FI78078C

FI78078C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara p-oxo-oxazolindinylbensensulfonamider.

Info

Publication number: FI78078C
Application number: FI824182A
Authority: FI
Inventors: Walter Adelman Gregory
Original assignee: Du Pont
Priority date: 1981-12-04
Filing date: 1982-12-03
Publication date: 1989-06-12
Also published as: ES517852A0; IL67397A0; ES8401951A1; NZ202695A; AU9103282A; EP0081200B1; PT75928B; SU1194274A3; HU189196B; AU560666B2; DE3273626D1; EP0081200A1; PT75928A; DK538382A; FI78078B; FI824182A0; NO156751B; IL67397A; FI824182L; NO156751C

Description

1 78078

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten p-okso-oksatso-lidinyylibentseenisulfoniamidien valmistamiseksi

Keksintö koskee menetelmää terapeuttisesti käyttö-5 kelpoisten p-okso-oksatsolidinyylibentseenisulfoniamidien valmistamiseksi, joiden kaava on

O

10 Ri-02S—(OV-N O

\_/ a) '—or5

15 jossa Rx on -NR2R3, -N(OR2)R3, -N3, -NHNH2, -NX2, -NXZ

tai -N=S(0)nRgRg, R2 ja R3 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyä, C2_4~alkyyliä tai C3_g-sykloalkyyliä, Rg on 0 0 0

II II II

2Q vety, -CRg tai -C(CH2)mC-0H,

Rg on aryyli tai Ci_i2-alkyyli, Rg 3a R9 tarkoittavat toisistaan riippumatta C^.^-alkyyliä tai ne muodostavat yhdessä ryhmän -(CH2)p-, X on Cl tai Br, Z on fysiologisesti 25 hyväksyttävä kationi, m on 2 tai 3, n on 0 tai 1, ja P on 3, 4 tai 5. Näillä yhdisteillä on bakteerinvastainen vaikutus.

US-patenttijulkaisusta 4 128 654 tunnetaan yhdisteitä, joiden kaava on

30 A

35 jossa A = RS(0)n, X = Cl, Br tai F, R = C1-C3-alkyyli ja n = 0, 1 tai 2.

2 78078

Yhdisteiden ilmoitetaan olevan käyttökelpoisia kasvien sieni- ja bakteeritautien torjumiseksi.

GB-patenttijulkaisussa 2003-151 kuvataan antidepressiivisenä aineena käytettävää yhdistettä, jonka kaava on 5 CH3S^A0

10 ' (-OH

US-patenttijulkaisussa 4 340 606 kuvataan bakteerinvastai-sia yhdisteitä, joiden kaava on 15

Rj-S(0)n

X

20 jossa R2 ~ CH3, C2H5, CF2H, CF3 tax CF2CF2H ja k = OR2·

Nyt on havaittu, että kaavan I mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia lievittämään nisäkkäiden bakteeri-infektioita.

25 Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat ne, jois sa on H ja R^ = NH2 tai NH-CH3. Erityisen edullinen kaavan I mukainen yhdiste on (l)-4-£5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yylj!7bentseenisulfoniamidi.

Termillä "aryyli", jota on käytetty tässä substi-30 tuentin Rg määrittelyssä, tarkoitetaan mitä tahansa yksiarvoista aromaattista radikaalia, joko homosyklistä tai heterosyklistä. Sopivia aryyliryhmiä ovat yksirenkaisten yhdisteiden kuten bentseenin, pyridiinin, pyrimidiinin, pyratsolin, furaanin, triatsiinin, tiofeenin, imidatsolin, 35 oksatsolin, tiatsolin ja pyrrolin radikaalit. Sopivia ovat myös polysyklisten yhdisteiden kuten difenyylin ja trife- 3 78078 nyylin samoin kuin kondensoitujen polysyklisten yhdisteiden kuten naftaleenin, antraseenin, fenantreenin, kinoliinin, isokinoliinin, akridiinin, fenatsiinin, indolin, bentso-tiofeenin, karbatsolin ja dibentsofuraanin radikaalit.

5 Missä tahansa aryyliryhmästä voi olla valinnaisesti substituentteina missä tahansa asemassa yksi tai useampia substituentteja, kuten F, Cl, Br, NO2, Cj^-alkyyli, alkoksi, OH, CF3, CN, CO2(Cj-C3-alkyyli) tai S(0)qCH3, jossa q = 0, 1 tai 2. Edullisia aryylisubstituentteja ovat py-10 ridiini, tiofeeni, furaani, pyrroli ja bentseeni, joissa on valinnaisesti substituentteina edellä mainittuja substituentte ja .

Fysiologisesti hyväksyttäviä kationeja (Z) ovat esim. alkali- tai maa-alkalimetalli-ionit, kuten K+, Mg++, Ca++, 15 Li+ ja Na+.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa siten, että yhdiste, jonka kaava on

O

Halogeeni-S02—/c^)\—N^O

^Y_/

'—OY

25 jossa Y on asyyli-ryhmän sisältävä substituentti, saatetaan kosketukseen reagenssin kanssa, joka on amiini HNR2R3 tai NH(OR2)R3, atsidi-ioni ^3, tai hydratsiini, joissa kaavoissa R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 30

/~\ A

r1“so2 (O ) \ / 13

35 '—OH

4 78078 jossa R^ = NR2R3, N(OR2)R3/ N3 tai NHNH2, ja haluttaessa A a) saatu kaavan Ia mukainen yhdiste, jossa R^ = NH2/ saatetaan kosketukseen esimuodostetun hypohaliitin kanssa tai halogeenin ja emäksen kanssa, jolloin saadaan 5 yhdiste, jonka kaava on NS02 -(c))-N^0 l0 2

\— OH

jossa X = Cl tai Br ja Z on fysiologisesti hyväksyttävä kationi, ja haluttaessa 15 Ab) saatu kaavan Ib mukainen yhdiste saatetaan kos ketukseen hypohaliitin kanssa pH-arvossa noin 4-8, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 20 /~\ ^

OH

25 jossa X = Cl tai Br, tai saatu kaavan Ib mukainen yhdiste saatetaan kosketukseen dialkyylisulfidin SRgRg kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 30 ^ r8r9s=nso2—/0 V-N o Id

^ — OH

35 ja haluttaessa 5 78078 A c) saatu kaavan Id mukainen yhdiste hapetetaan, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 5 0 r8r9s=nso2-(Xj)-N 0 Ie

' ^—OH

10 ja/tai haluttaessa B) saatu kaavan Ia-Ie mukainen yhdiste saatetaan kosketukseen happokloridin RgCOCl tai anhydridin (RgCO)20 kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 15 0 *l-S°2-{C^J If >-OCORg 20 tai saatu kaavan Ia-Ie mukainen yhdiste saatetaan kosketukseen anhydridin kanssa, jonka kaava on

O

11 2 5 /” 'c n o jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 30

O

ri~so2—n ° 35 w_ ?

N—0-C-(CH2)m-C02H

6 7δ078

Sellaisten kaavan Ia mukaisten yhdisteiden valmistusta, joissa = NR2R3 tai N(OR2>R3, v°idaan kuvata seuraavalla reaktiokaaviolla:

Reaktiokaavio 1· 5 -v ©-Λ OH \

10 ^-OY

II III

o

15 Hal-SO-sH A

--2-> „al.So2-^0)-« 0

\— OY IV

20 HN(0R9)Ro . . o tal _ _y R3R2N-S02-/()y-N o 2 5 THF 'v-f \_/

V_OH

Ia' (R2=R2 tai OR2) 30 jossa Y on asyyliryhmä.

5-hydroksimetyyli-3-fenyyli-2-oksatsolidinonin (II) -OH-funktio suojataan refluksoimalla tätä yhdistettä reagenssin kanssa, joka liittää siihen asyyliryhmän, ensisijaisesti 35 d-halogenoidun alkanoyyliryhmän. Sopivia reagensseja tähän tarkoitukseen ovat trifluorietikkahappoanhydridi, dikloori- 7 78078 asetyylikloridi, dikloorietikkahappoanhydridi, trikloori-asetyylikloridi ja trikloorietikkahappoanhydridi. Seosta refluksoidaan lämpötilan ollessa rajoissa noin 0°-150°C, ensisijaisesti rajoissa 0°-40°C. Tämä vaihe voidaan suorit-5 taa ilman liuotinta tai käyttämällä mitä tahansa inerttiä hiilivety- tai kloorattua hiilivetyliuotinta. Muodostunut esteri III saatetaan kosketukseen joko halogeenisulfoniha-pon kuten kloorisulfonihapon tai fluorisulfonihapon kanssa lämpötilan ollessa noin 30-40°C, jolloin saadaan kaavan IV 10 mukaista sulfonyylihalogenidia. Tämäkin vaihe voidaan suorittaa ilman liuotinta tai klooratussa hiilivetyliuottimes-sa kuten CHC^-.ssa, CHgCC^rssa tai CCl4:ssä. Tämä tuote liuotetaan sitten liuottimeen kuten tetrahydrofuraaniin, eetteriin, dioksaaniin, 1,2-dimetoksietaaniin, dimetyyli-15 formamidiin, dimetyyliasetamidin tai urealiuottimeen ja saatetaan kosketukseen sopivan amiinin, HNR2R3:n tai HN(OR2)R3:n kanssa lämpötilan ollessa rajoissa noin -20°C -+30°C, jolloin saadaan kaavan Ia' mukaista yhdistettä.

