FI59678C - Diagnostiskt medel foer att paovisa aeggvita i kroppsvaetskor - Google Patents
Diagnostiskt medel foer att paovisa aeggvita i kroppsvaetskor Download PDFInfo
- Publication number
- FI59678C FI59678C FI760578A FI760578A FI59678C FI 59678 C FI59678 C FI 59678C FI 760578 A FI760578 A FI 760578A FI 760578 A FI760578 A FI 760578A FI 59678 C FI59678 C FI 59678C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- protein
- diagnostic
- acetic acid
- indicator
- solution
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
- C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
- C09B11/06—Hydroxy derivatives of triarylmethanes in which at least one OH group is bound to an aryl nucleus and their ethers or esters
- C09B11/08—Phthaleins; Phenolphthaleins; Fluorescein
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6827—Total protein determination, e.g. albumin in urine
- G01N33/6839—Total protein determination, e.g. albumin in urine involving dyes, e.g. Coomassie blue, bromcresol green
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
R3C71 r.i KUULUTUSjutKAisu e o a 7 o 3®· w <">uTiAGCNiMe$s«irr iy6/e 5¾¾ C (45) Tatcnt!:i oy:!nr.: ty 10 o'9 l'-Gl ^ * ' (51) Kv.iic.3/int.ci.3 G 01 N 33/68 SUOMI —FINLAND (21) P«*n«lh*k.mu«-P»t.frtirt»eknln, 760578 (22) HakmnltpUvt —Ameknlnpdag 05.03*76 (23) AlkupUvt·—GHtighutadug 05.03*76 (41) Tullut JulktMksi — Mlvlt effumllg 13.09.76 PMtti. )· rekifterihmllltu· NlhtivUulp»». j. kuuMuHutam
Patunt- och refictontyralMMi AmOkm uttagd och utUkriftan pubHcurud 29-05-81 (32)(33)(31) Pyy*«tty «uo<kMs-B«iird prtoritut 12.03.75
Saksan Li i 11 ot as av alt a-Förbun ds r e pub liken Tyskland(DE) P 2510633.6 (71) Boehringer Mannheim GmbH,, Mannheim-Waldhof, Saksan Liittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (72) Walter Rittersdorf, Mannheim-Waldhof, Werner Giithlein, Mannheim-Neckarau, Wolfgang Werner, Mannheim-Vogelstang, Hans-Georg Rey, Mannheim-Waldhof, Peter Rieckmann, Mannheim-Waldhof, Saksan Liitto-tasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (7I*) Berggren Oy Ab (5^) Diagnostinen väline valkuaisaineen osoittamiseksi kehon nesteissä -Diagnostiskt medel för att pdvisa äggvita i kroppsvätskor
Valkuaisaineen osoittamisella kehon nesteissä, varsinkin virtsassa, on tärkeä asema munuaissairauksien diagnostiikassa. Pika-diagnosti-sia välineitä valkuaisaineen osoittamiseksi ja määrittämiseksi virtsassa on siten ollut kehitettyinä jo pitemmän aikaa. Nämä ovat enimmäkseen testipapereita, joihin on imeytetty puskuriainetta ja ns. valkuaisaine-virheindikaattoria. Valkuaisainevirhe-indikaattorit ovat pH-indikaattoreita, joiden pK-arvo siirtyy valkuaisaineiden läsnäollessa. Aina riippuen siitä, mihin suuntaan valkuaisaine siirtää pK-arvoa, on puskurin säädettävä pH-arvo sellaiseksi, että se on pK-arvon ylä- tai alapuolella, edullisesti juuri indikaattorin värin-muutosalueen ulkopuolella. Edullisia ovat sellaiset indikaattorit, jotka kastettaessa valkuaisainetta sisältämättömään virtsaan ovat vähemmän värillisessä muodossa, niin että valkuaisaineen läsnäolo saa aikaan indikaattorin enemmän tai vähemmän täydellisen muuttumisen vahvemman väriseen muotoon, ja tuloksena on siten herkkä värin-muutos. Tunnetuimpia tällaisia valkuaisaine-virheindikaattoreita ovat tetrabromifenoliftaleiinietyyliesteri ja tetrabromifenolisininen 59678 (oktabromifenolisulfoftaleiini). Kirjallisuudessa on kuvattu joukko tällaisia valkuaisainetestipapereita, jotka eroavat toisistaan enimmäkseen vain lisäaineiden, kuten anionisten pinta-aktiivisten aineiden, väriaineiden, epäorgaanisten sulfaattien tms. käytön suhteen, ja joilla yleensä saadaan herkkä valkuaisainenäyttö.
Kaikilla tunnetuilla testipapereilla on kuitenkin pahana haittana, että ne reagoivat virtsassa usein esiintyvien lääkeaineiden metabo-liittien, kuten kiniinin, kinidiinin, resokiinin ja muiden typpipitoisten aineiden, metaboliittien kanssa samalla tavalla kuin valkuaisaineen kanssa.
Keksinnön kohteena on siten sellaisten testipaperien valmistus, joissa näiden typpipitoisten yhdisteiden häiritsevää vaikutusta ei esiinny tai joissa se on niin vähäinen, että se voidaan jättää huomioimatta, ilman että valkuaisaineen osoittamisherkkyyttä samalla vähennetään tunnettuihin testipapereihin verrattuna.
Keksinnön tarkoitus toteutettiin valmistamalla diagnostinen väline valkuaisaineen osoittamiseksi kehon nesteissä, joka väline koostuu imukykyisestä kantajasta, joka on imeytetty valkuaisainevirheen osoittavalla pH-indikaattorilla ja sopivalla puskuriaineella, ja keksinnölle on tunnusomaista, että indikaattori on valittu oktahalo-geenisulfoftaleiineista ja että väline sisältää ainakin yhtä veden kanssa sekoittumatonta, lineaarista tai haarautunutta polypropy-leeniglykolia, jonka molekyylipaino on 500-10000 ja joka voi sisältää vielä muita alempia oksialkyleeniryhmiä.
