FI83221B - Foerfarande foer framstaellning av som laekemedel anvaendbara 1-, 1,5- eller 2,5-substituerade 1,5- eller 2,5 -dihydro-4h-pyrazol-/3,4-d/-pyrimidin-4-oner. - Google Patents

Description

83221 V'· '

Menetelmä lääkeaineina käyttökelpoisten 1-, 1,5- tai 2,5-substituoitu-jen 1,5- tai 2,5-dihydro-4H-pyratsolo-[3,4-d]-pyrimidin-4-onien valmistamiseksi Förfarande för framställning av som lakemedel användbara 1-, 1,5- eller 5 2,5-substituerade 1,5- eller 2,5-dihydro-4H-pyrazol-[3,4-d]-pyrimidin- 4-oner

Keksinnön kohteena on menetelmä kaavojen Ia tai Ib mukaisten lääkeai-10 neina käyttökelpoisten 1-, 1,5- tai 2,5-substituoitujen 1,5-dihydro-4H-pyratsolo-[3,4-d]-pyrimidin-4-onien valmistamiseksi "’xiö r,'ö^ *

Ri : . 2o joissa R, on jokin seuraavista ryhmistä: 25 0

II

a) -C-Rj 0 ^ R,

b) -C-(CH2)„ - N

30 R, 0

II

c) -C-NHR4 ‘ 35 0 • Il d) -Ci^O-C-Rj 2 83221

O

8 e) -CH20-C-0R4 5 O R8 f) -CH20-C-(CH2)n - N·^ 0 10 g) -CH20-C-CHRg-NH2 O Rg

Il

h) -CH20-C-CHR7 - N

r9 15

O O

8 // i) -CH20-C-CH2CH2CH2-C-R13 jossa R3 on Cj.galkyyli, monohalogenisoitu C1.Aalkyyli, fenyyli tai pyri-20 dyyli, R8 ja Rg ovat vety tai C3.A alkyyli; R13 on hydroksi tai ryhmä, jolla on kaava -NR8R9, jossa R8 ja Rg ovat edellä määritellyt; 25 R2 ja/tai R5 on jokin seuraavista ryhmistä 0 il d) -CH20-C-R3 30 0 R8 * / f) -CH20-C- (CH2)n - 35 0 /1 g) -ch2o-c-chr6-nh2 il 3 83221 o .R,

II

h) -CH20-C-CHR7 - N CT

Re 5 sekä niiden suolojen valmistamiseksi.

Tämä keksintö koskee uusia lyhytaikaisia allopurinolin esilääkeaine-muotoja, jotka ovat käyttökelpoisia hyperurisemian ehkäisyssä ja hoi-10 dossa, menetelmiä esilääkeainemuotojen valmistamiseksi, tällaisia esi-lääkeainemuotoja sisältäviä farmaseuttisia koostumuksia sekä menetelmiä esilääkeainemuotojen käyttämiseksi.

Tässä hakemuksessa käytettynä ilmaisua "esilääkeaine” (prodrug) tar-15 koittaa allopurinolin johdannaista, joka lämminverisille eläimille, esim. ihmisille, annettuna muuttuu tutkituksi lääkeaineeksi, so. allo-purinoliksi.

Ilmaisu "lyhytaikainen" tarkoittaa, että esilääkemuodon muuttuminen 20 etenee siten, että itse lääkeaine (kantayhdiste allopurinoli) vapautuu ja pilkkoutuneet muut osat pysyvät myrkyttöminä tai metabolisoituvat niin, että muodostuu myrkyttömiä aineenvaihdunnan tuotteita.

Nämä uudet allopurinolin esilääkeainemuodot ovat tiettyjä allopurino-: : . 25 Iin johdannaisia, joilla on kantayhdisteeseen allopurinoliin verrattu- na toivottava voimakas lipofiilisyys ja/tai parantunut vesiliukoisuus.

30 Tekniikan tason kuvaus.

Allopurinoli on laajalti käytetty aine hyperuriseemisten tilojen kuten : kihdin hoitamiseksi ja ehkäisemiseksi. Allopurinoli ja sen tärkein ai· neenvaihduntatuote oksipurinoli alentavat virtsahapon pitoisuutta plas-35 massa ja virtsassa estämällä ksantiinioksidaasia, entsyymiä joka katalysoi hypoksantiinin hapettumista ksantiiniksi ja ksantiinin hapettu- 4 83221 mistä virtsahapoksi (kts. esim. Spector, 1977; Elion, 1978). Sen ohella, että allopurinolia käytetään kihdin ja muiden kroonisten hyperuri-seemisten tilojen profylaksiaan ja hoitoon, allopurinolia käytetään yleisesti estämään hyperuricosurian kehittyminen, joka usein on seu-5 rauksena nopeasta solujen hajoamisesta potilailla, joilla on pahanlaatuisia sairauksia ja jotka läpikäyvät käsittelyä solumyrkyillä tai säteilyllä (kts. esim. Elion. 1978).

Tavanomaisesti allopurinoli annetaan suun kautta tabletteina. Pahoin-10 voinnin ja oksentelun kehittyminen potilaille, jotka läpikäyvät syövän lääkehoitoa, estää kuitenkin usein suun kautta annettavien valmisteiden käytön tällaisilla potilailla. Tämän johdosta on farmaseuttinen ja lääketieteellinen tarve allpurinolivalmisteille, jotka ovat käyttökelpoisia hyperurisemian hallitsemiseksi potilaissa, joilla on kasvai-15 mia, samoin kuin muissa yksilöissä, jotka ovat kytkenemättömiä ottamaan tai pitämään sisällään suun kautta annettavia lääkkeitä.

Ruiskeena tai rektaalisesti annettavien valmisteiden käyttö voi tarjota vaihtoehtoisen keinon allopurinolin antamiseksi. Kuitenkin, koska allo-20 purinoli liukenee vain hieman veteen (noin 0,5 mg/ml 25°C:ssa), ei hyväksyttäviä ruiskevalmisteita, kuten lihaksensisäistä ruisketta varten, ole saatavilla. Nykyisin on mahdollista antaa riittäviä määriä allopurinolia vain parenteraalisesti infuusiona. Käytettävät infuusionesteet sisältävät allopurinolin natriumsuolaa pitoisuudessa 0,5-1 % ja ovat 25 vahvasti emäksisiä (pH noin 10,5-11,5); sentähden niiden antaminen voi aiheuttaa laskiraotulehduksen tai suonen ympäristön tulehduksen.

Allopurinolin reaktaalista tietä tapahtuvan antamisen osalta ovat viimeaikaiset tutkimukset osoittaneet, että tämä lähestymistapa käyttäen 30 allopurinolia sinänsä ei ole sopiva ja luotettava hoitomuoto (Chang et ai., 1981; Appelbaum et ai.; 1980, 1982). Näissä tutkimuksessa osoitettiin, että käytännöllisesti ei lainkaan allopurinolia tai ainoastaan hyvin pieniä määriä (< 5 %) imeytyy erilaisista, ihmiselle rektaalisesti annetuista peräpuikkovalmisteista. Tämä allopurinolin erit-35 täin huono kyky imeytyä rektaalisesti voidaan lukea lääkeaineen alhai-

II

s 83221 sen lipofiilisyyden, yhdistyneenä sen heikkoon vesiliukoisuuteen, syyksi .

Vaikka teholliset pitoisuudet seerumissa saavutetaan antamalla allopu-5 rinolia suun kautta, ei yhdisteen imeytyminen ole täydellistä. Niinpä on ilmoitettu, että suun kautta annettavien allopurinoli-tablettien ehdoton systeeminen biosaatavuus ihmisellä on noin 70 % (Appelbaum et ai., 1982), toisessa tutkimuksessa (Elion et ai. 1966) taas ilmoitettiin, että noin 20-25 % oraalisesta annoksesta erittyy ulosteissa muut-10 tumattomana. Allopurinolin epätäydellinen ja vaihteleva imeytyrniskäyttäytyminen voidaan, kuten edellä on huomautettu reaktaalisen imeytymisen osalta, lukea lääkeaineen alhaisen vesi- ja lipidiliukoisuuden syyksi.

15 On näin ollen aivan ilmeistä, että tarvitaan kipeästi parempia allopurinolin muotoja, jotka olisivat vailla niitä haittoja ja vaikeuksia, jotka tähän asti ovat olleet tunnusomaisia kantalääkeaineelle, allopurinoli lie. Edellä esitetystä käy myös ilmi, että menestyksellisillä allopurinolin esilääkeaineilla farmaseuttisesti hyväksyttävien ruis-20 kevalmisteiden valmistusta varten tulisi olla suuri vesiliukoisuus fysiologisesti hyväksyttävässä pH:ssa. Edelleen, jotta imeytyminen reaktaalisesti annettuna olisi tehokas, luotettava ja nopea, näyttää siltä, että menestyksellisillä allopurinolin esilääkeaineilla tulisi olla sekä toivottu suuri vesiliukoisuus että lipofiilisyys. Näiden 1.1 25 ominaisuuksien lisäksi tulisi menestyksellisten esilääkeainejohdannais- : : ; ten kyetä muuntumaan takaisin aktiiviseksi allopurinoliksi imeydyttyään lämminverisen eläimen verenkiertoon tai saavuttaessaan kantalääkeaineen terapeuttisen vaikutuksen paikan. 1 2 3 4 5 6

Ainoat aikaisemmin kuvatut allopurinolin esilääkeaineet ovat eräät 2 II" eetterijohdannaiset (Hussain & Rytting, 1974), N-Mannich-emäkset (Bund- 3 *. . gaard & Johansen, 1981) ja N-hydroksimetyylijohdannaiset (Bansal et 4 • · :: : ai-, 1981). Nämä yhdisteet eroavat huomattavasti tämän keksinnön mukai- 5 *: sista yhdisteistä. Ne ovat erittäin pysymättömiä vesiliuoksissa, ovat 6 suhteellisen liukenemattomia veteen ja lipidiin eivätkä ilmeisesti 6 83221 tarjoa mitään etuja allopurinoliin nähden, rektaalista tai parenteraa-lista antoa seuraavan biosaatavuuden osalta.

