FI106119B - Menetelmä D-vitamiiniamidijohdannaisten valmistamiseksi ja välituotteita - Google Patents

Description

1 106119

Menetelmä D-vitamiiniamidijohdannaisten valmistamiseksi ja välituotteita Käsillä oleva keksintö kohdistuu uusien D-vitamii-* 5 nianalogien, täsmällisemmin la-hydroksi-D3-vitamiiniana- logien valmistukseen, joilla on muunnettu sivuketju 17-asemassa ja jotka omaavat solua moduloivaa aktiivisuutta.

D3-vitamiinilla, joka on seuraavan kaavan mukainen, 10 -'νΛΛ/ ^U, 1 tl 1 \ K+Mj 15 «/' JL··· 1 0|

Is I

H 0'""^ 20 tiedetään hyvin olevan merkittävä osa kalsiumin metaboliassa, koska se edistää kalsiumin ja fosforin suoliad-sorptiota, pitää yllä riittäviä kalsiumin ja fosforin see-rumitasoja ja stimuloi kalsiumin liikkuvuutta luuneste-25 osastosta lisäkilpirauhasen hormonin läsnä ollessa.

Noin 20 vuotta sitten havaittiin, että D-vitamiinit läpikäyvät hydroksylaation in vivo, hydroksylaation 25-asemassa, joka ilmenee maksassa, ja hydroksylaation la-asemassa, joka ilmenee munuaisissa, ja tuloksena saatava 30 la,25-dihydroksimetaboliitti on biologisesti aktiivinen . aine. Tämä havainto johti monien D-vitamiinianalogien syn- teeseihin, joiden evaluointi osoitti, että hydroksyyliryhmät Ια-asemassa ja joko 24R- tai 25-asemassa olivat olennaisia yhdisteelle tai sen metaboliitille, jolla voitiin 35 osoittaa merkittävä vaikutus kalsiummetaboliaan. Kun edellisen perusteella tällaiset hydroksyyliryhmät esitetään 2 106119 normaalisti viime kädessä in vivo, ilmenee hydroksylaatio 24R- tai 25-asemassa pikemminkin helpommin kuin la-asemas-sa, on jo näin hydroksyloituneiden D-vitamiinianalogien käyttö osoittanut merkittävää etua niiden parannettujen 5 aktiivisuustasojen ja toimintanopeuden nojalla ja siksi, että ne eliminoituvat myöhemmin kehosta. On ymmärrettävä, että la-hydroksyloidut D-vitamiinijohdannaiset ovat erityisen edullisia potilaille, joilla on munuaisten vajaatoimintaa.

10 Esimerkkejä nykyisin käytössä olevista hydroksyloi- duista D-vitamiinianalogeista ovat luonnossa esiintyvä metaboliitti lo,25-dihydroksi-D3-vitamiini ja la-hydroksi-D3-vitamiini (joka 25-hydroksyloituu helposti in vivo). Muita raportoituja lupaavia yhdisteitä ovat edellisten 15 yhdisteiden la,24R-dihydroksi-D3- ja -D2-vitamiinianalogit sekä la,25-dihydroksianalogit, joissa on fluoriatomeja 24-, 26- ja/tai 27-asemissa (katso De Luca ja Schnoes Ann. Rev. Biochem. 52 (1983) 411 - 439 sekä De Luca et ai.,

Top. Curr. Chem. 83 (1979) 1 - 65).

20 Viime aikoina on havaittu, että luonnossa esiinty vällä metaboliitilla la, 25-hydroksi-D3-vitamiinilla on muitakin vaikutuksia solumetaboliaan. Näitä solua moduloivia vaikutuksia ovat solun kypsymisen ja erilaistumisen stimulointi (Tanaka et ai., Biochem. J. 204 (1982) 713 - 719; 25 Amento et ai., J. Clin. Invest. 73 (1984) 731 - 739;

Colston et ai., Endocrinology 108 (1981) 1083 - 1086; Abe et ai., Proc. Nat. Acad. Sei. 78 (1981) 4990 - 4994) sekä immunosuppressiiviset vaikutukset (esimerkiksi interleu-kiini II -tuotannon inhibointi) (Rigby, Immunology Today 9 30 (1988) 54 - 58). Aivan viime aikoina on havaittu la,25-di- hydroksi-Dj-vitamiinin immuunitehostusvaikutusta ja yhdis-teen on havaittu stimuloivan bakterisidisten happimetabo-liittien ja leukosyyttien kemotaktista vastetta (katso esimerkiksi Cohen et ai., J. Immunol. 136 (1986) 1049 - 35 1053) . On sinänsä tunnettua, että leukosyyteillä on pääosa kehon puolustuksessa useita infektioita vastaan (katso 3 106119 esimerkiksi Roitt, Brostoff ja Male, teos Immunology, 2. painos (1989), C. V. Mosby, St. Louis, osat 16.10 - 16.13 r ja 17.4 - 17.5) esimerkiksi kiinnittymällä ja hautaamalla alleen hyökkäävät organismit (kemotaktinen vaste) ja/tai 5 tuottamalla peroksidia ja/tai muita toksisia hapen metabo-liitteja. Tiedetään, että tätä vastetta voidaan myös stimuloida mitogeeneilla, kuten kokarsinogeenisilla forbali-estereillä ja γ-interferonilla, jotka eroavat paljon rakenteellisesti D-vitamiinianalogeista.

10 Näiden sellulaariseen metaboliaan aiheutuvien vai kutusten nojalla on la,25-dihydroksi-D3-vitamiinilla periaatteessa terapeuttista tehoa seuraavilla vaihtelevilla hoitoalueilla: psoriasis, tulehdus- ja autoimmuunisairaudet, neoplasiat ja hyperplasiat lisänä infektioiden kemo-15 terapiassa (inter alia bakteriaalisten, viraalisten ja fungaalisten) ja muut terapeuttiset modaliteetit, joissa mononukleaariset syöjäsolut ovat mukana, la,25-dihydroksi-D3-vitamiinia ja la-hydroksi-D3-vitamiinia on esitetty käytettäväksi verenpainetaudin (Lind et ai., Acta Med. Scand. 20 222 (1987) 423 - 427) ja diabetes mellituksen hoidossa (Inomata et ai., Bone Mineral 1 (1986) 187 - 192) ja on mainittu, että la, 25-dihydroksi-D3-vitamiini saattaa lisätä hiusten kasvua {Lancet 4.3.1989, s. 478) ja se voi olla hyödyllinen aknen hoidossa (Malloy et ai., Tricontinental 25 Meeting for Investigative Dermatology, Washington, 1989). Kuitenkin la, 25-dihydroksi-D3-vitamiinin ja la-hydroksi-D3-vitamiinin voimakkaat vaikutukset kalsiummetaboliaan normaalisti estävät tällaiset käytöt, koska annokset, jotka olisivat riittäviä saamaan esiin halutun solua moduloivan, 30 immunosuppressiivisen tai immunopotentoivan vaikutuksen, näyttävät johtavan ei-hyväksyttyyn hyperkalsemiaan. Tästä syystä on yritetty syntetisoida uusia analogeja, joilla on vähemmän vaikutuksia kalsiummetaboliaan, mutta joilla silti on halutut vaikutukset solun metaboliaan.

35 On olemassa raportteja uusista analogeista, joilla on ainakin kohtuullisessa määrin tämä toivottu aktiivi- 4 106119 suuksien ero. Niinpä yhdisteellä MC-903, joka on 22,23-tyydyttyraätön la,24R-dihydroksi-D3-vitamiinianalogi, jossa on syklopropyyliryhmä 24-asemassa kolestaanisivuketjun ’ tavanomaisen C25.27-konfiguraation sijasta, ja joka on klii-5 nisissä tutkimuksissa indikaationa psoriasiksen hoito, raportoidaan omaavan la,25-dihydroksi-D3-vitamiinin suuruusluokkaa olevan vaikutuksen solun kypsymiseen ja sillä on pienempi hyperkalseeminen vaikutus (Calverley, Tetrahedron 43 (1987) 4609 - 4619, sekä Holick, Arch. Dermatol.

10 125 (1989) 1692 - 1696) . Samanlaisia esityksiä on tehty la, 25-dihydroksi-D3-vitamiinianalogien, esimerkiksi yhdisteiden 22-oksa (Abe et ai., Endocrinology 124 (1989) 2645 - 2647), 24- ja 26-homo (Ostrem et ai., J. Biol.

Chem. 262 (1987) 14164 - 14171), 16-dehydro-23,24-etynyyli 15 (Zhou et ai., Blood 74 (1989) 82 - 93) ja 19-nor-10-dihyd-ro (Perlman et ai., Tetrahedron Lett. (1990) 1823 - 1824) kohdalla.

Näistä esityksistä näyttää olevan kuitenkin mahdotonta päätellä, millä yhdisteillä on solua moduloivaa ak-20 tiivisuutta (tai minkääntasoista tällaista aktiivisuutta) tai määrittää tekijöitä, jotka johtavat aktiivisuuksien erottumiseen solumodulaation ja kalsiummetabolian suhteen.

