FI114876B - Menetelmä ja laite nesteiden käsittelemiseksi - Google Patents

Description

114876

Menetelmä ja laite nesteiden käsittelemiseksi

Keksintö koskee menetelmiä ja laitetta kemiallisten tai biolo-5 gisten analyysien suorittamiseksi näytteistä. Yksi esillä olevan keksinnön mukainen edullinen toteutusmuoto kuvaa menetelmän ja laitteen immunologisten nukleiinihappokoetinanalyy-sien suorittamiseksi astiassa, jossa on useita lokeroita. Lokerot ovat nesteyhteydessä astian pyöriessä.

10

Affiniteettisitoutumismäärityksiä käytetään usein sellaisen molekyylin läsnäolon toteamiseksi, joka molekyyli liittyy sairauteen tai biologiseen tilaan. Nämä määritykset perustuvat sitoutuviin pareihin, molekyylien pariin, joilla on keskinäi-15 nen affiniteetti tai sitoutumiskyky. Tyypillisesti sitoutu-misparin yhtä molekyyliä nimitetään ligandiksi ja sitoutumis-parin toista molekyyliä nimitetään antiligandiksi, reseptoriksi, analyytiksi tai kohteeksi. Nimitys on sattumanvarainen siinä mielessä, että se riippuu siitä, mikä molekyyli halutaan 20 havaita. Sitoutumispari voi käsittää kaksi komplementaarista nukleiinihappoa, antigeeniä tai vasta-ainetta, lääkettä tai lääkereseptorikohtaa ja entsyymiä tai entsyymisubstraattia.

• · • · t * · · : Tyypillisesti biologisen sitoutumisparin toinen jäsen immobi- 25 lisoidaan kiinteään pintaan kuten muovi, lasi tai nitrosellu- : loosapaperi. Näyte, joka mahdollisesti sisältää mielenkiinnon , kohteena olevan molekyylin, levitetään kiinteään tukeen. In- kubointi jakson jälkeen, minä aikana mielenkiinnon kohteena < 1 · olevalla molekyylillä on mahdollisuus sitoutua immobilisoi-30 88tuun ligandiin, sitoutumatta jäänyt näyte poistetaan. Tämän inkubointijakson aikana näytettä ja tukea keinutetaan, jolloin * muodostuu nestevirtaus tuen yli, jotta maksimoidaan kohdemo- lekyylien mahdollisuus löytää immobilisoitu ligandi. Kohde, ,·1. mikäli läsnä, muodostaa kompleksin immobilisoidun ligandin 35 kanssa.

”1 Seuraavaksi lisätään lisäreagensseja tukeen, jotka reagenssit kykenevät reagoimaan muodostuneen kompleksin tai immobilisoidun ligandin kiinniottaman kohteen kanssa. Näihin lisäreagens-40 seihin kuuluu tyypillisesti leimattu toinen ligandi, joka 2 1U876 kykenee sitomaan kohteeseen tai kompleksiin. Leimatulla toisella ligandilla on leima, molekyylirakenne, joka kyetään havaitsemaan. Tyypillisiin leimoihin kuuluvat esimerkiksi, rajoittumatta niihin, radioaktiiviset isotoopit, entsyymit, 5 luminesenssiaineet, saostusaineet ja väriaineet.

Tukea tarkkaillaan sopivien signaalin kehittävien olosuhteiden vallitessa signaalin saamiseksi. Signaali on osoitus kohteen läsnäolosta.

10

Menetelmät immunologisten aineiden, peptidien ja nukleiinihappojen immobilisoimiseksi kiinteään tukeen ovat hyvin tunnettuja tekniikan tasossa. Nukleiinihapposekvensseistä, jotka ovat spesifisiä tietylle sairaudelle, annetaan tietoa ta-15 vanomaisesti tieteellisissä julkaisuissa, US- ja muissa patenteissa ja patenttihakemusjulkaisuissa ja erilaisissa tietokannoissa, jotka sisältävät tietoa nukleiinihapposekvensseistä. Immunologisista aineista kuten vasta-aineet, jotka ovat spesifisiä tietylle organismille tai sairauksille, on 20 myös raportoitu tieteellisissä julkaisuissa, US- ja muissa . . patenteissa ja patenttihakemusjulkaisuissa sekä kemikaalien • · · ; toimittajien tieteellisissä luetteloissa (kuten Sigma Chemical : ·* Company, St. Louis, Missouri, USA), ja mitä tulee solulinjoi- i.i : hin, niitä säilyttävistä talletuslaitoksista (kuten The Ameri- • · 25 can Type Culture Collection Rockvillessä, Marylandissä, USA) ' : : saa tieto niistä.

i < « » · ·

Affiniteettimääritysten tehoa on rajoittanut se, että rea-. genssit on pitänyt levittää ja poistaa manuaalisesti analyytin ,···, 30 läsnäolon havaitsemiseksi. Af f initeettimääritykset suoritetaan tyypillisesti kyveteissä, pienissä koeputken kaltaisissa asti-.·.* oissa. Kyvettien pienet tilavuudet ja aukot ovat käytännön työssä hankalia ja ne voivat johtaa toimintavirheisiin.

‘ 35 Vaikka menetelmän vaiheet on automatisoitu, säilyy tarve sel laiselle astialle, joka sallii oleellisesti koko määrityksen suorittamisen automaattisella tavalla. Siten on yhä olemassa tarve astialle, jonka käyttäminen helpottaa nesteiden lisää- 114876 3 mistä ja poistamista ja joka sallii näytteen ja immobilisoi-tujen ligandien inkuboimisen yhdenmukaisella tavalla.

Esillä oleva keksintö koskee menetelmiä ja laitetta pienten, 5 säädeltyjen nestetilavuuksien käsittelemiseksi. Esillä olevan keksinnön menetelmät ja laitteet sopivat ihanteellisesti affi-niteettisitoutumismääritysten suorittamiseen.

Esillä olevan keksinnön yksi toteutusmuoto esittää astian 10 nesteiden käsittelemiseksi. Astia käsittelee nesteitä liikkumalla ensimmäisessä liikkumiskuviossa. Ensimmäinen liikkumis-kuvio käsittää liikkumattoman asennon ja pyörimisen ympyrän kehässä. Ympyrällä on halkaisija, säde ja pyörimistaso. Kuten tässä käytetään, termi ·'aksiaalisesta, akselinpuoleinen" tar-15 koittaa akselia kohti. Termi "periferaalinen" viittaa pyöri-mistason ulkokehään, tai ympyrän reunaan suurimmassa kaaressaan. Pyöriminen on sellaista, joka liittyy levytasoon ja sentrifugeihin sentrifugivoimen aikaansaamiseksi astiassa oleviin nesteisiin.

20

Astia käsittää rungon, jossa on kammio. Kammiossa on ensim- I · Ψ mäinen lokero ja toinen lokero. Ensimmäisessä lokerossa on V yksi tai useampi seinämä määrittäen syvennyksen nesteen pitä- * miseksi paikallaan. Samoin toisella lokerolla on yksi tai ; 25 useampi seinämä määrittäen syvennyksen nesteen pitämiseksi : paikallaan. Ainakin yksi ensimmäisen lokeron yhdestä tai useammasta seinämästä ja toisen lokeron yhdestä tai useammasta seinämästä käsittää patoelimen. Patoelin sijaitsee ensimmäisen ,·, ja toisen lokeron välissä määrittämään nesteen pidätysalueen 30 ensimmäisessä lokerossa nesteen pitämiseksi paikallaan, kun » » * astia on liikkumattomassa asemassa, ja ylimenokäytävä kammioi-*,i#ϊ den välillä nesteille, kun runko pyörii ensimmäisessä liikku- miskuviossa. Ylimenokäytävä on nesteyhteydessä ensimmäisen ja . toisen lokeron kanssa rungon pyöriessä. Toisella lokerolla on 35 ainakin yksi mainituista yhdestä tai useammasta seinästä, jotka määrittävät toisen nesteen pidätysalueen nesteen pitämiseksi paikallaan, kun astia on liikkumattomassa asemassa, ja ainakin kolmannen nesteen pidätysalueen, kun runkoa pyörite- 4 114876 tään. Astia saa nesteen ensimmäiseen lokeroon ja vapauttaa nesteen ensimmäisestä lokerosta sentrifugivoimien avulla rungon pyöriessä, ylimenokäytävän kautta ja toiseen lokeroon. Pyörimisen aikana toiseen lokeroon saapunut neste pysyy kol-5 mannessa nesteen pidätysalueessa. Toiseen lokeroon saapunut neste pysyy toisessa nesteen pidätysalueessa paikallaan olevassa asemassa.

