ES2948660T3 - Profármacos de gemcitabina - Google Patents

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Christopher Mcguigan
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Abstract

Esta invención se refiere a un profármaco del nucleótido monofosfato del conocido fármaco oncológico gemcitabina. Específicamente, se refiere a gemcitabina-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-fosfato cuando está presente como un diastereoisómero de fosfato único y, en particular, se relaciona con el diastereoisómero de (S)-fosfato que ofrece un aumento notable e inesperado en la solubilidad. en relación con el (R)-diastereoisómero. El epímero (S)-fosfato también se absorbe preferentemente en soluciones de ciclodextrina en lugar del diastereoisómero (R). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Profármacos de gemcitabina
Esta invención se refiere a un profármaco del monofosfato del bien conocido fármaco oncológico gemcitabina para su uso en el tratamiento de diversos tipos de cáncer. Específicamente, se relaciona con la gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-fosfato (nombre genérico: 2-desoxi-2',2'-difluoro-D-citidin-5-O-[fenil (benzoxi-L-alaninil)] fosfato) cuando está presente como un solo diastereoisómero de fosfato y, en particular, se relaciona con el diastereoisómero (S)-fosfato que ofrece un notable e inesperado aumento de la solubilidad en relación con el diastereoisómero (R). El diastereoisómero (S)-fosfato también se absorbe preferiblemente en soluciones de ciclodextrina sobre el diastereoisómero (R).
Antecedentes
Gemcitabina (1; comercializado como Gemzar®) es un análogo de nucleósido eficaz que actualmente está aprobado para tratar el cáncer de mama, de pulmón de células no pequeñas, de ovario y de páncreas y se usa ampliamente para tratar una variedad de otros tipos de cáncer, incluidos los de vejiga, biliar, colorrectal y linfoma.
Figure imgf000002_0001
La utilidad clínica de la gemcitabina está limitada por una serie de mecanismos de resistencia inherentes y adquiridos. A nivel celular, la resistencia depende de tres parámetros: (i) la subregulación de la desoxicitidina quinasa, necesaria para la activación en la fracción fosforilada; (ii) la expresión reducida de transportadores de nucleósidos, en particular, hENT1 requerido para la absorción por las células cancerosas; y (iii) la sobrerregulación de las enzimas catalíticas, especialmente la citidina desaminasa que degrada la gemcitabina.
El documento WO2005/012327 describe una serie de profármacos de nucleótidos para gemcitabina y moléculas de fármacos nucleósidos relacionados. Entre ellos, la gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-fosfato (NUC-1031; 2) se identifica como un compuesto particularmente eficaz. Estos profármacos parecen evitar muchos de los mecanismos de resistencia inherentes y adquiridos que limitan la utilidad de la gemcitabina. ("Application of ProTide Technology to Gemcitabine: A Successful Approach to Overcome the Key Cancer Resistance Mechanisms Leads to a New Agent (NUC-1031) in Clinical Development'; Slusarczyk et all; J. Med. Chem.; 2014, 57, 1531-1542). El documento WO 2014/076490 describe un proceso para preparar fosforamidatos de nucleósido donde se proporciona un enantiómero deseado en una cantidad enriquecida. El documento WO 2015/081133 divulga compuestos nucleósidos y nucleótidos y profármacos que muestran eficacia y biodisponibilidad para el tratamiento de, por ejemplo, cáncer de hígado.
NUC-1031 2 se prepara como una mezcla de dos diastereoisómeros, epímeros en el centro fosfato.
Figure imgf000002_0002
Desafortunadamente, NUC-1031 2 es extremadamente lipifílico y, por lo tanto, poco soluble en agua (por cálculo: <0.1 mg/ml), y las fracciones ionizables, el nitrógeno de pirimidina y el hidroxilo fenólico tienen pKas calculados que se encuentran fuera del rango de pH adecuado para la administración parenteral. Es esencialmente insoluble en agua, independientemente del contenido de sal o el pH, y esto tiene implicaciones para el desarrollo de formulaciones para administrar el profármaco en dosis suficientemente altas para un tratamiento eficaz. También tiene implicaciones para el desarrollo de procesos de fabricación eficientes que permitirán producir NUC-1031 de manera rentable.
La gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-fosfato de la presente invención es preferiblemente de sustancialmente la misma actividad que la gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-fosfato (NUC-1031; 2). Sin embargo, puede tener una actividad ligeramente menor pero tener otros beneficios como se describe en esta memoria descriptiva si existe un beneficio terapéutico o de fabricación para su uso en esta forma.
Breve resumen de la divulgación
De acuerdo con la presente invención, se proporciona gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3:
Figure imgf000003_0001
o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, que tiene una pureza diastereoisomérica superior al 90%, para uso en el tratamiento de un cáncer seleccionado de cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, colangiocarcinoma, cáncer renal, cáncer cervical y cáncer de timo.
Los inventores han descubierto una sorprendente y notable diferencia en las solubilidades de los dos diastereoisómeros. El (S)-epímero 3 tiene suficiente solubilidad en mezclas de una serie de disolventes orgánicos polares con agua para que sea adecuado para la formulación y administración como agente terapéutico. El (R)-epímero 4 es sustancialmente insoluble en la mayoría de las mezclas de disolventes medidas. Esta notable diferencia en la solubilidad no se había identificado previamente y los beneficios potenciales de esta propiedad del (S)-epímero no había sido identificado. En varias de las mezclas de disolventes probadas, la diferencia de solubilidad entre (S)-epímero y el (R)-epímero es más de 100 veces.
Sorprendentemente, el (S)-epímero también se toma preferiblemente en soluciones de ciclodextrina sobre el (R)-epímero. Esto no se ha observado con otros derivados de fosfato de gemcitabina.
En un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona una formulación farmacéutica que comprende gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, que tiene una pureza diastereoisomérica superior al 90 %, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable para uso en el tratamiento de un cáncer seleccionado de cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, colangiocarcinoma, cáncer renal, cáncer cervical y cáncer tímico.
La formulación puede ser para administración parenteral, por ejemplo, intravenosa, subcutánea o intramuscular. Preferiblemente, la formulación es para administración intravenosa.
La formulación puede ser una formulación acuosa que opcionalmente también comprenda un disolvente orgánico polar. En el caso de la administración parenteral (por ejemplo, intravenosa), la formulación preferiblemente también comprende un disolvente orgánico polar.
La formulación también puede comprender una ciclodextrina.
Un solvato será típicamente un hidrato. Así, la gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato puede estar en forma de sal o hidrato. Puede ser que la gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato no está en forma de una sal y/o un solvato (por ejemplo, hidrato). Preferiblemente, está en forma de base libre.
La gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato puede tener una pureza diastereoisomérica superior al 95 %, 98 %, 99 % o incluso al 99.5 %. 'Sustancialmente diastereoméricamente puro' se define para los fines de esta invención como una pureza diastereomértica superior a aproximadamente el 90%.
