FI118035B - Koostumuksia endotoksiiniin liittyvien tilojen ennaltaehkäisemiseen ja hoitoon - Google Patents
Koostumuksia endotoksiiniin liittyvien tilojen ennaltaehkäisemiseen ja hoitoon Download PDFInfo
- Publication number
- FI118035B FI118035B FI970534A FI970534A FI118035B FI 118035 B FI118035 B FI 118035B FI 970534 A FI970534 A FI 970534A FI 970534 A FI970534 A FI 970534A FI 118035 B FI118035 B FI 118035B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- weight
- pharmaceutical composition
- lipid
- phospholipid
- acid
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
- A61K31/683—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols
- A61K31/685—Diesters of a phosphorus acid with two hydroxy compounds, e.g. phosphatidylinositols one of the hydroxy compounds having nitrogen atoms, e.g. phosphatidylserine, lecithin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1275—Lipoproteins; Chylomicrons; Artificial HDL, LDL, VLDL, protein-free species thereof; Precursors thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/775—Apolipopeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
118035
Koostumuksia endotoksiiniin liittyvien tilojen ennaltaehkäisemiseen ja hoitoon
Keksinnön ala 5 Tämän keksinnön kohteena on tilojen, jotka johtuvat endotoksiinien läsnäolosta veressä (endotoxemia), hoito. Keksintö kohdistuu erityisemmin tällaisen myrkytyksen hoitoon antamalla erilaisia koostumuksia, jotka kykenevät neutraloimaan ja/tai poistamaan endotoksiineja eliöstä, se-10 kä ennalta ehkäisyyn näitä koostumuksia käyttäen.
Tausta ja tekniikan nytytaso
Endotoksinen shokki on usein kohtalokas tila, jonka syynä on lipopolysakkaridin (LPS) vapautuminen useimpien gram-negatiivisten bakteerien (esim. Escherichia coli; Sal-15 monella tymphimurium) ulkokalvosta. Bakteeriperäisen LPS:n rakenne on selvitetty sangen hyvin ja yksittäinen molekyylit, johon viitataan käsitteellä lipidi A, on kytkeytynyt asyyliketjuihin lipidi A-molekyylin glukosamiinirungon välityksellä. Katso tähän liittyen Raetz, Ann. Rev. Biochem. 20 59: 129 - 170 (1990).
Tämä lipidi A-molekyyli toimii lipopolysakkaridira- kenteen ("LPS") kalvon ankkurina, ja nimenomaan LPS osal-···» ' ' * **·’: listuu endotoksisen shokin kehittymiseen. Korostettakoon, • * • j*· että LPS-molekyylien tunnnusomaisena piirteenä on lipidi A- ··* · .**·. 25 tyyppinen rakenne sekä polysakkaridiosa. Tämän viimeksi • · · mainitun osan molekyylitason yksityiskohdat voivat vaihdel- • ·* la eri LPS-molekyyleissä kuitenkin siten, että endotoksii- • * · ’ neille tunnusomaiset yleiset rakennepiirteet säilyvät. Ei ole oikein sanoa, että LPS-molekyyli on sama kaikissa bak- • · • ** 30 teereissa (katso Raetz, edellä). Näihin erilaisiin LPS- • * · ^ *..·· molekyyleihin viitataan alalla yleisesti käsitteellä "endo- *·· toksiinit", ja tätä käsitettä käytetään seuraavassa yhtei- ·♦·· .*··. sesti LPS-molekyyleistä.
* · · /% US-patenttijulkaisussa 5 128 318, jonka sisältö • · · *· *· 35 liitetään oheen tällä viittauksella, on esitetty, että • · · * · • · *»· .-2 118035 HDL-lipidiin liittynyttä apolipoproteiinia sekä sellaista lipidiä, joka kykenee sitomaan endotoksiinin sitä inakti-voiden, sisältäviä, uudestaan muokkautuneita hiukkasia voidaan käyttää tehokkaina aineina endotoksiinin aiheutta-5 man myrkytyksen lieventämiseksi.
Kappaleessa "Asiaan liittyvät hakemukset" mainituissa lähtö- ja jatkohakemuksissa, jotka on sisällytetty oheen niihin viittaamalla, on esitetty, että monia muitakin aineita voidaan ehkä käyttää endotoksiinin aiheuttaman 10 myrkytyksen hoitamiseksi. Erityisesti on todettu, ettei apolipoproteiineja tarvita uudestaan muokkautuneissa hiukkasissa, ja että tämä uudestaan muokkautunut hiukkanen voi ^ sisältää peptidin ja lipidin, joka peptidi ei ole apoli-poproteiini.
15 Keksijät ovat samoin todenneet, että endotoksiinin aiheuttamaa myrkytystä voidaan hoitaa antamalla peräkkäin joko apolipoproteiinia tai peptidiä ja sitten lipidiä.
Tämän peräkkäisen antamisen jälkeen nämä komponentit liittyvät uudestaan muokkautuneiksi hiukkaseksi ja toimivat 20 sitten endotoksiinia poistaen.
Samoin on todettu, että ainakin eräät yksilöt kä- i sittävät luontaisesti normaaleja pitoisuuksia suurempia • ·* · : apolipoproteiinipitoisuuksia, jolloin tehokas endotoksii- ' • · j I nimyrkytyksen hoito voidaan toteuttaa antamalla sellaisia • » · 25 uudelleen muokkautuneita hiukkasia, jotka eivät sisällä ' · • * " [·/·' apolipoproteiinia eivätkä peptidiä, vaan jotka sisältävät • · • ** julkaisun mukaista lipidiä.
M· V * Lisäksi näissä hakemuksissa julkaistussa keksinnössä uudelleen muokkautuneita hiukkasia ja ohessa
M
j 30 tarkasteltuja komponentteja käytettiin endotoksiinin ai- heuttaman myrkytyksen ennaltaehkäisemiseksi antamalla nii- **♦ *. tä ennaltaehkäisyn kannalta tehokkaita määriä sellaisille • · · kohteille, joissa tällainen ennalta ehkäisy oli tarpeen. ‘ f · 1 Tällaisia kohteita ovat infektioista kärsivät tai leik- ♦ 35 kauksesta toipuvat potilaat. Näiden potilaiden plasma si-
* B B
• · β B
· · 3 118035 sältää HDL:iä joskus hyvin pieninä pitoisuuksina, joskus niinkin vähän kuin 20 % normaaleista pitoisuuksista. Näissä tapauksissa varhainen ennalta ehkäisy HDL:llä on hyvin toivottavaa tällaisten vajausten kompensoimiseksi.
5 Nyt ollaan sangen yllättävällä tavalla todettu, että fosfolipidejä voidaan käyttää yksinään tai yhdessä muiden aineiden kuten neutraalien lipidien, kolaattien, jne. kanssa tehokkaina aineina endotoksiinimyrkytyksen lievittämiseksi ja/tai estämiseksi. Erityisen edullista on 10 käyttää fosfatidyylikoliineja (joista käytetään seuraavas-sa lyhennettä "PC") joko yksinään tai yhdessä muiden fos-folipidien kuten sfingolipidien kanssa koostumuksissa, - jotka eivät sisällä olennaisesti lainkaan peptidejä eikä proteiineja kuten apolipoproteiineja tai niistä saatuja 15 peptidejä. Neutraaleja lipidejä kuten mono-, di- ja tri-glyseridejä voidaan yhdistää näihin fosfolipideihin, kunhan vain neutraalien lipidien kokonaismäärä on tiettyjä painoprosenttisia osuuksia pienempi, kun näitä koostumuksia käytetään laskimon sisäisenä kerta-annoksena (bolus).
20 Kun niitä annetaan muulla tavalla, kuten esimerkiksi laskimon sisään jatkuvasti tiputtaen, niin tällöin nämä pai-noprosenttiset osuudet eivät ole niin tärkeitä, kuitenkin · toivottavia.
• · 1 * · ‘ | Keksinnön erityisen edulliset suoritusmuodot ovat • 1 · ·1;/ 25 emulsioita, joissa sappihappoa tai sappihapon suolaa käy- • · *···1 tetään yhdessä fosfolipidin ja neutraalin lipidin kanssa.
• · .1 ** Ohessa on esitetty sappihappojen ja sappihapon suo- * · 1 ; lojen, jotka ovat kolaatteja, tehokkuus endotoksiinimyrky tyksen hoidossa. Näitä sappihappoja voidaan käyttää yksi-30 nään tai yhdessä yhden tai useamman fosfolipidin ja/tai ;***; neutraalien lipidien kuten f osf atidyylikoliinin ja/tai • ·· *, triglyseridin kanssa.
* 1 ·
Keksintöä kuvataan yksityiskohtaisemmin seuraavassa * · *··.1 kuvauksessa.
