FI66177B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara 4,-diaryl-2-(substituerad-tio)imidazoler - Google Patents

Description

155^ Μ α«*ϋϋ··ϋτϋ·ΐυ«Αΐ·υ l J 11 utlAcgnincsskript o o i /7 ^ ^ (51) K«Ju/iM.a.3 c 07 D 233/84 SUOMI-FINLAND (M) 762290 f‘-‘ rm‘-r"··* *rr1T-Tnjrfr· 10.08.76 ' 7 (21) AfcflM—cm%>nt»<n 10.08.76 (41) Τ·ΝκHUmU —MMto«Mdlt 12.02.77 nnT'ocIh rr^ir (44) h kmiytokm pm.- 31.05.84 (32)(33)(31) rn*»f —<*« ««* pH·** 11.08.75 09.06.76 USA(US) 603650, 691282 (71) E. I. du Pont de Nemours and Company, 1007 Market Street, Wilmington, Delaware 19898, USA(US) (72) Saul Carl Cherkofsky, Wilmington, Delaware,

Thomas Ray Sharpe, Wilmington, Delaware, USA(US) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä terapeuttisesti käytettävien 4,5-diaryyli-2-(substituoitu--tio)imidatsolien valmistamiseksi - Förfarande för f ramstäilning av terapeutiskt användbara 4,5~diaryl-2-(substituerad-tio)imidazoler

Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käytettävien 4,5-diaryyli-2-(substituoitu-tio)imidatsolien valmistamiseksi, joiden kaava on ,!γ\ I >~S<0)n-R1 1

H

jossa n on 0, 1 tai 2, on C^-C^-alkyyli, allyyli, vinyyli, -CI^COCHg tai -Cf^SiOJ^CH^, jossa m on 0, 1 tai 2, tai mono- tai polyhalogeeni-C^-C^-alkyyli, ja ja R^/ jotka ovat samoja tai erilaisia, merkitsevät ryhmää »tt.04.34 66177 Υ Υ *1 2 jossa Y,j ja Υ2, jotka ovat samoja tai erilaisia, ovat vety, C^-C^-alkoksi, C.,-C4-alkyyli, Cl, F, CF3, NH2, (CH^N-, N02, CH3S-, CH3S02~, tai Y^ ja Y2 yhdessä muodostavat dioksimetyleenisillan; edellyttäen, että kun n = 0, 1 tai 2 ja ja Y2 ovat molemmat vety, niin ei voi olla vinyyli, ja että kun on C^-C^-halogee-nialkyyli, jossa halogeeni on substituenttina 3- tai 4-asemassa, allyyli tai asetonyyli, Y^ ja Y2 eivät molemmat voi olla vetyjä, ja edellyttäen edelleen, että kun n on 0 ja R^ on CH3# R2 ja R3 eivät molemmat voi olla p-kloorifenyyli tai p-metoksifenyyli; sekä näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi .

US-patentissa 3 707 475 on kuvattu tulehduksia ehkäiseviä 4.5- diaryyli-2-substituoituja imidatsoleja, ja US-patentissa 3 505 350 tulehduksia ehkäiseviä 4-alkyyli-5-aryyli-1-substituoitu- 2-merkapto-imidatsoleja. Artikkelissa Chem. Ber. 106, 1638 (1973) on kuvattu 4,5-bis(4-metoksifenyyli)-2-metyylitioimidatsoleja ja 4.5- bis(4-kloorifenyyli)-2-metyylitioimidatsoleja, mutta ei ole mainittu mitään käyttöalaa.

Lukuisista viittauksista, kuten artikkeleista Current Sei. India 17, 184 - 85 (1948) ja Acta Chem. Acad. Sei. Hung. 79 (2) 197 - 212 (1973) tunnetaan 2-(substituoitu-tio)-4,5-difenyyli-imidatsoleja, joissa on substituentteina esimerkiksi metyyli, propyyli, allyyli ja asetonyyli.

Luotettavista ja tehokkaista tulehduksia ehkäisevistä aineista on jatkuvasti puutetta. Tulehdus on sairausprosessi, jolle on ominaista punotus, kuume, turvotus ja kipu. Tulehdussairauksista yleisin, kroonisin ja vakavin on niveltulehdus eri muodoissaan. Tapaturmaiseen vammaan ja infektioon liittyy myös tulehdus, ja niiden hoitamiseen käytetään usein tulehduksia ehkäiseviä lääkkeitä. Useimpien kaupan olevien ehkäisevien aineiden käyttökelpoisuus on rajoi- 3 66177 tettua myrkyllisyydestä ja haitallisista sivuvaikutuksista johtuen. Monet aiheuttavat vatsan ärsytystä ja muita vaikeuksia, kuten muutoksia verisoluissa ja keskushermostossa. Adrenokortikosteroidit aiheuttavat vatsan ärsytystä ja normaalin adrenaalitoiminnan heikentymistä.

Artikkelissa Journal of the American Medical Association,

Voi. 224, n:o 5 (Supplement), 1973 "Primer on the Rheumatic Diseases" esitetään, että immunologiset reaktiot esittävät pääosaa reumatismin tapaisen tulehduksen jatkumisessa. Laajalti käytetyillä ei-ste-roidaalisilla tulehduksia ehkäisevillä lääkkeillä, kuten aspiriinilla, indometasiinilla, fenyylibutatsonilla ja ibuprofeenilla, ei ole mitään vaikutusta näihin immunologisiin reaktioihin, vaan ne ainoastaan lievittävät tulehdusreaktion oireita; nämä lääkkeet eivät pysähdytä nivelreuman jatkuvia ja lopulta hävittäviä prosesseja. Immu-nosupressiiviset lääkkeet, kuten syklofosfamidi, ovat tehokkaita nivelreumaa hoidettaessa, mutta ne ovat liian myrkyllisiä laajalti käytettäviksi.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on osoittautunut olevan ainutlaatuinen tulehduksia ehkäisevä ja immuu-nisuutta säätelevä vaikutus. Näiden yhdisteiden biologiset profiilit ovat erilaiset kuin ei-steroidaalisten tulehduksia ehkäisevien ja immunosupressiivisten lääkkeiden. Uusien yhdisteiden ainutlaatuisten ominaisuuksien ansiosta on aikaansaatu uusi menetelmä nivelreuman hoitamiseksi, joka menetelmä on myös hyödyllinen hoidettaessa muita sairauksia, joihin liittyy immuunitilamuutoksia.

Kaksi kaavan I mukaisista yhdisteistä ei ole uusia; ne, joissa n on 0, R^ on CH^, ja sekä R2 että R^ on joko p-Cl-fenyyli tai p-OCH^-fenyyli. Disklaimeri on tarpeen sellaisten yhdisteiden poissulkemiseksi, jotka eivät ole riittävän aktiivisia, jotta niillä olisi käytännön merkitystä.

Ensisijaisia yhdisteitä ovat aktiivisuudestaan johtuen yhdisteet, joissa R.| on -CF2CF2H.

Suositeltavia ovat myös yhdisteet, joissa R2 ja Ry toisistaan riippumatta, ovat -O-’' 4 66177 jossa Y.j on H, Cl tai F; suositeltavia ovat myös yhdisteet, joissa n on 1 tai 2. Suositeltavampia ovat yhdisteet, joissa R1 on -CF2CF2H, ja R2 ja R^,toisistaan riippumatta, ovat jossa Y.j on H, Cl tai F, ja n on 0, 1 tai 2.

Synteesin helppouden kannalta suositeltavimpia ovat yhdisteet, joissa R^ on -CF2CF2H, ja R2 ja R3» toisistaan riippumatta, ovat “©",· jossa Y^ on H, Cl tai F, ja n on 0 tai 2.

Erityisen arvokkaita ovat seuraavat yhdisteet: 4.5- bis-(4-fluorifenyyli)-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)-imidatsoli, 4 (tai 5)-(4-fluorifenyyli)-5- (tai 4) fenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluo-rietyylisulfonyyli)imidatsoli, 4.5- bis(4-kloorifenyyli)-2-(1,1, 2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)-imidatsoli, 4 (tai 5)-(4-kloorifenyyli)-5- (tai 4)fenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluori-etyylisulfonyyli-imidatsoli, 4.5- difenyyli-2-(1,1, 2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)imidatsoli, 4.5- difenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylitio)imidatsoli.

Keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on tulehduk-senvastaisten ja immuunisäätelyominaisuuksien lisäksi myös analgeet-tista vaikutusta. Tälläkin ominaisuudella on merkitystä hoidettaessa niveltulehdusta ja muita läheisiä tauteja. Yhdisteitä voidaan lisäksi käyttää yleisesti kivun lievittämiseen.

Erityisen edullisia analgeettisen aktiivisuutensa vuoksi ovat yhdisteet, joilla on kaava 5 66177 Ύ ^>^-S,0,n-R1 Y2 jossa on C1~C4-alkyyli, monohalogeeni- tai polyhalogeeni-C.|-C4~ alkyyli, ja Y^ ovat samanlaisia tai erilaisia ja ovat vety, 2-metoksi, 4-metoksi, 2-etoksi, 4-etoksi, 2-kloori tai 4-kloori, n on 0, 1 tai 2.

Näistä ovat arvokkaimpia yhdisteet, joissa on polyhalogee-ni-C.j-Cj-alkyyli, ja ovat samanlaisia tai erilaisia ja ovat vety, 2-metoksi, 4-metoksi, 2-etoksi, 4-etoksi, 2-kloori tai 4-kloori, sillä edellytyksellä, että ainakin toinen symboleista Y^ ja on 4-metoksi tai 4-etoksi, n on 0, 1 tai 2.

Erityisen edullisia analgeettisen aktiivisuutensa vuoksi ovat seuraavat yhdisteet: 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(1,1,2-trifluorietyylisulfonyyli)-imidatsoli, 4.5- bis(4-metoksifenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)-imidatsoli, 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsoli, 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfonyyli)imidatsoli, ja 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(trifluorimetyylisulfonyyli)imidatsoli.

Tautomeerlt

Kun R2 ja R^ ovat erilaisia, seuraavat kaksi rakennetta ovat tautomeerisia muotoja

R, o H

Vv r2v*v I | J H 3 6 66177

Farmaseuttiset suolat

Yhdisteiden, joissa n on 1 tai 2, farmaseuttisesti sopivia suoloja ovat terapeuttisesti hyväksyttävien metallien, kuten natriumin, kaliumin ja kalsiumin suolat.

Synteesi

Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa seuraavasti: bentsoiini tai substituoitu bentsoiini, jota on valmistettu artikkelissa Ide, W. S. and Buck, J. S., Organic Reactions, Voi. IV, s. 629 selitetyllä tavalla, kondensoidaan tiourean kanssa kiehuvassa dime-tyyliformamidissa tai muissa korkealla kiehuvissa polaarisissa liuottimissa, jolloin saadaan 4,5-diaryyli-2-merkaptoimidatsolia. Saman tapaista kondensointimenetelmää on selitetty artikkelissa Kochergin, P. M., Zhur, Obschei Khim., 31, 1093 (1961), ks. Chem. Abstr. 55, 23503f.

Myös 4,5-diaryyli-2-merkaptoimidatsoleja voidaan valmistaa lämmittämällä 4,5-diaryyli-imidatsoleja rikin kanssa lämpötilojen ollessa välillä 150 - 300°C joko liuottimen kanssa tai ilman sitä. Eräs tässä reaktiossa käytettäväksi soveltuva liuotin on tetramety-leenisulfoni. Tämä menetelmä on analoginen reaktion kanssa, jossa 1- metyylibentsimidatsoli muutetaan 2-merkapto-1-metyylibentsimidatso-liksi artikkelissa A. V. El’tsov ja K. M. Krivozheiko, ZhOrKh, 2, 189 (1966) selitetyllä tavalla.

-ryhmän liittäminen voidaan suorittaa alkyloimalla 4,5-diaryyli-2-merkaptoimidatsolia alkylointiaineen, kuten etyylijodidin tai 2,2,2-trifluorietyylitrikloorimetaanisulfonaatin, avulla. Nämä menetelmät ja muiden alkylointiaineiden käyttötapa ovat löydettävissä esimerkeistä.

4,5-diaryyli-2-merkaptoimidatsolin voidaan antaa reagoida myöskin tetrafluorietyleenin kanssa, jolloin saadaan 4,5-diaryyli- 2- (1,1,2,2-tetrafluorietyylitio)imidatsoli-johdannaisia. Samanlaisia tetrafluorietyleenin ja muiden fluorattujen olefiinien additioreak-tioita on selitetty artikkeleissa England, D. C., et ai., J. Am.