Yhteenveto keksinnöstä.

5 Tämän keksinnön eräänä tarkoituksena on tarjota uusia allopurinolin esilääkeainemuotoja, jotka ovat käyttökelpoisia hyperuriseemisten tilojen, kuten kihdin, ehkäisyssä ja hoidossa.

10 Tämän keksinnön toisena tarkoituksena on tarjota uusia allopurinolin esilääkeainemuotoja, joilla esilääkeaineilla, tai lyhytaikaisilla johdannaisilla, on parantuneen lipidi- ja/tai vesiliukoisuutensa ansiosta ylivoimainen biosaatavuus allopurinoliin itseensä nähden, annettuna peräaukon tai suun kautta.

15 Tämän keksinnön tarkoituksena on vielä tarjota uusia, lyhyaikaisia allopurinolin esilääkeainemuotoja, joille on tunnusomaista suuri vesiliukoisuus ja jotka näin ovat erittäin käyttökelpoisia allopurinolin pa-renteraalisina antomuotoina.

20

Kaikki edulliset tarkoitukset saavutetaan valituilla lyhyaikaisilla allopurinolin esilääkeainemuodoilla.

"Allopurinoli"-niminen rengasrakenne esiintyy eri tautomeerisina muo-25 töinä:

Hs X Hx X

N ||-i| ___ N ]=|

30 H

l,5-dihydro-4H-pyratsolo- 2,5-dihydro-4H-pyratsolo- [3,4-d]pyrimidin-4-oni [3,4-d]pyrimidin-4-oni

Tautomeerisista muodoista kaksi on piirretty ylle ja niiden systemaat-35 tiset nimet on annettu, mutta tässä yhteydessä ilmaisu "allopurinoli" kattaa kaikki rengasjärjestelmän tautomeeriset muodot.

II

7 83221

Menetelmä keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on pääasiassa tunnettu siitä, että menetelmä käsittää 5 (a) kaavan I'a mukaisten yhdisteiden, joissa R5 on vety ja Rj on kaavan 0 0 Re

Il H

-C-R3 mukainen ryhmä tai -C-(CH2)n - , jossa R3,R8,R9 ja n mer- ^Rg 10 kitsee samaa kuin edellä, valmistamiseksi, allopurinolin Η^Λυ—H ’ _ · Hnn^S-1 15 H .

saattamisen reagoimaan kaavan XI mukaisen yhdisteen kanssa 0

H

20 R12 - C - Z XI

' jossa R12:lla on sama merkitys kuin R3:lla tai kaavan R'eR'gN-(CH2)n ; · mukainen ryhmä, jossa R'a ja R'e tarkoittavat samaa kuin Re ja R9 tai se ’·*** on aminoa suojaava ryhmä, joka on määritelty edellä; : 25 ja Z on sellainen poistuva ryhmä, jota yleensä käytetään näissä yhteyksissä ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhmää, suojaryhmän poistaminen, tai 30 (t^) kaavan Ia mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jossa R5 on vety ja Rj on jonkun seuraavan kaavan mukainen ryhmä

: O

H

: d) -CH20-C-R3 ,-!·! 35 8 83221

O

11 e) -CHjO-C-OR* O R8 5 f) -CH20-C-(CH2)n - ^ r9

O

tl g) -ch2o-c-chr6-nh2 10 O Ro li 0 h) -CH20-C-CHR7 - N ^ 15 0 0

H U

i) -CH20-C-CH2CH2CH2-C-R13 1-hydroksimetyyliallopurinolin O· sVi, '

CH2"0H

25 saattamisen reagoimaan kaavan (X') R'12-C0-Z (X') mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R’12 on jonkun seuraavan kaavan mukainen ryhmä: R3, 0R<, R'8R'9N-(CH2)n-, H2N-CHR6-, R'8R'gN-CHR7 tai R13C0CH2C12CH2-, jossa R3, R'e, R'9 ja R13 on määritelty kuten edellä, 30 R* on alempi alkyyli, R6 on vety, alempi alkyyli, fenyyli tai betsyyli ja R7 on vety tai alempi alkyyli ja n on 1-3; ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhmää, suojaryhmän poistaminen, tai (b2) kaavan Ia mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R2 ja R5 ovat samoja ja valittu jonkun seuraavan kaavan mukaisesta ryhmästä 35 il 9 83221

O

N

d) -CH20-C-R3

Re

5 f) -CH20-C-(CH2)n -O

(I

g) -CH20-C-CHR<5-NH2 10 O Rg il

h) -CH20-C-CHR7 - N

R9 15 2,5-dihydroksimetyyliallopurinolin O· saattamisen reagoimaan kaavan (X") R"12-C0-Z (X") ·.·.· mukaisen ryhmän kanssa, jossa R"12 on R3, R'8R'gN-(CH2)n-, H^-CHRe- tai 25 R'gR'gNCHR;, jossa R3,R'8,R'9, n ja Rc on määritelty edellä, :V: ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhmää, suojaryhmän poistami sen, tai 30 (c) kaavan Ia tai Ib mukaisten yhdisteiden, joissa Rj^ tai R2 sekä R5 tarkoittaa kaavan '··* 0

Il

'·; -CH20-C-R

35 mukaista ryhmää, jossa R on alempi alkyyli, valmistamiseksi, allopu-.* rinolin saattamisen reagoimaan kaavan XII mukaisen yhdisteen kanssa 10 83221

O H

k I

R12 - C - O - C - Z XII

R7 5 jossa R7 on vety, Z on halogeeni, edullisesti kloori ja R12 on alempi alkyyli, ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhmää, suojaryhmän poistamisen, tai (d) kaavan I'a mukaisten yhdisteiden, tai kaavan Ib mukaisten yhdistei-10 den, jossa R5 on vety ja Rx on 0

H

-C-NHR* 15 valmistamiseksi, 1-hydroksimetyyliallopurinolin saattamisen reagoimaan kaavan V" mukaisen yhdisteen R* - N - C - O V" 20 jossa Ra on edellä määritelty ja tämän jälkeen haluttaessa, tulokseksi saadun kaavojen I'a ja Ib mukaisen yhdisteen muuttamisen suolakseen.

25

Erityisiä esimerkkejä edullisista kaavan Ia mukaisista yhdisteistä ovat 1-(butyryylioksimetyyli)allopurinoli, 1-(N,N-dimetyyliglysyylioksimetyyli)allopurinoli, 1-(N,N-die tyyliglysyy1ioks imetyyli)allopur inoli, 30 1-(N,N-dipropyyliglysyylioksimetyyli)allopurinoli, 1-(DL-N,N-dimetyylialanyylioksimetyyli)allopurinoli, 1-(DL-N,N-dietyylialanyylioksimetyyli)allopurinoli, 1-(L-fenyylialanyylioksimetyyli)allopurinoli, 1-(L-leusyylioksimetyyli)allopurinoli, 35 1-(L-valyylioksimetyyli)allopurinoli, 1-(DL-N,N-dimetyy1ifenyy1ialanyy1ioksimetyy1i)ailopurinoli, li 83221 2,5-bis(asetoksimetyyli)allopurinoli sekä niiden suolat.

5 Edellisen selvityksen perusteella on ilmeistä, että sen suuresti parantuneen vesiliukoisuuden johdosta, joka valikoiduilla, vaatimusten kohteena olevilla esilääkeaineilla on itse allopurinoliin ja tunnettuihin johdannaisiin verrattuna, saavutetaan ylivoimainen parenteraalinen formulointi ja lääkkeen anto. Samalla tavoin saavutetaan poikkeukseni-10 sesti parantunut biosaatavuus rektaalisesti, tarkoitettujen yhdisteiden parantuneen vesiliukoisuuden ja/tai lipofiilisyyden ansiosta.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa erilaisilla vaatimusten mukaisilla menetelmillä.

15

Kuvaus piirustuksista

Kuvio 1 esittää 1-(N,N-dimetyyliglysyylioksimetyyli)allopurinolin hajoamisen (o) ja siihen liittyvän allopurinolin muodostumisen (·) ajan ku-20 luessa, 80 % ihmisen plasmaliuoksessa (pH 7,4) 37°C:ssa.