Imukykyisinä kantajina tulevat kysymykseen varsinkin suodatinpaperi, mutta myös kuitumatto, asbesti tms.
Keksinnössä käytettäviä polypropyleeniglykoleja ovat ennen kaikkea lineaariset polypropyleeniglykolit, edelleen propyleenioksidin ja etyleenioksidin massapolymeerit sekä haarautuneet yhdisteet, joissa propyleenioksidi on polymeroitu moniarvoisen alkoholin, kuten esim. trimetylolipropaanin, glyserolin tai pentaerytritolin kanssa, ja joka on mahdollisesti lisäksi modifioitu etyleenioksidilla. Näiden propyleeniglykolien molekyylipainon tulee olla noin 500-10000.
Tämänkaltaiset polypropyleeniglykolit ovat sinänsä tunnettuja, ja niitä käytetään tekniikassa mitä erilaisimpiin tarkoituksiin, esim.
5 59678 voiteluaineina, hydraulisina nesteinä, liuottimina, polyuretaanien raaka-aineina, pinta-aktiivisina aineina ym.
Kiiden keksinnön mukaista vaikutusta ei voitu ennakoida, ja se oli erittäin yllättävä, sillä tähän ryhmään kuuluvat vesiliukoiset edustajat, kuten esim. polypropyleeniglykoli, jonka molekyylipaino on noin 400, tai puhtaat polyetyleeniglykolit eivät vaikuta halutulla tavalla.
On huomattava, että haluttuja ominaisuuksia omaavia testipaperelta voidaan valmistaa keksinnön mukaisten polypropyleeniglykolien avulla vain käyttäen valkuaisainevirheindikaattoreita oktahalogeenisulfo-ftaleiinien luokasta. Muiden muuten käyttökelpoisten valkuaisaine-virheindikaattorien, kuten esim. tetrabromifenoliftaleiinietyyli-esterin kanssa saadaan testipapereita, joissa reaktio valkuaisaineen kanssa on myös vahvasti heikentynyt. Indikaattoreina tulevat kysy-mukseen seuraavat:
Oktabromifenolisulfoftaleiini (tetrabromifenolisininen), oktakloori-fenolisulfoftaleiini (tetrakloorifenolisininen) sekä sekahalogenoi-dut indikaattorit, esim. 3f,3",5',5"-tetrabromifenoli-3,4,5,6-tet-rakloorisulfoftaleiini, 3',3",5',5"-tetrakloorifenoli-3,4,5,6-tetrabromisulfoftaleiini ja 3',3M-dikloori-5’,5"-dibromifenoli- 3,4,5,6-tetrakloorisulfoftaleiini.
Kolmen ensimmäisen yhdisteen ollessa kirjallisuudesta tunnettuja ovat kolme muuta indikaattoria uusia; ne voidaan kuitenkin valmistaa tunnetuin menetelmin, esim. saattamalla tunnetut tetrahalogeeni-bentseeni-sulfokarbonihappoanhydridit reagoimaan fenolin tai 2-halo-geenifenolien kanssa Lewis-happojen, esim. tina-IV-kloridin, läsnäollessa ja klooraamalla tai bromaamalla syntyneet fenolisulfofta-leiinit inerteissä liuottimissa, esim. kloorilla tai bromilla jää-etikassa.
Erityisen edullisia ovat indikaattorit, joissa on 3',3",5'^"-asemassa 4 klooriatomia, koska typpiemästen häiritsevä vaikutus niihin on vielä heikompi kuin vastaaviin bromattuihin yhdisteisiin.
Valkuaisainetestipaperissa on käytettävä vahvaa puskuria, joka pitää pH:n vakiona kastettaessa paperi kehon nesteeseen, jolla on mahdol- 4 59678 lisesti toinen pH-arvo, niin että indikaattorin värinmuutos johtuu selvästi valkuaisaineen aiheuttamasta pK-arvon siirtymästä eikä pH-arvon muutoksesta. Tavallisesti sulfoftaleiini-indikaattoreita käytettäessä puskurin pH säädetään arvoon, joka on jonkin verran indikaattorin pH-muutosalueen alapuolella, niin että indikaattori on täysin vähemmän värillisessä happamassa muodossa. Parempi herkkyys erittäin pienien valkuaisainepitoisuuksien suhteen saadaan kuitenkin, kun puskurin pH-arvo on indikaattorin muutosalueella. Tämä aiheuttaa kuitenkin sen, että virtsaan kastamisen jälkeen osa indikaattorista on jo muuttunut ja negatiivivärjäys on vaikeampi erottaa heikosta valkuaisainevärj äyksestä.
Toisena odottamattomana ominaisuutena keksinnön mukaisilla polypro-pyleeniglykoleilla on että ne estävät tämän alkavan indikaattorin värinmuutoksen ilman, että herkkyys vakuaisaineen suhteen olennaisesti kärsii.