* · * 1 · ··· * 1 • « 1 • · « 1 118035
Kuvioiden lyhyt kuvaus
Kuviot 5A ja 5B esittävät niitä tuloksia, jotka saaatiin testaamalla erilaisia koostumuksia mallissa, jossa endotoksiinin neutraloituminen määritettiin määrittä-5 mällä TNF:n vapautuminen ihmisen kokovereen perustuvassa mallissa. Kuvio 5A esittää proteiinin merkitystä ja kuvio 5B esittää fosfolipidin merkitystä. Testatut koostumukset sisälsivät luonnollisia lipoproteiineja (VLDL, LDL, HDL), uudelleen muokkautunutta HDL: ia ("R-HDL") sekä INTRALIPID*-10 koostumuksia, sekä fosfolipidiä ja proteiinia sisältäviä emulsioita.
Kuviossa 6A ja 6B on verrattu triglyseridin (neutraali lipidi) sekä fosfotidyylikoliinin, joka on fosfoli-pidi, merkitystä samassa koemallissa.
15 Kuvio 7 esittää tietoja erilaisten PC- ja PC/TG- koostumusten antamiseen liittyvästä toksisuudesta hiiri-mallissa, käyttäen 55 % kuolleisuuden mallia, jossa annetaan E. coli:n LPS:ia.
Kuvio 8 esittää tietoja, jotka ovat samankaltaisia 20 kuin edellä ihmisen kokovereen perustuvassa määrityksessä saadut tulokset, mutta jotka on kuitenkin saatu käyttämäl- lä triglyseridien sijasta fosfolipidiä yhdessä esteröity- "'= mättömän kolesterolin, sfingomyeliinin tai niiden seoksen I .** kanssa.
• · · • · · ***.’ 25 Kuviot 9A ja 9B esittävät tuloksia, jotka ovat sa- • » )···* mankaltaisia kuin kuvioiden 5A ja 5B yhteydessä esitetyt • · • ** tulokset, paitsi että näissä uusissa lukuarvoissa fosfoli- • · * *.* * pidiä, esteröitymätöntä kolesterolia ja/tai sfin- gomyeliiniä on sekoitettu neutraalina lipidinä toimiviin • 30 triglyserideihin tai esteröityneeseen kolesteroliin.
Kuviossa 10 on verrattu toisiinsa tuloksia, jotka • ·· \ on saatu kolesteroliesteriä ja triglyseridiä sisältävillä • '1 **" emulsioilla in vivo-hiirimallissa.
• · *·;·’ Kuviossa il on esitetty graafisesti vereen vapautu- 35 neiden triglyseridien määrät erilaisten TG:tä sisältävien • · · • * • * • * * s ; 118035 koostumusten antamisen jälkeen, sekä myrkyllisyyskynnyk-set. "TPN" tarkoittaa "ruuansulatuskanavan ulkopuolista kokonaisravitsemusta" ("total parenteral nutrition"), kun taas "Rl" tarkoittaa keksinnön mukaisia koostumuksia.
5 Suoritusmuotojen yksityiskohtainen kuvaus
Esimerkki 1
Tekijöitä, jotka vaikuttavat TNF-ain LPS-välittei-seen kiihottumiseen, samalla kun plasman proteiinien ja veren soluperäisten elementtien välisen vuorovaikutuksen 10 eheys säilyy, voidaan tutkia asianmukaisella tavalla ihmi-sen kokovereen perustuvassa in vitro -järjestelmässä. Tällaisen järjestelmän avulla määritettiin se, mikä lipopro-teiinien komponenteista on tärkeä LPS:n neutraloitumiselle.
15 Testatut materiaalit olivat uudelleen muokattu suurtiheyksinen lipoproteiini (R-HDL), plasman luonnolliset lipoproteiinit (VLDL, LDS, HDL), lipoproteiinia sisältämätön seerumi (LPDS) sekä runsaasti triglyseridiä sisältävä emulsio 20 % INTRALIPIDR (triglyseridien ja fosfolipi-20 dien seos).
Verta kerättiin heparinoituun putkeen, se laimen- I
nettiin Hankiin tasapainotetulla suolaliuoksella (tämän jälkeen "HBSS") tai HBSS-liuokseen liuotetulla testatta- • · 1 l valla aineella. Tuloksena ollut materiaali siirrettiin * * * " *".* 25 Starstedt-putkiin (250 μΐ/putki). LPS liuotettiin pyrogee- • · ];··' nittomaan suolaliuokseen, joka sisälsi 10 mM HEPES, ja • ♦ : lisättiin 10 ng/ml olevaksi lopulliseksi pitoisuudeksi.
• · · V · Neljä tuntia 37 °C:ssa kestäneen inkuboinnin jälkeen put ket jäähdytettiin 4 °C:n lämpötilaan, ja sitten niitä • · • *.. 30 sentrifugoitiin nopeudella 10 000 x g 5 minuuttia. Super- natantti otettiin talteen ja siitä määritettiin TNF-a käyttäen kaupallisesti saatavaa ELISA-määritystä.
**** Alla olevassa taulukossa 1 on verrattu testattujen • ' s*
*·“" aineiden koostumuksia. Tulokset on esitetty kuvioissa 5A
35 ja 5B. Tulokset on esitetty käyränä, jossa syntyneen TNF- ··· • · *·» 6 118035 or:n määrä on esitetty lisätyn proteiinin pitoisuuden funktiona (kuvio 5A) ja fosfolipidin pitoisuuden funktiona (kuvio 5B). Kuvioissa on käytetty logaritmiasteikkoja hyvin erilaisten käytettyjen pitoisuuksien havainnollistami-5 seksi siten, että 10° on sama kuin 1 mg/ml. Kaikki koko- veri-inkuboinnit sisälsivät 10 ng/ml E. coli 0111:B4 LPS:ia täydennettynä yhdellä kyseessä olevista koostumuksista kuvioiden 5A ja 5B selityksessä esitetyllä tavalla.
Sen tosiasian, että näiden aineiden tehokkuus vaih-10 telee proteiinipitoisuuden funktiona esitettynä (kuvio 5A), kun taas tämä tehokkuus on hyvin samankaltainen fos-folipidipitoisuuden funktiona esitettynä (kuvio 5B), perusteella voidaan olettaa, että fosfolipidi on tärkeä komponentti. Tätä tukee se havainto, että proteiineja sisäl-15 tämätön lipidiemulsio on paljon tehokkaampi kuin luonnollinen HDL, mutta tehottomampi kuin R-HDL. Proteiini ei näytä olevan tärkeä neutraloitumiselle.
Luonnollisten lipoproteiinien ja uudelleen muokkau-20 tuneen HDL:n koostumus
Lipoproteiini TC TG PC Proteiini ^ Luokka Tiheys (g/ml) Paino-% vldl < i,ooe 22 53 is 7 • 1 · : ;1 LDL 1,007 - 1,063 48 11 22 20,9 ·'·!: 25 HDL 1,063 - 1,21 18 8 22 52 • · · R-HDL 1,063 - 1,21 - - 79 21 t1 • ’·· LPDS > 1,21 0 0 2 98 V Intralipidi - 1 93 6 0 \t 30 Esimerkki 2 ' 7 118035
Kaikki ohessa kuvatut hiukkaset tehtiin samalla tavalla, eli siten, että fosfolipidiä, sfingomyeliiniä tai fosfotidyylikoliinia, trioleiinia ja/tai esteröitymätöntä kolesteroliesteriä, kloroformiin liuotettuna, sekoitettiin 5 ja punnittiin pulloon. Antioksidantiksi lisättiin E-vita-miinia (0,02 % p/t) . Sitten valmistettiin kuiva lipidikal-vo puhaltamalla näytteen yli typpi- tai argonkaasua. Sitten pulloon lisättiin eräs tilavuus pyrogeenitonta suolaliuosta, minkä jälkeen seosta sekoitettiin pyörresekoit-10 timella, kunnes kaikki lipidi oli suspendoitunut. Sitten tämä liuos homogenoitiin suurpainehomogenisaattorissa.
