FI73131B - Anvaendning av alkaloidderivat och salter daerav vid framstaellning av diagnostiska preparat. - Google Patents
Anvaendning av alkaloidderivat och salter daerav vid framstaellning av diagnostiska preparat. Download PDFInfo
- Publication number
- FI73131B FI73131B FI830760A FI830760A FI73131B FI 73131 B FI73131 B FI 73131B FI 830760 A FI830760 A FI 830760A FI 830760 A FI830760 A FI 830760A FI 73131 B FI73131 B FI 73131B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- ukrainian
- alkaloids
- alkaloid
- group
- patient
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6564—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms
- C07F9/6581—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms having phosphorus and nitrogen atoms with or without oxygen or sulfur atoms, as ring hetero atoms
- C07F9/6584—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having phosphorus atoms, with or without nitrogen, oxygen, sulfur, selenium or tellurium atoms, as ring hetero atoms having phosphorus and nitrogen atoms with or without oxygen or sulfur atoms, as ring hetero atoms having one phosphorus atom as ring hetero atom
- C07F9/65842—Cyclic amide derivatives of acids of phosphorus, in which one nitrogen atom belongs to the ring
- C07F9/65846—Cyclic amide derivatives of acids of phosphorus, in which one nitrogen atom belongs to the ring the phosphorus atom being part of a six-membered ring which may be condensed with another ring system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/04—X-ray contrast preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
- C07F9/224—Phosphorus triamides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/553—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07F9/564—Three-membered rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
Description
1 73131
Alkaloidijohdannaisten ja niiden suolojen käyttö diagnostisten valmisteiden valmistukseen
Keksinnön kohteena on patenttivaatimuksessa 1 määritel-5 tyjen alkaloidijohdannaisten ja niiden suolojen käyttö diagnostisten valmisteiden, erikoisesti kasvainten diagnostisointiin tarkoitettujen valmisteiden valmistukseen.
Ennestään tunnetaan menetelmä alkaloidijohdannaisten tiofosforihapposuolojen valmistamiseksi, joiden farmakolo-10 ginen sytostaattivaikutus on tunnustettu ja joita vesiliukoisina yhdisteinä on ehdotettu edullisesti käytettäviksi. Vesiliukoisista alkaloidisuoloista tulevat kysymykseen berberiini, sangvinariini sekä keltamon alkaloidien suolat ja bisbentsyyli-isokinoliinialkaloidien suolat, esimerkiksi 15 seuraavien: kuriini, fangokinoliini, tetrandiini, pendulii-ni, talidasiini, aporfiini-bentsyyli-isokinoliini-alkaloi-dit, esim. talikarpiini, ibogo-alkaloidit, esim. 20-hydroksi-voakamidiini, indoli-indoliini-alkaloidit, esim. leorisidii-ni, lurosiini, vinkaleukoblastiini, leurokristiini, tropo-20 Ioni-alkaloidit, esim. kolkisiini, isokinoliini-alkaloidit, esim. liriodeniini, o-metyyliateroliini, oksopurpuriini, ke-lidoniini, protpiini, stylopiini, allokryptopiini, koptsisii-ni, kelerytriini, korysamiini, kelidimeriini, homokelidonii-ni, metoksikelidoniini, kelilulitiini, kelirubiini, narsikla-25 siini, talikarpiini, Pakistaniini, pasistanamiini, pensyl-vaniini, pensylvanamiini, berberiini, sangvinariini, kofeiini, nitydyyni, faraganiini, steroidi-alkaloidit, indoli-iso-kinoliini-alkaloidit, esim. 9-metoksielliptisiini, elliptisiin!, indoli-alkaloidit, esim. reserpiini, kinoliini-indo-30 litsidiini-alkaloidit, esim. kompotesiini, pyroliini-alka-loidit, esim. tatrofaani, pyrolitsidiini-alkaloidit, esim. heliotriini, akrinodi-alkaloidit, esim. melikopiini, akro-mysiini, normelioepidiini, fenantroindolitsidiini-alkaloidit, esim. tyloferiini, tylokrebiini, imidatsoli-alkaloidit, esim. 35 pilokarpiini, kinolitsidiini-alkaloidit, esim. matriini, oksimariini, kryptoleuriini, kinatsoloni-alkaloidit, esim.
2 731 31 febrifugiini, bentsatsepiini-alkaloidit, esim. kefalotaksii-ni, deoksiharringtoniini, homoharringtoniini, harringtoniini ja muut.
Tässä yhteydessä mielenkiintoa on myös tunnetuilla va-5 paassa emäsmuodossa olevien alkaloidien tiofosforijohdannaisilla. Esimerkkejä tällaisista tunnetuista johdannaisista ovat tiofosforihappodi(etyleeni-imido)-N-berberinoli-etyyli-amidi, tiofosforihappotri(N-sangvinarinoli)etyyliamidi sekä keltamon kondensoidun isokinoliinisysteemin käsittävien kaik-10 kien alkaloidien tiofosforihappojohdannaiset.
Nämä tunnetut sytostaattivaikutusta omaavat yhdisteet ovat sellaisenaan niukkaliukoisia veteen, jolloin vesiliuot-timen käytön sijasta varsinkin valmistettaessa injektioliuoksia pidetään edulisempana käyttää samaan tarkoitukseen or-15 gaanisia liuottimia.
Haluttu vesiliukoisuus saavutetaan tehoaineiden tällöin menettämättä sytostaattivaikutustaan tai niiden saamatta ei toivottuja sivuvaikutuksia, muuttamalla tehoaineet farmaseuttisesti hyväksyttävien happojen suoloiksi siten, 20 että kulloinkin kyseessä oleva alkaloidi, joka mahdollisesti itse voi olla karsinostaattisesti vaikuttava, saatetaan reagoimaan toisen karsinostaattisen aineen kanssa, joka kuuluu edullisesti alkylanttien, antimetaboliittien tai antibioottien tai muiden typpi- tai fosforipitoisten orgaanis-25 ten yhdisteiden ryhmään ja saatu tuote mahdollisesti muutetaan farmaseuttisesti käyttökelpoiseksi suolaksi, jolloin poikkeuksena ovat keltamon kondensoidun isokinoliinisysteemin alkaloidien emäkset tiofosforihappotri(N-sangvinaronoli)-etyyliamidi, tiofosforihappodi(etyleeni-imido)-N-herberino-30 lietyyliamidi sekä N,N',N"-trietyleenitiofosforiamidijoh-dannaiset. Alkaloidikomponenteiksi ovat edellä mainitut yhdisteet osoittautuneet erityisen sopiviksi.
Karsinostaattisena aineena reaktiossa käytettäväksi sopivat varsinkin: 3 731 31 CH,-Nil CH.CII.CI ^Η,-,Ιη CH.CB.CI "*9- \_ A"· ° CU.
-/-i I «V- «>“ C-.CN.^T"'-.
CHj-O CH^HjCI CU,— O CH.CK.CI ' ' /\ H«.C —CH, H,c— CH, c txxxixj (XL) 5 fLIV) (LV) o o " .CHt i CH- CHtCH,OC N H — P — N ^ | .(' ')—-CH-OCNH—P—| *
II 1 CH \-_ / ^ Il I
10 on *· '—' a n c /N . / \ H?C— CH, HtC—CH^ «LVI) (LVII) ° ^-CH, n Cl·), 15 ( 7-nh-p-nJ >-?-<| n CHt · CH,—CH. ^ CH, / \ / \
HjC“CHt H,C —CH, (.evin) (cnc > 20 CH^CH. ° ^Η' ^ " *CHC- CH-v M .CH, °V M-p-<! I N-P-W >-P-N | CHt-CHj J, CH, H,c J, ^CH-CH^ J, "cH, / \ / \ / \ H»C — CH, H^C—CHj H^C— CHj (LX) (LV.J) 25 H /ΓΛ n CH,
I N-P-O—( N)—O-P— N
H.C" 1 \—/ I e» * N - N "» > \ / \
HjC—CH, HtC—CH, (LXD) 30 H^C II CH, CH^-CH, || „CH, | K-P-Nj N— P - N | · "cH, C^-CH," ’ CH.