Edullisesti toisen lokeron toisella nesteen pidätysalueella on 10 pohjapinta, jossa on syvennys nesteiden vastaanottamiseksi, syvennys helpottaa nesteiden poistamista pipetillä tai muulla tavalla.

Edullisesti astialla on patoelimet, jotka käsittävät ainakin 15 yhden nesteen kuljetuspinnan. Nesteen kuljetuspinta on kallistettu vastaanottamaan nesteet ensimmäisestä nesteen pidä-tysalueelta ja kuljettamaan sellaisen nesteen sentrifugivoiman avulla. Nesteen kuljetuspinnalla on edullisesti kulma suhteessa pyörimistasoon, mitattuna kammion sisällä pyörimista-20 sosta sellaiseen pintaan, jonka kulma on suurempi kuin 90°. Pyörimistason mitat ovat suhteessa sellaiseen tasoon, joka ·.·.· ulottuu arviolta yhdensuuntaisesti astian pohjan kanssa.

• · : : : Edullisesti ensimmäisellä lokerolla on ainakin yksi seinämä ,* %: 25 vastaanottamaan koeliuska. Edullisesti seinämä on tasainen, * * . tasomainen ja ensimmäisen lokeron pohjassa, jotta vastaanote- taan neste koko sen pinnalle. Edullisesti koeliuskassa on sitoutumisparin jäsen immobilisoituna yläpinnalle. Edullinen . sitoutumisparin jäsen käsittää immunologisia tai nukleiini- ;;;* 30 happokoettimia. Tyypilliset immunologiset koettimet käsittävät ‘ vasta-aineita ja antigeenejä, jotka liittyvät sairauteen tai . biologiseen tilaan. Tyypilliset nukleiinihappokoetinreagenssit käsittävät nukleiinihapon, jolla on nukleotidisekvenssi, joka , kykenee hydbridisoitumaan kohdenukleiinihappoon. Kohdenukle- ; 35 iinihappo liittyy tyypillisesti sairauteen tai biologiseen tilaan.

5 114876

Keksinnön mukaisen astian runko käsittää lisäksi kääntämiselimet, jotta saadaan aikaan toinen liikkumiskuvio runkoon. Toinen liikkumiskuvio käsittää edullisesti keinuvan liikkumisen nesteiden sekoittamiseksi ensimmäisen tai toisen 5 lokeron sisällä inkubointikäsittelyn aikana.

Edullinen kääntämiselin käsittää kielekkeet, jotka ulottuvat rungosta ensimmäisen lokeron ympäriltä. Kielekkeet kykenevät tarttumaan tukikoloihin sallien rungon pyörimisen kääntymis-10 kaarta pitkin. Edullinen kääntymiskaari on jopa 30°. Se on, kääntymiskaari, jossa saranapiste on laitteen aksiaalisen pään ja kehäpään välissä, on jopa 15° pyörimissuunnan yläpuolella tai alapuolella.

15 Esillä oleva runko sovitetaan edullisesti pidettäväksi levy-tasossa. Edullisesti levytasossa on kolot vastaanottamaan kielekkeet, jotka ulkonevat rungosta. Siten levytaso pystyy antamaan ensimmäisen liikkumiskuvion rungolle. Kielekkeet, jotka ulkonevat rungosta, ottavat vastaan kolot, jolloin sal-20 Iitaan rungon ottaa toinen liikkumiskuvio. Edullisesti kolot ja kielekkeet toimivat yhdessä astian keskukseen päin, tai pitävät astian asennon, kun astiaa keinutetaan.

• i · • I f • · • I t : .* Edullisesti levytasolla on elimet toisen liikkumiskuvion ai- » » ;,· · 25 kaansaamiseksi. Esillä olevan keksinnön yksi toteutusmuoto * » :/<j kuvaa rungon, jolla on varsielimet toisen liikkumiskuvion : * : elinten kytkemiseksi. Edullinen toisen liikkumiskuvion elin käsittää edestakaisin liikkuvan keskiön, joka kykenee edestakaiseen kohtisuoraan liikkeeseen. Rungolla on varsi keskiön 30 kytkemiseksi, jotta se keinuttaa runkoa kääntyvällä liikkeel-·· lä.

i V Edullisesti ensimmäinen lokero pystyy vastaanottamaan valoa ja :,,,ί sillä on yksi tai useampi seinämä, joissa on valoa hajaannut- 35 tava pinta. Vaihtoehtoisesti yhdellä tai useammalla seinämällä ; on valoa absorboiva pinta, jotta tarjotaan ensimmäisen lokeron yhdenmukainen valaiseminen. Edullisesti ensimmäinen lokero käsittää koeliuskan, joka luetaan valaisemalla.

6 114876

Edullisesti ainakin yksi ensimmäisen lokeron yhdestä tai useammasta seinämästä, joka käsittää patoelimen, on kallistettu sallimaan valon saapua ensimmäiseen lokeroon pohjataso-pinnan valaisemiseksi. Yhdellä tai useammalla seinämällä on 5 kulma suhteessa pyörimistasoon, joka kulma mitattuna kammion sisällä pyörimistasosta sellaiseen seinämään, on edullisesti suurempi kuin 90°, ja edullisimmin 110-165°, ja edullisimmin noin 120°.

10 Edullisesti ensimmäisellä lokerolla on pohjatasopinta. Edullisesti pohjatasopinta on immobilisoitu immunologisilla tai nukleiinihappokoettimilla tai se kykenee vastaanottamaan yhden tai useamman koeliuskan, joka sisältää immunologisia tai nuk-leiinihappokoettimia.

15

Edullisesti ensimmäinen lokero käsittää lisäksi kaksi si-vuseinämää, akseliseinämän ja patoseinämän. Patoseinämä muodostaa kulman suhteessa pohjatasoseinämään, joka kulma on oleellisesti sama, jotta tarjotaan symmetrinen heijastusva- 20 laistuskuvio. Edullisesti kunkin sivuseinämän kulma pohja-tasopinnasta on 90° tai suurempi. Edullisemmin 90° - 135°, ja • · · ! edullisimmin noin 95°.

• · · i · t ;· ; Edullisesti akseliseinämällä ja patoseinämällä on kulma suh- ' ’· 25 teessä pohjaseinämään, joka kulma on oleellisesti sama, jotta ’ tarjotaan symmetrinen heijastuvan valaistuksen kuvio pohja- ν' ·’ seinämälle. Edullisesti akseliseinämä ja patoseinämällä on kulma suhteessa pohjatasopintaan, mitattuna kammion sisällä ; pohjatasopinnasta kuhunkin vastaavaan seinämään, joka kulma on - 30 suurempi kuin 90° ja edullisemmin 110° - 165°, ja edullisimmin noin 120°.

» I I

*·’ Edullisesti ainakin yksi tai useampi toisen lokeron seinämä ; käsittää patoelimen, pohjaseinämän ja takaseinämän. Edulli- *...: 3 5 sesti toisella lokerolla on takaseinämä, joka on aksiaalisesti kallistettu suhteessa pyörimistasoon, jotta muodostetaan kolmas nesteen pidätysalue. Se on, takaseinämällä on kulma, mi 7 114876 tattuna kammion sisällä pyörimistaosta sellaiseen seinämään, joka kulma on pienempi kuin 90° ja edullisemmin 60° - 70°.

Edullisesti yksi tai useampi seinämä käsittää syvennyksen, 5 joka määrittää alhaisen pisteen toisen nesteen pidätysalueen sisällä. Painanne kerää nesteen, josta painanteesta nesteet vedetään pois pipeteillä tai vastaavilla.

Edullisesti esillä olevan keksinnön mukainen astia puristetaan 10 muottiin yhdeksi yksiköksi, jotta tarjotaan helppo valmistaminen. Astia voidaan täyttää edeltä valmiiksi koeliuskalla tai soveltaa vastaanottamaan koeliuska, jonka asettaa paikalleen laitteen käyttäjä. Astialla on oleellisesti avoin yläosa. Se on, rungossa on aukko, joka ulottuu ensimmäisen lokeron akse-15 liseinämästä toisen lokeron päätyseinämään.

Esillä olevan keksinnön lisätoteutusmuoto kuvaa menetelmän nesteiden käsittelemiseksi. Menetelmä käsittää sen, että asetetaan näyte astiaan nesteiden käsittelemiseksi liikuttamalla 20 ensimmäisessä liikkumiskuviossa. Kuten tässä käytetään, termi .·.·. "näyte" viittaa nesteeseen, jota käsitellään. Analyyttisessä 'I tai diagnostisessa mielessä näyte sisältää mahdollisesti ana- ! lyyttiä. Astia käsittää rungon, jossa on kammio, jossa on ·;· ; ensimmäinen lokero ja toinen lokero. Ensimmäinen lokerolla on ’ 25 yksi tai useampi seinämä, jotka määrittävät syvennyksen nes- « · · teiden paikallaan pitämiseksi. Samoin toisella lokerolla on v ; yksi tai useampi seinämä, jotka määrittävät syvennyksen nes teiden paikallaan pitämiseksi. Ainakin yksi ensimmäisen loke-: ron yhdestä tai useammasta seinämästä ja ainakin yksi toisen : 3 0 lokeron yhdestä tai useammasta seinämästä käsittää patoelimen, joka on ensimmäisen ja toisen lokeron välissä, jolloin muodostuu nesteen pidätysalue ensimmäiseen lokeroon nesteiden pai- kallaan pitämiseksi, kun laite on liikkumattomassa asemassa, *.· ja ylikäytävän nesteitä varten kammion sisällä. Toisella loke- 35 rolla on ainakin yksi tai useampi seinämä, joka määrittää toisen nesteen pidätysalueen nesteiden pitämiseksi paikallaan, kun laite on liikkumattomassa asennossa, ja kolmannen nesteen pidätysalueen, kun runkoa pyöritetään. Ylimenokäytävä on nes- 8 114876 teyhteydessä ensimmäisen ja toisen lokeron kanssa rungon pyöriessä. Ensimmäisessä lokerossa olevaa näytettä käsitellään ja vapautetaan toiseen lokeroon rungon pyöriessä ja neste kulkee ylimenokäytävän kautta toiseen kammiolokeroon.

5

Esillä olevan keksinnön toteutusmuodot sopivat ihanteellisesti koeliuskojen käsittelemiseen. Edullisesti yksittäinen koelius-ka asetetaan astian ensimmäiseen lokeroon. Laajentuva, avoin kammio, avoin ensimmäisen lokeron akseliseinämästä toisen 10 kammion päätyseinämään, sallii koeliuskan helpon lukemisen. Esillä oleva keksintö sopii ihanteellisesti koeliuskojen kolo-rimetrisiin määrityksiin immunoblottausmäärityksen muodossa. Avoin kammio sallii lisäksi manuaalisen tai automaattisen nesteiden pipetoimisen kammioon sisään tai ulos sieltä.

15

Muut esillä olevan keksinnön piirteet ja edut käyvät ilmeisiksi katsomalla piirrustuksia ja ymmärtämällä seuraavana oleva yksityiskohtainen kuvaus.

20 Kuvio 1 on isometrinen näkymä laitteesta, joka ilmentää esillä ,·,·. olevan keksinnön piirteitä; • · I ; Kuvio 2 kuviossa 1 havainnollistetun laitteen tasonäkymä; • · · · '· *·* 25 Kuvio 3 on läpileikkauskuva laitteesta, joka ilmentää esillä ·,;.· olevan keksinnön piirteitä, katsottuna kuviossa 2 esitettyjen V · linjojen 3-3 kautta; : Kuvio 4 on poikkileikkausnäkymä laitteesta, joka ilmentää 30 esillä olevan keksinnön piirteitä, toimien yhdessä valaisu-elimen ja lukuelimen kanssa; *...· Kuvio 5 kuvaa tasolevyn, joka on varustettu ulkonevalla lo- villa kuviossa 1 kuvatun laitteen vastaanottamiseksi; ja 35

Kuvio 6 on tasolevy- ja keskikeskiökokoonpano kahden liikku-miskuvion aikaansaamiseksi laitteelle, joka ilmentää esillä olevan keksinnön piirteitä.

9 114876

Esillä olevan keksinnön menetelmää ja laitetta kuvataan yksityiskohtaisemmin mitä tulee edullisiin toteutusmuotoihin, jotka esittävät affiniteettisitoutumismääritystä. Selityksen yksityiskohtien ei tarkoiteta rajoittavan keksintöä vaan ne 5 korostavat sen piirteitä ja etuja. Menetelmällä ja laitteella on sovellutuksia missä tahansa tilanteessa, joissa moniloke-roiset astiat, jotka pystyvät pyörimään ja kääntymään, voivat olla käyttökelpoisia.

10 Kuviossa 1 on kuvattu astia, yleisesti merkitty numerolla 11, liuosten käsittelemiseksi. Astia 11 käsittää rungon 13, joka kykenee liikkumaan kahdessa liikkumiskuviossa.

Kuviossa 2 ensimmäinen liikkumiskuvio käsittää liikkumattoman 15 asennon ja pyörimisen ympyräkehässä. Ympyrällä on pyörimisakseli, -säde ja -taso.

Rungolla 13 on akselipää 15 ja uiko- eli kehäpää 17. Akselipää asetetaan akseliin päin. Ulkopää 17 määrittää ympyrän kehän. 20 Ensimmäinen liikkumiskuvio ja pyörimistaso ovat paksujen nuo-lien AA suuntaan. Sellaisen pyörimistason kulmat on määritetty .! ! suhteessa sellaiseen tasoon, jonka määrittää rungon pohja.

:·: '· Kuviossa 3 rungolla 13 on toinen liikkumiskuvio, joka käsittää ” 25 liikkumattoman asennon ja keinuvan asennon. Keinuvaliike kä- sittää kääntyvän liikkeen säteen sunnassa olevan pisteen kaut- ·’ ta kallistamaan runkoa 13 suhteessa pyörimistasoon. Sellaisen tilanteen, jossa saranapiste on akselipään 15 ja ulkopään 17 : välissä, toinen liikkumiskuvio on esitetty suurilla nuolilla :·. 30 BB.

♦ * ·

Rungolla 13 on yksi tai useampi seinämä, joka määrittää si-semmän kammion 19, kuten parhaiten nähdään kuviosta 2, ja ulkopinnan 21, kuten parhaiten nähdään kuviosta 1. Runko 13 on 35 edullisesti valettu muottiin yhtenä kappaleena.

Kuvioissa 2 ja 3 sisemmällä kammiolla 19 on ensimmäinen lokero 23 ja toinen lokero 25. Ensimmäisellä lokerolla 23 on akselin- 114876 ίο puoleinen sijainti suhteessa toiseen lokeroon 25. Ensimmäisen lokeron 23 määrittää pohjaseinämä 27, sivuseinämät 29a ja b, akseliseinämä 31 ja patoseinämä 33. Edullisesti ensimmäisen lokeron 23 pohjaseinämä 27 on noin 1,45 tumaa kertaa 0,215 5 tuumaa. Sivuseinämät 29a ja b ovat korkeudeltaan 0,85 tuumaa. Ensimmäisellä lokerolla on nesteen pidätysalue 35, osoitettu pilkkuviivalla, sisältämään nestettä, kun runko 13 on liikkumatta ensimmäisessä liikkumiskuviossa ja kun se keinuu toisessa liikkumiskuviossa. Ensimmäinen lokero 23 voi edullisesti 10 sisältää nestetilavuuksia 1,8 ml:aan saakka.

Pohjaseinämällä 27 on koeliuska 37, joka sisältää yhtä tai useampaa biologista sitoutumisainetta. Edullinen koeliuska on immunologisen kokeen liuska. Esillä oleva laite sopii erityi-15 sen hyvin käsittelemän CHIRON®RIBA™ Strip Immunoblot -määrityksen (SIÄ) koeliuskaa.

Alan ammattimiehet huomaavat, että monenlaisia antigeenejä voidaan immobilisoida koeliuskaan, jotta havaitaan vasta-ai-20 neita sellaisille antigeeneille. Alan ammattimiehet ymmärtävät • ._ lisäksi, että vasta-aineita voidaan immobilisoida koeliuskaan ,! | tavanomaisilla tavoilla, jotta havaitaan erilaisia antigeeni- ; ;* siä molekyylejä. Antigeeni ja vasta-aine -sitoutumisparit ·'*· · tunnistetaan helposti ja komponentit voidaan ostaa kemikaaleja ·: 25 toimittavista yrityksistä, kuten ICN Biomedicals, Inc., Irvi- :ne, CA, USA.

Kemikaaleja toimittavilta yrityksiltä saatavissa olevien vas-: ta-aineiden ja antigeenien esimerkkien ei tarkoiteta olevan 30 rajoittavia. Muut vasta-aineet ja antigeenit voidaan helposti tunnistaa ja immobilisoida koeliuskoihin 37.

*...· Koeliuska 37 voidaan valmistaa käyttämällä nukleiinihappoja, : joilla on sellainen sekvenssi, joka kykenee hybridisoitumaan 35 kohdesekvenssiin. Tämä sekvenssi, koetinsekvenssi, voidaan helposti syntetisoida ja kiinnitetään koeliuskaan tavanomaisilla tavoilla. Koetinsekvenssi voidaan saada mistä tahansa lukuisista tietopankeista kuten GenBank®. Koetinsekvenssi on 11 114876 yleensä 10-20 nukleotidia pitkä käsittäen sekvenssin, jolla on haluttu selektiivisyys kohteelle.

Koeliuska 37 voi koostua inistä tahansa kiinteästä tuesta. 5 Edullisesti koeliuska on nitroselluloosaa kolorimetristen reaktiotuotteiden pitämiseksi paikallaan.

Ensimmäisellä lokerolla 23 on sellaiset optiset ominaisuudet, jotka sallivat koeliuskan 37 yhdenmukaisen luennan. Kuviossa 4 10 akseliseinämällä 31 ja patoseinämällä 33 on tulokulma suhteessa pyörimistasoon ja pohjaseinämään 27. Patoseinämän 33 kulma θ', määritettynä pohjaseinämästä 27 ylös läpi kammion 19 akse-liseinämään 31, ja kulma Θ määritettynä pohjaseinämästä 27 ylös kammion 19 läpi akseliseinämään 31, ovat suurinpiirtein 15 yhtä suuret. Edullinen kulma Θ ja θ' on välillä 110-165° ja edullisimmin noin 120°.

Samoin sivuseinämillä 29a ja b on tulokulmat suhteessa pyörimistasoon ja pohjaseinämään 27. Sivuseinämän 29a ja b kulmat 20 mitattuna pohjaseinämästä 27 ylös sivuseinämään 19a tai b, ovat arviolta yhtä suuria. Edullinen kulma on 90-135° ja edul-lisimmin noin 95°.

« · • · · ;* ; Sivuseinämät 29a ja b, akseliseinämä 31 ja patoseinämä 33 • · · '· ’· 25 heijastavat valoa, joka saa alkunsa asemasta sen linjan ylä- puolella, joka ulottuu akseliseinämästä 31 ja patoseinämästä ',·* · 33, yhdenmukaisesti pohjaseinämään 27. Kuvio 4 havainnollistaa pohjaseinämän valaisemista kahdella valoa lähettävällä läh-: teellä 39a ja b. Valoa lähettävät lähteet 39a ja b tuottavat 30 valoa pohjaseinämän 27 valaisemiseksi. Valo on lähtöisin asemasta sen linjan yläpuolelta, joka ulottuu akseliseinämästä 31 ja patoseinämästä 33, jolloin sallitaan lukuelinten vastaanot-*;·’ taa valoa, joka heijastuu pohjaseinämästä 27. Valo, joka hei- jastuu pohjaseinämästä 27 vastaanotetaan prismalla 41 ja kame-·;··· 35 ralla 42 määrittämistä tai nauhoittamista varten.

Sivuseinämät 29a ja b, jotka määrittävät ensimmäisen lokeron 23, ja akselinseinämä 31 ja patoseinämä 33 ovat edullisesti 12 114876 sameita tai läpikuultavia, jotta ne absorboivat tai heijastavat valoa hajottavalla tavalla helpottamaan koeliuskan 37 lukemista. Sivuseinämät 29a ja b, akseliseinämä 31 ja pato-seinämä tummennetaan pigmenteillä puristusprosessin aikana tai 5 edullisesti sivuseinämä 29a ja b, akseliseinämä 31 ja pa-toseinämä 33 ovat yhdenmukaisen värisiä ja matta tai kuviollisia [ei- esitetty] valon hajaannuttamiseksi.

Tarkasteltuna kuvia 2 ja 3, patoseinämän 33 kulma suhteessa 10 pohjaseinämään 27 ja pyörimistasoon helpottavat nesteiden liikkumista ensimmäisestä lokerosta toiseen lokeroon rungon 13 pyöriessä. Patoseinämällä 33 on sellainen korkeus, joka on pienempi kuin sivuseinämien 29a ja b, jolloin ne määrittävät ylimenokäytävän 45 sisäkammion 19 sisälle, joka on yhteydessä 15 toiseen lokeroon. Se on, kun sivuseinämät 29a ja b ovat 0,85 tuumaa, patoseinämän korkeus on 0,63 tuumaa.

Toisen lokeron 25 määrittää pohjaseinämä 47, etuseinämä 49, sivuseinämät 29a ja b, takaseinämä 51, ulkonevat seinämät 53a 20 ja b ja sivuseinämät 55a ja b. Edullisesti toisen lokeron 25 . . pohjaseinämä 47 on noin 1,1 tuumaa kertaa 0,4 tuumaa. Sivusei- ; nämien 29a ja b korkeus on noin 0,65 tuumaa.

« · · M : Toisella lokerolla 25 on kaksi nesteen pidätysaluetta ensim- V·: 25 mäisen lokeron 23 ensimmäisen nesteen pidätysalueen 35 lisäksi.1 si. Toisen nesteen pidätysalueen 57 määrittää pohjaseinämä 47, : : : etuseinämä 49, sivuseinämät 29a ja b, takaseinämä 51, ulkone vat seinämät 53a ja b ja sivuseinämät 55a ja b. Toinen nesteen . pidätysalue 57 on esitetty pilkkuviivalla, kuten parhaiten 30 nähdään kuviosta 3. Toinen nesteen pidätysalue 57 pitää nesteen toisessa lokerossa 25, kun runko 13 on liikkumattomassa '>V asennossa ensimmäisessä liikkumiskuvissa.

t

Toisessa pidätysalueessa 57 on painanne 59, jossa akselisei-35 nämä 49 kohtaa pohjaseinämän 47. Painanne 59 kykenee vastaan- • * ottamaan pipettejä tai muita nesteen poistoon tarkoitettuja laitteita [ei esitetty] nesteiden poistamiseksi toisesta lokerosta 25.

13 114876

Kolmannen nesteen pidätysalueen 61 määrittelee oleellisesti pohjaseinämä 47, takaseinämä 51 ja sivuseinämät 55a ja b. Kolmas nesteen pidätysalue 61, osoitettu pisteviivalla, pitää nesteen toisessa lokerossa 25, kun runko 13 liikkuu ensimmäi-5 sessä liikkumiskuviossa.

Alan ammattimiehet ymmärtävät heti, että ensimmäisen, toisen ja kolmannen pidätysalueen 35, 37 ja 61 muuttavat muotoa rungon 13 pyöriessä ja siten nesteiden tilavuus muuttuu, joita 10 nesteitä pidetään kussakin lokerossa. Toinen ja kolmas nesteen pidätysaluee ovat kooltaan edullisesti sellaiset, että ne sisältävät noin 2,4 ml nestettä.

