ES2925218T3 - Inhibidores de RAD51 - Google Patents

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ES2925218T3 ES18782257T ES18782257T ES2925218T3 ES 2925218 T3 ES2925218 T3 ES 2925218T3 ES 18782257 T ES18782257 T ES 18782257T ES 18782257 T ES18782257 T ES 18782257T ES 2925218 T3 ES2925218 T3 ES 2925218T3
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halogen
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Alfredo C Castro
Casey Cameron Mccomas
Joseph VACCA
Tyler Maclay
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Cyteir Therapeutics Inc
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Cyteir Therapeutics Inc
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Abstract

Esta solicitud está dirigida a inhibidores de RAD51 representados por la siguiente fórmula estructural y métodos para su uso, tales como para tratar cáncer, enfermedades autoinmunes, inmunodeficiencias o enfermedades neurodegenerativas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Inhibidores de RAD51
REFERENCIAS CRUZADAS A SOLICITUDES RELACIONADAS
La presente solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional de EE. UU. N.° 62/556.763, presentada el 11 de septiembre de 2017; y la solicitud provisional de EE. UU. N.° 62/711.959, presentada el 30 de julio de 2018.
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La presente solicitud se refiere a inhibidores de RAD51, y a su uso, tal como en el tratamiento de afecciones que incluyen cánceres, enfermedades autoinmunitarias, deficiencias inmunitarias y enfermedades neurodegenerativas.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
RAD51 es un gen eucariota. La proteína codificada por este gen es un miembro de la familia de proteínas RAD51 que ayuda en la reparación de las roturas bicatenarias de ADN. Los miembros de la familia RAD51 son homólogos a RecA bacteriano, RadA de arqueas y RAD51 de levadura. La proteína está altamente conservada en la mayoría de los eucariotas, desde la levadura hasta los seres humanos. En seres humanos, RAD51 es una proteína de 339 aminoácidos que desempeña una función importante en la recombinación homóloga de ADN durante la reparación de la rotura bicatenaria (DSB). RAD51 cataliza la transferencia de cadenas entre una secuencia rota y su homólogo sin dañar para permitir la resíntesis de la región dañada (véanse los modelos de recombinación homóloga).
Los estudios han demostrado una sensibilización a ciertas terapias que dañan el ADN asociadas a defectos celulares en las proteínas que promueven la reparación de ADN de HR. Esta sensibilización es particularmente espectacular para los fármacos quimioterapéuticos de reticulación de ADN (30-100 veces) y radiación ionizante (3-5 veces) (Godthelp et al., "Mammalian Rad51C contributes to DNA crosslink resistance, sister chromatid cohesion and genomic stability'', Nucleic Acids Res., 30:2172-2182, 2002; Tebbs et al., "Correction of chromosomal instability and sensitivity to diverse mutagens by a cloned cDNA of the XRCC3 DNA repair gene", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92:6354-6358, 1995; Takata et al., ''Chromosome instability and defective recombinational repair in knockout mutants of the five Rad51 paralogs", Mol. Cell Biol., 21:2858-2866, 2001; Liu et al., "XRCC2 and XRCC3, new human Rad51-family members, promote chromosome stability and protect against DNA cross-links and other damages", Mol. Cell, 1:783-793, 1998).
Varios grupos han demostrado recientemente que la HR puede ser parcialmente inhibida para sensibilizar las células a terapias que dañan el ADN. La inhibición de XRCC3 (una proteína paráloga de RAD51) se ha demostrado usando un péptido sintético correspondiente a otra proteína paráloga. Este péptido sensibilizó a células de ovario de hámster chino (CHO) al cisplatino e inhibió la formación de focos subnucleares de RAD51 en respuesta al daño de ADN (Connell et al., Cancer Res., 64:3002-3005, 2004). Otros investigadores han inhibido la expresión de la proteína RAD51 en sí (Russell et al., Cancer Res., 63:7377-7383, 2003; Hansen et al., Int. J. Cancer, 105:472-479, 2003; Ohnishi et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 245:319-324, 1998; Ito et al., J. Gene Med., 7(8):1044-1052, 2005; Collins et al., Nucleic Acids Res., 29:1534-1538, 2001) o bloquearon su función expresando en exceso un fragmento de BRC negativo dominante de péptido derivado de BRCA2 (Chen et al., J. Biol. Chem., 274:32931-32935, 1999). El documento de patente WO2016140971 desvela inhibidores de molécula pequeña de RAD51.
También ha habido interés en la familia de proteínas RAD52 con, por ejemplo, el documento de patente WO2016/196955 que proporciona novedosos inhibidores de RAD52. En vista de la conexión entre la elevada sensibilidad a ciertas terapias que dañan el ADN y los defectos celulares en las proteínas relacionadas con la reparación de ADN de HR, existe la necesidad de compuestos adicionales que inhiban RAD51.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
El solicitante ha descubierto ahora compuestos novedosos que son inhibidores de RAD51 eficaces (véanse los Ejemplos 1-75). Los inhibidores de RAD51 de la presente invención inhiben la recombinación homóloga alterando la distribución nucleocitoplásmica de RAD51 tras la inducción del daño de ADN. Los inhibidores de RAD51 de la presente invención reducen la reparación de roturas bicatenarias de ADN inducido por AID, que conduce a citotoxicidad dependiente de AID en linfocitos B normales y malignos. Ciertos de estos inhibidores de RAD51 tienen permeabilidad celular superior, como se mide en células Caco-2 (véase el Ejemplo 76). Entre los inhibidores de RAD51 con buena permeabilidad celular, varios tienen estabilidad metabólica superior (como se mide por un ensayo en microsomas de hígado, véase el Ejemplo 77) y exposición, que incluye exposición oral (véase el Ejemplo 79).
La presente invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I:
Figure imgf000003_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La definición de cada variable se proporciona a continuación. La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se describe en el presente documento o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
También se proporciona un compuesto desvelado en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica desvelada en el presente documento para su uso en el tratamiento de un cáncer, una enfermedad autoinmunitaria, una deficiencia inmunitaria o una enfermedad neurodegenerativa.