/ \ ' \ H,C—CH, \C— CH, 35 LXIII) (UXJV) 4 731 31 CH,— C ’Vu-ΓΗ^ · Crt- CH — CM> N ’ / \ 5 M’C"CH* ILXV1
/~*\ x7 Y Ύ V
10 \ O^-NiCHaCH2CH2.H20 |vX/^N-iU<T
v o ^ « V-V Ö N s w s ^C7 /N<] C.HjCOWM-B-N^ l>«-5-*<l HfV™° N<i s ^ 15 typpisinappikaasu, syklofosfamidi, triamsikoni, klooriambu-siili, busulfaani, 20 H2C“ CH2 H2C ^ ^H2 Γ-Λ ^/CH2CH2C1
-P- S GHCH —{ V—N
u I I \=/ \
2 N COOH CH0CH_CL
/ \ Z 2 25 H2C -CH2 nitomiini, mannitoli-typpisinappikaasu, ametopteriini, 6-mer-kaptopuriini, 5-fluoriurasiili, sytosiini-arabinosidi, podo-fylliini, aktinomysiini C, aktinomysiini D, mitramysiini, 30 mitomysiini C, adriamysiini, bleomysiini, asparaginaasi, ibentsmetysiini, N (CH-.) -, /T~\ XCH3 I 3 "
H.C-NH-NH-CH.—\)—CO-NH-CH 35 ^CH3 f I
(ch3)2h-J^VA.n(ch3)2 5 73131 ft ΓΗ 0
(C1CH2CH2)2^Y^NH (C1CH2CH2)2Ny^N F NH
3 H
5
Cl /-\ /—W-\
UnAn<] ClCH2CH2-B^Ä^y^J,-CH2CH2Cl 2C1- 10 [>N N^N<] ch2ch2ci V ’ CH7CHC1CH--N Y . HC1 n^n 2 2 \ Y' CH2CH2C1
N
15 Δ
SH ?H 0H
N -NH N jj N ^
^ N^^N ^ H2° hcY^N^ HCK^ N^C02H
20 (XXI) (XXIII) nh2 n<Y\Yf .conh
I T /NY
\ ^ch3 jolloin R=H tai 25 (XDCV) CH3
R
Suolanmuodostus voidaan suorittaa käytännöllisesti katsoen jokaisen farmaseuttisesti hyväksyttävän hapon kans-30 sa, joka on riittävän vesiliukoinen ja siten tuottaa riittävän vesiliukoisia suoloja; taloudellisista syistä käytetään edullisesti kloorivetyhappoa, jolloin saadaan vastaavia hydroklorideja.
6 731 31
Alkaloiditiofosforihappoamidisuolat eivät sytostaatti-vaikutukseltaaan ja siten farmakologiselta vaikutukseltaan eroa vastaavista emäksistä; niitä on kuitenkin olennaisesti paremman vesiliukoisuuden johdosta helpompi annostella tar-5 kasti, eikä niitä käytettäessä esiinny tähän asti välttämättä tarvittavien orgaanisten liuottimien aiheuttamia haittaa-via sivuvaikutuksia.
Alkaloidisuoloina tulevat kysymykseen myös berberiinin, sangvinariinin ja lisäksi keltamoalkaloidien ja muiden alka-10 loidien (ks. myös kuvioiden 1-17 rakennekaavoja) suolat, varsinkin hydrokloridit.
Alkaloidisuolojen reaktio sytostaattisten aineiden kanssa suoritetaan tarkoituksenmukaisesti liuottimessa tai liuo-tinseoksessa korotetussa lämpötilassa; voidaan kuitenkin 15 ensin saattaa alkaloidiemäs reagoimaan tifosforihappoamidin kanssa ja muuttaa sitten reaktiotuote suolaksi. Alkaloidiyh-disteen ja sytostaatin reaktiotuotteen reaktio halutun hapon kanssa suoritetaan tarkoituksenmukaisesti orgaanisessa liuot-timessa, jolloin suolanmuodostuksen jälkeen kyseinen suola 20 saostuu tai uutetaan veden tai vesipitoisen hapon kanssa vesiliuokseen.
Valmistekoostumus, esimerkiksi Chelidonium majus L. -alkaloideista koostuva valmiste perustuu alkaloidien ja al-kyloivien aineiden, kuten tiofosforihappotriatsirididin 25 (ti-TEPA) välisiin reaktiotuotteisiin.
Tässä yhdisteessä on kolme reaktiivista ryhmää, jotka joko liittyvät alkaloidimolekyyleihin tai ovat substituoitu-ja OH- tai NH2-ryhmillä. Tällä tavoin tämän yhdisteen ollessa liittyneenä yhden ainoan puhtaan alkaloidin kanssa, voi 30 syntyä suuri joukko erilaisia reaktiotuotteita. Yksinkertaisempien reaktioiden tutkimiseksi koesarjoissa lisättiin yksittäisiin alkaloideihin tio-TEPA:a, syklofosforamidia ja muita orgaanisia yhdisteitä. Kelidoniinin tapauksessa voitiin ohutkerroskromatografisesti osoittaa vähintään 12
II
7 731 31 reaktiotuotetta. Näiden reaktiotuotteiden tarkan analyysin saamiseksi joitakin niistä eristettiin kromatografisesti ja kiteytettiin.
Näiden komponenttien alkyaineanalyyseistä saadut ke-5 mialliset kaavat on esitetty mahdollisina molekyylirakenne-kaavoina kuvioissa 1-17.
Kun erilaisia alkaloideja sisältävään seokseen lisätään tio-TEPA:a, on mahdollista, että kolmen erilaisen alkaloidin molekyylit liittyvät toisiinsa tio-TEPA-molekyylin 10 välityksellä, jolloin synteesissä syntyy erittäin suuri määrä erilaisia komponentteja. Tähän erittäin kompleksiseen reaktiotuotteiden seokseen sisältyy joitakin, joita voidaan pitää seoksella saadun ainutlaatuisen biologisen aktiviteetin aiheuttajina.
15 Tosiasiassa erotettaessa Chelidonium majus L. -alka- loidiuutteen ja tio-TEPA:n reaktiotuotteita kaksidimensio-naalisella ohutkerroskromatografiällä, saatiin yli 50 UV-valossa fluoresoivaa täplää.
Lisäksi voitiin osoittaa, ettei ukraiinivalmisteessa 20 (reaktio suoritettiin tällöin Chelidonium majus L. -alkaloidien ja tiofosforihappotriatsirididin, tav. nimitys tio-TEPA, kesken) ollut lainkaan tio-TEPA:n vapaita etyleeniryh-miä.
Tämä osoitettiin seuraavasti: 25 1. kemiallisella analyysillä ja 2. siten, että biologisessa kokeessa tio-TEPA:n kuolettava annos on 1 mg/kehonpaino-kg, eikä kuitenkaan valmisteen annos 250 mg/kehonpaino-kg ole myrkyllinen.
Tämän lisäksi valmisteella ei ole vaikutusta leuke-30 mia 1210:een eikä verenkuvaan. Tästä voidaan päätellä, että tio-TEPA:n etyleeniryhmät, joista myös johtuu sen myrkyllisyys, ovat alkaloidien salpaamia.
Kuviot esittävät edellä mainittujen 17 erilaisen yhdisteen kemiallisen rakenteen, joka on saatu täydellisesti 35 analysoimalla joitakin tio-TEPA:n ja syklofosfamidin reaktiosta puhtaiden alkaloidien kanssa saatuja reaktiotuotteita .
8 731 31
Kuvio 1: Kelilutiini + tiofosforihappotriatsirididi {1-kelilutiini, 2-tiofosforihappotriatsirididi, 3-kelilu-tiini + tiofosforihappotriatsirididi).