Sellaisen kaavan I mukaisen yhdisteen valmistusta 20 jossa R^ = N3, voidaan kuvata reaktiokaaviolla 2.

Reaktiokaavio 2 iv NaH3 tai KN3 > N3-S02-«5y-N ° 25 '-(

\_OH

Ia"

Sulfonyylihalogenidi IV saatetaan kosketukseen natrium- tai kaliumatsidin kanssa asetoni-vesi-seoksessa. So-30 pivia liuottimia ovat asetoni, alhaalla kiehuvat ketoni-liuottimet kuten metyylietyyliketoni, dietyyliketoni ja syklopentanoni, eetteri-liuottimet ja dipolaariset aproot-tiset liuottimet.

Sellaisen kaavan Ia mukaisen yhdisteen valmistusta, 35 jossa R-l on NHNH2, voidaan kuvata seuraavalla reaktiokaaviolla: 8 78078

Reaktiokaavio 3

O

5 IV h2nnh2 s h2n-nh-so2 0

'—OH

la" '

Hydratsidin Ia"' valmistamiseksi sulfonyylihalogeni-10 di IV saatetaan kosketukseen hydratsiinin kanssa.

Kaavojen Ib, Ie, Id ja Ie mukaisten yhdisteiden valmistusta voidaan kuvata reaktiokaaviolla 4.

0 9 78078

Reaktiokaavio 4 5 H.NSCL·—/()V- N 0 hypohaliitti (OX®) 2 2 \^/ \_/ -^-> ' \ emäs/X~ '—OH 2 la’ (R2=R3=H) 10 N N5° 2~° IS \— oh lb

NaOX SR8R9 H * / 20 ι/' Ψ 0 0

X2NS02^O)/j R8R9S-NS02^^*|J

\-0H ^0H

Ic Id [0] v 30 ° JF\ ^ R8R9S=NS02\O/-^ 0

V_0H

Ie 10 78078

Halogeenisulfoniamidia Ib voidaan valmistaa helposti saattamalla sulfoniamidi Ia' kosketukseen halogeenin ja emäksen kuten natriumhydroksidin kanssa tai edeltäkäsin valmistetun hypohaliitin kuten natriumhypokloriitin tai 5 kalsiumhypokloriitin kanssa. N,N-dihalogeenisulfoniamidin Ie valmistamiseksi pH säädetään rajoihin noin 4-8. pH:n säätämiseksi voidaan lisätä etikkahappoa, hiilidioksidia tai laimeaa epäorgaanista happoa.

Sulfiili-imiinejä Id voidaan valmistaa saattamalla 10 halogeenisulfoniamidi Ib kosketukseen dialkyylisulfidin SRgRg, kuten dimetyylisulfidin, trimetyleenisulfidin, me-tyylietyylisulfidin tai tetrahydrotiofeenin kanssa, ensisijaisesti vesi-alkoholi-liuoksessa. Hapetettaessa sulfii- li-imiinejä, esimerkiksi, hypokloriitin tai metaklooriper-15 bentsoehapon kanssa, saadaan sulfoksi-imiinejä Ie.

Kaavan If mukaiset yhdisteet valmistetaan reaktiokaa-vion 5 mukaisesti antamalla kaavan Ia-Ie mukaisen yhdisteen reagoida sopivan happokloridin tai happoanhydridin kanssa, edullisesti emäksen kuten pyridiinin tai 4-dimetyyliamino-20 pyridiinin läsnäollessa. Edullinen liuotin on pyridiini tai muut pyridiini-ryhmän liuottimet, vaikkakaan monissa tapauksissa ei tarvita mitään liuotinta.

Reaktiokaavio 5

25 O

jj RgCOCl

Rl-S°2-(5V" 0 + \_/ (r6co)2o

OH

30 Ia-Ie ~/n\- ^ 35 -> 1 2 VrV \_i

If \-ocor6 5 11 78078

Kaavan Ig mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa seuraavasti :

Reaktiokaavio 6 «1-°2S-\0)-Nx O + (CH2)n

v—( S

'— OH O

10

Ia-Ie

O

15 -> ° ? \— o-c-a-co2h ig

Sopivia liuottimia ovat heikot pyridiini-ryhmän emäkset 20 ja sopiva reaktiolämpötila on noin 30-115°C.

Edellä selostetuin menetelmin saadut yhdisteet ovat raseemisia seoksia, se on, (+)- ja (-)-enantiomeerien seoksia (50:50). Optisesti aktiivisten yhdisteiden synteesi voidaan suorittaa käyttämällä lähtöaineena kaaviossa 1 yh-25 distettä /-5-hydroksimetyyli-3-fenyyli-2-oksatsolidinonia (Ha). Tätä lähtöainetta voidaan saada poistamalla rikkiä ^-3-/7(4-metyylitio) fenyyl£7~5-hydroksimetyyli-2-oksatsoli-dinonista (VII) kuten reaktiokaaviossa 7 on esitetty.

12 78078

Reaktiokaavio 7 S o 5 CH3-S-(0)->N ° ~^(Raneyi» <OVN^° N_f \_/ etanoli VZ_Z \ /

'“OH N-OH

^-isomeeri /-isomeeri 10 ϊΐλ Ila i-5-hydroksimetyyli-3-fenyyli-2-oskatsolidinonin (Ila) valmistetaan edullisesti seuraavalla tavalla: Reaktiokaavio 8 15

<δ>-2 ♦ ^ ^{3) NHCH2^HCH20H

©-S»,» d-erräs 25

/——\ OH

eiräs / /'"'NX 1

_^ NHCH2CHCH20H

d-enäs 30 0 ©-Λ l,2-dlnet-K co ' \ / oksietaa- 2 3 \

„ ni CH,0Na p ^—°H

35 3 £-isomeeri

Ila 13 78078 2-10 moolisin ylimäärin käytettävän aniliinin annetaan reagoida glysidolin kanssa. Ylimääräinen anilii-ni poistetaan tislaamalla, ja (d (L ) -3-fenyyliamino-l,3-propaanidioli tislataan vakuumissa. Se erotetaan yhdis-5 tämällä noin 50-60 mooliprosentin kanssa H-mantelihap-poa kloroformissa tai asetonitriilissä. Haluttu suola ki-teytyy ja voidaan puhdistaa kiteyttämällä uudelleen kloroformista tai asetonitriilistä. (d)-3-fenyyli-amino- 1,3-propaanidioli voidaan eristää saattamalla se koskelo tuksiin emäksen kanssa. Suola suspendoidaan veteen, seoksen pH säädetään välille 8-10, sitten seos kyllästetään natriumkloridilla, ja sitten uutetaan jatkuvasti dikloorimetaanilla. Vaihtoehtoisesti suola liuotetaan vesi-alkoholi-seokseen ja lasketaan vahvasti emäksisen 15 ioninvaihtaja-hartsin läpi. Kummassakin tapauksessa saatu uute tai kolonnieluaatti konsentroidaan, jolloin jälel-le jää (d)-3-fenyyliamino-l,3-propaanidioli. Tämän tuotteen annetaan sitten reagoida dietyylikarbonaatin kanssa (voidaan käyttää muita karbonaatteja kuten dimetyyli-20 karbonaattia tai difenyylikarbonaattia) polaarisessa liu-ottimessa kuten 1,2-dimetoksietaanissa käyttämällä kata-lyytteinä kaliumkarbonaattia ja natriummetylaattia. Tuote eristetään haihduttamalla liuotinta pois, laimentamalla vedellä ja pienellä määrällä etikkahappoa, ja pe-25 semällä vedellä. Tuote voidaan puhdistaa kiteyttämällä uudelleen 95-prosenttisesta etanolista tai asetonitriilistä. Käyttämällä tässä menetelmässä d-mantelihappoa, voidaan saada 5-hydroksimetyyli-3-fenyyli-2-oksatsoli-dinonin d-isomeeria.

30 Kaavan I mukaisten optisesti aktiivisten yhdistei den saamiseksi voidaan reaktiokaavion 8 ensimmäinen reaktio suorittaa käyttämällä optisesti aktiivista glysidolia, edullisesti R-glysidolia, jolloin saadaan suoraan optisesti aktiivista emästä.