Sivuseinämät 55a ja b ja takaseinämä 47 ulkonevat sivuttain 15 ulospäin sivuseinämistä 29a ja b, jolloin ne tarjoavat kolmannen pidätysalueen 61, jonka kapasiteetti on suurempi. Takaseinämä on kallistettu suhteessa pyörimistasoon. Edullisesti takaseinämä 47 määrittää kulman a suhteessa pyörimistasoon. Kulma a, mitattuna pyörimistasosta takaseinämään 47 kammion 19 20 sisäpuolella, on noin 60° - 75°. Tämä kulma a toimii yhdessä • . ensimmäisen liikkumiskuvion kanssa ympyrässä, jonka säde on 5- I 12 tuumaa ja pyörimisnopeus noin 100-200 rpm. Edullinen nopeus ; ; on noin 160 rpm rungolle 13, jonka pituus on noin 5 tuumaa ja j pyörimisympyrän säde on noin 7 tuumaa.

* · · ’· *: 25 :,i.: Toisen lokeron 25 etuseinämä 49 on kallistettu suhteessa pyö- :.·* : rimistasoon, jolloin määräytyy kulma β. Kulma β, mitattuna pyörimistasosta kammion 19 etuseinämään 49 on suurempi kuin 90° ja edullisesti noin 150°. Etuseinämä 49 ottaa vastaan ,;·. 30 nesteen ylimenokäytävästä 45 ja kuljettaa nesteen keskipakois voimalla mahdollisimman vähällä aerosolin muodostumisella • » · *;*·’ toiseen lokeroon 25. Neste liikkuessaan etuseinämää 49 kohti ' pysyy seinämällä pintajännityksen tai kapillaarivoiman avulla.

;·.· Edullisesti pohjaseinämän 47, akseliseinämän 31, sivuseinämien 35 29a ja b pinta toisen lokeron 25 sisällä, takaseinämän 51, ulkonevien seinämien 53a ja b ja sivuseinämien 55a ja b pinta kiillotetaan nesteen liikkumisen helpottamiseksi.

1 1 4876 14

Akseliseinämä 31, takaseinämä 51, sivuseinämät 55a ja b, ulkonevat seinämät 53a ja b ja sivuseinämät 29a ja b määrittävät aukon, yleisesti merkitty numerolla 65. Aukko 65, joka ulottuu oleellisesti kammion 19 pituudelle, sallii pipettien ja muiden 5 nestettä poistavien ja nestettä poisottavien työkalujen työntämisen sisään ensimmäiseen lokeroon 23 tai toiseen lokeroon 25 kammiossa 19. Aukko 65 sallii koeliuskan 37 laittamisen sisään ensimmäiseen lokeroon 23 tai toiseen lokeroon 25.

10 Palataan nyt kuvioon 1, jossa rungolla 13 on kielekkeet 67 ulottuen sivuttain ulospäin yläulkopinnasta 21. Kielekkeet 67 määrittävät saranapisteen antamaan keinuva liike rungolle 13.

Edullisesti kielekkeet 67 toimivat yhdessä ja ne vastaanottaa 15 pyörivän levytason 75 tukitelineet 69, kuten parhaiten nähdään kuviosta 5. Kielekkeen 67 pohja muodostaa saranapisteen ensimmäisen lokeron 23 pituuden keskivälille. Levytaso 75 kykenee liikkumaan ensimmäisellä liikkumiskuviolla, jolloin saadaan runko 13 pyörimään. Kielekkeet 67 ulottuvat lineaarisesti 20 rungon päältä noin keskivälille ulkopintaa 21, jolloin se . . määrittää linjan suhteessa pyörimistasoon, ja kulma t, mitat- tuna pyörimistaosta kielekkeiden 67 pohjasta, aksiaalisesti, : ·* kielekkeen 67 huippuun, on 90° tai suurempi siten, että kie- : lekkeet 67 pyrkivät pysymään paikallaan telineessä 69 pyörimi- \’·· 25 sen aikana.

* t t • * *

Edullisesti rungolla 13 on varsi 79. Varressa 79 on tuki 81 jäykkyyden aikaansaamiseksi. Varsi 79 kykenee kytkemään kohtisuoraan liikkumisvälineen toisen liikkumiskuvion aikaansaa-.···, 30 miseksi rungolle 13. Kieleke 67, ensimmäisen lokeron 23 pituu den keskipisteessä, määrittää saranapisteen suuremman painon ,.· ollessa kohti laitteen 11 ulkopäätä 17. siten varren 79 tar- ',,,· vitsee kytkeytyä vertikaaliseen liikkumisvälineeseen, joka kä- : sittää pystysuoraan edestakaisin liikkuvan keskiön 85 kiin- 35 teänä osana levytason 75 kanssa, kuten parhaiten nähdään kuviosta 6. Kun keskiö 85 liikkuu ylös ja alas, varsi pakotetaan alaspäin keskiön voimasta ja ylöspäin laitteen 11 painon voimasta kohti ulkopäätä 17, jotta kallistetaan saranarunkoa 13 15 114876 telineessä 69. Tyypillinen toinen liikkumiskuvio on noin 10-30 tuumaa minuutissa ja edullisesti 16-20 sykliä minuutissa.

Esillä olevan keksinnön mukaista laitetta kuvataan edullisen 5 toteutusmuodon avulla, jossa toteutusmuodossa laitteessa on koeliuska 37, joka käsittää CHIRON® RIBA™ HCV 3,0 -liuskaim-munoblottausmäärityksen. Muut koeliuskat 37 voidaan tehdä kooltaan sellaisiksi, että ne sopivat ensimmäisen lokeron 23 pohjapinnalle 27.

10 CHIRON® RIBA™ HCV 3,0 -liuskaimmunoblottausmääritys käsittää komponentit, jotka on esitetty tunnistetiedoin taulukossa 1.

Taulukko 1 15 Komponenttien kuvaus 1. Hepatiitti-C-virus (HCV) -koodatulla antigeeni/pepti-dillä (rekombinantti c33c ja NS5, synteettinen 5-1-lp, clOOp ja c22p) päällystetyt liuskat: kukin liuska sisältää neljä itsenäistä juovaa HCV-koodattuja anti-20 geenejä/peptidejä, rekombinantti-humaani-SOD-juovan ja kaksi IgG-kontrollijuovaa.

* · · • r < * ’ ! 2. Näytteen laimennin: fosfaattipuskuroitu suolaliuos I * ·;· l (PBS) naudan proteiinistabilisaattoreiden ja puhdis- '· ” 25 tusaineiden kanssa. Sisältää 0,1 % natriumatsidia ja 0,05 % gentamisiinisulfaattia säilöntäaineina.

• I

• · 3. Konjugaatti: peroksidaasileimattua vuohen antihumaania : : IgG:tä (kevyt- ja raskasketjut) naudan proteiinistabi- 30 lisaattoreiden kanssa. Sisältää 0,01 T timerosaalia säilöntäaineena.

• · 1 t · ‘4. Substraattiliuos: 4-kloori-l-naftoli metanolissa.

·;··; 35 5. Substraattipuskuri: fosfaattipuskuroitu vetyperoksidi.

16 114876 6. Pesupuskuritiiviste (50x): fosfaattipuskuroitu puhdis-tuaineliuos sisältäen 0,01 % timerosaalia säilöntäaineena.

5 7. Positiivinen kontrolli (humaani): inaktivoitu ihmisen seerumi tai plasma sisältäen vasta-aineita HCVrlle (anti-HCV) ja non-reaktiivisia hepatiitti-B-pinta-an-tigeenille (HBsAg) ja vasta-aineita ihmisen immuu-nipuutosviruksen tyypille 1 (anti-HIV-1) ja tyypille 2 10 (anti-HIV-2). Sisältää 0,1 % natriumatsidia ja 0,05 % gentamisiinisulfaattia säilöntäaineina.

8. Negatiivinen kontrolli (humaani): ihmisen seerumi tai plasma, joka on non-reaktiivinen HBsAg:lie, anti-HIV-15 l:lle, anti-HIV-2:lie ja anti-HCV:lie. Sisältää 0,1 % natriumatsidia ja 0,05 % gentamisiinisulfaattia säilöntäaineina.

Reagenssit valmistetaan pakkauksen ohjeen mukaan.

20

Tarkastellaan nyt kuvaa 3, jossa koeliuska 37 kiinnitetään Λ* ensimmäisen lokeron 23 pohjapintaan 27. Siinä tapauksessa, : * < : V että määritystä ei aiota suorittaa välittömästi, laitetta 11 : : pidetään jäähdytettynä. Noin 30 minuuttia ennen analyysin ’.· 25 aloittamista laite poistetaan jääkaapista ja sen annetaan lämmetä huoneenlämpötilaan.

* i * • 1 • ·

Kuten kuvissa 5 ja 6 on esitetty, laite 11 asetetaan kielek-. keiden 67 levytason 75 telineessä 69 oleviin koloihin. Varsi » ψ 30 79 kiinnittyy keskiöön 85.

* * Y: Noin 0,5-2,0 ml näyteliuosta lisätään laitteen 11 ensimmäiseen lokeroon 23. Edullinen nestetilavuus, muille kuin näytteille , tai kontrolleille on 1 ml. Kohtisuoraan edestakaisin liikkuva > » ’ ; 35 keskiö 85 aktivoidaan keinuttamaan laitetta 11, jotta varmis- * f » » tutaan siitä, että koko liuska on nesteen peitossa. Edestakaisin liikkuva keskiö 85 toimii 16 - 20 sykliä minuutissa.

17 114876

Kun keinumisliike lopetetaan, noin 20-40 mikrolitraa sopivaa näytettä tai kontrollia lisätään ensimmäiseen lokeroon 23 ja kohtisuoraan edestakaisin liikkuva keskiö 85 aktivoidaan keinuttamaan laitetta 11. Tämä toinen liikkumiskuvio jatkuu 4-4% 5 tuntia.

Seuraavaksi aktivoidaan levytaso 75 ensimmäiseen liikkumisku-vioon pyörittämällä laitetta 11. Ensimmäisen lokeron 23 sisältämä neste liikkuu patoseinämää 33 ylöspäin ja ylimenokäytävän 10 45 läpi ja toiseen lokeroon 25. Neste pysyy toisen lokeron 25 kolmannessa nesteen pidätysalueessa 61 keskihakuvoimalla. Levytason 75 pyöriminen pysäytetään ja neste ottaa paikan toisen lokeron 25 toisessa nesteen pidätysalueessa 57. Toisessa nesteen pidätysalueessa 57 oleva neste poistetaan pipetil-15 lä, joka työntyy toiseen lokeroon 25 ja toimii syvennyksestä 59.

Seuraavaksi lisätään vielä 0,5-2,0 ml näyteliuotusainetta laitteen 11 ensimmäiseen lokeroon 23. Jälleen kohtisuoraan 20 edestakaisin liikkuva keskiö 85 aktivoidaan toiseen liikku- . miskuvioon. Laitetta keinutetaan kielekkeestä 67 noin 30 mi- » · f * · ; nuutin ajan huoneenlämpötilassa.

• * • .

* · ' Seuraavaksi levytaso 75 aktivoidaan jälleen ensimmäiseen .*’i 25 liikkumiskuvioon. Pyöriminen työntää laitteen 11 ensimmäisessä ·/ lokerossa pidetyn nesteen ylös patoseinämää 33, ylimenokäytä- : : vän 45 läpi ja toiseen lokeroon 25. Neste pysyy toisen lokeron 25 kolmannessa nesteen pidätysalueessa 61 keskihakuvoiman .\ avulla. Levytason 75 pyöriminen pysäytetään ja neste ottaa l\ 30 paikan toisen lokeron 25 toisessa nesteen pidätysalueessa 57.

Neste toisessa nesteen pidätysalueessa 57 poistetaan pipetil-V lä, joka työnnetään toiseen lokeroon 25 ja joka toimii syven- nyksestä 59.

* f ‘ · ,,· 35 Seuraavaksi 0,5-2,0 ml työpuskuria (2x) laitetaan ensimmäiseen lokeroon 23. Kohtisuoraan edestakaisin liikkuva keskiö 85 aktivoidaan jälleen kerran lyhyeksi ajaksi aikaansaamaan keinuvan liike laitteelle 11.

18 114876

Sen jälkeen levytaso 75 aktivoidaan ensimmäiseen liikkumisku-vioon pyörimään. Pyöriminen työntää ensimmäisessä lokerossa 23 olevan työpesupuskurin ylös patoseinämää 33, ylimenokäytävän 45 läpi ja toiseen lokeroon 25. Neste pysyy toisen lokeron 25 5 kolmannessa nesteen pidätysalueessa 61 keskihakuvoiman avulla. Levytason 75 pyöriminen pysäytetään ja nesteen annetaan ottaa paikka toisen lokeron 25 toisessa nesteen pidätysalueessa 57. Toisessa nesteen pidätysalueessa 57 oleva neste poistetaan pipeteillä, joka työnnetään toiseen lokeroon 25 ja joka toimii 10 syvennyksestä 59. Työpesupuskurin lisäys- ja poistovaihe voidaan toistaa.

Seuraavaksi laitetaan 0,5-2,0 ml konjugaattiliuosta ensimmäiseen lokeroon 23. Jälleen kohtisuoraan edestakaisin liikkuva 15 keskiö 85 aktivoidaan antamaan keinuva liike laitteelle 11 ja liikettä ylläpidetään 10 minuuttia.

Konjugaattiliuos poistetaan ensimmäisestä lokerosta 23 aloittamalla ensimmäinen liikkumiskuvio laitteella 11 aktivoimalla 20 levytaso 75. Konjugaattiliuos, joka on ensimmäisessä lokerossa ., 23, työntyy keskipakoisvoimalla ylös patoseinämää 33, ylimeno- • * * ;Y käytävän 45 läpi ja toiseen lokeroon 25. Neste pysyy toisen ·' ·* lokeron 25 kolmannessa nesteen pidätysalueessa 61 keskihaku- ,! voiman avulla. Levytason 75 pyöriminen pysäytetään ja nesteen . | 25 annetaan ottaa paikka toisen lokeron 25 toisessa nesteen pidä- : ί tysalueessa 57. Toisessa nesteen pidätysalueessa 57 oleva : · neste poistetaan pipetillä, joka työnnetään toiseen lokeroon 25 ja joka toimii syvennyksestä 59.

» * i t t 30 Sitten laitetaan 0,5-2,0 ml työpesupuskuria (3X) ensimmäiseen lokeroon 23. Kohtisuoraan edestakaisin liikkuva keskiö 85 v aktivoidaan vielä kerran lyhyeksi ajaksi antamaan keinuva ,,,ί liike laitteelle 11.

* · < i , 35 Sen jälkeen levytaso 75 aktivoidaan ensimmäiseen liikkumisku- vioon pyörimään. Pyöriminen työntää ensimmäisessä lokerossa 23 olevan työpesupuskurin ylös patoseinämää 33, ylimenokäytävän 45 läpi ja toiseen lokeroon 25. Neste pysyy toisen lokeron 25 19 114876 kolmannessa nesteen pidätysalueessa 61 keskihakuvoiman avulla. Levytason 75 pyöriminen pysäytetään ja nesteen annetaan ottaa paikka toisen lokeron 25 toisessa nesteen pidätysalueessa 57. Toisessa nesteen pidätysalueessa 57 oleva neste poistetaan 5 pipeteillä, joka työnnetään toiseen lokeroon 25 ja joka toimii syvennyksestä 59. Työpesupuskurin lisäys- ja poistovaihe voidaan toistaa.

Sitten lisätään 0,5-2,0 ml työsubstraattiliuosta ensimmäiseen 10 lokeroon 23 ja jälleen kerran kohtisuoraan edestakaisin liikkuva keskiö 85 aktivoidaan toisen liikkumiskuvion aikaansaamiseksi laitteelle 11. Laitetta 11 keinutetaan 15 minuuttia.

Työsubstraattiliuos poistetaan koeliuskasta 27, jota pidetään 15 ensimmäisessä lokerossa 23, aktivoimalla levytaso 75 ensimmäiseen liikkumiskuvioon. Ensimmäisessä lokerossa 23 oleva työpesupuskuri työntyy keskipakoisvoimalla ylös patoseinämää 33, ylimenokäytävän 45 läpi ja toiseen lokeroon. Neste pysyy toisen lokeron 25 kolmannessa nesteen pidätysalueessa 61 kes-20 kihakuvoiman avulla. Levytason 75 pyöriminen pysäytetään ja nesteen annetaan ottaa paikka toisen lokeron 25 toisessa nes-teen pidätysalueessa 57. Toisessa nesteen pidätysalueessa 57 oleva neste poistetaan pipeteillä, joka työnnetään toiseen lokeroon 25 ja joka toimii syvennyksestä 59.

‘ / 25 ;;; Seuraavaksi ensimmäiseen lokeroon 23 laitetaan 0,5-2,0 ml ·' ‘ deionisoitua vettä. Kohtisuoraan edestakaisin liikkuva keskiö 85 aktivoidaan antamaan laitteelle 11 keinuva liike. Tislattu tai deionisoitu vesi poistetaan ensimmäisestä lokerosta 23 ! : 30 pyörittämällä levytasoa 75. Jos koeliuska 37 pestään uudestaan • deionisoidulla vedellä, toisen lokeron 25 neste poistetaan » * pipetillä syvennyksestä 59 ja vaihe toistetaan.

Koeliuska 37 lingotaan kuivaksi pyörittämällä laitetta 11 le-;·· 35 vytason 75 ympäri hieman kohotetuissa lämpötiloissa. Edulli sesti koeliuska luetaan kolmen tunnin sisällä kuivaamisesta. Tarkastellaan nyt kuvaa 4, jossa koeliuskaa 37 valaistaan valonlähteillä 39a ja b. Sopiva kamera tai filmielin 43 ka- 20 114876 libroidaan ja sitä käytetään lukemaan ja tallettamaan koe-liuskan 37 tulokset. Ensimmäisen kammion 21 valaiseminen valoa lähettävillä lähteillä 39a ja b tuottaa yhdenmukaiset tulokset johtuen valon tasaisesta hajaantumisesta kun se saapuu kammi-5 oon 21 matta- tai värjätyillä seinämäpinnoilla, jotka liittyvät kammioon.

Esillä oleva keksintö esittää laitteen, joka kykenee käyttämään koeliuskaa 37 ja kantamaan koeliuskaa 37 lukuisten kä-10 sittelyvaiheiden läpi. Laite 11 pystytään muovaamaan yhtenä palana, jolloin vähennetään määrityksen suorittamisen kustannuksia. Lisäksi laite 11 voidaan puhdistaa ja uudelleenkier-rättää sarjakäyttöä varten lukusissa määrityksissä.

15 Siten esillä oleva keksintö on kuvattu edullisin toteutusmuodoin, joita toteutusmuotoja pystytään muuntelemaan ja muuttamaan. Esillä olevaa keksintöä ei pitäisi rajoittaa esitettyyn selitykseen vaan keksinnön piiriin pitäisi kuulua sellaiset muunnelmat ja muunnokset, jotka kuuluvat seuraavana olevien 20 patenttivaatimusten suojan piiriin.

I · • ·

Claims (22)

114876

1. Astia (11) nesteiden käsittelemiseksi liikuttamalla ensimmäisellä liikkumiskuviolla, joka ensimmäinen liikkumiskuvio käsittää liikkumattoman asennon ja ympyrää 5 pyörimisen, jolla ympyrällä on akseli, säde ja pyörimistaso, ja toisella liikkumiskuviolla käsittäen liikkumattoman asennon ja keinuvan liikkeen, joka astia (11) käsittää yhtenä kappaleena valetun rungon (13) kääntämiselimellä (67) ja yhdellä kammiolla (19), joka kääntämiselin (67) aikaansaa 10 toisen liikkumiskuvion mainitussa astiassa, jolla kammiolla on ensimmäinen lokero (23) ja toinen lokero (25) ja yksi aukko (65), joka ulottuu olennaisesti mainitun ensimmäisen (23) ja toisen lokeron (25) pituudelle, jolloin ensimmäisellä lokerolla (23) on yksi tai useampi seinämä, jotka määrittävät 15 syvennyksen nesteiden pitämiseksi paikallaan, jolloin toisella lokerolla on yksi tai useampi seinämä, jotka määrittävät syvennyksen nesteiden pitämiseksi paikallaan, ainakin yhden ensimmäisen lokeron (23) mainitusta yhdestä tai useammasta seinämästä tai vähintään yhden toisen lokeron (25) mainitusta 20 yhdestä tai useammasta seinämästä käsittäessä patoelimen (33), joka on mainitun ensimmäisen (23) ja toisen lokeron (25) vä- . . Iissä, määrittäen ensimmäisen nesteen pidätysalueen (35) * · * ,* mainitussa ensimmäisessä lokerossa (23) nesteen paikallaan ; pitämiseksi, kun mainittu astia (11) on mainitussa :«'· 25 liikkumattomassa asennossa, ja käytävän (45) mainitun kammion •.i (19) sisällä nesteille, kun mainittua astiaa (11) pyöritetään, *.’/ jolla toisella lokerolla (25) on ainakin yksi mainittu yksi : tai useampi seinämä määrittäen toisen nesteen pidätysalueen (57) nesteiden paikallaan pitämiseksi, kun astia (11) on . 30 liikkumattomassa asennossa, ja kolmannen nesteen pidätysalueen (61), kun runkoa (13) pyöritetään, jolla astialla (11) neste vastaanotetaan mainittuun ensimmäiseen lokeroon (23) ja mainittu neste vapautetaan mainittua runkoa (13) pyöritettäessä mainitun käytävän (45) kautta mainittuun . 35 toiseen lokeroon (25) , vähintään yhden ensimmäisen lokeron (23) yhdestä tai useammasta seinämästä ja vähintään yhden toisen lokeron (25) yhdestä tai useammasta seinämästä käsittäessä mainitun aukon (65) ja mainitun aukon (65) 114876 salliessa yhteyden mainittuun ensimmäiseen (23) ja toiseen (25) lokeroon.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen astia, jolloin mainittu 5 patoelin (33) käsittää ainakin yhden nestettä kuljettavan pinnan, jolla nestettä kuljettavalla pinnalla on kulma mitattuna kammion sisällä mainitusta pyörimistasosta mainittuun pintaan, joka kulma on suurempi kuin 90°, nesteliikkeen edistämiseksi mainitulla pinnalla pintajännitteen avulla ja 10 aerosolin muodostumisen estämiseksi.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen astia, jolloin mainitussa ensimmäisessä lokerossa (23) on ainakin yksi seinämä tasaisen tasomaisen koeliuskan vastaanottamiseksi. 15

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen astia, jolloin mainitussa koeliuskassa on immunologiset tai nukleiinihappokoettimet ja vähintään yksi mainitun koeliuskan tasaisista tasomaisista pinnoista alttiiksi asetettuna mainitulle aukolle. 20

5. Jonkin edellä mainitun patenttivaatimuksen mukainen astia, .. jolloin mainittu kääntämiselin käsittää kielekkeet (67), jotka ; ulkonevat rungosta (13) mainitun rungon (13) tukemiseksi ja • kääntymiskaaren ympäri pyörimisen sallimiseksi. : i : 25

6. Jonkin patenttivaatimuksista 1-4 mukainen astia, jolloin mainittu runko (13) on sovitettu asetettavaksi levytasolle (75).

7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen astia, jolloin mainitulla levytasolla (75) on kolot ja mainitulla rungolla (13) on kielekkeet (67), jotka ulkonevat rungosta (13) ja jotka kykenevät asettumaan mainittuihin koloihin.

8. Patenttivaatimuksen 6 tai 7 mukainen astia, jolloin : mainitulla levytasolla (75) on toinen liikkumiskuvioelin (85) mainitun toisen liikkumisen aikaansaamiseksi ja mainittu runko 114876 (13) käsittää varsielimen (79) toiseen liikkumiskuvioelimeen (85) kytkemiseksi.

9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen astia, jolloin mainittu 5 toisen liikkumiskuvion elin käsittää edestakaisin liikkuvan keskiön (85) , jonka keskiön kyetessä liikkumaan kohtisuoraan mainittuun pyörimistasoon nähden, jolloin rungolla (13) on varsi (79) mainitun keskiön (85) kytkemiseksi keinuttamaan mainittua runkoa (13) kääntävällä liikkeellä. 10

10. Jonkin edellä mainitun patenttivaatimuksen mukainen astia, jolloin mainittu ensimmäinen lokero (23) kykenee vastaanottamaan valoa ja mainitulla yhdellä tai useammalla seinämällä on valoa hajaannuttava pinta. 15

11. Jonkin patenttivaatimuksisa 1-9 mukainen astia, jolloin mainittu ensimmäinen lokero (23) kykenee vastaanottamaan valoa ja mainitulla yhdellä tai useammalla seinämällä on valoa absorboiva pinta. 20

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen astia, jolloin mainitulla ensimmäisellä lokerolla on pohjatasopinta (27), kaksi ’ vastakkaista sivuseinämää (29a, 29b), akseliseinämä (31) ja • ♦ : ‘ patoseinämä (33), joka patoseinämä käsittää patoelimen, mai- : 25 nitulla kahdella sivuseinämällä on ensimmäinen kulma suhteessa mainittuun pohjaseinämään, jolloin mainittu ensimmäinen kulma :tj/ on oleellisesti sama, jotta tarjotaan symmetrinen valon : ; heijastuskuvio, jolloin mainituilla akseliseinämällä ja maini tulla patoseinämällä on toinen kulma suhteessa mainittuun poh-30 jaseinämään, joka toinen kulma on oleellisesti sama, jotta tarjotaan symmetrinen valon heijastumiskuvio mainitulla pohja-·’ seinämällä. * t

13. Jonkin edellä mainitun patenttivaatimuksen mukainen astia, .·. 35 jolloin mainitulla toisella kammiolla on painanne yhdessä tai , ; useammassa mainitun toisen nesteen pidätysalueen määrittävässä seinämässä nesteiden vastaanottamiseksi painovoimaisesti ja 114876 pipettien ja nestettä poistavien elinten vastaanottamiseksi sallien mainitun toisen lokeron tyhjentämisen.

14. Jonkin edellä mainitun patenttivaatimuksen mukainen astia, 5 jolloin mainittu kolmas nesteen pidätysalue (61) mainitussa toisessa lokerossa (25) käsittää takaseinämän (51), jossa mainittu takaseinämä määrittää kulman suhteessa pyörimistasoon kammion sisällä, joka kulma on pienempi kuin 90°.

15. Jonkin edellä mainitun patenttivaatimuksen mukainen astia, jolloin mainitulla toisella lokerolla (25) on yksi tai useampi sivusuunnassa ulottuva seinämä (53a, 53b).

16. Menetelmä nesteiden käsittelemiseksi liikuttamalla nes-15 tettä ensimmäisellä liikkumiskuviolla, joka ensimmäinen liikkumiskuvio käsittää liikkumattoman asennon ja ympyrää pyörimisen, jolla ympyrällä on akseli, säde ja pyörimistaso, ja toisella liikkumiskuviolla käsittäen liikkumattoman asennon ja keinuvan liikkeen, jolloin kääntämiselin aikaansaa toisen 20 liikkumiskuvion, joka menetelmä käsittää seuraavat vaiheet: a) laitetaan nesteitä astiaan (11), joka käsittää rungon (13), • · ♦ jossa on kammio (19) , jossa kammiossa (19) on ensimmäinen : ' lokero (23) ja toinen lokero (25), jolloin ensimmäisellä ' :: 25 lokerolla (23) on yksi tai useampi seinämä, jotka määrittävät • · syvennyksen nesteiden pitämiseksi paikallaan, jolla toisella ; lokerolla (25) on yksi tai useampi seinämä, jotka määrittävät syvennyksen nesteiden pitämiseksi paikallaan, jolloin vähintään yksi ensimmäisen lokeron (23) mainitusta yhdestä tai :. 30 useammasta seinämästä ja vähintään yksi mainitun toisen lokeron (25) mainitusta yhdestä tai useammasta seinämästä käsittää patoelimen (33), joka on mainitun ensimmäisen (23) ja toisen (25) lokeron välissä määrittäen ensimmäisen nesteen pidätysalueen (35) mainitussa ensimmäisessä lokerossa (23) .·. 35 nesteen paikallaan pitämiseksi, kun astia (11) on mainitussa , ; liikkumattomassa asennossa, ja käytävän (45) mainitun kammion (19) sisällä nesteille astiaa (11) pyöritettäessä, jolla toisella lokerolla (25) on ainakin yksi mainittu yksi tai 114876 useampi seinämä, joka määrittää toisen nesteen pidätysalueen (57) nesteiden paikallaan pitämiseksi astian (11) ollessa liikkumattomassa asennossa, ja kolmannen nesteen pidätysalueen (61) , kun runkoa pyöritetään, joka käytävä on nesteyhteydessä 5 mainitun ensimmäisen (23) ja toisen (25) lokeron kanssa runkoa (13) pyöritettäessä, jolloin astialla (11) neste vastaanotetaan mainittuun ensimmäiseen lokeroon (23) ja neste vapautetaan runkoa (13) pyöritettäessä mainitun käytävän (45) kautta mainittuun toiseen lokeroon (25); 10 b) aikaansaadaan mainittu keinuva liike käsittäen kääntöliikkeen noin säteen suuntaisen pisteen kautta rungon (13) kieppaamiseksi tai kalustamiseksi pyörimistason suhteen nesteiden sekoittumisen ja leviämisen edistämiseksi astian (11) mainitussa ensimmäisessä (23) tai toisessa (25) 15 lokerossa; ja c) aikaansaadaan ensimmäinen liikkumiskuvio mainitulla astialla (11) nesteen siirtämiseksi ensimmäisestä lokerosta (23) toiseen lokeroon (25) käytävän (45) kautta ja toisen lokeron kolmanteen nesteenpidätysalueeseen (61), kun astiaa 20 pyöritetään, ja toiseen nesteenpidätysalueeseen (57) toisessa lokerossa (25), kun astia (11) on liikkumattomana ensimmäisessä liikkumiskuviossa. » t ·

17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, jolloin i 25 ensimmäisessä lokerossa (23) on vähintään yksi seinämä tasaisen tasomaisen koeliuskan vastaanottamiseksi.

18. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, jolloin ensimmäisessä lokerossa on koeliuska, jossa on immobilisoidut 30 immunologiset tai nukleiinihappokoettimet ja vähintään yksi •t koeliuskan tasomaisista pinnoista alttiiksi asetettuna vasten mainittua aukkoa.

19. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, jolloin \\ 35 mainittu ensimmäinen lokero (23) kykenee vastaanottamaan valoa ja mainitulla yhdellä tai useammalla seinämällä on valoa dif-fusoivia pintoja, joka menetelmä käsittää vaiheen, jossa 114876 valaistaan mainittua ensimmäistä lokeroa (23) ja monitoroidaan koeliuskaa analyytin läsnäolon määrittämiseksi.

20. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, jolloin 5 ensimmäinen lokero (23) kykenee vastaanottamaan valoa ja mainitulla yhdellä tai useammalla seinämällä on valoa absorboiva pinta, joka menetelmä käsittää vaiheen, jossa valaistaan ensimmäistä lokeroa ja monitoroidaan koeliuskaa analyytin läsnäolon määrittämiseksi. 10

21. Jonkin patenttivaatimuksista 16-20 mukainen menetelmä, jolloin mainitulla toisella lokerolla (25) on takaseinämä (51) käsittäen mainitun kolmannen nesteen pidätysalueen (61), jolla takaseinämällä on kulma suhteessa mainittuun pyörimistasoon, 15 joka kulma mitattuna kammion sisällä mainitusta pyö- rimistasosta mainittuihin takaseinämiin on pienempi kuin 90°.

22. Jonkin patenttivaatimuksista 16-21 mukainen menetelmä, jolloin mainitulla ensimmäisellä lokerolla (23) on 20 pohjatasopinta (27), kaksi vastakkaista sivuseinämää (29a, 29b), akseliseinämä (31) ja patoseinämä (33), joka patoseinämä käsittää patoelimen, mainitulla kahdella sivuseinämällä on '·'·* ensimmäinen kulma suhteessa mainittuun pohjaseinämään, joka : .* ensimmäinen kulma on oleellisesti sama, jotta aikaansaadaan · 25 symmetrinen valon heijastuskuvio, jolla akseliseinämällä ja patoseinämällä on toinen kulma suhteessa mainittuun poh-* jaseinämään, joka toinen kulma on oleellisesti sama, jotta tarjotaan symmetrinen valon heijastumiskuvio mainitulla poh-jaseinämällä. 30 » 1 1 4876 Patentkrav;