JP4489590B2 - 蛋白質測定用試験片およびその製造方法 - Google Patents
蛋白質測定用試験片およびその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4489590B2 JP4489590B2 JP2004527332A JP2004527332A JP4489590B2 JP 4489590 B2 JP4489590 B2 JP 4489590B2 JP 2004527332 A JP2004527332 A JP 2004527332A JP 2004527332 A JP2004527332 A JP 2004527332A JP 4489590 B2 JP4489590 B2 JP 4489590B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- test piece
- protein
- protein measurement
- producing
- sensitizer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 45
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 45
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims description 24
- 238000005259 measurement Methods 0.000 title claims description 22
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 14
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 18
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 claims description 16
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 claims description 13
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 9
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 9
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 8
- UUZYBYIOAZTMGC-UHFFFAOYSA-M benzyl(trimethyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].C[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UUZYBYIOAZTMGC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- XJWSAJYUBXQQDR-UHFFFAOYSA-M dodecyltrimethylammonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C XJWSAJYUBXQQDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- LHGMHYDJNXEEFG-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]iminocyclohexa-2,5-dien-1-one Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1N=C1C=CC(=O)C=C1 LHGMHYDJNXEEFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 4
- RAWVDDAJSCCYHU-CSJRWYNFSA-N Zephyramine Chemical compound C([C@@H]1O[C@@H]11)CC2N3CC(C=C(C(=C4)OC)OC)=C4[C@@]21CC3 RAWVDDAJSCCYHU-CSJRWYNFSA-N 0.000 claims description 3
- RAWVDDAJSCCYHU-DXEWXGHRSA-N Zephyramine Natural products O(C)c1c(OC)cc2c(c1)[C@]13[C@@H]4O[C@H]4CC[C@H]1N(C2)CC3 RAWVDDAJSCCYHU-DXEWXGHRSA-N 0.000 claims description 3
- OCBHHZMJRVXXQK-UHFFFAOYSA-M benzyl-dimethyl-tetradecylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 OCBHHZMJRVXXQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 29
- -1 alkyl dimethyl benzyl ammonium Chemical compound 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 11
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 11
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 11
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 10
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 7
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- AAAQKTZKLRYKHR-UHFFFAOYSA-N triphenylmethane Chemical compound C1=CC=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 AAAQKTZKLRYKHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 2
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 2
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N monopropylene glycol Natural products CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 2
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 2
- 0 *C1=CC(C2(c3cc(*)c(*)c(*)c3)O*3(CC3)c3c(*)c(*)c(*)c(*)c23)C=C(*)C1O Chemical compound *C1=CC(C2(c3cc(*)c(*)c(*)c3)O*3(CC3)c3c(*)c(*)c(*)c(*)c23)C=C(*)C1O 0.000 description 1
