FI91407C - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 5-substituoitujen /4,5-c/imidatsopyridiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

i 91407

Menetelma terapeuttisesti kayttOkelpoisten 5-substituoitu-jen [4,5-c]imidatsopyridiinijohdannaisten valmistamiseksi

Tama keksintO kuuluu nisakkaiden hoito-opilliseen 5 kenttaan ja koskee yhdisteita, jotka on tarkoitettu ni-sakkaiden sairauksien, kuten tulehduksen, sydanverisuoni-hairiOiden, astman ja mulden sairauksien hoitamiseen. Eri-tyisen kilnnostava on 5-substituoitujen[4,5-c]imidatsopy-ridiinien luokka, jotka ovat kayttOkelpoisia hoidettaessa 10 sydanverisuonisairauksia ja immunitulehdukseen liittyvia hairiOita, jotka ovat verihiutaletta aktivoivan tekijan (paf) vaittamia.

Verihiutaleita aktivoiva tekija (RAF) on ollut yh-teydessa erilaisiin biologisiin aktiivisuuksiin ja johto-15 ratoihin, tehden sen taten tarkeaksi vaiittajaksi ja ol-lessa syypaana erilaisissa fysiologisissa prosesseissa, mukaan lukien, naihin rajoittumatta, verihiutaleiden ak-tivoitumisessa ja kasautumisessa, silean lihaston kutis-tumisessa, immuuni-kompleksi-saostumataudin synnyssa, tu-20 lehduksessa, ja hengityksen, sydanverisuonien ja suonen-sisaisissa sairaaloisissa hairiOissa. Ndma fysiologiset tapahtumat ovat yhteydessa hyvin laajaan sairauksien ryh-maa, kuten esimerkiksi sydanverisuonihairibihin, astmaan, keuhkovesipOhOn, hajaantumismyrkkyshokkiin, aikuisen hen-25 gityshairidoireistoon ja tulehdussairauksiin.

US-patentti 4 804 658 paljastaa imidatsopyridiini-johdannaisten luokan, jotka ovat kayttOkelpoisia hoidettaessa sairauksia tal hairiOita, jotka ovat verihiutaleita aktivoivan tekijan vaittamia. Tama keksintO eroaa sel-30 vasti tasta kuvauksesta sikali, etta tassa keksinnOssa bentsamidiryhma on liittynyt imidatsopyridiinirengassys-teemin kuusijåsenisen renkaan (asema 5), vastakohtana ku-vaukselle, jossa bentsamidiryhma on liittynyt yhteen imid-atsopyridiinirengassysteemin viisijasenisen renkaan typpi-35 atomeista.

2 T&må keksintO koskee menetelmåa kaavan I mukaisten terapeuttisesti kSyttOkelpoisten 5-asemassa substituoitu-jen [4,5-c]imidatsopyridiinijohdannaisten ja niiden farma-seuttisesti hyvSksyttavien happoadditiosuolojen valmista-5 miseksi //3N^1><R3 /~vji /Rl R_/2 s1?—<cH2»rf \=λ, \ jossa kaavassa

Rx ja R2 ovat kumpikin itsenSisesti vety; suoraket-15 juinen tai haaroittunut alkyyli, jossa on 1 - 12 hiiliato-mia; sykloalkyyli, jossa on 3 - 6 hiiliatomia; substituoi-tu sykloalkyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, bisykloalkyy-li, jonka kummassakin renkaassa on 3 - 8 hiiliatomia; fe-20 nyyli; pyridyyli; substituoitu pyridyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 3 hiiliatomia; ja Rx ja R2 eivat molemmat voi olla vetyja; X on yksi tai useampi substituentti yhdessa tai useammassa fenyylirenkaan asemista 2, 3, 5 tai 6, valittu-25 na itsenaisesti ryhmasta, jonka muodostavat vety, metoksi, fluori ja bromi; n on kokonaisluku 1-3; R3 on ryhma, joka on substituenttina imidatsopyri-diinirengasssysteemin pyridiinirenkaan 4-asemassa, joka 30 on vety, hydroksi, metoksi, metyyli, fluori, kloori tai bromi; R4 on vety, metyyli tai metoksi; Tåsså kaytettyna termi "alkyyli, jossa on 1 - 12 hiiliatomia" merkitsee suora- tai sivuketjuisia hiilive-35 tyryhmia, joissa on 1 - 12 hiiliatomia. Kuvaavia sellai- 91407 3 sia alkyyliryhmia ovat metyyli, etyyli, propyyli, isopro-pyyli, butyyli, isobutyyli, pentyyli, neopentyyli, hek-syyli, isoheksyyli, oktyyli, dekyyli ja nSiden kaltaiset ryhmat.

5 TåssS kSytettynS termin "sykloalkyyli, jossa on 3 - 6 hiiliatomia" piiriin sisåltyvSt sykloalkyyliryhmat, joissa on 3 - 8 hiilta. Kuvaavia sellaisista sykloalkyyli-ryhmista ovat syklopropyyli, syklobutyyli, syklopentyyli, sykloheksyyli, sykloheptyyli, syklo-oktyyli ja nåiden kal-10 taiset ryhmat.

Taman keksinnbn kohteiden piiriin sisailytetaan se-lostettujen yhdisteiden tautomeeriset muodot, isomeeriset muodot, mukaan lukien geometriset isomeerit, enantiomeerit ja diastereoisomeerit, ja niiden farmaseuttisesti hyvåk-15 syttSvSt suolat.

Termi "farmaseuttisesti hyvaksyttava happoadditio-suola" merkitsee suolaa, joka on valmistettu saattamalla kaavan (I) mukainen yhdiste kosketuksiin hapon kanssa, jonka anionin katsotaan tavallisesti soveltuvan ihmisen 20 sydtavSksi. Esimerkkeja farmakologisesti hyvaksyttavista happoadditiosuoloista ovat hydrokloridi-, hydrobromidi-, hydrojodidi-, sulfaatti-, fosfaatti-, asetaatti-, propio-naatti-, laktaatti-, maleaatti-, malaatti-, sukkinaatti-ja tartraattisuolat. Kaikkia naita suoloja voidaan val-25 mistaa tavallisin tavoin antamalla, esimerkiksi, sopivan hapon reagoida vastaavan kaavan I mukaisen yhdisteen kanssa.

Menetelmaile on tunnusomaista, etta imidatsopyri-diini, jolla on kaava 30 R3 //ΝΝγ^Ν“Η (-11)

R4-λ 1 J

35 4 saatetaan reagoimaan halogeenialkyylibentsamidin kanssa, Jolla on kaava

(CH ) L

Λ1

^ N

10 \ R

R2 jossa kaavassa L on kloori, broml tai metaanisulfonyylioksi; minka jaikeen, haluttaessa, valmistetaan nain saa-duista kaavan I mukaisista yhdlstelstd happoadditiosuoloja 15 tavanomaisin menetelmin.

Edelia mainitun menetelman ensisijaisiin reaktio-olosuhteisiin sisaityy halogeenialkyylibentsamidin ja imi-datsopyridiinin liuoksen lammittSminen γόη ajan 70 -90 °C:ssa liuottimessa kuten dimetyyliasetamidissa (mo-20 lempia suunnilleen 0,1-molaarisina). Υΰη ajan lammittami-sen jaikeen liuotin poistetaan vakuumissa Ja jaannbs lai-mennetaan vedelia Ja tehdaan emaksiseksi ammoniumhydrok-sidilla. Vesiliuos uutetaan kloroformilla Ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pestaan takaisin kyliastetylia natri-25 umkloridin vesiliuoksella. Orgaaninen liuos kuivataan nat- riumsulfaatilla tai magnesiumsulfaatilla, kuivausaine suo-datetaan pois Ja suodos konsentroidaan vakuumissa, Jolloin saadaan raaka tuote. Puhdistaminen suoritetaan kromatogra-fioimalla silikageelilia kayttamaiia kloroformin, etanolin 30 Ja ammoniumhydroksidin seoksia.

Edelia selostetun menetelman ensisijaisena Jatko-kasittelyna on reaktioliuoksen, Jota oli lammitetty ybn ajan, Jaahdyttaminen huoneen låmpOtilaan Ja liuottimen poistaminen vakuumissa < 45 eC:ssa. Saatua jaannbsta tri-35 turoidaan kuivan eetteriylimaaran kanssa ja suodatetaan.

Raaka tuote puhdistetaan kromatografioimalla.

91407 5 vaiituotteiden valmistus

Kaavio A

“j cO=*cO W OX" I 81«

I I

1· BtOK-NaOH 2- Kloranllll Ψ 10 «, ]'·

CO v CO

« 6°* ( 15 Imidatso[4,5-c]pyridiinia, Jossa R3 on 4-metyyli, valmistetaan edelia olevan kaavion mukaisesti lahtemaiia kaavan (II) mukalsesta imidatsopyridiinista. Taman yhdis-teen asema 1 suojataan antamalla reaktion tapahtua 2-(trialkyylisilyyli)etoksimetyylikloridin ja emaksen kuten 20 natriumhydridin tai kaliumhydridin kanssa polaarisessa aproottisessa liuottimessa kuten dimetyyliforamidissa.

Tama reaktio suoritetaan huoneen lamptttilassa. Spesifinen esimerkki sellaisesta suojausreagenssista on 2-(trimetyy-lisilyyli)etoksimetyylikloridi. Suojatun imidatsopyridii-25 nin annetaan reagoida fenyyliklooriformiaatin ja metyyli-magnesiumbromidin kanssa eetteriliuottimessa kuten tetra-hydrofuraanissa noin -20 °C:ssa. Metyloitua tuotetta, jossa on fenoksikarbonyyli asemassa 5, kasiteliaan emaksen, kuten natriumhydorksidin alkoholiliuoksen kanssa, kiehut-30 tamalla 24 tuntia. Tuote hapetetaan, esimerkiksi, klor-aniililla, ja 2-(trimetyylisilyyli)etoksimetyyliryhma poistetaan kasittelemaiia sopivan hapon kanssa. Esimerk-kina sellaisesta haposta on trifluorietikkahappo. Substi-tuentittoman imidatso[4,5-c]pyridiinin valmistusta on se-35 lostettu US-patentissa 4 804 658.

6

Halogeenialkyylibentsamideja valmistetaan seuraa-van reaktiokaavion mukaisesti.

Kaavio B

x I

o CHjir

10 I

A< "a 15 jossa Rx ja R2 ovat edelia maariteltyja; Z on CH2Br tai H; X on fluori, OMe tai metyyli.