La divulgación incluye un método, que no forma parte de la invención, para proporcionar al menos un diastereoisómero de gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-fosfato en una forma sustancialmente diastereoisoméricamente pura, comprendiendo el método las etapas de:
obtener una mezcla de gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato 3'-protegido 4 y gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3'-protegido 3;
someter la mezcla a una técnica de separación;
una vez separados, aislar gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato 3'-protegido 4 y/o gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3'-protegido 3 en una forma sustancialmente diastereoisoméricamente pura;
eliminar el grupo protector 3' de uno o ambos diastereoisómeros separados para proporcionar gemcitabin-[fenilbenzoxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato 4 y/o gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3 en una forma sustancialmente diastereoisoméricamente pura.
Una gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-fosfato 3'-protegida es un derivado de la gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-fosfato en el que el grupo 3'-hidroxi presenta un grupo protector de hidroxilo. El grupo protector en cuestión debe poder eliminarse limpiamente. Los grupos protectores de ejemplo incluyen grupos protectores de sililo (por ejemplo, tert-butildimetilsililo y trietilsililo), en cuyo caso el grupo protector puede eliminarse utilizando un reactivo seleccionado entre TFA, HF, ácido fluorosilícico y fluoruro de tetrabutilamonio. Un grupo protector alternativo sería un grupo carbonato (por ejemplo, carbonato de tertbutilo), en cuyo caso el grupo protector puede eliminarse utilizando un ácido de Bronsted (por ejemplo, TFA) o un ácido de Lewis (por ejemplo, ZnBr2 ).
La técnica de separación puede ser cromatografía, por ejemplo, cromatografía en columna, cromatografía en capa fina preparativa o HPLC preparativa. Cuando la técnica de separación sea HPLC preparativa, puede llevarse a cabo utilizando una columna quiral, por ejemplo uno que comprende tris (3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilosa. Un ejemplo de una columna quiral útil en el proceso de la invención es Chiralpak AD™; cuya fase estacionaria consiste en un soporte de sílice de 20 μm sobre el que se ha recubierto físicamente tris (3,5-dimetilfenilcarbamato) de amilosa.
La técnica de separación puede ser la captación selectiva en una solución de ciclodextrina. Esta técnica implica poner en contacto la mezcla con una solución de ciclodextrina de modo que un epímero se absorba en la solución de ciclodextrina con preferencia al otro epímero, y luego separar la solución de ciclodextrina del sólido no disuelto. La solución de ciclodextrina puede ser una solución acuosa de ciclodextrina. La separación de la solución del sólido puede lograrse por filtración.
La presente divulgación también proporciona gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato 4:
Figure imgf000004_0001
o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables. La presente divulgación también proporciona una formulación farmacéutica que comprende gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato 4, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, que tiene una pureza diastereoisomérica superior al 90 %, y un excipiente farmacéuticamente aceptable, así como usos médicos del compuesto 4 y métodos de tratamiento usando compuestos 4.
Se ha demostrado que el epímero R tiene una vida media en la incubación con células hepáticas humanas aisladas que es cuatro veces mayor que la del epímero S (véase el Ejemplo 4). La vida media más larga asociada con el isómero R indica un aclaramiento intrínseco más bajo y debería dar como resultado un perfil farmacocinético y farmacodinámico diferente al del isómero S. Este perfil puede significar una concentración mayor y más prolongada del isómero R en la circulación sistémica y, por lo tanto, una mayor exposición al epímero R que la que se lograría con el epímero S. Por lo tanto, el AUC para el isómero R podría ser más alto, lo que daría como resultado una exposición mayor y más prolongada a la fracción, por ejemplo, para la vía de administración oral donde los efectos de primer paso son más pronunciados. Esta exposición prolongada al epímero R podría permitir una exposición tumoral sustancialmente prolongada al epímero R y puede resultar en una mayor eficacia, donde el metabolismo de primer paso reducido en el hígado dará como resultado concentraciones más altas del fármaco. Esta propiedad diferente también podría permitir la selección de tumores específicos en los que un perfil farmacocinético más largo puede resultar en una mayor eficacia en sitios tumorales de difícil acceso donde la vasculatura es deficiente. La exposición prolongada al epímero R puede garantizar una concentración adecuada del metabolito activo en más fases del ciclo celular, incluida la división celular.
Breve descripción de los dibujos
Las realizaciones de la invención se describen más detalladamente a continuación con referencia a los dibujos adjuntos, en los que:
La figura 1 muestra el cromatógrafo para la separación de compuestos. 3 y 4 por HPLC usando una columna Chiralpak AD y un sistema de disolvente en gradiente de n-heptano/IPA.
La Figura 2 muestra la estructura del compuesto 4 determinado por difracción de rayos X
La Figura 3 muestra la estructura del compuesto 3 determinado por difracción de rayos X
La Figura 4 muestra el espectro 31P-RMN (202 MHz, D2O) de la mezcla isomérica NUC-1031 (3.12 mM), tras la adición de HP-p-CD en una relación molar 1:2.3.
La figura 5 muestra las trazas de HPLC de NUC-1031 (3.12 mM) en MeOH (A) en H2O tras la adición de HP-p-CD en una relación molar 1:2.3 (B).
Descripción detallada
A lo largo de esta memoria descriptiva, el término S-epímero o S-diastereoisómero se refiere a gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato. Asimismo, a lo largo de esta memoria descriptiva, el término R-epímero o R-diastereoisómero se refiere a gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato.
Los compuestos de la presente invención pueden usarse en el tratamiento del cuerpo humano. Pueden usarse en el tratamiento del cuerpo animal. En particular, los compuestos de la presente invención pueden usarse para tratar animales comerciales tales como ganado. Alternativamente, los compuestos de la presente invención se pueden usar para tratar animales de compañía como gatos, perros, etc.
Los compuestos de la invención se pueden obtener, almacenar y/o administrar en forma de una sal farmacéuticamente aceptable. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas incluyen, pero no se limitan a, sales de ácidos inorgánicos farmacéuticamente aceptables, tales como ácidos clorhídrico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, carbónico, bórico, sulfámico y bromhídrico, o sales de ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables, tales como el ácido acético, propiónico, butírico, tartárico, maleico, hidroximaleico, fumárico, málico, cítrico, láctico, mucico, glucónico, benzoico, succínico, oxálico, fenilacético, metanosulfónico, toluenosulfónico, bencenosulfónico, salicílico, sulfanílico, aspártico, glutámico, edético, esteárico, palmítico, oleico, láurico, pantoténico, tánico, ascórbico y valérico. Las sales básicas adecuadas se forman a partir de bases que forman sales no tóxicas. Ejemplos incluyen sales de aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y zinc. También se pueden formar hemisales de ácidos y bases, por ejemplo, sales de hemisulfato, hemioxalato y hemicalcio. En ciertas realizaciones, particularmente aquellas que se aplican al s-epímero, el compuesto está en forma de una sal de HCl o una sal de hemioxalato.