35 -£-5-hydroksimetyyli-3-fenyyli-2-oksatsolidinonia (Ha) voidaan valmistaa myös (R) - (+) -1-bentsyyliglysero- i4 7 8 0 7 8 lista /S. Takano, E. Goto, M. hirama, ja Ogasawara, Heterocycles, 16, 381 (1981)^7, minkä jälkeen seuraa tosylointi p-tolueeni-sulfonyylikloridilla pyridiinis-sä ja tämän (S)-tosyyliesterin (VIII) annetaan reagoida 5 N-fenyyli-4-metyylibentseenisulfoniamidin kaliumsuolan kanssa dipolaarisessa aproottisessa liuottimessa kuten DMF:ssa. Saadun tuotteen (IX) annetaan reagoida natrium-naftaleeni-radikaali-anionin kanssa, jolloin saadaan yhdiste (X), jonka annetaan reagoida dietyylikarbonaatin 10 tai muun karbonaattiesterin kanssa katalyyttisen natrium-metylaattimäärän läsnäollessa, jolloin saadaan haluttua ^-isomeeriä. Tämä reaktiosar ja on kuvattu reaktiokaaviossa 9.

Reaktiokaavio 9 15 r°T@"CH3 20 (S).isomeeri

VIII

/o"@^CH3 H OH

~\/^λ -Sa_/oY-n-ch2-ch-ch2oh

Naftaleeni-1,2- '-' dimetoksietaani

Lo-ch2-VÖ) W

30 ' ' (R) - isomeeri

IX X

NaOCH..

35 -1_> ila (Et0)2C0 15 78078

Edellä kuvatut kaavan Ig mukaiset yhdisteet muodostavat suoloja erilaisten epäorgaanisten ja orgaanisten emästen kanssa. Sellaisia suoloja ovat alkalimetallisuolat kuten natrium- ja kaliumsuolat, ammoniumsuolat, maa-alkali-5 metallisuolat kuten kalsium- ja magnesiumsuolat, suolat orgaanisten emästen kuten alempien alifaattisten amiinien, bentsyyliamiinin, disykloheksyyliamiinin kanssa, ja suolat emäksisten aminohappojen kuten arginiinin kanssa.

Koetuloket osoittavat, että kaavan I mukaiset yhdis-10 teet ovat aktiivisia hyvin erilaisia aerbosisia, tilapäisesti anaerobisia ja ehdottoman anaerobisia eristettyjä bakteereja vastaan mukaan lukien /J-laktamaasia aiheuttavat Staphylococcus aureus-, ja Neisseria gonorrhoea-kannat, eräät gram-negatiiviset Enterobacteriaceae-kannan jäsenet 15 ja Pseudomonas aeruginosa. Näiden yhdisteiden bakteerien vastaisen spektrin piiriin sisältyy organismeja, jotka tunnetaan merkittävinä ihmisissä ja eläimissä hengitysteiden maha-suoliseudun, sukupuoli-virtsaelinten ja keskushermosto järjestelmän; veren; välikudosnesteiden, pehmeiden kudos-20 ten; ja luuston tautien aiheuttajina.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden bakteerinvastainen vaikutus in-vitro ilmenee taulukosta I. 24 tunnin minimi-estokonsentraatioiden (MIC-arvojen) määrittämiseksi kokeessa Staphylococcus epidermidis- ja E. Coli-kantoja vastaan 25 Mueller-Hinton-viljelyväliaineen yhteydessä käytettiin standardin mukaista mikrolaimennusmenetelmää (Conrath, Theodore B., 1972, Handbook of Microtiter Procedures, Dynatech Corporation, Cambridge, Massachusetts).

78078 16

Taulukko I

Minimiestokonsentraatiot in vitro laimennus-kokeessa 5 0

OH

viljely- R-L Kemiallinen nimi Mikrolai- väliaine mennus MIC: ^,ug/ml S.epidermis E.coli NHj (d, £)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2- 62,5 62,5 okso-oksatsolidin-3-yyli7~ 15 bentseenisulfoniamidi NHj (¢.)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2- 31,3 31,3 okso-oksatsolidin-3-yyli7~bent-seeni-sulfoniamidi N (CH3)2 (d, ^)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2- 50,0 >200,0 okso-oksatsolidin-3-yyli7-N,N-di-20 nBtyylibentseenisulfoniamidi CHoNH (d, t )-4-/5-(hydroksimetyyli)-2- 50,0 >200,0 okso-oksatsolidin-3-yyli/-N-metyylitentseenisulfoniamidi CH^NH ((£)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2- 25,0 200,0 okso-oksatsolidin-3-yyli7~N-2 5 metyylibentseenisulfoniamidi (d,d)-4-/5-(hydroksimetyyli)- 4,2 12,5 2-okso-oksatsolidin-3-yyli/- bentseenisulfonyyliatsidi N, (L)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2- 1,6 9,4 okso-oksatsolidin-3-yyli/-bentseeni-sulfonyyliatsidi

Yhteenveto ( <t) -4-/5- (hydroksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin- 3-yyl^7-bentseenisulfoniamidin in vitro bakteerien vastaisesta spektristä on esitetty taulukossa II. Minimiestokonsentraatiot aerobisten ja tilapäisten anaerobisten koe-eristei-35 den osalta, jotka edustivat kahta gram-positiivista ja yhtätoista gram-negatiivista sukua, määritettiin agari- 17 78078 laimennusmenetelmällä. Menetelmä on alalla yleinen ja se on seuraava: Valmistetaan Mueller-Hinton-agari-levyt, joissa yhdistekonsentraatiot ovat kaksikertaisina ulottuen 128 yug/ml arvoon 1,0 g/ml bakteerikantojen, Neisseria gonorr-5 hoea- ja Hemophilus sp.-kantoja lukuun ottamatta, alttiuden koestamiseksi. Jälkimmäisiä organisemja testattiin käyttämällä GC-agaria, jossa oli 1 % Bacto-Supplement C:tä (Difco Laboratories, Detroit, Michigan) ja viljeltiin 6 % C02:ta käyttäen. Agari-levyihin istutettiin 0,001 ml kali-10 broitua silmukanista bakteeri-istutetta laimennettuna sisältämään 5 x 106 kolonian muodostamaa yksikköä (CFU) millilitra akohden. 24-tuntisen viljelyajan jälkeen 35°C:ssa MIC-arvot ilmoitetaan pienimpänä yhdisteen konsen-traationa, joka ehkäisee makroskooppisen bakteerikasvun.

15 (/)-4-£5~(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3- yylij-bentseenisulfoniamidin inhibioivan aktiivisuuden määrittämiseksi anaerobisten bakteerien osalta käytettiin, yhdiste-konsentraatioiden ollessa välillä 32 yug/ml - 0,06 yug/ml, agari-laimennusmenetelmää, jota on selostanut A. L. 20 Barry ("The Antimicrobic Susceptibility Test: Principles and Practice". 1976, Lea and Febiger, Philadelphia, Pennsylvania) .

18 78078

Taulukko II

( iL ) -4-/5- (hydroksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin- 3-yyli/-bentseenisulfoniamidin bakteerien vastainen spektri in vitro 5 Koe-organismi Eristeiden lukumäärä Keskimääräinen MICl-arvo: ^ug/ml

Staphylococci sp. 3Θ 22,3

Streptococci sp. IA 7,7 E. coli 86 29,8

Proteus sp. 88 29,1

Providencia sp. 12 Al,3

Enterobacter sp. AI 58,5

Salmonella sp. 6 32

Shigella sp. 9 8,0

Serratla sp. AA *96,0 (alue 32-^128)

Klebsiella sp. 50 39,A

Pseudomonas sp. 79 *116,8 (alue 8-^128) 20 Neisseria sp. A3 12,3

Haemophilus sp. A 32

Clostridium sp. 5 16,8

Fusobacterium sp. A 0,9

Bacteroides sp. 23 *15,13 (alue A-*32) 25 Gram-anaerobinen kokki 7 ^MIC: minimiestokonsentraatiot agar-laimennusmenetelmällä.

19 78078 Näiden yhdisteiden in vivo-tehosta ovat esimerkkeinä arvot, jotka on koottu taulukkoon III. In vivo-tehon määritykset suoritettiin istuttamalla hiiriin vatsaontelonsisäisesti infektoivan organismin viljelmiä 5 laimennettuina siten, että ne aiheuttivat 90-100 %:n kontrollieläinten kuolleisuuden seitsemän päivän kuluessa. Käytetyt laimentimet olivat trypticase-soijaliemi kun kyseessä olivat E. coli-, Proteus sp.- ja Psuedomonas aeruginosa-infektiot ja 5-prosenttinen sianmaha-musiini 10 kun kyseessä oli Staphylococcus aureus-infektio. Yhdisteitä annettiin, liuotettuina tai suspendoituina 0,25-prosenttiseen methocel.^O-seokseen, suun kautta intu-boimalla infektoinnin aikana ja jälleen neljän tunnin kuluttua infektoinnista. Kuolleisuus merkittiin muistiin 15 päivittäin kokeen päättymiseen asti ja 50-prosenttisesti tehoava annos, ED^q, laskettiin Reed-Muench'in menetelmällä (Reed, L. G. ja Muench, H., "A simple method of estimating fifty percent end points." American Journal of Hygiene, 27, 1938, 493-497).