Samalla kun suurimmassa osassa tuloksia esitetään, että hydroksyyliryhmän mukanaolo kolestaanityyppisen sivuketjun 25 tai sen homologin loppua kohden on tarpeellinen yhdisteille osoittamaan merkittävää solua moduloivaa aktiivisuutta, niin Ostremin (esitetty edellä) löydökset osoittavat, että analogit, joilla on vain lyhyt, substituoimaton 17-aseman sivuketju (esimerkiksi isopropyyli tai sek-butyyli-homo-30 tai bis-homopregnaaneissa), omaavat melko merkittävää erottumista indusoivaa aktiivisuutta ja ne ovat tehokkaam- * > pia kuin vastaavat lyhytketjuiset yhdisteet, joissa on hydroksyyliryhmä sivuketjussa. Koska useat näistä yhdisteistä näyttävät osoittavan solua moduloivaa aktiivisuutta 35 samalla tasolla kuin la,25-dihydroksi-D3-vitamiini, niillä näyttää silti olevan merkittäviä vaikutuksia kalsiummeta- 5 106119 boliaan, joka aktiivisuus vähentyy vähintään kaksi suuruusluokkaa suhteessa la, 25-dihydroksi-D3-vitamiiniin. Täs-' tä syystä johtuen voi syntyä kumulatiivisia toksisuuson- gelmia, jos näitä yhdisteitä käytetään pitkäaikaisessa 5 terapiassa, erityisesti terapiassa, jossa tarvitaan systeemistä käyttöä, esimerkiksi hoidettaessa tulehdus- ja autoimmuunisairauksia, neoplasioissa ja hyperplasioissa tai oraalisessa terapiassa psoriasiksen hoitamiseksi.

Käsillä oleva keksintö perustuu siihen yllättävään 10 havaintoon, että useat Ια-hydroksi-D-vitamiinijohdannaiset sekä niiden 20-epianalogit, joissa 17-aseman sivuketju loppuu valinnaisesti N-substituoituun tai N,N-disubsti-tuoituun karbamoyyliryhmään, omaavat minimaalisen vaikutuksen kalsiummetaboliaan, mutta niillä on tehokas solua 15 moduloiva vaikutus, joka todistetaan esimerkiksi tuomalla esiin solujen erilaistuminen ja kypsyminen, lisääntymisen indusoiminen ja/tai aktivoimalla monosyyttejä (esimerkiksi kuten on arvioitu Styrtin et ai. menetelmällä, Blood 67 (1986) 334 - 342). Niinpä käsillä olevan keksinnön mukais-20 ten yhdisteiden on havaittu omaavan merkityksettömiä vai kutuksia seerumin kalsium- ja fosforitasoihin rotissa jopa 100 kertaisilla annoksilla lo, 25-dihydroksi-D3-vitamiinin tavanomaiseen annokseen nähden. Vastaavasti yhdisteillä on edullinen terapeuttinen solua moduloiva ja kalseemisen 25 aktiivisuuden suhde.

Käsillä olevan keksinnön mukaisten yhdisteiden lisäetu on se, että niillä on erittäin alhainen affiniteetti suolen lo,25-dihydroksikolekalsiferolireseptoriin.

Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti 30 käyttökelpoisten, yleisten kaavojen (I) ja (II) mukais- - ten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on soluja moduloivaa aktiivisuutta, 35 6 106119 R* o jf {I) 10 R 4 ο"Λ>''^'ΛνΟ R 1 fi* vV«' 15 o v- (ii) 20 1^1 r'o'^^^or4 (joissa Y on alkyleeni- tai alkenyleeniryhmä, joka sisältää korkeintaan 4 hiiliatomia; R1 ja R2, jotka voivat olla 25 samoja tai erilaisia, ovat vetyatomeja tai alempia alkyy-li- tai sykloalkyyliryhmiä, tai jotka yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, muodostavat heterosykli-sen ryhmän; ja R3 ja R4, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat vetyatomeja tai metabolisesti labiileja, 30 eetteröityviä tai esteröityviä O-suojaryhmiä).

·. On ymmärrettävä, että kaavat (I) ja (II) käsittävät yhdisteet, joilla on luonnon D-vitamiinijohdannaisten 20R-konfiguraatio, epi-D-vitamiinijohdannaisten 20S-konfigu-raatio sekä näiden kahden isomeerin seokset. Kaavat käsit-35 tävät myös aktiiviset yhdisteet, joissa R3 ja R4 ovat vety- 7 106119 atomeja, ja prekursorit niitä varten, joissa R3 ja R4 ovat O-suojaryhmiä, vaikkakin tällaiset prekursorit itsessään saattavat olla aktiivisia, jolloin O-suojaryhmä tai -ryhmät ovat metabolisesti labiileja.

5 Se tosiasia, että aktiiviset yhdisteet (I) ja (II), jotka omaavat isohkoja D-vitamiinin kaltaisia 17-aseman sivuketjuja, joissa ei ole 24- tai 25-hydroksyyliryhmää ja jotka useissa tapauksissa eivät kykene hydroksyloitumaan näissä asemissa, omaavat solua moduloivaa aktiivisuutta, 10 on odottamatonta aiempien tämän alueen havaintojen valossa, koska näissä on esitetty vahvasti tällaisen hydroksyy-liryhmän välttämättömyyttä. Se havainto, että kaavojen (I) ja (II) mukaisilla aktiivisilla yhdisteillä on hyödyllistä solua moduloivaa aktiivisuutta, on vieläkin yllättävämpää, 15 koska on raportoitu, että yhdisteillä, joilla on samanlainen sivuketju mutta joista puuttuu Ια-hydroksyyliryhmä, ei ole D-vitamiinin kaltaista aktiivisuutta ja ne ovat itse asiassa hyödyllisiä D-vitamiiniantagonisteina, koska ne estävät 25-hydroksylaation (katso US-patenttijulkaisu 20 4 217 288).

On myös havaittu (Sorensen et ai., Biochemical Pharmacology 39 (1990) 391 - 393), että edellä mainittu la, 24R-dihydroksi-D3-vitamiinianalogi MC-903, hapettuu in vivo vastaavaksi 24-oksoyhdisteeksi, ja että tämä metabo- 25 liitti osoittaa merkittävästi pienempää aktiivisuutta solun lisäkasvun ja erilaistumisen suhteen verrattuna MC-903 yhdisteeseen. Tässä esitetään, että 24-oksoryhmän mukanaolo käsittää deaktivointivaiheen solun modulointiaktiivi-suuden suhteen päinvastoin kuin meidän havaintomme liit- 30 tyen käsillä olevan keksinnön mukaisiin 24-okso- ja homo- v logisiin yhdisteisiin.

Lisäksi edellä esitettyihin syihin havaittu ero solua moduloivan aktiivisuuden ja kalseemisen aktiivisuuden välillä, joka on osoitettu olevan käsillä olevan kek 8 106119 sinnön mukaisilla aktiivisilla yhdisteillä, ei voinut olla ennalta arvattavissa solua moduloivaa aktiivisuutta omaaviin D-vitamiinianalogeihin liittyvästä tunnetusta tekniikan tasosta.

5 Aktiiviset kaavan (II) mukaiset 5,6-trans-(5E)-iso meerit, jotka ovat suuruusluokaltaan noin yhden kerran vähemmän aktiivisia kuin aktiiviset kaavan (I) mukaiset 5,6-cis-(5Z)-isomeerit solua moduloivan aktiivisuuden suhteen, ovat myös vähemmän aktiivisia seerumin kalsiumtasojen nos-10 tamisen suhteen ja niinpä ne omaavat merkittävää ja odottamatonta solua moduloivan aktiivisuuden ja kalseemisen aktiivisuuden eroa.

Edellä esitetyissä kaavoissa kuvattu ryhmä Y voi sisältää 0, 1 tai 2 kaksoissidosta ja voi olla esimerkiksi 15 kaavan - (RA)m- (R8)n- mukainen, jossa RÄ on -CH=CH-, R8 on -CH2-, m on 0, 1 tai 2 ja n on 0 tai kokonaisluku siten, että 2m + n = 1, 2, 3 tai 4. Y voi olla edullisesti C2.4-alkyleeniryhmä.

Kun kaavoissa (I) ja (II) esiintyvät R1 ja/tai R2 20 ovat alempia alkyyliryhmiä, voivat nämä olla esimerkiksi C^g-alkyyliryhmiä, kuten metyyli, etyyli, propyyli ja bu-tyyliryhmiä. Alemmat sykloalkyyliryhmät voivat sisältää esimerkiksi 3-8 hiiliatomia, esimerkiksi syklopropyyli-, syklopentyyli- ja sykloheksyyliryhmissä. Kun ryhmä R1R2N-25 edustaa heterosyklistä ryhmää, voi tämä sisältää esimerkiksi yhden tai useamman heteroatomin, joka voi olla o, N tai S, ja se voi käsittää yhden tai useamman renkaan, esimerkiksi 5 tai 6 rengasjäsentä, esimerkiksi kuten N:ään liittyvässä pyrrolyyli-, pyratsolyyli-, imidatsolyyli-, 30 indolyyli-, indatsolyyli-, purinyyli-, pyrrolidinyyli-, V imidatsolidinyyli-, pyratsolidinyyli-, piperidinyyli-, morfoliini-, tiatsolidinyyli- tai tiamorfoliiniryhmissä.

Kun R3 ja R4 tarkoittavat O-suojaryhmiä, voivat nämä olla sellaisia lohkeavia O-suojaryhmiä, jotka ovat ylei- 9 106119 sesti tunnettuja. Sopivia ryhmiä ovat eetteröityvät ryhmät, kuten silyyliryhmät (esimerkiksi tri (alempi alkyyli) silyyliryhmät, kuten trimetyylisilyyli, trietyylisilyyli, tri-isopropyylisilyyli tai t-butyylidimetyylisilyyli; sekä 5 alkyyli-aryylisilyyliryhmien seokset) , alemmat (esimerkiksi C^g) alkyyliryhmät, joissa voi olla valinnaisesti happiatomi, kuten metyyli, metoksimetyyli tai metoksietoksi-metyyli, sekä sykliset ryhmät, kuten tetrahydropyranyyli. Esteröityviä O-suojaryhmiä ovat alempi (esimerkiksi 10 alkanoyyli, kuten asetyyli, propionyyli, isobutyryyli tai pivaloyyli; aroyyli (sisältää esimerkiksi 7-15 hiiliatomia) , kuten bentsoyyli tai 4-fenyyliatsobentsoyyli; alempi alkaanisulfonyyli, kuten (valinnaisesti halogenoitu) metaani sulfonyyli; ja aseenisulfonyyli, kuten p-tolueenisul-15 fonyyli. Tällaiset O-suojatut johdannaiset ovat käyttökel poisia välituotteina valmistettaessa aktiivisia kaavojen (I) ja (II) mukaisia la,3S-dioleja, joissa R3 ja R4 ovat vetyatomeja, vaikka, kuten edellä on esitetty, kun O-suo-jaryhmät ovat metabolisesti labiileja in vivo, voidaan 20 tällaisia kaavojen (I) ja (II) mukaisia eettereitä ja es-tereitä käyttää suoraan terapiassa.