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 description 1
- 229920000049 Carbon (fiber) Polymers 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical class CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 229920001328 Polyvinylidene chloride Polymers 0.000 description 1
- 229920000297 Rayon Polymers 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 208000012931 Urologic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 125000005211 alkyl trimethyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004760 aramid Substances 0.000 description 1
- 229920003235 aromatic polyamide Polymers 0.000 description 1
- CYDRXTMLKJDRQH-UHFFFAOYSA-N benzododecinium Chemical class CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 CYDRXTMLKJDRQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 description 1
- 239000004917 carbon fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000009535 clinical urine test Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical class OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 150000004693 imidazolium salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 239000011490 mineral wool Substances 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 125000000018 nitroso group Chemical group N(=O)* 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 1
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002861 polymer material Substances 0.000 description 1
- 229920000098 polyolefin Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000005033 polyvinylidene chloride Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 239000002964 rayon Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 150000003333 secondary alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 208000014001 urinary system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/84—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH
Description
本発明は、蛋白質含有試料（たとえば血液や尿などの体液、蛋白質含有飲料、工場廃水）中に存在する蛋白質を測定するための蛋白質測定用試験片およびその製造方法に関する。
生体試料中の蛋白質を測定することは、病理学的診断において重要である。たとえば、肝臓機能が低下した場合には、血清アルブミンの量が減少する一方、腎炎、ネフローゼ症候群、結石、腫瘍等の腎・尿路疾患、循環系及び中枢神経系の疾患などの場合には、尿中の蛋白質の量が増加する。したがって、アルブミンなどの蛋白質を測定することは、これらの疾患の診断において重要な指針となり得るのである。
蛋白質測定の分野においては、蛋白質誤差指示薬を用いた簡便な測定方法が知られてい る。
この測定方法では、蛋白質誤差指示薬として、たとえばテトラブロモフェノールブルー（ＴＢＰＢ）が用いられており、一例を挙げれば、ＴＢＰＢを用いた尿試験紙が一次スクリーニング用として広く用いられている。ＴＢＰＢは、蛋白質が存在すると、ｐＨ３付近でフェノール性ヒドロキシル基の解離が起こり、黄色から青色に変化するため、蛋白質を検出することができる。
しかしながら、ＴＢＰＢを指示薬として用いた試験紙は、臨床的に必要とされる１０〜２０ｍｇ／ｄＬの低濃度蛋白質に対する検出感度が不充分なため、蛋白質を正確に検出できない場合がある。たとえば、カラーチャートとの比較により行われる目視判定においては、陰性蛋白質と痕跡蛋白質の色が近いために区別が難しく判定が困難である。一方、尿試験紙の測定装置を用いる場合においても、ＴＢＰＢの感度が低いためにしばしば判定を誤る場合がある。
そのため、低濃度な蛋白質をより高感度に定量できる技術が望まれていた。
上述した課題を解決すべく本発明者が鋭意検討した結果、本発明者は、試験片に界面活性剤を含有させれば、低濃度の蛋白質を高感度で測定することができることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明の第１の側面により提供される蛋白質測定用試験片は、蛋白質を定量または半定量するために使用され、かつ酸性ｐＨ指示薬を含む蛋白質測定用試験片であって、蛋白質に対する発色感度を高めるための増感剤として、界面活性剤を含んでいる。
本発明の第２の側面においては、蛋白質を定量または半定量するために使用される蛋白質測定用試験片を製造する方法であって、酸性ｐＨ指示薬および増感剤を含んだ含浸液を吸収性担体に含浸させた後に、これを乾燥させることにより蛋白質測定用試験片を製造する方法において、上記増感剤として、界面活性剤を使用する、蛋白質測定用試験片の製造方法が提供される。
本発明において使用することができる酸性ｐＨ指示薬としては、たとえばトリフェニルメタン系指示薬が挙げられる。トリフェニルメタン系指示薬としては、典型的には、下記化学式（１）で示されるものが挙げられる。
化学式（１）において、Ｘ１はハロゲン、ニトロ基またはニトロソ基であり、Ｘ２およびＸ３は同一または異なるハロゲンである。