2 0 'Taulukko' III

Suun kautta annettujen yhdisteiden tehokkuus in vivo hiirien vatsaontelonsisäisissä infektioissa Yhdiste 1 (d, / )-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/-25 bentseenisulfoniamidi Yhdiste 2 ( £-)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7~ bentseenisulfoniamidi Yhdiste 3 30 (d,X)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7- bentseenisulfonyyliatsidi

Yhdiste 4 ( t )-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7~ N-metyylibentseenisulfonyyliatsidi 35 Yhdiste 5 (£ )-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7~ N-metyylibentseenisulfoniamidi 20 7 8 0 7 8

Infektoiva bakteeri-organismi R1 Yhdis- staphylococcus Escherichia Proteus Proteus Pseudomonas te aureus coll mirafailis vulgaris fluorescens ^501 ^50 ED50 ED50 ^50 5 NH2 1 39,1 24,9 N.T.2 N.T. N.T.

NH2 2 22,4 13,9 44.3 40,8 67,46 N, 3 25,99 17,89 N.T. N.T. N.T.

10 * N3 4 26,4 14,87 N.T. N.T. N.T.

CH,NH 5 15,44 39,72 N.T. N.T. N.T.

✓ 15 1ED5o : 50-prosentt.isesti tehoava annos: mg/kg 2 N.T.: ei testattu.

20

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.

Esimerkki 1 4-£5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7” bentseenisulfoniamidi (R^ = NH2, R5 = H)

Liuosta, jossa oli 247,3 g (1,00 moolia) N-fenyyli-25 4-metyylibentseenisulfoniamidia, joka sisälsi 20 g 1,4- diatsabisyklo£2,2,27oktaania (DABCO), 950 ml:ssa dimetyyli-formamidia (DMF) sekoitettiin ja lämmitettiin typen suojaamana lisättäessä kahden tunnin kuluessa 70 ml tuoreeltaan tislattua glysidolia 70 ml:ssa DMF:a. Lämmittämistä jatket-30 tiin 1 tunti ja 40 minuuttia, ja sitten lisättiin tunnin kuluessa edelleen 35 ml glysidolia 35 ml:ssa DMF:a. Lämmittämistä jatkettiin 51/2 tuntia. Reaktioseos kaadettiin 4 litraan kylmää vettä (läsnä vähän jäitä) ja tuote, N-(2,3-dihydroksipropyyli)-4-metyyli-N-fenyylibentseenisulfoniami-35 di, kiteytyi. Tämä suodatettiin erilleen ja pestiin hyvin 2i 780 7 8 kylmällä vedellä, jolloin saatiin tuotetta 348 g, sp. 91-94°C, ja tämä kiteytettiin sitten uudelleen 700 ml:sta to-lueenia, jolloin saanto oli 312 g, sp. 108,5-109,5°C.

250 grammaa 40-prosenttista natriumin mineraaliöljy-5 dispersiota lisättiin typen suojaamana sekoitettuun liuokseen, jossa oli 600 g naftaleenia 1,8 litrassa 1,2-dimetok-sietaania ("Glyme") ja pidettiin välillä 20-30°C olevassa lämpötilassa. Kun kaikki natrium oli lisätty, seosta sekoitettiin 20 minuuttia, ja sitten lisättiin jauheenlisäyssup-10 pilon läpi 305 g N-(2,3-dihydroksipropyyli)-4-metyyli-N-fenyylibentseenisulfoniamidia pitämällä reaktiomassan lämpötila 35°C:n alapuolella. Kun kaikki kiinteä aine oli lisätty, seosta sekoitettiin tunnin ajan. Sitten lisättiin vettä kunnes seoksen väri vaaleni tummanvihreästä tai mus-15 tästä keltaiseksi; sitten lisättiin väkevää suolahappoa kunnes liuos oli vahvasti hapan. Seos uutettiin kaksi kertaa tolueenilla ja sitten kolme kertaa heksaanilla, huuhdeltiin typellä heksaanin poistamiseksi, kyllästettiin nat-riumkloridilla ja tehtiin sitten emäksiseksi väkevällä 20 ammoniumhydroksidilla. Tuote uutettiin dikloorimetaanilla, ja uute kuivattiin kaliumkarbonaatilla. Suodatettu dikloo-rimetaaniliuos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 132,3 g 3-fenyyliamino-l,2-propaanidiolia vaaleankeltaisena öljynä.

25 Seosta, jossa oli 83,6 g (0,5 moolia) 3-fenyyliamino- 1,2-propaanidiolia, 250 ml 1,2-dimetoksietaania ja 61 ml dietyylikarbonaattia, kiehutettiin typen suojaamana. Lisättiin kiinteätä natriummetylaattia (noin 0,15 g) ja kiehuttamista jatkettiin noin 21/2 tuntia. Seos jäähdytettiin, 30 sekoitettiin veden kanssa ja suodatettiin, jolloin saatiin 41,1 g 5-(hydroksimetyyli)-3-fenyyli-2-oksatsolidionia, sp. 122-124°C. Nuo 41,1 g kiteytettiin uudelleen 100 ml:sta asbsoluuttista etanolia, jolloin saatiin 38,0 g tuotetta, sp. 125,5-126°C. Vesisuodoksesta saatiin lisäerä, 25,3 g 35 (sp. 124,5-125°), haihduttamalla kuiviin ja kiteyttämällä uudelleen etanolista.

22 78078

Seosta, jossa oli 25,3 g 5- (hydroksixnetyyli)-3-fenyyli-2-oksatsolidinonia ja 100 g trifluorietikkahappo-anhydridiä, kiehutettiin typen suojaamana tunnin ajan. Kinteä aine liukeni kokonaan. Seos haihdutettiin sitten 5 kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 41 g öljyä, joka kiteytyi paikoillaan ollessaan. Tätä tuotetta käytettiin enempää puhdistamatta.

Noin 250 ml kloorisulfonihappoa sekoitettiin hyvin pullossa typen suojaamaan lisättäessä edellä mainittu tuo-10 te viidentoista minuutin kuluessa. Seosta ei jäähdytetty ja lämpötila pysyi välillä 30-40°C. Kiinteä aine liukeni, jolloin kehittyi lämpöä ja kloorivetyä. Seosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa tunnin ja kahdenkymmenen minuutin ajan ja kaadettiin sitten jäihin. Tuote, (d/)-4- 15 £5-(trifluoriasetoksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yylj7" bentseenisulfonyylikloridi, kiteytyi ja suodatettiin erilleen ja pestiin hyvin kylmällä vedellä ja kuivattiin typ-pivirrassa. Sitten tuote liuotettiin tetrahydrofuraaniin ja sekoitettiin jäähauteessa lisättäessä 18 ml väkevää 20 ammoniumhydroksidia, pitämällä lämpötila välillä 20-25°C. Konsentroimalla ja suodattamalla saatiin 24 g otsikon yhdistettä, sp. 154-156°C. Tämä kiteytettiin uudellen aseto-nitriilistä, jolloin tuotetta saatiin 15,8 g, sp. 167-168°C.

25 Esimerkki 2 jt-4—£5- (hydroksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin-3-yyljjbentseenisulfoniamidi (R^ = NH2, R5 = H) 300 grammaa Raney-nikkeli-katalyyttiä lisättiin sekoittaen liuokseen, jossa oli 40,4 g (0,169 moolia), 30 /^3-/7(4-metyylitio) fenyyli7"5-hydroksimetyyli-2-oksatso- lidinonia 500 ml:ssa absoluuttista etanolia, ja saatua seosta kiehutettiin tunnin ajan. Reaktioseoksesta otettu näyte tutkittiin NMR:n avulla, joka osoitti -SCi^-ryhmän kadonneen. Sitten liuos suodatettiin ja reaktioseos uutet-35 tiin toistuvasti kiehuvalla etanolilla. Alkoholiuutteet 23 78078 yhdistettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin 32,5 g /-5-hydroksimetyyli-3-fenyyli-2-oksatsolidinonia, sp. 134-136°C.

