FI114687B - Kitti hedelmöitymisen ehkäisemiseksi - Google Patents

Description

114687

Kitti hedelmöitymisen ehkäisemiseksi. - Kit för att förhindra befruktning.

Munasarjakierto/kuukautiskierto on monimutkainen tapahtuma, jolle on tunnusomaista kaksi vaihetta, nimittäin runsaasti estrogeeniä sisältävä munarakkulavaihe ja ovulaati-5 on jälkeen runsaasti progesteronia sisältävä keltarauhasvaihe. Kummankin kestoaika on noin 14 päivää, kuukautisten väli on noin 28 päivää. Kohdun limakalvokudos reagoi hormoniympäristön muutoksiin.

Kuukautisvuodon alkaminen käynnistää uuden kuukautiskierron, ja lasketaan päiväksi 10 1. Noin 5 - 7 päivän aikana kohdun limakalvon pintakerrokset, jotka kasvoivat ja kehit tyivät edeltävän munasarjakierron/kuukautiskierron aikana, kuoriutuvat, koska keltarauhasen loppumiseen epäfertiilissä kuukautiskierrossa liittyy progesteronin erittymisen väheneminen. Munasarjan molekulaarinen kypsyminen tapahtuu vähitellen ja aiheuttaa estrogeenin pitoisuuksien nousun verenkierrossa, mikä vuorostaan aiheuttaa kohdun 15 limakalvon kasvun (so. estrogeenin indusoiman mytogeneesin), pääasiallisesti munarakkuloiden kypsymisen toisen viikon aikana.

Dominoiva munasarjafollikkeli ovuloituu kierron keskivälissä, yleensä kuukautiskierron päivien 12 -16 välillä. Follikkeli muuntuu pääasiallisesta estrogeenilähteestä pää-20 asialliseksi progesteronilähteeksi (keltarauhaseksi).

Ovulaatio tapahtuu, kun munasolu kykenee mahdollisesti hedelmöitymään, sen jälkeen ; ’; . kehittymään ja kiinnittymään alkiona. Progesteronin kasvava pitoisuus veressä muun- : ·, taa kasvavan kohdun limakalvon erittävään vaiheeseen, jossa kudoksen kasvu vaime- ’ 25 nee nopeasti ja johtaa endometriaalisten rauhasten tai elinten muodostumiseen. Kun ovuloitunut munasolu on näkyvästi hedelmöitynyt ja jatkaa alkionsa etenevää jakaan-; tumista, erittävä kohdun limakalvo ja conceptus voivat toimia keskenään ja saada ai- : kaan kiinnittymisen (uppoutumisen limakalvoon alkaen noin 6 - 8 päivää hedelmöity- : misen jälkeen).

30 , ’ Jotta alkanut raskaus voisi vakiintua kiinnittymisen kautta, alkio kiinnittyy ja hautautuu ; ; erittävään kohdun limakalvoon ja alkaa tuottaa ihmisen kronioni-gonadotropiinia , - ’ ·, (hCG). hCG vuorostaan stimuloi keltarauhasen jatkamaan toimintaansa, so. progeste- t · !,; ronin tuotto pysyy kohonneena, eikä kuukautisia esiinny hedelmällisen kuukautiskier- ‘’ 35 ron aikana. Raskaus on nyt vakiintunut.

* ♦ ; ’ ·.: Raskauden esiintymättömyyteen voi olla monia eri syitä, mukaan lukien mm. kelvollis ten siittiöiden puute, hedelmöitymisen puuttuminen huolimatta siittiöiden pääsystä 2 114687 munasoluun, se, että kelvollinen alkio ei onnistu kiinnittymään, se, että kelvollinen kohdun limakalvo ei kykene tukemaan kiinnittymistä ja myöhemmät tehottomat istukan ja sikiön kehitystapahtumat.

5 Epäfertiilissä kuukautisjaksossa aiheuttaa progesteronin aleneva pitoisuus veressä en-dometriaalisen kudoksen kuoriutumisen. Tämä aloittaa seuraavan kuukautiskierron.

Koska kohdun limakalvon kasvun tehtävänä on valmistaa kohtu alkavaa raskautta varten, ehkäisy voidaan saada aikaan manipuloimalla hormoneja ja kohtuympäristöä.

