FI112079B - 2-(2-amino-4-okso-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyridiini- ja pyrimido[5,4-b][1,4]tiatsin-6-yyli)etyyli-4-metyylitien-2-yyli-L-glutamiinihappojohdannaisia - Google Patents

2-(2-amino-4-okso-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyridiini- ja pyrimido[5,4-b][1,4]tiatsin-6-yyli)etyyli-4-metyylitien-2-yyli-L-glutamiinihappojohdannaisia Download PDF

Info

Publication number
FI112079B
FI112079B FI970317A FI970317A FI112079B FI 112079 B FI112079 B FI 112079B FI 970317 A FI970317 A FI 970317A FI 970317 A FI970317 A FI 970317A FI 112079 B FI112079 B FI 112079B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
compound
ethyl
oxo
formula
amino
Prior art date
Application number
FI970317A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI970317A0 (fi
FI970317A7 (fi
Inventor
Michael D Varney
William H Romines
Original Assignee
Agouron Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Agouron Pharma filed Critical Agouron Pharma
Publication of FI970317A0 publication Critical patent/FI970317A0/fi
Publication of FI970317A7 publication Critical patent/FI970317A7/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI112079B publication Critical patent/FI112079B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D333/38—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Electrochromic Elements, Electrophoresis, Or Variable Reflection Or Absorption Elements (AREA)