Keksinnön kohteena ovat täten myös yleisten kaavojen (I1) ja (II') mukaiset yhdisteet, jotka ovat käyttökelpoisia välituotteina patentti- vaatimuksen 1 mukai-25 sessa menetelmässä, « H1 yV-i' o JΓ d') 10 106119 R1 ,γΥ-»' 0 5 kJ---/ UI') 10 R*0'" (joissa Y on alkyleeni- tai alkenyleeniryhmä, joka sisältää korkeintaan 4 hiiliatomia; R1 ja R2, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat vetyatomeja tai alempia alkyy-li- tai sykloalkyyliryhmiä, tai jotka yhdessä typpiatomin 15 kanssa, johon ne ovat liittyneet, muodostavat heterosykli-sen ryhmän; ja R3 ja R4, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat O-suojaryhmiä).

Aktiivisten käsillä olevan keksinnön mukaisten yhdisteiden solua moduloiva aktiivisuus yhdessä niiden kal-‘20 seemisen vaikutuksen olennaisen puutteen kanssa tekevät niistä mielenkiintoisia (sekä yksin että lisäaineena) neo-plastisten sairauksien, erityisesti myelogeenisten leukemioiden yhteydessä. Niitä voidaan käyttää myös joko yksin tai lisäaineina infektion kemoterapiassa ja kaikissa muis-25 sa terapeuttisissa modaliteeteissä, joissa mononukleaari-set syöjäsolut ovat mukana, esimerkiksi hoidettaessa luu-sairauksia (esimerkiksi osteoporoosi), autoimmuunisairauksia, käänteishyljintää, siirteen hyljintää ja tulehdussairauksia, neoplasiaa ja hyperplasiaa, kuten psoriasista. 30 Akne, kaijuus, ihon vanheneminen (käsittäen myös valon aiheuttaman vanhenemisen), verenpainetauti, nivelreuma ja astma ovat muita tiloja, joita voidaan hoitaa aktiivisilla käsillä olevan keksinnön mukaisilla yhdisteillä; keksintö käsittää näiden yhdisteiden käytön tällaisten tilojen te-35 rapiassa tai profylaksiassa sekä lääkkeiden valmistuksessa tällaista hoitoa tai profylaksiaa varten.

“ 106119

Me uskomme, että kaavojen (I) ja (II) mukaiset aktiiviset 20R-isomeerit voivat olla edullisia hoidettaessa infektioita, esimerkiksi kombinaatioterapiana, kun taas aktiiviset 20S-epi-isomeerit voivat olla edullisia immuno-5 suppressiiviseen vaikutukseen liittyvissä käytöissä, esimerkiksi hoidettaessa autoimmuuni- ja tulehdussairauksia, nivelreumaa, astmaa, jne. Tätä näkökantaa tukee esimerkiksi Binderupin et ai. työ, joka liittyy 20-epi-D3-vitamiini-analogeihin, josta on raportoitu julkaisussa Biochemical 10 Pharmacology 42 (8) (1991) 1569 - 1575.

Aktiivisia käsillä olevan keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan formuloida annettaviksi millä tahansa sopivalla tavalla, esimerkiksi oraalisesti (käsittäen myös sublinguaalisen käytön), parenteraalisesti, rektaalisesti 15 tai inhaloimalla; näin formuloidut farmaseuttiset koostumukset ovat osa tätä keksintöä.

Oraalisesti annettavat koostumukset voivat haluttaessa sisältää yhtä tai useampaa fysiologisesti yhteensopivaa kantajaa ja/tai täyteainetta ja voi olla kiinteä tai 20 nestemäinen. Koostumukset voivat olla missä tahansa sopivassa muodossa, kuten esimerkiksi tabletit, päällystetyt tabletit, kapselit, lääketabletit, vesi- tai öljysuspen-siot, liuokset, emulsiot, siirapit, eliksiirit ja kuiva-tuotteet, jotka sopivat sekoitettavaksi veden tai muun 25 sopivan nestevehikkelin kanssa ennen käyttöä. Koostumukset voidaan valmistaa edullisesti annosyksikkömuodossa. Käsillä olevan keksinnön mukaiset tabletit ja kapselit voivat haluttaessa sisältää tavanomaisia ainesosia, kuten sidonta-aineita, esimerkiksi siirappia, akaasiaa, gelatiinia, 30 sorbitolia, traganttia tai polyvinyyli-pyrrolidonia; täy-' J teaineita, esimerkiksi laktoosia, sokeria, maissitärkke- lystä, kalsiumfosfaattia, sorbitolia tai glysiiniä; liu-kastusaineita, esimerkiksi magnesiumstearaattia, talkkia, polyetyleeniglykolia tai silikaa; hajotusaineita, esimer-35 kiksi perunatärkkelystä; tai hyväksyttyjä kostutusaineita, 12 106119 kuten natriumlauryylisulfaattia. Tabletit voidaan päällystää sinänsä hyvin tunnetuilla menetelmillä.

Nestemäiset koostumukset voivat sisältää tavanomaisia lisäaineita, kuten suspendointiaineita, esimerkiksi 5 sorbitolisiirappia, metyyliselluloosaa, glukoosi/sokeri- siirappia, gelatiinia, hydroksimetyyliselluloosaa, karbok-simetyyliselluloosaa, alumiinistearaattigeeliä tai hydrat-tuja syötäviä rasvoja; emulgointlaineita, esimerkiksi lesitiiniä, sorbitaanimono-oleaattia tai akaasiaa; vedettö-10 miä vehikkeleitä, jotka voivat sisältää syötäviä öljyjä, esimerkiksi kasvisöljyjä, kuten arakisöljyä, manteliöljyä, fraktioitua kookosöljyä, kalanmaksaöljyjä, öljyisiä este-reitä, kuten polysorbaatti 80:ä, propyleeniglykolia tai etyylialkoholia; ja säilöntäaineita, esimerkiksi metyyli-15 tai propyyli-p-hydroksibentsoaatteja tai sorbiinihappoa.

Nestemäiset koostumukset voivat olla sopivasti kapseloituja esimerkiksi gelatiiniin, jolloin tuote voidaan antaa annosyksikkömuodossa.

Parenteraalisesti annettavat koostumukset voidaan 20 formuloida käyttäen injektoitavaa nestekantajaa, kuten steriiliä pyrogeenitöntä vettä, steriiliä peroksiditonta etyylioleaattia, vedetöntä alkoholia tai propyleeniglykolia tai vedetöntä alkoholi/propyleeniglykoliseosta ja ne voidaan injektoida intravenoosisesti, intraperitoneaali-25 sesti tai intramuskulaarisesti.

• »

Rektaalisesti annettavat koostumukset voidaan formuloida käyttämällä tavanomaista peräpuikkomassaa, kuten kookosvoita tai muuta glyseridiä.

Inhaloiden annettavat koostumukset formuloidaan 30 sopivasti ponneainejakeluun, esimerkiksi mitatussa annosti muodossa, esimerkiksi suspensiona ponnekaasussa, kuten halogenoidussa hiilivedyssä, joka on täytetty aerosolisäi-liöön, jossa on mittaava päästöventtiili.

Voi olla edullista käyttää antioksidanttia, esimer-35 kiksi askorbiinihappoa, butyloitua hydroksianisolia tai 13 106119 hydrokinonia käsillä olevan keksinnön mukaisissa koostumuksissa parantamaan niiden säilytysikää.

Kun mitä tahansa edellä mainituista koostumuksista valmistetaan annosyksikkömuodossa, voivat nämä sisältää 5 esimerkiksi 0,05 - 250 μg, esimerkiksi 0,1 - 50 μg, aktiivista käsillä olevan keksinnön mukaista yhdistettä yksik-köannosmuotoa kohden. Koostumukset voivat haluttaessa sisältää yhtä tai useampaa toista aktiivista ainesosaa.

Sopiva päivittäinen annos aktiivista käsillä olevan 10 keksinnön mukaista yhdistettä voi olla esimerkiksi 0,1 -500 μg, esimerkiksi 0,2 - 100 μg, päivää kohden riippuen tekijöistä, kuten hoidettavan tilan vakavuus ja ikä, paino ja potilaan tila.

Käsillä olevan keksinnön mukaisia yhdisteitä voi-15 daan valmistaa seuraavilla menetelmillä: A) Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa isomeroimalla vastaava kaavan (II) mukainen 5,6-transyh-diste, jonka jälkeen tarvittaessa ja/tai haluttaessa poistetaan mikä tahansa O-suojaryhmistä. Isomerointiin voidaan 20 vaikuttaa esimerkiksi käsittelemällä jodilla, disulfidilla tai diselenidillä tai säteilyttämällä ultraviolettivalolla, edullisesti triplettiherkentäjän läsnä ollessa. Kaavan (II) mukaiset Ια-hydroksiyhdisteet voidaan itsessään valmistaa hapettamalla vastaava 1-substituoimaton 5,6-trans-. 25 yhdiste käyttämällä seleniittiesteriä tai seleenidioksidia tai seleenihappoa alkoholin läsnä ollessa, kuten esimerkiksi GB-hakemusjulkaisussa 2 038 834 on kuvattu, jonka julkaisun sisältö liitetään tähän hakemukseen viitteenä. 1-substituoimaton 5,6-transyhdiste voidaan haluttaessa 30 valmistaa vastaavan 5,6-cis-vitamiinijohdannaisen in situ isomeroinnilla hapetusolosuhteissa.