Aunque el solicitante no desea quedar ligado a mecanismo alguno, se cree que los compuestos de la invención inhiben RAD51 uniéndose a MDC1 y causando una capacidad reducida de formación de complejos activos de RAD51. DESCRIPCIÓN DETALLADA
En una primera realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I:
Figure imgf000003_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
el anillo de tiazol está sustituido opcionalmente con -F o -Cl;
Cy es -cicloalquilo (C3-C7), cicloalquilo (C6-C12) puenteado, o un anillo heterocíclico de 4-12 miembros, cada uno de los cuales está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -OH, alquilo (C1-C4) y alcoxi (C1-C4);
cuando X5 está conectado con un átomo de nitrógeno del anillo de Cy, X5 está ausente;
cuando X5 está conectado con un átomo de carbono del anillo de Cy, X5 es NRa u O;
X6 es NRa u O;
R1 es alquilo (C1-C5) opcionalmente sustituido con -OH;
R3 es alquilo (C1-C5), -CH2-fenilo, -cicloalquilo (C3-C7), -CH2-cicloalquilo (C3-C7), -CH2-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, o anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, en donde el alquilo (C1-C5), -cicloalquilo (C3-C7), fenilo o anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico representado por R3 o en el grupo representado por R3 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -OH, alquilo (C1-C4), halometilo, halometoxi, -CN y alcoxi (C1-C4);
R2 es -NRaC(O)Oalquilo (C1-C4); -NRaC(O)NRaalquilo (C1-C4); -NRaC(O)Oalquenilo (C2-C4); -NRaC(O)NRaalquenilo (C2-C4); -NRaC(O)O-cicloalquilo (C3-C6); -NRaC(O)NRa-cicloalquilo (C3-C7); -NRaC(O)O-fenilo; -NRaC(O)NRa-fenilo; -NRaC(O)O-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico; -NRaC(O)NRa-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico; -NRaC(O)O-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico; -NRaC(O)NRa-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico;
en donde el alquilo (C1-C4) y el alquenilo (C2-C4) en el grupo representado por R2 están cada uno opcionalmente e independientemente sustituidos con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, N3 , -ORa, -NRaRa, -cicloalquilo (C3-C6), fenilo, un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico y un anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico;
en donde el cicloalquilo (C3-C7) en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -CH3 , =O, -ORa y -NRaRa;
en donde el fenilo en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, -CN, -ORa y -N3 ;
en donde el anillo heterocíclico en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en =O, halógeno, -ORa, -CH3 , halometilo y halometoxi;
en donde el anillo heteroaromático en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -CN, -CH3 , halometilo, halometoxi, -ORa y -NRaRa; y cada Ra es independientemente -H o -CH3.
En una segunda realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural II:
Figure imgf000004_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde
el anillo de tiazol está sustituido opcionalmente con -F o -Cl;
Cy es ciclohexilo o un anillo heterocíclico monocíclico de 6 miembros;
X5 y X6 son cada uno independientemente NRa u O;
R1 es alquilo (C1-C5);
R3 es alquilo (C1-C5) o anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros;
R2 es -NRaC(O)Oalquilo (C1-C4); -NRaC(O)NRaalquilo (C1-C4); -NRaC(O)Oalquenilo (C2-C4); -NRaC(O)NRaalquenilo (C2-C4); -NRaC(O)-Ocicloalquilo (C3-C6); -NRaC(O)NRa-cicloalquilo (C3-C6); -NRaC(O)O-fenilo; -NRaC(O)NRa-fenilo; -NRaC(O)O-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico; -NRaC(O)NRa-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico; -NRaC(O)O-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico; -NRaC(O)NRa-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico;
en donde el alquilo (C1-C4) y el alquenilo (C2-C4) en el grupo representado por R2 están cada uno opcionalmente e independientemente sustituidos con uno o más de halógeno, N3 , -ORa, -NRaRa, -cicloalquilo (C3-C6), fenilo, anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros, o anillo heteroaromático monocíclico de 5-6 miembros; en donde el -cicloalquilo (C3-C6) en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, -CH3 , -ORa o -NRaRa;
en donde el fenilo en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, -ORa o -N3 ;
en donde el anillo heterocíclico en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de =O, halógeno, -CH3 , halometilo o halometoxi;
en donde el anillo heteroaromático en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, -ORa o -NRaRa; y
cada Ra es independientemente -H o -CH3.
En una tercera realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Cy es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo; azetidinilo, azepanilo, diazaespiro[4.4]nonilo, diazaespiro[3.5]nonilo, diazepanilo, dihidroimidazol, dihidrofuranilo, dihidropiranilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidrotienilo, dihidrotiofenilo, dihidrotiopiranilo, hexahidropiridazinilo, hexahidropirimidinilo, hidantoinilo, indolinilo, isoindolinilo, morfolinilo, oxiranilo, oxetanilo, piperidinilo, piperazinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroimidazol, tetrahidroindolilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiopiranilo, tiomorfolinilo, tropanilo, valerolactamilo; biciclo[2.1.1 ]hexilo, biciclo[2.2.1]heptilo, biciclo[2.2.2]octilo, biciclo[3.2.1]octilo, biciclo[4.3.1]decilo, biciclo[3.3.1]nonilo, bornilo, bornenilo, norbornilo, norbornenilo, 6,6-dimetilbiciclo[3.1.1]heptilo, triciclobutilo, adamantilo; azanorbornilo, quinuclidinilo, isoquinuclidinilo, tropanilo, azabiciclo[2.2.1]heptanilo, 2-azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.2]nonanilo, azabiciclo[3.3.0]nonanilo, azabiciclo[3.3.1]nonanilo, diazabiciclo[2.2.1]heptanilo, diazabiciclo[3.2.1]octanilo, octahidropirrolo[3,4-b]pirrolilo, octahidropirrolo[3,4-c]pirrolilo; y las variables restantes son como se definen en la primera realización.
En una cuarta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I o II, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Cy es ciclohexilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo, piperazinilo, hexahidropiridazinilo, hexahidropirimidinilo, valerolactamilo, dihidropiranilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidrotiopiranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo o tetrahidrotiopiranilo; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda y/o tercera realizaciones.
En una quinta realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural III,
Figure imgf000005_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
X7 es NH u O;
R4 es alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6), o un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico;
en donde el alquilo (C1-C4) representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, N3 , -ORa, -NRaRa, -cicloalquilo (C3-C6), fenilo, un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico y un anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico, en donde el cicloalquilo (C3-C6) o el anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico representado por R4, el cicloalquilo (C3-C6) o el anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -ORa, =O y -CH3,
en donde el fenilo en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, -ORa y -N3 ;
en donde el anillo heteroaromático en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno y -CH3 ; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera y/o cuarta realizaciones.
En una sexta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural III, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X7 es NH u O; R3 es alquilo (C1-C5); y R4 es alquilo (C1-C4), en donde el alquilo (C1-C4) representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, -ORa, -NRaRa, -cicloalquilo (C3-C6), fenilo (opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, ORa o N3), anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros (opcionalmente sustituido con =O, halógeno o -CH3), o anillo heteroaromático monocíclico de 5-6 miembros (opcionalmente sustituido con halógeno o -CH3); y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta y/o quinta realizaciones.
En una séptima realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural IV,
Figure imgf000005_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una octava realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural V,
Figure imgf000006_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una novena realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural VI:
Figure imgf000006_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una décima realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural VII:
Figure imgf000006_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una undécima realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural VIII:
Figure imgf000006_0004
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una duodécima realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural IX:
Figure imgf000007_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una decimotercera realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I, II o III, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Cy es azetidinilo o pirrolidinilo, y el átomo de nitrógeno del anillo está conectado con el anillo de tiazol; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una decimocuarta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I, II o III, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Cy es 1,7-diazaespiro[4.4]nonilo, 2,7-diazaespiro[4.4]nonilo, 2,7-diazaespiro[3.5]nonilo, 1,4-diazepanilo, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanilo, 3,8-diazabiciclo[3.2.1]octanilo, octahidropirrolo[3,4-b]pirrolilo u octahidropirrolo[3,4-c]pirrolilo, y los dos átomos de nitrógeno del anillo están conectados con el anillo de tiazol y el resto -X5C(O)X6R3, respectivamente; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta y/o sexta realizaciones.
