FI78703B - Nya vinylkefalosporin c-derivat, foerfarande foer deras framstaellning och deras anvaendning vid framstaellning av aminokefalosporiner. - Google Patents

Description

1 78703

Uusia vinyylikefalosporiini C-johdannaisia, menetelmä niiden valmistamiseksi ja niiden käyttö aminokefalospo-riinien valmistuksessa 5 Keksintö koskee uusia vinyylikefalosporiini-C-joh dannaisia, menetelmää niiden valmistamiseksi ja niiden käyttöä aminokefalosporiinien valmistuksessa.

7-aminokefalosporaanihapon (7-ACA:n) johdannaiset ovat avainvälituotteita suuren joukon erilaisia puolisynteettisiä kefalosporiiniantibiootteja valmistuksessa. Erään menetelmän mukaisesti ne valmistetaan deasyloimalla vastaavia 7-asyyliaminokefalosporaanihappoja, jotka on valmistettu suoraan käymisen avulla tai voivat olla käymistuotteiden johdannaisia. Eräs hyvin tunnettu deasylointimenetelmä 15 käsittää ns. iminohalogenidi/iminoeetteri-tien, jossa 7-amidosidoksen karbonyyliryhmä muutetaan iminohalogeni-diksi halogenointiaineella, kuten fosforipentakloridillä; iminohalogenidi muutetaan sitten iminoeetteriksi alkoholilla ja iminoeetteri lohkaistaan helposti hydrolyysillä, 20 jolloin muodostuu vapaa 7-aminokefalosporaanihappo. Tätä menetelmää sovellettuna kefalosporiini C:lle on kuvattu esimerkiksi GB-patenttijulkaisussa 1 041 985.

Hakemusjulkaisussa DOS 3 002 659 on kuvattu erittäin edullista parannusta menetelmään kefalosporiini C;n 25 muuttamiseksi 7-ACA:ksi, mikä aluksi käsittää kefalospo-riini C-johdannaisten muodostamisen, joilla on kaava A:

Ra-OOC-CH- (CH2) 3-CO-NH“j- 30 iH / i* J- CH2OCOCH3 a JH COORa c b c 35 jossa ryhmät R , jotka voivat olla samoja tai erilaisia,

SL

ovat kukin vety tai esteriryhmittymän tähde, ja R^ ja Rc 2 78703 jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat kumpikin vety, nitro, syaani tai alempi alkoksikarbonyyli.

Kaavan A mukaiset johdannaiset voidaan helposti de-asyloida, esimerkiksi iminohalogenidi/iminoeetteri-tietä, 5 muodostamaan 7-ACA tai sen suoloja tai estereitä. Eräs tämän menetelmän pääetu on, että kaavan A mukaisten yhdisteiden muodostaminen voidaan suorittaa helposti kefalospo-riini C:n viljelysuodoksissa välttäen siten tarve eristää kefalosporiini C, mikä on työlästä. Eräs lisäetu on, että 10 reagenssit, joita käytetään kaavan A mukaisten johdannaisten valmistamiseen, ovat kestäviä hydrolyysiä vastaan vesipitoisessa väliaineessa eikä niitä siten tarvitse käyttää suuressa ylimäärässä, vastakohtana muille tunnetuille menetelmille, joissa kefalosporiiniosan aminoryhmä suoja-15 taan ennen deasylointivaihetta, esimerkiksi reaktiolla happokloridien kanssa. Tällaisten ylimäärien välttäminen vähentää sivureaktioita ja parantaa siten saaliita. Kaavan A mukaisia johdannaisia nimitetään tässä polaarisiksi ole-fiineiksi ja siten menetelmää nimitetään polaariseksi ole-20 fiinimenetelmäksi.

• Nyt on yllättäen havaittu, että muita polaarisia olefiineja voidaan käyttää menetelmässä kefalosporiini C:n muuttamiseksi 7-ACA:ksi. Yllättäen on myös havaittu, että polaarinen olefiinimenetelmä on melko yleisesti käyttökel-; 25 poinen ei ainoastaan itse kefalosporiini C:lle, vaan myös muille tunnetuille kefalosporiineille, joissa on aminoadi-poyylisivuketju, esimerkiksi kefamysiineille. Lopuksi on keksitty, että nämä polaariset olefiinit sopivat hyvin, esimerkiksi riittävän pysyvinä, edelleen derivatisaatioon, 30 erityisesti 3-substituentin kohdalla, aivan erityisesti : tioloimalla ennen deasylointivaihetta.

; Keksintö koskee siten polaaristen olefiinien uutta luokkaa. Keksinnön mukaisilla vinyylikefalosporiini C-johdannaisilla on kaava I: ; 35 73703

RgOOC-CH-(CH2) 3-CO-NH-|-i'""8 \ NH J—N ^ ώ 0 ^ CH2-R4 5 i j, i < \ jossa R4 on ryhmä R..-C0-0-, jossa R5 Qn alempi alkyylif tai R4 tarkoittaa kefalosporiinikemiassa tavanomaista C3-10 heterosyklyylitiosubstituenttia, R^ ja R , jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat joko alempi alkanoyyli, kun R4 on CH^—CO—O, tai alempi alkoksikarbonyyli, kun R4 on muu kuin CHg-CO-O-, ja ryhmät Rg, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat kumpikin vety tai esteriryhmän 15 tähde, tai johdannaisen, jossa toinen tai kumpikin ryhmistä Rg on vety, suola.

Keksintö koskee myös menetelmää kaavan I mukaisten vinyylikefalosporiini C-johdannaisten valmistamiseksi, jolle menetelmälle on tunnusomaista, että 20 a) valmistetaan yhdiste, jolla on kaava Ia: ; Rg-OOC-CjH-{CH2) gCO-NH-r-f Ί fjH ^—N - CH2OCOR5 CH 0 j Ia I ' 25 ^CN COOR8 R2 Ri jossa R^ ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä ja R2 ja R| kumpikin on alempi alkanoyyli, saattamalla yhdiste, jolla 30 on kaava II:

RgOOC-CH- (CH2) 3-CO-NH-i-f I

:· K o>-V ch2ocor5

T II

35 COORg 4 78703 jossa Rg ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava III:

Ri

5 R7-0-CH=C III

R2 jossa R| ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä ja R^ on alempi alkyyli, tai b) valmistetaan yhdiste, jolla on kaava Ib: 10

S

R8OOC-CH-(CH2) 3-CO-NH-----S N

f ^ i v,U:h2s-r6 ib CH 6oORq 15 II 8

C

K-"" X R2 *1 20 jossa R1, R2 ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä ja Rg tarkoittaa kefalosporiinikemiassa tavanomaista C^-hetero-sylkyylisubstituenttia saattamalla yhdiste, jolla on kaava Ie:

S

25 r8OOC-CJH-(CH2) 3-CO-NH-i-^ X

NH J-n - CH_OCORc I O ^ '<S 2 5

CH I

K COOR- lG

r/ \ R2 R1 30 jossa R3, R2, ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava IV:

HS-Rg IV

35 jossa Rg tarkoittaa samaa kuin edellä.

