FI84725B - Foerfarande foer framstaellning av 5- eller 6-bensyloxisubstituerade-4-metoximetyl-3-(1,2,4-oxadiatzol -5-yl)- -karbolinderivat. - Google Patents

Description

84725

Menetelmä farmakologisesti aktiivisten 5- tai 6-bentsyyli-oksisubstituoitujen 4-metoksimetyyli-3-(1,2,4-oksadiatsol- 5- yyli)-β-karboliinijohdannaisten valmistamiseksi (Jakamalla erotettu ph:sta 84 2499)

Keksintö koskee menetelmiä uusien, 5- tai 6-bentsyylioksi-substituoitujen 4-metoksimetyyli-3-(1,2,4-oksadiatsol-5-yyli)-β-karboliinien valmistamiseksi, joiden kaava on CH, o A 1 R -o ch2

H

jossa R' tarkoittaa Cj__3-alkyyliä, ja RA tarkoittaa 5- tai 6- aseman aralkyylitähdettä - \ —A R" ' jossa X tarkoittaa C1_2-alkyyliä, jolloin alkyylitähde on . . haarautumaton tai haarautunut, ja jossa R"' tarkoittaa fluo- ; ria, klooria, bromia tai jodia, Cj__ 3-alkyyliä, 3-alkoksia, ‘ trifluorimetyyliä tai nitroa, jossa substituentti R"1 aryy- litähteessä voi esiintyä kerran tai kaksi kertaa, ollen sa-manlainen tai erilainen.

Keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistetut yhdisteet omaavat arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia. Ne vaikuttavat ____: erityisesti keskushermostoon ja ovat siten sopivia psykofar- maseuttisina aineina.

Sanonnalla "alkyyli" tarkoitetaan sekä haarautumattomia että haarautuneita alkyyliryhmiä. Esimerkiksi kysymykseen voi tul-la metyyli, etyyli, propyyli tai iso-propyyli.

2 84725

On tunnettua, että selkärankaisilla tietyissä kohdissa keskushermostoa on suuri spesifinen affiniteetti 1,4- ja 1,5-bentsodiatsepiinien sitoutumiseksi (Squires, R.F. ja Braest-rup, C., Nature, (Lontoo) 266 (1977), s. 734). Näitä kohtia kutsutaan bentsodiatsepiinireseptoreiksl.

On yllättäen havaittu, että vaikka tämän keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistettujen substituoitujen β-karbolii-nien rakenne eroaa suuresti bentsodiatsepiineista, on näillä β-karboliineilla voimakas affiniteetti ja spesifisyys sitoutua bentsodiatsepiinireseptoreihin, koska ne syrjäyttävät radioaktiivisesti. merkityn f ] unitratsepami n näistä bentsodiatsepiini reseptoreista .

Keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistettujen yhdisteiden syrjäyttämisaktiivisuus on esitetty jäljempänä olevassa taulukossa IC50 ja ED50-arvojen muodossa.

ICgo-arvo on konsentraatio, jossa tapahtuu 3H-flunitratsepa-min (1,0 nM, 0°C) spesifisen sitoutumisen 50-prosenttinen syrjäyttäminen, joissa kokonaistilavuus on 0,55 ml aivomem-braanisuspensiota, esim. rotan aivomembraanista valmistettua.

Syrjäyttämisaktiivisuus määritetään in-vitro kokeessa seu-" raavalla tavalla: 0,5 ml käsittelemätöntä rotan aivosuspen- ' siota 25 mMtssa KH2P04, pH = 7,1 (5-10 mg kudosta/näyte) inkuboidaan 40-60 minuuttia 0 °C:ssa yhdessä 3H-diatsepamin (spesifinen aktiivisuus 14,4 Ci/mmooli, l,9nM) tai 3H-flu-nitratsepamin (spesifinen aktiivisuus 87 Ci/mmooli, 1,0 nM) :: : kanssa. Inkuboinnin jälkeen suspensio suodatetaan lasikuitu- suodattimen läpi, suodatusjäännös pestään kaksi kertaa kyl-: mällä puskuriliuoksella ja radioaktiivisuus mitataan tuike- laskimessa.