En una decimoquinta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural III, IV, V, VI, VII, VIII o IX, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es -alquilo (C1-C3), cicloalquilo (C3-C6), o un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, en donde el alquilo -(C1-C3) está sustituido opcionalmente con (i) fenilo opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno o -CH3 ; (ii) un anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno o -CH3 ; o (iii) un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno y -CH3 ; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera y/o decimocuarta realizaciones.
En una decimosexta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural III, IV, V, VI, VII, VIII o IX, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es -alquilo (C1-C3), -CHRa-fenilo, -CHRaanillo heteroaromático de 5-6 miembros o -CHRa-anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros, en donde el fenilo, el anillo heteroaromático de 5-6 miembros o el anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno y -CH3 ; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera y/o decimocuarta realizaciones.
En una decimoséptima realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural III, IV, V, VI, VII, VIII o IX, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es -alquilo (C1-C3), opcionalmente sustituido con (i) fenilo opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, ORa o N3 ; (ii) un anillo heteroaromático monocíclico de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno o -CH3 ; o (iii) un anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más de =O -CH3 ; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera y/o decimocuarta realizaciones.
En una decimoctava realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural III, IV, V, VI, VII, VIII o IX, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es -alquilo (C1-C3), opcionalmente sustituido con (i) fenilo opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, ORa o N3 ; (ii) un anillo heteroaromático monocíclico de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno o -CH3 ; o (iii) un anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más de =O o -CH3 ; y las variables restantes son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera, decimocuarta y/o decimoséptima realizaciones.
En una decimonovena realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I, III, IV, V, VI, VII, VIII o IX, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es alquilo (C1-C4), -cicloalquilo (C4-C6), -CH2-fenilo, -CH2-anillo heterocíclico monocíclico de 4-6 miembros, o anillo heterocíclico monocíclico de 4-6 miembros, en donde el fenilo o el anillo heterocíclico monocíclico de 4-6 miembros representado por R3 o en el grupo representado por R3 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -ORa y -CH3 ; y las variables restantes son como se definen en la primera, tercera, cuarta, quinta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera, decimocuarta, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima y/o decimoctava realizaciones.
En una vigésima realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural X:
Figure imgf000008_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava y/o decimonovena realizaciones.
En una vigésimo primera realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural XI:
Figure imgf000008_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava y/o decimonovena realizaciones.
En una vigésimo segunda realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural XII:
Figure imgf000008_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, octava, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava, y/o decimonovena realizaciones.
En una vigésimo tercera realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural XIII(a) o XIII(b):
Figure imgf000008_0004
o
Figure imgf000009_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, octava, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava y/o decimonovena realizaciones.
En una vigésimo cuarta realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural XIV:
Figure imgf000009_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, décima, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava y/o decimonovena realizaciones.
En una vigésimo quinta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII(a), XIII(b), XIV, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es isopropilo, terc-butilo, ciclobutilo, ciclopentilo, bencilo, oxetanilo, tetrahidro-2H-piranilo, o
Figure imgf000009_0003
; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera, decimocuarta, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava, decimonovena, vigésima, vigésimo primera, vigésimo segunda, vigésimo tercera y/o vigésimo cuarta realizaciones. En una realización alternativa, R3 es isopropilo u oxetanilo. En otra realización alternativa, R3 es isopropilo.
En una vigésimo sexta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII(a), XIII(b), XIV, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R1 es tercbutilo; y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera, decimocuarta, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava, decimonovena, vigésima, vigésimo primera, vigésimo segunda, vigésimo tercera, vigésimo cuarta y/o vigésimo quinta realizaciones.
En una vigésimo séptima realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII(a), XIII(b), XIV, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es
Figure imgf000009_0004
Figure imgf000010_0001
y las variables son como se definen en la primera, segunda, tercera, cuarta, quinta, sexta, séptima, octava, novena, décima, undécima, duodécima, decimotercera, decimocuarta, decimoquinta, decimosexta, decimoséptima, decimoctava, decimonovena, vigésima, vigésimo primera, vigésimo segunda, vigésimo tercera, vigésimo cuarta, vigésimo quinta y/o vigésimo sexta realizaciones. En una realización alternativa, R4 es
Figure imgf000010_0002
En otra realización alternativa, R4 es
Figure imgf000010_0003
En otra realización alternativa,
Figure imgf000011_0001
Todavía en otra realización alternativa, R4 es
Figure imgf000011_0002
Todavía en otra realización alternativa, R4 es
Figure imgf000011_0003
o
Figure imgf000011_0004
La presente invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I'.
En una primera realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I':
Figure imgf000011_0005
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
el anillo de tiazol está sustituido opcionalmente con -F o -Cl;
X4 es NRa u O;
X5 y X6 son cada uno independientemente NRb u O;
R1 es alquilo (C1-C5);
R3 es alquilo (C1-C5), -cicloalquilo (C3-C7), o -(CH2)qheterociclilo (en donde el heterociclilo es un anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros opcionalmente sustituido con una o más apariciones de metilo) o bencilo (en donde el anillo de bencilo está sustituido opcionalmente con una o más apariciones de halógeno, metoxi, halometoxi, metilo, halometilo o ciano);
cada uno de Ra, Rb y Rc es independientemente hidrógeno o metilo;
Rd es independientemente halógeno, metoxi, halometoxi, metilo, halometilo o ciano;
m es 0, 1,2 o 3;
n es 0, 1 o 2; y
q es 0 o 1.
En una segunda realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I'-1:
Figure imgf000012_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y las variables son como se definen en la primera realización. En una tercera realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I'-2:
Figure imgf000012_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y las variables son como se definen en la primera realización. En una cuarta realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I'-3:
Figure imgf000012_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y las variables son como se definen en la primera realización. En una quinta realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural I'-4:
Figure imgf000013_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y las variables son como se definen en la primera realización. En una sexta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I', I'-1, I'-2, I'-3 o I'-4, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X4 es NH, y las variables restantes son como se definen en la primera realización.
En una séptima realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I', I'-1, I'-2, I'-3 o I'-4, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es alquilo (C1-C4), -cicloalquilo (C4-C6), -(CH2)qheterociclilo (en donde el heterociclilo es un anillo heterocíclico monocíclico de 4-6 miembros opcionalmente sustituido con un metilo), o bencilo, y las variables restantes son como se definen en la primera y/o sexta realizaciones. En una realización específica, R3 es isopropilo, tero-butilo, ciclobutilo, ciclopentilo, oxetanilo, bencilo, tetrahidro-2H-piranilo, o
Figure imgf000013_0002
En otra realización específica, R3 es isopropilo u oxetanilo.
