FI76337C

FI76337C - Foerfarande foer framstaellning av nya, farmakologiskt aktiva 4,7-dihydropyrazolo/3,4-b/pyridin-5- karboxylsyraderivat.

Info

Publication number: FI76337C
Application number: FI834661A
Authority: FI
Inventors: Giorgio Winters
Original assignee: Lepetit Spa
Priority date: 1982-12-20
Filing date: 1983-12-19
Publication date: 1988-10-10
Also published as: NO160367C; DK582083D0; DK582083A; PH20896A; KR890002227B1; PT77850B; AU2227083A; FI76337B; ES528152A0; PT77850A; IL70445A; KR840007000A; ZA839092B; IE57305B1; IE832988L; GR79111B; US4954508A; DE3382452D1; NO834695L; ATE69227T1

Description

763 37 MENETELMÄ UUSIEN, FARMAKOLOGISESTI AKTIIVISTEN 4,7-DIHYDRO-

PYRATS0L0[3,4-b]pYRIDIINI-5-KARB0KSYYLIHAPP0J0HDANNAISTEN

VALMISTAMISEKSI

Tämä keksintö koskee menetelmää farmakologisesti aktiivisten 5 4,7-dihydropyratsolo]~3,4-bJpyridiini-5-karboksyylihappojoh-dannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (I) R2 r' ^ /kyW»3 R* I I "> sN ^sNH'^SsCH3

R

jossa R tarkoittaa vetyä, (C^-Cg)alkyyliä tai fenyyliä; Ί R tarkoittaa (C^-Cg)alkyyliä, (C^-C^sykloalkyyliä tai 10 fenyyliä; 2 R tarkoittaa fenyyliä, joka mahdollisesti on subsituoi-tu 1 tai 2 substituentilla, jotka ovat (C^-C^)alkyyli, (C^-C4)alkoksi, halo(C^-C^)alkyyli, halogeeni, nitro tai tri f 1uorimetyyli, tai R2 tarkoittaa pentaf1uorifenyyliä 15 tai - tai /3-naftyyliä; 3 R tarkoittaa (C^-Cg)a 1kyyliä, (C^-C^)alkoksi(C^-Cg)alkyyliä tai (fenyylimetyyli)(metyy1i) ami noetyy 1 i ä, sekä näiden yhdisteiden fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.

20 (-Cg)alkyyliryhmät määriteltynä tämän keksinnön puitteis sa käsittävät ryhmät: metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, n-butyyli, isobutyyli, pentyyli, heksyyli ja vastaavat.

(C^-C-,) syki oal kyyl i ryhmi ä ovat: syki opropyyl i - , syklo- 76337 2 butyyli-, syk 1opentyy1i-, syk 1oheksyy1i- ja sykioheptyyli-ryhmä t.

(C^-C^)alkoksiryhmiä ovat: metoks i-, etoksi-, propoksi-, ja buto kslryhmät.

5 (Cj-C^)aikyyliryhmät sisältävät 1-4 hiiliatomia ja sisälty vät jo edellä esitettyjen (-Cg )alkyyliryhmien määritelmää n.

Termi "halo" tarkoittaa ha 1ogeenia torni a, joka on kloori, bromi tai fluori, kun taas halo(C^-C^)alkyyliryhmät ovat 10 1-4 hiiliatomia sisältäviä ha 1ogeenia 1kyyliryhmiä, joissa joku tai kaikki vetyatomit on korvattu halogeeniatomeilla. Esimerkkejä ha 1 o(C^-C^)aikyyliryhmistä ovat: trifluori-metyyli, klooridif1uorimetyyli, bromikloorifluorimetyyli, trikloorimetyyli, 1,1-dikloorietyyli, 1,2-dikloorietyyli , 15 1 -kloori-2,2,2-trif1uorif1uorietyy1i ja vastaavat.

"Fysiologisesti hyväksyttävät suolat" ovat farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja, joissa yhdisteen kokonaismyrkyl-lisyys ei ole lisääntynyt verrattuna ei-suolaan. Nämä hap-poadditiosuolat saadaan käsittelmällä edellä esitetyn 20 kaavan (I) mukaisia yhdisteitä farmaseuttisesti hyväksyttävillä hapoilla.

Edullisia esimerkkejä fysiologisesti hyväksyttävien suolojen muodostamiseen sopivista hapoista ovat: hydrohaloi dit, rikki-, fosfori- ja typpihapot; aiifaattiset, aii sykii set, 25 aromaattiset tai heterosykliset karboksyyli- tai sulfoni-hapot, kuten muurahais-, etikka-, propioni-, meripihka-, glykoli-, maito-, omena-, viini-, sitruuna-, askorbiini-, ο^-ketoglutaari-, glutamiini-, asparagiini-, male i i n i-, hydroksimaleiini-, palorypälehappo; fenyylietikka-, bent-soe-, para-aminobentsoe-, antraniili-, para-hydroksibent-soe-, salisyyli-, para-aminosalisyyli- tai embonihappo, metaanisulfoni-, etaanisulfoni-, hydroksietaanisulfoni-, 3 76337 etyleenisulfoni happo; halobentseenisulfoni-, tolueenisul-fon i- , naftaleenisulfonihapot tai sulfani!iinihappo.

Näitä tai uusien yhdisteiden muita suoloja voidaan käyttää myös puhdistettaessa saatuja yhdisteitä, muuttamalla ne 5 suoloiksi, jotka eristetään ja vapauttamalla vapaa yhdiste suoloista. Kun edellä esitettyjen menetelmien mukaisesti saadaan kaavan (I) mukaisia yhdisteitä farmaseuttisesti hyväksyttävien happojen vastaavina suoloina, ne voidaan muuttaa vastaavaksi vapaaksi emäkseksi käsittelemällä al-10 kalisella aineella.

Vapaa emäs voidaan puolestaan muuttaa vastaaviksi suoloiksi saattamalla reagoimaan edeltä käsin valittujen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen kanssa. Koska uudet yhdisteet vapaassa muodossa ja suolojensa muodossa ovat 15 hyvin samankaltaisia, on edellä esitetyssä ja jäljempänä seuraavassa, sen mitä sanotaan vapaista yhdisteistä katsottava tarkoittavan myös vastaavia suoloja.

Edullisen ryhmän tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä muodostavat kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa R on vety, 20 (Cj-Cg)alkyyli tai fenyyli ja R1 on (C1-Cg)ai kyy 1i tai fe-nyyli, R^ on fenyyli, joka on substituoitu 1 tai 2 subs-tituentilla, jotka ovat nitro, (C^)a 1koksi , (C^-C^)al- kyyli, kloori tai trifluorimetyyli ja R^ on (C. -Cr ) - Ί b a 1 kyy 1i tai (C1-C4)a 1koksi(C1-C^)a 1kyyli , tai vastaavat 25 fysiologisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat.

Erään toisen edullisen ryhmän muodostavat kaavan (I) mukaiset yhdisteet, joissa R on vety, metyyli tai fenyyli, ί 2 R on metyyli, etyyli, isopropyyli tai fenyyli, R on 2- tai 3-nitrofenyyli, 2- tai 3-metyylifenyyli tai 2- tai 30 3-tri f1uorimetyylifenyyli ja R on (C^-Cg)a 1 kyy1i, (Cj- -C4)aikoksi(C^-Cg)aikyyli, tai vastaavat fysiologisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat.

4 '76337

Terapeuttisesti käyttökelpoisia pyratsolo(3,4-b)-pyridii-nijohdannaisia on kuvattu mm. FI-patenteissa 55 660 ja 61 899. Näissä patenteissa esitetyt yhdisteet eroavat kuitenkin substituenttiensa puolesta tämän hakemuksen mu -5 kaisista yhdisteistä. Lisäksi farmakologinen aktiivisuus on erilainen.

