FI75365B - Foerfarande foer framstaellning av monoklonal antikropp till maensklig protymocytantigen medelst deras hybridcellinje. - Google Patents

Claims (2)

1. Förfarande för framställning av en monoklonal antikropp, som 5 a) reagerar med cirka 95 % av människans normala tymocyter, med 5 % av människans normala perifera T-celler, med 10 % av perifera mononukleära E -oeller(B-celler och nollceller) och med 10-20 % av benmärgsceller, b) reagerar med 92 % av obehandlade tymocyter, 10 med 75 % av tymocyter, som pä förhand behandlats med en medelst hybridcellinjen ATCC CRL 8002 framställd monoklonal antikropp och med komplement, men 86 % av tymocyter, som pä förhand behandlats med en medelst hybridcellinjen ATCC CRL 8001 framställd monoklonal antikropp och med komplement, 15 och med 85 % av tymocyter, som pä förhand behandlats med en medelst hybridcellinjen ATCC CRL 8014 framställd monoklonal antikropp och med komplement, c) reagerar med en ytantigen hos T-ALL-leukemiceller, och 20 d) reagerar med cellinjer HSB-2, CEM och MOLT-4, kännetecknat därav, att förfarandet omfattar de följande stegen: man (A) framställer hybridoma ATCC CRL 8022 genom i) immunisering av möss med människans T-ALL-leuke-25 miceller, ii) avlägsning av mjältarna frän nämnda möss och framställning av en mjältsuspension, iii) fusionering av nämnda mjältceller med musmyelo-maceller i närvaro av en fusionskatalysator, 30 iv) utspädning och odling av de fusionerade cellerna i separata brunnar i ett medium, där fria myelomaceller inte växer, v) evaluering av supernatanten i olika brunnar som innehäller ett hybridoma avseende pä närvaro av en anti-35 kropp mot E-rosett-positiva, renade T-celler eller människans tymocyter, II 31 75 36 5 vi) väljning och kloning av hybridoma ATCC CRL 8022, som producerar en antikropp, vilken reagerar med cirka 95 % av människans normala tymocyter, med 5 % av människans normala T-celler, med 10 % av perifera mono- 5 nukleära E -celler (B-celler och nollceller) och med 10-20 % av benmärgsceller, och B) framställer den monoklonala antikroppen genom vii) odling av hybridoma ATCC CRL 8022 i ett lämp-ligt medium, och 10 viii) tillvaratagande av antikroppen frän superna- tanten över nämnda hybridoma.

2. Förfarande för framställning av en monoklonal antikropp, som a) reagerar med cirka 95 % av människans normala 15 tymocyter, med 5 % av människans normala perifera T-celler, med 10 % av perifera mononukleära E celler (B-celler och nollceller) och med 10-20 % av benmärgsceller, b) reagerar med 92 % av obehandlade tymocyter, med 75 % tymocyter, som pä förhand behandlats med en medelst 20 hybridcellinjen ATCC CRL 8002 framställd monoklonal anti kropp och med komplement, med 86 % av tymocyter, som pä förhand behandlats med en medelst hybridcellinjen ATCC CRL 8001 framställd monoklonal antikropp och med komplement, och med 85 % av tymocyter, som pä förhand behandlats med 25 en medelst hybridcellinjen ATCC CRL 8014 framställd monoklonal antikropp och med komplement, c) reagerar med en ytantigen hos T-ALL-leukemi-celler, och d) reagerar med cellinjer HSB-2, CEM och MOLT-4, 30 kännetecknat därav, att förfarandet omfattar de följande stegen: man (A) framställer hybridoma ATCC CRL 8022 genom i) immunisering av möss med människans T-ALL-leuke-miceller, 35 ii) avlägsning av mjältarna frän nämnda möss och framställning av en mjältcellsuspension,