Tämä tuote kiteytettiin uudelleen 115 ml:sta abso-5 luuttista etanolia, jolloin saatiin 32,5 g valkeita kiteitä, jotka sulivat 138-139,5°C:ssa. Tämä tuote kiteytettiin uudelleen vielä kerran 106 mlrsta absoluuttista etanolia, jolloin saatiin 28,9 g tuotetta, sp. 139-140°C. Seosta, jossa oli 28,7 g (0,148 moolia) /-5-hydr-10 oksimetyyli-3-fenyyli-2-oksatsolidinonia 100 ml:ssa tri-fluorietikkahappoanhydridiä, kiehutettiin kunnes kiinteä aine oli liuennut. Tämä seos konsentroitiin vakuumissa, ja saatu öljy lisättiin 200 ml:aan kloorisulfonihappoa pitämällä seoksen lämpötila 30°C:n alapuolella. Sitten 15 seosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 2 1/4 tuntia ja sitten se kaadettiin jäihin. Kiteytynyt tuote (/-4-£5-(trifluoriasetoksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin- 3-yyli7bentseenisulfonyylikloridi) suodatettiin erilleen ja pestiin vedellä ja lisättiin sitten seokseen, jossa 20 oli 60 ml väkevää ammoniakkia 300 ml:ssa THF:a, pitämällä muodostuneen seoksen lämpötila välillä -10° - 0°C. Saatua seosta sekoitettiin 15 minuuttia 0°C:ssa ja vielä 30 minuuttia ulkopuolista jäähdytystä käyttämättä. Sitten seos konsentroitiin vakuumissa THF:n poistamiseksi ja 25 laimentamiseksi ja laimennettiin vedellä. Tuote pestiin vedellä ja suodatettiin, jolloin saatiin 32,1 g otsikon yhdistettä, sp. 182-184°C. (Kidemuodon muuttumista havaittiin 158°C:ssa). Tämä kiteytettiin uudelleen aseto-nitriilistä, jolloin saatiin 25,5 g tuotetta, sp. 184,5-30 185°C.

Esimerkki 3 (d/)-Ν,Ν-dimetyyli- ja (di)-N-metyyli-4-^5-(hydr-oksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7bentseeni-sulfonamidi 24 78078 (E, = N(CH3)2 tai NHCH,, R5 = H)

Liuosta, jossa oli 2,72 g (0,01 moolia) (d{)-^5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7bentseeni-sulfoniamidia 50 ml:ssa kuivaa dimetyyliformamidia (DME) 5 sisältäen 5 g kuivaa kaliumkarbonaattia, sekoitettiin 60°C:ssa lisättäessä 0,62 ml jodimetaania 10 ml:ssa DMF:a. Tämän lisäyksen jälkeen seosta pidettiin 60°C:ssa tunnin ajan ja sitten sitä konsentroitiin vakuumissa DMF:n tislaamiseksi pois. Jäännös (3,7 g) liuotettiin dimetyyli-10 sulfoksidiin ja kromatografioitiin silikageelillä, jolloin saatiin aikaisempana jakeena 0,65 g (d^ )-N,N-dimetyyli- 4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7bentsee-nisulfoniamidia, sp. 174-176°C. Tällöin saatiin myös toinen 1,05 g:n jae (d^)-N-metyyli-4-/5-(hydroksimetyyli)-15 2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfoniamidia, sp. 164-166°C.

Esimerkki 4 (d<l) -4-/5- (hydroksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin- 3-yyli/bentseenisulfonyyli-atsidi (R^ = N^, Rg=H) 20 Liuos, jossa oli 10 g natriumatsidia 20 ml:ssa vettä, lisättiin 200 ml:aan reagenssilaatua olevaa asetonia ja sitten jäähdytettiin -5°C:seen. Liuokseen lisättiin 19 gramman erä (d&)-4-/5-(trifluoriasetoksime-tyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7bentseeni-sulfonyyli-25 kloridia (valmistettu esimerkin 1 mukaisesti), pitämällä seoksen lämpötila 0°C:n alapuolella. Kun seosta oli sekoitettu tunnin ajan, sen annettiin olla paikoillaan yön ajan. Asetoni poistettiin vakuumissa, lisättiin vettä ja tuote suodatettiin erilleen ja pestiin vedellä, jolloin 30 saatiin 12,8 g tuotetta, sp. 108-110°C. Tätä tuotetta sekoitettiin 250 ml:n kanssa asetonitriiliä 25°C:ssa ja suodatettiin vähäisen kiinteän aineen poistamiseksi. Asetonitriili haihdutettiin pois ja kiteytynyt tuote suodatettiin erilleen, saannon ollessa 12,3 g. Tämä tuote 35 kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatista, jolloin saatiin 6,0 g otsikon yhdistettä, sp. 112-113°C.

25 7 8 0 7 8

Esimerkki 5 ^,-4-/5- (hydroksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin- 3-yyli7bentseenisulfonyyli-atsidi (R-^ = N3, R^ = H)

Liuos, jossa oli 5 g natriumatsidia 10 ml:ssa vet-5 tä, lisättiin 100 ml:aan reagenssilaatua olevaa asetonia ja sitten jäähdytettiin -5°C:seen. Pitämällä seoksen lämpötila välillä -5 - 0°C lisättiin 7 gramman erä £-4-/5-(trifluoriasetoksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin-3-yyli>7-bentseenisulfonyylikloridia (valmistettu kuten esimerkis-10 sä 2). Kun seosta oli sekoitettu tunnin ajan 0°C:ssa ja annettu olla paikoillaan yön ajan, asetoni poistettiin vakuumissa. Lisättiin vettä ja kiinteä aine suodatettiin erilleen ja pestiin vedellä, jolloin saatiin 4,8 g tuotetta, sp. 136-138°C. Tämä kiinteä aine kiteytettiin 15 uudelleen etyyliasetaatista, jolloin saatiin 4 g otsikon yhdistettä, sp. 137-138°C.

Esimerkki 6 £ -4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin- 3-yyli7-N-metyylibentseenisulfoniamidi (R^ = 20 NHCH3, R5 = H)

Liuosta, jossa oli 10 ml metyyliamiinia 200 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania (THF), sekoitettiin lisättäessä 6,3 g ^-4-/5-(trifluoriasetoksimetyyli)-2-okso-oksatso-lidin-3-yyli7bentseenisulfonyylikloridia. Seos pidettiin 25 tämän lisäyksen ajan -10°C:ssa tai tämän alapuolella olevassa lämpötilassa ja sitten sen annettiin kohota ympäristön lämpötilaan yön kuluessa sekoitettaessa. Kun THF oli poistettu vakuumissa, lisättiin vettä ja valkea kiinteä aine suodatettiin erilleen ja pestiin vedellä, jolloin 30 saatiin 4,41 g tuotetta, sp. 137-142°C. Kiteyttämällä uudelleen asetonitriilistä saatiin 3,83 g otsikon yhdistettä, sp. 137-138°C.

Esimerkki 7 Käyttämällä esimerkin 6 menetelmää voidaan valmis-35 taa {£)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/- 26 78078 N-n-butyylibentseenisulfoniamidia (R^ = NH-n-C^Hg, R^=H) käyttämällä metyyliamiinin asemesta 4 ml n-butyyli-amilnia.

Esimerkki 8 5 Käyttämällä esimerkin 6 menetelmää voidaan valmis taa (^)-N,N-n-dibutyyli-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfoniamidia (R^ = N (n-C4Hg)2, R5 = H) käyttämällä metyyliamiinin asemesta 5,5 ml di-n-butyyliamiinia.

10 Esimerkki 9 £-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/-N-syklopropyylibentseenisulfoniamidi (R^ = NH- <TJ , R5 = H)

Liuosta, jossa oli 6 ml syklopropyyliamiinia 50 ml: 15 ssa tetrahydrofuraania, sekoitettiin jäähauteessa pitämällä lämpötila 30°C:n alapuolella lisättäessä 9,3 g ¢.-4-/5-(trifluoriasetoksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7-bentseenisulfonyylikloridia (katso esimerkkiä 2) . Seosta sekoitettiin tunnin ajan, tetrahydrofuraani poistettiin 20 vakuumissa ja jäännös laimennettiin vedellä ja tehtiin happameksi laimealla suolahapolla. Kiinteä aine suodatettiin erilleen, pestiin vedellä ja kuivattiin. Otsikon yhdisteen saanto oli 7,06 g, sp. 129-147°C. Tämä kiteytettiin 30 ml:sta asetonitriiliä, jolloin saatiin 2,0 g tuo-25 tetta, sp. 161,8-163,4°C.

Esimerkki 10 £-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/-N-metoksibentseenisulfoniamidi (R·^ = NHOCH^, R5 * H) 30 Liuosta, jossa oli 3 ml metoksiamiinia (0-metyyli- hydroksyyliamiinia) 50 ml:ssa tetrahydrofuraania, sekoitettiin ja jäähdytettiin -5 - +10°C:ssa lisättäessä 15 minuutin kuluessa liuos, jossa oli 4,4 g £,-4-/5-(tri-fluoriasetoksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentsee-35 nisulfonyylikloridia (katso esimerkkiä 2) 20 ml:ssa tetrahydrofuraania. Eroittui valkeata kiinteätä ainetta. Seok- 27 78078 sen annettiin lämmetä ympäristön lämpötilaan ja suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin väritöntä hartsia. Tämä (4,5 g) kromatografioitiin käyttämällä valmistetta Water Co. Prep-500 ja käyttämällä liuo-5 tinseosta jossa oli 45 % asetonitriiliä/55 % dikloori-metaania. Viides fraktio (1,8 g) kiteytettiin etyyliasetaatista, jolloin saatiin 1,04 g otsikon yhdistettä, sp.