Koe uusitaan siten, että ennen radioaktiivisesti merkityn : bentsodiatsepiinin lisäystä lisätään tietty määrä tai yli- 3 84725 määrin yhdistettä, jonka syrjäyttämisaktiivisuus halutaan määrittää. Saatujen mittaustulosten perusteella voidaan laskea IC50-arvo.

ED5Q-arvo ilmoittaa testattavan yhdisteen sen annoksen, jossa flunitratsepamin spesifinen sitoutuminen bentsodiatsepii-nireseptoreihin elävissä aivoissa vähenee 50-prosenttiin kontrolliarvosta.

In-vivo koe suoritetaan seuraavalla tavalla:

Hiiriryhmät injektoidaan testattavan aineen erilaisilla annoksilla ja tavallisesti subkutaanisesti. 15 minuutta myöhemmin hiirille annetaan intravenöösisti 3H-flunitratsepa-mia. Tästä 20 minuutin kuluttua hiiret tapetaan, niiden etu-aivomembraanit poistetaan ja radioaktiivisuus etuaivomem-braaneissa mitataan tuikelaskimessa. ED^Q-arvo määritetään annos/responssikäyrien avulla.

Keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistetut yhdisteet omaavat farmakologisissa kokeissa tuskaa lievittävän, aggressiota lievittävän ja kouristuksia estävän aktiivisuuden.

. . Lisäksi keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistetuilla yh- - ’· disteillä on kouristuksia laukaisevia, vastaavasti kouris- ' tuksia estävä vaikutus testissä, jossa kohtauksen laukaisee ääni. 18-21 päivää vanhoille uroshiirille, joiden paino on 8-12 g (DBA/2-hiiri) annetaan 30 minuuttia ennen testiä tut-γ : kittavan aineen intraperitoneaalinen ruiske ultraääni-mikro- :Y: suspension muodossa, valmistettuna vesi/"Cremofor EL"-seok- seen (95:5). Tämän jälkeen eläimiin kohdistetaan äänieriste-tyssä puulatikossa 14 kHz:n ja 111 db:n sinusääni.

Ääni kytketään heti kun eläimet on laitettu laatikkoon. Ny-kivien kouristusten esiintyminen rekisteröidään 30 sekunnin välein. Taulukossa annetut ED50 -arvot ovat annoksia, joissa 4 84725 hiirillä ei esiinny kouristuksia 111 dB:ssä (80%:illa hiiriä on kouristuksia lii dB:ssä).

Taulukko

CH OOh /0--N

—etyyli

H

ra IC50 ng/ml ED50 mg/ml ED50 mg/kg

_in vitro in vivo_111 dB

FI-73 427 5-bentsyylioksi___9,3 >90_~~ 5-(4-Cl-bentsyylioksi) 2,9 1,6 0,015 5-(3-CH30-bentsyylioksi) 0,9 1,2 5-(2-F-bentsyylioksi) 1,6 2,2 5- (2,6-diklooribentsyy- lioksi) 2,6 9 6- ( 3-Cl-bentsyylioksi)_2,9_12_ 5- bentsyylioksi-4-metoksi-metyyli-O-karboliini-3- : karboksyylihappoetyyli- esteri (FI 74961)_2_4_0,5 6- bentsyylioksi-4-metoksi-metyyli-p-karboliini-3-karboksyylihappoetyyli- esteri (FI 74961 )__4_5,6_

Keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistetut yhdisteet ovat biologisen aktiivisuutensa perusteella sopivia psykofarma-seuttisiksi aineiksi ihmisille. Niitä voidaan käyttää val-‘ niistettäessä psykofarmaseuttisia valmisteita, joita annoste- taan esim. oraalisesti tai parenteraalisesti.

Sopivia valmistusapuaineita ovat fysiologisesti hyväksyttä vät orgaaniset ja epäorgaaniset kantaja-aineet, jotka ovat inerttejä kyseessä oleviin yhdisteisiin nähden.

5 84725

Esimerkkejä tällaisista kantaja-aineista ovat vesi, suolaliuokset, alkoholit, polyetyleeniglykoli, polyhydroksiety-loitu risiiniöljy, gelatiini, laktoosi, amyloosi, magnesium-stearaatti, talkki, piihappo, rasvahappomonoglyseridit ja rasvahappodiglyseridit, pentaerytritolirasvahappoesterit, hydroksimetyyliselluloosa ja polyvinyylipyrrolidoni.

Farmaseuttiset valmisteet voidaan steriloida ja/tai sekoittaa apuaineiden, kuten voiteluaineiden, säilöntäaineiden, stabiloivien aineiden, kosteuttavien aineiden, emulgoivien aineiden, puskureiden ja väriaineiden kanssa.

Parenteraaliseen annostukseen erityisen sopivia ovat injektoitavat liuokset tai suspensiot, erikoisesti aktiiviaineen vesipitoiset liuokset polyhydroksietoksyloidussa risiiniöl-j yssä.

Oraaliseen annostukseen erityisen sopivia ovat tabletit, rakeet tai kapselit, jotka sisältävät talkkia ja/tai hiilihyd-raattikantaja-ainetta tai -sideainetta, kuten esim. laktoo-- ; siä, maissi- tai perutatärkkelystä. Annostus voi tapahtua myös nestemäisessä muodossa, esim. mehuna, johon mahdolli-sesti lisätään makeutusainetta .

Keksinnön mukaisilla menetelmillä valmistettuja yhdisteitä ; annetaan yksikköannoksina, jotka ovat 0,05 - 10 mg aktiivi- ainetta fysisologisesti hyväksyttävässä kantaja-aineessa.

... Yhdisteitä käytetään yksikköannoksina 0,1 - 300 mg/päivä, mieluimmin 1-30 mg/päivä.

: : Yleisen kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistus tapahtuu sinänsä tunnetuilla menetelmillä siten, että yleisen kaavan (III) mukainen substituoitu 3-karboliini-3-karboksyylihappo 6 84725 CM -, f ^ Λ 0

R -O

Ϊ0Χ3§Γ- un,

H

jossa tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan yleisen kaavan R'-C(=NOH)NH2 mukaisen amidioksiimin kanssa, jossa R' tarkoittaa samaa kuin edellä.

Yhdisteiden valmistamiseksi kondensoidaan kaavan (III) mukainen vapaa 0-karboliini-3-karboksyylihappo reaktioseoksen palautuslämpötilassa kaavan R'-C(=NOH)NH2 mukaisen amidioksiimin kanssa liuottimessa, joka kiehuu yli 100 °C:n lämpötilassa ja joka on inertti reagensseihin nähden. Sopivia liuottimia kondensaatioreaktioon ovat esim. tolueeni ja di-metyyliformamidi.

On tarkoituksenmukaista että kaavan (III) mukainen, vapaa p-karboliini-3-karboksyylihappo aktivoidaan sopivalla tavalla ennen kondensaatioreaktiota. On mahdollista muuttaa happo seka-anhydridiksi, aktivoiduksi esteriksi tai kloridiksi. Aktivointi imidatsoli/tionyylikloridilla on osoittautunut " tarkoituksenmukaiseksi suorittaa aproottisessa liuottimessa, kuten dioksaanissa, tetrahydrofuraanissa, dimetyyliformami-dissa tai N-metyylipyrrolidonissa , lämpötiloissa jotka ovat 0-50 °C, mieluimmin huoneen lämpötilassa.

Seuraava esimerkki havainnollistaa keksinnön mukaista menetelmää:

Esimerkki: 1,36 g imidatsolia 15 ml:ssa absoluuttista tetrahydrofuraa-nia saatettiin reagoimaan 0,36 ml:n kanssa tionyylikloridia 7 84725 5 ml:ssa tetrahydrofuraania. Hämmennettiin 15 minuutia huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen sakka suodatettiin pois. Suodos lisättiin suspensioon, jossa oli 2,55 g 5-(3-kloori-bentsyylioksi)-4-metoksimetyyli-3-karboliini-3-karboksyyli-happoa 50 ml:ssa absoluuttista dimetyyliformamidia. Hämmennettiin 1 tunti huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen seokseen lisättiin 180 μΐ vettä ja tämän jälkeen 2,6 g propioniami-doksiimia, sen jälkeen tetrahydrofuraani tislattiin pois ja reaktioseosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 3 tuntia. Liuotin tislattiin pois, jonka jälkeen uutettiin metyleeni-kloridi/kyllästetty natriumbikarbonaattiliuoksella, jonka jälkeen orgaaninen faasi pestiin neutraaliksi natriumklori-diliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin tislattiin pois tyhjössä. Reaktiotuote kiteytettiin uudestaan 2-propanolista. Saatiin 1,3 g 5-(3-klooribentsyylioksi)-3-(5'-(3'-etyyli-(1,2,4-oksadiatsol))-yy1i)-4-metoksimetyyli-β-karboliinia, jonka sulamispiste on 182-187 “C.

Lähtöaineena käytettyjä 5-(3-klooribentsyylioksi)-4-metoksi-metyyli-p-karboliini-3-karboksyylihappoa saatiin muuttamalla tarkoituksenmukainen etyyliesteri.

Vastaavalla tavalla valmistettiin seuraavat yhdisteet: - 5-(1-fenyyli-etoksi) — 3-(5’ — (3* —etyy1i —(1,2,4-oksadiatsol))- yyli)-4-metoksimetyyli-3-karboliini, sulamispiste 191-198 °C, 5 -[ 1-( 3-kloorifenyyli )-etoksi]-3-( 5 ' - ( 3 ’ -etyyli -(1,2,4-oksa-diatsol))-yy1i)-4-metoks imetyy1i-3-karboliini, sulamispiste ... 179-181 °C, ____- 6-(3-klooribentsyylioksi)-3-(5'-(3'—etyyli—(1,2,4-oksadiatsol ))-yyli)-4-metoksimetyyli-p-karboliini, sulamispiste 198-**' ‘ 202 °C, ja : 6-[1-(3-kloorifenyyli)-etoksi]-3-(5’-(31-etyyli-(1,2,4-oksa- diatsol))-yyli)-4-metoksimetyyli-3-karboliini, sulamispiste "Ϊ; 153-157 °C.

Claims (1)

1. 8 84725 Patenttivaatimus Menetelmä uusien, arvokkaita farmakologisia ominaisuukia omaavien 5- tai S-bentsyyt^g^stsubstituoitujen 4-metoksi-metyyli-3-(l,2,4-oksadiatsol-5-yyli)-p-karboliinien valmistamiseksi, joiden yleinen kaava (I) on CH, i 4 0 R -o ClU H jossa R' tarkoittaa Cj _ 3-alkyyl iä, ja RA tarkoittaa 5- tai 6-aseman aralkyylitähdettä "O.- jossa X tarkoittaa C1_2-alkyyliä, jolloin alkyylitähde on haarautumaton tai haarautunut, ja jossa R"' tarkoittaa fluoria, klooria, bromia tai jodia, C1_3-alkyyliä, C^.j-alkoksia, trifluorimetyyliä tai nitroa, jossa substituentti R" 1 aryy-: litähteessä voi esiintyä kerran tai kaksi kertaa, ollen sa- : / manlainen tai erilainen, tunnettu siitä, että ylei- sen kaavan (III) mukainen substituoitu 3-karboliini-3-kar-boksyylihappo :Y: CH3 I ..... H jossa RA tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan yleisen kaavan R'-C(=NOH)NH2 mukaisen amidioksiimin kanssa, jossa R' tarkoittaa samaa kuin edellä. 9 84725 Förfarande för framställning av nya 5- eller 6-substituerade 4-metoximetyl-3-(1,2,4-oxadiazol-5-yl)-β-karbolinderivat med värdefulla farmakologiska egenskaper och med den allmänna formeln (I) CH I 3 o da R -O ch9 H i vilken R' betecknar C-^j-alkyl, och RA aralkylresten : : -Ο,·· .· ' i 5- eller 6-ställningen, i vilken X betecknar C]__2-alkyl, varvid alkylresten är oförgrenad eller förgrenad, och i vil-ken R"' betecknar fluor, klor, brom eller jod, Cj^-alkyl, C^.j-alkoxi, trifluormetyl, eller nitro, i vilken substitu-enten R" ' ρέ arylresten kan uppträda en eller tvä gänger, och kan vara lika eller olika, kännetecknat där-av, att en substituerad β-karbolin-3-karboxylsyra med den allmänna formeln (III) 10 84725 CH -, 1 3 O rA-° CH V >A fo Tor inn v\A H i vilken RA betecknar detsamma som ovan, omsStts med en amid-oxim med den allmänna formeln R'-C(=NOH)NH2 i vilken R' betecknar detsamma som ovan.