Laskettu: C 49,44 H 6,36 N 11,53 P 8,49 % 5 Saatu: C 49,41 H 6,34 N 10,65 P 8,67 %
Kuvio 2: Kelerytriini + tiofosforihappotriatsirididi C66H69N6°15PS-
Laskettu: C 63,45 H 5,56 N 6,72 P 2,47 %
Saatu: C 62,69 H 5,37 N 5,37 P 2,35 % 10 Kuvio 3: Koptisiini + tiofosforihappotriatsirididi C24H27N4U5PS·
Laskettu: C 56,02 H 5,28 N 10,88 P 6,01 S 6,23 %
Saatu: C 55,94 H 5,12 N 11,10 P 5,89 S 6,10 %
Kuvio 4: Kelidoniini + tiofosforihappotriatsirididi 15 C66H75N6°18PS’
Laskettu: C 60,82 H 5,79 N 6,44 P 2,37 S 2,45 %
Saatu: C 61,14 H 5,76 N 5,94 P 2,40 S 2,39 %
Kuvio 5: Protopiini + tiofosforihappotriatsirididi C32H55N11°3P4S3’ 20 Laskettu: C 44,59 H 6,43 N 17,87 P 14,37 S 11,16 %
Saatu: C 44,58 H 6,14 N 17,76 C 44,72 H 6,30 N 17,77 P 14,04 S 12,71 % Kuvio 6: Reserpiini + tiofosforihappotriatsirididi C27H92N7PS018'2H20' sp· 120-125°.
25 Laskettu: C 59,95 H 6,70 N 6,79 S 2,22 %
Saatu: C 59,89 H 6,62 N 6,82 S 2,26 %
Kuvio 7: Reserpiini + tiofosforihappotriatsirididi C35H46N3°11PS·
Laskettu: C 56,21 H 6,20 N 5,61 P 4,14 S 4,28 % 30 Saatu: C 56,30 H 6,22 N 4,11 %
Kuvio 8: Kofeiini + tiofosforihappotriatsirididi C^H.^N^PSO. , sp. 110-112°; 215-216°.
304215 6
Laskettu: C 46,68 H 5,48 N 27,22 P 4,01 S 4,15 %
Saatu: C 47,47 H 5,44 N 27,25 P 4,02 S 4,15 % 35 Kuvio 9: Narkotiniini + tiofosforihappotriatsirididi C28H35N4PS07' SP* 225-226°· 9 73131
Laskettu: C 55,80 H 5,85 N 9,29 P 5,13 S 5,29 %
Saatu: C 55,34 H 5,69 N 9,52 P 4,80 S 5,29 %
Kuvio 10: Akonitiini + tiofosforihappotriatsirididi C74H106N5°22PS' Sp* 197-200°· 5 Laskettu: C 60,02 H 7,21 N 4,72 P 2,09 S 2,16 %
Saatu: C 60,30 H 7,22 N 4,38 P 2,09 S 2,16 %
Kuvio 11: Akonitiini + tiofosforihappotriatsirididi C39H59N4°11PS' sp‘ 210"211°·
Laskettu: C 56,92 H 7,22 N 6,80 P 3,76 S 3,86 % 10 Saatu: C 56,91 H 7,12 N 6,89 P 3,60 S 3,73 %
Kuvio 12: Akonitiini + tiofosforihappotriatsirididi C35H55N4PS011, sp* 190-192°.
Laskettu: C 54,83 H 7,19 N 7,26 %
Saatu: C 54,83 H 6,98 N 8,74 % 15 Kuvio 13: Pilokarpiini + tiofosforihappotriatsirididi C26H31N3°7*
Kuvio 14: Allokryptopiini + syklofosfamidi (N,N-bis-(/3-kloorietyyli) -N ’ ,0-propyleenifosforihappoesteridiamidi) C49H65N4°12C12P' Sp' 159-160°.
20 Laskettu: C 58,22 H 6,27 N 5,58 P 3,08 Cl 7,06 %
Saatu: C 58,25 H 6,25 N 5,40 P 2,53 Cl 7,41 % C 54,84 H 6,16 N 5,62 P 2,51 Cl 7,26 %
Kuvio 15: Protopiini + syklofosfamidi /N,N-bis-(/3-kloorietyyli) -N10-propyleenifosforihappoesteridiamidi/ 25 c47H55N4012PC14, sp. 239-242°.
Laskettu: C 54,24 H 5,32 N 5,38 P 2,97 Cl 13,62 %
Saatu: C 54,04 H 5,25 N 4,85 P 2,72 Cl 10,13 % C 54,48 H 5,22 N 4,69 P Cl 9,91 %
Kuvio 15a: Protopiini + syklofosf amidi /N,N-bis(/3-30 kloorietyyli)-N’,0-propyleenifosforihappoesteridiamidi7 C47H59N4°12PC14' Sp' 239-242°.
Laskettu: C 54,03 H 5,69 N 5,36 P 2,96 Cl 13,57 %
Saatu: C 54,04 H 5,25 N 4,85 P 2,27 Cl 10,13 % C 54,48 H 5,22 N 4,69 Cl 9,91 % 35 Kuvio 15b: Protopiini + syklofosfamidi /N,N-bis-(fi- kloorietyyli) -N ’ ,0-propyleenif osf orihappoester idiamidi_7 C47H59N4°12PC14' sp· 239-242°.
10 731 31
Laskettu: C 54,03 H 5,69 N 5,36 P 2,96 Cl 13,57 %
Saatu: C 54,04 H 5,25 N 4,85 P 2,27 Cl 10,13 % C 54,48 H 5,22 H 4,69 Cl 9,91 %
Kuvio 16: Kelerytriini + syklofosfamidi /N,N-bis(/3-5 kloorietyyli)-N',0-propyleenifosforihappoesteridiamidi/ C27H37N309PC12/ sp. 188-192°.
Laskettu: C 49,94 H 5,74 N 6,64 P 4,76 Cl 10,91 %
Saatu: C 49,85 H 5,31 N 6,06 P 4,95 Cl 13,23 % C 49,84 H 5,24 N 5,96 Cl 14,24 % 10 Kuvio 17: Kelidoniini + syklofosfamidi /N,N-bis^3~ kloorietyyli) -N' ,O-propyleenifosforihappoesteridiamidi_7 C27H35N3°7PC13' Sp' 273_276°·
Laskettu: C 49,82 H 5,41 N 6,45 P 4,75 Cl 16,33 %
Saatu: C 49,26 H 5,07 N 5,12 P 3,50 Cl 16,50 % 15 Diagnostisten tutkimusten kannalta merkitystä on sillä, että valmisteella ukraiini (Chelidonium majus L. -alkaloidi-tiofosforihappotriätsirididi-johdannainen) fluoresoi UV-valossa kellanvihreänä. Aktivoimisrekvenssit ovat frekvenssialueella 220-490 nm. Fluoresenssispektri ulottuu 20 alueelle 410-665 nm, maksimi on 550 nm:ssä. Laaja spektri-alue selittyy sillä, että valmiste koostuu ryhmästä erilaisia alkaloidijohdannaisia. Fluoresenssi-ilmiön näkyvyysraja UV 366 nm:ssä ohutkerroskromatografialevyllä on laimennuksessa 0,000007 mg/ml, 0,0000003 mg 1 mm2;ä kohti. Valmis-25 teen tämä ominaisuus säilyy myös elimistössä, joten myös kliinisissä kokeissa voitiin havaita ukraiini-valmisteen jakautuminen elimistössä.
Seuraavassa esitetään joitakin kliinisiä havaintoja: Tapaus 1 30 Potilas M.B., 64-vuotias mies, diagnoosi: peräsuolen adenokarsinooma ja laajaa metastaasimuodostusta LWS-alueel-la, OS il. sin. et Femur dext. Potilas sai kaksi hoitosar-jaa ukraiini-valmistetta aikaisemmin esitetyllä terapiaoh-jelmalla. Annos 140 mg ja 160 mg. Taudin kulku: yleistila 35 parani, analgeettien käyttö väheni. Subjektiivisesti potilas tunsi voivansa paremmin, kasvaimen alueella tuntui vaihtelevasti lämpöaaltoja. Fluoresenssitekijä: kuuden vuorokauden 11 73131 kuluttua toisen hoitosarjan päättymisestä näkyi kasvaimen yläpuolella olevalla ihoalueella ja sen ympäristössä selvä rajoittunut fluoresenssi. Lisäksi fluoresenssia esiintyi yhdellä rajoitetulla kliinisesti kasvainvapaalla ihoalueella.