本発明においては、トリフェニルメタン系指示薬として、下記化学式（２）で示されるテトラブロモフェノールブルー（ＴＢＰＢ）を使用するのが好ましい。
含浸液中の酸性ｐＨ指示薬（たとえばＴＢＰＢ）の濃度は、特に限定されないが、典型的には０．１〜５ｍＭ、好ましくは０．３〜０．１ｍＭとされる。
界面活性剤（増感剤）としては、カチオン系の界面活性剤を用いるのが好ましく、これに加えて、あるいはこれに代えてノニオン系の界面活性剤を使用してもよい。
カチオン系の界面活性剤としては、たとえば第４級アンモニウム塩を使用することができる。第４級アンモニウム塩としては、たとえばアルキルジメチルベンジルアンモニウム、アルキルトリメチルアンモニウム塩、ジアルキルジメチルアンモニウム塩、ベンザルコニウム塩、およびイミダゾリウム塩が挙げられる。カチオン系の界面活性剤としては、脂肪族アミン塩を使用することもできる。
ノニオン系の界面活性剤としては、エーテル型、エーテルエステル型、エステル型、および含窒素型のいずれをも使用することができる。
エーテル型の界面活性剤としては、たとえばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン２級アルコールエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンステロールエーテル、ポリオキシエチレンラノリン誘導体、アルキルフェノールホルマリン縮合物の酸化エチレン誘導体、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー、およびポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテルが挙げられる。
エーテルエステル型の界面活性剤としては、たとえばポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、およびポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルが挙げられる。
エステル型の界面活性剤としては、たとえばポリエチレングリコール脂肪酸エステル、脂肪酸モノグリセリド、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、およびショ糖脂肪酸エステルが挙げられる。
含窒素型の界面活性剤としては、脂肪酸アルカノールアミド、ポリオキシエチレン脂肪酸アミド、ポリオキシエチレンアルキルアミン、およびアルキルアミンオキサイドが挙げられる。
本発明におけるカチオン系の界面活性剤としては、典型的には、臭化ベンジルトリメチルアンモニウム、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、臭化ラウリルトリメチルアンモニウム、またはゼフィラミンが使用され、ノニオン系の界面活性剤としては、典型的には、ポリエチレングリコールが使用される。もちろん、複数種の界面活性剤を併用してもよく、その場合には、カチオン系の界面活性剤とノニオン系の界面活性剤とを組み合わせて使用するのが好ましい。典型的には、カチオン系界面活性剤である臭化ベンジルトリメチルアンモニウムと、ノニオン系の界面活性剤であるポリエチレングリコールを組み合わせて使用される。
含浸液中の増感剤（界面活性剤）の濃度は、特に限定されないが、典型的には０．０１〜５ｗｔ％、好ましくは０．０１〜１ｗｔ％とされる。
増感剤としては、界面活性剤に加えて、ポリカーボネートやポリビニルアルコールなどの高分子材料を使用してもよい。
含浸液のｐＨは、酸性ｐＨ指示薬のｐＫａ値よりもやや低い値に設定される。酸性ｐＨ指示薬としてＴＢＰＢを使用する場合には、含浸液のｐＨは２．０〜４．５とされ、好ましくは２．０〜３．５とされる。
緩衝剤としては、含浸液のｐＨ（たとえばｐＨ２．０〜４．５の範囲）において良好な緩衝能を有し、酸性ｐＨ指示薬と蛋白質との反応を阻害しないものであれば何れでもよい。緩衝剤としては、たとえばグリシン緩衝液、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、リンゴ酸緩衝液、あるいは酒石酸緩衝液を用いることができる。含浸液中の緩衝剤の濃度は、特に限定されないが、典型的には０．１〜１．５Ｍ、好ましくは０．３〜１Ｍである。
吸収性担体としては、蛋白質成分を含まない多孔性物質を使用することができ、たとえばシート状または膜状の形態のものが使用される。多孔性物質としては、たとえば紙状物、フォーム（発泡体）、織布状物、不織布状物、および編物状物が挙げられる。吸収性担体を形成するための材料としては、たとえば綿、麻、セルロース、ニトロセルロース、セルロースアセテート、ロックウール、ガラス繊維、シリカ繊維、カーボン繊維、ボロン繊維、ポリアミド、アラミド、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセテート、レーヨン、ポリエステル、ナイロン、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸エステル、およびポリオレフィンが挙げられる。これら吸収性担体の形状は、特に限定されないが、矩形、長矩形、円形あるいは楕円形が一般的である。
本発明の蛋白質測定用試験片は、そのままでも使用することができるが、非吸収体に接着させて使用することもできる。
非吸収体としては、たとえばシート状または膜状の形態のものが使用される。非吸収体を形成するための材料としては、たとえばポリエチレンテレフタレート、ポリエステル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、およびポリスチレンが挙げられる。
［実施例１］
本実施例では、アルブミン濃度が０．３ｍｇ／ｄＬ（陰性）または１５ｍｇ／ｄＬ（陽性）の尿を試験片に含浸させ、それぞれについて反射率を測定した。試験片は、含浸液を濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ社製「３ＭＭＣｈｒ」）に含浸させた後にそれを乾燥させることにより形成した。含浸液としては、表１に示した基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ベンジルトリメチルアンモニウムを０．２ｗｔ％添加したものを使用した。反射率は、色差計を用いて、測定波長を６３０ｎｍとして測定した。測定結果については、表２に示した。
本実施例では、アルブミン濃度が０．３ｍｇ／ｄＬ（陰性）または１５ｍｇ／ｄＬ（陽性）の尿を試験片に含浸させ、それぞれについて反射率を測定した。試験片は、含浸液を濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ社製「３ＭＭＣｈｒ」）に含浸させた後にそれを乾燥させることにより形成した。含浸液としては、表１に示した基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ベンジルトリメチルアンモニウムを０．２ｗｔ％添加したものを使用した。反射率は、色差計を用いて、測定波長を６３０ｎｍとして測定した。測定結果については、表２に示した。
［実施例２］
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウムを０．０１ｗｔ％添加したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウムを０．０１ｗｔ％添加したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