Description

1121)79 2- (2 -AMINO-4 -OKSO-TETRAHYDROPYRIDO [2,3-d] -PYRIDIINI-ja PYRIMIDO[5,4-b] [1,4]TIATSIN-6-YYLI)ETYYLI-4-
METYYLITIEN-2 -YYLI-L-GLUTAMIINIHAPPOJOHDANNAISIA
Keksintö koskee alla määriteltyjä kaavan I 5 yhdisteitä, jotka inhiboivat entsyymiä glysinamidiri-bonukleotidi formyylitransferääsi (GARFT) . Keksintö koskee myös farmaseuttisia seoksia, jotka sisältävät kaavan I yhdisteitä, niiden käyttöä GARFT-inhibointiin ja niiden käyttöä korkeampien eliöiden tai mikro-10 organismien, kuten bakteerien, hiivan ja sienten, solujen kasvun ja lisääntymisen estämiseen. Keksintö koskee myös näiden yhdisteiden valmistusta ja niiden valmistuksessa käytettyjä välituotteita.
GARFT on folaatti-riippuvainen entsyymi pu-15 riinin biosynteesipolun alussa. Tämä polku on kriittinen solun jakautumiselle ja lisääntymiselle. Tämän polun sulkemisella tiedetään olevan antiproliferatiivi-nen vaikutus, erityisesti kasvaimia ehkäisevä vaikutus. Siten lukuisia folaattianalogeja on syntetisoitu 20 ja tutkittu niiden kyvyn vuoksi estää GARFT. Prototyypin asteella olevan ominaisen lujasidoksisen GARFT-, ’· inhibiitin, 5,10-dideatsatetrahydrofoolihapon (DDATHF) , on ilmoitettu osoittavan kasvaimia ehkäise-vää vaikusta. Ks. F.M. Muggia, "Folaatti tuottaa in-:***; 25 hibiitin puriinisynteesin alkamisen estämiseen", New :·. _ Drugs, Concepts and Results in Cancer Chemotherapy,
Kluwer Academic Publishers, Boston (1992) , 65-87.
Suuri joukko antiproliferatiivisia aineita . . sisältää antimetaboliittiyhdisteitä. Eräs erityinen ’;[· 30 antifolaatteina tai antifooleina tunnettu antimetabo- • · ···1 liittien alaryhmä ovat vitamiinifoolihapon antagonis- :Y: tit. Tyypillisesti antifolaatit muistuttavat läheises- ti foolihapon rakennetta ja sisältävät tunnusomaisen foolihapon p-bentsoyyliglutamaattiosuuden. Foolihapon : ’’ 35 glutamaattiosuus ottaa negatiivisen kaksoisvarauksen \ ·: fysiologisella pH-alueella ja sen vuoksi tällä yhdis teellä ja sen analogeilla on aktiivisen energian käyt- 2 1121) 79 tämä siirtojärjestelmä solukalvon ylittämiseksi ja metabolisen vaikutuksen kohdistamiseksi. Useiden tutkijoiden tutkimustyö on osoittanut, että foolihappo sekä pelkistyneissä että hapettuneissa muodoissaan ja sen 5 analogit kuljetetaan aktiivisesti soluihin ainakin kahdella eri siirtomekanismilla. Näihin siirtoproteii-neihin viitataan pelkistettynä folaattisiirtoprote-iinina, jolla on preferenssi pelkistettyjä folaatteja kohtaan, mutta joka siirtää useita foolihappojohdan-10 naisia. Metotreksaatti (MTX) siirtyy pelkistetyn fo-laattisiirtojärjestelmän kautta. Muihin folaattisiir-toproteiineihin viitataan proteiinia tai mFBPria sitovana kalvoiolaattina, jolla on preferenssi foolihappoa kohtaan. Ks. A.C. Antony, "Folaattireseptoreiden bio-15 loginen kemia", Blood, The Journal of the American Society of Hematology, osa 79 (1992), 2807-2820.
Kliinisesti tähän saakka käytetyt syöpää ehkäisevät glutamaattia sisältävät antifolaatit, mukaanlukien MTX, tulevat soluihin pelkistyneen folaatti-20 siirtojärjestelmän kautta yhdellä huomattavalla poikkeuksella. 5,10-Dideatsa-tetrahydrofoolihappo (DDATHF) on kasvaimia ehkäisevä GARFT-inhibiitti, joka on kaik-kialla kliinisen tutkimuksen kohteena. DDATHF: n on osoitettu siirtyvän soluihin sekä pelkistyneen folaat-25 tisiirtojärjestelmän että mFBP:n kautta. Ks. G. Piz-zorno et ai., "5,10-Dideatsa-tetrahydrofoolihapon (DDATHF) siirtyminen CCRF-CEM ja MA104 solusukupolvis-.· * sa", The Journal of Biological Chemistry, osa 268 (1993), 1017-1023.
• · 30 On ehdotettu, että ei toivottu myrkyllisyys, ”*: erityisesti folaattiköyhissä nisäkkäissä, johtuu siitä seikasta, että DDATHF :11a, tunnetun tekniikan GARFT-inhibiitillä, on korkea affiniteetti mFBP:n suhteen, ’·;·* joka on säännöstelemätön folaattivajauksen aikoina. On '·.. 35 lisäksi ehdotettu, että foolihappo ja muut molekyylit, jotka estävät mFBP:n siirtämästä muita GARFT-inhibiittejä, voivat laimentaa näiden inhibiittien 3 112,7v myrkyllisyyttä. Ks. esim. T. Alati et ai., "Myrkyllisyyden inhibointimekanismi(e)n arviointi Lometrexo-lin (DDATHX) kasvaimia ehkäisevän vaikutuksen lisäksi foolihapon avulla", Proceedings of the American Asso-5 ciation for Cancer Research, osa 33 (1992), Abstract 2432, 407; L.L. Habeck et ai., "Uusi ryhmä monogluta-maattiantifolaatteja omaa ihmisen glysinamidiribonuk-leotidin formyylitransferaasin lujasidoksisen inhi-boinnin ja voimakkaan vaikutuksen kiinteitä kasvaimia 10 vastaan", Cancer Research, osa 54 (1994), 1021-1026; ja Grindley et al:n patentti U.S. 5,217,974.
Julkaisussa EP 343801 on esitetty N-(5, 6, 7, 8-tetrahydropyrido(2, 3-D)pyrimidin-6-yyli- alkanoyyli)-glutaminihappojohdannaisia, joilla on kas-15 vainten vastaisia vaikutuksia. Edelleen kasvainten vastaisia vaikutuksia omaavia L- glutaminihappojohdannaisia on kuvattu EP 334636, EP 438261, WO 85/02844 ja WO 86/05181 julkaisuissa.
Täten keksinnön tarkoitus on tuottaa yhdis-20 teitä, jotka ovat voimakkaita, vähemmän myrkyllisiä GARFT-inhibiittejä. Tämä tarkoitus on saavutettu alla olevilla kaavan I antiproliferatiivisilla aineilla, :··· jotka ovat voimakkaita GARFT-inhibiittejä, mutta joil- “.·. la ei lujaa sidosta mFBPrhen. Näiden yhdisteiden si- ,···, 25 toutumisvakiot mFBPrhen ovat edullisesti vähintään kertaluokkaa 1000 pienemmät kuin DDATHFrlla kuitenkin yhä säilyttäen GARFT-inhiboinnin edulliset ominaisuu-' ’ det ja pelkistyneen folaattisiirron kasvaimia ehkäise vän vaikutuksen.
30 Seuraavassa kuvataan yksityiskohtaisesti kek- sintöä ja sen edullisia suoritusesimerkkejä.
V. Keksintö koskee erityisesti kaavan I yhdis- -··, teitä: ; '·· 35 112079 4 ° xYwr 5 co*'
aXJ
h2n^ jossa 10 A on rikki tai CH2; Z on CH2; X on CH3; ja
Ri ja R2 ovat itsenäisesti vety.
Keksintö koskee myös kaavan I yhdisteen far-15 maseuttisesti hyväksyttäviä suoloja.
Vaikka kaavan I yhdisteet on esitetty 4-okso-muodossa ja niihin viitataan sellaisina tämän kuvauksen edetessä, oksoryhmä on tautomeerisessa tasapainossa vastaavan 4-hydroksiryhmän kanssa. Sen vuoksi ym-20 märretään, että kaavan I yhdisteet sisältävät rakenteellisesti kuvatut 4-okso- ja tautomeeriset 4-hydroksimuodot. Täten keksintö koskee myös kaavan I kuvaamien yhdisteiden 4-hydroksitautomeerien far-. . maseuttisesti hyväksyttäviä suoloja.
25 Kaavan I yhdisteet ovat diastereomeeristen ;··' seosten muodossa. Ymmärretään, että ellei toisin il maista, yhdisteet, joissa on päällekkäisiä keskuksia, .· * ovat diastereomeerien seosten muodossa.
A on edullisesti rikki tai CH2.
30 Z on CH2.
X on metyyli.
Ri ja R2 ovat edullisesti itsenäisesti vety.
; ; Erityisen edullisissa suoritusmuodoissa A on rikki tai CH2, Z on CH2 ja X metyyli.
35 Kaavan I yhdisteiden edullisiin esimerkkeihin j kuuluvat: N-(5-[2-(2-amino-4(3H)-okso-5,6,7,8- 112079 5 tetrahydropyrido[2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)etyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-L-glutamiinihappo; ja N-(5-[2-(2-amino-4-okso-4,6,7,8-tetrahydro-3H-pyrimido[5,4-6][1,4]tiatsiini-6-yyli)etyyli]-4-metyylitieno-2-5 yyli)-L-glutamiinihappo.
Kaavan I yhdisteet ovat käyttökelpoisia GARFT-inhibiitteinä. Kaavan I yhdisteet, joissa Ri ja R2 ovat kumpikin vety, ovat erikoisen aktiivisia kasvaimia estävinä tai antiproliferatiivisina aineina.
10 Keksinnön farmaseuttisesti hyväksyttäviin suoloihin kuuluvat esim. keksinnön glutamiinihappoyh-disteiden alkalimetalli-, maa-alkalimetalli-, muut ei-myrkylliset metalli- ja ammonium- ja substituoidut am-moniumsuolat. Esimerkkisuoloihin kuuluvat vapaiden 15 happoyhdisteiden natrium-, kalium-, litium-, kalsium-, magnesium-, pyridiini- ja substituoidut pyridiinisuo-lat.
Kaavan I yhdisteitä voidaan valmistaa alla kuvatulla tavalla.
20 Kaavan I, jossa Z on CH2, yhdisteiden valmis tamiseksi käyttökelpoinen lähtöaine on kaavan II yhdiste: ? ” xy(
R
• · « · jossa R on halogeeni, edullisesti bromi; X on kuten 30 edellä määriteltiin; ja B on OH tai aminohappo, edullisesti amino-osan kautta amidin muodostamiseksi lii-tetty dietyyliglutamaatti, tai Ci-C6alkoholi, edulli-sesti alkoholi-osan kautta esterin muodostamiseksi .·.* liitetty metyyli- tai etyylialkoholi.
35 Kaavan II yhdisteen annetaan reagoida kaavan *. : III yhdisteen kanssa:
< I
112079 6
H
5 Y (HI) jossa Y on kaavan IV CH2OH tai suojattu pyridopyrimi-diini: O h 10
O
I (IV) 15 ^
Synteesi voi sitten noudattaa toista kahdesta reitistä riippuen onko Y suojattu pyridopyrimidiini vai CH2OH.
20 Y:n ollessa kaavan IV suojattu pyridopyrimi diini tai CH2OH kaavojen II ja III yhdisteiden liitos-reaktio suoritetaan edullisesti siirtymämetallikata-.lyytin, edullisesti palladiumin tai nikkelin, läsnäol-·,·. lessa, emäksen, edullisesti ei-nukleofiilisen apuemäk- ..I 25 sen, läsnäollessa liuottimessa, johon vähintään yksi reaktioon osallistuvista aineista ainakin osittain ’’ liukenee. Edullisia liuottimia kaavojen II ja III yh- ’ ’ disteiden liitosreaktiota varten ovat dietyyliamiini, asetonitriili, dimetyyliformamidi, dimetyyliasetamidi · 30 ja trietyyliamiini. Emäksinen väliaine liitosreaktiota varten järjestetään edullisesti ei-nukleofiilisen apu-emäksen avulla, joka on emäs, joka kykenee neutraloi-.maan liitosreaktion kehittämän vetyhalidin. Emäs on edullisesti di- tai trialkyyliamiini, kuten dietyyli-35 amiini, trietyyliamiini tai di- ·,* isopropyylietyyliamiini. Mikäli tarkoituksenmukaista emäksistä liuotinta voidaan käyttää erillisten liuot- 7 112079 timen ja emäksen asemesta.
Y:n ollessa pyridopyrimidiini kaavojen II ja III yhdisteiden liitosreaktio tuottaa kaavan V yhdisteen: H \ c°2ri (v) 10 jossa X, Ri ja R2 ovat kuten edellä määriteltiin.
Kaavan V yhdisteen annetaan reagoida vetykaa-15 sun kanssa, edullisesti 45-1000 psi:n paineessa, sopivan siirtymämetallikatalyytin, edullisesti platina-, palladium- tai rodiummetallin, läsnäollessa hiili- tai muulla sopivalla kantoaineella sopivassa liuottimessa, edullisesti etikkahapossa tai trifluorietikkahapossa, 20 kaavan VI yhdisteen saamiseksi: I XYAyBY^COlR! ;vj f \ COjR, (VI)
^ H
jossa X, Ri ja R2 ovat kuten edellä määriteltiin.
30 Lopuksi kaavan VI yhdiste hydrolysoidaan kaa- van I vapaan glutamiinihapon muodostamiseksi (Ri ja R2 \ ovat kumpikin H) .
Y:n ollessa CH2OH kaavojen II ja III yhdis- teiden reaktio tuottaa kaavan VII yhdisteen: 35 112079 8 TVyb 5 0 (VII) HO--/ jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
10 Kaavan VII yhdisteen annetaan reagoida vety- kaasun kanssa sopivan metallikatalyytin, edullisesti palladiumin tai platinan, läsnäollessa kaavan VIII yhdisteen saamiseksi: 20 HO--^ jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