5 Nämä kohdat ovat samat, jotka tuntuivat lämpimiltä. Suurempi paikallinen lämmönkehitys voidaan saada näkyviin kuume-liuskoilla. 13 vuorokauden kuluttua fluoresenssi on selvästi vähäisemmän intensiivistä. Se näkyy epäsäännöllisinä läiskinä .
1 0 Tapaus 2
Potilas R.N. 68-vuotias mies, diagnoosi: keuhkoput-kikarsinooma, vasen ylälohko. Histologia: suurisoluinen, infiltroitunut N. bronchi. Keltatauti, maksimestaaseja. Kolme kertaa diagnostisesti ukraiinia, kaikkiaan 130 mg. Käm-15 menenlaajuinen vahvasti fluoresoiva alue miekkalisäkkeen päällä. Kyseenalaista fluoresenssia rintakehän vasemmalla puolella. Viikon kuluttua fluoresenssia ei havaittu.
Tapaus 3
Potilas M.L., 72-vuotias nainen, diagnoosi: haima-20 karsinooma, lukuisia maksimetastaaseja. Operaatio: Probatoria ja P.E. maksametastaasista. Histologia: monimuotosoluisen, osaksi limaamuodostavan adenokarsinooman metastaasi. Jatkuvia kipuja ja vahvaa alkaloidikäyttöä, epiduraalikatetri, karbostesiini-tiputus, sisälmysblokadi. Ultraääni: maksame-25 tastaaseja, suuri haimakarsinooma. Hoito ukraiinilla keskeytetty antaen plaseboa. Tunnustelemalla: vasen maksalohko pieneni siten, että rintakorin alle mahtui poikittain kolmen sormen sijasta viisi. Metastaasit vaikuttivat pehmeämmiltä. Ukraiini-injektioiden jälkeen valkosolut kohoavat 13 000:een. 30 Fluoresenssi: joidenkin päivien kuluttua terapian alusta keskellä leikkaushaavaa kerran 30 mm leveä fluoresenssi, jota ei myöhemmin saatu uudelleen.
Tapaus 5
Potilas R.M., 73-vuotias nainen, diagnoosi: ei lei-35 kattavissa oleva mahakarsinooma. Operaatio: Probatoria ja osittainen vatsapaidan resektio. Illalla ennen leikkausta 2 x 20 mg ukraiinia i.v. Histologia: laajalle levinnyt 12 731 31
Lymphagiosis carcinomatosa mahan adenokarsinooman suuressa vatsapaidassa. Huom: terveillä potilailla ei esiinny vatsapaidan fluoresenssia. Rintakyhmyt (nisän rakkulatauti) eivät fluoresoi ukraiiniannon jälkeen.
5 Tapaus 9
Potilas W.S., 26-vuotias mies, diagnoosi: arpikasvain (miekkalisäkkeen yläpuolella). 0,5 mg ukraiinia 1 ml:ssa 0,9-%:ista fysiologista NaCl-liuosta subkutaanisesti 50 cm:n päähän arpikasvaimesta (havanseutu), noin minuutin kuluttua 10 injektion antamisesta arpikasvain fluoresoi voimakkaasti, fluoresenssi säilyi kaksi vuorokautta.
Tapaus 10
Potilas N.U., 58-vuotias nainen, diagnoosi: rintasyöpä. Histologia: Carsinosis pleurae, moninkertainen luumeta-15 staasi. Tila uusiutuneiden keuhkopussin nestepurkautumien jälkeen, sytostaattitiputus. 2,5 mg:n ukraiini-injektio. Lyhyen ajan kuluttua fluoresenssi selvä keuhkopussin neste-purkaumakohdassa. (4 RFI leikkausarven alapuolella). Heik koa fluoresenssia rinnanpoiston arpialueella.
20 Kliinisten tulosten selostus 60 potilasta käsiteltiin ukraiinilla, joista potilaista 59:llä oli pitkälle kehittynyt syöpäsairaus. Kliinisten havaintojen kuluessa osoittautui, että valmiste vaikuttaa eri tavalla kasvannaisen kasvuun, mutta ei kuitenkaan mis-25 sään tapauksessa johtanut mainitsemisen arvoiseen luuytimen vaurioon.
Potilaista voitiin erottaa 3 erilaista ryhmää:
Ryhmään I kuului 8 potilasta: 2 potilaalla oli rintasyöpä, 2 potilaalla pahanlaatuinen melanooma, 1 potilaal-30 la basosellulaarinen epiteliooma, 1 potilaalla korvasylkirauhasen lieriösolukarsinooma, kahdella potilaalla oli luultavasti rintasyöpä, joista toisesta potilaasta otettu kudosnäyte ei osoittanut sitä ja toisella oli levinnyt lukuisia adenokarsinooman metastaaseja kainaloon ja solisluun ylä-35 puoleiselle alueelle, mutta primaarikasvainta ei voitu paikallistaa. Kaikissa näissä kahdeksassa tapauksessa saatiin selvä väliaikainen kasvainkudoksen väheneminen, jolloin 13 731 31 kasvainkudos osittain taantui vastakkaisessa järjestyksessä kuin syntyessään, so. ne metastaasit, jotka olivat viimeksi ilmestyneet, hävisivät ensimmäisinä. Tällöin ei esiintynyt kuolioita, vaan ensin kasvainkudos rajoittui selvästi ympä-5 ristöstä ja paikallinen turvotus ja mahdollisesti myös nes-tevirtauksen estymisestä johtuva pysyvä imusuoniturvotus väheni. Sitten kasvainkyhmy vähitellen pieneni. Näillä potilailla ilmeni heti ensimmäisen injektion jälkeen selvää vaikutusta subjektiivisena tuntemuksena, kuten: kivut väheni-10 vät eräässä tapauksessa jo 1-2 tunnin kuluttua injektiosta; kasvain tuntui lämpiävän, mikä voitiin yhdellä potilaalla osoittaa paikallisena lämpiämisenä; kasvaimen alueella jännitystä ja kutiamista; kuuma-aaltoja, sydämen tiheälyönti-syyttä, lievää kulmausta tai päänsärkyä; kohonnutta virt-15 saneritystä, väsymystä, kielteisyyttä, pahoinvointia ja osaksi masennusta. Nämä oireet eivät kaikki esiintyneet samanaikaisesti, mutta kaikilla potilailla esiintyi joitakin niistä yksilöllisinä jaksoina jokaisen injektion jälkeen.
Mainittujen subjektiivisten ilmiöiden esiintyminen 20 voidaan selvästi havaita eräällä potilaalla mitattujen pulssi-, verenpaine- ja lämpötila-arvojen selvästä korrelaatiosta.
Ryhmä III käsitti 27 potilasta: 10 keuhkoputkikarsi-noomatapausta, 6 rintasyöpätapausta, 2 munasarjasyöpäta-25 pausta, 2 kohtisyöpätapausta, 1 haimasyöpätapaus, 2 perä- suolisyöpätapausta, 1 mahasyöpätapaus ja 1 vatsanpohjasyöpä-tapaus, jossa pitkälle edistyneen tilan vuoksi primaarikas-vainta ei enää voitu yksiselitteisesti paikallistaa.
Erotukseksi ryhmästä I ei tässä saatu mitään vaiku-30 tusta kasvaimen ja kuvattujen sivuoireiden suhtee. Ei edes pitemmällä käsittelyajalla ja suuremmalla annostuksella saatu mitään sellaisia muutoksia, joiden aiheuttajaksi voitiin osoittaa ukraiini-valmiste.
Ryhmä II oli ns. väliryhmä, se käsitti 25 potilasta, 35 joiden sairaus oli erittäin pitkälle kehittynyt: 9 rintasyöpätapausta, 7 keuhkoputkisyöpätapausta, peräsuolisyöpäta-paus, 2 osteosarkoomatapausta, 1 prostatasyöpätapaus, 14 731 31 1 kilpirauhassyöpätapaus, 1 paksusuolisyöpätapaus ja 1 vat-sanpohjasyöpätapaus. Tässä ryhmässä valmisteen vaikutus oli erittäin vaihteleva. Kaikilla näillä potilailla esiintyi pitempiaikaisen käsittelyn jälkeen samoja seurausoireita, 5 joita ryhmällä I kuvattiin, muttai kuitenkaan yhtä nopeasti .