Saksalaisissa hakemusjulkaisuissa DE 2641747, DE 2356684, DE 2225433, DE 2237765, DE 2138528, DE 2123318 ja DE 2028828 kuvataan yhdisteiden 5-karboksyy1ihappojohdannaisia. Mutta 10 näissäkin substituentit eroavat tämän hakemuksen mukais ten yhdisteiden substituenteista , erityisesti asemissa 4 ja 5. Näillä yhdisteillä aktiivisuus näyttää myös olevan keskushermostoon vaikuttava (CNS), kun taas tämän hakemuksen mukaiset yhdisteet vaikuttavat erityisesti kardiovasku-15 laariseen systeemiin.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistusmenetelmän kaavio on seuraava: R2 - l ^COOR2

Il i + T

N 1 -^

Ml ^Nih I ^ 0 ^ ^ CH3

R

11 R2 III

r1v J^^C00r3 rl x M MH. 1 3

R

5 76337

Kaavan (II) mukainen 5-aminopyratsolijohdannainen , jossa R ja tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan kaavan (III) mukaisen substituoidun ^»^-tyydyttämättömän ketoesterin kanssa, joka myös tunnetaan 2-vi-5 nylideeniasetoasetaattina, jossa substituentit tarkoittavat samaa kuin edellä.

Tämä reaktio voidaan suorittaa käyttäen näiden kahden rea -genssin erilaisia molaarisia suhteita, kuitenkin on edullista käyttää aminopyratsoli-reagenssin ekvimoolarista 10 määrää tai sen pientä ylimäärää.

Reaktioliuotin on orgaaninen liuotin, joka ei vaikuta häiritsevästi reaktion kulkuun. Edullisia esimerkkejä tällaisista liuottimista ovat: (C^-C^)alkanolit, kuten metanoli, etanoli, propanoli, isopropanoli, tert.-butanoli ja vastaa-15 vat, glykolit ja niiden eetterit. Yksi edullisista eetteri gl yko 1 e i s ta on etyleeniglykolin mono-metyylieetteri (me-

(TD

tyyl i sei 1osolve ^ ).

Reaktiolämpötila on yleensä 40°C - palautuslämpötila.

Reaktioaika vaihtelee ilmeisesti huomattavasti riippuen 20 reaktio-olosuhteista, kuitenkin reaktio yleensä tapahtuu täydellisesti 15 minuutissa - 20-60 tunnissa. Joka tapauksessa reaktion kulkua voidaan seurata tavanomaisilla menetelmillä, kuten T L C:11ä , käyttäen sopivaa eluointiseos-ta, kuten metanoli/k 1oroformi-seosta, suhteessa 1:9, tai 25 n-heksaani/etanoli-seosta , suhteessa 8:2.

Esitettyjen tietojen perusteella alan ammattimies kykenee optioimaan reaktio-o1 osuhteet ja erityisesti reaktio- a jän.

Vaihtoehtoisesti ainakin joissakin tapauksissa, keksinnön 30 mukaiset dihydropyratsolopyridiinit voidaan valmistaa 6 763 37 saattamalla 5-aminopyratsolijohdannainen reagoimaan noin 2 ekvimolaarisen määrän kanssa kaavan R -CHO mukaista alde- 3 hydiä ja kaavan CH^COCH^COOR mukaista asetetikkaesteriä, 0 3 joissa kaavoissa R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä, 6 orgaanisessa 1 i uotti mes sa , mieluimmin a 1 empi a 1 kyy1ia 1ko- holissa. Joka tapauksessa reaktio suoritetaan mieluimmin typpi atmosfäärissä ja pimeässä. Työskentelymenetelmät käsittävät: uuttamisen liuottimilla, saostamisen ei-liuot-timilla, kromatografisen puhdistamisen, erityisesti väläh-10 dyskromatografisesti ja kiteyttämisen.

Kaavan (II) mukaiset lähtöaineet R1·^

TT

i 2

R

valmistetaan pääasiallisesti käyttäen 5-pyratsoliamiinien valmistuksessa tunnettua tekniikkaa, jota kuvataan viite-kirjoissa, kuten "The Chemistry of heterocyclic compounds", 15 voi. ΥΛ, sivut 41-43, julkaisija Wiley and Wiley, New York, 1964.

Kaavan (III) mukaisten 2-vinylideeniasetoasetaattijohdannaisten valmistus tunnetaan kemiallisesti kirjallisuudesta .

20 Keksinnön mukaiset yhdisteet omaavat farmakologisen aktiivisuuden ja siten niitä voidaan käyttää lääkkeinä. Termillä "käyttö" tarkoitetaan mainitun käytön kaikkea teollisesti sopivia muotoja ja toimintoja, mukaan lukien niiden käytön farmaseuttisissa koostumuksissa.

7 76337

Erityisesti keksinnön mukaiset yhdisteet osoittavat in--vitro kalsium-antagonistista aktiivisuutta ja in-vivo an-tihypertensiivista vaikutusta. Mahdolliset terapeuttiset indikaatiot käsittävät siten anti-angina-indikaatiot ja 5 vasodilatooriset indikaatiot.

In vitro aktiivisuus voidaan todeta testaamalla kalsium--indusoitujen supistusten antagonismi marsun K+-depolari-soidussa umpisuolennauhassa.

Edellä esitetyn tekniikan mukaisesti, suolinauhat (läpi-10 mitta 1-2 mm, pituus rentona 2-2,5 cm) leikattiin marsun (250-350 g) umpisuolesta ja asetettiin 20 ml:n hauteisiin, joita käytetään eristetyille elimille ja jotka sisälsivät + , , , e t p( K -depolarisoitua tyrodi-liuosta, joka pidettiin 35' C:ssa ja oli kaasutettu: 95 % 0^ ja 5 % C02· K+-tyrodi-liuoksen 15 koostumus oli (mmoolia/1): NaCl 97; KC1 40; NaHCOg 11,9;

NaH^PO^ 0,4; glukoosia 5,5; pH 7,1. Supistusreponssit mitattiin isotonisissa olosuhteissa (1 g kuorma) käyttäen Harvard?in isotonista siirtojärjestelmää, joka kytkettiin Rikadenki'n potentiometriseen rekisteröintilaitteeseen.

20 Kumulatiiviset konsentraatio-responssikäyrät saatiin

CaCl2:lle (30-3000 ^moolia/l) lisäämällä Ca^+-konsentraa-tiota 3 minuutin väliajoin logaritmisesti kasvattaen (Van Rossum, Arch. Int. Pnarmacodyn., 143, 299-330, 1963). 20 minuutin pesu-jakso (hauteen neste vaihdettiin 6 kertaa) 25 suoritettiin käyrien välillä. 100 % responssiksi otettiin kudoksen maksimi-supistusresponssi toisen konsentraatio-responssikäyrän kuluessa ja kaikki muut supistukset laskettiin prosentteina tästä arvosta. Annossuhteet lasket-2+ tun Ca -konsentraation suhteena, joka tuotti 50 % maksi-30 maalisen responssin (EC^q) antogonistin läsnäollessa ja sen puuttuessa. Esitetyt pA2~arvot laskettiin menetelmällä, jonka ovat esittäneet Arunlakshana ja Schild, Br. J. Pharmac. Chemother. , _14, 48-58 (1959 ), merkitsemällä log (annossuhde-1) vastaan negatiivinen log (molaarinen kon-35 sentraatio-antagonisti). "Oppilas-testiä” käytettiin 76337 8 keskiarvojen vertailuun. Arvot tekstissä viittaavat keskimääräiseen _+ SEM-arvoon. Kaikki konsentraatiot ovat samoja kuin lääkeaineen lopullinen konsentraatio haude-liuoksissa.