［実施例３］
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ラウリルトリメチルアンモニウムを０．０１ｗｔ％添加したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ラウリルトリメチルアンモニウムを０．０１ｗｔ％添加したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
［実施例４］
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてノニオン系界面活性剤であるポリエチレングルコールを０．５ｗｔ％添加したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてノニオン系界面活性剤であるポリエチレングルコールを０．５ｗｔ％添加したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
［実施例５］
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ベンジルトリメチルアンモニウムを０．２ｗｔ％およびノニオン系界面活性剤であるポリエチレングリコールを０．５ｗｔ％を併用したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ベンジルトリメチルアンモニウムを０．２ｗｔ％およびノニオン系界面活性剤であるポリエチレングリコールを０．５ｗｔ％を併用したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
［実施例６］
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ラウリルトリメチルアンモニウムを０．０１ｗｔ％およびノニオン系界面活性剤であるポリエチレングリコールを０．５ｗｔ％を併用したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤である臭化ラウリルトリメチルアンモニウムを０．０１ｗｔ％およびノニオン系界面活性剤であるポリエチレングリコールを０．５ｗｔ％を併用したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
［実施例７］
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤であるゼフィラミンを０．０１ｗｔ％およびノニオン系界面活性剤であるポリエチレングリコールを０．５ｗｔ％を併用したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した
本実施例においては、含浸液として、表１の基本組成に対して、増感剤としてカチオン系界面活性剤であるゼフィラミンを０．０１ｗｔ％およびノニオン系界面活性剤であるポリエチレングリコールを０．５ｗｔ％を併用したものを用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した
［比較例１］
本比較例においては、含浸液として基本組成のもの（界面活性剤（増感剤）を含まないもの）を用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
本比較例においては、含浸液として基本組成のもの（界面活性剤（増感剤）を含まないもの）を用いた以外は、実施例１と同様にして反射率を測定した。その結果を表２に示した。
表２から明らかなように、アルブミン濃度が１５ｍｇ／ｄＬのときの反射率は、界面活性剤を含有させた場合には、界面活性剤を含有させない場合に比べて小さくなっている。そのため、陰性時（０．３ｍｇ／ｄＬ）と陽性時（１５ｍｇ／ｄＬ）との差分Δ（％）は、界面活性剤を含ませた場合には、界面活性剤を含ませない場合の２倍程度となっている。したがって、界面活性剤を含ませた場合には、アルブミンに対する感度が高くなり、アルブミン濃度が１０〜２０ｍｇ／ｄＬ程度の低濃度であっても、適切にアルブミンを検出できるといえる。とくに、カチオン系の界面活性剤を単独で、あるいはこれに加えてノニオン系の界面活性剤を併用した場合には、アルブミンの検出感度が高くなっている。この点からは、増感剤としては、カチオン系の界面活性剤を使用するのが好ましいといえる。
なお、各実施例における実験結果は尿サンプルに関するものであるが、本発明は尿に限らず、蛋白質を含んだ種々の試料、たとえば血液、蛋白質含有飲料、工場廃水における蛋白質を定量する場合にも適用することができる。
Claims (9)
- 蛋白質を定量または半定量するために使用され、かつ酸性ｐＨ指示薬を含む蛋白質測定用試験片であって、
上記酸性ｐＨ指示薬は、下記化学式（１）で示されるテトラブロモフェノールブルーであり、
蛋白質に対する発色感度を高めるための増感剤として、臭化ベンジルトリメチルアンモニウム、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、臭化ラウリルトリメチルアンモニウム、およびゼフィラミンからなる群より選択される少なくとも１種のカチオン系の界面活性剤を含んでいる、蛋白質測定用試験片。
- 上記増感剤としてポリエチレングリコールを更に含む、請求項１に記載の蛋白質測定用試験片。
- 蛋白質を定量または半定量するために使用される蛋白質測定用試験片を製造する方法であって、酸性ｐＨ指示薬および増感剤を含んだ含浸液を吸収性担体に含浸させた後に、これを乾燥させることにより蛋白質測定用試験片を製造する方法において、
上記酸性ｐＨ指示薬として、下記化学式（２）で示されるテトラブロモフェノールブルーを使用し、
上記増感剤として、臭化ベンジルトリメチルアンモニウム、臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、臭化ラウリルトリメチルアンモニウム、ゼフィラミン、およびポリエチレングリコールからなる群より選択される少なくとも１種のカチオン系の界面活性剤を使用する、蛋白質測定用試験片の製造方法。
- 上記増感剤として、ノニオン系の界面活性剤たるポリエチレングリコールを更に使用する、請求項３に記載の蛋白質測定用試験片の製造方法。
- 上記含浸液における上記界面活性剤の含有量は、０．０１〜５ｗｔ％に設定される、請求項３に記載の蛋白質測定用試験片の製造方法。
- 上記含浸液における上記界面活性剤の含有量は、０．０１〜１ｗｔ％に設定される、請求項５に記載の蛋白質測定用試験片の製造方法。
- 上記含浸液における上記酸性ｐＨ指示薬の濃度は、０．１〜５ｍＭに設定される、請求項３に記載の蛋白質測定用試験片の製造方法。
- 上記含浸液のｐＨは、上記酸性ｐＨ指示薬ｐＫａ以下に設定される、請求項７に記載の蛋白質測定用試験片の製造方法。
- 上記含浸液のｐＨは、２．０〜４．５に設定される、請求項８に記載の蛋白質測定用試験片の製造方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002233468 | 2002-08-09 | ||
| JP2002233468 | 2002-08-09 | ||