Indikaattorin "muutosalueella1’ käsitetään yleensä pH-aluetta, joka on puhtaassa vedessä yksikön verran pK-arvon ylä- ja alapuolella. Keksinnön mukaisiin valkuaisainetestipapereihin valitaan tarkoituksenmukaisesti pH-arvoja, jotka ovat alueella noin 1,0 yksiköstä käytetyn indikaattorin pK-arvon alapuolella noin 0,5 yksikköön pK-arvon yläpuolelle. Koska nämä ovat alueella 3»5 - 0, riittää sopivaksi pH- alueeksi noin pH 2,5 - noin pH 4,5· Alemmilla arvoilla esiintyy yleensä valkuaisainereaktion heikkeneminen, korkeammilla arvoilla typpiemästen ja normaalivirtsan reaktion vahvistuminen. Edullinen pH-arvo riippuu indikaattorin ohella keksinnön mukaan käytetystä polypropyleeniglykolin lajista ja muiden reagenssien laadusta, ja se voidaan helposti saada selville yksinkertaisin sarjakokein, joissa pH-arvoa ja puskurimäärää vaihdellaan siten, että indikaattori osoittaa kastamisen jälkeen valkuaisainetta sisältämättömään virtsaan pelkästään puhtaan "happamen" värin.
Puskureina tulevat kysymykseen kaikki, joilla on hyvä puskurikapa-siteetti mainitulla alueella, esim. sitruunahapon, omenahapon, viinihapon jne. seokset alkali- tai ammoniumsuolojensa kanssa.
Vaikka keksinnön mukaisilla polypropyleeniglykoleilla on osittain pinta-aktiivisia ominaisuuksia, voi kuitenkin olla tarkoituksenmukaista lisätä vielä tavallisia tensidejä. Tällöin tulevat kysymyk- 5 59678 seen ennen kaikkea ionittomat pinta-aktiiviset aineet, varsinkin etoksiloidut rasva-alkoholit ja fenolit, joissa on 1-^ oksietyleeni-ryhmää. Anioniset pinta-aktiiviset aineet vahvistavat reaktiota typpiemästen kanssa, kun taas kationiset tensidit saavat aikaan vahvan väärän positiivisen indikaattorireaktion, jollei käytetä erittäin happamia puskureita, jotka estävät valkuaisainereaktion. Nämä molemmat tensidiluokat ovat siten sopimattomia.
Voidaan tietenkin lisätä myös turpoavia aineita tai paksunnosaineita, jotka pystyvät hidastamaan reagenssien tihkumista kastetuista testi-papereista, jolloin on mahdollisesti kokeiltava, sopivatko nämä yhteen puskuriaineiden kanssa. Sopiviksi ovat osoittautuneet esim. hydroksietyyli- ja hydroksipropyyliselluloosa.
Edelleen reagensseihin voidaan lisätä vielä kompleksinmuodostajia, varsinkin magnesiumsulfaattia.
Keksinnön mukaisia polypropyleeneja sekä muita aineosia lisätään impregnointiliuokseen 100 ml:aa kohti seuraavat määrät:
Keksinnön mukaisia polypropyleeniglykoleja 0,5 - 5 g, edullisesti 1 - 2 g; puskuria 10 - 30 g, edullisesti 15 - 20 g; indikaattoria 0,02 - 0,2 g, edullisesti 0,05 - 1,0 g; pinta-aktiivista apuainetta 0,0 - 1,0 g, edullisesti 0,2 - 0,5 g.
Aineosien liuottimina tulevat kysymykseen veden ja alempien alkoholien seokset, joihin kaikki aineosat ovat liukenevia. Voidaan kuitenkin ensin esi-impregnoida puskuri vesiliuoksesta ja sitten jälki-impregnoida muut aineosat orgaanisen liuottimen liuoksesta.
Valmiita testipapereita voidaan käyttää sellaisenaan, tai ne voidaan liimata sinänsä tunnetulla tavalla pitämiin, edullisesti sulkea muovien ja hienosilmäisten verkkojen väliin. Keksintöä valaistaan lähemmin seuraavilla esimerkeillä, jolloin tehokkuutta typpiemästen suhteen valaistaan sillä, että ilmoitetaan kiniinimäärä, joka värjää kuten 5 mg-ί albumiinipitoisuus (normaalin erottamisen yläraja).
Mitä suurempi tämä määrä siis on, sitä vähemmän kiniini häiritsee koetta. Muiden typpiemästen, kuten esim. kinidiinin, resokiinin, 6 59678 bentsydamiinin jne. häiritsevät vaikutukset ovat samaa suuruusluokkaa kuin kiniinin.
Esimerkki 1
Suodatinpaperi (Schleicher & Schtlll 2316) impregnoidaan peräkkäin seuraavilla kahdella liuoksella ja kuivataan aina 60°C:ssa:
Liuos 1 sitruunahappo, monohydraatti 20 g ammoniakki, 25~#:nen vesiliuos n. 10 ml vesi, tisl. ad. 100 ml
Liuoksen pH säädetään 4,l:ksi.
Liuos 2 3’,3”,5', 5"-tetrakloorifenoli-3,i< »5,6- tetrabromi-sulfoftaleiini (pK = 3,9) 50 mg polypropyleeniglykoli, keskimääräinen mol.p. 1200 (Polyglykol P 1200 (R)) 2 g metanoli ad. 100 ml
Normaalivirtsa antaa testipapereilla keltaisen reaktion ja albumiini-pitoinen virtsa vihreästä sinivihreään väriin, jonka voimakkuus kasvaa .
Virtsat, joiden kiniinipitoisuus on n. 100 mg-# antavat saman vihreän värin kuin virtsat, joissa on 5 mg-# albumiinia.
Testipaperi, jolla on sama koostumus, mutta ilman polypropyleenigly-kolia, reagoi normaalivirtsan kanssa muodostaen vihreän värin. 5 mg-#:lla albumiinia saatu vihreä väri ei ole varmasti erotettavissa tästä negatiiviväristä. Tämän vuoksi verrataan 25 mg-#:n albumiinin aiheuttamaan reaktioon: jo n. 25 mg-# kiniiniä antaa tämän valkuaisai-nemäärän kanssa sekoittuvan tuloksen.