Taten edelia olevan kaavion mukaisesti happoklori-deja valmistettiin vastaavista karboksyylihapoista kie-huttamalla tionyylikloridissa (2-molaarisessa ylimaaras-20 sS) kaksi tuntia. Ylimaaråinen tionyylikloridi poistet-tiin aseotrooppisesti tolueenin kanssa. jaijelle jaånyt happokloridi liuotettiin THF:iin ja jaahdytettiin -10 eC:seen. Lisattiin tiputtamalla ja sekoittaen liuos, jossa oli kaksi mooliekvivalenttia sekundaarista amiinia 25 THFtssa. Lisayksen paatyttya reaktioseoksen annettiin lam-meta huoneen lampOtilaan ja sekoitettiin 1-2 tuntia. Reaktioseos sammutettiin 1-norm. HC1:lia, laimennettiin H20:lla ja uutettiin kolme kertaa etyyliasetaatilla. Yh-distetyt orgaaniset kerrokset pestiin kyliastetylia nat-30 riumvetykarbonaatin vesiliuoksella, vedelia ja kyliastetylia natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin nat-riumsulfaatilla. Kuivausaine suodatettiin pois ja suodos ·;; konsentroitiin vakuumissa, jolloin saatiin raakaa tuotet- ta, joka kromatografioitiin silikageelilia kayttamaiia 35 etyyliasetaatin ja heksaanin seoksia, jolloin saatiin puh-distettua amidia.

91407 7

Kun Z « CH2Br ja X = H, edelia oleva selostus on riittava kaavan (III) mukaisten yhdisteiden valmistami-seksi. Kun Z = CH3, ja X = OMe tal F, tal kun Z = H ja X = CH3, silloin kaavan (VI) mukaista yhdistetta on kSsitel-5 tSvå halogenointiaineen kuten N-bromisukkiini-imidin kans- sa.

Puhdistetun amidin ja NBS:n sekoitettua seosta (moolisuhde 1:1) sateilytettiin hlilitetrakloridissa au-rinkolampulla 1-3 tuntia. Valkea sakka suodatettiin 10 erilleen ja pestiin minimimåårålia CHCl3:a. Suodos pestiin vedelia, ja ammonlumhydroksidllla emaksiseksi tekemlsen jaikeen, vesikerros uutettiin kolme kertaa kloroformilla. Kalkki orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin kolme kertaa kyliastetylia natriumkloridin vesiliuoksella ja 15 kuivattiin natriumsulfaatilla.

Kuivausaine suodatettiin pois ja suodos konsent-roitiin vakuumissa, jolloin saatiin raakaa tuotetta, joka kromatografioitiin silikageelilia kayttamaiia etyyliase-taatin ja heksaanin seoksia, jolloin saatiin puhdistettua 20 bromimetyyliyhdistetta.

Bentsamideja, joissa n = 2 tai 3, voidaan valmis-taa kaavion C mukaisesti lahtemaiia sopivasta hydroksial-kyylibromibentseenista.

Kaavio C

25 T

fc-Bu Si—Q Br ✓v λ_> r fy 30

\f CD

(4/)2 Pd Br2

35 L R

R/i ** N ^ (2) fteSOjCl 8

HydroksyyliryhmS suojattiin trialkyylisilyylieette-rinS antamalla sen reagoida trialkyylisilyylikloridin ja imidatsolin kanssa sopivassa liuottimessa kuten dimetyyli-formamidissa. Esimerkiksi sellaisesta suojaryhmSstS on t-5 butyylidimetyylisilyyli-eetteri. Raaka silyylieetteri puh-distettiin kromatografioimalla silikageelillå kSyttSmållS etyyliasetaatin ja heksaanin seoksia. Aryylibromidi muu-tettiin karboksiamidiksi Schoenbergin ym:n menetelmSn mu-kaisesti [J. Org. Chem., 39, 3327 (1974)]. TSten aryyli-10 bromidin annettiin reagoida hiilimonoksidin kanssa sekundprisen amiinin ollessa liuottimena, kåyttSmSlia kata-lyyttina bistrifenyylifosfiini-palladium(II)dibroraidia, noin 100 °C:ssa 8-26 tuntia paineastiassa. Reaktioasti-asta paastettiin kaasu pois, reaktioseosta trituroitiin 15 etyylieetterin kanssa ja pesunesteet suodatettiin. Suodos pestiin 10 %:sella HCl:n vesiliuoksella, vedella ja suola-liuoksella. Sopivalla kuivausaineella, kuten magnesiumsul-faatilla, kuivaamisen ja suodattamisen jaikeen suodos kon-sentroitiin ja jaannds kromatografioitiin silikageelilia 20 kayttamaiia etyyliasetaatin ja heksaanin seoksia eluentti-na, jolloin saatiin puhdasta tuotetta. Silyylieetteri poistettiin antamalla reagoida tetra-n-butyyliammonium-fluoridin kanssa ja alkoholi muutettiin sulfonaattieste-riksi antamalla reaktion tapahtua alkyyli- tai aryylisul-25 fonyylikloridin kanssa. EsimerkkinS sellaisesta sulfonaa-tista on metaanisulfonaatti.

Sekundåårisiå amiineja voidaan valmistaa mills ta-hansa useista alan asiantuntijoiden tuntemista menetelmis-tS. Katso viitteitS: Emerson, W. S. Org. Reactions 4, 1974 30 1948) ja J. B. Cambell, L. B. Lavaginino "Catalysis in

Organic Synthenis" (Jones W. H., ed) s. 43, Academic Press, New York, 1980.

91407 9 4-metyyll-7-metoksi-imidat:sopyridiinin valmlstus Μ· οφ H OU·

Edelia mainittua yhdistetta voidaan valmistaa seu-raavasti:

Kaavio D

10 “· 0 CO -a?- CQa"‘ -- 0(X°’· x.,-_ o> \ I· pX" * oX"

.o- 0 < T 0M

v_" c \ '-"n- , 20 \ pX~_

V-.X- °VM

N ’· λ_„'_ 25 I n ·

I 1. IlN

I * Ok

Pv ^ X

30 "VO “ °“* .· TSten additiotuotetta 2, joka eristetaan antamalla yhdisteen 1 reagoida fenyyliklooriformiaatin ja metyyli-magnesiumbromidin kanssa, kSsiteliaan osmiumtetroksidin 35 kanssa ves±pit:oisessa asetonissa, jossa on N-metyylimor-foliini-N-oksidia, huoneen låmpdtilassa 24 tuntia, jolloin 10 saadaan diolia 3 ja hydrokslketonla 4. Hydrokslketonl 4 asetyloldaan (etikkahappoanhydridi, DMAP, metyleeniklo-ridi, huoneen lampbtila, 24 tuntia) ja kSsiteliaan CrCl2:n kanssa asetonissa, jolloln saadaan deasetoksiloitua tuo-5 tetta 6. Tuotetta 6 kasiteliaan NaH:n kanssa DMFrssa ja sitten jodimetaanin kanssa, jolloin saadaan metyylieet-teria 7. Lohkaisemalla karbamaatti ja hapettamalla saadaan N-l-suoj attua4-metyyli-7-metoksi-imidatsopyridiinituotet-ta 8. Poistamalla suojaus tuotteesta 8 saadaan 4-metyyli-10 7-metoksi-imidatsopyridiinia.

2-metoksi-4-bromimetyyli-5-bromibents( N-syklopen-tyyli,N-2-metyyllsykloheksyyli)amidin valmistus ΛΧ

15 vS

OM·

EdellS mainittua yhdistetta valmistetaan 2-metoksi- 4-metyylibents- (N-syklopentyyli, N-2-metyylisykloheksyyli) -.25 amidista ja N-bromisukkiini-imidista hiilitetrakloridissa sateilyttamaiia aurinkolampulla 5 tuntia.

2,6-dimetoksi-3-bromi-4-brominietyylibents(N-syklo-heksyyli,N-syklopentyyli)amidin valmistus

30 Br V

35 °CH* ^ 91407 11

Edelia mainittua yhdistetta valmistetaan 2,6-dime-toksi-4-metyylibentsoehaposta, jota ovat selostaneet I. W. Mathison, R. C. Gueldner, D. M. Carrol, J. Pharma Sci 57, 1820 (1968). Substituoitu bentsoehappo muutetaan vastaa-5 vaksi amidiksi muuttamalla ensin mainittu yhdiste happo-klorldlksl (kayttamaiia tionyylikloridia) ja kondensoi-malla sen jaikeen N-sykloheksyyli,N-syklopentyyliamiinin kanssa. Sateilyttamaiia 2,6-dimetoksi-4-metyyli-bents(N-sykloheksyyli,N-syklopentyyli)amidi noudattamalla menetel-10 maa, jota on selostettu 2-metoksi-4-bromimetyyli-5-bromi-bents-(N-syklopentyyli, N-2-metyylisykloheksyyli )amidin valmistuksen osalta, saadaan kahta tuotetta, 2,6-dimetok-si-3-bromi-4-metyylibents( N-sykloheksyyli, N-syklopentyyli )amidi ja 2,6-dimetoksi-3-bromi-4-bromimetyylibents(N-15 sykloheksyyli,N-syklopentyyli)amidia. Tuote on paaasial- lisena tuotteena.

Imidatso[4,5-c]pyridiinia, jossa R3 on 4-kloori, valmistetaan kaavion E mukaisesti lahtemaiia kaavan II mukaisesta imidatsopyridiinista.

20 Kaavio E

CD — CD . — νζΧ> » Η S'V \ <o/V*i N- 25 poci». m* so όο “&> -= cio

. ^ < N.OH

OM· SCI

Taman yhdisteen asema 1 suojataan antamalla reaktion tapahtua 2-(trialkyylisilyyli)etoksi-metyylikloridin ja emaksen kuten natriumhydridin tai kaliumhydridin kanssa 35 polaarisessa aproottisessa liuottimessa kuten dimetyyli- 12 formamidissa. Reaktlo suoritetaan huoneen låmpdtilassa. Suojatun imidatsopyridiinin annetaan reagoida m-klooriper-bentsoehapon kanssa metyleenlkloridlssa huoneen lSmpiJti-lassa, jolloin saadaan pyridiini-N-oksidituotetta. N-oksi-5 dituotetta lSnunitetaan POCl3:n kanssa 90 °C:ssa, jolloin saadaan 4-kloori-l-kloorimetyyli-imidatsopyridiinia. KS-sittelemålia tata yhdlstetta natriummetylaatin kanssa me-tanolissa saadaan 4-kloori-l-metoksi-etyyli-imidatsopyri-diinia. Antamalla tamSn yhdlsteen reagoida veden/hapon 10 kanssa lammittaen saatiin kloori-imidatso[4,5-c]pyridii-nia.