Kuvio 2 esittää havaittujen pseudo-1-kertaluvun nopeusvaikioiden logaritmien riippuvuuden pHrsta, allopurinolin eri esilääkeaineiden muuttumiselle allopurinoliksi vesiliuoksessa 37°C:ssa.

; ;·. 25

Selitys: (Δ) 2,5-bis(butyryylioksimetyyli)allopurinoli; (o) 1-(N.N-dietyyliglysyylioksimetyyli)allopurinoli; ja 30 (·) 1-(asetyyli)allopurinoli.

i * · ·.· Kuvio 3 esittää plasman keskimääräisten oksipurinolipitoisuuksien ja : ajan väliset riippuvuudet, jotka on saatu antamalla rektaalisesti perä- .··· puikkoina allopurinolia (·), 1-(butyryylioksimetyyli)allopurinolia (Δ) 35 ja 1-(N.N-dietyyliglysyylioksimetyyli)allopurinolin hydrokloridia (o) kaniineille, annoksena vastaten 25 mg allopurinolia (ristitutkimus kä- i2 83221 sittäen kaniineita, joista kukin painoi 2,7 kg). Allopurinolin pitoisuudet plasmassa olivat alle 1 ug/ml kaikilla kolmella verinäytteen ottokerralla.

5 Kuvio 4 esittää plasman keskimääristen oksipurinoli- (o) ja allopuri-nolipitoisuuksien (·) ja ajan väliset riippuvuudet, jotka on saatu antamalla rektaalisesti peräpuikkoina 1-(N,N-dietyyliglysyylioksimetyy-li)allopurinolin hydrokloridia viidelle vapaaehtoiselle ihmiselle annoksena vastaten 350 mg allopurinolia.

10

Kuvio 5 esittää plasman keskimääräisten oksipurinolipitoisuuksien ja ajan väliset riippuvuudet, kun allopurinolia (o) ja 1-(N,N-dietyyli-glysyylioksimetyyli)allopurinolin hydrokloridia (·) on annettu laskimoon neljälle kaniinille annoksena vastaten 25 mg allopurinolia. Allo-15 purinolin pitoisuudet plasmassa olivat alle 1 ug/ml kaikilla verinäytteen ottokerroilla.

Reaktio-olosuhteet. Allopurinolin eri johdannaisten liuoksia puskuri-vesiliuoksissa tai 80 % ihmisen plasmaliuoksissa (pH 7,4) pidettiin 20 37°C:ssa. Johdannaisten alkupitoisuudet olivat alueella 0,01-0,1 mg/ml.

Eri aikoina poistettiin osa liuoksista ja analysoitiin HPLC:lla sekä jäljellä olevan johdannaisen että allopurinolin suhteen. Plasmaliuos-ten osalta poistettu erä deproteinisoitiin etanolilla tai trikloori-etikkahapolla ja sentrifugoinnin jälkeen kirkas liuos injektoitiin 25 HPLC:iin.

Analyysimenetelmä. HPLC-menetelmää käytettiin allopurinolin ja sen johdannaisten määrittämiseen. Tässä menetelmässä käänteisfaasi LiCh-rosorb RP-8 pylvästä (250 x 4 mm) eluoitiin ympäristön lämpötilassa 30 metanolin ja 0,01 M asetaattipuskurin pH 4,5 tai metanolin ja 0,03 M fosfaattipuskurin pH 7,0 seoksilla. Eluentin koostumus säädettiin kullekin yhdisteelle, sopivan retentioajan saamiseksi. Virtausnopeus oli 1,2 ml/min ja effluenttia pylväästä tarkkailtiin spektrofotometrisesti kohdalla 252 nm tai 274 nm. Yhdisteiden määrät laskettiin mittaamalla 35 piikkien korkeudet.

Il u 83221

Havaittiin tapahtuvan johdannaisten täydellinen muuttuminen allopuri-noliksi ja kaikissa tapauksissa johdannaisten lohkeaminen osoitti tarkoin ensimmäisen kertaluvun kinetiikkaa. Yksi esimerkki on esitetty kuviossa 1. Hydrolyysinopeus vaihteli suuresti liuosten pH:n mukaan, 5 mitä valaisee kuvio 2, jossa näkyy pH-nopeus riippuvuudet joillekin johdannaisille.

Puoliintumisajat allopurinolin muodostumiselle eri johdannaisista fysiologisissa pH- ja lämpötilaolosuhteissa on annettu taulukossa 2.

10 Voidaan nähdä, että ihmisen plasman läsnäollessa hajoamisnopeus on suuresti kiihtynyt, mikä osoittaa johdannaisten taipumuksen muuttua tehokkaaksi kantayhdisteeksi olosuhteissa, jotka ovat samanlaiset kuin is vivo vallitsevat.

15 Allopurinoli-lääkeaineiden vesiliukoisuus la lipofiilisvvs Näennäiset jakaantumiskertoimet (P) joillekin allopurinolijohdannaisille ja allopurinolille mitattiin käyttäen yleisesti käytettyä 1-oktanoli/vesi-järjestelmää. Samoin määritettiin johdannaisten liukoi->··_ 20 suus veteen tai puskuri-vesiliuoksiin. Log P:lle saadut arvot ja vesi- ! . liukoisuudet on lueteltu taulukossa 3. Saadut tulokset osoittavat sel västi, että vaihtelemalla johdannaisten esiosia tai johdannaisen tyyp-'·· piä on mahdollista saada allopurinolin esilääkeaineita, joilla on vaih- televa ja mikä tahansa toivottava lipofiilisyys tai vesiliukoisuus.

: 25 Niinpä on mahdollista, kuten on osoitettu yhdisteellä 1-(N,N-dietyyli- : : : glysyylioksimetyyli)allopurinolin hydrokloridi, saada esilääkeaine- muoto, joka omaa samanaikaisesti sekä paljon suuremman vesiliukoisuuden (so. 5000-kertainen) että suuremman lipofiilisyyden kuin kanta-yhdiste .

.···. 30

Eräiden allopurinolilohdannalsten 1a allopurinolin biosaatavuus rek-. taalisen annon jälkeen : : Allopurinolista ja eräistä tämän keksinnön mukaisista johdannaisista • >_ 35 valmistettiin peräpuikkoja käyttäen Adeps solidus (Ph.Nord. 63) perä- ! puikkojen perusaineena. Kukin peräpuikko sisälsi ao. yhdistettä (saa- 14 83221 teCtu samaan osaskokoon seulomalla) määrän, joka vastasi 25 mg allo-purinolia. Joitakin vesiliukoisia johdannaisia formuloitiin myös pie-noisperäruiskeiksi, liuottimen ollessa metyyliselluloosan 0,5 % vesi-liuos. Peräpuikot tai pienoisperäruiskeet annettiin kaniineille. Lää-5 keaineen antamisen jälkeen otettiin eri aikoina verinäytteitä ja plas-majakeesta tutkittiin allopurinoli ja sen tärkein aineenvaihduntatuote oksipurinoli, käyttäen edellä selostettua HPLC-menetelmää.

Kuvio 3 esittää muutamia edustavia plasman oksipurinolipitoisuuksien 10 aikariippuvuuksia kaniineille rektaalisesti tapahtuneen antamisen jälkeen. Tulokset osoittavat selvästi, että allopurinolijohdannaisilla on suuresti parantunut biosaatavuus verrattuna allopurinoliin, joka osoitti vain hyvin alhaista imeytymistä (<2 % annetusta annoksesta). Plasma-näyteet analysoitiin myös muuttumattomien allopurinolin esilääkeainei-15 den suhteen, mutta yhdessäkään tapauksessa ei todettu mitattavissa olevia pitoisuuksia (<0,1 μg/ml). Tuloksista on siis ilmeistä, että tämän keksinnön mukaiset allopurinolin esilääkeainemuodot tarjoavat allopurinolin tehokkaan imeytymisen rektaalisen annon jälkeen, jyrkkänä vastakohtana itse allopurinolin käyttäytymiselle. Edellä kuvatut tutki-20 mukset osoittavat lisäksi, että esilääkeaineet muuttuvat takaisin allo-purinoliksi in vivo. vastaten tämän hakemuksen alussa esitettyä "esi-lääkealneen" määritelmää.

Näiden eläinkokeiden lisäksi annettiin pienoisperäruiskevalmisteena 1-25 (N.N-dietyyliglysyylioksimetyyli)allopurinolin hydrokloridisuolaa terveelle vapaaehtoiselle ihmiselle. Annettu annos (2 ml 0,5 % metyyli-selluloosaliuosta sisältäen 118 mg/ml esilääkeainetta) vastasi 100 mg allopurinolia. Virtsa kerättiin 5 päivän ajan ja osasta tutkittiin allopurinoli ja oksipurinoli spesifisellä HPLC-kokee11a. Allopurinolin 30 ja oksipurinolin kokonaiseritykset virtsassa olivat vastaavasti 11 ja 78 mg. Koska tiedetään (Breithaupt & Tittel, 1982), että noin 88 % laskimoon annetusta allopurinoliannoksesta saadaan talteen virtsassa muuttumattomana allopurinolina (12 %) ja oksipurinolina (76 %) osoittaa kokeen tulos kantalääkeaineen itse asiassa täydellistä biosaatavuutta 35 rektaalisesti annetusta esilääkeainejohdannaisesta.

li i5 83221

Lisäksi annettiin peräpuikkoja, jotka sisälsivät 1-(N,N-dietyyliglysyy-lioksimetyyli)allopurinolin hydrokloridisuolaa määrän, joka vastasi 350 mg allopurinolia, ja jotka oli tehty käyttäen Adeps solidus peräpuikkojen perusaineena, rektaalisesti viidelle terveelle vapaaehtoiselle 5 ihmiselle. Lääkeaineen antamisen jälkeen otettiin eri aikoina verinäytteitä ja plasmajakeesta tutkittiin allopurinoli ja oksipurinoli käyttäen HPLC. Kuvio 4 esittää saadut keskimääräiset palsmatiedot. Samoille vapaaehtoisille annettiin myös allopurinolin tablettivalmiste ja saatujen plasmatietojen perusteella arvioitiin allopurinolin esilääkeainetta 10 sisältävän peräpuikkovalmisteen biosaatavuuden olevan 42 % oraalisen valmisteen vastaavasta.