En una octava realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I', I'-1, I'-2, I'-3 o I'-4, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Rd es halógeno, y m es 0 o 1, y las variables restantes son como se definen en la primera, sexta y/o séptima realizaciones. En una realización específica,
Figure imgf000013_0003
es
Figure imgf000013_0004
En una novena realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural I', I'-1, I'-2, I'-3 o I'-4, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R1 es tero-butilo, y las variables restantes son como se definen en la primera, sexta, séptima y/u octava realizaciones.
En una décima realización, la invención proporciona un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:
Figure imgf000014_0001
En una undécima realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural II':
Figure imgf000014_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
el anillo de tiazol está sustituido opcionalmente con -F o -Cl;
X4 es NRa u O;
X5 y X6 son cada uno independientemente NRb u O;
R1 es alquilo (C1-C5);
R4 es alquilo (C1-C4), -cicloalquilo (C3-C7), -(CH(Rc))q-heterociclilo (en donde el heterociclilo es un anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros opcionalmente sustituido con una o más apariciones de metilo), -(CH(Rc))q-fenilo (en donde el anillo de fenilo está sustituido opcionalmente con una o más apariciones de halógeno, metoxi, halometoxi, metilo, halometilo o ciano) o -(CH(Rc))q-2-piridinilo (en donde el anillo de 2-piridinilo está sustituido opcionalmente con una o más apariciones de halógeno, metoxi, halometoxi, metilo, halometilo o ciano);
cada uno de Ra, Rb y Rc es independientemente hidrógeno o metilo;
n es 0, 1 o 2; y
q es 0 o 1.
En una duodécima realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural II'-1:
Figure imgf000015_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y las variables son como se definen en la undécima realización. En una decimotercera realización, la invención proporciona un compuesto representado por la fórmula estructural II'-2:
Figure imgf000015_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y las variables son como se definen en la undécima realización. En una decimocuarta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural II', II'-1 o II'-2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es isopropilo, oxetanilo, ciclobutilo, -CH2-2-pirrolidinilo, -CH2-W-metil-2-pirrolidinilo, -CH2-3-piperidinilo, -CH2-2-pirazinilo, -CH2-2-pirimidinilo, -CH(Rc)-fenilo o -CH(Rc)-2-piridinilo, y que los anillos de fenilo y 2-piridinilo están cada uno independientemente y opcionalmente sustituidos con una o más apariciones de halógeno, y las variables restantes son como se definen en la undécima realización. En una realización específica, R4 es
Figure imgf000015_0003
En otra realización específica, R4 es
Figure imgf000015_0004
En una decimoquinta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural II', II'-1 o II'-2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X4 es NH, y las variables restantes son como se definen en la undécima y/o decimocuarta realizaciones.
En una decimosexta realización, la invención proporciona un compuesto según la fórmula estructural II', II'-I o II'-2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R1 es terc-butilo, y las variables restantes son como se definen en la undécima, decimocuarta y decimoquinta realizaciones.
En una decimoséptima realización, la invención proporciona un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:
Figure imgf000016_0001
También se incluyen los compuestos desvelas en Ejemplos, tanto en la forma de sal farmacéuticamente aceptable como en la forma neutra.
El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal farmacéutica, es decir, dentro del alcance del criterio médico sensato, adecuada para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales inferiores sin excesiva toxicidad, irritación y respuesta alérgica, y es proporcional en una relación beneficio/riesgo razonable. Se conocen bien en la técnica las sales farmacéuticamente aceptables. Por ejemplo, S. M. Berge et al. describen sales farmacológicamente aceptables en J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19.
En las presentes enseñanzas se incluyen sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos desvelados en el presente documento. Los compuestos que tienen grupos básicos pueden formar sales farmacéuticamente aceptables con ácido(s) farmacéuticamente aceptable(s). Las sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables adecuadas de los compuestos descritos en el presente documento incluyen sales de ácidos inorgánicos (tales como ácido clorhídrico, ácidos bromhídrico, fosfórico, metafosfórico, nítrico y sulfúrico) y de ácidos orgánicos (tales como ácido acético, ácidos bencenosulfónico, benzoico, etanosulfónico, metanosulfónico, succínico y trifluoroacético). Los compuestos de las presentes enseñanzas con grupos ácidos, tales como ácidos carboxílicos, pueden formar sales farmacéuticamente aceptables con base(s) farmacéuticamente aceptable(s). Las sales básicas farmacéuticamente aceptables adecuadas incluyen sales de amonio, sales de metales alcalinos (tales como sales de sodio y potasio) y sales de metales alcalinotérreos (tales como sales de magnesio y calcio).
Definiciones
El término "halo", como se usa en el presente documento, significa halógeno e incluye flúor, cloro, bromo y yodo. El término "alquilo", usado solo o como parte de un resto mayor, tal como "alcoxi" o "haloalquilo" y similares, significa radical de hidrocarburo monovalente de cadena lineal o ramificado alifático saturado. A menos que se especifique de otro modo, un grupo alquilo tiene normalmente 1-5 átomos de carbono, es decir, alquilo (C1-C5). Como se usa en el presente documento, un grupo "alquilo (C1-C5)" significa un radical que tiene desde 1 hasta 5 átomos de carbono en una disposición lineal o ramificada. Los ejemplos incluyen metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo y similares.
El término "alcoxi" significa un radical alquilo unido mediante un átomo de enlace del oxígeno, representado por -O­ alquilo. Por ejemplo, "alcoxi (C1-C4)" incluye metoxi, etoxi, propoxi y butoxi.
Los términos "haloalquilo" y "haloalcoxi" significan alquilo o alcoxi, según lo requiera el caso, sustituido con uno o más átomos de halógeno.
Un "grupo alquileno" es un radical de hidrocarburo divalente ramificado o de cadena lineal alifático saturado. A menos que se especifique de otro modo, un grupo alquileno tiene normalmente 2-6 átomos de carbono, por ejemplo alquileno (C2-C6).
El término "alquenilo" significa un radical de hidrocarburo monovalente ramificado o de cadena lineal que contiene al menos un doble enlace. Alquenilo puede ser mono o poliinsaturado, y puede existir en la configuración E o Z. A menos que se especifique de otro modo, un grupo alquenilo tiene normalmente 2-6 átomos de carbono, es decir, alquenilo (C2-C6). Por ejemplo, "alquenilo (C2-C4)" significa un radical que tiene desde 2-4 átomos de carbono en una disposición lineal o ramificada.
El término "cicloalquilo" significa un sistema de anillos de hidrocarburo saturado monocíclico. Por ejemplo, un cicloalquilo C3-C6 incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. A menos que se describa de otro modo, un "cicloalquilo" tiene desde tres hasta siete átomos de carbono del anillo.
Un cicloalquilo puenteado significa un sistema de anillos de hidrocarburo bicíclico no aromático en el que los dos anillos comparten al menos tres átomos de carbono del anillo adyacentes. Un cicloalquilo puenteado tiene normalmente 6-12 átomos de carbono del anillo. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, biciclo[2.1.1]hexilo, biciclo[2.2.1]heptilo, biciclo [2.2.2]octilo, biciclo[3.2.1]octilo, biciclo[4.3.1]decilo, biciclo[3.3.1]nonilo, bornilo, bornenilo, norbornilo, norbornenilo, 6,6-dimetilbiciclo[3.1.1]heptilo, triciclobutilo y adamantilo.
Los términos "heterociclilo", "anillo heterocíclico" y "grupo heterocíclico" se usan indistintamente en el presente documento, y significan un radical de anillo de 4-10 miembros no aromático saturado o insaturado que contiene desde 1 hasta 4 anillo heteroátomos, que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de N, O o S. Puede ser monocíclico, bicíclico o tricíclico (por ejemplo, un anillo bicíclico o tricíclico condensado o puenteado). Los ejemplos de incluyen, pero no se limitan a, azetidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, hidantoinilo, valerolactamilo, oxiranilo, oxetanilo, dihidroimidazol, dihidrofuranilo, dihidropiranilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidrotienilo, dihidrotiofenilo, dihidrotiopiranilo, tetrahidroimidazol, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo y tetrahidrotiopiranilo. Un anillo heterocíclico contiene opcionalmente uno o más dobles enlaces y/o está condensado opcionalmente con uno o más anillos aromáticos (por ejemplo, tetrahidronaftiridina, indolinona, dihidropirrolotriazol, imidazopirimidina, quinolinona, dioxaespirodecano).
Los ejemplos de anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros incluyen, pero no se limitan a, azetidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, hidantoinilo, valerolactamilo, oxiranilo, oxetanilo, dihidroimidazol, dihidrofuranilo, dihidropiranilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidrotienilo, dihidrotiofenilo, dihidrotiopiranilo, tetrahidroimidazol, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo y tetrahidrotiopiranilo.
Un heterociclilo puenteado significa un sistema bicíclico de anillos no aromáticos que contienen desde 1 hasta 4 heteroátomos del anillo en el que los dos anillos comparten al menos tres átomos de anillo adyacentes. Un heterociclilo puenteado tiene normalmente 6-12 átomos de anillo. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, azanorbornilo, quinuclidinilo, isoquinuclidinilo, tropanilo, azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[2.2.1]heptanilo, 2-azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.2]nonanilo, azabiciclo[3.3.0]nonanilo y azabiciclo[3.3.1]nonanilo.
Los términos "heteroarilo", "heteroaromático", " anillo de heteroarilo", "grupo heteroarilo", "anillo heteroaromático" y "grupo heteroaromático" se usan indistintamente en el presente documento. "Heteroarilo", cuando se usa solo o como parte de un resto mayor como en "heteroaralquilo" o "heteroarilalcoxi", se refiere a grupos de anillo aromático que tienen cinco a diez átomos de anillo seleccionados de carbono y al menos un heteroátomo (normalmente 1 a 4, más normalmente 1 o 2) (por ejemplo, oxígeno, nitrógeno o azufre). "Heteroarilo" incluye anillos monocíclicos y anillos policíclicos en los que un anillo heteroaromático monocíclico está fusionado con uno o varios de otros anillos aromáticos o heteroaromáticos. "Heteroarilo" incluye sistemas de anillos monocíclicos y bicíclicos.
"Anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico (o heteroarilo)" significa un anillo heteroaromático monocíclico que tiene cinco o seis átomos de anillo seleccionados de carbono y al menos un heteroátomo (normalmente 1 a 3, más normalmente 1 o 2) (por ejemplo, oxígeno, nitrógeno o azufre). Los ejemplos de grupos de anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico incluyen furanilo (por ejemplo, 2-furanilo, 3-furanilo), imidazolilo (por ejemplo, N-imidazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, 5-imidazolilo), isoxazolilo (por ejemplo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo), oxadiazolilo (por ejemplo, 2-oxadiazolilo, 5-oxadiazolilo), oxazolilo (por ejemplo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 5-oxazolilo), pirazolilo (por ejemplo, 3-pirazolilo, 4-pirazolilo), pirrolilo (por ejemplo, 1 -pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo), piridilo (por ejemplo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo), pirimidinilo (por ejemplo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo, 5-pirimidinilo), piridazinilo (por ejemplo, 3-piridazinilo), tiazolilo (por ejemplo, 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo), isotiazolilo, triazolilo (por ejemplo, 2-triazolilo, 5-triazolilo), tetrazolilo (por ejemplo, tetrazolilo) y tienilo (por ejemplo, 2-tienilo, 3-tienilo).
Si se describe que un grupo está "sustituido", un sustituyente distinto de hidrógeno sustituye a un hidrógeno en un carbono o nitrógeno del sustituyente. Por lo tanto, por ejemplo, un alquilo sustituido es un alquilo en donde al menos un sustituyente distinto de hidrógeno está en el lugar de un sustituyente de hidrógeno en el sustituyente alquilo. Para ilustrar, monofluoroalquilo es alquilo sustituido con un sustituyente flúor, y difluoroalquilo es alquilo sustituido con dos sustituyentes flúor. Se debe reconocer que si existe más de una sustitución en un sustituyente, cada sustituyente distinto de hidrógeno puede ser idéntico o diferente (a menos que se establezca de otro modo). Como se usa en el presente documento, se denomina que muchos restos (por ejemplo, alquilo, cicloalquilo, o un anillo heterocíclico) están o "sustituidos" u "opcionalmente sustituidos". Cuando un resto se modifica por uno de estos términos, a menos que se indique lo contrario, indica que se puede sustituir cualquier porción del resto que se conoce por un experto en la técnica como que está disponible para sustitución, que incluye uno o más sustituyentes. Si está presente más de un sustituyente, entonces cada sustituyente se selecciona independientemente. Dichos medios de sustitución se conocen bien en la técnica y/o enseñan por la presente divulgación. Los sustituyentes opcionales pueden ser cualquier sustituyente que sea adecuado para la unión al resto. Un experto habitual en la técnica reconocerá que los compuestos y las definiciones proporcionadas no incluyen patrones de sustituyentes no permisivos (por ejemplo, metilo sustituido con 5 grupos diferentes, y similares). Dichos patrones de sustituyentes no permisivos son claramente reconocidos por un experto habitual en la técnica. Cuando se describe que un grupo está opcionalmente sustituido con "uno o más" sustituyentes, indica que el grupo está sustituido opcionalmente por uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis sustituyentes. En una realización, un grupo está sustituido opcionalmente por 1-3 sustituyentes. En una realización, un grupo está sustituido opcionalmente por 1-2 sustituyentes. En una realización, un grupo está sustituido opcionalmente por un sustituyente.
Los sustituyentes adecuados son los que no tienen un efecto adverso significativo sobre la capacidad del compuesto para inhibir RAD51. Donde sustituyentes adecuados no sean específicamente enumerados, los sustituyentes a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, halometilo, halometoxi, alquilo (C1-C5), haloalquilo (C1-C5), alcoxi (C1-C5), -NO2 , -ORc', -NRa'Rb', -S(O)iRa', -NRaS(O)iRb', -S(O)iNRaRb', -C(=O)ORa', -OC(=O)ORa', -C(=S)ORa', -O(C=S)Ra', -C(=O)NRa'Rb', -NRa'C(=O)Rb', -C(=S)NRa'Rb', -NRa'C(=S)Rb', -NRa'(C=O)ORb', -O(C=O)NRa'Rb', -NRa'(C=S)ORb', -O(C=S)NRa'Rb', -NRa'(C=O)NRa'Rb', -NRa'(C=S)NRa'Rb', -C(=S)Ra', -C(=O)Ra', cicloalquilo (C3-C6), heteroarilo monocíclico y fenilo, en donde los sustituyentes cicloalquilo (C3-C6), heteroarilo monocíclico y fenilo están sustituidos opcionalmente e independientemente con -CH3 , halometilo, halógeno, metoxi o halometoxi. Cada Ra' y cada Rb' se selecciona independientemente de -H y alquilo (C1-C5), en donde el grupo alquilo (C1-C5) representado por Ra' o Rb' está sustituido opcionalmente con hidroxilo o alcoxi (C1-C3); Rc' es -H, haloalquilo (C1-C5) o alquilo (C1-C5), en donde el grupo alquilo (C1-C5) representado por Rc está sustituido opcionalmente con hidroxilo o alcoxi (C1-C3); y i es 0, 1 o 2. =O también es un sustituyente adecuado para alquilo, cicloalquilo y un anillo heterocíclico.
Los compuestos que tienen uno o más centros quirales pueden existir en diversas formas estereoisoméricas. Los estereoisómeros son compuestos que se diferencian solo en su disposición espacial. Los estereoisómeros incluyen todas las formas diaestereoméricas, enantioméricas y epiméricas, así como racematos y mezclas de los mismos.
El término "isómero geométrico" se refiere a compuestos cíclicos que tienen al menos dos sustituyentes, en donde los dos sustituyentes están ambos en el mismo lado del anillo (cis) o en donde los sustituyentes están cada uno en lados opuestos del anillo (trans). Cuando un compuesto desvelado se nombra o representa por la estructura sin indicar la estereoquímica, se entiende que el nombre o la estructura engloba uno o más de los posibles estereoisómeros, o isómeros geométricos, o una mezcla de los estereoisómeros o isómeros geométricos englobados.
Cuando un isómero geométrico se representa por el nombre o la estructura, se debe entender que el isómero nombrado o representado existe en un mayor grado que otro isómero, que es que la pureza isomérica geométrica del isómero geométrico nombrado o representado es superior al 50 %, tal como al menos del 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 99 % o 99,9 % de pureza en peso. La pureza isomérica geométrica se determina dividiendo el peso del isómero geométrico mencionado o representado en la mezcla entre el peso total de todos los isómeros geométricos en la mezcla.
Mezcla racémica significa 50 % de un enantiómero y 50 % del enantiómero correspondiente. Cuando un compuesto con un centro quiral se nombra o representa sin indicar la estereoquímica del centro quiral, se entiende que el nombre o la estructura engloba ambas formas enantioméricas posibles (por ejemplo, tanto enantioméricamente puras, enantioméricamente enriquecidas como racémicas) del compuesto. Cuando se nombra o representa un compuesto con dos o más centros sin indicar la estereoquímica de los centros quirales, se entiende que el nombre o la estructura engloba todas las posibles diaestereoméricas (por ejemplo, diaestereoméricamente puras, diaestereoméricamente enriquecidas y mezclas equimolares de uno o más diaestereómeros (por ejemplo, mezclas racémicas) del compuesto.
Se pueden resolver mezclas enantioméricas y diaestereoméricas en sus enantiómeros o estereoisómeros componentes por métodos bien conocidos, tales como cromatografía de gases en fase quiral, cromatografía líquida de alta resolución en fase quiral, cristalización del compuesto como complejo de sal quiral o cristalización del compuesto en un disolvente quiral. También se pueden obtener enantiómeros y diaestereómeros de productos intermedios diaestereoméricamente o enantioméricamente puros, reactivos y catalizadores por métodos de síntesis asimétrica bien conocidos.
Cuando un compuesto se designa por un nombre o estructura que indica un enantiómero individual, a menos que se indique lo contrario, el compuesto es al menos 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 99 % o 99,9 % ópticamente puro (también denominado "enantioméricamente puro"). La pureza óptica es el peso en la mezcla del enantiómero nombrado o representado dividido entre el peso total en la mezcla de ambos enantiómeros.
Cuando la estereoquímica de un compuesto desvelado se nombra o representa por estructura, y la estructura nombrada o representada engloba más de un estereoisómero (por ejemplo, como en un par diaestereomérico), se debe entender que se incluye uno de los estereoisómeros englobados o cualquier mezcla de los estereoisómeros englobados. Se debe entender además que la pureza estereoisomérica de los estereoisómeros nombrados o representados es al menos del 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 99 % o 99,9 % en peso. La pureza estereoisomérica en este caso se determina dividiendo el peso total en la mezcla de los estereoisómeros englobados por el nombre o la estructura entre el peso total en la mezcla de todos los estereoisómeros.
Composiciones farmacéuticas
Los compuestos desvelados en el presente documento son inhibidores de RAD51. La composición farmacéutica de la presente invención comprende uno o más inhibidores de RAD51, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
"Vehículo farmacéuticamente aceptable" y "diluyente farmacéuticamente aceptable" se refieren a una sustancia que ayuda en la formulación y/o administración de un agente activo a y/o absorción por un sujeto, y se puede incluir en las composiciones de la presente divulgación sin causar un efecto toxicológico adverso significativo sobre el sujeto. Los ejemplos no limitantes de vehículos y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables incluyen agua, NaCl, soluciones salinas normales, Ringer con lactato, sacarosa normal, glucosa normal, aglutinantes, cargas, disgregantes, lubricantes, recubrimientos, edulcorantes, aromas, disoluciones salinas (tales como disolución de Ringer), alcoholes, aceites, gelatinas, hidratos de carbono, tales como lactosa, amilosa o almidón, ésteres de ácidos grasos, hidroximetilcelulosa, polivinilpirrolidina y colorantes, y similares. Dichas preparaciones se pueden esterilizar y, si se desea, mezclar con agentes auxiliares, tales como lubricantes, conservantes, estabilizadores, humectantes, emulsionantes, sales para influir en la presión osmótica, tampones, colorantes y/o sustancias aromáticas y similares que no reaccionan perjudicialmente con o interfieren con la actividad de los compuestos proporcionados en el presente documento. Un experto habitual en la técnica reconocerá que otros excipientes farmacéuticos son adecuados para su uso con los compuestos desvelados.
Las composiciones farmacéuticas de las presentes enseñanzas incluyen opcionalmente uno o más vehículos y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables para los mismos, tales como lactosa, almidón, celulosa y dextrosa. También se pueden incluir otros excipientes, tales como aromatizantes; edulcorantes; y conservantes, tales como metil-, etil-, propil- y butil-parabenos. Listados más completos de excipientes adecuados se pueden encontrar en Handbook of Pharmaceutical Excipients (5a Ed., Pharmaceutical Press (2005)). Un experto en la técnica conocería como preparar formulaciones adecuadas para diversos tipos de vías de administración. Los procedimientos y componentes convencionales para la selección y la preparación de formulaciones adecuadas se describen, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Sciences (2003 - 20a edición) y en la Farmacopea de los Estados Unidos: The National Formulary (USP 24 NF19) publicada en 1999. Los vehículos, diluyentes y/o excipientes son "aceptables" en el sentido de ser compatibles con los otros componentes de la composición farmacéutica y no perjudiciales para el receptor de la misma.