. Kaavan VIII yhdisteen annetaan reagoida ha- > · ,, . pettävän aineen, edullisesti tetrapropyyliammoniumper- 25 rutenaatin, kanssa kaavan IX yhdisteen saamiseksi: v-i 30 J (IX)
HC
Il 0 35 jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
·.: Kaavan IX yhdisteen annetaan reagoida mety- leenisiirtoreagenssin, edullisesti metyleenitrifenyy- 112079 9 lifosforaanin, kanssa sopivassa liuottimessa, edullisesti tetrahydrofuraanissa, kaavan X yhdisteen saamiseksi: ! b O (X) 10 jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
Kaavan X yhdisteen annetaan reagoida dihydro-ksylointiaineen, edullisesti osmiumtetroksidin, kanssa sopivan hapettavan aineen, edullisesti N-metyylimorfoliini-N-oksidin, läsnäollessa kaavan XI 15 yhdisteen saamiseksi:
VwB
20 ^__' o («)
HO OH
jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
s » 25 Kaavan XI yhdiste muunnetaan kaavan I yhdis- teeksi käyttäen jotakin alla kuvatuista neljästä prosessista.
: Ensimmäisessä konversioprosessissa kaavan XI
yhdisteen annetaan reagoida sulfonylointiaineen, edul-30 lisesti p-tolueenisulfonyylikloridin tai metaanisulfo-nyylikloridin, kanssa ei-nukleofiilisen emäksen, edullisesti trietyyliamiinin tai di-isopropyyli-etyyliamiinin, läsnäollessa mono-sulf onyloidun väli-tuoteyhdisteen saamiseksi. Tämän välituotteen annetaan 35 sitten reagoida vahvan emäksen, edullisesti natrium-. | hydridin, kanssa kaavan XII yhdisteen saamiseksi: 112079 10 5 v7 • 0 jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
Kaavan XII epoksin annetaan reagoida typpeä sisältävän nukleofiilin, edullisesti natriumatsidin, 10 kanssa laimean Lewis-happokatalyytin, edullisesti li-tiumperkloraatin tai magnesiumperkloraatin, läsnäollessa alkoholiatsidivälituotteen saamiseksi. Alkoho-liatsidin pelkistäminen edullisesti vetykaasulla me-tallikatalyytin läsnäollessa ja sen jälkeinen suojaus 15 sopivalla typpi-suojaryhmällä, edullisesti t-butoksi-karbonyylillä, bentsokarbonyylillä tai bentsyylillä, tuottaa kaavan XIII yhdisteen: 20 ^ 5 0 (XIII)
R5R4N OH
i 1 » t ,, . jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin ja R4 ja R5 » · ’ 25 ovat kumpikin itsenäisesti vety tai sopiva typpi- 1 * ' ·*’ suojaryhmä. Edullisia suojaryhmiä ovat t-butoksi- karbonyyli, bentsyyli-oksokarbonyyli ja bentsyyli.
: ·* Kaavan XIII yhdisteen annetaan reagoida asy- lointi- tai sulfonylointiaineen, edullisesti metaani-30 sulfonyylikloridin tai p-tolueenisulf onyylikloridin, kanssa ei-nukleofiilisen emäksen, edullisesti trietyy-*. liamiinin tai di-isopropyylietyyliamiinin, läsnäolles- sa sopivassa liuottimessa, johon vähintään yksi reaktioon osallistuvista aineista ainakin osittain liuke-35 nee, aktivoidun hydroksiryhmän saamiseksi. Aktivoitu . : hydroksiryhmä korvataan sopivalla nukleofiililla, edullisesti tiohapon suolalla, edullisemmin kaliumtio- 112079 11 asetaatilla, kaavan XIV yhdisteen saamiseksi:
R
^jj \_/ (Xiv) R5R4N aa c 10 jossa A, X, B ja R4 ja R5 ovat kuten edellä määriteltiin ja Ac on asyyliryhmä. Ac on edullisesti asetyyli.
Vaihtoehtoisesti kaavan XIII yhdiste voidaan muuntaa kaavan XIV yhdisteeksi yhdessä kemiallisessa prosessissa käyttäen trifenyylifosfiinia, dietyyli-15 tai dimetyyliatsadikarboksylaattia ja happonukleofii-lia, edullisesti tioetikkahappoa, sopivassa liuotti-messa.
Kaavan XIV yhdistettä käsitellään nukleofii-lisella emäksellä, edullisesti kaliumkarbonaatilla, 20 natriumkarbonaatilla, natriumhydroksidilla tai kalium-hydroksidilla, alkoholiliuottimessa, edullisesti me-\ tanolissa, etanolissa tai isopropanolissa, alkylointi- aineen, edullisesti dimetyyli- tai dietyylikloorima-lonaatin, läsnäollessa kaavan XV yhdisteen saamiseksi: 25
S /XK
30 R5R4N A
r€o2c—(xv) C02Re » · ·*·.. 35 jossa A, X, B ja R4 ja R5 ovat kuten edellä määritel- tiin ja kumpikin R6 on itsenäisesti vety tai osuus, • « joka muodostaa sidotun C02-ryhmän kanssa helposti hyd- 112079 12 rolysoituvan esteriryhmän. R6 on edullisesti Ci-C6alkyyli, hydroksialkyyli, alkyyliaryyli tai aralkyy- li. Edullisemmin R6 on Ci-C2alkyyli.
Kaavan XV yhdistettä käsitellään joko R4:n 5 tai R5:n tai molempien suojaryhmien poistamiseen sopivissa olosuhteissa kaavan XVI yhdisteen saamiseksi: 10 T (XVI) 15 jossa A, X, B ja R6 ovat kuten edellä määriteltiin. Käytettäessä t-butoksikarbonyyliä suojaryhmänä sopivat olosuhteet ovat käsittely trifluorietikkahapolla, sen jälkeen neutralointi.
20 Kaavan XVI yhdisteen annetaan reagoida alky- lointiaineen, edullisesti trimetyyli- tai trietyyliok-_ soniumtetraf luoriboraat in, kanssa sopivassa liuotti- messa, edullisesti dikloorimetaanissa, laktiimieette- • · .. . rivälituotteen muodostamiseksi. Laktiimieetteriväli- • · 25 tuotteen annetaan reagoida guanidiinin kanssa alkoho- • · ,;·*’ liliuottimessa, edullisesti metanolissa, etanolissa ” tai isopropanolissa, kaavan XVII yhdisteen muodostami- · seksi:
S! “ ° xWvB
Λ \ (XVII)
• I
!*·.. 35 • · jossa A, X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
112079 13
Vaihtoehtoisesti kaavan XVI yhdiste voidaan muuntaa kaavan XVII yhdisteeksi antamalla kaavan XVI yhdisteen reagoida tiolointiaineen, edullisesti P2S5:n tai 2,4-bis(4-metoksifenyyli)-l,3-ditia-2,4-difos- 5 fetaani-2-4-disulfidin, kanssa tiolaktaamivälituotteen muodostamiseksi. Tämä välituote alkyloidaan sitten al-kylointiaineella, edullisesti metyylijodidilla tai trimetyyli- tai trietyylioksonium-tetrafluoriboraa- tilla, ja sitten guanidiinilla alkohollliuottimessa, 10 edullisesti metanolissa, etanolissa tai isopropanolis-sa, kaavan XVII yhdisteen saamiseksi.
B:n ollessa alkoholin tavoin vaikuttava s.o. missä B:hen kiinnittynyt ryhmä muodostaa esteri-ryhmän - kaavan XVII yhdiste hydrolysoidaan emäksisis- 15 sä olosuhteissa kaavan XVIII yhdisteen muodostamiseksi : i λ xTV-('" 20 0 (XVIII) » * * » .. . jossa A ja X ovat kuten edellä määriteltiin.
25 Kaavan XVIII yhdiste on peptidi, joka on lii- tetty alan asiantuntijoiden tuntemalla tavalla gluta-: " miinihapon diesterihydrokloridiin kaavan XIX diesterin V : muodostamiseksi: 30 O H rno I |—χγ/^Νχ/°°2Α2 V; NY^Snv/^S 0 C02ri jL Jk J (XIX)
:---53 H
jossa A, X, Rx ja R2 ovat kuten edellä määriteltiin 112079 14 sillä poikkeuksella, ettei Ri eikä R2 ole vety.
Lopuksi, mikäli halutaan vapaa glutamaatti-happomuoto, kaavan XIX yhdiste hydrolysoidaan kaavan I yhdisteen muodostamiseksi.
5 Toisessa konversioprosessissa valmistetaan kaavan XIV yhdiste, kuten edellä on kuvattu. Tätä yhdistettä käsitellään hapolla, edullisesti trif-luorietikka-, kloorivety- tai p- tolueenisulfonihapolla, kaikkien suojaryhmien (R4, R5 10 ja Ac) poistamiseksi kaavan XX yhdisteen saamiseksi: - H2N AH (XX) jossa A, X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
20 Kaavan XX yhdisteen annetaan reagoida heikos
ti emäksisissä puskuriolosuhteissa, edullisesti käyt-täen pH 7 fosfaattipuskuria, sopivassa liuottimessa, edullisesti etanolissa tai metanolissa, yhdisteen .. . kanssa, jolla on kaava XXI
25
O
*;·. ,, Br
HN
(XXI) '·! 30 .··. h2nt ^ci kaavan XVII yhdisteen saamiseksi. Toisen prosessin
' loppuosa, joka etenee kaavan XVII yhdisteestä kaavan I
35 yhdisteeseen, suoritetaan edellä kuvattua vastaavalla : tavalla.
Kolmannessa konversioprosessissa kaavan XI
112079 15 yhdisteen annetaan reagoida sopivan hydroksyylisuoja-ryhmän, edullisesti trialkyylisilyyliryhmän, edullisemmin t-butyylidimetyylisilyylikloridin, kanssa laimean ei-nukleofiilisen emäksen, edullisesti trietyyli-5 amiinin, läsnäollessa kaavan XXII yhdisteen saamiseksi :
B
/ \ ° (xxii) R70 oh 15 jossa X ja B ovat kuten edellä määriteltiin ja R7 on sopiva hydroksyylisuojaryhmä, edullisesti trialkyy-lisilyyliryhmä.
Kaavan XXII yhdisteen annetaan sitten reagoida asylointi- tai sulfonylointiaineen, edullisesti me-20 taanisulfonyylikloridin tai p-tolueenisulfonyyli- kloridin, kanssa ei-nukleofiilisen emäksen, edullisesti trietyyliamiinin tai di-isopropyylietyyliamiinin, <>i; läsnäollessa liuottimessa, johon vähintään yksi reak- ... tiivisista aineista ainakin osittain liukenee, akti- 25 voidun hydroksiryhmän saamiseksi. Aktivoitu hydroksi- » · ;··' ryhmä korvataan sopivalla nukleofiililla, edullisesti ; '* tiohapon suolalla, edullisemmin kaliumtioasetaatilla, '.· * kaavan XXIII yhdisteen saamiseksi: 30 VV./ V: ^ \ (XXIII) R7O AAc : ·.. 35 ;\· jossa A, X, B, R7 ja Ac ovat kuten edellä määritel tiin.
112079 16
Vaihtoehtoisesti kaavan XXII yhdiste voidaan muuntaa kaavan XXIII yhdisteeksi yhdessä kemiallisessa työvaiheessa käyttäen trifenyylifosfiinia tai dietyy-li- tai dimetyyliatsadikarboksylaattia ja happonukle-5 ofiilia, edullisesti tioetikkahappoa, sopivassa liuot-timessa.
Kaavan XXIII yhdisteen annetaan reagoida nuk-leofiilisen emäksen tai laimean hapon kanssa asyyli-ryhmän poistamiseksi selektiivisesti osalla A. Saadun 10 välituotteeen annetaan reagoida kaavan XXIV yhdisteen kanssa: ^ Br 15 hn JL (XXIV) H2NT . NT ^NH2 20 ei-nukleofiilisen emäksen, edullisesti trietyyliamii-nin, di-isopropyylietyyliamiinin tai kaliumkarbonaa-\tin, läsnäollessa kaavan XXV yhdisteen saamiseksi: • ·
* 25 V
o j XyyB
I (XXV) 30 ^0R7 » * jossa A, X, B ja R7 ovat kuten edellä määriteltiin.
*...· Suojaryhmä R7 kaavan XXV yhdisteessä poiste-
[’•it 35 taan käsittelemällä sopivalla reagenssilla kaavan XXVI
,·. : yhdisteen saamiseksi: 17 112079 jl^Ock 5 H" 7T 0 (XXVI)
A5** A A
H2N^ ^nh2 \oh jossa A, X ja B ovat kuten edellä määriteltiin. R7:n 10 ollessa trialkyylisilyyli reagenssi on edullisesti fluorisuola, edullisemmin kaliumfluoridi, tetrabutyy-liammoniumfluoridi tai keesiumfluoridi.
Kaavan XXVI yhdiste muodostetaan sykliseksi kaavan XVII yhdisteen saamiseksi aktivoimalla hydrok- 15 siryhmä aktivointiaineella, edullisesti metaanisulfo- nyylikloridilla, sen jälkeen käsittelemällä emäksellä.
Vaihtoehtoisesti pyrimidinonin typpi suojataan ensin sopivalla suojaryhmällä, edullisesti t- butoksikarbonyylillä, sen jälkeen muodostetaan sykli- 20 seksi ja poistetaan myöhemmin suojaryhmä happamissa
olosuhteissa. Prosessin loppuosa etenee kaavan XVII
·. yhdisteestä kaavan I yhdisteeksi edellä kuvattua tapaa • · • vastaavasti.
• · · · » · .. . Neljännessä ja edullisessa konversioproses- • · 25 sissa kaavan XXVI alkoholiyhdiste valmistetaan, kuten *;··* edellä on kuvattu. Tämän alkoholin annetaan reagoida : " sopivan hapettavan aineen kanssa aldehydifunktionaali- v * suuden tuottamiseksi, joka muodostaa syklisen kaavan XXVII yhdisteen: Ϊ “ Xy>1! I (XXVII) » · · I t 18 1 12079 jossa A, X ja B ovat kuten edellä määriteltiin.