Vaikutus kasvaimeen ei näillä potilailla ollut niin selvä, minkä kuitenkin täytyy katsoa johtuvan myös mm. siitä, että syöpä oli osittain jo erittäin laajalle levinnyt.
10 Kahden keuhkoputkisyöpäpotilaan kohdalla saatiin väliaikaisesti lyhytaikainen kasvaimen pieneneminen, kahdella potilaalla jonkin aikaa kestävä kasvun pysähtyminen. Neljällä rintasyöpäpotilaalla metastaasien päällä olevat haavaumat paranivat ja kahdeksalla potilaalla kasvaimen aiheuttamat 15 kivut vähenivät osaksi kokonaan. Eräällä potilaalla, jolla oli infiltroitunut uusiutunut kilpirauhassyöpä, kasvain muutti muotoaan siten, että se oli selvästi rajoittunut terveen kudoksen suhteen. Melkein kaikilla näillä potilailla yleiskunto parani osaksi odotusten vastaisesti myös sil-20 loin, kun kasvaimen kasvua ei voitu pysäyttää. Asian selventämiseksi liitetään tähän kustakin ryhmästä yksi edustava sairaskertomus.
Ryhmä I
Potilas T.J., 40-vuotias nainen, diagnoosi: pahan-25 laatuinen melanooma. Histolosesti todettu. (1977 potilaalla todettiin vasemmassa sääressä pahanlaatuinen melanooma, joka poistettiin leikkauksella.) 1980 todettiin vasemmassa nivuksessa imusolmukemeta-staasi suuruudeltaan 5 x 5 cm ja potilasta käsiteltiin täl-30 löin ukraiinilla. Hän sai kolmen hoitokerran aikana kaikkiaan 680 mg.
Ensimmäisen hoitojakson aikana esiintyi ajoittain masennusta, lihaskipuja ja huonovointisuutta. Toisen hoitojakson jälkeen imusolmuke oli enää vain saksanpähkinän kokoi-35 nen ja kolmannen hoitojakson jälkeen pavun kokoinen; se oli kova ja vielä vaikeasti tunnustelemalla todettavissa. Vointi oli hyvä.
15 73131
Ryhmä II
Potilas H.G., 63-vuotias nainen, diagnoosi: rintasyöpä vasemmassa rinnassa, solisluun päällä imusolmukeme-staaseja ja luumetastaaseja. Aikaisemmin suoritettu syste-5 maattinen terapia: Nolvadex kesäkuusta 1977 tammikuuhun 1978; polykemoterapia endoksaanilla, metotreksaatilla, fluo-riurasiililla ja prednisolonilla, myöhemmin kombinaatiote-rapia adriblastiini-endoksaanilla maaliskuusta 1978 huhtikuuhun 1979. Elipteeniä (aminoglutetimidi) huhtikuusta 1979 10 tammikuuhun 1980.
Ukraiiniterapia aloitettiin 29.2.1980. Löydös terapian alussa: kooltaan 5 x 5 cm oleva haavainen solisluun päällä oleva metastaasi. Silmien alueella subjektiivista paineen tuntua ja jännityksen tuntua vasemman solisluun 15 päällä. Terapia aloitettiin 2,5 mg :11a. Heti alussa potilas huomasi lämmöntuntua kehon vasemmalla puolella ja solisluun päällä olevassa kasvaimessa. Jo kuuden injektion jälkeen haavaumaa ei enää näkynyt, itse kasvaimen koko oli kuitenkin muuttumaton. Subjektiivinen jännityksen tuntemus oli 20 myös kadonnut samoin kahden vuoden ajan esiintynyt paineen tuntemus silmien alueella. Viimeisessä tarkastuksessa 8.4.1980 potilas oli subjektiivisesti vailla vaivoja. Hän valitti kohtuullista painon vähenemistä. Paikallinen löydös vasemman solisluun päällä oli muuttumaton. Tällöin ei ollut 25 osoitettavissa haavaumaa. Laboratoriotutkimuksen mukaan (verenkuva, SMA, seerumin kalsium) ei ollut patologisia löydöksiä. Vakavia sivuvaikutuksia ei voitu todeta.
Ryhmä III
Potilas K.G., 58-vuotias nainen, diagnoosi: adenoso-30 lidi munasarjakarsinooma; poistettu leikkauksella.
Aikaisemmin suoritettu systemaattinen terapia: Endo-ksaania 1 200 mg infuusiota kohti. Kobolttisäteilytys 4 500 rd/g. Profylaktinen terapia ukraiinilla. Käsittelyn aikana ei havaittu minkäänlaisia sivuvaikutuksia tai subjektiivi-35 siä tuntemuksia, kuten huimausta, lämmönnousua, tiheälyön-tisyyttä tai depressioita. Yleistila ja ruokahalu paranivat. Kuukauden kuluttua terapian alkamisesta todettiin vasemmassa 16 73131 rinnassa myhky, jolloin viikon kuluttua suoritettiin rinnan poisto Pateyn mukaan. Histologisessa tutkimuksessa löytyi osittain nekrotisoitunut kiinteä karsinooma. Ukraiinikäsit-tely keskeytettiin.
5 Vaikutusmekanismin tutkimusta täydennettiin suoritta malla ukraiinin immunostimuloivan vaikutuksen in vitro -tutkimuksia ns. lymfosyytti-transformaatiokokeella. Lymfosyytit ovat tunnetusti immunokompetentteja, sillä ne pystyvät tunnistamaan spesifiset antigeenit tai ne pystyvät reagoi-10 maan niiden kanssa. Tällaisia soluja nimitetään immunosyy-teiksi ja niiden esiasteita immunoblasteiksi.
Immunoblastien muodostus voi tapahtua myös in vitro. Immunoblastien koko on 20-30 ^um, normaalien lymfosyyttien koko sen sijaan vain 5-15 ^um.
15 Ukraiinin biologisen vaikutustavan selvittämiseksi suoritettiin seuraavat immunologiset tutkimukset. Blasti-transformaatioon käytettiin marsuista ukraiinilisäyksen jälkeen eristettyjä lymfosyyttejä. Eristämiseen käytettiin kauppanimellä "Ficoll 4000" saatavissa olevan yhdisteen 20 ja EDTA:n seosta (0,9 EDTA + 0,1 Ficoll 4000).
Eristettyjä lymfosyyttejä kasvatettiin in vitro Parker-liuoksessa lisäysmäärän ollessa 1,6 ^ug, 0,16 ^,ug ja 0,016 yug. Samanaikaisesti viljeltiin lymfosyyttejä Parker-liuoksessa spesifioimattoman stimulaattorin fytohemagluti-25 niinin (PHA, 5 yug/ml) kanssa ja kontrolliksi ilman lisäystä. Bakteeritartunnan välttämiseksi lisättiin tarvittava määrä antibiootteja: penisilliiniä, streptomysiiniä ja nys-tatiinia. Viljelmiä inkuboitiin 37°C:ssa ja kolmen vuorokauden aikana laskettiin mikroskoopin alla transformoitu-30 jen lymfosyyttien luku kerran päivässä.
Jokaista valmistetta kohti laskettiin 100 lymfosyyttiä ja ne, joiden koko oli suurempi kuin 15 ^um ihmisen lymfosyyttien tapauksessa ja suurempi kuin 20 ^um marsun lymfosyyttien tapauksessa, arvioitiin transformoiduiksi. Kai-35 kissa tapauksissa transformoitujen solujen lukumäärä oli ennen viljelemisen alkua korkeintaan 10,1 %. Kokeet suoritettiin käyttäen 10 terveen ihmisen ja 10 terveen marsun 17 731 31 lymfosyyttejä. Nämä tulokset osoittavat selvästi, että ukraiini-valmiste vaikuttaa lymfosyyttitransformaatioon.
Ukraiinin annos valittiin seuraavin perustein: koska ukraiini-hoitosarjassa käytetään ukraiinia keskimäärin 5 yksittäisannoksena 16 mg/ml, niin kokeet suoritettiin 1/10000:lla, 1/100000:lla ja 1/1000000:11a tästä määrästä. Tulokset on koottu seuraaviin taulukoihin I ja II.
