FI91407B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 5-substituoitujen /4,5-c/imidatsopyridiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

91407

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 5-substituoitu-jen [4,5-c]imidatsopyridiinijohdannaisten valmistamiseksi Tämä keksintö kuuluu nisäkkäiden hoito-opilliseen 5 kenttään ja koskee yhdisteitä, jotka on tarkoitettu nisäkkäiden sairauksien, kuten tulehduksen, sydänverisuoni-häiriöiden, astman ja muiden sairauksien hoitamiseen. Erityisen kiinnostava on 5-substituoitujen[4,5-c]imidatsopy-ridiinien luokka, jotka ovat käyttökelpoisia hoidettaessa 10 sydänverisuonisairauksia ja immunitulehdukseen liittyviä häiriöitä, jotka ovat verihiutaletta aktivoivan tekijän (PAF) väittämiä.

Verihiutaleita aktivoiva tekijä (RAF) on ollut yhteydessä erilaisiin biologisiin aktiivisuuksiin ja johto-15 ratoihin, tehden sen täten tärkeäksi välittäjäksi ja ollessa syypäänä erilaisissa fysiologisissa prosesseissa, mukaan lukien, näihin rajoittumatta, verihiutaleiden aktivoitumisessa ja kasautumisessa, sileän lihaston kutistumisessa, immuuni-kompleksi-saostumataudin synnyssä, tu-20 lehduksessa, ja hengityksen, sydänverisuonien ja suonensisäisissä sairaaloisissa häiriöissä. Nämä fysiologiset tapahtumat ovat yhteydessä hyvin laajaan sairauksien ryhmää, kuten esimerkiksi sydänverisuonihäiriöihin, astmaan, keuhkovesipöhön, hajaantumismyrkkyshokkiin, aikuisen hen-25 gityshäiriöoireistoon ja tulehdussairauksiin.

US-patentti 4 804 658 paljastaa imidatsopyridiini-johdannaisten luokan, jotka ovat käyttökelpoisia hoidettaessa sairauksia tai häiriöitä, jotka ovat verihiutaleita aktivoivan tekijän väittämiä. Tämä keksintö eroaa sel-30 västi tästä kuvauksesta sikäli, että tässä keksinnössä bentsamidiryhmä on liittynyt imidatsopyridiinirengassys-teemin kuusijäsenisen renkaan (asema 5), vastakohtana kuvaukselle, jossa bentsamidiryhmä on liittynyt yhteen imid-atsopyridiinirengassysteemin viisijäsenisen renkaan typpi-35 atomeista.

2 Tämä keksintö koskee menetelmää kaavan 1 mukaisten terapeuttisesti käyttökelpoisten 5-asemassa substituoitu-jen [4,5-c]imidatsopyridiinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmista-5 miseksi R_/2 o?—,ch2»rf jossa kaavassa

Rx ja R2 ovat kumpikin itsenäisesti vety; suoraket-15 juinen tai haaroittunut alkyyli, jossa on 1 - 12 hiiliatomia; sykloalkyyli, jossa on 3 - 6 hiiliatomia; substituoi-tu sykloalkyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, bisykloalkyy-li, jonka kummassakin renkaassa on 3 - 8 hiiliatomia; fe-20 nyyli; pyridyyli; substituoitu pyridyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 3 hiiliatomia; ja Rx ja R2 eivät molemmat voi olla vetyjä; X on yksi tai useampi substituentti yhdessä tai useammassa fenyylirenkaan asemista 2, 3, 5 tai 6, valittu-25 na itsenäisesti ryhmästä, jonka muodostavat vety, metoksi, fluori ja bromi; n on kokonaisluku 1-3; R3 on ryhmä, joka on substituenttina imidatsopyri-diinirengasssysteemin pyridiinirenkaan 4-asemassa, joka 30 on vety, hydroksi, metoksi, metyyli, fluori, kloori tai bromi; R4 on vety, metyyli tai metoksi; Tässä käytettynä termi "alkyyli, jossa on 1 - 12 hiiliatomia" merkitsee suora- tai sivuketjuisia hiilive-35 tyryhmiä, joissa on 1 - 12 hiiliatomia. Kuvaavia sellai- 91407 3 siä alkyyliryhmiä ovat metyyli, etyyli, propyyli, isopro-pyyli, butyyli, isobutyyli, pentyyli, neopentyyli, hek-syyli, isoheksyyli, oktyyli, dekyyli ja näiden kaltaiset ryhmät.

5 Tässä käytettynä termin "sykloalkyyli, jossa on 3 - 6 hiiliatomia" piiriin sisältyvät sykloalkyyliryhmät, joissa on 3 - 8 hiiltä. Kuvaavia sellaisista sykloalkyyli-ryhmistä ovat syklopropyyli, syklobutyyli, syklopentyyli, sykloheksyyli, sykloheptyyli, syklo-oktyyli ja näiden kallo täiset ryhmät.

Tämän keksinnön kohteiden piiriin sisällytetään selostettujen yhdisteiden tautomeeriset muodot, isomeeriset muodot, mukaan lukien geometriset isomeerit, enantiomeerit ja diastereoisomeerit, ja niiden farmaseuttisesti hyväk-15 syttävät suolat.

Termi "farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditio-suola" merkitsee suolaa, joka on valmistettu saattamalla kaavan (I) mukainen yhdiste kosketuksiin hapon kanssa, jonka anionin katsotaan tavallisesti soveltuvan ihmisen 20 syötäväksi. Esimerkkejä farmakologisesti hyväksyttävistä happoadditiosuoloista ovat hydrokloridi-, hydrobromidi-, hydrojodidi-, sulfaatti-, fosfaatti-, asetaatti-, propio-naatti-, laktaatti-, maleaatti-, malaatti-, sukkinaatti-ja tartraattisuolat. Kaikkia näitä suoloja voidaan val-25 mistaa tavallisin tavoin antamalla, esimerkiksi, sopivan hapon reagoida vastaavan kaavan I mukaisen yhdisteen kanssa.

Menetelmälle on tunnusomaista, että imidatsopyri-diini, jolla on kaava 30 R3 //ΝΝγ^Ν“Η (-11)

R4-λ 1 J

35 4 saatetaan reagoimaan halogeenialkyylibentsamidin kanssa, jolla on kaava

(CH ) L

(K

R1

^ N

10 \ R

R2 jossa kaavassa L on kloori, bromi tai metaanisulfonyylioksi; minkä jälkeen, haluttaessa, valmistetaan näin saaduista kaavan I mukaisista yhdisteistä happoadditiosuoloj a 15 tavanomaisin menetelmin.

Edellä mainitun menetelmän ensisijaisiin reaktio-olosuhteisiin sisältyy halogeenialkyylibentsamidin ja imi-datsopyridiinin liuoksen lämmittäminen yön ajan 70 -90 °C:ssa liuottimessa kuten dimetyyliasetamidissa (mo-20 lempiä suunnilleen 0,1-molaarisinä). Yön ajan lämmittämisen jälkeen liuotin poistetaan vakuumissa ja jäännös laimennetaan vedellä ja tehdään emäksiseksi ammoniumhydrok-sidilla. Vesiliuos uutetaan kloroformilla ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestään takaisin kyllästetyllä natri-25 umkloridin vesiliuoksella. Orgaaninen liuos kuivataan nat- riumsulfaatilla tai magnesiumsulfaatilla, kuivausaine suodatetaan pois ja suodos konsentroidaan vakuumissa, jolloin saadaan raaka tuote. Puhdistaminen suoritetaan kromatogra-fioimalla silikageelillä käyttämällä kloroformin, etanolin 30 ja ammoniumhydroksidin seoksia.

Edellä selostetun menetelmän ensisijaisena jatkokäsittelynä on reaktioliuoksen, jota oli lämmitetty yön ajan, jäähdyttäminen huoneen lämpötilaan ja liuottimen poistaminen vakuumissa < 45 eC:ssa. Saatua jäännöstä tri-35 turoidaan kuivan eetteriylimäärän kanssa ja suodatetaan.

Raaka tuote puhdistetaan kromatografioimalla.

5 91407

Välituotteiden valmistus Kaavio A

“j OQ ~~cO Wr φΚ~ I i

1· ItOH-MaOH

2- Kloranllll Ψ ίο «, f

OO -555Γ CO

« 6°* ( 15 Imidatso[4,5-c]pyridiiniä, Jossa R3 on 4-metyyli, valmistetaan edellä olevan kaavion mukaisesti lähtemällä kaavan (II) mukaisesta imidatsopyridiinistä. Tämän yhdisteen asema 1 suojataan antamalla reaktion tapahtua 2-(trialkyylisilyyli)etoksimetyylikloridin Ja emäksen kuten 20 natriumhydridin tai kaiiumhydridin kanssa polaarisessa aproottisessa liuottimessa kuten dimetyyliforamidissa.

Tämä reaktio suoritetaan huoneen lämpötilassa. Spesifinen esimerkki sellaisesta suojausreagenssista on 2-(trimetyy-lisilyyli)etoksimetyylikloridi. Suojatun imidatsopyridii-25 nin annetaan reagoida fenyyliklooriformiaatin Ja metyyli-magnesiumbromidin kanssa eetteriliuottimessa kuten tetra-hydrofuraanissa noin -20 °C:ssa. Metyloitua tuotetta, Jossa on fenoksikarbonyyli asemassa 5, käsitellään emäksen, kuten natriumhydorksidin alkoholiliuoksen kanssa, kiehut-30 tamalla 24 tuntia. Tuote hapetetaan, esimerkiksi, klor-aniililla, Ja 2-(trimetyylisilyyli)etoksimetyyliryhmä poistetaan käsittelemällä sopivan hapon kanssa. Esimerkkinä sellaisesta haposta on trifluorietikkahappo. Substi-tuentittoman imidatso[4,5-c]pyridiinin valmistusta on se-35 lostettu US-patentissa 4 804 658.