5 Yhdisteet testataan aluksi vakio konsentraatiossa (10 pg/ml). häissä olosuhteissa keksinnön mukaiset yhdisteet 2 + . . . , .

osoittavat Ca -indusoitujen supistusten antagonismia K+-depolarisoiduissa suolinauhoissa. Erityisesti esimerkkien 1, 2, 11, 13, 18, 27, 35, 39, 41, 42 ja 43 yhdis-10 teet omaavat pA2-arvon, joka on välillä 8,2 - 9, ne ai kaansaavat konsentraatio-riippuvuuden siirtymisen oikeal-2 + le Ca :lle saaduissa konsentraatio-responssikäynssä, .... . 2+ niiden toiminta alkaa nopeasti ]a ne aiheuttavat Ca :n nopean relaksaation (300 μΜ) - indusoidut supistukset 15 alhaisissa konsentraatioissa (0,01 - 0,1 μΜ).

In vivo aktiivisuus voidaan todeta niin kutsutun "pithed rat preparation"-menetelmän avulla.

Rotille ruiskutetaan angiotensiini II verenpaineen aikaansaamiseksi .

20 Menetelmällä voidaan arvioida hypotensiiviset efektit autonomisten refleksien puuttuessa.

Keksinnön mukaiset yhdisteet aikaansaavat annoksesta riippuvan verenpaineen alenemisen, vaikuttamatta sydämen lyön-tinopeuteen. Yhdisteet tässä testissä annostetaan joko 25 suonensisäisesti tai pöhjukaissuolensisäisesti.

Edellä esitetyn tekniikan mukaisesti uros Spraque-Dawley-rotat (250-330 g) nukutettiin natriumpentobarbitonilla (40-50 mg/kg i.p,), sydämen toiminta ja hengitys hapen avulla. Ruumiirilämpöti ] a pidettiin välillä 35,0-36,5°C.

30 Verenpaine mi. tattiin vasemmasta päävaltimosta ja antago nistiset aineet annettiin kumulatiivisesti vasemman kau-lalaskimon kautta tai pöhjukaissuoleen asetetun kanyylin avulla. Verenpaine pidettiin välillä 75-120 mmHg, anta- 9 7 6 3 3 7 tamalla angiotensiini II suonensisäisellä infuusiolla (0,2-1,0 pg/kg/min). Sydämen lyöntinopeus mitattiin EKG:llä.

Edellä esitetyssä testissä esimerkin 1 mukainen yhdiste 5 osoitti huomattavaa annoksesta riippuvaa verenpainetta alentavaa vaikutusta, annoksen ollessa 0,1-3 pmoolia/kg i.v., eikä se aiheuttanut toisen asteen eteis-kammio-katkosta millään testatulla annoksella.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden sydän-verisuoni-aktiivi-10 suus (kardiovaskulaarinen aktiivisuus) havainnollistet tiin myös spontaanisti hypertensiivisilla rotilla, menetelmällä, jonka on esittänyt K. Aoki julkaisussa Japan Cir. Journal, voi. _2_7, s. 289 ( 1963). Valtimopaine mitattiin menetelmällä, jonka on esittänyt H. Friebel, 15 E. Vredom julkaisussa Arch. Exp. Phat. Pharmak., Voi.

232 , s. 416 (1958).

Eräät keksinnön mukaiset yhdisteet näyttävät alentavan valtimopainetta ainakin 15 %, annettavan annoksen ollessa alle 1/10 LD^-annoksesta. Tätä 15 % kynnysarvoa pi-20 detään yleensä todisteena huomattavasta kardiovaskulaa- risesta aktiivisuudesta.

Taulukossa I on esitetty tästä testistä saadut tulokset käytettäessä eräitä kaavan (I) mukaisia edullisia yhdisteitä: 76337 10

TAULUKKO I

Yhdiste esi- Annos (i.p.) Verenpaineen ale- merkistä No mg/kg nemisprosentti 1 30 20 5 11 30 17 13 30 46 15 25 50 16 30 37 27 30 47 10 29 30 39 30 30 21 35 20 19 36 30 32 38 30 34 15 41 3 37 51 30 36 53 40 24 55 10 33 Nämä tulokset vahvistettiin renaalisesti hypertensiivi-20 silla koirilla, jolloin havaitaan systolisen verenpai neen huomattavat alenemiset annostettaessa keksinnön mukaisia yhdisteitä oraalisesti.

Edellä esitetyssä testissä saadut tulokset, käytettäessä keksinnön mukaisia edullisia yhdisteitä, on esitetty Taulukossa II: 1 1 763 37

TAULUKKO II

Yhdiste esi- Annos (os) Verenpaineen alenemis- merkistä No mg/kg prosentti 15 10 32 5 115 (kestää noin 5 tuntia) 16 10 21 27 3 40 (kestää 5-7 tuntia) 35 1 38 (kestää noin 7 10 tuntia) 36 10 36 0,3 19 41 0,1 33 51 3 35 15 53 3 53 55 3 26

Yleensä keksinnön mukaiset yhdisteet omaavat vaikutuksen pidentyneen keston.

Itse asiassa edullisilla yhdisteillä on eläimillä antihyper- 20 tensiivisen vaikutuksen kesto 8-12 tuntiin tai kauemmin, annosten ollessa yhtä suuria kuin EDcn-arvo.

b 0 76337 12

Seuraavien esimerkkien tarkoituksena on edelleen kuvata tätä keksintöä, mutta niiden ei kuitenkaan sellaisenaan voida katsoa rajoittavan keksinnön piiriä.

ESIMERKKI 1 5 4,7-dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-(2-nitrofenyyli)-lH-pyrat- solo ^3,4-b] pyridiini-5-karboksyylihappo-metyylies teri

Liuokseen, jossa on 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiinia (4,89 g; 0,044 moolia) etanolissa (40 ml), lisätään metyyli-2--(2-nitrobentsylideeni)asetasetaattia (10 g; 0,040 moolia). 10 Seosta keitetään palautusjäähdyttäen noin 5 tuntia, sen jälkeen liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan etyylieetteriin ja otetaan talteen suodattamalla. Sul.p. 216-220°C.

ESIMERKKI 2 15 4,7-dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-(2-nitrofenyyli)-lH-pyrat- solo f3,4-b jpyridiini-5-karboksyylihappo-etyyliesteri

Reaktio suoritetaan pääasiassa edellä esitetyllä tavalla käyttäen etyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaattia ja seosta keitetään palautus jäähdyttäen noin 3 tuntia. Sul.p. 20 19 4-19 8°C.

ESIMERKKI 3 4,7-dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-(3-nitrofenyyli)-lH-pyrat-solo |3,4-b pyridiini-5-karboksyylihappo-metyyliesteri 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiini (3,33 g\ 0,030 moolia) 25 liuotetaan etanoliin (35 ml) ja tähän lisätään metyyli--2-(3-nitrobentsylideeni)asetasetaattia (6,75 g; 0,27 moolia). Seosta keitetään palautus jäähdyttäen noin 5 tuntia, jonka jälkeen liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan metyleenikloridiin, pestään - 2 % kloorivetyhapolla, sitten kyllästetyllä, vesipitoi sella natriumbikarbonaatilla, orgaaninen faasi kuivataan 13 76337 natriumsulfaatilla, jonka jälkeen liuotin haihdutetaan. Jäännös liuotetaan etyylieetteriin, josta otsikossa mainittu yhdiste otetaan talteen suodattamalla. Sul.p.

16 3-166°C.