Alkoksialkyylien valmistus

CN CN CN

15 |T^|^CH3 φ-°Η3 _____ j^^CH2Hal C02H 1. CONR,R2 2. CONR,R2 3·

20 ?H2°H ?H0 ?N

jA^ch2z ^L^ch2z /L^ch2z CONR,R2 6. CONR,R2 5. CONR,R2 4.

25 ch2z·

iTiCH2Z

conr,r2 7.

30 jossa Rx ja R2 ovat edelia maariteltyja; "Hal" on halogee-ni; Z on yksi tai useampi substituentti yhdessS tai useam-massa fenyylirenkaan asemista 2, 3, 5 tai 6, valittuna itsenaisesti ryhmasta, jonka muodostavat vety, metoksi, fluori ja bromi; ja Z' on kloori, bromi, metaanisulfonyy- 35 lioksi tai p-tolueenisulfonyylioksi.

91407 13

Yhdisteen 4 (Z = OMe) muuttarainen aldehydiksi 5 (Z - OMe) suoritetaan pelkistamaiia kontrolloidusti pel-kistysaineella kuten di-isobutyyllaluminiumhydridilia, ja hydrolysolmalla sen jSIkeen hapolla. Aldehydln 5 pelkistys 5 alkoholiksi 6 suoritetaan toisen pelkistyksen avulla muul-la pelkistysaineella kuten natriumboorihydrldllia tal litium- tri-t-butoksialuminiumhyridilia. Alkoholi 6 muutetaan johdannaiseksi, joka soveltuu nukleofiiliseen korvaamiseen kuten yhdisteeksi 7, jossa Z' on poistuva ryhma kuten ha-10 loidi tai aryyli- tai alkyylisulfonaatti. Sellainen muut-taminen suoritetaan kasittelemaiia yhdistetta 6, esimer-kiksi, p-tolueenisulfonyylikloridin, metaanisulfonyyli-kloridin, tai tionyylikloridin kanssa.

Keksinnbn mukaisesti valmistetut kaavan (I) mukai-15 set yhdisteet voidaan kayttaa muun muassa heikentamåån tulehdusta, korjaamaan hengityselimien, sydSmverisuonien, ja suonen sisaisia sairaalloisia muutoksia tai hairibita, ja saatelemaan verihiutaleiden aktivointumista tai koagu-loitumista, immuunikompleksisaostumataudin syyta ja silean 20 lihaston supistumisia.

Tulehduksen, sydanverisuonihairibn, astman, tai mulden PAF:n vaiittamien sairauksien hoitamiseksi kaavan (I) mukaista yhdistetta (1) voidaan antaa suun kautta, paikallisesti, parenteraalisesti, tai sisaanhengityssuihk-25 eena tai peraaukon kautta annosykikkbseosmuotoina, jotka sisaitavat tavallisia toksittomia farmaseuttisesti hyvaks-yttavia kantajia, apuaineita ja vaiiainetta. Termin "pa-renter aalinen" puitteisiin tassa yhteydessa kaytettyna sisaityvat ihonalaiset ruiskeet, laskimonsisainen, lihak-:: 30 sensisainen, rintalastansisainen injektio- tai nesteen suoneenantomenetelmat.

.:. Seuraavien esimerkkien tarkoituksena on valaista edelleen tata keksintba rajoittamatta keksinnbn henkea tai piiria. Esimerkeissa kaikki osat ovat paino-osia, ellei 35 toisin ole nimenomaisesti mainittu.

« » * • · • * · 14

Esimerkki 1 5-[4-(N-metyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bent-syyli]imidatso[4,5-c]pyrldllnl 9yCro:> 0 10

Sekoitettuun liuokseen, jossa oil imidatsopyridii-ni& (5,86 g, 49,2 mmoolia) DMF:ssa (125 ml) typpiatsmos-faarin suojaamana, lisattiin pestya, kuivattua natriumhyd-ridia (valmistettu 3,54 g:sta 50-prosenttista Oljydisper-15 siota pesemaiia nelja kertaa 50 - 75 ml:n heksaanierilia). Tunnin sekolttamisen jaikeen huoneen låmpOtilassa, vety-kaasun kehittyminen oli loppunut ja reaktioseos jaahdytet-tiin -10 °C:seen. Lisattiin N-metyyli-N-sykloheksyyli-a-bromi-p-tolyyliamidia (16,9 g, 54,5 mmoolia). Reaktioseos-20 ta sekoitettiin 0 °C:ssa 45 minuuttia ja huoneen lampdti-lassa 3 tuntia.

DMF poistettiin vakuumissa ja jaannOs laimennettiin H20:lla (200 ml) ja saatu liuos kyliastettiin natriumklo-ridilla. Vesiliuos uutettiin nelja kertaa etyyliasetaatil-25 la (100 ml:n erilia) ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kolme kertaa kyliastetylia natriumkloridin vesi-liuoksella (150 ml:n erilia). Natriumsulfaati11a kuivaa-misen jaikeen orgaaninen liuos suodatettiin erilleen ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 13,38 g 30 raakaa tuotetta ruskeana hartsina. Tama aine kromatogra-fioitiin silikageelilia kayttamaiia seosta etanoli/kloro-formi/ammoniumhydroksidi (20/79/1), jolloin saatiin 3,13 g yhdistetta oranssinvarisena Oljyna, joka kiteytyi kasitel-taessa etyyliasetaatin kanssa. Kiteyttamaiia uudelleen 35 etyyliasetaatista saanto oli 1,06 g.

91407 15

Analyysi yhdisteelle C21H24N40· 1/4H20: laskettu: C 71,46; H 7,00; N 15,88; saatu: C 71,14; H 7,18; N 15,78; sp. 115-117 °C.

5 Esimerkki 2 5-[4-(N-metyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)-2-fluoribentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiini m,c y 0 15

Lluosta, jossa oli N-metyyli, N-sykloheksyyli-3-fluori-4-bromimetyylibentsamidia (1,2 g, 2,66 mmoolia) ja imidatsopyridiiniS (0,48 g, 4,0 mmoolia) dimetyyliaset-amidissa (25 ml), lammitettiin yttn ajan 70 - 80 °C:ssa 20 sekoittaen N2:n suojaamana. Reaktioliuotin poistettiin va-kuumissa ja jSSnnOs laimennettiin vedelia ja tehtiin em£k-slseksi ammoniumhydroksidilla. Vesiliuos uutettiin neljS kertaa kloroformilla ja yhdistetyt orgaaniset uutteet pes-tiin takaisin kolme kertaa kyllåstetyllS natriumkloridin 25 vesiliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin magnesiumsul-faatilla, kuivausaine suodatettiin pois ja suodos haihdu-tettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 0,88 g raakaa yhdistetta. Yhdisteen puhdistus suoritettiin kromatografi-oimalla piidioksidilla kSyttamSllfi kloroformin, etanolin . . 30 ja ammoniumhydroksidin seoksia.

Analyysi yhdisteelle C21H23FN4O*0,8 H0: laskettu; C 66,22; H 6,51; N 14,71; F 4,99; saatu: C 66,03; H 6,44; N 14,65; F 4,91; / . sp. 154 - 158 °C.

35 Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkissS 2 valmistettiin taulukoissa A & B selostettuja esimerkkien 3-11 yhdisteitå.

16

O O

o T* o ^ ^2 Ί1 2

2 2 0 O 2 0 X

O (S N CO to N Ot

(O CO COS 2 CSX (S

> x x s· x x S in vos1 es cscs in

Ses es - o es * es

U O o U o U

a eo co vo n ot o intern oo co c'' h ri to o •P oo eo o co s ^ i-ι s* i-h co in η ri ri co «0 ......... -......

(O OC^CO O MS O C" CO CO to S1 H CO S1 OOC^rHP^fHt^t-lvOfH^i—l ycs to oo h es s os*oo in vo r* in co es rseses o in c-" o> s· h æ to s· ot ro in Η X rSr»C0 rHt^CS o N ro ottos' h to co S'

\ SS U X 2 2X2 U X 2 0X2 U X 2 X

K o \ * ot ot in >_c w rH Ot Ot 00 00

/ I I I I I

r—< · Cv es. es vo m

// 'λ ΟιΉ ot Ot O O

„ // \\ CO es η rH es es

i V

g ^jc

S

3 O * c ~ øs a k te s s: § " --O „

Y -V «X X X X X

r\ z *

C H rH rH rH rH

CO CO CO CO

k X X X X

υ u υ υ ko o o o u* fQ Cl h s" f ;-gpppp

S

*H (s m q) eo s* in vo r* X Θ 91407 17 t# b 2 τ* b O 2 0

N CO N

O NX NS

> S S

kj com hoo ON* N * K o o o o a vor-tinæ η ^ in h +3 t* ri t* co o τ* vo σ 3 »*.«.*. **«.·.

KJ CO VO 00 T* vO v£> τ* t* CQ VO ri VO ri •W 3

M -P VD σ σ ri N ri ri Øl b +J t# Q\ CO t>- NIOMJI

pif KJ < K ^ ^ ^ V

Η X CO vD (O Ti vOvDTjiTji OM vO <-l vO «Η

<3 O X 2 b O X 2 b O

• N

w CO CO

I I

• CO Ti at" uo (OH ri

Ti SS s

CO

S X X

C ri ri K S b

V CO

N \_ X

s 2 U

;p P

M S co σ> u i 18 O o Ί* ^ 2 2 TJI 00

10 (N CS

> s æ CO >H 00

S CNC CS

υ o

3 VO O H CS 00 H

4J Μ Η O O' VO vD

(Q V ·» S ^ k V

(0 N t" VD (S

(fl Η i' H

H 3 ta P oo co t' o co £ +J oo ov O co in co pifO) \ *1 Η X ΟΊ Ό vo 00 t>

Sj (O t> ι-H rH

~ ^ S3 0 2 2 0X2 \/ z /“*c m f~\ ~

O \-/ « <7> IN

H ) w \D *H

C · O' 3 -Γ· Οι vo o

5 S t/J r-i (N

£ \

Q

/¾ m x00 V- S/ K ° <

'PP

•ri

, I

•H h μ a o «-i

W S Η H

91407 19

Esimerkki 12 5- [ (4- (N, N-disykloheksyylikarboksiamido )bentsyyli] - imidatso[4,5-c]pyridilni 10 °

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-nia (750 mg, 6,3 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa, li-såttiin 4-bromimetyyli-N,N-disykloheksyylibentsamidia 15 (2,6 g, 6,88 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 80-85 °C:ssa. 24 tunnin kuluttua reaktioastia jaahdytettiin huoneen lampOtilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 45 °C:ssa. Saatua jaanndsta trituroitiin eet-terin (2 x 70 ml) kanssa ja suodatettiin. Raaka tuote 20 (2,7 g) kromatografioitiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli- NH40H 80-20-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,47 g, 62 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta EtOAc-CH3-CN, sp. 233 - 35 eC.

Analyysi yhdisteelle C26H32N40· 0,3 H2): 25 laskettu: C 74,0; H 7,73; N 13,28; saatu; C 73,93; H 7,90; N 13,09.

Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkissa 12 valmistettiin taulukossa C selostettuja esimerkkien 13 -38 yhdisteita.

* » m *

• «I

20

O O O O O

N< Ν' Ν' Ν' N1 2 0 2 2 2 0 2

N (S GO (N æ CN VO

(O CNX N CO MK CO

• > * X X S X

H (O r-KN CN N« COM Ν'

O (0 CN < CN CN CN - CN

X k o o o υ oo o p CO CD vO CN CO ID N «3 NON O 00 in

P Η Η N CN CN 00 00 CN CMC CO Ν' θ'- CN

CO r-iC'.in cn in co co Ν' cn t>- n coi^^i

W Ον Η N Η Η H h* Η Η H

•H p to p vooæ cn σν oo vovoco o oo in o φ in

6n4J ^ O CO in vO ro MirHCN H vC N COvOOO

0) < K V k ^ \ ^ ^ V * * * * * * H X r-lt^in CN ts in 00 00 Ν' CN Γ- Ν' 00 C» Ν'

h ri eOC'HNHfNrlNrlrlH

* * C (0 \ / 3i3 0 X 2 0X2 0X2 0X2 2X2 \ o \_o o ts in in O h / w i—< 1—I Ν' t—( f—(

t-( I I I I I

ff Yv .in co η σν o

ff V> α Ή «Η Ν' Ο rH

7 W Η »H Η CN CN

0 W

8 _4 1 5 X \ χχχχχχ "-Ο

/^ XX X X X X

Υ e - βΤ

XX X X X X

CO V C__ CN X _Z /

KO X X

co

CO X

,p I ?pp

•H

' i Η ty

03 a CO Ν' in VO N

UB H i—I H *H «—I

91407 21 o o T* o o o o o 2 ^ ^ Z OO 2 20 2 2 2 20 VO 2 2 CO VO 2 COS O O 2 (O CO X 2 CM CMS CM CM CO2 . j> 2 in 2 2 2 uo 2 2 HØ VO (MM1 CM CM UO COC» UO UOt> SØ CM O v CM CM - CM- CM 2 -

2 O O U OO OO O OO

3 O UO vO H O CO CO CM CO (MS H CM M· CO M1 O O Ό l> O

p H t- (O ^C-CO CO 00 CM <J\ CO CO VO 2 CM ΙΛ 00 CO UO UO

* V S v V V k \ ^ V ·> ^ ^ vvs vvv 0 Tji CO CO (O C- CO CM C- uo O C- M* O M1 C- (O 2 2 2

C0C"-rH2rHE‘‘»rH2rH2rHC'-rHC'-H

CO 2 2 H CM 2 CM 2 IS MIC vD C- Ό 2 VO 2 «-Η CO CO

>, 4J CM UO CO 222 I1HM0 H CM O 222 Ό Μ1 Φ CO Μ1 H

>i Q) — — — - - - -2 - --- - - - --- - - - H åi »#22 2 C- 2 CM -2 H C- 1Λ 0 2^· ^22 2 2 2

0 CO Η H C- I-I 2 2 rH C- rH C'- rH 2 i-t rH rH

S3 022 022 022 022 022 022 022

O

• 2 2 w CM CM CM 2 O' 2

I I I I II

• O 2 rH 2 2 2

Qi 2 H 2 CM O' 2 CO rH rH 2 2 Ή 2 2 << 2 22 2 2 2 2 O 2 2 2 2

22 2 2 2 2 2 O

C rH H i-l 2 2 «Η i-l X 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2/- / 2 2 2 2 O O ·*- 2

J Q t P P 9 Q

ri i! cn qj co σ' o h 2 2 <*

Ug rH η 2 2 2 2 2 22 O O O O o o

Tf Tf Ti O Tf Tf 2 2 202 Tf 2 2

00 O CS CS O 2 N (S

SCS CO COS CO Tf CO CO

S S S S n x s

H O Tf ID «0(0 Tf X VO VO

SØN N N*N ΙΟ N N

KO O O O O o O o 3 CO N CO MinvO ΓΟΟΝ Ό h in «O CO CO CO Tf es W Tf O' p O' es co n Tf n σ\ σ' o co oo <0 »oho incoco oococo 0 ‘ ‘ ‘ * ·> * *............* *

0 CO N- Tf TfTfTf CONCO CO N Tf tOvOTf Tf N (O Tf c- (O

Wf'HSrlCvHf'Hf'HSrlCvrl *09 -p NrHCO (N VO CO COCO Tf σ' in CO O CO Tf Tf Tf Tf Tf >1+) N N Tf Ό Tf O' ONN CO VO CO NHH O' IS Tf O' Tf Tf Kø .....................

Η X Tf Tf Tf co Tf ts co co in Tf in vo Tf Tf n co «f oo

0 0 S rH S r( S H S rH N H S r( C> N H

<3 U S 2 U S 2 U X 2 U S 2 U X 2 U S 2 O S 2 o _ • co in co Tf cj> es

w CO N (O O' «-» CO H

I I I I I I I

• O CS CO N CO N rH

a O' N CO O' rH CO rH

(Λ Ή CS CS rH CS rH CS

* QS X s s s s s s p§° x s s s s s s

β rH rH rH rH rH rH rH

KS X X X X X X

p p ΐ Q f

X

,9PP p pp-fp

J

CQØin VO N CO O' O rH

UR N N N N N CO CO

91407 23

o O O O O O O

Tt t# Tt Tt Tt Tt 2 20 20 2 2 20 20

O (NN VON ^ 00 NN VON

0 00 002 NS N N NS 0Ί2 .§►2 2 2 2 2 2 2

H SJ -vi ION 00ID O Tt Ot1 NOO

£S N N v N 1· N N N - N 1

gO OO OO O O OO OO

fl o O Tt NNN in VO 00 O O' H Tt O' 00 ^ 00 in Tt O'

μ N N C'·· rH O' C** N H Tt η N N ONN 00 00 N 00 N H

«0 v - « - «· - - - ' » - ‘ > " > « ' ‘ V»» (0 CO 0- Tt 00 O'- CO N N Tt Η N (O 0^ Tt OvOvO rH D1 in m 5 tji ον in o in oo vo -<t n n mmo n h oo co co h in Tt Tt

æ VO CO VO CO N O O Ό TtHvD N N Tt CO vO Tt CO N N

Φ «. V ^ % k. V ^ ^ S V V V VVS V V V v V V

H x coc^^ co co <s ^ hc^vd o vo vd h md

(dejC^Ht^HC^HC^HSrlC^HC^H

SS 0 2 2 022 022 022 022 022 022 o o

• O 00 O O rH

W N rH O' in 00 N 00

I I I I l I I

,00 rH 00 Tt 00 O' VO

ft O' rH 00 N N rH in

CO rH N N N N H

C? 2 2 2 2 2 2 2 S1 S 2 2 2 2 2 2

C ri rH rH iH rH rH rH

*2 2 2 2 2 2 2 00 «X v 4 y p - ’

;PPP >- PPP

•hI

W qj n oo Tt in vo o·' oo UB co oo oo oo oo oo oo 24

Esimerkki 39 5-[4{-(N-syklopentyyli,N-3,5-dimetyylisykloheksyy-li)karboksiamido}bentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridii-nin valmistus 5 iXX"Oyw”3

« ° V

CH3

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-nifi (400 mg, 3,4 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (30 ml), lisattiin 4-bromimetyyli-N-syklopentyyli, N-3,5- dimetyylisykloheksyylibervtsamidia (1,4 g, 3,5 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 80 -85 eC:ssa. 40 tunnin kuluttua reaktioastia jaåhdytettiin huoneen lSmp5tilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa 20 < 45 °C:ssa. Saatua jaannOsta trituroitiin eetterin kanssa (2 x 70 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote (1,8 g) kromato-grafioitiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,05 g, 72 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta EtOAc-CH3CN; sp. 214 -25 16 °C.

Analyysi yhdisteelle C27H34N4: laskettu: C 75,30; H 7,9; N 13,02; saatu; C 74,92; H 8,07; N 12,97.