6

Halogeenialkyylibentsamideja valmistetaan seuraa-van reaktiokaavion mukaisesti.

Kaavio B

x I

o CHjir

10 I

Λ< ¢- "a 15 jossa Rx ja R2 ovat edellä määriteltyjä; Z on CH2Br tai H; X on fluori, OMe tai metyyli.

Täten edellä olevan kaavion mukaisesti happoklori-deja valmistettiin vastaavista karboksyylihapoista kiehuttamalla tionyylikloridissa (2-molaarisessa ylimääräs-20 sä) kaksi tuntia. Ylimääräinen tionyylikloridi poistettiin aseotrooppisesti tolueenin kanssa. Jäljelle jäänyt happokloridi liuotettiin THF:iin ja jäähdytettiin -10 eC:seen. Lisättiin tiputtamalla ja sekoittaen liuos, jossa oli kaksi mooliekvivalenttia sekundääristä amiinia 25 THFtssa. Lisäyksen päätyttyä reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoitettiin 1-2 tuntia. Reaktioseos sammutettiin 1-norm. HCl:llä, laimennettiin H20:lla ja uutettiin kolme kertaa etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kyllästetyllä nat-30 riumvetykarbonaatin vesiliuoksella, vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin nat-riumsulfaatilla. Kuivausaine suodatettiin pois ja suodos ·;; konsentroitiin vakuumissa, jolloin saatiin raakaa tuotet ta, joka kromatografioitiin silikageelillä käyttämällä 35 etyyliasetaatin ja heksaanin seoksia, jolloin saatiin puhdistettua amidia.

7 91407

Kun Z « CH2Br ja X = H, edellä oleva selostus on riittävä kaavan (III) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi. Kun Z = CH3, ja X = OMe tai F, tai kun Z = H ja X = CH3, silloin kaavan (VI) mukaista yhdistettä on käsitel-5 tävä halogenointiaineen kuten N-bromisukkiini-imidin kans sa.

Puhdistetun amidin ja NBS:n sekoitettua seosta (moolisuhde 1:1) säteilytettiin hiilitetrakloridissa aurinkolampulla 1-3 tuntia. Valkea sakka suodatettiin 10 erilleen ja pestiin minimimäärällä CHCl3:a. Suodos pestiin vedellä, ja ammoniumhydroksidilla emäksiseksi tekemisen jälkeen, vesikerros uutettiin kolme kertaa kloroformilla. Kaikki orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin kolme kertaa kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja 15 kuivattiin natriumsulfaatilla.

Kuivausaine suodatettiin pois ja suodos konsentroitiin vakuumissa, jolloin saatiin raakaa tuotetta, joka kromatografioitiin silikageelillä käyttämällä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksia, jolloin saatiin puhdistettua 20 bromimetyyliyhdistettä.

Bentsamideja, joissa n = 2 tai 3, voidaan valmistaa kaavion C mukaisesti lähtemällä sopivasta hydroksial-kyylibromibentseenistä.

Kaavio C

25 f t-eusi-ei Br iύ Jl„> r fy l.ld.t.0II ' SL 0(CH2)n>^ i)

Ai V

30 ">«

H

\! CD

(4/)2 Pd Br2

35 L R

O^^*1 R/i. ** (2) fteSOjCl 8

Hydroksyyliryhmä suojattiin trialkyylisilyylieette-rinä antamalla sen reagoida trialkyylisilyylikloridin ja imidatsolin kanssa sopivassa liuottimessa kuten dimetyyli-formamidissa. Esimerkiksi sellaisesta suojaryhmästä on t-5 butyylidimetyylisilyyli-eetteri. Raaka silyylieetteri puhdistettiin kromatografioimalla silikageelillä käyttämällä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksia. Aryylibromidi muutettiin karboksiamidiksi Schoenbergin ym:n menetelmän mukaisesti [J. Org. Chem., 39, 3327 (1974)]. Täten aryyli-10 bromidin annettiin reagoida hiilimonoksidin kanssa sekundäärisen amiinin ollessa liuottimena, käyttämällä katalyyttinä bistrifenyylifosfiini-palladium(II)dibromidia, noin 100 °C:ssa 8-26 tuntia paineastiassa. Reaktioasti-asta päästettiin kaasu pois, reaktioseosta trituroitiin 15 etyylieetterin kanssa ja pesunesteet suodatettiin. Suodos pestiin 10 %:sella HCl:n vesiliuoksella, vedellä ja suolaliuoksella. Sopivalla kuivausaineella, kuten magnesiumsulfaatilla, kuivaamisen ja suodattamisen jälkeen suodos konsentroitiin ja jäännös kromatografioitiin silikageelillä 20 käyttämällä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksia eluentti-na, jolloin saatiin puhdasta tuotetta. Silyylieetteri poistettiin antamalla reagoida tetra-n-butyyliammonium-fluoridin kanssa ja alkoholi muutettiin sulfonaattiesteriksi antamalla reaktion tapahtua alkyyli- tai aryylisul-25 fonyylikloridin kanssa. Esimerkkinä sellaisesta sulfonaa-tista on metaanisulfonaatti.

Sekundäärisiä amiineja voidaan valmistaa millä tahansa useista alan asiantuntijoiden tuntemista menetelmistä. Katso viitteitä: Emerson, W. S. Org. Reactions 4, 1974 30 1948) ja J. B. Cambell, L. B. Lavaginino "Catalysis in

Organic Synthenis" (Jones W. H., ed) s. 43, Academic Press, New York, 1980.

9 91407 4-metyyll-7-metoksi-imidatsopyridiinin valmistus Μ· οψ" H OU·

Edellä mainittua yhdistettä voidaan valmistaa seuraavasti :

Kaavio D

10 “· 0 CO <XjA"‘ — OCX’·· W<- <X- X.,'- , \ I· piC - <&-

.0^ o / T 0M

\ - o--, ° v_" c \ '-"n- , 20 \ \em οφΛ-_Χ<Ιν-

Λ_,-_ °vM

N ’· V_„'_ 25 I n · I 1. am I * O» ρφ ΡΦ 30 “ °“* '—N- .· Täten additiotuotetta 2, joka eristetään antamalla yhdisteen 1 reagoida fenyyliklooriformiaatin ja metyyli-magnesiumbromidin kanssa, käsitellään osmiumtetroksidin 35 kanssa vesipitoisessa asetonissa, jossa on N-metyylimor-foliini-N-oksidia, huoneen lämpötilassa 24 tuntia, jolloin 10 saadaan diolia 3 ja hydrokslketonla 4. Hydrokslketonl 4 asetyloldaan (etikkahappoanhydridi, DMAP, metyleeniklo-ridi, huoneen lämpötila, 24 tuntia) ja käsitellään CrCl2:n kanssa asetonissa, jolloin saadaan deasetoksiloitua tuo-5 tetta 6. Tuotetta 6 käsitellään NaH:n kanssa DMFrssa ja sitten jodimetaanin kanssa, jolloin saadaan metyylieet-teriä 7. Lohkaisemalla karbamaatti ja hapettamalla saadaan N-l-suojattua4-metyyli-7-metoksi-imidatsopyridiinituotetta 8. Poistamalla suojaus tuotteesta 8 saadaan 4-metyyli- 10 7-metoksi-imidatsopyridiiniä.

2-metoksi-4-bromimetyyli-5-bromibents( N-syklopen-tyyli,N-2-metyyllsykloheksyyli)amidin valmistus ΛΧ

15 vS

OM·

Xl

Edellä mainittua yhdistettä valmistetaan 2-metoksi-4-metyylibents- (N-syklopen tyyli, N-2-metyylisykloheksyyli) -.25 amidista ja N-bromisukkiini-imidistä hiilitetrakloridissa säteilyttämällä aurinkolampulla 5 tuntia.

2,6-dimetoksi-3-bromi-4-bromimetyylibents(N-syklo-heksyyli,N-syklopentyyli)amidin valmistus

30 Br V

X

35 0CH* ^ 11 91407

Edellä mainittua yhdistettä valmistetaan 2,6-dime-toksi-4-metyylibentsoehaposta, jota ovat selostaneet I. W. Mathison, R. C. Gueldner, D. M. Carrol, J. Pharma Sei 57, 1820 (1968). Substituoitu bentsoehappo muutetaan vastaa-5 vaksi amidiksi muuttamalla ensin mainittu yhdiste happo-kloridiksi (käyttämällä tionyylikloridia) ja kondensoi-malla sen jälkeen N-sykloheksyyli,N-syklopentyyliamiinin kanssa. Säteilyttämällä 2,6-dimetoksi-4-metyyli-bents(N-sykloheksyyli,N-syklopentyyli)amidi noudattamalla menetel-10 mää, jota on selostettu 2-metoksi-4-bromimetyyli-5-bromi-bents-(N-syklopentyyli, N-2-metyylisykloheksyyli )amidin valmistuksen osalta, saadaan kahta tuotetta, 2,6-dimetok-si-3-bromi-4-metyylibents( N-sykloheksyyli, N-syklopentyyli) amidi ja 2,6-dimetoksi-3-bromi-4-bromimetyylibents(N-15 sykloheksyyli,N-syklopentyyli)amidia. Tuote on pääasial lisena tuotteena.

Imidatso[4,5-c]pyridiiniä, jossa R3 on 4-kloori, valmistetaan kaavion E mukaisesti lähtemällä kaavan II mukaisesta imidatsopyridiinistä.

