FI82250C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva 6-(1-hydroxietyl)-2-azacykloalkyl(alkylen)tio- 2-penem-3-karboxylsyrafoereningarna. - Google Patents

Description

1 82250

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 6-(1-hydroksietyy-li )-2-atsasykloalkyyli( alkyleeni )tio-2-peneemi-3-karbok-syylihappoyhdisteiden valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää bakteerien vastais ten uusien yhdisteiden valmistamiseksi, joissa on 2-atse-tidinoni- eli laktaamirengas. Kemiallisesti tämän keksinnön mukaisesti valmistetut bakteerien vastaiset yhdisteet identifioidaan 2-substituoituina 6-a-(1-hydroksietyyli)-10 2-peneemi-3-karboksyylihappoyhdisteinä.

Vaikkakin aikaisemmin on esitetty tiettyjä 2-subs-tituoituja 2-peneemi-3-karboksyylihappoyhdisteitä, jatkuvasti esiintyy tarvetta uusista yhdisteistä, joilla on toivottavia bakteerien vastaisia terapeuttisia ominaisuuk-15 siä.

Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetaan uusia yhdisteitä, joilla on kaava I

OH

20 T H

H.....I-:._U S^-SB !

H3C Γ T

A-N-

C02H

25 tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja; jossa kavaassa R on 30 35 2 2 82250 jossa A on alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia, alkylee-ni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia ja jonka yhdessä hiiliatomissa on okso-substituentti, tai alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia ja jonka yksi metyleeniryhmä on korvattu ha-5 peliä tai rikillä; B on karbonyyli tai metyleeni; R2 on vety, formyyli tai alkyyli, jossa on 1 - 4 hiiliatomia; alk on alkyleeni, jossa on 1 - 4 hiiliatomia; ja n on 0 10 tai 1; edellyttäen, että kun B on metyleeni ja A on alkyleeni, jossa on 2-4 hiiliatomia, alkyleeni, jossa on 2-4 hiiliatomia ja jonka yhdessä hiiliatomissa on okso-substituentti, joka hiiliatomi ei ole ryhmän R typpiatomin vierei-15 nen hiiliatomi, tai alkyleeni, jossa on 2-4 hiiliatomia ja jonka metyleeniryhmä on korvattu hapella tai rikillä, niin R2 on formyyli.

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat yhdisteet, joissa A on alkyleeni, B on karbonyyli, R2 on vety 20 tai metyyli ja n on 0. Erityisen edullisia ovat yhdisteet, joissa R on 2-pyrrolidon-3-yyli, 2-pyrrolidon-4-yyli, pi-peridin-2-on-3-yyli, l-metyylipiperidin-2-on-3-yyli tai 2-piperidon-5-yyli.

Edullisia ovat myös yhdisteet, joissa A on alkylee-25 ni, B on metyleeni, R2 on formyyli ja n on 0. Erityisen edullinen on yhdiste jossa R on l-formyyli-3-pyrrolidinyy-li tai l-formyylipiperidin-3-yyli.

Edullisia ovat edelleen yhdisteet, joissa A on karbonyylietyleeni tai karbonyylipropyleeni, B on karbo-30 nyyli, R2 on vety tai metyyli, edellyttäen, että A:n ety-leeni tai propyleeni on sitoutunut B:hen; erityisesti yhdisteet, joissa Rx on vety ja R on pyrrolidin-2,5-dion-3-yyli·

Edullisia ovat lisäksi yhdisteet, joissa A on 35 1-oksa-alkyleeni, B on karbonyyli R2 on vety tai metyyli

II

3 82250 ja n on 1, edellyttäen, että 1-oksa-alkyleenin happi on sitoutuneena B:hen; erityisesti yhdisteet, joissa Rx on vety ja R on (3-metyyli-l,3-oksatsolidin-2-on-4-yyli) metyyli, (3-metyyli-l,3-oksatsolidin-2-on-5-yyli)metyyli, 5 (1,3-oksatsolidin-2-on-4-yyliJmetyyli, tai (1,3-oksatsoli- din-2-on-5-yyli)metyyli.

Tämän keksinnön piiriin sisältyy yhdisteiden valmistus, joissa A on 1-oksa-alkyleeni ja B on karbonyyli, R2 on vety tai metyyli ja n on 0; erityisesti kun Rx on vety 10 ja R on 3-metyyli-perhydro-l,3-oksatsolidin-2-on-5-yyli.

Tämän keksinnön piiriin sisältyy myös yhdisteiden valmistus, joissa A on 1-tia-alkyleeni, B on karbonyyli, R2 on vety, tai metyyli ja n on 1; erityisesti kun Ri on vety ja R on (1,3-tiatsolidin-2-on-4-yyli)metyyli.

15 Tämän keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan käyttää farmaseuttisissa koostumuksissa, jotka sisältävät kaavan I mukaista yhdistettä ja farmaseuttisesti hyväksyttävää laimenninta tai kantajaa; ja niitä voidaan käyttää menetelmässä nisäkkään bakteeri-infektion 20 hoitamiseksi, jolloin nisäkkäälle annetaan bakteerien vastaisesti tehoava määrä kaavan I mukaista yhdistettä.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia bakteerien vastaisina aineina, ja ne ovat bisyklisen rakenteen johdannaisia, jonka kaava on 25 δ—-''X 2

I I «“N

A_N - 3 O 4 30

Kaavan III mukaisesta rengasrakenteesta käytetään tässä selityksessä kauttaaltaan nimitystä ”2-peneemi", ja rengasatomit on numeroitu esitetyllä tavalla. Rengashii-35 leen 6 sitoutuneelle hiiliatomille annetaan numero 8.

4 82250

Niinikään kauttaaltaan tässä selityksessä lyhenteellä "PNB" tarkoitetaan p-nitrobentsyyliryhmää.

Kaavan I mukaisissa yhdisteissä sillanpäähiiliato-missa 5 oleva vety ja hiilessä 6 jäljellä oleva vety voi-5 vat olla toisiinsa nähden cis- tai trans-konfiguraatiossa. Tämän keksinnön piiriin sisältyvät molemmat isomeerit samoin kuin niiden seokset. Farmaseuttisissa sovellutuksissa trans-isomeeri on yleensä ensisijainen ja cis-isomeeri on helposti muutettavissa trans-isomeeriksi.

10 Yleensä 5-aseman hiilellä on absoluuttinen stereo- kemia, josta käytetään merkintää R käytettäessä Prelog-Ingold'in R,S-stereokemiallista merkitsemistapaa, jota käytetään tässä patenttihakemuksessa. Täten esimerkiksi kaavan I mukaisesta yhdisteestä, jossa Rx on vety ja R on 15 2-pyrrolidon-3-yyli, käytetään nimitystä (5R,6S-6-[(R)-l-hydroksietyyli]-2-(2-pyrrolidon-3-yyli)tio-3-karboksyyli-2-peneemi.

Kuten on ymmärrettävää, uusien yhdisteiden erilaiset optisesti aktiiviset isomeerit ovat mahdollisia. Tämä 20 keksintö käsittää tällaisten optisesti aktiivisten isomeerien samoin kuin niiden seosten valmistamisen.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että yhdisteestä, jolla on kaava 25

OH

T H

Hitin C, J

f ·'. ^SR

30 C02R4 jossa R on edellä määritelty ja R4 on p-nitrobentsyyli, poistetaan hydraamalla ryhmä R4, ja haluttaessa muutetaan 35 saatu kaavan I mukainen yhdiste farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolakseen.

Il 5 82250

Keksinnön mukaisessa menetelmässä käytettäviä lähtöaineita ja kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan synte-soida kaavioiden A-C mukaisesti.

Kuten kaaviossa A on esitetty, kaavan I mukaista 5 yhdistettä voidaan valmistaa Yoshida et ai.:n menetelmällä, [Chem. Pharm, Bull., 29, (1981) ss. 2899-2909] tunnetusta kaavan IV mukaisesta dibromipenaamiyhdisteestä. Di-bromipenaami (IV) ja t-butyylimagnesiumkloridin välillä tapahtuu vaihtoreaktio lämpötilan ollessa välillä noin 10 -90°- -40°C, edullisesti noin -78°C, reaktion suhteen iner- tissä liuottimessa kuten terahydrofuraanissa, dietyyli-eetterissä tai tolueenissa, edullisesti tetrahydrofuraanissa. Muitakin metalliorgaanisia reagensseja voidaan käyttää. Muodostunutta reaktioseosta käsitellään in situ 15 sopivan aldehydin, esim. asetaldehydin kanssa 1-hydroksi-etyyli-johdannaista valmistettaessa. Aldehydi lisätään lämpötilan ollessa välillä noin -80° - -60°C, edullisesti noin -78°C, asetaldehydiä käytettäessä.

Saatu bromihydroksipenaami V hydrataan 6-bromi-20 substituentin poistamiseksi. Sopiva hydrauskatalyytti on jalometallikatalyytti kuten palladium. Reaktio suoritetaan proottisessa liuottimessa, kuten metanoli-vesiseoksessa (1:1) tai tetrahydrofuraani-vesi-seoksessa (1:1), edullisesti metanoli-vesi-seoksessa (1:1), noin 1-4 ilmakehän, 25 edullisesti 4 ilmakehän paineessa ja lämpötilan ollessa välillä noin 0 - 30°C, ensisijaisesti noin 25°C.

I' 6 82250

Kaavio A

Br HO B

O co2ch3 o '*co2ch3 IV v ’PO* 0 \ 'C02ch3

VI

f 1

Rg-Sio I /"»•in t / · /y C0oCH,

VII ^ J

i f t

Rq-SiO Rn-SiO

/ /-·-]—0AC , / /*·~"·ι—.

*’ R9 /"V" C02ch3

IX VIII

7 82250

Kaavio B

f» I § IX -> R9-fi0V -^S-C-SR10 R9

X

** f» i

^f1? Ro-SiO S

^rTT10 «— ^'rrr--

-lc°2™ 0^-VrCo2MB

XII

XI

. J

I9 f9

R9-9i° O Rg-SiO

[l-i—r^V'8*10 P I 1—S"T"SR

’P-K —

o 002PNB o COjPNB

XIII XIV

HO

<—/V^V" —n-n

O C02PNB

XV

8 82250

Kaavio C

f9

IX -^ R9-SiO S

K\ li

Juutut j "-S-C—SR

XVA

R ^ |9 ?9 R9“f1? § Rq—SiO e ’j3-r H Ä-

° CO,PNB I

C02PN3 XVII XV1 f9 I s ' T If

R9“SlO s-C-SR

I -1 R9 J,_n „ %

fj ^ XIV

0 C02PNB XVI12 9 82250

Muodostunut kaavan VI mukainen alkoholi voidaan suojata trialkyylihalogeenisilaanilla, jonka kaava on R9 9 *

5 R -Si-Q

jossa kukin R, on alkyyli, jossa on 1-6 hiiliatomia, ja Q on kloori, bromi tai jodi. Täten dimetyyli-t-butyylikloo-10 risilaani muodostaa amiiniprotoniakseptorin, kuten imidat- solin läsnäollessa polaarisessa, aproottisessa liuottimes-sa, kuten N,N-dimetyyliformamidissa, lämpötilan ollessa välillä noin 5 - 40°C, edullisesti noin 25°C, hydroksyylin trialkyylisilyylisuojaryhmän, kuten on esitetty kaavassa 15 VII.

Käsiteltäessä yhdistettä VII elohopea-asetaatin kanssa etikkahapossa noin 90°C:n lämpötilassa saadaan ole-fiini VIII.

Halutun atsetidinonin IX saamiseksi olefiini VIII 20 otsonoidaan reaktion suhteen inertissä liuottimessa kuten dikloorimetaanissa lämpötilan ollessa välillä noin -80 --40°C, edullisesti noin -78°C. Reaktiotuotetta käsitellään alkanolin kuten metanolin kanssa, jolloin saadaan atseti-diini IX.

25 Kuten kaaviossa B on esitetty, kaavan IX mukaista yhdistettä käsitellään kaavan M*R10-S-C( S )-S' mukaisen tri-tiokarbonaattisuolan kanssa, jossa kaavassa R10 on alkyyli, jossa on 1-4 hiiliatomia, edullisesti etyyli, ja M on metalli kuten natrium- tai kalium, jolloin saadaan kaavan X 30 mukainen yhdiste. Tämä konversio IX -+ X suoritetaan orgaanisessa liuottimessa tai vedessä, edullisesti veden ja dikloorimetaanin seoksessa, lämpötilan ollessa noin 0 -35°C, ensisijaisesti noin 25°C.

Kaavan X mukainen yhdiste kondensoidaan p-nitro-35 bentsyylikloorioksalaatin kanssa tertiäärisen alkyyliamii-nin, jonka kussakin alkyylissä on esimerkiksi 1-4 hiili- 10 82250 atomia, kuten etyyli-di-isopropyyliamiinin läsnä ollessa, jolloin saadaan kaavan VI mukainen yhdiste. Tämä konden-sointireaktio suoritetaan reaktion suhteen inertissä liuottimessa, edullisesti dikloorimetaanissa, lämpötilan 5 ollessa noin 5-25 °C, edullisesti noin 10°C.

Saatu kaavan XI mukainen yhdiste syklisoidaan käyttämällä trialkyylifosfiittia, jonka kussakin alkyylissä on 1-4 hiiliatomia, kuten trietyylifosfiittia, reaktion suhteen inertissä liuottimessa, kuten trikloorimetaanissa, 10 lämpötilan ollessa noin 40 - 80°C, edullisesti noin 60°C, jolloin saadaan kaavan XII mukainen peneemi.

Yhdisteen XII tioryhmä hapetetaan vastaavaksi sul-foksidiksi XIII hapettavalla aineella kuten m-klooriper-bentsoehapolla, reaktion suhteen inertissä liuottimessa, 15 kuten dikloorimetaanissa, lämpötilan ollessa noin -10 --30°C, edullisesti -20°C.

Kaavan XIII mukaisen yhdisteen sulfoksidi substi-tuoidaan kaavan R-S' mukaisella merkaptidilla käyttämällä esimerkiksi sopivan merkaptidin natrium- tai kaliumsuolaa, 20 jonka annetaan reagoida sulfoksidin XIII kanssa polaarisessa orgaanisessa liuottimessa, kuten etanolissa tai ase-tonitriilissä, lämpötilan ollessa noin -10 - -50°C, edullisesti noin -35°C.

Kaavan R-SH mukaiset lähtöainemerkaptaanit tai kaa-25 van R-S-C(0)CH3 mukaiset lähtöainetioasetaatit ovat tunnet tuja monien R:n merkitysten osalta ja niitä, joita ei tunneta, voidaan valmistaa alalla tunnetuin menetelmin. Yleissilmäyksen luomiseksi katso J.L. Wardell, "Preparation of Thiols", julkaisussa The Chemistry of the Thiol 30 Group, toim. S. Patai, John Wiley & Sons, London, 1974, Osa 4. Katso myös Volante, Tetrahedron Letters, 22, (1981) s. 3119-3122, koskien alkoholien muuttamista tioleiksi ja tioliestereiksi käyttämällä trifenyylifosfiinia ja di-alkyyliatsodikarboksylaattia alkoholin ja sopivan tioli-35 hapon läsnäollessa.

li 11 82250

Kaavan XIV mukaisista yhdisteistä poistetaan edullisesti trialkyylisilyyliryhmä ennen hydrogenolyysiä hap-posuojaryhmän (PNB) poistamiseksi, jolloin saadaan kaavan XV mukaista yhdistettä. Trialkyylisilyyliryhmä poistetaan 5 tetra-alkyyliammoniumfluoridin kanssa eetteri-liuottimes-sa, kuten tetrahydrofuraanissa, lämpötilan ollessa noin 15 - -40°C, edullisesti noin 25°C.

Kaavan XV mukaisen yhdisteen konversio kaavan I mukaisesti yhdisteeksi suoritetaan käyttämällä tavallista 10 hydrogenolyysireaktiota, ja se suoritetaan tavalliseen tapaan, jota tämän tyyppisessä muuntamisessa käytetään. Täten kaavan XV mukaisen yhdisteen liuosta sekoitetaan tai ravistellaan vetyatmosfäärissä, tai vetyatmosfäärissä, johon on sekoitettu inertissä laimenninta, kuten typpeä 15 tai argonia, jolloin läsnä on katalyyttinen määrä jalome-tallihydrauskatalyyttiä, kuten palladiumia kalsiumkarbo-naatilla tai palladiumia Celitellä (piimaalla). Sopivia tässä hydrogenolyysissä käytettäviä liuottimia ovat alemmat alkanolit, kuten metanoli; eetterit, kuten tetrahydro-20 furaani ja dioksaani; alhaisen molekyylipainon omaavat esterit, kuten etyyliasetaatti ja butyyliasetaatti; vesi; ja näiden liuottimien seokset. Tavallisesti valitaan kuitenkin olosuhteet, joissa lähtöaine liukenee, kuten esim. tetrahydrofuraanin vesiliuos. Hydrogenolyysi suoritetaan 25 tavallisesti huoneen lämpötilassa paineen ollessa noin 0,5 - noin 5 kg/cm2. Katalyyttiä on tavallisesti läsnä noin 10 paino-%:sta lähtöaineen määrästä enintään lähtöaineen painoa vastaavaan määrään, joskin suurempiakin määriä voidaan käyttää. Reaktio kestää tavallisesti noin tunnin, 30 minkä jälkeen kaavan I mukainen yhdiste otetaan talteen, yksinkertaisesti suodattamalla, minkä jälkeen liuotin poistetaan vakuumissa. Jos katalyyttinä käytetään palladiumia kalsiumkarbonaatilla, tuote eristetään kalsiumsuo-lana, ja jos käytetään palladiumia Celitellä, tuote eris-35 tetään natriumsuolana.

i2 82250

Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan puhdistaa tavanomaisin β-laktaamiyhdisteiden puhdistusmenetelmin. Kaavan I mukainen yhdiste voidaan puhdistaa esimerkiksi geelisuodattamalla Sephadexilla, tai uudelleenkiteyttä-5 mällä.

Vaihtoehtoinen synteettinen menetelmä on esitetty kaaviossa C. Kaavan IX mukaisen atsetidiinin annetaan reagoida kaavan M+R-S-C(S)-S" mukaisen tritiokarbonaatin kanssa, jossa kaavassa M on metalli, kuten natrium tai kalium, 10 käyttämällä aikaisemmin selostettua menetelmää yhdisteen X valmistamiseksi.

Saatua tritiokarbonaattia XVA käsitellään (p-nitro-bentsyylioksikarbonyyli)(dihydroksi)metaanin kanssa ap-roottisessa liuottimessa, kuten bentseenissä, tolueenissa 15 tai dimetyyliformamidissa, edullisesti bentseenissä, läm pötilan ollessa noin 25 - 110°C, edullisesti noin 80°C, jolloin saadaan kaavan XVI mukainen alkoholi.

Vastaava kloridi XVII valmistetaan alkoholista XVI käsittelemällä tätä tionyylikloridin kanssa reaktion suh-20 teen inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten dikloorime-taanissa happoakseptorina toimivan estyneen amiinin kuten 2,6-lutidiinin läsnäollessa, lämpötilan ollessa noin -10 -75°C, edullisesti 0°C.

Kloridin XVII annetaan reagoida triaryylifosfiinin, 25 kuten esim. trifenyylifosfiinin kanssa reaktion suhteen inertissä liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, terti-äärisen amiinin, kuten 2,6-lutidiinin läsnäollessa lämpötilan ollessa noin 25°C, jolloin saadaan kaavan XVIII mukainen yhdiste, joka syklisoidaan refluksoimalla aromaat-30 tisessa liuottimessa, kuten tolueenissa, jolloin saadaan kaavan XIV mukainen peneemi.

Kaavan M*R-S-(C=S)-S" mukaisia tritiokarbonaatti-suoloja valmistetaan sopivasta kaavan R-SH mukaisesta mer-kaptaanista tai käsittelemällä kaavan RSC(0)CH3 mukaista 35 tioasetaattia alkalimetallialkoholaatin kanssa ja sen jälkeen rikkihiilen kanssa.

Il ia 82250 Käyttämällä aikaisemmin mainittua Yoshida et ai.:n menetelmää stereokemia peneemin hiilen 6 samoin kuin hiileen 6 sitoutuneen hydroksietyyliryhmän osalta on kaavassa I esitetty. Täten olennainen stereokemia renkaan sulkemis-5 tuotteen osalta käytettäessä kaavioita B tai C on sellainen, jossa peneemirenkaan 5-asemassa oleva vety on trans-asennossa hiilessä 6 olevaan vetyyn nähden ja a-konfigu-raatiossa. Vaihtoehtoisesti stereokemiallinen rakenne voidaan esittää muodossa 5R, 6S; 6-(R)-l-hydroksietyyli.

10 Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat happamia ja muo dostavat suoloja emäksisten aineiden kanssa. Sellaisten suolojen katsotaan kuuluvan tämän keksinnön piiriin. Näitä suoloja voidaan valmistaa vakiomenetelmin, kuten saattamalla happamet ja emäksiset aineosat kosketuksiin tois-15 tensa kanssa tavallisesti stökiometrisessä suhteessa, vesipitoisessa, vedettömässä tai osittain vesipitoisessa väliaineessa, kuten sopivaksi katsotaan. Ne otetaan sen jälkeen talteen suodattamalla, saostamalla liuottamatto-malla liuottimena ja suodattamalla sen jälkeen, haihdut-20 tantalla liuotin, tai vesiliuosten ollessa kysymyksessä, kylmäkuivaamalla, kuten sopivaksi katsotaan. Emäksiset aineet, jotka soveltuvat käytettävksi suolan muodostamiseen, ovat tyypiltään joko orgaanisia tai epäorgaanisia, ja niitä ovat ammoniakki, orgaaniset amiinit, alkalimetal-25 lihydroksidit, -karbonaatit, -vetykarbonaatit, -hydridit ja -alkoholaatit, samoin kuin maa-alkalimetallihydroksi-dit, -karbonaatit, -hydridit ja -alkoholaatit.

Edustavia esimerkkejä sellaisista emäksistä ovat primääriset amiinit, kuten -n-propyyliamiini, -n-butyyli-30 amiini, aniliini, sykloheksyyliamiini, bentsyyliamiini ja oktyyliamiini; sekundääriset amiinit, kuten dietyyliamii-ni, morfOliini, pyrrolidiini ja piperidiini; tertiääriset amiinit, kuten trietyyliamiini, N-etyylipiperidiini, N-metyylimordoliini ja 1,5-diatsabisyklo[4,3,0]non-5-eeni; 35 hydroksidit, kuten natriumhydroksidi, kaliumhydroksidi, ammoniumhydroksidi ja bariumhydroksidi; alkoholaatit, ku- i4 82250 ten natriumetylaatti ja kaliumetylaatti; hydridit, kuten kalsiumhydridi ja natriumhydridi; karbonaatit, kuten kaliumkarbonaatti ja natriumkarbonaatti; vetykarbonaatit kuten natriumvetykarbonaatti ja kaliumvetykarbonaatti; ja 5 pitkäketjuisten rasvahappojen alkalimetallisuolat, kuten natrium-2-etyyliheksanoaatti.

Edullisia kaavan I mukaisten yhdisteiden suoloja ovat natrium-, kalium- ja kalsiumsuolat.

Farmaseuttisesti hyväksyttäviä kaavan I mukaisten 10 yhdisteiden suoloja ovat suolat, joilla ei ole merkittävän haitallisia sivuvaikutuksia tavallisesti käytettävinä määrinä ja niitä ovat esim. niiden natrium-, kalium- tai kalsiumsuolat.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden ja niiden suolojen 15 bakteerien vastainen vaikutus in vitro voidaan osoittaa määrittämällä niiden pienimmät inhiboivat konsentraatiot (MIC-arvot) yksikköinä pg/ml erilaisia mikro-organismeja vastaan. Noudatettava menetelmä on menetelmä, jota suosit-telee International Collaborative Study on Antibiotic Sen-20 sitivity Testing (Ericcson ja Sherris, Acta. Pathologica et Microbiologia Scandinav, Supp. 217, Section B, (1971) s. 64-68 ja jossa käytetään aivosydäninfuusio (BHI)-agaria ja rokotteen toistavaa laitetta. Yön ajan inkuboidut putket laimennetaan 100-kertaisesti käytettäviksi standardi-25 rokotteena (20000-10000 solua suunnilleen 0,002 ml:ssa pannaan agar-pinnalle; 20 ml BHI-agaria/malja). Käytetään kahtatoista 2-kertaista koeyhdisteen laimennusta koeyhdis-teen alkukonsentraation ollessa 200 pg/ml. Yksittäiset pesäkkeet jätetään huomioonottamatta tutkittaessa levyt 30 sen jälkeen, kun niitä on pidetty 18 tuntia 37°C:ssa. Koe-organismin herkkyydeksi (MIC) katsotaan yhdisteen alhaisin konsentraatio, joka pystyy aiheuttamaan kasvun täydellisen estymisen paljaalla silmällä arvioiden.

Edellä mainitun menetelmän mukaisesti määritettiin 35 MIC-arvot in vitro kaavan I mukaisille yhdisteille, joiden substituentin R merkitykset on esitetty seuraavassa, lu- 15 82250 kuisia mikro-organismeja vastaan. Tulokset on esitetty seuraavissa taulukoissa I ja II. Taulukossa on esitetty seuraaville kaavan I mukaisille yhdisteille:

Yhdiste A: Keksinnön mukaisesti valmistettu yhdiste, jossa

5 _/~V

R on —( ^ O

'“B

Yhdiste B: Keksinnön mukaisesti valmistettu yhdiste, jossa

10 R on II

H

Yhdiste C on julkaisun EP 70204 mukainen edullinen yhdiste, jossa substituenttia R vastaa ryhmä

O

Yhdisteessä D substituentti R on —^ ^ch3 ; 20 yhdiste on siten läheinen homologi julkaisun EP 70204 mukaiselle edulliselle yhdisteelle, jossa R on -p,.

Yhdisteessä E R on I I ; siten tämä yhdiste on 25 ch3 läheinen homologi julkaisun EP 70204 mukaiselle edulliselle yhdisteelle, jossa R on '1 1

H

16 82250

Taulukko I

Antlbakteerinen MIC (pg/ml) in vitro yhdiste

A__C__D__C/A D/A

5 (1) Staph, aur. 0,05 <0,025 0,10 0,5 2 01A005 (2) 01A052 0,05 0,05 0,05 1 1 (3) 01A110 0,10 0,05 0,10 1 1 (4) 01A400 0,05 <0,025 0,05 0,5 1 10 (5) Staph, epi. 0,20 0,20 0,20 1 1 01B087 (6) 01B111 0,05 <0.025 0,05 0,51 1 (7) 01B126 1,56 0,78 0,39 0,5 0,25 (8) Strep, faec. 3,12 3,12 6,25 1 2 15 02A006 (9) Strep, pyog. S0,025 <0,025 0,025 1 1 02C054 (10) 02C203 SO,025 <0,025 <0,025 1 1 (11) Strep, agalact. 0,05 <0,025 0,05 0,5 1 20 02B006 (12) E. coli. 0,20 >50 1,56 >250 8 51A125 (13) 51A129 0,78 >50 6,25 >64 8 (14) 51A266 0,10 >50 0,78 >500 8 25 (15) 51A470 — 0,39 0,78 (16) Ps. aerug. >50 >50 >50 1 1 52A104 (17) 52A663 >50 >50 >50 1 1 (18) Kleb. pn. 0,20 >50 3,12 >250 16 30 53A009 (19) 53A031 0,20 >50 3,12 >250 16 (20) Kleb. oxy. 0,20 >50 3,12 >250 16 53D024 (21) Past. mult. SO,025 0,05 0,39 2 >16 35 59A001 (22) Serr. mar. 1,56 >50 6,25 >32 4 63A017 17 82250

Taulukko I (jatkoa)

A C _D_ C/,A D/A

(23) Neiss sic. £0,025 0,20 0,78 --- ---

66COOO

5 (24) Ent. aerog. £0,025 >50 3,12 >2000 125 67A040 (25) Ent. cloac. 3,12 >50 12,5 >16 4 67B009 (26) Prov. stua. 1,56 >50 50 >32 32 10 77A013 (27) Prov. ret. 0,39 >50 25 >128 64 77C025 (28) Morg. morg. 0,78 >50 50 >64 64 97A001 15 H. Infl.: 54A036 0,78 0,20 3,12 0,25 4 54A038 0,78 0,20 1,56 0,25 2 54A042 0,78 0,20 1,56 0,25 2 54A051 0,78 0,39 1,56 0,5 2 20 54A012 0,78 0,20 0,78 0,25 1 54A078 0,78 0,39 1,56 0,5 2 54A081 0,78 0,20 1,56 0,25 2 54A070 0,39 0,39 1,56 1 4 18 82250

Taulukko II

Antlbakteerlnen MIC (pg/ml) in vitro yhdiste

_B__E__E/B

5 (1) Staph, aur. 0,10 0,05 0,5 01A005 (2) 01A052 0,10 0,05 0,5 (3) 01A110 0,10 0,05 0,5 (4) 01A400 0,10 0,05 0,5 10 (5) Staph, epi. 0,39 0,20 0,5 01B087 (6) OlBlll 0,10 0,10 1 (7) 01B126 1,56 1,56 1 (8) Strep, faec. 3,12 6,25 2 15 02A006 (9) Strep, pyog. <0,025 <0,025 1 02C054 (10) 02C203 <0,025 <0,025 1 (11) Strep, agalact. <0,025 0,05 2 20 02B006 (12) E. coli. 0,10 0,78 8 51A125 (13) 51A129 0,39 1,56 4 (14) 51A266 0,05 0,78 16 25 (15) 51A470 0,05 0,39 8 (16) Ps. aerug. >50 >50 1 52A104 (17) 52A663 >50 >50 1 (18) Kleb. pn. 0,10 6,25 62 30 53A009 (19) 53A031 0,20 1,56 8 (20) Kleb. oxy. 0,20 1,56 8 53D024 (21) Past. mult. 0,05 0,39 8 35 59A001 (22) Serr. mar. 1,56 1,56 1 63A017 li 19 82250

Taulukko II (jaktoa)

_B_ E E/B

(23) Neiss slc. £0,025 0,20 >8

5 66COOO

(24) Ent. aerog. 0,05 1,56 31 67A040 (25) Ent. cloac. 1,56 6,25 4 67B009 10 (26) Prov. stua. 3,12 >50 >16 77A013 (27) Prov. ret. 1,56 25 16 77C025 (28) Morg. morg. 3,12 50 16 15 97A001 H. Infl.: 54A036 0,20 3,12 16 54A038 0,20 NT --- 54A042 0,20 1,56 8 20 54A051 0,20 3,12 16 54A012 0,20 3,12 16 54A078 0,20 3,12 16 54A081 0,20 1,56 8 54A070 1,56 6,25 4 25

Taulukossa I verrataan MIC-arvoja, jotka on saatu keksinnön mukaisesti valmistetulla kaavan I mukaisella yhdisteellä, jossa R on 2-oksopiperidin-5-yyli ja rakenteeltaan läheisinunillä tunnetun tekniikan mukaisilla yh-30 disteillä, joissa vastaava substituentti on sykloheksyyli (yhdiste C) tai l-metyylipiperidin-4-yyli. Yhdisteelle A ja yhdisteelle C saatujen arvojen vertailusta sarakkeessa HC/A" ilmenee, että keksinnön mukaisesti valmistetun yhdisteen aktiivisuus on jopa useita kertaluokkia yhdisteen 35 C aktiivisuutta suurempi tärkeitä Gram-negatiivisia patogeenejä E. coli, Klebsiella, Serratia, Enterobacter, Pro-videncia ja Morganella vastaan.

20 8 2 2 5 0

Samanlainen sarakkeessa "D/A" esitetty vertailu osoittaa, että keksinnön mukaisesti valmistetulla yhdisteellä A on merkittävästi yhdisteen D tehoa voimakkaampi teho mikro-organismeja E. coli, Klebsiella, Enterobacter, 5 Providencia ja Morganella vastaan.

Samalla tavalla taulukossa II verrataan MIC-arvoja, jotka on saatu keksinnön mukaisesti valmistetulla kaavan I mukaisella yhdisteellä, jossa R on 2-oksopyrrolidin-3-yy-li, ja rakenteeltaan läheisimmällä tunnetulla yhdisteellä 10 E, jossa vastaava substituentti on l-metyylipyrrolidin-3-yyli. Sarakkeen "E/B" arvot osoittavat, että keksinnön mukaisesti valmistetulla yhdisteellä on merkittävästi voimakkaampi teho tärkeitä mikro-organismeja E. coli, Klebsiella, Enterobacter, Providencia, Morganella ja H. influen-15 za vastaan.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat soveltuvat torjumaan bakteeri-infektioita nisäkkäissä, ihminen mukaan lukien. Niitä voidaan käyttää torjuttaessa infektioita, joita ovat aiheut-20 taneet haitalliset bakteerit ihmispotilaissa, esim. in fektioita, joita ovat aiheuttaneet haitalliset Staphylococcus aureuskannat.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan antaa suun kautta tai parenteraalisesti, s.o. li-25 haksensisäisesti, ihonalaisesti, vatsaontelonsisäisesti tai laskimoruiskeena; sellaisinaan pelkkinä, tai yhdistelminä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan kanssa normaalin farmaseuttisen käytännön mukaisesti.

Aktiivisen aineen suhde kantajaan riippuu aktiivi-30 sen aineen kemiallisesta luonteesta, liukoisuudesta ja stabilisuudesta, samoin kuin suunnitellusta annostuksesta. Normaalisti farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan suhde peneemiyhdisteeseen on rajoissa 1:10 - 4:1. Suun kautta antoa varten tämän keksinnön yhdisteitä voidaan käyttää 35 tablettien, kapselien, pastillien, lääkenappien, jauhei den, siirappien, eliksiirien, vesiliuosten ja suspensioiden muodossa ja näiden kaltaisissa muodoissa. Kun kyseessä ti 2i 82250 ovat tabletit, käyttökelpoisia kantajia ovat laktoosi, natriumsitraatti ja fosforihapon suolat. Tableteissa käytetään yleisesti erilaisia hajottavia aineita, kuten tärkkelystä ja luistoaineita, kuten magnesiumstearaattia, nat-5 riumlauryylisulfaattia ja talkkia. Käyttökelpoisia kapselien laimentimia ovat laktoosi ja suurimolekyylipainoi-set polyetyleeniglykolit. Tarvittaessa suun kautta annettavia vesisuspensioita, aktiivinen aineosa on yhdistettynä emulgointi- tai suspendointiaineiden kanssa. Niihin voi-10 daan lisätä makeuttavia ja/tai aromiaineita.

Parenteraalista antoa varten valmistetaan tavallisesti aktiivisen aineosan steriilejä liuoksia, ja liuosten pH säädetään sopivaksi ja puskuroidaan. Laskimoruiskeena käyttöä varten liuosten kokonaiskonsentraatio on säädettä-15 vä sellaiseksi, että valmiste on isotooninen. Lääkkeen määräävä lääkäri määrää viime kädessä sopivan tietylle ihmispotilaalle annettavan annoksen, ja tämän voidaan odottaa vaihtelevan yksityisen potilaan iän, painon, ja reaktion mukaisesti, samoin kuin potilaan oireiden luon-20 teestä ja vakavuudesta johtuen. Kaavan I mukaisia yhdisteitä käytetään tavallisesti suun kautta annoksina, jotka ovat välillä noin 10 - noin 200 mg kehon painon kiloa kohden päivässä, ja parenteraalisesti annoksina, jotka ovat noin 10 - noin 400 mg kehon painon kiloa kohden päivässä. 25 Eräissä tapauksissa voi olla välttämätöntä käyttää annoksia, jotka poikkeavat näistä rajoista.

Seuraavat esimerkit ja valmistukset on esitetty vain lisävalaistustarkoituksissa. Infrapuna (IR)-spektrit määritettiin joko kaliumbromidi-tabletteina (KBr-tablet-30 ti), Nujol-tahtaissa tai liuoksina kloroformissa (CHC13), metyleenikloridissa (CH2C12) tai dimetyylisulfoksidissa (DMSO), ja diagnostiset absorptiovyöt on ilmoitettu joko mikroneina tai aaltolukuina (cm’1). Ydinmagneettiset resonanssi (NMR)-spektrit mitattiin liuoksista deuterokloro-35 formissa (CDC13), perdeuterometanolissa (CD30D) tai perdeu-terodimetyylisulfoksidissa (DMS0-d6) tai niiden seoksissa, ja piikkien kohdat on ilmoitettu ppm-arvoina tetrametyyli- 22 82250 silaanista alaspäin. Piikkien muodoista on käytetty seu-raavia lyhenteitä: s singletti; d dubletti: t tripletti; q kvartetti; m mul-tipletti; b leveä; c kompleksi. Lyhenteet "ss" ja "sss" 5 merkitsevät, että tietty protoni esiintyi kahtena tai vastaavasti kolmena siglettinä johtuen diastereoisomeerien läsnäolosta. Esimerkeissä ja valmistuksissa kauttaaltaan lyhenne "PNB" merkitsee p-nitrobentsyyliryhmää.

Esimerkki 1 10 Natrium-(5R,6S)-6-[(R)-1-hydroksietyyll]-2-(2-pyr- rolidon-3-yyli)tio-2-peneemi-3-karboksylaatti

Suspension, jossa oli 73 mg ΙΟ-prosenttista Pd-piimaata seoksessa, jossa oli 20 ml tetrahydrofuraania ja 20 ml tislattua vettä, pH säädettiin arvoon 8,3 0,02 M 15 natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 73 mg p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-[(R)-l-hydroksietyyli]-2-(2-pyrrolidon-3-yyli)tio-2-peneemi-3-karboksylaattia seoksessa, jossa oli 8 ml tetrahydrofuraania ja 8 ml vettä, ja saatua seosta hydrattiin 55 psi:n 20 (379 kPa) vetypaineessa 75 minuuttia; sitten lisättiin vielä 73 mg 10-prosenttista Pd-piimaata ja seoksen pH säädettiin arvoon 7,0 0,02 M natriumvetykarbonaatin vesi-liuoksella. Seosta hydrattiin 55 psi:n (379 kPa) paineessa 75 minuuttia; sitten katalyytti poistettiin suodattamalla 25 ja suodos konsentroitiin vakuumissa tetrahydrofuraanin poistamiseksi. Saadun vesiliuoksen pH säädettiin arvoon 7,0 ja liuos uutettiin kahdella 165 ml:n erällä etyyliasetaattia. Sitten vesiliuos kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 38 mg (saanto 69 %) otsikon yhdistettä amorfisena kiinteä-30 nä aineena.

Otsikon yhdisteen infrapunaspektrissä kaliumbromi-ditablettina absorptiot olivat kohdilla 2,94, 5,65 ja 6,3 mikronia.

Esimerkki 2 35 Noudatettiin esimerkin 1 menetelmiä käyttämällä sopivia kaavan XV mukaisia yhdisteitä, jolloin saatiin kaavan I mukaisten yhdisteiden natriumsuoloja, joiden saanto, kaiiumbromiditabletin (ellei toisin ole mainittu) infrapunaspektri ja R on esitetty taulukossa 1.

23 82250

Taulukko 1 5 R 1R (mikroneja) Saanto (%) 2-pyrrolidon-4-yyli 2,92, 5,68, 6,0 88 ja 6,15 1- formyyli-3-pyrrolidinyyli 2,92, 5,64, 6,03 89 10 ja 6,3 (3-metyyli-l,3-oksatsolidin- 2,94, 5,7 ja 6,25 78 2- on-5-yyli)metyyli (3-metyyli-l,3-oksatsolidin- 2,94, 5,7 ja 6,28 90 2- on-4-yyli)metyyli 15 2-piperidon-5-yyli 5,64, 6,02 ja 6,3 93 (DMSO) piperidin-2-on-3-yyli 2,94, 5,66, 6,06 79 ja 6,25 l-metyylipiperidin-2-on-3- 2,93, 5,64 ja 6,15 98 20 yyii l-formyylipiperidin-3-yyli 2,9, 5,65 ja 6,03 73 3- metyyli-perhydro-l,3- 2,92, 5,63, 5,99 57 oksatsin-2-on-5-yyli ja 6,08 (huonommin liukenevasta 25 diastereomeerista) 3-metyyli-perhydro-l,3- 5,65 (DMSO) 84 oksatsin-2-on-5-yyli (liukoisemmasta diastereomeerista ) 30

Esimerkki 3

Natrium-(5R,6S)-6-[(R)-l-hydroksletyyli]-2-(pyrro-lidln-2,5-dlon-3-yyli)tio-2-peneemi-3-karboksylaatti

Noudatettiin esimerkin 1 menetelmiä paitsi että 35 alku-pH oli 7,5 ja kaavan XV mukaisessa lähtöyhdisteessä R oli pyrrolidin-2,5-dion-3-yyli. Yhdistettä saatiin 90 %:n saannoin ja sen in£rapunaspektrin absorptiot kaliumbromi- 24 82250 ditablettina olivat kohdilla 2,92, 5,63, 5,8 ja 6,2 mikronia.

Esimerkki 4

Noudatettiin esimerkin 3 menetelmiä käyttämällä 5 sopivia kaavan XV mukaisia yhdisteitä, jolloin saatiin kaavan I mukaisten yhdisteiden suoloja, joiden saanto, kaliumbromiditabletin (ellei toisin ole mainittu) infrapu-naspektri ja R on esitetty taulukossa IA.

Taulukko 1 A

10 R IR (mikroneja) Saanto (%) (1,3-oksatsolidin-2-on- 4-yyli)metyyli 5,72(b) 95 (1,3-oksatsolidin-2-on- 15 5-yyli)metyyli 5,72(b) 87 (1,3-tiatsolidin-2-on- 4-yyli)metyyli 5,65 100

Valmistus A

20 p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-[(R)-1-hydroksietyyli]- 2-(2-pyrrolidon-3-yyli)tio-2-peneemi-3-karboksylaatti

Liuokseen, jossa oli 118 mg (0,204 mmoolia) p-nitrobentsyyli- ( 5R,6S)-6-[(R)-1-t-butyylidimetyylisilyyliok-sietyyli] -2-( 2-pyrrolidon-3-yyli )tio-2-peneemi-3-karbok-25 sylaattia 6 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisättiin 0,11 ml (2,04 mmoolia) etikkahappoa ja 0,612 ml (0,612 moolia) 1 M tetrabutyyliammoniumfluoridin tetrahydrofuraani-liuosta. 20 tunnin sekoittamisen jälkeen typen suojaamana huoneen lämpötilassa lisättiin 50 ml etyyliasetaattia ja saatu 30 liuos pestiin 40 ml:11a kyllästettyä natriumvetykarbonaa-tin vesiliuosta, 40 ml:11a vettä ja 40 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Etyyliasetaattikerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Raaka tuote (110 mg) kromatografoitiin 35 silikageelillä (50 g) eluoimalla etyyliasetaatti-metanoli -seoksella (95:5), jolloin saatiin 73 mg (saanto 77 %) otsikon yhdistettä amorfisena kiinteänä aineena.

Il 25 82250

Otsikon yhdisteen deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 1,32 (d, 3H); 2,0-3,2 (c, 3H); 3,2-4.37 (c, 5H); 5,3 (q, 2H); 5,6 (d, 1H); 6,64 (b, 1H); 7,6 (d, 2H); ja 8,2 (d, 2H) ppm. Otsikon yhdisteen 5 infrapunapektrissä dikloorimetaaniliuoksessa absorptiot olivat kohdilla 5,58, 5,85 ja 6,57 mikronia.

Valmistus B

Noudatettiin valmistuksen A menetelmiä käyttämällä kaavan XIV mukaisia yhdisteitä, jolloin saatiin kaavan XV 10 mukaisia yhdisteitä, joiden ominaisuudet ja R on esitetty taulukossa 2. Liuottimet, joissa spektrit mitattiin, ovat sulkeissa.

26 82250

Taulukko 2 R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) 2-pyrrolidon- 5,58, 5,87 ja l,3(d, 3H); 87 4-yyli 6,58 (CH2C12) 2,0-4,42(c, 5 8H) ; 5,3 (q, 2H); 5,68 (d, 1H); 6,25 (b, 1H); 7.56 (d, 2H); 10 ja 8:18 (d, 2H).

(CDC13) l-formyyli-3- 5,57, 5,96 ja l,35(d,3H); 1,8- 42 pyrrolidinyyli 6,56 (CH2C12) 2,6(c,2H); 3,2 (b,1H); 3,3-4,46 15 (c,7H); 5:3(q,2H) 5,64(d,1H): 7,6 (d,2H); ja 8,2 (s ja d, 3H); (cdci3) 20 (3-metyyli-l,3- 5,56, 5,66 ja 1,36 (d;3H); 2,4 38 oksatsolidin-2- 6,57 (CH2C12) (b,lH); 2,9 (s, οη-5-yyli)metyy- 3H); 3,17-3,92 li (c, 5H); 4,0-4,86 (c, 2H) 5,31 (q,2H); 25 5,69 (d, 1H); 7,6 (d, 2H); ja 8.2 (d, 2H).

(CDClg) (3-metyyli-l,3- 5,56, 5,67 ja 1,35 (d, 3H); 2,2 25 30 oksatsolidin-2- 6,56 (CH2C12) (b,lH); 2,89 (s) on-4-yyli)me- ja 2'81-3,5 (c), tyyli (yht. 5H); 3,6-4,49 (c, 5H); 5.3 (q, 2H); 35 5,67 (d, 1H); 7.56 (d, 2H); ja 8,16 (d, 2H).

(CDC13)

II

27 82250

Taulukko 2 jatk.

H IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) pyrrolidin-2,5- 5,57, 5,75 ja 1,3 (d,3H); 32 dion-2-yyli 6,54 (CH2C12) 2,1 (b,lH); 5 2,5-4,4 (c,6H); 5,3 (q, 2H); 5,65 (d,lH): 7,56 (d, 2H); ja 8,16 (d, 2H).

10 (CDC13) 2-piperidon-5- 5,64 ja 6,0 1,18 (d, 3H); 86 yyli (Nujol-tahdas) 1,74-2,8 (c, 4H); 3,05-3,74 (c, 4H); 4,03 (m, 1H); 5,25 15 (d, 1H); 5,37 (q, 2H); 5;78 (d, 1H); 7,66 (b, 1H); 7,7 (d, 2H); ja 8,25 (d, 2H).

20 (DMSO-dg, 250MHz) (1,3-oksatsolidin- 5,5, 5,67, 2,0 (b, 1H); 1,27 57 2-on-4-yyli)metyyll 5,91 ja 6,58 (d, 3H); 3,1 (m, (CH2C12) 2H); 3,7 (dd, 1H); 3,8-4,67 (c, 4H); 25 5,31 (q, 2H); 5,68 (d, 1H); 7,1 (b, 1H); 7,6 (d, 2H); ja 8,18 (d, 2H). (cdci3/cd3od) 30 35 28 82250

Taulukko 2 jatk.

R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) 1,3-oksatsolidin- 5,58, 5,67 ja 1,29 (d, 3H); 56 2-on-5-yyli)me- 6,58 (CH2C12) 2,2 (b, 1H); 5 tyyli 3,1-3,98 (C, 5H); 4,1 (m, 1H); 4,83 (C, 2H); 5,3 (q, 2H); 5.7 (d, 1H); 10 7,1 (b, 1H); 7,58 (d, 2H); ja 8,17 (d, 2H). (CDClg/DMSO-dg) (1,3-tiatsolidin- 5,61, 5,97, 1,18 (d, 3H); 64 15 2-on-4-yyli)me- 6,06, 6,6, 6;7 3,13-3,46 (C, tyyli (KBr) 3H); 3;62 (dd, 1H); 3,88 (dd, 1H); 4’02 (m, 1H); 4;1 (m, 1H); 20 5,25 (d, 1H); 5,38 (q, 2H); 5,76 (d, 1H); 7.7 (d, 2H); 8,24 (d, 2H); 25 8,42 (s, 1H).

(250 MHz, DMSO-dg) piperidin-2-on-3- 5,56, 5,9, 1,3 (d, 3H); 65 yyli 6,0 ja 6,56 1,65-2,45 (c, 4H); (CH2C12) 3,28 (c, 2H); 30 3,52-4,42 (c, 4H); 5,32 (q, 2H); 5,65 ja 5,7 (2d,yht. 1H); 7,12 (b, 1H); 35 7,6 (d, 2H); 8,2 (d, 2H). (CDCl3/DMSO-d6)

II

29 82250

Taulukko 2 jatk.

R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) 1-metyylipipe- 5,56, 5,92, 6,07 1,3 (d,3H); 40 ridin-2-on-3-yyll ja 6,56 (CH2C12) 1,7-2,45 (c, 5 5H); 2,96 (s, 3H); 3,3 (m, 2H); 3,65-4,45 (c,3H); 5,3 (q, 2H); 5,6 (d,lH); 10 7,57 (d,2H); ja 8,2, (d, 2H).

(CDC13) 1- formyyllpiperi- 5,57, 5,97 ja 1,12-2,33 (c) 64 din-3-yyli 6,56 (CH2C12) ja 1,3 (d) 15 (yht. 8H); 2,78-4,62 (c, 7H); 5,28 (q, 2H); 5163 (d, 1H); 7,54 (d, 2H); 20 7,98 (s, 1H); ja 8,16 (2H).

(CDClg)

Valmistus C

25 p-nltrobentsyyll-(5R,6S)-6-[(R)-1-hydroksletyyll]- 2- (3-metyyllperhydro-l,3-oksatsln-2-on-5-yyll )tio-2-penee-mi-3-karboksylaatti

Tetrabutyylianunonlumfluoridia (1,25 ml 1 M tetra-hydrofuraanllluosta, 1,25 mmoolla) ja etlkkahappoa (0,25 30 ml) lisättiin liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R, 6S)-6[(R)-1-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli]-2-(3-me-tyyliperhydro-1,3-oksatsin-2-on-5-yyli)tio-2-peneemi-3-karboksylaattia (0,24 g; 0,39 mmoolia) 2 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania. Saatua liuosta sekoitettiin 25°C:ssa 35 typen suojaamana 20 tuntia. Reaktioliuos laimennettiin sitten 100 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 10 ml:11a vettä ja 20 ml:11a suolaliuosta, kuivattiin vedettömällä 30 8 2 2 5 0 natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäljelle jäänyttä kiinteätä ainetta trituroitiin 5 ml:n kanssa metanolia, sitten lisättiin 15 ml dietyylieetteriä ja saatu seos suodatettiin, Jolloin saatiin 71 mg huonom-5 min liukenevaa diastereomeeria vaalean kullanruskeaksi värjäytyneenä kiinteänä aineena. Suodos haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös kromatografoitiin silikagee-lillä (75 g), eluoimalla etyyliasetaattimetanoliseoksella (9:1), jolloin saatiin liukoisempaa diastereomeeria kiin- 10 teänä aineena. Trituroimalla kiinteätä ainetta dietyyli-eetteri-petrolieetteriseoksen (1:1) kanssa ja suodattamalla saatiin 52 mg liukoisempaa diastereomeeria vaalean kullanruskeaksi värjäytyneenä kiinteänä aineena (kokonaissaanto 63 %).

15 Huonommin liukeneva diastereomeeri: NMR (DMS0-d6 250 MHz): 1,2 (d, 3H); 2,86 (s, 3H); 3,4 (dd, 1H); 3,83 (dd, 1H); 3,9-4,1 (c, 3H); 4,25 (dd, 1H); 4,51 (dd, 1H); 5,26 (d, 1H); 5,38 (q, 2H); 5,8 (d, 1H); 7,7 (d, 2H); ja 8,26 (d, 2H)ppm.

20 Paremmin liukeneva diastereomeeri: NMR (DMS0-d6, 250 MHz): 1,2 (d, 3H); 2,86 (s, 3H); 3,35 (dd, 1H); 3,81 (dd, 1H); 3,9-4,1 (c, 3H); 4,29 (dd, 1H); 4,54 (dd, 1H); 5,26 (d, 1H); 5,39 (q, 2H); 5,83 (d, 1H); 7,7 (d, 2H); ja 8,26 (d, 2H)ppm; 25 IR (KBr); 2,92, 5,61, 5,85, 5,91 ja 6,61 mikronia.

Valmistus D

p-nitrobentsyyli-( 5R, 6S)-6-[(R)-l-t-butyylidlmetyy-llsilyylloksietyyli] -2-( 2-pyrrolidon-3-yyli )tio-2-peneemi- 3-karboksylaatti 30 Natriummetylaattia (27 mg, 0,5 mmoolia) lisättiin liuokseen, jossa oli 80 mg (0,5 mmoolia) 2-pyrrolidon-3-yyli-tioasetaattia 5 ml:ssa kuivaa etanolia jäähdytettynä -30°C:ssa typen suojaamana. Seoksen oltua 30 minuuttia -30°C:ssa, lisättiin liuos, jossa oli 300 mg (0,5 mmoolia) 35 valmistuksessa I saatua raakaa p-nitrobentsyyli-(5R,6S)- 6-[(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli] -2-etyylisul-finyyli-2-peneemi-3-karboksylaattia 5 ml:ssa kuivaa tetra-

II

si 82250 hydrofuraania, joka oli jäähdytetty -50°C:seen. Saatua liuosta sekoitettiin -30°C:ssa 60 minuuttia, sitten lisättiin 0,029 ml (0,5 mmoolia) etikkahappoa ja liuos haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan 5 etyyliasetaattia ja saatu liuos pestiin 40 ml:11a kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta, 40 ml:11a vettä ja 40 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Etyyliasetaattikerros kuivattiin vedettömällä natriumsul-faatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Kromatogra-10 foimalla raaka tuote (370 mg) silikageelillä (120 g), eluoimalla kloroformi/etyyliasetaatti-seoksella (1:1), saatiin 118 mg (saanto 41 %) otsikon yhdistettä viskoosi-sena hartsina.

Otsikon yhdisteen dikloorimetaaniliuoksen infrapu-15 naspektrissä oli absorptiot kohdilla 5,58, 5,86 ja 6,58 mikronia. Otsikon yhdisteen deutrokloroformiliuoksen NMR-spektrissä piikit olivat kohdilla 0,06 (s, 3H); 0,1 (s, 3H); 0,84 (s, 9H); 1,24 (d, 3H); 1,92-2,98 (c, 2H) 3,23-4, (c, 5H); 5,29 (q, 2H); 5,6 (d, 1H); 6,6 (b, 1H); 7,55 20 (d. 2H); ja 8,16 (d, 2H) ppm.

Valmistus E

Noudatettiin valmistuksen D menetelmiä käyttämällä sopivaa tioasetaattia, jolloin saatiin kaavan XIV mukaisia yhdisteitä, joiden ominaisuudet ja R on esitetty taulukos-25 sa 3.

32 82250

Taulukko 3 R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) 1-pyrrolidon- 5,58, 5,86 ja 0,04 (s 3H) 31 4-yyli 6,57 (CH2C12) 0,09 (s,3H); 5 0,82 (s,9H); 1.25 (d,3H); 2,1-4,42 (c, 7H); 5,29 (q, 2H); 5,62 (d, 10 1H); 6,44 (b, 1H); 7,57 (d, 2H)? ja 8,16 (d, 2H). (CDC12) l-formyyl±-3- 5,58, 6,02 ja 0,02 (s, 3H): 37 15 pyrrolidinyyli 6,57 (CH2C12) 0,09 (s, 3H); 0,85 (s, 9H) 1,24 (d, 3H); 0,08-2,42 (c, 2H); 3,3-4,47 (c, 20 7H); 5,28 (q,2H): 5,64 (d, 1H); 7,55 (d, 2H); ja 8,16 (d) ja 8,18 (s), (yht. 3H).

25 (CDC13) (3-metyyli-l,3- 5,57, 5,66 5,9 0,05 (s, 3H); 49 oksatsolidin-2- ja 6,57 (CH2C12) 0,1 (s, 3H); on-5-yyl1)metyyli 0,85 (s, 9H); 1.26 (d, 3H); 30 2,89 (s, 3H); 3,12-3,89 (c, 5H); 4,04-4,8 (c, 2H); 5,3 (c, 2H); 5,67 (d, 1H); 35 7,6 (d, 2H); 8,2 (d, 2H).

(coci3) 33 8 2 2 5 0

Taulukko 3 jatk.

R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) 3-metyyli-l,3- 5,56, 5,67, 5,88 0,02 (s,3H); 48 oksatsolidin-2- ja 6,57 (CH2C12) 0,08 (s,3H); 5 on-4-yyli)metyy- 0,82 (s, 9H): li 1,26 (d, 3H); 2,9 (s) ja 2,8-3,5 (c), (yht. 5H); 10 3,65-4,54 (c, 5H); 5,3 (q, 2H); 5,69 (d, 1H); 7,6 (d, 2H); ja 8,2 (d, 15 2H). (CDC13) 3-metyyli-l,3- 5,62 ja 6,0 0,04 (s,3H); 34 oksatsolidin-2- (Nujoi-tahdas) 0,08 (s, 3H): on-4-yyli)metyy- 0,84 (s, 9H); li 1,27 (d, 3H); 20 1,85-2,7 (c,4H); 3,34-3,84 (c,4H); 4,28 (m,1H); 5,33 (q, 2H); 5,69 (d, 1H); 6,06 25 (b, 1H); 7,63 (d, 2H); ja 8,22 (d, 2H).

(CDC13, 250 MHz) 34 82250

Taulukko 3 jatk.

R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) piperidin-2-on- 5,57, 5,98 ja 0,03 (s, 3H): 29 3-yyli 6,56 (CH2C12) 0,06 (s, 3H): 5 0,84 (s, 9H); 1,22 (d, 3H): 1,66-2,4 (c, 4H); 3,34 (c,2H) 3.6- 4,5 (c,3H); 10 5,26 (q,2H); 5.56 ja 5,62 (2d, yht. 1H); 6,5 (b, 1H); 7,54 (d, 2H); 15 ja 8,14 (d, 2H).

(CDC13) 1-metyylipiperi- 5,57, 5,93, 6,08 0,03 (s, 3H); 40 din 2-on-3-yyli ja 6,56 (CH2C12) 0,06 (s, 3H) ; 0,82 (s, 9H); 20 1,22 (d, 3H); 1.6- 2,36 (c,4H); 2,96 (s,3H); 3;3 (m,2H); 3,67-4,43 (c, 3H); 5,28 (q, 25 2H); 5,57 (d, 1H); 7.57 (d, 2H); ja 8,18 (d, 2H).

(cdci3) 30 35

II

35 82250

Taulukko 3 jatk.

R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) 1-formyylipiperi- 5,8, 5,98, 6,58 0,03 (s, 3H); 48 din-3-yyli (CH2C12) 0,06 (s, 3H); 5 0,82 (s, 9H); 1,1-2,3 (c) ja 1,23 (d) (yht.

7H); 2,8-4,5 (c, 7H); 5,26 (q, 10 2H); 5,62 (d, 1H); 7,54 (d, 2H); 7.98 (s, 1H);ja 8;14 (d, 2H).

(cdci3)

15 Valmistus F

Noudatettiin valmistuksen D menetelmiä käyttämällä valmistuksen H puhdistettua p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-[ (R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli] -2-etyylisulf i-nyyli-2-peneemi-3-karboksylaattia ja sopivaa tioasetaat-20 tia, jolloin saatiin kaavan XIV mukaisia yhdisteitä, joiden ominaisuudet ja R on esitetty taulukossa 3A.

Taulukko 3A

_R IR (mikroneja) NMR(ppm) Saanto (%) 1,3-oksatsolidin- 5,57, 5,67, 0,03 (s,3H); 40 25 2-on-4-yyli)metyy- 5,92 ja 6,58 0,06 (s, 3H); li (CH2C12) 0,82 (s, 9H); 1,22 (d, 3H); 3,1 (2d, 2H); 3,72 (dd, 1H); 30 3,82-4,68 (c, 4H); 5,26 (q, 2H); 5,64 (d, 1H); 5.98 (b, 1H); 7,54 (d, 2H), 35 ja 8,16 (d, 2H).

(CDC13) 36 82250

Taulukko 3A, jatk.

_R IR (mikroneja) NMR(ppm) (Saanto (%) (1,3-oksatsolidin- 5,6, 5,67, 5,92 0,03 (s,3H); 48 2-on-5-yyli)metyyli ja 6,58 (CH2C12) 0,06 (s, 3H); 5 0,82 (s, 9H); 1.22 (d, 3H); 3,1-4,0 (c, 5H); 4,22 (m, 1H); 4;8 (m, 1H); 10 5:29(q, 2H); 5:65 (d,1H); 5,84 (b, 1H); 7,56 (d,2H); ja 8,16 (d, 2H).

15 (CDC13) (1,3-tiatsolidin- 5,56, 5,89 ja 0,03 (s,3H); 50 2-on-4-yyli)me- 6,54 (CH2C12) 0,06 (s, 3H); tyyli 0,82 (s, 9H); 1.22 (d, 3H); 20 3,0-4,42 (c, 7H); 5,3 (q, 2H); 5,66 (d, 1H); 6,0 (b, 1H); 7,56 (d, 2H); ja 25 8,16 (d, 2H).

(cdci3)

II

37 82250

Taulukko 3A, jatk.

_R IR (mikroneja) NMR(ppm) (Saanto (%) 3-metyyli-perhydro- 0,05 (s, 82 l,3-oksatsin-2-on-5- 3H); 0,08 5 yyli-metyyli (s, 3H); 0,84 (s, 9H); 1,27 (d, 3H); 3,0 (s, 3H); 3,37 (dd, 1H); 10 3,67 (dd, 1H); 3,8 (c, 2H); 4,14-4,34 (c, 2H); 4:47 (dd, 1H); 5,33 (q, 2H); 15 5,72 (d, 1H); 7,62 (d, 2H); ja 8,23 (d, 2H).

(CDC13, 250 MHz)

20 Valmistus G

p-nitrobentsyyli-( 5R, 6S)-6-[(R)-l-t-butyylidimetyy-lisilyylioksietyyli]-2-(pyrrolidin-2,5-dion-3-yyli)tio-2-peneemi-3-karboksylaatti

Natriununetylaattla (54 mg, 1,0 mmoolia) lisättiin 25 liuokseen, jossa oli 87 mg (0,5 mmoolia) pyrrolidin-2,5-dion-3-yyli-tioasetaattia 5 ml:ssa kuivaa etanolia jäähdytettynä -35°C:seen typen suojaamana. Seoksen oltua 40 minuuttia -35°C:ssa lisättiin liuos, jossa oli 300 mg (noin 0,5 mmoolia) raakaa p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-[(R)-l-t-30 butyylidimetyylisilyylioksietyyli] -2-etyylisulf inyyli-2- peneemi-3-karboksylaattia 5 mlrssa kuivaa tetrahydrofuraa-nia, joka oli jäähdytetty -50°C:seen. Saatua liuosta sekoitettiin -40°C - -35°C:ssa 6 minuuttia, lisättiin 0,058 ml (1,0 mmoolia) etikkahappoa ja liuos haihdutettiin kuiviin 35 vakuumissa. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan etyyliasetaattia ja saatu liuos pestiin 40 ml:11a kyllästettyä natriumvety- 38 82250 karbonaatin vesiliuosta, 40 ml:11a vettä ja 40 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Etyyliasetaattiker-ros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Kromatografoimalla raaka tuo-5 te (360 mg) silikageelillä (120 g), eluoimalla klorofor-mi/etyyliasetaattiseoksella (3:1), saatiin 123 mg (saanto 42 %) otsikon yhdistettä viskoosisena hartsina.

Otsikon yhdisteen infranunaspektrissä dikloorime-taaniliuoksessa oli absorptiot kohdilla 5,56, 5,72 ja 6,5 10 mikronia. Otsikon yhdisteen deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 0,04 (s, 3H); 0,08 (s, 3H); 0,86 (s, 9H); 1,25 (d, 3H); 2,54-4,54 (c, 5H); 5,3 (q, 2H]; 5,7 (d, 1H); 7,6 (d, 2H); ja 8,2 (d, 2H) ppm.

Valmistus H

15 p-nitrobentsyyli-( 5R, 6S)-6-[(R)-l-t-butyylidimetyy- lisiloksietyyli]-2-etyylisulfinyyli-2-peneemi-3-karboksy-laatin puhdistus 8,0 g otsikon peneemi-sulfoksidia, jota oli valmistettu valmistuksen I mukaisesti, kromatografoitiin silika-20 geelillä (500 g). Eluoimalla heksaanietyyliasetaatti-seoksella (1:1) saatiin 4,6 g puhdistettua otsikon yhdistettä diastereomeerien seoksena.

Valmistus I

p-nitrobentsyyli- (5R, 6S) -6- [ (R) -1 -1-butyy 1 idimetyy-25 lisilyylioksietyyli] -2-etyylisulf inyyli-2-peneemi-3-kar- boksylaatti

Liuos, jossa oli 970 mg (4,78 mmoolia, puhtaus 85 %) m-klooriperbentsoehappoa 25 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin liuokseen, jossa oli 2,5 g (4,78 mmoolia) p-30 nitrobentsyyli-( 5R, 6S)-6-[(R)-l-t-butyylidimetyylisilyyli- oksietyyli]-2-etyylitio-2-peneemi-3-karboksylaattia 125 ml:ssa metyleenikloridia jäähdytettynä -20°C:seen typpiat-mosfäärin suojaamana. Seosta sekoitettiin -20°C:ssa 3 tuntia, sitten pestiin peräkkäin kahdella 70 ml:n erällä kyl-35 lästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta, 70 ml:11a vettä ja 70 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuos- 39 8 2 2 5 0 ta. Metyleenikloridiliuos kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin otsikon yhdistettä keltaisena vaahtomaisena aineena (2,2 g, saanto 86 %).

5 Otsikon yhdisteen infrapunaspektrissä dikloorime- taaniliuoksena oli absorotiot kohdilla 5,54, 5,86 ja 6,53 mikronia. Otsikon yhdisteen NMR-spektrissä deuterokloro-formlliuoksessa piikit olivat kohdilla 0,06, 0,08, 0,1 ja 0,12 (4s, yht. 54); 0,8 (s, 9H); 1,12-1,58 (m, 6H); 3,1 10 (m, 2H); 3,86 (m, 1H); 4,3 (m, 1H); 5,3 (m, 2H); 5,67 ja 5,78 (2d, yht, 1H); 7,54 (d, 2H); ja 8,18 (d, 2H) ppm.

Valmistus J

p-nitrobentsyyli-( 5R, 6S)-6-[ (R)-l-t-butyylimetyyli-silyylloksietyyli]-2-etyylitio-2-peneemi-3-karboksylaatti 15 p-nitrobentsyyli-oksalyylikloridia (5,85 g, 0,024 moolia) lisättiin seokseen, jossa oli 7,3 g (0,02 moolia) (3-a-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli-4-etyylitio( tio-karbonyyli)tio-2-okso-atsetidiinia ja 4,8 g (0,048 moolia kalsiumkarbonaattia 70 ml:ssa metyleenikloridia jäähdytet-20 tynä 10°C:seen typpiatmosfäärin suojaamana. Lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 4,17 ml (0,024 moolia) di-iso-Propyylietyyliamiinia 20 ml:ssa metyleenikloridia sellaisella nopeudella, että lämpötila saatiin pidettynä 12°C:n alapuolella. Seosta sekoitettiin 60 minuuttia 10°C:ssa, 25 sitten pestiin kahdella 50 ml:n erällä jääkylmää vettä, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin vakuumissa viskoosiseksi öljyksi. Saatu raaka p-nit-robentsyyli-(3-a-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli-2-oksoatsetidinyyli)oksoasetaatti liuotettiin 300 ml:aan 30 etanolitonta kloroformia ja saatua liuosta kiehutettiin typen suojaamana lisättäessä tiputtamalla 2 tunnin kuluessa liuos, oli 6,85 ml (0,04 moolia) trietyylifosfiittia 50 ml:ssa etanolitonta kloroformia. Saatua liuosta kiehutettiin 16 tuntia, minkä jälkeen haihdutettiin kuiviin vakuu-35 missä. Jäännös kromatografioitiin silikageelissä (800 g), eluoimalla tolueeni/etyyliasetaatti-seoksella 95:5, joi- 40 82250 loin saatiin 5,5 g (saanto 53 %) otsikon yhdistettä keltaisena vaahtona.

Otsikon yhdisteen infrapunaspektrissä dikloorime-taaniliuoksessa oli absorptiot kohdilla 5,56, 5,89 ja 6,54 5 mikronia. Otsikon yhdisteen NMR-spektrissä deuterokloro-formiliuoksessa oli piikit kohdilla 0,07 (s, 3H); 0,1 (s, 3H); 0,85 (s, 9H); 1,12-1,53 (m, 6H); 2,97 (q, 2H); 3,7 (m, 1H); 4,25 (m, 1H); 5,3 (q 2H); 5,63 (d, 1H); 7,38 (d, 2H); ja 8,18 (d, 2H) ppm.

10 Väliyhdisteen (1-asetidinyyli)-oksoasetaatin NMR- spektrissä deuterokloroformiliuoksessa oli piikit kohdilla 0,06 (s, 06 (s, 6H); 0,8 (s, 9H); 1,14-1,62 (m, 6H); 3,14- 3,63 (m, 3H); 4,33 (m, 1H); 5,16 (s, 2H); 6,7 (d, 1H); 7,5 (d, 2H); ja 8,17 (d, 2H) ppm.

15 Valmistus K

3-a-t-butyylidimetyylisilvylioksietyyli-4-etyyli-tio-(tiokarbonyyll)tio-2-okso-atsetidiini

Etaanitiolia (8,5 ml, 0,115 moolia) lisättiin liuokseen, jossa oli 4,18 g (0,104 moolia) natriumhydrok-20 sidia 250 ml:ssa vettä jäähdytettynä 0-5°C:seen typpiatmos-fäärin suojaamana. 15 minuutin kuluttua lisättiin 7,73 ml (0,12 moolia) rikkihiiltä ja seosta sekoitettiin 0,5°C:ssa 35 minuuttia. Lisättiin liuos, jossa oli 15,0 g (0,0522 moolia) 4-asetoksi-3-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli-25 2-atsetidinonia 500 ml:ssa metyleenikloridia, ja seosta sekoitettiin voimakkaasti huoneen lämpötilassa 24 tuntia. Vesifaasi erotettiin ja uutettiin kahdella 150 ml:n erällä metyleenikloridia. Yhdistetyt metyleenikloridifraktiot pestiin kahdella 200 ml:n erällä vettä ja 200 ml:11a kyl-30 lästettyä natriumkloridin vesiliuosta, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin va-kuumissa. Raaka otsikon tuote (18 g) kromatografoltiin silikageelillä (500 g) eluoimalla kloroformi/etyyliase-taattiseoksella (99:1), jolloin saatiin 9,1 g (saanto 48 35 %) otsikon tritiokarbonaattia keltaisena vaahtona.

Il 4i 82250

Otsikon yhdisteen infrapunaspektrissä dikloorime-taaniliuoksessa oli absorptiot kohdilla 6,62 ja 9,2 mikroni. Otsikon yhdisteen NMR-spektrissä deuterokloroformi-liuoksessa oli piikit kohdilla 0,08 (s, 6H); 0,8 (s, 9H); 5 1,02-1,5 (m, 6H); 3,0-3,48 (m, 3H); 4,12 (m, 1H); 5,54 (d, 1H); ja 6,57 (b, 1H) ppm.

Valmistus L

2-pyrrolidon-3-yyli-p-tolueenisulfonaatti

Liuokseen, jossa oli 1,0 g (0,01 moolia) 3-hydrok-10 si-2-pyrrolidonia 50 ml:ssa metyleenikloridia jäähdytettynä 0°:seen typen suojaamana, lisättiin 2,44 g (0,02 moolia 4-dimetyyliaminopyridiiniä, sitten 1,9 g (0,01 moolia) p-tolueenisulfonyylikloridia. Saatua liuosta sekoitettiin 0°:ssa 30 minuuttia, sitten huoneen lämpötilassa yön ajan. 15 Liuos pestiin 50 ml:11a 1 N suolahpnon vesiliuosta, 50 ml:11a vettä ja 50 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa otsikon yhdisteeksi amorfiseksi kiinteäksi aineeksi (2,1 g, saanto 83 %).

20 Otsikon yhdisteen NMR-spektrissä deuterokloroformi- liuoksessa oli piikit kohdilla 2,44 (s) ja 1,83-2,64 (c) (yht, 5H); 3,1-3,44 (m, 2H); 4,86 (t, 1H); 7,33 (d, 2H); ja 7,8 (d + b, 3H) ppm.

Valmistus M

25 Noudatettiin valmistuksen L menetelmiä käyttämällä lähtöaineena l-formyyli-3-hydroksipyrrolidiinia, jolloin saatiin l-formyyli-3-pyrrolidinyyli-p-tolueenisulfonaat-tia 82 %:n saannoin. Tuotteen deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 1,9-2,3 (c, 2H); 2,46 30 (s, 3H); 3,36-3,78 (c, 4H); 5,1 (c, 1H); 7,32 (d, 2H); 7,77 (d, 2H); ja 8,13 (d, 1H) ppm.

Vastaavasta alkoholista valmistettiin samalla tavalla 3-metyyli-perhydro-l,3-oksatsin-2-on-5-yyli-p-to-lueenisulfonaattia (81 %). Deuterokloroformin liuoksessa 35 NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 2,44 (s, 3H); 2,9 (s, 42 82250 3H); 3,46 (m, 2H); 4,18 (ra, 2H); 4,9 (m, 1H); 7,3 (d, 2H); ja 7,74 (d, 2H) ppm.

Valmistus N

2-pyrrolidon-4-yyli-p-tolueenisulfonaatti 5 Liuokseen, jossa oli 0,71 g (7,02 mmoolia) 4-hyd- roksi-2-pyrrolidonia 35 ml:ssa metyleenikloridia jäähdytettynä 0°C:seen typen suojaamana, lisättiin 1,72 g (14,04 moolia) 4-dimetyyliaminopyridiiniä, ja sen jälkeen 1,34 g (7,02 mmoolia) p-tolueenisulfonyylikloridia. Saadun liuok-10 sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan ja sekoitettiin 3 tuntia. Liuos pestiin sitten 2 kertaa 30 ml:n erillä 1 N suolahapon vesiliuosta, 30 ml:11a kyllästettyä natrium-vetykarbonaatin vesiliuosta ja 30 ml:11a kyllästettyä nat-riumkloridin vesiliuosta, kuivattiin vedettömällä natrium-15 sulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa amorfisek si kiinteäksi otsikon yhdisteeksi (1,5 g, saanto 84 %).

Otsikon yhdisteen deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 2,46 (s), 2,02-2,84 (c) (yht. 5H); 3,24-3,86 (c, 2H); 5,17 (c, 1H); 7,1 (b, 1H); 20 7,34 (d, 2H); 3a 7,76 (d, 2H) ppm.

Valmistus 0

Noudatettiin valmistuksen N menetelmiä käyttämällä lähtöalkoholina 5-hydroksimetyyli-3-metyyli-l,3-oksatso-lidin-2-onia, jolloin saatiin 85 %:n saannoin (3-metyyli-25 1,3-oksatsolidin-2-on-5-yyli)metyyli-p-tolueenisulfonaat- tia, jonka deuterokloroformiliuoksen MR-spektrissä oli piikit kohdilla 2;44 (s, 3H); 2,82 (s, 3H); 3,16-3,8 (m, 2H); 4,12 (d, 2H); 4,66 (c, 1H); 7,33 (d, 2H); ja 7,74 (d, 2H) ppm.

30 Samalla tavalla 4-hydroksimetyyli-3-metyyli-l,3- oksatsolidin-2-onin ollessa lähtöalkoholina saatiin 88 %:n saannoin (3-metyyli-l,3-oksatsolidin-2-on-4-yyli)-metyy- li-p-tolueenisulfonaattia, jonka deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 2,45 (s, 3H); 2,77 (s, 35 3H); 3,66-4,52(c, 5H); 7,32 (d, 2H); ja 7,74 (d, 2H) ppm.

Il 43 8 2 2 5 0

Samalla tavalla valmistettiin 75 %:n saannoin 1-formyylipiperidin-3-yyli-p-tolueenisulfonaattiavastaavas-ta alkoholista. NMR (CDC13); 1,22-2,17 (C, 4H); 2,46 (s, 3H); 2,96-3,9 (c, 4H); 4,53 (m, 1H); 7,34 (d, 2H); 7,8 (d, 5 2H); 7,93 (d, 1H).

Valmistus P

2-pyrrolidon-2-yyli-tioasetaatti

Seosta, jossa oli 855 mg (7,5 mmoolia) kaliumtio-asetaattla ja 1,27 g (5 mmoolia) raakaa 2-pyrrolidon-3-10 yyli-p-tolueenisulfonaattia 40 ml:ssa asetonia, kiehutettiin typen suojaamana noin 20 tuntia, Sitten seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännös jaettiin 50 ml:aan asetyyliasetaattia ja 50 ml:aan vettä liukeneviin osiin ja etyyliasetaattikerros pestiin 15 40 ml:11a vettä ja 30 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Etyyliasetaattiliuos kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Raaka tuote kromatografoitiin silikageelillä eluoimalla etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 180 mg (saanto 23 %) 20 otsikon yhdistettä.

Otsikon yhdisteen deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 2,38 (s) ja 1,7-2,98 (c) (yht. 5H); 2,27-3,6 (m, 2H); 4,17 (t, 1H); ja 7,74 (b, 1H) ppm.

25 Valmistus Q

Noudatettiin valmistuksen P menetelmiä käyttämällä lähtöaineina taulukossa 4 esitettyjä p-tolueenisulfonaat-teja, jolloin saatiin vastaavia tioasetaatteja, joiden saanto ja deuterokloroformiliuosten NMR-spektrit on esi-30 tetty taulukossa 4.

35 44 82250

Taulukko 4 Vastaavan p-tolueenisulfo- tioasetaatln naatti_saanto (%) NMR (ppm)_ 5 2-pyrrolidon-4-yyli 61 2,34(s) ja 2,0-4,4 (c) (yht. 8H); ja 7,44 (b, 1H).

1-formyy1i-3-pyrro- 95 2,4(s) ja 1,63- lidinyyli 3,06 (c) (yht.

10 5H); 3,14-4,26 <c,4H); ja 8,14 (b, 1H).

(3-metyyli-l,3-oksatso- 77 2,38(s, 3H); 2,82 lidin-2-on-5-yyli)met- (s,3H): 3,03-3,81 15 yyli (c, 4H); ja 4,57 (m, 1H).

(3-metyyli-l,3-oksatso- 68 2,36(s, 3H); 2,82(s) lldln-2-on-4-yyli)me- ja 2,75-3,45(m) (yht.

tyyli 5H); ja 3,64-4,57 20 (c, 3H).

Valmistus R

Pyrrolidin-2,5-dion-3-yyll-tioasetaatti Maleimidiä (5,0 g, 0,051 moolia) lisättiin 10 ml:aan (0,14 moolia) tioetikkahappoa, joka oli jäähdytetty 25 typen suojaamana 0°C:seen. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 70 minuuttia, ja suodatettiin sitten. Suodos laimennettiin 70 ml:11a etyyliasetaattia ja saatu liuos pestiin 50 ml:11a kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta ja 50 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Etyyli-30 asetaattikerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja konsentroitiin vakuumissa keltaiseksi öljyksi (5,4 g). Raaka tuote puhdistettiin flash-kromatografoimalla silika-geelillä (350 g), eluoimalla etyyliasetaatti-heksaani-seoksella 1:3, jolloin saatiin 3,81 g (43 %) otsikon yh-35 distettä valkeana kiinteänä aineena. Otsikon yhdisteen

II

♦s 82250 deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 2,38 (s) ja 2,3-3,54 (m) (yht. 5 H); 4,24 (m, 1H); ja 8,86 (b, 1H) ppm.

Valmistus S

5 2-piperidon-5-yyli-p-tolueenisulfonaatti 2-piperidon-5-olia (0,575 g, 5 mmoolia) liuotettiin 15 ml:aan dimetyyliformamidia ja liuos laimennettiin 50 ml:11a dikloorimetaania. Liuos jäähdytettiin 0°C:seen typen suojaamana ja lisättiin 0,95 g (5 mmoolia) p-tolueenisul-10 fonyylikloridia ja 1,22 g (10 mmoolia) 4-dimetyyliamino-pyridiiniä. Liuosta sekoitettiin 0°C:ssa 3 tuntia, sitten 25°C:ssa 20 tuntia, Reaktioseos laimennettiin sitten 125 ml:11a dikloorimetaania ja liuos pestiin 20 ml:11a 1 N suolahapon vesiliuosta, kahdella 20 ml:11a erällä vettä ja 15 20 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Orgaa ninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännökseen lisättiin dietyylieetteriä ja otsikon yhdiste saatiin kiinteänä tuotteena suodattamisen jälkeen (0,8 g, saanto 60 %).

20 Otsikon yhdisteen deuterokloroformiliuoksen NMR- spektrissä oli piikit kohdilla 2,4 (s) ja 1,67-2,6 (c) (yht. 7H); 3,43 (c, 2H); 4,86 (m, 1H); 6,96 (b, 1H); 7;3 (d, 2H); ja 7,76 (d, 2H) ppm.

Valmistus T

25 2-piperidon-5-yyli-tioasetaatti

Liuosta, jossa oli 1,9 g (6 mmoolia) tetrabutyyli-ammonium-tioasetaattia ja 0,0807 g (3 mmoolia) 2-piperi-don-5-yyli-p-tolueenisulfonaattia 15 ml:ssa asetonia, kiehutettiin typen suojaamana 70 minuuttia. Sitten liuos 30 haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös liuotettiin 75 ml:aan etyyliasetaattia. Etyyliasetaattiliuos pestiin peräkkäin 10 ml:11a vettä, 10 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta, 10 ml:11a vettä ja 10 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Yhdistetyt vesiuutteet 35 pestiin kahdella 50 ml:11a erällä etyyliasetaattia. Yhdis- 46 82250 tetyt etyyliasetaattifraktiot kuivattiin vedettömällä nat-riumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Raaka tuote kromatografoitiin silikageelillä (100 g), eluoimalla etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 0,229 g (44 %) otsikon 5 yhdistettä kellertävänä kiinteänä aineena. Otsikon yhdisteen deuterokloroformiliuoksen NMR-spektrissä oli piikit kohdilla 2,4 (s) ja 1,64-2,68 (c) (yht.7H); 2,73-4,1 (c, 3H); ja 7,05 (b, 1H) ppm.

Valmistus U

10 (1,3-oksatsolidin-2-on-4-yyll) metyyli-p-tolueeni- sulfonaatti p-tolueenisulfonyylikloridia (1,01 g, 0,0053 moolia) lisättiin sekoitettuun liuokseen, jossa oli 2-okso- 1,3-oksatsolidin-4-metanolia (0,619 g, 0,053 moolia) ja 4-15 dimetyyliaminopyridiiniä (1,30 g, 0,0106 moolia) 60 ml:ssa metyleenikloridia 0°C:ssa typpiatmosfäärin suojaamana. Seoksen oltua tunnin ajan 0°C.ssa lisättiin vielä 0,121 g p-tolueenisulfonyylikloridia ja reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia ja 25°C:ssa tunnin ajan. Reaktioseos 20 pestiin sitten kahdella erällä 1 N suolahapon vesiliuosta, 50 ml:11a vettä, 50 ml:11a kyllästettyä natriumvetykarbo-naatin vesiliuosta ja 50 ml:11a kyllästettyä natriumklori-din vesiliuosta, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatil-la ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 25 otsikon yhdistettä valkeana kiinteänä aineena (1,22 g saanto 85 %). NMR (CDC13); 2,45 (s, 3H); 3,87-4,54 (c, 5H); 6,18 (b, 1H); 7,3 (d, 2H); ja 7,73 (d, 2H) ppm.

Valmistus V

Käyttämällä valmistuksen U menetelmiä sopiva alko-30 holilähtöaine muutettiin vastaavaksi tosylaatiksi, jonka R, saanto ja NMR-spektri on esitetty taulukossa 5.

II

35 47 82250

Taulukko 5 _R_ NMR (ppm) Saanto (%) (1,3-oksatsolidin- 2,46 (s, 3H); 3:54 84 2-on-5-yyli)metyyli (m, 2H); 4,13 (d, 5 2H); 4,8 (m, 1H); 6,23 (b, 1H); 7,33 (d, 2H); ja 7,8 (d, 2H).

(1,3-tiatsolidin- 2,45 (s, 3H); 3,32 88 10 2-on-4-yyli)metyyli (m, 2H); 3,86-4,32 (c, 3H); 6,06 (b, 1H); 7,32 (d, 2H); ja 7,74 (d, 2H).

15 Valmistus W

l-metyylipiperidin-2-on-3-yyli-metyylisulfonaatti Metaanisulfonyylikloridia (0,8 ml, 0,01 moolia) lisättiin tiputtamalla sekoitettuun liuokseen, jossa oli l-metyyli-2-okso-3-piperidinolia (1,29 g 0,01 moolia) ja 20 4-dimetyyliaminopyridiiniä (2,44 g, 0,02 moolia) 50 ml:ssa metyleenikloridia 0°C:ssa typen suojaamana. Saatua liuosta sekoitettiin 0°C:ssa 15 minuuttia ja 25°C:ssa 2,5 tuntia. Reaktioseos pestiin sitten 50 ml:11a kyllästettyä natrium-kloridin vesiliuosta, jossa oli 6,8 ml 6 N kloorivetyhapon 25 vesiliuosta, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin vakuumissa paksuksi öljyksi, otsikon yhdisteeksi (1,8 g, saanto 87 %).

NMR (CDC13); 1,6-2,37 (c, 4H); 2,96 (s, 3H); 3,1-3,4 (c) ja 3,24 (s) (yht. 5 H); ja 4.9 (m, 1H) ppm.

30 2-okso-piperidin-3-olia muutettiin samalla tavalla 25 %:n saannoin piperidin-2-on-3-yyli-metyylisulfonaatik-si. NMR (CDCI3): 2,03 (c, 4H); 3,06-3,45 (c) ja 3,25 (s) (yht. 5H); 4,96 (m, 1H); 6,26 (b, 1H) ppm.

35 48 8 2 2 5 0

Valmistus X

(1,3-oksatsolidin-2-on-4-yyli)metyyli-tioasetaatti Liuosta, jossa oli 2-okso-l,3-oksatsolidin-4-yyli-metyyli-p-tolueenisulfonaattia (1,22 g, 0,0045 moolia) ja 5 tetrabutyyliammonium-tioasetaattia (1,71 g, 0,0054 moolia) 75 ml:ssa asetonia, kiehutettiin typen suojaamana 90 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin ja jäännös kro-matografoitiin silikageelillä (250 g). Eluoimalla etyyliasetaatti heksaaniseoksella (4:1) saatiin 580 mg otsikon 10 yhdistettä (saanto 75 %). NMR (CDC13): 2,38 (s, 3H); 3,06 (d,2H); 3,84-4,67 (c, 3H); ja 6,3 (b, 1H) ppm.

Valmistus Y

Käyttämällä valmistuksen X menetelmiä sopiva p-tosylaatti muutettiin vastaavasti tioasetaatiksi, jonka R, 15 NMR-spektri deuterokloroformissa ja saanto on esitetty taulukossa 6.

Taulukko 6 _R NMR (ppm) Saanto (%) (1,3-oksatsolidin- 2,37 (s, 3H); 3,22 76 20 2-on-5-yyli)metyyli (d, 2H); 3,47 (m, 2H); 4:7 (m, 1H); ja 6,26 (b, 1H); (1,3-tiatsolidin- 2,4 (s, 3H); 3,13 (d, 58 2- on-4-yyli)metyy- 2H); 3,32 (m, 2H); 25 li 3,93 (m, 1H); ja 6,63 (b, 1H).

3- metyyli-perhydro- 2,4 (s, 3H); 2,98 (s, 61 1,3-oksatsin-5-yyli 3H); ja 3,0-4,6 (c, 5H).

Valmistus Z

30 l-formyyli-3-plperidinyyli-tloasetaattl

Liuosta, jossa oli l-formyyli-3-piperidinyyli-p-tolueenisulfonaattia (1,12 g, 0,007 moolia) ja kaliumtio-asetaattia (0,091 g, 0,008 moolia) 10 ml:ssa dimetyyli-formamidia, lämmitettiin 70°C:ssa typen suojaamana 20 tun-35 tia. Reaktioseos laimennettiin 150 ml:11a etyyliasetaattia 49 82250 ja saatu liuos pestiin neljällä 50 ml:n erällä vettä ja 50 ml:11a suolavettä, kuivattiin vedettömällä natriumasetaa-tilla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännös kroma-tografoitiin silikageelillä (125 g) eluoimalla etyyliase-5 taatti/heksaaniseoksella (4:1), jolloin saatiin 0,16 g (saanto 21 %) otsikon yhdistettä.

NMR (CDClj): 1,12-2,3 (c) ja 2,32 (s) (yht. 7H); 2,84-4,0 (c, 5H); ja 7,9 (d, 1H) ppm.

Valmistus AA

10 l-metyylipiperldin-2-on-3-yyli-tioasetaatti

Seosta, jossa oli l-metyyli-2-okso-3-piperidinyyli-metaanisulfonaattia (1,7 g, 0,008 moolia) ja kaliumtioase-taattia (1,39 g, 0,012 moolia) 80 ml:ssa asetonia, kiehutettiin typen suojaamana 20 tuntia. Reaktioseos haihdutet-15 tiin kuiviin vakuumissa ja jäännös liuotettiin 50 ml:aan etyyliasetaattia ja 50 ml:aan vettä. Etyyliasetaatti-kerros pestiin 50 ml:11a vettä ja 50 ml:11a kyllästettyä nat-riumkloridin vesiliuosta, kuivattiin vedettömällä natrium-asetaatilla ja haihdutettiin kuiviin vaakumissa. Jäännös 20 kromatografoitiin silikageelillä eluoimalla etyyliasetaa tilla, jolloin saatiin 600 mg (saanto 40 %) otsikon yhdistettä. NMR (CDC13): 1,7-2,5 (c) ja 2,38 (s) (yht. 7H); 3,0 (s, 3H); 3,36 (m, 2H); ja 4,2 (m, 1H) ppm.

Piperidin-2-on-3-yyli-metyylisulfonaatti muutet-25 tiin samalla tavalla piperidin-2-on-3-yyli-tioasetaatiksi 56 %:n saannoin. NMR (CDC13): 1,5-2,5 (c) ja 2,36 (s) (yht. 7H); 3,32 (c, 2H); 4.12 (m, 1H); 7.18 (b, 1H) ppm.

Claims (2)

50

1. Menetelmä terapeuttisesti aktivisen 6-(l-hydrok-sietyyli)-2-atsasykloalkyyli(alkyleeni)tio-2-peneemi-3-5 karboksyylihappoyhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I OH Ϊ „ H·'" C . „ , ·. : ^ S ^ SR io / —K h3c I | ^--N-k υ C02H 15 tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, jossa kaavassa R on 20 u R2 25 jossa A on alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia, alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia ja jonka yhdessä hiiliatomissa on oksosubstituentti, tai alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia ja jonka yksi metyleeniryhmä on korvattu ha-pella tai rikillä; 30. on karbonyyli tai metyleeni; R2 on vety, formyyli tai alkyyli, jossa on 1 - 4 hiiliatomia; alk on alkyleeni, jossa on 1 - 4 hiiliatomia; ja n on 0 tai 1; 35 edellyttäen, että kun B on metyleeni ja A on alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia, alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiili 51 82250 liatomia ja jonka yhdessä hiiliatomisssa on oksosubsti-tuentti, joka hiiliatomi ei ole ryhmän R typpiatomin viereinen hiiliatomi, tai alkyleeni, jossa on 2 - 4 hiiliatomia ja jonka metyleeniryhmä on korvattu hapella tai rikil-5 lä, niin R2 on formyyli, tunnettu siitä, että yhdisteestä, jolla on kaava OH m J H h3c n t O^ C02R4 15 jossa R on edellä määritelty ja R4 on p-nitrobentsyyli, poistetaan hydraamalla ryhmä R4, ja haluttaessa muutetaan saatu kaavan 1 mukainen yhdiste farmaseuttisesti hyväk-20 syttäväksi suolakseen.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R on 2-pyrrolidon-3-yyli, 2-pyrrolidon-4-yyli, l-formyyli-3-pyrrolidinyyli, pyrroli-din-2,5-dion-3-yyli, (3-metyyli-l,3-oksatsolidin-2-on-4-25 yyli)metyyli, (3-metyyli-l,3-oksatsolidin-2-on-5-yyli)me- tyyli, 2-piperidon-5-yyli, piperidin-2-on-3-yyli, 1-metyy-lipiperidin-2-on-3-yyli, 2-piperidon-5-yyli, 1-formyylipi-peridin-3-yyli, (1,3-oksatsolidin-2-on-4-yyli)metyyli, (1,3-oksatsolidin-2-on-5-yyli)metyyli tai (1,3-tiatsoli-30 din-2-on-4-yyli)metyyli. 52 82250