5 ESIMERKKI 4 4,7-dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-fenyyli-lH-pyratsolo- ' 3,4-b(pyridiini-5-karboksyylihappo-etyyliesteri, hydro- kloridi

Liuokseen, jossa on 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiini (0,050 10 ml) etanolissa (40 ml), lisätään etyyli-2-bentsylideeni- asetasetaattia (50 mmoolia). Seosta keitetään palautus-jäähdyttäen noin 3 tuntia. Liuotin haihdutetaan ja jäännös liuotetaan etyylieetteriin, otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan. Sen jälkeen saatu kiinteä aine liuo-15 tetaan metanoliin ja lisätään seos, jossa on kloorivety- happoa/metanolia (45 mmoolia HC1); otsikossa mainittu tuote saostetaan lisäämällä etyylieetteriä. Sul.p. 232°C (haj.).

ESIMERKKI 5 20 4,7-dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-(2-metyylifenyyli)-lH- -pyratsolo j_3,4-bl pyridiini-5-karboksyylihappo-etyyli-esteri, hydrokloridi

Liuokseen, jossa on 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiinia (0,050 moolia) etanolissa (50 ml), lisätään etyyli-2-(2-25 metyylibentsylideeni)asetasetaattia (0,050 moolia). Seos ta keitetään palautus jäähdyttäen noin 90 minuuttia, seos jäähdytetään huoneen lämpötilaan, jonka jälkeen lisätään vielä etyyli-2-(2-metyylibentsylideeni)asetasetaattia (0,050 moolia) ja lämpötila nostetaan uudestaan palautus-30 lämpötilaan ja kuumentamista jatketaan vielä 90 minuutin ajan. Sen jälkeen reaktioseos jäähdytetään, liuotin haihdutetaan ja jäännös liuotetaan etyylieetteriin, tuote otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan. Kiinteä aine 76337 14 käsitellään edellä esitetyssä esimerkissä kuvatulla tavalla, jonka jälkeen saadaan otsikossa mainittu tuote. Sul.p. 235°C (haj.).

Työskentelemällä pääasiassa edellä esitetyllä tavalla, o saadaan seuraavat yhdisteet, lähtemällä sopivista reagens- seista.

ESIMERKKI 6 4.7- dihydro-1,3,6-trImetyyli-4-(3-metoksifenyyli)-1H--pyratsolo ,4-bj pyridiini-5-karboksyy lihappo-etyy li-

10 esteri, hydrokloridi; sul.p. 200-202°C

Lähtöaineet: 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiini ja etyyli--2-(3-metoksibentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 7 4.7- dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-(2-kloorifenyyli)-lH- 15 -pyratsolo li.t-b] pyridiini-5-karboksyylihappo-etyyli-

esteri, hydrokloridi^ sul.p. 240-242°C

Lähtöaineet: 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiini ja etyyli-- 2-(2-klooribentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 8 20 4,7-dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-(3-nitrofenyyli)-1H- -pyratsolo ,4-b|pyridiini-5-karboksyylihappo-etyyli-esteri, hydrokloridi·, sul.p, 237°C (haj.) Lähtöaineet: 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiini ja etyyli--2-(3-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

25 ESIMERKKI 9

4.7- dihydro-l,3,6-trimetyyli-4-(2-nitrotenyyli)-1H--pyratsolo lä.-bj pyridiini-5-karboksyylihappo-2-metoksi-etyyliesteri, hydrokloridi·, sul.p. 170-174°C

15 7 6 3 3 7 Lähtöaineet: 1,3-dimetyyli-5-pyratsoliamiini ja 2-metok-sietyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 10 1-etyy1i-4,7-dihydro-3,6-dimetyyli-4-(2-nitrofenyyli)-1H-5 -pyratsolo\3,4-b*3pyridiini-5-karboksyylihappo-metyyl ies

teri, hydrokloridi ; sul.p. 230-232°C

Lähtöaineet: 3-etyyli-1-metyyli-5-pyratsoliamiini ja metyyli -2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti. Keittäminen pa 1autusjäähdyttäen suoritetaan mieluimmin typpiatmosfää-10 rissa.

ESIMERKKI 11 4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-3-fenyyli-4-(2-metyy1ifenyyli)--1H-pyratsolo^3,4-b]pyridiini-5-karboksyyli happo-etyyli-esteri, hydrokloridi 15 Liuokseen, jossa on 1-metyyli-3-fenyyli-5-pyratsoliamiinia (0,050 moolia) etanolissa (50 ml), lisätään etyyli-2-(2--metyylibentsylideeni)asetasetaattia (0,050 moolia), ja seosta keitetään pa 1autusjäähdyttäen 90 minuuttia. Sen jälkeen seos jäähdytetään huoneen lämpötilaan, siihen lisä-20 tään vielä etyy1i-2-(2-metyy1ibentsy1ideeni) as eta setäättia (0,050 moolia), ja seosta keitetään palautusjäähdyttäen vielä 90 minuuttia. Sen jälkeen reaktioseos jäähdytetään, liuotin haihdutetaan ja jäännös liuotetaan etyylieetteriin , sakka otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan. Tuote 25 liuotetaan metanoliin ja siihen lisätään kloorivetyhapon ja metanolin seos (45 mmoolia HC1 ) . Otsikossa mainittu tuote seostetaan lisäämällä etyylieetteriä. Sul.p. 187°C (haj . ).

Työskentelemällä pääasiassa edellä olevassa esimerkissä 30 kuvatun menetelmän mukaisesti, saadaan seuraavat yhdis teet lähdettäessä sopivista reagensseista : 16 ESIMERKKI 12 76337

4.7- dihydro-1,6-dimetyyli-3-fenyyli-4-(3-metoksifenyyli)--1H-pyratsolo][3,4-b"3 pyri diini-5-karboksyyli happo-etyyli-esteri, hydrokloridi; sul.p. 200-204°C

5 Lähtöaineet: 1-metyyli-3-fenyyli-5-pyratsoliamiini ja etyyli-2-(3-metoksibentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 13 4.7- dihydro-1 ,6-dimetyyli-3-fenyyli-4-(2-nitrofenyyli)--1H-pyratsolojj”3,4-b]pyridiini-5-karboksyyl i happo-etyyl i - 10 esteri, hydrokloridi ; sul.p. 175°C (haj.) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-fenyyli-5-pyratsoliamiini ja etyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 14 4.7- dihydro-1,6-dimetyyli-3-fenyyli-4-(2-nitrofenyyli)- 15 -1H-pyratsolo^3,4-b3pyridiini-5-karboksyyl ihappo-isopro- pyyli esteri, hydroklori di; sul.p. 162-167°C (haj.) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-fenyy1i-5-pyratso1iami ini ja isopropyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 15 20 4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-3-fenyy1i-4 -(3-ni trofenyy1i)--1H-pyratsolo \3.4-b] pyridiini-5-karboksyylihappo-etyyli-esteri, hydrokloridi; sul.p. 212-215°C (haj.) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-fenyy1i-5-pyratso1iamiini ja etyyli-2-(3-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

17 ESIMERKKI 16 76337

4.7- dihydro-1,6-d imetyy1i-3-fenyyli-4-(2-nitrofenyyli)--1H-pyratsolo\3,4-b3pyridiini-5-karboksyylihappo-2-me-toksietyyliesteri, hydrokloridl ; sul .p. 167-174°C

5 Lähtöaineet: 1-metyyli-3-fenyyli-5-pyratsoliamiini ja 2-metoksietyyl i-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 17 4.7- dihydro-1,6-dimetyyli-4-(2,5-dimetyylifenyyli)-3-fe-nyyli-1H-pyratsolo^3,4-b3 pyridiini-5-karboksyylihappo-

10 etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 184-189°C

Lähdetään ekvimolaari sista määristä 1-metyyli-3-fenyyli--5-pyratsoliamiinia ja etyyli-2-(2,5-dimetyylibentsyli-deeni)asetasetaattia. Raakatuote liuotetaan etyylieette-riin, pestään 2 % H^SO^rllä, vedellä, jonka jälkeen 5 % 15 NaHCO^lla, kunnes emäliuokset ovat neutraaleja. Kuivataan N a 2 s :11ä, jonka jälkeen otsikossa mainitun yhdisteen hydrokloridi saadaan reaktiolla HC1/etyylieetteri n kanssa. Kiteytetään isopropanoli/etyylieetteristä.