10 Esimerkiksi estrogeenien tiedetään pienentävän follikkelia stimuloivan hormonin erittymistä feedback-inhibition kautta. Estrogeenit voivat eräissä olosuhteissa myös estää keltarauhashormonin erittymistä, jälleen negatiivisen feedbackin kautta. Juuri ennen ovulaatiota havaittava estrogeenipiikki veressä saa normaaleissa olosuhteissa aikaan gonadotropiinihormonien äkillisen kasvun, joka tapahtuu juuri ennen ovulaatiota ja 15 johtaa siihen. Välittömästi yhdynnän jälkeen annetut korkeat estrogeeniannokset voivat myös estää hedelmöitymisen, luultavasti, koska ne häiritsevät kiinnittymistä.

Myös progestiinit voivat saada aikaan ehkäisyn. Estrogeenin jälkeinen endogeeninen progesteroni on syynä kohdun limakalvon raskautta edeltäviin muutoksiin ja kohdun- 20 kaulan ja emättimen solujen ja kudoksen syklisiin muutoksiin. Progestiinin antaminen tekee kohdunkaulan limakalvon paksuksi, kestäväksi ja sellulaariseksi, minkä uskotaan ehkäisevän siittiöiden kuljetusta. Progestiinin antaminen inhiboi myös keltarauhashor-.'; ; monin erittymistä ja estää ihmisissä ovulaation.

25 Kaikkein yleisin oraalinen ehkäisymuoto on pilleri, jossa on yhdessä sekä estrogeeniä että progestiinia, nk. yhdistelmäpilleri. Ilmeisestikin progestiini vaikuttaa estämällä gonadotropiinin vapautumisen; estrogeenikomponentti kontrolloi kohdun limakalvoa : pienentäen välivuotoa.

30 Vaihtoehtona on olemassa ehkäisyvalmisteita, jotka sisältävät vain progestiinia. Vain ;' progestiinia sisältävillä valmisteilla on kuitenkin vaihtelevampi sivuvaikutuskirjo kuin . ‘: yhdistelmävalmisteilla, erityisesti niillä esiintyy enemmän välivuotoa. Tästä johtuen '. t oraalisina ehkäisyaineina käytetään nykyään mieluummin yhdistelmävalmisteita (Sheth ; et ai., Contraception 25:243, 1982).

';·* 35 ,; j Antiprogestiinit Qoista joskus käytetään nimitystä "progesteroniantagonistit" tai "anti- : i gestageenit") ovat aineluokka, joka salpaa progesteronireseptorin. Esimerkiksi eräs progesteronireseptorin antagonisti on mifepristoni (RU 486). RU 486 sitoutuu proge- 3 114687 steronin reseptoriin ja estää progesteronin sitoutumisen reseptoriinsa. Kun RU 486:a annetaan kuukautiskierron keltarauhasvaiheessa, se aiheuttaa verenvuotoa emättimessä.

5 Alalla ei ole aikaisemmin osoitettu ovulatorisen kuukautiskierron inhibointia tai viivästynyttä kohdun limakalvon kypsymistä, vastoin kuin mitä tässä keksinnössä on kuvattu. Kädellisten eläinten malleissa on osoitettu, että sekä yksi ainoa RU 486-antiprogestiinin i ruiske (5 mg/kg, IM) myöhäisessä föllikkelivaiheessa että yksi viikoittainen oraalinen annos RU 486:a (25 mg) esti ovulaation (Collins et ai., J. Clin. Endocrinol. Metab.

10 1986, 63:1270-1276; Danforth et ai., Contraception 1989, 40:195-200).

Useat tutkijaryhmät ovat erilaisia tutkimusprotokollia, jotka erosivat toisistaan annosteluohjeiden ja annoksen suhteen, käyttämällä osoittaneet, että RU 486 inhiboi ovulaatiota myös naisilla (Shoupe et ai., Am. J. Obstet. Gynecol. 1987, 157:1421-1426; Liu 15 et ai., J. Clin. Endocrinol. Metab. 1987, 65:1135:1140; Luukkainen et ai., Fertil. Steril.

1988, 49:961-963).