18 731 31
Taulukko I
Transformoitujen marsun lymfosyyttien %-osuus
Nro Viljelyväliaine ja Inkubointiaika 5 lisäaine 24 h_48 h_72 h_ 1. 1,6 yug/ml ukraiinia ^__45, &_40, 2_ 0,16 yug/ml " 42,3 29,3 28,5 0,016 ^,ug/ml " 35,6 33,6 25,0 PHA 32,2 28,3 27,9 10 Ilman stimulaattoria 19,2 15,3 1,0 2. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 53,9 30,2 18,3 0,16 ^ug/ml " 43,/ 32,2 32,0 (?) 0,016 yug/ml " 27,3 30,2 10,5 PHA 20,8 17,2 1 /, 9 15 Ilman stimulaattoria 13,3 12,2 19,2 (?) 3. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 50,2 40,3 42,8 0,16 yug/ml " 49,3 51,1 33,9 0,016 /ug/ml " 41,0 29,3 30,1 PHa 32,5 29,8 22,3 20 Ilman stimulaattoria 18,0 11,2 10,3 4. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 55,0 42,3 0,16 ^,ug/ml " 50,0 40,/ 43,8 0,016 ^ug/ml " 41,2 30,5 39,5 PHA 33,2 27,0 10,0 25 Ilman stimulaattoria 18,2 18,0 16,2 5. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 51,3 43,5 31,5 0,16 /ug/ml " 48,2 33,2 33,5 19 - 73131
Taulukko I (jatkoa)
Nro Viljelyväliaine ja Inkubointiaika lisäaine 24 h 48 h 72 h 0,016 yug/ml ukraiinia 39,9 31,5 - 30,2 PHA 33,4 20,3 11,3
Ilman stimulaattoria 12,5 12,5 8,4 6. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 58,5 57,9 41,8 0,16 ^ug/ml " 48,3 50,0 43,2 0,016 ^ug/ml " 40,1 35,2 30,0 PHA 30,2 22,1 17,3
Ilman stimulaattoria *9,0 18,2 13,5 7. 1,6 yug/ml ukraiinia 43,3 41,2 39,0 0,16 yug/ml " 42,3 36,6 36,2 0,016 yug/ml " 41,2 37,2 35,5 PHA 33,3 33,4 27,2
Ilman stimulaattoria 15,1 16,1 13,2 8. 1,6 yug/ml ukraiinia 48,7 45,1 40,5 0,16 ^ug/ml " 43,1 39,2 31,1 0,016 /Ug/ml " 35,6 29,8 24,2 PHA 31,3 27,0 24,3
Ilman stimulaattoria 12,2 10,1 10,5 9. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 53,3 51,5 41,2 0,16 ^ug/ml " 49,6 47,2 42,2 0,016 yug/ml " 39,2 36,7 34,6 PHA 38,3 32,8 25,2
Taulukko I (jatkoa) 20 . 731 31
Nro Viljelyväliaine ja Inkubointiaika lisäaine 24 h 48 h 72 h
Ilman stimulaattoria 10,1 16,7 11 ,3 5 10. 1,6 yug/ml ukraiinia 56,2 53.6 40,7 0,16 ^ug/ml " 49,3 42,0 34,5 0,016 /ug/ml " 39,0 37,3 20,3 pha 34,2 33,2 2/,5
Ilman stimulaattoria 12,0 10,2 8,4 2i . 73131
Taulukko II
Transformoitujen ihmisen lymfosyyttien %-osuus 1 . viljelyväliaine ja Xnkubointiaika lisäaine 21 h 48 h 72 h_ 5 1,6 ,ug/ml ukraiinia 47,2 45,4 41,2 0,16 ^ug/ml " 43,8 39,2 38,6 0,016 /ug/ml " 36’7 3ί’2_ 36,6 24,8 20,8 PHA 5 yug/ml ,_____ 111 <4 2 0 0
Ilman stimulaattona __’______ 10 2. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 49,9_41 , 2_37,2__ 0,16 yug/ml " 43,2 40,3 33,2 0,016 yug/ml " "8>6_36,2_26,8_ PHA 5 ^,ug/ml 31 ,2 27,0 _21,2
Ilman stimulaattoria 18,4 14,1 8,4 15 3. 1,6 yug/ml ukraiinia 1__18>8_18,2_ 0,16 yug/ml " 19,5 18,2 15,3 0,016 /Ug/ml - 14>2_ 1 ^ 13>2 , , 33,1 28.2 14,1 PHA 5 ^ug/ml -------- -
Ilman stimulaattoria 1 ^_8 ’ ^^ ^_ 20 4. 1 ,6 ^ug/ral ukraiinia 43,9_____________ 0,16 ^ug/ml " 41,2 40,6 41,2 0,016 /ug/nl " ^·6 ?1·2__ , , 40,2 53,0 23,3 PHA 5 yUg/ml -------:---
Ilman stimulaattoria ^9,6_^2,'j_10,8__ 25 5. 1 ,6 yug/ml ukraiinia 9j,9 - 51 , 5_47,8_ 0,16 7ug/ml " 48 ,6 43,6 41 ,0
Taulukko II (jatkoa) 22 . 731 31
Nro Viljelyväliaine ja Inkubointiaika lisäaine 24 h 48 h 72 h 0,016 yug/ml ukraiinia 37,2 37,8 36,2 5 PHA 5 yug/ml 36,4 23,3 25,4
Ilman stimulaattoria 15,3 14,4 12,8 6. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 55,5 53,4 51,5 0,16 ^,ug/ml " 51,2 49,1 47,3 0,016 /ug/ml " 43,2 36,2 36,0 10 PHA 5 ^ug/ml 37,1 36,2 34,7
Ilman stimulaattoria 19,3 18,4 16,5 7. 1,6 yUg/ml ukraiinia 40,6 46,0 42,5 0,16 yug/ml " 47,2 45,2 24,5 0,016 y,ug/ml " ^9,8__32,0_21,2 _ 15 PHA 5 yug/ml 30,1 26 ,8 19,0
Ilman stimulaattoria 14,7 13,1 8,5 8. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 52,3 37,4 21,8 0,16 /ug/ml " 43,3 20,3 19,3 0,016 ^ug/ml " 41,2 19,4 W,4 20 PHA 5 yUg/ml 37,3 19,5 20,1
Ilman stimulaattoria ^ ^_8 ’ J_8 ’ 2_ 9. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 4/,2 32,8 29,1 0,16 ^ug/ml " 43,4 36,4 34,2 0,016 ^,ug/ml " ^8,6_28,0_2Q>°_ 25 PHA 5 ^ug/ml 36,6 28,6 21,4
Taulukko II (jatkoa) 23 731 31
Nro Viljelyväliaine ja Inkubointiaika lisäaine 24 h 48 h 72
Ilman stimulaattoria 15.3 13,3 10,7 5 10. 1,6 ^ug/ml ukraiinia 4Ö,3 37,4 33,3 0,16 yug/ml " 43 > 4_4-1 > 2_3" _ 0,016 ^ug/ml " 37,1 36,2 29,1 PHA 5 yUg/ml 30,0_19,4_18,4_
Ilman stimulaattoria 9,3 9,6 5,3 24 73131
Kokeissa voitiin todeta tilastollisesti merkitsevä ero eläinten ja ihmisten ja kontrolliryhmien transformoitujen lymfosyyttien lukumäärissä ukraiinin läsnäollessa. Tästä voidaan vetää johtopäätös, että ukraiini-valmisteella on immu-5 nologista vaikutusta ja että se stimuloi ihmisen torjunta-systeemiä .
Vain yhdessä tapauksessa 10:stä (ks. taulukko II, nro 3) ei saatu selvää lymfosyyttien transformoitumista. Siinä ovat kyseessä ihmisen lymfosyytit. Potilaalla nro 3 saat-10 taisi siis tietyissä olosuhteissa esiintyä kliinisen ilmiön kanssa "in vitro-ekvivalenttinen" ilmiö, jossa yksittäinen potilas ei ylipäänsä lainkaan reagoi ukraiinille.
Kaikilla muilla potilailla saatiin korkeampi transfor-maatiosuhde kuin PHArlla.