20 Kaavio E

CO CO . — SQ:> » H S'V \ <o/V*i N- 25 poci». m* äo όο -ä=. tie) -= όο

. ^ < N.OH

OM· SCI

Tämän yhdisteen asema 1 suojataan antamalla reaktion tapahtua 2-(trialkyylisilyyliJetoksi-metyylikloridin ja emäksen kuten natriumhydridin tai kaliumhydridin kanssa 35 polaarisessa aproottisessa liuottimessa kuten dimetyyli- 12 formamidissa. Reaktio suoritetaan huoneen lämpötilassa. Suojatun imidatsopyridiinin annetaan reagoida m-klooriper-bentsoehapon kanssa metyleenikloridissa huoneen lämpötilassa, jolloin saadaan pyridiini-N-oksidituotetta. N-oksi-5 dituotetta lämmitetään POCl3:n kanssa 90 °C:ssa, jolloin saadaan 4-kloori-l-kloorimetyyli-imidatsopyridiiniä. Käsittelemällä tätä yhdistettä natriummetylaatin kanssa me-tanolissa saadaan 4-kloori-l-metoksi-etyyli-imidatsopyri-diiniä. Antamalla tämän yhdisteen reagoida veden/hapon 10 kanssa lämmittäen saatiin kloori-imidatso[4,5-c]pyridii-niä.

Alkoksialkyylien valmistus

CN CN CN

15 |T^|^CH3 φ-°Η3 _____ j^^CH2Hal C02H 1. CONR,R2 2. CONR,R2 3·

20 ?H2°H ?H0 ?N

jA^ch2z ^L^ch2z /L^ch2z CONR,R2 6. C0NR,R2 5. C0NR,R2 4.

25 ch2z·

iTiCH2Z

conr,r2 7.

30 jossa Rx ja R2 ovat edellä määriteltyjä; "Hai" on halogeeni; Z on yksi tai useampi substituentti yhdessä tai useammassa fenyylirenkaan asemista 2, 3, 5 tai 6, valittuna itsenäisesti ryhmästä, jonka muodostavat vety, metoksi, fluori ja bromi; ja Z' on kloori, bromi, metaanisulfonyy- 35 lioksi tai p-tolueenisulfonyylioksi.

13 91407

Yhdisteen 4 (Z = OMe) muuttaminen aldehydiksi 5 (Z - OMe) suoritetaan pelkistämällä kontrolloidusti pel-kistysaineella kuten di-isobutyylialuminiumhydridillä, ja hydrolysoimalla sen jälkeen hapolla. Aldehydin 5 pelkistys 5 alkoholiksi 6 suoritetaan toisen pelkistyksen avulla muulla pelkistysaineella kuten natriumboorihydridillä tai litium- tri-t-butoksialuminiumhyridillä. Alkoholi 6 muutetaan johdannaiseksi, joka soveltuu nukleofiiliseen korvaamiseen kuten yhdisteeksi 7, jossa Z' on poistuva ryhmä kuten ha-10 loidi tai aryyli- tai alkyylisulfonaatti. Sellainen muuttaminen suoritetaan käsittelemällä yhdistettä 6, esimerkiksi, p-tolueenisulfonyylikloridin, metaanisulfonyyli-kloridin, tai tionyylikloridin kanssa.

Keksinnön mukaisesti valmistetut kaavan (I) mukai-15 set yhdisteet voidaan käyttää muun muassa heikentämään tulehdusta, korjaamaan hengityselimien, sydämverisuonien, ja suonen sisäisiä sairaalloisia muutoksia tai häiriöitä, ja säätelemään verihiutaleiden aktivointumista tai koagu-loitumista, immuunikompleksisaostumataudin syytä ja sileän 20 lihaston supistumisia.

Tulehduksen, sydänverisuonihäiriön, astman, tai muiden PAF:n välittämien sairauksien hoitamiseksi kaavan (I) mukaista yhdistettä (1) voidaan antaa suun kautta, paikallisesti, parenteraalisesti, tai sisäänhengityssuihk-25 eena tai peräaukon kautta annosykikköseosmuotoina, jotka sisältävät tavallisia toksittomia farmaseuttisesti hyväksyttäviä kantajia, apuaineita ja väliainetta. Termin "pa-renteraalinen" puitteisiin tässä yhteydessä käytettynä sisältyvät ihonalaiset ruiskeet, laskimonsisäinen, lihak-30 sensisäinen, rintalastansisäinen injektio- tai nesteen suoneenantomenetelmät.

·· Seuraavien esimerkkien tarkoituksena on valaista edelleen tätä keksintöä rajoittamatta keksinnön henkeä tai piiriä. Esimerkeissä kaikki osat ovat paino-osia, ellei 35 toisin ole nimenomaisesti mainittu.

« I t • · • * · 14

Esimerkki 1 5-[4-(N-metyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bent- syyli]imidatso[4,5-c]pyridiini .Svcra> o 10

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (5,86 g, 49,2 mmoolia) DMF:ssa (125 ml) typpiatsmos-fäärin suojaamana, lisättiin pestyä, kuivattua natriumhyd-ridiä (valmistettu 3,54 g:sta 50-prosenttista öljydisper-15 siota pesemällä neljä kertaa 50 - 75 ml:n heksaanierillä). Tunnin sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa, vety-kaasun kehittyminen oli loppunut ja reaktioseos jäähdytettiin -10 °C:seen. Lisättiin N-metyyli-N-sykloheksyyli-a-bromi-p-tolyyliamidia (16,9 g, 54,5 mmoolia). Reaktioseos-20 ta sekoitettiin 0 °C:ssa 45 minuuttia ja huoneen lämpötilassa 3 tuntia.

DMF poistettiin vakuumissa ja jäännös laimennettiin H20:lla (200 ml) ja saatu liuos kyllästettiin natriumklo-ridillä. Vesiliuos uutettiin neljä kertaa etyyliasetaatil-25 la (100 ml:n erillä) ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kolme kertaa kyllästetyllä natriumkloridin vesi-liuoksella (150 ml:n erillä). Natriumsulfaatilla kuivaamisen jälkeen orgaaninen liuos suodatettiin erilleen ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 13,38 g 30 raakaa tuotetta ruskeana hartsina. Tämä aine kromatogra-fioitiin silikageelillä käyttämällä seosta etanoli/kloro-formi/ammoniumhydroksidi (20/79/1), jolloin saatiin 3,13 g yhdistettä oranssinvärisenä öljynä, joka kiteytyi käsiteltäessä etyyliasetaatin kanssa. Kiteyttämällä uudelleen 35 etyyliasetaatista saanto oli 1,06 g.

15 91407

Analyysi yhdisteelle C21H24N40· 1/4H20: laskettu: C 71,46; H 7,00; N 15,88; saatu: C 71,14; H 7,18; N 15,78; sp. 115-117 °C.

5 Esimerkki 2 5-[4-(N-metyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)-2-fluoribentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiini 9Jxxx> m,c y o 15

Liuosta, jossa oli N-metyyli, N-sykloheksyyli-3-fluori-4-bromimetyylibentsamidia (1,2 g, 2,66 mmoolia) ja imidatsopyridiiniä (0,48 g, 4,0 mmoolia) dimetyyliaset-amidissa (25 ml), lämmitettiin yön ajan 70 - 80 °C:ssa 20 sekoittaen N2:n suojaamana. Reaktioliuotin poistettiin va-kuumissa ja jäännös laimennettiin vedellä ja tehtiin emäksiseksi ammoniumhydroksidilla. Vesiliuos uutettiin neljä kertaa kloroformilla ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin takaisin kolme kertaa kyllästetyllä natriumkloridin 25 vesiliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla, kuivausaine suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 0,88 g raakaa yhdistettä. Yhdisteen puhdistus suoritettiin kromatografi-oimalla piidioksidilla käyttämällä kloroformin, etanolin . . 30 ja ammoniumhydroksidin seoksia.

Analyysi yhdisteelle C21H23FN4O*0,8 H0: laskettu: C 66,22; H 6,51; N 14,71; F 4,99; saatu: C 66,03; H 6,44; N 14,65; F 4,91; / . sp. 154 - 158 °C.

35 Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkissä 2 valmistettiin taulukoissa A & B selostettuja esimerkkien 3-11 yhdisteitä.

16

O O

o T* o ^ ^2 Ί1 2

2 2 0 O 2 0 X

O CS N CO VO es Ov

(O CO COX X CSX M

> X X XJI k x S in νο·»ί es es es in S es es - o es * es O O o o o o a eoeovo n ov o intern ro m h h λ o •P © ro o ro ^ t'- ideoin h h ri n «O ......... -......

(O oc^co ot^es o t" co ai « s1 r-tc^eo·'*

(flNH^HNHVOHNH

y es © ro iHts^i o s1 m in © r* in to es rseses oinc^ ov^t^ h o vo ov co in H x «sr»co Ht^ts ot^eo ctv © -s« h o en s1

(0Bt^Htv.rStsHVOHt^H

\ SS 0X2 2X2 U X 2 0X2 O X 2 X

K o \ * ov ov in >_c w rH Ch OV CO ©

/ I I I I I

r—< «tv es. es © © // 'λ ft-t © © o o „ // \\ to es h in es es

i V

gj ^jc S 3* äo * c ~ os ä k ä ä ä < X2r—\ ·* .-O „

Y -V «X X X X X

r\ z * C H H rH «H Ή en m co co

k X X X X

o o o o KO o o o u* * O O y- e g g p pp p

i S

*H (s m λ co ** © © X Θ 2 91407 17 h

In O 2 0 CS co es

(0 CSX CSX

> X X

(0 com h oo β es * es * K O O O o a « h in cq n ^ in h +3 s1 h s en o s id σ (0 «**·«· ***«.