Kaavan XXVII yhdisteen annetaan reagoida pelkistävän aineen, edullisesti natriumsyaaniboorihydri-din, kanssa Lewis-hapon, edullisesti booritrifluo-5 rieteraatin, läsnäollessa edellä määritellyn kaavan XVII yhdisteen saamiseksi. Prosessin loppuosa etenee kaavan XVII yhdisteestä kaavan I yhdisteeksi edellä kuvattua tapaa vastaavasti.
Kaavan I yhdisteen valmistuksen yksityiskoh-10 täinen esimerkki annetaan seuraavassa.
ESIMERKKI 1 N-(5-[2-(2-amino-4(3H)-okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidiini-6-yyli)etyyli]-4-15 metyylitieno-2-yyli)-L-glutamiinihappo (Yhdiste 1)
Aa J o co2h
20 H2N^N N
H 1
Synteesi
Yhdiste 1 syntetisoitiin seuraavalla menetelmällä.
25 a. 5-bromi-4-metyylitiofeeni-2-karboksyylihappo:
Br s-^COjH
30 ·’·, Tämä yhdiste valmistettiin M. Nemecin mukaan, Collec- * ♦ · !.! tion Czechoslov. Chem. Commun. , osa 39 (1974) 3527.
b. 6-etynyyli-2-(pivaloyyliamino) -4 (3H) -oksopyri-• '·» do [2,3-d]-pyrimidiini : 35 • » 19 1 12079 o
X lx ii J
(CH3),C^N^N^rT
5 ' H
Tämä yhdiste valmistettiin E.C. Taylorin & G.S.K. Won-gin mukaan, J. Org. Chem., osa 54 (1989) 3618.
c . Dietyyli-N-(5-bromi-4-metyylitieno-2-yyli)-L-glutamaatti: 10 \ .C02Et
ΤΛ H I
BrAS^f V
O C02E1 15 5-bromi-4-metyylitiofeeni-2-karboksyylihapon (3,32 g, 15 mmoolia), 1-hydroksibentsotriatsolin (2,24 g, 16,6 mmoolia), L-glutamiinihapon dietyyliesterihydro- kloridin (3,98 g, 16,6 mmoolia) ja di-iso- 2 0 propyylietyyliamiinin (2,9 ml, 2,15 g, 16,6 mmoolia) sekoitettuun liuokseen dimetyyliformamidissa (DMF) (40 ·. ml) lisättiin 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyyli- • « ’ t. karbodi-imidihydrokloridia (3,18 g, 16,6 mmoolia).
. Saatua liuosta sekoitettiin argon kaasussa huoneenläm- <t; 25 pötilassa 18 tunnin ajan, kaadettiin suolaliuokseen ’···* (300 ml), laimennettiin vedellä (100 ml) ja uutettiin i ’·· eetterillä (3x120 ml) . Yhdistetyt orgaaniset uutteet V : pestiin vedellä (150 ml), kuivattiin MgS04:lla ja kon sentroitiin vakuumissa saaden ruskeaa hartsia, joka 30 puhdistettiin liekkikromatograf iän avulla. Eluointi • · heksaanilla: EtOAc (2:1) antoi tuotteen oranssina öl-,·, jynä (5,05 g, saanto 83 %) . Analyysit osoittivat, että tuote oli dietyyli-N-(5-bromi-4-metyylitieno-2- ’·-·* yyli) glutamaatti.
·*·.. 35 NMR (CDCla) δ: 7,22 (1H, s) , 6,86 (1H, d, J=7,5 Hz), * : 4,69 (1H, ddd, J=4,8, 7,5, 9,4 Hz), 4,23 (2H, q, J=7,l • 1 »
Hz), 4,12 (2H, q, J=7,l Hz), 2,55-2,39 (2H, m), 2,35- 20 1 12079 2,22 (1H, m), 2,19 (3H, s), 2,17-2,04 (1H, m), 1,29 (3H, t, J=7,1 Hz), 1,23 (3H, t, J=7,l Hz). Analyysi (CisHsoNOsSBr) C,H,N,S,Br.
d. dietyyli-N-(5-[(2-[pivaloyyliamino)-4(3H)- 5 oksopyrido[2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)-etynyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-glutamaatti: o rc°2E'
IA J
io ?, hn^v^^-Vy T
0 C0*Et
H
dietyyli-N-(5-bromi-4-metyylitieno-2-yyli)-gluta- 15 maatin (4,21 g, 10,4 mmoolia) sekoitettuun liuokseen asetonitriilissä (55 ml) lisättiin argon kaasussa bis(trifenyyli-fosfiini)palladiumkloridia (702 mg, 1,0 mmoolia), kuparijodidia (200 mg, 1,1 mmoolia), tri- etyyliamiinia (1,5 ml, 1,09 g, 10,8 mmoolia) ja 6- 2 0 etynyyli-2 -(pivaloyyliamino)-4(3H)-oksopyrido[2,3-d]- pyrimidiiniä (5,68 g, 21 mmoolia). Saatua suspensiota •# lämmitettiin palautusjäähdyttimellä varustetussa asti- * * assa 6 tunnin ajan. Huoneenlämpötilaan jäähdytyksen 1 I · jälkeen raaka reaktioseos suodatettiin ja saostuma • · ’ «* 25 pestiin asetonitriilillä (50 ml) ja etyyliasetaatilla (EtOAc) (2x50 ml) . Yhdistetyt suodokset konsentroitiin * ’·· vakuumissa saaden ruskeaa hartsia, joka puhdistettiin ; : ; liekkikromatograf iän avulla. Eluointi CH2C12: CH3OH: 11a (49:1) antoi tuotteen oranssina kiinteänä aineena »’, : 30 (4,16 g, saanto 67 %) . Analyysit osoittivat, että tuo- i » ,···, te oli dietyyli-N- (5-[ (2-[pivaloyyliamino) -4 (3H) - i oksopyrido (2,3-d] -pyrimidiini-6-yyli) -etynyyli] -4-7V metyylitieno-2-yyli)-glutamaatti.
:ll(: NMR (CDC13) δ: 8,95 (1H, d, J=2,2 Hz), 8,59 (1H, d, \ 35 J=2,2 Hz), 7,33 (1H, s), 7,03 (1H, d, J=7,4 Hz), 4,73 i * 4 X; (1H, ddd, J=4,8, 7,4, 9,5 Hz), 4,24 (2H, q, J=7,l Hz), 4,13 (2H, q, J=7,l Hz), 2,55-2,41 (2H, m), 2,38 (3H, 21 112079 s), 2,35-2,24 (1H, m), 2,19-2,05 (1H, m), 1,34 (9H, s), 1,30 (3H, t, J=7,1 Hz), 1,24 (3H, t, J=7,l Hz). Analyysi (C29H33N507S .0.75H20) C,H,N,S.
e. dietyyli-N-(5-[(2-[pivaloyyliamino)-4(3H)- 5 oksopyrido[2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)-etyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-glutamaatti: I >1 H .rc°2Et
10 0 H| "hT^s‘VNT
(CH3)3C'ANANA'N<J 0 c°2Et
H
Dietyyli-N-(5-[(2-[pivaloyyliamino)-4(3H)-okso-15 pyrido[2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)-etyyli]-4-metyyli- tieno-2-yyli)-glutamaatin (959 mg, 1,6 mmoolia) ja hiilessä olevan 10 % Pd:n (1,5 g, 150 p% ekvivalenttia) suspensiota trifluorietikkahapossa (30 ml) ravisteltiin 50 psi:n H2-paineessa 22 tuntia. Raaka reak-20 tioseos laimennettiin CH2Cl2:lla, suodatettiin seliit-tikerroksen (piimää) läpi ja konsentroitiin vakuumis-. *·· sa. Saatu jäännös liuotettiin CH2Cl2:een (120 ml), pes- :**: tiin kyllästetyllä NaHC03:lla (2x100 ml), kuivattiin
Na2S04:llä ja konsentroitiin vakuumissa saaden ruskeaa 25 hartsia, joka puhdistettiin liekkikromatografiän avulla. Eluointi CH2C12: CH3OH:11a (49:1) antoi tuotteen keltaisena kiinteänä aineena (772 mg, saanto 80 %) .
Analyysit osoittivat, että tuote oli dietyyli-N-(5-[(2 -[pivaloyyliamino)-4(3H)-oksopyrido[2,3-d]-30 pyramidiini-6-yyli)-etyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-glutamaatti.
; NMR (CDCl3) 6: 8,60 (1H, d, J=2,2 Hz), 8,49 (1H, laa- *·. ja), 8,32 (1H, d, J=2,2 Hz), 7,22 (1H, s), 6,78 (1H, d, J=7,5 Hz), 4,72 (1H, ddd, J=4,8, 7,5, 9,5 Hz), 4,23 i 35 (2H, q, J=7,l Hz), 4,11 (2H, q, J=7,l Hz), 3,12-3,00 (4H, m), 2,52-2,41 (2H, m), 2,37-2,22 (1H, m), 2,16-2,04 (1H, m), 2,02 (3H, s), 1,33 (9H, s), 1,29 (3H, t, 22 1 12079 J=7,1 Hz), 1,23 (3H, t, J=7,l Hz). Analyysi (C29H37N5O7S . 0.5H20) C,H,N,S.
f . dietyyli-N-(5-[(2-[pivaloyyliamino)-4(3H)-okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)-5 etyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-glutamaatti : O \_ X02Et
O T
» (CwAVy 0 “·*'
Dietyyli-N-(5-[(2-[pivaloyyliamino)-4(3H)-oksopy-rido[2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)-etyyli]-4-metyyliti-15 eno-2-yyli)-glutamaatin (2,98 g, 5 mmoolia), hiilessä olevan 10 % Pd:n (1,5 g, 50 p% ekvivalenttia) ja
Pt02: n (1,5 g, 50 p% ekvivalenttia) suspensiota trif-luorietikkahapossa (170 ml) ravisteltiin 800 psi:n H2-paineessa 40 tuntia. Raaka reaktioseos laimennettiin 20 CH2Cl2:11a, suodatettiin seliittikerroksen läpi ja konsentroitiin vakuumissa. Saatu jäännös liuotettiin • '* CH2Cl2:een (150 ml), pestiin kyllästetyllä NaHC03:lla **· (2x150 ml), kuivattiin Na2S04:llä ja konsentroitiin va- • kuumissa saaden ruskeaa hartsia, joka puhdistettiin 25 liekkikromatografiän avulla. Eluointi CH2Cl2:CH3OH:lla (24:1) antoi aluksi reagoimattoman aineen (1,42 g, /:·. saanto 48 %) ja sitten tuotteen keltaisena kiinteänä aineena (293 mg, saanto 10 %) . Analyysit osoittivat, . . että tuote oli dietyyli-N-(5-[(2-[pivaloyyliamino)- 30 4(3H)-okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyrimidii- ;·’ ni-6-yyli) -etyyli] -4-metyylitieno-2-yyli) -glutamaatti .
;Y: NMR (CDC13) δ: 7,24 (1H, s), 6,75 (1H, d, J=7,6 Hz), 5,57 (1H, laaja), 4,72 (1H, ddd, J=4,8, 7,6, 12,6 Hz), / 4,22 (2H, q, J=7,l Hz), 4,11 (2H, q, J=7,l Hz), 3,43- ” 35 3,36 (1H, m), 3,06-2,98 (1H, m), 2,89-2,68 (3H, m), 2,52-2,40 (3H, m), 2,37-2,23 (1H, m), 2,15 (3H, s), 2,14-2,03 (1H, m), 1,94-1,83 (1H, m), 1,73-1,63 (2H, 23 112079 m), 1,32 (9H, s), 1,29 (3H, t, 3=1,1 Hz), 1,23 (3H, t, 3=1,1 Hz) . Analyysi (C29H41N5O7S . 0.5H20) C,H,N,S.
g. N-(5-[2-(2-amino-4(3H)-okso-5,6,7,8-tetrahydro-pyrido[2,3-dJ-pyrimidiini-6-yyli)-etyyli]-4-metyyli-5 tieno-2-yyli)-glutamiinihappo (Yhdiste 1):
Dietyyli-N-(5-[(2-[pivaloyyliamino)-4(3H)-okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)-etyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-glutamaatin (293 mg, 0,5 mmoolia) liuosta IN NaOHissa (25 ml) sekoitettiin 10 huoneenlämpötilassa 90 tunnin ajan, sitten neutraloitiin 6N HCl:lla. Muodostunut saostuma otettiin talteen suodattamalla ja pestiin vedellä (4x10 ml) tuottaen tuotteen keltaisena kiinteänä aineena (63 mg, saanto 28 %) . Analyysit osoittivat, että tuote oli N-(5-[2-15 (2-amino-4 (3H) -okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido [2,3-d]-pyrimidiini-6-yyli)-etyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-glutamiinihappo.
NMR (DMSO-d6) δ: 12,44 (2H, laaja), 9,89 (1H, laaja), 8,42 (1H, d, 3=1,8 Hz), 7,57 (1H, s), 6,39 (1H, br s), 20 6,12 (2H, br s), 4,30 (1H, ddd, J=4,8, 7,8, 9,6 Hz), 3,26-3,18 (2H, m), 2,83-2,74 (3H, m), 2,31 (2H, t, ·· J=7,4 Hz), 2,12 (3H, s), 2,09-2,01 (1H, m), 1,94-1,80 (2H, m), 1,68-1,47 (3H, m). Analyysi •‘V (C2oH25N506S.1.1H20) C,H,N,S.
25 ; ’·* Biologinen ja biokemiallinen arviointi
Inhibointivakioiden määrittäminen GAR-transformy-laasille:
Young et ai: n GAR-transformylaasi- (GARFT) 30 analyysimenetelmää, Biochemistry 23 (1984), 3979-3986, : : : modifioitiin ja käytettiin alla kuvatulla tavalla. Re- : aktioseokset sisälsivät ihmisen katalyyttisen GARFT- domeenin, 0-250 nM testattavaa yhdistettä, 20 μΜ gly-, sinamidiribonukleotidia (GAR) , 10 tai 20 μΜ N10-
’· 35 formyyli-5,8-dideatsafolaattia (FDDF) , 50 mM HEPES-KOH
(pH 7,5) ja 50 mM KCl. Reaktio käynnistettiin lisää- 24 112079 mällä entsyymiä lopulliseen konsentraatioon llnM, sen jälkeen tarkkailtiin absorbanssin kasvua 294 nm:ssa 20°C: ssa (e294 = 18,9 nM^crrf1) .
GARFT-inhibointivakio (Ki) määritettiin va-5 kiotilan katalyyttisen nopeuden riippuvuudesta inhi- biitin ja perusaineen konsentraatiosta. Havaitun inhi-boinnin lajin määritettiin olevan kilpaileva FDDF:n suhteen näennäisen Ki:n (Kiiapp) riippuessa FDDF:n konsentraatiosta ja sitä esitettiin kuvaavan Ki,app = Ki + 10 (Ki/Km) [FDDF] . Michaelis-vakio FDDFrlle, Km, määritettiin itsenäisesti katalyyttisen nopeuden riippuvuudesta FDDF-konsentraatiosta. Sekä Km- että Ki-määritysten tulokset sijoitettiin epälineaarisilla menetelmillä Michaelis-yhtälöön tai tarkoituksenmukaisesti Micha-15 elis-yhtälöön kilpailevaa inhibointia ajatellen. Lu- jasidoksisesta inhiboinnista saadut tulokset analysoitiin ja Ki määritettiin sijoittamalla tiedot Morriso-nin lujan sidoksen yhtälöön, Biochem Biophys Acta 185 (1969), 269-286, epälineaarisilla menetelmillä.
20
Dissosioitumisvakioiden määritys ihmisen folaat-, ’* tisitoutuvalle proteiinille:
Dissosioitumisvakio (¾) ihmisen folaat-tisitoutuvalle proteiinille (FBP) määritettiin kilpai-·,..· 25 levässä sidosanalyysissä käyttäen hyväksi viljellyistä • '·· KB-soluista valmistettua kalvoon liittynyttä FBP: ia.