15 Lopuksi suoritettaessa sinänsä tunnettu agarelektro- foreesi ukraiinille käyttäen 0,05 mg ukraiinia, joka pantuna agargeelissä (Sörensen-puskuri + NaCl) olevaan pieneen uraan ja ajettuna neljän tunnin aikana 70 V jännitteellä ja 2 mA virranvoimakkuudella, saatiin pintaan painetussa suoda-20 tinpaperissa, joka merkitsi lähtökohdan ja poolisuuden, tarkasteltaessa UV-lampun alla negatiiviseen napaan suunnattu fluoresoiva vyöhyke. Fluoresoivat farktiot olivat positiivisesti varattuja.
Edellä olevasta ilmenee selvästi, että alussa kuvattu-25 ja valmisteita ja vastaavasti yhdisteitä voidaan käyttää kaikenlaatuisten kasvainten diagnosoimiseen (terapeuttisen käsittelyn ohella), jolloin valmisteiden fluoresenssilla on suuri merkitys. Tällöin diagnoosin suorittamiseksi on mahdollista injektoimalla valmistetta tai valmisteita valmisteiden 30 kerääntyessä injektion jälkeen sairaaseen kudokseen suorittaa nopea ja luotettava varhaisdiagnoosi, jossa injektioneste nopeasti leviää injektoidulta ja kerääntyy sairastuneeseen alueeseen, siis esimerkiksi kasvainkudokseen.
Tämä havainto ulottuu myös kaikkiin endoskooppisiin 35 menetelmiin, kuten bronkoskopiaan, mediastinokopiaan, tora-skopiaan, esofagoskopiaan, oto-rinoskopiaan, laryngoskopiaan, 25 73131 rektoskopiaan, proktoskopiaan nun., jolloin esim. kylmä valo voidaan korvata UV-valolla.
Diagnostista menetelmää voidaan täydentää liittämällä valmisteeseen radioaktiivinen isotooppi niin, että radio-5 aktiivisuus voidaan mitata sinänsä tunnetulla tavalla vastaavilla detektoreilla ja radioaktiivisuuden kumuloituminen piirtää esimerkiksi gamma-säteilyskannerillä.
Lopuksi mainittujen valmisteiden fluoresoiville aineilla ja radioaktiivisilla isotoopeilla saadun merkitsemisen 10 lisäksi on ajateltavissa myös valmisteiden varustaminen säteilyä absorboivilla yhdisteillä tai radikaaleilla, jotta valmisteen kerääntyminen tietylle kudosalueelle siihen tällöin saadun kohonneen röntgensädeabsorption vuoksi on tunnistettavissa .
Claims (17)
1. Kaavan (I) mukaisten alkaloidiyhdisteiden ja niiden suolojen käyttö R7 ^ ?7 R' R1 . I ; (i)
10 R / \ '^E5 Ri R4 R5 jossa kaavassa R, = H; 0CH-. ; Y Ά. _ 13 ^ / 1 ^ R0 = OCH.,; OH; ΟΗ-,-ΟΗ,,-Ν-Ρ-Ν ^ -3 1 1 I I \
15 R9? \ • 11 R10 tai ja R£ muodostavat yhdessä ryhmän; ^0 V 20 ^ \ Y . Rn f /12 R0 - H; 0CHo; CHn-CH0-N-P-N 3. z ^ | j v R9f NR„
25 R10 tai R2 ja R^ muodostavat yhdessä ryhmän: -°) 30 'v^O/ R4 = H; R4 = «,· tai R4 + = O 35 tai R^ ja R4 muodostavat yhdessä ryhmän: 27 731 31 cht OH
5 Y ,R19 t / 1 2 Rc = CH0; OH; 0Ho-CHo-N-P-N U \ 9i R11 Rio
10 R' = CH0; OH; D 3 tai R^ ja Rg muodostavat yhdessä ryhmän: OOH 3 „raC). JOO O' cc oa °-R14 20 3
25 Rg = H; Rg = H; tai yhdessä R^:n kanssa = O; tai Rg ja Rg yhdessä muodostavat ryhmän; 30 i ^fCf0).· 1 'X^T0'*14 no-r13 sillä ehdolla, että ainakin yksi ryhmistä P-2, R3 ja Rg (yksin tai yhdessä R^:n tai R^:n kanssa) merkitsevät ryhmää: 28 7 31 31 Υ / R1 0 t / 12 -CH„-CH--N-P-N 2 2 I I \ r9x Rn R10 5 tai sisältävät tällaisen ryhmän, R? = H; Ry = H; tai Rg ja yhdessä muodostavat ryhmän:
10. H "’“'‘OOO· 000·
15. H,CO h3co^^\^^ 3 20 r °"R15 0/
25 Rg = H; CH2-CH2-C1; alkaloidi; q = H; OH; alkaloidi; R^ = H; alkaloidi; tai R11 + R12 = CH2-CH2?
30 Y = S; O; X = NH; O; R^2 = H; alkaloidi; Ϊ /R12 R1^ = OH; CH„-CH„-N-P-N IJ Z Z | | v
35 R9| R10 29 7 31 31 H N--CH» 5 / \2 CH»-CH»-N-P —> O CH» ;
2. I \ / 2 CH» O-CH» I 2 2 cich2h2o c^2 ch3 1 5 γ t / ^2 R.. = OH; CH»-Cl; CH»-CH»-N-P-N 14 z £ £ j | \ M R11 R1 o 20 H
25 N-CH / V CH -CH»-N-P—* O CH» ;
2. CH \ / | 2 O -CH CH2 ch2
30 O v o -N ) '\ / CH2-' 35 3 30 731 31 H N- CH» / X CH»-CH»-N-P —» O CH» ; 2 2 | v /2 CH ^ / ,2 O-CH» 5 1 1 CH» ! 2 Cl 10 f N-CH» / \ R15 = CH2-CH2-?-pC 0 /2 ; CI?2 O-CH 15 1 1 CH» i2 Cl aktiivisena aineosana diagnostisten valmisteiden valmistukseen .
