ES2945736T3 - Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN - Google Patents

Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN Download PDF

Info

Publication number
ES2945736T3
ES2945736T3 ES19211939T ES19211939T ES2945736T3 ES 2945736 T3 ES2945736 T3 ES 2945736T3 ES 19211939 T ES19211939 T ES 19211939T ES 19211939 T ES19211939 T ES 19211939T ES 2945736 T3 ES2945736 T3 ES 2945736T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
mmol
meoh
methyl
thiadiazol
bromo
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES19211939T
Other languages
English (en)
Inventor
Jake Axford
Natalie Dales
Moo Je Sung
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novartis AG
Original Assignee
Novartis AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis AG filed Critical Novartis AG
Application granted granted Critical
Publication of ES2945736T3 publication Critical patent/ES2945736T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/433—Thidiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/438—The ring being spiro-condensed with carbocyclic or heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4436—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/20—Spiro-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

La presente invención proporciona un compuesto de Fórmula (X) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; un método para fabricar los compuestos de la invención y sus usos terapéuticos. La presente invención proporciona además una combinación de agentes farmacológicamente activos y una composición farmacéutica. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN Antecedentes de la invención
La atrofia muscular espinal proximal (AME) es un grupo heredado, clínicamente heterogéneo de trastornos neuromusculares que se caracteriza por la degeneración de las células del asta anterior de la médula espinal. Los pacientes padecen debilidad simétrica de los músculos del tronco y las extremidades, viéndose las piernas más afectadas que los brazos y quedando los músculos proximales más débiles que los distales; el diafragma, los músculos faciales y oculares quedan exentos. Existen tres formas de AME de inicio en la infancia (tipos I, II y III) y una forma IV de inicio en la edad adulta clasificada de forma relativamente reciente, todas las cuales se pueden distinguir en función de la edad de inicio y la gravedad del curso clínico que se evalúa mediante un examen clínico, biopsia muscular y electromiografía (EMG) (Munsat TL, Davies KE (1992)).
El tipo I (enfermedad de Werdnig-Hoffmann) es la forma más aguda y grave, con inicio antes de los seis meses y fallecimiento por lo general antes de los dos años; los niños nunca pueden sentarse sin ayuda. Los síntomas de la enfermedad pueden estar presentes en el útero, como una reducción de los movimientos fetales; al nacer; o más a menudo, dentro de los primeros cuatro meses de vida. Los bebés afectados son particularmente flácidos, experimentan dificultades de alimentación y respiración diafragmática, y se caracterizan por una debilidad general en los músculos respiratorios intercostales y accesorios. Los niños afectados nunca se sientan ni se aguantan de pie y por lo general fallecen antes de los 2 años de edad; el fallecimiento se debe generalmente a una insuficiencia respiratoria.
El tipo II (forma intermedia, crónica) tiene un inicio entre los seis y dieciocho meses de edad; las fasciculaciones musculares son comunes y los reflejos tendinosos se reducen progresivamente. Los niños no pueden aguantarse de pie ni caminar sin ayuda. Por lo general no se manifiestan problemas de alimentación ni deglución en la AME de tipo Ii, aunque en algunos pacientes puede ser necesaria una sonda de alimentación. La mayoría de los pacientes desarrollan por lo general una escoliosis muscular progresiva que puede requerir corrección quirúrgica. Al igual que en los pacientes con la enfermedad de tipo I, la eliminación de las secreciones traqueales y la tos pueden suponer dificultades debido a una función bulbar deficiente y al hecho de que los músculos intercostales están debilitados. Estos pacientes presentan hipotonía profunda, parálisis flácida simétrica y no controlan el movimiento de la cabeza. El tipo III (enfermedad de Kugelberg-Welander o atrofia muscular espinal juvenil) es una forma leve crónica, que comienza después de los 18 meses de edad; se consigue un desarrollo motriz normal y se puede evitar la deambulación hasta edades variables. Estos pacientes desarrollan a menudo escoliosis y se observan con frecuencia síntomas de sobreuso articular, provocados en general por la debilidad. La esperanza de vida es casi normal, pero la calidad de vida se ve afectada en gran medida.
Los tipos I, II y III de la AME evolucionan con el tiempo, acompañados de un deterioro de la afección del paciente. El tipo IV de inicio en la edad adulta se caracteriza por debilidad en la segunda o tercera década de la vida, con un deterioro motriz leve que no va acompañado de problemas respiratorios ni nutricionales. La AME del adulto se caracteriza por un inicio insidioso y una evolución muy lenta. Los músculos bulbares rara vez se ven afectados en el tipo IV. No está claro que la AME de tipo IV esté etiológicamente relacionada con las formas de tipo I-III.
Otras formas de atrofia muscular espinal incluyen la enfermedad relacionada con el cromosoma X, atrofia muscular espinal con dificultad respiratoria (AMEDR), atrofia muscular espinal y bulbar (enfermedad de Kennedy o atrofia muscular bulboespinal) y atrofia muscular espinal distal.
La AME se debe a mutaciones en el gen de Supervivencia de MotoNeuronas (SMN), que existe en dos formas en los seres humanos (SMN1 y SMN2). La pérdida de SMN es perjudicial para las neuronas motoras y produce insuficiencia neuromuscular, una característica distintiva de la enfermedad. Desde un punto de vista genético, la AME es una afección autosómica recesiva, provocada por la alteración del gen SMN1, que se encuentra localizado en 5q13 (Lefebvre S. et al. (1995) Cell 80: 155-165). Más de un 98% de los pacientes con atrofia muscular espinal tienen una alteración homocigótica de SMN1 por deleción, reordenamiento o mutación. Todos estos pacientes, sin embargo, conservan al menos una copia de SMN2.
A nivel genómico, solo se han encontrado cinco nucleótidos que diferencian el gen SMN1 del gen SMN2. Además, los dos genes producen ARNm idénticos, excepto por un cambio silencioso de nucleótidos en el exón 7, es decir, un cambio C ^T seis pares de bases dentro del exón 7 en SMN2. Esta mutación modula la actividad de un potenciador del corte y empalme del exón (Lorson y Androphy (2000) Hum. Mol. Genet. 9:259-265). El resultado de este y de los otros cambios de nucleótidos en las regiones intrónicas y promotoras es que la mayoría de SMN2 se cortan y empalman de forma alternativa y sus transcritos carecen de los exones 3, 5 o 7. Por el contrario, el ARNm transcrito a partir del gen SMN1 es por lo general un ARNm de longitud completa con solo una pequeña fracción de sus transcritos cortada y empalmada para eliminar el exón 3, 5 o 7 (Gennarelli et al. (1995) Biochem. Biophys. Res. Commun. 213:342-348; Jong et al. (2000) J. Neurol. Sci. 173:147-153). Todos los sujetos con AME tienen al menos una, y por lo general de dos a cuatro copias del gen SMN2, que codifica la misma proteína que SMN1; sin embargo, el gen SMN2 produce predominantemente la proteína truncada (SMNA7) y solo niveles bajos de proteína SMN de longitud completa.
La proteína SMNA7 no es funcional y se cree que se degrada rápidamente. Alrededor de un 10% del pre-ARNm de SMN2 se corta y empalma de forma adecuada y posteriormente se traduce en proteína SMN de longitud completa (FL-SMN), siendo el resto la copia de SMNA7. La eficacia del corte y empalme de SMN2 podría depender de la gravedad de la enfermedad, y la producción de un transcrito de longitud completa de SMN2 podría variar de un 10% a un 50%. Además, la presencia o ausencia del gen SMN1, aproximadamente un 90% del cual se convierte en la proteína y el producto del gen FL-SMN, influye en la gravedad de la AME en el hecho de si puede compensar o no las copias truncadas de SMNA7. Un nivel bajo de proteína SMN permite el desarrollo embrionario, pero no es suficiente para mantener la supervivencia de las neuronas motoras de la médula espinal.
La gravedad clínica de los pacientes con AME se correlaciona inversamente con el número de genes SMN2 y con el nivel de proteína SMN funcional producida (Lorson C L et al. (1999) PNAS; 96:6307-6311) (Vitali T. et al. (1999) Hum Mol Genet; 8:2525-2532) (Brahe C. (2000) Neuromusc. Disord.; 10:274-275) (Feldkotter M et al. (2002) Am J Hum Genet; 70:358-368) (Lefebvre S et al. (1997) Nature Genet; 16:265-269) (Coovert D D et al. (1997) Hum Mol Genet; 6:1205-1214) (Patrizi A L et al. (1999) Eur J Hum Genet; 7:301-309).
Las estrategias terapéuticas actuales para la AME se centran principalmente en elevar los niveles de proteína SMN de longitud completa (de origen natural), modular el corte y empalme hacia la inclusión del exón 7, estabilizar la proteína de origen natural y, en menor medida, en restaurar la función muscular en la AME proporcionando apoyo trófico o inhibiendo la atrofia del músculo esquelético.
El mecanismo que conduce a la pérdida de motoneuronas y a la atrofia muscular sigue siendo desconocido, aunque la disponibilidad de modelos animales de la enfermedad está aumentando rápidamente los conocimientos en este campo (Frugier T et al. (2000) Hum Mol. Genet. 9:849-58; Monani U R et al. (2000) Hum Mol Genet 9:333-9; Hsieh-Li H M et al. (2000) Nat Genet 24:66-70; Jablonka S et al. (2000) Hum Mol. Genet. 9:341-6). Además, la función de la proteína SMN sigue siendo parcialmente desconocida y los estudios indican que puede estar involucrada en el metabolismo del ARNm (Meister G et al. (2002). Trends Cell Biol. 12:472-8; Pellizzoni L et al. (2002). Science. 298: 1775-9) y probablemente en el transporte de proteínas/ARNm hacia las uniones neuromusculares (Ci-fuentes-Diaz C et al. (2002) Hum Mol. Genet. 11: 1439-47; Chan Y B et al. (2003) Hum Mol. Genet. 12:1367-76; McWhorter M L et al. (2003) J. Cell Biol. 162:919-31; Rossoll W et al. (2003) J. Cell Biol. 163:801-812).
Además de las AME, se ha descrito por otra parte que una subclase de artrogriposis múltiple congénita de tipo neurogénico (AMC congénita) involucra la eliminación del gen SMN1, lo que sugiere que cierto grado de patología en los afectados probablemente se deba a unos niveles bajos de neurona motora SMN (L. Burgien et al., (1996) J. Clin. Invest. 98(5):1130-32). La AMC congénita afecta a seres humanos y animales, por ejemplo, caballos, ganado, ovejas, cabras, cerdos, perros y gatos (M. Longeri et al., (2003) Genet. Sel. Evol. 35:S167-S175). Además, se ha demostrado que el riesgo de desarrollar esclerosis lateral amiotrófica (ELA) o la gravedad de esta se correlacionan con unos niveles bajos de neurona motora SMN.
No existe una cura ni tratamiento eficaz para la AME disponible hasta la fecha y, por lo tanto, sería favorable proporcionar métodos novedosos para modular SMN con el fin de tratar a los afectados de AME, de AMC congénita neurogénica, ALS u otras afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN. Por ejemplo, el documento WO2001/130515 y Xiao, J. et al., J. Med. Chem., 2011, 54, 6215-6233 describen compuestos que actúan como moduladores de la proteína SMN. Sería además favorable proporcionar dianas farmacológicas novedosas que se pudieran utilizar como base para desarrollar terapias o diagnósticos efectivos para tales afecciones neuronales. Compendio de la invención
Se necesitan nuevos tratamientos y terapias para la atrofia muscular espinal. La invención proporciona compuestos, sales de estos, formulaciones farmacéuticas de estos y combinaciones de estos, donde los compuestos son moduladores de la atrofia muscular espinal. La invención proporciona además compuestos para su uso en métodos de tratamiento, prevención o mejora de la atrofia muscular espinal, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad eficaz de un modulador de SMN (por ejemplo, un compuesto de la invención).
En la presente se describen varias realizaciones de la invención. Se reconocerá que las características especificadas en cada realización se pueden combinar con otras características especificadas para proporcionar otras realizaciones. En ciertos aspectos, los moduladores de SMN proporcionados en la presente son compuestos de Fórmula X y sales de estos:
Figure imgf000004_0001
donde
A' se selecciona entre:
Figure imgf000004_0002
B se selecciona entre
Figure imgf000004_0003
donde Z es NH o N(Me);
o B se selecciona entre
Figure imgf000004_0004
En otra realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la definición de la Fórmula (X), o subfórmulas de esta, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.
En otra realización, la invención proporciona una combinación, en particular una combinación farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de acuerdo con la definición de la Fórmula (X), o subfórmulas de esta, y uno o más agentes terapéuticamente activos.
Una realización de la invención es proporcionar un compuesto para su uso en métodos para el tratamiento, prevención o mejora de una afección relacionada con la deficiencia de SMN, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz de un modulador de SMN, o una composición farmacéutica que lo comprende.
Se describe un método de modulación de la proteína SMN a través de la administración de un modulador de SMN. En otra realización, dicho modulador de SMN es capaz de incrementar uno o más de los niveles de FL-SMN o SMNA7. En otra realización más, dicho modulador de SMN es capaz de prevenir que el exón 7 se separe del transcripto de SMN.
La presente invención se basa en el descubrimiento de que los moduladores de SMN de la invención (p. ej., compuestos de fórmula (X) y/o subfórmulas de esta) son capaces de modular las proteínas SMN, p. ej., a través de la activación del promotor de SMN, la modulación del corte y empalme (p. ej., evitar que el exón 7 se separe del gen de SMN) y/o la modulación de la estabilidad de la proteína SMN.
Descripción detallada de la invención
Como se ha mencionado anteriormente, la presente invención proporciona compuestos que modulan la actividad de SMN. Tales compuestos se pueden utilizar in vivo o in vitro para modular (preferentemente incrementar) la producción y la actividad de SMN en varios contextos.
En una primera realización, la invención proporciona compuestos de Fórmula X y sales farmacéuticamente aceptables de estos, que modulan la actividad de SMN. Los compuestos de Fórmula X se representan por la estructura:
Figure imgf000005_0001
donde A' se selecciona entre:
Figure imgf000005_0002
B se selecciona entre
Figure imgf000005_0003
donde Z es NH o N(Me);
o B se selecciona entre
Figure imgf000005_0004
En una segunda realización, la invención es un compuesto, o sal de este, de acuerdo con la primera realización, donde B se selecciona entre
Figure imgf000006_0004
donde Z es NH o N(Me).
En una tercera realización, la invención es un compuesto, o sal de este, de acuerdo con la primera o segunda
realizaciones, donde B e
Figure imgf000006_0001
En una cuarta realización, un compuesto, o sal de este, de acuerdo con la primera realización, donde B se selecciona entre
Figure imgf000006_0003
En una quinta realización, la invención es un compuesto, o sal de este, de acuerdo con cualquiera de la primera a cuarta realizaciones, donde B es
Figure imgf000006_0002
En una sexta realización, la invención es un compuesto, o sal de este, seleccionado entre el grupo que consiste en:
-metoxi-1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona; 4-hidroxi-1 -metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1 H)-ona; 3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona; y
1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona.
En una séptima realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.
En una octava realización, la invención es una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones primera a sexta o una sal farmacéuticamente aceptable de este y uno o más coagentes terapéuticamente activos.
En una novena realización, la invención es un compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones primera a sexta o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso como medicamento.
En una décima realización, la invención es un compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de una afección relacionada con la deficiencia de SMN.
En una decimoprimera realización, la invención es el compuesto de acuerdo con cualquiera de las realizaciones primera a sexta, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso de acuerdo con la décima realización, donde la afección relacionada con la deficiencia de SMN es atrofia muscular espinal.
A efectos de interpretación de esta memoria descriptiva, se aplicarán las siguientes definiciones y, cuando proceda, los términos utilizados en singular también incluirán el plural y viceversa.
La expresión «modulador de SMN», tal como se utiliza en la presente, incluye agentes, tales como los compuestos de la invención, que poseen la capacidad de modular, por ejemplo, incrementar, los niveles de proteína SMN mediante al menos uno de los múltiples mecanismos posibles. Un conjunto no limitante de mecanismos incluye la activación del promotor de SMN, la modulación del corte y empalme (por ejemplo, evitar que el exón 7 se separe del gen SMN) y la modulación de la estabilidad de la proteína SMN. Los moduladores de SMN pueden modular, por ejemplo, incrementar los niveles de FL-SMN y/o SMNA7 a través de cualquiera de dichos mecanismos, y/o pueden evitar que SMNA7 se degrade.
La expresión «compuestos de la invención», tal como se utiliza en la presente, incluye los compuestos de fórmula (X).
La expresión «afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN», tal como se utiliza en la presente, incluye, sin carácter limitante, atrofia muscular espinal (AME), artrogriposis múltiple congénita de tipo neurogénico (AMC congénita) y esclerosis lateral amiotrófica (ELA).
La expresión «atrofia muscular espinal», «AME», tal como se utiliza en la presente, incluye tres formas de AME de inicio en la infancia: El tipo I (enfermedad de Werdnig-Hoffmann); tipo II (forma intermedia, crónica), tipo III (enfermedad de Kugelberg-Welander o atrofia muscular espinal juvenil); tipo IV de inicio en la edad adulta; así como otras formas de AME, que incluyen la enfermedad relacionada con el cromosoma X, atrofia muscular espinal con dificultad respiratoria (AMEDR), atrofia muscular espinal y bulbar (enfermedad de Kennedy o atrofia muscular bulboespinal) y atrofia muscular espinal distal.
A efectos de interpretación de esta memoria descriptiva, se aplicarán las siguientes definiciones y, cuando proceda, los términos utilizados en singular también incluirán el plural y viceversa.
La expresión «alquilo C1-10», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un resto hidrocarbonado ramificado o no ramificado totalmente saturado que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. Las expresiones «alquilo Ci -6» y «alquilo Ci-4» deben interpretarse de forma correspondiente. Los ejemplos representativos de alquilo C1-10 incluyen, sin carácter limitante, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, isobutilo, tert-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, n-hexilo, 3-metilhexilo, 2,2-dimetilpentilo, 2,3-dimetilpentilo, n-heptilo, n-octilo, n-nonilo y n-decilo.
La expresión «alquileno C1-10», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un grupo alquilo divalente tal como se ha definido anteriormente en la presente que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. Las expresiones «alquileno C1-6» y «alquileno C1-4» deben interpretarse de forma correspondiente. Los ejemplos representativos de alquileno C1-10 incluyen, sin carácter limitante, metileno, etileno, n-propileno, isopropileno, n-butileno, sec-butileno, isobutileno, tert-butileno, n-pentileno, isopentileno, neopentileno, n-hexileno, 3-metilhexileno, 2,2-dimetilpentileno, 2,3-dimetilpentileno, n-heptileno, n-octileno, n-nonileno y n-decileno.
La expresión «haloalquilo C1-4» se refiere a un grupo alquilo C1-4 tal como se define en la presente, donde al menos uno de los átomos de hidrógeno se reemplaza por un átomo halogenado. El grupo haloalquilo C1-4 puede ser monohaloalquilo C1-4, dihaloalquilo C1-4 o polihaloalquilo C1-4, que incluye perhaloalquilo C1-4. Un monohaloalquilo C1-4 puede tener un yodo, bromo, cloro o fluoro dentro del grupo alquilo. Los grupos dihaloalquilo C1-4 y polihaloalquilo C1-4 pueden tener dos o más de los átomos halogenados iguales o una combinación de átomos halogenados diferentes dentro del alquilo. Normalmente, el grupo polihaloalquilo C1-4 contiene un máximo de 12, o 10, u 8, o 6, o 4, o 3, o 2 grupos halogenados. Los ejemplos no limitantes de haloalquilo C1-4 incluyen fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, clorometilo, diclorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, heptafluoropropilo, difluoroclorometilo, diclorofluorometilo, difluoroetilo, difluoropropilo, dicloroetilo y dicloropropilo. Un grupo perhaloalquilo C1-4 se refiere a un grupo alquilo C1-4 que tiene todos los átomos de hidrógeno reemplazados por átomos halogenados.
El término «arilo» se refiere a un grupo hidrocarbonado aromático que tiene 6-20 átomos de carbono en la porción anular. Normalmente, el arilo es un arilo monocíclico, bicíclico o tricíclico que tiene 6-20 átomos de carbono e incluye uno o más anillos aromáticos fusionados con uno o más anillos hidrocarbonados no aromáticos. Algunos ejemplos no limitantes incluyen fenilo, naftilo o tetrahidronaftilo.
La expresión «alcoxi C1-10», tal como se utiliza en la presente, se refiere a (alquil C1-10)-O-, donde el alquilo C1-10 se ha definido anteriormente en la presente. La expresión «alcoxi C1-4» se refiere a (alquil C1-4)-O-, donde el alquilo C1-4 se ha definido anteriormente en la presente. Los ejemplos representativos de alcoxi C1-10 incluyen, sin carácter limitante, metoxi, etoxi, propoxi, 2-propoxi, butoxi, ferf-butoxi, pentiloxi, hexiloxi, heptiloxi, octiloxi- y deciloxi-.
El término «heterociclilo» o «heterociclo», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un anillo o sistema anular no aromático saturado o insaturado, que es un anillo monocíclico de 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, un sistema anular bicíclico de 7, 8, 9, 10, 11 o 12 miembros que contiene 1, 2, 3, 4 o 5 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, o un sistema anular tricíclico de 10, 11, 12, 13, 14 o 15 miembros y que contiene 1, 2, 3, 4, 5, 6 o 7 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, donde el N y el S también pueden estar oxidados opcionalmente en varios estados de oxidación. El grupo heterocíclico puede estar unido mediante un heteroátomo o un átomo de carbono. Los heterociclos pueden incluir anillos fusionados o con puentes, así como anillos espirocíclicos. Los ejemplos de heterociclos incluyen tetrahidrofurano (THF), dihidrofurano, 1,4-dioxano, morfolina, 1,4-ditiano, piperazina, piperidina, 1,3-dioxolano, imidazolidina, imidazolina, pirrolina, pirrolidina, tetrahidropirano, dihidropirano, oxatiolano, ditiolano, 1,3-dioxano, 1,3-ditiano, oxatiano y tiomorfolina.
La expresión «cicloalquilo C3-12», tal como se utiliza en la presente, se refiere a grupos hidrocarbonados monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos saturados o insaturados de 3-12 átomos de carbono. La expresión «cicloalquilo C3-18» se refiere a un grupo hidrocarbonado monocíclico totalmente saturado o insaturado de 3-8 átomos de carbono. La expresión «cicloalquilo C3-7» se refiere a grupos hidrocarbonados monocíclicos, bicíclicos o tricíclicos saturados o insaturados de 3-7 átomos de carbono. Los grupos hidrocarbonados monocíclicos a modo de ejemplo incluyen, sin carácter limitante, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo y ciclohexenilo. Los grupos hidrocarbonados bicíclicos a modo de ejemplo incluyen bornilo, indilo, hexahidroindilo, tetra hidron afti l o, decahidronaftilo, biciclo[2.1.1]hexilo, biciclo[2.2.1]heptilo, biciclo[2.2.1]heptenilo, 6,6-dimetilbiciclo[3.1.1]heptilo, 2,6,6-trimetilbiciclo[3.1.1]heptilo, biciclo[2.2.2]octilo. Los grupos hidrocarbonados tricíclicos a modo de ejemplo incluyen, por ejemplo, adamantilo.
La expresión, «cicloalquiloxi C3-12», tal como se utiliza en la presente, se refiere a cicloalquil C3-12-O-, donde cicloalquilo C3-12 se ha definido anteriormente en la presente. Los ejemplos representativos de cicloalklyoxi C3-12 incluyen, sin caracter limitante, grupos monocíclicos tales como ciclopropoxi, ciclobutoxi, ciclopentiloxi, ciclopenteniloxi, ciclohexiloxi y ciclohexeniloxi y similares. Los grupos hidrocarburo bicíclicos ilustrativos incluyen borniloxi, indiloxi, hexahidroindiloxi, tetrahidronaftiloxi, decahidronaftiloxi, biciclo[2.1.1]hexiloxi, biciclo[2.2.1]heptiloxi, biciclo[2.2.1]hepteniloxi, 6,6-dimetilbiciclo[3.1.1]heptiloxi, 2,6,6-trimetilbiciclo[3.1.1]heptiloxi, biciclo[2.2.2]octiloxi y similares. Los grupos hidrocarburo tricíclicos ilustrativos incluyen, por ejemplo, adamantiloxi.
El término «ariloxi», tal como se utiliza en la presente, se refiere tanto a un grupo --O-arilo como a un grupo --O-heteroarilo, donde el arilo y heteroarilo se han definido en la presente.
El término «heteroarilo», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un anillo aromático monocíclico de 5, 6 o 7 miembros que contiene 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, un sistema anular bicíclico fusionado de 8, 9 o 10 miembros que contiene 1, 2, 3, 4 o 5 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, o un sistema anular tricíclico fusionado de 11, 12, 13 o 14 miembros que contiene 1, 2, 3, 4, 5 o 6 heteroátomos seleccionados entre O, S y N, donde al menos uno de los anillos de los sistemas anulares bicíclico o tricíclico es totalmente aromático. Los grupos heteroarilo habituales incluyen 2- o 3-tienilo, 2- o 3-furilo, 2- o 3-pirrolilo, 2-, 4- o 5-imidazolilo, 3-, 4- o 5-pirazolilo, 2-, 4- o 5-tiazolilo, 3-, 4- o 5-isotiazolilo, 2-, 4- o 5-oxazolilo, 3-, 4- o 5-isoxazolilo, 3- o 5-1,2,4-triazolilo, 4- o 5- 1,2,3-triazolilo, tetrazolilo, 2-, 3- o 4-piridilo, 3- o 4-piridazinilo, 3-, 4- o 5-pirazinilo, 2-pirazinilo, 2-, 4- o 5-pirimidinilo, 1-, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- u 8-indolizinilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-isoindolilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-indolilo, 2-, 3-, 4-, 5­ , 6- o 7-indazolilo, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-purinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8- o 9-quinolizinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinolinilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-isoquinolinilo, 1-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-ftalazinilo, 2-, 3-, 4-, 5- o 6-naftiridinilo, 2-, 3-, 5-, 6- , 7- u 8-quinazolinilo, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-cinolinilo, 2-, 4-, 6- o 7-pteridinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-4aH-carbazolilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-carbazaolilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9-carbolinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8-, 9- o 10-fenantridinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9-acridinilo, 1-, 2-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9-perimidinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 8-, 9-o 10-fenatrolinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8- o 9-fenazinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7-, 8-, 9- o 10-fenotiazinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 6-, 7­ , 8-, 9- o 10-fenoxazinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, o 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9- o 10-bencisoqinolinilo, 2-, 3-, 4- o tieno[2,3-¿]furanilo, 2-, 3-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10 - u 11-7H-pirazino[2,3-c]carbazolilo, 2-, 3-, 5-, 6- o 7-2H-furo[3,2-jb]-piranilo, 2-, 3- , 4-, 5-, 7- u 8-5H-pirido[2,3-d]-o-oxazinilo, 1-, 3- o 5-1H-pirazolo[4,3-d]-oxazolilo, 2-, 4- o 5-4H-imidazo[4,5-d]tiazolilo, 3-, 5- u 8-pirazino[2,3-d]piridazinilo, 2-, 3-, 5- o 6- imidazo[2,1-¿]tiazolilo, 1-, 3-, 6-, 7-, 8- o 9-furo[3,4-c]cinolinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 8-, 9-, 10 u 11-4H-pirido[2,3-c]carbazolilo, 2-, 3-, 6- o 7-imidazo[1,2-¿][1,2,4]triazinilo, 7- benzo[jb]tienilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzoxazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-bencimidazolilo, 2-, 4-, 4-, 5-, 6- o 7-benzotiazolilo, 1-, 2-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- o 9- benzoxapinilo, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-benzoxazinilo, 1-, 2-, 3-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10- u 11-1H-pirrolo[1,2-¿][2]benzazapinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinolinilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-isoquinolinilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-o 7-indolilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-benzo[b]tienilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzoxazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-bencimidazolilo y 2-, 4- , 5-, 6- o 7-benzotiazolilo.