ESIMERKKI 18 18 76337 4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-4-(2-nitrofenyyli)-3-fenyyli-

- ΙΗ-py rats olo ^_3,4-b]pyridiini-5-karboksyylihappo-me tyyli-esteri, hydrokloridi; sul.p. 145-148°C

5 Seosta, jossa on 1-metyyli-3-fenyyli-5-pyratsoliamiinia (3,46 g; 0,02 moolia), 2-nitrobentsaldehydiä (3,02 g; 0,02 moolia), ja metyyliasetasetaattia (2,32 gi 0,02 moolia), keitetään palautus jäähdyttäen isopropanolissa (30 ml) typpiatmosfäärissä ja pimeässä. Keittämistä palautus-10 jäähdyttäen jatketaan noin 12 tunnin ajan. Jäähdytetään huoneen lämpötilaan, jonka jälkeen liuotin poistetaan, kuiva jäännös liuotetaan etyylieetteriin, pestään 2 % I^SO^illä, vedellä, jonka jälkeen NaHCOgilla. Kuivataan MgSO^rllä, jonka jälkeen liuotin poistetaan ja jäännös 15 liuotetaan metanoliin ja suola muodostetaan kuten taval lista käyttäen 20 % HCl/etanoli-seosta.

ESIMERKKI 19 4.7- dihydro-6-metyyli-4-(2-nitrofenyyli)-3-fenyyli-lH- 20 -pyratsolo j*3,4-bJ pyridiini-5-karboksyylihappo-etyyli- esteri; sul.p. 185-187°C (metanoli) Lähdetään 3-fenyyli-5-(lH)pyratsoliamiinista ja etyyli--2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatista. Keittäminen palautus jäähdyttäen suoritetaan typpiatmosfäärissä ja 25 pimeässä.

ESIMERKKI 20 4.7- dihydro-4-(2,5-dimetyylifenyyli)-6-metyyli-3-fenyy-li-lH-pyratsolo l3,*-b] pyridiini-5-karboksyylihappo-etyy-liesteri; sul.p. 270-273°C (etanoli) i0 Lähtöaineet: 3-fenyyli-5-(lH)pyratsoliamiini ja etyyli-2- -(2,5-dimetyylibentsylideeni)asetasetaatti.

19 ESIMERKKI 21 76337 4)7-dihydro-6-metyyli-l,3-difenyyli-4-(3-nitrofenyyli)-lH--pyratsolo ^3,4-b1[pyridiini-5-karboksyy lihappo-me tyylies-teri 5 Metyyli-2-(3-nitrobentsylideeni)asetasetaatti lisätään liuokseen, jossa on 1,3-difenyyli-5-pyratsoliamiinia (0,010 moolia) etanolissa (16 ml), ja seosta keitetään palautus jäähdyttäen 90 minuuttia typpiatmosfäärissä. Jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja sen jälkeen liuotin haih-10 dutetaan alennetussa paineessa, jäännös liuotetaan etyyli- eetteriin, liukenemattomat aineet hylätään ja liuotin haihdutetaan. Kiteyttämällä metanolista saadaan otsikossa mainittu tuote. Sul.p. 186-189°C.

ESIMERKKI 22 15 4,7-dihydro-6-metyyli-3-fenyyli-4-(3-nitrofenyyli)-lH- -pyratsolo|j3,4-b^pyridiini-5-karboksyylihappo-metyyli-esteri 3-fenyyli-S-pyratsoliamiini (5 mmoolia) liuotetaan etanoliin (12 ml), ja tähän lisätään metyyli-2-(3-nitro-20 bentsylideeni)asetasetaatti, ja seosta keitetään palautus jäähdy ttäen 3 tuntia typpiatmosfäärissä. Sen jälkeen reaktioseos jäähdytetään huoneen lämpötilaan, liuotin poistetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan metyleenikloridiin. Tuote puhdistetaan piihappogeelillä 25 pylväskromatografisesti, eluointiin käytetään metyleeni- kloridi/metanoli-seosta, suhteessa 99:1. Sen jälkeen liuotin haihdutetaan kerätyistä fraktioista ja jäännös kiteytetään etyyliasetaatti/n-heksaani-seoksesta, saadaan otsikossa mainittu tuote. Sul.p. 240-241°C.

ESIMERKKI 23 20 76337 3-etyyli-4, 7-di hydro-1,6-dimetyyli-4-(2-ni trofenyyli)-1 H--pyratsolo|3,4-bjpyridiini-5-karboksyyli happo-etyyl i esteri, hydrokloridi; sul.p. 243-247°C (haj .) (etanoli) 5 Lähtöaineet: 3-etyyli-i-metyy1i-5-pyratsoliamiini ja etyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 24 3-etyyli-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-4-(2-nitrofenyyl i)-1 H--pyratsolo ^3,4-bjpyridiini-5-karboksyylihappo-2-metoksi-10 etyyliesteri; sul.p. 172-176°C (etyylieetteri) Lähtöaineet: 3-etyy1i-1-metyy1i-5-pyratsoliamiini ja (2-metoksietyyli)-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 25 4,7-dihydro-1,6-di metyyli-4-(3-nitrofenyyli)-3-propyy1i-15 -1H-pyratsol o^3,4-b]pyri di i ni-5-karboksyyli happo-metyy-liesteri, hydrokloridi; sul.p. 240°C (metanoli) Lähtöaineet: 3-propyyli-1-metyyli-5-pyratsoliamiini ja metyyli-2-(3-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 26 20 4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-4-(2-nitrofenyyli)-3-propyyli-

-1H-pyratsolo]3,4-b][pyridiini-5-karboksyylihappo-metyy-liesteri; sul.p. 175-186°C

Lähtöaineet: 3-propyyli-1-metyyli-5-pyratsoliamiini ja metyyli-2-(2-n itrobentsylideeni)asetasetaatti.

76337 21

Työskentelemällä pääasiassa esimerkissä 4 esitetyn menetelmän mukaisesti saadaan seuraavat yhdisteet: ESIMERKKI 27 4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli)-4-(2-nitro- 5 fenyyli)-lH-pyratsolojj3,4-bj pyridiini-5-karboksyylihappo- -etyyliesteri, hydrokloridi* sul.p. 218°C (haj.) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoli-amiini ja etyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 28 10 4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli)-4-(2-nitro- fenyyli)-lh-pyratsolo^3,4-bjpyridiini-5-karboksyylihappo--(1-metyylietyyli)-esteri, hydrokloridi; sul.p. 229-231°C (haj.) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoli-15 amiini ja (1-metyylietyyli)-2-(2-nitrobentsylideeni)aset- asetaatti.

ESIMERKKI 29 4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli)-4-(2-nitro-fenyy li )-lH-pyratsolo jj3,4-b] pyridiini-5-karboksyylihappo-

20 -2-metoksietyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 119-124°C

(haj.) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoli-amiini ja 2-metoksietyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)aset-asetaatti.

25 ESIMERKKI 30

4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli)-4-(2-metyyli f enyy li )-lH-py rats olo |_3,4-b[ pyridiini-5-karboksyylihappo-etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 225-231°C

22 76337 Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoli-amiini ja etyyli-2-(2-metyylibentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 31 L,7-dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli )-4-(3-tri-5 fluorimetyyli)-lH-pyratsolo^3,4-b^pyridiini-5-karboksyy- lihappo-etyyliesteri , hydrokloridi·, sul.p. 255-260°C (haj .) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoli-amiini ja etyyli-2-(3-trifluorimetyylibentsylideeni)asetasetaatti .