5 78703

Menetelmä a) toteutetaan edullisesti inertissä liuottimessa tai liuotinseoksessa, esim. vesipitoisessa väliaineessa tai veden ja veden kanssa sekoittuvan liuottimen, kuten alkanolin, esim. etanolin seoksessa, tai 5 asetonissa, edullisesti vedessä. Reaktio saatetaan sopivasti tapahtumaan lämpötilassa 5°-50°C, edullisesti 10°-40°C, erityisesti huoneen lämpötilassa. Edullisesti käytetään kaavan II mukaista yhdistettä, kun toinen tai kumpikin ryhmistä Rg on vety, vapaan hapon tai suolan muodossa, 10 esimerkiksi alkalimetallisuolan, kuten mono- tai dinat-riumsuolan muodossa.

Menetelmä b) toteutetaan sopivasti vesipitoisessa liuoksessa, edullisesti toimien neutraaleissa tai heikosti happamissa tai emäksisissä olosuhteissa, erityisesti 15 pHsssa 4-9 ja varsinkin pH:ssa 6,5. Vesipitoinen väliaine voi sopivasti sisältää hydrofiilisen orgaanisen liuottimen, esimerkiksi asetonia, ja reaktio voidaan sopivasti saattaa tapahtumaan lämpötilassa 20°-100°C, edullisesti 50°-70°.

20 Menetelmä b) voidaan vaihtoehtoisesti toteuttaa inertissä orgaanisessa liuottimessa tai liuotinseoksessa; kysymykseen tulevat esimerkiksi alifaattiset tai aromaattiset hiilivedyt, amidit, eetterit, ketonit, karboksyyli-happoesterit, alifaattiset tai aromaattiset halogeenihii-25 livedyt, nitrohiilivedyt ja nitriilit. Spesifisiä esimerkkejä sopivista liuottimista ovat tolueeni, ksyleeni, diok-saani, metyyli-isobutyyliketoni, sykloheksanoni, butyyli-asetaatti, dietyylikarbonaatti, 1,2-dikloorietaani, hii-litetrakloridi, kloroformi, 1,1,1- tai 1,1,2-trikloori-30 etaani, 1,1,2,2-tetrakloorietaani, klooribentseeni, di- klooribentseeni, nitrometaani, nitroetaani, nitrobentsee-ni, propionitriili ja butyronitriili, edullisesti 1,1,2-trikloorietaani, 1,1,2,2-tetrakloorietaani, metyyli-isobutyyliketoni, nitrobentseeni, nitrometaani tai nitro-35 etaani. Edullisesti liuotin valitaan niin, että reagoivat aineet ovat liukoisia halutussa reaktiolämpötilassa. Menetelmä toteutetaan edullisesti 50°-180°C:ssa.

6 7 ö 7 u 6

Vaihtoehtoisesti menetelmä b) voidaan toteuttaa ilman liuotinta, jolloin, näiden kahden reagoivan aineen ollessa hyvin sekoitettuja ja kuumennettuja reaktiolämpöti-laan, useimmissa tapauksissa muodostuu kirkas sulate (tai 5 liuos).

Reagoivien aineiden molekyylisuhde ei ole ratkaiseva, mutta yleensä kaavan IV mukaista yhdistettä käytetään ekvimolaarisissa määrissä tai pienessä ylimäärässä; edullisesti käytetään 1-3, vielä edullisemmin 1-1,5 mooliek-10 vivalenttia yhdistettä IV mooliekvivalenttia kohti yhdistettä Ie. Reagoivia aineita voidaan käyttää vapaassa muodossa tai suolojen muodossa, esimerkiksi alkalimetallisuo-loina, kuten natrium- tai kaliumsuoloina.

Syntyneet kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan, jos 15 niin halutaan, eristää ja puhdistaa tavanomaiseen tapaan.

Kun on tarpeen, muutetaan kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa toinen tai kumpikin Rg on vety, suolamuodoiksi, esim. alkalimetalli-, kuten kalium- tai natriumsuoloiksi tavalliseen tapaan, tai päinvastoin.

20 Kaavan I mukaisissa yhdisteissä ryhmän (ryhmien) Rg muodostama(t) esteriryhmittymä(t) voi olla mikä tahansa tavanomainen esterisuojaryhmä, jota käytetään kefalospo-riinikemiassa, erityisesti deasylointiprosesseissa 7-ACA:n tai sen johdannaisten valmistamiseksi. Edullisia estereitä 25 ovat trialkyylisilyyli-, dialkyylikloorisilyyli-, bentshyd- ryyli- ja nitrobentsyyliesterit. Ryhmät Rg sekä ryhmät R^ ja R2 ovat sopivasti samoja. Vaihtoehtoisesti toinen voi olla vety ja toinen esimerkiksi alempi alkanoyyli. Tässä käytettynä käsite "alempi”, kun sitä käytetään alkyyliryh-30 mistä tai ryhmistä, jotka sisältävät alkyyliryhmiä, tarkoittaa esim. c^_2' er:>-tyisesti c^·

Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat, kuten on osoitettu, käyttökelpoisia välituotteina 7-ACA-johdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava V: 35 7

.S

Η2ΝΊ-( ^ CH2R4 v 5 coor8 73703 jossa ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä, sekä yhdisteiden, joissa Rg on vety, suolojen valmistamiseksi.

Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan muuttaa yhdis-10 teiksi V hyvin tunnetuin deasylointimenetelmin, kuten edellä kuvattua iminohalogenidi/iminoeetteri-tietä. Kaavan V mukaiset yhdisteet ovat tietenkin itse avainlähtöaineita suurta joukkoa varten tunnettuja, erittäin aktiivisia ke-falosporiiniantibiootteja.

15 Edulliset merkitykset R4:lle sanelee tietenkin ha luttu kaavan V mukainen tuote, tai, lopullisesti siitä valmistettu haluttu kefalosporiiniantibiootti. Nämä ovat tietenkin tunnettuja tuotteita. Kun R^ on kefalosporiinikemi-assa tavanomainen Cg-heterosyklyylitiosubstituentti, voi 20 heterosykliosa olla esimerkiksi: pyrroli, oksatsoli, isoksatsoli, tiatsoli, isotiatsoli, pyratsoli, imidatsoli, 1,2,3-oksadiatsoli, 1,2,4-oksadi-atsoli, 1,2,5-oksadiatsoli, 1,2,3-tiadiatsoli, 1,2,4-tia-diatsoli, 1,2,5-tiadiatsoli, 1,3,4-tiadiatsoli, 1,2,3-tri-25 atsoli, 1,2,4-triatsoli, oksatriatsoli, tetratsoli, pyri-diini, pyridatsiini, pyrimidiini, pyratsiini, 1,2,4,5-tetratsiini, bentstiatsoli, bentsimidiatsoli, puriini, pteridiini, kinoliini, kinatsoliiini, tetratsoli/j,5,67-pyridatsiini. Heterosykli voi olla substituoimaton. Vaih-30 toehtoisesti se voi olla mono- tai polysubstituoitu, esimerkiksi alemmalla alkyylillä, alemmalla alkenyylillä, alemmalla alkynyylillä, bentsyylillä, aryylillä (esimerkiksi fenyylillä tai substituoidulla fenyylillä), halogeenilla, trifluorimetyylillä, aminolla, karboksilla, karbamoyy-35 Iillä, karbalkoksilla, alemmalla aminoalkyyIillä, alemmalla karboksialkyylillä, alemmalla karbalkoksialkyylillä tai alemmalla karbamoyylialkyylillä.

8 78703

Erityisesti heterosykli voi sopivasti olla 2-metyy-li-3-pyratsoli, 2-metyyli-3-imidatsoli, 1-metyyli-l,2,3-triatsoli-5, 3,5-dimetyyli-l,2,3-triatsoli-4, 4-metyyli- 1.2.4- triatsoli-5, 3-metyyli-l,2,3-triatsoli-4, 5-metyyli- 5 1,2,3-oksadiatsoli-4, 1,2,4-oksadiatsoli-3, 3-metyyli- 1.2.4- oksadiatsoli-5, 3-metyyli-l,2,5-oksadiatsoli-4, 3-metyyli-l,2,4-tiadiatsoli-5, 1,3,4-tiadiatsoli-5, 2-me-tyyli—1,3,4-tiadiatsoli-5, 2-(N-metyyliasetamido)-1,3,4-tiadiatsoli-5, 5-tetratsoli, l-metyylitetratsoli-5, 1-kar-boksimetyylitetratsoli-5, 1-(2-dimetyyliaminoetyyli)-tet-ratsoli-5, 1,2,3,4-oksatriatsoli-5, 2-pyridiini, 2-pyrimi-diini, 4-pyridiini, 3-pyridatsiini, 2-pyratsiini, 2-kar-bamoyylimetyyli-1,3,4-tiadiatsoli, 2-karbamoyylimetyyli- 1.3.4- oksadiatsoli-5, 2-karbamoyylimetyyli-l,3,4-oksa-15 diatsoli-5, 1-karbamoyylimetyyli-l,2,3,4-tetratsoli-5, suojattu 1-(ft-aminoetyyli)tetratsoli-5, 1-(/A-karboksi-etyyli)tetratsoli-5, 2,5-dihydro-6-hydroksi-2-metyyli-5-okso-1,2,4-triatsiini-3, 4,5-dihydro-6-hydroksi-4-metyyli- 5-okso-l,2,4-triatsiini-3, 1,3,5-triatsiini-2, bentsimi-20 diatsoli-2, bentsotiatsoli-2, bentsoksatsoli-2 ja tetrat-soli/T,5, £/pyridatsiini-6,

Menetelmässä b) käytettävät kaavan IV mukaiset yhdisteet ovat tunnettuja ja niitä voidaan valmistaa tavalliseen tapaan käytettävissä olevista lähtöaineista, kuten on 25 kuvattu esimerkiksi julkaisuissa Heterocyclic Compounds, Robert C. Elderfield (John Wiley & Sons, N.Y.) tai The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Weissberger et ai. (John Wiley & Sons, N.Y.). Yhdiste dihydro-1,2,4-triat-siini-3-tioli voidaan valmistaa analogisesti menetelmän 30 kanssa, jonka on kuvannut K.H. Ongania (Dissertation,

Innsbruck 1972). Kun menetelmässä b) käytettävä kaavan IV - mukainen yhdiste sisältää vapaan aminoryhmän, tämä tulisi edullisesti suojata ennen reaktiota, jolloin suojaryhmä syntyneessä tuotteessa on poistettavissa tavanomaiseen 35 tapaan.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.

9 rj o n 7

/ O / UO

Esimerkki 1

N- (2,2-diasetyylivinyyli)kefalosporiini C

(Menetelmä a) 9.5 Cephalosporin C:n mononatriumsuolan dihydraat-5 tia liuotetaan veteen ja pH asetetaan 8:aan lisäämällä 2N NaOH. Lisätään 4 g 3-etoksimetyleenipentaani-2,4-dio-nia, minkä jälkeen pH-arvo välittömästi alkaa laskea. Lisäämällä jatkuvasti 2N NaOH pidetään pH-arvo n. 8:ssa.

N. 30 minuutin kuluttua liuoksen pH-arvo asetetaan 2:een 10 ja reaktioseos uutetaan n-butanolilla. Orgaaninen faasi kuivataan ja liuotin haihdutetaan pois. Jäännöstä hierretään di-isopropyylieetterillä ja kuivataan tyhjössä antamaan otsikkoyhdiste, sp. >110°C (hajoaa).