Samalla tavalla kuin on selostettu esimerkissa 39 30 valmistettiin taulukossa D selostettuja esimerkin 40 - 55 yhdisteita. 1 · · · • 91407 25 •Η Ο Ο Ο Ο Ο Η ^ ^ ^ '»m ?Ζ Ζ Ζ Ζ Ζ Ο

Ο 00 ί* CO ON

<0 CO N CO CO COX

> X X X X X

H (0 ID CO C^ VO VOrH

£(0 N N N N N -

X O O O O O O

a N vo o co m n is in σι m n in 43 h in σ η ίο æ σ> ο σ> vo is co ncoco k. k. V V k k k k. k. k S k k k k to τι· ο co π f' ^1 00 cs cv ro <1 mo (QC^Ht'rlSHSrlC^rl

•H P

η 43 cs vo ¢0 o in σι oon vo m oho vo^ov TJI ^ 00 CO Ol O ov^·^1 OCO^* L d) k k k k k k k k k k fk k k k k Η X ^t^co co Is* in mo Ό1 k to in t^· co

(0 CO t>k ri fk i—1 C H NpkrH rH

f S3 UXZ OXZ OXZ oxz oxz \ / Λ ζ Λ \ 0 • \ η · H vo /==° w vo co h in in \ / 1 1 1 1 1

\ --/ · T* σι CO N

// Sy a 0 N h N co

„ // \_ » W N N N N rH

Q \ /

O

ύ \ of x x x x * g "O -

^ / XX X X X X

Y\

In. * *

XX X X X X

X° X X X X X

0

* ^ £ ‘p P

*rl h

ffl φ O rH N CO

ω a ^ 'a· ^ ^ 26 Η I Ο

•Η CO Μ CO OS CS

Η Ο Ο Ο Ο ΟΟΟ tio χίΟ χί χ* χί Ο Μ* X# 2 0 2 CS 2 2 20)2 2 (Ο ο· Ο) cox ο σ> ossc χ* χί > ΗΧ CO 00 (Ν 00 00 00 Η « X Sin χ X χ in X χ Ο Λ οσι οέν χί χ» ιηΟ' θ' ο» ί 0S ' CS ' CS θ') CS ' ΟΙ Ο)

ΟΟ ϋο ϋ ο UO Ο U

3 otf'vo οο in ιη νο οο σν ιο co η ν οοιηνο οο ιη χ* η η ο £ ο» σ' os co os m «ΟΝΟ σ' ο«, in os wnn os νο χ* νο«ν (0 ' ' ' ' ' ' ' *· ' ‘ ‘ * xxx xxx xxx

(0 νΟ χ* O' 00 00 Η t^CxOO χί VO CS 00 «Ο MS 0S O' OS OS O' OS

(JvOHf'HVOHVOH VO H fv H ^ H

rt p (OP O' VO C" VO 00 Ό OS in vO OS OS Ο O rSOO O O' x* O O' χί os χί O' χί oo os rH os oo vo O' i-ι O' in χί vo vo in vovotn ^ Φ ''' ' ' ' ' ' ' ' ' V ' ' ' ' ' ' ' ' ' ' HJ< vo in <r> οο οο h oo O' co in vo os oo vo O' os os O' os os os

ΦΒνΟΗΟ'ΗνΟΗ'ΟΗ vO rH O' i—I Ox i—I

3 3 0X2 0X2 0X2 0X20 0X2 0X2 0X2

/«S

O

• 00 O' Χί w X# o 00 00 rH CO 00

I rH I I III

• os i in iH os o co a χί in co θ' η os vo

CO OS O' OS rH OS OS rH

CO

X

vo X Η O

xxxoo oxx in X X X X X xxx 00

X

* u X X X X X xox CO CO CO 00

XXX X

CO O (J o u X X X Ο O 0X0 ' U'h p 9 9 P^P"* ' '5

5 p p ϊ )c y ? P

m Φ m vo O' co o' ο h W g xi xi xi xi xa* in m 91407 27 u £ cm

I CQ CQ O

•H CO CO CM H

H O O O O Λ f(0 ^ ^

2 0 2 2 0 2 N

<fl "«* CM CO in N HX

> COS CO O CO® CO

nej® a cm ® æin

O β r^co t^a f^in "tfcN

SJiCS- CM CM * CM V

oo OH OO OO

3 HCSVO VOHCO C" O C' O CO

P o ** co in o cn co M1 n o in ^ co o (O ^ **“·' - - - · (Ο σ> C' h c- m σι in o vo o ^ "M« c~ cm co

to in H in H VDHHVOH

Mp o\ in c* inonco η oo in η o\ cm cm s, p cm ^ σι σι co o - νο·Μ·^·σι m o in σι Μ Φ ^ V \ ^ ^ H * * * V * V V s HJi OI C H C.IOOH OIOOM ·Μ* f'· CM C*

(0 CO lO H in H lOHHlDH

S3 O S 2 OS2CQ 0®2CQ O ® 2 O

• ID O CO

w rH CO C H

II II

• ^ H C' O

Qi Η Οι ΙΟ H

(Λ OM η H CM

VO

® a a a a co co a a in o o a a o o a co co o a * a o a o o a a

CO

a a) co o h (m 2 a o m η o

'99 9> P

o i? ? 9 1 H h to δ CM CO in U 8 in in in in 28

Esimerkki 56 5-[4{-(N-isopropyyli,N-3-metyylisyklopentyyli)kar-boksiamido}bentsyyli]lmidatso[4,5-c]pyridiininval-mistus (ΧΓΟγΥΐ 10 0 «1

Sekoitettuun liuokseen, jossa oil imidatsopyridii-nié (689 mg, 5,76 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (30 ml), lisåttiin 4-bromimetyyli-N-isopropyyli,N-3-metyy- lisykloheksyylibentsamidia (2,17 g, 6,42 mmoolia). Reak-tioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 95 °C:ssa. 48 tunnin kuluttua reaktioastia jfiShdytettiin huoneen lSmpO-tilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 45 °C:ssa. Saa-20 tua jéSnnOstS trituroitiin eetterin kanssa (2 x 100 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote (2,97 g) kromatografioitiin (si-likageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (0,93 g, 43 %), joka kiteytettiin uudel-leen seoksesta EtOAc-CH3CN; sp. 229 - 31 °C.

25 Analyysi yhdisteelle C23H28N40: laskettu: C 73,40; H 7,45; N 14,89; saatu: C 73,13; H 7,64; N 14,85.

Esimerkki 57 5-[4{-(N-isopropyyli, N-sykloheksyyli )karboksiami-30 do}-2-metoksibentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiinin valmistus CHj 0 91407 29

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-nia (1,5 g, 12,6 mmoolia) diraetyyliasetamidissa (120 ml) argonin suojaamana, lisåttiin yhtena erånå N-isopropyyli, N-sykloheksyyli-3-metoksi-4-bromimetyylibentsamidia 5 (5,1 g, 13,86 mmoolia). Reaktioseoksen lampOtila nostet- tiin hitaasti 80 - 85 °C:seen ja sekoitettiin viikonlopun ajan. Reaktioastia jå&hdytettiin huoneen lSmpOtilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 56 °C:ssa. Saatua jaan-nOsta trituroitiin kuivan eetteriylimaaran kanssa (2 x 10 100 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote kromatografioitiin (silikageeli, CH2C12: metanoli :NH4: OH = 90:10:1), jolloin saatiin puhdasta alkyloitua tuotetta (3,53 g, 69 %). Tuote voitiin kiteyttaa uudelleen etyyliasetaatista, sp. 192 -95 eC.

15 Analyysi yhdisteelle C24H30N402: laskettu: C 70,90; H 7,44; N 13,78; saatu: C 70,58; H 7,43; N 13,78.

Esimerkki 58 5-[4{-(N-isopropyyli,lN-sykloheksyyli)karboksi-20 amido}-2-metoksibentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiini- hydrokloridin valmistus «3^0 ΝνΛΝ/νΑ¥ν013 <Χ^Ογ·Γρ1 HCl 30 Kirkkaaseen liuokseen, jossa oli esimerkin 57 tuotetta (100 mg) metanolissa (7 ml), lisåttiin HCl:aa diok- saanissa (5 ml, 6-norm. liuosta). Kahden tunnin sekoitta-misen jaikeen huoneen lampdtilassa liuotin poistettiin vakuumissa. Lisåttiin etyyliasetaattia (25 ml) ja seosta 35 kiehutettiin tunnin ajan. Seos suodatettiin kuumana ja jaannOs pestiin lisatylia kuumalla etyyliasetaatilla. Kui- 30 vaamisen jålkeen tuote (92 mg) keråttiin talteen, sp. 210 - 13 °C.

Analyysi yhdisteelle C24H31N4C102 · 0,25 H20: laskettu: C 64,41; H 7,09; N 12,52; Cl 7,92; 5 saatu: C 64,40; H 7,34; N 12,43; Cl 8,0.

Eslmerkki 59 5-[4{-(N-syklopentyyli, N-3-metyyllsykloheksyyli)-karboksiamido}-3-metoksibentsyyll]imidatso[4,5-c]-pyrldllnln valmistus 10 •s

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-20 nia (412 mg, 3,47 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa (25 ml), lisattiin 4-bromimetyyli-2-metoksi-N-syklopentyy-li, H-3-metyylisykloheksyylibentsamidia (1,49 g, 3,65 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 90 - 95 °C:ssa. 48 tunnin kuluttua reaktioastia jaahdytet-25 tiin huoneen l&mpOtilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa > 45 °C:ssa. Saatua jaannbsta trituroitiin eetterin (2 x 70 ml) kanssa ja suodatetbiin. Raaka tuote (1,85 g) kroma-tografioitiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,05 g, 67 %), joka 30 kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatissa, sp. 226 - 28 °C. Analyysi yhdisteelle C27h34n4o2: laskettu: C 72,60; H 7,67; N 12,54; saatu: C 72,28; H 7,65; N 12,44.

91407 31

Esimerkki 60 5-[4{-(N-syklopentyyli,N-3-metyylisykloheksyyli )-karboksiamido}-2-metoksibentsyyli]imidatso-[4/5-c]pyridllnln valmlstus 5

<xnx$L

10 . l) »»

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-ni& (525 mg, 4,4 mmoolla) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (25 ml), lisåttiin 4-bromimetyyli-3-metoksi-N-syklopen tyyli, N-3-metyylisykloheksyylibentsamidia (1,9 g, 4,66 mmoolia). Reaktloseosta sekoitettiin argonin suojaamana 90-95 °C:ssa. 48 tunnin kuluttua reaktioastia jåahdytet-tiin huoneen lSmpOtilaan ja liuotin poistettlin vakuumlssa 20 < 45 eC:ssa. Saatua jåSnnbstå trituroitiin eetterin kanssa (2 x 100 ml) ja suodatettiin. Raaka tuote kromatografioi-tiin (silikageeli, CH2Cl2-metanoli-NH4OH 90-10-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,39 g, 71 %), joka kiteytet-tiin uudelleen seoksesta etyyliasetaatti-CH3N, sp. 186 -25 888 °C.

Analyysi yhdisteelle C27H34N402: laskettu: C 72,60; H 7,67; N 12,54; saatu: C 72,61; H 7,91; N 12,28.