Los compuestos de la invención pueden existir en forma monocristalina o en una mezcla de formas cristalinas o pueden ser amorfos. Por lo tanto, los compuestos de la invención destinados al uso farmacéutico pueden administrarse como productos cristalinos o amorfos. Pueden obtenerse, por ejemplo, tales como tapones sólidos, polvos o películas mediante métodos tales como precipitación, cristalización, secado por congelación, secado por aspersión, o secado por evaporación. El secado por microondas o por radiofrecuencia se puede utilizar para este fin.
Para los compuestos de la invención mencionados anteriormente, la dosificación administrada variará, por supuesto, con el compuesto empleado, el modo de administración, el tratamiento deseado y el trastorno indicado. Por ejemplo, si el compuesto de la invención se administra por vía parenteral, entonces la dosificación del compuesto de la invención puede estar en el rango de 0.1 a 5 g/m2, por ejemplo, de 0.5 a 2 g/m2. El tamaño de la dosis para fines terapéuticos de los compuestos de la invención variará naturalmente según la naturaleza y gravedad de las condiciones, la edad y el sexo del animal o paciente y la vía de administración, según principios bien conocidos de la medicina.
Se espera que los niveles de dosificación, la frecuencia de la dosis y la duración del tratamiento de los compuestos de la invención difieran dependiendo de la formulación y la indicación clínica, la edad y las condiciones médicas comórbidas del paciente.
Un compuesto de la invención, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, se puede usar solo, pero generalmente se administrará en forma de una composición farmacéutica en la que los compuestos de la invención, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, están asociados con un compuesto farmacéuticamente aceptable. adyuvante, diluyente o vehículo aceptable. Los procedimientos convencionales para la selección y preparación de formulaciones farmacéuticas adecuadas se describen, por ejemplo, en "Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs", M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988.
Dependiendo del modo de administración de los compuestos de la invención, la composición farmacéutica que se utiliza para administrar los compuestos de la invención comprenderá preferiblemente de 0.05 a 99 %p (por ciento en peso) de compuestos de la invención, más preferiblemente de 0.05 a 80 % en peso de compuestos de la invención, todavía más preferiblemente de 0.10 a 70 % en peso de compuestos de la invención, e incluso más preferiblemente de 0.10 a 50 % en peso de compuestos de la invención, estando todos los porcentajes en peso basados en la composición total.
Para la administración oral, los compuestos de la invención se pueden mezclar con un adyuvante o un vehículo, por ejemplo, lactosa, sacarosa, sorbitol, manitol; un almidón, por ejemplo, almidón de patata, almidón de maíz o amilopectina; un derivado de celulosa; un aglutinante, por ejemplo, gelatina o polivinilpirrolidona; y/o un lubricante, por ejemplo, estearato de magnesio, estearato de calcio, polietilenglicol, una cera, parafina y similares, y luego se comprime en tabletas. Si se requieren tabletas recubiertas, los núcleos, preparados como se describe anteriormente, se pueden recubrir con una solución de azúcar concentrada que puede contener, por ejemplo, goma arábiga, gelatina, talco y dióxido de titanio. Alternativamente, la tableta se puede recubrir con un polímero adecuado disuelto en un disolvente orgánico fácilmente volátil.
Para la preparación de cápsulas de gelatina blanda, los compuestos de la invención se pueden mezclar, por ejemplo, con un aceite vegetal o polietilenglicol. Las cápsulas de gelatina dura pueden contener gránulos del compuesto usando cualquiera de los excipientes para tabletas mencionados anteriormente. También pueden introducirse formulaciones líquidas o semisólidas del compuesto de la invención en cápsulas de gelatina dura.
Las preparaciones líquidas para aplicación oral pueden presentarse en forma de jarabes o suspensiones, por ejemplo soluciones que contienen el compuesto de la invención, siendo el resto azúcar y una mezcla de etanol, agua, glicerol y propilenglicol. Opcionalmente, tales preparaciones líquidas pueden contener agentes colorantes, agentes aromatizantes, agentes edulcorantes (tal como sacarina), agentes conservantes y/o carboximetilcelulosa como agente espesante u otros excipientes conocidos por los expertos en la técnica.
Para la administración parenteral (por ejemplo, intravenosa), los compuestos de la invención se pueden administrar como una solución acuosa u oleosa estéril. Los compuestos de la invención son muy lipofílicos. Las formulaciones acuosas típicamente, por lo tanto, también contendrán un disolvente orgánico polar farmacéuticamente aceptable.
Se ha demostrado que las ciclodextrinas encuentran una amplia aplicación en la administración de fármacos (Rasheed et al, Sci. Pharm., 2008, 76, 567-598). Las ciclodextrinas son una familia de oligosacáridos cíclicos. Actúan como una 'jaula molecular' que encapsula las moléculas del fármaco y altera las propiedades de esas moléculas del fármaco, tal como la solubilidad. Las ciclodextrinas comprenden unidades de a-D-glucopiranosa enlazadas a (a-1,4). Las ciclodextrinas pueden contener 6, 7 u 8 unidades de glucopiranosa (designadas a-, p- y Y-ciclodextrinas respectivamente). Las ciclodextrinas utilizadas en formulaciones farmacéuticas suelen ser p-ciclodextrinas. Los grupos hidroxilo colgantes se pueden alquilar con un grupo alquilo C1-C6 sustituido o no sustituido. Ejemplos de ciclodextrinas son a-ciclodextrina, p-ciclodextrina, Y-ciclodextrina, 2-hidroxipropil-p-ciclodextrina (HP-p-CD), sal sódica de sulfobutiléter p-ciclodextrina, p-ciclodextrina parcialmente metilada.
El tamaño de la dosis para fines terapéuticos de los compuestos de la invención variará naturalmente según la naturaleza y gravedad de las condiciones, la edad y el sexo del animal o paciente y la vía de administración, de acuerdo con principios bien conocidos de la medicina.
Se espera que los niveles de dosificación, la frecuencia de la dosis y la duración del tratamiento de los compuestos de la invención difieran dependiendo de la formulación y la indicación clínica, la edad y las condiciones médicas comórbidas del paciente.
La presente invención también incluye todas las formas marcadas con isótopos farmacéuticamente aceptables del de compuestos 3 en donde uno o más átomos son reemplazados por átomos que tienen el mismo número atómico, pero una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa del isótopo predominante que se encuentra usualmente en la naturaleza.