Chem. Soc. 82, 5116 (1960) ja Rapp, K. E. et ai., J. Am. Chem. Soc. 72, 3642 (1950).

7 66177

Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa myös saattamalla N-suojattu diaryyli-imidatsoli, kuten 4,5-difenyyli-1-(2-tet-rahydropyranyyli)-imidatsoli tai 1-bentsyylioksimetyyli-4,5-difenyy-li-4,5-difenyyli-imidatsoli, ensin reagoimaan vahvan emäksen, kuten n-butyylilitiumin, kanssa, ja sen jälkeen fluoratun alkyylisulfenyy-lihalogenidin, disulfidin tai sulfonihappoanhydridin kanssa. Valitsemalla suojaryhmä ja valmistusolosuhteet sopivasti saadaan haluttu 4,5-diaryyli-2-(substituoitu-tio tai sulfonyyli)-imidatsoli eristettyä suoraan. Yhdisteitä, joissa on CF^» voidaan sopivasti valmistaa tällä menetelmällä.

4,5-diaryyli-2-(substituoitu-tio)imidatsoli voidaan sitten hapettaa vastaavaksi sulfoksidiksi tai sulfoniksi käyttämällä hapettavia aineita, kuten m-kloori-perbentsoehappoa (Tweit, R. C. ym., J. Med. Chem. 16, 1161 (1973)), natriumperjodaattia (Leonard, N. J. ja Johnson, C. R., J. Org. Chem. 27, 282 (1962)), vetyperoksidia (Kochergin, P. M. ja Shchukina, M. N., J. Gen. Chem. USSR 25, 2289 (1955)), tai kaliumpermanganaattia (Rapp, K. E. et ai, loc. cit.).

Yleisen kaavan

R3 H

jossa R^ ja R^ ovat fenyyli tai substituoitu fenyyli, n on 0, 1 tai 2, R^ on fluorattu alkyyliryhmä, erityisesti CF^, mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa saattamalla N-suojattu diaryyli-imidatsoli kosketuksiin vahvan emäksen kanssa, sitten fluoratun alkyylisulfenyylihalo-genidi-disulfidin tai sulfonianhydridin kanssa, minkä jälkeen seuraa suojaryhmän poistaminen ja sitten haluttaessa rikin hapetus. N-suojaryhmän luonne on sellainen, että se kestää vahvoja emäksiä, mutta poistuu helposti happoreagensseilla tai hydrogenolyysillä. Esimerkkejä käyttökelpoisista suojaryhmistä ovat 2-tetrahydropyra-nyyli, bentsyylioksimetyyli, metoksimetyyli, metyylitiometyyli, /b-metoksietoksimetyyli ja 2-tetrahydrofuranyyli.

8 66177 N-suojattu diaryyli-imidatsoli saatetaan kosketuksiin vahvan emäksen, kuten alkalimetallialkyylien (n-butyylilitium ja vastaavat) , alkalimetallihydridin (natriumhydridi ja vastaavat), alka-limetallialkoksidien (natriummetoksidi, kalium-t-butoksidi ja vastaavat) , alkalimetalliamidien (natriumamidi, litiumdi-isopropyyli-amidi ja vastaavat), kanssa sopivissa ei-hydroksyyliliuottimissa, kuten eetterissä, tetrahydrofuraanissa, etyleeniglykolidimetyylieet-terissä, heksaanissa, tolueenissa jne. Reaktiolämpötila on edullisesti alueella 0 - 78°C, vaikka lämpötilat arvosta 0°C liuottimen kiehumispisteeseen saakka ovat käyttökelpoisia. Kompleksointiaineen, kuten tetrametyylietyleeniamiinin, lisääminen reaktioväliaineeseen parantaa usein tuotteen saantoa.

Täten tuotettu imidatsolianioni saatetaan sitten kosketuksiin suLfenyylihalogenidin, disulfidin tai sulfonianhydridin fluora-tun alkyylitioreagenssin kanssa. Esimerkkeinä tällaisista reagens-seista ovat trifluorimetaanisulfenyylikloridi, trifluorimetyylidi-sulfidi, trifluorimetaanisulfonianhydridi, pentafluorietaanisulfenyy-likloridi, disulfidi jne. Reaktion tämä osa suoritetaan myös alueella 0 - 78°C, vaikka lämpötilat arvosta 0°C liuottimen kiehumispisteeseen saakka ovat käyttökelpoisia.

Saatua N-suojattua 2-fluorattua alkyylitio- (tai sulfonyyli)- 4,5-diaryyli-imidatsolia käsitellään saattamalla se kosketuksiin orgaanisen tai epäorgaanisen hapon, kuten etikkahapon, suolahapon, rikkihapon tai vastaavan kanssa tai saattamalla se kosketuksiin Lewis' n happojen, kuten sinkkibromidin, titaanitetrakloridin jne. kanssa tai hydrogenolyysillä saattamalla se kosketuksiin vedyn ja sopivan katalyytin kanssa suojaryhmän poistamiseksi. Suojaryhmän hydro-lyysi voi joissakin tapauksissa tapahtua normaaleissa vesipitoisissa työolosuhteissa.

Saatu 2-fluorattu alkyylitio-4,5-diaryyli-imidatsoli (fluora-tun alkyylisulfenyylihalogenidin tai disulfidin tapauksessa) hapetetaan vastaavaksi sulfoksidiksi ja sulfoniksi käyttämällä hapetusai-neita, kuten perasideja (esim. m-klooriperoksibentsoehappo), natrium-metaperiodaattia, vetyperoksidia, kaliumpermanganaattia tai vastaavia.

66177

Farmakologiset kokeet ja niiden tulokset

Jotta saataisiin selville ja voitaisiin verrata uusien yhdisteiden ja normaalien lääkkeiden tulehdusta ehkäiseviä ja immuuni-suutta sääteleviä vaikutuksia, suoritettiin koeasarjoja käyttämällä standardimallia, jolla saavutetaan hyvä vastaavuussuhde ihmisillä todettavaan tehokkuuteen. Mallina on adjuvantilla rottin indusoitu niveltulehdus. Artikkelissa Federation Proceedings, Voi. 32, No. 2, 1973, "Models Used for the Study and Therapy of Rheumatoid Arthritis" - Symposium of the American Society for Pharmacology and Experimental Therapeutics - esitetään, että "rotalla esiintyvää moni-niveltulehdusta, joka on aiheutettu injektoimalla ihonsisäisesti Mycobacterium tuberculosis-mineraaliöljysuspensiota (adjuvantti), on käytetty laajalti seulottaessa lääkkeitä, jotka ovat tehokkaita käytettäviksi nivelreuman yhteydessä".

Todettu adjuvantilla indusoitu niveltulehdus rotilla

Koe, jota on käytetty primäärisesti tulehdusta ehkäisevän vaikutuksen määrittämiseksi.

Charles River Lewis-urosrottien (130 - 150 g) oikean takakä-pälän jalkapohjaan ruiskutetaan ihonalaisesti 0,1 ml adjuvanttia (Difco heat-killed, mineraaliöljyyn suspendoitua lyofilisoitua Mycobacterium butyricum-suspensiota 5 mg/ml). Kahteenkymmeneen kont-rollieläimeen ruiskutetaan mineraaliöljyä. Niveltulehduksen annetaan kehittyä eläimissä 2 viikon ajan. Mitataan käpälien tilavuudet (injektoimaton, vasen takakäpälä) ja adjuvantilla injektoidut rotat lajitellaan erilleen ja jaetaan käsittelyryhmiin, joissa on 10 yhtä vaikeasti sairastunutta eläintä. Niveltulehdusta sairasta-matttomat kontrollieläimet jaetaan kahteen 10 eläimen ryhmään. Rotille annetaan suun kautta letkuruokintaa käyttäen yhdistettä tai PVA-Acacia'a (polyvinyylialkoholia 1 %, arabikumia, USP. 5 % ja metyyliparabeenia 0,5 %; annos 10 ml/kg) tuona päivänä ja 6 seuraa-vana päivänä. Viimeisen annoksen antamisen jälkeisenä päivänä mitataan käpälien tilavuudet (injektoimaton, vasen takakäpälä) käyttämällä Ugo Basile'n Volume Differential Meter Model 7101-laitetta.

Niveltulehduskantrolli Käsittelyryhmä Käpälän tilavuus, keskiarvo (ml) _Käpälän tilavuus, keskiarvo (ml) ^

Niveltulehdus-kontrolli - Niveltulehdusvapaa kontrolli Käpälän tilavuus, keskiarvo (ml) Käpälän tilavuus, keskiarvo (ml) 10 661 77

Pienentyminen prosentteina kontrollieläinten keskimääräisestä käpälän tilavuudesta.

Pienentymis-%:n annos-reaktioregressioviivat on piirretty puolilogaritmipaperille silmämääräisesti sovittaen ja ED^ %:n pienentyminen kontrollieläinten käpälän tilavuudesta on määritetty tuloksia tarkastelemalla.

Toteamaton adjuvantilla indusoitu niveltulehdus rotilla

Koe, jota on käytetty primäärisesti yhdisteiden vaikutusten määrittämiseksi induktioprosessiin sisältyviin immuunisuusfeaktioi-hin ja ehkäisemään niveltulehduksen kehittymistä.

Charles River Lewis-urosrottien (130 - 150 g) oikean takakä-pälän jalkapohjaan ruiskutetaan ihonalaisesti 0,1 ml adjuvanttia (Difco heat-killed, lyofilisoitua Mycobacterium butyricum-suspensio-ta suspendoituna mineraaliöljyyn 5 mg/ml). Neljäänkymmeneen kontrol-lieläimeen, joissa ei ole niveltulehdusta, ruiskutetaan mineraali-öljyä. 20 rotan ryhmille annetaan yhdistettä suun kautta päivittäisinä kerta-annoksina (PVA-akaasia-väliaineessa, 10 ml/kg tai väliainetta letkuruokintaa käyttäen, jonka antaminen aloitetaan heti käpälän injektoinnin jälkeen, kaikkiaan 14 annosta. Injektoimattoman (vasemman) takakäpälän tilavuus mitataan 24 tuntia viimeisen annoksen antamisen jälkeen käyttämällä Ugp Basile'n Volume differentia-meter Model 7101-laitetta. ED^-q %:n pienentyminen kontrolliar-voon verrattuna määritetään edellä selostetulla tavalla.

Näiden yhdisteiden immuunisuutta säätelevien ominaisuuksien edelleen arvioimiseksi käytettiin kahta alla selostettua lisäkoetta. Jerne Hemolytic Plaque Assay-menetelmällä mitattiin yhdisteiden vaikutusta spesifistä vasta-ainetta tuottaviin soluihin (B-lymfosyy-tit). B-lymfosyyttien ja T-lymfosyyttien (osallisia solun epäsuoraan immunisuuteen) suhteelliset määrät määritetään fluoroivaa vasta-aine-värjäysmenetelmää käyttäen.

Modifioituja Jerne'n pernasolun verenpunaa liuottavan täplän määr itysmenetelmiä Näissä tutkimuksissa käytettiin N. K. Jerne1n ja A. A. Nor-din'in selostaman menetelmän (Science 140, 450 (1963)) muunnelmaa. Rotille (Charles River Lewis), joilla oli adjuvantilla indusoitu niveltulehdus, ja niveltulehdusvapaille kontrollieläimille annet- " 66177 tiin suun kautta kerran päivässä PVA-akaasia-väliainetta (polyvi-nyylialkoholia 1 %, arabikumia 5 %, metyyliparabeenia 0,5 % vedessä) tai väliaineessa olevia yhdisteitä 14. päivästä (adjuvantin in-jektoinnista laskien) alkaen 20. päivään saakka. Eläimet herkistettiin lampaan punaisilla verisoluilla (SRBC) (0,2 ml 10-% suspensiota = 2 - 3 x 10° solua) antamalla tätä laskimonsisäisesti 17. päivänä. SRBC-erät (Microbiological Associates) pestiin ennen injek-tointia 3 kertaa 0,9-% natriumkloridiliuoksessa. 21. päivänä rotat nukutettiin 1-% natriumpentobarbitaalilla (intraperitoneaalinen ruiske) ja pernat poistettiin. Kukin perna pantiin ruostumattomasta teräksestä valmistetulle ristikolle, joka oli ripustettu jäähau-teessa olevan muovidekanterin päälle ja maseröitiin varovaisesti lasista mäntäpumppua käyttäen. Solut pestiin verkon läpi dekanteriin käyttämällä Pasteru'in pipettiä noin 10 ml:n suuruisen Eagle's Minimal Essential Medium (MEM) -erän lisäämiseksi maseroinnin aikana, kunnes ristikolle jäi vain kuitumaista materiaalia. Suurten osasten annettiin laskehtia erilleen noin 5 minuutin ajan ja noin 5 ml sakan päällä olevasta nesteestä siirrettiin muoviputkeen. Laimennukset 1:10 ja 1:20 suoritettiin lisäämällä kylmää MEM-nestettä.

Levykoe 2 ml 0,7-% agaroosia (1,4 % laimennettu 1:2 2X Eagle MEM:llä) ja 0,2 ml 10-% SRBC-suspensiota esilämmitettiin 45°C:ssa vesihauteessa. Lisättiin 20 lambdaa pernasolulaimennusta, sekoitettiin varovaisesti ja kaadettiin alustalle, jossa oli 2 ml 1,4-% agaroosia muovisessa 60 x 15 mm:n kokoisessa petri-maljassa. Levyjä idätettiin 37°C:ssa 1,5 tuntia kosteassa hautomiskaapissa. Lisättiin 1,5 ml marsukomplementtia (laimennettuna 1:10 MEM:llä) ja hautomista jatkettiin vielä tunnin ajan.

Laskettiin suurennusta käyttämättä hemolyysialueet (täplät) levyä kohden diffuusia valolähdettä vasten. Olettaen kunkin täplän muodostuneen yhden pernasolun kehittämästä hemolysiinistä, laskettiin kunkin laimennuksen osalta täplän muodostamien solujen (PEC) lukumäärä miljoonaa pernasolua kohden. Statistisiin laskelmiin (keskiarvo, standardivirhe ja "f-koe) sisältyi PFC/miljoona-arvo kunkin pernan kunkin laimennuksen osalta.

66177 12

Rotan pernan B-solujen immuunifluoroiva vasta-aine-väri

Menetelmä

Adjuvantti-niveltulehduksen kehittämismenetelmässä B-solu-%:n määrityksissä käytettiin rottia (Charles River Lewis). Rotille annettiin suun kautta kerran päivässä PVA-akaasia (polyvinyylialkoholia 1 %, arabikumia 5 %, metyyliparabeenia 0,5 % vedessä) - väliainetta tai väliaineessa olevaa lääkettä. Hoito aloitettiin 3 päivää ennen adjuvantin antoa. Päivänä 0 rottien vasempaan takakäpälään injektoitiin ihonalaisesti 0,1 ml (5 mg/ml) Mycobacterium butyricum'in (Dif-co-dried, heat-killed) mineraaliöljy-suspensiota. Lääkekäsittelyä jatkettiin 7. päivän loppuun. Pernat otettiin talteen 8. päivänä adjuvantin antamisen jälkeen.

Pernasolususpensio valmistettiin maseroimalla pernat ruostumattomasta teräksestä tehdyllä seulalla väliaineeseen RPMI 1640. Suurten osasten annettiin laskehtia ja päällä oleva kerros siirrettiin puhtaisiin putkiin ja pyöritettiin 10 minuuttia kierrosnopeu-della 800 kierr./min. IEC-International Centrifuge Model K, Sige 2, -sentrifugissa. Solunappi suspendoitiin uudelleen 0,83-% NH^Cl-liuok-seen (pH säädetty arvoon 7,0 natriurahydroksidilla) punasolujen liuottamiseksi (noin 1 osa solutiivistettä 3 osaan NH Cl:a). Näitä sus- 4 pensioita pidettiin jäissä 5-7 minuuttia ja sen jälkeen niitä sekoitettiin nopeudella 800 kierr./min. 10 minuutin ajan. Solut pestiin kahdesti Dulbecco'n fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) ja suspendoitiin lopuksi Dulbecco'n PBS-liuokseen. Lopullinen solukon-sentraatio oli sellainen, että tiputettaessa yksi tippa solususpen-siota mikroskooppilasille, joka oli päällystetty peitelasilla, kenttään saatiin 10 - 15 solua suurella suurennuksella. Arvioimalla so-lunapin koko ja kokemuksen perusteella tähän lopulliseen solususpen-sioon lisättiin 8 - 10 ml Dulbecco'n PBS-liuosta pernaa kohden.

Immunofluoroivaa väritystä varten 0,2 ml solususpensiota sekoitettiin 0,2 ml:n kanssa suhteessa 1:4 laimennettua valmistetta Fluorescein Isothiocyanate conjucated Rabbit-Anti-Rat IngG (Miles-Yeda Laboratories). Soluja haudottiin 2 - 4°C:ssa tunnin ajan, sekoitettiin 10 minuuttia nopeudella 800 kierr./min., pestiin kahdesti 2 ml:ssa Dulbecco'n PBS:ää ja suspendoitiin uudelleen 0,2 ml:aan Dulbecco'n PBS:ää. Pisara solususpensiota pantiin mikroskooppilevylle, peitettiin peitelevyllä ja tutkittiin käyttämällä valaistus- ja 66177 fluorointi-mikroskopiaa. Pernasuspensiossa laskettiin olevan 200 -300 solua. Fluoroivien lymfosyyttien tai B-solujen lukumäärä ilmoitettiin prosentteina.

Arvot, jotka liittyvät edellä selostetuissa kokeissa todettuihin tämän sarjan eräiden yhdisteiden vaikutuksiin, on koottu taulukkoihin IV, V ja VI.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet olivat yhtä tehokkaita käsiteltäessä todettua niveltulehdusta rotilla (tulehdusta ehkäisevä vaikutus) ja estettäessä ennakolta niveltulehduksen kehittymistä rotilla (ei-sitovasti todettua niveltulehdusta), kuten taulukossa IV on osoitettu. Normaalit tulehduksia ehkäisevät lääkkeet, kuten indometasiini ja fenyylibutatsoni, olivat tehottomampia niveltulehduksen kehittymistä ehkäiseviä aineita rotille annettuina kuin hoidettaessa sitovasti todetussa niveltulehduksessa esiintyvää tulehdusta. Immuunisupressiivinen lääke, syklofosfamidi, esti tehokkaammin niveltulehduksen kehittymistä rotilla kuin hoidettaessa rotilla sitovasti todettua niveltulehdusta. Tämän sarjan yhdisteillä osoittautui olevan näissä kokeissa ainutlaatuisia ominaisuuksia.

Adjuvantilla indusoitua niveltulehdusta sairastavilla rotilla on voimakkaasti modifioidut immunologiset systeemit, mikä ilmenee täpliä muodostavien (vasta-ainetta kehittävien) solujen (PFC) lukumäärän lisääntymisestä pernasolususpensioissa (hemolyyttinen täp-lämääritys, taulukko V). Niveltulehdusta sairastavien rottien käsitteleminen tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä pienensi PFC-luku-määrää. Indometasiinikäsittelyllä ei ollut mitään vaikutusta PFC-lukumäärään kun taas käsittely syklofosfamidilla pienensi PFC:n normaalia paljon pienemmäksi. Tämän sarjan yhdisteet osoittautuivat tässä kokeessa ainutlaatuisen aktiivisiksi.

Adjuvantilla indusoitua niveltulehdusta sairastavista rotista saaduissa pernasolususpensioissa on suurempi osuus B- (vasta-ainetta kehittäviä) lymfosyyttejä kuin T-lymfosyyttejä (soluimmuunisuuden välittäjiä) verrattuna normaaleista rotista saatuihin soluihin (taulukko VI) . Niveltulehdusta sairastavien rottien käsitteleminen tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä pienensi B-lymfosyyttien osuuden normaaliksi. Indometasiinikäsittelyllä ei ollut mitään vaikutusta lymfosyytti-populaatioon, kun taas käsittely syklofosfamidilla pienensi B-lymfosyyttien osuuden normaalia pienemmäksi.

14 661 77

Fenyylikinoni-vääntelykoe

Yhdisteiden analgeettisen aktiivisuuden toteamiseen käytetty standardimenetelmä, joka korreloi hyvin ihmisellä saadun vaikutuksen kanssa, on Siegmund'in et ai., Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 95, 729 (1957) kokeesta muunnettu fenyylikinoni-vääntelykoe. Siinä koe-yhdiste suspendoidaan 1-% metyyliselluloosaan ja annetaan oraalisesti paastonneille (17 - 21 tuntia) valkeille naarashiirille, 5-20 eläimelle kaksoiskoetta kohti. 24 minuuttia myöhemmin annetaan int-raperitoneaalisesti injektiona fenyylikinonin vesiliuosta (0,01 % fenyyli-p-kinonia) 0,20 ml hiirtä kohti. 30 minuuttia koeyhdisteen oraalin annon jälkeen hiiriä tarkkaillaan tehden havaintoja niiden vääntelystä, joka osoittaa fenyylikinonin aiheuttamaa kipua. 50 %:lla hiiristä saatu tehokas analgeettinen annos (ED^q) laskettiin Thompson'in, Bact. Rev. 11, 115 - 145 (1947) liikkuvan keskiarvon menetelmällä. Havaintoja tehtiin useilla yhdisteillä myös maksimi-vaikutuksen ajankohdan suhteen. Nämä tulokset on koottu taulukkoon VII.

66177

Taulukko ι 4,5-diaryyli-2-:(substituoitu-tio)imidatsolit ja niiden rotta-adjutoantti-niveltulehdusarvbt. ^

V /~S_R

v-40j '

Adjuvantti- niveltulehdus X Y R Sp.(°C) (ED5q %) (2 4-F 4-CH3S CF3 105 - 155 (5 1,1 4-CH30 4-CH30 CH3CH2CH2 152-153 9,0 4-F 4-F CH3 222 - 223,5 3,5 4-CH30 4-CH30 CHF2 170,5 - 172 1,8 H H CHF2 227 228 21 4-Cl 4-Cl CHF2 222 - 223 0,35 4-F 4-F CHF2 192,5 - 194 0,42 4-C1 4-F CH3 222 - 223 3,8 4-CF3 H CH3 176 - 177 20 4-F 4-CF3 CH3 196-197 17 4-C1 4-CF3 CH3 214 - 215 3,6 3,4-0CH20 3,4-0CH20 CH3 201 - 202 20 4-CH.O 4-CH.O CF_CH 150 - 151 (3 20 3 3 3 2 4-Cl 4-Cl 212 “ 213 5,0 (4 4-CH30 4-CH30 108 ~ 109 4,7 4-CH3 4-CH^-O CH2=CHCH2 167 - 167,5 22 4-CH30 4-CH30 CH3COCH2 115-117,5 9,4 4-CH30 4-CH30 CH3SOCH2 84,5 τ 86,5 52

(1 tätä biologista systeemiä on selostettu aikaisemmin (2 yksiköt mg/kg (3 polymorfin sp. oli 119 - 120°C (4 polymorfin sp. oli 146°C

(5 massaspektri: m/e = 384 16 661 77

Taulukko 11 4,5-diaryyli-2-(polyhalogeenialkyylitio)imidatsolit ja niiden rotta-adjuvantti-niveltulehdusarvot ^ *

j -SCF2CFH

Adjuvantti- niveltulehdus x Y z sP. (°c) (ed5Q %) (2 4-CH^O 4-CH^O F 134 - 136 4,2 4-Cl 4-Cl F 222,5-223,5 0,3 4-F 4-F F 220 - 221,5 0,075 H H Cl 187 - 188 3,9 4-Cl 4-F F 206,5 - 207,5 0,18 4-CH3 4-CH3 F 204 - 205 18 4-CH30 H F 175 - 175,5 20 4-C1 H F 205 - 206 0,3 3,4-0CH20 3,4-0CH2O F 204 - 205,5 10 4-CF3 H F 202 - 204 4,5 4-F 4-CF3 F 182,5-183,5 1,5 4-F H F 196 - 197,5 0,2 3-C1 3-Cl F 208 - 209 1,2 4-CH30 4-CH30 Br 151 - 153 10 H H Br 184 - 186 11 4-(CH3)2N H F 189 - 192,5 2,5 H H F 218 - 219,5 0,75 4-F 4-CH3S F 155,5 - 157 1,6 (1 tätä biologista systeemiä on selostettu aikaisemmin (2 yksiköt mg/kg 17 661 77

Taulukko III

4,5-diaryyli-2-(alkyylisulfinyyli)imidatsolit ja 4,5-diaryyli-2-(alkyylisulfo-nyyli)imidatsolit ja niiden rotta-adjuvantti-niveltulehdusarvot *

Adjuvantti-nive1tulehdus (0 X Y R n sp.(°C) (ED50 %) H H CF CH 1 198 (haj.) 48 H H 2 226,5 (haj.) 12 4-CH30 4-CH^O CF3CH2 1 193,5 (haj.) 10 4-CH30 4-CH30 ^3^2 2 173,5 - 174,5 3,8 4-C1 4-C1 ^3^2 1 214 (ha3·* 3,0 4-C1 4-C1 CF3CH2 2 241 4'5 4-CH30 4-CH30 ^3^2 1 161 “ 162 10 4-CH30 4-CH30 ^3^2 2 136 - 137 5,2 4-CH30 4-CH30 CH2=CHCH2 1 118-119 (haj.) 11 4-CH O 4-CH.O CH =CHCH_ 2 162 - 163 11 3 3 2 2 4-CH30 4-CH30 CH3 1 167-168,5 6,2 4-CH30 4-CH30 CH3 2 142 - 143 6,4 4-Cl 4-C1 ^3^ 1 214 (ha3·* 3,0 4-C1 4-C1 CH 1 202 (haj.) 2,3 3 H H HCF2CF2 2 239 - 240 0,13 4-CH30 4-CH30 CH3CH2CH2 1 143 - 144,5 13 18 ✓ 1 7 7

Taulukko III (jatkuu) ®

Adjuvantti-n ive1tu1ehdus o , (2 X Y R n sp.( c) (ED50 %) 4-CH30 4-CH30 CH3(CH2)2 2 152 - 153 9 4-CH30 4-CH30 (CH^CH 2 175 - 176 30 4-CH30 4-CH30 HCF2CF2 2 156 - 157 1,1 4-CH30 4-CH30 HCF2CF2 1 162,5-163,5 2,4 4-F 4-CH3S02 CF2CF2H 2 221-223 37 % (15) 4-F 4-CH3S02 CH3 2 (3 1,8 H H HCF2CF2 1 181 - 182 0,18 4-C1 4-C1 CH3 2 255 - 256 2,0 4-Cl 4-Cl HCF2CF2 1 198 (ha3·) 0,2 4-C1 4-C1 HCF2CF2 2 235-236,5 0,2 4-F 4-F CF3CH2 2 247 (ha3·) 3,5 4-F 4-F HCF2CF2 2 241,5-242 0,025 4-F 4-F CH3 2 239 - 240 4,5 H H C1FCHCF2 2 213-214 0,25 4-CH,0 4-CH O CHF 2 186 - 187 0,5 3 3 2 H H CHF2 2 265 0,35 H H HC12CF2 2 223-223,5 1,5 4-Cl 4-Cl CHF2 2 244 - 245 0,35 4-F 4-F CHF2 2 246,5 - 247 0,1 4-Cl 4-F CH3 2 226 - 227 2,8 4-C1 4-F HCF2CF2 2 212 - 213 0,091 4-CH3 4-C®3 HCF2CF2 2 225 - 226 0,35 4-CH30 H HCF2CF2 2 169 - 170 1,1 2-Cl 4-CH JO HCF CF„ 2 176 - 177 7,2 3 2 2 1 9

Taulukko III (jatkuu) 661 77

Adjuvantti- niveltulehdus X Y R n sp. (°C) (ED50 %) (2 3-CH30 3-C3J30 HCF2CF2 2 155,5 - 156,5 4,0 4-Cl H CH3 2 169 - 170 30 4-Cl H HCF2CF2 2 206 - 207,5 0,065 4-F 4-CF3 CH3 2 189-190 3,7 4-C1 4-CF CH 2 224 - 225 2,2 3 ·* 4-CF3 H HCF2CF2 2 188 - 189 2,4 4-C1 4-CF3 HCF2CF2 2 208 τ 209 1,8 2- Cl 2-C1 HCF2CF2 2 183 - 184 0,8 4-F H HCF2CF2 2 228 - 229 0,027 3- C1 3-C1 HCF CF 2 208 - 209 0,16 2 2 4- C1 4-Cl CHF2 1 203 - 206 0,19 4-CH30 4-CH30 BrFCHCF2 2 187 - 188 2,4 4-CH3 H HCF2CF2 2 202 - 203 0,6 3,4-0CH20 3,4-0CH20 HCF2CF2 2 212 - 214 1,0 4-CH30 4-CH30 CH3SCH2 1 142,5-143,5 28 4-CH30 4-CH30 CH3COCH2 1 138 - 140 56 4-CH30 4-CH30 CH3S02CH2 2 202 - 203 54 4-CH30 4-CH30 CH3COCH2 2 134 - 135 18 4-F 4-N02 CF2CF2H 2 208 - 211 0,37 4-F 4-NH2 CF2CF2H 2 223 - 235 (18 %) 3 4-N02 4-N02 CF2CF2H 2 240-240,5 8,5 (1 tätä biologista systeemiä on selostettu aikaisemmin (2 yksiköt mg/kg (3 Analyysi; laskettu C 45,6, H 2,7, N 6,3 todettu C 45,7, H 2,8, N 6,3

Massaspektri: m/e = 448 20 6 6 1 7 7

Taulukko IV Adjuvantilla indusoitu niveltulehdus rotilla ED50 % mg/kg

Sitovasti todettu Ei-sitovasti todet-_Yhdiste_niveltulehdus_tu niveltulehdus 4.5- difenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylitio)- imidatsoli 1,5 2,3 4.5- di(4-kloorifenyyli)- 2-(1,1,2-trifluori-2-kloori- etyylitio)imidatsoli 0,2 0,06 4.5- di(4-fluorifenyyli)-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyyli- sulfonyyli)imidatsoli 0,03 0,03 4-(4-kloorifenyyli)-5-fenyyli-2-(1,1,2,2-tetra-fluorietyylisulfonyyli)-imidatsoli 0,1

Fenyylibutatsoni 10 35

Indometasiini 0,3 3

Syklofosfamidi 10 1/5 66177 21

Taulukko V

Hemolyyttisen täplän määritys niveltulehdusta sairastavien, niveltulehdusta sairastamattomien ja lääkkeellä käsiteltyjen niveltulehdusta sairastavien rottien pernasolususpensioissa.

Täplän muodostavien

Suun kautta an- solujen keskiarvo-luku-nettu päivittäi- määrä milj. pernasolua Yhdiste_nen annos mg/kg kohti (N = 20)_ 4.5- difenyyli-2-(1,1,2,2- tetrafluorietyylitio)- 1,5 197 imidatsoli 15 320 4.5- di(4-kloorifenyyli)- 2-(1,1,2-trifluori-2- 0,1 788 kloori-etyylitio)imidatsoli 1,0 488 4.5- di(4-fluorifenyyli)-2- (1,1,2,2-tetrafluorietyyli- 0,03 499 sulfonyyli)imidatsoli 0,3 439 i *

Niveltulehduskontrolli - 863 (*

Ei-niveltulehduskontrolli - 323 / **

Indometasiini 1,0 720

Syklofosfamidi 5,0 25 (* Arvot laskettu 3 kokeen perusteella (** Arvot laskettu 2 kokeen perusteella 66177 22

Taulukko VI

B-lymfosyyttien osuus niveltulehdusta sairastamattomien ja lääkkeillä käsiteltyjen niveltulehdusta sairastavien rottien perna-solususpensioissa määritettynä fluoroivan vasta-aine-värjäysmenetel-män avulla.

Suun kautta annettu Keskim.

Yhdiste_päivittäinen annos mg/kg B-solu-% 4.5- difenyyli-2-(1,1,2,2- tetrafluorietyylitio)- 1,5 37 imidatsoli 15 33 4.5- di(4-kloorifenyyli)-2- (1,1,2-trifluori-2-kloori- 0,2 39 etyylitio)imidatsoli 2,0 38 4.5- di(4—fluorifenyyli)-2- (1,1,2,2-tetrafluorietyyli- 0,03 40 sulfonyyli)imidatsoli 0,3 43 4-(4-kloorifenyyli)-5-fenyyli-2-(1,1,2,2-tetra- fluorietyylisulfonyyli)- 0,1 48 imidatsoli 1,0 42 (*

Niveltulehdus-kontrolli - 57 (*

Ei-niveltulehdus-kontrolli - 42

Fenyylibutatsoni 20 53

Indometasiini 0,5 57

Syklofosfamidi 5 25 (* Arvot laskettu 7 kokeen perusteella 66177 23

Taulukko VII

Analgeettinen vaikutus fenyylikinoni-vääntelykokeessa lvv n"' X Y R n ED50 mg/kg Maksimivaikutuksen ajankohta (min) 4-CH30 4-CH30 CHF2 2 1,5 4-CH30 4-CH30 CF3 2 0,045 240 4-CH30 4-CH30 1 0,86 60 4-CH30 4-CH30 CH2CF3 0 1,2 240 4-CH30 4-CH30 CH2CF3 2 0,58 60 4-CH30 4-CH30 CE^CI^F 2 0,25 160 4-CH30 4-CH30 CF2CHF2 1 0,8 4-CH30 4-CH30 ^2^2 2 0,11 120 4^S30 4-CH3O CF2fflBrF 2 2,8 4-CH30 2-Cl ce-£sf2 2 0,56 60 4-CH30 H CF2CHF2 2 0,33 240 4-C2H50 H CE^CHE^ 2 0,95 120 H H CF2CHF2 2 0,48 120 24 6 6 1 77

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.

Osat ovat paino-osia, ellei toisin ole mainittu. Lämpötila on ilmoitettu Celsius-asteina.

Esimerkki 1 4,5-difenyyli-2-(2,2,2-trifluorletyylitio)imidatsoli

Seosta, jossa oli 4,5-difenyyli-2-merkaptoimidatsolia (71,9 g, 0, 285 moolia), 2,2,2-trifluorietyyli-trikloorimetaanisulfonaat-tia (80,3 g, 0,285 moolia), trietyyliamiinia (28,8 g, 0,285 moolia) ja tolueenia (700 ml), keitettiin typpisuojakaasussa 4 tuntia. Annettiin seoksen jäähtyä huoneen lämpötilaan, ja suodatettiin eroon 13,4 g reagoimatonta 4,5-difenyyli-2-merkaptoimidatsolia. Suodos pestiin kahdesti vedellä, ja orgaanisen faasin jäähtyessä tuote kiteytyi. Saatiin 46,2 g (49 %) 4,5-difenyyli-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)-imidatsolia lähes värittöminä kiteinä, sp. 185,5 - 187°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C17H13F N S: C 61,06 H 3,92 N 8,33

Todettu: C 61,28 H 3,97 N 8,49

Esimerkki 2 4.5- difenyyli-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfinyyll)imidatsoli Seokseen, jossa oli 4,5-difenyyli-2-(2,2,2-trifluorietyylitio) imidatsolia (13,9 g, 0,0416 moolia) ja kloroformia (75 ml) jäähdytettynä jäähauteessa, lisättiin tiputtamalla 86,4-% m-klooriper-bentsoehappoa (8,4 g, 0,042 moolia) liuotettuna kloroformiin (85 ml). Yön kestäneen sekoittamisen jälkeen seos pestiin kyllästetyllä nat-riumvetykarbonaatiliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin, jolloin saatiin 12,3 g raakaa tuotetta. Kiteyttämällä uudelleen tolueenista saatiin 10,1 g (69 %) 4, 5-difenyyli- 2-(2,2,2-trifluorietyylisulfinyyll)imidatsolia värittöminä prismoina, sp. 198° (hajosi).

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle ^F^N^OS: C 58,28 H 3,74 N 8,00

Todettu: C 58,27 H 3,76 N 8,10

Esimerkki 3 4.5- difenyyli-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfonyyli)imidatsoli Seokseen, jossa oli 4,5-difenyyli-2-(2,2,2-trifluorietyylitio) imidatsolia (15,7 g, 0,0470 moolia) ja kloroformia (100 ml) jäähdytettynä jäähauteessa, lisättiin tiputtamalla 86,4-% m-kloori- 25 661 77 perbentsoehappoa (19,0 g, 0,0952 moolia) liuotettuna kloroformiin (200 ml). Seosta sekoitettiin 4 vuorokautta huoneen lämpötilassa, lisättiin tetrahydrofuraania, ja seos pestiin kyllästetyllä natrium-vetykarbonaatilla, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin, jolloin saatiin 18,9 g raakaa tuotetta. Kiteytettiin 2 kertaa uudestaan asetonitriilistä, jolloin saatiin 8,8 g (51 %) 4,5-difenyyli-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfonyyli)imidatsolia värittöminä neulasina, sp. 228° (hajosi).

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C 55,73 H 3,58 N 7,65 F 15,56 Todettu: C 56,18 H 3,95 N 7,52 F 15,44

Esimerkki 4 4,5-bis-(4-metoksi-fenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)-imidatsoli

Seosta, jossa oli 2-merkapto-4,5-bis(4-metoksifenyyli)imidatsolia (31,2 g, 0,100 moolia), 2,2,2-trifluorietyyli-trikloorimetaa-nisulfonaattia (31,0 g, 0,110 moolia), trietyyliamiinia (11,1 g, 0,110 moolia), ja tolueenia (300 ml), keitettiin 6 tuntia typpisuo-jakaasussa. Seos jäähdytettiin, pestiin 3 kertaa vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja konsentroitiin, jolloin saatiin 43,4 g raakaa tuotetta, joka kromatografoitiin kolonnissa, jossa oli 450 g si-likageeliä, kloroformilla eluoiden. Pääfraktion jäännös kiteytettiin uudelleen metyylisykloheksaanista, jolloin saatiin 21,5 g (55 %) 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsolia lähes värittöminä kiteinä, sp. 119 - 120°. Polymorfisen muodon sp. on 150 - 151°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle gH,j ^F^^C^S: C 57,86 H 4,34 N 7,10

Todettu: C 57,96 H 4,01 N 7,09

Esimerkki 5 4,5-bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfinyyli)-imidatsoli

Meneteltiin kuten esimerkissä 2, mutta käytettiin 4,5-difenyy-li-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsolin asemasta 4,5-bis(4-metoksifenyyli) -2-(2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsolia, jolloin saatiin 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfinyyli)imid- 26 66177 atsolia. Kiteyttämällä raakatuote uudelleen vesipitoisesta etanolista saatiin 83 %:n saannoin puhdasta tuotetta, sp. 193,5° (hajosi). Analyysi:

Laskettu yhdisteelle ^Η17F3N203S: C 55,60 H 4,18 N 6,83

Todettu: C 55,52 H 3,80 N 6,77

Esimerkki 6 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfonyyli)-imidatsoli

Seokseen, jossa oli 4,5-bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-tri-fluorietyylitio)imidatsolia (6,0 g, 0,015 moolia) ja kloroformia (75 ml) jäähdytettynä jäähauteessa, lisättiin tiputtamalla 86,4-% m-klooriperbentsoehappoa (6,1 g, 0,031 moolia) kloroformiin (75 ml) liuotettuna. Yön ajan huoneen lämpötilassa sekoittamisen jälkeen seos pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja konsentroitiin, jolloin saatiin 7,1 g raakaa tuotetta. Kiteyttämällä uudelleen 1-klooributaanista saatiin puhdasta 4,5-bis(4-metoksifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfonyy-li)imidatsolia värittöminä neulasina, sp. 173 - 174°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C^gH^F^^O^S: C 53,51 H 4,02 N 6,57 Todettu: C 53,47 H 4,06 N 6,55 53,81 3,69 6,59

Esimerkki 7 4.5- bis(4-kloorifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsoli

Seosta, jossa oli 4,5-bis (4-kloorifenyyli)-2-^nerkaptoimidatso-lia (32,1 g, 0,100 moolia), 2,2,2-trifluorietyylitrikloorimetaani-sulfonaattia (28,1 g, 0,100 moolia), natriummetylaattia (5,9 g, 0,109 moolia), ja etanolia (300 ml), keitettiin 3 tuntia. Reaktio-seos kaadettiin veteen, ja kiinteä aine koottiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin. Tätä kiinteätä ainetta (43,9 g) sekoitettiin sitten yön ajan etyyliasetaatissa (400 ml). Seos suodatettiin ja liuos poistettiin suodoksesta, jolloin saatiin 21,7 g jäännöstä. Kiteyttämällä uudelleen tolueenista saatiin 15,1 g (37 %) puhdasta 4,5-bis(4-kloorifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsolia värittöminä kiteinä, sp. 212 - 213°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C1 ?H1 .jCljF^S: C 50,63 H 2,75 N 6,95 Todettu: C 50,87 H 3,05 N 6,69 27 66177

Esimerkki 8 4.5- bis(4-kloorifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfinyyli)-imidatsoli

Menettelemällä kuten esimerkissä 2, mutta käyttäen 4,5-difenyy-li-2-(2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsolin asemasta 4,5-bis(4-kloorifenyyli) -2- (2,2,2-trifluorietyylitio)imidatsolia, saatiin 4,5-bis-(4-kloorifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfinyyli)imidatsolia. Kiteyttämällä raakatuote uudelleen asetonitriilistä saatiin 77 %:n saannoin puhdasta tuotetta, sp. 214° (hajosi).

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C.j ^C^F^^OS: C 48,70 H 2,64 N 6,68 Todettu: C 48,97 H 2,89 N 6,47

Esimerkki 9 4.5- bis(4-kloorifenyyll)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfonyyli)-imidatsoli

Seokseen, jossa oli 4,5-bis-(4-kloorifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylitio) imidatsolia (5,3 g, 0,013 moolia) ja kloroformia (50 ml) jäähdytettynä jäähauteessa, lisättiin tiputtamalla 86,4-% m-kloori-perbentsoehappoa (5,3 g, 0,027 moolia) liuotettuna kloroformiin (60 ml). Yön ajan huoneen lämpötilassa sekoittamisen jälkeen seosta keitettiin 15 minuuttia, jäähdytettiin, ja kiinteä aine koottiin talteen ja pestiin kylmällä kloroformilla. Kiinteä aine liuotettiin sitten eetterin ja tetrahydrofuraanin seokseen, ja saatu liuos pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin pestiin, jolloin saatiin 5,9 g väritöntä kiinteätä jäännöstä, joka kiteytettiin uudelleen nitrometaanista (125 ml). Saatiin 4,1 g (72 %) puhdasta 4,5-bis(4-kloorifenyyli)-2-(2,2,2-trifluorietyylisulfonyyli)imidatsolia värittöminä neulasina, sp. 241° (hajosi).

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C1?H1 .jCl^l^O S: C 46,91 H 2,55 N 6,44 Todettu: C 47,13 H 2,67 N 6,56 47,29 2,58 6,58

Esimerkki 10 2-etyylitio-4,5-bis(4-metoksifenyyli)imidatsoli Suspensioon, jossa oli 2-merkapto-4,5-bis(4-metoksifenyyli)-imidatsolia (31,2 g, 0,100 moolia) metanolissa (200 ml), lisättiin yhtenä eränä natriummetylaattia (6,5 g, 0,12 moolia), ja seosta se- 66177 28 koitettiin 15 minuuttia. Lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli jodietaania (17,1 g, 0,11 moolia) metanolissa (50 ml) ja seosta lämmitettiin kiehuttaen 4,5 tuntia. Kun seosta oli sekoitettu yön yli huoneen lämpötilassa, se kaadettiin veteen, ja saostuva kiinteä aine koottiin yhteen, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 33,0 g raakatuotetta. Kiteyttämällä uudelleen vesipitoisesta etanolista saatiin 28,8 g (85 %) puhdasta 2-etyylitio-4,5-bis(4-metoksi-fenyyli)imidatsolia, sp. 108 - 190°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C 67,03 H 5,92 N 8,23

Todettu: C 66,96 H 6,20 N 7,85

Esimerkki 11 2-allyylitio-4,5-bis(4-metokslfenyyli)imidatsoli Seosta, jossa oli 2-merkapto-4,5-bis(4-metoksifenyyli)imidatsolia (31,2 g, 0,100 moolia), allyylibromidia (13,1 g, 0,108 moolia), trietyyliamiinia (20,2 g, 0,200 moolia) ja kloroformia (500 ml), lämmitettiin yön ajan kiehuttaen. Sitten lisättiin allyylibromidia (4,8 g, 0,040 moolia) ja kiehuttamista jatkettiin 2 tuntia. Lisättiin vielä 2 erää (4,8 g) allyylibromidia, jolloin kummankin lisäyksen jälkeen kiehutettiin 2 tuntia. Kirkas liuos jäähdytettiin, pestiin 3 kertaa vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja konsentroitiin. Jäännös trituroitiin eetterin kanssa, ja kiinteä aine koottiin talteen, jolloin saatiin 31,5 g raakatuotetta. Kiteytettäessä uudelleen vesipitoisesta etanolista saatiin 26,7 g (76 %) puhdasta 2-allyylitio-4,5-bis(4-metoksifenyyli)imidatsolia, sp. 167 - 167,5°. Analyysi:

Laskettu yhdisteelle c2oH20N2°2S: C 68'16 H 5'72 N 7'95 Todettu: C 67,22 H 5,87 N 7,81

Esimerkki 12 4,5-bis(4-metokslfenyyli)-2-(metyylitiometyylitio)imidatsoli Korvaamalla esimerkin 11 allyylibromidi kloorimetyylimetyyli-sulfidillä saatiin 4,5-bis(4-metoksifenyyli)-2-(metyylitiometyylitio) imidatsolia, sp. 171 - 172°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle : C 61,26 H 5,41 N 7,52

Todettu: C 61,32 H 5,57 N 7,32 29 661 77

Esimerkki 13 2-etyylisulfinyyli-4,5-big(4-metokslfenyyli)imidatsoli Liuokseen, jossa oli 2-etyylitio-4,5-bis(4-metoksifenyyli)-imidatsolia (10,2 g, 0,030 moolia) dikloorimetaanissa (200 ml) jäähdytettynä jäähauteessa. lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 86,4-% m-klooriperbentsoehappoa (6,0 g, 0,030 moolia) dikloorimetaanissa (100 ml). Yön ajan huoneen lämpötilassa sekoittamisen jälkeen reaktioseos pestiin 3 erällä (75 ml) kyllästettyä natriumvetykarbo-naattiliuosta. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin pyörivässä haihduttimessa. Jäljelle jäänyt Öljy trituroitiin eetterin kanssa, ja saatu kiinteä aine koottiin talteen ja kiteytettiin uudelleen 1-klooributaanista (500 ml), jolloin saatiin 7,5 g (70 %) puhdasta 2-etyylisulfinyyli-4,5-bis(4-metoksifenyyli) imidatsolia, sp. 161 - 162°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C^H^N^S: C 64,02 H 5,66 N 7,86

Todettu: C 63,98 H 5,59 N 7,97

Esimerkki 14 2-etyylisulfonyyli-4,5-bis(4-metoksifenyyli)imidatsoli Korvaamalla 6,0 g esimerkin 13 86,4-% m-klooriperbentsoe happoa 12,0 g:11a (0,060 moolia) 86,4-% m-klooriperbentsoehappoa saatiin 1-klooributaanista (125 ml) suoritetun uusintakiteytyksen jälkeen 6,0 g (54 %) 2-etyylisulfonyyli-4,5-bis(4-metoksifenyyli)-imidatsolia, sp. 136 - 137°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C19H2QN204S: C 61,27 H 5,41 N 7,52

Todettu: C 61,47 H 5,47 N 7,35

Esimerkki 15 2-asetonyylitio-4,5-bis(4-metoksifenyyli)imidatsoli Sekoitettuun seokseen, jossa oli 2-merkapto-4,5-bis(4-metok-sifenyyli)imidatsolia (31,2 g, 0,100 moolia), trietyyliamiinia (11,0 g, 0,11 moolia) ja kloroformia (500 ml) lisättiin tiputtamalla klooriasetonia (10,2 g, 0,11 moolia) liuotettuna kloroformiin (50 ml). Yön ajan sekoittamisen ja kiehuttamisen jälkeen reaktio-seos pestiin 3 kertaa vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja konsentroitiin, jolloin saatiin 32,0 g raakatuotetta. Kromatogra-foitaessa (silikageelikolonni, eluointi kloroformialla) saatiin 30 661 77 27,0 g (73 %) puhdasta 2-asetonyylitio-4,5-bis(4-metoksifenyyli)-imidatsolia, sp. 115 - 117,5°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C2oH20N2°3S: C 65,20 H 5,47 N 7,60 Todettu: C 65,14 H 5,42 N 7,36

Esimerkki 16 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(metyylitiometyylisulfinyyli)-imidatsoli ja 4,5-bls(4-metoksifenyyli)-2-(metyylisulfinyy-limetyylitio)imidatsoli

Liuokseen, jossa oli 4,5-bis(4-metoksifenyyli)-2-(metyylitio-metyylitio)imidatsolia (7,4 g, 0,020 moolia) dikloorimetaanissa (100 ml) jäähdytettynä jäähauteessa, lisättiin liuos, jossa oli 86,4-% m-klooriperbentsoehappoa (4,0 g, 0,020 moolia) dikloorimetaanissa (100 ml). Yön ajan huoneen lämpötilassa sekoittamisen jälkeen reaktioseos pestiin 3 kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-liuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja konsentroitiin. Jäännös (7,5 g) kromatografoitiin (silikageelikolonni, eluointi toluee-nin ja etyyliasetaatin seoksella).

Ensimmäinen kolonnista eluoituva yhdiste oli 4,5-bis(4-metoksifenyyli) -2- (metyylitiometyylisulf inyyli) imidatsolia , sp. 142,5 -143,5°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C.j 9^20N2°3S2: c 58,74 H 5,19 N 7,21

Todettu: C 59,00 H 5,13 N 6,93

Jatkettaessa kolonnin eluointia saatiin puhdasta 4,5-bis(4-metoksifenyyli)-2-(metyylisulfinyylimetyylitio)imidatsolia, sp.

84,5 - 86,5°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle 9H20N2°3S2! C 56,74 H 5,19 N 7,21

Todettu: C 58,85 H 5,36 N 6,94

Esimerkki 17 4.5- difenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylitio)imidatsoli Ruostumattomasta teräksestä valmistettuun putkeen lisättiin 4,5-difenyyli-2-merkaptoimidatsolia (5,0 g, 0,020 moolia) ja dime-tyyliformamidia (50 ml), jossa oli 0,5 ml 40-% bentsyylitrimetyyli-ammoniumhydroksidin metanoliliuosta. Putki huuhdeltiin useaan kertaan kuivalla typellä, ja siihen johdettiin sitten tetrafluoriety- 31 66177 leeniä (2,2 g, 0,022 moolia). Putkea sekoitettiin 7 tuntia. Reaktio-seos kaadettiin veteen, ja kiinteä aine koottiin talteen ja pestiin vedellä, jolloin saatiin 5,7 g raakatuotetta. Kromatografoimalla (silikageelikolonni, eluointi kloroformilla) saatiin 3,5 g puhdasta 4.5- difenyyli-2-(1,1,2,2-tertafluorietyylitio)imidatsolia, sp. 212 -213°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle c·] 7Η·| 2F4N4S: C 57,95 H 3,43 N 7,95 Todettu: C 57,71 H 3,70 N 7,89

Esimerkki 18 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-vinyylitioimidatsoli Ruostumattomasta teräksestä valmistettuun putkeen lisättiin 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-merkaptoimidatsolia (15,0 g, 0,05 moolia), kuprokloridia (0,75 g) ja 100 ml dimetyyliformamidia. Putki jäähdytettiin, vakumoitiin ja sen jälkeen siihen puristettiin 1,3 g asetyleeniä. Putkea lämmitettiin 150°:ssa ravistellen 8 tuntia, jäähdytettiin ja kaasu laskettiin pois. Sisältö laimennettiin 500 ml:lla vettä ja lisättiin 25 ml väkevää ammoniumhydroksidia. Vesi-seos uutettiin eetterillä (4 x 300 ml). Yhdistetyt eetteriuutteet pestiin vedellä (3 x 300 ml), ja sitten kuivattiin ja konsentroitiin pöyrivässä haihduttimessa. Jäännös kromatografoitiin kolonnissa, jossa oli 600 g silikageeliä (Silic AR® CC-7) . Tuote eluoitiin kloroformilla (jakeet 6-811 kumpaakin), jolloin konsentroinnin jälkeen saatiin 2,9 g kiteitä. Kiteyttämällä uudelleen 1-klooributaa-ni/heksaani-seoksesta saatiin 2,8 g puhdasta tuotetta, sp. 114 -115°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C^gH^gN202S: C 67,43 H 5,36 N 8,28 Todettu: C 67,17 H 5,40 N 8,42

Esimerkki 19 4.5- bis(4-metoksifenyyli)-2-(1,1,2-trifluorietyylitio)-imidatsoli

Liuokseen, jossa oli 2-{2-bromi-1,1,2-trifluorietyylitio)- 4.5- bis(4-metoksifenyyli)imidatsolia (14,2 g, 0,03 moolia) 150 ml:ssa tolueenia lisättiin tri-n-butyylitinahydridiä (9,0 g, 0,03 moolia). Seosta keitettiin 4 tuntia. Lisättiin toinen 9,0 g:n erä 32 6 6177 (0,03 moolia) tri-n-butyylitinahydridiä ja seosta keitettiin yön ajan. Seos lisättiin sitten suoraan kolonniin, jossa oli 900 g silikageeliä (Silic AR® CC-7) . Eluoitaessa tolueenilla ja sen jälkeen tolueeni/ etyyliasetaatti-seoksella (95/5) saatiin 6,5 g kiteistä tuotetta. Kiteyttämällä uudelleen metyyliheksaanista saatiin 5,6 g puhdasta tuotetta, sp. 143,5 - 145°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle : C 57,86 H 4,34 N 7,10

Todettu: C 57,95 H 4,71 N 7,04

Esimerkki 20 4.5- difenyyll-1-(1,1,2-trifluorietyylitlo)imidatsoli

Korvaamalla esimerkin 19 2-(2-bromi-1,1,2-trifluorietyyli- tio)-4,5-bis(4-metokslfenyyli)imidatsoli 2-(2-bromi-1,1,2-trifluori-etyylitio)-4,5-difenyyli-imidatsolilla saatiin 4,5-difenyyli-2-(1,1,2-trifluorietyylitlo)imidatsolia, sp. 225 - 226,5°.

Esimerkki 21 4.5- bis(4-fluorlfenyyli)-2-(1,1,2,2-tetrafluorletyylisulfo-nyyll)imidatsolln natriumsuola

Seosta, jossa oli 4,5-bis(4-fluorifenyyli)-2-(1,1,2,2-tetra-fluorietyylisulfonyyli)imidatsolia (5,0 g, 0,0199 moolia), natrium-metylaattia (0,6 g, 0,0111 moolia) ja eetteriä (300 ml), sekoitettiin yön ajan huoneen lämpötilassa. Kiinteä aine koottiin talteen ja pestiin eetterillä, jolloin saatiin 2,1 g 4,5-bis(4—fluorifenyyli)-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)imidatsolin natriumsuolaa, sp. 290 - 292°.

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C^HgFgN^SNa: C 46,16 H 2,05 N 6,33 Todettu: C 45,98 H 2,19 N 6,07

Esimerkki 22 4.5- difenyyll-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)imidatsolin natriumsuola Käyttämällä esimerkissä 21 selostettua menetelmää ja lähtöaineena 4,5-difenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)imidatsolia saatiin 4,5-difenyyli-2-(1,1,2,2-tetrafluorietyylisulfonyyli)-imidatsolin natriumsuolaa, sp. 296 - 302° (hajosi).

66177 33 Käyttämällä sopivia lähtöaineita ja esimerkissä 10 selitettyä menetelmää valmistettiin taulukossa I esitetyt yhdisteet. Tyypillisiä käyttökelpoisia liuottimia ovat metanoli, etanoli tai to-lueeni. Käyttämällä sopivia lähtöaineita ja esimerkissä 17 selitettyä menetelmää valmistettiin taulukossa II esitetyt yhdisteet. Tyypillisiä käyttökelpoisia katalysaattoreita ovat di-isopropyyliamii-ni tai bentsyylitrimetyyliammoniumhydroksidi.

Käyttämällä sopivia lähtöaineita ja esimerkeissä 13 ja 14 selitettyjä menetelmiä valmistettiin taulukossa III esitetyt yhdisteet.

Esimerkki 23 A) 4,5-difenyyli-1-(2-tetrahydropyranyyli)imidatsoli

Seosta, jossa oli 27 g (0,122 moolia) 4,5-difenyyli-imidat-solia, 21 g (0,25 moolia) dihydropyraania, 250 ml etyyliasetaattia ja 4,0 g BF^.E^C^ta, keitettiin palautustislaten 5 vuorokautta. Lähes kirkas liuos laimennettiin eetterillä ja suodatettiin liukenemattoman lähtöaineen (0,6 g) poistamiseksi. Eetterlsuodos pestiin useita kertoja 10-% NaHC0^:lla, kuivattiin ja haihdutettiin. Ohut-kerroskromatografia osoitti, että lähtöainetta oli vielä läsnä, joten raakatuote kromatografoitiin 900 g:lla Silic AR®CC-7:ää ja eluoitiin 20 - 40 % etyyliasetaattia sisältävällä tolueenilla. Puhdasta tuotetta saatiin 30,3 g (81,7 %), sp. 170 - 171°. IR: 3,21 pm, =CH; 3,40, 3,49 pm, tyyd. CH; 6,25, 6,64, 6,73 pm, arom. C=C ja/tai C=N; vahva 9,10 pm, C-O-C; 12,98 ja 14,38 pm, monosubstituoitu aro-maatti. N-NMR: raultipletti (1,6-2,3,6 δ, 6H); multipletti (ci 3,4, 4,0, 4,8 6, kukin Ci 1H); multipletti + singletti (7,0 - 7,6 + 7,4 S, 10H); S (7,8 S, 1H).

Massaspektri laskettu kaavalle: C20H20N2O: 304,1574 Todettu: 304,1559

Analyysi:

Laskettu kaavalle c2oH20N2°: c 78*92 H 6,62 N 9,20 Todettu: C 78,57 H 6,89 N 9,07 34 6 6 1 77 B) 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyylitiolmidatsoli Kuumailmapuhaltimella kuivatussa lasiastiassa typpisuojakaa-sussa oleva liuos, jossa oli 0,9 g (3 mmoolia) 4,5-difenyyli-1-(2-tetrahydropyranyyli)imidatsolia 15 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 15 ml:ssa eetteriä, jäähdytettiin -78°:seen. Kylmään liuokseen lisättiin tipoittain liuos, jossa oli 2,5 ml (4 mmoolia) 1,6-m n-butyyli-litiumin heksaaniliuosta 10 mlzssa eetteriä. Liuosta sekoitettiin -78°:ssa, sitten lisättiin 0,55 g (4 mmoolia) trifluorimetaanisulfe-nyylikloridikaasua. Seosta sekoitettiin 2 tuntia -78°:ssa, sitten huoneen lämpötilassa yli yön. Seos kaadettiin veteen ja uutettiin eetterillä (vesifaasin pH Ci 4). Vesifaasi neutraloitiin natriumbikarbonaatilla ja uutettiin sitten uudella eetterierällä. Yhdistetyt eetteriuutteet kuivattiin ja väkevöitiin. Jäännöksenä saatu raaka-tuote kromatografoitiin 50 g:11a Silic AR^ CC-7:ää, eluoitiin 2 % etyyliasetaattia sisältävällä tolueenilla, jolloin saatiin 0,45 g (47 %) tuotetta. Uudelleenkiteyttämällä tolueenista saatiin 0,3 g (31 %) valkeata kiinteätä ainetta, sp. 254 - 256°; IR: leveä 3-4 pm, NH; 3,28 pm, =CH; 6,24, 6,34, 6,42, 6,71 pm, arom. C=C ja/tai C=N; vahva 8,5 - 9 pm, C-F; 13,09, 14,34 pm, monosubstituoitu aromaatta. H-NMR: multipletti (7,1 - 7,7 6, 10H); leveä (136, 1H).

F-NMR: S (42,46 6).

Massaspektri: molekyyli-ioni c-j -jF3N2S: todettu 320,0609

Analyysi:

Laskettu kaavalle C.,H-,F_N_S: C 59,99 H 3,46 N 8,75

Ib 11 j Z

Todettu: C 60,20 H 3,57 N 8,52

Esimerkki 24 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyylisulfonyyli-imidatsoli

Seosta, jossa oli 0,48 g (1,5 mmoolia) 4,5-difenyyli-2-tri-fluorimetyylitioimidatsolia ja 0,72 g (3,6 mmoolia) 85-% m-kloori-peroksibentsoehappoa 30 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitettiin huoneen lämpötilassa yli yön, ja sitten, ohutkerroskromatografiän osoittaessa hapettumisen olevan epätäydellistä, palautustislauslämpöti-lassa vielä vuorokauden ajan. Ohutkerroskromatografia osoitti edelleen hapettumisen epätäydellisyyttä, joten metyleenikloridi poistettiin rotaatiohaihduttimessa ja korvattiin 30 ml:11a kloroformia, ja seosta keitettiin palautustislaten vielä 6 tuntia. Kloroformi haihdutettiin ja jäännöstä trituroitiin noin 20 ml:11a eetteriä. Eette- 35 661 77 riin liukenematon aine ( noin 3 g) yhdistettiin noin 0,1 g:aan kiinteätä ainetta, joka saatiin eetteriuutoksesta pesemällä 10-% nat-riumsulfIitillä, 10-% natriumbikarbonaatilla, kuivaamalla ja haihduttamalla. Uudelleenkiteyttämällä tolueenista saatiin 0,37 g (70 %) valkeata tuotetta, sp. 292 - 293,5° (alkaa sublimoida 250°:ssa).

IR: 3-4 pm, NH; 6,33, 6,44, 6,72 pm, aromaattinen C=C ja/tai C=N; 7,23, 8,32 pm, 8,97 pm, C-F; 13,05, 14,30 pm, monosubstituoi- tu aromaatti. H-NMR: multipletti (7,1 - 7,7 ό , 10H). F-NMR: multi-pietti S (78,25 6) ; pieniä singlettejä havaittiin myös kohdissa 42,43 δ (noin 2 %, sulfidi) ja 72,69 6 (noin 3 %, sulfoksidi).

Analyysi:

Laskettu kaavalle gH^F^N^O^S: C 54,54 H 3,15 N 7,95

Todettu: C 55,13 H 2,94 N 8,06 54,98 2,95 8,05

Esimerkin 24 mukaisen yhdisteen adjuvantti niveltulehdus ED,.q rotilla oli 0,03 mg/kg.

Esimerkki 25 4 (tai 5)-(4—fluorifenyyli)-5(tai 4)-(4-metyylitiofenyyli)- 2-Z11t1,2,2-tetrafluorietyyli)tio7imidatsoli

4-FC6H4\ / N

] ^>— scf2cf2h 4-MeSC6H4^'“ (Taulukko II; X = 4-F, Y = 4-CH3S, Z = F, AA ED^ = 1,6)

Liuos, jossa oli 4 (tai 5)-(4-fluorifenyyli)-5 (tai 4)-(4-metyylitiofenyyli)-2-merkaptoimidatsolia (11,1 g, 0,035 moolia) ja di-isopropyyliamiinia (3,5 g) 100 mlrssa dimetyyliformamidia, pantiin paineastiaan, johon johdettiin tetrafluorietaania (7,0 g) ja kuumennettiin sitten yön ajan lämpötilassa 60°. Reaktioseos kaadettiin 1 litraan jäävettä ja uutettiin useita kertoja eetterillä. Eet-teriuute pestiin vedellä ja väkevöitiin, jolloin saatiin keltaista öljyä, joka kiteytyi seistessään. Kiteyttämällä uudelleen metyyli-sykloheksaanista saatiin 9,2 g (63 %) otsikkotuotetta, sp. 155,5 -157°.

66177 36

Esimerkki 26 4 (tai 5)-(4—fluorifenyyli-5 (tai 4)-(4-metyylisulfonyyli- fenyyli-2-/( 1,1,2,2-tetrafluorietyyli)sulfonyyll7imidatsoli 4-FC6H4

Jl so2cf2cf2h 4-MeS0_C,H.

2 6 4 H

(Taulukko III; X = 4-F, Y = 4-CH3SC>2f R = CF2CF2H, n = 2, AA ED50 = (37 %)15)

Liuos, jossa oli 4 (tai 5)-(4-fluorifenyyli)-5 (tai 4)-(4-metyylitiofenyyli)-2-/(1,1,2,2-tetrafluorietyyli)tiq7imidatsolia (4,2 g, 0,01 moolia) etyyliasetaatissa (150 ml), jäähdytettiin lämpötilaan 0° ja lisättiin tiputtamalla liuokseen, jossa oli 10 g 85-% m-klooriperbentsoehappoa 75 ml:ssa etyyliasetaattia. Kahden päivän kuluttua seos uutettiin 10-% natriumsulfiittiliuoksella, sitten kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella ja lopuksi suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja haihdutettiin, jolloin saatiin lasimainen kiinteä aine. Kiteyttämällä etanolin ja veden seoksesta (1:2, 150 ml) saatiin 1,6 g (33 %) otsikkotuotetta, sp. 221 - 223°.

Esimerkki 27 4 (tai 5)-(4-fluorifenyyli)-5 (tai 4)-(4-nitrofenyyli)-2- ^(1,1,2,2-tetrafluorietyyll)sulfonyyljjimidatsoli 4-FC,H. ^ .N.

]| so2cf2cf2h

4-N02C6H4 S

(Taulukko III; X = 4-F, Y = 4-NC>2, R = CF2CF2H, n = 2, AA ED50 = 0,37) 37 6 6 1 77 4 (tai 5)- (4-fluorifenyyli)-5 (tai 4)-fenyyli-2-£(1 ,1 ,2,2-tetrafluorietyyli)sulfonyyli/imidatsolin (4,02 g, 10 mmoolia), liuosta trifluorietikkahapossa (60 ml) käsiteltiin 1,06 g:lla kaliumnit-raattia, 22 tunnin kuluttua lisättiin vielä 100 mg kaliumnitraattia, ja 7 tunnin kuluttua seos haihdutettiin ja jäännös liuotettiin etyy-asetaattiin. Orgaaninen liuos pestiin vedellä ja suolaliuoksella, haihdutettiin ja jäännös kiteytettiin kloroformista, jolloin saatiin 2,77 g (62 %) otsikkotuotetta, sp. 208 - 211°.

Esimerkki 28 4 (tai 5)-(4-aminofenyyli)-5 (tai 4)-(4-fluorifenyyll)-2- C( 1 ,1 ,2,2-tetraf luorietyyli) sulfonyyli_7imldatsoli 4-Ρε6Η4\^ΗΚ 11 V- so2cf2cf2h

4-NH2C6H4 H

(Taulukko III? X = 4-F, Y = 4-NH2# R = CF2CF2H, n = 2, AA ED50 = 18 %)3)

NaBH^tn (78 mg) liuokseen metanolissa (5 ml) lisättiin 10-% natriumhydroksidiliuosta (0,5 ml), ja seos kaadettiin 10-% Pd/C (20 mg) vesisuspensioon (5 ml). Lisättiin 4 (tai 5)-(4-fluorifenyy-li)-5 (tai 4)-(4-nitrofenyyli)-2-/11,1,2,2-tetrafluorietyyli)sulfo-nyyli/imidatsolia (447 mg, 1 mmooli) metanolissa (8 ml) ja seosta sekoitettiin yön ajan. Seos tehtiin happameksi suolahapolla siten, että ensin lisättiin laimeata suolahappoa ja lopussa väkevää, jonka jälkeen suodatettiin Celite®-piimaan läpi ja tehtiin suodos emäksiseksi (pH 8) ammoniakkiliuoksella. Saatu liuos uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin vedellä ja suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin öljy, joka kiteytyi seistessään. Käsittelemällä sakkaa kloorivedyn eetteri-liuoksella saatiin otsikkoyhdiste kiinteänä hydrokloridina, sp. 238 -241° (hajosi).

38 661 77

Toisessa synteesissä, joka suoritettiin laajemmassa mittakaavassa (4,47 g lähtöainetta), saatiin ensimmäisessä vaiheessa, eli kun oli tehty emäksiseksi ammoniakkiliuoksella, 2,3 g otsikkoyhdis-tettä, sp. 233 - 235°; lisäksi saatiin 1,4 g otsikkotuotetta hydro-kloridisuolana yllä kuvatulla lisäkäsittelyllä.

Esimerkki 29 4,5-difenyyli-1-(2-tetrahydropyranyyli)imidatsoli Seosta, jossa oli 27 g (0,122 moolia) 4,5-difenyyli-imidat-solia, 21 g (0,25 moolia) dihydropyraania, 250 ml etyyliasetaattia ja 4,0 g BF^.Et^Ojta keitettiin 5 päivän ajan. Lähes kirkas liuos laimennettiin eetterillä ja suodatettiin jäljellä olevan liukenemattoman lähtöaineen (6 g) poistamiseksi. Eetterisuodos pestiin useita kertoja 10-% natriumbikarbonaatilla, sitten se kuivattiin ja haihdutettiin. TLC osoitti lähtöainetta olevan vielä läsnä, joten raaka-tuote kromatografoitiin kolonnissa, jossa oli 1 kg silikageeliä Silic AR® CC-7. Saatiin 30,3 g (81,7 %) puhdasta tuotetta, sp. 170 - 171°. IR: 3,21 pm, =CH; 3,40, 3,49 pm,kyll. CH; 6,25, 6,64, 6,73 pm, aromaattinen C=C ja/tai C=N; vahva 9-10 pm, C-O-C; 12,98 ja 14,38 um, monosubstituoitu aromaattinen. H-NMR: multipletti (1,6 - 2,3 6, 6H) ; multipletti 1^3,4, 4,0, 4,8 S, kukin 1H) ; multipletti + singletti (7,0 - 7,6 + 7,4 6, 10H); S (7,8 S, 1H) . .

Massaspektri,laskettu yhdisteelle C2oH20N2O: 304,1574 Todettu: 304,1559

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C20H20N2O: c 78,92 H 6,62 N 9,20

Todettu: C 78,57 H 6,89 N 9,07

Samalla tavalla valmistettiin seuraavissa taulukoissa luetellut 2-tetrahydropyranyyli-imidatsolit.

66177 39 χΎ V-

X

O

X Υ sp.

H H 170 - 171° p-F p-F 158 - 159° p-CH30 p-CH30 123 - 125° p-F tai p-CH30 p-CH30 tai p-F 109 - 125° H tai 3,4-diCl 3,4-diCl tai H 113 - 120°

Jl SR

"

Adjuvantti niveltu- X Y R sd lehdus x Y R p· ED50 (mg/kg) 3- Cl H CH3 202 - 203° 50 3,4-Cl2 H CH3 183/5 - 184,5° <25 4- F 4-F CH3(CH2)3 175-175,5° <10 40 66177

Esimerkki 30 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyylitlolmidatsoli (Trifluorimetaanisulfenyylin kautta, ilman välituotteen eristystä)

Typen suojaamana ja lasiastiassa kuumennuspistoolilla kuivattuna liuos, jossa oli 0,9 g ( 3 mmoolia) 4,5-difenyyli-1-(2-tetra-hydropyranyyli)imidatsolia 15 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 15 ml:ssa eetteriä, jäähdytettiin lämpötilaan -78°. Kylmään liuokseen lisättiin tipoittain liuos, jossa oli 2,5 ml (4 mmoolia) 1,6-m n-butyyli-litiumia (heksaanissa) ja 10 ml eetteriä. Liuosta sekoitettiin lämpötilassa -78° ja sitten siihen lisättiin 0,55 g (4 mmoolia) trifluo-rimetaanisulfenyylikloridia kaasuna. Seosta sekoitettiin lämpötilassa -78° 2 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa yön ajan. Seos kaadettiin veteen ja uutettiin eetterillä (vesikerroksen pH = 4). Vesikerros neutraloitiin natriumbikarbonaatilla, sitten uutettiin vielä kerran eetterillä. Yhdistetyt eetteriuutteet kuivattiin ja \äkevöitiin. Raaka jäännös kromatografoitiin kolonnissa, jossa oli 50 g silikageeliä Silic AR'®' CC-7 eluoiden tolueenin ja etyyliasetaatin seoksella (98:2), jolloin saatiin 0,45 g (47 %) tuotetta. Kiteyttämällä uudelleen tolueenista saatiin 0,3 g (31 %) valkoista kiintoainetta, sp. 254 - 256°. IR: laaja 3-4 pm, NH; 3,28 pm, =CH; 6,24, 6,34, 6,42, 6,71 pm, aromaattinen C=C ja/tai C=N; vahva 8,5 -9 pm, C-F; 13,09, 14,34 pm, monosubstituoitu aromaattinen. H-NMR: multipletti (7,1 - 7,7 6, 10H) ; laaja (13 6, 1H) . F-NMR: S (42,46S) . Massaspektri: molekyyli-ioni C.jgH.j .jF^^S: todettu 320,0609. Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C^gH^F^N^S: C 59,99 H 3,46 N 8,75 Todettu: C 60,20 H 3,57 N 8,52

Esimerkki 31 4,5-difenyyll-1-(2-tetrahydropyranyyli)-2-trifluorimetyyli-tioimidatsoli (trifluorimetyylidisulfidin kautta)

Lasiastiassa kuumennuspistoolilla kuivattuna ja typen suojaamana seokseen, jossa oli 1,5 g (5 mmoolia) 4,5-difenyyli-1-(2-tetrahydropyranyyli) imidatsolia 20 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 20 ml:ssa eetteriä lämpötilassa -78°, lisättiin tipoittain liuos, jossa oli 3,75 ml (6 mmoolia) 1,6-m n-butyylilitiumia heksaanissa 20 ml:ssa eetteriä. Vaaleankeltaiseen liuokseen lisättiin tipoittain 15 minuu- 41 66177 tin välein lämpötilassa -78° liuosta, jossa oli 1,2 g (6 mmoolia) trifluorimetyylidisulfidia 10 mlsssa eetteriä. Tummaa liuosta sekoitettiin lämpötilassa -78° tunnin ajan, sitten huoneen lämpötilassa puoli tuntia. Seos lisättiin veteen ja uutettiin 3 kertaa eetterillä (vesikerroksen pH ^->6). Eeetteriuutteet kuivattiin ja väkevöi-tiin. Jäännös kromatografoitiin kolonnissa, jossa oli 150 g silika-geeliä Silic AR^ CC-7 eluoiden tolueenilla, jolloin saatiin heksaa-nista kiteyttämisen jälkeen 0,55 g tuotetta, sp. 104 - 105°. IR: 3,25 pm, =CH; 3,37, 3,48 pm, kyll. CH; 6,23, 6,64, 6,74 pm, konju-goitu syklinen C=C ja/tai C=N; vahva 9 pm alue, -SCF^ ja C-O-C; 13,09, 14,36 pm, monosubstituoitu aromaattinen. H-NMR: multipletti (1,1 - 2,0 S , 6H) ; multipletti (3,2 - 4,2 &, 2H) ; multipletti (5,3 5,6 6 , 1H); multipletti + singletti (7,0 - 7,5 + 7,4 6, 10H). F-NMR: S (42,20 6 ).

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C 62,36 H 4,74 N 6,93

Todettu: C 62,70 H 4,83 N 6,91

Tetrametyylietyleenidiamiinin käyttö samassa määrin kuin n-butyylilitiumin käyttö johti tuotteen saantojen paranemiseen.

Esimerkki 32 4,5-dlfenyyli-2-trifluorimetyylitioimidatsoli (tetrahydro- pyranyylijohdannaisen hydrolyysin kautta

Pieni näyte 4,5-difenyyli-1-(2-tetrahydropyranyyli)-2-tri-fluorimetyylitioimidatsolia suspendoitiin suhteessa 1:1 etanolia: 0,1-n suolahappoa. Seosta kuumennettiin höyrykylvyssä (kirkas liuos) tunnin ajan. Jäähdytyksen jälkeen tuotteesta muodostui kiteitä ja ne kerättiin talteen, pestiin vedellä ja kuivattiin. IR ja TLC osoittivat kiintoaineen olevan 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyylitio-imidatsolia, sp. 255°.

Vastaavalla tavalla valmistettiin seuraavissa taulukoissa luetellut 4,5-diaryyli-2-trifluorimetyylitioimidatsolit.

66177 42 ‘-iol .

I S— scf3 *-{Θ] "

Adjuvantti nivelreuma X Y sp. ED50 (m9/kg) H H 254 - 256° <3 (26 %) 3) p-F p-F 228 - 229° 0,02 p-CH30 p-CH30 181-182° 1,5 p-F p-CH30 156-157,5° 2,7 H 3,4-diCl 241 - 242° 7,0

x^Gl N

I -SCF CFH

z

*40] H

Adjuvantti nivelreuma X Y Z sp. ED50 (m9/k9) 3-Cl H F 212 - 213° 0,6 3-F H F 205,5 - 207° 2,5 3,4-Cl2 H F 209 - 211° 3,0 4-CH30 4-F F 170-171,5° 14 4-CH30 4-CH30 I 183 - 184° 40 66177 43

Esimerkki 33 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyylisulfonyyli-imidatsoli (sulfi- din hapetuksen kautta

Seosta, jossa oli 0,48 g (1,5 mmoolia) 4,5-difenyyli-2-tri-fluorimetyylitioimidatsolia ja 0,72 g (3,6 mmoolia) 85-% m-kloori-peroksibentsoehappoa 30 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan ja sitten, koska TLC ilmaisi epätäydellisen hapettumisen, keitettiin toisen päivän ajan. TLC osoitti yhä epätäydellistä hapettumista, joten metyleenikloridi poistettiin pyö-röhaihdutuksella ja korvattiin 30 ml:11a kloroformia ja seosta keitettiin vielä 6 tuntia. Kloroformi haihdutettiin ja jäännös tritu-roitiin ^ 20 ml:11a eetteriä. Eetteriin liukenematon kiintoaine (rv o,3 g) yhdistettiin eetterisuodoksesta saatuun λ>1,0 g:aan kiintoainetta; pestiin 10-% natriumsulfiitilla ja 10-% natriumbikarbonaatilla, ja kuivattiin ja haihdutettiin. Kiteyttämällä uudelleen tolueenista saatiin 0,37 g (70 %) valkoista tuotetta, sp. 292 -293,5° (sublimoituu yli 250°:ssa). IR: 3-4 /am, NH; 6,33, 6,44, 6,72 jum, aromaattinen C=C ja/tai C=N; 7,23, 8,32 pm, -SC^-; 8,97 pm, C-F; 13,05, 14,30 pm, monosubstituoitu aromaattinen. H-NMR: multi-pletti (7,1 - 7,7 & , 10H). F-NMR: S (78,25 6 ); havaittiin myös pieniä singlettejä arvossa 42,43 δ (rv 2 %, sulfidi) ja arvossa 72,69 (rv 3 %, sulfoksidi) .

Analyysi:

Laskettu yhdisteelle C.| gH.j ^ F^f^C^S: C 54,54 H 3,15 N 7,95

Todettu: C 55,13 H 2,94 N 8,06 54,98 2,95 8,05

Esimerkki 34 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyylisulfonyyli-imidatsoli (tri- fluorimetaanisulfonianhydridin kautta)

Lasiastiassa kuumennuspistoolilla kuivattuna ja typen suojaamana liuokseen, jossa oli 1,5 g (5 mmoolia) 4,5-difenyyli-1(2-tetra-hydropyranyyli)imidatsolia 20 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 20 ml:ssa eetteriä lämpötilassa -78° lisättiin tipoittain liuosta, jossa oli 3,75 ml (6 mmoolia) 1,6-m n-butyylilitiumia heksaanissa 20 ml:ssa eetteriä. Kun oli sekoitettu lämpötilassa -78° 15 minuuttia, lisättiin liuos, jossa oli 1,7 g (6 mmoolia) trifluorimetaanisulfonianhyd- 661 77 44 ridiä 10 mlrssa eetteriä. Reaktioseosta sekoitettiin lämpötilassa -78° 2 tunnin ajan ja sitten huoneen lämpötilassa 2 vuorokautta.

Seos lisättiin veteen, neutraloitiin natriumbikarbonaatilla ja uutettiin eetterillä. Eetteriuutteet kuivattiin ja väkevöitiin ja jäännös kromatografoitiin kolonnissa, jossa oli 150 g silikageeliä Silic AR® CC-7. Eluoimalla tolueenilla saatiin 0,25 g kiintoainetta, joka massaspektrillä identifoitiin 4,5-difenyyli-1-(2-tetrahyd-ropyranyyli)-2-trifluorimetyylisulfonyyli-imidatsoliksi (IR: ei NH, vahva sulfoni, C-O-C siteitä). Eluoimalla tolueenin ja etyyliasetaatin seoksella (9:1) saatiin kiinteä tuote, kiteyttämällä uudelleen tolueenista saatiin 80 mg (*v 5 %) 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyy-lisulfonyyli-imidatsolia, sp. 285 - 288 . IR oli samanlainen kuin tuotteella, joka saatiin 4,5-difenyyli-2-trifluorimetyylitioimidat-solin hapetuksella.

Analogisella tavalla valmistettiin seuraavissa taulukoissa luetellut 4,5-diaryyli-2-trifluorimetyylisulfonyyli-imidatsolit.

x-{Ol v_ I >— so2cf3

*-{Oj H

Adjuvantti nivelreuma X _Y_ sp. ED50 (m9/kg) H H 292 - 293,5° 0,03 p-F p-F 264 - 265° 0,015 p-CH30 p-CH30 201 - 202,5° 0,33 p-F p-CH30 187 - 188° 1,4 H 3,4-diCl 195,5 - 197° 0,35 45 6 6 1 77 *—ίο

jf ^S(0)nR

γΟθΓ"

Adjuvantti nivelreuma _X_Y_R _bp. ED50 (mg/kg) 3-C1 H CH3 1 150 - 151,5° <75 3-C1 H CH3 2 171 - 172° <10 3-F H CH3 1 163,5 - 164,5° <100 3.4- Cl2 H CH3 1 188 - 189° 50 3.4- Cl2 H CH3 2 199 - 200° <50 3-C1 H HCF2CF2 2 193-194° 0,05 3- F H HCF2CF2 2 217-218° 0,06 4- C2H50 H HCF2CF2 2 162 - 163° 1,5 3.4- Cl2 H HCF2CF2 2 197-198° 0,2 4-F 4-F CH3 1 185 - 187° 4,0 4-F 4-F HCF2CF2 1 192,5 - 193° 0,055 4-CH30 4-F HCF2CF2 2 189 - 190° 2,2 4-02N 4-02N hcf2CF2 2 240 - 240»5° 8,5 4-CH30 4-CHjO H2CFCF2 2 162 - 164° 5,0 H H HCBrFCF2 2 217-218° 0,85 H H H2CFCF2 2 239 - 240° 0,15 4-CH30 4-CH30 HCFICF2 2 190 - 192° 3,0 4-CH30 4-CH30 CH3(CH2)3 2 99 - 101° <50

Claims (2)

1. 46 661 77 Patenttivaatimus Menetelmä terapeuttisesti käytettävien 4,5-diaryyli-2-(substituoitu-tio)imidatsolien valmistamiseksi, joiden kaava on R2 JT ^>“S<0>n-Rl I R3 H jossa n on 0, 1 tai 2, on C^-C^-alkyyli, allyyli, vinyyli, -CH^COCH^ tai -CH S(O) CH , jossa m on 0, 1 tai 2, tai mono- tai polyhalogeeni-C.-C,alkyyli, ώ m j J. h ja ja R^, jotka ovat samoja tai erilaisia, merkitsevät ryhmää XX Y1 Y2 jossa ja > jotka ovat samoja tai erilaisia, ovat vety, C^-C^-alkoksi, Cj-C4 -alkyyli, Cl, F, CF3, N02, CH3S-, CH^-, tai Υχ ja Y2 yhdessä muodostavat dioksimetyleeni-sillan; edellyttäen, että kun n = 0, 1 tai 2 ja Y^ ja Y2 ovat molemmat vety, niin R^ ei voi olla vinyyli, ja että kun R^ on C^-C^-alkyyli, C3~C^-halogeeni-alkyyli, jossa halogeeni on substituenttina 3- tai 4-asemassa, allyyli tai ase-tonyyli, Y ja Y eivät molemmat voi olla vetyjä, ja edellyttäen edelleen, että kun n on 0 ja R^ on CH3» R2 ja R3 eivät molemmat voi olla p-kloorifenyyli tai p-metoksifenyyli , sekä näiden yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) yhdiste, jonka kaava on "‘X>- r3 h 661 77 47 jossa R^ ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan alkylointi-aineen kanssa, jona on esimerkiksi etyylijodidi, 2,2 ,2-trifluorietyylitrikloori-metaanisulfonaatti tai tetrafluorietyleeni, inertissä liuottimessa, kuten tolu-eenissa tai dimetyylifuraanissa, jolloin läsnä mahdollisesti on emäs, kuten tri-etyyliamiini, lämpötilassa 20°C - seoksen kiehumispiste, minkä jälkeen muodostunut substituoitu-tioimidatsoli haluttaessa saatetaan reagoimaan hapettimen kanssa, jona on esimerkiksi m-klooriperoksibentsoehappo, inertissä liuottimessa, o esimerkiksi kloroformissa, lämpötilassa 20 C - seoksen kiehumispiste, tai b) yhdiste, jonka kaava on ”X>- A jossa ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä ja A on suojaryhmä, saatetaan reagoimaan ensin'emäksen kanssa, kuten n-butyylilitiumin kanssa, inertissä liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, lämpötilassa -78°C...+20°C, ja sen jälkeen fluoratun alkyylisulfenyylihalogenidin, kuten trifluorimetyylisulfenyyliklori-din kanssa, tai disulfidin, kuten trifluorimetyylidisulfidin kanssa, tai sulfoni-happoanhydridin, kuten trifluorimetyylisulfonihappoanhydridin (R^SX tai (R^SO^J^O, jossa X on halogeeni tai -SR^ kanssa, jonka jälkeen muodostunut substituoitu-tioimidatsoli (jos on käytetty R^SX:ää) haluttaessa saatetaan reagoimaan hapettimen kanssa, kuten m-klooriperoksibentsoehapon kanssa, inertissä liuottimessa, kuten metyleenikloridissa, lämpötilassa 20°C - seoksen kiehumispiste. 48 66177 Förfarande för framställning av terapeutiskt användbara 4,5-diaryl- 2-(sobstituerad-tio)Imidazoler med formeIn R3 H väri n = 0, 1 eller 2, Rj är C^-C^-alkyl, allyl, vinyl, -CH^COCH^, eller -CH S(O) CH , väri m = 0,1 eller 2, eller mono- eller polyhalogen-C.-C,-alkyl. 2 m 3 Lh och och R^, som kan vara lika eller olika, betecknar gruppen