Esimerkki 2 15 N-(2,2-diasetyylivinyyli)kefalosporiini C:n mono- natriumsuola (Menetelmä a) 1 litra tavanomaisesti saatua Cephalosporin C-käymi-sen viljelysuodosta (vaikuttavan aineen pitoisuus 13 g/ litra) asetetaan pH-arvoon 8 lisäämällä 2N NaOH. Sekoit-20 taen lisätään 15 ml 3-etoksimetyleenipentaani-2,4-dionia, jolloin pH-arvo pidetään 8:ssa lisäämällä jatkuvasti NaOH. N. 30 minuutin kuluttua pH-arvo ei enää laske, silloinkaan kun NaOH:ia ei lisätä. pH-arvo asetetaan sitten 2:een ja : seos uutetaan n-butanolilla. Orgaaninen faasi haihdutetaan 25 pääasiallisesti ja jäännös kootaan 300 ml:aan asetonia.

Mononatriumsuola saostetaan lisäämällä 5 g natriummetyyli-heksoaattia (liuotettuna 50 ml:aan asetonia). Suola eristetään suodattamalla ja kuivataan tyhjössä. Sp. >160-170°C (hajoaa).

30 Esimerkki 3 N-(3-oksobut-l-en-l-yyli)kefalosporiini C Menetelmä a) 9.5 g Cephalosporin C:n mononatriumsuolan dihydraat-tia liuotetaan 200 ml saan vettä. Seoksen pH-arvo asete- 35 taan arvoon 9 lisäämällä 2N NaOH. Seokseen lisätään sekoittaen 10 ml 4-metoksibut-3-en-2-onia ja seos lämmitetään 40°C:seen. pH pidetään arvossa 9 20 minuutin ajan lisää- 10 78703 mällä 2N NaOH. Seos jäähdytetään 10°C:seen ja pH asetetaan sen jälkeen arvoon 2. Reaktioseos uutetaan n-butanolilla. Uute haihdutetaan tyhjössä. Jäännös käsittää seoksen, jossa on otsikkoyhdistettä ja kefalosporiini C:tä, jota muo-5 dostuu otsikkoyhdisteen happohydrolyysissä. Tätä seosta voidaan käyttää hydrolyysin kefalosporiini C:ksi tai loh-kaisuun 7-ACA:ksi ilman lisäpuhdistusta.

Esimerkki 4 N-(3-oksobut-l-en-l-yyli)kefalosporiini C 10 Menetelmä a) 1 litra tavanomaisesti saatua Cephalosporin C-käy-misen veijelysuodosta (aktiivisen aineen pitoisuus 13 g/1) lämmitetään 40°C:seen. Seoksen pH-arvo asetetaan arvoon 9 lisäämällä 2N NaOH ja sekoitetaan sitten 25 ml:n kans-15 sa 4-metoksi-but-3-en-2-onia. pH pidetään 20 minuutin ajan arvossa 8,5 - 9 lisäämällä 2N NaOH ja seos jäähdytetään sitten 10°C:seen ja pH asetetaan arvoon 2. Seos uutetaan n-butanolilla ja sekoitetaan 50 % risen NaOH:n kanssa kunnes saavutetaan pH-arvo 5. Liuotin poistetaan 20 tyhjössä ja jäännös digeroidaan etyyliasetaatilla. Kiin teä aine eristetään ja kuivataan ja näin saatu otsikko-yhdisteen ja kefalosporiini C:n natriumsuolaseos on, lisäpuhdistamisen jälkeen, sopiva ei ainoastaan hydrolyy-siin kefalosporiini Crksi, vaan myös lohkaistavaksi 25 7-ACA:ksi.

Esimerkki 5 7-ZK-(2,2-dietoksikarbonyyli)vinyylijadipiiniamidi- 3-/2,5-dihydro-6-hydroksi-5-okso-2-metyyli-1,2,4-triatsin- 3-yyli)tiometyyli7kef-3-eemi-4-karboksyylihappo 30 (Menetelmä b) 11,7 g N-/(2,2-dietoksikarbonyyli)vinyyli/kefalo-sporiini Crtä ja 3,5 g 2,5-dihydro-6-hydroksi-5-okso-2-metyyli-l,2,4-triatsiini-3-tiolia suspendoidaan 100 ml:aan vettä. Seoksen pH-arvo asetetaan 6,5:een lisäämällä natrium- 11 78703 bikarbonaattia, minkä jälkeen saadaan kirkas liuos. Liuos kuumennetaan 60°C:seen ja sitä sekoitetaan tässä lämpötilassa 6 tuntia, minkä jälkeen pH-arvo pysyy 6,5:ssä. Seos jäähdytetään sitten huoneen lämpötilaan ja sen pH-arvo ase-5 tetaan 2:een lisäämällä puoliväkevää rikkihappoa. Syntynyttä osittain öljymäistä sakkaa uutetaan etyyliasetaatin ja asetonin seoksella (5:1) ja uute vapautetaan liuottimes-ta ja jäännöstä dispergoidaan asetonitriilillä. Syntynyt kiinteä aine eristetään ja kuivataan 40°C:ssa tyhjössä 10 antamaan otsikkoyhdiste vaalean beige-värisenä oleellisesti puhtaana jauheena. Sp. >165°C (hajoaa).

1H-NMR (MeOH-d4): /= 9,30 (q, 1H, -CO-NH -); 8,10 (d, 1H, >n-CH=); 5,70 (1H, H?); 5,00 (1H, Hg); 4,20 (4H, 0-CH2~); 3,70 (s, 3H, NCH3)? 3,65 (q, 2H, S-CH2~); 1,30 (2t, 6H, 15 -CH2-CH3).

Otsikkoyhdiste voidaan eristää myös natriumsuolana kokoamalla haihdutusjäännös asetoniin ja lisäämällä nat-riumetyyliheksoaatin liuosta asetonissa tai natriumase-taatin metanolipitoista liuosta, suodattamalla ja kuivaa- 20 maila 50°C:ssa.