Ejemplos de isótopos adecuados para su inclusión en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, tales como 2H y 3H, carbono, tales como 11C, 13C y 14C, cloro, tales como 36Cl, flúor, tales como 18F, yodo, tales como 123| y 125Y, nitrógeno, tales como 13N y 15N, oxígeno, tales como 15O, 17O y 18O, fósforo, tales como 32P, y azufre, tales como 35S.
Ciertos compuestos marcados isotópicamente, por ejemplo, aquellos que incorporan un isótopo radiactivo, son útiles en estudios de distribución de fármacos y/o sustratos en tejidos. Los isótopos radiactivos tritio, es decir 3H, y carbono-14, es decir 14C, son particularmente útiles para este propósito en vista de su facilidad de incorporación y rápidos medios de detección.
La sustitución con isótopos más pesados tales como el deuterio, es decir 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas derivadas de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, aumento de la vida media in vivo o requisitos de dosificación reducidos y, por lo tanto, puede ser preferible en algunas circunstancias.
La sustitución con isótopos emisores de positrones, tales como 11C, 18F, 15O y 13N, puede ser útil en los estudios de topografía por emisión de positrones (PET) para examinar la ocupación del receptor del sustrato.
Los compuestos marcados isotópicamente se pueden preparar generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los descritos usando un reactivo marcado isotópicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado anteriormente.
El compuesto para uso en el tratamiento de un cáncer puede implicar, además del compuesto de la invención, cirugía convencional o radioterapia o quimioterapia. Tal quimioterapia puede incluir la administración de uno o más agentes activos.
Cuando se administra un agente activo adicional como parte de un método de tratamiento de la invención, dicho tratamiento combinado se puede lograr mediante la dosificación simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento. Dichos productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro de un rango de dosificación terapéuticamente eficaz descrito anteriormente y uno o más agentes farmacéuticamente activos dentro de su rango de dosificación aprobado.
Así, las formulaciones farmacéuticas de la invención pueden comprender otro principio activo.
El uno o más agentes activos pueden ser una o más de las siguientes categorías de agentes antitumorales:
(i) fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y combinaciones de los mismos, tales como agentes alquilantes (por ejemplo, ciclofosfamida, mostaza nitrogenada, bendamustina, melfalán, clorambucil, busulfano, temozolamida y nitrosoureas); antimetabolitos (por ejemplo, gemcitabina y antifolatos tales como fluoropirimidinas como 5-fluorouracilo y tegafur, raltitrexed, metotrexato, pemetrexed, arabinósido de citosina e hidroxiurea); antibióticos (por ejemplo, antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina y mitramicina); agentes antimitóticos (por ejemplo, alcaloides de la vinca como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina y taxoides como taxol e inhibidores de taxotere y poloquinasa); inhibidores de proteosomas, por ejemplo, carfilzomib y bortezomib; terapia con interferón; e inhibidores de topoisomerasa (por ejemplo, epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecán, mitoxantrona y camptotecina);
(ii) agentes citostáticos tales como antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno y yodoxifeno), antiandrógenos (por ejemplo, bicalutamida, flutamida, nilutamida y acetato de ciproterona), antagonistas o agonistas de LHRH (por ejemplo, goserelina, leuprorelina y buserelina), progestágenos (por ejemplo, acetato de megestrol), inhibidores de la aromatasa (por ejemplo, como anastrozol, letrozol, vorazol y exemestano) e inhibidores de la 5a-reductasa, tales como finasterida;
(iii) agentes anti-invasión, por ejemplo, dasatinib y bosutinib (SKI-606), e inhibidores de metaloproteinasas, inhibidores de la función del receptor del activador del plasminógeno de uroquinasa o anticuerpos contra heparanasa;
(iv) inhibidores de la función del factor de crecimiento: por ejemplo, tales inhibidores incluyen anticuerpos contra el factor de crecimiento y anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento, por ejemplo, el anticuerpo anti-erbB2 trastuzumab [Herceptin™], el anticuerpo anti-EGFR panitumumab, el anticuerpo anti-erbB1 cetuximab, los inhibidores de la tirosina quinasa, por ejemplo, los inhibidores de la familia del factor de crecimiento epidérmico (por ejemplo, los inhibidores de la tirosina quinasa de la familia EGFR como gefitinib, erlotinib y 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)-quinazolin-4-amina (Cl 1033), inhibidores de tirosina quinasa erbB2 tales como lapatinib); inhibidores de la familia del factor de crecimiento de hepatocitos; inhibidores de la familia del factor de crecimiento de la insulina; moduladores de proteínas reguladoras de la apoptosis celular (por ejemplo, inhibidores de Bcl-2); inhibidores de la familia de factores de crecimiento derivados de plaquetas como imatinib y/o nilotinib (AMN107); inhibidores de serina/treonina quinasas (por ejemplo inhibidores de la señalización de Ras/Raf tales como inhibidores de la farnesil transferasa, por ejemplo sorafenib, tipifarnib y lonafarnib), inhibidores de la señalización celular a través de las quinasas MEK y/o AKT, inhibidores de c-kit, inhibidores de la quinasa abl, inhibidores de quinasa PI3, inhibidores de quinasa Plt3, inhibidores de quinasa CSF-1R, receptor de IGF, inhibidores de quinasa; inhibidores de aurora quinasa e inhibidores de quinasa dependientes de ciclina tales como inhibidores de c DK2 y/o CDK4;
(v) agentes antiangiogénicos como los que inhiben los efectos del factor de crecimiento del endotelio vascular, [por ejemplo, el anticuerpo anti-factor de crecimiento de células endoteliales vasculares bevacizumab (Avastin™); talidomida; lenalidomida; y por ejemplo, un inhibidor de la tirosina quinasa del receptor VEGF tal como vandetanib, vatalanib, sunitinib, axitinib y pazopanib;
(vi) enfoques de terapia génica, incluidos, por ejemplo, enfoques para reemplazar genes aberrantes tales como p53 aberrante o BRCA1 o BRCA2 aberrante;
(vii) enfoques de inmunoterapia, que incluyen, por ejemplo, terapia con anticuerpos tales como alemtuzumab, rituximab, ibritumomab tiuxetan (Zevalin®) y ofatumumab; interferones tales como interferón a; interleucinas tales como IL-2 (aldesleucina); inhibidores de interleucina, por ejemplo, inhibidores de IRAK4; vacunas contra el cáncer que incluyen vacunas profilácticas y de tratamiento tales como vacunas contra el VPH, por ejemplo, Gardasil, Cervarix, Oncophage y Sipuleucel-T (Provenge); y moduladores de receptores de tipo toll, por ejemplo, agonistas de TLR-7 o TLR-9; y
(viii) agentes citotóxicos, por ejemplo, fludaribina (fludara), cladribina, pentostatina (Nipent™);
(ix) esteroides tales como corticosteroides, incluyendo glucocorticoides y mineralocorticoides, por ejemplo, aclometasona, dipropionato de aclometasona, aldosterona, amcinonida, beclometasona, dipropionato de beclometasona, betametasona, dipropionato de betametasona, fosfato sódico de betametasona, valerato de betametasona, budesonida, clobetasona, butirato de clobetasona, propionato de clobetasol , cloprednol, cortisona, acetato de cortisona, cortivazol, desoxicortona, desonida, desoximetasona, dexametasona, fosfato sódico de dexametasona, isonicotinato de dexametasona, difluorocortolona, fluclorolona, flumetasona, flunisolida, fluocinolona, acetónido de fluocinolona, fluocinonida, butilo de fluocortina, fluorocortisona, fluorocortolona, caproato de fluocortolona, pivalato de fluocortolona, fluorometolona, fluprednideno, acetato de fluprednideno, flurandrenolona, fluticasona, propionato de fluticasona, halcinonida, hidrocortisona, acetato de hidrocortisona, butirato de hidrocortisona, aceponato de hidrocortisona, buteprato de hidrocortisona, valerato de hidrocortisona, icometasona, enbutato de icometasona, meprednisona, metilprednisolona, parametasona de mometasona, furoato de mometasona monohidrato, prednicarbato, prednisolona, prednisona, tixocortol, pivalato de tixocortol, triamcinolona, acetónido de triamcinolona, alcohol de triamcinolona y sus respectivos derivados farmacéuticamente aceptables. Puede usarse una combinación de esteroides, por ejemplo, una combinación de dos o más esteroides mencionados en este párrafo;
(x) terapias dirigidas, por ejemplo, inhibidores de PI3Kd, por ejemplo, idelalisib y perifosina; o compuestos que inhiben PD-1, PD-L1 y CAR T
El uno o más de los otros agentes activos también pueden ser antibióticos.
A lo largo de la descripción y las reivindicaciones de esta memoria descriptiva, las palabras "comprenden" y "contienen" y las variaciones de las mismas significan "incluido, pero no limitado a", y no pretenden (y no excluyen) otras fracciones, aditivos, componentes, números enteros o pasos. A lo largo de la descripción y las reivindicaciones de esta memoria descriptiva, el singular abarca el plural a menos que el contexto requiera lo contrario. En particular, cuando se usa el artículo indefinido, la memoria descriptiva debe entenderse que contempla tanto la pluralidad como la singularidad, a menos que el contexto requiera lo contrario.
Debe entenderse que los rasgos, números enteros, características, compuestos, fracciones químicas o grupos descritos junto con un aspecto, realización o ejemplo particular de la invención son aplicables a cualquier otro aspecto, realización o ejemplo descrito en el presente documento a menos que sea incompatible con el mismo. Todas las características divulgadas en esta memoria descriptiva (incluidas las reivindicaciones, el resumen y los dibujos adjuntos), y/o todos los pasos de cualquier método o proceso así divulgado, pueden combinarse en cualquier combinación, excepto combinaciones en las que al menos algunas de dichas características y/o pasos son mutuamente excluyentes. La invención no se limita a los detalles de ninguna de las realizaciones anteriores. La invención se extiende a cualquier novedad o combinación novedosa de las características descritas en esta memoria descriptiva (incluidas las reivindicaciones, el resumen y los dibujos adjuntos), o a cualquier novedad o combinación novedosa de los pasos de cualquier método o proceso así divulgado.
Se dirige la atención del lector a todos los papeles y documentos que se presentan al mismo tiempo o antes de esta memoria descriptiva en relación con esta solicitud y que están abiertos a la inspección pública con esta memoria descriptiva, y el contenido de todos esos papeles y documentos se incorpora aquí por referencia.
En esta memoria descriptiva se utilizan las siguientes abreviaturas:
Figure imgf000008_0001
Ejemplo 1
Los isómeros (R) y (S) se separaron por HPLC bajo las siguientes condiciones:
Equipo: Agilent 1200™ serie con detector DAD
Tasa de flujo: 1.0 ml/min
Columna: Chiralpak AD™; 250 x 4.6 mm ID (fase normal)
Temperatura: ambiente
Tamaño de partícula: 20 micrones
Alimentación: disuelta en MeOH; 10 g/litro
Disolvente: n-heptano/IPA 10 ->50% IPA
El cromatograma se muestra en la Figura 1. El epímero (S) eluyó a los 8.6 min y el epímero (R) eluyó a los 10.3 minutos.
Métodos de Caracterización y Materiales: Los espectros de RMN de Protón (1H), carbono (13C), fósforo (31P) y flúor (19F) se registraron en un espectróm Bruker Avance 500 a 25°C. Los espectros fueron autocalibrados al pico de disolvente deuterado y todos 13C RMN y 31P NMR estaban desacoplados de protones. Se verificó que la pureza de los compuestos finales era > 95 % mediante análisis HPLC utilizando Varian Polaris C18-A (10 μM) como columna analítica con un gradiente de elución de H2O/MeOH de 100/0 a 0/100 en 35 min. El análisis de HPLC fue realizado por Varian Prostar (LC Workstation-Varian prostar 335 LC detector).
2'-Desoxi-2',2'-difluoro-D-citidin-5'-O-[fenil(benciloxi-L-alaninil)]-(S)- fosfato 3
(ES) m/z, encontrado: (M Na+) 603.14. C25H27F2 N4OsNaP requerido: (M+) 580.47.
31P RMN (202 MHz, MeOD): Sp 3.66
1H RMN (500 MHz, MeOD): Sh 7.58 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H-6), 7.38 - 7.32 (m, 7H, ArH), 7.26 - 7.20 (m, 3H, ArH), 6.24 (t, J = 7.5 Hz, 1H, H-1'), 5.84 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H-5), 5.20 (sistema AB, Jab = 12.0 Hz, 2H, O C ^Ph), 4.46 -4.43 (m, 1H, H-5'), 4.36 -4.31 (m, 1H, H-5'), 4.25 -4.19 (m, 1H, H-3'), 4.07 -4.00 (m, 2H, H-4', CHCH3 ), 1.38 (d, J = 7.2 Hz, 3H, CHCH3 ).
19F RMN (470 MHz, MeOD): Sr -118.0 (d, J = 241 Hz, F), - 120.24 (ancho d, J = 241 Hz, F).
13C RMN (125 MHz, MeOD): Sc 174.61 (d, 3Jc-p = 5.0 Hz, C=O, ester), 167.63 (C-NH2 ), 157.74 (C=O base), 152.10 (d, 2Jc-p = 7.0 Hz, C-Ar), 142.40 (CH-base), 137.22 (C-Ar), 130.90, 129.63, 129.39, 129.32, 126.32 (CH-Ar), 124.51 (d, 1Jc - f = 257 Hz, CF2), 121.47, 121.43 (CH-Ar), 96.67 (CH-base), 85.92 (señal ancha, C-1'), 80.31 (C-4'), 71.27 (t aparente, 2Jc -f = 23.7 Hz, C-3'), 68.03 (OCH2 Ph), 65.73 (d, 2Jc -p = 5.30 Hz, C-5'), 51.66 (CHCH3 ), 20.42 (d, 3Jc -p = 6.25 Hz, CHCH3 ).
HPLC inversa, eluyendo con H2O/MeOH de 100/0 a 0/100 en 35 min, mostró un pico de diastereoisómero con ír = 22.53 min.
2'-desoxi-2',2'-difluoro-D-citidin-5'-O-[fenil(benciloxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato 4.
(ES+) m/z, encontrado: (M Na+) 603.14. C25H27F2 N4OsNaP requerido: (M+) 580.47.
31P RMN (202 MHz, MeOD): Sp 3.83
1H RMN (500 MHz, MeOD): Sh 7.56 (d, j = 7.5 Hz, 1H, H-6), 7.38 - 7.31 (m, 7H, ArH), 7.23 - 7.19 (m, 3H, ArH), 6.26 (t, j = 7.5 Hz, 1H, H-1'), 5.88 (d, j = 7.5 Hz, 1H, H-5), 5.20 (s, 2H, OCH2 Ph), 4.49 -4.46 (m, 1H, H-5'), 4.38 -4.34 (m, 1H, H-5'), 4.23 -4.17 (m, 1H, H-3'), 4.07 -4.01 (m, 2H, H-4', CHCH3 ), 1.38 (d, j = 7.2 Hz, 3H, CHCH3 ).
19F RMN (470 MHz, MeOD): Sr -118.3 (d, J = 241 Hz, F), - 120.38 (d ancha, J = 241 Hz, F).
13C RMN (125 MHz, MeOD): Sc 174.65 (d, 3Jc-p = 5.0 Hz, C=O, ester), 167.65 (C-NH2 ), 157.75 (C=O base), 152.10 (d, 2Jc-p = 7.0 Hz, C-Ar), 142.28 (CH-base), 137.50 (C-Ar), 130.86, 129.63, 129.40, 129.32, 126.31 (CH-Ar), 124.50 (d, 1Jc - f = 257 Hz, CF2), 121.44, 121.40 (CH-Ar), 96.67 (CH-base), 85.90 (señal ancha, C-1'), 80.27 (C-4'), 71.30 (t aparente, 2Jc -f = 23.7 Hz, C-3'), 68.02 (OCH2 Ph), 65.50 (C-5'), 51.83 (CHCH3 ), 20.22 (d, 3Jc -p = 7.5 Hz, CHCH3).
HPLC inversa, eluyendo con H2O/MeOH de 100/0 a 0/100 en 35 min, mostró un pico de diastereoisómero con ír = 21.87 minutos
También se obtuvieron datos de difracción de rayos X para los dos isómeros y las imágenes resultantes se muestran en las Figuras 2 y 3. Los datos y la metodología de difracción correspondientes se proporcionan en las Tablas 1 a 4 a continuación.
Tabla 1. Refinamiento de estructura y datos de cristal para (R)-epímero 4.
Figure imgf000009_0001
Figure imgf000010_0001
Tabla 2. Coordenadas atómicas ( * 104) y parámetros de desplazamiento isotrópico equivalentes (A2* 103) para (R)-epímero 4.
U(eq) se define como un tercio de la traza del tensor Uij ortogonalizado.
Figure imgf000010_0002
U(eq) se define como un tercio de la traza del tensor Uij ortogonalizado.
Figure imgf000011_0001
Tabla 3. Refinamiento de estructura y datos de cristal para (S)-epímero 3.
Figure imgf000011_0002
Figure imgf000012_0001
Tabla 4. Coordenadas atómicas (* 104) y parámetros de desplazamiento isotrópico equivalentes (A2* 103) para el (S)-epímero 3.
U(eq) se define como un tercio de la traza del tensor Uij ortogonalizado.
Figure imgf000012_0002
U(eq) se define como un tercio de la traza del tensor Uij ortogonalizado.
Figure imgf000013_0001
U(eq) se define como un tercio de la traza del tensor Uij ortogonalizado.
Figure imgf000014_0001
U(eq) se define como un tercio de la traza del tensor Uij ortogonalizado.
Figure imgf000015_0001
U(eq) se define como un tercio de la traza del tensor Uij ortogonalizado.
Figure imgf000016_0002
Ejemplo 2
Las solubilidades de NUC-1031 y sus diastereoisómeros se determinaron en un rango de sistemas de disolventes farmacéuticamente aceptables. El protocolo adoptado fue el siguiente:
Se preparó un pequeño volumen, 1 - 2 mL, de cada sistema disolvente y se agregó un peso del compuesto en cuestión. Las soluciones se agitaron durante aproximadamente 4 horas y luego se filtraron con membrana 0.45 μl. A continuación, se determinó la concentración del compuesto en cuestión en el filtrado mediante un ensayo de HPLC.
Con base en el programa de dosificación de gemcitabina utilizado en el tratamiento del cáncer de páncreas, la dosis ajustada por peso molecular de NUC-1031 sería de aproximadamente 3200 mg, administrada como una infusión una vez por semana. Como indicación del nivel de solubilidad requerido, tomando un objetivo teórico de un volumen de infusión de 500 ml, la solubilidad requerida del NUC-1031 sería >6 mg/ml en el fluido de infusión. Sin embargo, este nivel de solubilidad es solo una indicación y las solubilidades a continuación todavía pueden proporcionar terapias efectivas.
La Tabla 5 muestra la solubilidad de una mezcla epimérica de gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-fosfato 2 en un rango de disolventes adecuados para la administración intravenosa.
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000017_0001
La Tabla 6 muestra la solubilidad de los dos epímeros 3 y 4 de gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-fosfato en un rango de mezclas de disolvente/agua.
Figure imgf000017_0002
Como se puede ver en la Tabla 6, el (R)-epímero 4 es sustancialmente insoluble en mezclas al 10% de disolventes orgánicos polares en agua. El (S)-epímero 3, por otro lado, muestra una solubilidad significativamente mejorada. En mezclas al 50% de disolventes orgánicos polares en agua, el (S)-epímero 3 puede ser más de 100 veces más soluble que el (R)-epímero4. El (S)-epímero puede así proporcionar una terapia potencialmente muy conveniente y eficaz.
Ejemplo 3
Para evaluar la captación diferencial de los (R)- y (S)-epímeros en ciclodextrina, se registraron los espectros de 31P RMN de la mezcla de isómeros NUC-1031 después del tratamiento con HP-p-CD en D2O.
Estudios de RMN. Se registraron 1H RMN (500 MHz) y 31P NMR (202 MHz) en un espectrómetro Bruker Avance de 500 MHz a 25 °C. Los desplazamientos químicos (d) se citan en partes por millón (ppm) en relación con el D2O interno (d 4.9 1H RMN) o el 85 % de H3 PO4 externo (d 0.00 31P RMN). Tanto los estudios de HPLC como los de RMN se llevaron a cabo a temperatura ambiente.
Estudios de HPLC. El análisis analítico de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) se realizó utilizando un sistema ThermoScientific. Los análisis de HPLC de fase inversa se llevaron a cabo en un SCIENTIFIC Hypersil Gold C18, 5 |j, 150 x 4 .6 mm eluyendo con H2O/CH3CN de 90/10 a 0/100 en 30 min a una tasa de flujo de 1mL/min y a la longitud de onda de detección de 280 nm. Los tiempos de retención de los epímeros NUC-1031 (disueltos en MeOH) se observan respectivamente a los 13.58 min para el (S)-epímero 3 y a los 13.44 min para el (R)-epímero 4 bajo estas condiciones (Fig. 5A).
Se pesaron 2.36 mg de mezcla de isómeros NUC-1031 (1:1.1 (S):(R)) y se transfirieron a un tubo de RMN. A continuación, se disolvieron 13.3 mg de HP-p-CD en 1.3 ml de óxido de deuterio y se añadió esta solución al tubo de RMN (relación molar 1:2.3 NUC1031: HP-p-CD) (NOTA: no todo el sólido se disuelve en la solución).
El espectro de 31P RMN muestra que HP-p-CD es capaz de mejorar la solubilidad de NUC-1031 (S)-epímero 3 (4.14 Hz) en relación con el (R)-epímero (4.00 Hz), con la relación observada de (S)- y (R)-epímeros en solución siendo 6.6:1 a favor del (S)-epímero (Fig. 4).
0.5 ml de la solución de D2O del estudio de RMN se diluyó a 1 ml mediante la adición de 0.5 ml de agua (1.15 mg/ml). Se inyectaron 20 jL de esta solución en la HPLC.
El análisis de HPLC de la muestra de RMN diluida confirmó que el (S)-epímero 3 se disuelve mejor que (R)-epímero 4, con la relación observada de (S)- y (R)-epímeros en solución siendo 5:1 a favor de (S)-epímero, ampliamente de acuerdo con los datos de RMN (Fig. 5b ).
Estudios similares realizados con otro derivado de fosfato de gemcitabina no mostraron diferencias entre la absorción de (S)- y (R)-epímeros de ese derivado en una solución de ciclodextrina.
Ejemplo 4
El aclaramiento y la biodisponibilidad de la mayoría de los medicamentos están fuertemente influenciados por su metabolismo de primer paso en el hígado. Es posible estimar la "estabilidad metabólica" hepática relativa in vitro incubando compuestos con hepatocitos crioconservados y determinando la cantidad inicial frente a la final del compuesto de prueba en las mezclas de incubación.
El siguiente procedimiento es un ensayo de HPLC-MS/MS que utiliza una suspensión de hepatocitos humanos crioconservados combinados.
Matriz de ensayo
Hepatocitos humanos: género mixto y grupo de 10
Densidad celular final: 1 millón (106) células viables/mL
Protocolo experimental
Los hepatocitos crioconservados agrupados se descongelan, se lavan y se resuspenden en tampón de Krebs-Heinslet (pH 7.3). La reacción se inicia agregando el compuesto de prueba (concentración final de 1 μM) a la suspensión celular y se incuba en un volumen final de 100 μL en una placa de 96 pocillos de fondo plano durante 0 minutos y 120 minutos, respectivamente, a 37 °C /5 % CO2. La reacción se detiene añadiendo 100 j L de acetonitrilo a la mezcla de incubación. A continuación, las muestras se mezclan suave y brevemente en un agitador de placas, se transfieren completamente a una placa de 96 pocillos con fondo en V de 0.8 ml y se centrifugan a 2550 xg durante 15 minutos a temperatura ambiente. Cada sobrenadante (150 μL) se transfiere a un tubo de racimo limpio, seguido de un análisis HPLC-MS/MS en un sistema de triple cuadrupolo Thermo Electron.
Este ensayo se modificó para la determinación de la vida media. En este caso, los puntos de tiempo de muestreo son 0, 30, 60, 90 y 120 minutos.
Compuestos de referencia
Se probaron cuatro compuestos de referencia (1 μM) simultáneamente con los compuestos de prueba. El propranolol es relativamente estable en los hepatocitos humanos, mientras que el flurazepam, la naloxona y la terfenadina son relativamente inestables en los hepatocitos humanos.
Métodos analíticos
Las muestras se analizan a través de (RP)HPLC-MS/MS usando monitorización de reacción seleccionada (SRM). Las condiciones de HPLC consisten en una bomba binaria HP1100 con muestreador automático, una columna de 2 * 20 mm de modo mixto C-12 y un gradiente.
Análisis de los datos
Las áreas de los picos correspondientes al compuesto de ensayo se registran mediante HPLC-MS/MS. La estabilidad metabólica, expresada como porcentaje del compuesto de prueba restante, se calcula comparando las áreas pico del compuesto de prueba a las 2 horas con el tiempo cero. En el caso de la determinación de la vida media, la vida media se estima a partir de la pendiente del rango lineal inicial de la curva logarítmica del compuesto de ensayo restante (%) frente al tiempo, asumiendo una cinética de primer orden.
Los resultados se muestran en la Tabla 7.
Figure imgf000019_0001

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3:
Figure imgf000020_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que tiene una pureza diastereoisomérica superior al 90%, para uso en el tratamiento de un cáncer seleccionado de cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, colangiocarcinoma, cáncer renal, cáncer cerical y cáncer tímico.
2. Gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3:
Figure imgf000020_0002
que tiene una pureza diastereoisomérica superior al 90%, para uso en el tratamiento de un cáncer seleccionado de cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, colangiocarcinoma, cáncer renal, cáncer cervical y cáncer de timo.
3. El compuesto para uso de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que el cáncer es cáncer de pá
4. El compuesto para uso de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que el cáncer es cáncer de ov
5. El compuesto para uso de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que el cáncer es colangiocarc
6. Una formulación farmacéutica que comprende gemcitabin-[fenil-(benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3:
Figure imgf000020_0003
o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables, con una pureza diastereoisomérica superior al 90 %, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de un cáncer seleccionado de cáncer de páncreas, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de vejiga, colangiocarcinoma, cáncer renal, cáncer cervical y cáncer de timo.
7. La formulación para uso de la reivindicación 6, en la que el cáncer es cáncer de páncreas.
8. La formulación para uso de la reivindicación 6, en la que el cáncer es cáncer de ovario.
9. La formulación para uso de la reivindicación 6, en la que el cáncer es un colangiocarcinoma.
10. La formulación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, en la que la formulación comprende ciclodextrina.
11. La formulación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, en la que la formulación es para administración oral.
12. La formulación para uso de una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, en la que la formulación es para administración intravenosa.
13. La formulación para uso de la reivindicación 12, en la que la formulación comprende un disolvente orgánico polar.
14. El compuesto o formulación para uso de cualquier reivindicación precedente, en el que la pureza diastereoisomérica de la gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3 es superior al 98%.
15. El compuesto o formulación para uso de la reivindicación 14, en el que la pureza diastereoisomérica de la gemcitabin-[fenil-benzoxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 3 es superior al 99.5%.
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Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111592577A (zh) 2012-11-16 2020-08-28 努卡那公共有限公司 用于制备核苷前体药物的方法
SG10201907898SA (en) 2014-06-25 2019-09-27 NuCana plc Gemcitabine prodrugs
PL3119794T3 (pl) 2014-06-25 2018-04-30 NuCana plc Preparat zawierający prolek gemcytabiny
GB201417644D0 (en) 2014-10-06 2014-11-19 Nucana Biomed Ltd Method of separating phosphate diastereoisomers
CN106543252A (zh) 2015-09-16 2017-03-29 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 核苷氨基磷酸酯类前药的制备方法及其中间体
CN106543220A (zh) 2015-09-16 2017-03-29 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶体
CN106478753A (zh) * 2015-09-16 2017-03-08 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种nuc‑1031单一异构体的制备方法和用途
KR20180063075A (ko) 2015-10-05 2018-06-11 뉴카나 피엘씨 조합 요법
SI3386998T1 (sl) 2015-12-11 2022-02-28 NuCana plc Diastereoselektivna sinteza fosfatnih derivatov in predzdravila gemcitabina NUC-1031
GB201522771D0 (en) 2015-12-23 2016-02-03 Nucana Biomed Ltd Crystalline form of a phosphate derivative
GB201609600D0 (en) * 2016-06-01 2016-07-13 Nucuna Biomed Ltd Cancer treatments
CN107652342A (zh) * 2016-07-23 2018-02-02 江苏万高药业股份有限公司 核苷氨基磷酸酯类前药的多晶型及其制备方法
CN106946960A (zh) * 2017-03-29 2017-07-14 郑州泰基鸿诺医药股份有限公司 一种吉西他滨前药的晶型、制备方法、用途和药物组合物
GB201709471D0 (en) 2017-06-14 2017-07-26 Nucana Biomed Ltd Diastereoselective synthesis of hosphate derivatives
CN110806454A (zh) * 2018-08-06 2020-02-18 江苏正大清江制药有限公司 一种盐酸吉西他滨中手性异构体的检测方法
CN110215469B (zh) * 2019-07-08 2021-11-30 绍兴市人民医院 一种治疗胆管癌的药物组合物

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6703396B1 (en) 1990-02-01 2004-03-09 Emory University Method of resolution and antiviral activity of 1,3-oxathiolane nuclesoside enantiomers
US5728575A (en) 1990-02-01 1998-03-17 Emory University Method of resolution of 1,3-oxathiolane nucleoside enantiomers
PT1045897E (pt) 1998-01-23 2002-07-31 Newbiotics Inc Agentes terapeuticos por catalise enzimatica
US7462605B2 (en) 1998-01-23 2008-12-09 Celmed Oncology (Usa), Inc. Phosphoramidate compounds and methods of use
ATE429438T1 (de) 1999-07-22 2009-05-15 Celmed Oncology Usa Inc Enzym katalisierte therapeutische aktivierung
GB0317009D0 (en) 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
WO2006081363A2 (en) 2005-01-27 2006-08-03 Erimos Pharmaceuticals Llc Oral formulations for delivery of catecholic butanes including ndga compounds
EP1928475B1 (en) 2005-08-15 2018-05-23 Riboscience LLC Antiviral phosphoramidates of 4'-c-azido-substituted pronucleotides
WO2007092620A2 (en) 2006-02-09 2007-08-16 Macusight, Inc. Stable formulations, and methods of their preparation and use
GB0821994D0 (en) 2008-12-02 2009-01-07 Ge Healthcare Ltd In viva imaging method
KR20110120886A (ko) 2009-01-09 2011-11-04 유니버시티 칼리지 오브 카디프 컨설턴트 리미티드 바이러스 감염 치료용 구아노신 뉴클레오사이드 화합물의 포스포라미데이트 유도체
TWI583692B (zh) 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
KR20120086729A (ko) 2009-11-20 2012-08-03 클라비스 파마 에이에스에이 젬시타빈 유도체의 비경구적 제제
SG188497A1 (en) 2010-09-22 2013-05-31 Alios Biopharma Inc Substituted nucleotide analogs
DK3031812T3 (en) 2011-03-01 2018-09-17 NuCana plc CHEMICAL COMPOUNDS
ES2575676T3 (es) 2012-01-20 2016-06-30 Aratana Therapeutics Nv Composición de colirio
CN111592577A (zh) * 2012-11-16 2020-08-28 努卡那公共有限公司 用于制备核苷前体药物的方法
GB2517988A (en) * 2013-09-09 2015-03-11 Redx Pharma Ltd Compounds
DK3043803T3 (da) 2013-09-11 2022-08-01 Univ Emory Nukleotid- og nucleosidsammensætninger og deres anvendelse
AU2014354775A1 (en) * 2013-11-27 2016-05-19 Idenix Pharmaceuticals Llc Nucleotides for the treatment of liver cancer
SG10201907898SA (en) 2014-06-25 2019-09-27 NuCana plc Gemcitabine prodrugs
PL3119794T3 (pl) * 2014-06-25 2018-04-30 NuCana plc Preparat zawierający prolek gemcytabiny
US9834577B2 (en) 2014-07-22 2017-12-05 Laurus Labs Limited Process for the preparation of gemcitabine-[phenyl(benzoxy-L-alaninyl)] phosphate
GB201417644D0 (en) 2014-10-06 2014-11-19 Nucana Biomed Ltd Method of separating phosphate diastereoisomers
SI3197456T1 (en) 2015-05-14 2018-08-31 NuCana plc CANCER CANCER
KR20180063075A (ko) 2015-10-05 2018-06-11 뉴카나 피엘씨 조합 요법
SI3386998T1 (sl) 2015-12-11 2022-02-28 NuCana plc Diastereoselektivna sinteza fosfatnih derivatov in predzdravila gemcitabina NUC-1031
SG11201805184TA (en) 2015-12-23 2018-07-30 NuCana plc Combination therapy
GB201522771D0 (en) 2015-12-23 2016-02-03 Nucana Biomed Ltd Crystalline form of a phosphate derivative
KR102566461B1 (ko) 2015-12-23 2023-08-14 뉴카나 피엘씨 조합 요법

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