Biosaatavuus parenteraalisen ia oraalisen annon jälkeen 15 1-(N.N-dietyyliglysyylioksimetyyli)allopurinolin hydrokloridin vesi- liuosta (1 ml sisältäen 59 mg yhdistettä ~25 mg allopurinolia) annettiin laskimoon neljälle kaniinille. Kuvio 5 esittää käyrää (keskimääräinen plasman oksipurinolipitoisuus ajan suhteen), yhdessä (pitoisuus plasmassa ajan suhteen) tietojen kanssa, jotka todettiin, kun oli sa-20 maila tavoin annettu 25 mg allopurinolia sen natriumsuolan 1 % emäk-sisenä liuoksena. Kokeen tulokset osoittavat kantalääkeaineen lähes täydellistä biosaatavuutta laskimoon annetusta esilääkeainejohdannai-sesta.

25 Vertaileva imeytymistutkimus tehtiin myös allopurinolista ja edellä mainitusta esilääkeaineesta peroraalisen annon jälkeen. Kumpaakin yhdistettä annettiin terveelle vapaaehtoiselle ihmiselle annoksena, joka vastasi 100 mg allopurinolia, allopurinoli kaupallisesti saatavana tablettina ja 1-(N,N-dietyyliglysyylioksimetyyli)allopurinolin hydro-30 kloridi liuoksena vedessä (236 mg 10 ml:ssa). Allopurinolin ja oksipu-rinolin kokonaiseritys virtsassa mitattiin ja sen havaittiin vastaavan 67 % annetusta annoksesta allopurinolitabletilla ja 92 % esilääkeainet-ta sisältävällä valmisteella.

•X 35 « · * U 83221

Taulukko 2

Puoliintumisajat (t„ 5) eri allopurinolijohdannaisten muuttumiselle allopurinolisi 37°C:ssa 5 _ C0,5

Yhdiste pH 7,4 80 % ihmisen puskuri plasma, min 10 _ 1- (butyryylioksimetyyli)allopurinoli 193 h 9 2- (butyryylioksimetyyli)allopurinoli 54 h 22 1.5- bis(butyryylioksimetyyli)allopurinoli 25 h 22 2.5- bis(butyryylioksimetyyli)allopurinoli 35 h 32 15 1-(asetoksimetyyli)allopurinoli 87 h 31 2.5- bis(asetoksimetyyli)allopurinoli 15 h 51 1-(bentsoyylioksimetyyli)allopurinoli 237 h 4 1-(nikotinoyylioksimetyyli)allopurinoli 26 h 21 1-(glysyylioksimetyyli)allopurinoli 26 min 9 20 1-(Ν,Ν-dimetyyliglysyylioksimetyyli)- allopurinoli 72 min 7 1-(Ν,Ν-dietyyliglysyylioksimetyyli)- allopurinoli 49 min 10 1-(DL-N,N-dietyylialanyylioksimetyyli)-25 allopurinoli 21 min 17 1-(asetyyli)allopurinoli 26 min 6 1-(propionyyli)allopurinoli 30 min 4 1-(butyryyli)allopurinoli 36 min 2.5 l-(bentsoyyli)allopurinoli 20 min 4 30 1-(DL-alanyylioksimetyyli)allopurinoli 15 min 11 1-(Ν,Ν-dipropyyliglysyylioksimetyyli)- allopurinoli 50 min 12 1-(DL-fenyyliglysyylioksimetyyli)- allopurinoli 20 min 3 35 1-(L-leusyylioksimetyyli)allopurinoli 17 min 6 li 17 83221

Taulukko 2 jatkuu 1-(etoksikarbonyylloksimetyyli)- allopurinoli - 20 5 1-(N,N-dimetyyliglysyyli)allopurinoli 1,5 min <1 1-(N-butyylikarbamoyyli)allopurinoli - 90 1-(DL-fenyylialanyylioksimetyyli)- allopurinoli 40 min 9 1 3-(N,N-dietyylikarbamoyyli)propionyyli- 10 oksimetyyli allopurinoli 81 h 8.4 h 1-(klooriasetyyli)allopurinoli <1 min <1 1-[4-(N,N-dimetyyliamino)butyryylioksi- metyyli]allopurinoli 145 min 140 2.5- bis(DL-alanyylioksimetyyli)- 15 allopurinoli <1 min <1

Taulukko 3 ... 20

Allopurinolin ja allopurinolin eri esilääkeaineiden vesiliukoisuudet [ (S) ja jakaantumiskertoimet (P)

Yhdiste S* log pb : 25 (mg/ml) allopurinoli 0.50 -0.55 1-(pivaloyylioksimetyyli)allopurinoli 0.52 1.07 2 -(pivaloyylioksimetyyli)allopurinoli 1.7 0.79 ···_ 30 1,5-bis(pivaloyylioksimetyyli)allopurinoli 0.02 2.50 2.5- bis(pivaloyylioksimetyyli)allopurinoli 0.045 2.34 1-(butyryylioksimetyyli)allopurinoli 0.35 0.60 \'· j 2-(butyryylioksimetyyli)allopurinoli 1.5 0.33 : : 1,5-bis(butyryylioksimetyyli)allopurinoli 0.050 1.82 • - 35 2,5-bis(butyryylioksimetyyli)allopurinoli 0.094 1.60 ’. 1-(asetoksimetyyli)allopurinoli 0.58 -0.35 is 83221

Taulukko 3 jatkuu 2,5-bis(asetoksimetyyli)allopurinoli 2.9 n.d.

1-(bentsoyylioksimetyyli)allopurinoli 0.024 1.50 5 1-(nikotinoyylioksimetyyli)allopurinoli 0.093 0.27 1-(glysyylioks imetyyli)allopurinolin hydrokloridi >500 n.d.

1-(DL-alanyylioksimetyyli)allopurinolin hydrobromidi >500 n.d.

10 1-(Ν,Ν-dimetyyliglysyylioksimetyyli)- allopurinolin hydrokloridi >500 -0.49c 1-(Ν,Ν-dietyyliglysyylioksimetyyli)- allopurinolin hydrokloridi >500 0.20° 1-(N,Ν-dipropyyliglysyylioksimetyyli)-15 allopurinolin hydrokloridi >400 1.27c 1-(DL-N,N-dietyylialanyylioksimetyyli)- allopurinolin hydrokloridi >400 0.72e 1-(DL-fenyyliglysyylioksimetyyli)- allopurinolin hydrobromidi >200 -0.15c 20 1-(asetyyli)allopurinoli 0.75 -0.35 1-(propionyyli)allopurinoli 0.30 0.30 1-(butyryyli)allopurinoli 0.11 0.85 1-(bentsoyyli)allopurinoli 0.014 1.20 1-(etoksikarbonyylidesimetyyli)allopurinoli n.d. 0.21 25 1-(DL-fenyylialanyylioksimetyyli)- allopurinolin hydrobromidi >200 0.40° 1-(L-leusyylioksimetyyli)allopurinolin hydrobromidi >400 0.19c 1-[3-(Ν,Ν-dietyylikarbamoyyli)-propionyyli-30 oksimetyylijallopurinoli 33 -0.22 1-(N,N-dimetyyliglysyyli)allopurinolin hydrokloridi >200 n.d.

35 * lämpötilassa 21 ± 1°C

b oktanolin ja veden välillä

II

i9 83221 c oktanolin ja pH 8,0 boraattipuskurin välillä n.d. - ei määritetty Tätä keksintöä valaistaan edelleen seuraavilla esimerkeillä, joita ei 5 kuitenkaan tule tulkita rajoittavina. Esimerkit valaisevat erityisesti keksinnön edullisia sovellutusmuotoja.

Valmistettujen yhdisteiden spektri- ja kromatografiatiedot on annettu taulukossa 1.

10

Esimerkki 1 1-(asetyyli)allopurinoli 15 0 /1 R3 - CH3C - ; R5 - H [menetelmä (a)] 20

Allopurinolin (500 mg; 3,67 mmoolia) suspensiota etikkahappoanhydri-; dissä (8 ml) kuumennettiin öljyhauteessa 130°C:ssa viiden tunnin ajan.

Jäähdyttämisen jälkeen lisättiin vettä (10 ml) ja seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa kolmen tunnin ajan. Saostuma kerättiin, pestiin 25 vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 375 mg (57 %). Uudelleenkitey- : tys etanoli/N,N-dimetyyliformamidista antoi analyyttisesti puhtaan yhdisteen, sp. 251-254°C (haj.).

Esimerkki 2 .··. 30 1-(propionyyli)allopurinoli 0

.·.·. 35 M

. Rj - CH3CH2C-; Rs - H [menetelmä (a)] 20 83221

Yhdiste valmistettiin allopurinolista ja propionihappoanhydridistä esimerkissä 1 kuvatulla menettelyllä. Saanto oli 60 %. Uudelleenkiteytys etanoli/N,N-dimetyyliformamidista antoi analyyttisesti puhtaan tuot-5 teen, sp. 259-263°C.

10

Esimerkki 3 1-(butyryyli)allopurinoli 15 0

II

Rl “ CH3CH2CH2C-; Rs - H [menetelmä (a)] 20

Yhdiste valmistettiin allopurinolista ja voihappoanhydridistä esimerkissä 1 kuvatulla menettelyllä. Saanto oli 52 %. Uudelleenkiteytys etanolista antoi analyyttisesti puhtaan tuotteen, sp. 222-225°C.

25 Esimerkki 4 1-(klooriasetyyli)allopurinoli 30 0

II

R·! - C1CH2C- ; R5 - H [menetelmä (a) ]

Allopurinolin (2,7 g; 20 mmoolia) ja kloorietikkahappoanhydridin (6,8 35 g; 40 mmoolia) seosta N,N-dimetyyliformaidissa (20 ml) kuumennettiin ; 80°C:een ja saatiin kirkas liuos. 1 tunnin kuluttua liuos jäähdytettiin

II

n 83221 ja saostuma kerättiin ja pestiin asetonilla. Saanto: 2,6 g (61 %), sp. 233-236°C (haj.).

Esimerkki 5 5 1-(bentosyyli)allopurinoli 0

10 II

Rx - C6H5 - C-; Rs - H [menetelmä (a) ]

Yhdiste valmistettiin allopurinolista ja bentsoehappoanhydridistä esimerkissä 4 kuvatulla menettelyllä. Saanto oli 50 %. Uudelleenkiteytys 15 Ν,Ν-dimetyyliformamidista antoi analyyttisesti puhtaan yhdisteen, sp. 270-273°C (haj.).

Esimerkki 6 20 1-(asetyylioksimetyyli)allopurinoli 0 n : 25 Rx - CH3C - OCH2 Rs - H [menetelmä (b)] 1-hydroksimetyyliallopurinolin (1,6 g; 10 mmoolia) ja etikkahappoanhyd-ridin (2,5 ml) seosta pyridiinissä (10 ml) hämmennettiin huoneen lämpötilassa 20 tunnin ajan. Saostuma kerättiin, pestiin etanolilla ja kui-30 vattiin. Saanto: 780 mg (47 %), sp. 257°C.

• - Esimerkki 7 1-(bentsoyylioksimetyyli)allopurinoli .•X 35 22 83221

O

K

Rx - C6H5C - O - CH2 - ; Rs - H [menetelmä (b) ] 5 1-hydroksimetyyliallopurinolin (0,8 g; 5 mmoolia) ja bentsoyyllkloridin (0,75 ml; 6,5 mmoolia) seosta pyridiinissä (10 ml) hämmennettiin huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajan. Lisättiin vettä (30 ml) ja kun oli seissyt 20 tunnin ajan 5°C:ssa, kerättiin saostuma ja uudelleen kiteytettiin etanolista. Saanto: 900 mg (67 %), sp. 217-219°C.

10

Esimerkki 8 1-(nikotinoyylioksimetyyli)allopurinoli 15 0

II

Rx - C5HaN - C - 0CH2-; R5 - H [menetelmä (b) ] 20 ; Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja nikotinoyyli- kloridista oleellisesti samalla menettelyllä kuin esimerkissä 7 kuvattu. Uudelleenkiteyttämisen jälkeen etanolista oli saanto 30 %, sp. 242-243°C.

: 25

Esimerkki 9 1-(klooriasetyylioksimetyyli)allopurinoli . 30 0

II

: Rj - CICH2C - 0 - CH2-; R5 - H [menetelmä (b) ] : 35 i: 23 83221 1-hydroksimetyyliallopurinolin (0,83 g; 5 mmoolia) ja kloorietikkahap-poanhydridin (1,03 g; 6 mmoolia) seosta pyridiinissä (20 ml) hämmennettiin huoneen lämpötilassa 18 tunnin ajan. Lisättiin etanolia (20 ml) ja saostuma kerättiin ja uudelleenkiteyttiin etanolista. Sp. 203-205°C 5 (haj.).

Esimerkki 10 1-(butyryylioks imetyyli)allopurinoli 10

O

II

15 Rx - CH3CH2CH2C - 0CH2-; R5 - H [menetelmä (b) ] (kts. myös esim. 19) 1-hydroksimetyyliallopurinolin (1,44 g; 8,7 mmoolia) suspensioon mety-20 leenikloridissa (100 ml) lisättiin trietyyliamiinia (2,64 g; 26 mmoo-lia) ja butyryylikloridia (2,20 g; 20,8 mmoolia). Seosta hämmennettiin . . huoneen lämpötilassa kahdenkymmenen tunnin ajan. Tulokseksi saatu kir- kas liuos pestiin vedellä (50 ml), natriumvetykarbonaatin vesiliuoksel-**· la (2,5 %; 50 ml) ja vedellä (2 x 50 ml). Liuos kuivattiin ja haihdu- 25 tettiin. Jäännöstä hierrettiin etyyliasetaatin kanssa ja saatiin 567 mg (28 %) raakatuotetta. Uudelleenkiteytys etanolista antoi analyyttisesti puhdasta yhdistettä, sp. 224-226°C.

Esimerkki 11 ;; 30 1-(N,N-dimetyyliglysyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrokloridi) • · • · » O 0 :V: 35

Ri - (CH3)2NCH2C - 0CH2-; R5 - H [menetelmä (b)] 24 83221 1-hydroksimetyyliallopurinolin (2,0 g; 12 mmoolia), Ν,Ν-dimetyyligly-siinln (1,25 g; 12 mmoolia), N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidin (2,5 g; 12 mmoolia) ja 4-tolueenisulfonihapon (150 mg) seosta pyridiinissä (40 5 ml) hämmennettiin huoneen lämpötilassa 48 tunnin ajan. Lisättiin mety-leenikloridia (80 ml). Seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin in vacuo. Jäännöstä uutettiin kahdella 50 ml:n annoksella kiehuvaa mety-leenikloridia ja uutteet haihdutettiin. Jäännös uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatista. Saatu raaka yhdiste lietettiin etanoliin (20 ml) ja 10 lisättiin kloorivetyhapon 2N liuos etyyliasetaatissa (8 ml) ja sitten etyyliasetaattia (20 ml). Saostuma kerättiin (1,32 g) ja uudelleenkiteytettiin metanoli/eetteristä, jolloin saatiin analyyttisesti puhdas tuote, sp. 203-206°C (haj.).

15 Esimerkki 12 l-[4-(N,N-d ime tyy1i amino)butyryy1ioks ime tyy1i]ailopur ino1i (hydrokloridi) 20

O

li R, - <CH3)2NCH,CH,CH2C - 0-CK2-; R, - H [menetelmä (b)] 25 Käyttäen samaa menettelyä kuin esimerkissä 11 kuvattu, mutta käyttäen N,N-dimetyyli-4-amino-voihappoa Ν,Ν-dimetyyliglysiinin asemasta, saatiin otsikon yhdiste, sp. 150-155°C (haj.).

Esimerkki 13 30 1-(DL-N.N-dietyylialanyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrokloridi) : CH3 0 35 | /1

Rj - (C2H5)2N - CH - C - 0 - CH2 R5 - H [menetelmä (b) ] 25 83221

Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja DL-N,N-die-tyylialaniinista esimerkissä 11 kuvatulla menttelyllä. Saanto oli 24 %, sp. 165-170°C (haj.).

5

Esimerkki 14 1-(N.N-dipropyyliglysyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrokloridi) 10 0

II

Rl — (C3H7)2N - CH2 - C - 0 - CH2 Rs - H [menetelmä (b)] 15

Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja N,N-dipropyy-liglyysinistä esimerkissä 11 kuvatulla menettelyllä. Yhdiste kiteytyi etanolista, 195-198°C (haj.).

20 Esimerkki 15 • . 1-(N,N-dietyyliglysyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrokloridi) : 25 0

II

Ri - (C2H5)2NCH2C - OCH2 R5 - H [menetelmä (b) ] 1-hydroksimetyyliallopurinolin (3,8 g; 16,8 mmoolia), N,N-dietyyli-30 glysiinin hydrokloridin (2,88 g; 17 mmoolia), N,N*-disykloheksyyli- karbodi-imidin (3,6 g; 17,5 mmoolia) ja 4-tolueenisulfonihapon (270 mg) seosta pyridiinissä (60 ml) hämmennettiin huoneen lämpötilassa 24 tun-··· - nin ajan. Metyleenikloridia (50 ml) lisättiin reaktioseokseen. Saostuma ’...· kerättiin Ja hämmennettiin veden kanssa (15 ml). Liukenematon yhdiste 35 suodatettiin pois ja pestiin vedellä ja yhdistetyt suodokset haihdutettiin in vacuo. Jäännös uudelleenkiteytettiin kahdesti metanoli/eette- 26 83221 ristä, jolloin saatin analyyttisesti puhdas yhdiste (1,3 g; 25 %), sp. 196-198°C (haj.).

Esimerkki 16 5 1-(DL-alanyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrobromidi) CH3 0

1» 1 II

Rx - H2NCH - C - 0 - CH2 R5 - H [menetelmä (b)] 1-hydroksimetyyliallopurinolin (1,6 g; 10 mmoolia), N-bentsyylioksi-karbonyyli-D,L-alaniinin (2,23 g; 10 mmoolia), N,N'-disykloheksyyli-15 karbodi-imidin (2,06 g; 10 mmoolia) ja 4-tolueenisulfonihapon (150 mg) seosta pyridiinissä (60 ml) hämmennettiin huoneen lämpötilassa 20 tunnin ajan. Metyleenikloridia (100 ml) lisättiin ja seos suodatettiin. Suodos haihdutettiin in vacuo ja jäännöstä uutettiin kiehuvalla mety-leeniklrodilla (3 x 50 ml). Metyleenikloridi haihdutettiin ja jäännös 20 uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatti/etanolista. Raakaan N-suojattuun - yhdisteeseen lisättiin bromivetyhapon 33 % liuos etikkahapossa (8 ml).

Seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa seitsemän minuutin ajan ja lisättiin etyyliasetaattia (50 ml). Saostuma (520 mg, 16 %) kerättiin ja uudelleenkiteytettiin metanolista. Otsikon yhdiste kiteytyi 2/3 25 moolin vettä kera, sp. 195-198°C (haj.).

Esimerkki 17 1-(sukkinyy1ioksimetyy1i)ailopurinoli 30 O 0

Il II

R! - HOC - CH2CH2 - C - 0CH2 R5 - H [menetelmä (b)] 35

II

27 83221 1-hydroksimetyyliallopurinolin (1,6 g; 10 mmoolla) ja meripihkahappoan-hydridin seosta pyridiinissä (20 ml) hämmennettiin huoneen lämpötilassa 96 tunnin ajan. Lisättiin 4N kloorivetyhappoa (50 ml) ja saostuma kerättiin. Etanoli/N,N-dimetyyliformamidista otsikon yhdiste kiteytyi 5 0,25 ekvivalentin vettä kera. Sp. 217-219°C (haj.).

Esimerkki 18

1) Rj - Rj - tert.-butyylioksimetyyli [menetelmä (c)J

10 2) R2 - R5 “ tert.-butyylioksimetyyli 3) Rj - tert.-butyylioksimetyyli; R5 - vety 4) R2 - tert.-butyylioksimetyyli; Rs - vety

Allopurinolin (2,04 g; 15 mmoolia) liuokseen dimetyylisulfoksidissa (45 15 ml), jota pidettiin 40°C:ssa, lisättiin kaliumkarbonaattia (2,07 g; 15 mmoolia) ja sitten tipoittain yhden tunnin kuluessa kloorimetyylipiva-laatin (2,2 g; 15 mmoolia) liuos dimetyylisulfoksidissa (15 ml). Seosta hämmennettiin 40°C:ssa neljän tunnin ajan ja kaadettiin jäihin (75 g). Happameksi tekemisen jälkeen seosta uutettiin kloroformilla (3 x 70 20 ml). Uutteet pestiin vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin. Tolueenia (5 ml) lisättiin jäännökseen ja muodostunut kiinteä yhdiste kerättiin ·; suodattamalla ja pestiin suodattimena eetterillä (2x5 ml). Kiinteän ·· : aineen uudelleenkiteytys etyyliasetaatista antoi analyyttisesti puhdas ta 2-(pivaloyylioksimetyyli)allopurinolia (813 mg; sp. 180-181°C).

; 25

Raa'asta kiintoaineesta saatu tolueeni-etterisuodos haihdutettiin in vacuo. Jäännökselle suoritettiin pylväskromatografia (CC) ja yhdisteet kerättiin seuraavassa järjestyksessä: 30 1) l,5-bis(pivaloyylioksimetyyli)allopurinoli (90 mg; sp. 136-137°C, uudelleenkiteytetty eetteri-kevytbentsiinistä).

| 2) 2,5-bis(pivaloyylioksimetyyli)allopurinoli (402 mg; sp. 145-146°C, .·*·. uudelleenkiteytetty etyyliasetaatti-eetteri-kevytbentsiinistä).

'·’· 35 28 83221 3) 1-(pivaloyylioksimetyyli)allopurinoll (151 mg; sp. 185-187°C, uudel- leenkiteytetty etyyliasetaatista).

Esimerkki 19 5 1) Rx - R5 - butyylioksimetyyli [menetelmä (c)] 2) R2 - Rs - butyylioks ime tyyli 3) Rj - butyylioksimetyyli; R5 - vety 4) R2 - butyylioksimetyyli; Rs - vety 10 Käyttäen samaa menettelyä kuin esimerkissä 18 kuvattu ja ekvivalentit määrät allopurinolia ja kloorimetyylibutyraattia saatiin seuraavat yhdisteet: 15 1) 1,5-bis(butyryylioksimetyyli)allopurinoli, sp. 122-123°C (etyyliase taatti -eetteri-kevytbentsiinistä).

2) 2,5-bis(butyryylioksimetyyli)allopurinoli, sp. 133-135°C (etyyli-ase taatti-eetteri-kevytbentsiinistä).

20 3) 1-(butyryylioksimetyyli)allopurinoli, sp. 220-225°C (etyyliasetaatista) .

4) 2-(butyryylioksimetyyli)allopurinoli, sp. 182-183°C (etyyliasetaa- 25 tista).

Esimerkki 20 1-(N,N-dimetyyliglysyyli)allopurinoli (hydrokloridi) 30

Rx - (CH3)2NCH2C0- ; Rs - H [menetelmä (a)]

Allopurinolin (778 mg; 5,7 mmoolia) suspensioon 5 ml:ssa N,N-dimetyyli-formamidia lisättiin Ν,Ν-dimetyyliglysinyylikloridin hydrokloridin (5,7 35 mmoolia) liuos 10 ml:ssa Ν,Ν-dimetyyliformamidia. Seosta kuumennettiin 29 83221 80°C:een 1 tunnin ajan. Jäähdyttämisen jälkeen saostuma kerättiin ja pestiin etanolilla. Saanto: 209 mg, sp. 192-196°C (haj.).

Esimerkki 21 5 1-(e toks ikarbonyy1i oks ime tyy1i)ailopur ino1i

Rx - CH3CH2-0-C0-0-CH2* ; R5 - H [menetelmä (b)] 10 Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja etyylikloori-formaatista samalla menettelyllä kuin esimerkissä 7 kuvattu. Etanolista uudelleenkiteyttämisen jälkeen saanto oli 38 %, sp. 228°C.

15 Esimerkki 22 1-(DL-fenyyliglysyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrobromidi)

Rx - C6H5CH(NH2)C0-0CH2- ; Rj - H [menetelmä (b)] 20

Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja N-(bentsyyli-oksikarbonyyli)-DL-fenyyliglysiinistä esimerkissä 16 kuvatulla menette-lyllä. Analyyttisesti puhdas otsikon yhdiste kiteytyi metanoli-eette-ristä, sp. 192-195°C (haj.).

: 25

Esimerkki 23 2,5-b is(butyryylioks ime tyy1i)ailopur inoli 30 0

Il M R2 - R5 - CH3CH2CH2C-OCH2- [menetelmä (b) ] 35 Seosta, jossa oli 400 mg 2,5-dihydroksimetyyliallopurinolia (valmis te t-tu kuten Bansal et ai. (1981) ovat selostaneet, jossa yhdiste on nimet- 3o 83221 ty 1,5-[bis(hydroksimetyyli)]-1,5-dihydro-4H-pyratsolo[3,4-d]pyrimi-din-4-oniksi), voihappoanhydridiä (1 ml) ja pyridiiniä (5 ml), hämmennettiin huoneen lämpötilassa 24 tunnin ajan. Liuokseen lisättiin vettä (20 ml) ja kun oli hämmennetty 2 tunnin ajan, saostuma kerättiin. Uu-5 delleenkiteytys etyyliasetaatista antoi 268 mg otsikon yhdistettä, jolla oli saraa sp. ja spektritiedot kuin esimerkin 19 mukaisesti syntetisoidulla yhdisteellä.

Esimerkki 24 10 2.5- bis(asetoksimetyyli)allopurinoli 15 0

II

R2 - R5 - CH3C-0CH2- [menetelmä (b)]

Yhdiste valmistettiin 2,5-dihydroksimetyyliallopurinolista ja etikka-20 happoanhydridistä esimerkissä 23 kuvatulla menettelyllä. Uudelleen-kiteytys etanolista antoi analyyttisesti puhtaan tuotteen 68 % saannolla, sp. 153-154°C.