Esimerkki 6 7-Z5-(2,2-dietoksikarbonyyli)vinyyli?adipiiniamidi- S-ZJ-metyyli-^l, 2,3,4-tetratsol-5-yyli) tiometyylI7-kef-3-eemi-4-karboksyylihappo, natriumsuola (Menetelmä b) 25 5,85 g N-/2~. 2-dietoksikarbonyvli) vinyyli?-kefalo- sporiini C:tä suspendoidaan yhdessä 1,35 g:n kanssa 1-me-tyyli-5-merkaptotetratsolia 70 ml:aan vettä. pH-arvo asetetaan 6,5:een kiinteällä natriumbikarbonaatilla, minkä jälkeen saadaan kirkas liuos. Tätä liuosta sekoitetaan 30 5 tuntia 60-70°C:ssa ja jäähdytetään sitten huoneen läm pötilaan. pH asetetaan 5:een laimealla rikkihapolla ja happofaasia, josta erottuu öljyraäinen sakka, uutetaan etyy-liasetaatti/asetoni-seoksella (5:1). Uute pestään kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella ja haihdutetaan sitten.

35 Jäännös kootaan 70 ml:aan asetonia, suodatetaan liukenemattomasta aineesta ja sekoitetaan natriumetyyliheksoaa-tin liuoksen kanssa asetonissa, minkä jälkeen muodostuu 12 73703 tilaavievä sakka. Sakka suodatetaan, pestään asetonilla ja kuivataan 50°C:ssa tyhjössä antamaan otsikkoyhdiste oleellisesti puhtaan vaalean beige-keltaisen jauheen muodossa, sp. >175°C (hajoaa).

5 1H-NMR (MeOH-dg): 9,20 (q, 1H, =C-N-H , J = 8 Hz, J = 16 Hz); 8,00 (d, 1H, =C-H, J = 16 Hz); 5,50 (d, 1H, H?, J = 5 Hz); 4,95 (d, 1H, Hg, J = 5 Hz); 4,20 (m, 7H, 2X-OCH,»-, C3-CH2-S-, >N-C-COOH); 3,98 (s, 3H, N-CH3); 3,60 (q, 2H, S-CH2-, J = 18 Hz); 2,40 - 1,60 (2m, 6H, -CH2-CH2); 1,33 10 ja 1,28 (2t, 6H, 2x-etyyli-CH3, J = 7 Hz).

Esimerkki 7 7-Zn-(2,2-dietoksikarbonyyli)vinyyljjadipiiniamidi-ZJl-metyyli-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)tiometyylX7kef-3-eemi-karboksyylihappo, natriumsuola (Menetelmä b) 15 5,85 g N-0"2,2-dietoksikarbonyyli)vinyyl£/kefalo- sporiini C:tä sekoitetaan 1,75 g:n kanssa 5-merkapto-l-metyyli-l,2,3,4-tetratsolia. Seos kuumennetaan 140°C:seen ja pidetään tässä lämpötilassa 15 minuuttia. Jäähdyttämisen jälkeen tummaksi värjäytynyt sulate kootaan 200 ml;aan 20 asetonia, vapautetaan suodattamalla liukenemattomasta aineesta ja suodos sekoitetaan natriumetyyliheksaatin liuoksen kanssa asetonissa (1,7 g 30 ml:ssa). Syntynyt sakka eristetään, pestään asetonilla ja kuivataan 60°C:ssa tyhjössä antamaan otsikkoyhdiste, sp. >175°C (hajoaa).

25 Esimerkki 8 7-£F~- (2,2-dietoksikarbonyyli) vinyyLOadipiiniamidi-metyyli-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-eemi-4-karboksyylihappo, natriumsuola (Menetelmä b) 5,85 g N-&,2-dietoksikarbonyyli)vinyyljjkefalospo-30 riini C:tä liuotetaan yhdessä 1,75 g:n kanssa 5-merkapto-1-metyyli-l,2,3,4-tetratsolia 100 ml:aan 1,1,2-trikloori-etaania ja liuos saatetaan kiehuvaksi. 50 minuutin palautus jäähdyttäen kuumentamisen jälkeen liuos haihdutetaan liuottimen pääasiallisesti poistamiseksi, jäännös kootaan 35 200 ml:aan asetonia ja asetonipitoinen liuos käsitellään valmiiksi kuten esimerkissä 7 antamaan otsikkoyhdiste sp. >175°C (hajoaa).

13 78703

Esimerkki 9 7-Ζ1Γ- (2,2-dietoksikarbonyyli) vinyyli?adipiiniamidi- 3-Z.Tl-metyyli-l ,2,3,4-tetratsol-5-yyli) tiometyyljJ-kef-3-eemi - 4-karboksyylihappO/ natriumsuola (Menetelmä b) 5 5,85 g N-£J2,2-dietoksikarbonyyli) vinyylf7-kefalo- sporiini C:tä sekoitetaan hyvin 2 g:n kansa natrium-l-me-tyyli-1,2,3,4-tetratsoli-5-tiolaattia.

Jauhemaista seosta kuumennetaan sitten 15 minuuttia 140°C:ssa, minkä jälkeen muodostuu tummaksi värjäytynyt su-10 late. Tämä digeroidaan asetonilla jäähdyttämisen jälkeen ja kiinteä aine eristetään, pestään asetonilla ja kuivataan tyhjössä antamaan otsikkoyhdiste, sp. >175°C (hajoaa).

Esimerkki 10 7-Zn-(2,2-dietoksikarbonyyli)vinyyli?adipiiniamidi-3-15 ZTl-metyyli-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)tiometyylU-kef-3-eemi-karboksyylihappo, natriumsuola (Menetelmä b) 6,07 g N-/jf2,2-dietoksikarbonyyli) vinyyl£7-kefalospo-riini C:n natriumsuolaa sekoitetaan hyvin 1,75 g:n kanssa 5-merkapto-l-metyyli-l,2,3,4-tetratsolxa ja seosta käsitel-20 lään kuten esimerkissä 9 otsikkotuotteen saamiseksi, sp. >175°C (hajoaa).

Esimerkki 11 7-/N-(2,2-dietoksikarbonyyli)vinyy1x7adipiiniamidi-3-Z_(bentsotiatsol-2-yyli) tiometyyl£7~kef-3-eemi-4-karboksyyli-25 happo, natriumsuola (Menetelmä b) Ν-Λ12,2-dietoksikarbonyyli)vinyyli7kefalosporiini C ja 2-merkaptobentsotiatsoli saatetaan reagoimaan ja käsitellään valmiiksi moolisuhteessa 1:1,5 samalla tavalla kuin esimerkeissä 7 ja 8 antamaan otsikkoyhdiste, sp. >180°C 30 (hajoaa).