2. Patenttivaatimuksessa 1 määriteltyjen yhdisteiden käyttö kasvainten diagnostisointiin tarkoitettujen valmisteiden valmistukseen. 31 73131
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19813128018 DE3128018A1 (de) | 1981-07-13 | 1981-07-13 | "verfahren zum diagnostizieren und fuer die therapeutische behandlung von tumoren und/oder infektioesen krankheiten verschiedenster art unter praeparativem einsatz von alkaloid-verbindungen bzw. deren salze" |
| DE3128018 | 1981-07-13 | ||
| AT8200021 | 1982-07-08 | ||
| PCT/AT1982/000021 WO1983000486A1 (en) | 1981-07-13 | 1982-07-08 | Method for the diagnostic and the therapeutic treatment of tumors and/or infectious diseases of all sorts by the use of alkaloid compositions or the salts thereof |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI830760A0 FI830760A0 (fi) | 1983-03-07 |
| FI830760L FI830760L (fi) | 1983-03-07 |
| FI73131B true FI73131B (fi) | 1987-05-29 |
| FI73131C FI73131C (fi) | 1987-09-10 |
Family
ID=6136994
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI830760A FI73131C (fi) | 1981-07-13 | 1983-03-07 | Anvaendning av alkaloidderivat och salter daerav vid framstaellning av diagnostiska preparat. |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0083600B1 (fi) |
| JP (1) | JPS58501074A (fi) |
| AU (1) | AU568483B2 (fi) |
| DE (3) | DE3128018A1 (fi) |
| DK (1) | DK33283D0 (fi) |
| FI (1) | FI73131C (fi) |
| GB (1) | GB2110533B (fi) |
| WO (1) | WO1983000486A1 (fi) |
| YU (1) | YU44969B (fi) |
| ZA (1) | ZA824983B (fi) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2623504B1 (fr) * | 1987-11-25 | 1990-03-09 | Adir | Nouveaux derives n-(vinblastinoyl-23) d'acide amino-1 methylphosphonique, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
| AT407833B (de) * | 1995-06-01 | 2001-06-25 | Nowicky Wassyl Dr | Mittel zur behandlung von strahlenschäden |
| HUP9601096A2 (hu) * | 1996-04-26 | 1998-01-28 | János Aradi | Anti-HIV-aktivitással rendelkező gyógynövényalapú gyógyászati és gyógyhatású készítmény,és vegyületek |
| AU8414098A (en) | 1997-08-19 | 1999-03-08 | Emory University | Noscapine derivatives, useful as anticancer agents |
| US6673814B2 (en) | 1997-08-19 | 2004-01-06 | Emory University | Delivery systems and methods for noscapine and noscapine derivatives, useful as anticancer agents |
| AT408719B (de) * | 2000-03-22 | 2002-02-25 | Nowicky Wassili | Mittel zur behandlung von hepatitis c |
| US6426351B1 (en) * | 2000-08-11 | 2002-07-30 | Dana-Farber Cancer, Inc. | Chelerythrine-based therapies for cancer |
| DE10043615A1 (de) * | 2000-09-05 | 2002-03-14 | Erich Schneider | Freikolbenmotor mit rotativer Bewegungs- und Energieauskopplung |
| CH695417A5 (de) | 2001-11-15 | 2006-05-15 | Ddr Wassyl Nowicky Dipl Ing | Verfahren zur Umsetzung von Alkaloiden. |
| EP1459753A1 (en) | 2003-03-18 | 2004-09-22 | Nowicky, Wassyl, Dipl.-Ing. DDr. | Quaternary chelidonine and alkaloid derivatives, process for their preparation and their use in the manufacture of medicaments |
| WO2006053649A1 (en) * | 2004-11-19 | 2006-05-26 | Nowicky Wassili | Method for the detection of cancer |
| WO2006053680A1 (en) * | 2004-11-19 | 2006-05-26 | Nowicky Wassili | Ex vivo cancer diagnostic method |
| JP4753114B2 (ja) * | 2004-12-28 | 2011-08-24 | 国立大学法人 琉球大学 | 抗腫瘍細胞剤、薬学的組成物および診断剤 |
| WO2007073919A2 (en) * | 2005-12-28 | 2007-07-05 | Nowicky Wassili | Method and kit for the detection of cancer |
| EP2192114A1 (en) * | 2008-12-01 | 2010-06-02 | Universite victor Segalen Bordeaux II | bis [O-(14-benzoylaconine-8-yl)] esters |
| WO2015144900A1 (de) * | 2014-03-27 | 2015-10-01 | Nowicky Wassili | Diagnoseverfahren zur krebsfrüherkennung |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3865830A (en) * | 1969-06-16 | 1975-02-11 | Nikolai Mikhailovich Turkevich | Thiophosphamide derivatives of isoquinoline alkaloids, method of producing and application thereof |
| JPS5512003B2 (fi) * | 1973-01-24 | 1980-03-29 | ||
| AT354644B (de) * | 1975-12-19 | 1980-01-25 | Nowicky Wassili | Verfahren zur herstellung von neuen salzen von alkaloidderivaten von thiophosphorsaeure |
| AT377988B (de) * | 1976-06-28 | 1985-05-28 | Nowicky Wassili | Verfahren zur herstellung von neuen phosphorderivaten von alkaloiden |
| DE4339730C2 (de) * | 1993-11-22 | 1996-07-11 | Eisenmann Kg Maschbau | Herdwagenofen zum Brennen von Keramik o. dgl. Brenngut |
-
1981
- 1981-07-13 DE DE19813128018 patent/DE3128018A1/de not_active Withdrawn
-
1982
- 1982-07-08 WO PCT/AT1982/000021 patent/WO1983000486A1/en active IP Right Grant
- 1982-07-08 DE DE8282901956T patent/DE3277726D1/de not_active Expired
- 1982-07-08 EP EP82901956A patent/EP0083600B1/de not_active Expired
- 1982-07-08 JP JP57502047A patent/JPS58501074A/ja active Granted
- 1982-07-08 AU AU86814/82A patent/AU568483B2/en not_active Expired
- 1982-07-08 DE DE82AT8200021T patent/DE3248943D2/de not_active Expired
- 1982-07-13 ZA ZA824983A patent/ZA824983B/xx unknown
- 1982-07-13 GB GB08220293A patent/GB2110533B/en not_active Expired
- 1982-07-13 YU YU1529/82A patent/YU44969B/xx unknown
-
1983
- 1983-01-28 DK DK0332/83A patent/DK33283D0/da unknown
- 1983-03-07 FI FI830760A patent/FI73131C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2110533A (en) | 1983-06-22 |
| FI830760A0 (fi) | 1983-03-07 |
| EP0083600A1 (de) | 1983-07-20 |
| FI830760L (fi) | 1983-03-07 |
| FI73131C (fi) | 1987-09-10 |
| EP0083600B1 (de) | 1987-11-25 |
| DE3248943D2 (en) | 1984-10-04 |
| AU568483B2 (en) | 1988-01-07 |
| DE3277726D1 (en) | 1988-01-07 |
| JPH0326199B2 (fi) | 1991-04-10 |
| YU152982A (en) | 1986-04-30 |
| GB2110533B (en) | 1986-06-11 |
| JPS58501074A (ja) | 1983-07-07 |
| DE3128018A1 (de) | 1983-04-07 |
| AU8681482A (en) | 1983-02-22 |
| ZA824983B (en) | 1984-04-25 |
| YU44969B (en) | 1991-06-30 |
| WO1983000486A1 (en) | 1983-02-17 |
| DK33283D0 (fi) | 1983-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI73131B (fi) | Anvaendning av alkaloidderivat och salter daerav vid framstaellning av diagnostiska preparat. | |
| US4816462A (en) | Method for diagnosing and for the therapeutic treatment of tumors and/or infectious diseases of different types with alkaloid-compounds | |
| RU2009117589A (ru) | ПРОИЗВОДНЫЕ ГИДРОБЕНЗАМИДА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Hsp90 | |
| CA2633112A1 (en) | A method of treating tumors with azaxanthones | |
| US5723465A (en) | Inhibitors for cell adhesion and cellular infiltration | |
| BR112020000103A2 (pt) | composto médico | |
| CA2923835C (en) | Novel anthranilic amides and the use thereof | |
| CA2593202A1 (en) | Quaternary alkaloid derivatives of chelidonium majus l | |
| WO2012075957A1 (zh) | 咖啡酸苯乙酯类衍生物在制备抗肿瘤血管形成的药物中的用途 | |
| JP6239103B2 (ja) | チロシンキナーゼ阻害活性を有する物質ならびにその調製方法および使用 | |
| Jiang et al. | Activity of camptothecin, harringtonin, cantharidin and curcumae in the human tumor stem cell assay | |
| EP2475361A1 (en) | N-substituted benzenepropanamide or benzenepropenamide for use in the treatment of pain and inflammation | |
| AU2004222661B2 (en) | Quaternary chelidonine and alkaloid derivatives, process for their preparation and their use in manufacture of medicaments | |
| JPH07508996A (ja) | 色素沈着疾患の診断および処置に使用するための放射線造影および放射線治療用フェノール化チオエーテルアミンおよびそのアシル誘導体 | |
| US20080039483A1 (en) | Novel Chelidonine Derivatives, Methods for the Production Thereof, and Use Thereof For Producing Pharmaceutical Agents | |
| WO2016116587A1 (en) | Triptolide and derivatives thereof in the treatment of tumors and precancerous pathologies of the skin | |
| JP2011530539A (ja) | 腫瘍形成を抑制する脂質化合物 | |
| JP2022528454A (ja) | Ａ－ＮＯＲ－５αアンドロスタン薬物と抗がん薬物との併用 | |
| CN104892707A (zh) | 一种定向合成化合物clcn及其在抗肝癌药物中的应用 | |
| RU2436572C2 (ru) | Комбинация ингибиторов гистондеацетилазы и излучения | |
| WO2018068696A1 (zh) | 一种青藤碱及其衍生物的peg修饰物、其制备方法和用途 | |
| EA006852B1 (ru) | Бис(n,n'-бис(2-галоэтил)амино)фосфороамидаты в качестве противоопухолевых агентов | |
| RU2623034C1 (ru) | Противоопухолевое средство | |
| RU2682039C1 (ru) | Пептид, обладающий противоопухолевой и антиметастатической активностью, и готовая лекарственная форма на его основе | |
| US8314144B2 (en) | Compounds having antitumor activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired |
Owner name: NOWICKY, WASSYL |