KB-solukalvo-osan valmistus: : *·· Kiinnittyneitä KB-soluja kaavittiin kolveis- • 30 ta, pestiin kerran jääkylmällä PBS:lla ja sentrifugoi-
tiin 5000 g:n voimalla 5 minuutin ajan 4°C:ssa. Ra-keistetut solut (2xl08 solua) suspendoitiin uudelleen ;·* 10 ml:aan suspensiopuskuria (KH2P04-K0H, pH 7,4 : 10 mM
; EDTA : 10 mM 2-merkaptoetanoli) , altistettiin nopeasti 35 ultraäänelle solujen liukenemisen saattamiseksi lop puun ja sentrifugoitiin 12000 g:n voimalla 10 minuutin 25 112079 ajan 4°C:ssa. Rakeinen aines erotettiin endogeeniin sitoutuneesta folaatista suspendoimalla uudelleen 20 ml:aan hapanta puskuria (KH2P04-K0H, pH 3,5 : 10 mM ED-TA : 10 mM 2-merkaptoetanoli) ja sentrifugoitiin kuten 5 aikaisemmin. Sitten rakeinen aines suspendoitiin uu delleen 20 ml:aan suspensiopuskuria pH:ssa 7,4 ja sentrifugoitiin kuten aikaisemmin. Rakeinen aines suspendoitiin uudelleen 5 ml:aan suspensiopuskuria pH:ssa 7,4 ilman EDTA. Proteiinipitoisuus määritettiin käyt-10 täen Bradford-menetelmää BSA:n ollessa standardina.
Tyypilliset saannot tällä menettelyllä olivat yhteensä 4-5 mg kalvoproteiinia 2x10® solua kohden. Tätä lopullista suspensiota käytettiin kalvoon liittyneen ihmisen FBP:n alkulähteenä.
15 FBP:n kanssa kilpaileva sidosanalyysi:
Inhibiitin annettiin kilpailla 3H-foolihapon kanssa FBP:hen sitoutumisesta. Reaktioseokset sisälsivät 50-100 mg solukalvoproteiinia, joka sisälsi 3-6 20 pmoolia (3-6 nM) FBP:ia, 17,25 pmoolia 3H-foolihappoa (17,25 nM, 0,5 //Ci), erilaisia pitoisuuksia kilpaili-' \* jaa 1 ml: ssa 50 mM KH2P04-K0H: ia, pH 7,4 : 10 mM 2- merkaptoetanoli. Reaktiot suoritettiin 25°C:ssa. Sidotun 3H-foolihapon hyvin hitaan vapautumisen vuoksi 25 kilpailija sidottiin ennalta 30 minuutin ajaksi ilman , '·· 3H-foolihappoa. Sitten lisättiin 3H-foolihappo ja seos- : : ten annettiin saavuttaa tasapaino 2,5 tunnin aikana.
Reaktioseokset imettiin kokonaisuudessaan nitrosellu-. : loosasuodattimien läpi vakuumissa sidottua 3H- t 30 foolihappoa sisältävien solukalvojen saamiseksi tal teen. Talteen otetut kalvot pestiin sitten 4 kertaa 1 V ml:lla reaktiopuskuria. Sitoutuneen 3H-foolihapon mää- rä mitattiin tuikelaskimen avulla nitroselluloosakal-vosta. Saadut tulokset sijoitettiin epälineaarisesti ; 35 edellä kuvatulla tavalla. Kilpailijan Κ<ι:η laskemiseen käytetty FBP:n Kd 3H-foolihapolle saatiin suoraan tit-raamalla 3H-folaattia sisältävä FBP ja sijoittamalla 26 112079 sen jälkeen epälineaarisesti tiedot lujan sidoksen Kd-yhtälöön.
Solusukupolvet: 5 Käytetyt solusukupolvet ja niiden alkuperä on esitetty taulukossa 1. Kunkin solusukupolven kasvuolosuhteet ja kasvuväliainevaatimukset on esitetty yhteenvetona taulukossa 2. Kaikkia viljelmiä säilytettiin 37°C:ssa, 5 % ilma-C02-seoksessa kostutetussa 10 kasvatuskaapissa.
Koeputkessa kasvun inhibointi:
Inhibiittien varastoliuokset valmistettiin 10 mM natriumbikarbonaatissa vedessä ja varastoitiin 1 15 ml:n osuuksina -20°C:ssa soluviljelmäkokeita varten. Solujen kasvun estäminen määritettiin Mosmannin menetelmän modifikaation avulla, J. Immunol. Methods 65 (1983), 55-63.
Kunkin solusukupolven keskiosan faasin soluja 20 laimennettiin 18,500 soluun/ml tuoreessa RPMI- kasvuväliaineessa (Mediatech, Washington, DC) , johon lisättiin dialysoitua sikiövasikan seerumia (Hyclone Laboratories Inc., Logan, UT), ja jaettiin sitten osissa 96-paikkaisten mikrotiitterilevyjen riveille 2-)** 25 12. Riville 1 täytettiin samaan tilavuuteen 135 ml ’’ tuoretta väliainetta ilman soluja käytettäväksi ver- ’ ' tailukokeena. 1-4 tunnin kuluttua levyt poistettiin kasvatuskaapista, sen jälkeen lisättiin testattavaa /·· yhdistettä 10 kertaa lopullisessa konsentraatiossa 15 30 ml/paikka kaksoislaimennuksina riveille 12-4. Palautu- miskokeita varten kaikkiin lääkeliuoksiin (lopullinen i · M konsentraatio 175 mM) sisällytettiin hypoksantiinia ;·* (1,75 mM) tai AICA:ia (1,75 mM) . Kyvetit, jotka sisäl- : '.· sivät testattavan yhdisteen kaikki pitoisuudet, val- 35 misteltiin nelinkertaisina kullekin levylle. 15 ml vä liainetta lisättiin ilman testattavaa yhdistettä ky- 27 112079 vetteihin levyjen rivillä 1. Solut palautettiin sitten kasvatuskaappiin ja säilytettiin häiritsemättä koko inkubointijakson ajan. Kolmantena päivänä L1210 ja L1210/CI920 soluihin tai viidentenä päivänä CCRF-CEM 5 soluihin lisättiin 50 ml kudosviljelmän väliaineeseen 0,8 mg/ml liuotettua MTT ((4,5-dimetyylitiatsoli-2-yyli)-2,5-difenyylitetratsoliumbromidia; Sigma luettelo no. M2128) kaikkien levyjen kuhunkin kyvettiin, jonka jälkeen solut palautettiin kasvatuskaappiin. 4 10 tunnin jälkeen kaikki levyt poistettiin kaapista ja sentrifugoitiin nopeudella 1200 rpm 7 minuutin ajan. Väliaine imettiin pois ja 150 ml DMSO lisättiin kaikkien levyjen kuhunkin kyvettiin. Sitten levyjä sekoitettiin hitaalla nopeudella pyörresekoittimessa 1 tun-15 nin ajan pimeässä ja huoneen lämpötilassa. Muuttuneen MTT:n määrä mitattiin spektrofotometrisesti aallonpituudella 540 nm kineettisellä mikrolevyn Molecular Devices Vmax™-lukijalla. Solujen kasvua 50 %:lla alentamaan tarvittavan lääkeaineen pitoisuus mitattuna MTT-20 muutoksen avulla määritettiin interpoloimalla ylian nostus (miinus vertailuarvo) heti 50 % vertailuylian-nostuksen (miinus vertailuarvo) yllä ja alla olevassa välissä.
TAULUKKO 1 25 Koeputkitutkimuksissa käytettyjen solusukupolvien al- ; ’·* kuperäiskudos ja lähde ,· · Solusukupolvi Alkulähde Alkuperä_ L1210 ATCC” Hiiri, imusolusyöpä , . CCRF-CEM ATCC# Ihminen, akuutti ,’·· _varhais imusolusyöpä_ #ATCC = American Type Culture Collection !·. TAULUKKO 2
Mikrotiitterianalyyseissä käytetyt viljelyolosuhteet, 30 sijoitustiheydet ja inkubointiajat , , Solusuku- Väliaine DFCS- Sijoitus- Inkubointi- polvi pit.* tiheys aika (päiviä) (%) (solua/ kyvetti) 28 112079 L1210 RPMI-1640 5 2500 3 CCRF-CEM RPMI-1640 10_2500_5_ * DFCS-pit. = dialysoitu sikiövasikan seerumipitoisuus .
TAULUKKO 3
Vertailutulokset testattavan yhdisteen ja 6R-DDATHF:n 5 kasvun inhiboinnille käyttäen jatkuvaa (72 tunnin) altistusta
Yhdiste GARFT Ki IC50,Soluvi IC50 Solu- Ihmis-FBP K<j (nM) ljelmä viljelmä (nM)
L1210 (nM)a CCRF-CEM
_(nM) a_ 1 1,4 13,5 6,1 28 DDATHFb 25_17,5_1^_5_0,0020_ a: Keskimääräinen IC50 ± keskihajonta;
b: 6R-DDATHF, 5,10-dideatsatetrahydrofoolihapon 6R
diastereomeeri (Lometrexol) (ks. F.M. Muggia, "Folaat-10 ti tuottaa inhibiitin puriinisynteesin alkamisen estämiseksi", New Drugs, Concepts and Results in Cancer Chemotherapy, Kluwer Academic Publishers, Boston (1992), 65-87).
Kuten edellä olevat vertailevat tulokset 15 osoittavat, yhdisteellä 1 on suhteellinen folaattia sitovan proteiinin K<ä, joka on n. 1400 kertaa heikompi kuin 6R-DDATHF.
ESIMERKKI 2 .‘20 N- (5 - [2- (2-amino-4-okso-4,6,7,8-tetrahydro-3H- pyrimido[5,4-6]-[1,4]tiatsiini-6-yyli)etyyli]-4 -metyylitieno-2-yyli)-L-glutamiinihappo (Yhdiste 2) ' »
l:; 25 o \—. h fC0*H
·.: Η,ΝΛΝΛΝ^ ° C°2H
H 2 29 112079
Yhdiste 2 valmistetaan seuraavasti.
a. metyyli-5-bromi-4-metyylitiofeeni-2-karboksy-laatti:
Br^s^COzCHa 10 5-bromi-4-metyylit iofeeni-2 -karboksyylihapon (20,32 g, 92 mmoolia) liuokseen CH3OH:ssa (450 ml) lisättiin konsentroitua H2S04 (4 ml). Saatua liuosta lämmitettiin palautusjäähdyttimellä varustetussa astiassa 18 tunnin ajan. Liuotin poistettiin konsentroimalla 15 vakuumissa ja saatu jäännös jaettiin osiin kyllästetyn NaHC03 (350 ml) ja eetterin (350 ml) välillä. Kerrokset erotettiin ja vesipitoinen faasi uutettiin eetterillä (3x150 ml) . Yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin MgS04:lla ja konsentroitiin vakuumissa saaden 20 punaista öljyä, joka puhdistettiin liekkikromatografi-an avulla. Eluointi heksaani:etyyliasetaatilla (9:1) antoi tuotteen keltaisena öljynä, joka muuttui kiinte- :·: äksi seistessään (18,34 g, saanto 85 %) . Analyysit osoittivat, että tuote oli metyyli-5-bromi-4- .··*. 25 metyylitiofeeni-2-karboksylaatti.
;·’/ NMR (CDC13) δ: 7,47 (1H, s), 3,86 (3H, s), 2,20 (3H, \;. s). Analyysi (C7H702SBr) C,H,S,Br.
b. metyyli-5-(3-hydroksipropynyyli)-4-metyylitio-feeni-2-karboksylaatti: ·'·: 30
··; CH302C>VS-A^^'OH
35 , Metyyli-5-bromi-4-metyylitiofeeni-2-karboksyy- laatin (5,18 g, 22 mmoolia) sekoitettuun liuokseen di- 30 112079 etyyliamiinissa (60 ml) lisättiin argon kaasussa bis(trifenyylifosfiini)palladiumkloridia (77 mg, 0,11 mmoolia), kuparijodidia (42 mg, 0,22 mmoolia) ja pro-pargyylialkoholia (1,5 ml, 1,44 g, 26 mmoolia). Saatua 5 seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia. Liuotin poistettiin konsentroimalla vakuumissa ja saatu jäännös laimennettiin vedellä (200 ml) ja uutettiin sitten EtOAc:lla (3x100 ml). Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 0,5N HCltlla (100 mlj, kuivattiin 10 MgS04:lla ja konsentroitiin vakuumissa saaden ruskeaa öljyä, joka puhdistettiin liekkikromatografiän avulla. Eluointi heksaani:EtOAclla (2:1) antoi tuotteen oranssina öljynä, joka muuttui kiinteäksi seistessään (4,07 g, saanto 88 %) . Analyysit osoittivat, että tuote oli 15 metyyli-5-(3-hydroksipropyyli)-4-metyylitiofeeni-2-karboksylaatti.
NMR (CDC13) δ: 7,52 (1H, s), 4,55 (2H, s), 3,87 (3H, s), 2,29 (3H, s). Analyysi (Ci0Hi0O3S) C,H,S.
c. metyyli-5-(3-hydroksipropyyli)-4-metyylitio- 20 feeni-2-karboksylaatti: 25 ... Metyyli-5- (3-hydroksipropynyyli) -4-metyylitiofee- ni-2-karboksylaatin (3,86 g, 18 mmoolia) ja hiilessä olevan 5 % Pd:n (0,72 g, 19 p% ekvivalenttia) suspen- ” 30 siota EtOAc-.ssa (110 ml) ravisteltiin 50 psi:n H2- paineessa 20 tuntia. Raaka reaktioseos suodatettiin seliittikerroksen läpi ja suodos konsentroitiin vakuumissa antaen tuotteen keltaisena öljynä (3,84 g, saan-·’ to 98 %) . Analyysit osoittivat, että tuote oli metyy- 35 li-5-(3-hydroksipropyyli)-4-metyylitiofeeni-2-karbok-sylaatti.
NMR (CDCI3) δ: 7,51 (1H, s), 3,84 (3H, s), 3,71 (2H, t, 31 112079 J=6,2 Hz), 2,86 (2H, t, J=7,6 Hz), 2,16 (3H, s), 1,92 (2H, tt, J=6,2, 7,6 Hz). Analyysi (Cx0Hi4O3S) C,H,S.
d. metyyli-4-metyyli-5-(3-oksopropyyli)-tiofeeni-2-karboksylaatti: 5 jrC ^ 10
Metyyli-5- (3-hydroksipropyyli-4-metyylitiofeeni- 2 -karboksyylaatin (3,74 g, 17 mmoolia), N-metyylimorfoliini-N-oksidin (3,00 g, 26 mmoolia) ja jauhetun 4 Ä molekyyliseulojen (4,5 g) sekoitettuun 15 suspensioon CH2Cl2:ssa (50 ml) lisättiin tetrapropyy-liammoniumperrutenaattia (300 mg, 0,85 mmoolia). Saatua suspensiota sekoitettiin huoneenlämpötilassa 40 minuutin ajan. Liuotin poistettiin konsentroimalla va-kuumissa ja saatu jäännös puhdistettiin liekkikromato-20 grafian avulla. Eluointi heksaani:EtOAclla (4:1) antoi tuotteen keltaisena öljynä (1,82 g, saanto 49 %) . Analyysit osoittivat, että tuote oli metyyli-4-metyyli-5-(3-oksopropyyli) -tiofeeni-2-karboksylaatti.