129,6-131,5°C. Tätä kiehutettiin 13 ml:n kanssa etyyliasetaattia, jäähdytettiin ja suodatettiin, jolloin saa-10 tiin 0,73 g tuotetta, sp. 130-132,5°C.

Esimerkki 11 (d £)-N,N-dikloori-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7-bentseenisulfoniamidi (R^ = NC12, R5 = H) 15 Seosta, jossa oli 2 gramman erä (dj^_)-4-/5-(hydr oksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfoni-amidia seoksena 10 ml:n kanssa vettä ja 50 ml:n kanssa dikloorimetaania, sekoitettiin jäähauteessa ja lisättiin 27 ml 5,25-prosenttista natriumhypokloriittia (Clorox).

20 Kaikki kiinteä aine liukeni ja muodostui sakkaa. Suodatettu dikloorimetaaniliuos erotettiin, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,54 g otsikon yhdistettä, sp. 121,5-123°C, hajoten. 1,24 gramman lisä-erä oli kiinteätä liukenematonta ainetta ja sen infrapu-25 nakäyrä oli sama kuin edellä mainitun näytteen.

Esimerkki 12 ( )-N,N-dikloori-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso- oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfoniamidi Suspensiota, jossa oli 1,00 g (<2) -4-/5-hydroksime-30 tyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7bentseenisulfoniamidia millilitrassa vettä, sekoitettiin jäähauteessa lisättäessä 13,5 ml 5,25-prosenttista natriumhypokloriittia (Clorox). Sitten liuos tehtiin lievästi happameksi lisäämällä etikka-happoa; tuote eroittui valkeina kiteinä (1,24 g), sp.

35 124,5-125,5°C.

28 7 8 0 7 8

Esimerkki 13 (dä)-N-kloori-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7bentseenisulfoniamidi, natriumsuola (R = NClNa, R^ = H) 5 Seosta, jossa oli 2,0 g (dfo-4-/5-(hydroksimetyy- li)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfoniamidia 10 ml:ssa vettä, sekoitettiin jäähauteessa lisättäessä 13.5 ml 5,25-prosenttista natriumhypokloriittia (Clorox). Kiinteä aine liukeni ja sitten eroittui kiteitä. Nämä suo- 10 datettiin erilleen ja pestiin pienellä määrällä kylmää vettä ja kuivattiin. Otsikon yhdisteen saanto oli 1,97 g (hajaantuu lämmitettäessä 138°C:n yläpuolella).

Esimerkki 14 ( HL ) -N-kloori-4-/5- (hydroksimetyyli) -2-okso-oksat-15 solidin-3-yyli/bentseenisulfoniamidi, natriumsuola

Seosta, jossa oli yksi gramma (^)-4-/5-(hydroksimetyyli) -2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfoniami-dia 1 ml:ssa vettä, sekoitettiin jäähauteessa lisättäessä 6.5 ml natriumhypokloriittia (Clorox, 5,25-prosenttista 20 natriumhypokloriittia). Kiinteä aine liukeni, ja sitten kiteytyi valkeata kiinteätä ainetta. Tuote suodatettiin erilleen ja pestiin kerran pienellä määrällä jäävettä (1,15 g), sp. 165-167°c (hajoten).

Esimerkki 15 25 (dZ)-N-/4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin- 3-yyli/7-fenyylisulfonyyliJ-S,S-dimetyylisulfiili-imiini (R1 = N = S(CH3)2, R5 = H)

Suspensiota, jossa oli 2,00 g (d d)-4-/5-(hydroksi-metyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfoniamidia 30 10 ml:ssa vettä, sekoitettiin ja lisättiin 11,5 ml 5,25 prosenttista natriumhypokloriittia (Clorox). Lähes kaikki kiinteä lähtöaine liukeni. Liuos suodatettiin ja lisättiin 25 ml etanolia ja sen jälkeen 10 ml dimetyylisulfidia. Seosta sekoitettiin hyvin kolmekymmentä minuuttia ja sit-35 ten se konsentroitiin värittömäksi lasimaiseksi aineeksi.

29 7 8 0 7 8

Tuote liuotettiin asetonitriiliin ja kromatografioi-tiin käyttämällä valmistetta Waters Prep-500 HpLc. Puhtaan otsikon yhdisteen saanto oli 1/74 g sp. 162,5-164,5°C (kiteiden muuttumista havaittiin 136°C:ssa).

5 Esimerkki 16 (d_£) -3-/4-hydratsiinosulfonyyli) fenyyli^Z-5- (hydr-oksimetyyli)-2-oksatsolidin-2-oni (R^ = NHNH2/ Rcj=H) 30 gramman erä (d#) -4-/5-(trifluoriasetoksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentseenisulfonyylikloridia 10 lisättiin liuokseen, jossa oli 6 ml hydratsiinihydraat-tia 300 ml:ssa tetrahydrofuraania ja jota pidettiin -10 -0°C:ssa. Kolmenkymmenen minuutin sekoittamisen jälkeen seoksen annettiin palautua ympäristön lämpötilaan. Tetra-hydrofuraani haihdutettiin pois typpivirrassa, ja jäännös 15 laimennettiin vedellä ja suodatettiin. Saanto oli 11,81 g, sp. 172-174°C hajoten. Tuote puhdistettiin liuottamalla 30 ml:aan dimetyylisulfoksidia, liuos suodatettiin ja laimennettiin metanolilla; saanto 8,8 g, sp. 173°C hajoten. Esimerkki 17 20 (dl) -4-/5- (asetoksimetyyli-2-okso-oksatsolidin-3- yyli7bentseenisulfoniamidi (R^ = / R^ = OCH^)

Seosta, jossa oli 19,3 g (0,10 moolia) (dl) -5-(hydroksimetyyli)-3-fenyyli-2-oksatsolidinonia, 50 ml asetonitriiliä, 11 ml etikkahappoanhydridiä ja 0,1 g 25 4-dimetyyliaminopyridiiniä, kiehutettiin 30 minuuttia.

Tämä seos konsentroitiin vakuumissa, jolloin saatiin raakaa öljyä, jonka IR:n ja NMR:n perusteella todettiin sisältävän (d & )-5-(hydroksimetyyli)-3-fenyyli-2-okso-oksat-solidinoni-asetaattia.

30 öljy lisättiin 130 ml:aan kloorisulfonihappoa, se koitettiin ympäristön lämpötilassa kaksi tuntia ja kaadettiin sitten kolmeen litraan jäitä. Jälelle jäänyt öljy uutettiin metyleenikloridiin ja kuivattiin natriumsulfaa-tilla. Metyleenikloridiliuos konsentroitiin ja jälelle 35 jäänyt öljy (10,9 g) lisättiin seokseen, jossa oli 300 ml THF:a ja 60 ml väkevää ammoniumhydroksidia jäähdytettynä 30 78078 -10 - 0°C:seen. THF poistettiin vakuumissa, ja jäännös laimennettiin vedellä ja suodatettiin, jolloin saatiin 8,8 g tuotetta, sp. 196,5-197°C. Kiteytettäessä uudelleen asetonitriilistä saatiin 6,3 g otsikon yhdistettä, 5 sp. 199-200°C.

Esimerkki 18 H -5-hydroksimetyyli-3~fenyyli-2-oksatsolidinoni

Osa A

(R)-(+)-1-bentsyyliglyserolia (48 g tai 0,263 moo-10 lia) valmistettiin menetelmin, jotka on esitetty artikkelissa S. Takano, E. Goto, M. Kirama ja Ogaswara, Heterocycles, 16, 381 (1981) ja siinä siteeratuissa viitteissä. Tämä tosyloitiin viitatulla menetelmällä, jolloin saatiin 57,8 g väritöntä öljyä.