El término «halógeno» o «halo», tal como se utiliza en la presente, se refiere a fluoro, cloro, bromo y yodo.
El término «isómeros», tal como se utiliza en la presente, se refiere a compuestos diferentes que tienen la misma fórmula molecular, pero difieren en la disposición y configuración de los átomos. Además, la expresión «un isómero óptico» o «un estereoisómero», tal como se utiliza en la presente, se refiere a cualquiera de las diversas configuraciones estereoisoméricas que pueden existir para un compuesto dado de la presente invención e incluye isómeros geométricos. Se sobreentiende que un sustituyente puede estar unido a un centro quiral de un átomo de carbono. Por lo tanto, la invención incluye enantiómeros, diastereómeros o racematos del compuesto. Los «enantiómeros» son un par de estereoisómeros cuyas imágenes especulares no se pueden superponer entre sí.
Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es una mezcla «racémica». El término se utiliza para designar una mezcla racémica cuando proceda. Los «diastereoisómeros» son estereoisómeros que tienen al menos dos átomos asimétricos, pero que no son imágenes especulares entre sí. La estereoquímica absoluta se especifica de acuerdo con el sistema R-S de Cahn-Ingold-Prelog. Cuando un compuesto es un enantiómero puro, la estereoquímica en cada carbono quiral puede especificarse mediante R o S. Los compuestos resueltos, cuya configuración absoluta es desconocida, pueden designarse (+) o (-) dependiendo de la dirección (dextrógira o levógira) en la que hacen girar la luz polarizada del plano en la longitud de onda de la línea D del sodio. Ciertos compuestos descritos en la presente contienen uno o más centros o ejes asimétricos y, por lo tanto, pueden dar lugar a enantiómeros, diastereómeros y otras formas estereoisoméricas que pueden definirse, en términos de su estereoquímica absoluta, como (R) o (S). Se pretende que la presente invención incluya todos los isómeros posibles de este tipo, incluidas las mezclas racémicas, formas ópticamente puras y mezclas de intermedios. Se pueden preparar isómeros (R) y (S) ópticamente activos utilizando sintones quirales o reactivos quirales, o se pueden resolver utilizando técnicas convencionales. Si el compuesto contiene un doble enlace, el sustituyente puede tener la configuración E o Z. Si el compuesto contiene un cicloalquilo disustituido, el sustituyente del cicloalquilo puede tener una configuración cis o trans. También se pretende que todas las formas tautoméricas estén incluidas.
Los términos «sal» o «sales», tal como se utilizan en la presente, se refieren a una sal de adición de ácido o base de un compuesto de la invención. El término «sales» incluye, en particular, «sales farmacéuticamente aceptables». La expresión «sales farmacéuticamente aceptables» se refiere a sales que conservan la efectividad biológica y las propiedades de los compuestos de esta invención, y que normalmente no son indeseadas desde un punto de vista biológico o de otra forma. En muchos casos, los compuestos de la presente invención son capaces de formar sales de ácidos y/o bases en virtud de la presencia de grupos amino y/o carboxilo o grupos similares a estos.
Se pueden formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables con ácidos inorgánicos y ácidos orgánicos, por ejemplo, sales de acetato, aspartato, benzoato, besilato, bromuro/bromhidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, canforsulfonato, cloruro/clorhidrato, cloroteofilonato, citrato, etandisulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hipurato, yodhidrato/yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, estearato, succinato, sulfosalicilato, tartrato, tosilato y trifluoroacetato.
Los ácidos inorgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares.
Los ácidos orgánicos a partir de los cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido toluenosulfónico, ácido sulfosalicílico y similares. Se pueden formar sales de adición de base farmacéuticamente aceptables con bases inorgánicas y orgánicas.
Las bases inorgánicas a partir de las cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, sales de amonio y metales de las columnas I a XII de la tabla periódica. En determinadas realizaciones, las sales se obtienen a partir de sodio, potasio, amonio, calcio, magnesio, hierro, plata, zinc y cobre; algunas sales particularmente adecuadas incluyen sales de amonio, potasio, sodio, calcio y magnesio.
Las bases orgánicas a partir de las cuales se pueden obtener sales incluyen, por ejemplo, aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas que incluyen aminas sustituidas de origen natural, aminas cíclicas, resinas de intercambio iónico básicas y similares. Ciertas aminas orgánicas incluyen isopropilamina, benzatina, colinato, dietanolamina, dietilamina, lisina, meglumina, piperazina y trometamina.
Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden sintetizar a partir de un compuesto precursor, un resto básico o ácido, mediante métodos químicos convencionales. Generalmente, las sales de este tipo se pueden preparar haciendo reaccionar formas de ácido libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base apropiada (tal como hidróxido, carbonato, bicarbonato de Na, Ca, Mg o K, o similares), o haciendo reaccionar formas de base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica del ácido apropiado. Las reacciones de este tipo normalmente se llevan a cabo en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos. Generalmente, cuando sea posible, es deseable el uso de medios no acuosos tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se pueden encontrar listas de sales adecuadas adicionales, por ejemplo, en «Remington's Pharmaceutical Sciences», 20.a ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); y en «Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use» de Stahl y Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2002).
También se pretende que cualquier fórmula proporcionada en la presente represente formas no marcadas, así como formas marcadas isotópicamente de los compuestos. Los compuestos marcados isotópicamente tienen estructuras representadas por las fórmulas proporcionadas en la presente, excepto que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o un número másico seleccionado. Los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36Cl, incluye diversos compuestos marcados isotópicamente tal como se definen en la presente, por ejemplo, aquellos en los que están presentes isótopos radiactivos tales como 3H, 13C y 14C. Tales compuestos marcados isotópicamente son útiles en estudios metabólicos (con 14C), estudios de la cinética de reacción (con, por ejemplo, 2H o 3H), técnicas de detección o de obtención de imágenes, tales como la tomografía por emisión de positrones (PET) o la tomografía computerizada de emisión monofotónica (SPECT), que incluyen ensayos de distribución tisular de fármacos o sustratos, o en el tratamiento radiactivo de pacientes. En particular, un compuesto marcado o 18F puede ser particularmente deseable para estudios de PET o SPECT. Los compuestos marcados isotópicamente de esta invención y los profármacos de estos se pueden preparar en general llevando a cabo los procedimientos descritos en los esquemas o en los ejemplos y preparaciones que se describen más adelante sustituyendo un reactivo no marcado isotópicamente por un reactivo marcado isotópicamente que se pueda adquirir fácilmente.
Además, la sustitución con isótopos más pesados, en particular deuterio (es decir, 2H o D), puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas como resultado de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor semivida in vivo o una reducción de los requisitos de dosificación o una mejora en el índice terapéutico. Se sobreentiende que el deuterio en este contexto se considera un sustituyente de un compuesto de Fórmula (X). La concentración de un isótopo más pesado de este tipo, específicamente deuterio, se puede definir a través del factor de enriquecimiento isotópico. La expresión «factor de enriquecimiento isotópico», tal como se utiliza en la presente, significa la relación entre la abundancia isotópica y la abundancia natural de un isótopo específico. Si un sustituyente en un compuesto de esta invención se denomina deuterio, dicho compuesto tendrá un factor de enriquecimiento isotópico para cada átomo de deuterio designado de al menos 3500 (52.5% de incorporación de deuterio en cada átomo de deuterio designado), al menos 4000 (60% de incorporación de deuterio), al menos 4500 (67.5% de incorporación de deuterio), al menos 5000 (75% de incorporación de deuterio), al menos 5500 (82.5% de incorporación de deuterio), al menos 6000 (90% de incorporación de deuterio), al menos 6333,3 (95% de incorporación de deuterio), al menos 6466,7 (97% de incorporación de deuterio), al menos 6600 (99% de incorporación de deuterio) o al menos 6633.3
(99.5% de incorporación de deuterio).
Los compuestos de Fórmula (X) marcados isotópicamente pueden prepararse generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los descritos en los Ejemplos y Preparaciones adjuntos utilizando unos reactivos marcados isotópicamente apropiados en lugar del reactivo no marcado empleado previamente.
Los solvatos farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención incluyen aquellos en los que el disolvente de cristalización puede estar sustituido con isótopos, p. ej., D2O, d6-acetona, d6-DMSO.
Los compuestos de la invención, es decir, los compuestos de Fórmula (X) que contienen grupos capaces de actuar como dadores y/o aceptores de puentes de hidrógeno pueden ser capaces de formar cocristales con formadores de cocristales adecuados. Estos cocristales se pueden preparar a partir de compuestos de Fórmula (X) mediante procedimientos de formación de cocristales conocidos. Tales procedimientos incluyen moler, calentar, cosublimar, cofundir o poner en contacto en disolución los compuestos de Fórmula (X) con el formador de cocristales en condiciones de cristalización y aislar los cocristales formados de este modo. Los formadores de cocristales adecuados incluyen los descritos en el documento WO 2004/078163. Por lo tanto, la invención proporciona además cocristales que comprenden un compuesto de Fórmula (X).
La expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» de un compuesto de la presente invención se refiere a una cantidad del compuesto de la presente invención que provocará la respuesta biológica o médica de un sujeto, por ejemplo, la reducción o inhibición de una actividad enzimática o proteica, o mejorar los síntomas, aliviar afecciones, retrasar o demorar la progresión de la enfermedad o prevenir una enfermedad, etc. En una realización no limitante, la expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invención que, cuando se administra a un sujeto, es eficaz para (1) aliviar, inhibir, prevenir y/o mejorar al menos parcialmente una afección, o un trastorno o una enfermedad (i) mediado por el gen o el producto del gen de Supervivencia de MonoNeuronas (SMN), o por la degradación de SMNA7, o por los niveles relativos de FL-SMN y SMNA7 (ii) asociado con la actividad de SMN o (iii) caracterizado por la actividad (normal o anómala) de SMN; o (2) reducir o inhibir la actividad de SMN; o (3) reducir o inhibir la expresión de SMN1 o SMN2.
En otra realización no limitante, la expresión «una cantidad terapéuticamente eficaz» se refiere a la cantidad del compuesto de la presente invención que, cuando se administra a una célula, o un tejido, o un material biológico no celular, o un medio, es eficaz para reducir o inhibir al menos parcialmente la actividad de SMN; o reducir o inhibir al menos parcialmente la expresión de SMN, en ambos casos mediante la modulación de los niveles relativos de FL-SMN y SMNA7.
Las expresiones «cantidad terapéuticamente eficaz» y «cantidad eficaz» se utilizan en la presente para referirse a una cantidad suficiente para reducir al menos en aproximadamente un 15 por ciento, preferentemente en al menos
un 50 por ciento, más preferentemente en al menos un 90 por ciento y de la manera más preferida prevenir, un déficit clínicamente significativo en la actividad, función y respuesta del hospedador. Como alternativa, una cantidad terapéuticamente eficaz es suficiente para provocar una mejora en una afección/síntoma clínicamente significativo en el hospedador.
La cantidad eficaz puede variar dependiendo de factores tales como el tamaño y el peso del sujeto, el tipo de enfermedad o el compuesto particular de la invención. Por ejemplo, la elección del compuesto de la invención puede afectar a lo que constituye una «cantidad eficaz». Un experto en la técnica tendría la capacidad de estudiar los factores contenidos en la presente y hacer la determinación con respecto a la cantidad eficaz de los compuestos de la invención sin demasiada experimentación.
El régimen de administración puede afectar a lo que constituye una cantidad eficaz. El compuesto de la invención se puede administrar al sujeto antes o después del inicio de una afección relacionada con la deficiencia de SMN. Además, se pueden administrar varias dosis divididas, así como dosis escalonadas, a diario o secuencialmente, o la dosis se puede infundir de forma continuada, o puede ser una inyección en bolo. Además, las dosificaciones del (de los) compuesto(s) de la invención se pueden aumentar o reducir proporcionalmente según lo indiquen las exigencias de la situación terapéutica o profiláctica.
El término «sujeto», tal como se utiliza en la presente, se refiere a un animal. Normalmente el animal es un mamífero. Un sujeto también se refiere, por ejemplo, a primates (por ejemplo, seres humanos, hombres o mujeres), vacas, ovejas, cabras, caballos, perros, gatos, conejos, ratas, ratones, peces, pájaros y similares. En ciertas realizaciones, el sujeto es un primate. En otras realizaciones más, el sujeto es un ser humano.
El término “inhibir”, “inhibición” o “que inhibe”, tal como se utiliza en la presente, se refiere a la reducción o supresión de una afección, síntoma, trastorno o enfermedad dado, o una disminución significativa en la actividad basal de una actividad o proceso biológico.
El término «tratar», «que trata» o «tratamiento» de cualquier enfermedad o trastorno, tal como se utiliza en la presente, se refiere, en una realización, a mejorar la enfermedad o trastorno (es decir, ralentizar o detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de esta). En otra realización, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a aliviar o mejorar al menos un parámetro físico incluidos los que pueden no ser perceptibles por el paciente. En otra realización más, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a modular la enfermedad o trastorno, ya sea físicamente, (por ejemplo, mediante la estabilización de un síntoma discernible), fisiológicamente (por ejemplo, mediante la estabilización de un parámetro físico) o ambas. En otra realización más, «tratar», «que trata» o «tratamiento» se refiere a prevenir o retrasar la aparición o el desarrollo o avance de la enfermedad o trastorno.
Tal como se utiliza en la presente, un sujeto «necesita» un tratamiento si dicho sujeto se beneficiaría, desde un punto de vista biológico, médico o en su calidad de vida, de dicho tratamiento.
Tal como se utiliza en la presente, se debe interpretar que el término «un», «una», «el/la» y términos similares utilizados en el contexto de la presente invención (especialmente en el contexto de las reivindicaciones) cubren tanto el singular como el plural a menos que se indique lo contrario en la presente o el contexto lo contradiga claramente. Todos los métodos descritos en la presente se pueden llevar a cabo en cualquier orden adecuado, a menos que se indique lo contrario en la presente o el contexto lo contradiga claramente. El uso de todos y cada uno de los ejemplos o el lenguaje ilustrativo (por ejemplo, «tal/es como») proporcionado en la presente tiene por objeto únicamente ilustrar mejor la invención y no supone ninguna limitación del alcance de la invención que por lo demás se reivindica.
Cualquier átomo asimétrico (por ejemplo, carbono o similar) del (de los) compuesto(s) de la presente invención puede estar presente en forma racémica o enriquecida enantioméricamente, por ejemplo, la configuración (R), (S) o (R,S). En ciertas realizaciones, cada átomo asimétrico tiene al menos un 50% de exceso enantiomérico, al menos un 60% de exceso enantiomérico, al menos un 70% de exceso enantiomérico, al menos un 80% de exceso enantiomérico, al menos un 90% de exceso enantiomérico, al menos un 95% de exceso enantiomérico o al menos un 99% de exceso enantiomérico en la configuración (R) o (S). Los sustituyentes en los átomos con enlaces insaturados pueden, si es posible, estar presentes en forma cis (Z) o trans (E).
Por consiguiente, tal como se utiliza en la presente, un compuesto de la presente invención puede estar en forma de uno de los posibles isómeros, rotámeros, atropisómeros, tautómeros o mezclas de estos, por ejemplo, como racematos, isómeros ópticos (enantiómeros), diastereómeros, isómeros geométricos (cis o trans) sustancialmente puros o mezclas de estos.
Cualesquiera mezclas resultantes de isómeros se pueden separar, basándose en las diferencias fisicoquímicas de los constituyentes, en los racematos, diastereómeros, isómeros geométricos u ópticos puros o sustancialmente puros, por ejemplo, mediante cromatografía y/o cristalización fraccionada.
Cualesquiera racematos resultantes de productos finales o intermedios se pueden resolver en los enantiómeros ópticos mediante métodos conocidos, por ejemplo, mediante la separación de las sales diastereoméricas de estos, obtenidas con una base o ácido ópticamente activo, y la liberación del compuesto ácido o básico ópticamente activo. En particular, se puede emplear de este modo un resto básico para resolver los compuestos de la presente invención en sus enantiómeros ópticos, por ejemplo, mediante la cristalización fraccionada de una sal formada con un ácido ópticamente activo, por ejemplo, ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido diacetiltartárico, ácido di-0,0'-p-toluoiltartárico, ácido mandélico, ácido málico o ácido canfor-10-sulfónico. Los productos racémicos también se pueden resolver mediante cromatografía quiral, por ejemplo, cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) utilizando un adsorbente quiral.
Los compuestos de la presente invención se obtienen en forma libre, como una sal de estos, o como derivados de tipo profármaco de estos.
Cuando hay tanto un grupo básico como un grupo ácido presente en la misma molécula, los compuestos de la presente invención también pueden formar sales internas, por ejemplo, moléculas zwitteriónicas.
Además, los compuestos de la presente invención, incluidas sus sales, también se pueden obtener en forma de sus hidratos o pueden incluir otros disolventes utilizados para su cristalización. Los compuestos de la presente invención pueden formar solvatos de forma inherente o por diseño con disolventes farmacéuticamente aceptables (que incluyen agua); por lo tanto, se pretende que la invención englobe tanto formas solvatadas como no solvatadas. El término «solvato» se refiere a un complejo molecular de un compuesto de la presente invención (incluidas las sales farmacéuticamente aceptables de este) con una o más moléculas de disolvente. Tales moléculas de disolvente son aquellas utilizadas comúnmente en el campo farmacéutico, que se sabe que son inocuas para el receptor, por ejemplo, agua, etanol y similares. El término «hidrato» se refiere al complejo en el que la molécula de disolvente es agua.
Los compuestos de la presente invención, incluidas las sales, hidratos y solvatos de estos, pueden formar polimorfos de manera inherente o por diseño.
Los compuestos de la invención y los intermedios también se pueden convertir los unos en los otros de acuerdo con métodos generalmente conocidos por los expertos en la técnica.
En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y un portador farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica se puede formular para vías particulares de administración tales como la administración oral, administración parenteral y administración rectal, etc. Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden elaborar en forma sólida (que incluye, sin carácter limitante, cápsulas, comprimidos, píldoras, gránulos, polvos o supositorios) o en forma líquida (que incluye, sin carácter limitante, soluciones, suspensiones o emulsiones). Las composiciones farmacéuticas pueden someterse a operaciones farmacéuticas convencionales tales como esterilización y/o pueden contener diluyentes inertes, agentes lubricantes o agentes tamponantes convencionales, así como adyudantes tales como conservantes, estabilizantes, agentes humectantes, emulsionantes y tampones, etc.
Habitualmente, las composiciones farmacéuticas son comprimidos o cápsulas de gelatina que comprenden el principio activo junto con
diluyentes, por ejemplo, lactosa, dextrosa, sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa y/o glicina;
lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico, su sal de magnesio o calcio y/o polietilenglicol; para comprimidos también
aglutinantes, por ejemplo, silicato de magnesio y aluminio, pasta de almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y/o polivinilpirrolidona; si se desea
desintegrantes, por ejemplo, almidones, agar, ácido algínico o su sal de sodio, o mezclas efervescentes; y/o absorbentes, colorantes, sabores y edulcorantes.
Los comprimidos pueden estar recubiertos con películas o tener un recubrimiento entérico de acuerdo con métodos conocidos en la técnica.
Las composiciones adecuadas para la administración oral incluyen una cantidad eficaz de un compuesto de la invención en forma de comprimidos, grageas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones destinadas a uso oral se preparan de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la elaboración de composiciones farmacéuticas, y las composiciones de este tipo pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo constituido por agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservantes con el fin de proporcionar preparados farmacéuticamente atractivos y de gusto agradable. Los comprimidos pueden contener el principio activo mezclado con excipientes atóxicos, farmacéuticamente aceptables, que sean adecuados para la elaboración de comprimidos. Estos excipientes son, por ejemplo, diluyentes inertes tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes granulantes y disgregantes, por ejemplo, almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes, por ejemplo, almidón, gelatina o goma arábiga; y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos no están recubiertos o se recubren mediante técnicas conocidas para retrasar la disgregación y la absorción en el tubo digestivo y, por lo tanto, proporcionar una acción sostenida durante un período más prolongado. Por ejemplo, se puede utilizar un material retardante tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. Las formulaciones para uso oral se pueden presentar como cápsulas de gelatina dura, en las que el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda, donde el principio activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva. Ciertas composiciones inyectables son soluciones o suspensiones isotónicas acuosas, y favorablemente se preparan supositorios a partir de emulsiones o suspensiones grasas. Dichas composiciones pueden esterilizarse y/o contener adyuvantes tales como agentes conservantes, estabilizantes, humectantes o emulsionantes, promotores de la disolución, sales para regular la presión osmótica y/o tampones. Además, también pueden contener otras sustancias valiosas desde el punto de vista terapéutico. Dichas composiciones se preparan de acuerdo con métodos convencionales de mezcla, granulación o recubrimiento, respectivamente, y contienen aproximadamente un 0,1-75%, o contienen aproximadamente un 1-50%, del principio activo.
Las composiciones adecuadas para la aplicación transdérmica incluyen una cantidad eficaz de un compuesto de la invención con un portador adecuado. Los portadores adecuados para el suministro transdérmico incluyen disolventes absorbibles farmacológicamente aceptables para facilitar el paso a través de la piel del hospedador. Por ejemplo, los dispositivos transdérmicos adoptan la forma de un apósito que comprende un elemento de soporte, un depósito que contiene el compuesto opcionalmente con portadores, opcionalmente una barrera que controla la velocidad para suministrar el compuesto de la piel del hospedador con una velocidad controlada y predeterminada durante un periodo de tiempo prolongado, y un medio para fijar el dispositivo a la piel.
Las composiciones adecuadas para aplicación tópica, por ejemplo, a la piel y los ojos, incluyen soluciones acuosas, suspensiones, pomadas, cremas, geles o formulaciones pulverizables, por ejemplo, para el suministro por aerosol o similares. Dichos sistemas de suministro tópico serán particularmente apropiados para la aplicación dérmica, por ejemplo, para el tratamiento del cáncer de piel, por ejemplo, para el uso profiláctico en cremas de protección solar, lociones, aerosoles y similares. Por tanto, son particularmente adecuados para su uso en formulaciones tópicas, incluidas las cosméticas, muy conocidas en la técnica. Estas pueden contener solubilizantes, estabilizantes, agentes potenciadores de la tonicidad, tampones y conservantes.
Tal como se utiliza en la presente, una aplicación tópica también puede referirse a una inhalación o a una aplicación intranasal. Se pueden administrar convenientemente en forma de un polvo seco (ya sea solo, como una mezcla, por ejemplo, una mezcla seca con lactosa, o una partícula de componentes mixtos, por ejemplo, con fosfolípidos) desde una presentación de inhalador de polvo seco o un rociador de aerosol desde un recipiente presurizado, una bomba, un aerosol, un atomizador o un nebulizador, con o sin el uso de un propelente adecuado.
La presente invención proporciona además composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas anhidras que comprenden los compuestos de la presente invención como principios activos, ya que el agua puede facilitar la degradación de ciertos compuestos.
Las composiciones farmacéuticas y las formas farmacéuticas anhidras de la invención se pueden preparar utilizando ingredientes anhidros o que contengan poca humedad, y condiciones de baja humectación o baja humedad. Una composición farmacéutica anhidra se puede preparar y almacenar de manera que mantenga su naturaleza anhidra. Por consiguiente, las composiciones anhidras se envasan utilizando materiales que se sabe que evitan la exposición al agua de modo que se puedan incluir en kits de vademécum adecuados. Los ejemplos de envases adecuados incluyen, sin carácter limitante, envases de láminas metálicas selladas herméticamente, plásticos, recipientes de dosis unitarias (por ejemplo, viales), envases de tipo blíster y envases de tiras.
La invención proporciona además composiciones farmacéuticas y formas farmacéuticas que comprenden uno o más agentes que reducen la velocidad a la que se descompondrá el compuesto de la presente invención como principio activo. Tales agentes, que se denominan en la presente «estabilizantes», incluyen, sin carácter limitante, antioxidantes tales como el ácido ascórbico, tampones de pH o tampones salinos, etc.
Los compuestos de Fómula I en forma libre o en forma salina exhiben propiedades farmacológicas valiosas, por ejemplo, propiedades moduladoras de la producción de proteína SMN de longitud completa, por ejemplo, como las indicadas en las pruebas in vitro e in vivo tal como se proporcionan en las siguientes secciones y, por lo tanto, están indicados para terapia o para uso como productos químicos de investigación, por ejemplo, como compuestos de referencia.
Por tanto, como una realización adicional, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de Fórmula (X), o una sal de este, en terapia. En una realización adicional, la terapia se selecciona a partir de una enfermedad que se puede tratar mediante la modulación de la producción de proteína SMN de longitud completa. En otra realización, la enfermedad se selecciona a partir de la lista mencionada anteriormente, convenientemente atrofia muscular espinal.