NMR (CDC13) δ: 9,83 (1H, t, J=0,8 Hz), 7,50 (1H, s) , 25 3,84 (3H, s), 3,07 (2H, t, J=7,4 Hz), 2,83 (2H, dt, J=0,8, 7,4 Hz), 2,17 (3H, s) . Analyysi (Ci0Hi2O3S) ;.t C, H, S .
e. etyyli-5-(3-butenyyli)-4-metyylitiofeeni-2-kar-boksylaatti: 'j 30 35 '.· Metyyl itrifenyyli f osfoniumbromidin (3,14 g, 8,8 mmoolia) sekoitettuun suspensioon THF.-ssa (30 ml) li- 32 112079 sättiin argon kaasussa 0°C:ssa 2,5M n-butyylilitiumia heksaanissa (3,4 ml, 8,5 mmoolia) . Saatua lietettä sekoitettiin 10 minuutin ajan 0°C:ssa, 75 minuuttia huoneenlämpötilassa ja jäähdytettiin sitten -65°C:een en-5 nen metyyli-4-metyyli-5-(3-oksopropyyli)-tiofeeni-2- karboksylaatin (1,71 g, 8,1 mmoolia) liuoksen THF:ssa (30 ml) lisäämistä pisaroittain. Jäähdytyshaude poistettiin ja reaktioseosta sekoitettiin 90 minuutin ajan samalla lämmittäen vähitellen huoneenlämpötilaan. Raa-10 ka reaktioseos konsentroitiin vakuumissa tilavuuteen 20 ml, laimennettiin eetterillä (200 ml) ja suodatettiin seliittikerroksen läpi. Suodos konsentroitiin vakuumissa antaen oranssia öljyä, joka puhdistettiin liekkikromatografiän avulla. Eluointi heksaa-15 ni:EtOAc:lla (95:5) antoi tuotteen keltaisena öljynä (772 mg, saanto 46 %). Analyysit osoittivat, että tuote oli metyyli-5-(3-butenyyli)-4-metyylitiofeeni-2-karboksylaatti.
NMR (CDC13) δ: 7,50 (1H, s), 5,84 (1H, ddt, J=10,2, 20 17,0, 6,6 Hz), 5,07 (1H, dd, J=l,6, 17,0 Hz), 5,02 (1H, dd, J=l,6, 10,2 Hz), 3,84 (3H, s). Analyysi (CnHnOaS) C, H, S .
f. metyyli-5-(3,4-dihydroksibutyyli)-4-metyylitio-feeni-2-karboksylaatti : 25 CH30
0H
” 30 N-metyylimorf oliini-N-oksidin (735 mg, 6,3 mmoo- V: lia) ja osmiumtetroksidin (5 mg, 0,02 mmoolia) sekoi- '·. tettuun suspensioon asetonissa (30 ml) lisättiin me tyyli-5- (3-butenyyli)-4-metyylitiofeeni-2-karboksylaa-35 tin (701 mg, 3,3 mmoolia) liuosta asetonissa (20 ml).
t » . *: Saatua liuosta sekoitettiin argon kaasussa huoneenläm pötilassa 48 tunnin ajan ja suodatettiin sitten se- 33 112079 liittikerroksen läpi. Suodos tehtiin happamaksi lisäämällä 0,5M H2S04 (10 ml) ja asetoni poistettiin kon sentroimalla vakuumissa. Vesipitoista jäännöstä laimennettiin vedellä (20 ml) ja uutettiin EtOAc:lla 5 (3x25 ml), kuivattiin Na2S04:lla ja konsentroitiin va kuumissa saaden ruskeaa hartsia, joka puhdistettiin liekkikromatografiän avulla. Eluointi CH2C12:EtOAc:11a (2:3) antoi tuotteen harmahtavana kiinteänä aineena (577 mg, saanto 71 %). Analyysit osoittivat, että tuo-10 te oli metyyli-5-(3,4-dihydroksitutyyli) -4-metyylitio-feeni-2-karboksylaatti.
NMR (CDCI3) δ: 7,50 (1H, s), 3,84 (3H, s), 3,79-3,72 (1H, m), 3,86 (1H, dd, J=3,2, 10,9 Hz), 3,48 (1H, dd, J=7,4, 10,9 Hz), 3,00-2,80 (2H, m). Analyysi (CnH1604S) 15 C, H,S.
Loput vaiheet yhdisteen valmistamiseksi voidaan suorittaa edellä kuvatun mukaisesti, jolloin yhdiste, jolla on kaava XI, muutetaan yhdisteeksi, jolla on kaava XIX, ja joka valmistus käsittää vaiheen akti-20 voidun hydroksiryhmän korvaamiseksi nukleofiilillä, edullisesti tiohapon suolalla, edullisemmin kaliumtio-asetaatilla.
;·*: Edellä olevat esimerkit on annettu keksinnön erilaisten toteutusmuotojen kuvaamiseksi. On ymmärret- ·’*. 25 tävä, että sopivat modifikaatiot ovat alan asiantunte muksen omaavan mahdollisuuksien rajoissa hakemukseen sisällytettyjen opetusten pohjalta.
Mikäli kemian kannalta on mahdollista, hakemuksessa esitetyt kemialliset ryhmät voivat olla sub-"> 30 stituoituja. Joissakin tapauksissa tämä mahdollisuus on tehty yksiselitteiseksi ilmaisemalla esim. substi-·. tuoitu tai substituoimaton Ci-C3alkyyliryhmä.
Jos on esitetty useampia kuin yksi R6-ryhmä missään hakemuksen kaavassa, kukin R6 voidaan valita 35 itsenäisesti annetuista mahdollisuuksista.
* » , · Kuten edellä on esitetty, keksinnön yhdisteet omaavat antiproliferatiivisen vaikutuksen, ominaisuu- 34 112079 den, joka voi ilmetä kasvaimia ehkäisevän vaikutuksen muodossa. Keksinnön yhdiste voi olla aktiivinen sellaisenaan tai esivaihe, joka muuttuu elimistössä aktiiviseksi yhdisteeksi. Keksinnön edulliset yhdisteet 5 ovat erikoisen aktiivisia entsyymi-GARFT:n inhiboin- nissa. Erityisesti edulliset yhdisteet ovat aktiivisia L1210 solusukupolven kasvun inhiboinnissa, hiiren leu-kemiasolusukupolven, jota voidaan kasvattaa kudosvil-jelmässä. Keksinnön yhdisteet voivat olla aktiivisia 10 myös inhiboitaessa bakteerien kasvua, kuten gram- kielteisten Escherichia coli-bakteerien, joita voidaan kasvattaa viljelmässä.
Keksinnön mukaisia yhdisteitä samoin kuin niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja voidaan 15 yhdistää tarkoituksenmukaisiin annosmuotoihin, kuten kapselit, tabletit ja ruiskutettavat valmisteet. Kiinteitä tai nestemäisiä farmaseuttisesti hyväksyttäviä kantoaineita, laimennusaineita tai täyteaineita voidaan myös käyttää.
20 Kiinteisiin kantoaineisiin kuuluvat tärkke lys, laktoosi, kalsiumsulfaattidihydraatti, valkea ’·· kaoliini, ruokosokeri, talkki, gelatiini, agar-agar, :*·: pektiini, akaasia, magnesiumstearaatti ja steariini- happo. Nestemäisiin kantoaineisiin kuuluvat siirappi, ···. 25 maapähkinäöljy, oliiviöljy, fysiologinen suolaliuos ja i < » ;·, vesi.
> *
Kantoaine tai laimennusaine voi sisältää hi- • · « · taasti vapautuvaa ainetta, kuten glyserolimonostea-raattia tai glyseryylidistearaattia, yksin tai vahan 30 yhteydessä. Käytettäessä nestemäistä kantoainetta val- miste voi olla siirapin, eliksiirin, emulsion, pehmeän ;·. gelatiinikapselin, steriloidun ruiskutettavan nesteen (esim. liuoksen) tai vedettömän tai vesipitoisen suspension muodossa.
’· 35 Lääkevalmisteet valmistetaan noudattaen ta- i vanomaisia apteekkimenetelmiä käsittäen vaiheet, kuten sekoittamisen, rakeistuksen ja kokoonpuristamisen tar- 35 112079 vittaessa tabletin muotoihin tai ainesosien sekoittamisen, täyttämisen ja liuottamisen sopivasti haluttujen tuotteiden saamiseksi annettavaksi suun kautta, ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti, ulkoisesti, emät-5 timen sisäisesti, nenän kautta, keuhkoputken sisäisesti, silmän kautta, korvan kautta tai peräsuolen kautta .
Keksinnön yhdisteet voivat lisäksi sisältää yhden tai useampia muita farmaseuttisesti aktiivisia 10 yhdisteitä. Esim. joku seuraavista kasvaimia ehkäisevistä aineista voidaan sisällyttää seokseen: mitoosi-inhibiitit (esim. vinblastiini); alkylointiaineet; di-hydrofolaattireduktaasi-inhibiitit tai TS-inhibiitit; antimetaboliitit (esim. 5-fluorourasiili, sytosiinira-15 binosidi); interkalaatioantibiootit (esim. adriamycin, bleomycin); entsyymit (esim. asparaginaasi); to-poisomeraasi-inhibiitit (esim. etoposidi) ; ja biologiset reaktiomodifikaattorit (esim. interferoni). Keksinnön yhdisteitä voidaan käyttää myös yhdessä yhden 20 tai useamman antiproliferatiivisen aineen tai GARFT- inhibiitin kanssa, kuten yleiseksi siirretyssä (com-monly assigned) kansainvälisessä patenttijulkaisussa :*·· W0 94/13295, joka on julkaistu 23. kesäkuuta 1994, tai patenttijulkaisussa WO 92/05153, joka on julkaistu 2. ··, 25 huhtikuuta 1992, joiden paljastukset sisällytetään tä hän hakemukseen tällä viittauksella, kuvattu yhdiste.
t ·
Keksinnön seokset voivat sisältää myös yhden tai use-’’ ’ ämmän bakteerien, sienten, iholoisten, virusten, hil- settymän tai kokkidioosin vastaisen aineen. Esimerk-ί 30 keinä bakteereja vastustaviin aineisiin kuuluvat: sul- / fonamidit, kuten sulfametoksatsoli, sulfadiatsiini, sulfameter ja sulfadoksiini; dihydrofoolireduktaasi-inhibiitit, kuten trimethoprim, bromodiaprin ja tri-metreksaatti; penisilliinit; cephalosporiinit; ja ki-35 nolonikarboksyylihapot ja niiden kondensoidut isotiat- : soloanalogit.
Keksinnön toinen toteutusmuoto koskee keksin- 36 112079 nön mukaisen yhdisteen I käyttöä valmistettaessa mikro-organismien tai korkeampien eliöiden solujen kasvua tai lisääntymistä estävää lääkevalmistetta. Terapeuttisessa menetelmässä korkeampien eliöiden tai mikro-5 organismien solujen kasvun tai lisääntymisen estämiseksi keksinnön mukaista yhdistettä annetaan tehokas annos tai määrä isännälle. Keksinnön yhdisteet ovat erityisen käyttökelpoisia nisäkäsisäntien, kuten ih-misisäntien, ja lintuisäntien hoidossa. Erityisen 10 edullinen hoitoprosessi käsittää keksinnön mukaisen yhdisteen määrän, joka on tehokas estämään GARFT:n, antamisen isännälle.
Monia hakemuksessa kuvatuista antiproliteratiivisista yhdisteistä ja niiden farmaseuttisesti hy-15 väksyttävistä suoloista voidaan käyttää hoitomenetelmässä. Yhdisteet voidaan antaa farmaseuttisesti hyväksyttävän seoksen muodossa, joka sisältää edellä kuvattua laimennus- tai kantoainetta.
Annos seosta sisältää ainakin tehokkaan mää-20 rän aktiivista yhdistettä ja koostuu edullisesti yhdestä tai useammasta farmaseuttisesta annosyksiköstä. Tehokas määrä tarkoittaa riittävää määrää folaattime-tabolisten polkujen estämiseksi ja hyötyvaikutusten saamiseksi siitä, esim. antamalla yksi tai useampia 25 farmaseuttisia annosyksiköitä.
Esimerkin luonteinen päivittäinen annos sel-;·, kärankaiselle isännälle sisältää määrältään yhteen grammaan asti aktiivista yhdistettä isäntä-kg kohden, , ( edullisesti puoli grammaa, edullisemmin 100 mg ja * * 30 edullisimmin n. 50 mg tai vähemmän isännän kehonpaino-kiloa kohden. Valittu annos voidaan antaa lämminveri-selle eläimelle tai nisäkkäälle, esim. hoidon tarpeessa olevalle ihmispotilaalle, folaattimetabolisten polkujen estämisen välittämänä kaikilla sopivilla annok-35 sen antomenetelmillä mukaan lukien: ulkoisesti, esim.
* ‘i voiteena tai rasvana; suun kautta; peräsuolen kautta, esim. peräpuikkona; ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta 37 1 12079 ruiskeena; tai jatkuvasti emättimen sisäisesti, nenän kautta, keuhkoputken sisäisesti, korvan tai silmän kautta suihkeena.
Keksinnön mukaiset yhdisteet tuottavat yhden 5 tai useampia antiproliferatiivisesta vaikutuksesta, bakteerien vastaisesta vaikutuksesta, iholoisten vastaisesta vaikutuksesta, virusten vastaisesta vaikutuksesta, hilsettymän vastaisesta vaikutuksesta, alkueläinten vastaisesta vaikutuksesta, kokkodioosin 10 vastaisesta vaikutuksesta, tulehdusten vastaisesta vaikutuksesta, immunosupressiivisesta vaikutuksesta ja sienten vastaisesta vaikutuksesta. Yhdisteet ovat erityisen käyttökelpoisia tuotettaessa kasvainten kasvua estävä vaikutus selkärankaiseen isäntään, jolla on 15 kasvain.
s a I · > • IHt I · ; » t * I t • 4 4 » • I I · < a ► I ♦ * · i a « * a i · i a * * a a I 4 ·
I I
i a * a a
t II
a a i i a a t t t a »