| PCT/JP2003/009889 WO2004015424A1 (ja) | 2002-08-09 | 2003-08-04 | 蛋白質測定用試験片およびその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2004015424A1 JPWO2004015424A1 (ja) | 2005-12-02 |
| JP4489590B2 true JP4489590B2 (ja) | 2010-06-23 |
Family
ID=31711862
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2004527332A Expired - Fee Related JP4489590B2 (ja) | 2002-08-09 | 2003-08-04 | 蛋白質測定用試験片およびその製造方法 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20060057735A1 (ja) |
| EP (1) | EP1548443A4 (ja) |
| JP (1) | JP4489590B2 (ja) |
| CN (1) | CN1322329C (ja) |
| AU (1) | AU2003252383A1 (ja) |
| WO (1) | WO2004015424A1 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5493069B2 (ja) * | 2009-03-23 | 2014-05-14 | 株式会社シノテスト | 試料中のタンパク質の測定方法及び測定キット |
| CN103411818B (zh) * | 2013-08-27 | 2015-07-08 | 苏州大猫单分子仪器研发有限公司 | 一种固定生物大分子的改性载玻片及方法 |
| CN104730236B (zh) * | 2015-04-16 | 2017-12-12 | 三诺生物传感股份有限公司 | 一种蛋白质固定试剂及其应用 |
| DE102016203335A1 (de) * | 2016-03-01 | 2017-09-07 | Axagarius Gmbh & Co. Kg | Test zur Bestimmung einer Basen-Konzentration |
| CN106153947B (zh) * | 2016-04-05 | 2018-08-28 | 广州捷检生物科技开发有限公司 | 一种尿蛋白快速检测试剂及其制备方法和应用 |
| CN113376150A (zh) * | 2021-06-10 | 2021-09-10 | 吉林基蛋生物科技有限公司 | 一种尿液微量白蛋白干化学检测试纸及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001302660A (ja) * | 2000-04-28 | 2001-10-31 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 蛋白質測定用指示薬 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2510633C3 (de) * | 1975-03-12 | 1978-07-13 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Diagnostisches Mittel zum Nachweis von Eiweiß in Körperflüssigkeiten und dafür geeignete Indikatorfarbstoffe |
| DD216806A1 (de) * | 1983-07-20 | 1984-12-19 | Adw Ddr | Teststreifen zum nachweis von proteinen im urin |
| US5183742A (en) * | 1984-02-24 | 1993-02-02 | Dai Nippon Insatsu Kabushiki Kaisha | Test device for detecting glucose, protein urobilinogen, and/or occult blood in body fluids and/or determining the PH thereof |
| US5049358A (en) * | 1988-09-30 | 1991-09-17 | Miles Inc. | Composition and test device for assaying for proteins |
| JPH0412271A (ja) * | 1990-04-28 | 1992-01-16 | Toyo Roshi Kaisha Ltd | 多孔性フィルム濾材からなる乾式分析片 |
| US5187104A (en) * | 1991-06-06 | 1993-02-16 | Miles Inc. | Nitro or nitroso substituted polyhalogenated phenolsulfonephthaleins as protein indicators in biological samples |
| US5565363A (en) * | 1991-10-21 | 1996-10-15 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Reagent composition for measuring ionic strength or specific gravity of aqueous solution samples |
| US5326707A (en) * | 1991-11-29 | 1994-07-05 | Miles Inc. | Composition and device for urinary protein assay and method of using the same |
| US5716851A (en) * | 1996-01-16 | 1998-02-10 | Bayer Corporation | Glass/cellulose as protein reagent |
| US5750405A (en) * | 1996-03-01 | 1998-05-12 | Bayer Corporation | Method for the detection for protein |
| JP2863491B2 (ja) * | 1996-06-07 | 1999-03-03 | 株式会社京都第一科学 | 試薬組成物、試験片及び測定キット |
| JPH10123128A (ja) * | 1996-10-17 | 1998-05-15 | Hokko Chem Ind Co Ltd | 水洗トイレでの尿蛋白検査・洗浄用固形製剤およびその使用方法 |
| CA2451611A1 (en) * | 2001-06-25 | 2003-01-03 | Bayer Healthcare Llc | Total protein detection methods and devices at low ph |
| US7563621B2 (en) * | 2002-03-05 | 2009-07-21 | Siemens Healhcare Diagnostics Inc | Absorbing organic reagents into diagnostic test devices by formation of amine salt complexes |