B) Kaavojen (I) ja (II) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa antamalla kaavan (III) mukaisen yhdisteen 106119 14

cfcT

ά ‘ r<q"’\-/>OR3 (jossa R3 ja R4 ovat, kuten edellä on määritelty, ja X on okso tai fosforanylidiiniryhmä, metalloitu silaani- tai 10 sulfoniryhmä, - (CH2) aL-ryhmä, jossa a on 0, 1 tai 2 ja L on poistuva ryhmä, esimerkiksi sulfonaattiesteriryhmä, kuten alempi alkyylisulfonyylioksi, alempi fluorialkyylisulfo-nyylioksi tai aryylisulfonyylioksi tai edullisemmin halo-geeniatomi, kuten kloori, bromi tai jodi, tai - (CH2) bR5-ryh-15 mä, jossa b on 0, 1, 2 tai 3 ja R5 on syaaniryhmä tai este-röity karboksyyli- tai tiokarboksyyliryhmä, kuten alkoksi-karbonyyli-, aralkoksikarbonyyli-, aryylioksikarbonyyli-, alkyylitiokarbonyyli-, aralkyylitiokarbonyyli- tai aryyli-tiokarbonyyliryhmä) tai vastaavan 5,6-transyhdisteen rea-20 goida yhden tai useamman reagenssin kanssa, joka hyödyttää saamaan aikaan halutun sivuketjuamidiryhmityksen, jonka jälkeen tarvittaessa ja/tai haluttaessa poistetaan mikä tahansa O-suojaryhmistä. On ymmärrettävä, että talla tavalla saatu kaavan (II) mukainen yhdiste voidaan halut-25 taessa konvertoida kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi iso-meroinnilla, kuten prosessissa (A) on kuvattu.

Prosessin (B) mukaiset reaktiot, joita voidaan käyttää valmistettaessa kaavan (I) tai (II) mukaisia yhdisteitä, joissa Y on a1ky1eeniryhmä, käsittävät: 30 Bl) Yhdisteen (III), jossa X on on - (CH2)aL-ryhmä, ‘ kuten edellä on kuvattu, tai sen 5,6-transisomeerin reak- tio metalloidun tai dimetalloidun kaavan (IV) mukaisen amidin suolan 35 CH3 · CO · NR3R2 (IV) 15 106119 (jossa R1 ja R2 ovat kuten edellä on määritelty), esimerkiksi alkalimetallisuolan, kuten litiumsuolan, joka on valmistettu reaktiossa emäksen, kuten litiumdi-isopropyy-liamidin, kanssa.

1 5 B2) Yhdisteen (III), jossa X on on - (CH2)bR5-ryhmä, kuten edellä on kuvattu, tai vastaavan 5,6-transisomeerin reaktio konvertoitaessa esteriksi, tioesteriksi tai syaa-niryhmä R5 halutuksi amidiryhmäksi, esimerkiksi esterin tai tioesterin suoralla aminolyysillä, tai epäsuorasti vastaa-10 van vapaan hapon kautta, joka on saatu esterin, tioesterin tai nitriilin hydrolyysillä, tai siitä saadun happohalidin kautta. On ymmärrettävä, että kaavan (III) mukaiset nit-riilit voidaan osittain hydrolysoida suoraan yhdisteiksi (I), joissa sekä R1 että R2 ovat vetyatomeja.

15 B3) Yhdisteen (III), jossa X on on - (CH2)aL-ryhmä, kuten edellä on kuvattu, tai sen 5,6-transisomeerin reaktio reagenssin kanssa, joka ottaa käyttöön yksihiilisen fragmentin (esimerkiksi metallisyanidi tai metalloitu tri-tiaani), ja näin saadun ryhmän konversio halutuksi -CON-20 R^2-ryhmäksi, kuten esimerkiksi prosessin (B2) kohdalla on kuvattu.

Prosessin (B) mukainen reaktio, jota voidaan käyttää kaavojen (I) ja (II) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Y on alkenyleeniryhmä, käsittää: " 25 B4) Yhdisteen (III), jossa X on oksoryhmä, tai sen 5,6-transisomeerin reaktio Wittigin tyyppisen reaktion mukaan, esimerkiksi kaavan (V) mukaisen fosforaanin kanssa (Rc)3P=CH- (Yx)p-Rd (V) 30 (jossa Y1 on alkyleeni- tai alkenyleeniryhmä, jossa on jopa 2 hiiliatomia; p on 0 tai 1; Rc on hydrokarbyyliryhmä, esimerkiksi alkyyli- tai aralkyyliryhmä, tai aryyliryhmä, kuten fenyyli; ja R° on aminokarbonyyliryhmä -CONRxR2, kuten 35 edellä on määritetty, tai siksi konvertoituva prekursori- 16 106119 ryhmä, kuten esteri-, tioesteri- tai syaaniryhmä), jonka , jälkeen tarpeen mukaan konversiolla tuotetaan ryhmä -CON- R1R2. Vaihtoehtoisesti voidaan fosforaani (V) korvata me-talloidulla silaanilla (Rc) 3Si-CHM-(Y1) p-RD tai metalloidul-5 la sulfonilla RcS02-CHM-(Y1) p-R° (jossa Rc, RD, Y1 ja p ovat kuten edellä on määritelty ja M on metalliatomi, esimerkiksi alkalimetalli, kuten litium tai natrium), ja tätä jälkimmäistä reaktiota seuraa välituotteen hydroksi-sulfo-nin pelkistys vaaditun kaksoissidoksen muodostamiseksi, 10 esimerkiksi käyttämällä natriumamalgaamia. Käänteisesti näihin reaktioihin voidaan vaikuttaa käyttämällä kaavan (III) mukaista yhdistettä, jossa X on fosforanylidiiniryh-mittymä =P(Rc)3j tai vastaavaa kaavan (III) mukaista metal-loitua johdannaista, jossa X on -Si(Rc)3 tai -S02Rc (jossa 15 Rc on kuten edellä on määritelty), kaavan HCO-(Y1)p-Rc> mukaisen aldehydin kanssa (jossa p, RD ja Y1 ovat kuten edellä on määritelty) .

Kaavan (III) mukaiset yhdisteet, joissa on luonnon D-vitamiinijohdannaisten normaali 20-aseman konfiguraatio, 20 eli kaavan (lila) mukaiset yhdisteet

Clllaj

** 25 r'O

ja/tai niiden 5,6-transisomeerit voidaan valmistaa la-hyd-roksi-D2-vitamiinista tai sen O-suojatusta johdannaisesta 30 22,23-kaksoissidoksen hapettavalla lohkaisulla, D2-vitamii- I niyhdisteen ollessa edullisesti stabiloitu Diels Alder -dienofiiliadditiotuotteen muodostuksella, esimerkiksi rikkidioksidilla tai diasyyliatsoyhdisteellä, kuten GB-hakemusjulkaisussa 2 114 570 on kuvattu (julkaisun sisältö l7 106119 liitetään tähän hakemukseen viitteenä). Tällä tavalla voidaan saada 20S-yhdiste (lila), jossa X on oksoryhmä.

* Tällaiset yhdisteet (lila) tai edullisemmin niiden dienofiiliadditiotuotteet voidaan isomeroida esimerkiksi 5 käsittelemällä miedolla emäksellä, esimerkiksi epäorgaanisella emäksellä, kuten natriumbikarbonaatilla tai tertiaa-risella orgaanisella emäksellä, kuten DABCO:11a (eli 1,4-diatsabisyklo[2.2.2]oktaani) tai DBU:lla (eli 1,8-diatsa-bisyklo[5.4.0]undek-7-eeni), jolloin saantona saadaan 20R-10 ja 20S-isomeerien seosta, josta puhdas 20R-epi-isomeeri, eli kaavan (Illb) mukainen yhdiste, c 11 ito

15 II

r^ct^-^or3 (jossa X on oksoryhmä) tai sen dienofiiliadduktiotuote 20 voidaan eristää kromatografisesti (esimerkiksi kuten Calverley on kuvannut julkaisussa Tetrahedron 43 (1987) 4609 - 4619). Vaihtoehtoisesti voidaan halutun epi-isomee-rin erotusta viivyttää myöhempään vaiheeseen synteesissä sen viimeiseen vaiheeseen asti.

·· 25 Oksoryhmä X näin saaduissa yhdisteissä (lila) ja (Illb) tai niiden seoksissa voidaan konvertoida pelkistämällä hydroksyyliryhmäksi ja sitten yhdisteiksi, joissa X on - (CH2) aL-ryhmä, jossa a on 0 ja L on halogeeniatomi esimerkiksi konversiolla sulfonaattiesteriksi (esimerkiksi 30 tosylaatiksi) ja tosylaattiryhmän nukleofiilinen korvaus - ; reaktiolla halidisuolan (esimerkiksi alkalimetallibromi- din) kanssa. Näiden viimeisten yhdisteiden (III) ja niiden 5,6-transisomeerien voidaan antaa reagoida esimerkiksi metallisyanidin kanssa, kuten prosessissa (B3) on kuvattu, 35 yhdisteen (III) tai sen 5,6-transisomeerin saamiseksi, 1β 106119 jossa X on - (CH2)bR5-ryhmä, jossa b on 0; syaaniryhmä R5 voidaan haluttaessa modifioida peräkkäin hydrolyysillä ja esteröinnillä.