Claims (9)

  1. 3e 112079 » 1 \ i 1. 2-(2-amino-4-okso-tetrahydropyrido[2,3-d]- pyridiini- ja pyrimido[5,4-b][1,4]tiatsin-6- yyli)etyyli-4-metyylitien-2-yyli-2- 5 glutamiinihappojohdannainen, jolla on kaava I: 10 η,ΑΛ^ tunnettu siitä, että A on rikki tai CH2; 15. on CH2 ; X on CH3; ja Ri ja R2 ovat itsenäisesti vety; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
  2. 2. Förening eller sait enligt patentkrav 1, 20 kännetecknat därav, att A är CH2.
    2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste tai 20 suola, tunnettu siitä, että A on CH2. . 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste tai • · suola, tunnettu siitä, että se valitaan jou- I · · · kosta: 39 112079 10 Η jossa A on rikki tai CH2; Z on CH2; 15. on CH3; ja Rx ja R2 ovat itsenäisesti vety; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan; ja (ii) farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen.
  3. 3. Förening eller sait enligt patentkrav 1, kännetecknat därav, att den väljs bland: *"· N-(5-[2-(2-amino-4(3H)-okso-5,6,7,8- .'} tetrahydropyrido[2,3-d]-pyrimidin-6-yl)etyl]-4- 25 metyltieno-2-yl)-L-glutaminsyra och dess farmaceutiskt godtagbara salter; och N- (5- [2- (2-amino-4-okso-4,6,7,8-tetrahydro-3H-pyr-imido[5,4-6][1,4]tiatsin-6-yl)etyl]-4-metyltieno-2-. . yl)-L-glutaminsyra och dess farmaceutiskt godtagbara 30 salter.
  4. ···’ 4. N- (5- [2- (2-amino-4 (3H) -okso-5,6,7,8- tetrahydropyrido [2,3-d] -pyrimidin-6-yl) etyl] -4-metyl- tieno-2-yl)-L-glutaminsyra.
  5. 5. Farmaceutisk blandning, känneteck- : 35 n a t därav, att den innehäller: • * (i) en förening enligt formel I: 41 1 12079 = jv vCovtr". ίο väri A är svavel eller CH2; Z är CH2; X är CH3; och
    15 Rx och R2 oberoende av varandra är väte; eller dess farmaceutiskt godtagbara salt; och (ii) en farmaceutisk godtagbar bärare.
  6. 6. Farmaceutisk blandning enligt patentkrav 5, kännetecknat därav, att A är CH2.
    6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen farmaseut-2 0 tinen seos, tunnettu siitä, että A on CH2.
  7. 7. Farmaceutisk blandning enligt patentkrav 5 eller 6, kännetecknat därav, att i den är fö- * '·· reningen enligt formel I N- (5-[2- (2-amino-4 (3H) -okso- :1·: 5,6,7,8-tetrahydropyrido [2,3-d] -pyrimidin-6-yl) etyl] - ’·1; 4-metyltieno-2-yl) -L-glutaminsyra. ,···. 25 8. Användning av förening I enligt nägot av patentkraven 1-4 vid tillverkning av ett läkemedels- * · preparat som hindrar tillväxten eller förökningen av • · • mikroorganismers eller högre organismers celler.
    7. Patenttivaatimuksen 5 tai 6 mukainen far- . ” maseuttinen seos, tunnettu siitä, että siinä kaavan I yhdiste on N-(5-[2-(2-amino-4(3H)-okso-. **. 5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyrimidiini-6- 25 yyli)etyyli]-4-metyylitieno-2-yyli)-L-glutamiinihappo. • · ·
  8. 8. Jonkin patenttivaatimuksista 1-4 mukai-sen yhdisteen I käyttö valmistettaessa mikro- t · · organismien tai korkeampien eliöiden solujen kasvua , . tai lisääntymistä estävää lääkevalmistetta / 3 0 9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen käyttö, • · ···1 tunnettu siitä, että yhdiste I on N-(5-[2- :V: (2-amino-4(3H)-okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]- » · ;·'1· pyrimidiini-6-yyli) etyyli] -4-metyylitieno-2-yyli) -L- glutamiinihappo. I · · · f 40 1 12079 ' / 1. 2-(2-Amino-4-okso-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyridin- och pyrimido[5,4-b]-[1,4]tiatsin-6-yl)etyl-4- 5 metyltien-2-yl-2-glutaminsyraderivat enligt formel I: & COlR· (0 Jj ^ kännetecknat därav, att A är svavel eller CH2;
    15 Z är CH2 ; X är CH3; och Rx och R2 oberoende av varandra är väte; eller dess farmaceutiskt godtagbara sait.
  9. 9. Användning enligt patentkrav 8, k ä n n e -30 tecknat därav, att föreningen I är N-(5-[2-(2- ' amino-4 (3H) -okso-5,6,7,8-tetrahydropyrido [2,3-d] - * , V, pyrimidin-6-yl)etyl]-4-metyltieno-2-yl)-L- glutaminsyra. » i t * · » · · t t 1
FI970317A 1994-07-28 1997-01-24 2-(2-amino-4-okso-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyridiini- ja pyrimido[5,4-b][1,4]tiatsin-6-yyli)etyyli-4-metyylitien-2-yyli-L-glutamiinihappojohdannaisia FI112079B (fi)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US28163994 1994-07-28
US08/281,639 US5608082A (en) 1994-07-28 1994-07-28 Compounds useful as antiproliferative agents and GARFT inhibitors
PCT/US1995/009519 WO1996003406A1 (en) 1994-07-28 1995-07-28 Compounds useful as antiproliferative agents and garft inhibitors
US9509519 1995-07-28