10 ESIMERKKI 32

4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli)-4-nitrofe-nyyli-lH-pyratsolo jj3,4-b|pyridiini-5-karboksyylihappo-2--^(fenyylimetyyli)metyyliaminojetyyliesteri, dihydroklo-ridi; sul.p. 220-228°C

15 Seosta, jossa on 3-nitrobentsaldehydiä (3,02 g; 0,02 moo lia) , asetetikkahappo-2- ^(fenyylimetyyli)metyyliaminojetyy-liesteriä (5,0 g; 0,02 moolia), 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli )-5-pyratsoliamiinia propanolissa (40 ml), keitetään palautusjäähdyttäen typpiatmosfäärissä, pimeässä noin 8 20 tunnin ajan.

Raakatuote käsitellään pääasiassa esimerkissä 22 esitetyllä tavalla, mutta käyttäen eluointiliuoksena n-heksaani--etanoli-seosta, suhteessa 8:2, välähdyskromatografiassa.

ESIMERKKI 33 25 4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-4-(2,5-dimetyylifenyyli)-3-(1-

-metyylietyyli)-lH-pyratsο1ο^3,4-bjpyridiini-5-karboksyyli-happo-etyyliesteri, hydrokloridi\ sul.p. 204-211°C

Lähtöaineet: 3-(1-metyylietyyli)-1-metyyli-5-pyratsoli-emiini ja etyyli-2-(2,5-dimetyylibentsylideeni)asetasetaatti.

23 ESIMERKKI 34 76337 4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli )-4-(1-naft-yyli)-lH-pyratsolo jj,4-bJpyridiini-5-karboksyylihappo--metyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 239-241°C (metanoli) 5 Lähdetään ekvimolaarisista määristä 3-(1-metyylietyyli)- -1-metyyli-5-pyratsoliamiinia ja metyyli-2-(1-naftylideeni)-asetasetaattia.

Raakatuote liuotetaan etyyliasetaattiin, pestään peräkkäin 2 % i^SO^illä ja vedellä, kuivataan NajSO^illä. Liuotetaan 10 etyylieetteriin ja suola muodostetaan johtamalla liuokseen kloorivetyä.

ESIMERKKI 3S

4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli )-4-(2-nitro-fenyyli)-lH-pyratsolo ^3,4-lT[pyridiini-5-karboksyylihappo-

15 -metyyliesteri, hydrokloridi\ sul.p. 222-228°C

Lähdetään 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoliamii-nista (2,79 g', 0,02 moolia), 2-nitrobentsaldehydistä (3,Ö2 gi 0,02 moolia) ja metyyliasetasetaatista (2,32 g; 0,02 moolia) propanolissa (30 ml). Seosta keitetään palautus-20 jäähdyttäen noin 8 tuntia typpiatmosfäärissä ja pimeässä, jonka jälkeen työskentelyä jatketaan tavalliseen tapaan.

ESIMERKKI 36 4.7- dihydro-l ,6-dime tyy li-3- (1-metyy lie tyy li)-4- |j>- (tri-fluorimetyyli)fenyyli[-lH-pyratsolo ^3,4-b|pyridiini-5- 25 -karboksyylihappo-etyyliesteri, hydrokloridij sul.p.

19 7-199°C (isopropanoli/etyylieetteri) Lähdetään ekvimolaarisista määristä 1-metyyli-3-(1-metyy-lietyyli)-5-pyratsoliamiinia ja etyyli-2 ^(2-trifluorimetyyli )bentsylideeni|asetasetaattia.

24 ESIMERKKI 37 76337 4-(2-fluorifenyyli)-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-3-(1-metyy-lietyy li)-lH-pyratsolo\j3,4-b] pyridiini-5-karboksyylihappo--etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 210-217°C (haj.) 5 Lähdetään 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoliamii- nista (2,78 g; 0,02 moolia), 2-fluoribentsaldehydistä (2,48 g; 0,02 moolia) ja etyyliasetasetaatista (2,6 g; 0,02 moolia) isopropanolissa (30 ml). Seosta keitetään palautus jäähdyttäen noin 8 tuntia. Laitteisto suojataan 10 ilmalta ja valolta kuten tavallisesti eikä työskentely eroa edellä esitetyistä menetelmistä.

ESIMERKKI 38

4-pentafluorifenyyli-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-3-(1-metyy lietyyli)-lH-pyratsolo ^3,4-b]pyridiini-5-karboksyyli-15 happo-etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 219-222°C

Lähdetään ekvimolaarisista määristä 1-metyyli-3-(1-metyy-lietyyli)-5-pyratsoliamiinia ja etyyli-2-(pentafluori-bentsylideeni)asetasetaattia.

ESIMERKKI 39 20 4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-3-(l-metyylietyyli)-4-(3-nitro-

fenyyli)-lH-pyratsolo ^3,4-b]pyridiini-5-karboksyylihappo--metyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 248-250°C

Lähdetään ekvimolaarisista määristä 1-metyyli-3-(1-metyy-lietyyli)-5-pyratsoliamiinia ja metyyli-2-( 3-nitrobents-25 ylideeni)asetasetaattia. Seosta keitetään palautusjäähdyt täen etanolissa noin 6 tuntia, uutetaan etyyliasetasetaa-tilla ja työskentelyä jatketaan tavalliseen tapaan.

ESIMERKKI 40 4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-3-(1-metyylietyyli)-4-(3-nitro-30 fenyyli)-lH-pyratsolo ,4-b|pyridiini-5-karboksyylihappo- 25 76337 -etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 249-253°C (metanoli) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoli-amiini (0,02 moolia), 3-nitrobentsaldehydi (0,02 moolia) ja etyyliasetasetaatti (0,02 moolia).

5 ESIMERKKI 41 4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-3-(2-metyylipropyyli)-4-(2-nit-rofenyyli )-lH-pyratsolo 1^3,4-b|pyridiini-5-karboksyylihappo--metyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 160-167°C (isopropa-noli/etyylieetteri) 10 1-metyyli-3-(2-metyylipropyyli)-5-pyratsoliamiinia (0,015 moolia) ja metyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaattia (0,015 moolia) absoluuttisessa etanolissa keitetään palautus jäähdy ttäen noin 24 tuntia. Sen jälkeen liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin ja 15 saatetaan reagoimaan molaarisen ekvivalentin kanssa 15 % HCl/etyylieetteriä. Pestään vedellä ja kuivataan, jonka jälkeen eetterifaasi haihdutetaan tyhjössä ja jäljelle jäävä raakatuote puhdistetaan välähdyskromatografisesti ja suola muodostetaan tavalliseen tapaan.

20 ESIMERKKI 42

4.7- dihydro-l,5-dimetyyli-3-(2-metyylipropyyli)-4-(3-nit-rofenyyli )-lH-py rats olo ,4-b] pyridiini-5-karboksyy lihappo--metyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 168-172°C

Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(2-metyylipropyyli)-5-pyratsoli-25 amiini ja metyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 43 4.7- dihydro-l,6-dimetyyli-3-(2-metyylipropyyli)-4-(2-nit-rofenyy li)-ΙΗ-py rats olo jj), 4-bJpyridiini-5-karboksyylihappo--2-metoksietyyliesteri, sul.p. 186-189°C (haj.) 30 Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(2-metyylipropyyli)-5-pyratsoli- 76337 26 amiini ja 2-metoksietyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)aset-asetaatti.