15 Seosta, jossa oli 37,1 g (0,15 moolia) N-fenyyli- 4-metyylibentseenisulfoniamidia 150 ml:ssa kuivaa DMF:a, sekoitettiin ja lisättiin 17 g kalium-t-butylaattia ja sen jälkeen 55 g edellä mainittua tosylaattia. Seosta lämmitettiin 95-100°C:ssa 15 tuntia. Seos kaadettiin 20 jääveteen ja tuote uutettiin eetteriin. Eetteriliuos pestiin takaisin vedellä ja kuivattiin natriumsulfaatilla, jolloin saatiin 57,1 g tuotetta. Ohkokromatografaatinen analyysi silikageelillä osoitti siinä olevan kolmea aineosaa ja hiukan sulfonianilidi-lähtöainetta. Nuo 57,1 g 25 tuotetta liuotettiin 1,5 litraan eetteriä, sekoitettiin 100 ml:n kanssa 25-prosenttista natriumhydroksidin vesi-liuosta, ja suodatettiin Celite-suodatinpatjän läpi. Eetteriliuos konsentroitiin, jolloin saatiin 32,7 g öljyä. Tämä kromatografioitiin silikageeli-kolonneissa eluoi-30 maila seoksella 90 % tolueenia/10 % etyyliasetaattia kahtena ajona, jolloin saatiin 17,02 g kiinteätä tuotetta, sp. 88-99°C. Tuote on 4-metyyli-N-fenyyli,/2-hydroksi-3-(fenyylimetoksi)propyyli7bentseenisulfoniamidia.

Liuosta, jossa oli 16,5 g (0,049 moolia) 4-metyy-35 li-N-fenyyli-,/2-hydroksi-3- (fenyylimetoksi) propyyli/-bents- 31 78078 eenisulfoniamidia 100 mlrssa kuivaa 1,2-dimetoksietaania, sekoitettiin typen suojaamana lisättäessä liuos, jossa oli natriumnaftaleeni-radikaalianionia (valmistettu lisäämällä 20 ml 40-prosenttista natrium-metallin mineraa-5 liöljydispersiota liuokseen, jossa oli 40 g naftaleenia 100 ml:ssa kuivaa 1,2-dimetoksietaania pitämällä seoksen lämpötila typen suojaamana välillä 25-40°C). Lisäämistä jatkettiin kunnes seoksen väri vaihtui ja oli tumman vihreä - musta. Lisäyksen päätyttyä lämpötilan annettiin 10 kohota 40°C:seen. Kolmenkymmenen minuutin sekoittamisen jälkeen lisättiin 20 ml vettä ja sen jälkeen 125 ml 20-prosenttista rikkihappoa. Happameksi tehtäessä lämpötila pidettiin välillä 30-40°C. 1,2-dimetoksietaani poistettiin tislaamalla vakuumissa. Vesiliuos ja jäännös 15 uutettiin kuusi kertaa tolueenilla, kaksi kertaa metylee-nikloridilla ja sitten huuhdeltiin typellä metyleeni-kloridin poistamiseksi. Sitten vesiliuos kyllästettiin natriumkloridilla ja uutettiin viisi kertaa metyleeni-kloridilla. Uutteet kuivattiin vedettömällä kaliumkar-20 bonaatilla, suodatettiin ja konsentroitiin, jolloin saatiin 6,0 g väritöntä öljyä. Tämä tuote on d-3-fenyyliami-no-1,2-propaanidiolia.

6,0 gramman (0,036 moolia) erä d-3-fenyyliamino-1, 2-propaanidiolia yhdistettiin 10 ml:n kanssa 1,2-di-25 metoksietaania ja 5 ml:n kanssa dietyylikarbonaattia ja kiehutettiin. Kiehuvaan liuokseen lisättiin 0,1 g nat-riummetylaattia. Kymmenen minuutin kuluttua eroittui kiinteätä ainetta ja lisättiin vielä 5 ml 1,2-dimetoksietaania. Kiehuttamista jatkettiin kolmekymmentä minuuttia, 30 minkä jälkeen lisättiin yksi ml etikkahappoa ja seos konsentroitiin vakuumissa, jolloin jälelle jäi 7,2 g kiinteätä ainetta. Tämä uutettiin kuumalla asetonitriilillä, ja asetonitriili haihdutettiin pois, jolloin saatiin 1,8 g otsikon yhdistettä, sp. 136,5-138°C. Tuotteen optinen mer-35 kintätapa /o(7^ on -67,1° (C=l asetonitriilissä).

32 7 8 0 7 8

Osa B

1820 ml:n erä aniliinia lämmitettiin sekoittaen N2:n suojaamana 80-85°C:seen. Tähän lisättiin hitaasti 265 ml tuoreeltaan tislattua glysidolia sellaisella no-5 peudella, että lämpötila pysyi 85-90°C:ssa. Kun ensimmäiset 40-100 ml glysidolia oli lisätty, ulkopuolinen lämpölähde poistettiin ja reaktiolämpötilaa valvottiin sen jälkeen lisäysnopeuden avulla ja tilapäisesti jäähdyttämällä. Lisäyksen päätyttyä käytettiin lämmitystä 10 lämpötilan pitämiseksi kahden tunnin ajan 80-90°C:ssa. Tuote, (d£)-3-fenyyliamino-l,2-propaanidioli, tislattiin lyhyen kolonnin läpi 4,0-4,5 mm:n paineessa ani-liinin poistamiseksi, joka tislautui 50-55°C:ssa, (1,5 1 saatiin takaisin). Tuote tislattiin 0,05 mm:n vakuumissa, 15 kp. 132-135°C; saanto 588 g väritöntä viskoosista öljyä. Liuosta, jossa oli 1201 g (7,18 moolia) (d (L) -3-fenyyliamino-l, 3-propaanidiolia 1,9 litrassa kloroformia, sekoitettiin ja lisättiin 600,1 g (3,95 moolia) ^-manteli-happoa. Seosta lämmitettiin kiehuttaen kiinteän aineen 20 liuottamiseksi. Sen jälkeen sen annettiin jäähtyä hitaasti, suolan erottuessa kiteinä. Huoneen lämpötilan saavuttamisen jälkeen kiinteä aine suodatettiin erilleen ja pestiin sekoittaen sitä kloroformin kanssa kolme kertaa. Kuivattu saalis oli 868 g (d)-3-fenyyliamino-l,2-25 propaanidioli-(1)-mandelaattia, sp. 86-87°C. Tämä kiteytettiin uudelleen kiehuttamalla 2,8 litran kanssa kloroformia, jäähdyttämällä hitaasti ja suodattamalla, ja pesemällä kolme kertaa kloroformilla, jolloin saatiin 754 g tuotetta, sp. 87-88°C.

30 Suspensiota, jossa oli 845 g (d)-3-fenyyliamino- 1,2-propaanidioli-(^)-mandelaattia 300 ml:ssa vettä, sekoitettiin jäähauteessa lisättäessä kylmä liuos, jossa oli 108 g natriumhydroksidia 300 ml:ssa vettä. Liuos kyllästettiin natriumkloridilla ja uutettiin sitten jatku-35 vasti dikloorimetaanilla. Uute konsentroitiin vakuumissa, 33 78078 jolloin saatiin 446,9 g (d)-3-fenyyliamino-l,2-propaani-diolia, väritöntä öljyä. Tämän tuotteen optinen merkintätapa oli /o<y^=+210 (C=l etanolissa, lukema 200 cm:n putkessa) .

5 Seosta, jossa oli 441,5 g (2,60 moolia) (d)-3-fe- nyyliamino-1,2-propaanidiolia, 325 ml dietyylikarbonaat-tia, 300 ml 1,2-dimetoksietaania, 40 g kaliumkarbonaattia ja 1 g natriummetoksidia, kiehutettiin kaksi tuntia. Tuon ajan kuluttua lisättiin vielä 20 g kaliumkarbonaat-10 tia. 3,5 tunnin kuluttua lisättiin vielä 50 ml dietyyli-karbonaattia.

Kiehuttamista jatkettiin viisitoista tuntia. Ohkokromatograafinen analyysi osoitti, että reaktio oli tapahtunut täydellisesti. Liuottimesta poistettiin va-15 kuumissa noin puolet ja lisättiin 500 ml vettä ja 40 ml etikkahappoa. Valkea kiinteä aine suodatettiin erilleen ja pestiin vedellä, 70-prosenttisella etanolilla ja eetterillä, jolloin saatiin 401,7 g otsikon yhdistettä, sp.

137.5- 138,5°C. Tämä kiteytettiin litrasta 95-prosent-20 tista etanolia, jolloin saatiin 368,1 g tuotetta, sp.

138.6- 139,1°C. Se kiteytettiin uudelleen 700 ml:sta ase- tonitriiliä, jolloin saatiin 330,4 g tuotetta, sp. 138,5-139,5°C. Tuotteen optinen kierto -72,0 (C=l aseto ni triilissä) .