Kaupallisia pikatestejä käytettäessä harhauttavat 2-5 mg-# kiniiniä jo 5 mg-# albumiinimäärän.
Esimerkki 2
Suodatinpaperi (Schleicher & SchUll 2316) impregnoidaan peräkkäin seuraavilla kahdella liuoksella ja kuivataan aina 60°C:ssa: 7 59678
Liuos 1 sitruunahappo, monohydraatti 20 mg ammoniakki, 25_$:nen vesiliuos n. 6 ml vesi, tisl. ad. 100 ml
Liuoksen pH säädetään 3,l:ksi.
Liuos 2 3’,3",5’,5”,3,4,5,6-oktabromifenolisulfoftaleiini (tetrabromifenolisininen, pK = 3,6) 50 mg polypropyleeniglykoli, keskimääräinen mol.p.2000 (Polyglykol P 2000 (R)) 1 g nonyylifenoli, eetteröity 1-2 oksietyleeni- ' tähteellä (Antarox CO 210 (R)) 0,4 g metanoli ad. 100 ml Nämä molemmat liuokset voidaan valmistaa myös käyttäen puolta määrää liuotinta ja yhdistää liuokset ennen impregnointia.
Normaalivirtsalla saadaan testipaperilla keltainen reaktio ja albu-miinipitoisella virtsalla vihreä väri, jonka voimakkuus kasvaa.
Virtsat, joiden kiniinipitoisuus on n. 50 mg-%, antavat saman vihertävän värin kuin 5 mg-JK albumiinia sisältävät.
Testipaperi, jonka koostumus on sama, mutta ilman polypropyleeni- s glykolia, reagoi normaalivirtsan kanssa antaen heikosti vihertävän värin.
i
Noin 10 mg-% kiniiniä aiheuttaa näillä testipapereilla saman reaktion kuin 5 mg-$ albumiinia.
Jos nonyyli fenolin sijasta, joka sisältää 1-2 oksietyleenitähdettä (Antarox CO 210) käytetään 0,4 g kookosalkoholia, joka on eetteröity 2 oksietyleenitähteellä (Genapol C 020 (R)) tai 0,2 g tributyylife- ^ nolia, joka on eetteröity 4 oksietyleenitähteellä (Sapogenat T 040 (R)), niin saadaan käytännöllisesti katsoen identtisiä testipaperei-ta.
i
Esimerkki 3 s
Suodatinpaperi (Schleicher & Schilll 2316) esi-impregnoidaan natrium- i a vetysitraatin 15-#:sella vesiliuoksella (pH 3,5) ja kuivataan 60° '' * f : 1· -· 8 59678 C:ssa. Jälki-impregnointi suoritetaan seuraavilla liuoskoostumuksil-la, jolloin kuivatus tapahtuu aina 60°C:ssa: a) 3',3"»5',5”?3j^,5»6-oktakloorifenoli- sulf oftaleiini 50 mg polypropyleeniglykoli taulukon 1 mukaan 1 g metanoli ad. 100 ml Tämän testipaperin ominaisuudet vastaavat olennaisesti esimerkin 1 paperin ominaisuuksia.
b ) 3' ,3"-dibromi-51,5"_dikloorifenoli-3,4,5,6- tetrakloorisulfoftaleiini 50 mg
Desmophen 7200 (R) 1 g metanoli ad. 100 ml Tämän testipaperin ominaisuudet vastaavat olennaisesti esimerkin 2 paperin ominaisuuksia.
c ) 3' ,3",5’ ,5,,-tetrabromifenoli-3,4,5,6- tetrakloorisulfoftaleiini 50 mg
Desmophen 7200 (R) 1 g metanoli ad. 100 ml Tämän testipaperin ominaisuudet vastaavat olennaisesti esimerkin 2 paperin ominaisuuksia.
9 59678 >> >> co rvi σν vo vo r-- -=r cr\ r— X 3 -=r ·=τ -3- tn cm vo cm m
O X
d 3 d dcc c ddd
Oi—I ·Η ·Η ·Η Ή ·Η Ή ·Η ·Η >ί·Η ο ο ο ο Ο ο ο ο K h c ddd d ddd d φ o d d •H ·Η xö cö d a co o o o o o ooo o XÖ -H O o ooo o ooo o
XÖ H O 00 H LO O ΓΟ VO CO LTV CO
E >s -=r ro ro ro ro vo cm ro -3- ro •H ί>>
X Φ CO H Φ O
« e
I I
•H ·Η ·Η d d hi d φ φ o >j <ö φ φ x a d CÖ H H I >> O Φ .x >»>. >jd Hdd 3 o, ex a h i ω a ·η E O O O -rl >a -H >> d d d d d h d h Cö d aa a cö o φ o cö φ >>>i >, «s a φ a φ CO i—I H H CU H d
X O O O O ·Η P >5 P H
d a cv h a d h 3 ad h p h a o d o d •H H O O P ·Η .X 3 d 3 d o d d 3 h >> p a-p -p
E d d >»dOHd >sd-H
H d d H d rl M CÖ HCÖ O
H P P hO -P >3·Η Ci O Ci ·Η d d -Hd-Pdrö acö «m
d CÖ CÖ d CÖ Φ Φ CÖ CÖ *H
H CÖ ·Η Ci Ci Φ d E Φ· £5 P ,d Ό