(0 00 VO 00 Ό1 vovo^·^·

CQ VO rl VO H

•H ? 03 -P ΙΟ σι σι H N H H oi *<+> vioiooh es in e*

P>f φ < K ^ k ^ ^ V

H X CO ID (O Vf vovo^·^·

Id 0) VO rI VO «H

<3 U X 2 (n U X 2 In

O

• CS

w co oo i i • 00 S<

a C^ IO

10 H rl 'i·

XX X

CO

XX X

C «h rl

K X X

V CO

CS \_ X

x 2 u

;p P

cq m co σι u & 18 O o Ί* ^ 2 2

Ti 00

10 (N N

> a a (O «h oo S es es υ o

3 VO O H MO H £ N H O tJv VO VO

(Q V ·» S ^ k V

10 es t" vo es

(fl f' H H

H 3 tn -P oo -s· co t> o co £ +j n ov o coinco Q) * % k \ *1 H X es vo vo eo t> -S'

B) 0) C'' *H rH

~ ^ S3 υ a z o a z \/ z V—1*c m f~\ ~ o \-/ « o> es y ) w « *h e · σι

3 -Γ· Oi vO O

5 S to rH es £ \

Q

/¾ rs a°° V- S/ K ° <

-PP

-rt , Ϊ •H h

m a o «-I

M S H H

19 91407

Esimerkki 12 5- [ (4- (N, N-disykloheksyylikarboksiamido )bentsyyli] - imidatso[4,5-c]pyridiini 10 °

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (750 mg, 6,3 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa, lisättiin 4-bromimetyyli-N,N-disykloheksyylibentsamidia 15 (2,6 g, 6,88 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 80-85 °C:ssa. 24 tunnin kuluttua reaktioastia jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 45 °C:ssa. Saatua jäännöstä trituroitiin eetterin (2 x 70 ml) kanssa ja suodatettiin. Raaka tuote 20 (2,7 g) kromatografioitiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli- NH40H 80-20-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,47 g, 62 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta EtOAc-CH3-CN, sp. 233 - 35 eC.

Analyysi yhdisteelle C26H32N40· 0,3 H2): 25 laskettu: C 74,0; H 7,73; N 13,28; saatu: C 73,93; H 7,90; N 13,09.

Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkissä 12 valmistettiin taulukossa C selostettuja esimerkkien 13 -38 yhdisteitä.

* » m «

• «I

20

O O O O O

rjt Tjt tJI

2 0 2 2 2 0 2

T}I (S 00 N 00 CS VO

R) CSX N CO MK CO

• > S X X X X

H β rtCS CS -S' COM

O fÖ CS v M M CS* CS

X k o o o υ oo o p s· oo oo vo es co in es vo es o es o oo in p h h s cs e* cs cocoes σι vo oo s< c- cs p rs c* m es cv in n ω s o tv s1 cocv^i (0 Cv H C* H H rt Cv «—I rt rt •H p to P vo o co cs σν oo vo vo co omin o en in 6jl4J ^ O CO m VO Π MVrHCS r-i T* Cv oo vo co p>| φ * * * ^ * * * * * * * * *** H X h Cv m es cs in co oo -S' cs c* co c- S' h rl P 10 Cv i—I Γν rt Cv r-1 C* rH rH rt * * Cp \ / 3i3 UX2 OX2 0X2 OX2 2X2

\ O

\_o o ts in in O h

/ w iH »H rH rH

t-( I I I I I

ff Yv .in co h σι o

// Y> α Ή rH <* O rH

7 W H rt rt cs es u w g _4 § ®

X \ K X X X X X

-o

J ^ XX X X X X

Y e ~

bT

XX X X X X

CO V

es x _L /

KO X X -L

co

CO X

,p> fpp

•H

' i H ty m ώ co tj· m vo c* U S rt rt rt rt rt 91407 21 o o T* o o o o o 2 ** ^ Z OO K Z O z<sz 20 VO CO (S 00 VO (N 002 O O cv)

(0 CO KK N CS K es es CO K

. j> K in K K K in K K

h e vo css< es es in cot- in mt> £(0 <s o - es es - es- es es -

2 O O U OO OO O OO

3 o in VO H OI 00 CO (N CO OI CO H CS^CO V» O O VO t- o £ hc^co ^e-eo co co es σν^οο oo vo es es in oo o in m

**.«·. H ^ ^ k \ ^ V ·> ^ *. k *» V *«. S

(0 tji oo ro co e- co es e- m oe-'tf ^r-eo es co

COC-rHC-rHe-H^rHC^-rHe-rHC-H

co c- co rH es co es oo in is ov vo e- m es vo eo h co oo s, .μ es in eo co in vo in en co «h es o co in co vo s1 oi co s1 .h >i Q) — — — - - - -vo - --- - - - --- - - - h κ s1 co eo eo t- co es -in h Mn oc-^< e- co co r- co

(0 CO H H C- rH f-> C- rH e- rH f- rH Γ- rH rH rH

S3 UK2 UK2 0 2 2 O K 2 OK2 OK2 OK2

O

• 00 oo w es es es in σι oo

I I I I II

• o eo >h eo e- in a m h es es «λ es CO rH rH es es rH es eo

<< K

KK K K K K O K

(O

eo 2 KK K K K K K o

C rH rH rH es eo rH rH

KK K K K K K K

..00 es kk)— / KK K K o o *- eo ,1 8 £ p P 9 0 rl •i! en S co σι o h es eo S1

Ug <h h es es es es es 22 O O O O o o

Ti τί Ti o Ti M» 2 2 202 τί 2 2

00 O CS ts O 2 (S (S

S (S CO COX CO Ti CO CO

X X X X N X X

H O Ti in «0(0 Tf X VO VO

Sees m es v (s in es (S

KO o o o o o o o a co s co m in vo coot'' voisin vocooo co Ti es ιητίσν P en cs co es s< es σ> σι o oo oo <o «oho inooco oococo e * * * vh* *..............

10 co S Ti Ti Ti Ti co s co CO S Ti in vo Ti >vi s co Ti e* co {OtTrlSrlSHSHSHSHSH

n £ CS rH (O CS VO CO CO CO V# ovin COOCO Ti Ti Ti Ti Ti >i+> cs cs Ti o Ti σν o s (S eovoco s· h h o> s s· σν Ti Ti M ...................s - H X Ti s τί Ti co Ti s co co s Ti in «o Ti Tit^co ^ * co ti (I) S rH S rt S rt S rH S rt S H tr S rt <3 0X2 0X2 0X2 0X2 0X2 0X2 0X2 O _ • co m oo Ti σ> es

w CO CS (O OV r-t 00 rH

I I I i i i i

• O CS CO S CO S rH

Oi σν CS CO en rH OO rH

(Λ rH CS CS rH (S rH CS

*

XX X X X X X X

K° X X X X X X X

C H rH rH rH I—i rH rH

K S X X X X X X

'OH P P ΐ P f

X

:: ,9 pp p p ρ-φ

J

näin vo s co en o rH

US es cs es cs cs co co 23 91407

o O O O O O O

Ν' Ν' Ν' Ν' Ν' n· Ν' 2 20 20 2 2 20 20

o (NM VO (N Ν' 00 (NCN VO CN

0 CO CO® CN® (N (N CN® (N® . £ a a a a a a x HO Ν' incN coin o n< on mco £0<N (N 1 (N1 CN CN (N1 CN «

ÖO OO OO O O U O OO

a o o N1 cn (N cn in vo oo oovh vf oi oo N co in N cn

p CNC^C^ H oi h (N H ^ CO CN C" O CN CN CO 00 CN 00 CN »H

a s » 1 > v 1 v v k «. - >. > " - « » ‘ v»» a CO C- N CO C^ CO (N C^ N H P» O N OvOvO rHC^in

(OC^rHfvHC'-HF'HN'HC^HC^H

m 5 n σ\ in o in co vo Ν' cn cn n· vo n h co co oo h in n n1

CO VO CO VO CO IS O O VO N1 H vO CN CN Ν' CO Ό Ν' CO CN CN

Φ V ^ v> % k, V ^ ^ S VVV «»VV VVV VVV

H x CO ^ CO CO fHC^vD O VO VO H Mf)

(ÖÖJC^Ht^HC^HC^HSrlC^HC^H

SS o a 2 u a 2 u a 2 o a 2 u a 2 u a 2 υ a 2 o o

• O CO O OH

w CN rH Oi in CO CN 00

I I I I I I I

• 00 r-l 00 N1 00 ov VO

ασν H 00 CN CN H in

CO rH CN CN CN CN H

a a a a a a a κη a a a a a a a

C H H H H H H H

x a a a a a a a

CO

'X y <1 ) P · fppp y ppp •h! M dj cn co N1 in vo C' oo MB co co co co co co co 24

Esimerkki 39 5-[4{-(N-syklopentyyli,N-3,5-dimetyylisykloheksyy-li)karboksiamido}bentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridii-nin valmistus 5 ixyxXfYy^ * ° v CH3

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (400 mg, 3,4 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (30 ml), lisättiin 4-bromimetyyli-N-syklopentyyli, N-3,5- dimetyylisykloheksyylibentsamidia (1,4 g, 3,5 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 80 -85 eC:ssa. 40 tunnin kuluttua reaktioastia jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa 20 < 45 °C:ssa. Saatua jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa (2 x 70 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote (1,8 g) kromato-grafioitiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,05 g, 72 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta EtOAc-CH3CN; sp. 214 -25 16 °C.

Analyysi yhdisteelle C27H34N4: laskettu: C 75,30; H 7,9; N 13,02; saatu: C 74,92; H 8,07; N 12,97.

Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkissä 39 30 valmistettiin taulukossa D selostettuja esimerkin 40 - 55 yhdisteitä. 1 · · · • 91407 25

•H O O O O O

H τ» ^ '»»Λ

?Z Z Z Z Z O

O 00 'sf CO ON

<0 CO N CO CO COX

> X X X X X

H (0 in co C'' vo voin £(Ö N N N N N -

O O O O O O

3 N vo o co Ti tn Nf'C'' in σν in n in r·» 43 rl in O' h 10 m 000 vo r-· co N co co k. k. V V k k k k k k. s k. k k k

to Tl· O m CO C'' Ti Ti CO CN Ti Ck co Ti CO

{QCTHt^rlSrlSrlCTrl •H 3 n 43 n vo co o in o· 00N vo m oho O ·ί oi Ti Ti CO CO οι O σι Ti Ti O CO Ti L d) k k k k k k k k k k fk k k k k H Ti co co f' Ti in mo Ti k co in tr. co

β (I) C'k t—I fk 1—I C H NpkrH fk rH

~ S3 UXZ OXZ OXZ oxz oxz \ / ^ z Λ \ o

• \_n · H VO

/==° w vo co »h in in \ / liiti

\ --/ · Ti σν Ti co N

// Sy a O N H N CO

„ // \_ m CO N N N N rH

Λ · —( V « Q \ /

O

ύ \ of X X X X X

g "O .

^ f XX X X x x ΓΛ *>k * XX X X x x of X X X x x ' ^ o ^ ^ £ £

*H M

n Q) O rH N CO Ti

Ug Ti Ti t* ^ ^ 26

H

I O

•h tn (s m es es h o o o o ooo fin Ti o Ti ^ -io M* τί 2 0 2N2 2 20)2 2 CO 0-0) C02 O tn 0)2 M* Ti

> H 2 CO CO O) CO CO CO

H (O 2 K in 2 2 2 m 2 2 O (O OCT» »o Tf Ti in o- tv tv £ J* O) - CM - O) O) O) - O) O)

OO UO O O UO O U

3 σ' cv vo n in in vo eo en »o o h s eo in vo m in Ti hhoo £ tv en o) co n ό 100)0 en cv in es in es es n io s1 es en es (O «.»·. ' «. * «.«.«. ' ‘ ' V - - V V k (O vo Ti en eo co h [v tv co Ti vo es co vo cv es (seves es cv es

60vOrHfvrHvO«—IVOrH VO «H tv f—( Cv »—I

H p m P en vo cv vo to vo es in vo esesoo rsoo o o Ti o o t# cv es ^ cv Ti co es rH es to vo cv h tv in Ti vo vo in vo vo in

^ Φ k V V ^ \ ^ k V ^ ^ V V ttfc. ^ ^ k K k V

H 2 voinen to co h oo cv co in vo es co vo cv es es cv es non flJttlOrHCvrHVOHVOrH VO rH Cv Ϊ-Η Cv r—1 3 3 022 022 022 0220 022 022 022

/«S

O

• eo tv Ti w Ti o co en rH co co

I rH I I III

• CS I in iH es vo CO

a Ti in to tv h es vo M es en es -h es es ή co 2

VO 2 H O

22200 022 in 22222 222

CO

2

* O

22222 202 to CO to to 2 2 2 2 to OOO o 22200 020 ' kp p 9 9 PP3’ ' '5 | p ? ϊ )c y £ ?

Muin vo cv co tn o h y g S Ti <4 Ti -sv in m 27 91407 u £ cm

I CQ CQ O

H CO CO CM H

HO O O Ο Λ fco ^

2 0 2 SO 2 N

<fl "«* CM CO in N Hi

> COS COO CO® CO

Hid® x cm ® Kin

geo c-'co r^x f^in -ifN

X CM - CM CM * CM V

oo OH oo oo

S H CM VO VO H CO ^ o O CO

jj om1 oo in ο ov oo ^ cm o in ^ co o (0 *.».*. - ^ *.»»«. - - - · id ovf'H tv vo σν in ο ό o 'M* cm co

to VO H in H VOHHVOH

w 2 ovinc^ m o h co ή oo in h o\ n n CM^OV ovcoo * vO'vf^Ov vf o in o> Μ Φ ^ V \ ^ ^ H * * * V * V V s H X Ovt^H h-vOOH Ο Ό O vf CM C*»

id CO VO H in H VOHHVOH

S3 0X2 0X20 0X20 0X20

• VO O CO

w rH CO T-t

II II

. ^ h o

Οι H ov VO H

t/J CM H H CM

VO

XXX X X

CO CO

X X

in o o X a o o x CO co o x * x o

X O O X X

CO

x a) CO O h (m £ X o o o o

'PP P P

o ? 1 H h CQ 3 CM CO «Μ* in U 8 in in in in 28

Esimerkki 56 5-[4{-(N-isopropyyli,N-3-metyylisyklopentyyli)kar-boksiamido}bentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiininval-mistus οσχςτ 10 0

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (689 mg, 5,76 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (30 ml), lisättiin 4-bromimetyyli-N-isopropyyli,N-3-metyy- lisykloheksyylibentsamidia (2,17 g, 6,42 mmoolia). Reak-tioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 95 °C:ssa. 48 tunnin kuluttua reaktioastia jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 45 °C:ssa. Saa-20 tua jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa (2 x 100 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote (2,97 g) kromatografioitiin (si-likageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (0,93 g, 43 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta EtOAc-CH3CN; sp. 229 - 31 °C.

25 Analyysi yhdisteelle C23H28N40: laskettu: C 73,40; H 7,45; N 14,89; saatu: C 73,13; H 7,64; N 14,85.

Esimerkki 57 5-[4{-( N-isopropyyli, N-sykloheksyyli )karboksiami-30 do}-2-metoksibentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiinin valmistus 35 CHj 0 29 91407

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (1,5 g, 12,6 mmoolia) diraetyyliasetamidissa (120 ml) argonin suojaamana, lisättiin yhtenä eränä N-isopropyyli, N-sykloheksyyli-3-metoksi-4-bromimetyylibentsamidia 5 (5,1 g, 13,86 mmoolia). Reaktioseoksen lämpötila nostet tiin hitaasti 80 - 85 °C:seen ja sekoitettiin viikonlopun ajan. Reaktioastia jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 56 °C:ssa. Saatua jäännöstä trituroitiin kuivan eetteriylimäärän kanssa (2 x 10 100 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote kromatografioitiin (silikageeli, CH2Cl2:metanoli:NH4:OH = 90:10:1), jolloin saatiin puhdasta alkyloitua tuotetta (3,53 g, 69 %). Tuote voitiin kiteyttää uudelleen etyyliasetaatista, sp. 192 -95 eC.

15 Analyysi yhdisteelle C24H30N402: laskettu: C 70,90; H 7,44; N 13,78; saatu: C 70,58; H 7,43; N 13,78.

Esimerkki 58 5-[4{-(N-isopropyyli,lN-sykloheksyyli)karboksi-20 amido}-2-metoksibentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiini- hydrokloridin valmistus «3^0 ΝνΛΝ/νΑ¥ν013 'ΧΧΟγίρ HCl 30 Kirkkaaseen liuokseen, jossa oli esimerkin 57 tuotetta (100 mg) metanolissa (7 ml), lisättiin HCl:aa diok- saanissa (5 ml, 6-norm. liuosta). Kahden tunnin sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa liuotin poistettiin vakuumissa. Lisättiin etyyliasetaattia (25 ml) ja seosta 35 kiehutettiin tunnin ajan. Seos suodatettiin kuumana ja jäännös pestiin lisätyllä kuumalla etyyliasetaatilla. Kui- 30 vaamisen jälkeen tuote (92 mg) kerättiin talteen, sp. 210 - 13 °C.

Analyysi yhdisteelle C24H31N4C102 · 0,25 H20: laskettu: C 64,41; H 7,09; N 12,52; Cl 7,92; 5 saatu: C 64,40; H 7,34; N 12,43; Cl 8,0.

Esimerkki 59 5-[4{-(N-syklopentyyli, N-3-metyyllsykloheksyyli)-karboksiamido}-3-metoksibentsyyll]imidatso[4,5-c]-pyridllnln valmistus 10 •s

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-20 niä (412 mg, 3,47 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa (25 ml), lisättiin 4-bromimetyyli-2-metoksi-N-syklopentyy-li, N-3-metyylisykloheksyylibentsamidia (1,49 g, 3,65 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 90 - 95 °C:ssa. 48 tunnin kuluttua reaktioastia jäähdytet-25 tiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa > 45 °C:ssa. Saatua jäännöstä trituroitiin eetterin (2 x 70 ml) kanssa ja suodatettiin. Raaka tuote (1,85 g) kroma-tografioitiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10- 1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,05 g, 67 %), joka 30 kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatissa, sp. 226 - 28 °C. Analyysi yhdisteelle C27h34n4o2: laskettu: C 72,60; H 7,67; N 12,54; saatu: C 72,28; H 7,65; N 12,44.

31 91407

Esimerkki 60 5-[4{-(N-syklopentyyli,N-3-metyylisykloheksyyli) -karboksiamido}-2-metoksibentsyyli]imidatso-[4/5-c]pyridiinin valmistus 5

<xnx5L

10 . I) •s

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (525 mg, 4,4 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (25 ml), lisättiin 4-bromimetyyli-3-metoksi-N-syklopen tyyli, N-3-metyylisykloheksyylibentsamidia (1,9 g, 4,66 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 90-95 °C:ssa. 48 tunnin kuluttua reaktioastia jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa 20 < 45 eC:ssa. Saatua jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa (2 x 100 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote kromatografioi-tiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,39 g, 71 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta etyyliasetaatti-CH3N, sp. 186 -25 888 °C.

Analyysi yhdisteelle C27H34N402: laskettu: C 72,60; H 7,67; N 12,54; saatu: C 72,61; H 7,91; N 12,28. 1 « » f • · » 32

Esimerkki 61 5-[4-(-(N-syklopentyyli,N-sykloheksyyli )karboksl-amido}-2-metoksibentsyyli] imidatso[4, 5-c]pyridli-nln valmistus 5

Sekoitettiin liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (660 mg, 5,57 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (25 ml), lisättiin 4-bromimetyyli-2-metoksi-N-syklopen- tyyli,N-sykloheksyylibentsamidia (2,0 g, 5,07 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 75 °C:ssa. 24 tunnin kuluttua reaktioseosta jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa. Saatu jään-20 nös laimennettiin vedellä (650 ml) ja tehtiin emäksiseksi ammoniumhydroksidin vesiliuoksella (20 ml). Reaktioliuos uutetiin kloroformilla (4 x 100 ml). Orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella (3 x 250 ml), kuivattiin (MgS04) ja suodatettiin. Yhdistetty suodos haih-25 dutettiin kuiviin ja jäännös (2,u79 g) kromatografioitiin (silikageeli, CHCl3-etanoli-NH4OH 10-90-1), jolloin saatiin haluttua tuotetta (1,36 g, 62 %), sp. 197 - 99 °C. Analyysi yhdisteelle C26H32N4O2010,4 H20: laskettu: C 71,01; H 7,52; N 12,74; 30 saatu: C 70,87; H 7,49; N 12,70.

• · 91407 33

Esimerkki 62 5-[4{-(N-isopropyyli,N-sykloheksyyli )karboksiami-do}bentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiinin valmistus 10

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niä (680 mg, 5,8 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa (30 ml), lisättiin 4-bromimetyyli-N-isopropyyli,N-syklo-heksyylibentsamidia (2,2 g, 6,44 mmoolia). Reaktioseosta 15 sekoitettiin argonin suojaamana 80 - 85 °C:ssa. 20 tunnin kuluttua reaktioastia jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 45 °C:ssa. Saatua jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa ja suodatettiin. Raaka tuote (1,85 g) kromatografioitiin (silikageeli, CH2Cl2-eta-20 noli-NH40H 80-20-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,29 g, 59 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta EtOAc-CH3CN, sp. 209 - 10 °C.

Analyysi yhdisteelle C23H28N40 · 0,2 H20: laskettu: C 72,70; H 7,48; N 14,75; 25 saatu: C 72,92; H 7,60; N 14,82.

Esimerkki 63 5- [4-{ (N-sykloheksyyli, N-isopropyyli )karboksiami-do}-2-metoksibentsyyli] -4-kloori-imidatso[4,5-c]py-ridiinin valmistus 30

Cl OCHj ··' ;r': ' « 34 4-kloori-imidatso[4,5-c]pyridiinilähtöaineen samoin kuin 2-metoksi-3-bromibents-(N-sykloheksyyli,N-iso-propyyli)amidin valmistusta on selostettu aikaisemmin tässä selityksessä. Kytkemällä 4-kloori-imidatso[4,5-c] 2- 5 metoksi-3-bromibents-(N-sykloheksyyli,N-isopropyyli)ami-diin dimetyyliasetamidissa 85 - 90 °C:ssa 26 tunnin kuluessa, saadaan otsikon yhdistettä.

Esimerkki 64

Yhdisteen 10 OH oh· ja yhdisteen 20 OCH, OM· otro^L·

25 N

valmistus.

Edellä esitettyjä yhdisteitä voidaan syntesoida ·_ ' 30 seuraavan kaavion mukaisesti 35 91407 CO "CO — ;6c \ <0^1' ‘Ac 10 / OH <T /

15 NaHfOtfP

H· I

p Γ1 s

„ <;0AC + AA

9.

Imidatsopyridiinin N-l-yhdiste suojataan SEM-Cl:lla ja muutetaan pyridiini-N-oksidiksi käyttämällä m-kloori-,25 perbentsoehappoa 4-kloori-imidatso[4,5-c]pyridiinin valmistuksen osalta selostetulla tavalla. Pyridiini-N-oksidi-yhdistettä kiehutetaan etikkahappoanhydridissä 4 tuntia, jolloin saadaan 4-okso-l-(2-trimetyylisilyyli)etoksime-tyyli-imidatso[4,5-c]pyridiiniä. Antamalla tämän yhdisteen 30 reagoida 4-bromimetyyli-3-metoksi-bents-(N-isopropyyli,N-sykloheksyyli)amidin kanssa dimetyyliformamidissa ja nat-riumhydridin kanssa huoneen lämpötilassa 4 tuntia, saadaan 5-bentsyloitua tuotetta. SEM-ryhmän lohkaisu suoritetaan trifluorietikkahapolla 50 eC:ssa 18 tunnin kuluessa, jol- 35 loin saadaan kaavan 8 mukaista yhdistettä (otsikon yhdiste). Käsittelemällä kaavan 8 mukaisen yhdisteen 4-hydrok- 36 siryhmää natriumhydridi/jodimetaanin kanssa saadaan kaavan 9 mukaista yhdistettä (otsikon yhdiste).

Esimerkki 65 PAF:n indusolma verihiutaleiden kasautuminen ja 5 sekreetio

Pestyjä, [3HJserotoniini-merkittyjä kanin verihiutaleita peraparoitiin kuten on aikaisemmin selostettu julkaisussa COX, C. P., J. Linden ja S. I. Said; VIP nostaa verihiutaleiden syklisen AMP:n (cAMP) määrinä ja ehkäisee 10 in vitro verihiutaleita aktivoivan tekijän (PAF) indusoi-maa verihiutaleen aktivoitumista, Peptides 5:25-28, 1984, ja pidettiin atmosfäärissä, jossa oli 5 % C02:ta, 37 °C:ssa kunnes niitä käytettiin eläinkoemäärityksessä. Tasaeriä verihiutaleita (2,5 x 108/ml) inkuboitiin joko PAF:n anta-15 gonistin tai sopivan väliaineen kanssa 60 sekuntia ennen PAF:n lisäämistä (0,2 nmoolia - 0,2 ymoolia). Kasautumista tarkkailtiin jatkuvasti strip-chart-tallentimella ja taltioitiin viivan korkeutena 60 sekunnin kohdalla PAF:n lisäämisen jälkeen. [3H]serotoniinin sekreetio määritettiin 20 verihiutale-suspensio-näytteestä, joka oli otettu 60 se kuntia PAF:n lisäämisen jälkeen. Kasautuman estymis- ja sekreetioprosentti laskettiin vertaamalla antagonistilla käsiteltyjä verihiutaleita sopivalla välitysaineella käsiteltyihin kontrolli-verihiutaleihin. Kukin antagonistin ja 25 PAF:n yhdistelmä toistettiin 12 - 15 kertaa, käyttämällä useita erilaisia verihiutale-preparaatteja. IC50-arvot määritettiin tutkimalla annos-reaktio-käyriä.

Esimerkki 66 3H-PAF-sitoutumisen estyminen ihmisen verihiutale-30 kalvoreseptoreihin

Reseptoripreparaatti 10 yksikköä päivättyjä ihmisen varastoverihiutalei-ta, joissa kussakin oli 45 - 65 ml verihiutalerikasta plasmaa, hankittiin kaupallisesta veripankista. Kertakäyt- '· 35 töisiä muovituotteita käytettiin koko ajan reseptorin val mistuksessa. Yksiköt yhdistettiin ja otettiin 1 ml:n ta- • 4 · « » ♦ · 1 · • « · 37 91407 saeriä verihiutalekonservtraation määrittämiseksi, käyttämällä Coulter-laskinta. Jäljellä oleva verihiutalerikas plasma jaettiin 50 ml:n kartiomaisiin putkiin ja sentri-fugoitiin huoneen lämpötilassa 15 minuuttia nopeudella 5 3000 kierrosta/minuutti 2300 x g). Plasma dekantoitiin pois ja verihiutaleet suspendoitiin uudelleen 35 ml:aan puskuria (10 mmoolia Trizma'a 7,0, 2 mmoolia EDTA:ta (di- kaliumsuolaa) ja 150 mmoolia KCl:a) ja siirrettiin uusiin putkiin, joita sentrifugoitiin jälleen kuten edellä. Veri-10 hiutaleet pestiin kolme kertaa, välttämällä saastuttavia punasoluja pellettien pohjalla. Pellettejä tiivistettiin jokaisessa vaiheessa, ja viimeisen pesun jälkeen EDTA/KC1-puskurilla, suurin osa punasoluista oli yhdessä putkessa. Verihiutaleet suspendoitiin uudelleen puskuriin, jossa oli 15 10 mmoolia Trizma'a 7,0 ja 10 mmoolia CaCl2:a. Sentri- fugoinnin jälkeen puskuri dekantoitiin pois ja pelletit suspendoitiin uudelleen CaCl2-puskuriin, välttämällä punasoluista saastuminen ottamalla verihiutalepelleteistä talteen vähemmän kuin 100 %. Uudelleen suspendoitu verihiu-20 taleet jaettiin 8 - 10 ml:n tasaerin Corex-putkiin ja hajotettiin pakastamalla kolme kertaa (kuivajää/etanoli) ja sulattamalla (24 eC). Putkia sentrifugoitiin nopeudelle 40,000 x g 20 minuuttia 4 °C:ssa. Pintakerrokset dekantoitiin pois ja kukin pelletti suspendoitiin uudelleen 5-7 25 ml:aan 10 mmolaarista Trizma'a 7,0. Kaikki uudelleen suspendoidut pelletit yhdistettiin ja noin 1200 μ1:η tasaeriä jaettiin 1,5 ml:n mikrofuugiputkiin ja pakastettiin -70 °C:ssa. Proteiinipitoisuus määritettiin fluoreseiini-proteiinianalyysin avulla.

30 Analyysimenetelmät:

Reseptorin luonnehdinta

Jokainen reseptoripreparaatti arvioitiin reseptroi-populaatioiden lukumäärän, PAF-reseptroiekvivalenttien lukumäärän mg:ssa proteiinia ja dissosiaatiovakion (KD) 35 PAF-sitoutumisen määrittämiseksi. Tämä vaatii 2-3 koetta, joissa proteiinikonsentraatio pidettiin vakiona ja 38 3HH-PAFligandikonsentraatio vaihteli välillä noin 0,10 - 2,5 nmoolia, ja arvot analysoitiin Scatchard-menetelmällä. Koko inkubaatiotilavuus näissä menetelmissä oli 250 μΐ ja inkuboinnit suoritettiin 24 °C:ssa 30 minuutin aikana.