-
2003
- 2003-08-04 US US10/523,853 patent/US20060057735A1/en not_active Abandoned
- 2003-08-04 WO PCT/JP2003/009889 patent/WO2004015424A1/ja not_active Application Discontinuation
- 2003-08-04 EP EP03784517A patent/EP1548443A4/en not_active Withdrawn
- 2003-08-04 JP JP2004527332A patent/JP4489590B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2003-08-04 CN CNB038190370A patent/CN1322329C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2003-08-04 AU AU2003252383A patent/AU2003252383A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001302660A (ja) * | 2000-04-28 | 2001-10-31 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 蛋白質測定用指示薬 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2003252383A1 (en) | 2004-02-25 |
| EP1548443A1 (en) | 2005-06-29 |
| JPWO2004015424A1 (ja) | 2005-12-02 |
| EP1548443A4 (en) | 2006-09-06 |
| CN1322329C (zh) | 2007-06-20 |
| US20060057735A1 (en) | 2006-03-16 |
| WO2004015424A1 (ja) | 2004-02-19 |
| CN1675552A (zh) | 2005-09-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3219874B2 (ja) | 尿タンパク質検定のための改良された組成物および試験具ならびにそれを用いる方法 | |
| US10383564B2 (en) | Indicator panels for incontinence products | |
| EP1715347B1 (en) | Method of protein measurement | |
| US8784748B2 (en) | Dry test strip for measuring calcium | |
| JP3667370B2 (ja) | 生物学的試料中の蛋白質の測定方法 | |
| JP3843270B2 (ja) | 全タンパク質検出方法及び装置 | |
| EP2462441B1 (en) | Method of detecting oxides of nitrogen | |
| JP4489590B2 (ja) | 蛋白質測定用試験片およびその製造方法 | |
| JP3955911B2 (ja) | 尿中のアルブミン測定方法、尿中のアルブミン測定用指示薬、および尿中のアルブミン測定用試験片 | |
| US6413778B1 (en) | Methods for the detection and identification of crystals in biological fluids | |
| US20210231574A1 (en) | Diagnostic test kits for sample preparation and analysis | |
| AU731530B2 (en) | Total protein detection method | |
| RU2464368C1 (ru) | Способ получения универсальной кислотно-основной индикаторной бумаги | |
| JPH11337547A (ja) | タンパク質測定用乾式分析要素およびタンパク質測定法 | |
| WO2002039081A2 (en) | Determination of low range total chlorine residuals | |
| JP2002243743A (ja) | 被検物質の検出方法 | |
| JPS61284660A (ja) | 試験体 | |
| US7166234B1 (en) | Dialdehyde assay | |
| JP2005207949A (ja) | クレアチニンの測定方法およびクレアチニン測定用試験片 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060630 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090602 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090724 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20091006 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091119 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20091222 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091227 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100202 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100223 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100323 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100331 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130409 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Ref document number: 4489590 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130409 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130409 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140409 Year of fee payment: 4 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |