JPH01221364A - Ｈｉｖ逆転写酵素阻害剤および抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の治療薬な
どとして期待されるヒト免疫不全症ウィルス（ＨＩＶと
略す。）の逆転写酵素阻害剤および抗腫瘍剤に関するも
のである。

（従来の技術と月７決しようとする課題　）後天性免疫
不全症候群（ＡＩＤＳ）の原因であるＨＩＶはレトロウ
ィルスであり、その逆転写酵素は抗１−Ｉ　Ｉ　Ｖ物質
探索の標的の一つと考えられる。

既にアドリアマイシンなどが、トリ白血病ウィルスの逆
転写酵素を阻害することが知られている（文献：　Ｊｏ
ｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　４０巻３
９６−３９９．１９８７）が、それは強い毒性を示す。

そこでＩ−］　Ｉ　Ｖの逆転写酵素に対する阻害活性が
強く、細胞毒性の弱い新規な化合物の創製と開発が要望
されている。

（課題を解決するための手段　） 本発明者等は、上記の要望に応えるべ（研究を行ってい
る。そして、本発明者等は、下記の一般式（１）で示さ
れるアクリジン誘導体がＩＩＩＶの逆転写酵素阻害活性
が強く、細胞毒性がアドリアマイシンなどに比べ遥かに
弱い化合物であることを見いだし、本発明を完成した。

即ち、本発明は一般式 〔式中、Ｒはアルキレン基または下記式ル基またはアミ
ノ低級アルキレン基を示し、ｎで示されるアクリジン誘
、導また―その酸付加塩を有効成分とするＨＩＶ逆転写
酵素阻害剤および抗腫瘍剤に関するものである。

本発明において、Ｙの塩基性基としては塩基性の基であ
れば特に制限はないが、例えば−Ｎく七（式中、Ｒ３お
よびＲ４はそれぞれ水素原子、低級アルキル基、ω−ヒ
ドロキシ低級アルキル原子、アミノ基、低級アルキル基
またはフェニル基を示す。）などの基をあげることがで
きる。

本発明において、アルキル基としては例えばメチル基、
エチル基、プロピル基、ブチル基、イソブチル基、アミ
ル基、イソアミル基、ヘキ片 シル基、ヘプチル基、ケクチル基、ノニル基、デシル基
などのＣ１〜ＣＩＧの直鎖もしくは分枝のアルキル基を
あげることができる。

低級アルキル基としてはメチル基、エチル基、プロピル
基、ブチル基、イソブチル基、アミル基、イソアミル基
などのＣ１〜Ｃ５のアルキル基などをあげることができ
る。

アルキレン基としては直鎖でも分枝していてもよく、例
えば直鎖部分がＣ＋　”　Ｑ。のものがあげられる。例
えば−（ＣＨ２）　　、　　（ＣＨ２）２　　、　　（
ＣＨ２）３　　。

（ＣＨ２）４　　、　　（ＣＨ２）５　　、　　（ＣＨ
２）６−１（ＣＨ２）７　　。

（ＣＨ２）８　　、　　（ＣＨ２）９　　、　　（ＣＨ
ｚ）ｔｏ　　。

などがあげられる。

低級アルキレンとしては直鎖でも分枝して℃ごてもよく
、例えば直鎖部分がＣ＋−Ｃｓのものがあげられる。

ハロゲン原子としてはクロル原子、ブロム原子などがあ
げられる。

次に本発明で使用する一般式（１）における化合物を例
示すると次の通りである。

上記化合物のうち一般式ｎｉ 〔式中、川は低級アルキル基、Ｘはハロゲン原子、ｒｉ
はアルキレン基または−（アルキレン）−Ｎ−（低級ア
ルキレン＞　−＜　ｔ’ｚは低級アルキル基またはアミ
ン低級アルキル基を示す。）、但しＲがアルキレン基ま
たは−（アルキレン）−ＮＨ−（低級アルキレン）−の
とき、Ｙは−ＮＨ２以外の基を示す。〕 で表わされるアクリジン誘導体またはその酸付加塩は新
規化合物である。

本発明の化合物は、通常公知方法、例えばＪ、Ｃｈｅｍ
−８ｏｃ、、Ｃｈｅｍ、Ｃｏｍｍｕｎ、＋　（１９８０
）ｔ　１２９８−１３００などに記載の方法もしくはそ
れに準じて合成することができる。

即ち、−最大（ＩＩ） （式中、Ｒ，およびＸは前記と同じ意味を表わし、Ｘは
ハロゲン原子を意味する。）で表わされる２−アルコキ
シ−６，９−ジハロゲノアクリジンと一般式（１） ％式％ （式中、ＲおよびＹは前記と同じ意味を表わす。）で表
わされるアミンとを、該アミンが液体のときは通常この
アミンを溶媒とし、該アミンが固体もしくは液体でも他
の溶媒を併用した方がよいときは、不活性溶媒の存在の
下に、縮合させることによって得ることができる。縮合
は通常６０〜溶媒の沸点の範囲で加熱することによって
行うことができる。アミンは一般式（１）の化合物に対
して等モル以上好ましくは１．５モル〜２モル以上であ
る。

一般式（１）の化合物としては次のようなものなあげる
ことができる。

ｚ：：：ｒ、　　　＝：Ｉ： ＺＺＺ　　Ｚ　　Ｚ は、通常、前記−最大（１）で示されろアクリジン基ま
たはアミノ基、Ｘはアルコキシ、アリールオ置換アミジ
ンを不活性溶媒、好ましくはメタノール、エタノールな
どの低級アルコール、水、ジメチルホルムアミド（ＤＭ
Ｆ）などの中で反応させる乙により得ることができる。

反応は通常０°〜溶媒の沸点で行うことができるが好ま
しくは１０〜１００℃程度である。

−最大（ＩＶ）の化合物としては例えば下記のものが上
記縮合反応によって得られる一般式（１）の化合物は必
要に応じてクロマトグラフィー処理、溶媒抽出など一般
的に公知な方法を用いて分離精製を行うことができる。

一般式（１）の化合物は酸と塩を形成し、通常塩酸塩な
どの薬理学上許容される塩の形で使用される。

前記−最大（１）の化合物をＨＩＶ逆転写酵素阻害剤も
しくは抗腫瘍剤として用いるときは、−最大（１）の化
合物をそのまま、もしくは医薬用担体とともに製剤化し
て用いることができる。

製剤中における一般式（１）の化合物の含量は製剤によ
り種種異なるが、通常０．Ｏ１〜１００重量％通常０．
１〜９０％、好ましくは１〜７０重量％であり、残部は
通常医薬品に使用される担体その他の補助剤からなる。

一般式（１）の化合物の毒性は細胞毒性で、いずれの化
合物も１．Ｃｓｏはおおよそ０．３以上でアドリアマイ
シンに比して十分の−り下と小さい。

次に本発明の製剤例を示す。

製剤例１゜ 化合物（１）の塩酸塩３０重量部に対し精製水を加え全
量を２０００部としてこれを溶解後ミリポアフィルター
ＧＳタイプを用いて除菌濾過する。

このＦ液２ｇをｔｏｍｔのバイアル瓶にとり凍結乾燥し
、１バイアルに化合物（１）の塩酸塩３０■を含む凍結
乾燥注射剤を得た。

（作用） 次に一般式（１）の化合物のＨＩＶ逆転写酵素阻害活性
ならびに細胞毒性の評価試験について以下に記載する。

（イ）　　ＨＩＶ逆転写酵素阻害活性 ＨＩＶ感染細胞培養上清を９．５％ポリエチレングリコ
ールで３時間処理した後、遠心分離して２．５　ｘ　１
０　ＰＦＵ／ｍｌのＩ−Ｉ　Ｉ　Ｖ溶解液〔３３，３％
グリセロール、１６．７　ｍＭ　トリス−ＨＣＬ　（ｐ
Ｈ７、５）、　　５　３　３　　ｍＭＫ（Ｊ　、　０．
３２　％　ト　リ　ト　７Ｘ−１００，３，３ｍＭジチ
オツレイト−Ａ／に溶解〕を調製した。このように調製
されたＨＩＶ溶解液の逆転写酵素活性はウサギ−β−グ
ロビンｍＲＮＡを鋳型、オリゴｄＴをブライマーとした
場合のＤＮＡ合成を〔α　Ｐ　）　ｄＡＴＰの取り込み
率によって測定した。すなわち１１ＬｔのＨＩＶ溶解液
９１Ｌｔの酵素反応液（５０ｍＭ）リス−ＨＣｔ（ｐＨ
８，３）、７０　ｍＭＫｃｔ、　１０　ｍＭＭｇＣ２２
，３０ｍＭメルカプトエタノール、９０　ｎＭ　ｄＮＴ
Ｐｓ３．３　μｇ　／ｍｌ　オリゴｄＴ、　８．１　ｍ
Ｕ　／ｍｌヒト胎盤ＲＮａｓｏインヒビター、５μｇ／
ｍｌβ−グロビンｍＲＮＡ、　０．１４　ｍＣｉ　／ｍ
ｌ、　（α　Ｐ　’）　ｄＡＴＰ）に加え３７℃で３０
分間保温した後、１０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を加
えて反応を停止させた。

反応終了後は全反応液をニトロセルロースフィルターに
載せて生成りＮＡを吸着させ、５％ＴＣＡ１２０　ｍＭ
ビロリン酸ナトリウムで洗浄して未反応〔α　Ｐ　］　
ｄＡＴＰを除去した。ニトロセルロースフィルター上の
生成りＮＡ量は放射能を測定して算出した。

酵素反応液に一般式（１）の化合物を加え、Ｉ　Ｃｓｏ
を測定した結果を、アドリアマイシン（ＡＤＭと略す）
のそれと比較して第２表に示す。

（ロ）細胞毒性 ５Ｘ１０３個のマウスのリンパ性白血病細胞Ｐ−３８８
に本発明の新規アクリジン誘導体を加え、撹拌後に培養
した。４８時間後の細胞増殖度をＭＴＴ法により測定し
た。本発明の新規アクリジン誘導体のＩ　Ｃｓｏ値をア
ドリアマイシン（ＡＤＭ　）のそれと比較して第２表に
示す。

さらに、本発明の新規アクリジン誘導体のＨＩＶ逆転写
酵素阻害活性と細胞毒性の比を、ＡＤＭのそれと比較し
て第２表に示す。

第２表 次に一般式（１）の化合物の製造例を示す。

製造例１゜ ２７メトキシー６．９−ジクロロアクリジン３．５にト
ルエン５０ｍ１を加えて５０ｍ１の水で４回洗った。ト
ルエン相を分離し濃塩酸を加えると化合物’！ｔ　ｌ　
３　（ＡＰＭＰ）の黄色結晶が析出した。メタノ−δ８
．５６　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝９　）、　７．４〜８．１
　（５Ｈ，ｍ）。

４．３５　（２Ｈ，ｔ、　Ｊ＝８　）、　４．０６　（
３Ｈ，ｓ、　ＯＣＨ，）。

２．８〜３．８　（６Ｈ，ｍ　）、　２．９５　（３Ｈ
，ｓ、　Ｎ−ＣＨａ）。

１．９〜２．８　（４Ｈ，ｍ　） εの他の物性値に関しては、本実施例と同様にし〔得ら
れた化合物の物性値とともに第３表に示す。

（注１）　　Ａニブロバノール３：１０％蟻酸アンモン
ＩＢ：トルエン４０：メタノール１９　：　ＮＨ４ＯＨ
ｔＣニゲロバノール４０：ビリジン１０：酢酸３：水１
２製造例２゜ 化合物Ｎ［Ｌ２（ＡＰ）５９．４■とエチル・フォルム
イミデート塩酸塩５９．３■を５　ｍｔのメタノールに
溶解し、良く撹拌しながら９６．８μｐのトリエチルア
ミンを加えて室温にて１時間反応させる。反応液を減圧
下に濃縮し、１％酢酸を含むメタノールで充填した１０
０ＭＬセファデックスＬＨ−２０のカラムにそそぎ、１
％酢酸を含むメタノールで展開する。溶出液を５ｇずつ
集める。１３−１５番の分画を集めて減圧下に濃縮しア
ルカリ性にし、酢酸エチルで抽出する。

酢酸エチル層を乾固し、残香にＩ　ＮＨＣ７０，５ｍｌ
を加え乾固した。エタノールから再結晶して化合物崗１
０　（ＦＩＰ）の黄色結晶１６．８■を得た。

ＮＭＲ：　（６，０ＭＨｚ　、　ＣＤｓ　＝　ＯＤ　）
δ８．５５　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝９　）、　７．４〜８
．１　（６Ｈ，ｍ）。

４．３０　（２Ｈ，ｔ、　Ｊ＝７　）ｔ　４．０６　（
３Ｈ，Ｓ、０ＣＨ３）。

３．５５　（２Ｈ，ｔ、’　Ｊ＝７　）ｔ　２．３７　
（２Ｈ，ｍ）その他の物性値は、同様にして得た化合物
とともに第４表に・示す。

第４表 （注ｔ）Ａニブロバノール３：１０％蟻酸アンモンｌＢ
：トルエン４０：メタノール１９　：　ＮＨ４０）］　
ＩＣ＝グＩＣニブロバノール４０：ビリジン１３：水１
２（発明の効果） 一般式（１）の化合物は優れた逆転写酵素阻害作用を有
し、細胞毒性がアトレアマイシンなどに比して著じるし
く少な（ＡＩＤＳの治療薬などとして期待される。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒはアルキレン基または下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿２またはＲ′＿２は水素原子、低級アルキ
   ル基またはアミノ低級アルキル基を示し、ｎは０または
   １の整数を示す。）で表わされる基、Ｒ＿１は低級アル
   キル基、Ｘはハロゲン原子、Ｙは塩基性基を示す。〕 で示されるアクリジン誘導またはその酸付加塩を有効成
   分とするＨＩＶ逆転写酵素阻害剤および抗腫瘍剤に関す
   るものである。
2. （２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＿１は低級アルキル基、Ｘはハロゲン原子、
   Ｒ′はアルキレン基または▲数式、化学式、表等があり
   ます▼（Ｒ″＿２は低級アルキル基またはアミノ低級ア
   ルキル基を示す。）、Ｙは−ＮＨ＿２、▲数式、化学式
   、表等があります▼、▲数式、化学式、表等があります
   ▼、▲数式、化学式、表等があります▼を示す。但しＲ
   がアルキレン基のとき、Ｙは−ＮＨ＿２以外の基を示す
   。〕 で表わされる新規アクリジン誘導体またはその酸付加塩