5 Jatkokokeiluja varten inkubointien kokonaistilavuudet ovat 500 μΐ. Proteiini- ja ligandikonsentraatiot säädettiin siten, että reseptoriekvivalenteiksi saatiin 0,075 nmoolia kun läsnä oli 0,75 nmoolia 3H-PAF:ää. Kutakin resepto-ripreparaattia käytettiin sitten merkitsemättömän PAF:n ja 10 PAF-antagonistin, triazolam'in, annos-vastesiirtymä-yhtey- den määrittämiseksi. Niin kauan kun KD-arvo ja PAF:n ja triazolam'in IC50-arvot olivat yhdenmukaiset samanlaisten arvojen kanssa, jotka oli koottu viimeisistä kokeessa käytetyistä reseptoripreparaateista, mutta reseptoriprepa-15 raattia käytettiin yhdisteiden arvioimiseen.

Yhdisteiden rutiinianalyysi

Yhdisteet punnittiin tarkasti ja liuotettiin DMSO-määriin siten, että 5 μ1:η tasaerä inkubaatissa antaisi halutun yhdisteen konsentraation. Yhdisteet, jotka testat-20 tiin ensimmäisen kerran tässä kokeessa, arvioitiin konsentraation inkubaatioväliaineessa ollessa 50 pmoolia. Kaikki yhdisteet liuotettiin tavallisesti DMSOriin noin 2 tuntia ennen koetta. Triazolam oli aina läsnä jokaisessa seulontakokeessa yhdisteen estymäkontrollina. 50 pmoolin 25 standardikonsentraatio ehkäisi 3H-PAF-sitoutumista noin 50 %. Epäspesifinen sitoutumiskontrolliluos valmistettiin kuivaamalla täydellisesti noin 26,2 μΐ merkitsemätöntä PAF:ää argon-virtauksen suojaamana. PAF liuotettiin uudelleen 1000 pl:aan DMSOra. Lisättäessä 5 μ1:η tasaeränä, 1 30 pmoolin PAF-erän loppukonsentraatio inkubaatissa ylitti 1000-kertaisesti 3H-PAF:n konsentraation.

Kaikki proteiineja sisältävät puskurit valmistettiin huoneen lämpötilassa analyysipäivässä. Koepuskuri valmistettiin lisäämällä 125 mg ihmisen albumiinia 35 25 ml:aan varastopuskuria (10 mmoolia Trizma'a 7,4 20 mmoolin kanssa CaCl2:a). Huuhtelupuskuria valmistettiin 39 91407 lisäämällä 20 grammaa härän seerumialbumiinia 1000 ml:aan varastopuskuria. Noin 80 ml huuhtelupuskuria dekantoitiin pieneen pyrex-maljaan ja käytettiin 65 Whatman CF/C 2,5 cm:n lasisuodattimien kasteluun. Jäljellä oleva huuhtelu-5 puskuri kaadettiin pipettiin ja pantiin jäähauteeseen suodattimien kanssa.

Ligandi valmistettiin analyysiä varten lisäämällä noin 10 μΐ varasto-3H-PAF:ää (DuPont NEN, NET-668) 14 ml:aan koepuskuria. Koska 3H-PAF:n määrän lopullisessa in-10 kubaatissa oli oltava 0,75 nmoolia, käytettävän varasto-3H-PAF:n todellinen määrä oli määritettävä kutakin aine-erää varten spesifisen aktiivisuutensa perusteella.

Kalvoreseptorit koetta varten valmistettiin sulattamalla sopiva putkimäärä huoneen lämpötilassa ja lisää-15 mällä kalvot 10 mmooliin Trizma'a 7,0, jossa oli 10 mmoo-lia CaCl2:a. Kokonaistilavuus saatettiin 14 ml:ksi. Tarvittavien kalvojen todellisen määrän määritteli vaatimus saada 0,075 nmoolia PAF-reseptoriekvivalenttia koeputkea kohden. Kaikkia aineita pidettiin liikkeessä ravistelemal-20 la tärylevyllä.

Kuhunkin 12 x 75 mm:n polypropyleeniputkeen lisättiin ensin 5 μΐ yhdistettä tai DMSO:a, minkä jälkeen lisättiin 95 μΐ koepuskuria. Seuraavaksi lisättiin jokaiseen putkeen 200 μΐ 3H-PAF:ää ja 3 tasaerää 3H-PAF:ää, jotka oli 25 otettu eri aikoina käytön aikana, pantiin tuikeampulleihin. Reaktio käynnistettiin lisäämällä 200 μΐ kalvoja. Kaikkia putkia pyöritettiin hyvin lyhyen ajan ja pantiin 24 °C:n vesihauteeseen noin 30 minuutiksi. Tänä aikana Whatman CF/C-suodattimet pantiin 5 milliporen vakuumi-imu-30 rin suodatinristikoille. Inkuboinnit lopetettiin lisäämäl lä ensin kuhunkin inkubointiputkeen 4 ml jääkylmää huuhtelupuskuria ja dekantoimalla ne sitten suodattimille va-kuumissa. Putket ja suodattimet huuhdeltiin vielä kahdesti. Kukin suodatin pantiin 20 ml:n tuikeampulliin, johon 35 lisättiin 20 ml Aquasol'ia (DuPont NEN, NDF 952). Kaikkien ampullien annettiin olla 2 tuntia pimeässä valoluminoinnin 40 ja kemiluminoinnin hajottamiseksi ennen nestetuikelasken-taa.

Kukin inkubointiputki sisälsi summittain 500 μΐ kokonaistilavuuden inkubaattia. Tässä oli 5 μΐ lääkeainetta 5 DMS0:n kanssa tai vain DMSO:ta, 95 μΐ koepuskuria, 200 μΐ 3H-PAF:ää (loppukonsentraatio 0,75 nmoolia ja 200 mikrolit-raan kalvoreseptoreita (loppukonsentraatio 0,075 nmoolia). Koetta kohden käytettiin 60 putkea ja koe suoritettiin kolme kertaa kunkin annoksen osalta. Kontrolleina kussakin 10 kokeessa oli kaksi laimennus(DMSO-"O"-kontrollia (kaksi kolminkertaista määritystä sijoitettuina eri paikkoihin 60 putken kokeessa), 1 epäspesifinen sitomiskontrolli, ja 1 triazolam-rohdos-kontrolli. 16 jäljellä olevaa annosta käytettiin testaamaan 16 erilaista yhdistettä seulonta-15 annoksen 50 pmoolia kohdalla tai annos-vaste-määritysten suorittamiseksi yhdisteen osalta. Yleensä annos-vaste-käy-rät koottiin neljästä yhdisteannoksesta, jotka merkitsivät 3H-PAF-sitoutumisen estymistä 15 - 85 %, ainakin yhden annoksen ollessa kummallakin puolella 50 %:n kohtaa.

20 Rutiinianalyysilaskelmat

Yhden yhdisteannoksen osalta laskettiin kolminkertaisen DPM-määrityksen keskiarvot (korjattuna taustan osalta), kun taas kokonaissitoutumisen osalta ("0” annos, ainoastaan DMSO) laskettiin kaikkien kuuden määrityksen 25 keskiarvo. Epäspesifisen sitoutumisen määrä (1 pmooli PAF) vähennettiin kaikista annos-keskiarvoista, jolloin saatiin spesifisen sitoutumisen määrä kaikissa tapauksissa. 3H-PAF:n sitoutumisprosentti tai sitoutumisen estyminen laskettiin kaavasta STBo-SBc/STBo x 100, jossa STBo * "0"-..· 30 annoskontrollien spesifinen sitoutuminen ja SBc spesifinen sitoutuminen yhdisteen läsnäollessa. Jos yhdiste, joka testattiin alkuperäisen seulonta-annoksen 50 pmoolin '!!! kohdalla, ehkäisi sitoutumista 45 % tai enemmän, yhdistet- *. tä pidettiin aktiivisena ja testattiin annos-vaste-tapaan 35 IC50-arvon määrittämiseksi. Yhdisteitä, jotka estivät PAF-sitoutumista vähemmän kuin 45 % 50 pmooli-konsentraation 41 91407 kohdalla, pidettiin epäaktiivisena eikä lisätestausta enää suoritettu.

IC50-arvot määritettiin aktiivisten yhdisteiden osalta seuraavin testein. Kolmen tai useamman yhdiste-5 annoksen on ehkäistävä 65W-PAF-sitoutumista 15 - 85 %.

Tietokoneohjelmaa käyttäen muunnettiin korvausprosentti-arvot (logit) ja suoritettiin "least squares"-lineaarinen regressio arvojen osalta, jotka täyttivät 15 - 85 %:n vaatimuksen, IC50-arvojen määrittämiseksi samassa kokeessa 10 saaduista arvokohdista.