ESIMERKKI 44 4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-3-(2-metyylipropyyli)-4-(2-nitro-S fenyylii-lH-pyratsolo]^,4-b]pyridiini-5-karboksyylihappo- -etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 158-161°C (isopropa-noli/etyylieetteri) Lähtöaineet: 1-metyyli-3-(2-metyylipropyyli)-5-pyratsoli-amiini ja etyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

10 ESIMERKKI 45 3-butyyli-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-4-(3-nitrofenyyli)-1H--py rats olo ]_3,4-b^ pyridiini-5-karboksyylihappo-2-metoks i-etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 200°C (haj.) (metanoli/ etyylieetteri) 15 Lähtöaineet: 3-butyyli-l-metyyli-5-pyratsoliamiini ja (2-metoksietyyli)-2-(3-nitrobentsylideeni)asetasetaatti ekvimolaarisissa määrissä isopropanolissa.

ESIMERKKI 46 3-butyyli-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-4-(3-nitrofenyyli)-1Π-20 pyratsolo ^_3,4-bJ pyridiini-5-karboksyylihappo-metyyliesteri , hydrokloridi; sul.p. 215-230°C (metanoli) Lähdetään ekvimolaarisista määristä 3-butyyli-l-metyyli-5-pyratsoliamiinia ja metyyli-2-(3-nitrobentsylideeni)aset-asetaattia isopropanolissa. Keitetään palautus jäähdyttäen 25 noin 8 tuntia, jonka jälkeen reaktioseos käsitellään taval liseen tapaan.

ESIMERKKI 47 3-butyyli-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-4-(2-nitrofenyyli)-1H--py rats olo |j) , 4-bj pyri di ini - 5-k arboksyy lihappo- 2-metoks i- 27 76337 etyyliesteri; sul.p. 131-139°C (etyylieetteri) Lähtöaineet: 3-butyy1i-1-metyy1i-5-pyratsoliamiini ja (2-metoksietyyli)-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti.

ESIMERKKI 48 5 3-butyyli-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-4-(2-nitrofenyyli)--1H-pyratsolo{3,4-b^py rid iini-5-karboksyylihappo-me tyyli esteri, sul.p. 191-201°C (etyylieetteri) Lähtöaineet: 3-butyy1i-1-metyyli-5-pyratso1iamiini ja metyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti ekvimo-10 laarisissa määrissä.

ESIMERKKI 49 4,7-dihydro-1,6-di metyyli-3 - (1,1-d imetyy1ietyyli)-4-(2--nitrofenyyli)-1H-pyratsolo\3,4-lQpyridiin i-5-karboksyyli-happo-metyyliesteri , hydrokloridi; sul.p. 163-1 72°C (haj.) 15 (etanoli/etyylieetteri)

Keitetään palautusjäähdyttäen typpiatmosfäärissä ja öl-jymäinen vapaa emäs puhdistetaan mahdollisesti välähdys-kromatografisesti käyttäen 350 ml piihappogeeliä ja eluoin-tiliuoksena CHC1-j/CH^OH-seosta, suhteessa 95:5, ennen suo-20 lan muodostamista.

ESIMERKKI 50 28 76337 4.7- di hydro-1,6-dimetyyli-3-(1,1-dimetyylietyyli)-4-(2--nitrofenyyl i )-1H-pyratsolo^3 s4-b3pyridi ini-5-karboksyy-1ihappo-2-metoksietyyliesteri, hydroklori di; sul.p.

5 118-160°C (haj.)

Työskennellään esimerkin 49 mukaisesti.

ESIMERKKI 51 4.7- dihydro-1,6-dimetyyli-3-(1,1-dimetyylietyyli)-4-(2--nitrofenyyl i) -1 H-pyratsol ο]^3.4-bJ pyridi i ni-5-karboksyyl i- 10 happo-etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 140-160°C (haj)

Työskennellään esimerkin 49 mukaisesti.

ESIMERKKI 52 4.7- dihydro-1,6-dimetyyli-3-(1,1-dimetyyli etyyl i)-4-(3--nitrofenyyli)-1H-pyratsolo (3,4-b] pyridi ini-5-karboksyy-

15 1ihappo-metyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 230-233wC

(haj.) (isopropanoli)

Raakareaktiotuote liuotetaan etyyliasetaattiin, pestään 2 % HCl:llä, vedellä, kuivataan Na2S0^:llä, liuotetaan isopropanoliin ja suola muodostetaan tavalliseen tapaan.

20 ESIMERKKI 53 3-sykloheksyyli-4,7-dihydro-1,6-dimetyyli-4-(3-nitrofe-nyyli)-1H-pyratsolo^3,4-b3pyridiini-5-karboksyylihappo--metyyliesteri; sul.p. 235-245°C (haj.) (etanoli/metanoli) 76337 29 Lähdetään ekvimolaarisista määristä 3-sykloheksyyli-l--metyyli-5-pyratsoliamiinia ja metyyli-2-(3-nitrobents-ylideeni)asetasetaattia.

ESIMERKKI 54 5 3-sykloheksyyli-4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-4-(2-nitrofe- nyy li )-lH-pyratsolo , 4-bJ pyridiini-5-karboksyylihappo-metyyliesteri, hydrokloridi\ sul.p. 219-228°C (isopropa-noli/etyylieetteri) Lähdetään ekvimolaarisista määristä 3-sykloheksyyli-1-10 -metyyli-5-pyratsoliamiinia ja metyyli-2-(2-nitrobents- ylideeni)asetasetaattia absoluuttisessa etanolissa.

Seosta keitetään palautus jäähdyttäen noin 24 tuntia käyttäen tavanomaisia varotoimenpiteitä (reaktio suoritetaan pimeässä ja typpiatmosfäärissä), liuotin poistetaan ja 15 jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin. Liuos pestään 1 % HClrllä ja vedellä, kuivataan ja haihdutetaan kuiviin. Raakajäännös puhdistetaan välähdyskromatografisesti.

Saatu tuote liuotetaan etyylieetteri/isopropanoli-seok-seen, jonka jälkeen siihen lisätään dikloorivetyä etyy-20 lieetterissä ja saatu kiinteä aine otetaan talteen ja kiteytetään isopropanoli/eetteri-seoksesta.

ESIMERKKI 55

3-sykloheksyyli-4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-4-(2-nitrofe-nyyli)-lH-pyratsolo ^3,4-b]pyridiini-5-karboksyylihappo-25 -2-metoksietyyliesteri, sul.p. 203-207°C

Lähtöaineet: 3-sykloheksyyli-l-metyyli-5-pyratsoliamiini ja 2-metoksietyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti noin ekvimolaarisissa määrissä.

ESIMERKKI 56 30 3-sykloheksyyli-4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-4-(2-nitro- 30 ^633 7 fenyyli)-lH-pyratsolo,4-b]pyridiini-5-karboksyylihappo--etyyliesteri, hydrokloridi; sul.p. 160-165°C (haj.) Lähtöaineet: 3-sykloheksyyli-l-metyyli-5-pyratsoliamiini ja 2-metyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)asetasetaatti noin S ekvimolaarisissa määrissä.

Työskennellään tavalliseen tapaan.

ESIMERKKI 57 4,7-dihydro-l,6-dimetyyli-3-fenyyli-4-(3-nitrofenyyli)--ΙΗ-pyratsolo j~3,4-b] pyridiini-5-karboksyylihappo-etyy li-10 esteri, hydrokloridin yhdessä astiassa tapahtuva valmis tus ("one pot" preparation)

Seosta, jossa on 3-nitrobentsaldehydi (3,02 g; 0,02 moolia), etyyliasetasetaatti (2,6 0,02 moolia), 1-metyy li- 3-fenyyli-5-pyratsoliamiini (3,46 g^ 0,02 moolia) ab-15 soluuttisessa etanolissa (30 ml), keitetään palautusjääh dyttäen typpiatmosfäärissä ja pimeässä. Noin 5 tunnin kuluttua seos jäähdytetään 0°C:een ja liukenemattomat aineosat kerätään suodattamalla ja hylätään. Suodos konsentroidaan alennetussa paineessa, jäännös liuotetaan etyy-20 lieetteriin ja otsikossa mainittu tuote saostetaan lisää mällä kloorivety/etyylieetteriä. Talteenotettu kiinteä aine voidaan edelleen puhdistaa muodostamalla sen suspensio veteen, säätämällä pH alkaliseksi NaHCO^lla, uuttamalla etyylieetterillä ja saostamalla kloorivety/eette-25 rillä. Sul.p. 212-215°C.

ESIMERKKI 58 1-me tyyli-3-(1-metyylietyyli)-5(lH)-pyratsoliamiinin valmistus 4-metyyli-3-okso-pentaaninitriili (39,58 0,356 moolia) liuotetaan jääetikkaan (400 ml) ja metyylihydratsiinia (18,05 0,382 moolia) lisätään 15-20° C:ssa.

31 76337

Reaktioseosta kuumennetaan 70-75°C:ssa typpiatmosfäärissä noin 5 tuntia. Sen jälkeen seos jäähdytetään ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan veteen (200 ml) ja pH säädetään noin yhdeksään.

5 Uuutetaan metyleenikloridilla, jonka jälkeen kuivatun or

gaanisen faasin liuotin poistetaan. Jäännös liuotetaan etyylieetteriin ja otetaan talteen suodattamalla. Sul.p. 115-118°C

ESIMERKKI 59 10 N-bentsyyli-l,3-dimetyyli-5(lH)-pyratsoliamiinin val mistus

Seosta, jossa on 1,3-dimetyy li-5 (lii)-pyratsoliamiinia (1 mmooli) ja bentsyylikloridia (2 mmoolia) metyleeni-kloridissa (10 ml), kuumennetaan trietyyliamiinin (1 ml) 15 läsnäollessa palautusjäähdyttäen noin 6 tuntia. Sen jäl keen reaktioseos jäähdytetään, pestään vedellä ja orgaaninen liuotin haihdutetaan kuiviin. Otsikossa mainittu yhdiste kiteytetään etyylieetteri/petrolieetteri-seok-sesta. Sul.p. 95-97°C.

Claims

32 76337

1. Menetelmä farmakologisesti aktiivisen, kaavan (I) mukaisen 4,7-dihydropyratsolo|j3,4-b][pyridiini-5-karbok-syylihappojohdannaisen valmistamiseksi R2 R1n. ^k^^cooR3 { li T \ N NH^^CH3 ! R 5 jossa R tarkoittaa vetyä, (C^-Cg)alkyy!iä tai fenyyliä; R tarkoittaa (C^-Cg)alkyyliä, (C3~C^)sykloalkyyliä tai fenyyliä; R tarkoittaa fenyyliä, joka mahdollisesti on substi-10 tuoitu 1 tai 2 substituenti11 a , jotka ovat (C^-C^)alkyyli , (Cj-C^Jalkoksi, halo(C^-C4)alkyyli, halogeeni, nitro tai tri f1uorimetyyli , tai R2 tarkoittaa pentaf1uorifenyyliä tai o(- tai /3-naftyyliä; R3 tarkoittaa (C1-Cg)alkyyliä, (-C^)a 1koksi(C^-Cg)a 1kyy-15 liä tai (fenyylimetyyli)(metyyli) aminoetyy1iä , ja sen fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että kaavan (II) mukainen 5-aminopyratsolijohdannainen 33 76337 ΊΤΙ (ιι) ι 2 R jossa R ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan a) ekvimolaari sen määrän tai pienen ylimäärän kanssa kaavan (III) mukaista o(,^3-tyydyttämätöntä ketoesteriä R1 I^^COOR2 | (III) oÄh3 5 jossa substituentit tarkoittavat samaa kuin edellä, iner-tissä orgaanisessa liuotti messa; b) vaihtoehtoisesti kaavan (II) mukainen 5-aminopyrat-soli saatetaan noin ekvimolaarisessa määrässä reagoimaan kaavan R1CH0 mukaisen aldehydin ja kaavan CH^COCH^COOR2 10 mukaisen asetetikkaesterin kanssa, joissa kaavoissa substituentit tarkoittavat samaa kuin edellä. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä 4,7-dihydro--1,6-dimetyyli-3-(1-metyy1i etyyli)-4-(2-ni trofenyyli) -1 H --pyratsolo[3,4-b]pyridi ini-5-karboksyyl ihappoetyyli esteri n tai 15 -metyyliesterin tai näiden fysiologisesti hyväksyttävän 2 suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 1-me-tyyli-3-(1-metyylietyyli)-5-pyratsoloamiini saatetaan reagoimaan etyyli- tai metyyli-2-(2-nitrobentsylideeni)aset-asetaatin kanssa. 34 76337

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä 4,7-dihydro- -1,6-dimetyyli-3-(2-metyylipropyyli)-4-(2-nitrofenyyli)-1H--pyratsolo^3,4-b3pyridiini-5-karboksyy1ihappometyyliesterin tai sen fysiologisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, 5 tunnettu siitä, että 1-metyy1i-3-(2-metyylipropyyli)--5-pyratsoliamiini saatetaan reagoimaan metyyli-2-(2-nitro-bentsylideeni)asetasetaatin kanssa keittäen palautusjäähdyttäen absoluuttisessa etanolissa. 10 1. Förfarande för framstä11 ning av farmako1ogiskt aktiva 4,7-dihydropyrazolo^3,4-bjpyridin-5-karboxylsyraderivat med formeln (I) R2 R1s. /k^COOR3 li f 1 (n ^ w ^NH CH3 l R i vi1 ken R betecknar väte, (C^-Cg)alkyl eller fenyl;

15 R^ betecknar (C^-Cg)alkyl , (Cg-C^)cykloalkyl eller fenyl; 2 R betecknar fenyl, vilken eventuellt är substituerad med 1 eller 2 substituenter, vilka är (C^-C^)alkyl , (C^-C^)-alkoxi, halo(C^-C4)alkyl, halogen, nitro eller trifluor-metyl, eller R2 betecknar pentaf1uorfenyl eller <K- eller 2n /3-naftyl ; betecknar (C^-Cg)alkyl, (-C^)a 1koxi(C^-Cg)aikyl eller 'fenylmetyl)(metyl)ami noetyl, 35 7 6 3 3 7 och fysiologiskt godtagbara salter därav, kanne-t e c k n a t därav, att 5-aminopyrazolderivat med formeln (II) R1 "Ί-1 Π (ii) x N //^sNH9 I l R i vilken R och R^ betecknar detsamma som ovan, omsättes 5 med a) en ekvimolarisk mängd eller en liten överskott av okj^J-omattad ketoester med formeln (III) R2 L vCOOR3 Y (III) i vilken substituenterna betecknar detsamma som ovan, i en inert lcisning; 10 b) alternativt 5-aminopyrazol med formeln (II) omsättes ungefär i en ekvimolarisk mängd med en aldehyd med formeln 2 3 R CHO och med en acetättiksester med formeln CH^COCH^COOR , i vilka formlerna substituenterna betecknar detsamma som ovan .

2. Fbrfarande enligt patentkravet 1 för framstäl1ning av 4,7-dihydro-1,6-dimetyl-3-(1-metyletyl)-4-(2-nitrofenyl)--1H-pyrazolo\3,4-b3pyridin-5-karboxylsyraetylester eller -metylester eller deras fysiologiskt godtagbara salt, kännetecknat därav, att 1-metyl-3-(1-metyletyl)"