Yhdisteet (III) ja niitä vastaavat 5,6-transisomee-5 rit, joissa X on - (CH2)bR5-ryhmä, jossa b on 1 tai 2 ja R5 on kuten edellä on määritelty, voidaan valmistaa antamalla yhdisteen (III) tai sen 5,6-transisomeerin, jossa X on - (CH2) aL-ryhmä, jossa a on 0 tai 1 ja L on kuten edellä on määritelty, reagoida etikkahapon esterin tai tioesterin 10 metalloidun johdannaisen kanssa, joka sisältää toisen etikkahapon karbanionisen ekvivalentin (esimerkiksi aseto-nitriilin metalloitu johdannainen) tai metalloidun malo-naattiesterin kanssa. Tässä viimeisessä tapauksessa reaktiotuote hydrolysoidaan osittain monoesterin saamiseksi, 15 joka voidaan dekarboksyloida lämmittämällä, jolloin saantona saadaan yhdistettä (III), jossa X on ryhmä -(CH2)bR5, jossa Rs on esteriryhmä.

Yhdisteet (III) ja niitä vastaavat 5,6-transiso-meerit, joissa X on ryhmä -(CH2)aL, jossa a on 1 tai 2 ja 20 L on kuten edellä on määritelty, voidaan valmistaa yhdisteistä (III) tai niiden 5,6-transisomeereistä, joissa X on - (CH2)bR5 ryhmä, jossa b on 0 tai 1 ja R5 on esteriryhmä, pelkistämällä esteri alkoholiksi, käyttämällä esimerkiksi litiumalumiinihydridiä, ja konvertoimalla hydroksyyliryhmä ·· 25 poistuvaksi ryhmäksi, kuten edellä on kuvattu.

Kaavan (III) mukaisten yhdisteiden 1-substituoimat-tomat analogit ja/tai niiden 5,6-transisomeerit voidaan myös valmistaa samalla tavalla D2-vitamiinista ja sitten niiden annetaan reagoida siten, että saadaan aikaan halut-30 tu sivuketjuamidiryhmä, ja laitetaan lo-hydroksylaatioon, ; kuten esimerkiksi edellä mainitussa GB-hakemusjulkaisussa t 2 038 834 on kuvattu, synteesin sopivassa vaiheessa.

Yleisesti joko 5,6-cis- tai 5,6-transgeometriaa voi olla läsnä missä tahansa vaiheessa, vaikkakin voi olla 35 edullista käyttää 5,6-transisomeerejä edellä mainitussa 19 106119 la-hydroksylaatiossa ja 22,23-kaksoissidoksen hapettavassa lohkeamisreaktiossa. 5,6-transgeometrian konversioon 5,6-' cis-muotoon vaikutetaan edullisimmin la-hydroksyyliryhmän käyttöönoton jälkeen.

5 la- ja/tai 3fi-asemissa olevat O-suojaryhmät voidaan poistaa esimerkiksi tavanomaisilla tavoilla, joita on kuvattu kirjallisuudessa. Niinpä esteröityvät asyyliryhmät voidaan poistaa emäksisellä hydrolyysillä käyttäen esimerkiksi alkalimetallialkoksidia alkanolissa. Eetteröityvät 10 ryhmät, kuten silyyliryhmät, voidaan poistaa happohydro-lyysillä tai käsittelemällä tetra-alkyyliammoniumfluori-deilla. Tällaisten happolabiilien mutta emässtabiilien suojaryhmien käyttö voi olla edullista, kun reagoitetaan kaavan (III) mukaisia yhdisteitä ja vastaavia 5,6-trans-15 isomeerejä ja/tai 1-substituoimattomia yhdisteitä vahvasti emäksisissä olosuhteissa, joita normaalisti käytetään ho-mologointivaiheissa, ja joita käytetään muodostamaan haluttu sivuketju.

Seuraavat käsillä olevaa keksintöä rajoittamattomat 20 esimerkit kuvaavat keksintöä. Kaikki lämpötilat ovat celsiusasteita .

Esimerkki 1 a) la,3S-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-9,10-seko-25-atsakolesta-5(E),7,10 (19)-trien-24-oni [kaava (II) 25 20R-isomeeri, R1 = R2 = CH3, R3 = R4 = (i-Pr)3Si, Y = -CH2CH2- ] la,3S-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-9,10-seko-20-p-tolueenisulfonyylioksimetyylipregna-5(E) ,7,10(19) -triee-niä [kaavan (III) mukaisen yhdisteen 5,6-transisomeeri; 30 R3 = R4 = (i-Pr) 3Si, X - tosyylioksi; NMR δ 7,5 (2H, d, j = - 8, aryyli) , 7,03 (2H, d, j - 8, aryyli) 6,16 & 5,6 (AB, j - 11, 6H, 7 H), 4,8 (2H, S, 19 H), 4,46 (1H, t, j = 11, 1 H), 4,33 - 3,5 (3H, m, 3H, 22 H), 2,36 (3H, s, aryyli CH3), 0,5 (3H, s, 18 H)) (170 mg) lämmitettiin refluksissa 35 asetonitriilissä (8 ml) , joka sisälsi ylimäärän litiumbro- 20 106119 midia (620 mg). 45 minuutin kuluttua seos jäähdytettiin, sitä laimennettiin vedellä ja uutettiin eetterillä. Eette-riuute puhdistettiin kromatografisesti silikageelillä, jolloin saatiin 490 mg vastaavaa 20-brominetyyliyhdistettä 5 [NMR δ 6,25 & 5,66 (ABq, j = 11, 6, 7 H) , 4,83 (2H, s, 19 H), 4,66 - 4,0 (2H, m, 1, 3 H) , 3,31 (2H, bs, 22 H), 0,55 (3H, s, 18 H) . UV 270 (21300), Amin 229 (4922)].

Liuos, jossa oli tätä yhdistettä (245 mg) heksametyylifos-foriamidissa (0,7 ml), lisättiin -78 °C:ssa liuokseen, 10 jossa oli N,N-dimetyyliasetamidin suolaa [valmistettu N,N-dimetyyliasetamidista (0,158 ml) ja litiumdi-isopropyyli-amidista (1,54 mmol) tetrahydrofuraanissa (4,6 ml)]. Reak-tioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan (30 minuuttia) , sitä sekoitettiin vielä 2 tuntia ja sitten sitä 15 käsiteltiin kyllästetyllä vesipitoisella ammoniumkloridillä ja sitten vedellä ja tuotetta uutettiin eetterillä. Kromatografisen puhdistuksen jälkeen saatiin otsikon mukaista yhdistettä (208 mg). NMR δ 6,4 & 5,76 (ABq, j = 11, 6, 7 H) , 4,93 (2H, s, 19 H), 4,76 - 4,01 (2H, m, 1, 3 H) , 20 3,31 & 2,9 (kumpikin 3H, s, N-CH3) , 0,55 (3H, s, 18 H). IR

ν^χ (CDClj) 1625 ern'1 (amidi). UV λ^χ 270 (23333), Amin 230 (7337).

b) la,3S-dihydroksi-9,10-seko-25-atsakolesta-5-ZE),7,10(19)-trien-24-oni [kaava (I) - 20R isomeeri, R1 -·· 25 R2 = CH3, R3 = R4 = H, Y = -CH2CH2-]

Edellä kohdassa (a) saatua tuotetta säteilytettiin 45 minuuttia bentseenissä (6 ml) , joka sisälsi fenatsiinia (12 mg). Tämän jälkeen liuotin poistettiin ja raakaa 5Z-yhdistettä käsiteltiin huoneenlämmössä 2 tuntia vesipitoi-30 sella tetrabutyyliammoniumfluoridilla (0,3 ml, IM) tetrahydrofuraanissa (1 ml). Sen jälkeen kun tuotetta oli lai-mennettu vedellä, se oli uutettu eetteriin ja puhdistettu preparatiivisella TLC:lla, saatiin otsikon mukaista yhdistettä (21 mg). NMR δ 6,36 & 5,98 (ABq, j = 11, 6, 7H) , 35 5,26 & 4,95 (kumpikin 1H, s, 19 H), 4,63 - 3,9 (2H, m, 1, ai 106119

3 H), 3,0 & 2,93 (kumpikin 3H, s, N-CH3) , 0,56 (3H, s, 18 H) . IR (CDC13) 3610 Se 3410 (OH) , 1630 cm*1 (amidi) . UV

λΜΧ 265 (18300) , Xmin 228 (10166) .