« * • · ♦ 42

Thdlata »rm lndnaolaa ΡΑΠ n Induaolaa 3Β-ΡΑΠη altoutualaen verihiutaleiden verihiutaleiden aatyalnen Ihaiaen ve-arottuainen kaaautuainen rlhlutaleeaeen (XC90)aoolla <IC9Q)aoolia (ICg0)paoolia 5 S-(4-(B-aatyyli-B-ayklohekayy11- karbokalaaldo)bentayyli)Ialdatao- ^ ^ l4.$-c)pyridlini 7.2 * lo" 10* - 10 15.2 5-|4-(B-n-oktyylikarbokelaaldo)bent- ^ ^ ayyllJlaldateo(4,5-c)pyrldilnl 10 - 10 10 10 11.0 10 5-J4-(N-n-dekyyllkarbokalaaldo)- ^ bantayyll)ialdatao(4,S-e]pyrldllnl 10 - 10 10 10 9.71 S-(4-(K-n-dodekyyllkarbokalanldo)- 767 bantayyll]inldatao[4,5-c]pyrldilnl 1 - 5 x - 10 10 - 10 11.9 S-[4-(N-2-dakalyyll-B-aetyyllkarbok- alaaido)bantayyll)Ialdatao[4.5-c] ^ ^ 15 pyrldllnl 10* lo" - 10 13.2 5-f4-(H-2-(4,4-dlaetyyllääntyy 1 ikarbokalaaldo) bantayyll )iaIdat- ao[4.5-c]pyrldllnl 10 10 22.3 5-(4-(N.lt-dl-leopropyyllkarbokal-2Q an1do)bentayyll]laIdatao[4.5-c]pyrldllnl 10* - 106 10 - 10 7.65 S-(4-(tt.N-dlayklopentyyllkarbokal- aaldo(bantayyll)Ialdatao]4.5-c]pyri- ^ dllnl lo" - lo’’ 10* - 5 « 10* 0,31 5-[4 -(H-ayklohekayyllkarbokalaaldo)- 25 bantayyll]Ialdataot4,5-c)pyrldllnl 10 - 10 10 19.3 5-]4-(H-etyyl1-N-ayklohakayyllkar-bokeiaaldo)karbokalaaido)- -7 bantayyl1)Ialdatao]4.5-e)pyrldllnl 10 -6 -6 -5 - 10 10 - 10 5,20 5-14-(N-laopropyyll-N-ayklohekayy11-30 karbokalaaldo)bantayyll]Ialdatao[4.5- c)pyrldlnl 10 10 - 10 0.17 5-]4-(H-aek.butyyli-H-eyklohekeyyli- karbokalaaldo)bentayyll]Ialdatao- ^ (4.5-c]pyrldllnl lo" - lo" 10_ -6 - 5 s 10 0.,58 35 5-(4-(N-laobutyy11-N-eyklohekayyli- karbokalanldo)bentayrll]Ialdatao- -6 -7 10 2.62 (4.5-c]pyrdllnl 10 91407 43

Thdlit· nrin Indusoi·· Mfi« Indusoi·· 3Η-Ρ»Γ:η sltoutualsen sarlhlutalsidan sarihiutaleIdan aatyalnan lhalssn it-•rottualnsn kassutwlnsn rlhlutslsoseen (lC50)aoolla (ICS0)aooll· (IC50)paoolia 5 5-14 -|K-3-pentrTll-K-irkleh<kinll- karbokaianldo)bentsyyll]laidatao- g 67 (4.5-c)pyrldllnl 10* - 10 10 - 10 5-(4-(ΙΙ-»τΜορΓθριτΗ-*-·Γΐ'1ο·'··>* syyllkarbokalaaldolbentayyllIlaidat- ^ ^ JQ ao[4,5-c]pyrldllnl 10 - 10 3.68 5 - 14 - (R-syklobutyyli -lt-ayklo- heksyyllkarbokslaaldo)bentayyll)- ^ 78 laidatao(4.5-c]pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0,0199 ^ 5-(4-(H-ayklopentyyli-8-ayklohakayy- 1lkarbokslaaldo)bentsyy11)Imidatso- -8-9 -7 -8 (4.5-c)pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0,32 5-(4-(N.H-dlaykloheksyyllkarbokal-amldobsntsyyll)laldatso(4,5-c)pyrl- -8 -6 -7 dllnl 10 10 - 10 1.06 20 5-[2-[4-(N-aetyyli-N-ayklohekayyli- ksrbokslaaldo)fanyyllJatyyll]1·!- ^ datso[4.5-c]pyrldllnl 10 - 10 10-4 - 10 5- (3 - (4 - (N-aatyyll-M-syklohekayyli-kerhoksisaldo)fanyyllJpropyyllJ- laldatso[4.5-c]pyridllnl lo" - 10* 10-4 - 10 61.1 5-(4-(N.H-diayklopantyyllkar-bokalaaldo)-2-aatoksibantsyy11]ial- -8 -9 -7 -8 datao[4,5-c]pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0.055 30 5-(4-(B-sykloheksyyll-k-syklopan-tyyllkarbokslaaldo)-2-aetokslbant- yyll)ladlatso(4.5-cJpyrldllnl 10 - 10 10 0,0302 5-(4-(M-laopropyyll-H-ayklohakayyli-ksrbokslsaldo)-2-aatokslbantayy1lilat da tao ( 4 . 5 -e ) py ridi lnl 10 10 - 10 0,0665 35 44 TMlat· nrm induaoi» nri· lalantM ^If-PÄF:n Rltoutualicn

TerlhUUUiita «arthlatalallaa ntralon ihalMa ▼·-arattaalnan kaaaa tmalnan rlhlatalaaaaan (ICjglMolU IICjj)i»eH· (ICS0)paoolla 5 5-l4-(E-eetyylt-E-ayklohekayyllkar- bohalaaldoj-y-aetokelbent- „ -6 -7 -5 -6 ayyll)laidatao(4.S-c]pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 5-(4 -(M-ayklopantyyU-K-ayklohak- ayyllkarbokalaaldo)-2-fluorlbant- -78 ayyll|laldatao(4,5-e]pyrldllnl lo’" - lo" 10 - 10 0.0755 10 8- (4 - (H-laopropyyll-ll-eyklohekeyy-llkarbokalaaldo)-2-fluori- bantayyll]laldatao[4.5-e]pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0.442 5-(4-(N-aatyyll-H-ayklohekayyllkar- bokalaaldo)-2-fluorlbantayyll)lal- 56

datao(4.S-e|pyrldlIni lo"° - 10* 10 - lO

15 5-(4 -(N-tart.butyyll-N-ayklo- bakeyyllkarbokelaaldojbentayyll1- 78 laldatao(4.5-e)pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 $7.7 * lnhlb (50 pa) 5-(4-(H-fenyy11-R-ayklopentyyllkar- bokalaatdo)bantayyll)laldatao(4.5- e 20 ejpyrldllnl 10 - 10 10 2.35 5-(4-(N-3-aatyyliayklohakayy11-K- ayklopantyyllkarbokalaaldo)bantayy- ^ ^ 111ialdataol4.S-clpyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0.074 5-(4-(N-4-aatyyliayklohakayy11-8- ayklopentyyllkarbokBlaaldo)bentayy- ^ ^ 11]laldatao(4,5-e]pyrldllnl 10* - ίο" 10 - 10 0.75 5-(3-(N-aatyyli-H-ayklohakayyUkar- bokalaaldo)bantayyll]laldatao(4.S- 5 ejpyrldllnt 10-4 - 10 10-4 - 10 JB 1 lnhlb (50 pa) 5-(3-(H-laopropyyll-N-ayklohakayyll- 30 karbokelaaldo)bentayyllJlaldatao- 56 5 (4.5-e]pyrldllnl 10 - 10 10-4 - 5 « 10 26.1 * lnhlb (50 pa) 5- (4 - (II, H-dlayklopantyyllkarbokal- aaldo)bantayyll)-4-aatyyll-laldat- 78 ao(4.5-c)pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0.188 5-(4-(N.R-dlayklopantyyllkarbokal- aaldo)bentayyll)-2-aotyyll-laldat- 67 56 ao(4.58-c)pyrldltnl 10 - 10 10 - 10 70.8 8 lnhlb (50 pa)

1. EtOH-HaOH

Claims (9)

45 91407

1. Menetelmä kaavan I mukaisten terapeuttisesti käyttökelpoisten 5-asemassa substituoitujen [4,5-c]imid-5 atsopyridiinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi N -' NX R2 jossa kaavassa

15 Rx ja R2 ovat kumpikin itsenäisesti vety; suoraket- juinen tai haaroittunut alkyyli, jossa on 1 - 12 hiiliatomia; sykloalkyyli, jossa on 3 - 6 hiiliatomia; substituoi-tu sykloalkyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, bisykloalkyy-20 li, jonka kummassakin renkaassa on 3 - 8 hiiliatomia; fe-nyyli; pyridyyli; substituoitu pyridyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 3 hiiliatomia; ja R2 ja R2 eivät molemmat voi olla vetyjä; X on yksi tai useampi substituentti yhdessä tai 25 useammassa fenyylirenkaan asemista 2, 3, 5 tai 6, valittuna itsenäisesti ryhmästä, jonka muodostavat vety, metoksi, fluori ja bromi; n on kokonaisluku 1-3; R3 on ryhmä, joka on substituenttina imidatsopyri-30 diinirengasssysteemin pyridiinirenkaan 4-asemassa, joka on vety, hydroksi, metoksi, metyyli, fluori, kloori tai bromi; * R4 on vety, metyyli tai metoksi; tunnettu siitä, että imidatsopyridiini, jolla on 35 kaava 46 s saatetaan reagoimaan halogeenialkyylibentsamidin kanssa, jolla on kaava 10 (<jH2»nL -4"x 15 (III) R, Ά/ Nr2 jossa kaavassa 20. on kloori, bromi tai metaanisulfonyylioksi; minkä jälkeen, haluttaessa, valmistetaan näin saaduista kaavan I mukaisista yhdisteistä happoadditiosuoloja tavanomaisin menetelmin.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n-25 n e t t u siitä, että valmistetaan 5-[4-{-(N-syklopentyy- li,N-sykloheksyyli)karboksiamido}-2-metoksibentsyyli]imi-datso[4,5-c]pyridiini.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 5-[4-{-(N-isopropyy- 30 li,N-sykloheksyyli)karboksiamido}bentsyyli]imidatso-[4,5-c]pyridiini.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 5-[4-(N-isopropyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bentsyyli]imidatso[4,5-c] - 35 pyridiini. 47 91407

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 5-[4-(N-syklobutyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bentsyyli]imidatso[4,5-c]-pyridiini.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan 5-[4-(N-syklopentyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiini.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n- 10. e t t u siitä, että valmistetaan 5-[4-(N,N-disyklopen- tyylikarboksiamido)bentsyyli] -4-metyyli-imidatso[4, 5-c] -pyridiini.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 5-[4-(N-isopropyyli-

15 N-sykloheksyylikarboksiamido ) -2-metoksibentsyyli] imidat- so[4,5-c]pyridiini.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 5-[4-(N-isopropyyli- N-sykloheksyylikarboksiamido)-2-metoksibentsyyli]-imidat- 20 so[4,5-c]pyridiinihydrokloridi. 48