Esimerkki 25 25 2.5- bis(DL-alanyylioksimetyyli)allopurinoli (dihydrobromidi) H3C 0

30 I II

R2 - Rj - H2NCH-C-0CH2- [menetelmä (b)]

Yhdiste valmistettiin 2,5-dihyroksimetyyliallopurinolista ja kaksinkertaisista määristä N-(bentsyylioksikarbonyyli)-DL-alaniinia, N,N'-35 disykloheksyylikarbodi-imidiä ja pyridiiniä oleellisesti samalla menettelyllä kuin esimerkissä 16 kuvattu. Uudelleenkiteytys metanoli- li « 83221 etyyliasetaatti-eetteristä antoi 16 % otsikon yhdistettä, sp. 190-192°C (haj.)· Yhdiste kiteytyi 0,5 moolin metanolia kera.

Esimerkki 26 5 1-[4-(N,N-dimetyyliamino)butyryyli]allopurinoli (hydrokloridi) 0 10 //

Rx - (CH3)2NCH2CH2CH2C- ; R5 - H [menetelmä (a)]

Yhdiste valmistettiin allopurinolista ja 4-(Ν,Ν-dimetyyli)-butyryyli-kloridin hydroklorista samalla menettelyllä kuin esimerkissä 20 ku-15 vattu. Yhdiste kiteytyi 1/3 moolin vettä kera eikä sulanut alle 270°C:n.

Esimerkki 27 20 1-(DL-fenyylialanyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrobromidi) 0 ilf 25 R, - C6H5CH2CH(NH2)C-OCH2- ; R5 - H [nenecelnd (b) ]

Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja N-(bentsyy-lioksikarbonyyli)-DL-fenyylialaniinista esimerkissä 16 kuvatulla menettelyllä. Analyyttisesti puhdas otsikon yhdiste kiteytyi 1/4 moolin 30 vettä kera metanolista, sp. 204-205°C (haj.).

’ Esimerkki 28 1-(L-leusyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrobromidi) 35 32 83221

O

I)

Rx - (CH3)2CHCH2CH(NH2)C-OCH2- ; Rj - H [menetelmä (b) ] 5 Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja N-(bentsyy-lioksikarbonyyli)-L-leusiinista oleellisesti samalla menettelyllä kuin esimerkissä 16 kuvattu. Analyyttisesti puhdas otsikon yhdiste kiteytyi metanoliasetonitriilistä 1 moolin vettä kera, sp. 215-217°C (haj.).

10 Esimerkki 29 1-(N-butyylikarbamoyyli)allopurinoli 15 0

II

Rx - CH3CH2CH2NHC- ; R5 - H [menetelmä (d)]

Allopurinolin (2,7 g; 20 mmoolia), trietyyliamiinin (0,2 ml) ja butyy-20 li-isosyanaatin (3 g, 30 mmoolia) seosta N,N-dimetyyliformamidissa hämmennettiin 90°C:ssa 2 tunnin ajan. Jäähdytettäessä saostui 1,05 g otsikon yhdistettä. Raakatuote uudelleenkiteytettiin N,N-dimetyylifor-mamidi-etanolista, sp. >270°C.

25 Esimerkki 30 1-[3-(N.N-dietyylikarbamoyyli)propionyylioksimetyyliJallopurinoli 30 0 0

Il II

Rx - (CH3CH2)2N-C-CH2-CH2-C-OCH2- ; Rs - H [menetelmä (b) ]

Seosta, jossa oli 1-hydroksimetyyliallopurinolia (1,47 g; 8,8 mrnoo-35 lia), 3-(N,N-dietyylikarbamoyyli)propionihappoa (1,53 g; 8,8 mmoolia), N,N'-disykloheksyyli-karbodi-imidiä (1,8 g; 8,8 mmoolia) ja 4-tolueeni- li 33 83221 sulfonihappoa (100 mg) pyridiinissä (30 ml), hämmennettiin huoneen lämpötilassa 24 tunnin ajan. Lisättiin metyleenikloridia (60 ml), seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin in vacuo. Jäännöstä uutettiin lämpimällä metyleenikloridilla (50 ml) ja metyleenikloridi haihdutet-5 tlin. Jäännös uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatista, jolloin saatiin 0,71 g (25 %); sp. 128-131°C.

Esimerkki 31 10 1-(glysyylioksimetyyli)allopurinoli (hydrokloridi) 15 0

(I

R: - H2NCH2C-0CH2- ; R5 - H [menetelmä (ö) ]

Yhdiste valmistettiin 1-hydroksimetyyliallopurinolista ja N-(tert.-20 butyylioksikarbonyyli)glysiinistä samalla menettelyllä kuin esimerkissä 16 kuvattu. Tert.-butyylioksikarbonyyli-suojaryhmä poistettiin 1 N kloorivetyhapolla. Otsikon yhdiste suli 192-195°C:ssa (haj.).

34 83221

Taulukko 1

Allopurinolin eri esilääkeaineiden *H NMR- ja UV-spektritiedot ja HPLC-kromatografiset tilavuustekijät 5 _

Kromato- λπ,«χ <nn) graafinen

Yhdiste ΧΗ NMR (δ) (puskurissa tilavuus- H(3) ja H(6) pH 5,0) tekijä (k') 10 _ 1-(asetyyli)allopurinolia 8.30 8.38 274 1.05c 1-(propionyyli)allopurinolia 8.30 8.37 274 0.66d 1-(butyryyli)allopurinoli8 8.32 8.40 274 1.10d 1-(bentsoyyli)allopurinolia 8.32 8.46 250,280(sh) 1.20d 15 1-(klooriasetyyli)allo- purinoli* 8.29 8.39 274 n.d.

1-(asetyylioksimetyyli)allopurinoli® 8.20 8.22 251 0.30d 1-(butyryylioksimetyyli)allo- 20 purinoli* 8.20 8.23 251 0.85d 1-pivaloyy1ioks ime tyyli)ailo- purinoli* 8.19 8.23 251 1.50d 1-(bentsoyylioksimetyyli)- allopurinoli* 8.45 8.49 234 2.00d 25 1-(nikotinoyylioksimetyyli)- allopurinoli® 8.41 8.48 251 0.67d 1-klooriasetoksimetyyli)- allopurinoli* 8.31 8.33 251 n.d.

1-(DL-alanyylioksimetyyli)- 30 allopurinoli15 8.38 8.42 251 1.37c 1-(DL-N,N-dietyylialanyyli- oksimetyyli)allopurinolib 8.36 8.45 251 17.lc 1-(N,N-dimetyyliglysyyli- oksimetyyli)allopurinolib 8.28 8.34 251 4.00c 35 1-(N,N-dietyyliglysyyli -oksimetyyli)allopurinolib 8.27 8.32 251 12.0°

II

35 83221

Taulukko 1 jatkuu 1-(N,N-dipropyyliglysyyli- 5 oksimetyyli)allopurinolib 8.34 8.40 251 >60c 1- 4-(Ν,Ν-dimetyyliamino)-butyryy1ioks ime tyyli) allopurinolib 8.29 8.35 251 n.d.

2- (butyryylioksimetyyli)allo- 10 purinoli* 8.06 8.78 261 0.65d 2-(pivaloyylioksimetyyli)- allopurinoli* 8.08 8.70 261 1.07d 1.5- bis(butyryylioksimetyyli)- allopurinoli* 8.28 8.62 251 4.82d 15 1,5-bis(pivaloyylioksimetyyli)- allopurinoli* 8.29 8.64 251 13.8d 2.5- bis(butyryylioksimetyyli)- allopurinoli* 8.40 8.82 259 3.37d 2.5- bis(pivaloyylioksimetyyli)- 20 allopurinoli* 8.41 8.85 259 9.9d : - 1-(Ν,Ν-dimetyyliglysyyli)- ·.; allopurinoli*3 8.45 8.46 279 n.d.

1-(glysyylioksimetyyli)allo- purinoli*3 8.27 8.32 251 0.89c 25 1-(etoksikarbonyylioksime-tyyli) allopurinoli* 8.24 8.28 251 n.d.

1-(DL-fenyyliglysyylioksime- tyyli)allopurinolib 8.15 8.20 n.d. n.d.

1-(sukkinyylioksimetyyli)- 30 allopurinoli* 8.23 8.25 251 n.d.

2.5- bis(asetyylioksimetyyli) - allopurinoli* 8.70 9.17 259 n.d.

. ·. 2,5-bis(DL-alanyylioksimetyy- li) allopurinoli*3 8.51 8.97 259 n.d.

35 1-(L-butyylioksimetyyli)allo- purinoli*5 8.32 8.36 251 0.80d 36 83221

Taulukko 1 j atkuu 1-(DL-fenyylialanyylioksime- tyyli)ailopur inolib 8.28 8.30 251 1.05d 5 _ a) NMR DMS0-d6: ssa b) NMR D20: ssa c) liikkuva faasi: 0,02 M fosfaattipuskuri pH 7,4 - metanoli (4:1 til./til.) 10 d) liikkuva faasi: 0,01 M asetaattipuskuri pH 4,5 - metanoli (1:1 til./til.) pylväs: 250 mm x 4 mm LiChrosorb RP-8 (Merck) n.d. — ei määritetty.

15 Aliopurinolijohdannaisten lohkeaminen in vitro

II

37 83221

Esitetyt viitteet:

Appelbaum, S.J., M. Mayersohn, D. Perrier & R.T. Dorr: Drug Intell. Clin. Pharm. 14, (1980), p. 789.

5

Appelbaum, S.J., M. Mayersohn, R.T. Dorr & D. Perrier: Cancer Chemot-her. Pharmacol. 8, (1982), p. 93.

Bansal, P.C., I.H. Pitman & T. Higuchi: J. Pharm. Sei. 70, (1981), p.

10 855.

Bergmann, F., Frank, A. 6c Neimann, Z.: J. Chem. Soc. Perkin Trans I, (1979), p. 2795.

15 Breithaupt, H. & M. Tittel: Eur. J. Clin. Pharmacol. 22, (1982), p. 77.

Bundgaard, H. & M. Johansen: Acta Pharm. Suec 18, (1981), p. 129.

20 Chang, S.-L., W.G. Kramer, S. Feldman, R. Ballentine & L.S. Frankel: : * Am. J. Hosp. Pharm. 38, (1981), p. 365.

: : Elion, G.B., A. Kovinsky, G.H. Hitchings, E. Metz 6c R.W. Rundles:

Biochem. Pharmacol. 15, (1966), p. 863.

25

Elion, G.B.: Handbook Exp. Pharmacol. 51, (1978), p. 485.

Hussain, A. 6cJ.H. Rytting: J. Pharm. Sci. 63, (1974), p. 798.

30 De Leede, L.G.J. &A.G. De Boer: Biopharm. Drug Disp. 2, (1981), p.

131.

: .·. De Leede, L.G.J. 6cA.G. De Boer, S.L. van Velzen 6c D.D. Breimer: J.

··. Pharmacokin. Biopharm. 10, (1982), p. 525.

35 38 83221 "Remington's Pharmaceutical Sciences", 16. painos (1980), Hack Publishing Company, Easton.

Spector, T.: Biochem. Pharmacol. 26, (1977), p. 355.

5 l:

Claims (12)

39 83221 Patent t ivaat imuks e t

1. Menetelmä kaavojen Ia tai Ib mukaisten lääkeaineina käyttökelpoisten 1-, 1,5- tai 2,5-substituoitujen 1,5-dihydro-4H-pyratsolo-[3,4-d]-5 pyrimidin-4-onien valmistamiseksi Co 1 · Cco * R, . 15 joissa Rx on jokin seuraavista ryhmistä: 0 II 20 a) -C-R3

0. Re n b) -C-(CH2)n - N

25 Rg : ‘: 0 • · N c) -C-NHR* 30 0 II ... d) -CH20-C-R3 0 H : : : e) -CH20-C-0R* 35 i? 40 83221 f) -CH20-C-(CH2)n - Re 5 0 II g) -CH20-C-CHR6-NH2 S ^R® h) -CH20-C'CHR7 - N

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(butyryylioksimetyyli)allopurinolin tai sen 35 suolan valmistamiseksi. Il « 83221

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(N,N-dimetyyliglysyylioksimetyyli)allo-purinolin tai sen suolan valmistamiseksi.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(N,N-dietyyliglysyylioksimetyyli)allo-purinolin tai sen suolan valmistamiseksi.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 10 että lähtöaineet valitaan 1-(N.N-dipropyyliglysyylioksimetyyli)allo- purinolin tai sen suolan valmistamiseksi.

5 O II e) -CHjO-C-OR, O R* f) -CHjO-C- (CHj), -

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(DL-N,N-dimetyylialanyylioksimetyyli)allo- 15 purinolin tai sen suolan valmistamiseksi.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(DL-N,N-dietyylialanyylioksimetyyli)allo-purinolin tai sen suolan valmistamiseksi. : 20

·.: 8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(L-fenyylialanyylioksimetyyli)allopurinolin tai sen suolan valmistamiseksi.

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(L-leusyylioksimetyyli)allopurinolin tai sen suolan valmistamiseksi.

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 30 että lähtöaineet valitaan 1-(L-valyylioksimetyyli)allopurinolin tai sen suolan valmistamiseksi. IV.

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 1-(DL-N,N-dimetyylifenyylialanyylioksimetyy-·.*: 35 li)allopurinolin tai sen suolan valmistamiseksi. 46 83221

10 R, O li g) -CHjO-C-CHR^-NHj

15. R, h) -CHjO-C-CHR, - ^ 8, O O »M 20 i) - CHjO - C - CHjCHjCHj - C - R, 3 1-hydroksiraetyyliallopurinolln λ "ύ? ch2-oh saattamisen reagoimaan kaavan (X')

30 R'u-CO-Z (X') mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R'12 on jonkun seuraavan kaavan mukainen ryhmä: R,, OR,, R'*R',N-(CHj)b- , HjN-CHR^, R'gR'^-CHR, tai R^COCHjCHjCHj-, jossa R,, R'g, R'9 ja R13 on määritelty kuten edellä, R, on alempi alkyyli, Re on vety, alempi alkyyli, fenyyli tai betsyyli 35 ja R, on vety tai alempi alkyyli ja n on 1-3; ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhraää, suojaryhmän poistaminen, tai li 43 83221 (b2) kaavan Ib mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Rj ja Rj ovat samoja ja valittu jonkun seuraavan kaavan mukaisesta ryhmästä 0 II 5 d) -CHjO-C-Rj f) -CHjO-C-iCHj). - N 10 o »I g) -CHjO-C-CHR^-NHj 0 ^R, ft / 15 h) -CHjO-C-CHR, - N 2,5-dihydroksimetyyliallopurinolin OH. o s 0Η,Υχι S^V^gh-oh z 25 saattamisen reagoimaan kaavan (X") R"l2-CO-Z (X") mukaisen ryhmän kanssa, jossa R"^ on Rj, R',R',N-(CH^,,-, HjN-CHRj- tai R'gR'^CHRj, jossa R,,R',,R',, n ja Rc on määritelty edellä, 30 ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhmää, suojaryhmän poistamisen, tai : : (c) kaavan Ia tai Ib mukaisten yhdisteiden, joissa R, tai R^ sekä R5 ·;* tarkoittaa kaavan 35 ** 83221 O (I -ch2o-c-r mukaista ryhmää, jossa R on alempi alkyyli, valmistamiseksi, allopu-5 rinolin saattamisen reagoimaan kaavan XII mukaisen yhdisteen kanssa

0 H Il t R12 - C - 0 - C - Z XII i R; 10 jossa R7 on vety, Z on halogeeni, edullisesti kloori ja R12 on alempi alkyyli, ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhmää, suojaryhmän poistamisen, tai 15 (d) kaavan I'a mukaisten yhdisteiden, tai kaavan Ib mukaisten yhdistei den, jossa R5 on vety ja Rx on 0 II -C-NHR* 20 valmistamiseksi, 1-hydroksimetyy1iallopurinolin saattamisen reagoimaan kaavan V" mukaisen yhdisteen 25 R* - N - C - O V" jossa R4 on edellä määritelty 30 ja tämän jälkeen haluttaessa, tulokseksi saadun kaavojen I'a ja Ib mukaisen yhdisteen muuttamisen suolakseen.

10. R9 0 0 n « i) -CH20-C-CH2CH2CH2-C-R13 15 jossa R3 on C1.8alkyyli, monohalogenisoitu C^alkyyli, fenyyli tai pyri-dyyli, R8 ja Rg ovat vety tai Cx_4 alkyyli; R13 on hydroksi tai ryhmä, jolla on kaava -NR8R9, jossa R8 ja Rg ovat edellä määritellyt; 20 R2 ja/tai R5 on jokin seuraavista ryhmistä 0 II d) -CH20-C-R3 ’·· 25

0 Ra f) -CH20-C-(CH2)n - N ^ R9 30 0 g) -CH20-C-CHR6-NH2 : 35 li 4i 83221 ,° * h) -CHjO-C-CHR, - N R, 5 sekä niiden suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää (a) kaavan I'a mukaisten yhdisteiden, joissa Rs on vety ja R, on kaavan 10

0 OR, Il II / -C-Rj mukainen ryhmä tai -C-iCHj),, - N , jossa R^R^R, ja n mer- ^*R. kitsee samaa kuin edellä, valmistamiseksi, allopurinolin .·.*! 20 H saattamisen reagoimaan kaavan XI mukaisen yhdisteen kanssa : 0 ^ Il

25 R,j - C - Z XI jossa Railia on sama merkitys kuin R,:lla tai kaavan R',R',N- (CHj). mukai-··.·' nen ryhmä, jossa R'g ja R', tarkoittavat samaa kuin R, ja R, tai se on aminoa suojaava ryhmä, joka on määritelty edellä; 30 ja Z on sellainen poistuva ryhmä, jota yleensä käytetään näissä yhteyksissä ja sitten, mikäli on käytetty aminon suojaryhmää, suojaryhmän :V poistaminen, tai 35 (b,) kaavan Ia mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jossa Rs on vety ja R, on jonkun seuraavan kaavan mukainen ryhmä 42 83221 O II d) -CHjO-C-Rj

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineet valitaan 2,5-bis(asetoksimetyyli)allopurinolin tai sen suolan valmistamiseksi. 5 II 47 83221