Esimerkki 2 5 a) 3S-hydroksi-20-(2-etoksikarbonyylietyyli)-9,10- sekopregna-5(E),7,10(19)-trieeni [kaavan (lila) mukaisen 5,6-transisomeerin 1-substituoimaton analogi - R4 = H, X = CH2CO· O· C2Hs] 3i5-asetoksi-20-hydroksimetyyli-9,10-sekopregna (5-10 E) , 7,10 (19)-trieenin rikkidioksidiadditiotuotetta (4,54 g) liuotettiin dikloorimetaaniin (40 ml), joka sisälsi 1,8-bis(dimetyyliamino)naftaleeniä (3,34 g), ja tätä seosta käsiteltiin -30 °C:ssa trifluorimetaanisulfonianhydridillä (3,812 g). Reaktioseosta sekoitettiin hiukan, sen annet-15 tiin lämmetä huoneenlämpöön, jäähdytettiin -30 °C:seen ja sitten sitä käsiteltiin liuoksella, jossa oli sodiodietyy-limalonaattia [valmistettu dietyylimalonaatista (8,32 g) ja natriumhydridistä (1,248 g)] tetrahydrofuraanissa (40 ml). Seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpöön ja sitä se-20 koitettiin 15 minuuttia. Sen jälkeen kun seokseen oli lisätty kyllästettyä, vesipitoista ammoniumkloridia, sitten vettä ja tuote oli uutettu eetteriin ja puhdistettu kroma-tografisesti, saatiin 3S-asetoksi-20-(2,2-dietoksikarbo-nyylietyyli)-9,10-sekopregna-5(E),7,10(19)-trieenin rikki- ·: 25 dioksidiadditiotuotetta 6R- ja 6S-yhdisteiden seoksena • · < (4,675 g) [NMR 6 5,1 - 4,26 (3H, m, 3, 6, 7 H), 4,0 (4H, q, j = 7, 0-CH2Me) , 3,46 (2H, bs, 19 H), 1,93 & 1,90 (kok. 3H, kumpikin s, asetyyli H), 0,63 & 0,56 (kok. 3H, s, 18 H)] .

30 Liuosta, jossa oli tätä tuotetta (4,475 g) etano- -.v lissa (15 ml), käsiteltiin etanolisella kaiiumhydroksidil lä (20 ml, 1 M) ja vedellä (0,380 ml). Seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 1,5 tuntia, sitten se laimennettiin vedellä ja tehtiin happamaksi ja tuote uutettiin eetteriin. 35 Näin saatu raaka monoesteri dekarboksyloitiin (ja rikki- 22 106119 dioksidi poistettiin 5,7,10(19)-trieenisysteemin saamiseksi) lämmittämällä 125 °C:ssa natriumbikarbonaattia (5 g) sisältävässä dimetyylisulfoksidissa (15 ml) 20 minuuttia. Seos jäähdytettiin, sitten se laimennettiin vedellä ja 5 tuote uutettiin eetteriin ja puhdistettiin kromatogra-fisesti, jolloin saatiin otsikon mukaista yhdistettä (2,22 g). NMR δ 6,16 & 5,56 (ABq, j = 11, 6, 7 H), 4,53 & 4,43 (kumpikin 1H, s, 19 H), 3,91 (2H, q, j = 7, 0-CH2Me) , 0,56 (3H, S, 18 H) . UV 272 (23600), Amin 231 (5645).

10 b) la,3£-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-20-(2-etok- sikarbonyylietyyli)-9,10-sekopregna-5(E),7,10(19)-trieeni [kaavan (lila) mukaisen yhdisteen 5,6-transisomeeri - R3 = R4 - (i-Pr) 3Si, X = CH2CO· O* C2H5]

Edellä saadun tuotteen (a) (2,568 g) annettiin rea- 15 goida seoksen kanssa, jossa oli tri-isopropyylisilyyliklo-ridia (1,214 g) ja imidatsolia (1,42 g) dikloorimetaanissa (5 ml), 3S-hydroksyyliryhmän konvertoimiseksi tri-isopro-pyylisilyylioksiryhmäksi. Tätä tuotetta 1,2-dikloorietaa-nissa (32 ml) hydroksyloitiin käsittelemällä seleenidiok-20 sidilla (0,51 g) asetonitriilissä (32 ml) ja N-metyylimor-foliini-N-oksidilla (2,47 g) dikloorimetaanissa (32 ml) GB-hakemusjulkaisun 2 038 834 mukaisesti, jolloin saatiin (kromatografisen puhdistamisen jälkeen) la-hydroksiyhdis-tettä (1,37 g) [NMR δ 6,3 & 5,7 (ABq, j = 11, 6, 7 H) , 25 4,9 & 4,8 (kumpikin 1H, s, 19 H), 4,63 - 3,7 (2H, m, 1, 3 H), 4,0 (2H, q, j = 7, 0-CH2Me) , 0,56 (3H, s, 18H) . UV 270 (23200), Xmin 229 (5068)]. Tämä tuote silyloitiin, kuten edellä on kuvattu, otsikon mukaisen yhdisteen saamiseksi (1,575 g). NMR δ 6,26 & 5,68 (ABq, j = 11, 6, 7 H) , 30 4,86 (2H, s, 19 H), 4,73 - 3,73 (2H, m, 1, 3 H), 4,0 (2H, V q, j = 7, 0-CH2Me) , 0,53 (3H, s, 18 H) . UV Xmax 270 (23600),

Xmln 228 (5053)] .

23 1 06119 c) la,3&-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-25,26,27-trinor-9,10-sekokolesta-5(E),7,10(19)-trien-24-oli [kaavan (Ilia) mukaisen yhdisteen 5,6-transisomeeri - R3 = R4 = (i-Pr) 3Si, X = CH2CH20H] 5 Liuos, jossa oli kohdasta (b) saatua tuotetta (350 mg) eetterissä (1 ml) , lisättiin 0 °C:ssa sekoitettuun liuokseen, jossa oli litiumalumiinihydridiä (100 mg) eetterissä (5 ml). Seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 0,5 tuntia, se jäähdytettiin 0 °C:seen, sitä käsiteltiin nat-10 riumsulfaatin vesiliuoksella ja tuote uutettiin eetteriin. Eetteri pestiin vedellä ja sitten suolavedellä ja poistettiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikon mukaista yhdistettä. NMR δ (CC14) : 6,21 & 5,63 (ABQ, 6 ja 7 H) ; 4,82 (s, 2H, 19 H); 4,66 - 3,98 (2H, m, 1, 3 H); 3,41 (bs, 2H, 24 H); 15 0,55 (s, 3H, 18 Me). UV (Et20) : 270 (23600), Xmin 229 (5714).

d) la,3S-di (tri-isopropyylisilyylioksi)-25,26,27-trinor-9,10-sekokolesta-5(E) ,7,10(19) -trien-24-bromidi [kaavan (lila) mukaisen yhdisteen 5,6-transisomeeri - R3 = 20 R4 = (i-Pr)3Si, X = CH2CH2Br]

Liuosta, jossa oli edellisessä vaiheessa (c) saatua alkoholia (330 mg) dikloorimetaanissa (4 ml) , jossa oli 1,8-bis(dimetyyliamino)naftaleenia (309 mg), käsiteltiin 3 minuuttia -40 °C:ssa trifluorimetaanisulfonianhydridillä ·: 25 (0,203 g). Tämän jälkeen seosta käsiteltiin liuoksella, m jossa oli natriumbromidia (1,03 g) ja tetrabutyyliammo-niumbromidia (0,01 g) vedessä (5 ml), ja sen annettiin lämmetä huoneenlämpöiseksi. 30 minuutin kuluttua reaktio-seos jaettiin dikloorimetaanin ja veden kesken. Orgaaninen 30 faasi eristettiin, pestiin laimealla rikkihapolla, konsen-- troitiin ja tuote puhdistettiin kromatografisesti, jolloin saatiin 0,26 g otsikon mukaista yhdistettä. NMR δ (CC14) : 6,06 & 5,6 (ABQ, 6, 7 H); 4,71 (s, 2H, 19 H); 4,63 - 4,0 (m, 2H, 1, 3 H); 3,21 (t, 2H, 24 H); 0,56 (s, 3H, 18 Me). 35 UV (Et20) : λΜΧ 270 (23600), Xmin 229 (6098).

24 1 061 19 e) la,3E-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-23,23-bis-homo-24-atsa-9,10-sekokolesta-5(E),7,10(19)-trien-24-one [kaava (II) - 20 isomeeri - R1 = R2 = CH3, R3 = R4 = (i-Pr)3-Si, Y = -CH2CH2CH2CH2-] 5 Edellisestä vaiheesta (d) saatua bromidia (0,18 g) heksametyylifosforamidissa (0,8 ml) käsiteltiin N,N-dime-tyyliasetamidin litiumsuolalla, kuten esimerkissä 1 (a) on kuvattu, ja näin saatiin otsikon mukaista yhdistettä (0,103 g). NMR δ (CCl4) : 6,26 & 5,66 (ABQ, 6, 7 H); 4,83 10 (s, 2H, 19 H); 4,66 - 4,01 (m, 2H, 1, 3 H); 2,93 & 2,91 (2s, kumpikin 3H, N-Me) ; 0,52 (s, 3H, 18 Me). UV (Et20) : λΜΧ 270 (23600) , Amin 229 (5526) .

f) la,3S-dihydroksi-23,23-bishomo-24-atsa-9,10-se-kokolesta-5(E),7,10(19)-trien-24-one [kaava (I) - 20R-iso- 15 meeri - R1 = R2 = CH3, R3 = R4 = H, Y = -CH2CH2CH2CH2-]

Edellisestä vaiheesta (e) saatua amidia (0,072 g) säteilytettiin fenatsiinin (0,018 g) läsnä ollessa ja sitten sitä desilyloitiin, kuten esimerkissä 1 (b) on kuvattu, ja näin saatiin otsikon mukaista yhdistettä (0,26 g).

20 NMR δ (CDC13) : 6,33 & 5,93 (ABQ, 6, 7, H); 5,26 & 4,93 (2, 1H, 19 H); 4,66 - 3,83 (m, 2H, 1, 3 H); 2,96 & 2,9 (2s, kumpikin 3H, N-Me); 0,53 (s, 3H, 18 Me). UV (EtOH) : 264 (18300) , Xmln 228 (10892) .

Esimerkki 3 ·; 25 a) la,3&-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-27-nor- »ti 9,10-sekokolesta-5(E),7,10(19),22,24-pentaeeni-26-karbok-syylihappo, 26-etyyliesteri [kaavan (lila) mukaisen yhdisteen 5,6-transisomeeri - X = (=CH-CH=CH-C02Et) , R3 = R4 = (i-Pr) 3Si] 30 Seosta, jossa oli la,3S-di(tri-isopropyylisilyyli- oksi)-9,10-sekopregna-5(E),7,10(19)-trieeni-20S-karboksal-dehydiä [kaavan (lila) mukaisen yhdisteen 5,6-transiso-meeri, R3 = R4 = (i-Pr)3Si, X = (=0)] (0,452 g) ja fosforaa- nia 4-trifenyylifosfonium-but-2-enoehapon etyyliesteristä 35 (1,2 g) kloroformissa (3 ml), refluksoitiin 4 tuntia, 25 106119 liuotin poistettiin tyhjössä ja tuote puhdistettiin kroma-tografisesti, jolloin saatiin otsikon mukaista yhdistettä (0,26 g). NMR δ (CCl4) : 7,26 - 6,41 (m, 1H, 25 H); 6,26 - 5,23 (m, 5H, 6, 7, 22, 23, 24 H); 4,7 (s, 2H, 19 H); 5 4,56 - 3,66 (m, 4H, 1, 3 H, esteri CH2) ; 0,55 (s, 3H, 18

Me) . UV (EtOH) : 264 (39695) .

b) la,3S-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-27-nor- 9,10-sekokolesta-5(Z),7,10(19),22,24-pentaeeni-26-karbok-syylihappo, 26 etyyliesteri [kaava (Ilia), X = (=CH-CH=CH- 10 COaEt) , R3 = R4 = (i-Pr)3Si]

Edellisestä vaiheesta (a) saatua esteriä (0,06 g) säteilytettiin fenatsiinin (0,015 g) läsnä ollessa, kuten esimerkissä 1 (b) on kuvattu, ja näin saatiin otsikon mukaista yhdistettä (0,053 g). NMR δ (CCl4) : 7,58 - 6,66 (m, 15 1H, 25 H); 6,41 - 5,33 (m, 5H, 6, 7, 22, 23, 24 H); 5,08 & 4,75 (2s, 1H n., 19 H); 4,58 - 3,75 (m, 4H, 1, 3 H, esteri CH2) ; 0,55 (S, 3H, 18 Me). UV /EtOH): 263 (46938).

c) la,3S-dihydroksi-27-nor-9,10-sekokolesta-5(Z),-7,10(19),22,24-pentaeeni-26-karboksyylihappo, 26 dimetyy- 2 0 liamidi [kaava (I) - 20R isomeeri, R1 = R2 = CH3, R3 = R4 = H, Y = -CH=CH-CH=CH-]

Edellisestä vaiheesta (b) saatu esteri (0,53 g) liuotettiin 1 M kaiiumhydroksidin etanoliliuokseen (2 ml) . Sen jälkeen kun seosta oli säilytetty huoneenlämmössä yön 25 yli, se laimennettiin vedellä, tuote uutettiin dikloorime- • · · taaniin, pestiin l-%:isen rikkihapon vesiliuoksella ja liuotin poistettiin. Raaka happo (0,046 g) liuotettiin dikloorimetaaniin (1 ml) ja sitä käsiteltiin disyklohek-syylikarbodi-imidillä (0,016 g) ja sitten dimetyyliamii-30 nilla (0,3 ml). Sen jälkeen kun reaktioseosta oli sekoi- - tettu huoneenlämmössä 30 minuuttia, se laimennettiin di-kloorimetaanilla, kiinteät ainekset poistettiin suodatta- - maila, suodos pestiin vedellä ja sitten 1-%risen rikkihapon vesiliuoksella ja liuotin poistettiin. Kromatografoin- 35 nin jälkeen saatiin otsikon mukaisen yhdisteen l,3-di(tri- 26 1 06119 isopropyylisilyylieetteriä) (0,019 g). NMR δ (CHCl3) : 7,33 - 6,6 (m, 1H, 25 H); 6,56 - 5,33 (m, 5H, 6, 7, 22, 23, 24 H); 5,06 & 4,73 (2s, 1H ea., 19 H); 4,6 - 3,83 (m, 2H, 1, 3 H); 2,98 (s, 6H, NMe) ; 0,53 (s, 3H, 18 Me). UV 5 (EtOH): λ^χ 265 (40671). Sen jälkeen kun silyyliryhmät oli poistettu esimerkissä 1 (b) kuvatulla tavalla, saatiin otsikon mukaista yhdistettä (0,008 g). UV (EtOH) : Amax 266 (36775).

Esimerkki 4 10 a) la,3S-di(tri-isopropyylisilyylioksi)-9,10-seko- kolaanihappo-5(Z),7,10(19)-trieeni [kaavan (lila) mukaisen yhdisteen 5,6-transisomeeri - R3 = R4 = (i-Pr)3Si, X = CH2-C02H]

Otsikon mukaista etyyliesteriä (valmistettu esimer-15 kin 2 (b) yhdisteestä valoisomeraatiolla, kuten esimerkissä 3 (b) on kuvattu) (140 mg) tetrahydrofuraanissa (0,5 ml) käsiteltiin 1 N etanolisella kaliumhydroksidilla (3 ml). Sen jälkeen kun reaktioseosta oli säilytetty huoneenlämmössä 3 tuntia, sen pH-arvoksi saatettiin 2 (lisät-20 tiin l-%:isen rikkihapon vesiliuosta) ja tuote uutettiin eetteriin, joka puolestaan pestiin vedellä ja suolavedellä. Eetterin poistamisen jälkeen saatiin otsikon mukaista yhdistettä 8123 mg) . IR (CC14) 3200 - 2400 (karboksyy-lin OH), 1720 cm'1 (karbonyyli) . NMR δ (CC14) : 12,33 (1H, 25 br, COOH); 6,03, 5,8 (2H, dd, 6, 7 H); 5,05, 4,75 (kumpikin 1H, s, 19 H); 5,01 - 4,0 (2H, m, 1, 3 H); 0,53 (3H, s, 18 H). UV (EtOH): λ*» 264 (18300).

b) Ν,Ν-pentametyleeni-lcc, 3S-dihydroksi-9,10-sekoko-lanamidi-5(Z),7,10(19)-trieeni [kaava (I) - 20R-isomeeri, 30 R3+R2 = -(CH2)5-, R3 = R4 = H, Y = -(CH2)2-]

Edellisessä vaiheessa (a) saatua karboksyylihappoa „ (41 mg) liuotettiin dikloorimetääniin (0,5 ml) ja seosta käsiteltiin disykloheksyylikarbodi-imidillä (1 ekv.) ja 4-dimetyyliaminopyridiinillä (2 mg) ja sitten vielä pipe-35 ridiinillä (1 ekv.). Reaktioseosta säilytettiin yön yli 27 1 06119 huoneenlämmössä. Tuloksena saatu 1,3-disilyloitu amidi de-silyloitiin (tetrabutyyliammoniumfluoridi), kuten esimerkissä 1 (b) on kuvattu, ja näin saatiin otsikon mukaista yhdistettä. IR νΜΧ (CDC13) 3600 (-OH), 1630 cm1 (C=0, 5 t-amidi) . NMR δ (CDC13) : 6,26, 5,86 (2H, dd, 6, 7 H); 5,2, 4,86 (kumpikin 1H, s, 19 H); 4,66 - 3,76 (2H, m, 1, 3 H); 3,4 (4H, m, NCHj) ; 0,5 (3H, s, 18 H) . UV (EtOH) : λ*.* 264 (18300) .

Esimerkki 5 10 N-syklopropyyli-Ια,3fi-dihydroksi-9,10-sekokolanami- di-5(Z),7,10(19)-trieeni [kaava (I) - 20R isomeeri, R1 = H, R2 = syklopropyyli, R3 = R4 = H, Y = -(CH2)2-]

Otsikon mukainen yhdiste valmistettiin esimerkissä 4 (b) kuvatulla tavalla käyttäen syklopropyyliamiinia pi-15 peridiinin sijasta. IR (CDCl3) 3580 (-0H), 3420 (-NH), 1660 cm'1 (C=0, amidi). NMR δ (CDC13) : 6,26, 5,83 (2H, dd, 6, 7 H); 5,53 (1H, br s, NH); 5,16, 4,83 (kumpikin 1H, s,

19 H); 4,66 - 3,83 (2H, m, 1, 3 H); 0,5 (3H, s, 18 H). UV

(EtOH) : 265 (18404) .

20 Esimerkki 6 la,3S-dihydroksi-9,10-sekokolanamidi-5(Z),7,10(19)-trieeni [kaava (I) - 20R-isomeeri, R1 = R2 = R3 = R4 = H, Y = - (CH2) 2 - ]

Otsikon mukainen yhdiste valmistettiin esimerkissä 25 4 (b) kuvatulla tavalla käyttäen ammoniakkia piperidiinin sijasta. IR νΜΧ (CDCl3) 3600 (-OH), 3525 & 3410 (NH2) , 1680 cm'1 (C=0, amidi). NMR δ (CDC13) : 6,33, 5,91 (2H, dd, 6, 7 H); 5,41 (2H, br s, NH); 5,26, 4,91 (kumpikin 1H, s,

19 H); 4,66 - 3,93 (2H, m, 1, 3 H); 0,53 (3H, s, 18 H). UV

30 (EtOH) : 265 (18300) .

^ 106119

Esimerkki 7 a) N,N-pentametyleeni-ΐα,3S-di(tri-isopropyylisi-lyylioksi)-9,10-seko-20-epi-kolanamidi-5(E),7,10(19)-tri-eeni [kaava (II) - 20S isomeeri, R3+R2 = -(CH2)5-, R3 = R4 = 5 (i-Pr) 3Si, Y = - (CH2)2-] 20S-formyyli-3S-tri-isopropyylisilyylioksi-9,10-sekopregna-5,7,10(19)-trieenin rikkidioksidiadditiotuote (5,17 g, valmistettu D2-vitamiinista, kuten julkaisussa J.