Esimerkki 12

Kefalosporiini C-mononatrium-dihydraattisuola 5 g esimerkissä 4 tai 3 saatua seosta liuotetaan 25 mlsaan etanolia, sekoitetaan 10 ml:n kanssa muurahais-35 happoa ja kuumennetaan 50°C:seen. 20 minuutin kuluttua 14 73703 seos haihdutetaan tyhjössä kuiviin, jäljellä oleva muurahaishappo poistetaan atseotrooppisella tislauksella tolueenin kanssa ja jäännös kootaan 15 ml:aan 80 %:ista etanolia ja neutraloidaan natriumasetaatilla. Liuos ym-5 pätään kefalosporiini C-natriumdihydraattisuolan kiteillä ja annetaan seistä useita tunteja. Kiteet eristetään, pestään kylmällä etanolilla ja kuivataan antamaan otsik-koyhdiste.

10 Esimerkki 13 7-aminokefalosporaanihappo (7-ACA) 10 g esimerkeissä 3 tai 4 saatua seosta suspendoi-daan 50 mitään dikloorimetaania. Lisätään 12 ml dimetyy-lianiliinia ja 10 ml dimetyylidikloorisilaania tiputtaen 15 ja jäähdytetään, minkä jälkeen syntyy pääasiallisesti kirkas liuos. Tämä liuos jäähdytetään sitten -10°C:seen ja lisätään annoksittain 5,1 g fosforipentakloridia kosteuden poissaollessa ja pitäen lämpötila -10°C:ssa. Seosta sekoitetaan sitten 1 tunti -10°C:ssa ja kaadetaan 20 sen jälkeen 180 ml:aan esijäähdytettyä metanolia (-20°C), minkä jälkeen lämpötila nousee n. +5°C:seen. Seokseen lisätään 15 ml vettä, pH asetetaan arvoon 3,5 lisäämäl- : lä väkevää ammoniakkia ja seosta sekoitetaan 1 tunti n. +5°C:ssa. Sakka suodatetaan pois, pestään hyvin vedel-25 lä ja metanolilla ja kuivataan 60°C:ssa antamaan 7-ACA puhtaudeltaan n. 95 %:isena.(HPLC).

Esimerkki 14 7-amino-3-r( 1-metyyli-l,2,4-tetratsol-5-yyli)tio-metyylj7~kef~3-eemi-4-karboksyylihappo 30 7 g 7-Zn-(2,2-dietoksikarbonyyli)vinyyli/adipiini- amidi-3-/"( 1-metyyli-l ,2,3,4-tetratsol-5-yyli) tiometyylU-kef-3-eemi-4-karboksyylihapon natriumsuolaa suspendoidaan 40 ml:aan kuivaa metyleenidikloridia. Lisätään 11 ml dime- is 73703 tyylianiliinia huoneen lämpötilassa, mitä seuraa 10 ml dimetyylidikloorisilaania, minkä jälkeen lämpötila nousee n. 33°C:seen ja muodostuu kirkas liuos. 10 minuutin kuluttua seos jäähdytetään -10°C:seen ja lisätään 3 g fosfori-5 pentakloridia, minkä jälkeen lämpötila nousee n. -5°C:seen. 40 minuutin sekoittamisen jälkeen -5°C:ssa reaktioliuos kaadetaan 60 ml:aan esijäähdytettyä metanolia (-20°C), jolloin lämpötila nousee n. +5°C:seen. Sen jälkeen kun on lisätty 10 ml vettä asetetaan liuoksen pH-arvo 3,5:een puo-10 liväkevällä ammoniakilla, minkä jälkeen tuote saostuu. Sakka suodatetaan pois, pestään vedellä ja metanolilla ja kuivataan tyhjössä 50°C:ssa. Näin saatu vaaleankermanvärinen jauhe muodostaa puhtaan otsikkoyhdisteen, sp. >225°C (hajoaa) .

15 1H-NMR (D20, K2C03) : 4 = 5,05 (d, 1H, H?, J = 5 Hz); 4,80 (d, 1H, Hg, J = 5 Hz); 4,20 (q, 2H, C3-CH2~S-, J = 13 Hz); 4,05 (s, 3H, N-CH3); 3,55 (q, 2H, -C2CH2", J = 18 Hz).

Esimerkki 15 7-amino-3- /~T2,5-dihydro-5-okso-6-hydroksi-2-metyy-20 li-1,2,4-triatsin-3-yyli)tiometyyl£7kef-3-eemi-4-karbok- syylihappo 7 g 7-/JI-(2,2-dietyylioksikarbonyyli)vinyyljjadipii-niamidi-3-£j2,5-dihydro-6-hydroksi-5-okso-2-metyyli-l,2,4-triatsin-3-yyli)tiometyyli7kef-3-eemi-4-karboksyylihapon 25 natriumsuolaa suspendoidaan 40 ml:aan metyleenikloridia.

Lisätään 1,5 ml dimetyylianiliinia ja 8,9 ml dimetyylikloo-risilaania, minkä jälkeen lämpötila nousee 37°C:seen ja muodostuu kirkas liuos. 10 minuutin kuluttua seos jäähdytetään -10°C:seen ja lisätään 2,6 g fosforipentakloridia, 30 minkä jälkeen lämpötila nousee -5°C:seen. Seosta sekoitetaan tässä lämpötilassa 14 minuuttia ja kaadetaan sitten 60 ml:aan esijäähdytettyä kuivaa metanolia (-20°C), jolloin lämpötila nousee n. +5°C:seen. Sitten lisätään 10 ml vettä ja lopuksi liuoksen pH-arvo asetetaan 3,5:een puoliväkeväl-35 lä ammoniakilla, minkä jälkeen otsikkoyhdiste saostuu. Sakka suodatetaan, pestään vedellä ja metanolilla ja kuivataan « 16 73703 tyhjössä 50°C:ssa antamaan otsikkoyhdiste, s. >195°C (hajoaa) .

1H-NMR (D20, K2C03): 4 - 5,40 (d, 1H, H?, J = 5 Hz); 5,00 (d, 1H, Hg, J = 5 Hz); 4,20 (q, 2H, C3-CH2-S-, J = 13 Hz); 5 3,65 (s, 3H, N-CH3); 3,55 (q, 2H, C2CH2-S-, J =18 Hz).