RU 486:n on oletettu aiheuttavan naisilla kiinnittymisenvastaisen vaikutuksen alhaisena annoksena annettuna (Spitz et ai. The Endocrinology 1993, 3:1, 58 et seq.). Eräät 20 muut ovat osoittaneet RU 486:n vaikuttavan kohdun limakalvon histologiaan, mukaanlukien viivyttävän endometriumin kypsymistä (Batista et ai., Am. J. Obstet. Gynecol.

1992,167:60-65). Tässä yhteydessä kuvattu keksintö, joka eroaa tekniikan tasosta, . . perustuu gameetin kypsymisen ja hedelmöitymisprosessin inhibointiin. Alalla ei ole aikaisemmin osoitettu mitään tällaista ehkäisyvaikutusta.

' , 25

Keksijä on havainnut, että riittävän alhaisen progesteronireseptorin antagonistiannok-sen antaminen toimii ehkäisykeinona, mutta tämä ei perustu kiinnittymisenvastaiseen : vaikutukseen. Pikemminkin munasolun kypsyminen ja/tai hedelmöityminen estyy ja/tai ' : inhiboituu riippumatta siitä, voiko kiinnittyminen tapahtua.

30 ' Tämän keksinnön tavoitteena on siten tuoda esiin uusi kitti normaalin munasolun he- ’ ’ [: delmöitymisen ehkäisemiseksi inhiboimatta nisäkkään, erityisesti kädellisten ovulaatio- .'. t ta. Tämä ja muut keksinnön tavoitteet käyvät ilmi alan keskivertoammattimiehelle seu- raavasta kuvauksesta.

35 * » 4 114687

Piirustuksessa:

Ainoa kuva esittää seuraavassa esimerkissä 1 saatuja seerumin estradioli- ja progesteronipitoisuuksia.

5 Tämän keksinnön kohteena on kitti hedelmöitymisen ehkäisemiseksi. Tarkemmin sanoen sen kohteena on kitti, jolla ehkäistään munasolun normaali hedelmöityminen antamalla ovuloivalle nisäkkäälle niin suuri määrä progesteronireseptorin antagonistia, että se riittää ehkäisemään hedelmöitymisen, jolloin antamisalue on sellainen, että se 10 ei riitä estämään ovulaatiota eikä häiritsemään nisäkkään ovulatorisen kuukautiskierron säännöllisyyttä.

Esillä olevan keksinnön mukaisesti nisäkkäälle annetaan progesteronireseptorin antagonistia määrä, joka ei riitä häiritsemään nisäkkään yksittäisen ovulatorisen kuukautis-15 kierron säännöllisyyttä. Kierrossa voidaan havaita eräitä pienehköjä muutoksia, esimerkiksi kierron pituus voi kasvaa ja kohdun limakalvon kypsyminen voi viivästyä tai ei viivästy. Tässä yhteydessä käytettynä nimitys "säännöllisyys" tarkoittaa säännöllisen menstruaation säilymistä jaksollisin välein tapahtuvana. Kun antiprogestiinin määrä on riittävän suuri, ovulaatio estyy. Esillä olevassa keksinnössä ei tällaista määrää käytetä.

20 Sen seurauksena, että antiprogestiinia annetaan riittävän alhainen annos, munasolun kypsyminen ja/tai hedelmöityminen estyy tai ehkäistyy esillä olevassa keksinnössä.

Tätä määrää kutsutaan jäljempänä nimellä "hedelmöitymisen ehkäisevä määrä".

* »

Keksinnön mukainen antiprogestiini on progesteronireseptorin antagonisti. Esillä ole- < * ’ , 25 vassa keksinnössä käytettäväksi sopii erityisesti esimerkiksi RU 486.