Org. Chem. 51 (1986), sivulla 4819 on kuvattu) konvertoi-10 tiin 20R- ja 20S-isomeerien noin 1:1-seokseksi säilyttämällä tätä seosta 0 °C:ssa yön yli bentseenissä (50 ml) ja metanolissa (50 ml), joka sisälsi 1,8-diatsabisyklo-[5.4.0.]undek-7-eeniä (1 ml). Osa seosta (2,55 g) pelkistettiin natriumboorihydridillä, tosyloitiin tosyyliklori-15 dilla, sitä lämmitettiin natriumbikarbonaatin läsnä ollessa rikkidioksidin poistamiseksi ja regeneroitiin 5,7,-10(19)-trieenisysteemi, la-hydroksyloitiin käyttäen selee-nidioksidia ja metanolia, kuten GB-hakemusjulkaisussa 2 038 834 on kuvattu, ja silyloitiin esimerkissä 2 (b) ku-20 vatulla tavalla, jolloin saatiin kaavan (III) mukaisen tosylaatin 20R (epi)- ja 20S (normaali) -isomeerien seosta ^ (1,62 g) (R3 = R4 = (i-Pr)jSi-, X = tosyylioksi) . Osa tästä seoksesta (511 mg) liuotettiin asetonitriiliin (10 ml) ja dikloorimetaaniin (10 ml) , sitä käsiteltiin litiumbromi-25 dilla (488 mg) ja 1,8-bis(dimetyyliamino)naftaleenilla (20 mg), lämmitettiin refluksissa 1,5 tuntia ja työstettiin, ja näin saatiin kaavan (III) mukaisia bromideja, R3 = R4 = (i-Pr)3Si, X = Br (340 mg).

Liuos, jossa oli N-asetyylipiperidiiniä (546 mg) 30 tetrahydrofuraanissa (2 ml), lisättiin -78 °C:ssa liuok-| seen, jossa oli litiumdi-isopropyyliamidia (valmistettu ^ 658 milligrammasta di-isopropyyliamiinia ja 2 millilit-rasta 1,55 M n-butyylilitiumia) tetrahydrofuraanissa (2,5 ml) . Reaktioseoksen annettiin lämmetä huoneenlämpöön, 35 sitten se jäähdytettiin -78 °C:seen ja sitä käsiteltiin 29 1 06119 edellä saaduilla bromideilla (III) (340 mg) ja seosta pidettiin yön yli huoneenlämmössä. Sen jälkeen kun seosta oli työstetty ja puhdistettu osittain kromatografisesti, saatiin otsikon mukaisen yhdisteen R,S-seosta (215 mg) ja 1 5 reagoimattomia bromideja (III) .

Edellä valmistettu R,S-seos (300 mg) hajotettiin kromatografisesti (20 g silikageeliä, kehitettiin 5-pro-senttisella etyyliasetaatilla heksaanissa). Ensimmäiseksi ilmaantunut isomeeri oli otsikon mukaisen yhdisteen 20-10 epimuoto (103 mg), IR (CC14) : 1645, 1465 cm'1 (amidi); UV (Et20) : λΜΧ 269, 208 nm. Amin 229 nm; NMR 6 (CC14) 0,57 (3H, s, 18 H); 3 - 3,5 (4H, m, N-CH2) , 4 - 4,6 (2H, m, 1, 3 H), 4,73 (2H, be, 19 H), 5,3 - 6,4 (2H, ABq, 6, 7 H) .

Tätä seurasi epi- ja normaali-isomeerien seos (95 mg) ja 15 sitten normaali (20R) -isomeeri (86 mg).

b) N,N-pentametyleeni-lo,3S-dihydroksi-9,10-seko-20-epikolanamidi-5(Z),7,10(19)-trieeni [kaava (I) - 20S- isomeeri, R1 + R2 = -(CH2)5-, R3 = R4 = H, Y = -{CH2)2-]

Sen jälkeen kun edellisen vaiheen (a) ensimmäistä 20 fraktiota oli säteilytetty fenatsiinin läsnä ollessa ja desilyloitu esimerkissä 1 (b) kuvatulla tavalla, saatiin otsikon mukaista yhdistettä, IR (CDCl3) : 1620, 1445 crn'1; UV (EtOH) λΜΧ 207, 263 nm. Xmin 227 nm; NMR δ (CDC13) 0,51 (3H, s, 18 H) , 3 - 3,6 (4H, m, N-CH2) , 3,8 - 4,7 (2H, 25 m, 1, 3 H) , 4,7, 5,3 (1H kumpikin, s, 19 H), 5,6 - 6,5 (2H, ABq, 6, 7 H) . Kun seuraavia fraktioita käsiteltiin samalla tavalla, saatiin (i) epi- ja normaali-isomeerien seosta ja (ii) esimerkin 4 (b) mukaista yhdistettä vastaavasti.

« ' «

Claims (9)

106119 30

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten, yleisten kaavojen (I) ja (II) mukaisten yhdisteiden val-5 alistamiseksi, joilla on soluja moduloivaa aktiivisuutta, R1 .vV"·"' 0

10. JLv 15 r' 2o yY“v yU 0 (II) 3i 106119 eetteröityviä tai esteröityviä O-suojaryhmiä), tunnettu siitä, että (A) annetaan yleisen kaavan (III) raukaisen yhdisteen 5 i(III) . .. (jossa R3 ja R4, jotka ovat samoja tai erilaisia, mer-15 kitsevät vetyatomia tai O-suojaryhmää, ja X on okso tai fosforanylidiiniryhmä, metalloitu silaani- tai sulfoniryh-mä, -(CH2)aL-ryhmä, jossa a on 0, 1 tai 2 ja L on poistuva ryhmä tai - (CH2)bR5-ryhmä, jossa b on 0, 1, 2 tai 3 ja R5 on syaaniryhmä tai· esteröity karboksyyli- tai tiokarboksyyli-20 ryhmä) tai vastaavan 5(E)-isomeerin reagoida yhden tai useamman reagenssin kanssa, joka saa aikaan halutun sivu-ketjuamidiryhmityksen, jonka jälkeen tarvittaessa ja/tai haluttaessa poistetaan mikä tahansa O-suojaryhmistä, tai (B) isomeroidaan yleisen kaavan (II) mukainen yh-• 25 diste, jolloin saadaan kaavan (I) mukainen yhdiste, ja sen jälkeen tarvittaessa ja/tai haluttaessa poistetaan mikä tahansa O-suojaryhmistä.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Y on seuraavan kaavan mukai-30 nen ryhmä ^ · -(RA)ro-(Reijossa RA on -CH=CH-, R8 on -CH2-, m on 0, 1 tai 2 ja n on 35 0 tai kokonaisluku siten, että 2m + n = 1, 2, 3 tai 4). 106119

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että Y on C2_4-alkyleeniryhmä.

4. Minkä tahansa edellisen patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että ainakin 5 toinen R1 tai R2 on muu kuin vety.

5. Minkä tahansa edellisen patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R1 ja R2 ovat vetyatomeja, metyyli- tai syklopropyyliryhmiä tai R3R2N- on piperidinoryhmä.

6. Minkä tahansa edellisen patenttivaatimuksen mu kainen menetelmä, tunnettu siitä, että R3 ja R4 ovat eetteröityviä silyyliryhmiä.

7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen menetelmä, tunne t t u siitä, että silyyliryhmät poistetaan, 15 jolloin saadaan kaavan (I) tai (II) mukainen yhdiste, jossa R3 ja R4 ovat vetyatomeja.

8. Jonkin edellisen patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan la,3S-dihydroksi-9,10-seko-25-atsakolesta-5(Z),7,- 20 10(19)-trien-24-oni; la,3S-dihydroksi-23,23-bishomo-24-atsa-9,10-sekoko-lesta-5(Z),7,10(19)-trien-24-oni; la, 3S-dihydroksi-27-nor-9,10-sekokolesta-5 (Z) ,7,-10(19),22,24-pentaeeni-26-karboksyylihappo, 26-dimetyyli- 25 amidi; N, N-pentametyleeni-la,3S-dihydroksi-9,10-sekokolan-amidi-5(Z),7,10(19)-trieeni; N-syklopropyyli-1a,3β-dihydroksi-9,10-sekokolanami-di-5(Z),7,10(19)-trieeni; 30 la,3S-dihydroksi-9,10-sekokolanamidi-5(Z),7,10(19)- . trieeni; N,N-pentametyleeni-la,36-dihydroksi-9,10-seko-20-epi-kolanamidi-5(E),7,10(19)-trieeni; tai niiden vastaava 5(E)-isomeeri. 33 106119

9. Yleisten kaavojen (I1) ja (II1) mukaiset yhdisteet, jotka ovat käyttökelpoisia välituotteina patenttivaatimuksen 1 mukaisessa menetelmässä, R1 5 vV'"' o (1') R < R1 15 R1 f| Π H (II') o 20 kr —' R»0'·* \x^>0R4 25 (joissa Y on alkyleeni- tai alkenyleeniryhmä, joka sisältää korkeintaan 4 hiiliatomia; R1 ja R2, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, ovat vetyatomeja tai alempia alkyy-li- tai sykloalkyyliryhmiä, tai jotka yhdessä typpiatomin 30 kanssa, johon ne ovat liittyneet, muodostavat heterosykli-v sen ryhmän; ja R3 ja R4, jotka voivat olla samoja tai eri laisia, ovat O-suojaryhmiä). 34 1 06119