Esimerkki 16 7-amino-3-£Il-metyyli-l,2,3,4-tetratsol-5-yyli)tio-metyyli7kef-3-eemi-4-karboksyylihappo a) 7-/N- (2,2-dietoksikarbonyyli) vinyyli?-3-/_Tl-metyy- 10 li-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-eemi-4-karb- oksyylihapon natriumsuola 1 litra Cephalosporin C:n viljelysliuosta (13 g Cephalosporin C/litra) saatetaan reagoimaan etoksimetylee-nimalonihappoesterin kanssa DE-patenttijulkaisussa 3 002 659 15 kuvatulla tavalla. Reaktioseos asetetaan pH-arvoon 2 ja sitä uutetaan kahdesti 500 ml;11a metyyli-isobutyyliketonia. Uute vapautetaan vedestä atseotrooppisesti tislauksella tyhjössä ja haihdutetaan n. 250 ml:ksi. Lisätään 5 g l-metyyli-5-merkap-totetratsolia ja seosta kuumennetaan palautusjäähdyttäen 20 40 minuuttia. Liuotin poistetaan tyhjössä ja jäännös kootaan 300 ml:aan asetonia ja vapautetaan liukenemattomasta aineesta. Suodos sekoitetaan natriumetyyliheksoaattiliuoksen kanssa asetonissa kunnes saostuminen on täydellinen. Sakka suodatetaan, pestään asetonilla ja kuivataan tyhjössä 50°C:ssa. 25 Näin saatu tuote sisältää n. 60 % otsikoyhdistettä.

Tämä raakatuote voidaan puhdistaa tavallisin menetelmin (kiteyttämällä kromatografisesti jne.) tai se voidaan käyttää suoraan deasylointia varten.

b) 7-/W- (2,2-dietoksikarbonyyil) vinyyli./-3-/j 1-me-30 tyyli-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli) tiometyyli_/kef-3-eemi-4- karboksyylihappo Lähtien 1 litrasta viljelysuodosta (Cephalosporin C-pitoisuus - 13 g/litra) menetelmä toteutetaan kuten kohdassa a) kuvattiin metyyli-isobutyyliketonin poistamiseen 35 asti. Näin saatu öljymäinen jäännös voidaan joko käyttää suoraan deasylointiin tai sitä voidaan digeroida etyyli- i7 73703 asetaatti/di-isopropyylieetterillä, minkä jälkeen otsikko-yhdiste saadaan amorfisen jauheen muodossa, jonka puhtaus on n. 50 %. Tämä voidaan puhdistaa tavanomaisin menetelmin (kromatografisesti jne.) 5 c) 7-amino-3-Zjl-metyyli-l,2,3,4-tetratsol-5-yyli)- tiometyylT7kef-3-eemi-4-karboksyylihappo (kohdassa a) saadun raakatuotteen deasylointi) 15 g kohdassa a) saatua raakatuotetta (sisältö n.

60 %) 7-/N- (2,2-dietoksikarbonyyli) vinyyli7-3-£_(l-metyyli-10 1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)tiometyyli/kef-3-eemi-4-karboksyy- lihapon natriumsuolaa) suspendoidaan 80 ml:aan dikloori-metaania ja sekoitetaan 22 ml:n kanssa dimetyylianiliinia. Lisätään 20 ml dimetyylidikloorisilaania lievästi jäähdyttäen ja 15 minuutin kuluttua syntynyt kirkas liuos jäähdy-15 tetään -10°C:seen ja lisätään 6 g fosforipentakloridia. Seosta sekoitetaan vielä 45 minuuttia -6 - -10°C:ssa ja kaadetaan sitten 120 ml:aan metanolia, joka oli esijäähdytetty -20°C:seen. Sen jälkeen kun oli lisätty 20 ml vettä pH-arvo asetetaan 3,5:een lisäämällä ammoniakkiliuosta 20 (25-%:ista) ja sakka suodatetaan erilleen. Sakka pestään joka kerta 50 ml:11a vettä ja metanolia ja kuivataan 50°C:ssa tyhjössä antamaan otsikkoyhdiste puhtaana kerman-värisenä tuotteena, sp. >225°C (hajoaa).

d) 7-amino-3-/Tl-metyyli-lf 2,3,4-tetratsol-5-yyli)-25 tiometyylJ7kef-3-eemi-4-karboksyylihappo (kohdassa b) saa-. . dun tuotteen deasyloiminen)

Metyyli-isobutyyliketonien poistamisen jälkeen saatu haihdutusjäännös liuotetaan 100 ml:aan metyleenidiklo-ridia ja sekoitetaan 35 ml:n kanssa dimetyylianiliinia.

30 Lisätään 25 ml dimetyylidikloorisilaania kevyesti jäähdyttäen ja seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 15 minuuttia. Seos jäähdytetään -10°C:seen ja siihen lisätään 8 g fosforipentakloridia. Seosta sekoitetaan vielä 45 minuuttia -10°C:ssa ja kaadetaan 180 ml:aan metanolia, joka oli 35 esijäähdytetty -20°C:seen. Sen jälkeen kun on lisätty 30 ml vettä pH-arvo asetetaan 3,5:een ammoniumhydroksidi- ie 78703 liuoksella (25-%:inen). Sakka suodatetaan erilleen, pestään vedellä ja metanolilla ja kuivataan 50°C:ssa tyhjössä. Näin saatu kermanvärinen tuote muodostaa puhtaan ot-sikkoyhdisteen, sp. >225°C (hajoaa).

5 e) 7-amino-3-Zjl-metyyl-l,2,3,4-tetratsol-5-yyli)- tiometyyli7kef-3-eemi-4-karboksyylihappo (puhtaan 7-^N- (2,2-dietoksikarbonyyli) vinyyli7-3-Zjri-me-tyyli-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)tiometyyli7kef-3-eemi-4-karboksyylihapon tai sen natriumsuolan deasylointi) 10 Menetelmä toteutetaan oleellisesti kuten kohdissa c) tai d) on kuvattu otsikkoyhdisteen saamiseksi kermanvä-risen jauheen muodossa, sp. >225°C (hajoaa).

NMR (D20, K2C03): /= 5,05 (d, 1H, J = 5 Hz, H?); 4,80 (d, 1H, J = Hz, Hg) ; 4,20 (q, 2H, J = 13 Hz, C-j-CI^-S-) ; 15 4,05 (s, 3H, N-CH3); 3,55 (q, 2H, J = 18 Hz, C2-CH2).

Esimerkki 17 7-amino-3-ZJbentsotiatsol-2-yyli)tiometyylpkef-l-eemi-4-karboksyylihappo 21,4 g 7-^N-(2,2-dietoksikarbonyyli) vinyyljC7adipiini-20 amidi-3-/Tbentsotiatsol-2-yyli)tiometyylT7kef-3-eemi-4-kar-boksyylihapon natriumsuolaa suspendoidaan 120 ml:aan mety-leenidikloridia ja lisätään 33 ml dimetyylianiliinia. Seokseen lisätään 28 ml dimetyylidikloorisilaania lievästi jäähdyttäen ja seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 15 mi-25 nuuttia, minkä jälkeen syntyy kirkas liuos. Tämä jäähdytetään -10°C:seen ja siihen lisätään 10 g fosforipentaklori-dia. 45 minuutin sekoittamisen jälkeen -6 - -10°C:ssa liuos kaadetaan 100 ml:aan metanolia, joka on esijäähdytetty -20°C:seen. Lisätään 30 ml vettä ja liuoksen pH-arvo asete-30 tetaan 3:een 25-%:isella ammoniumhydroksidillä. Syntynyt sakka suodatetaan erilleen, pestään vedellä ja metanolilla ja kuivataan tyhjössä 60°C:ssa. Syntynyt tuote on puhdas otsikkoyhdiste, sp. >225° - 230°C (hajoaa).

NMR (D20, K2C03): f/ = 7,8 - 7,0 (m, 4H, aryyliprotoneja); 35 5,20 (d, 1H, 5 = 5 Hz,H?); 5,00 (d, 1H, J = 5 Hz, Hg); 4,40 (q, 2H, J = 13 Hz, C3-CH2~S-); 3,45 (q, 2H, J = 18 Hz, 2-CH2-) .

*9 73703

Tarvittava lähtöaineena käytetty N-/JT2,2-dietoksi-karbonyyli)vinyyll/kefalosporiini C voidaan saada seuraa-valla tavalla: 14,2 g Cephalosporin C:n mononatriumsuolan dihyd-5 raattia liuotetaan 30 ml:aan vettä. Saatuun seokseen lisätään 2,52 g natriumbikarbonaattia pienissä annoksissa sekoittaen. Kun kaasun kehittyminen on loppunut, jäljelle jäävä hiilidioksidi poistetaan liuoksesta lämmittämällä n. 35°C:seen. Lisätään 10 ml vettä, mitä seuraa 5,7 g etok-10 simetyleenimalonihapon dietyyliesteriä liuotettuna 15 ml:aan asetonia. 6-tuntisen sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa asetoni haihdutetaan pois. Vesipitoinen faasi uutetaan etyyliasetaatilla. Vesipitoinen faasi asetetaan pH-arvoon 2 ja uutetaan jälleen etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-15 faasi pestään vedellä ja kuivataan. Liuottimen poistamisen jälkeen jäännöstä hierretään di-isopropyylieetterillä ja kuivata eksikkaattorissa antamaan otsikkoyhdiste, sp. n. 80°C (hajoaa).

Claims (9)

1. 20 7 3703
2. 1. Vinyylikefalosporiini C-johdannainen, jolla on kaava I; 5 R8OOC-CH-(CH2)3-CO-NH-j-S τ
3. 7. CH2-R4
4. 10 R2 Έ1 jossa R^ on ryhmä Rg-CO-O-, jossa Rg on alempi alkyyli, tai R4 tarkoittaa kefalosporiinikemiassa tavanomaista C^-heterosyklyylitiosubstituenttia, R^ ja R2, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat joko alempi alkanoyyli, kun on CH^-CO-O-, tai alempi alkoksikarbonyyli, kun R^ on muu kuin CHg-CO-O-, ja ryhmät Rg, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat kukin vety tai esteriryhmän tähde, tai johdannaisen, jossa toinen tai kumpikin ryhmistä Rg on 2Q vety, suola.
5. 2. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen vinyylikefalosporiini C-johdannaisen valmistamiseksi, tunnet-t u siitä, että a) valmistetaan yhdiste, jolla on kaava Ia ; 25 /S Rg-OOC-CH- (CH2) 3CO-NH η-r η NH J-N J_CH2OCOR5 fiH T RrC-R; 30 jossa Rg ja Rg tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 1, ja R2 ja Rj^ kukin on alempi alkanoyyli, saattamalla yhdiste, jolla on kaava II : 21 7ö/ui saattamalla yhdiste, jolla on kaava II: .S RgOOC-CH- (CH2) 3-CO-NH-j ^ |jH_ \ N yy-CHo0C0R[- 2 0^ Y 2 5 b 1 ii COORg jossa Rg ja Rg tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 1, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava lii; io ^-Ri R7-0-CH=C^ III \r^ jossa R| ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä ja R^ on alempi alkyyli, tai b) valmistetaan yhdiste, jolla on kaava Ib: .S RgOOC-CH- (CH2)3-CO-NH η-^ N UH Y-CH2S-R6 Ib
6. 20 I PH I |j C00R8 C κΓ Ri 25 jossa R^, R2 ja Rg tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 1 ja Rg tarkoittaa kefalosporiinikemiassa tavanomaista C^-heterosyklyylisubstituenttia, saattamalla yhdiste, jolla on kaava Ie:
7. 30 RgOOC-CH- (CH2) j—CO—NH—i-^ ^ f X— -CH OCOR CH O T li I coorq Ic R2 R1 35 jossa R^, R2, Rg ja Rg tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 1, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on 22 73703 kaava IV j HS -Rg IV jossa R, tarkoittaa samaa kuin edellä. 0
8. 3. Patenttivaatimuksen 1 mukaisen vinyylikefalo-5 sporiini C-johdannaisen käyttö kaavan V mukaisen amino-kefalosporiinin valmistuksessa Η2Νη- y—ch2r4 v
9. 10. I COORg jossa kaavassa R^ ja Rg tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 1. 73703