* t

Esimerkkejä antiprogestiineista, joita voidaan käyttää tässä keksinnössä, ovat RU 486 : ("mifepristoni", Roussel Uclaf, Paris; US-patentti 4,386,085); ja "onapristoni" (Schering : AG, Berlin; US-patentti 4,780,461) ja seuraavissa patenteissa ja patenttihakemuksissa 30 kuvatut steroidit: US-patentti 4,609,651, erityisesti lilopristoni (lip-(4-dimetyyli-amino-, ' fenyyli)-17p-hydroksi-17a-(3-hydroksi-prop-l-(Z)-entsyyli-4,9(10) estradien-3-oni); : US-hakemusnumero 06/927,050, erityisesti lip-(4-asetyylifenyyli)-17p-hydroksi-17a- t ‘ t (l-propinyyli)-4,9-estradien-3-oni ja lip-(4-asetyylifenyyli)-17p-hydroksi-17a-(3- !,; hydroksi-l(2)-propenyyli)-4,9-estradien-3-oni; US-hakemusnumero 07/283,632; jul- : * 35 kaistu eurooppalainen patenttihakemus EP-A 04042831; ja muut antigestaatit, esimer- ;,; ; kiksi US-patentti 4,891,368,

Antiprogestiini voidaan antaa millä tahansa farmaseuttisella alalla käytetyllä, tunnetulla 5 114687 tavalla. Sopiva antiprogestiini voidaan esimerkiksi formuloida niin, että se voidaan antaa oraalisesti, transdermaaliseen absorboimiseen tarkoitetun iholaastarin kautta, kehoon siirrostetun inertin matriisin sisällä ja depottitilassa tai emättimensisäisesti matriisissa, joka vapauttaa antiprogestiinin hitaasti (tällaisia siirrosteita on esitetty US-5 patenteissa nro 4,957,119 ja 5,088,505 ja vastaavissa).

Antiprogestiinia ja sopivaa kantajaa sisältävät farmaseuttiset formulaatiot voivat olla kiinteitä annostusmuotoja, joihin kuuluvat tabletit, kapselit, tärkkelyskaketit, pelletit, pillerit, jauheet tai rakeet; jotka sisältävät vaikuttavan määrän antiprogestiinia tämän 10 keksinnön mukaisesti. Alalla on tunnettua, että aktiivinen ainesosa, antiprogestiini, voi olla tällaisissa formulaatioissa yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävien laimentimien, täyteaineiden, hajotusaineiden, sideaineiden, voiteluaineiden, pinta-aktiivisten aineiden, hydrofobisten vehikkeleiden, vesiliukoisten vehikkeleiden, emulgointiaineiden, puskureiden, kostuttavien aineiden, kostutusaineiden, liuentavien aineiden, säilöntä-15 aineiden ja vastaavien kanssa. Nämä antamistavat ja -menetelmät ovat alalla tunnettuja, ja alan harjoittaja voi etsiä neuvoa erilaisista farmakologisista julkaisuista. Konsultoitavia julkaisuja voivat olla esimerkiksi "Modern Pharmaceutics", Banker & Rhodes,

Marcel Dekker, Inc. 1979; "Goodman & Gilman's The Pharmaceutical Basis of Therapeutics", 6. painos, MacMillan Publishing Co., New York 1980.

20

Farmaseuttiset formulaatiot voivat olla kittimuodossa, joka sisältää vähintään noin 20 ja mieluummin noin 28 tablettia, jotka on tarkoitus ottaa kuukautiskierron peräkkäisinä . päivinä. Kun progesteronireseptorin antagonistin antamisen on tarkoitus olla jaksollis ta, monta, yleensä vähintään kolme, ei-vierekkäisistä tableteista sisältää progesteroni-25 reseptorin antagonistia, kun taas loput tableteista ovat plasebo-tabletteja. Kun antamisen on tarkoitus olla päivittäistä, tableteista yleensä vähintään noin 20 sisältää progesteronireseptorin antagonistia.

t : Progesteronireseptorin antagonistin ehkäisevästi vaikuttava määrä voidaan tätä keksin- 30 töä toteutettaessa määrittää käyttämällä alalla tunnettuja menetelmiä, esimerkiksi : * määrittämällä annos-vaste-käyrät sopivissa kädellisten eläinten malleissa ja ekstrapo- ; loimalla tulokset ihmisille, ekstrapoloimalla sopivista in vitro-systeemeistä tai määrittä- mällä tehokkuus kliinisissä kokeissa. Annostusalue on hedelmöitymisen ehkäisemään !.; tarvittavan pienimmän määrän ja suurimman määrän välillä, joka ei estä ovulaatiota » » 35 tai muutoin häiritse nisäkkään kuukautiskierron säännöllisyyttä. Vaikuttavan annoksen j määrittäminen on farmaseuttisella alalla rutiinitoimi. Alan harjoittaja ottaa huomioon : ’ i kyseisen isännän eri fysikaaliset parametrit, kuten painon, iän ja vastaavan.