32

Esimerkkl 61 5-[4-(-(N-syklopentyyli,N-sykloheksyyli )karboksl-amido}-2-metoksibentsyyli] imidatso[4, 5-c]pyridli-nln valmistus 5 ^rco

Sekoitettiin liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-nia (660 mg, 5,57 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa 15 (25 ml), lisSttiin 4-bromimetyyli-2-metoksi-N-syklopen- tyyli,N-sykloheksyylibentsamidia (2,0 g, 5,07 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin argonin suojaamana 75 °C:ssa. 24 tunnin kuluttua reaktioseosta jååhdytettiin huoneen lampOtilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa. Saatu jaan-20 nds laimennettiin vedellS (650 ml) ja tehtiin emfiksiseksi ammoniumhydroksidin vesiliuoksella (20 ml). Reaktioliuos uutetiin kloroformilla (4 x 100 ml). Orgaaninen kerros pestiin kyllåstetylia suolaliuoksella (3 x 250 ml), kui-vattiin (MgS04) ja suodatettiin. Yhdistetty suodos haih-25 dutettiin kuiviin ja jfiSnniSs (2,u79 g) kromatografioitiin (silikageeli, CHCl3-etanoli-NH4OH 10-90-1), jolloin saa-tiin haluttua tuotetta (1,36 g, 62 %), sp. 197 - 99 °C. Analyysi yhdisteelle C26H32N4O20*0,4 H20: laskettu: C 71,01; H 7,52; N 12,74; 30 saatu: C 70,87; H 7,49; N 12,70.

• · 91407 33

Bsimerkki 62 5-[4{-(N-isopropyyll,N-sykloheksyyli )karboksiami-do}bentsyyli]imldatso[4/5-c]pyridiinin valmistus ccnop^ 10

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli imidatsopyridii-niå (680 mg, 5,8 mmoolia) N,N-dimetyyliasetamidissa (30 ml), lisåttiin 4-bromimetyyli-N-isopropyyli,N-syklo-heksyylibentsamidia (2,2 g, 6,44 mmoolia). Reaktioseosta 15 sekoitettiin argonin suojaamana 80 - 85 °C:ssa. 20 tunnin kuluttua reaktioastia jååhdytettiin huoneen låmpbtilaan ja liuotin poistettiin vakuumissa < 45 °C:ssa. Saatua jSSn-nbstå trituroitiin eetterin kanssa ja suodatettiin. Raaka tuote (1,85 g) kromatografioitiin (silikageeli, CH2Cl2-eta-20 noli-NH40H 80-20-1), jolloin saatiin puhdasta tuotetta (1,29 g, 59 %), joka kiteytettiin uudelleen seoksesta EtOAc-CH3CN, sp. 209 - 10 °C.

Analyysi yhdisteelle C23H28N40 · 0,2 H20: laskettu: C 72,70; H 7,48; N 14,75; 25 saatu: C 72,92; H 7,60; N 14,82.

Esimerkki 63 5- [4-{ (N-sykloheksyyli, N-isopropyyli )karboksiami-do}-2-metoksibentsyyli] -4-kloori-imidatso[4,5-c]py-ridiinin valmistus 30

Cl OCHj

OtTXxa

V' ' " Y 'Q

« 34 4-kloori-imidatso[4,5-c]pyridiiniiaht£5aineen sa-moin kuin 2-metoksi-3-bromibents-(N-sykloheksyyli,N-iso-propyyli)amidin valmistusta on selostettu aikaisemmin tas-sa selityksessa. Kytkemaiia 4-kloori-imidatso[4,5-c] 2- 5 metoksi-3-bromibents-(N-sykloheksyyli,N-isopropyyli)ami-diin dimetyyliasetamidissa 85 - 90 °C:ssa 26 tunnin ku-luessa, saadaan otsikon yhdistettå.

Esimerkki 64

Yhdisteen 10 OH oh· ja yhdisteen 20 OCH, OM·

<xr6A

25 N

valmlstus.

Edelia esitettyja yhdisteita voidaan syntesolda ·_ ' 30 seuraavan kaavion mukaisesti 91407 35 CD "CD — ;iir> \ <0^1' <7 ’At) 10 / OH <T /

15 l (HIP

Ha I

p Γ1 s ·' 9.

Imidatsopyridiinin N-l-yhdiste suojataan SEM-Cl:lla ja muutetaan pyridiini-N-oksidiksi kåyttåmailå m-kloori-,25 perbentsoehappoa 4-kloori-imidatso[4,5-c]pyridiinin val-mistuksen osalta selostetulla tavalla. Pyridiini-N-oksidi-yhdistettå kiehutetaan etikkahappoanhydridissS 4 tuntia, jolloin saadaan 4-okso-l-(2-trimetyylisilyyli)etoksime-tyyli-imidatso[4,5-c]pyridiinia. Antamalla tSman yhdisteen 30 reagoida 4-bromimetyyli-3-metoksi-bents-(N-isopropyyli,N-sykloheksyyli)amidin kanssa dimetyyliformamidissa ja nat-riumhydridin kanssa huoneen låmpOtilassa 4 tuntia, saadaan 5-bentsyloitua tuotetta. SEM-ryhmån lohkaisu suoritetaan trifluorietikkahapolla 50 eC:ssa 18 tunnin kuluessa, jol-35 loin saadaan kaavan 8 mukaista yhdistetta (otsikon yhdis-te). Kasittelemaiia kaavan 8 mukaisen yhdisteen 4-hydrok- 36 siryhmaa natriumhydridi/jodimetaanin kanssa saadaan kaavan 9 mukaista yhdistetta (otsikon yhdiste).

Esimerkki 65 PAF:n indusolma verihiutaleiden kasautuminen ja 5 sekreetio

Pestyja, [3HJserotoniini-merkittyja kanin verihiu-taleita peraparoitiin kuten on aikaisemmin selostettu jul-kaisussa COX, C. P., J. Linden ja S. I. Said; VIP nostaa verihiutaleiden syklisen AMP:n (cAMP) maSrinS ja ehkaisee 10 in vitro verihiutaleita aktivoivan tekijan (PAF) indusoi-maa verihiutaleen aktivoitumista, Peptides 5:25-28, 1984, ja pidettiin atmosfaarissa, jossa oli 5 % C02:ta, 37 °C:ssa kunnes niita kaytettiin eiainkoemaarityksessa. Tasaeria verihiutaleita (2,5 x 108/ml) inkuboitiin joko PAF:n anta-15 gonistin tai sopivan valiaineen kanssa 60 sekuntia ennen PAF:n lisaamista (0,2 nmoolia - 0,2 ymoolia). Kasautumista tarkkailtiin jatkuvasti strip-chart-tallentimella ja tal-tioitiin viivan korkeutena 60 sekunnin kohdalla PAF:n li-saamisen jaikeen. [3H]serotoniinin sekreetio maaritettiin 20 verihiutale-suspensio-naytteesta, joka oli otettu 60 se kuntia PAF:n lisaamisen jaikeen. Kasautuman estymis- ja sekreetioprosentti laskettiin vertaamalla antagonistilla kasiteltyja verihiutaleita sopivalla valitysaineella kåsi-teltyihin kontrolli-verihiutaleihin. Kukin antagonistin ja 25 PAF:n yhdistelma toistettiin 12 - 15 kertaa, kayttamaiia useita erilaisia verihiutale-preparaatteja. IC50-arvot maaritettiin tutkimalla annos-reaktio-kayria.

Esimerkki 66 3H-PAF-sitoutumisen estyminen ihmisen verihiutale-30 kalvoreseptoreihin

Reseptoripreparaatti 10 yksikkda paivattyja ihmisen varastoverihiutalei-ta, joissa kussakin oli 45 - 65 ml verihiutalerikasta plasmaa, hankittiin kaupallisesta veripankista. Kertakayt- '· 35 tttisia muovituotteita kaytettiin koko ajan reseptorin val- mistuksessa. YksikOt yhdistettiin ja otettiin 1 ml:n ta- • 4 · « » ♦ · 1 · • « · 91407 37 saeria verihiutalekonservtraation maarittamiseksi, kaytta-maiia Coulter-laskinta. jaijelia oleva verihiutalerikas plasma jaettiin 50 ml:n kartiomaisiin putkiin ja sentri-fugoitiin huoneen lampdtilassa 15 mlnuuttia nopeudella 5 3000 kierrosta/mlnuutti 2300 x g). Plasma dekantoitiin pols ja verihiutaleet suspendoltiin uudelleen 35 ml:aan puskuria (10 mmoolia Trizma'a 7,0, 2 mmoolia EDTA:ta (di- kaliumsuolaa) ja 150 mmoolia KCl:a) ja siirrettiin uusiin putkiin, joita sentrifugoitiin jalleen kuten edelia. Veri-10 hiutaleet pestiin kolme kertaa, vaittåmaiia saastuttavia punasoluja pellettien pohjalla. Pelletteja tiivistettiin jokaisessa vaiheessa, ja viimeisen pesun jaikeen EDTA/KC1-puskurilla, suurin osa punasoluista oli yhdessa putkessa. Verihiutaleet suspendoitiin uudelleen puskuriin, jossa oli 15 10 mmoolia Trizma'a 7,0 ja 10 mmoolia CaCl2:a. Sentri- fugoinnin jaikeen puskuri dekantoitiin pois ja pelletit suspendoitiin uudelleen CaCl2-puskuriin, vaittamaiia punasoluista saastuminen ottamalla verihiutalepelleteista tal-teen vahemman kuin 100 %. Uudelleen suspendoitu verihiu-20 taleet jaettiin 8 - 10 ml:n tasaerin Corex-putkiin ja ha-jotettiin pakastamalla kolme kertaa (kuivajaa/etanoli) ja sulattamalla (24 eC). Putkia sentrifugoitiin nopeudelle 40,000 x g 20 minuuttia 4 °C:ssa. Pintakerrokset dekantoitiin pois ja kukin pelletti suspendoitiin uudelleen 5-7 25 ml:aan 10 mmolaarista Trizma'a 7,0. Kaikki uudelleen sus-pendoidut pelletit yhdistettiin ja noin 1200 μ1:η tasaerid jaettiin 1,5 ml:n mikrofuugiputkiin ja pakastettiin -70 °C:ssa. Proteiinipitoisuus måaritettiin fluoreseiini-proteiinianalyysin avulla.

30 Analyysimenetelmat:

Reseptorin luonnehdinta

Jokainen reseptoripreparaatti arvioitiin reseptroi-populaatioiden lukumaaran, PAF-reseptroiekvivalenttien lukumaaran mg:ssa proteiinia ja dissosiaatiovakion (KD) 35 PAF-sitoutumisen maarittamiseksi. Tama vaatii 2-3 koet-ta, joissa proteiinikonsentraatio pidettiin vakiona ja 38 3HH-PAFligandikonsentraatio vaihteli vaiilia noin 0,10 - 2,5 nmoolia, ja arvot analysoitiin Scatchard-menetelmaiia. Koko inkubaatiotilavuus naissa menetelmlssa oli 250 μΐ ja lnkuboinnit suorltettiin 24 °C:ssa 30 minuutin alkana.