•ra H CÖ CÖ Φ CÖ ·Η H d O
ocöocö cö h m e >i (d dcö e P .X .d JS >> jd P a > d> .x co >> cv odPdcö d-HHd d o 3 3 d p 3 p «h HE bflp p d p P a co Cö CO ό d h ·Η -H H a -H -H >» d Ci d ·Η
CÖCÖ do O >s O OH Ci CÖ Ci CO
E-l > φ H ·Η H H ·Η O Φ CÖ Φ — φ a a o a a a a da o i—I ·Η Ή a Ή ·Η ·Η cost'd Ό OOPd cöd d ·η d ao o pood-H >·η φ h E oE E dEEd-n d-π ojo 3d d ddPdH^ci P aCÖ CÖ dCÖCÖPCÖHCOCÖ >>>s
CO >> H H PHHdCÖHdCÖ pH
o hh h dHHcö ao e. a φ to
O O -H H CÖ H ·Η Ci O X Φ O -H
λ: a ό το CiOTdcöCi^aci cöd •H «H CÖ Ή ·Η ·Η CÖ a H a ·Η Η Φ d deo CO CÖ CO H 03 C *H bO d ·Ηι—I i—1φ
Φ d> X X JZ X o X H H -H H O ·· H
d do o οϋ o cö od ·η ολ! >> H ·Η H ·Η d Ή >J H > H φ H H >» a h Ci d-π dH -h dndd >>φ o >> h oo H CÖ ΦΗ (UH cö Φ fcO Φ p pH Ci P faO H Ci CÖ CÖ Φ O ΦΟ P φ ·Η Φ CO Φ >s Φ Φ·Η a •h φ r-\ χ r-{ χ P HerHd E a co Ed ·>>
E d >5>» >3>>·Η >ϊ Φ >ϊ d Ή Ο >ί·ΗΦ X H
<u H PH PH CO ΡφΡΦ dd H d Φ CÖO
te h φ to Φω o φη φ a p a W) ph e a
»""N /«“N
CC tt
—- — K
O K CC CC CC -=r O CC cc cc o — — '-r -— LO -3- '— ' —
-=J- O O O O VO LO ro CM H
o o o o cm tr- σν o
a CM H cö p- [i] H
t- o- ro ro a a «« •H H E-l E-ι S S d E O d d d d
Ή X & Φ φ Φ H H HH O
d >> d d d d o o oo h dna a a a o o oo e a ω o o o o cö cö cöcö o a >> E E EEd d dd d 3 H co CO CO CO 3 3 33 3
CÖ O Φ Φ CU CU H i—I i—I H i—I
«aa ω Ω Ω a a aa a 10 5967 8
Esimerkki b
Suodatinpaperi (Schleicher & SchUll 2316) impregnoidaan peräkkäin seuraavilla 2 liuoksella, jolloin kuivatus on aina 60°C:ssa:
Liuos 1 omenahappo 15 g 6-n natriumhydroksidi n. 16 ml hydroksietyyliselluloosa (Natrosol 250 G (R)) 2 g vesi, tisl. ad. 100 ml
Liuoksen pH säädetään 3>5:een.
Liuos 2 tetrabromifenolisininen 0,6 g
Polyglykol P 1200 (R) 3 g kloroformi ad. 100 ml Tämän testipaperin ominaisuudet vastaavat olennaisesti esimerkin 2 paperin ominaisuuksia.
Esimerkki 5 31,3"-dikloorifenoli-3,^,5,6-tetrakloorisulfoftaleiini 25,7 g (0,2 moolia) o-kloorifenolia sekoitetaan tetrakloori-o-sulfo-bentsoehappoanhydridin (*J5 g, 0,14 moolia) kanssa, seokseen lisätään 9 ml = 20,il g tina-IV-kloridia, ja seosta kuumennetaan sekoittaen 12 tuntia öljyhauteella 120-130°C:ssa. Sitten ylimääräinen kloorifenoli poistetaan vesihöyryn avulla, ja jäännös puhdistetaan liuottamalla useampaan kertaan 4-n natriumkarbonaattiliuokseen ja saostamalla suolahapolla, lopuksi kiteytetään uudelleen jääetikasta. Saadaan 5,3 g = 47 % vaaleanpunaista 3',3"“dikloorifenoli-3,^,5,6-tetrakloorisulfo-ftaleiinia, joka sisältää 1 moolin etikkahapooa, sp. 244—245°C (mole-kyylipaino: C-^HgClgO^S · C2H4O2 = 621,13).
Samalla tavalla saadaan käytettäessä o-bromifenolia 3,,3"-dibromifeno'· li-3, i|,5,6-tetrakloorisulfoftaleiini , joka kiteytettäessä uudelleen jääetikasta kiteytyy samoin 1 etikkahappomoolin kanssa, sp. 172-1730C.
Esimerkki 6 3’,3"-dibromifenoli-3,4,5,6-tetrakloorisulfoftaleiini L>9 g (0,01 moolia) fenoli-3,^,5,6-tetrakloorisulfoftaleiinia liuotetaan 50 mlraan jääetikkaa, ja liuokseen tiputetaan sekoittaen 2()o0: u;-,n 11 59678 liuos, jossa on 1,1 ml = 3,37 g bromia (0,04 g-atomia) 50 mlissa jääetikkaa. Sekoitusta jatketaan vielä 3 tuntia, muodostuneet kiteet imusuodatetaan ja kiteytetään uudelleen jääetikasta. Saadaan 3,9 g = 55 % 3' ,3,,-dibromifenoli-3,4,5,6-tetrakloorisulfoftaleiinia, sp. 173“17^°C. Yhdiste sisältää 1 moolin kide-etikkahappoa (molekyyli-paino: C^HgB^ClijO^S · C2Hi|02 = 710,05).