e 114687

Samalla tavoin valmisteen annostusalue voidaan määrittää käyttämällä alalla tunnettuja menetelmiä, kuten määrittämällä annos-vaste-käyrä samankaltaisissa kädellisten eläinten malleissa tai sopivassa in vitro-koejätjestelmässä tai määrittämällä empiirisesti ' kliinisissä kokeissa.

5

Progesteronireseptorin antagonistin antaminen voi olla joko jaksollista, kuten viikoittaista tai jatkuvaa, so. päivittäistä. Jatkuva päivittäinen antaminen on suositeltavaa, ei vain vaikutuksen osoitetun tehokkuuden vuoksi, vaan pikemminkin mukautumisesta johtuen; ihmiset noudattavat todennäköisemmin hoito-ohjetta eivätkä unohda tai jätä 10 huomioimatta säännöllistä antamisaikataulua. RU 486-progesteronireseptorin antagonistin tapauksessa sopiva oraalinen annos ihmiselle on suuruusluokkaa noin 0,01 -1 mg annosta ja päivää kohti, mieluummin noin 0,05 - 0,5 mg annosta ja päivää kohti.

Tätä määrää voidaan pienentää tai suurentaa antamisohjeiden mukaisesti ja perustuen hoidettavan henkilön ominaisuuksiin. Muilla antiprogestiineilla annosmäärät mg:na 15 voivat olla erilaisia riippuen tehosta, antamistavasta ja vastaavista tekijöistä. Antamis-tiehen perustuvassa annostuksessa voi esiintyä vaihteluita, ja nämä muutokset voidaan määrittää alalla tunnetuilla tekniikoilla.

Teoriaan rajoittumatta inhiboidaan esillä olevaa keksintöä käytettäessä muna-solun 20 kypsyminen ja/tai hedelmöityminen. Tämä voi johtua munasolun epätäydellisestä tai riittämättömästä aktivoitumisesta, munasolun riittämättömästä yhdistymisestä kompetentin siittiön kanssa, riittämättömästä alkion jakaantumisesta, riittämättömästä ga-... meetin keskinäisvaikutuksesta, gameetin kuljetuksen muuttumisesta tai munasolun : ·. inkompetenssin tai sen alkion kiinnittymisen epäonnistumisesta tai yhden tai useam- 25 man edellä mainitun syyn yhdistelmästä. Riippumatta kyseisestä mekanismista nor- • t t ,; ; maalia hedelmöitymistä, (so. jossa munasolussa tapahtuu progressiivista alkiojakaan- ; ; ’ tumista niin paljon, että kiinnittyminen tapahtuu loppuun ja alkion jakaantuminen ta- s » » : > pahtuu edelleen) ei tapahdu. Lisäksi, vaikkakin tämän keksinnön mukaisen aktiivisen v : aineen eräs tunnusmerkki on, että se on progesteronireseptorin antagonisti (antipro- 30 gestiini), hedelmöitymisen ehkäisevän vaikutuksen syynä voi olla näiden aineiden jokin t ; 1 erilainen, yhteinen ominaisuus.

. \ ^ Esillä olevaa keksintöä on edelleen havainnollistettu seuraavassa annettujen yksittäis- ;,; ten esimerkkien avulla. Kuitenkin on huomattava, että nämä esimerkit ovat ainoastaan » » ’135 havainnollistavia, eikä niitä tulee pitää keksinnön laajuutta rajoittavana.

1 I

7 114687

ESIMERKKI I

Tämän tutkimuksen tavoitteita varten antiprogestiiniksi valittiin RU 486. Tätä annettiin kerran viikossa 12,5 mg annoksina naarasapinoille, joiden tiedetään olevan sopiva mal-5 li ihmistutkimukselle. Tämän tutkimuksen kohteena olivat estradiolin ja progesteronin seerumipitoisuudet, kuukautisten oikea-aikaisuus ja kesto, raskaus tai sen puuttuminen ajoitettujen sukupuoliyhteyksien jälkeen ja sen määrittäminen, ovatko irronneet munasolut hedelmöityneet lääkehoitosyklien aikana.

10 Tutkimus suoritettiin Eastern Virginia Medical Schoolissa, joka ylläpitää täysin akkreditoitua eläintutkimuslaitosta, joka noudattaa eläinten hoidosta ja käytöstä vastaavan komiteansa kautta katselmusstandardeja, jotka on esitetty National Institute of Health:in "Guide for Care and Use of Laboratory Animals", Public Health Servicesrn "Principles for the Care and Use of Laboratory Animals", ja USA:n maatalousminis-15 teriön Implementation Regulatins of the 1985 Amendments for the Animal Welfare Actissa.

Antiprogestiinia sisältävät tabletit annettiin oraalisesti, (mahaletkun kautta) kolmantena, kymmenentenä, seitsemäntenätoista ja kahdentenakymmenentenäneljäntenä päi-20 vänä kuukautisten alkamisen jälkeen. Kuukautisia ja/tai välivuotoa seurattiin päivittäisten vaginaalisivelyjen avulla.

. . Tutkimuksen ensimmäisessä vaiheessa tutkittiin yhdeksää normaalia aikuista naa- rasapinaa (Macaca fascicularis) ja kahta tutkittua siitosurosta seitsemän peräkkäisen

t ' I

‘. 25 kuukautiskierron aikana. Ensimmäisessä kierrossa kelpuutettiin protokollaan näennäi- ,; sen ovulaation pohjalta. Tätä seurasi kolme peräkkäistä kiertoa, joissa suoritettiin hoito > * antiprogestiinilla, ja tätä seurasi kolme hoidonjälkeistä palautumiskiertoa. Kaikkia naa- * * raita pidettiin häkissä hedelmällisen uroksen kanssa kierron päivinä 13 -18. Pariutumi- . : nen vahvistettiin emättimen siementulppien läsnäolon avulla. Koko kontrollialkujakson 30 ja hoitojakson kaksi läpi otettiin vuoroittaisina päivinä verta reidestä ja verta otettiin ( : ‘ muutoin syklin päivänä 23. Verestä mitattiin progesteroni (> 2 ng/ml) näennäisen ovu- , laation merkkinä.

Kuvio esittää estradiolin ja progesteronin seerumipitoisuuksien kontrollikuvioita kontrol-‘ ’ 35 lisyklissä alemmassa ruudussa ja ylemmässä ruudussa hoitosyklissä 2. Kierron hieman : : ; ajallisesta vääristymisestä huolimatta, so. siirtymisestä oikealle follikkelivaiheessa, voi- : : daan havaita, että nämä endokriiniset parametrit viittaavat siihen, että ovulaatiota ei tapahtunut. Munasarjasteroidien seerumipitoisuudet ovat oikealla välillä. Kuukautisten 8 114687 kestoaika oli kuitenkin lyhyempi, kun naaraat saivat kerran viikossa antiprogestiinia, kuin kontrollikierroissa, vastaavasti 1,7 + 0,9 verrattuna 4,9 + 1,0 päivään (p < 0,05). Välivuoto pysyi kaikissa kierroissa satunnaisena eikä ollut erottavana tekijänä.

5 Oleelliset havainnot on koottu seuraavaan taulukkoon 1: TAULUKKO 1

MUNASARJA/ KUUKAUTISKIERRON VASTE VIIKOTTAISELLE ALHAISELLE 10 ANTIPROGESTIINIANNOKSELLE HEPELMÖ1TYMISELLE ALTTIISSA TILANTEESSA

_______Päiviä (X + SEM)___

Kierto- Kuukau- Follik- Näen- Kelta- Kierron Kumula- ryhmä tiset keli- näinen rauhas- pituus tiivi- vaihf» ovulaa- vaihe set “ras _J___vaine tio_kaudet

Kontr. 9 Vi^O 13,6 ±1,3 9/9 15,2+3,.1 12^312,7 -_ kierto i ? ^°±0/< 17/4 * *f0 9/9 l4'9± l·7 33e5±V w kierto-2 ? l'7±0'9 l8/7 ± 5/5 9/9 16J.±Z3 %7±3,0 0/9

Hoito- 9 l,9±l,l 17,9 ± M 7/9 13,0 ±1,2 H5±4,9 <W

kierto-3 _ 1 kiertoni 9 V±0/7 13,0 ± 8/9 15,7 ± 2,7 30,1 ±4,2 2/9 " kierto-2* $ 13£±3·1 6/7 U,8 ± p 28,1±^3 519

Keitot' ‘ 3,6±°'8 ^ **15;1±3,0 29,4±4,4“W

' I

’ t : 15 1 Raskaudet detektoitiin mCG:lla virtsakittien avulla 2 Tutkimuksesta poistettiin yksi apina uroksen aiheut-, * tamien vammojen vuoksi , ’ ‘; 3 7 raskaudesta 6 johti normaaliaikaisiin synnytyksiin » · > 20 Taulukosta 1 näkyy, että keskeytyvän matala-annoksisen antiprogestiinijakson aikana ‘ ’ kuukautisten kestoaika oli lyhyempi (p < 0,05), follikkelivaiheet olivat pidempiä (p < i :': 0,05) ja että keltarauhasvaiheen pituus ei muuttunut (p > 0,05). Erityisen merkittäviä : i ovat kolme havaintoa. Ensiksikin munasarja/kuukautiskierrot jatkuivat lähes "nor maalilla" tavalla. Toiseksi, kerran viikossa tapahtuva antiprogestiinin antaminen esti 9 114687 luotettavasti hedelmöitymisen. Kolmanneksi, palautuminen hedelmällisyyden torjunnasta tapahtui nopeasti ("reversibiliteetti"); eräät raskaudet alkoivat ensimmäisessä hoidon jälkeisessä kierrossa ja toiset raskaudet toisessa ja kolmannessa kierrossa hoidon loppumisen jälkeen.

5

Tutkimuksen toisen vaiheen tarkoituksena oli selvittää antiprogestiinin vaikutuksen ensisijainen ehkäisymekanismi. Toisessa vaiheessa sama hoito annettiin 14 naaras-apinalle ja noudatettiin yhden kierron ajan samaa yhdyntäprotokollaa kuin mitä on edellä kuvattu paitsi, että kuukautiskierron päivänä 23 tehtiin lapartomia, jotta lisään-10 tymiskanava voitaisiin pestä takautuvasti ja voitaisiin mahdollisesti saada talteen munasoluja ja/tai alkioita. Lisäksi tänä päivänä jokaisesta apinasta otettiin endometriumis-ta kiilapala ja tämä arvioitiin histologisesti, jotta voitaisiin arvioida erittävän kudoksen kypsyyden oikeellisuus. Tulokset on koottu taulukkoon 2.

15 Taulukko 2

Saadut mu- Jakautuneet "Normaalit" Rappeutuneet Myöhemmät nasolut yh- ja/tai hedel- munasolut munasolut raskaudet1 teensä möityneet mu- (ehjät) (tumma syto- __nasolut___plasma)__ 1 11 Γ o I 7|4 0 1 Yhdellä apinalla oli anovulatoorinen kuukautiskierto.

Kohdun limakalvon paksuuden havaittiin pienentyneen selvästi (noin 60 %) verrattuna 20 saman ajankohdan kontrolleihin keltarauhasvaiheen keskellä. 14 apinasta 12 apinan endometrium oli erittäin varhaisessa eritysvaiheessa, kun biopsiat otettiin päivänä 23, so. ne eivät olleet synkronissa havaittujen estradiolin ja progesteronin seerumiprofiilien « : kanssa, vaikkakin RU 486-hoito viivästytti keltarauhasvaiheen alkamisen kiertopäivään : 17 tai 18.

25 ,, ' Talteensaatuja hedelmöitymättömiä munasoluja oli yksitoista, joista neljä oli rappeutu- ; : nutta. Mitään jakaantuvia esialkioita ei havaittu eikä myöhemmin tapahtunut lainkaan , ' ( raskauksia. Huomionarvoista on, että munasoluissa ei ollut niiden ympärille kettoon ;, I sitoutunutta spermaa. 14 apinalla 13:sta oli näennäisesti munasarja/kuukautiskierrot 30 RU 486:n kerran viikossa annettujen oraalisten, 12,5 mg suuruisten annosten jälkeen.

» : ; Arvioinnin perustana oli tunnistettavan corpus luteum'in läsnäolo laparotomiassa kier- : ! topäivänä 23.

10 1 1 4687

Edellä olevien tutkimusten havainnot osoittavat, että käytettäessä hoitoa, jossa anti-progestiinia annetaan alhainen annos, munasarja/kuukautiskierrot voidaan säilyttää, samalla kun samanaikaisesti saadaan aikaan ehkäisyvaikutus primäärisen mekanismin kautta, jossa ehkäistään normaali munasolun hedelmöityminen. Vaikkakin antiproges-5 tiinihoidon kiertojen follikkelivaiheet olivat hieman pidentyneet, kuukautisten säännöllisyys ei estynyt. Kumulatiivinen hedelmöitymismäärä hoidon jälkeisissä kierroissa on vertailukelpoinen milloinkaan hoitamattomiin naaraisiin, mikä on osoitus nopeasta ja täydellisestä reversibiliteetistä.

10 ESIMERKIT 2 - 5

Esimerkissä 1 kuvattu tutkimus toistetaan paitsi, että RU 486 korvataan seuraavilla antiprogestiineilla:

Esimerkki__Antiproqestiini_ 2 onapristoni 3 lilopristoni 4 1 lp-(4-asetyylifenyyli)-17p-hydroksi-17a-(l-propinyyli)-4,9- estradien-3-oni 5 lip-(4-asetyylifenyyli)-17p-hydroksi-17a-(3-hydroksi-l(2)- __propenyyli)-4,9-estradien-3-oni_ 15

Huomattakoon, että luotettava ehkäisymenetelmä, joka voi säilyttää endogeenisen \ munasarjasteroidin erittymisen fysiologisen alueen sisällä, on houkutteleva vaihtoehto , *. olemassa oleville eksogeenisten hormonien formulaatioille, jotka estävät munasolun ,'. irtoamisen ja jotka keinotekoisesti säätelevät kuukautisia. Tämä on saavutettavissa, 20 kuten edellä olevat tulokset, joissa käytettiin RU 486:a malliantiprogestiinina kerran viikossa alhaisena annoksena, osoittavat. Huomattakoon, että edellä esimerkissä 1 kuvatussa tutkimuksessa ei yritetty määrittää antiprogestiinin alhaisinta vaikuttavaa annosta.

» * « r · | * ·

Claims (6)

11 1 1 4687

1. Kitti, joka sisältää vähintään 20 tablettia, joissa progesteronireseptorin antagonistin antamisen on tarkoitus olla jaksollista, tunnettu siitä, että monta, yleensä vähintään 5 kolme ei-vierekkäisistä tableteista sisältää progesteronireseptorin antagonistia hedelmöitymisen ehkäisevän määrän, joka määrä ei riitä estämään ovulaatiota eikä häiritsemään nisäkkään munasarja/kuukautiskierron säännöllisyyttä, kun taas loput tableteista ovat plasebo-tabletteja.

2. Kitti, joka sisältää tabletteja päivittäistä antamista varten kuukautiskierron aikana tunnettu siitä, että tableteista vähintään 20 sisältää progesteronireseptorin antagonistia hedelmöitymisen ehkäisevän määrän, joka määrä ei riitä estämään ovulaatiota eikä häiritsemään nisäkkään munasaija/kuukautiskierron säännöllisyyttä.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen kitti, tunnettu siitä, että määrä on 0,01 -1 mg.

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen kitti, tunnettu siitä, että määrä on 0,05 - 0,5 mg.

5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen kitti, tunnettu siitä, että progesteronireseptorin 20 antagonisti on mifepristoni. t I « | Γ ,.

6. Patenttivaatimuksen 2 mukainen kitti, tunnettu siitä, että se sisältää 28 tablettia, : 1 : jolloin näistä tableteista vähintään 20 sisältää progesteronireseptorin antagonistia : ’ : hedelmöitymisen ehkäisevän määrän. : 25 • · : · * · ‘ 1 · • » · • · · • · · • I t t · · I | « » 1 I • · ’2 1 1 4687