5 Jatkokokeiluja vårten inkubointien kokonalstllavuudet ovat 500 μΐ. Proteiini- ja ligandikonsentraatiot saadettlln siten, etta reseptoriekvivalenteiksi saatlln 0,075 nmoolia kun lasna oli 0,75 nmoolia 3H-PAF:aa. Kutakin resepto-ripreparaattia kaytettiin sitten merkitsemåttOmån PAF:n ja 10 PAF-antagonistin, triazolam'in, annos-vastesiirtyma-yhtey- den maarittamiseksi. Ni in kauan kun KD-arvo ja PAF:n ja triazolam'in IC50-arvot olivat yhdenmukaiset samanlaisten arvojen kanssa, jotka oli koottu viimeisista kokeessa kay-tetyista reseptoripreparaateista, mutta reseptoriprepa-15 raattia kaytettiin yhdisteiden arvioimiseen.

Yhdisteiden rutiinianalyysi

Yhdisteet punnittiin tarkasti ja liuotettiin DMSO-maariin siten, etta 5 μ1:η tasaerå inkubaatissa antaisi halutun yhdisteen konsentraation. Yhdisteet, jotka testat-20 tiin ensimmaisen kerran tassa kokeessa, arvioitiin konsentraation inkubaatiovaiiaineessa ollessa 50 pmoolia. Kaikki yhdisteet liuotettiin tavallisesti DMSOriin noin 2 tuntia ennen koetta. Triazolam oli aina låsna jokaisessa seulontakokeessa yhdisteen estymåkontrollina. 50 pmoolin 25 standardikonsentraatio ehkåisi 3H-PAF-sitoutumista noin 50 %. Epaspesifinen sitoutumiskontrolliluos valmistettiin kuivaamalla tåydellisesti noin 26,2 μΐ merkitsematdnta PAF:aa argon-virtauksen suojaamana. PAF liuotettiin uudel-leen 1000 pl:aan DMSOra. Lisattåesså 5 μ1:η tasaerånå, 1 30 pmoolin PAF-eran loppukonsentraatio inkubaatissa ylitti 1000-kertaisesti 3H-PAF:n konsentraation.

Kaikki proteiineja sisaltavat puskurit valmistettiin huoneen lampdtilassa analyysipåivassa. Koepuskuri valmistettiin lisaåmaiia 125 mg ihmisen albumiinia 35 25 mlraan varastopuskuria (10 mmoolia Trizma'a 7,4 20 mmoolin kanssa CaCl2:a). Huuhtelupuskuria valmistettiin 91407 39 lisaamaiia 20 grammaa haran seerumialbumiinia 1000 ml:aan varastopuskurla. Noin 80 ml huuhtelupuskuria dekantoitiin pleneen pyrex-maljaan ja kfiytettiln 65 Whatman CF/C 2,5 cm:n lasisuodattimien kasteluun. jaijelia oleva huuhtelu-5 puskurl kaadettlln pipettiin ja pantlin jaahauteeseen suo-dattlmlen kanssa.

Ligand! valmistettlin analyysiS vårten lisaamaiia noin 10 μΐ varasto-3H-PAF:aa (DuPont NEN, NET-668) 14 ml:aan koepuskuria. Koska 3H-PAF:n maaran lopullisessa in-10 kubaatissa oli oltava 0,75 nmoolia, kaytettavan varasto-3H-PAF:n todellinen maara oli maaritettavå kutakin aine-eraa vårten spesifisen aktiivisuutensa perusteella.

Kalvoreseptorit koetta vårten valmistettlin sulat-tamalla sopiva putkimaara huoneen lampOtilassa ja lisaa-15 maiia kalvot 10 mmooliin Trizma'a 7,0, jossa oli 10 mmoo-lia CaCl2:a. Kokonaistilavuus saatettiin 14 ml:ksi. Tar-vittavien kalvojen todellisen maaran maaritteli vaatimus saada 0,075 nmoolia PAF-reseptoriekvivalenttia koeputkea kohden. Kaikkia aineita pidettiin liikkeesså ravistelemal-20 la tarylevylia.

Kuhunkin 12 x 75 mm:n polypropyleeniputkeen lisat-tiin ensin 5 μΐ yhdistetta tai DMSO:a, minka jalkeen li-sattiin 95 μΐ koepuskuria. Seuraavaksi lisattiin jokaiseen putkeen 200 μΐ 3H-PAF:aa ja 3 tasaeraa 3H-PAF:aa, jotka oli 25 otettu eri aikoina kaytbn aikana, pantiin tuikeampullei-hin. Reaktio kaynnistettiin lisaamaiia 200 μΐ kalvoja. Kaikkia putkia pyOritettiin hyvin lyhyen ajan ja pantiin 24 °C:n vesihauteeseen noin 30 minuutiksi. Tåna aikana Whatman CF/C-suodattimet pantiin 5 milliporen vakuumi-imu-30 rin suodatinristikoille. Inkuboinnit lopetettiin lisaamai ia ensin kuhunkin inkubointiputkeen 4 ml jaakylmaa huuh-telupuskuria ja dekantoimalla ne sitten suodattimille va-kuumissa. Putket ja suodattimet huuhdeltiin viela kahdes-ti. Kukin suodatin pantiin 20 ml:n tuikeampulliin, johon 35 lisattiin 20 ml Aquasol'ia (DuPont NEN, NDF 952). Kaikkien ampullien annettiin olla 2 tuntia pimeassa valoluminoinnin 40 ja kemiluminoinnin hajottamiseksi ennen nestetuikelasken-taa.

Kukin inkubointiputki sisSlsi summittain 500 μΐ ko-konaistilavuuden inkubaattia. TåssS oli 5 μΐ laakeainetta 5 DMS0:n kanssa tai vain DMS0:ta, 95 μΐ koepuskuria, 200 μΐ 3H-PAF:aa (loppukonsentraatio 0,75 runoolia ja 200 mikrolit-raan kalvoreseptoreita (loppukonsentraatio 0,075 nmoolia). Koetta kohden k&ytettiin 60 putkea ja koe suoritettiin kolme kertaa kunkin annoksen osalta. Kontrolleina kussakin 10 kokeessa oli kaksi laimennus(DMS0-"0"-kontrollia (kaksi kolminkertaista mSåritystå sijoitettuina eri paikkoihin 60 putken kokeessa), 1 epåspesifinen sitomiskontrolli, ja 1 triazolam-rohdos-kontrolli. 16 jaijellå olevaa annosta kSytettiin testaamaan 16 erilaista yhdistetta seulonta-15 annoksen 50 pmoolia kohdalla tai annos-vaste-maaritysten suorittamiseksi yhdisteen osalta. Yleensa annos-vaste-kSy-rét koottiin neljastå yhdisteannoksesta, jotka merkitsiv&t 3H-PAF-sitoutumisen estymista 15 - 85 %, ainakin yhden annoksen ollessa kummallakin puolella 50 %:n kohtaa.

20 Rutiinianalyysilaskelmat

Yhden yhdisteannoksen osalta laskettiin kolminker-taisen DPM-maarityksen keskiarvot (korjattuna taustan osalta), kun taas kokonaissitoutumisen osalta ("0” annos, ainoastaan DMSO) laskettiin kaikkien kuuden maarityksen 25 keskiarvo. Epaspesifisen sitoutumisen maara (1 pmooli PAF) vahennettiin kaikista annos-keskiarvoista, jolloin saatiin spesifisen sitoutumisen maara kaikissa tapauksissa. 3H-PAF:n sitoutumisprosentti tai sitoutumisen estyminen laskettiin kaavasta STBo-SBc/STBo x 100, jossa STBo * "0"-..· 30 annoskontrollien spesifinen sitoutuminen ja SBc spesi-finen sitoutuminen yhdisteen lasnaollessa. Jos yhdiste, joka testattiin alkuperaisen seulonta-annoksen 50 pmoolin '!!! kohdalla, ehkaisi sitoutumista 45 % tai enemman, yhdistet- *. ta pidettiin aktiivisena ja testattiin annos-vaste-tapaan 35 IC50-arvon maarittamiseksi. Yhdisteita, jotka estivat PAF-sitoutumista vahemman kuin 45 % 50 pmooli-konsentraation 91407 41 kohdalla, pidettiin epåaktiivisena eika lisfitestausta enaa suoritettu.

IC50-arvot maaritettiin aktiivisten yhdisteiden osalta seuraavin testein. Kolmen tai useamman yhdiste-5 annoksen on ehkaistava 65W-PAF-sitoutumista 15 - 85 %.

Tietokoneohjelmaa kayttaen muunnettiin korvausprosentti-arvot (logit) ja suoritettiin "least squares"-lineaarinen regressio arvojen osalta, jotka tayttivåt 15 - 85 %:n vaa-timuksen, IC50-arvojen maarittamiseksi samassa kokeessa 10 saaduista arvokohdista.

« * • · ♦ 42

Thdlata »rm lnduaolaa nrtn Induaolaa ’l-Mftn aitoutualaen ▼erlhiutaleldan yerihiutalaldan aatyalnen Ihaiaen »e-arottualnen kaaautualnan rlhlutalaaaeen (XC90)aoolla <IC9Q)aoolia (ICg0)paoolla 5 S-|<-(k-eetyyll-k-ayklohekeyyll- karbokalaaldo)bantayyll)laldatao- ^ ^ l4.$-c)pyrldlini 7.2 * lo" 10* - 10 15.2 5-(4-(B-n-oktyyllkarbokelaaldo)bent- ^ g ayyllJlaldatao(4,5-c)pyrldllnl 10 - 10 10 10 11.0 10 5-J 4 - (N-n-dekyyllkarbokalaaldo) - ^ bantayyll)laldatao(4,S-e]pyrldllnl 10 - 10 10 10 9.71 S-(4-(N-n-dodekyyllkarbokalaaldo)- 767 bantayyll]laldatao[4,5-c]pyrldllnl 1 - 5 x - 10 10 - 10 11.9 S-[4-(N-2-dakalyyll-R-aetyyllkarbok- alaaldo)bantayyll)laldatao[4.5-c] ^ ^ 15 pyrldllnl 10* lo" - 10 13.2 5-(4-(H-2-(4,4-dlaetyyll)pan- tyy1lkarbokalaaldo)bantayyll)laldat- ao[4.5-c]pyrldllnl 10 10 22.3 5-(4-(N.H-dl-laopropyyllkarbokal-2Q anldo)bentayyll]laIdatao[4.5-c]pyrldllnl 10* - 106 10 - 10 7.65 S-(4-(N.N-dlayklopantyyllkarbokal- aaldo(bantayyll]laldatao!4,5-c]pyri- ^ dllnl lo" - lo’’ 10* - 5 * 10* 0,31 5- [4 -(H-ayklohekayyllkarbokalaaldo)- 25 bantayyll]laldatao)4.5-c)pyrldllnl 10 - 10 10 19.3 6- (4-(N-etyyl1-N-ayklohakayy1lkarbokalaaldo )karbokalaaldo)- -7 bantayyl1)laldatao(4.5-e)pyrldllnl 10 -6 -6 -5 - 10 10 - 10 5,20 5-14-(N-laopropyyll-N-ayklohekayy11-30 karbokalaaldo)bantayyll]laIdatao(4.5- e)pyrldlnl 10 10 - 10 0.17 5-(4-(H-eek.butyyll-H-ayklohekayyli- karbokalaaldo)bantayy11]laldatao- ^ (4.5-e]pyrldllnl lo" - lo" 10_ -6 - S s 10 0.,58 35 5-(4-(N-laobutyy11-N-ayklohekayyll- karbokalaaldo)bentayyll]laldatao- -6 -7 10 2.62 (4.5-e]pyrdllnl 10 91407 43

Thdlit· nrin lnlniolaa Win lnduaoiaa SH-P»F:n sltoutualaen «•rihUttUUm mlhlvtiltUtn aatyainen 1 halmen n-arottuainan kammutualnan rlhlutaleemeen (ICg0)eoolla {ICS0)eeell· (ICgQ)paoolia 5 5-14 -|K-3-pentrTll-K-irkleh<kinll- karbokeiamldo)benteyyli]laidatao· g 67 (4.5-c)pyrldllnl 10* - 10 10 - 10 5-14- (l»-eyklopropyyll-K-eyklohek-eyyHkarbokalaeidoJbenteyyli J laldat- ^ ^ JQ eo[4.5-cJprrldllnl 10 - 10 3.68 5-14-(R-eyklobutyyli-R-ayklo- heka77llkarbokalaaldo)benta77ll)- ^ 78 laidatao(4.5-c]pyridllnl 10 - 10 10 - 10 0,0199 ^ 5 - (4 - {N-ayklopen17711-8-ayklohekayy- 1lkarbokalaaldo)benteyyll)laldatao- -8-9 -7 -8 [4.5-c)pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0,32 5-(4-(K.H-dlayklohekayyllkarbokal-aa1dobenteyy11)laldataof4,5-c)pyrl- -8 -6 -7 dllnl 10 10 - 10 1.06 20 5-[2-[4-(N-aetyyli-N-B7klohekayyli- karbokalaaido)fenyyllJatyyll]lal- ^ datao[4.S-e]p7rldllnl 10 - 10 10-4 - 10 8-13-14-(N-aetyyll-H-eyklohekayyll-karbokalaaldo)fenyyllJpropyyll]- laldatao[4.5-c]pyrldlinl lo" - 10* 10-4 - 10 61.1 S - [4-(N,n-diayklopantyyllkar-bokalaaldo)-2-aatokalbanta77ll]lal- -8 -9 -7 -8 datao[4.5-c]pyridllni 10 - 10 10 - 10 0.055 30 5-14-tB-eyklohekeyyll-ll-eyklopen-tyyllkarbokalaaldo)-2-aetokelbent- ayyll]ladlatao[4.5-cJpyrldllnl 10 - 10 10 0,0302 5-14-(M-leopropyyli-H-eyklohekayyli-karbokalaaldo)-2-aatokalbentayyll]- laldatao(4.5-e)pyridllnl 10 10 - 10 0,0665 35 44 TMlat· nrm induaoi·· nri· lalant*· ^lf-ΡΛΓ:n iltoutualicn

TerlhUUUiita «arthlatalillaa ntralo« ihalita ▼·-arattaalnan kaaaa taalnan rlhlutalaaaaen (ICjglMolU IICjj)i»eH· (ICS0)paoolla 5 5-|4-(ll-eetyyl t-R-ayklohekayyllkar- kokelaeldol-l-Betokelbent- .

-6 -7 -5 -6 ayyll)laidatao(4.S-c]pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 5-14 -(M-ayklopentyyU-K-ayklohak- ayyllkarbokalaaldo)-2-fluorlbant- -78 ayyll|laldatao(4,5-e]pyrldllnl lo’" - lo" 10 - 10 0.0755 10 8- (4 - (H-laopropyyll-ll-eyklohekeyy-1ikarbokalaaldo)-2-fluorl- bantayyll]laldatao[4.5-e]pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 0.442 5-(4-(N-aatyyll-H-ayklohekayyllkar- bokalaaldo)-2-fluorlbantayyll)lal- 7 56

datao(4.S-efpyrldlInl lo"° - 10* 10 - lO

15 5-|4-(N-tert.butyyll-N-ayklo- bakeyyllkarbokelaaidojbentayyll1- 78 laldatao(4.5-e)pyrldllnl 10 - 10 10 - 10 $7.7 * lnhlb (50 pa) 5-14-(H-fenyyll-R-ayklopentyyllkar- bekalaatdo)bantayyll)laldatao(4,5- e 20 e)pyridlinl 10 - 10 10 2.35 5- (4 - (H-3-aatyyllayklohakayyll-l*- ayklopantyylIkarbokalaaldo)bantayy- ^ ^ 111laidataol4.5-clpyrldlinl 10 - 10 10 - 10 0.074 5-14 - (N-4-aatyyllayklohakayyll-lt- ayklopentyyllkarbokalaaldo)bentayy- ^ *5 11]laldatao(4,5-e]pyrldllnl 10* - lo" 10 - 10 0.75 5-(S-(N-aatyyll-N-Byklohakayyllkar- bokalaaido)bantayyll]laldatao(4.5- 5 ejpyrldllnl 10-4 - 10 10-4 - 10 » 1 lnhlb (50 pa) 5-(3-(N-laopropyyll-N-ayklohakayyll- 30 karbokalaaldo)benteyyll]laldatao- 56 5 (4.5-e]pyrldllnl 10 - 10 10-4 - 5 « 10 26.1 * lnhlb (50 pa) 5-(4-(H,k-dlayklopantyyllkarbokal- aaldo)bantayyll)-4-aatyyll-laldat- 78 ao(4.5-c)pyrldllni 10 - 10 10 - 10 0.188 5-(4-(N.R-dlayklopantyyllkarbokal- aaldo)bentayyll)-2-aatyyll-laldat- 67 56 ao|4.56-cJpyrldltnl 10 - 10 10 - 10 70.8 8 lnhlb (50 pa)

1. EtOH-HaOH

Claims (9)

91407 45

1. Menetelmå kaavan I mukaisten terapeuttisesti kayttdikelpoisten 5-asemassa substituoitujen [4,5-c]imid-5 atsopyridiinijohdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hy-vdksyttdvien happoadditiosuolojen valmistamiseksi N -' NX R2 jossa kaavassa

15 Rx ja R2 ovat kumpikin itsenåisesti vety; suoraket- juinen tai haaroittunut alkyyli, jossa on 1 - 12 hiiliato-mia; sykloalkyyli, jossa on 3 - 6 hiiliatomia; substituoi-tu sykloalkyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, bisykloalkyy-20 li, jonka kummassakin renkaassa on 3 - 8 hiiliatomia; fe-nyyli; pyridyyli; substituoitu pyridyyli, jossa voi olla substituenttina yksi tai useampi alkyyli, jossa on 1 - 3 hiiliatomia; ja R2 ja R2 eivSt molemmat voi olla vetyjB; X on yksi tai useampi substituentti yhdessS tai 25 useammassa fenyylirenkaan asemista 2, 3, 5 tai 6, valittu-na itsenSisesti iryhmasta, jonka muodostavat vety, metoksi, fluori ja bromi; n on kokonaisluku 1-3; R3 on ryhmå, joka on substituenttina imidatsopyri-30 diinirengasssysteemin pyridiinirenkaan 4-asemassa, joka on vety, hydroksi, metoksi, metyyli, fluori, kloori tai bromi; * R4 on vety, metyyli tai metoksi; tunnettu siitS, etta imidatsopyridiini, jolla on 35 kaava 46 saatetaan reagoimaan halogeenialkyylibentsamidin kanssa, jolla on kaava 10 (<jH2>nL 15 (III) R, A/ Xr2 jossa kaavassa 20. on kloori, bromi tai metaanisulfonyylioksi; minks jSlkeen, haluttaessa, valmistetaan nSin saa-duista kaavan I mukaisista yhdisteistS happoadditiosuoloja tavanomaisin menetelmin.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmS, t u n-25 n e t t u siitS, ettS valmistetaan 5-[4-{-(N-syklopentyy- li,N-sykloheksyyli)karboksiamido}-2-metoksibentsyyli]imi-datso[4,5-c]pyridiini.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmS, t unnet t u siitS, ettS valmistetaan 5-[4-{-(N-isopropyy- 30 li,N-sykloheksyyli)karboksiamido}bentsyyli]imidatso-[4,5-c]pyridiini.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmS, t unnet t u siitS, ettS valmistetaan 5-[4-(N-isopropyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bentsyyli]imidatso[4,5-c] - 35 pyridiini. 91407 47

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, t unnet t u siita, etta valmistetaan 5-[4-(N-syklobutyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bentsyyli]imidatso[4,5-c]-pyridiini.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, t un net t u siita, etta valmistetaan 5-[4-(N-syklopentyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)bentsyyli]imidatso[4,5-c]pyridiini.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, t u n- 10. e t t u siita, etta valmistetaan 5-[4-(N,N-disyklopen- tyylikarboksiamido)bentsyyli] -4-metyyli-imidatso[4, 5-c] -pyridiini.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, t unnet t u siita, etta valmistetaan 5-[4-(N-isopropyyli-

15 N-sykloheksyylikarboksiamido ) -2-metoksibentsyyli] imidat- so[4,5-c]pyridiini.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, t unnet t u siita, etta valmistetaan 5-[4-(N-isopropyyli-N-sykloheksyylikarboksiamido)-2-metoksibentsyyli]-imidat- 20 so[4,5-c]pyridiinihydrokloridi. 48