Fosfatidyylikoliinia (PC) sisältäviä näytteitä kierrätettiin trioleiinin läsnä ollessa tai ilman sitä homogeni-saattorin läpi 10 kertaa 20 000 psi:n (noin 1 379 bar)
15 paineessa. Kolesteroliesteriä sekä yhtä tai useampaa muuta lipidiä sisältäviä näytteitä kierrätettiin läpi 15-20 kertaa 30 000 psi:n (noin 2 069 bar) paineesssa. Homogenoidut liuokset suodatettiin 0,45 μιη:η ruiskusuodattimien läpi, ja suodosta säilytettiin huoneenlämpötilassa käyt-20 töön saakka (kolmen vuorokauden sisällä). Nämä tulokset on esitetty kuvioissa 6A ja 6B. Näissä tutkimuksissa LPS-riippuva TNF-a-tuotanto on esitetty käyränä lisätyn tri- C
“** glyseridin (kuvio 6A) tai fosfolipidin (kuvio 6b) pitoi- • · · j ·* suuden funktiona. Kuten selityksistä nähdään, nämä koostu- • · · :·· · 25 mukset sisälsivät 7 paino-% triglyseridiä ("TG"), 45 pai- * * * *...* no-% TG, 89 paino-% TG, 94 paino-% TG, R-HDL:iä tai fos- * * • **· f olipidiä ilman TG:tä (esitetty vain kuviossa 6B) . 89-pro- l/· : senttinen TG-koostumus on 10-prosenttinen INTRALIPIDR-valmiste, kun taas merkinnällä 94 % TG tarkoitetaan 20 % 30 INTRALIPID: iä. Kaikissa muissa kokeissa käytettiin munan .***. f osf atidyylikoliinia (PC) ja trioleiinia.
• · · *, Nämä tulokset osoittavat, että nämä proteiinittomat *♦· ··*· koostumukset ovat hyvin erilaisia triglyseridipitoisuuden *...* suhteen verrattaessa. Ne ovat hyvin samankaltaisia f osf o- ·*·.; 35 lipidin (PC) pitoisuuden suhteen testattaessa. Tämä var- • · • * · • · • · ··· 8 118035 mistaa fosfolipidin merkityksen, erityisesti koska pelkkä fosfolipidi on tehokas, ei kuitenkaan niin tehokas kuin jopa 45 % TG:tä sisältävät emulsiot.
Esimerkki 3 5 Sitten tutkimusta jatkettiin in vivo-kokeilla käyt täen hiirimallia, jota pidetään luotettavana järjestelmänä tehokkuuden ennustamiseksi ihmisessä.
Näissä kokeissa hiiriin injektoitiin kerta-annoksena riittäviä määriä esimerkissä 3 kuvattuja valmisteita 10 sekä muita (puhdasta fosfatidyylikoliinia, 7 % TG, 25 % TG, 45 % TG, 71 % TG, 81 % TG, 89 % TG, 94 % TG) tai vertailuna toimivaa suolaliuosta siten, että fosfolipidian-nokseksi saatiin joko 200 mg/kg tai 400 mg/kg, sekä 25 mg/kg E. coli Olli:B4 LPS:ia. Vertailuryhmälle annet-15 tiin laskimon sisäisesti fysiologista suolaliuosta emulsion tilavuutta vastaavana tilavuutena. Hengissäpysyminen 72 tunnin kuluttua on esitetty kuviossa 7. Vertailuryhmän 344 eläimestä 155 jäi henkiin.
Pelkällä PC:llä oli vaatimaton suojaava vaikutus, 20 joka ei ollut tilastollisesti merkittävä 95 %:n luotetta- vuustasolla, kun taas 7 %, 45 % ja 71 % TG-koostumukset paransivat merkittävällä tavalla hengissä pysymistä. 80 % / j!” ja 89 % TG-koostumukset olivat juuri ja juuri tehokkaita, ' I kun taas 94 % TG heikensi henkiinjäämistä.
• · · ' ·· · 25 Kun annosta suurennettiin siten, että PC-annos oli ·»· ··> *···* 400 mg/kg, niin tällöin sekä 89 % että 94 % TG-emulsiot .* • · : ’·* heikensivät merkittävällä tavalla henkiinjäämistä toden- ·*· V1 näköisesti TG-myrkytyksen seurauksena, kuten jäljempänä kuvataan.
·*·.. 30 Esimerkki 4 ;***. Esimerkeissä 2-4 suoritetut tutkimukset osoitti- # ·· ·. vat, että fosfolipidit ovat endotoksiinimyrkytyksen estä- • · · **·| miseksi käyttökelpoinen aktiivinen aine. Sen tosiasian, • · *·.·* että muutkin ei-polaariset lipidit kuin triglyseridit ·*·,· 35 saattavat muodostaa emulsioita muiden fosfolipidien kuin • · M* • · • · ·* 9 118035 PC:n kanssa, perusteella voidaan olettaa, että muitakin voidaan kokeilla. Esimerkkeinä voidaan mainita sfingomye-liini (toinen fosfolipidi) sekä esteröitymätön kolesteroli (polaarinen neutraali lipidi) sekä niiden seokset. Käyttö-5 kelpoisia ovat myös esteröitynyt kolesteroli (ei-polaari-nen esteri) , skvaleeni (hiilivety) ja E-vitamiini (ei-po-laarinen antioksidantti). Joukko kokeita suunniteltiin 1 niiden testaamiseksi edellä esimerkissä 2 kuvattua, ihmisen kokovereen perustuvaa määritystä ja edellä esimerkissä 10 4 kuvattua, hiiren hengissäpysymiseen perustuvaa määritys tä käyttäen.
f
Emulsiot valmistettiin edellä kuvatulla tavalla, ' käyttäen puhdasta fosfotidyylikoliinia sekä fosfatidyyli-koliinia ja 10 % (p/p) esteröitymätöntä kolesterolia tai 15 10 % (p/p) sfingomyeliiniä tai yhteensä 10 % niiden seos ta. Emulsioita lisättiin kokovereen pitoisuudeksi 100 mg/ dl PC:n suhteen ja 10 ng/ml LPS:n suhteen. Seosta inkuboi-tiin ja TNF-a:n vapautuminen mitattiin. .
Tulokset on esitetty kuviossa 8. TNF-ar:n tuotanto 20 väheni olennaisesti pelkällä PC:llä. Myös esteröitymätöntä kolesterolia, sfingomyeliiniä tai niiden seosta sisältävät ", emulsiot tukahduttivat TNF-<x:n vapautumista.
» Φ · *··1 Esimerkki 5 * Φ · * » · j ·1 Tällä kokovereen perustuvalla määrityksellä selvi- * · 1 id i 25 tettiin myös esteröitymättörnän kolesterolin ja/tai sfingo-• · · *...· myeliinin vaikutus neutraaleihin lipidipitoisiin emulsioi- • · • 1·· hin. Nytkin emulsioita lisättiin pitoisuudeksi 100 mg/dl * · · ί#ί : PC. Erilaiset koostumukset (p/p) on kuvattu seuraavassa taulukossa.
·· « · ••Λ.····· ·1· • · • · ···'" · * 1 · • 1 • · · 1 • ·· · • · · • ·· • · i • Φ · • · • · • Φ4 - ίο 1 1 8035
Emulsio Koostumus PC, joka sis. 45 % TG 55:45 PC+TG+C 54,4:45,3:0,3 PC+TG+SP 51,6:43,0:5,4 5 PC+TG+C+SP 51,4:42,9:0,3:5,4 PC+CE 54,5:45,5 PC+CE+C 54,4:45,3:0,3 PC+CE+SP L 51,6:43,0:5,4 PC+CE+C+SP 51,5:42,9:0,3:5,4 10 Kuviot 9A ja 9B esittävät saatuja tuloksia. PC- emulsioilla, joissa oli käytetty jompaa kumpaa neutraalia lipidiä sekä lisäksi polaarisia lipidejä tai ilman niitä, todettiin inhibitiota. Nytkin käytetty LPS-pitoisuus oli 10 ng/ml, joka on kliinisesti ajatellen tarkoituksenmukai-15 nen endotoksiinipitoisuus. Kolesteroliesteriä sisältävät emulsiot ovat tehottomampia kuin TG:tä sisältävät emulsiot, ja esteröitymätöntä kolesterolia sisältäneet emulsiot eivät tukahduttaneet TNF-α yhtä hyvin kuin ne emulsiot, jotka eivät sisältäneet sitä. Sfingomyeliinin lisäys emul-20 sioihin näytti parantavan TNF-α-tuotannon tukahtumista.
Esimerkki 6
Kolesteroliesteriä sisältävät emulsiot testattiin • '« • · · ··1· in vivo-mallissa (eli esimerkissä 4 käytetyssä mallissa) , • · 1 : jossa käytettiin tappavaa endotoksiiniannosta. Emulsiot • · ; 25 valmistettiin sisältämään PC:tä ja TG:tä tai PC:tä ja ko- * · · lesteroliesteriä (CE) , ja niitä annettiin hännän laskimon kautta siten, että yksittäinen kerta-annos oli 200 mg/kg * :1·1; PC: tä, yhdessä E. coli 0111:B4 LPS:n kanssa (25 mg/kg; tappava annos). Vertailuryhmille annettiin laskimon sisäi- :·, 30 sesti fysiologista suolaliuosta emulsion tilavuutta vas- • · · ... taavana tilavuutena.
• · • · *" Kuviossa 10 on verrattu toisiinsa toisaalta CE:ta ja toisaalta TG:ta sisältävillä emulsioilla saatuja tulok- ti· : : siä. Kutakin emulsiota testattiin vähintään kahdessa ko- • 1 · ,·) ; 35 keessa, käyttäen yhteensä 16 tai useampaa eläintä.
• · · • · « « * 1 * 1 11 : 118035
Kuten voidaan todeta, 7 paino-% tai 45 paino-% CE:ta sisältävät emulsiot paransivat merkittävästi hengis-säpysymistä. Nämä tulokset yhdessä esimerkissä 6 saatujen tulosten kanssa osoittavat, että TG voidaan korvata CE:lla 5 endotoksiinia neutraloivien emulsioiden aikaansaamiseksi.
Esimerkki 7
Fosfolipidiä sekä triglyseridiä sisältävät proteii-nittomat emulsiot salpaavat tehokkaasti TNF-α-tuotannon LPS:llä kiihotetussa kokoveressä. Nämä emulsiot saattavat 10 myös olla teoriassa tehokkaita in vivo, mikäli niitä voidaan antaa turvallisesti sellaisina annoksina, joilla saadaan aikaan suojaavia fosfolipidipitoisuuksia plasmassa. Aikaisempien R-HDL:lla toteutettujen kokeidemme perusteella voidaan päätellä, että fosfolipidin vähimmäisannos on 15 arviolta 200 mg/kg. Käyttämällä hyväksi tätä annostusta ja sitä tietoa, että plasman tilavuus on 4,5 % ruumiin painosta, plasmassa odotettu triglyseridipitoisuus voidaan ; laskea sen jälkeen kun on annettu peräkkäisiä emulsioita, i joissa triglyseridipitoisuus kasvaa. Tulos on esitetty 20 kuviossa 11 tasaisena käyränä, joka kääntyy ylöspäin TG:n painoprosenttisen pitoisuuden kasvaessa. Plasman TG-pitoi-suudet nousevat terveissä aikuisissa harvoin, ei edes ras- • · · vaisen aterian jälkeen, suuremmiksi kuin 1 000 mg/dl. Po- M « Ϊ .* tilaissa, joiden plasmassa TG on suurempi kuin 2 000 mg/ • · ·.: · 25 dl, on todettu haimatulehdus (Farmer, et ai., Amer. J.
Med. 54: 161-164 (1973); Krauss, et ai., Amer. J. Med. 62: 144 - 149 (1977); Glueck, et ai., J. Lab. elin. Med. 123: ·*·*: 59 - 61) . Yli 4 000 mg/dl oleva plasman TG on äärimmäisen harvinainen ja se on vakava huolenaihe. Nämä kaksi viimek-··. 30 si mainittua kynnysarvoa on esitetty vaakasuorina viivoina edellä mainitussa kuviossa. Tuotteen 10 % tai 20 % ’** INTRALIPIDr antaminen sellaisena annoksena, että fosfolipi- ...I dipitoisuudeksi saadaan 200 mg/kg, odotetaan nostavan • t · plasman TG-pitoisuudet (katso kaksi avointa ympyrää) sei-• ·· ; 35 vasti turvallisten rajojen yläpuolelle. Sitä vastoin 7 %, • · · * · ···'·.
• · ··'.' ·· 118035 12 45 %, 71 % tai 78 % (mustat neliöt vasemmalta oikealle) sisältävien emulsioiden antaminen nostaa plasman TG-pitoi-suuden vastaavasti arvoon 136, 477, 1 300 tai 2 000 mg/dl. Oletetaan, että korkeintaan noin 50 % TG:tä sisältäviin 5 emulsioihin ei liity TG:stä johtuvaa myrkyllisyyttä.
Esimerkki 8
Fosfolipidistä ja sappihaposta, eli natriumkolaa-tista muodostettujen yhdistelmien tehokkuus testattiin edellä olevissa esimerkeissä kuvatun tyyppisellä kokeella.
10 Kuitenkin menettelytapa, jolla nämä koe-eläimille annettavat valmisteet valmistettiin, vaihteli.
Tässä esimerkissä sekä seuraavissa esimerkeissä valmisteet valmistettiin käyttäen Microfluidizer-merkkistä suurpainehomogenisaattoria. Tämä laite helpotti mittakaa-15 van suurentamista.
Joko nestemäistä trioleiinia tai nestemäistä soijan triglyseridiä punnittiin sopivaan määrään vettä tai lisäksi myös 9 mM, 18 mM tai 36 mM natriumkolaattia sisältävää vettä. Kiinteätä, rakeista fosfotidyylikoliinia punnitiin 20 punnituspaperille ja lisättiin sitten hitaasti tähän liuokseen samalla sekoittaen. Lipidin dispergointiin tarvitaan noin 3-5 minuuttia. Dispergoinnin jälkeen materiaa- •·*ϊ lit kaadettiin mikronesteyttäjään. Tässä laitteessa käyte- ·· · Λ • · · : .* tään hydraulista painetta pumpun käyttämiseksi, joka pump- • · 25 pu puolestaan ohjaa kaksi vastakkaista näytesuihkua toisi- ··· ·#β>ϊ aan kohden. Paine voi olla niinkin suuri kuin 25 000 psi Γ·.. (noin 1 724 bar) . Suihkujen törmätessä ne pakotetaan kul- ·*·*· kemaan plusmerkin muotoisen aukon läpi, jolloin näyte ho- mogenisoituu.
j*. 30 Näytettä kierrätettiin mikronesteyttäjän läpi, joi- • ·· |···# loin "yksi läpikulku" tarkoittaa sitä aikaa, joka tarvi- • · ‘Γ taan koko näytteen pumppaamiseksi koneen läpi. Näytettä kierrätettiin 20 läpikulun ajan homogenisoituneen näytteen • · · tuottamiseksi. Dekstroosia lisättiin 5 %:n lopulliseksi .*] ; 35 pitoisuudeksi.
· · • · ··· • « • · ··♦ ' , 13 118036 E. coli 0111:B4:stä puhdistettua endotoksiinia (40 mg/kg) ja jäljempänä kuvattavaa emulsiota (200 mg fos-fatidyylikoliinia/kg), sekoitettiin huoneen lämpötilassa ja sitten sitä annettiin vähittömästi C57BL6/J-hiirille 5 (joiden paino oli arvojen 19 ja 30 g välillä), häntälaski-mon kautta laskimon sisäisellä injektiolla. Niille hiirille, joille annettiin pelkkää kolaattia, annettiin natrium-kolaattia sellaisena tilavuutena, joka oli yhtäsuuri kuin kolaatti/EML-valmisteen (emulsio) tilavuus, kolaattipitoi-10 suuden ollessa yhtäsuuri. Vertailuhiirille annettiin sama tilavuus 5 % dekstroosia, plasman osmolaalisuutta vastaavasti.
Tulokset on esitetty välittömästi alla olevassa taulukossa. Emulsio on edellä olevissa esimerkeissä kuvat-15 tu, fosfotidyylikoliinia ja 7 % triglyseridiä sisältävä emulsio. Mikäli natriumkolaattia käytettiin, sitä lisättiin esitettynä pitoisuutena lähtöaineisiin ennen aineiden emulgoimista.
20 Taulukko 1
Hiirten suojaaminen tappavalta endotoksiinialtistukselta 7 % TG + CA 18 SM CA >
·· · Aika Vertailu 7 % TG 9 mM 18 mM 36 mM ei PC:tä eikä TGttä +PC
• · · • · * * • , tuntia Henkiinjääneitä (N) • · · :.\V 25 0 28 28 8 16 8 8 8 • · ’**·* 24 9 12 4 15 8 8 8 * * · · 1 : 48 5 10 2 15 8 8 8 ···.' : 72 2 5 1 15 8 8 8 96 1 0 1 15 8 7 8 30
Emulsioiden painoprosenttiset osuudet ovat tarkoi-tuksenmukaisesti seuraavat. Kun käytettiin 9 mM kolaattia, * niin tällöin painoprosenttiset osuudet emulsiosta laskien • · *·** , ovat 7 % kolaattia, 6,1 % triglyseridiä ja 86,9 % fosfati- • * ϊ/.ϊ 35 dyylikoliinia. Kun kolaattipitoisuus on 18 mM, niin täi- • tl * f * · ·** 14 1 1 8035 löin painoprosenttiset osuudet ovat 13,1 % kolaattia, 5,7 % triglyseridiä ja 81,2 % fosfatidyylikoliinia. Kun kolaattipitoisuus on 36 mM, niin tällöin suhteelliset arvot ovat 23,2 % kolaattia, 5 % triglyseridiä ja 71,8 % 5 fosfatidyylikoliinia.
Huomattakoon, että näissä kokeissa annettu LPS-määrä (40 mg/kg) on paljon suurempi kuin aikaisempien kokeiden kuolleisuustutkimuksissa käytetty määrä. Näillä suuremmilla annoksilla on tarkoitus peittää mahdollinen, 10 fosfatidyylikoliinista ja/tai triglyseridistä johtuva suo- jaava vaikutus. Niinpä näiden kokeiden perusteella voidaan - vetää se johtopäätös, että sappihapon suolalla, natriumko-laatilla on suojaavaa vaikutusta.
Ohessa ei olla kuvattu muilla sappihapon suoloilla 15 eikä tauriinia sisältävillä sappihapoilla toteutettuja tutkimuksia. Muina esimerkkeinä sappihapoista voidaan mainita allodeoksikoolihappo, litokoolihappo, hyodeoksikooli-happo, hyokoolihappo, alfa-, beeta- ja omega-murikooliha-pot, murodeoksikoolihappo, ursodeoksikoolihappo, ursokoo-20 lihappo ja kaikki niiden suolat, kuten niiden natriumsuo- lat tai tauriini- tai glysiinikonjugaatit. Katso Hoffmann, - • edellä.
*·· i!" Esimerkki 9 • 1 · * 1 Tämän jälkeen toteutettiin muita tutkimuksia, jois- • · 1 : 25 ta ensimmäinen oli eloonjäämistutkimus käyttäen kohde- ··· • · *...1 eläiminä hiiriä. ' > • · * 1·· Tässä eloonjäämistutkimuksessa kohde-eläimet jaet-• · » ί,ϊ ί tiin neljäksi ryhmäksi. Ensimmäiselle ryhmälle annettiin 5 % dekstroosiliuosta, ja tämä ryhmä oli vertailuryhmä.
30 Toiselle ryhmälle annettiin emulsiota, joka sisälsi 93 .2 3·. paino-% fosfatidyylikoliinia ja 7 paino-% triglyseridiä, • 1 · *e ja joka oli valmistettu edellä kuvatulla tavalla. Tämä • · · • ••ϊ emulsio sisälsi 5 % dekstroosia sekä soijan fosfolipidejä noin pitoisuutena 50 mg/ml lipidiä.
* · * · · • · · • · 1 1 • 1 2 • 1 3 118035 15
Kolmannen ja neljännen ryhmän eläimille annettiin samankaltaista emulsiota kuin toisen ryhmän eläimille, jota emulsiota oli kuitenkin täydennetty joko 18 mM natri-umkolaatilla tai 18 mM natriumdeoksikolaatilla. Tässä ko-5 keessa meneteltiin samalla tavalla kuin esimerkissä 9.
Hengissäpysyminen määritettiin 72 tuntia altistuksen jälkeen, ja tulokset on koottu seuraavaan taulukkoon:
Taulukko 2 10 Vaikutus, joka saavutetaan lisäämällä sappihappoa 7-prosenttiseen triglyseridiemulsioon, hiirten hengi s säpy syntiseen 72 tunnin aikana
Ryhmä N Hengissä- p-arvo pysyminen ryhmässä 15 % 1 2 3 1 5 % dekstroosi 28 4 - - -
2 7 % TG 64 8 NS
3 Na-kolaatti + 7% TG 16 94 0,00001 0,00001 - 4 Na-deoksikolaatti +
20 7 % TG 8 75 0,0001 0,00001 NS
Huomattakoon, että ryhmien välisen hengissäpysymi- t ··· svertailun tilastollinen merkittävyys testattiin yleiste- * · 1 1 ·1·'. tyllä Viilcox-menetelmällä, tietokoneohjelmaa käyttäen.
• · : .1, 25 Vertaaminen ryhmään I kuuluviin vertailuihin nähden on .···. lueteltu tunnuksen "1" alla, vertaaminen ryhmään 2 kuulu- * · viin eläimiin, joita oli käsitelty 7 % emulsiolla, nähden • · ♦ on esitetty tunnuksen "2" alla ja vertaaminen ryhmään 3 • · *** 1 kuuluviin eläimin, joita oli käsitelty emulsiolla ja nat- 30 riumkolaatilla, nähden on esitetty tunnuksen "3" alla.
·· i ** Sekä prosentuaalinen hengissäpysyvyys että tilas- • · · tollinen analyysi osoittavat sappihapon suolaa sisältävien valmisteiden selvän ja odottamattoman paremmuuden.
• ♦ · 1 • 1 1 • 1 ....
• t ·♦·' ...
• · • · Φ • · · * · * 1 · • · · · .
118035 16
Esimerkki 10
Toisessa koesarjassa käytettiin kaniinimallia. Tässä mallissa määritettiin TNF-0!:n (kasvaimen nekroositekijä a) vapautuminen.
5 Kaniinit jaettiin kolmeksi ryhmäksi ja niille an nettiin 5 % dekstroosiliuosta, fosfolipidiä ja triglyseri-diä (93 % / 7 %) sisältävää emulsiota, jota on tarkasteltu edellä, tai 93 % / 7 % emulsiota, joka sisälsi myös 18 mM koolihappoa. Kaikkien emulsioiden pitoisuus asetettiin 5 10 prosentiksi kuten esimerkissä 10. Kaneille annettiin emulsiota herättävänä kerta-annoksena ja kaksi tuntia myöhemmin ne altistettiin E. coli 0lll:B4 LPS:lle (100 ^g). Herättävän kerta-annoksen jälkeen valmisteita annettiin jat-! kuvalla ylläpitävällä tiputuksella laskimon sisäisesti 15 siten, että lipidin annostus oli 50 mg painokiloa kohden tunnissa. Laskimon sisäistä antamista jatkettiin kolme tuntia altistuksen jälkeen.
Kaneista otettiin verta ennen koetta, 30 minuuttia herättävän kerta-annoksen antamisen jälkeen sekä kerran 20 tunnissa viisi tuntia kestäneen antamisen aikana. Seuraa-vassa taulukossa on esitetty huippu-TNF-a-arvot. Ne esiin-tyivät kaksi tuntia endotoksiinin antamisen jälkeen.
* VV'. Tilastollinen merkittävyys määritettiin käyttäen • » · • · ; * hyvin tunnettua Student:in koetta. Kuten taulukosta näh- • · · *·· * 25 dään, TNF-a-arvot pienenivät merkittävästi sen jälkeen kun • · *···* annettiin 18 mM koolihappoa.
*· • « * ♦· * V· Taulukko 3
Emulsioiden vaikutus TNF-of-tuotantoon kaneissa Γ·.. 30 Merkittävyys *... Emulsio TNF-ot, ng/ml N p • · : **·* 5 % dekstroosivertailu 134 ±70 9 .,*·* 7 % TG-emulsio 68 + 5 5 <0,05 :***: 7 % TG-emulsio + 39 + 20 4 <0,01 ··· * . 35 18 mM koolihappoa • * · • · • · * ·*'··· * » ··· 118035 17
Edellä esitetyt esimerkit kuvaavat yksityiskohtaisesti keksintöä, jonka erään piirteen kohteena on endotok-siinin aiheuttaman myrkytyksen lievittäminen kohteessa antamalla tehokas määrä fosfolipidiä, johon endotoksiini 5 yhdistyy. Sitten fosfolipidin ja endotoksiinin välinen yhdistelmä poistuu kohteesta tavanomaisten biologisten tapahtumasarjojen seurauksena, jotka tapahtumasarjat ovat hyvin tuttuja lipoproteiinihiukkasten poisturnismekanismeja tuntevalle asiantuntijalle. Endotoksiinin yhdistyminen 10 fosfolipidiin inaktivoi sen.
Nämä esimerkit osoittavat samoin, että kolaanihap- * pojen tai kolaanihappojen suolojen joukkoon kuuluvan yhdisteen kuten sappihapon tai sappihapon suolan antamista voidaan käyttää tähän samaan tarkoitukseen kuin fosfolipi-15 dejä, eli endotoksiinimyrkytyksen lievittämiseksi tai en naltaehkäisemiseksi. Näin ollen endotoksiinimyrkytyksen hoitamiseksi voidaan käyttää koostumuksia, jotka eivät sisällä peptidiä eivätkä proteiinia, ja jotka sisältävät joko sappihappoa/sappihapon suolaa tai fosfolipidiä tai 20 niitä kumpaakin. Kolaanihapot on kuvattu esimerkiksi julkaisussa Hofmann, Hepatology 4(5): 4S-14S (1984), joka sisällytetään oheen tällä viittauksella. Huomiota on "" kiinnitetty erityisesti sivuun 5S, sen kuvioihin 1 ja 2, * · · | ·* jotka sisällytetään oheen tällä viittauksella, jotka esit- • · · ;·: : 25 tävät kolaanihapoille tyypillisiä rakenteita.
φ · · *...* Hoidon kohde on edullisesti ihminen, mutta kek- • · • *·· sintöä voidaan soveltaa yhtä hyvin myös eläinlääketietees- • * * i : : sä.
Ohessa käytetyllä käsitteellä "lievittää" tarkoite- ·*·., 30 taan hoitoa minkä tahansa, esimerkiksi gram-negatiivisten .***. bakteereiden (S. t vmphimur ium. E. coli. jne.) tuottaman ··· •# erilaisen endotoksiinin aiheuttaman endotoksiinimyrkytyk- ··· •••5 sen oireiden helpottamiseksi. Ennalta ehkäisy voidaan to- • f · teuttaa antamalla tätä ainetta hetkellä, jolloin kohde Ϊ 35 joutuu tai saattaa joutua tilanteeseen, jossa saattaa ta-
• · * J
• · * * · • · • · • · · 18 1 1 8035 pahtua altistumista endotoksiinille. Tällaista tapahtuu klassisesti kirurgisen toimenpiteen aikana. Niinpä kohteelle, jolle on tarkoitus suorittaa kirurginen toimenpide, voidaan antaa tätä aktiivista aineosaa ennen tätä toi-5 menpidettä.
Kohteen hoitamiseksi tehokas määrä tätä fosfolipi-din ja sappihapon yhdistelmää voi vaihdella. Yleensä edullisena pidetään annosta, joka on yhteensä korkeintaan noin 200 - 800 mg fosfolipidiä kohteen painokiloa kohden, vaik-10 ka tämä määrä voikin olla pienempi tai suurempi riippuen endotoksiinimyrkytyksen vakavuudesta tai vaaran suuruudesta ennalta ehkäisyä toteutettaessa. Kolaanihappojen ja suolojen kuten sappihappojen ja niiden suolojen tapauksessa käyttökelpoisena pidetään annosta, joka on noin 10 -15 300 mg painokiloa kohden, edullisemmin 15 - 275 mg paino kiloa kohden.
Toivottavaa on antaa sappihappo/sappihapon suoja sekä fosfolipidit sellaisissa koostumuksissa, jotka sisältävät myös neutraaleja lipidejä, mutta tämä ei ole kuiten-20 kaan välttämätöntä, sillä mahdollisia ovat myös sellaiset fosfolipidiemulsiot, jotka eivät sisällä neutraaleja lipi-dejä. Fosfolipidien antaminen yhdessä neutraalien lipidien II" kanssa on toivottavaa siksi, että neutraalit lipidit ja Φ · · ; * fosfolipidit yhdistyvät lipoproteiineja muistuttaviksi • · · : 25 hiukkasiksi, jotka eroavat niistä kuitenkin siinä suhtees- Φ * · Φ φ *...* sa, että ne eivät sisällä proteiini- tai peptidikomponent- φ · i *·· teja, joita on luonnollisestikin aina läsnä lipoproteii- # φ * V 5 neissa.
Erityisen toivottavia hoitomuotoja ovat ne, joissa ·*·,. 30 fosfolipidi on fosf atidyylikoliini kuten munankeltuasen Φ fosfatidyylikoliini, soijapohjainen fosfatidyylikoliini • · Φ *, tai sfingolipidi. Mitä tulee sappihappoon/sappihapon suo- # φ φ ···· laan, edullisia ovat koolihappo ja/tai sen suolat kuten φ Φ natriumkolaatti, natriumdeoksikolaatti ja natriumkenodeok- φ ;*·,· 35 sikolaatti. Mitä taas tulee neutraaleihin lipideihin, * φ Φ φ φ • · • * Φ · · 118035 19 edullista on käyttää kolesteroliesteriä tai triglyseridiä, mutta käyttökelpoisia ovat myös muut neutraalit lipidit kuten skvaleeni tai muut hiilivetyöljyt, di- ja monogly-seridit sekä antioksidantit kuten E-vitamiini.
5 Muoto, jossa näitä koostumuksia voidaan antaa, saattaa vaihdella, kerta-annoksen tai muiden laskimon sisäisten muotojen ollessa erityisen edullisia. Kun käytetään kerta-annoksena olevaa muotoa, ja kun koostumus sisältää esimerkiksi triglyseridiä, niin tällöin tiettyä 10 varovaisuutta on noudatettava annostuksessa. Melko hyvin tunnettua on se, että triglyseridit ovat myrkyllisiä, mikäli niitä annetaan liian suurena määränä. Alan asiantuntija kykenee kuitenkin valmistamaan koostumukset siten, että triglyseridimyrkytyksen vaara vähenee tai siitä pääs-15 tään eroon. Yleensä, käytettäessä kerta-annoksena olevaa muotoa, nämä koostumukset saavat sisältää korkeintaan noin 80 paino-%, edullisesti korkeintaan 70 paino-% triglyseridiä tai muuta neutraalia lipidiä. Kaikkein edullisimmin nämä koostumukset saavat sisältää korkeintaan noin 50 pai-20 no-% neutraalia lipidiä, kun koostumusta annetaan kerta-annoksena .
Kuitenkin, kun käytetään muita antomuotoja kuin "" kerta-annosta, esimerkiksi muita laskimon sisäisiä muoto- * * * • ·
Il ja, niin tällöin myrkytyksen vaara vähenee. Edellä kuvatut # * · ··· · 25 alueet ovat kuitenkin edullisia laskimon sisäisen tai * * · ' * · *·..* muussa muodossa tapahtuvan antamisen tapauksessa, vaikka • * • '·· tuleekin muistaa, että ne eivät ole välttämättömiä. Sappi- !,ί * happojen ja sappihapon suolojen tapauksessa annokset ovat edullisesti noin arvosta 25 mg painokiloa kohden jopa noin ·*·.. 30 arvoon 500 mg painokiloa kohden siten, että erityisen .***. edulliset annokset ovat noin 50 - 100 mg painokiloa koh- • · · *, den. Fosfolipidien tapauksessa edullinen on noin 100 - » · · ··" 1 000 mg painokiloa kohden oleva annos. Nämä annokset ovat • · *···* kuitenkin yleisiä ja ne vaihtelevat kohteesta toiseen ja * ;*·,· 35 antamistavasta riippuen.
• # • · · • · • · * · ...
20 11 8035
Kuten edellä on esitetty, näissä proteiinia ja peptidiä sisältämättömissä valmisteissa on välttämätöntä, että läsnä on vähintään yhtä fosfolipidiä tai sappihap-poa/sappihapon suolaa. Mitä tulee fosfolipideihin, niin 5 edullisesti läsnä on vähintään yksi neutraali lipidi, kuten triglyseridi, diglyseridi tai monoglyseridi. Nämä koostumukset voivat sisältää myös muita aineita, kuten steroleja (esim. kolesterolia, β-sitosterolia), esteröity-neitä tai esteröitymättömiä lipidejä (esim. kolesterolies-10 teriä tai esteröitymätöntä kolesterolia) , hiilivetyöljyjä, kuten skvaleenia, antioksidanttia kuten E-vitamiinia, mutta nämä eivät ole kuitenkaan välttämättömiä. Luonnollisestikin kaikissa tällaisissa valmisteissa voidaan käyttää useampaa kuin yhtä fosfolipidiä ja/tai useampaa kuin yhtä 15 neutraalia lipidiä. Käytettäessä neutraalin lipidin ja fosfolipidin yhdistelmiä, niin tällöin neutraalia lipidiä tulisi olla läsnä noin 3-50 paino-% koostumuksessa läsnä olevan lipidin kokonaismäärästä laskien.
Mitä tulee sappihappoon/sappihapon suoloihin, niitä 20 voidaan käyttää toisistaan erillään tai yhdessä fosfolipidin, neutraalin lipidin tai niiden kummankin kanssa. Mitä tulee näihin ylimääräisiin aineisiin (kuten fosfolipidei- * tl" hin ja neutraaleihin lipideihin, edullisia ovat edellä * · • * kuvatut ja tarkastellut aineet. Muita valinnaisia aine- • · · : 25 osia on lueteltu edellä.
··* • * *...* Keksinnön kohteena ovat myös koostumukset, joita • · j- ! *** voidaan käyttää endotoksiinimyrkytyksen hoitamiseksi. Kek- ·#· · sinnön tämän piirteen mukainen suoritusmuoto on koostumus, joka sisältää kulloinkin vähintään yhtä sappihappoa/sappi- ·*·.. 30 hapon suolaa, fosfolipidiä ja neutraalia lipidiä siten, .***. että tämä koostumus sisältää kokonaisuudessaan endotoksii- • · • * · ·. nimyrkytystä lievittävän määrän aktiivista aineosaa. Tämä φ · * **♦· koostumus sisältää edullisesti, painoprosenttisina osuuk- • ♦ *·..* sinä esittäen, noin 5-30 paino-% sappihappoa/sappihapon :*·.· 35 suolaa, noin 3-50 paino-% neutraalia lipidiä sekä noin • · • · * • · • · • · · : 21 118035 10-95 paino-% fosfolipidiä. Erityisen edullisia ovat koostumukset, jotka sisältävät noin 10 - 15 paino-% sappi-happoa/sappihapon suolaa, noin 5-10 paino-% neutraalia lipidiä, koostumuksen loppuosan muodostuessa fosfolipi-5 deistä.
Huomattakoon, että nämä painoprosenttiset osuudet liittyvät koostumuksiin, jotka koostuvat kolmesta komponentista. Kun tähän kolmen komponentin järjestelmään yhdistetään esimerkiksi kantaja, apuaine tai muita valinnai-10 siä, esimerkiksi edellä tarkasteltuja aineosia, niin täl löin nämä koko koostumuksesta lasketut painoprosenttiset osuudet pienenevät. Mielessä on pidettävä aina se, että tällaiset hoitavat koostumukset ovat aina proteiinia sisältämättömiä ja peptidiä sisältämättömiä.
15 Mikäli koostumukset eivät sisällä sappihappoa eikä sappihapon suolaa, niin tällöin nämä proteiinia sisältämättömät ja peptidiä sisältämättömät koostumukset sisältävät edullisesti vähintään noin 3 paino-% neutraalia lipidiä, korkeintaan noin 50 paino-% neutraalia lipidiä, lopun 20 muodostuessa vähintään yhdestä fosfolipidistä. Tämä neutraali lipidi on edullisesti triglyseridi, mutta se voi . myös olla mikä tahansa edellä tarkasteltu ylimääräinen neutraali lipidi. Samoin fosfolipidi on edullisesti fos- * 1 2 3 1 \ ·" fatidyylikoliini.
• · · ··' ' 25 Keksinnön muut piirteet ovat selvät alan asiantun- * 1 1 tijalle, eikä niitä tarvitse toistaa tässä.
• 1·“ Selvää on, että tämä kuvaus ja esimerkit havainnoi- • 1 · ί listavat esillä olevaa keksintöä sitä rajoittamatta, ]a että muut, keksinnön hengen ja tavoitteiden mukaiset suo-;1.t> 30 ritusmuodot ovat ilmeisiä alan asiantuntijalle.
··· * t • · *·· • ' ··· ···· • · · • · • *** • · * 1 1 • · 1 * 1 · · • · 2 • 1 3
Claims (20)
1. Kolaanihappoa tai kolaanihapon suolaa, fosfoli-pidiä ja neutraalia lipidiä käsittävän proteiinittoman ja 5 peptidittömän farmaseuttisen koostumuksen käyttö valmistettaessa lääkettä käytettäväksi endotoksiinin aiheuttaman myrkytyksen hoitamiseksi tai estämiseksi ihmisessä tai eläimessä, joka kärsii endotoksiinin aiheuttamasta myrkytyksestä.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen käyttö, jossa neu traalia lipidiä on enintään 80 paino-%.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen käyttö, jossa neutraalia lipidiä on enintään 70 paino-%.
4. Jonkin patenttivaatimuksen 1-3 mukainen käyt-15 tö, jossa neutraalia lipidiä on enintään 50 paino-%.
5. Jonkin patenttivaatimuksen 1-4 mukainen käyttö, jossa neutraalia lipidiä on 3-50 paino-% suhteessa koostumuksen lipidien kokonaispainoon.
6. Farmaseuttinen koostumus, joka ei sisällä pro-20 teiinia eikä peptidejä ja on sopiva suonensisäiseen antoon, tunnettu siitä, että se sisältää kolaanihappoa tai kolaanihapon suolaa, fosfolipidiä ja neutraalia lipidiä, · · · jota neutraalia lipidiä on läsnä 3-50 paino-% suhteessa • · I I koostumuksen lipidien kokonaispainoon. • · · "*,* 25
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen farmaseuttinen * * .;·** koostumus, tunnettu siitä, että kolaanihappo tai kolaani- • * : ** hapon suola on sappihappo tai sappihapon suola.
* · · *.* * 8. Farmaseuttinen koostumus, joka ei sisällä pro teiinia eikä peptidejä, tunnettu siitä, että se sisäl- • « • *·· 30 tää sappihappoa/sappihapon suolaa, fosfolipidiä, neutraa- :***: lia lipidiä, jolloin koostumus sisältää 5-30 paino-% • · · sappihappoa/sappihapon suolaa, 3-50 paino-% neutraalia "II lipidiä ja 10 - 95 paino-% fosfolipidiä, jolloin koostumus • » *" on emulsio. • « • · · • ·♦ * ♦ • · * • · * ♦ ··· 118035
9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että koostumus sisältää 10 - 15 paino-% sappihappoa/sappihapon suolaa, 5-10 paino-% neutraalia lipidiä koostumuksen loppuosan muodostuessa fosfo- 5 lipideistä.
10. Patenttivaatimuksen 8 tai 9 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että se on suonensisäiseen antoon sopiva.
11. Jonkin patenttivaatimuksen 6-10 mukainen 10 farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että fosfoli- pidi on fosfatidyylikoliini.
12. Jonkin patenttivaatimuksen 6-10 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että fosfoli-pidi on sfingolipidi. 15.
13. Jonkin patenttivaatimuksen 6-12 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että neutraali lipidi on triglyseridi.
14. Jonkin patenttivaatimuksen 6-12 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että neutraa- 20 li lipidi on kolesteroliesteri.
15. Jonkin patenttivaatimuksen 7-14 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että sappiha- !".* pon suola valitaan natriumkolaatista, natriumdeoksikolaa- • · \ l ; tista ja natriumkenodeoksikolaatista. * · * *** * 25
16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen farmaseuttinen • · * * * '*·’ koostumus, tunnettu siitä, että sappihapon suola on nat- : ·* riumkolaatti.
• · · *.· · 17. Jonkin patenttivaatimuksen 6 - 11, 13 tai 16 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että 30 se sisältää fosfatidyylikoliinia, triglyseridiä ja natrium- .“*· kolaattia.
« · * · · ·. 18. Patenttivaatimuksen 17 mukainen farmaseuttinen • * * ·*“ koostumus, tunnettu siitä, että fosfatidyylikoliini:tri- • · *···* glyseridi -painosuhde on 93 : 7. • · • · · • ·« • · ; *·· • · • * *·· > . ' i · 118035
19. Patenttivaatimuksen 17 mukainen farmaseuttinen koostumus, tunnettu siitä, että natriumkolaatin, fosfati-dyylikoliinin ja triglyseridin kokonaispainosuhde on vastaavasti 13,1 : 81,2 : 5,7.
20. Jonkin patenttivaatimuksen 6-19 mukaisen far maseuttisen koostumuksen käyttö valmistettaessa lääkettä käytettäväksi endotoksiinin aiheuttaman myrkytyksen estämiseksi tai hoitamiseksi ihmisessä tai eläimessä, joka kärsii endotoksiinin aiheuttamasta myrkytyksestä. * · 1 • 1 · · • · · • 1 · * · • · • · 1 t 1 · ·2· • · 1 • · • · • 1 * « * «f * • · · • · · • · • · • ·· • · 1 • 1 • t 2 * • · · · • · · • · * · • « « * • · • ·· • · ·«1 • ♦ • · • · · 25 1 1 8035
Applications Claiming Priority (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/288,568 US5506218A (en) | 1992-08-12 | 1994-08-10 | Methods useful in endotoxin based therapy |
US28856894 | 1994-08-10 | ||
US48745995 | 1995-06-07 | ||
US08/487,459 US5674855A (en) | 1992-08-12 | 1995-06-07 | Methods and compositions useful in prophylaxis and therapy of endotoxin related conditions |
PCT/US1995/010189 WO1996004916A1 (en) | 1994-08-10 | 1995-08-10 | Methods and compositions useful in prophylaxis and therapy of endotoxin related conditions |
US9510189 | 1995-08-10 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI970534A0 FI970534A0 (fi) | 1997-02-07 |
FI970534A FI970534A (fi) | 1997-02-07 |
FI118035B true FI118035B (fi) | 2007-06-15 |
Family
ID=26965092
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI970534A FI118035B (fi) | 1994-08-10 | 1997-02-07 | Koostumuksia endotoksiiniin liittyvien tilojen ennaltaehkäisemiseen ja hoitoon |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5674855A (fi) |
EP (1) | EP0767666B1 (fi) |
JP (1) | JP3818660B2 (fi) |
CN (1) | CN1137688C (fi) |
AP (1) | AP782A (fi) |
AT (1) | ATE255415T1 (fi) |
AU (1) | AU703861C (fi) |
BG (1) | BG61967B1 (fi) |
BR (1) | BR9508584A (fi) |
CA (1) | CA2196906C (fi) |
CY (1) | CY2514B1 (fi) |
CZ (1) | CZ287614B6 (fi) |
DE (1) | DE69532239T2 (fi) |
DK (1) | DK0767666T3 (fi) |
ES (1) | ES2211915T3 (fi) |
FI (1) | FI118035B (fi) |
HK (1) | HK1003709A1 (fi) |
HU (1) | HUT77605A (fi) |
NO (1) | NO313786B1 (fi) |
NZ (1) | NZ292315A (fi) |
OA (2) | OA11737A (fi) |
PL (1) | PL182043B1 (fi) |
PT (1) | PT767666E (fi) |
RO (1) | RO115782B1 (fi) |
RU (1) | RU2174839C2 (fi) |
SK (1) | SK282493B6 (fi) |
WO (1) | WO1996004916A1 (fi) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6037323A (en) | 1997-09-29 | 2000-03-14 | Jean-Louis Dasseux | Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders |
US6004925A (en) | 1997-09-29 | 1999-12-21 | J. L. Dasseux | Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders |
US6518412B1 (en) | 1997-09-29 | 2003-02-11 | Jean-Louis Dasseux | Gene therapy approaches to supply apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders |
US6046166A (en) | 1997-09-29 | 2000-04-04 | Jean-Louis Dasseux | Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders |
WO2000053165A2 (en) * | 1999-03-09 | 2000-09-14 | Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin | Use of inhibitors of endotoxin for the treatment of chachexia |
US20030032674A1 (en) * | 2001-08-13 | 2003-02-13 | Hwang Daniel H. | Use of unsaturated fatty acids to treat severe inflammatory diseases |
EP1511508A4 (en) | 2002-05-17 | 2009-07-08 | Esperion Therapeutics Inc | METHOD FOR TREATING DYSLIPIDARY INTERFERENCE |
ATE358992T1 (de) * | 2003-02-05 | 2007-05-15 | Nutricia Nv | Enteralpräparat zur vorbeugung gegen bzw. behandlung von sepsis |
US20060127468A1 (en) | 2004-05-19 | 2006-06-15 | Kolodney Michael S | Methods and related compositions for reduction of fat and skin tightening |
ES2660172T3 (es) * | 2004-05-19 | 2018-03-21 | Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor-Ucla Medical Center | Composición inyectable que comprende desoxicolato de sodio |
US7754230B2 (en) * | 2004-05-19 | 2010-07-13 | The Regents Of The University Of California | Methods and related compositions for reduction of fat |
NZ565590A (en) * | 2005-08-29 | 2010-07-30 | Sepsicure L L C | Use of a protein free composition comprising cholinic acid and a phosphosphlipid for the treatment or prevention of conditions caused by gram-positive bacteria |
GB0522942D0 (en) | 2005-11-10 | 2005-12-21 | Leigh Steven | Dissolution composition |
WO2007137400A1 (en) | 2006-06-01 | 2007-12-06 | Institut De Cardiologie De Montreal | Method and compound for the treatment of valvular stenosis |
KR100785656B1 (ko) * | 2007-05-14 | 2007-12-17 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | 소염제로 사용되는 소디움글리코콜레이트 또는 그 유도체 |
EP2396017B1 (en) | 2009-02-16 | 2015-07-01 | Cerenis Therapeutics Holding SA | Apolipoprotein a-i mimics |
US8101593B2 (en) | 2009-03-03 | 2012-01-24 | Kythera Biopharmaceuticals, Inc. | Formulations of deoxycholic acid and salts thereof |
MX363465B (es) | 2011-02-18 | 2019-03-25 | Kythera Biopharmaceuticals Inc | Tratamiento de la grasa submental. |
US8653058B2 (en) | 2011-04-05 | 2014-02-18 | Kythera Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising deoxycholic acid and salts thereof suitable for use in treating fat deposits |
US9023833B2 (en) * | 2012-12-18 | 2015-05-05 | Sepsicure, LLC | Method for treating sepsis in patients with albumin, cholesterol and HDL levels above minimum thresholds |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4115313A (en) * | 1974-10-08 | 1978-09-19 | Irving Lyon | Bile acid emulsions |
DE2556592C2 (de) * | 1975-12-16 | 1986-10-09 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Arzneimittelzubereitungen auf Basis öliger Lösungen von Phospholipiden |
US4314997A (en) * | 1980-10-06 | 1982-02-09 | Edward Shanbrom | Purification of plasma protein products |
IL63734A (en) * | 1981-09-04 | 1985-07-31 | Yeda Res & Dev | Lipid fraction,its preparation and pharmaceutical compositions containing same |
CA1237671A (en) * | 1983-08-01 | 1988-06-07 | Michael W. Fountain | Enhancement of pharmaceutical activity |
JPS6193111A (ja) * | 1984-05-28 | 1986-05-12 | Funayama Seizo | 発熱性物質除去方法 |
US5032585A (en) * | 1987-02-17 | 1991-07-16 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions employing unique mixtures of polar and neutral lipids for surfactant replacement therapy |
CA2013755C (en) * | 1989-04-05 | 1993-11-30 | Simon Benita | Medicinal emulsions |
DE4017979A1 (de) * | 1990-06-05 | 1991-12-12 | Meyer Lucas Gmbh & Co | Lipid- bzw. phospholipid-zusammensetzungen sowie diese enthaltendes mittel zur behandlung von erkrankungen sowie auf die zellmembrane zurueckzufuehrende stoerungen |
BR9201168A (pt) * | 1992-04-02 | 1994-04-12 | Zerbini E J Fundacao | Microemulsoes usadas como velculo para carregar quimioterapicos as celulas neoplasicas |
-
1995
- 1995-06-07 US US08/487,459 patent/US5674855A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-10 CA CA002196906A patent/CA2196906C/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-10 DE DE69532239T patent/DE69532239T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-10 HU HU9700406A patent/HUT77605A/hu unknown
- 1995-08-10 CN CNB951951734A patent/CN1137688C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-10 PL PL95318593A patent/PL182043B1/pl unknown
- 1995-08-10 ES ES95930812T patent/ES2211915T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-10 PT PT95930812T patent/PT767666E/pt unknown
- 1995-08-10 DK DK95930812T patent/DK0767666T3/da active
- 1995-08-10 EP EP95930812A patent/EP0767666B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-08-10 NZ NZ292315A patent/NZ292315A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-08-10 RO RO97-00266A patent/RO115782B1/ro unknown
- 1995-08-10 RU RU97104061/14A patent/RU2174839C2/ru active
- 1995-08-10 WO PCT/US1995/010189 patent/WO1996004916A1/en active IP Right Grant
- 1995-08-10 AT AT95930812T patent/ATE255415T1/de active
- 1995-08-10 OA OA00100167A patent/OA11737A/en unknown
- 1995-08-10 AP APAP/P/1997/000921A patent/AP782A/en active
- 1995-08-10 BR BR9508584A patent/BR9508584A/pt not_active IP Right Cessation
- 1995-08-10 JP JP50750296A patent/JP3818660B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-08-10 SK SK176-97A patent/SK282493B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1995-08-10 AU AU34052/95A patent/AU703861C/en not_active Expired
- 1995-08-10 CZ CZ1997371A patent/CZ287614B6/cs not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-02-07 OA OA60963A patent/OA10598A/en unknown
- 1997-02-07 FI FI970534A patent/FI118035B/fi not_active IP Right Cessation
- 1997-02-07 NO NO19970582A patent/NO313786B1/no not_active IP Right Cessation
- 1997-03-05 BG BG101288A patent/BG61967B1/bg unknown
-
1998
- 1998-04-08 HK HK98102936A patent/HK1003709A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-06-03 CY CY0500036A patent/CY2514B1/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI118035B (fi) | Koostumuksia endotoksiiniin liittyvien tilojen ennaltaehkäisemiseen ja hoitoon | |
US5506218A (en) | Methods useful in endotoxin based therapy | |
PT100418B (pt) | Emulsoes parentericas especificas contendo derivados lipofilicos iodados e/ou bromados e derivados do fenantreno como agente emulsionante e sua utilizacao comoagentes de contraste de raios x | |
KR101413361B1 (ko) | 그람-양성 박테리아에 의해 유발되는 질병의 치료 또는예방 방법 | |
US5587366A (en) | Compositions useful in prophylaxis and therapy of endotoxin related conditions | |
KR100372672B1 (ko) | 엔도톡신관련질환의예방및치료에유용한조성물및방법 | |
MXPA97000929A (en) | Use and useful compositions in the prophylaxis and therapy of conditions related to endotox | |
JPH1017476A (ja) | 敗血症用非経口製剤及びそれによる予防及び治療方法 | |
Horlick | The serum lipids in atherosclerosis. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
GB | Transfer or assigment of application |
Owner name: SEPSICURE L.L.C. |
|
FG | Patent granted |
Ref document number: 118035 Country of ref document: FI |
|
MA | Patent expired |