La composición farmacéutica o combinación de la presente invención puede estar en una dosificación unitaria de aproximadamente 1-1000 mg de (de los) principio(s) activo(s) para un sujeto de aproximadamente 50-70 kg, o aproximadamente 1-500 mg o aproximadamente 1-250 mg o aproximadamente 1-150 mg o aproximadamente 0,5­ 100 mg, o aproximadamente 1-50 mg de los principios activos. La dosificación terapéuticamente eficaz de un compuesto, la composición farmacéutica o las combinaciones de estas depende de la especie del sujeto, el peso corporal, la edad y el estado del individuo, el trastorno o enfermedad que se esté tratando, o su gravedad. Un facultativo, médico o veterinario experto puede determinar fácilmente la cantidad eficaz de cada uno de los principios activos necesaria para prevenir, tratar o inhibir el avance del trastorno o la enfermedad.
Las propiedades de dosificación citadas anteriormente se pueden demostrar en pruebas in vitro e in vivo que utilizan convenientemente mamíferos, por ejemplo, ratones, ratas, perros, monos u órganos aislados, tejidos y preparados de estos. Los compuestos de la presente invención se pueden aplicar in vitro en forma de soluciones, por ejemplo, soluciones acuosas, e in vivo por vía enteral, parenteral, convenientemente por vía intravenosa, por ejemplo, en forma de una suspensión o en solución acuosa. La dosificación in vitro puede oscilar entre concentraciones de aproximadamente 10'3 molar y 10'9 molar. Una cantidad terapéuticamente eficaz in vivo puede variar en función de la vía de administración, entre aproximadamente 0,1-500 mg/kg, o entre aproximadamente 1-100 mg/kg.
El compuesto de la presente invención se puede administrar simultáneamente con uno o más agentes terapéuticos diferentes o antes o después de estos. El compuesto de la presente invención se puede administrar por separado, mediante una vía de administración idéntica o diferente, o de forma conjunta en la misma composición farmacéutica que los otros agentes.
En una realización, la invención proporciona un producto que comprende un compuesto de Fórmula (X) y al menos un agente terapéutico diferente como un preparado combinado para su uso simultáneo, separado o secuencial en terapia. En una realización, la terapia es el tratamiento de una atrofia muscular espinal. Los productos proporcionados como un preparado combinado incluyen una composición que comprende el compuesto de Fórmula (X) y el (los) otro(s) agente(s) terapéutico(s) juntos en la misma composición farmacéutica, o el compuesto de Fórmula (X) y el (los) otro(s) agente(s) terapéutico(s) en forma separada, por ejemplo, en forma de un kit.
En una realización, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (X) y otro(s) agente(s) terapéutico(s). Opcionalmente, la composición farmacéutica puede comprender un portador farmacéuticamente aceptable, tal como se ha descrito anteriormente.
Se describe un kit que comprende dos o más composiciones farmacéuticas separadas, y al menos una de ellas contiene un compuesto de Fórmula (X). En una realización, el kit comprende medios para mantener por separado dichas composiciones, tales como un recipiente, frasco dividido o envase de aluminio dividido. Un ejemplo de un kit de este tipo es un envase de tipo blíster, como los utilizados habitualmente para el envasado de comprimidos, cápsulas y similares.
El kit se puede utilizar para administrar diferentes formas farmacéuticas, por ejemplo, oral y parenteral, para administrar las composiciones separadas a intervalos de dosificación diferentes, o para valorar las composiciones separadas entre sí. Para facilitar el cumplimiento, el kit normalmente comprende instrucciones para su administración.
En las terapias combinadas de la invención, el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico pueden ser elaborados y/o formulados por el mismo fabricante o por fabricantes diferentes. Además, el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico se pueden integrar en una terapia combinada: (i) antes de dispensar el producto combinado a los facultativos (por ejemplo, en el caso de un kit que comprende el compuesto de la invención y el otro agente terapéutico), (ii) por parte de los mismos facultativos (o bajo la supervisión del facultativo) poco antes de la administración; (iii) en los mismos pacientes, por ejemplo, durante la administración secuencial del compuesto de la invención y el otro agente terapéutico.
Todos los materiales de partida, bloques estructurales, reactivos, ácidos, bases, agentes deshidratantes, disolventes y catalizadores utilizados para sintetizar los compuestos de la presente invención se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por el experto en la técnica (Houben-Weyl 4.a Ed. 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volumen 21). Además, los compuestos de la presente invención se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica tal como se muestra en los siguientes ejemplos.
Preparaciones de los compuestos
Se sobreentiende que en la siguiente descripción, las combinaciones de sustituyentes y/o variables de las fórmulas representadas son permisibles solo si tales contribuciones dan como resultado compuestos estables.
Los expertos en la técnica también apreciarán que en los procesos descritos a continuación los grupos funcionales de los compuestos intermedios pueden requerir ser protegidos con grupos protectores adecuados. Tales grupos funcionales incluyen hidroxi, fenol, amino y ácido carboxílico. Los grupos protectores adecuados para hidroxi o fenol incluyen trialquilsililo o diarilalquilsililo (por ejemplo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo o trimetilsililo), tetrahidropiranilo, bencilo, bencilo sustituido, metilo y similares. Los grupos protectores adecuados para amino, amidino y guanidino incluyen t-butoxicarbonilo, benciloxicarbonilo y similares. Los grupos protectores adecuados para el ácido carboxílico incluyen ésteres de alquilo, arilo o arilalquilo.
Los grupos protectores se pueden añadir o eliminar de acuerdo con técnicas estándar, que son muy conocidas por los expertos en la técnica, y como se describe en la presente. El uso de grupos protectores se describe detalladamente en Green, T.W. y P.G.M. Wutz, Protective Groups in Organic Synthesis (1999), 3.a Ed., Wiley. El grupo protector también puede ser una resina polimérica, tal como una resina Wang o una resina de cloruro de 2-clorotritilo.
Los expertos en la técnica también apreciarán que, aunque tales derivados protegidos de los compuestos de esta invención pueden no poseer actividad farmacológica como tales, pueden administrarse a un sujeto y posteriormente ser metabolizados en el cuerpo para formar compuestos de la invención que sean farmacológicamente activos. Tales derivados se pueden describir por lo tanto como «profármacos». Todos los profármacos de los compuestos de esta invención están incluidos dentro del alcance de la invención.
Los siguientes esquemas de reacción ilustran métodos para preparar compuestos de esta invención. Se sobreentiende que un experto en la técnica sería capaz de preparar estos compuestos mediante métodos similares o mediante métodos conocidos por un experto en la técnica. En general, los componentes de partida y los reactivos se pueden obtener de proveedores tales como Sigma Aldrich, Lancaster Synthesis, Inc., Maybridge, Matrix Scientific, TCI y Fluorochem USA, Strem, otros proveedores comerciales, o se pueden sintetizar de acuerdo con fuentes conocidas por los expertos en la técnica, o se pueden preparar como se describe en esta invención. A, B, X, R, R1, R2, R3, R4 se definen como en la memoria descriptiva, a menos que se definan específicamente.
En general, los compuestos de tipo tiadiazol de Fórmula (X) de esta invención se pueden sintetizar siguiendo el procedimiento general descrito en el Esquema 1.
Esq
Figure imgf000015_0002
uema general 1
Figure imgf000015_0001
Los materiales de partida para el esquema de reacción anterior se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos por un experto en la técnica o mediante métodos descritos en la presente. En general, los compuestos de la invención se preparan en el Esquema 1 de reacción anterior como se indica a continuación:
El dihalotiadiazol (1) reacciona en una reacción de desplazamiento o una reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal (Buchwald) con un alcohol o una amina (B) para proporcionar el intermedio de tipo tiadiazol (2). La reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal de transición, tal como una reacción de Suzuki, entre el compuesto de tipo haluro (2) y un compuesto de tipo arilo o heteroarilo sustituido A, tal como el ácido de un boronato o un éster de tipo boronato, proporciona el compuesto (3) de Fórmula (X) de la invención.
De manera alternativa, los compuestos de Fórmula (X) se pueden sintetizar siguiendo el procedimiento general descrito en el Esquema 2.
Esquema general 2
Figure imgf000016_0001
Los materiales de partida para el esquema de reacción anterior se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos por un experto en la técnica o mediante métodos descritos en la presente. En general, los compuestos de la invención se preparan en el Esquema 2 de reacción anterior como se indica a continuación:
El dihalotiadiazol (1) reacciona en una reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal de transición, tal como una reacción de Suzuki, con un ácido o éster de boronato, para proporcionar el intermedio de tipo tiadiazol (2). El intermedio de tiadiazol (2) reacciona mediante un segundo acoplamiento cruzado mediado por un metal, tal como una reacción de Suzuki, para proporcionar el tiadiazol (3) de Fórmula (X) de la invención.
Los compuestos de Fórmula (X) también se pueden preparar siguiendo el procedimiento general descrito en el Esquema 3 .
Esquema general 3
Figure imgf000016_0002
Los materiales de partida para el esquema de reacción anterior se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos por un experto en la técnica o mediante métodos descritos en la presente. En general, los compuestos de la invención se preparan en el Esquema 3 de reacción anterior como se indica a continuación:
El ácido aril- o heteroarilcarboxílico sustituido (4) reacciona con hidrazinocarotioamida y cloruro de fosforilo para formar el intermedio de tipo aminotiadiazol (5). El intermedio de tipo tiadiazol (5) se hace reaccionar a continuación con ferf-butilnitrilo y CuBr2 para proporcionar el intermedio de tipo tiadiazol (6). El intermedio de tipo tiadiazol (6) reacciona en una reacción de desplazamiento o una reacción de acoplamiento cruzado mediada por un metal (Buchwald) con un alcohol o una amina (B) para proporcionar el tiadiazol (3) de Fórmula (X) de la invención.
Los Esquemas generales 1, 2 y 3 se pueden llevar a cabo para varios grupos A aromáticos tales como fenoles, naftilos y heteroarilos sustituidos y similares, y para varios grupos amino B tales como aminopiperidinas, piperidinas, piperazinas, homopiperazinas, pirrolidinas y aminas bicíclicas sustituidas y similares, para proporcionar los compuestos de Fórmula (X) de la invención. Pueden ser necesarias estrategias rutinarias de grupos protectores para conseguir los compuestos finales de Fórmula (X).
Todos los materiales de partida, bloques estructurales, reactivos, ácidos, bases, agentes deshidratantes, disolventes, catalizadores y atrapadores utilizados para sintetizar los compuestos de la presente invención se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica. Además, los compuestos de la presente invención se pueden producir mediante métodos de síntesis orgánica conocidos por un experto en la técnica tal como se muestra en los siguientes ejemplos. Se pretende que los siguientes ejemplos ilustren la invención y no se deben interpretar como que sean limitaciones de esta. Las temperaturas se indican en grados centígrados. Si no se menciona lo contrario, todas las evaporaciones se realizan a presión reducida, preferentemente entre aproximadamente 15 mm de Hg y 100 mm de Hg (= 20-133 mbar). La estructura de los productos finales, intermedios y materiales de partida se confirma mediante métodos analíticos estándar, por ejemplo, microanálisis y características espectroscópicas, por ejemplo, LCMS, RMN, CHN. Las abreviaturas utilizadas son las convencionales en la técnica y se proporciona una lista de ellas al final de la sección experimental.
Síntesis de los intermedios
Intermedio 1: Síntesis de 1-(3-metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametiM,3,2-dioxaborolan-2-il)fenN)-1H-pirazol
Figure imgf000017_0001
Paso 1: (4-Bromo-3-metoxifenil)hidrazina:
Se suspendió 4-bromo-3-metoxianilina (3,0 g, 14,85 mmol) en HCl concentrado (50 ml) y la mezcla se enfrió hasta 0 °C en un baño de agua con hielo. Se añadió muy lentamente a la mezcla de reacción una solución de nitrito de sodio (1,23 g, 17,82 mmol) en 10 ml de agua. La mezcla se volvió amarilla y a continuación marrón con una turbulencia amarilla, lo que indica la formación de la sal de diazonio. La sal de diazonio se mantuvo a 0 °C durante una hora y a continuación se añadió muy lentamente una solución de cloruro de estaño (II) dihidratado (10,05 g, 44,5 mmol) en HCl concentrado (20 ml) (precaución, reacción extremadamente exotérmica). La reacción se agitó durante 2 h a 0 °C y a continuación a TA durante toda la noche. La reacción se filtró y la masa húmeda retenida sobre el filtro se lavó con H2O fría para proporcionar (4-bromo-3-metoxifenil)hidrazina como un sólido de color tostado (3,1 g, MS: 218 [M+H+]).
Paso 2: 1-(4-Bromo-3-metoxifenil)-1H-pirazol:
A una solución de (4-bromo-3-metoxifenil)hidrazina (62 g, 245 mmol) en etanol (310 ml) se le añadió tetrametoxipropano (40,2 g, 245 mmol) durante unos minutos y la mezcla se calentó hasta una temperatura interna de 70 °C. La mezcla se agitó a 70 °C durante 1,5 h y a continuación se enfrió lentamente hasta tA. Se eliminó el etanol al vacío y el residuo se suspendió en EtOAc. El residuo se neutralizó con hidróxido de sodio acuoso 1 M (-700 ml) para provocar su precipitación. La mezcla bifásica se filtró y el filtrado se extrajo con EtOAc, se secó con sulfato de sodio y se concentró para proporcionar 30 g de 1-(4-bromo-3-metoxifenil)-1H-pirazol como un sólido negro (30 g, MS: 254 [M+H+]).
Paso 3: 1-(3-Metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirazol
Se añadieron 1-(4-bromo-3-metoxifenil)-1H-pirazol (28,5 g, 113 mmol), bis(pinacolato)diboro (42,9 g, 169 mmol), carbonato de potasio (15,56 g, 113 mmol) y un aducto de PdCh( dppf).CH2Cl2 (9,20 g, 11,26 mmol) a un matraz de fondo redondo de 2 l y a continuación se añadió dioxano (700 ml). La mezcla de reacción se purgó con N2 y se agitó en atmósfera de N2 a una temperatura interna de 84 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de un embudo de filtro desechable y se concentró sobre gel de sílice. La mezcla se purificó utilizando cromatografía en columna (20% de EtOAc en heptanos). Las fracciones deseadas se recolectaron y se concentraron para proporcionar 13,5 g de 1-(3-metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirazol.
Intermedio 2: Síntesis del ácido (2-(benciloxi)-6-metoxi-4-(5-metiloxazol-2-il)fenil)borónico
Figure imgf000018_0001
Paso 1: 3-(Benciloxi)-4-bromo-5-hidroxibenzoato de metilo:
A una mezcla de 4-bromo-3,5-dihidroxibenzoato de metilo (18,8 g, 76 mmol) y carbonato de potasio (5,26 g, 38,1 mmol) en DMF (190 ml) se añadió bromuro de bencilo (3,17 ml, 26,6 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche, se diluyó con 200 ml de agua y se acidificó hasta un pH de 1 mediante la adición lenta de ácido clorhídrico concentrado. La solución se extrajo con acetato de etilo/éter 1:1 (6X) y los extractos combinados se lavaron con agua (8X), bicarbonato de sodio saturado y salmuera, a continuación se secaron con sulfato de magnesio y se concentraron para proporcionar un sólido naranja. El sólido se suspendió en DCM (200 ml) y se agitó durante toda la noche. El sólido (principalmente 4-bromo-3,5-dihidroxibenzoato sin reaccionar) se eliminó por filtración y el filtrado se concentró para proporcionar un aceite naranja que se purificó mediante cromatografía en columna (80 g de gel de sílice, elución con DCM en heptano 2:1, seguida de elución con DCM) para proporcionar 3-(benciloxi)-4-bromo-5-hidroxibenzoato de metilo (4,66 g). MS (M+1) = 337,0. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,32-7,57 (m, 6H), 7,26 (d, J=1,52 Hz, 1H), 5,77 (s, 1H), 5,22 (s, 2H), 3,93 (s, 3H) así como el 3,5-bis(benciloxi)-4-bromobenzoato de metilo dibencilado (1,8 g).
Paso 2: 3-(Benciloxi)-4-bromo-5-hidroxibenzoato de metilo:
A una mezcla de 3-(benciloxi)-4-bromo-5-hidroxibenzoato de metilo (3,69 g, 10,94 mmol) y carbonato de potasio (3,03 g, 21,98 mmol) en DMF (27 ml) se añadió yoduro de metilo (0,753 ml, 12,04 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche, después de lo cual se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (4X). Los extractos combinados se lavaron con agua (8X) y salmuera, se secaron con sulfato de magnesio y se concentraron para proporcionar 3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxibenzoato de metilo como un sólido blanco (3,72 g). MS (M+1) = 351,1; 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,31-7,59 (m, 7H), 5,24 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,95 (s, 3H).
Paso 3: Ácido 3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxibenzoico:
A una solución de 3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxibenzoato de metilo (3,72 g, 10,59 mmol) en MeOH/THF 1:1 (50 ml) se añadió hidróxido de sodio acuoso (1 M, 53,0 ml, 53,0 mmol). Después de 10 minutos, se eliminaron los componentes volátiles a presión reducida y la solución se acidificó hasta un pH de 1 mediante la adición de ácido clorhídrico concentrado, lo cual dio como resultado la formación de un precipitado blanco espeso. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2X) y DCM (3X). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato de magnesio y se concentraron para proporcionar el ácido 3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxibenzoico como un sólido blanco (3,41 g). MS (M-1) = 335,0. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,21-7,49 (m, 7H), 5,16 (s, 2H), 3,91 (s, 3H).
Paso 4: 3-(Benciloxi)-4-bromo-5-metoxi-N-(prop-2-in-1-il)benzamida:
A una suspensión del ácido 3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxibenzoico (2,0 g, 5,93 mmol) y 4 gotas de DMF en DCM (40 ml) se añadió lentamente cloruro de oxalilo (0,57 ml, 6,52 mmol). Después de tres horas, se eliminó el disolvente y el residuo se volvió a disolver en DCM (10 ml). A esta solución se le añadió lentamente una mezcla de propargilamina (0,46 ml, 7,12 mmol) y trietilamina (2,5 ml, 17,8 mmol) en DCM (2 ml). Después de 30 minutos, la solución se diluyó con éter, se lavó con agua (2X), ácido clorhídrico 1 M (2X), agua, bicarbonato de sodio saturado y salmuera, a continuación se secó con sulfato de magnesio y se concentró para obtener un sólido amarillo. El sólido se lavó disgregándolo con éter dietílico y se secó al vacío para proporcionar 3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxi-N-(prop-2-in-1-il)benzamida (1,88 g) como un sólido blanquecino. MS = 374,0 (M+1).
Paso 5: 2-(3-(Benciloxi)-4-bromo-5-metoxifenil)-5-metiloxazol:
A una solución de 3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxi-N-(prop-2-in-1-il)benzamida (0,455 g, 1,22 mmol) en dioxano (12 ml) se añadió hidruro de sodio (al 60% en peso, 0,146 g, 3,65 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante seis horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se desactivó mediante la adición lenta de agua y se diluyó con acetato de etilo. La mezcla se lavó con agua, bicarbonato de sodio saturado y salmuera, a continuación se secó con sulfato de magnesio y se concentró. La cromatografía flash en columna (12 g de sílice, 2% de acetato de etilo en DCM) proporcionó 2-(3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxifenil)-5-metiloxazol (198 mg) como un sólido blanquecino. MS = 374 (M+1). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,55 (d, J=7,58 Hz, 2H), 7,43 (t, J=7,33 Hz, 2H), 7,32-7,39 (m, 2H), 7,27 (d, J=2,02 Hz, 1H), 6,89 (d, J=1,01 Hz, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,02 (s, 3H), 2,44 (d, J=1,52 Hz, 3H).
Paso 6: Ácido (2-(benciloxi)-6-metoxi-4-(5-metiloxazol-2-il)fenil)borónico
A una solución agitada de 2-(3-(benciloxi)-4-bromo-5-metoxifenil)-5-metiloxazol (197 mg, 0,526 mmol) en THF (1,3 ml) enfriada hasta -78 °C se añadió n- butillitio (2,5 M en hexanos, 232 ul, 0,579 mmol). La solución se agitó durante 15 minutos, después de lo cual se añadió borato de trimetilo (235 μl, 2,11 mmol) y la solución se dejó calentar lentamente hasta temperatura ambiente durante toda la noche. La reacción se desactivó mediante la adición de HCl 0,1 M y se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó con sulfato de magnesio y se concentró. La cromatografía flash en columna (12 g de sílice, 0-100% de acetato de etilo en DCM durante 30 volúmenes de columna) proporcionó el ácido (2-(benciloxi)-6-metoxi-4-(5-metiloxazol-2-il)fenil)borónico (63 mg) como una espuma blanca. MS = 340,1 (M+1). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7,28-7,46 (m, 5H), 7,25 (d, J=1,01 Hz, 1H), 7,08 (s a, 1H), 6,85 (d, J=1,01 Hz, 1H), 5,17 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 2,38 (d, J=1,52 Hz, 3H).
Intermedio 3: Síntesis de fert-butM(3-metox¡-4-(4,4,5,5-tetramet¡M,3,2-d¡oxaborolan-2-il)fenoxi)d¡met¡lsMano
Figure imgf000019_0001
Paso 1: (4-Bromo-3-metoxifenoxi)(ferf-butil)dimetilsilano:
Se disolvió 4-bromo-3-metoxifenol (254 g, 1251 mmol) en DCM (2500 ml) y se trató con DIPEA (437 ml, 2502 mmol) en atmósfera de nitrógeno. Se añadió ferf-butilclorodimetilsilano (198 g, 1314 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. El producto crudo se diluyó con agua y la fase orgánica se extrajo, a continuación se secó con sulfato de sodio y se concentró.
Paso 2: ferf-Butil(3-metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenoxi)dimetilsilano
Se burbujeó nitrógeno a través de una mezcla agitada de acetato de potasio (392 g, 3999 mmol), (4-bromo-3-metoxifenoxi)(ferf-butil)dimetilsilano (472 g, 1250 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (381 g, 1499 mmol), DPPF (55,4 g, 100 mmol) y un aducto de PdCh(dppf).CH2Cl2 (82 g, 100 mmol) en dioxano (4500 ml). La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta una temperatura interna de 69 °C, a continuación se dejó agitar a 69 °C durante 16 horas antes de enfriarse lentamente durante una hora hasta 20 °C. La mezcla de reacción se filtró a través de celite, se lavó con EtOAc y se eliminó el disolvente al vacío para proporcionar un gel negro. El gel crudo se disolvió en DCM, se trató con DlpEA (90 ml) y ferf-butilclorodimetilsilano (70 g) y la mezcla resultante se dejó agitar a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla se diluyó con agua (1 l) y salmuera (1 l) y se agitó durante 30 min. La fase orgánica se separó, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material crudo se absorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash en sílice utilizando un 20% de EtOAc en heptanos (+ 1% de TEA) como eluyente para proporcionar el producto crudo como un semisólido negro. El material crudo se absorbió de nuevo sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash en sílice utilizando un 10% de EtOAc en heptanos (+ 1% de TEA) como eluyente para proporcionar el compuesto del título como un aceite.
Intermed¡o 4: 5-Bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡dm-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-amma:
Figure imgf000020_0001
A una solución agitada de 2,5-dibromo-1,3,4-tiadiazol (2,975 g, 12,2 mmol) y N,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-amina (2,493 g, 14,64 mmol) en dioxano (40 ml) se añadió DIPEA (10,65 ml, 61 mmol) y la mezcla resultante se calentó a reflujo a 120 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, a continuación se filtró al vacío, se lavó con dioxano y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite rosa/rojo. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un 3% de [NH3 7 M en MeOH]/DCM como eluyente para proporcionar el compuesto del título como un sólido rosa/rojo (2,924 g, 72% de rendimiento). LC-MS: tR 0,70 min; MS m/z 335,2 [M+2H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 4,13-4,03 (m, 1 H), 2,92 (s, 3 H), 1,57 (dd, J=12,13, 3,54 Hz, 2 H), 1,39 (t, J=12,13 Hz, 2 H), 1,26 (s a., 1 H), 1,16 (s, 6 H), 1,06 (s, 6 H). LC-MS: tR 1,12 min; MS m/z 335,2 [M+H]+ [Método B].
Empleando el método del Intermedio 4, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes intermedios:
Figure imgf000020_0002
Síntesis de los Ejemplos
Ejemplo de referencia 1: Síntesis de 5-(2-metoxi-4-(1H-pirazoM-il)feml)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpipendm-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
Figure imgf000021_0001
A una suspensión agitada de 1-(3-metox¡-4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)fen¡l)-1H-p¡razol (Intermedio 1) (297 mg, 0,990 mmol) y 5-bromo-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na (Intermedio 4) (300 mg, 0,900 mmol) en d¡oxano (4 ml) se añad¡ó Pd(PPh3)4 (52 mg, 0,045 mmol) segu¡do de una soluc¡ón de Na2CO 3 (191 mg, 1,800 mmol) en agua (1 ml). La mezcla resultante se purgó con n¡trógeno, se selló y se calentó a 120 °C durante 30 m¡nutos con ¡rrad¡ac¡ón de m¡croondas. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc (100 ml) y se lavó con agua (50 ml). La fase orgán¡ca se separó, se secó con MgSO4 y se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un ace¡te amar¡llo. El mater¡al crudo se preabsorb¡ó sobre gel de síl¡ce y se pur¡f¡có med¡ante cromatografía flash en síl¡ce ut¡l¡zando un 2,5% de [NH 37 M en MeOH]/DCM como eluyente para proporc¡onar un sól¡do vitreo de color marrón pál¡do que se d¡solv¡ó de nuevo en MeOH (10 ml) y se le añad¡ó S¡l¡aMetS DMT (0,52 mmol/g, 433 mg). La suspens¡ón resultante se colocó en un ag¡tador durante 2,5 horas, a cont¡nuac¡ón se el¡m¡nó el S¡l¡aMetS DMT med¡ante f¡ltrac¡ón y el f¡ltrado se concentró al vacío para proporc¡onar un ace¡te naranja/marrón. El ace¡te crudo se d¡solv¡ó de nuevo en MeOH y se ¡ntrodujo en un cartucho de SCX de 10 g (humedec¡do prev¡amente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (40 ml) y a cont¡nuac¡ón se purgó con NH37 M en MeOH (40 ml). El MeOH/NH3 se el¡m¡nó al vacío para proporc¡onar un sól¡do vitreo de color naranja/marrón pál¡do. El sól¡do vítreo crudo se pur¡f¡có de nuevo med¡ante HPLC preparat¡va d¡r¡g¡da por la masa en cond¡c¡ones bás¡cas (NH4OH 5 mM) para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do vítreo de color rosa pál¡do (0,185 g, 48% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 1,53 m¡n; MS m/z 427,3 [M+H]+ [Método B]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,64 (d, J=2,53 Hz, 1 H), 8,19 (d, J=8,59 Hz, 1 H), 7,80 (d, J=1,52 Hz, 1 H), 7,65 (d, J=2,02 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1 H), 6,60 (dd, J=2,53, 1,52 Hz, 1 H), 4,36 (tt, J=12,38, 3,28 Hz, 1 H), 4,04 (s, 3 H), 2,99 (s, 3 H), 1,61 (dd, J=12,13, 3,03 Hz, 2 H), 1,42 (t, J=12,38 Hz, 2 H), 1,29 (s a., 1 H), 1,22 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H). HR-MS: tR 1,54 m¡n; MS m/z 427,2260 [M+H]+ [Método C].
Empleando el método del Ejemplo de referencia 1, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000022_0001
Ejemplo de referencia 6: Síntesis de 5-(2-metoxi-4-(1-metiMH-pirazol-4-il)feml)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidm-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amma
Figure imgf000023_0001
Paso 1: 3-Metoxi-4-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)fenol:
A una suspensión agitada de ferf-but¡l(3-metox¡-4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)fenox¡)d¡met¡ls¡lano (Intermedio 3) (3,28 g, 9,00 mmol) y 5-bromo-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na (Intermedio 4) (1 g, 6,00 mmol) en d¡oxano (48 ml) en atmósfera de n¡trógeno se añad¡ó Pd(PPh3)4 (0,347 g, 0,30 mmol) segu¡do de una soluc¡ón de Na2CO 3 (1,272 mg, 12,00 mmol) en agua (12 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo a 120 °C durante 18 horas. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente, a cont¡nuac¡ón se d¡luyó con EtOAc (150 ml) y se lavó con agua (100 ml). La fase orgán¡ca se separó y la fase acuosa se volv¡ó a extraer con EtOAc (150 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron con MgSO4, se f¡ltraron y se concentró el f¡ltrado al vacío para proporc¡onar un res¡duo marrón ace¡toso. El res¡duo se suspend¡ó en EtOAc (10 ml) y se son¡có, a cont¡nuac¡ón la suspens¡ón resultante se f¡ltró al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un sól¡do blanquec¡no. La mezcla cruda se pur¡f¡có med¡ante cromatografía flash ut¡l¡zando un 3% de [NH37 M en MeOH]/DCM como eluyente para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do vitreo de color amar¡llo pál¡do (0,534 g, 23% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 0,75 m¡n; MS m/z 377,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,99 (s a., 1 H), 7,88 (d, J=8,59 Hz, 1 H), 6,54 (d, J=2,53 Hz, 1 H), 6,50 (dd, J=8,34, 2,27 Hz, 1 H), 4,34-4,25 (m, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 2,94 (s, 3 H), 1,59 (dd, J=11,62, 3,03 Hz, 2 H), 1,40 (t, J=12,38 Hz, 2 H), 1,26 (s a., 1 H), 1,20 (s, 6 H), 1,08 (s, 6 H).
Paso 2: Tr¡fluorometanosulfonato de 3-metox¡-4-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)fen¡lo:
Una suspens¡ón ag¡tada de 3-metox¡-4-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)fenol (533 mg, 1,416 mmol) y TEA (493 μl, 3,540 mmol) en DCM (15 ml) en atmósfera de n¡trógeno se enfr¡ó en un baño de h¡elo y se añad¡ó 1,1,1-tr¡fluoro-N-fen¡l-N-((tr¡fluoromet¡l)sulfon¡l)metanosulfonam¡da (531 mg, 1,486 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó a la temperatura del baño de h¡elo durante 10 m¡nutos y a cont¡nuac¡ón a temperatura amb¡ente durante 18 horas. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (35 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (20 ml). La fase orgán¡ca se separó con un separador de fases y se concentró al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un sól¡do blanco. El producto crudo se preabsorb¡ó sobre gel de síl¡ce y se pur¡f¡có med¡ante cromatografía flash ut¡l¡zando un grad¡ente de un 0-10% de MeOH/DCM durante 18 m¡nutos para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do de color amar¡llo pál¡do (0,577 g, 77% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 1,12 m¡n; MS m/z 509,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,24 (d, J=8,59 Hz, 1 H), 7,42 (d, J=2,53 Hz, 1 H), 7,21 (dd, J=8,84, 2,27 Hz, 1 H), 4,44-4,33 (m, 1 H), 4,00 (s, 3 H), 2,99 (s, 3 H), 1,62 (d, J=9,60 Hz, 2 H), 1,43 (t, J=11,62 Hz, 2 H), 1,28 (s a., 1 H), 1,22 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H).
Paso 3: 5-(2-Metox¡-4-(1-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)fen¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na A una soluc¡ón ag¡tada de 1-met¡l-4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-1H-p¡razol (177 mg, 0,849 mmol) y tr¡fluorometanosulfonato de 3-metox¡-4-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)fen¡lo (332 mg, 0,653 mmol) en d¡oxano (4 ml) se añad¡ó Pd(PPh3)4 (38 mg, 0,033 mmol) segu¡do de una soluc¡ón de Na2CO 3 (208 mg, 1,958 mmol) en agua (1 ml). La mezcla resultante se purgó con n¡trógeno, se selló y se calentó a 120 °C durante 30 m¡nutos con ¡rrad¡ac¡ón de m¡croondas. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc (100 ml) y se lavó con agua (50 ml). La fase orgán¡ca se separó, se secó con MgSO4 y se f¡ltró. Se añad¡ó al f¡ltrado S¡l¡aMetS DMT (541 mg, 0,61 mmol/g, 0,33 mmol) y la suspens¡ón resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 18 horas. El S¡l¡aMetS DMT se el¡m¡nó med¡ante una f¡ltrac¡ón al vacío, se lavó con EtOAc y se concentró el f¡ltrado al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un sól¡do de color amar¡llo pál¡do. El mater¡al crudo se recr¡stal¡zó en MeOH (3 ml) para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do blanco (0,166 g, 57% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 0,86 m¡n; MS m/z 441,4 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,27 (s, 1 H), 8,05 (d, J=8,08 Hz, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,37 (d, J=1,52 Hz, 1 H), 7,29 (dd, J=8,59, 1,52 Hz, 1 H), 4,35 (tt, J=12,38, 3,28 Hz, 1 H), 3,99 (s, 3 H), 3,88 (s, 3 H), 2,97 (s, 3 H), 1,61 (dd, J=11,87, 3,28 Hz, 2 H), 1,41 (t, J=12,13 Hz, 2 H), 1,26 (s, 1 H), 1,21 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H). LC-MS: tR 1,60 min; MS m/z 440,4 [M+H]+ [Método B]. HR-MS: tR 1,43 min; MS m/z 441,2419 [M+H]+ [Método C].
Empleando el método del Ejemplo de referencia 6, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000025_0001
Figure imgf000026_0001
Ejemplo de referencia 15: Síntesis de 2-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-(1-met¡MH-pirazol-4-¡l)fenol:
Figure imgf000027_0001
A una solución agitada de 5-(2-metox¡-4-(1-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)fen¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (129 mg, 0,293 mmol) en NMP (3 ml) se añad¡ó Na2CO3 (47 mg, 0,439 mmol) segu¡do de PhSH (35 |jl, 0,337 mmol). La mezcla resultante se selló, se somet¡ó al vacío y se volv¡ó a rellenar con n¡trógeno (x3), a cont¡nuac¡ón se calentó a 190 °C durante 20 m¡nutos con ¡rrad¡ac¡ón de m¡croondas. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con MeOH (10 ml) y se f¡ltró a través de cel¡te. El f¡ltrado se ac¡d¡f¡có med¡ante la ad¡c¡ón de ác¡do acét¡co (3 ml) y se ¡ntrodujo en un cartucho de SCX de 2 g (humedec¡do prev¡amente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (15 ml) y se purgó con NH37 M en MeOH (15 ml). El MeOH/NH3 se el¡m¡nó al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un sól¡do marrón. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va d¡r¡g¡da por UV en cond¡c¡ones bás¡cas (NH4OH 5 mM), llevando a cabo la recolecc¡ón a 352 nm, para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do vitreo de color marrón pál¡do (0.096g, 77% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 0,88 m¡n; MS m/z 427,2 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,13 (s, 1 H), 7,86-7,78 (m, 2 H), 7,17-7,10 (m, 2 H), 4,35-4,25 (m, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 2,99 (s, 3 H), 1,62 (dd, d=11,87, 3,28 Hz, 2 H), 1,43 (t, d=12,13 Hz, 2 H), 1,21 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H). LC-MS: tR 1,69 m¡n; MS m/z 427,4 [M+H]+ [Método B]. HR-MS: tR 1,49 m¡n; MS m/z 427,2660 [M+H]+ [Método C].
Empleando los métodos del Ejemplo de referencia 6 y el Ejemplo de referencia 15, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000028_0001
Figure imgf000029_0002
Ejemplo de referencia 20: Síntesis de 3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidm-4-N)ammo)-1,3,4-tiadiazol-2-il)naftalen-2,7-diol
Figure imgf000029_0001
Paso 1: 7-(Benciloxi)-6-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)naftalen-2-ol
A una solución agitada de 7-(benciloxi)-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-ol (73 mg, 0,195 mmol) y 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Intermedio 4) (84 mg, 0,150 mmol) en dioxano (2 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (3,5 mg, 0,003 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (63 mg, 0,599 mmol) en agua (0,5 ml). La mezcla resultante se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 120 °C durante 1 h con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (20 ml), se filtró a través de un filtro de jeringa y se concentró el filtrado al vacío para proporcionar el producto crudo.
La mezcla cruda se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó en un cartucho de sílice de 12 g utilizando un sistema ISCO CombiFlash con un gradiente de un 0-10% de MeOH/DCM durante 15 minutos. Las fracciones relevantes se combinaron y se concentraron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un producto sólido vítreo de color amarillo (51 mg, 67,8% de rendimiento). lC-MS: tR 1,04 min; MS m/z 503,4 [M+H]+ [Método B].
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,92 (s, 1 H) 8,53 (s, 1 H) 7,81 (d, J=9,09 Hz, 1 H) 7,56-7,63 (m, 2 H) 7,32-7,48 (m, 4 H) 7,08 (d, J=2,53 Hz, 1 H) 6,97 (dd, J=8,84, 2,27 Hz, 1 H) 5,33 (s, 2 H) 3,92 (s a., 1 H) 2,94 (s, 3 H) 1,69 -0,97 (a. m., 16 H).
Paso 2: 3-(5-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)naftalen-2,7-diol
A una suspensión agitada enfriada en un baño de hielo de 7-(benciloxi)-6-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)naftalen-2-ol (49 mg, 0,112 mmol) en DCM (2 ml) en atmósfera de nitrógeno se añadió BBrs (solución 1 M en DCM, 0,56 ml, 0,56 mmol). La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de MeOH (2 ml) y la solución resultante se calentó hasta temperatura ambiente, a continuación se introdujo en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (-15 ml) y a continuación se purgó con NH37 M en MeOH (-10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el producto crudo. El producto crudo se arrastró con MeOH:DMSO 1:1 (2 ml), se filtró a través de un filtro de jeringa y el filtrado se purificó mediante HPLC preparativa, en condiciones neutras, con un gradiente de un 10-90% de MeCN/agua durante 15 minutos. Las fracciones relevantes se combinaron y se concentraron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón/verde oscuro (20,6 mg, 49,2% de rendimiento). LC-MS: tR 0,85 min; MS m/z 413,3 [M+H]+ [Método B]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 10,92 (s a., 1 H) 9,81 (s a., 1 H) 8,31 (s, 1 H) 7,74 (d, J=9,09 Hz, 1 H) 7,07 (s, 1 H) 6,87 - 6,94 (m, 2 H) 4,25-4,34 (m, 1 H) 3,01 (s, 3 H) 1,64 (dd, J=12,13, 3,03 Hz, 2 H) 1,45 (t, J=12,13 Hz, 2 H) 1,22 (s, 6 H) 1,10 (s, 6 H).
Empleando el método del Ejemplo de referencia 20, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los si uientes com uestos:
Figure imgf000030_0001
Ejemplo de referencia 25: Síntesis de 5-(2-doro-4-(1-metiMH-pirazol-4-il)feml)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Figure imgf000031_0001
Paso 1: 5-(4-Bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una mezcla agitada del ácido 4-bromo-2-clorobenzoico (2 g, 8,49 mmol) e hidrazinocarbotioamida (1,161 g, 12,74 mmol) se enfrió en atmósfera de nitrógeno en un baño de hielo. A continuación, se añadió POCb (2,375 ml, 25,5 mmol) gota a gota. Al finalizar la adición, la mezcla de reacción se calentó hasta 78 °C y se dejó agitar durante 3 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta temperatura ambiente y a continuación se enfrió adicionalmente en un baño de hielo. La desactivación mediante la adición de agua con hielo (50 ml) dio como resultado una masa sólida/similar a una goma. Este material se sonicó durante 1,5 horas y la suspensión resultante se diluyó con 50 ml más de agua y se suspendió durante 16 horas. La suspensión se filtró al vacío y el sólido se lavó con agua, a continuación se suspendió de nuevo en NaHCO3(ac) saturado (100 ml). La suspensión se suspendió durante 30 minutos, a continuación se filtró al vacío y se lavó con agua para proporcionar el producto crudo como un sólido blanquecino. El producto crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un gradiente de un 0-10% de MeOH/DCM durante 30 minutos para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color blanquecino/amarillo pálido (1,087 g, 44% de rendimiento). LC-MS: tR 1,09 min; MS m/z 292,0 [M+2H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,96 (d, J=8,59 Hz, 1 H), 7,91 (d, J=2,02 Hz, 1 H), 7,68 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1 H), 7,51 (s, 2 H).
Paso 2: 2-Bromo-5-(4-bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió 5-(4-bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (1,087 g, 3,74 mmol), en porciones durante 5 minutos, a una solución agitada de CuBr2 (1 g, 4,49 mmol) y f-BuNO2 (0,661 ml, 5,61 mmol) en MeCN (11 ml) en atmósfera de nitrógeno. Al finalizar la adición, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (40 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido marrón (1,193 g, 90% de rendimiento) sin necesidad de purificación adicional. LC-MS: tR 1,51 min; MS m/z 354,8 M+; [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,12 (d, J=8,59 Hz, 1 H), 8,07 (d, J=2,02 Hz, 1 H), 7,80 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1 H).
Paso 3: 5-(4-Bromo-2-clorofenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una solución agitada de 2-bromo-5-(4-bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol (700 mg, 1,975 mmol) y 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Intermedio 4) (1009 mg, 5,92 mmol) en NMP (4 ml) se calentó hasta 120 °C durante 3 horas. Se dejó enfriar la mezcla de reacción hasta temperatura ambiente, a continuación se diluyó con DCM (100 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) (100 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para obtener un líquido marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash de sílice, con un gradiente de un 0-10% de [NH32 M en MeOH]/DCM durante 30 minutos, llevando a cabo la recolección a 320 nm para proporcionar el compuesto del título como un sólido vítreo de color marrón claro (750 mg, 86% de rendimiento). LC-Ms : tR 1,10 min; MS m/z 445,1 [M+2H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 7,96 (d, J=8,59 Hz, 1 H), 7,93 (d, J=2,02 Hz, 1 H), 7,70 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1 H), 4,36 (tt, J=12,38, 3,28 Hz, 1 H) 3,01 (s, 3 H), 1,62 (dd, J=12,13, 3,03 Hz, 2 H), 1,43 (t, J=12,13 Hz, 2 H), 1,28 (s a., 1 H), 1,20 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H).
Paso 4: 5-(2-Cloro-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina A una solución agitada de 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-1H-p¡razol (129 mg, 0,620 mmol) y 5-(4-bromo-2-clorofenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (250 mg, 0,563 mmol) en dioxano (4 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (33 mg, 0,028 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (179 mg, 1,69 mmol) en agua (1 ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 80 °C durante una hora con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (25 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido marrón. El material crudo se arrastró con una mezcla 2:1 de MeOH:DMSO (4,5 ml), se hizo pasar a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones básicas (NH4OH 5 mM), llevando a cabo la recolección a 335 nm para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (138 mg, 55% de rendimiento). LC-MS: tR 0,90 min; m S m/z 445,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 8,32 (s, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 7,99 (d, J=8,08 Hz, 1 H), 7,84 (d, J=1,52 Hz, 1 H), 7,67 (dd, J=8,08, 1,52 Hz, 1 H), 4,36 (tt, J=12,44, 3,47 Hz, 1 H), 3,88 (s, 3 H), 3,01 (s, 3 H), 1,62 (dd, J=11,87, 3,28 Hz, 2 H), 1,43 (t, J=12,13 Hz, 2 H), 1,28 (s a., 1 H), 1,21 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H). LC-MS: tR 1,84 min; MS m/z 444,8 M+ [Método B].
Ejemplo de referencia 26: Síntesis de 3-cloro-2-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetrametilp¡per¡dm-4-¡l)ammo)-1,3,4-tiad¡azol-2-¡l)-5-(1-met¡MH-p¡razol-4-il)fenol:
Figure imgf000032_0001
Paso 1: 3-Cloro-2-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenol
A una solución agitada de 5-(2-cloro-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Ejemplo de referencia 25) (125 mg, 0,281 mmol) en AcOH:Ac2O 1:1 (2,8 ml) se añadió PhI(OAc)2 (127 mg, 0,393 mmol ) seguido de Pd(OAc)2 (6 mg, 0,028 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta 80 °C y se agitó durante 48 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, a continuación se diluyó con MeOH (10 ml) y se introdujo en un cartucho de SCX de 2 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH37 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido vítreo de color marrón. El material crudo se arrastró con MeOH (3 ml), se hizo pasar a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por la masa en condiciones básicas (NH4OH 5 mM) para obtener el producto crudo como un sólido vítreo de color marrón. El sólido crudo se disolvió de nuevo en MeOH (3 ml) y se purificó de nuevo mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones ácidas (0,1% de TFA), llevando a cabo la recolección a 348 nm. Las fracciones combinadas se introdujeron en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH) y el cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH37 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido vitreo blanquecino (6 mg, 5% de rendimiento). LC-MS: tR 0,52 min; MS m/z 461,3/463,2 [M+H]+ [Método D]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,26 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,15 (d, J=1,52 Hz, 1 H), 4,35 (s a., 1 H), 3,87 (s, 3 H), 3,01 (s, 3 H), 1,65 (d, J=9,60 Hz, 2 H), 1,48 (s a., 2 H), 1,22 (s a., 6 H), 1,11 (s a., 6 H).
Empleando el método del Ejemplo de referencia 25, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los si uientes com uestos:
Figure imgf000033_0002
Ejemplo de referencia 28: Síntesis de 3-metoxi-2-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidm-4-il)ammo)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-(5-metiloxazol-2-il)fenol
Figure imgf000033_0001
Paso 1: 5-(2-(Benciloxi)-6-metoxi-4-(5-metiloxazol-2-il)fenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
A una suspensión agitada del ácido (2-(benciloxi)-6-metoxi-4-(5-metiloxazol-2-il)fenil)borónico (Intermedio 2) (56 mg, 0,165 mmol) y 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Intermedio 4) (50 mg, 0,150 mmol) en dioxano (1 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (9 mg, 0,008 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (32 mg, 0,300 mmol) en agua (0,25 ml). La mezcla resultante se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 120 °C durante 30 minutos con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (20 ml), se filtró a través de un filtro de jeringa y se concentró el filtrado al vacío para proporcionar el producto crudo como un residuo oleoso de color rosa/rojo. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones ácidas (0,1% de TFA), llevándose a cabo la recolección a 311 nm para proporcionar la sal de TFA del compuesto del título como un sólido vitreo de color amarillo. La sal de TFA se disolvió de nuevo en MeOH y se introdujo en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (15 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido vítreo transparente (0,029 g, 35% de rendimiento). LC-MS: tR 2,23 min; MS m/z 548,4 [M+H]+ [Método B]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,43 - 7,25 (m, 7 H), 7,06 (s, 1 H), 5,26 (s, 2 H), 4,18-4,10 (m, 1 H), 3,85 (s, 3 H), 2,97 (s, 3 H), 2,42 (s, 3 H), 1,65-1,56 (m, 2 H), 1,50-1,38 (m, 2 H), 1,18 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H).
Paso 2: 3-Metoxi-2-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-(5-metiloxazol-2-il)fenol Una solución de 5-(2-(benciloxi)-6-metoxi-4-(5-metiloxazol-2-il)fenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (28,9 mg, 0,053 mmol) en EtOAc:MeOH 1:1 (5 ml) se añadió a un matraz purgado con nitrógeno que contenía Pd/C al 10% (2,9 mg, al 10% en peso) y la mezcla resultante se sometió a una atmósfera de hidrógeno y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 72 horas. La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se diluyó con EtOAc (10 ml), se filtró a través de celite y a continuación se lavó con EtOAc (50 ml). El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido de color amarillo pálido. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa en condiciones ácidas con un gradiente de un 20-95% de MeCN/agua (+ 0,1% de TFA) durante 15 minutos. Las fracciones que contenían el producto se introdujeron directamente en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH) y el cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón pálido/blanquecino (9 mg, 39% de rendimiento). LC-MS: tR 2,08 min; MS m/z 458,4 [M+H]+ [Método B]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 12,74 (s a., 1 H), 7,15 (s, 2 H), 7,05 (d, J=1,01 Hz, 1 H), 4,42-4,33 (m, 1 H), 4,04 (s, 3 H), 3,03 (s, 3 H), 2,41 (d, J=1,01 Hz, 3 H), 1,64 (dd, J=11,87, 3,28 Hz, 2 H), 1,44 (t, J=12,13 Hz, 2 H), 1,22 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H).
Ejemplo de referencia 29: Síntesis de 2-(2-metox¡-4-(1H-pirazoM-¡l)feml)-5-(1,2,3,6-tetrah¡droμmdm-4-il)-1,3,4-tiadiazol:
Figure imgf000034_0001
Paso 1: 4-(5-Bromo-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de ferf-butilo
En un vial para microondas de 5 ml, se añadió 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de fert-butilo (247 mg, 0,8 mmol), 2,5-dibromo-1,3,4-tiadiazol (98 mg, 0,4 mmol), K3 PO4 (212 mg, 1,0 mmol), Pd(PPh3)4 (23 mg, 0,02 mmol), 1,4-dioxano (2 ml) y agua (0,4 ml). La mezcla se purgó con N2 durante 10 min y a continuación se calentó hasta 100 °C en un microondas durante 1 hora. La mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc/heptano) para proporcionar 64 mg (46%) de 4-(5-bromo-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de fert-butilo: MS (M+2) = 348,1; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 56,46 (td, J = 3,0, 1,9 Hz, 1 H), 4,15 (d, J = 3,0 Hz, 2H), 3,64 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,73 (m, 2H), 1,49 (s, 9H).
Paso 2: 4-(5-(2-Metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de fert-butilo:
En un vial para microondas de 5 ml, se añadió 4-(5-bromo-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de fert-butilo (100 mg, 0,29 mmol), 1-(3-metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirazol (173 mg, 0,58 mmol), K3 PO4 (153 mg, 0,72 mmol) y Pd(PPh3)4 (17 mg, 0,015 mmol), 1,4-dioxano (2 ml) y agua (0,4 ml). La mezcla se purgó con N2 durante 10 min y se calentó hasta 100 °C en un microondas durante 1 hora. La mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc/heptano) para obtener 87 mg (68,5%) de 4-(5-(2-metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de fert-butilo: MS (M+1) = 440,4; 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 58,57 (d, J=8,59 Hz, 1H), 8,03 (d, J=2,53 Hz, 1H), 7,78 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,62 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,32 (dd, J=2,02, 8,59 Hz, 1H), 6,59 (m, 1H), 6,51-6,55 (m, 1H), 4,15-4,22 (m, 2H), 4,11 (s, 3H), 3,69 (t, J=5,56 Hz, 2H), 2,78-2,90 (m, 2H), 1,51 (s, 9H).
Paso 3: 2-(2-metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-5-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-1,3,4-tiadiazol
A una solución de 4-(5-(2-metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de fert-butilo (80 mg, 0,18 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) se añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (0,9 ml). La mezcla se agitó durante 1 h. A continuación, la mezcla se diluyó con MeOH, se introdujo en SCX, se lavó con MeOH, se eluyó con NH3 2 N en MeOH y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (CH2 Cl2/MeOH) para obtener 32 mg de 2-(2-metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-5-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-1,3,4-tiadiazol: HRMS (M+1) calcd. para C17H17N5OS 340,1232, experimental 340,1228; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 8,71 (d, J=2,53 Hz, 1H), 8,40 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,83 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,73 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,68 (dd, J=2,02, 8,59 Hz, 1H), 6,73 (m, 1H), 6,54-6,68 (m, 1H), 4,12 (s, 3H), 3,52 (m, 2H), 3,02 (t, J=5,81 Hz, 2H), 2,62 (m, 2H).
Ejemplo de referencia 30: Síntesis de 2-(5-(piperazm-1-il)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-(1H-pirazol-1-il)fenol
Figure imgf000035_0001
Paso 1: 4-(5-Bromo-1,3,4-tiadiazol-2-il)piperazin-1-carboxilato de ferf-butilo:
Se añadió DIPEA (430 |jl, 2,460 mmol) a una solución agitada de 2,5-dibromo-1,3,4-tiadiazol (300 mg, 1,230 mmol) y piperazin-1-carboxilato de ferf-butilo (275 mg, 1,476 mmol ) en dioxano (4 ml). La mezcla de reacción se calentó a 120 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró al vacío, se lavó con dioxano y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un residuo oleoso de color naranja. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa en condiciones neutras (formiato de amonio modificado) para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo (331 mg, 77% de rendimiento). LC-MS: tR 1,18 min; MS m/z 351,1 [M+2]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 3,38-3,55 (m, 8H), 1,41 (s, 9H).
Paso 2: 4-(5-(2-Metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)piperazin-1-carboxilato de fed-butilo:
A una suspensión agitada de 1-(3-metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirazol [Intermedio 1] (132 mg , 0,441 mmol) y 4-(5-bromo-1,3,4-tiadiazol-2-il)piperazin-1-carboxilato de fed-butilo (140 mg, 0,401 mmol) en dioxano (2 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (23 mg, 20 jmol) seguido de una solución de Na2CO3 (85 mg, 0,802 mmol) en agua (0,5 ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 120 °C durante 30 minutos con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con DCM (20 ml), se lavó con agua (10 ml), a continuación la fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido de color marrón pálido. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 12 g con un gradiente de EtOAc/heptano para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color blanquecino/amarillo pálido (138 mg, 78% de rendimiento). LC-MS: í r 1,34 min; MS m/z 443,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,65 (d, J=2,53 Hz, 1H), 8,21 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,80 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,66 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,60 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1H), 6,59-6,62 (m, 1H), 4,05 (s, 3H), 3,51 (s, 8H), 1,43 (s, 9H).
Paso 3: 2-(5-(Piperazin-1-il)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-(1H-pirazol-1-il)fenol:
Se añadió BBrs (solución 1 M en heptano, 1,56 ml, 1,56 mmol) a una solución agitada purgada con nitrógeno de 4-(5-(2-metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)piperazin-1-carboxilato de fed-butilo (138 mg, 0,312 mmol) en DCM (6 ml) y la suspensión de color amarillo intenso resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de MeOH (10 ml) para obtener una suspensión. El sólido se recolectó mediante una filtración al vacío, se lavó con MeOH y se disolvió de nuevo en una mezcla de DMSO y agua. La solución se introdujo en un cartucho de SCX de 5 g (humedecido previamente con MeOH) y el cartucho se lavó con DMSO/agua (5 ml), MeOH (20 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (30 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido blanquecino. El material crudo se sonicó en MeOH (5 ml) y la suspensión resultante se filtró al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanquecino (69 mg, 68% de rendimiento). LC-MS: í r 0,76 min; MS m/z 329,2 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,50 (d, J=2,53 Hz, 1H), 8,03 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,77 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,52 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,42 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1H), 6,55-6,61 (m, 1H), 3,42-3,48 (m, 4H), 2,80-2,91 (m, 4H).
Ejemplo de referencia 31. Síntesis de 5-(7-metox¡qumolm-6-¡l)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilp¡per¡dm-4-¡l)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
Figure imgf000036_0001
Paso 1: 6-Bromo-7-metoxiquinolina
En un matraz de fondo redondo de 100 ml, una solución de ácido sulfúrico concentrado (2,1 ml, 39,6 mmol) en agua (2,4 ml) se trató con ácido 3-nitrobencenosulfónico (2,06 g, 10,1 mmol) y glicerol (2,5 ml, 34,8 mmol) para obtener una suspensión gris espesa. La mezcla se calentó hasta 110 °C (baño de aceite) y se añadió en porciones 4-bromo-3-metoxianilina (1,952 g, 9,66 mmol), lo que dio como resultado una suspensión inmóvil. Se añadieron porciones adicionales de agua (3 ml), glicerol (3 ml) y ácido sulfúrico concentrado (3 ml) y la temperatura aumentó hasta 140 °C. Después de tres horas, la mezcla se había convertido en una solución homogénea de color marrón oscuro y el análisis por LCMS indicó que la reacción había finalizado. La solución se enfrió hasta TA, se vertió sobre hielo y el pH se ajustó hasta 8 mediante la adición de hidróxido de amonio acuoso concentrado (al 30%). La mezcla se repartió entre acetato de etilo y agua, se lavó con agua y salmuera, se secó con sulfato de magnesio y se concentró para obtener un líquido marrón. La purificación mediante cromatografía en columna flash (24 g de gel de sílice, gradiente de un 0-20% de acetato de etilo en diclorometano durante 25 volúmenes de columna) proporcionó 6-bromo-7-metoxiquinolina (1,18 g, 46,2%) como un sólido esponjoso de color marrón claro. 1H r Mn (400 MHz, CLOROFORMO-D) □ ppm 8,86 (dd, J=4,0, 1,5 Hz, 1 H), 8,01-8,12 (m, 2 H), 7,53 (s, 1 H), 7,34 (dd, J=8,1, 4,5 Hz, 1 H), 4,07 (s, 3 H). La RMN indica la presencia de aproximadamente un 10% de 7-metoxiquinolina. Se prosiguió con la mezcla sin purificación adicional.
Paso 2: Ácido (7-metoxiquinolin-6-il)borónico
A una solución de 6-bromo-7-metoxiquinolina (pureza de un 90%, 0,65 g, 2,73 mmol) enfriada hasta -78 °C se añadió gota a gota nBuLi (1,6 M en heptanos, 1,877 ml, 3,00 mmol). La solución se agitó durante 0,5 h, después de lo cual se añadió borato de trimetilo (0,763 ml, 6,83 mmol) en una sola porción. Se dejó calentar lentamente la solución hasta TA durante toda la noche. La mezcla de reacción cruda se sometió a evaporación rotatoria hasta sequedad, se concentró a partir de heptano (2x), se lavó disgregándola con éter dietílico (3x) y se concentró para proporcionar una mezcla cruda del ácido (7-metoxiquinolin-6-il)borónico como un sólido de color tostado (1,185 g, 214%). El análisis por LCMS está limpio y, basándose en la masa recuperada, la mezcla se utilizó sin purificación adicional asumiendo una pureza de -50% en peso. MS = 204.1 (M+1). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) □ ppm 8,48 (s a, 1 H), 8,07 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 7,16 (dd, J=8,1, 4,5 Hz, 1 H), 7,11 (s, 1 H), 3,82 (s, 3 H).
Paso 3: 5-(7-Metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
En un tubo para microondas, se desgasificó con una corriente anhidra de nitrógeno durante cinco minutos una mezcla de 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Intermedio 4) (100 mg, 0,300 mmol), ácido (7-metoxiquinolin-6-il)borónico (-50% en peso, 171 mg, 0,420 mmol) y carbonato de sodio (95 mg, 0,90 mmol) en dimetoxietano/agua 3:1 (2,5 ml). Se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (34,7 mg, 0,030 mmol) y la mezcla se calentó en un microondas a 140 °C durante 30 min. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con DCM (6x). Se añadió HCl en dioxano (1 M, 1,2 ml, 1,2 mmol) y la solución se concentró a sequedad. La purificación mediante SCX (columna de 2 g, elución con amoniaco 7 M en MeOH) proporcionó un residuo marrón que se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna flash (12 g de gel de sílice, gradiente de un 1-17% de amoniaco 1,4 N en MeOH en DCM durante 30 volúmenes de columna) para proporcionar 5-(7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina como un sólido amarillo (104 mg, 84%). MS = 412,3 (M+1), tR = 0,45 min [Método D]. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) □ ppm 8,83 (dd, J=4,3, 1,8 Hz, 1 H), 8,71 (s, 1 H), 8,42 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,48 (dd, J=8,3, 4,3 Hz, 1 H), 4,43-4,57 (m, 1 H), 4,16 (s, 3 H), 3,11 (s, 3 H), 1,81 (dd, J=12,6, 3,0 Hz, 2 H), 1,58 (t, J=12,4 Hz, 2 H), 1,37 (s, 6 H), 1,25 (s, 6 H).
Ejemplo de referencia 32. Síntesis de 6-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-7-ol
Figure imgf000037_0001
Una mezcla de 5-(7-metoxiquinolin-6-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (30 mg, 0,073 mmol) y clorhidrato de piridina (126 mg, 1,093 mmol) se calentó en un microondas a 160 °C durante 30 minutos. El sólido resultante se disolvió en metanol y se concentró sobre una mezcla de gel de sílice (500 mg) y bicarbonato de sodio (14,6 mmol, 122 mg) y se sometió a una cromatografía en columna flash (4 g de gel de sílice, gradiente de un 1-17% de amoniaco 1,4 N en MeOH en DCM durante 30 volúm enes de columna) para proporcionar 6-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-7-ol como un sólido amarillo (24 mg, 83%). MS = 398,3 (M+1). 1H RMN (400 MHz, METANOL-cfo) □ ppm 8,67 (d, J= 3,0 Hz, 1 H), 8,49 (s, 1 H), 8,29 (d, J= 7 ,6 Hz, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,28 (dd, J=8,3, 4,3 Hz, 1 H), 4,55 (t, J=12,1 Hz, 1 H), 3 ,13 (s, 3 H), 1,90 (dd, J=12,6, 3,0 Hz, 2 H), 1,62-1,78 (m, 2 H), 1,46 (s, 6 H), 1,33 (s, 6 H).
Síntesis de los intermedios
Intermedio 7: Síntesis de 2-bromo-5-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)oxi)-1,3,4-tiadiazol:
Figure imgf000037_0002
Se añadió LiHMDS (solución 1 M en TBME, 1,72 ml, 1,72 mmol) a una suspensión agitada enfriada con hielo de 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-ol (248 mg, 1,578 mmol) en DMF (5 ml) en atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a 0 °C durante 30 minutos y a continuación se calentó a 50 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de MeOH (5 ml), se acidificó mediante la adición de TFA y se introdujo en un cartucho de S C X de 5 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (20 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (15 ml). Las purgas básicas com binadas se concentraron al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido de color marrón claro. El material crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 1 2 g, con un gradiente de MeOH/DCM, para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón pálido (227 mg, 49% de rendimiento). LC-M S tR 0,72 min; MS m/z 322,1 [M+2]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 5,26-5,38 (m, 1 H), 2 ,01-2,17 (m, 2H), 1,42 (s a., 1H) 1,23-1,32 (m, 2H), 1,17 (s, 6 H), 1,10 (s a., 6 H).
Intermedio 8: Síntesis de 1-(3-metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametiM,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-N-metiMH-pirazol-3-amina
Figure imgf000037_0003
Paso 1: 1-(4-Bromo-3-metoxifenil)-1H-pirazol-3-amina:
Una mezcla de 1-bromo-4-yodo-2-metoxibenceno (2,5 g, 7,99 mmol), 3-aminopirazol (0,797 g, 9,59 mmol), salicilaldoxima (0,219 g, 1,598 mmol), C u 2 O (91 mg, 0,479 mmol) y C s 2 C O 3 (3,9 g, 11,98 mmol) en DMF ( 8 ml) se desgasificó con N2 y se calentó a 95 °C durante toda la noche. Después de enfriar hasta TA, la mezcla se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc. El filtrado se lavó con agua y salmuera. La solución orgánica se secó con Na2 SO 4 , se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (10% -60% de EtOAc en heptano) para obtener 1-(4-bromo-3-metoxifenil)-1H-pirazol-3-amina (800 mg, MS: 270,3 [M+H+]).
Paso 2: N-(1-(4-Bromo-3-metoxifen¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)-2,2,2-tr¡fluoroacetam¡da
A una solución enfriada con hielo de 1-(4-bromo-3-metoxifen¡l)-1H-p¡razol-3-am¡na (200 mg, 0,746 mmol) y piridina (0,263 ml, 1,343 mmol) en DCM (5 ml) se añadió anhídrido trifluoroacético (0,124 ml, 0,895 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM, se lavó con una solución acuosa de HCl 1 N, NaHCOs acuoso saturado, a continuación se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener 320 mg de N-(1-(4-bromo-3-metox¡fenil)-1H-p¡razol-3-¡l)-2,2,2-tr¡fluoroacetam¡da, que se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional.
Paso 3: N-(1-(4-Bromo-3-metox¡fen¡l)-1H-p¡razol-3-il)-2,2,2-tr¡fluoro-N-met¡lacetam¡da
A una mezcla de N-(1-(4-bromo-3-metox¡fenil)-1H-p¡razol-3-¡l)-2,2,2-tr¡fluoroacetam¡da (320 mg, 0,879 mmol) y K2 CO3 (146 mg, 1,055 mmol) en DMF (2 ml) se añadió Mel (202 mg, 1,055 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción se vertió sobre agua y se extrajo con Et2 O. Las frases orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron con Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para obtener N-(1-(4-bromo-3-metox¡fen¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)-2,2,2-trifluoro-N-met¡lacetam¡da (300 mg, MS: 380,0 [M+H+]).
Paso 4: 1-(4-Bromo-3-metoxifen¡l)-N-met¡l-1H-p¡razol-3-am¡na
A una solución enfriada con hielo de N-(1-(4-bromo-3-metox¡fen¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)-2,2,2-trifluoro-N-met¡lacetam¡da (300 mg, 0,793 mmol) en EtOH (5 ml) se añadió una solución de etóxido de sodio al 21% en EtOH (0,4 ml, 0,793 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche y a continuación se vertió sobre agua. La mezcla se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa saturada de NaHCOs, se secaron con Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para obtener 1-(4-bromo-3-metoxifen¡l)-N-met¡l-1H-p¡razol-3-am¡na (200 mg, MS: 284,3 [M+H+]).
Paso 5: 1-(3-Metox¡-4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-il)fen¡l)-N-met¡l-1H-p¡razol-3-am¡na
Una mezcla de reacción desgasificada de 1-(4-bromo-3-metoxifen¡l)-N-met¡l-1H-p¡razol-3-am¡na (200 mg, 0,709 mmol), bis(pinacolato)d¡boro (270 mg, 1,063 mmol), Pd(dppf)Cl2 (51,9 mg, 0,071 mmol), dppf (39,3, 0,071 mmol) y acetato de potasio (451 mg, 2,127 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se calentó a 90 °C durante toda la noche. Después de enfriar hasta TA, la mezcla se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (10%-60% de EtOAc en heptano) para obtener 1-(3-metox¡-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)fen¡l)-N-met¡l-1H-p¡razol-3-am¡na (160 mg, m S: 330,2 [M+H+]).
Intermedio 9: Síntesis de 6-metox¡-5-(4,4,5,5-tetramet¡M,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-2,3-d¡h¡dro-1H-mden-1-ona
Figure imgf000038_0001
En un matraz de fondo redondo de 100 ml que contenía 1,4-dioxano (21 ml), se añadió 5-bromo-6-metox¡-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (1,0 g, 4,15 mmol), bis(pinacolato)d¡boro (1,6 g, 6,22 mmol) y acetato de potasio (1,3 g, 13,3 mmol). La suspensión se desgasificó con nitrógeno durante 5 min, a continuación se añadió 1,1'-bis(difen¡lfosf¡no)ferroceno (0,23 g, 0,415 mmol) y PdCh(dppf) (0,30 g, 0,415 mmol). La suspensión resultante se calentó a 80 °C durante 18 h. A continuación, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo, se filtró a través de celite y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice para proporcionar 6-metoxi-5-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-2,3-d¡h¡dro-1H-inden-1-ona (1,1 g) MS [M+H+]= 289,4
Intermed¡o 10: Síntes¡s de 7-metox¡-6-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)qu¡nol¡n-2-carbon¡tr¡lo
Figure imgf000038_0002
Paso 1: 6-Cloro-7-metoxiquinolina
Una solución de ácido sulfúrico (35 ml) en agua (35 ml) se trató con ácido 3-nitrobencenosulfónico (35,1 g, 159 mmol) y glicerol (80 ml, 1,1 mol) para obtener una suspensión gris espesa. La suspensión se calentó hasta 75 °C y se añadió 4-cloro-3-metoxianilina (25,0 g, 159 mmol). La mezcla se agitó a 140 °C durante 1 h. Se añadieron cantidades adicionales de agua (35 ml), ácido sulfúrico (35 ml) y glicerol (40 ml) y la reacción se agitó durante 2 h más a 140 °C. La solución se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió sobre hielo y se ajustó el pH hasta 13 mediante la adición de hidróxido de amonio concentrado. La mezcla se extrajo con EtOAc (3x) y los extractos se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron. Tras el procedimiento general para la purificación de quinolinas descrito por Leir, C. M. J. Org. Chem., 1977, 42, 911, el residuo se disolvió en HCl 2 M (500 ml) y se añadió cloruro de zinc (43,2 g, 317 mmol), lo cual dio como resultado la formación inmediata de un precipitado. La mezcla se agitó durante 30 min. Los sólidos se aislaron mediante filtración, se lavaron con HCl 2 M frío, 2-propanol y a continuación agua. Los sólidos se añadieron a hidróxido de amonio concentrado (400 ml) y la mezcla se agitó durante 10 min. Se añadió EtOAc y la mezcla se agitó durante 5 min. La mezcla se extrajo con EtOAc (3x) y los extractos se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron para obtener un residuo de color marrón oscuro constituido por una mezcla de los dos posibles regioisómeros de la ciclación. La cromatografía en gel de sílice (gradiente de un 15-100% de EtOAc en DCM) proporcionó 6-cloro-7-metoxiquinolina (7,03 g) como un sólido beis. MS (M+1) = 194,1, 1H RMN (400 MHz, Metanol-d 4) 58,78 (dd, J= 4,5, 1,6 Hz, 1H), 8,24 (dd, J= 8,4, 1,4 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,43 (dd, J= 8,3, 4,5 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H).
Paso 2: 1-Óxido de 6-cloro-7-metoxiquinolina
En un matraz de fondo redondo de 100 ml, se disolvió 6-cloro-7-metoxiquinolina en DCM (25,8 ml) y se añadió MTO (0,051 g, 0,207 mmol). La mezcla de reacción se tapó y se ventiló con una aguja, a continuación se colocó en un baño de hielo para que se enfriara. Una vez enfriada, se añadió peróxido de hidrógeno (0,633 ml, 10,33 mmol) gota a gota. Cuando se completó la adición, la mezcla de reacción se dejó de refrigerar, se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche (18 h). Se añadió MnO2 (10 mg, 0,115 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h más. La mezcla de reacción se filtró a través de celite, se lavó con DCM y a continuación se concentró al vacío para proporcionar 1-óxido de 6-cloro-7-metoxiquinolina (1,036 g) MS [M+H+] = 210,3.
Paso 3: 6-Cloro-7-metoxiquinolina-2-carbonitrilo
En un matraz de 50 ml que contenía acetonitrilo (6,0 ml), se introdujo 1-óxido de 6-cloro-7-metoxiquinolina (0,25 g, 1,19 mmol), TEA (0,33 ml, 2,39 mmol) y cianuro de trimetilsililo (0,48 ml, 3,58 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 2 h, se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se basificó utilizando Na2CO3 saturado y el producto se extrajo con DCM. La fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar 6-cloro-7-metoxiquinolin-2-carbonitrilo (0,20 g) MS [M+H+] = 219,4.
Paso 4: 7-Metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-2-carbonitrilo
A un vial para microondas de 5 ml que contenía 1,4-dioxano (2,5 ml) se añadió 6-cloro-7-metoxiquinolin-2-carbonitrilo (0,11 g, 0,503 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,26 g, 1,01 mmol) y acetato de potasio (0,30 g, 3,02 mmol). La suspensión se desgasificó con nitrógeno durante 5 min. Se añadió un aducto de PdCh(dppf) y diclorometano (0,04 g, 0,05 mmol) y la suspensión resultante se calentó a 100 °C durante 2 h. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo, se filtró a través de celite y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo, 7-metoxi-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinolin-2-carbonitrilo MS [M+H+] = 311,2.
Síntesis de los Ejemplos
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 1, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000040_0001
Figure imgf000041_0001
Empleando métodos s¡m¡lares a los descr¡tos para la preparac¡ón del Ejemplo de referencia 6 , ut¡l¡zando los mater¡ales de part¡da adecuados, se prepararon los s¡gu¡entes compuestos:
Figure imgf000041_0002
Empleando métodos s¡m¡lares a los descr¡tos para la preparac¡ón del Ejemplo de referencia 25, ut¡l¡zando los mater¡ales de part¡da adecuados, se prepararon los s¡gu¡entes compuestos:
Figure imgf000042_0001
Figure imgf000043_0001
Figure imgf000044_0001
Figure imgf000045_0001
Figure imgf000046_0001
Figure imgf000047_0001
Empleando métodos sim ilares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 26, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000047_0002
Ejemplo de referencia 61: Síntesis de 5-(2-fluoro-6-metoxi-4-(1H-pirazol-4-N)fenM)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
Figure imgf000048_0001
Paso 1: 5-(2-Fluoro-6-metoxifenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una mezcla agitada del ácido 2-fluoro-6-metoxibenzoico (2 g, 11,76 mmol) e hidrazinocarbotioamida (1,607 g, 17,63 mmol) se enfrió en atmósfera de nitrógeno en un baño de hielo y se añadió POCb (3,29 ml, 35,3 mmol) gota a gota. Al finalizar la adición, la mezcla de reacción se agitó a 78 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo y se desactivó mediante la adición de agua con hielo (~50 ml) para obtener una masa sólida/similar a una goma. Este sólido se sonicó durante 1,5 horas y la suspensión resultante se diluyó con 50 ml más de agua, a continuación se suspendió a temperatura ambiente durante -16 horas. El sólido se recolectó mediante una filtración al vacío, se lavó con agua, se suspendió de nuevo en NaHCO3(ac) saturado (-100 ml) y se suspendió durante ~30 minutos. El sólido resultante se recolectó mediante una filtración al vacío, a continuación se lavó con agua para proporcionar el producto crudo como un sólido blanquecino. El material crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 120 g, con un gradiente de 0-10% de MeOH/DCM como eluyente, para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color amarillo pálido (1,265 mg, 45% de rendimiento). LC-MS: tR 0,77 min; MS m/z 226,1 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,48 (td, J=8,34, 6,57 Hz, 1H), 7,29 (s, 2H), 7,02 (d, J=8,08 Hz, 1H), 6,91-6,99 (m, 1H), 3,85 (s, 3H).
Paso 2: 2-Bromo-5-(2-fluoro-6-metoxifenil)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió 5-(2-fluoro-6-metoxifenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (1,265 g, 5,62 mmol), en porciones, a una solución agitada de CuBr2 (1,505 g, 6,74 mmol) y f-BuNO2 (0,992 ml, 8,42 mmol) en MeCN (16 ml) en atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante -18 horas. La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (-40 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido marrón (1,401 g, 86% de rendimiento). LC-MS: tR 1,15 min; MS m/z 289,0 [M]+; [Método A], 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,63 (td, J=8,46, 6,32 Hz, 1H), 7,15 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,03-7,10 (m, 1H), 3,96 (s, 3H).
Paso 3: 5-(2-Fluoro-6-metoxifenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una solución agitada de 2-bromo-5-(2-fluoro-6-metoxifenil)-1,3,4-tiadiazol (335 mg, 1,159 mmol) y N,2,2,6,6-pentametilpiperidin-4-amina (197 mg, 1,159 mmol) en NMP (2,5 ml) se calentó a 120 °C durante ~18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3(ac) saturado (30 ml) y agua (20 ml), y se extrajo con DCM (75 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un líquido/aceite marrón. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones ácidas (0,1% de TFA), llevando a cabo la recolección a 298 nm. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se introdujeron en un cartucho de SCX de 5 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (30 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (20 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un aceite naranja (121 mg, 28% de rendimiento). LC-MS: tR 0,88 min; MS m/z 379,4 [M+H]+; [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,49 (td, J=8,34, 6,57 Hz, 1H), 7,03 (d, J=8,59 Hz, 1H), 6,97 (t, J=9,09 Hz, 1H), 4,26 - 4,36 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 1,62 (dd, J=11,62, 2,53 Hz, 2H), 1,42 (t, J=12,13 Hz, 2H), 1,27 (0 (s, 6 H),
Paso 4: 5-(4-Bromo-2-fluoro-6-metoxifenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Se hizo burbujear nitrógeno a través de una solución agitada de 5-(2-fluoro-6-metoxifenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (121 mg, 0,32 mmol) y 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (122 mg, 0,48 mmol) en dioxano (2,5 ml). Se añadió a esta solución dtbpy (9 mg, 0,032 mmol) e [Ir(COD)(OMe)]2 (11 mg, 0,016 mmol). La solución resultante se desgasificó haciendo burbujear nitrógeno a través de ella durante 10 minutos más, a continuación se calentó a 90 °C durante ~16 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se arrastró con una mezcla 1:1 de MeOH:agua (4 ml). Se añadió CuBr2 (168 mg, 0,754 mmol) y la suspensión resultante se calentó a 80 °C durante ~18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con NH4OH(ac) al 28% (10 ml) y se extrajo con DCM (20 ml). La fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite de color marrón oscuro. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones ácidas (0,1% de ácido fórmico), llevando a cabo la recolección a 314 nm. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se introdujeron en un cartucho de SCX de 2 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (-15 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar un sólido vítreo/aceite de color marrón claro como una mezcla cruda que contenía el compuesto del título, que se utilizó sin purificación adicional. LC-MS: tR 1,04 min; MS m/z 459,3 [M+2H]+ [Método A].
Paso 5: 5-(2-Fluoro-6-metoxi-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Se añadió Pd(Ph3P)4 (11 mg, 0,009 mmol) a una suspensión agitada de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (55 mg, 0,282 mmol) y 5-(4-bromo-2-fluoro-6-metoxifenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (86 mg, 0,188 mmol) en dioxano (1,5 ml), a continuación se añadió una solución de NaHCO3 (60 mg, 0,564 mmol) en agua (0,375 ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 120 °C con irradiación de microondas durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (10 ml). La fase orgánica se separó y se añadió SiliaMetS-DMT (0,61 mmol/g, 145 mg, 0,09 mmol). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante ~2 horas y a continuación se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite de color marrón claro. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones básicas (NH4OH modificado), llevando a cabo la recolección a 328 nm para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (26 mg, 32% de rendimiento). LC-MS: tR 0,76 min; MS m/z 445,5 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 13,09 (s a., 1H), 8,26 (s a., 2H), 7,23-7,31 (m, 2H), 4,27-4,37 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 1,62 (dd, J=11,87, 3,28 Hz, 2H), 1,42 (t, J=12,13 Hz, 2H), 1,20 (s, 6 H), 1,09 (s, 6H).
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 61, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000049_0001
Ejemplo de referencia 64: Síntesis de 6-metox¡-2-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡dm-4-¡l)ammo)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)-3,4-d¡h¡dro¡soqumolm-1(2H)-ona
Figure imgf000050_0001
Paso 1: 6-Metox¡-2-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)-3,4-d¡h¡dro¡soqu¡nol¡n-1(2H)-ona:
A una suspens¡ón ag¡tada de 6-metox¡-3,4-d¡h¡dro¡soqu¡nol¡n-1(2H)-ona (50 mg, 0,282 mmol) y 5-bromo-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na (Intermed¡o 4) (132 mg, 0,395 mmol) en DMF (0,7 ml) en atmósfera de n¡trógeno se añad¡ó K2 CO3 (78 mg, 0,564 mmol) segu¡do de CuI (32 mg, 0,169 mmol). La mezcla de reacc¡ón se calentó a 150 °C durante ~18 horas. Se añad¡eron 1.4 eq más de 5-bromo-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na (132 mg, 0,395 mmol) y 0.6 eq más de CuI (32 mg, 0,169 mmol) y se s¡gu¡ó ag¡tando a 150 °C durante 48 horas más. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc (10 ml) y se f¡ltró a través de cel¡te. El f¡ltrado se concentró al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un ace¡te de color marrón oscuro. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va d¡r¡g¡da por UV en cond¡c¡ones ác¡das (ác¡do fórm¡co mod¡f¡cado), llevando a cabo la recolecc¡ón a 312 nm. Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se ¡ntrodujeron en un cartucho de SCX de 2 g (humedec¡do prev¡amente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (-20 ml) y a cont¡nuac¡ón se purgó con un 10% de DCM en [NH3 7 M en MeOH] (12 ml). El DCM/MeOH/NH3 se el¡m¡nó al vacío para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do vitreo de color marrón/amar¡llo pál¡do (28 mg, 23% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 0,91 m¡n; MS m/z 430,5 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 7,88-7,97 (m, 1H), 6,96-7,03 (m, 2H), 4,35 (t, J=6,57 Hz, 2H), 4,16 (tt, J=12,19, 3,22 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,14 (t, J=6,57 Hz, 2H), 2,91 (s, 3H), 1,58 (dd, J=12,13, 3,03 Hz, 2H), 1,42 (t, J=11,87 Hz, 2H), 1,20 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H).
Ejemplo de referenc¡a 65: Síntes¡s de 5-(2-cloro-4-(1H-p¡razoM-¡l)feml)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡dm-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na
Figure imgf000050_0002
Paso 1: 5-(2-Cloro-4-fluorofen¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na:
A una suspens¡ón ag¡tada del ác¡do (2-cloro-4-fluorofen¡l)borón¡co (251 mg, 1,44 mmol) y 5-bromo-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na (Intermed¡o 4) (400 mg, 1,2 mmol) en d¡oxano (10 ml) en atmósfera de n¡trógeno se añad¡ó Pd(PPh3)4 (69 mg, 0,06 mmol) segu¡do de una soluc¡ón de Na2CO3 (382 mg, 3,6 mmol) en agua (2,5 ml). La mezcla de reacc¡ón se selló y se calentó a 120 °C con ¡rrad¡ac¡ón de m¡croondas durante 1 hora. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (100 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (40 ml). La fase orgán¡ca se separó, se secó con MgSO4 y se f¡ltró. El f¡ltrado se d¡luyó con MeOH (10 ml) y se añad¡ó S¡l¡aMetS-DMT (0,61 mmol/g, 0,984 mg, 0,6 mmol). La suspens¡ón resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante ~18 horas y a cont¡nuac¡ón se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un ace¡te de color amar¡llo/naranja. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía flash ut¡l¡zando un cartucho de síl¡ce de 24 g con un grad¡ente de un 2-10% de [NH3 2 M en MeOH]/DCM para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do de color amar¡llo pál¡do (312 mg, 68% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 0,97 m¡n; MS m/z 383,4 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,03 (dd, J=8,84, 6,32 Hz, 1H), 7,65 (dd, J=9,09, 2,53 Hz, 1H), 7,36-7,43 (m, 1H), 4,34 (tt, J=12,38, 3,28 Hz, 1H), 3,00 (s, 3H), 1,62 (dd, J=12,13, 3,03 Hz, 2H), 1,43 (t, J=12,38 Hz, 2H), 1,28 (s a., 1H), 1,20 (s, 6 H), 1,08 (s, 6H).
Paso 2: 5-(2-Cloro-4-(1H-p¡razol-1-¡l)fen¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na:
Se añad¡ó CS2 CO3 (128 mg, 0,392 mmol) a una soluc¡ón ag¡tada de 5-(2-cloro-4-fluorofen¡l)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-am¡na (50 mg, 0,131 mmol) y 1H-p¡razol (13 mg, 0,196 mmol) en DMF (1,3 ml). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 4 días, a cont¡nuac¡ón se calentó hasta 60 °C y se ag¡tó durante 18 horas más. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con DCM (10 ml), se f¡ltró a través de cel¡te y se el¡m¡nó el DCM al vacío para proporc¡onar el producto crudo como un líqu¡do de color marrón pál¡do. El mater¡al crudo se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va d¡r¡g¡da por UV en cond¡c¡ones ác¡das (ác¡do fórm¡co mod¡f¡cado), llevando a cabo la recolecc¡ón a 324 nm. Las fracc¡ones que contenían el producto se comb¡naron y se ¡ntrodujeron en un cartucho de SCX de 1 g (humedec¡do prev¡amente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a cont¡nuac¡ón se purgó con un 10% de DCM en [NH3 7 M en MeOH] (10 ml). El DCM/MeOH/NH3 se el¡m¡nó al vacío para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do vítreo transparente (37 mg, 66% de rend¡m¡ento). LC-MS: tR 0,97 m¡n; MS m/z 431,5 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,67 (d, J=2,53 Hz, 1H), 8,14 (dd, J=5,56, 3,03 Hz, 2H), 7,97-8,02 (m, 1H), 7,83 (d, J=1,52 Hz, 1H), 6,64 - 6,60 (m, 1H), 4,37 (tt, J=12,25, 3,16 Hz, 1H), 3,02 (s, 3H), 1,63 (dd, J=12,13, 3,03 Hz, 2H), 1,45 (t, J=12,13 Hz, 2H), 1,21 (s, 6H), 1,09 (s, 6H).
Empleando métodos s¡m¡lares a los descr¡tos para la preparac¡ón del Ejemplo de referencia 65, ut¡l¡zando los mater¡ales de part¡da adecuados, se prepararon los s¡gu¡entes compuestos:
Figure imgf000052_0001
Ejemplo de referencia 70: Síntesis de 2-(2-cloro-4-(1H-¡m¡dazol-1-il)feml)-5-((3aR,6aS)-5-metilhexah¡drop¡rrolo[3,4-c]p¡rrol-2(1H)-¡l)-1,3,4-t¡ad¡azol
Figure imgf000053_0001
Paso 1: 5-(2-Cloro-4-yodofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una mezcla agitada del ácido 2-cloro-4-yodobenzoico (2 g, 7,08 mmol) e hidrazinocarbotioamida (0,968 g, 10,62 mmol) se enfrió en atmósfera de nitrógeno en un baño de hielo. Se añadió POCb (1,98 ml, 21,24 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se calentó a 78 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo antes de desactivarla mediante la adición de agua con hielo (50 ml). El sólido/masa húmeda resultante se sonicó durante 1 hora para obtener una suspensión de agitación libre. Se dejó suspender este material a temperatura ambiente durante ~18 horas, a continuación se filtró al vacío y se lavó con agua para proporcionar el producto crudo como un sólido de color naranja/amarillo pálido. El sólido se suspendió de nuevo en NaHCO3(ac) saturado (50 ml), se suspendió a temperatura ambiente durante 2 horas, a continuación se recolectó mediante una filtración al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color amarillo pálido (2,05 g, 86% de rendimiento). LC-MS: tR 1,20 min; MS m/z 337,8 [M]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,01 (d, d=1,52 Hz, 1H), 7,76-7,82 (m, 2H), 7,50 (s, 2H).
Paso 2: 2-Bromo-5-(2-cloro-4-yodofenil)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió 5-(2-cloro-4-yodofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (2,05 g, 6,07 mmol) en porciones a una solución agitada de CuBr2 (1,628 g, 7,92 mmol) y f-BuNO2 (1,07 ml, 9,11 mmol) en MeCN (15 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (75 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml x2). Las fases orgánicas combinadas se concentraron al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido de color marrón pálido. El material crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 120 g con un gradiente de un 0-20% de EtOAc/heptano para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanquecino (1,795 g, 73% de rendimiento). MS m/z 402,6 [M+H]+ 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,15-8,19 (m, 1H), 7,91-7,97 (m, 2H).
Paso 3: 2-(2-Cloro-4-yodofenil)-5-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)-1,3,4-tiadiazol:
Una solución agitada de 2-bromo-5-(2-cloro-4-yodofenil)-1,3,4-tiadiazol (600 mg, 1,49 mmol) y (3aR,6aS)-2-metiloctahidropirrolo[3,4-c]pirrol (377 mg, 2,99 mmol) en Nm P (4 ml) se calentó a 120 °C durante ~18 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y a continuación se añadió NaHCO3(ac) saturado (30 ml). Se dejó suspender la suspensión resultante durante 1 hora antes de filtrarla al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón pálido, el cual se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. LC-MS: tR 1,06 min; MS m/z 446,8 [M]+ 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,03 (s, 1H), 7,77-7,86 (m, 2H), 3,71 (t, d=8,84 Hz, 2H), 3,36 (s a., 2H), 2,97 (s a., 2H), 2,40-2,54 (m, 4H), 2,22 (s, 3H).
Paso 4: 2-(2-Cloro-4-(1H-imidazol-1-il)fenil)-5-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió DMF (0,75 ml) a un matraz purgado con nitrógeno que contenía yoduro de cobre (I) (13 mg, 0,067 mmol), 2-(2-piridil)bencimidazol (13 mg, 0,067 mmol) y carbonato de cesio (273 mg, 0,839 mmol). La suspensión resultante se calentó a 60 °C durante 1 hora. Se añadió 1H-imidazol (23 mg, 0,336 mmol) y 2-(2-cloro-4-yodofenil)-5-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)-1,3,4-tiadiazol (150 mg, 0,336 mmol) y la mezcla se calentó a 90 °C durante ~18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (30 ml) y se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío para obtener un aceite verde. El material crudo se arrastró con MeOH (30 ml) y se añadió SiliaMetS-DMT (0,61 mmol/g, 1,098 g, 0,67 mmol). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas, a continuación se eliminó el SiliaMetS-DMT mediante una filtración al vacío y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite amarillo. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por la masa en condiciones ácidas (TFA modificado). Las fracciones que contenían el producto se combinaron, se introdujeron en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH) y el cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (22 mg, 17% de rendimiento). LC-MS: tR 0,52 min; MS m/z 387,0 [M+H]+ [Método D]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 8,44 (s, 1H), 8,15 (d, J=8,59 Hz, 1H), 8,06 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,83 (dd, J=8,59, 2,53 Hz, 1H), 7,15 (s, 1H), 3,72 (dd, J=10,36, 8,34 Hz, 2H), 3,37 (dd, J=10,36, 2,78 Hz, 2H), 3,00 (s a., 2H), 2,56 (s a., 4H), 2,26 (s, 3H).
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 70, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000054_0002
Ejemplo de referencia 73: Síntesis de 5-(2-metoxi-4-(1H-pirazol-5-il)feml)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Figure imgf000054_0001
Paso 1: 5-(4-Cloro-2-metoxifenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Se hizo burbujear nitrógeno a través de una solución agitada de 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina [Intermedio 4] (1 g, 3,00 mmol) y ácido (4-doro-2-metoxifenil)borónico (0,615 g, 3,30 mmol) en dioxano (20 ml). Se añadió a esta mezcla Pd(PPh3)4 (0,173 g, 0,150 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (0,954 g, 9,00 mmol) en agua (5 ml). La reacción se calentó a 80 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se diluyó con EtOAc (150 ml) y se lavó con agua (100 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite de color marrón/rojo oscuro que solidificó al dejarlo reposar. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 80 g con un gradiente de [NH3 2 M en MeOH]/DCM para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanquecino (1,051 mg, 89% de rendimiento). LC-MS: tR 1,04 min; MS m/z 395,2 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,09 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,32 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1H), 4,35 (tt, J=12,38, 3,54 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 1,60 (dd, J=11,87, 3,28 Hz, 2H), 1,41 (t, J=12,13 Hz, 2H), 1,27 (s, 1H), 1,21 (s, 6H), 1,08 (s, 6H).
Paso 2: 5-(2-Metoxi-4-(1H-pirazol-5-il)fenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
A una suspensión agitada del ácido (1H-pirazol-5-il)borónico (14 mg, 0,139 mmol) y 5-(4-cloro-2-metoxifenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (50 mg, 0,127 mmol) en dioxano (1 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (7 mg, 0,006 mmol) seguido de una solución de Na2 CO 3 (40 mg, 0,380 mmol) en agua (0,25 ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 120 °C con irradiación de microondas durante 30 minutos, a continuación de nuevo a 145 °C. Se añadió más catalizador y boronato, y la mezcla se calentó durante 30 minutos más con irradiación de microondas a una temperatura incrementada de 160 °C. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml), se lavó con NaHCO3(ac) saturado (10 ml) y la fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un residuo oleoso. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por la masa en condiciones básicas (NH4 OH modificado) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (12,5 mg, 23% de rendimiento). LC-MS: tR 0,81 min; MS m/z 427,3 [M+H]+ [Método A].
1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 12,99 (s a., 1H), 8,12 (d, J=8,08 Hz, 1H), 7,82 (s a., 1H), 7,60 (s, 1H), 7,54 (d, J=6,06 Hz, 1H), 6,84 (d, J=2,02 Hz, 1H), 4,31-4,41 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 2,99 (s, 3H), 1,61 (dd, J=12,13, 3,54 Hz, 2H), 1,42 (t, J=12,13 Hz, 2H), 1,27 (s a., 1H), 1,22 (s, 6 H), 1,09 (s, 6 H).
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 73, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000056_0001
Figure imgf000057_0002
Ejemplo de referencia 79: Síntesis de 2-(2-cloro-4-(1-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)feml)-5-((3aR,6aS)-5-met¡lhexah¡drop¡rrolo[3,4-c]p¡rrol-2(1H)-N)-1,3,4-t¡ad¡azol:
Figure imgf000057_0001
Paso 1: 5-(4-Bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
A una mezcla enfriada con hielo del ácido 4-bromo-2-clorobenzoico (2 g, 8,49 mmol) e hidrazinocarbotioamida (1,161 g, 12,74 mmol) se añadió oxicloruro de fósforo (2,375 ml, 25,5 mmol) lentamente y la reacción se calentó a 78 °C durante 3 horas. Después de enfriar hasta 0 °C, se añadió agua con hielo y la mezcla se agitó enérgicamente durante 1 hora. El precipitado resultante se filtró, se lavó con agua y a continuación se suspendió de nuevo en NaHCO3(ac) saturado y agua (1:1), y se agitó durante 1 hora. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título, el cual se utilizó sin purificación adicional (2 g, 81% de rendimiento). MS m/z 291,9 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,80-8,09 (m, 2H), 7,68 (dd, J=2,02, 8,59 Hz, 1H), 7,55 (s a, 2H).
Paso 2: 5-(2-Cloro-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
A una solución agitada de 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (197 mg, 0,946 mmol) y 5-(4-bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (250 mg, 0,860 mmol) en dioxano (8 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (50 mg, 0,043 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (274 mg, 2,58 mmol) en agua (2 ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 80 °C durante 1 hora con irradiación de microondas y a continuación durante 2,5 horas más a una temperatura incrementada de 120 °C. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (40 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (40 ml). Se añadieron unos ml de NaCl(ac) saturado para deshacer la ligera emulsión resultante y la fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido amarillo. El material crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 24 g, con un gradiente de MeOH/DCM, para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color amarillo pálido (118 mg, 47% de rendimiento). LC-MS: tR 0,83 min; MS m/z 292,0 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,31 (s, 1H), 7,97-8,03 (m, 2H), 7,83 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,65 (dd, J=8,34, 1,77 Hz, 1H), 7,41 (s, 2H), 3,87 (s, 3H).
Paso 3: 2-Bromo-5-(2-cloro-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió 5-(2-cloro-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (118 mg, 0,404 mmol), en porciones, a una solución agitada de CuBr2 (108 mg, 0,485 mmol) y f-BuNO2 (0,071 ml, 0,607 mmol) en MeCN (1 ml) en atmósfera de nitrógeno. Al finalizar la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas, a continuación se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (20 ml) y se añadió EtOAc (10 ml). La suspensión bifásica resultante se filtró al vacío, se lavó con agua (10 ml) y a continuación EtOAc (10 ml). El filtrado se separó y la fase orgánica se secó con MgSO4, se filtró y se combinó de nuevo con el sólido procedente de la primera filtración. El disolvente se eliminó al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido de color marrón claro. El material crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 12 g con un gradiente de EtOAc/heptano para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (70,5 g, 49% de rendimiento). MS m/z 356,8 [M+H]+
Paso 4: 2-(2-Cloro-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-5-((3aR,6aS)-5-metilhexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)-1,3,4-tiadiazol:
Una suspensión agitada de 2-bromo-5-(2-cloro-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol (70 mg, 0,197 mmol) y (3aR,6aS)-2-metiloctahidropirrolo[3,4-c]pirrol (75 mg, 0,590 mmol) en Nm P (0,5 ml) se calentó hasta 120 °C y la solución resultante se agitó durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (20 ml). La fase orgánica se separó y la fase acuosa se volvió a extraer con DCM (20 ml). Las fases orgánicas combinadas se concentraron al vacío para proporcionar el producto crudo como un residuo oleoso de color marrón oscuro. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por la masa en condiciones ácidas (TFA modificado) y las fracciones que contenían el producto se introdujeron en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (15 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón claro (10 mg, 13% de rendimiento). LC-MS: tR 0,79 min; MS m/z 401,4 [M+H]+ [Método D]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,32 (s, 1H), 7,99-8,03 (m, 2H), 7,84 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,65-7,69 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,70 (dd, J=10,61, 8,08 Hz, 2H), 3,36 (dd, J=10,61, 3,03 Hz, 2H), 2,99 (s a., 2H), 2,55 (s a., 4H), 2,25 (s, 3H). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8,21 (d, J=8,08 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,57 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,46 (dd, J=8,34, 1,77 Hz, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,79 (dd, J=9,85, 7,83 Hz, 2H), 3,53 (d, J=11,12 Hz, 2H), 3,12 (s a., 2H), 2,76 (s a., 2H), 2,58 (d, J=8,08 Hz, 2H), 2,41 (s a., 3H).
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 79, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000059_0001
Figure imgf000060_0002
Ejemplo de referencia 85: Síntesis de 2-(2-metox¡-4-(1-metil-1H-p¡razol-4-¡l)feml)-5-(2,6-d¡azaesp¡ro[3.5]nonan-2-il)-1,3,4-tiadiazol:
Figure imgf000060_0001
Paso 1: 5-(4-Yodo-2-metoxifenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
A una mezcla enfriada con hielo del ácido 4-yodo-2-metoxibenzoico (6,178 g, 22,22 mmol) e hidrazinocarbotioamida (2,43 g, 26,7 mmol) se añadió oxicloruro de fósforo (6,21 ml, 66,7 mmol) lentamente. La mezcla se calentó a 78 °C durante toda la noche. Después de enfriar hasta 0 °C, se añadió agua con hielo y la mezcla se agitó enérgicamente durante 1 hora. El precipitado resultante se filtró, se lavó con agua y se suspendió de nuevo en NaHCO3(ac) saturado y agua (1:1) durante 1 hora. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar el compuesto crudo. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash (M eO H/CH 2 Ch) para proporcionar el compuesto del título (1,2 g, 16% de rendimiento). MS m/z 334,0 [M+H]+.
Paso 2: 5-(2-Metoxi-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
A una suspensión agitada de 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (137 mg, 0,660 mmol) y 5-(4-yodo-2-metoxifenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (200 mg, 0,6 mmol) en dioxano (4 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (35 mg, 0,03 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (191 mg, 1,801 mmol) en agua (1 ml). La reacción se purgó con nitrógeno y a continuación se calentó a 80 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se dio con MeOH (20 ml), se filtró a través de celite y se lavó con DCM (20 ml). El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un residuo oleoso de color naranja. El producto crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 24 g, con un gradiente de MeOH/DCM, para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color amarillo pálido (107 mg, 62% de rendimiento). LC-MS: tR 0,81 min; MS m/z 288,1 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,27 (s, 1H), 8,05 (d, J=8,08 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,36 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,28 (dd, J=8,08, 1,52 Hz, 1H), 7,13 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,88 (s, 3H).
Paso 3: 2-Bromo-5-(2-metoxi-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió 5-(2-metoxi-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (205 mg, 0,713 mmol), en porciones, a una solución agitada de CuBr2 (191 mg, 0,865 mmol) y f-BuNO2 (0,126 ml, 1,07 mmol) en MeCN (16 ml) en atmósfera de nitrógeno. Al finalizar la adición, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas, a continuación se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (25 ml), se diluyó con agua (25 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml x 2) y a continuación con DCM (100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4, se filtraron y se concentró el filtrado al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido de color naranja/marrón claro. El material crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 12 g, con un gradiente de MeOH/DCM, para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color amarillo claro (80 mg, 32% de rendimiento). LC-MS: tR 1,19 min; MS m/z 353,1 [M+2]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,36 (s, 1H), 8,25 (d, J=8,59 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,48 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,39 (dd, J=8,08, 1,52 Hz, 1H), 4,09 (s, 3H), 3,89 (s, 3H).
Paso 4: 2-(2-Metoxi-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-5-(2,6-diazaespiro[3.5]nonan-2-il)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió DIPEA (116 μl, 0,666 mmol) a una suspensión agitada de 2-bromo-5-(2-metoxi-4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol (78 mg, 0,222 mmol) y 2,6-diazaespiro[3.5]nonan-6-carboxilato de fed-butilo (sal del ácido acético, 127 mg, 0,444 mmol) en NMP (444 |jl) y la mezcla se calentó a 120 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml), se lavó con NaHCO3(ac) saturado (10 ml) y se separó la fase orgánica. Se añadió TFA (342 μl, 4,44 mmol) y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadió 1 ml más de TFA y la mezcla de reacción se calentó hasta 35 °C y se agitó durante 48 horas. La mezcla de reacción se introdujo en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH) y el cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH 3 se eliminó al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite marrón. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones ácidas (TFA modificado) y las fracciones que contenían el producto se introdujeron en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido espumoso de color blanco (40,5 mg, 46% de rendimiento). Lc -MS: tR 0,83 min; MS m/z 397,1 [M+H]+ [Método D], 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,27 (s, 1H), 8,06 (d, J=8,08 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,37 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,29 (dd, J=8,08, 1,52 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,81 (d, J=7,58 Hz, 2H), 3,74 (d, J=7,58 Hz, 2H), 2,82 (s, 2H), 2,60 (t, J=5,05 Hz, 2H), 1,73 (t, J=5,56 Hz, 2H), 1,41 (quin, J=5,56 Hz, 2H).
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 85, utilizando los materiales de partida adecuados, se preparó el siguiente compuesto:
Figure imgf000062_0002
Ejemplo de referencia 87: Síntesis de 2-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidm-4-il)ammo)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-5-(1H-pirazol4-il)fenol
Figure imgf000062_0001
A una solución de 5-(2-metoxi-4-(1 H-pirazol-1 -il)fenil)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Ejemplo de referencia 1) (30 mg, 0,070 mmol) en DCM (1,5 ml) se añadió BBrs (solución 1 M en heptano, 0,352 ml, 0,352 mmol). La suspensión de color amarillo intenso resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de MeOH (5 ml) y la solución resultante se introdujo en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (15 ml). El disolvente se eliminó al vacío. El material crudo resultante se sonicó en MeOH (2 ml) y la suspensión resultante se filtró al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color amarillo pálido (14,9 mg, 51,4% de rendimiento). LC-m S: tR 0,55 min; Ms m/z 413,3 [M+H]+ [Método D]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 8,47 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,99 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,73-7,78 (m, 1H), 7,47 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,59 Hz, 1H), 6,53-6,58 (m, 1H), 4,33 (t, J=12,13 Hz, 1H), 2,99 (s, 3H), 1,58­ 1,69 (m, 2H), 1,47 (t, J=12,13 Hz, 2H), 1,23 (s, 6H), 1,12 (s, 6 H).
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 87, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000063_0001
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 1 y el Ejemplo de referencia 87, utilizando los materiales de partida adecuados, se preparó el siguiente compuesto:
Figure imgf000064_0001
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 25 y el Ejemplo de referencia 87, utilizando los materiales de partida adecuados, se preparó el siguiente compuesto:
Figure imgf000064_0002
Empleando métodos similares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 85 y el Ejemplo de referencia 87, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000065_0001
Empleando métodos sim ilares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 61 y el Ejemplo de referencia 87, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000066_0002
Ejemplo de referencia 98: Síntesis de 2-(2-metox¡-4-(1H-p¡razoM-il)feml)-5-((2,2,6,6-tetrametilpiper¡dm-4-il)metil)-1,3,4-tiadiazol:
Figure imgf000066_0001
Paso 1: 5-((2,2,6,6-Tetrametilpiperidin-4-il)metil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una mezcla agitada del ácido 2-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)acético (410 mg, 2,057 mmol) e hidrazinocarbotioamida (281 mg, 3,09 mmol) se enfrió en atmósfera de nitrógeno en un baño de hielo. Se añadió P O C b (0,575 ml, 6 ,17 mmol) gota a gota y la mezcla se calentó a 78 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo y se desactivó mediante la adición de agua con hielo (20 ml). La mezcla resultante se sonicó durante 20 minutos y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas. La solución resultante se basificó mediante la adición de NaOH (pellets añadidos en porciones durante -15 minutos). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora antes de filtrarla al vacío y lavarla con agua para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón pálido (118 mg, 22% de rendimiento). LC MS: tR 0,44 min; MS m/z 255,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 6,98 (s, 2H), 2,66 (d, J=7,07 Hz, 2H), 2,03 (s a., 1H), 1,49 (d, J=10,61 Hz, 2H), 1,08 (s, 6H), 0,99 (s a., 6 H), 0,78 (t, J=12,13 Hz, 2H).
Paso 2: 2-Bromo-5-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)metil)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió 5-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)metil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (117 mg, 0,46 mmol) en porciones a una solución agitada de CuBr2 (123 mg, 0,552 mmol) y f-BuNO2 (0,081 ml, 0,69 mmol) en MeCN (1 ml) en atmósfera de nitrógeno. Al finalizar la adición, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas y a continuación se añadieron 1,5 eq más de f-BuNO2 (0,081 ml, 0,69 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos y se añadieron 1,2 eq más de CuBr2 (123 mg, 0,552 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas más, a continuación se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (10 ml) y se extrajo con DCM (20 ml). La fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite marrón. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones ácidas (ácido fórmico modificado) y las fracciones que contenían el producto se introdujeron en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un aceite marrón (35 mg, 23% de rendimiento). LC-MS: tR 0,66 min; Ms m/z 320,2 [M+2]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 2,99 (d, J=7,07 Hz, 2H), 2,11-2,22 (m, 1H), 1,44-1,52 (m, 2H), 1,07 (s, 6 H), 0,98 (s, 6H), 0,82 (t, J=12,38 Hz, 2H).
Paso 3: 2-(2-Metoxi-4-(1H-pirazol-1-il)fenil)-5-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)metil)-1,3,4-tiadiazol:
A una suspensión agitada de 1-(3-metoxi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-1H-pirazol [Intermedio 4] (39 mg, 0,128 mmol) y 2-bromo-5-((2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)metil)-1,3,4-tiadiazol (34 mg, 0,107 mmol) en dioxano (1 ml) se añadió Pd(PPh3)4 (6 mg, 0,005 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (34 mg, 0,32 mmol) en agua (0,25 ml). La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 120 °C durante 1 hora con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (10 ml). La fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un residuo oleoso de color marrón. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones ácidas (ácido fórmico modificado) y las fracciones que contenían el producto se introdujeron en un cartucho de SCX de 1 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con NH3 7 M en MeOH (10 ml). El MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido ligeramente blanquecino (28,6 mg, 65% de rendimiento). LC-MS: tR 0,88 min; MS m/z 412,5 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,70 (d, J=2,53 Hz, 1H), 8,39 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,83 (d, J=1,01 Hz, 1H), 7,73 (d, J=1,52 Hz, 1H), 7,67 (dd, J=8,59, 2,02 Hz, 1H), 6,64 - 6,61 (m, 1H), 4,11 (s, 3H), 3,01 (d, J=6,57 Hz, 2H), 2,17- 2,28 (m, 1H), 1,53 (dd, J=12,63, 2,53 Hz, 2H), 1,09 (s, 6 H), 1,00 (s, 6H), 0,86 (t, J=12,38 Hz, 2H).
Ejemplo de referencia 99: Síntesis de 2-(2,3-difluoro-4-(1H-p¡razol-4-il)feml)-5-(2,7-diazaesp¡ro[3.5]nonan-2-il)-1,3,4-tiadiazol:
Figure imgf000067_0001
Paso 1: 2-(5-Bromo-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de fed-butilo:
Una suspensión agitada de 2,5-dibromo-1,3,4-tiadiazol (245 mg, 1,004 mmol), 2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de fed-butilo (290 mg, 1,105 mmol) y DIPEA (702 μl, 1,02 mmol) en dioxano (2,5 ml) se calentó a 120 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml), se extrajo con DCM (20 ml) y la fase orgánica se concentró sobre gel de sílice. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 24 g con un gradiente de EtOAc/heptano para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (343 mg, 88% de rendimiento). LC-MS: tR 1,25 min; MS m/z 391,2 [M+2]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 53,87 (s, 4H), 3,34-3,43 (m, 4H), 1,73-1,85 (m, 4H), 1,46 (s, 9H).
Paso 2: 2-(5-(4-(Benciloxi)-2,3-difluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tertbutilo:
Se hizo burbujear nitrógeno a través de una solución del ácido (4-(benciloxi)-2,3-difluorofenil)borónico (356 mg, 1,349 mmol) y 2-(5-brom o-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tert-butilo (343mg, 0,881 mmol) en dioxano (8 ml). Se añadió a esta solución Pd(PPh3)4 (52 mg, 0,045 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (286 mg, 2 ,7 mmol) en agua (2 ml). La mezcla de reacción se selló y se calentó a 100 °C durante 1 hora con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (150 ml) y se lavó con agua (75 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido de color marrón/naranja claro. El material crudo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 40 g con un gradiente de EtOAc/heptano para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (169 mg, 35% de rendimiento). LC-MS: tR 1,62 min; MS m/z 529,4 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 7,75 -7,82 (m, 1H), 7,46-7,51 (m, 2H), 7,36 -7,45 (m, 3H), 7,24 -7,32 (m, 1H), 5,30 (s, 2H), 3,89 (s, 4H), 3,24-3,31 (m, 4H), 1,66-1,78 (m, 4H), 1,40 (s, 9H).
Paso 3: 2-(5-(2,3-Difluoro-4-hidroxifenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tert-butilo:
Una suspensión de 2-(5-(4-(benciloxi)-2,3-difluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tert-butilo (169 mg, 0,32 mmol) en una mezcla 1:3 de MeOH:EtOAc (12 ml) se añadió a un matraz purgado con nitrógeno que contenía Pd/C al 10% (17 mg). La mezcla de reacción se sometió a una atmósfera de hidrógeno (50 psi) en un agitador Parr durante 18 horas. Se añadió más Pd/C al 10% (169 mg) y la reacción se sometió de nuevo a una hidrogenación a 50 psi utilizando un agitador Parr durante 5 días más. La mezcla de reacción se sometió a una atmósfera inerte (nitrógeno), se diluyó con un 10% de MeOH/DCM (50 ml), se filtró a través de celite y se lavó con DCM. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar un sólido de color marrón pálido, el cual se disolvió de nuevo en una mezcla 1:1 de MeOH:DCM (8 ml) y se sometió de nuevo a una hidrogenación durante 4 días a 50 psi utilizando un agitador Parr y Pd/C al 10% (169 mg) como catalizador. La mezcla de reacción se diluyó con un 10% de MeOH/DCM (50 ml), se filtró a través de celite y se lavó con DCM. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido ligeramente blanquecino. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 12 g, con un gradiente de MeOH/DCM, para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanquecino (47 mg, 34% de rendimiento). LC-MS: tR 1,27 min; MS m/z 439,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 11,00 (s, 1H), 7,65 (td, J = 8,5, 2,2 Hz, 1H), 6,92 (td, J = 8,5, 1,9 Hz, 1 H), 3,87 (s, 4H), 3,20-3,31 (m, 4H), 1,67-1,78 (m, 4H), 1,40 (s, 9H).
Paso 4: 2-(5-(2,3-Difluoro-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tert-butilo:
Una solución agitada de 2-(5-(2,3-difluoro-4-hidroxifenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tert-butilo (59 mg, 1,35 mmol) y TE A (47 μl, 0,366 mmol) en DCM (1,3 ml) en atmósfera de nitrógeno se enfrió en un baño de hielo. Se añadió a esta solución 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (51 mg, 0,141 mmol). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura del baño de hielo durante 10 minutos y a continuación se calentó hasta temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadieron 0,5 eq más de 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (24 mg, 0,067 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas más. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 ml) y se lavó con NaHCO3(ac) saturado (10 ml). La fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido ligeramente blanquecino. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 12 g, con un gradiente de EtOAc/heptano, para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (68 mg, 89% de rendimiento). LC-MS: tR 1,63 min; MS m/z 571,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 8,12 (ddd, J = 9,4, 7,1, 2,5 Hz, 1 H), 7 ,25 - 7,21 (m, 1H), 3,97 (s, 4H), 3,36-3,47 (m, 4H), 1,77-1,89 (m, 4H), 1,47 (s, 9H).
Paso 5: 2-(5-(2,3-Difluoro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tertbutilo:
Una mezcla de 2-(5-(2,3-difluoro-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de tert-butilo (68 mg, 0,119 mmol) y 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (35 mg, 0,179 mmol) en dioxano (1 ml) se agitó en atmósfera de nitrógeno. Se añadió a esta suspensión Pd(PPh3)4 (7 mg, 0,006 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (38 mg, 0,358 mmol) en agua (0,25 ml). La mezcla de reacción se selló y se calentó a 120 °C durante 1 hora con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con DCM (20 ml). La fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido blanquecino. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa dirigida por UV en condiciones básicas (NH4 OH modificado) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (11 mg, 19% de rendimiento). MS m/z 489,1 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 13,30 (s, 1H), 8,18 (s, 2H), 7,85 (ddd, J = 8,6, 6,7, 1,8 Hz, 1 H), 7 ,70 (ddd, J = 8,7, 7,0, 1,8 Hz, 1H), 3,91 (s, 4H), 3,28-3,31 (m, 4H), 1,74 (t, J = 5,6 Hz, 4H), 1,40 (s, 9H).
Paso 6: Sal de tipo clorhidrato de 2-(2,3-difluoro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-5-(2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2-il)-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió HCl (solución 4 M en dioxano, 113 pl, 0,45 mmol) a una suspensión agitada de 2-(5-(2,3-difluoro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de ferf-butilo (11 mg, 0,023 mmol) en dioxano (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas, a continuación se diluyó con una mezcla aproximadamente 1:1 de MeOH:DCM (10 ml) y se añadió una gota de agua. La suspensión resultante se solubilizó mediante la adición de DMSO (5 ml) y la solución se introdujo en un cartucho de S C X de 0,5 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (10 ml) y a continuación se purgó con un 10% de DCM en [NH3 7 M en MeOH] (10 ml). El DCM/MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanquecino (7,4 mg, 85% de rendimiento). LC-MS: tR 0,66 min; MS m/z 389,2 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 13,30 (s, 1H), 8,18 (s, 2H), 7,84 (ddd, J = 8,6, 6,8, 1,7 Hz, 1H), 7 ,70 (ddd, J = 8,6, 7,1, 1,7 Hz, 1H), 3,87 (s, 4H), 2,65 (t, J = 5,0 Hz, 4H), 1,70 (t, J = 5,4 Hz, 4H).
Ejemplo de referencia 100: Síntesis de 2-(5-(2,7-D¡azaesp¡ro[3.5]nonan-2-il)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)-3-fluoro-5-(1H-pirazol-4-il)fenol:
Figure imgf000069_0001
Paso 1: 5-(4-Bromo-2,6-difluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una mezcla agitada del ácido 4-bromo-2,6-difluorobenzoico (5 g, 21,1 mmol) e hidrazinocarbotioamida (2,88 g, 31,6 mmol) se enfrió en atmósfera de nitrógeno en un baño de hielo. Se añadió POCl3 (5,9 ml, 63,3 mmol) gota a gota y la reacción se agitó a la temperatura del baño de hielo durante 15 minutos, a continuación se calentó a 78 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo y a continuación se desactivó mediante la adición de agua con hielo (150 ml). El sólido resultante se sonicó durante 30 minutos para obtener una suspensión de agitación libre, la cual se dejó suspender a temperatura ambiente durante 72 horas. El sólido se recolectó mediante una filtración al vacío, se lavó con agua y se suspendió de nuevo en N aHCO 3 (ac) saturado (150 ml). Esta suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas, a continuación el sólido se recolectó mediante una filtración al vacío, se lavó con agua y se secó en un horno al vacío durante 24 horas para obtener el compuesto del título (5,174 g, 84% de rendimiento), el cual se utilizó en el siguiente paso sin purificación adicional. LC-MS: tR 0,99 min; MS m/z 294,2 [M+2]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 7,68 (d, J=8,08 Hz, 2 H), 7 ,57 (s, 2 H).
Paso 2: 5-(2-(Benciloxi)-4-bromo-6-fluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina:
Una suspensión agitada de NaH (dispersión al 60% en aceite mineral, 151 mg, 3 ,77 mmol) en TH F (10 ml) se enfrió en atmósfera de nitrógeno en un baño de hielo. Se añadió a esta suspensión una solución de alcohol bencílico (0,372 ml, 3,59 mmol) en TH F (5 ml) gota a gota. Al finalizar la adición, la suspensión resultante se agitó a la temperatura del baño de hielo durante 15 minutos, a continuación a temperatura ambiente durante 10 minutos, antes de añadirla lentamente a una suspensión agitada enfriada en un baño de hielo de 5-(4-bromo-2,6-difluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (1 g, 3,42 mmol) en TH F (20 ml). La suspensión de color marrón/amarillo resultante se agitó a la temperatura del baño de hielo durante 15 minutos, a temperatura ambiente durante 1 hora y a continuación se calentó a 50 °C durante 18 horas. La reacción se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (30 ml), se diluyó con agua (30 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml). La fase orgánica se separó, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró sobre gel de sílice y el material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 80 g, con un gradiente de EtOAc/heptano, para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color amarillo pálido (488 mg, 37% de rendimiento). LC-MS: tR 1,19 min; MS m/z 282,0 M+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 7 ,27 -7,47 (m, 9H), 5,28 (s, 2H).
Paso 3: 2-(2-(Benciloxi)-4-bromo-6-fluorofenil)-5-bromo-1,3,4-tiadiazol:
Se añadió 5-(2-(benciloxi)-4-bromo-6-fluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (487 mg, 1,281 mmol) en porciones a una solución agitada de CuBr2 (343 mg, 1,537 mmol) y f-BuNO2 (226 μl, 1,921 mmol) en MeCN (4,2 ml) en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La reacción se desactivó mediante la adición de agua (40 ml), a continuación se añadió NH4OH(ac) al 28% (5 ml) y la suspensión resultante se extrajo con DCM (50 ml). La fase orgánica se separó y se concentró sobre gel de sílice. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 40 g, con un gradiente de EtOAc/heptano, para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (253 mg, 44% de rendimiento). LC-MS: tR 1,53 min; MS m/z 445,0 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 57,31-7,56 (m, 7H), 5,38 (s, 2H).
Paso 4: 2-(5-(2-(Benciloxi)-4-bromo-6-fluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de ferf-butilo:
A una suspensión agitada de 2-(2-(benciloxi)-4-bromo-6-fluorofenil)-5-bromo-1,3,4-tiadiazol (252 mg, 0,567 mmol) y clorhidrato de 2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de ferf-butilo (179 mg, 0,681 mmol) en dioxano (2,8 ml) se añadió TEA (237 μl, 1,702 mmol) y la mezcla se calentó a 120 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se diluyó con agua (20 ml) y se extrajo con DCM (20 ml). La fase orgánica se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un residuo oleoso de color amarillo. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 40 g, con un gradiente de EtOAc/heptano, para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (150 mg, 45% de rendimiento). LC-MS: tR 1,62 min; MS m/z 591,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 57,29-7,47 (m, 7H), 5,31 (s, 2H), 3,83 (s, 4H), 3,17-3,30 (m, 4H), 1,65-1,77 (m, 4H), 1,40 (s, 9H).
Paso 5: 2-(5-(2-(Benciloxi)-6-fluoro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de ferf-butilo:
Una mezcla de 2-(5-(2-(benciloxi)-4-bromo-6-fluorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de ferf-butilo (150 mg, 0,254 mmol) y 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-¡l)-1H-p¡razol (74 mg, 0,382 mmol) en dioxano (2 ml) se agitó en atmósfera de nitrógeno. Se añadió a esta suspensión Pd(PPh3)4 (15 mg, 0,013 mmol) seguido de una solución de Na2CO3 (81 mg, 0,763 mmol) en agua (0,5 ml). La mezcla de reacción se selló y se calentó a 120 °C durante 1 hora con irradiación de microondas. Se añadieron 1,5 eq más de 4-(4,4,5,5-tetrametil-I , 3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (74 mg, 0,382 mmol) y la reacción se calentó durante una hora más a 120 °C con irradiación de microondas. Se añadieron 1,5 eq más de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (74 mg, 0,382 mmol) y a continuación 0,05 eq más de Pd(PPh3 )4 (15 mg, 0,013 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 1 hora a 120 °C con irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (15 ml) y se extrajo con DCM (20 ml). La fase orgánica se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un aceite de color marrón pálido. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 24 g, con un gradiente de MeOH/DCM, para proporcionar un aceite de color marrón pálido. El aceite se purificó utilizando 24 g de sílice con un gradiente de EtOAc/heptano para proporcionar el compuesto del título como un sólido vítreo transparente (86 mg, 58% de rendimiento). m S m/z 577,2 [M+H]+, 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 13,10 (s, 1H), 8,39 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,47-7,57 (m, 2H), 7,33-7,44 (m, 4H), 7,28 (dd, J = I I , 6, 1,5 Hz, 1H), 5,35 (s, 2H), 3,82 (s, 4H), 3,18-3,32 (m, 4H), 1,63-1,77 (m, 4H), 1,40 (s, 9H).
Paso 6: 2-(5-(2-Fluoro-6-hidroxi-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de ferf-butilo:
Una solución de 2-(5-(2-(benciloxi)-6-fluoro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de ferf-butilo (86 mg, 0,149 mmol) en una mezcla 1:1 de MeOH:DCM (3 ml) se añadió a un matraz purgado con nitrógeno que contenía Pd/C al 10% (8,6 mg). La mezcla de reacción se sometió a una atmósfera de hidrógeno (globo) y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno y se añadieron 8,6 mg más de Pd/C al 10%. La reacción se diluyó con MeOH:DCM 1:1 (3 ml), se sometió de nuevo a una atmósfera de hidrógeno (globo) y se agitó a temperatura ambiente durante 5 días más. La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se diluyó con un 10% de MeOH en DCM (50 ml) y se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar un sólido blanquecino/marrón pálido. El sólido se disolvió de nuevo en un 25% de MeOH en DCM (10 ml) y se añadió a un matraz con atmósfera de nitrógeno que contenía Pd/C al 10% (8,6 mg). La mezcla de reacción se sometió a una atmósfera de hidrógeno (globo) y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con un 10% de MeOH en dCm (50 ml) y se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía flash utilizando un cartucho de sílice de 10 g, con un gradiente de MeOH/DCM y llevando a cabo la recolección según la masa, para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón pálido (54 mg, 74% de rendimiento). LC-MS: tR 1,33 min; MS m/z 487,3 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 513,09 (s, 1H), 11,92 (s, 1H), 8,36 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 12,6, 1,6 Hz, 1H), 7,14-7,19 (m, 1H), 3,92 (s, 4H), 3,28-3,31 (m, 4H), 1,69-1,79 (m, 4H), 1,40 (s, 9H).
Paso 7: 2-(5-(2,7-Diazaespiro[3.5]nonan-2-il)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-3-fluoro-5-(1H-pirazol-4-il)fenol:
Se añadió HCl (solución 4 M en dioxano, 545 pl, 2,179 mmol) a una suspensión agitada de 2-(5-(2,3-difluoro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-7-carboxilato de fed-butilo (53 mg, 0,109 mmol) en dioxano (4 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, a continuación se diluyó con dioxano (2 ml), MeOH (5 ml), DMSO (5 ml) y una pequeña cantidad de agua, a contrnuadón se introdujo en un cartucho de S C X de 2 g (humedecido previamente con MeOH). El cartucho se lavó con MeOH (15 ml) y a continuación se purgó con un 10% de DCM en [NH3 7 M en MeOH] (20 ml). El DCM/MeOH/NH3 se eliminó al vacío para proporcionar el producto crudo como un sólido marrón. El material crudo se calentó en MeOH (5 ml) y la suspensión resultante se enfrió hasta temperatura ambiente, a continuación se filtró al vacío y se lavó con MeOH para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color marrón pálido (23 mg, 55% de rendimiento). LC-MS: tR 0,68 min; MS m/z 387,2 [M+H]+ [Método A]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 13,07 (s, 1H), 8,17 (s, 2H), 7 ,15 -7,05 (m, 2H), 3,87 (s, 4H), 2,70 (t, J = 5,1 Hz, 4H), 1,73 (t, J = 5,3 Hz, 4H).
Ejemplo 101: Síntesis de 4-metoxM-met¡l-3-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡dm-4-¡l)ammo)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)qumolm-2(1H)-ona:
Figure imgf000071_0001
Paso 1: 3-Bromo-4-metoxi-1-metilquinolin-2(1H)-ona
A una solución de 4-metoxi-1-metilquinolin-2(1H)-ona (2 g, 10,57 mmol) en TH F (5 ml) a 0 °C en atmósfera de N2 se añadió N-bromosuccinimida (2,26 g, 12,68 mmol) en porciones durante un periodo de 1 hora. La suspensión se agitó a 0 °C durante 1 hora y a continuación a temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el disolvente al vacío y se añadió CH 2 Cl2 para disolver de nuevo el residuo. La solución se lavó dos veces con una solución saturada fría de NaHCO3 y con H2 O fría, a continuación se secó con MgSO4 anhidro. Se eliminó el disolvente al vacío y el residuo sólido resultante se lavó disgregándolo varias veces con Et2 O. El sólido resultante se secó al vacío para proporcionar 3-bromo-4-metoxi-1-metilquinolin-2(1H)-ona (2,7 g, MS: 269,9 [M+H+].)
Paso 2: Ácido (4-metoxi-1-metil-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)borónico
A una solución de 3-bromo-4-metoxi-1-metilquinolin-2(1H)-ona (2,7 g, 10,07 mmol) en TH F (5 ml) se añadió nbutillitio (2,5 M en hexano, 4,03 ml) en atmósfera de nitrógeno a - 78 °C y la mezcla de reacción se mantuvo a esta temperatura durante 1 h. Se añadió una solución enfriada de borato de trimetilo (1,35 ml, 12,08 mmol) a -78 °C y la mezcla de reacción se mantuvo a esta temperatura durante 2 h. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante toda la noche. La mezcla de reacción se diluyó con HCl 1 M y precipitó un sólido blanco en la solución. El precipitado se filtró, se lavó con agua y EtOAc, y a continuación se secó con un vacío elevado para proporcionar el ácido (4-metoxi-1-metil-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)borónico (1,5 g, MS: 234,1 [M+H+].)
Paso 3: 4-Metoxi-1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona
Una mezcla de reacción desgasificada del ácido (4-metoxi-1-metil-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)borónico (500 mg, 2,15 mmol), 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (858 mg, 2,57 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (248 mg, 0,215 mmol) y Na2CO3 (682 mg, 6,44 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) y agua (1 ml) se calentó mediante irradiación de microondas a 100 °C durante 1 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite, se lavó con MeOH y a continuación se concentró el filtrado. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (2% - 10% de NH3 2 M en MeOH/DCM) para obtener 4-metoxi-1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona (240 mg, MS: 442,1 [M+H+]). (4 mg, MS: 442,0 [M+H+], LCM S tR = 1,25 min (LCM S Método D); 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,55 (s, 1 H), 8,14 (dd, J=8,08, 1,52 Hz, 1H), 7,72-7,81 (m, 1H), 7,61-7,69 (m, 1H), 7 ,33-7,45 (m, 1H), 4,61 (s a., 1H), 3,94 (s, 3H), 3 ,78 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 1,95 (d, J= 12 ,13 Hz, 2H), 1,79 (s a., 2H), 1,50 (s, 6H), 1,39 (s a., 6H).
Ejemplo 102: Síntesis de 4-h¡droxM-met¡l-3-(5-(met¡l(2,2,6,6-tetramet¡lp¡pendm-4-¡l)ammo)-1,3,4-t¡ad¡azol-2-¡l)qumolm-2(1H)-ona
Figure imgf000072_0001
Empleando los métodos del Ejemplo de referencia 15, el Ejemplo 101 se trató con PhSH para proporcionar 5-(1H-imidazol-1-il)-2-(6-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)piridazin-3-il)fenol como un polvo de color amarillo pálido (2 mg, MS: 428,2 [M+H+], LCM S tR = 0,57 min (LCM S Método D); 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,22 (d, J=8,08 Hz, 1H), 7,68 (t, J=8,08 Hz, 1H), 7 ,53 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7,31 (t, J = 7 ,33 Hz, 1H), 4,38 (s a., 1H), 3,72 (s, 3H), 3,07 (s, 3H), 1,80 (dd, J=12,63, 3,03 Hz, 2H), 1,52-1,65 (m, 2H) 1,37 (s, 6H) 1,23-1,29 (m, 6H).
Ejemplo 103: Síntesis de 3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpipeNdm-4-N)ammo)-1,3,4-tiadiazol-2-il)qumolm-2(1H)-ona
Figure imgf000072_0002
Paso 1: Ácido (2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)borónico
En un vial para microondas, se añadió 3-bromo-2-hidroxiquinolina (50 mg, 0,223 mmol), bis(pinacolato)diboro (113 mg, 0,446 mmol), acetato de potasio (66 mg, 0,669 mmol), PdCh(dppf). C H 2 O 2 (18,22 mg, 0,022 mmol) y dppf (12 ,37 mg, 0.022 mmol), y a continuación se añadió 1,4-dioxano (6 ml). La mezcla de reacción se purgó con N2 y se agitó en atmósfera de N2 a 90 °C durante toda la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de un embudo con un filtro desechable, se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (de un 10% a un 60% de EtOAc en heptano) para proporcionar el ácido (2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)borónico (30 mg, MS: 190,1 [M+H+].)
Paso 2: 3-(5-(Metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona
Siguiendo un procedimiento similar al descrito para el Paso 3 en el Ejemplo 101, se hizo reaccionar el ácido (2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)borónico y 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (858 mg, 2 ,57 mmol) para proporcionar el producto crudo, el cual se purificó mediante HPLC preparativa en condiciones básicas para obtener 3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona (14 mg, MS: 398,2 [M+H+], LCM S tR = 0,51 min (LCM S Método D); 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,74 (s, 1H), 7,67-7,80 (m, 1H), 7 ,47 -7,57 (m, 1H), 7,31 (d, J=8,08 Hz, 1H), 7,19 -7,27 (m, 1H), 4,34 (s a., 1H), 2,99 (s, 3H), 1,71 (dd, J=12,63, 3,03 Hz, 2H), 1,50 (t, J= 12 ,38 Hz, 2H), 1,28 (s, 6H), 1,10-1,23 (m, 6H).
Ejemplo 104: Síntesis de 1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona
Figure imgf000072_0003
Paso 1: 3-Bromo-1-metilquinolin-2(1H)-ona
A una solución de 3-bromo-2-hidroxiquinolina (50 mg, 0,223 mmol) en DMF (1 ml), se añadió yoduro de metilo (0,017 ml, 0,268 mmol) y carbonato de potasio (46,3 mg, 0,335 mmoL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Se añadió agua y la solución se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua y a continuación una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La fase orgánica se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente para el revelado: hexano/acetato de etilo = /1) para obtener 3-bromo-1-metilquinolin-2(1H)-ona (52 mg, MS: 238,1 [M+H+]).
Paso 2: 1-Metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona
Empleando los métodos del Ejemplo 103, se obtuvo 1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona como un polvo de color amarillo pálido (28 mg, MS: 412,2 [M+H+], LCM S tR = 0,62 min (LCM S Método D); 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,85 (s, 1H), 7,90 (d, J= 7 ,58 Hz, 1H), 7,73-7,81 (m, 1 H), 7,66 -7,72 (m, 1H), 7,42 (t, J= 7 ,58 Hz, 1H), 4,73-4,84 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,10-3,19 (m, 3H), 2,07 (dd, J=13,64, 3,54 Hz, 2H), 1,96 (t, J=12 ,88 Hz, 2H), 1,61-1,69 (m, 6H), 1,46-1,57 (m, 6 H).
Ejemplo de referencia 105: Síntesis de la sal de tipo clorhidrato de 2-(2-cloro-4-(1H-pirazol-4-il)feml)-5-((3aR,6aS)-hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)-1,3,4-tiadiazol
Figure imgf000073_0001
Paso 1: 5-(4-Bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
A una mezcla enfriada con hielo del ácido 4-bromo-2-clorobenzoico (3 g, 12,74 mmol) e hidrazinocarbotioamida (2 ,17 g, 23,81 mmol) se añadió oxicloruro de fósforo (3,56 ml, 38,2 mmol) lentamente. La mezcla se calentó a 78 °C durante toda la noche. Después de enfriar hasta 0 °C, se añadió agua con hielo. La mezcla se agitó enérgicamente durante 1 h. El precipitado resultante se filtró y se lavó con agua, a continuación se suspendió de nuevo en una solución saturada de NaHCO3 y agua (1:1) durante 1 h. El sólido se filtró, se lavó con agua y se concentró al vacío para obtener 5-(4-bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (2,4 g, MS: 291,8 [M+H+]).
Paso 2: 5-(2-Cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
En un vial para microondas, se añadió 5-(4-bromo-2-clorofenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (500 mg, 1,721 mmol), el éster pinacólico del ácido 4-pirazolborónico (668 mg, 3,44 mmol), carbonato de cesio (1,68 g, 5,16 mmol), Pd2(dba)3.CH2Cl2 (178 mg, 0,172 mmol) y Xphos (82 mg, 0,172 mmol), y a continuación se añadió 1,4-dioxano (2 ml)/H2 O (0,5 ml). El vial se purgó con N2 3 veces y la mezcla de reacción se calentó mediante irradiación con microondas a 100 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró a través de un embudo con un filtro desechable, se lavó con EtOAc, se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (de un 2% a un 15% de MeOH/DCM ) para proporcionar 5-(2-cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (250 mg, MS: 278,0 [M+H+]).
Paso 3: (3aR,6aS)-5-(5-(2-Cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-carboxilato de ferf-butilo
Se añadió 5-(2-cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (250 mg, 0,9 mmol), en porciones durante aproximadamente 5 minutos, a una solución agitada de CuB r2 (241 mg, 1,08 mmol) y nitrito de ferf-butilo (139 mg, 1,35 mmol) en MeCN (5 ml) en atmósfera de nitrógeno. Al finalizar la adición, se dejó agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se desactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó y se concentró al vacío para proporcionar 2-bromo-5-(2-cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol como un sólido marrón, el cual se utilizó sin purificación adicional. Una mezcla de reacción desgasificada de 2-bromo-5-(2-cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol (40 mg, 0,117mmol), cis-2-boc-hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol (24,86 mg, 0 ,117 mmol), fluoruro de potasio (7,48 mg, 0,129 mmol), 18-corona-6 (30,9 mg, 0 ,117 mmol) y DIEA (0,041 ml, 0,234 mmol) en NMP (1 ml) se calentó con irradiación de microondas a 190 °C durante 1 h. Después de enfriar hasta TA, la mezcla se filtró a través de celite, se lavó con MeOH y se concentró el filtrado. El residuo se disolvió en DMSO y se purificó mediante HPLC preparativa en condiciones básicas para obtener (3aR,6aS)-5-(5-(2-cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-carboxilato de ferf-butilo (10 mg, MS: 473,0 [M+H+]).
Paso 4: Sal de tipo clorhidrato de 2-(2-cloro-4-(1H-pirazol-4-il)fenil)-5-((3aR,6aS)-hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-il)-1,3,4-tiadiazol
Una solución de (3aR,6aS)-5-(5-(2-cloro-4-(1 H-pirazol-4-il)fenil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-carboxilato de ferf-butilo (10 mg, 0,021 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) se trató con HCl 4 M en dioxano (1 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró al vacío para obtener el compuesto del título (2 mg, MS: 373,1 [M+H+], LCM S tR = 0,44 min (LCM S Método D); 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7,99 (s a., 2H), 7,92 (d, J=8,59 Hz, 1H), 7 ,71 (d, J=2,02 Hz, 1H), 7,53-7,60 (m, 1H), 3,68 (dd, J=10,86, 7,83 Hz, 2H), 3,36 (dd, J=10,86, 3,28 Hz, 2H), 3,03-3,11 (m, 2H), 2,97-3,03 (m, 2H), 2 ,75 (dd, J = 11,12, 3,03 Hz, 2H).
Empleando métodos sim ilares a los descritos para la preparación del Ejemplo de referencia 105, utilizando los materiales de partida adecuados, se prepararon los siguientes compuestos:
Figure imgf000074_0002
Ejemplo de referencia 108: Síntesis de 2-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidm-4-il)ammo)-1,3,4-tiadiazol-2-il)benzo[b]tiofen-5-carbonitrilo
Figure imgf000074_0001
En un vial para microondas, una mezcla de 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Intermedio 4, 150 mg, 0,450 mmol), ácido (5-cianobenzo[b]tiofen-2-il)borónico (128 mg, 0,630 mmol) y carbonato de sodio (119 mg, 1,125 mmol) en dimetoxietano/agua 4:1 (3,7 ml) se desgasificó durante 5 minutos. Se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) (52,0 mg, 0,045 mmol) y la mezcla se calentó con irradiación de microondas a 140 °C durante 0,5 h. La mezcla se repartió entre DCM y agua, a continuación se extrajo con DCM (4x). Los extractos de DCM se acidificaron mediante la adición de HCl en dioxano (solución 4,0 M, 113 pl, 0,450 mmol) y se concentraron a sequedad. La purificación mediante SCX (columna de 1 g, elución con amoniaco 7 M en MeOH), seguida de cromatografía en columna flash (4 g de gel de sílice, gradiente de un 1-20% de amoniaco 7 N en MeOH, en DCM) proporcionó 2-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)benzo[d]tiofen-5-carbonitrilo (49 mg) como un sólido de color amarillo claro. Lc /MS tR = 0,52 min. MS = 412,1 (M+1) [Método D]. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,27 (d, J=1,0 Hz, 1H), 8,11 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,68 (dd, J=8 ,6 , 1,5 Hz, 1H), 4,43 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,12 (s, 3H), 1,82 (dd, J=12,6, 3,0 Hz, 2H), 1,60 (t, J=12,1 Hz, 2H), 1,37 (s, 6H), 1,25 (s, 6 H).
Ejemplo de referencia 109. Síntesis de 5-(3-clorobenzo[fo]t¡ofen-2-il)-N-met¡l-N-(2,2,6,6-tetramet¡lp¡per¡dm-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
Figure imgf000075_0001
Paso 1: 5-(Benzo[jb]tiofen-2-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
Se acopló 5-bromo-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (Intermed¡o 4, 150 mg, 0,450 mmol) con el ácido benzo[d]tiofen-2-ilborónico (112 mg, 0,630 mmol) utilizando el método del Ejemplo de referenc¡a 108 para el acoplamiento de Suzuki. La purificación mediante SCX (columna de 2 g, elución con amoniaco 7 M en MeOH) seguida de cromatografía en columna flash (12 g de gel de sílice, gradiente de un 1-20% de amoniaco 3,5 M en metanol, en DCM) proporcionó 5-(benzo[jb]tiofen-2-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina como un sólido de color amarillo claro (48 mg). MS = 387,0 (M+1). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7,82-7,95 (m, 2H), 7,72 (s, 1H), 7,37-7,46 (m, 2H), 4,40 (t, J=12,4 Hz, 1H), 3,11 (s, 3H), 1,82 (dd, J=12,6, 3,5 Hz, 2H), 1,59 (t, J=12,4 Hz, 2H), 1,37 (s, 6 H), 1,25 (s, 6H).
Paso 2: 5-(3-Clorobenzo[jb]tiofen-2-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina
Una mezcla de 5-(benzo[¿]tiofen-2-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina (37 mg, 0,096 mmol) y N-clorosuccinimida (15,34 mg, 0,115 mmol) en DCE:AcOh (1:1) (1 ml) se calentó a 90 °C durante seis horas. La reacción se enfrió hasta TA, se diluyó con bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con acetato de etilo (3x) y DCM (2x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato de magnesio y se concentraron para obtener un sólido cristalino de color amarillo. La purificación mediante cromatografía en columna flash (4 g de gel de sílice, gradiente de un 1-17% de amoniaco 3,5 N en MeOH en DCM durante 30 volúmenes de columna) proporcionó 5-(3-clorobenzo[d]tiofen-2-il)-N-metil-N-(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)-1,3,4-tiadiazol-2-amina como un sólido amarillo (18 mg). Lc /m S tR = 0,58 min. MS = 420,9 (M-1). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7,84-7,99 (m, 2H), 7,47-7,60 (m, 2H), 4,53 (m, 1H), 3,14 (s, 3H), 1,83 (d, J=9,6 Hz, 2H), 1,55­ 1,68 (m, 2H), 1,38 (s, 6H), 1,26 (s, 6 H).
Cond¡c¡ones de LCMS:
Método A:
Sistema de UPLC Waters Acquity
UPLC Waters Acquity BEH 1,7 |jm 2,1 x 50 mm (N.° de componente: 186002350)
Tasa de flujo: 1 ml/min
Temperatura: 50 °C (temp. de la columna)
Composiciones de la fase móvil:
A: agua 0,05% de ácido fórmico acetato de amonio 3,75 mM.
B: acetonitrilo 0,04% de ácido fórmico.
Gradiente:(de un 2 a un 98% de B en 1,7 min)
Método B:
Sistema de UPLC Waters Acquity
Waters Acquity BEH 1,7 jm 2,1 x 50 mm (N^ de componente: 186002350)
Tasa de flujo: 1 ml/min
Temperatura: 50 °C (temp. de la columna)
Composiciones de la fase móvil:
A: agua acetato de amonio 3,75 mM 2% de ACN.
B: acetonitrilo.
Gradiente: (de un 2 a un 98% de B en 4,4 min)
Método C:
Waters Acquity G2 Xevo QTof - Rs(FWHM) > 20000
Waters Acquity CSH 1,7μm 2,1 x 50 mm (N.° de componente: 186005296)
Tasa de flujo: 1 ml/min
Temperatura: 50 °C (temp. de la columna)
Composiciones de la fase móvil:
A: agua acetato de amonio 3,75 mM 0,001% de ácido fórmico. B: acetonitrilo.
Gradiente: (de un 2 a un 98% de B en 4,4 min)
Método D:
Sistema de UPLC Waters Acquity
UPLC Waters Acquity BEH c 181,7 um, 2,1 x 30 mm (N^ de componente: 186002349) Tasa de flujo: 1 ml/min
Temperatura: 55 °C (temp. de la columna)
Composiciones de la fase móvil:
A: 0,05% de ácido fórmico en agua.
B: 0,04% de ácido fórmico en metanol.
Gradiente:
Figure imgf000076_0001
Abreviaturas:
Figure imgf000077_0001
Ejemplo biológico 1:
Se utilizó un ELISA celular para SMN con el fin de medir los efectos de compuestos de bajo peso molecular sobre el aumento de la proteína SMN. Se sembraron células de una línea celular de mioblastos derivada del modelo de ratón SM Ndelta7 (cedida cordialmente por Steve Burden, NYU) en una placa de 384 pocillos con una densidad de 3000 células/pocillo y se trataron con los compuestos durante 24 horas. Se prepararon placas de captura ELISA recubriendo placas de 384 pocillos (Immulon 4HBX) con 0,5 ug/ml de mAb anti-SMN (BD Science, número de catálogo 610647) a 4 °C durante toda la noche. Las placas se lavaron 5 veces con 110 |jl de PBS-Tween (Tween-20 al 0,05%, PBST), se bloquearon con 100 j l de BSA al 1% en P B S T durante 2 horas y se lavaron (5 veces) con 100 j l de PBST. Después de 24 horas de tratamiento con el compuesto, las células se sometieron a lisis en un tampón R IP A modificado, en hielo durante 1 hora. A continuación, se añadieron 20 j l de lisado y 20 j l de BSA al 1% a las placas de captura ELISA y se incubaron a 4 °C durante toda la noche. Las placas se lavaron (5 veces) con P B S T y a continuación se incubaron con una dilución 1:100 de anticuerpo policlonal primario anti-SMN de conejo (Santa cruz, número de catálogo S C -15320 ) a temperatura ambiente durante 1 hora y posteriormente se lavaron (5 veces) con 110 uL de PBST. Esto fue seguido por la adición del anticuerpo secundario anti-IgG de conejo producido en cabra-H RP 1:100 (Cell Signaling, número de catálogo 7074 ) durante 1 hora. A continuación, las placas se lavaron con P B S T y se incubaron con 40 |jl de sustrato TMB (Cell Signaling, número de catálogo 7004L) a temperatura ambiente durante 1-10 minutos con agitación. La reacción se detuvo mediante la adición de 40 j l de solución de parada (Cell signaling, número de catálogo 7002L) y se midió la absorción a 450 nm. Los datos se registraron como el incremento de la activación respecto al control de DMSO y C E 50. Condiciones del ensayo ELISA: intervalo de concentración del compuesto 100 pM - 10 uM.
Tabla de actividad: Datos de ELISA generados utilizando el Ejemplo biológico
Figure imgf000079_0001
Figure imgf000080_0001
Figure imgf000081_0001
Figure imgf000082_0001
Figure imgf000083_0001
Figure imgf000084_0001
Figure imgf000085_0001
Figure imgf000086_0001
Figure imgf000087_0001
Figure imgf000088_0001
Figure imgf000089_0001
Figure imgf000090_0001
Figure imgf000091_0001
Figure imgf000092_0001
Figure imgf000093_0001
Figure imgf000094_0001

Claims (11)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto, o sal de este, donde el compuesto está representa por la Fórmula (X)
Figure imgf000095_0005
donde
A' se selecciona entre:
Figure imgf000095_0007
B se selecciona entre
Figure imgf000095_0006
donde Z es NH o N(Me);
o B se selecciona entre
Figure imgf000095_0001
2. Un compuesto, o sal de este, de acuerdo con la reivindicación 1, donde B se selecciona entre
Figure imgf000095_0002
donde Z es NH o N(Me).
3. Un compuesto, o sal de este, de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 2, donde B es
Figure imgf000095_0003
4. Un compuesto, o sal de este, de acuerdo con la reivindicación 1, donde B se selecciona entre
Figure imgf000095_0004
Figure imgf000096_0002
5. Un compuesto, o sal de este, de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 4, donde B es
Figure imgf000096_0001
6. Un compuesto o sal de este, de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado entre el grupo que consiste en:
4-metoxi-1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona; 4-hidroxi-1-metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona; 3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona; y
1 -metil-3-(5-(metil(2,2,6,6-tetrametilpiperidin-4-il)amino)-1,3,4-tiadiazol-2-il)quinolin-2(1H)-ona.
7. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.
8. Una combinación que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y uno o más coagentes terapéuticamente activos.
9. Un compuesto, o sal de este, de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, para su uso en terapia.
10. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de una afección relacionada con la deficiencia de SMN.
11. El compuesto, o sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso de acuerdo con la reivindicación 10, donde la afección relacionada con la deficiencia de SMN es atrofia m uscular espinal.
ES19211939T 2013-01-23 2014-01-23 Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN Active ES2945736T3 (es)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361755680P 2013-01-23 2013-01-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2945736T3 true ES2945736T3 (es) 2023-07-06

Family

ID=50114547

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES14704959T Active ES2780848T3 (es) 2013-01-23 2014-01-23 Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN
ES19211939T Active ES2945736T3 (es) 2013-01-23 2014-01-23 Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES14704959T Active ES2780848T3 (es) 2013-01-23 2014-01-23 Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN

Country Status (17)

Country Link
US (2) US9040712B2 (es)
EP (3) EP3736271B1 (es)
JP (1) JP6389474B2 (es)
KR (3) KR102354271B1 (es)
CN (1) CN104936955B (es)
AR (1) AR094557A1 (es)
AU (2) AU2014209315A1 (es)
BR (2) BR122020019185B1 (es)
CA (1) CA2896875C (es)
EA (2) EA035606B1 (es)
ES (2) ES2780848T3 (es)
MX (2) MX2015008975A (es)
PL (1) PL2948448T3 (es)
PT (1) PT2948448T (es)
TW (1) TW201443046A (es)
UY (1) UY35273A (es)
WO (1) WO2014116845A1 (es)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY174339A (en) * 2012-08-13 2020-04-09 Novartis Ag 1,4-disubstituted pyridazine analogs and methods for treating smn-deficiency-related conditions
EP3053577A1 (en) 2015-02-09 2016-08-10 F. Hoffmann-La Roche AG Compounds for the treatment of cancer
JP6884102B2 (ja) 2015-02-09 2021-06-09 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんの治療のための化合物
US10668171B2 (en) 2015-05-30 2020-06-02 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for modulating RNA splicing
CA3005434A1 (en) 2015-11-16 2017-05-26 Ohio State Innovation Foundation Methods and compositions for treating disorders and diseases using survival motor neuron (smn) protein
CN108697709A (zh) 2015-12-10 2018-10-23 Ptc医疗公司 用于治疗亨廷顿病的方法
EA201991309A1 (ru) 2016-11-28 2019-11-29 Способы модуляции сплайсинга рнк
WO2018226622A1 (en) 2017-06-05 2018-12-13 Ptc Therapeutics, Inc. Compounds for treating huntington's disease
BR112019026508A2 (pt) 2017-06-14 2020-07-14 Ptc Therapeutics, Inc. métodos para modificar o splicing do rna
EP3644996B1 (en) 2017-06-28 2023-07-26 PTC Therapeutics, Inc. Methods for treating huntington's disease
CA3067592A1 (en) 2017-06-28 2019-01-03 Ptc Therapeutics, Inc. Methods for treating huntington's disease
SG11202000980QA (en) 2017-08-04 2020-02-27 Skyhawk Therapeutics Inc Methods and compositions for modulating splicing
CN112135815A (zh) 2018-03-27 2020-12-25 Ptc医疗公司 用于治疗亨廷顿氏病的化合物
CA3103976A1 (en) 2018-06-27 2020-01-02 Ptc Therapeutics, Inc. Heterocyclic and heteroaryl compounds for treating huntington's disease
US11685746B2 (en) 2018-06-27 2023-06-27 Ptc Therapeutics, Inc. Heteroaryl compounds for treating Huntington's disease
JP2022521467A (ja) 2019-02-05 2022-04-08 スカイホーク・セラピューティクス・インコーポレーテッド スプライシングを調節するための方法および組成物
CN113677344A (zh) 2019-02-06 2021-11-19 斯基霍克疗法公司 用于调节剪接的方法和组合物
US11129829B2 (en) 2019-06-17 2021-09-28 Skyhawk Therapeutics, Inc. Methods for modulating splicing
CN110256342B (zh) * 2019-07-16 2022-06-07 河南省科学院化学研究所有限公司 一种2-氰基喹啉衍生物的合成方法
US20220307053A1 (en) 2019-07-25 2022-09-29 Novartis Ag Regulatable expression systems
TW202131920A (zh) 2019-11-01 2021-09-01 瑞士商諾華公司 剪接調節子用於減慢杭丁頓氏舞蹈症進展的治療之用途
TW202304446A (zh) 2021-03-29 2023-02-01 瑞士商諾華公司 剪接調節子用於減慢杭丁頓氏舞蹈症進展的治療之用途

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3677737A (en) 1969-10-24 1972-07-18 Gulf Research Development Co Combating unwanted vegetation with 2-(2',5' - dimethylpyrrolidinyl) - 5 - aryl-1,3,4-thiadiazoles
DD136963A1 (de) 1978-06-08 1979-08-08 Horst Willitzer Verfahren zur herstellung substituierter 1.3.4-thiadiazole
US4620675A (en) 1983-09-07 1986-11-04 Beloit Corporation Composite flexible pulp refiner disk
FR2636628B1 (fr) * 1988-08-25 1990-12-28 Sanofi Sa Derives du thiadiazole-1,3,4, leur procede d'obtention et compositions pharmaceutiques en contenant
EP1506200B1 (en) * 2002-05-07 2006-12-20 Neurosearch A/S Diazabicyclic biaryl derivatives
CN101723941A (zh) 2002-08-09 2010-06-09 阿斯利康(瑞典)有限公司 作为代谢型谷氨酸受体-5调节剂的“1,2,4”二唑
MXPA05001590A (es) 2002-08-09 2005-05-23 Astrazeneca Ab Compuestos que tienen actividad en los receptores metabotropicos de glutamato.
EP1536790A2 (en) 2002-08-09 2005-06-08 AstraZeneca AB Oxadiazoles as modulators of metabotropic glutamate receptor-5
CA2514733A1 (en) 2003-02-28 2004-09-16 Transform Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical co-crystal compositions of drugs such as carbamazepine, celecoxib, olanzapine, itraconazole, topiramate, modafinil, 5-fluorouracil, hydrochlorothiazide, acetaminophen, aspirin, flurbiprofen, phenytoin and ibuprofen
US20050075375A1 (en) 2003-05-14 2005-04-07 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds for treating hepatitis C virus
US20050065178A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-24 Anwer Basha Substituted diazabicycloakane derivatives
US7399765B2 (en) 2003-09-19 2008-07-15 Abbott Laboratories Substituted diazabicycloalkane derivatives
WO2005077368A2 (en) 2004-02-03 2005-08-25 Astrazeneca Ab Treatment of gastro-esophageal reflux disease (gerd)
WO2005077373A2 (en) 2004-02-03 2005-08-25 Astrazeneca Ab Treatment of gastro-esophageal reflux disease (gerd)
JP2008506669A (ja) * 2004-07-16 2008-03-06 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ 神経変性疾患の処置に適するピペリジン、ピペラジンもしくはモルホリンの二量体化合物またはそれらの７−員同族体
WO2006008259A1 (en) 2004-07-16 2006-01-26 Janssen Pharmaceutica N.V. Dimeric compounds of piperidine, piperazine or morpholine or their 7-membered analogs suitabale for the treatment of neurodegenerative disorders
MX2007003319A (es) 2004-09-20 2007-06-05 Xenon Pharmaceuticals Inc Derivados heterociclicos y su uso como agentes terapeuticos.
KR20070073791A (ko) 2004-10-18 2007-07-10 암젠 인코포레이티드 티아디아졸 화합물 및 이의 사용방법
GB0704394D0 (en) 2007-03-07 2007-04-11 Senexis Ltd Compounds
US20110039847A1 (en) * 2007-11-01 2011-02-17 Sirtris Pharmaceuticals, Inc Amide derivatives as sirtuin modulators
WO2010022055A2 (en) 2008-08-20 2010-02-25 Amgen Inc. Inhibitors of voltage-gated sodium channels
US20110224187A1 (en) * 2008-10-16 2011-09-15 Anandan Palani Pyrrolidine, piperidine and piperazine derivatives and methods of use thereof
SG181643A1 (en) * 2009-12-17 2012-07-30 Merck Patent Gmbh Inhibitors of sphingosine kinase
ES2586231T3 (es) 2010-03-03 2016-10-13 Probiodrug Ag Inhibidores de glutaminil ciclasa
WO2011130515A1 (en) * 2010-04-14 2011-10-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Arylthiazolyl piperidines and related compounds as modulators of survival motor neuron (smn) protein production
AR081626A1 (es) 2010-04-23 2012-10-10 Cytokinetics Inc Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos
AU2012230890A1 (en) 2011-03-22 2013-09-26 Amgen Inc. Azole compounds as Pim inhibitors
AU2013237939A1 (en) 2012-03-30 2014-10-30 Cubist Pharmaceuticals, Inc. 1,3,4-oxadiazole and 1,3,4-thiadiazole beta-lactamase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
US20150218175A1 (en) 2015-08-06
TW201443046A (zh) 2014-11-16
BR122020019185B1 (pt) 2022-03-22
AR094557A1 (es) 2015-08-12
ES2780848T3 (es) 2020-08-27
KR20210010951A (ko) 2021-01-28
PL2948448T3 (pl) 2020-07-13
KR20220015490A (ko) 2022-02-08
EP4227304A2 (en) 2023-08-16
MX2015008975A (es) 2015-09-29
AU2016256728B2 (en) 2018-03-29
UY35273A (es) 2014-08-29
CN104936955B (zh) 2018-08-28
EA201591363A1 (ru) 2015-11-30
EP2948448B1 (en) 2020-01-08
CA2896875A1 (en) 2014-07-31
JP6389474B2 (ja) 2018-09-12
CA2896875C (en) 2023-03-28
EP3736271A1 (en) 2020-11-11
EA202090860A1 (ru) 2020-07-03
KR20150107871A (ko) 2015-09-23
CN104936955A (zh) 2015-09-23
MX2020007023A (es) 2022-08-08
EP3736271B1 (en) 2023-03-08
WO2014116845A1 (en) 2014-07-31
US9040712B2 (en) 2015-05-26
PT2948448T (pt) 2020-04-01
EP4227304A3 (en) 2023-08-30
KR102354271B1 (ko) 2022-01-21
AU2016256728A1 (en) 2016-11-24
EA035606B1 (ru) 2020-07-15
KR102207178B1 (ko) 2021-01-26
BR112015016911B1 (pt) 2022-03-22
US20140206661A1 (en) 2014-07-24
EP2948448A1 (en) 2015-12-02
AU2014209315A1 (en) 2015-07-23
BR112015016911A2 (pt) 2017-07-11
JP2016505051A (ja) 2016-02-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2945736T3 (es) Análogos de tiadiazol y su uso para tratar enfermedades asociadas con una deficiencia de neuronas motoras SMN
ES2950450T3 (es) Análogos de piridazina con disustitución 1,4 y métodos para tratar afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN
ES2917979T3 (es) Derivados de Piridazina 1,4-disustituidos y su uso para tratar afecciones relacionadas con la deficiencia de SMN
ES2641478T3 (es) Derivados de 3-acetilamino-1-(fenil-heteroaril-aminocarbonil o fenil-heteroaril-carbonilamino)benceno para el tratamiento de trastornos hiperproliferativos
KR101661777B1 (ko) Ｍｅｔ 키나아제 저해제로서의 3-（3-피리미딘-2-일-벤질）-〔1,2,4〕트리아졸로〔4,3-ｂ〕피리다진 유도체
US11390588B2 (en) 2-substituted amino-naphth (1,2-d) imidazol-5-one compounds of pharmaceutically acceptable salts thereof
EA019723B1 (ru) ИНГИБИТОРЫ cMET
BR112012004533A2 (pt) composto, composto farmacêutico, método de inibição da pask, método de tratamento de uma doença, método para obter um efeito em um paciente, e, método de tratamento de uma doença mediada pela pask
JPWO2005087749A1 (ja) ２−アミノキナゾリン誘導体
TW202221007A (zh) 巨環化合物
EA040206B1 (ru) Аналоги тиадиазола и способы лечения состояний, связанных с дефицитом smn