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI970317A0 FI970317A0 (fi) 1997-01-24
FI970317A7 FI970317A7 (fi) 1997-03-05
FI112079B true FI112079B (fi) 2003-10-31

Family

ID=23078167

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI970317A FI112079B (fi) 1994-07-28 1997-01-24 2-(2-amino-4-okso-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyridiini- ja pyrimido[5,4-b][1,4]tiatsin-6-yyli)etyyli-4-metyylitien-2-yyli-L-glutamiinihappojohdannaisia

Country Status (20)

Country Link
US (2) US5608082A (fi)
EP (1) EP0773943B1 (fi)
JP (1) JPH10503762A (fi)
KR (1) KR100380610B1 (fi)
CN (2) CN1091770C (fi)
AT (1) ATE206122T1 (fi)
AU (1) AU697138B2 (fi)
CA (1) CA2195420A1 (fi)
DE (1) DE69522945T2 (fi)
DK (1) DK0773943T3 (fi)
ES (1) ES2162933T3 (fi)
FI (1) FI112079B (fi)
MX (1) MX9700675A (fi)
NO (1) NO308248B1 (fi)
NZ (1) NZ290703A (fi)
PT (1) PT773943E (fi)
RU (1) RU2152945C2 (fi)
SI (1) SI0773943T1 (fi)
TW (1) TW432062B (fi)
WO (1) WO1996003406A1 (fi)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5831100A (en) * 1995-06-07 1998-11-03 Agouron Pharmaceuticals, Inc. Syntheses of optically pure compounds useful as GARFT inhibitors and their intermediates
JP4815083B2 (ja) * 1999-08-31 2011-11-16 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 複素環化合物およびそれの使用方法
US6774138B2 (en) 1999-08-31 2004-08-10 Merck & Co., Inc. Thiazolyl(pyridyl)ethyne compounds
AU2002306413A1 (en) * 2001-02-16 2002-10-15 Eli Lilly And Company Use of pyrido`2,3-d pyrimidin derivatives for the treatment of human cytomegalovirus infections
WO2003033477A1 (en) * 2001-10-12 2003-04-24 Warner-Lambert Company Llc Alkynlated fused ring pyrimidine compounds as matrix metalloprotease-13 inhibitor
EP1434585A1 (en) 2001-10-12 2004-07-07 Warner-Lambert Company LLC Alkyne matrix metalloproteinase inhibitors
MXPA04003008A (es) * 2001-10-12 2004-07-16 Warner Lambert Co Compuestos pirimidina de anillo fusionado alquinilado como inhibidores de metaloproteasa 13 de la matriz.
US6962922B2 (en) * 2001-10-12 2005-11-08 Warner-Lambert Company Llc Alkynylated quinazoline compounds
US20040043959A1 (en) * 2002-03-04 2004-03-04 Bloom Laura A. Combination therapies for treating methylthioadenosine phosphorylase deficient cells
US6894057B2 (en) * 2002-03-08 2005-05-17 Warner-Lambert Company Oxo-azabicyclic compounds
US6747147B2 (en) 2002-03-08 2004-06-08 Warner-Lambert Company Oxo-azabicyclic compounds
US20040006077A1 (en) * 2002-06-25 2004-01-08 Bernard Gaudilliere Thiazine and oxazine derivatives as MMP-13 inhibitors
EP1534274A1 (en) * 2002-07-17 2005-06-01 Warner-Lambert Company LLC Combination of an allosteric alkyne inhibitor of matrix metalloproteinase-13 with celecoxib or valdecoxib
WO2004113337A1 (en) * 2003-06-25 2004-12-29 Pfizer Inc. Convergent synthesis of a garft inhibitor containing a methyl substitute thiophene core and a tetrahydropyrido`2,3-d! pyrimidine ring system and intermediates therefor
WO2004113328A1 (en) * 2003-06-25 2004-12-29 Pfizer Inc. Convergent asymmetric synthesis route to produce a key intermediate towards the synthesis of a garft inhibitor
WO2005016926A1 (en) * 2003-08-19 2005-02-24 Warner-Lambert Company Llc Pyrido [3,4-d] pyrimidine derivatives as matrix metalloproteinase-13 inhibitors
US7420059B2 (en) 2003-11-20 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company HMG-CoA reductase inhibitors and method
KR101203328B1 (ko) 2005-04-26 2012-11-20 화이자 인코포레이티드 Ｐ-카드헤린 항체
HN2006031275A (es) 2005-09-07 2010-10-29 Amgen Fremont Inc Anticuerpos monoclonales humanos para la quinasa-1 tipo receptor de activina
EA200802058A1 (ru) 2006-05-09 2009-06-30 Пфайзер Продактс Инк. Производные циклоалкиламинокислот и их фармацевтические композиции
US8252804B2 (en) 2008-10-01 2012-08-28 Duquesne University Of The Holy Spirit Selective proton coupled folate transporter and folate receptor, and GARFTase inhibitor compounds and methods of using the same
AP3649A (en) 2011-02-23 2016-03-18 Lupin Ltd Heteroaryl derivatives as alpha7 nachr modulators
GB201103578D0 (en) 2011-03-02 2011-04-13 Sabrepharm Ltd Dipyridinium derivatives
EP2729455B1 (en) 2011-07-05 2016-09-14 Lupin Limited Biaryl derivatives as nachr modulators
CA2850610A1 (en) * 2011-09-29 2013-04-04 Dennis C Liotta Sphingosine analogs, compositions, and methods related thereto
IN2014MN01756A (fi) 2012-03-06 2015-07-03 Lupin Ltd
GB2543550A (en) 2015-10-21 2017-04-26 Hox Therapeutics Ltd Peptides
CN115634228B (zh) * 2021-07-20 2024-03-19 首都医科大学 嘌呤合成抑制剂在制备治疗缺血和缺血再灌注损伤药物中的应用

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AT376436B (de) * 1982-11-05 1984-11-26 Laevosan Gmbh & Co Kg Verfahren zur herstellung neuer thiophen-2carbons[urederivate und pharmazeutisch vertraeglicher saeure- oder basenadditionssalze davon
US5026851A (en) * 1985-03-08 1991-06-25 The Trustees Of Princeton University Pyrido[2,3-]pyrimidine derivatives
US4684653A (en) * 1985-03-08 1987-08-04 The Trustees Of Princeton University Pyrido(2,3-d)pyrimidine derivatives
US4927828A (en) * 1985-03-08 1990-05-22 The Trustees Of Princeton University Diastereoisomeric tetrahydropyrido-(2,3,d) pyrimidine derivatives
US4831037A (en) * 1987-04-20 1989-05-16 The Trustees Of Princeton University 4 (3H)-oxo-5,6,7,8-tetrahydropyrido-(2,3-d)pyrimidine derivatives
US4988813A (en) * 1986-10-20 1991-01-29 The Trustees Of Princeton University Process for the preparation of fused pyridine compounds
US4895946A (en) * 1987-10-26 1990-01-23 The Trustees Of Princeton University Process for the preparation of fused pyridine compounds
US4889859A (en) * 1988-02-05 1989-12-26 The Trustees Of Princeton University Pyrido[2,3-d]pyrimidine derivatives
US4882333A (en) * 1988-05-25 1989-11-21 The Trustess Of Princeton University N-(5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl-alkanoyl)-glutamic acid derivatives
US4882334A (en) * 1988-05-25 1989-11-21 The Trustees Of Princeton University N-(5,6,7,8-tetrahydropyrido]2,3-d]pyrimidin-6-ylethl-thineyl-and furylcarbonyl)-glutamic acid derivatives
DK172753B1 (da) * 1988-05-25 1999-06-28 Lilly Co Eli N-(5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3--d]pyrimidin-6-yl-alkanoyl)-glutaminsyrederivater, deres anvendelse, farmaceutiske præparat
US4871746A (en) * 1988-05-31 1989-10-03 The Trustees Of Princeton University N-[N-(tetrahydropyrido[2,3-D]pyrimidinylmethyl)-aminomethylbenzoyl]glutamic acid derivatives as neoplastic growth inhibitors
US4883799A (en) * 1988-06-29 1989-11-28 The Trustees Of Princeton University N-(4-(1-hydroxy-3-(5,6,7,8-tetrahydropyrido(2,3,-d)-pyrimidin-6-yl)prop-2-yl)benzoyl)glutamic acid derivatives
EP0438261A3 (en) * 1990-01-16 1992-02-26 Takeda Chemical Industries, Ltd. Condensed heterocyclic glutamic acid derivatives, their production and use
IL99500A0 (en) * 1990-09-17 1992-08-18 Agouron Pharma Naphthalene compounds,processes for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing the same
US5217974A (en) * 1991-03-29 1993-06-08 Eli Lilly And Company Method for treating gar-transformylase tumors in mammals and reducing mammalian toxicity
US5223503A (en) * 1991-04-29 1993-06-29 Eli Lilly And Company 6-substituted pyrido[2,3-d]pyrimidines as antineoplastic agents
DE69216509T2 (de) * 1991-08-12 1997-05-28 Takeda Chemical Industries Ltd Kondensierte Pyrimidinderivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Antitumormittel
US5969136A (en) * 1992-10-15 1999-10-19 Eli Lilly And Company Cyclization for preparing antifolate compounds
PT674516E (pt) * 1992-12-16 2000-05-31 Agouron Pharma Compostos de 5-tiapirimidinona e 5-selenopirimidinona substituidos antiproliferativos

Also Published As

Publication number Publication date
KR100380610B1 (ko) 2003-08-27
US5608082A (en) 1997-03-04
RU2152945C2 (ru) 2000-07-20
FI970317A0 (fi) 1997-01-24
PT773943E (pt) 2002-01-30
AU697138B2 (en) 1998-09-24
WO1996003406A1 (en) 1996-02-08
SI0773943T1 (en) 2001-12-31
CN1394857A (zh) 2003-02-05
NZ290703A (en) 1998-11-25
CN1091770C (zh) 2002-10-02
DE69522945T2 (de) 2002-03-28
TW432062B (en) 2001-05-01
ES2162933T3 (es) 2002-01-16
NO970349D0 (no) 1997-01-27
CA2195420A1 (en) 1996-02-08
AU3151795A (en) 1996-02-22
ATE206122T1 (de) 2001-10-15
NO970349L (no) 1997-03-12
EP0773943A1 (en) 1997-05-21
US5646141A (en) 1997-07-08
EP0773943B1 (en) 2001-09-26
FI970317A7 (fi) 1997-03-05
DE69522945D1 (de) 2001-10-31
CN1154110A (zh) 1997-07-09
JPH10503762A (ja) 1998-04-07
NO308248B1 (no) 2000-08-21
MX9700675A (es) 1997-04-30
DK0773943T3 (da) 2002-03-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI112079B (fi) 2-(2-amino-4-okso-tetrahydropyrido[2,3-d]-pyridiini- ja pyrimido[5,4-b][1,4]tiatsin-6-yyli)etyyli-4-metyylitien-2-yyli-L-glutamiinihappojohdannaisia
KR910001136B1 (ko) 축합 이미다조피리딘 유도체의 제조방법
EP1399444B1 (fr) Composes heterocycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment comme anti-bacteriens
AU612331B2 (en) 2-substituted-e-fused-(1,2,4)triazolo(1,5-c)pyrimidines pharmaceutical compositions
US6303613B1 (en) Aminopyrimidine derivatives, processes for their preparation, compositions containing them and their use as pharmaceuticals
EP0150255A2 (en) Pyrrolo[1,2-a]imidazole and imidazo[1,2-a]pyridine immunomodulators
CA1254207A (en) THERAPEUTICALLY USEFUL IMIDAZO¬1,2-.alpha.|PYRIDINE DERIVATIVES
EP0082023A2 (en) Thienopyrimidine derivatives, their preparation and their medical use
EP3080119B1 (en) Tetrahydroimidazopyridine derivatives as modulators of tnf activity
DK164669B (da) 2- eller 3-arylsubstituerede imidazooe1,2-aaapyridiner samt fremgangsmaader til fremstilling deraf
SK6012002A3 (en) Imidazole derivative as phosphodiesterase vii inhibitor, use thereof and pharmaceutical composition containing the same
CS219256B2 (en) Method of making the derivative of the imidazothienpyrimidine
US5723607A (en) Compounds useful as antiproliferative agents and GARFT inhibitors
CN116568675A (zh) 作为cxcr4调节剂的环状异硫脲衍生物
PL145927B1 (en) Method of obtaining novel 1,1-alkanodiole dicarboxylates
Santagati et al. Synthesis and Activity of Phenyl Derivatives Containing 5, 6-Dimethylthieno [2, 3-d] pyrimidin-4 (1H)-one or 4H-Pyrimido [5, 4-b] indol-4-one Heterocyclic System as Potential Non-steroidal Anti-inflammatory Drugs
DE69432801T2 (de) Verbindungen die als antiproliferierende mittel und garft inhibitoren verwendbar sind
EP0025643B1 (en) Oxo-pyrido(1,2-a)thienopyrimidine compounds, processes for their production, and pharmaceutical compositions containing said compounds
Bhattacharya et al. Studies on the synthesis of furo [3, 2-d] pyrimidine C-nucleosides: new inosine analogues with antiprotozoan activity
WO2001003644A2 (en) Pyrazolopyrimidinone derivatives conjugated to thiophene moieties or benzo [fused] 5-membered heterocycles for erectile dysfunction
JPH02289574A (ja) 選択的なアデノシンレセプター化合物
GB2181129A (en) 9-(substituted thio)-4h-pyrido1,2-apyrimidin-4-one derivatives, their manufacture and us
JPS61236779A (ja) ３環式化合物
CS258500B2 (cs) Způsob výroby 4-methyl-e-methyleulfinyl-thieno[3,2-b]pyrid-7(4K)-onu
HK1052341A (en) Compounds useful as antiproliferative agents and garft inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired