FI115400B - Förfarande för framställning av oligoribonukleotid- och ribozymanaloger med terminala 3'-3'- eller 5'- 5'-bindningar - Google Patents

Claims (7)

1. Förfarande för framställning av terapeutiskt användbara oligoribonukleotider med formeln I 5 R1—O—v B γ O R3 i I i z—P=W \_/ (I) I__I n R2 där R1 betecknar väte eller en rest med formeln II B\/o\y//—0—rw'

10 R3 X (ll) t · » I .* R2 en rest med formeln III Y_. B x o R3 ' Z'—P=W' ^111 ) I t · 15 30 115400 B betecknar en bas, säsom till exempel en naturlig bas, säsom adenin, tyrnin, cytosin, guanin, eller en icke naturlig bas, säsom till exempel purin, 2,6-diaminopurin, 7-deazaadenin, 7-deazaguanin, N4,N4-etanocytosin eller 5 förläkemedelsformer därav; varvid baserna urasil eller cytosin ingär i oligo-ribonukleotiden; R3 är oberoende av varandra OH, väte eller F, högst en R3-rest är H, och;

10 R3 antingen i alia U-nukleocider eller bäde i alia U- och C-nukleocider är F; W och W' betecknar oberoende av varandra syre eller svavel; Z och Z' är oberoende av varandra O'; S ; Ci-ie-15 alkoxi, fördelaktigt Ci_8-alkoxi, Ci-ig-alkyl, fördelaktigt Ci-a-alkyl, NHR4, där R4 = Ci-i8-alkyl eller Ci-4-alkoxi-Ca-6-alkyl, fördelaktigt metoxietyl; NR4R5, där R4 är säsom ovan definierats och R5 är Ci_i8-alkyl, fördelaktigt Ci-8-alkyl, där R4 och R5 tillsammans med en kväveatom som bär dem be-20 tecknar en 5 - 6-ledad heterocyklisk ring, som dessutom kan innehälla en annan heteroatom frän serien O, S, N, säsom >.· t.ex. morfolin; I varvid X är OH, H, F, Cl, Br, NH2, N3,

0-C(0) - (Ci-ie) -alkyl, O-C (0) - (C2.18)-alkenyl, O-C (O) - (C2_18) -t 25 alkynyl, O-C (0) - (C6_18) -aryl, O-(C^ib)-alkyl, 0- (C2-i8) -alke- nyl, 0- (C2-18) -alkynyl, 0- (C6_18) -aryl, P(0)YY', varvid Y och • * Y' är säsom har definierats för grupperna Z ja Z', varvid R3 och X i formel II tillsammans kan bilda en cyklisk fos-;> forsyradiester, X fördelaktigt är OH, H, F; n är ett heltal ;;; 30 5 - 60, fördelaktigt 15 - 25, samt för framställning av fy- *; siologiskt tolererbara salter därav, kännetecknat av ; att i a) en nukleotidenhet med 3'- eller 5'-terminala fosfor(III)- eller fosfor (V)-grupperingar, eller ett akti-; i 35 verat derivat därav bringas att reagera med en annan nukle- ’ * otidenhet med en 3'- eller 5'-terminal, fri hydroxigrupp, 115400 31 eller b) oligonukleotiden bildas med hjälp av fragment pa samma sätt; fran oligonukleotider som erhallits i enlighet med punkt (a) eller (b) bortspjälks eventuellt en eller 5 flera skyddsgrupper som tillförts temporärt för att skydda andra funktioner och de sälunda erhällna oligonukleotiderna med formeln I omvandlas eventuellt till ett fysiologiskt tolererbart salt.

2. Förfarande enligt patentkrav 1, känneteck-10 n a t av att R3 i alia U- och C-nukleocider är F.

3. Förfarande enligt patentkrav 1 eller 2, kän-netecknat av att R2 betecknar en rest med formeln III och R1 betecknar väte; R1 och R2 en rest med formeln II eller III; eller R2 betecknar väte och R1 betecknar en rest 15 med formeln II, varvid i det sist nämnda fallet antingen W eller Z inte betecknar syre och X är OH eller H.

4. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-3, kännetecknat av att W betecknar syre eller Z och W betecknar bäda syre. 20

5. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-4, kännetecknat av att R2 betecknar en rest med formeln Ill och R1 betecknar väte.

,: · 6. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-5, kännetecknat av att oligoribonukleotiderna med for-25 mein I dessutom substituerats med grupper som befrämjar in-'/ tracellulär upptagning och som fungerar som in vitro eller in vivo reportergrupper och/eller grupper som vid hybridi-seringen av oligonukleotiden som binder sig vid biologiskt DNA eller RNA griper i dessa DNA- och RNA-molekyler och 30 binder sig vid dessa eller sönderdelar dessa.

*; 7. Förfarande enligt patentkrav 1, känneteck- /·/ nat av att man framställer en oligoribonukleotid som är :i en ribozym med en syntetisk 5'- och/eller 3'-ända. » »