Esimerkki 7 3*,3t’~dibromi-5 1,5t>~dikloorifenoli-3,^,5,6-tetrakloorisulfoftaleiini 3,55 g (0,005 moolia) 3’,3,,-dibromifenoli-3,il,5,6-tetrakloorisulfo-ftaleiinia suspendoidaan 50 ml:aan jääetikkaa. Suspensioon lisätään hitaasti ja sekoittaen liuos, jossa on 0,9^ g (0,025 g-atomia) klooria 50 ml:ssa jääetikkaa. Useampituntisen sekoittamisen jälkeen saadaan värittöminä kiteinä 3,8 g = 90,5 % 3',3"-dibromi-5*,5"-dikloori-fenoli-3,4,5,6-tetrakloorisulfoftaleiinia, sP. 265-268°C. Yhdiste kiteytyy 2 moolin kanssa etikkahappoa (molekyylipaino: C-^HgB^ClgO^S · 2 02Η^02 = 839,01).
Sama yhdiste voidaan valmistaa myös bromaamalla 3',3"-dikloorifenoli-3,^,5,6-tetrakloorisulfoftaleiini (saatu klooraamalla fenoli-3, l), 5,6-tetrakloorisulfoftaleiini , saanto 60 %).
Esimerkki 8 3' ,3” ,5’ ,5t'-tetrakloorifenoli-3,4,5,6-tetrabromisulfoftaleiini 13,8 g (0,02 moolia) fenoli-3,4,5,6-tetrabromisulfoftaleiinia suspendoidaan 100 ml:aan jääetikkaa, ja suspensioon tiputetaan sekoittaen huoneen lämpötilassa liuos, jossa on 3,6 g klooria (~O,1 g-atomia) 30 ml:ssa jääetikkaa. Sekoitusta jatketaan vielä useita tunteja, ja muodostuneet beigenväriset kiteet imusuodatetaan. Uudelleenkiteyttä- mällä jääetikka-vesiseoksesta 9:1 saadaan 11 g = 58,3 % 3*,3”,51,5"-tetrakloorifenoli-3,4,5,6-tetrabromisulfoftaleiinia värittöminä kiteinä, sp. 203-204°C (haj.).
Yhdiste kiteytyy 2 moolin kanssa etikkahappoa ja 1 moolin kanssa vettä (molekyylipaino: C-^HgBr^CljjC^S · 2 CH^COOH · H20 = 9*15,9).
Analogisella tavalla saadaan fenoli-3,^,5,6-tetrakloorisulfoftaleiinis-ta klooraamalla jääetikassa 3’ , 3" ,5 ’ ,5'’-tetrakloorifenol i-3,4,5,6-tetrakloorisulfoftaleiini, sp. 277-278°C. Yhdiste kiteytyy 1 moolin kanssa etikkahappoa (molekyylipaino: C-^HgClgC^S · 690).
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2510633A DE2510633C3 (de) | 1975-03-12 | 1975-03-12 | Diagnostisches Mittel zum Nachweis von Eiweiß in Körperflüssigkeiten und dafür geeignete Indikatorfarbstoffe |
| DE2510633 | 1975-03-12 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI760578A FI760578A (fi) | 1976-09-13 |
| FI59678B FI59678B (fi) | 1981-05-29 |
| FI59678C true FI59678C (fi) | 1981-09-10 |
Family
ID=5941061
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI760578A FI59678C (fi) | 1975-03-12 | 1976-03-05 | Diagnostiskt medel foer att paovisa aeggvita i kroppsvaetskor |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4013416A (fi) |
| JP (1) | JPS5278866A (fi) |
| AT (1) | AT349153B (fi) |
| AU (1) | AU501932B2 (fi) |
| BE (1) | BE839363A (fi) |
| CA (1) | CA1055824A (fi) |
| CH (1) | CH627000A5 (fi) |
| CS (1) | CS190526B2 (fi) |
| DD (2) | DD129788A5 (fi) |
| DE (1) | DE2510633C3 (fi) |
| DK (1) | DK144443C (fi) |
| ES (1) | ES445808A1 (fi) |
| FI (1) | FI59678C (fi) |
| FR (1) | FR2304084A1 (fi) |
| GB (2) | GB1487717A (fi) |
| HU (1) | HU172450B (fi) |
| IE (3) | IE42507B1 (fi) |
| IL (1) | IL49167A (fi) |
| IT (1) | IT1056947B (fi) |
| LU (1) | LU74519A1 (fi) |
| NL (1) | NL164966C (fi) |
| PL (1) | PL103510B1 (fi) |
| SE (1) | SE423754B (fi) |
| SU (2) | SU633501A3 (fi) |
| YU (1) | YU59476A (fi) |
Families Citing this family (37)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5513814A (en) * | 1978-07-12 | 1980-01-31 | Mitsui Toatsu Chem Inc | Inspecting method for albumin |
| US4654309A (en) * | 1980-12-19 | 1987-03-31 | Minnesota Mining And Manufacturing Co. | Test method and article for estimating the concentration of free acid in liquid |
| BR8108925A (pt) * | 1980-12-19 | 1982-11-30 | Minnesota Mining & Mfg | Processo de teste e artigo para estimar a concentracao de acido livre em liquido |
| US4542750A (en) * | 1982-08-13 | 1985-09-24 | Primary Diagnostic Systems, Inc. | Non-invasive method for diagnosing incipient or developed cancer tissue |
| US4568647A (en) * | 1983-10-11 | 1986-02-04 | Eastman Kodak Company | Method and element for albumin assay |
| DE3345748A1 (de) * | 1983-12-17 | 1985-08-29 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Phenolsulfonphthaleinyl-ss-d-galactoside, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zur bestimmung der ss-d-galactosidase |
| US5183742A (en) * | 1984-02-24 | 1993-02-02 | Dai Nippon Insatsu Kabushiki Kaisha | Test device for detecting glucose, protein urobilinogen, and/or occult blood in body fluids and/or determining the PH thereof |
| ES2028124T3 (es) * | 1987-04-22 | 1992-07-01 | Schiapparelli Biosystems, Inc. | Metodo para la determinacion de albumina en fluidos biologicos. |
| CA1320420C (en) * | 1988-03-25 | 1993-07-20 | Dominique Thoraval | Paper chemical agent detectors |
| US5194390A (en) * | 1988-07-05 | 1993-03-16 | Miles Inc. | Composition for the assay of albumin |
| DE3823151C2 (de) * | 1988-07-08 | 1997-07-10 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur Bestimmung der Ionenstärke oder des spezifischen Gewichts von wäßrigen Flüssigkeiten |
| US5077222A (en) * | 1988-09-30 | 1991-12-31 | Miles Inc. | Method for assaying for proteins using a dual indicator reagent composition |
| US5049358A (en) * | 1988-09-30 | 1991-09-17 | Miles Inc. | Composition and test device for assaying for proteins |
| JPH0752198B2 (ja) * | 1989-08-30 | 1995-06-05 | マイルス・インコーポレーテッド | 変色を示す組成物、アルブミンの存在及び／又は濃度の測定方法及び検出具 |
| US5264589A (en) * | 1991-06-06 | 1993-11-23 | Miles Inc. | Merocyanine protein error indicators |
| ES2092595T3 (es) * | 1991-06-06 | 1996-12-01 | Bayer Ag | Tira de ensayo que contiene merocianina y fenolsulfonoftaleinas polihalogenadas nitro o nitroso sustituidas como indicadores de proteinas. |
| US5187104A (en) * | 1991-06-06 | 1993-02-16 | Miles Inc. | Nitro or nitroso substituted polyhalogenated phenolsulfonephthaleins as protein indicators in biological samples |
| US5326707A (en) * | 1991-11-29 | 1994-07-05 | Miles Inc. | Composition and device for urinary protein assay and method of using the same |
| US5424215A (en) * | 1994-02-07 | 1995-06-13 | Miles Inc. | Assay for the determination of protein in a biological sample |
| US5593895A (en) * | 1995-04-27 | 1997-01-14 | Bayer Corporation | Method for the detection of protein in urine |
| US6551791B1 (en) | 1995-12-21 | 2003-04-22 | University Of Florida | Rapid diagnostic method for distinguishing allergies and infections and nasal secretion collection unit |
| US5910421A (en) * | 1995-12-21 | 1999-06-08 | University Of Florida | Rapid diagnostic method for distinguishing allergies and infections |
| KR100318552B1 (ko) * | 1998-12-24 | 2002-09-05 | 한국과학기술연구원 | 간질환관련표식물질의검출용스트립 |
| EP1039299B1 (en) * | 1999-03-24 | 2004-11-17 | JohnsonDiversey, Inc. | A method of detecting protein and a kit using the same |
| ES2226697T3 (es) | 1999-03-24 | 2005-04-01 | Johnsondiversey, Inc. | Metodo para detectar proteina y kit que emplea el mismo. |
| US20060057735A1 (en) * | 2002-08-09 | 2006-03-16 | Arkray, Inc. | Test piece for protein assay and process for producing the same |
| US8460877B2 (en) | 2004-01-23 | 2013-06-11 | Arkray, Inc. | Method of protein measurement |
| US7727206B2 (en) * | 2005-12-27 | 2010-06-01 | Gorres Geoffrey H | Device for monitoring a patient for a urinary tract infection |
| US8012761B2 (en) * | 2006-12-14 | 2011-09-06 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Detection of formaldehyde in urine samples |
| US7846383B2 (en) * | 2006-12-15 | 2010-12-07 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Lateral flow assay device and absorbent article containing same |
| GB0808557D0 (en) | 2008-05-13 | 2008-06-18 | 3M Innovative Properties Co | Sampling devices and methods of use |
| GB2460069A (en) * | 2008-05-15 | 2009-11-18 | Snell & Wilcox Ltd | Sampling conversion between formats in digital image processing |
| KR101958699B1 (ko) | 2010-12-28 | 2019-03-15 | 라이온 가부시키가이샤 | 구강 상태의 판정 방법, 그리고 그것을 위해 사용되는 분석 용구, 장치, 및 프로그램 |
| WO2014007846A1 (en) | 2012-07-06 | 2014-01-09 | 3M Innovative Properties Company | Apparatus and methods for detecting atp in a liquid sample |
| US10793890B2 (en) | 2012-07-06 | 2020-10-06 | 3M Innovative Properties Company | Apparatus for detecting ATP in a liquid sample |
| US10478498B2 (en) | 2014-06-20 | 2019-11-19 | Reform Biologics, Llc | Excipient compounds for biopolymer formulations |
| US10279048B2 (en) | 2016-07-13 | 2019-05-07 | Reform Biologics, Llc | Stabilizing excipients for therapeutic protein formulations |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US1786611A (en) * | 1928-04-04 | 1930-12-30 | Hynson Westcott & Dunning Inc | Halogenated sulphone phthaleins |
| US3485587A (en) * | 1956-02-29 | 1969-12-23 | Miles Lab | Protein indicator |
| US3095277A (en) * | 1956-05-21 | 1963-06-25 | Miles Lab | Diagnostic composition |
| US2986453A (en) * | 1957-11-13 | 1961-05-30 | Miles Lab | Diagnostic compositions |
| NL301192A (fi) * | 1963-01-18 | |||
| GB1050880A (fi) * | 1964-11-13 | |||
| US3533749A (en) * | 1967-09-12 | 1970-10-13 | Warner Lambert Pharmaceutical | Method for the determination of total albumin |
| US3558278A (en) * | 1967-12-26 | 1971-01-26 | Baxter Laboratories Inc | Determination of albumin |
| US3884637A (en) * | 1973-03-21 | 1975-05-20 | Pierce Chemical Co | Method and composition for the determination of albumin |
| CH593503A5 (fi) * | 1973-07-09 | 1977-12-15 | Oce Van Der Grinten Nv | |
| US3873272A (en) * | 1974-02-20 | 1975-03-25 | Baxter Laboratories Inc | Reagent and method for albumin determination |
-
1975
- 1975-03-12 DE DE2510633A patent/DE2510633C3/de not_active Expired
-
1976
- 1976-02-23 SE SE7602134A patent/SE423754B/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-02-26 DD DD7600198424A patent/DD129788A5/xx unknown
- 1976-02-26 DD DD191553A patent/DD125021A5/xx unknown
- 1976-02-26 US US05/661,687 patent/US4013416A/en not_active Expired - Lifetime
- 1976-03-05 FI FI760578A patent/FI59678C/fi not_active IP Right Cessation
- 1976-03-05 ES ES445808A patent/ES445808A1/es not_active Expired
- 1976-03-05 IL IL49167A patent/IL49167A/xx unknown
- 1976-03-05 CS CS761458A patent/CS190526B2/cs unknown
- 1976-03-05 SU SU762328363A patent/SU633501A3/ru active
- 1976-03-08 IT IT20968/76A patent/IT1056947B/it active
- 1976-03-08 YU YU00594/76A patent/YU59476A/xx unknown
- 1976-03-09 NL NL7602442.A patent/NL164966C/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-03-09 BE BE164993A patent/BE839363A/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-03-10 CH CH296376A patent/CH627000A5/de not_active IP Right Cessation
- 1976-03-10 LU LU74519A patent/LU74519A1/xx unknown
- 1976-03-10 HU HU76BO00001602A patent/HU172450B/hu unknown
- 1976-03-10 DK DK103276A patent/DK144443C/da not_active IP Right Cessation
- 1976-03-11 GB GB9734/76A patent/GB1487717A/en not_active Expired
- 1976-03-11 GB GB27421/76A patent/GB1487718A/en not_active Expired
- 1976-03-11 IE IE2561/77A patent/IE42507B1/en unknown
- 1976-03-11 AU AU11895/76A patent/AU501932B2/en not_active Expired
- 1976-03-11 FR FR7606937A patent/FR2304084A1/fr active Granted
- 1976-03-11 IE IE772561A patent/IE42507L/xx unknown
- 1976-03-11 IE IE504/76A patent/IE42506B1/en unknown
- 1976-03-11 PL PL1976187846A patent/PL103510B1/pl unknown
- 1976-03-11 AT AT180576A patent/AT349153B/de not_active IP Right Cessation
- 1976-03-12 JP JP51027019A patent/JPS5278866A/ja active Granted
- 1976-03-12 CA CA248,333A patent/CA1055824A/en not_active Expired
- 1976-11-10 US US05/740,462 patent/US4260777A/en not_active Expired - Lifetime
-
1977
- 1977-05-23 SU SU772482007A patent/SU625610A3/ru active
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI59678C (fi) | Diagnostiskt medel foer att paovisa aeggvita i kroppsvaetskor | |
| Heirwegh et al. | Recent advances in the separation and analysis of diazo-positive bile pigments | |
| FI69929C (fi) | Foerfarande och anordning foer avlaegsnande av grumlighet | |
| JP2964018B2 (ja) | エチレンオキサイド滅菌標識用インキ組成物 | |
| De Bold et al. | Atrial specific granules of the rat heart: light microscopic staining and histochemical reactions. | |
| US3712853A (en) | Diagnostic agent for the detection of nitrite and of nitrite-forming bacteria | |
| JPS5887461A (ja) | 分析素子の製造方法 | |
| EP0283206A2 (en) | Covalently labeled siloxane polymers | |
| PL192629B1 (pl) | Nowa kompozycja do barwienia in vivo zawierająca izomery błękitu toluidyny O i N-demetylowane pochodne tych izomerów | |
| AU646525B2 (en) | Peroxidase indicator system for basic media | |
| CA1289069C (en) | Test kit, extraction device and method for the determination of streptococcus a antigen | |
| WO2004015423A1 (ja) | 蛋白質測定方法、蛋白質測定用指示薬、および蛋白質測定用試験片 | |
| US5070158A (en) | Covalently labeled siloxane polymers | |
| JP4489590B2 (ja) | 蛋白質測定用試験片およびその製造方法 | |
| JP3842372B2 (ja) | 分析装置用の沈殿防止性組成物 | |
| KR100509668B1 (ko) | 간섭이감소된산화환원검출시스템 | |
| FI76434C (fi) | Foerfarande foer bestaemning av hemoglobinhalten i ett biologiskt prov. | |
| CA1055954A (en) | Halogenated sulphophthaleins | |
| CN111122881A (zh) | 一种25羟基维生素d磁微粒化学发光检测试剂盒 | |
| Eskelson et al. | Effects of tomatine on the colorimetric determination of cholesterol by the zak procedure | |
| TWI250157B (en) | In vivo stain compounds | |
| SU862107A1 (ru) | Позитивный фотокопировальный лак | |
| JP2001302660A (ja) | 蛋白質測定用指示薬 | |
| Luhman et al. | Simple enzymatic assay for determining cholesterol concentrations in bile | |
| US3317282A (en) | Field test for indicating and measuring quaternary ammonium compounds |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired | ||
| MA | Patent expired |
Owner name: BOEHRINGER MANNHEIM GMBH |