25 Esimerkki 19 {d£ )-4-/5-(bentsoyylioksimetyyli)-2-okso-oksatso-lidin-3-yyli7-bentseenisulfoniamidi (R^ = NH2, R5 = oc6H5)

Liuosta, jossa oli 5,0 g (18,3 ramoolia) (d £)-4-30 /5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli7~bentsee- nisulfoniamidia 50 mlrssa kuivaa pyridiiniä, sekoitettiin -8°C - 0°C:ssa jäähdyttäen lisättäessä hitaasti 2,34 ml bentsoyylikloridia. Havaittiin lievää eksotermisuutta. Lisäyksen päätyttyä seoksen annettiin lämmetä 25°C:seen 35 ja sekoittamista jatkettiin kaksi tuntia. Lisättiin vielä 34 0,2 ml bentsoyylikloridia ja seoksen annettiin olla paikoillaan yön ajan. Sitten seos kaadettiin jäihin ja tuote kiteytyi. Se suodatettiin erilleen ja pestiin hyvin vedellä ja kuivattiin. Saanto oli 6,72 g. Tämä kitey-5 tettiin uudelleen liuottamalla kuumaan dietyleeni-glykoli-dimetyylieetteriin, konsentroimalla puoleen tilavuudestaan ja antamalla seoksen olla paikoillaan; saanto 3,55 g, sp.

2 33-2 34°C.

Esimerkki 20 10 (d l)-4-/5-(propionyylioksimetyyli)-2-okso-oksatso- lidin-3-yyli7-bentseenisulfoniamidi (R·^ = NH2, r5 = oc3h?)

Liuosta, jossa oli 5,0 g (18,3 mmoolia) (d#)-4-/5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/-bentseeni-15 sulfoniamidia 50 ml:ssa kuivaa pyridiiniä, sekoitettiin jäähauteessa lisättäessä 1,60 ml propionyylikloridia. Seoksen annettiin lämmetä ympäristön lämpötilaan ja annettiin olla paikoillaan yön ajan. Sitten se kaadettiin 200 ml:aan jäävettä, vesiseos tehtiin happameksi suolaha-20 polla pitämällä seos kylmänä, ja kiteinen tuote suodatettiin erilleen ja pestiin kylmällä vedellä. Saanto oli 3,60 g, sp. 211-212,5°C. Tämä kiteytettiin uudelleen nitrometaanista, jolloin saatiin 3,32 g tuotetta, sp. 212-213,5°C.

25 Esimerkki 21 (dd )-meripihkahappo, monoesteri 4-/5-hydroksi-metyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/-bentseeni-sulfoniamidin kanssa (R^ = NH2, R^ = C (O) CH2CH2COOH) Liuosta, jossa oli 5,0 g (18,3 mmoolia) (d£)-4-30 /5-(hydroksimetyyli)-2-okso-oksatsolidin-3-yyli/bentsee- nisulfoniamidia 50 ml:ssa pyridiiniä ja 2,02 g meripihka-happoanhydridiä, sekoitettiin ja lämmitettiin kaksi tuntia 60°C:ssa. Reaktioseos kaadettiin 100 ml:aan jäävettä ja pH säädettiin arvoon 3 lisäämällä väkevää suolahappoa 35 (pitämällä seos kylmänä). Liuos kyllästettiin natriumklo- 35 78078 ridilla ja uutettiin tetrahydrofuraanilla. Uute kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsentroitiin, jolloin saatiin 7,96 g kiteitä. Kiinteä aine sekoitettiin 50 ml: aan vettä, ja lisättiin 20-prosenttista kaliumvetykarbo-5 naattia kunnes pH oli 10. Sitten tuote suodatettiin erilleen ja suodoksen pH säädettiin takaisin arvoon 2 suolahapolla. Tuote suodatettiin erilleen ja kuivattiin, jolloin saanto oli 4,80 g, sp. 167-170°C.

Tämän tuotteen natriumsuolaa valmistettiin suspen-10 doimalla 2,4 g edellä mainittua kiinteätä ainetta 50 ml:aan vettä, lisäämällä 1-norm. NaOH:a kunnes pH oli 7, suodattamalla ja konsentroimalla vakuumissa, jolloin saatiin 2,35 g valkeata kiinteätä ainetta.

Claims

36 78078 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten p-ok-so-oksatsolidinyylibentseenisulfoniamidien valmistamisek-5 si, joiden kaava on /-v 1 «l-°2S-(OVM 0 (I) v-/^w 10 jossa Rx on -NR2R3, -N{OR2)R3, -N3, -NHNH2, -NX2, -NXZ tai -N=S(O)nRgRgi R2 3a r3 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyä, C2_4~alkyyliä tai C3_g-sykloalkyyliä, Rg 15 on O 0 0 vety, -CRg tai -C(CH2)mC-0H,
20 Rg on aryyli tai C^.^-alkyyli, Rg ja Rg tarkoittavat toisistaan riippumatta C^_4-alkyyliä tai ne muodostavat yhdessä ryhmän -(CH2)p-, X on Cl tai Br, Z on fysiologisesti hyväksyttävä kationi, m on 2 tai 3, n on 0 tai 1, ja P on 3, 4 tai 5, tunnettu siitä, että yhdiste, 25 jonka kaava on 0 /—\ il Halogeeni-SO?-( \—n o 30 ^Loy jossa Y on asyyli-ryhmän sisältävä substituentti, saa tetaan kosketukseen reagenssin kanssa, joka on amiini
35 HNR2R3 tai NH(OR2)R3, atsidi-ioni “N3, tai hydratsiini, joissa kaavoissa R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 37 78078 O ^ A
5 Ri-SOo /o\_0 T \_ OH jossa R^ = NR2R3, N(OR2)R3I N3 tai NHNH2, ja haluttaessa 10 A a) saatu kaavan Ia mukainen yhdiste, jossa R^ = NH2, saatetaan kosketukseen esimuodostetun hypohaliitin kanssa tai halogeenin ja emäksen kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on “ \ „ i r(j '—OH 20 jossa X = Cl tai Br ja Z on fysiologisesti hyväksyttävä kationi, ja haluttaessa A b) saatu kaavan Ib mukainen yhdiste saatetaan kosketukseen hypohaliitin kanssa pH-arvossa noin 4-8, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 25 O X2NS°2-(^A ,n 30 jossa X = Cl tai Br, tai saatu kaavan Ib mukainen yhdiste saatetaan kosketukseen dialkyylisulfidin SRgRg kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 38 7 8 0 7 8 RgR9S=NS02-( (j ) N 0 Id 5 ^ \ OH ja haluttaessa A c) saatu kaavan Id mukainen yhdiste hapetetaan, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 10 ' ΛΛ A R8R9S=NS02 —( O V-N 0 Ie 15 ' ja/tai haluttaessa B) saatu kaavan Ia-Ie mukainen yhdiste saatetaan kosketukseen happokloridin RgCOCl tai anhydridin (RgC0)20 kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 20 25 '—OCOR6 tai saatu kaavan Ia-Ie mukainen yhdiste saatetaan kosketukseen anhydridin kanssa, jonka kaava on O 30 n o 35 jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on 39 78078 /—v X Ri-S°2 _( O ° S S N-O-C-(CH2)m-C02H 40 78078 Förfarande för framställning av terapeutiskt använd-bara p-oxo-oxazolindinylbensensulfonamider med formeln 5 O 0 (I) ' or5 10 5 där Rx är -NR2R3, -N(OR2)R3, -N3, -NHNH2, -NX2, -NXZ eller -N=S(O)nRgRg, R2 och Rg betecknar oberoende av varandra väte, C^.^-alkyl eller C3_g-cykloalkyl, R5 är väte, O 0 0
15 -CRg eller -C (CH2) mC-OH, Rg är aryl eller C-L_i2-alkyl, Rg och Rg betecknar oberoende av varandra C^.^-alkyl eller de bildar tillsammans en grupp -(CH2)p, X är Cl eller Br, Z är en fysiologiskt godtagbar katjon, m är 2 eller 3, n är 0 eller 1 och p är 3, 4, eller 5, kännetecknat 20 därav, att en förening med formeln f—y f Halogen-S02-N 0 25 ( '— OY där Y är en substituent innehällande en acylgrupp, bringas i kontakt med ett reagens, som är en amin HNR2R3 eller NH(0R2)R3/ azidjon “N3, eller hydrazin, i vilken formler
30 R2 och R3 betecknar saama som ovan, varvid erhälls en förening med formeln OH 41 78078 där = NR2R3, N(OR2)R3, N3 eller NHNH2, och, om si önskas, A a) bringas en erhillen förening med formeln la, där Rj = NH2, i kontakt en pä förhand bildad hypohalit eller med en halogen och en bas, varvid erhills en förening 5 med formeln Z\ /-\ X xNS°2 \2/v j ib 10 '—( '—OH där X = Cl eller Br och Z är en fysiologiskt godtagbar kat-jon, och, om si önskas, A b) bringas en erhillen förening med formeln Ib i 15 kontakt med en hypohalit vid ett pH-värde av 4-8, varvid erhills en förening med formeln 0 20 Χ2Ν8°2-(§Η(/0 '— OH där X = Cl eller Br, eller bringas en erhillen förening med formeln Ib i kontakt med en dialkylsulfid SRgRg, varvid 25 erhills en förening med formeln R8R9S=NS02-^O/“i; °/ Id >—OH och, om si önskas, Ac) oxideras en erhillen förening med formeln Id, varvid erhills en förening med formeln