Métodos de tratamiento
La presente invención desvela un método de tratamiento de un sujeto con una enfermedad que puede ser mejorada por la inhibición de RAD51, administrando al sujeto una cantidad eficaz de uno o más compuestos desvelados, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o la composición farmacéutica correspondiente. Las enfermedades que pueden ser mejoradas por inhibición de RAD51 incluyen tratamiento del cáncer, enfermedad autoinmunitaria, deficiencia inmunitaria o enfermedad neurodegenerativa.
En un aspecto, en el presente documento se describe un método de tratamiento de cáncer, enfermedad autoinmunitaria, deficiencia inmunitaria o enfermedad neurodegenerativa, comprendiendo el método administrar una dosis terapéuticamente eficaz de una composición como se describe en el presente documento, por ejemplo, una composición que comprende un compuesto de la presente invención, a un sujeto en necesidad de tratamiento para cáncer, enfermedad autoinmunitaria, deficiencia inmunitaria o enfermedad neurodegenerativa.
En algunas realizaciones, el sujeto puede ser un sujeto que se ha determinado que tiene un aumento del nivel de daño de ADN que ocurre en uno o más tipos de células con respecto a un nivel de referencia. Como se usa en el presente documento, "daño de ADN" se refiere a roturas, mellas y mutaciones del ADN presente en una célula. En algunas realizaciones, el daño de ADN puede comprender una o más roturas monocatenarias (por ejemplo, "mellas"), roturas bicatenarias (DSB) y mutaciones. En algunas realizaciones, el daño de ADN puede ser una o más DSB. Como se usa en el presente documento, "mutación" se refiere a un cambio o diferencia en el material genético de una célula en comparación con una célula natural de referencia, por ejemplo, una deleción, una inserción, un SNP, una reordenación génica y/o la introducción de una secuencia o gen exógeno.
En algunas realizaciones, se puede determinar que el sujeto tiene un aumento del nivel de daño de ADN si el sujeto se determina que tiene un aumento del nivel y/o la actividad de un proceso de daño de ADN o enzima editora de ADN.
Como se usa en el presente documento, "proceso de daño de ADN" se refiere a cualquier actividad o proceso en una célula que hace que ocurran uno o más tipos de daño de ADN.
En algunas realizaciones, un aumento del nivel de daño de ADN puede ser un aumento del nivel de mutaciones, por ejemplo, por determinación del estado global de mutaciones en todo o una porción del genoma de una célula. Un estado global de mutaciones al menos el 2 % mayor, por ejemplo el 2 % mayor o más, el 3 % mayor o más, el 5 % mayor o más, el 10 % mayor o más, o el 20 % mayor o superior al estado global de mutaciones en una célula de referencia, puede ser indicativo de un aumento, elevación y/o nivel significativo de una actividad enzimática editora de ADN. En algunas realizaciones, se puede determinar el nivel de hipermutaciones. En algunas realizaciones, el estado global de mutaciones en el genoma completo o una porción del mismo se puede determinar usando FISH, secuenciación del genoma completo, secuenciación de alto rendimiento, secuenciación de exomas, hibridación y/o PCR. En algunas realizaciones, la actividad de una enzima editora de ADN se puede medir determinando el nivel de hipermutaciones en los genes diana específicos que incluyen, pero no se limitan a IGH, BCL6, MYC, BCLl 1A, CD93, PIMl y/o PAX5. En ciertas realizaciones, la enzima editora de ADN es AID. En algunas realizaciones, un nivel de mutación en genes diana específicos que incluye IGH, BCL6, MYC, BCLl 1A, CD93, PIMl y/o PAX5 que es al menos 2 % mayor, por ejemplo 2 % mayor o más, 3 % mayor o más, 5 % e mayor o más, 10 % mayor o más, o 20 % mayor o superior al nivel de mutaciones en IGH, BCL6, My C, BCLl 1A, CD93, PIMl y/o PAX5 en una célula de referencia puede ser indicativo de un aumento, elevación y/o nivel significativo de actividad de AID.
En algunas realizaciones, un aumento del nivel de daño de ADN puede ser un aumento del nivel de roturas bicatenarias (DSB). El nivel de DSB se puede determinar, a modo de ejemplo no limitante, por cariotipado, por formación de focos de Y-H2AX y/o usando análisis de FISH para detectar roturas bicatenarias de ADN, por ejemplo detección de roturas de A d N-FISH (DBD-FISH) (Volpi y Bridger, BioTechniques, Vol. 45, N.° 4, octubre de 2008, pp. 385-409).
En algunas realizaciones, un aumento del nivel de daño de ADN puede ser un aumento del nivel de roturas monocatenarias. El nivel de roturas monocatenarias en ADN se puede determinar, a modo de ejemplo no limitante, por ensayos COMET, FISH, o el uso de sondas específicas de roturas monocatenarias. La detección de roturas de ADN, tanto mono- como bicatenarias, se conoce en la técnica y se describe además en, por ejemplo, Kumari et al. EXCLI Journal 2009 7:44-62 y Motalleb et al. Research Journal of Applied Sciences, Engineering and Technology.
20124: 1888-1894.
En algunas realizaciones, un aumento del nivel de actividad de un proceso de daño de ADN puede comprender un aumento del nivel y/o la actividad de una enzima editora de ADN. En algunas realizaciones, la tecnología descrita en el presente documento se refiere al tratamiento de células que tienen una enzima editora de ADN activa con un compuesto de la presente invención. En algunas realizaciones, la tecnología descrita en el presente documento se refiere al tratamiento de células que tienen un aumento del nivel y/o la actividad de una enzima editora de ADN con un compuesto de la presente invención. Como se usa en el presente documento, "enzima editora de ADN" se refiere a una enzima que normalmente cataliza la mutación, intercambio o corte de segmentos de ADN, particularmente enzimas que pueden generar o promover la generación de mutaciones puntuales, roturas monocatenarias de ADN, roturas bicatenarias de ADN o aductos de proteína-ADN. Una enzima editora de ADN, como se denomina en el presente documento, no es necesariamente específica de sitio en su acción. Similarmente, no es necesariamente específica de célula. En algunas realizaciones, la célula es un linfocito B que expresa una cantidad detectable de dicha enzima.
Los ejemplos no limitantes de enzimas editoras de ADN incluyen, pero no se limitan a, gen 1 activante de la recombinación (RAG1; NCBI Gene ID: 5896), gen 1 activante de la recombinación (RAG2; NCBI Gene ID: 5897), proteína 11 específica de la esporulación (SPOl 1; NCBI Gene ID: 23626), miembros de la familia APOBEC, una apoisomerasa de tipo 1; una apoisomerasa de tipo 2; y/o AID. En algunas realizaciones, la enzima editora de ADN puede ser AID.
En algunas realizaciones, la enzima editora de ADN puede ser un miembro de la familia APOBEC (enzima editora de ARNm de la apolipoproteína B, de tipo polipéptido catalítico). Como se usa en el presente documento, la "familia APOBEC" se refiere a una familia de enzimas citidina desaminasa que tienen un dominio catalítico de citidina desaminasa dependiente de cinc aminoterminal que comprende un dominio pseudocatalítico carboxiterminal. Los ejemplos no limitantes de los miembros de la familia APOBEC incluyen AID, APOBEC 1 (por ejemplo, NCBI Gene ID: 339), APOBEC2 (por ejemplo, NCBI Gene ID: 10930), APOBEC3A (por ejemplo, NCBI Gene ID: 200315), APOBEC3C (por ejemplo, NCBI Gene ID: 27350), APOBEC3E (por ejemplo, NCBI Gene iD: 140564), APOBEC3F (por ejemplo, NCBI Gene ID:200316), APOBEC3G (por ejemplo, Nc BI Gene ID: 60489), APOBEC3H (por ejemplo, n Cb I Gene ID: 164668) y APOBEC4 (por ejemplo, NCBI Gene ID: 403314).
En algunas realizaciones, la enzima editora de ADN puede ser una apoisomerasa de tipo 1. En algunas realizaciones, la enzima editora de ADN puede ser una apoisomerasa de tipo 2. Las topoisomerasas generan roturas en el ADN para ayudar a desenrollar o relajar la cadena. Las topoisomerasas de tipo lI hidrolizan el ATP generando cortes de DSB, mientras que las topoisomerasas de tipo I generan roturas monocatenarias. Los ejemplos no limitantes de topoisomerasas de tipo II pueden incluir topoisomerasa II (por ejemplo, NCBI Gene ID: 7153 y 7155). Los ejemplos no limitantes de topoisomerasas de tipo I pueden incluir la topoisomerasa I (por ejemplo, NCBI Gene ID: 7150).
Las realizaciones de la tecnología descritas en el presente documento se basan en el descubrimiento de que los compuestos descritos en el presente documento pueden inhibir los mecanismos de reparación de ADN, por ejemplo, reparación homóloga. La citidina desaminasa inducida por activación (AID, o AICDA, también conocida como ARP2, CDA2 o HIGM2), una enzima editora de ADN que es un miembro de las enzimas editoras de ARNm de apolipoproteína B, de tipo polipéptido catalítico (APOBEC), causarán roturas genómicas generalizadas y muerte celular en células con capacidad reducida de recombinación homóloga (por ejemplo, células con capacidades de reparación de roturas bicatenarias de ADN reducidas). Por consiguiente, en el presente documento se proporciona un método de causar la muerte celular que comprende detectar la elevada expresión de una enzima editora de ADN (por ejemplo, AID) en una célula y a partir de aquí poner en contacto la célula con un compuesto de la presente invención; dando así como resultado la muerte celular. Por consiguiente, en el presente documento se proporciona un método de causar la muerte celular que comprende aumentar la expresión de una enzima editora de ADN (por ejemplo, AID) en una célula y a partir de aquí poner en contacto la célula con un compuesto de la presente invención; dando así como resultado la muerte celular. Por consiguiente, en el presente documento se proporciona un método de causar la muerte celular que comprende administrar a una célula una cantidad terapéuticamente eficaz de una enzima editora de ADN (por ejemplo, AID) y a partir de aquí poner en contacto la célula con un compuesto de la presente invención; dando así como resultado la muerte celular.
AID, codificada por el gen AICDA (NCBI Gene ID: 57379), se requiere para la apropiada función de linfocitos B y se expresa lo más prominentemente en linfocitos B de centroblasto. La proteína participa en hipermutación somática, conversión génica y recombinación de cambio de clase de genes de inmunoglobulina. AID se expresa normalmente casi exclusivamente en linfocitos B de centros germinales activados por antígeno, donde inicia el cambio de clase de isotipo de inmunoglobulina (Manis et al. 2002, Trends Immunol, 23, 31-39; Chaudhuri y Alt, Nat Rev Immunol, 2004, 4, 541-552; Longerich et al., Curr Opin Immunol, 2006, 18, 164-174; Chaudhuri et al., Adv Immunol 2007, 94, 157­ 214). AID se requiere para la hipermutación somática y cambio de clase de inmunoglobulina en linfocitos B activados. La expresión de AID está regulada por el ligando CD40, receptor de linfocitos B, IL4R o estimulación del receptor del tipo toll (Crouch et al., J Exp Med 2007204: 1145-1156; Muramatsu et al., J Biol Chem 1999274: 18470-6). Después de la activación, AID se regula transitoriamente por incremento, induce mutaciones puntuales o roturas bicatenarias de ADN en un modo no específico de secuencia dentro de genes de inmunoglobulina, y entonces se regula por disminución (Longerich et al., Curr Opin Immunol, 2006, 18, 164-176; Chaudhuri et al., Adv Immunol 2007, 94, 157­ 214). En general, AID solo es activo en una minúscula población de células normales (linfocitos B activados por antígeno) en cualquier momento dado. Las transposiciones y mutaciones genómicas controladas por AID conducen al desarrollo de diversidad de reconocimiento de antígenos, edición de receptores y función efectora linfoide requerida para la inmunidad adaptativa funcional (Mills, et al., Immunol Rev 2003 194:77-95). Recientemente se ha informado que AID tiene actividades de mutaciones puntuales inespecíficas (Liu, M. et al., Nature 2008, 451, 841-845; Liu y Schatz, Trends Immunol. 2009, 30, 173-181; Perez-Duran et al., Carcinogenesis. 2007, 28(12):2427-33). Robbiani et al. han informado de actividades inespecíficas de AID en linfocitos B, especialmente translocaciones c-myc/IgH (Robbiani et al., Mol Cell 2009, 36(4):631 -41). La expresión de AID acelera la tasa de desarrollo de tumores en ratones transgénicos Bcl6 (Pasqualucci et al., 2008, Nat. Genet. 40, 108-112). Sin embargo, AID desrregulada no provoca necesariamente tumor maligno o cáncer asociado a la translocación por sí misma en linfocitos B (Muto et al., 2006, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103, 2752-2757; Okazaki et al., 2003, J. Exp. Med. 197, 1173-1181; Shen et al., 2008, Mol. Immunol. 45, 1883-1892). Además, a pesar de su función estricta en la translocación de c-myc/IgH, AID no se requiere para el desarrollo de plasmacitosis o plasmacitoma en ratones transgénicos IL-6 o tratados con pristano, respectivamente (Kovalchuk et al., 2007, J. Exp. Med. 204, 2989-3001; Ramiro et al., 2004, J. Exp. Med. 200, 1103­ 1110). Sin embargo, la mayoría de las translocaciones asociadas a linfoma de linfocitos B humano no implican a cmyc, y muchos no implican a genes Ig (Kuppers, 2005, Oncogene 20, 5580-5594).
Se ha informado de la expresión en exceso de AID en leucemia linfocítica crónica (CLL) (Hancer et al. Leuk Lymphoma.
2011 Jan;52(l):79-84; Heintel et al., Leukemia. 2004 Apr; 18(4):756-62). Además, se ha mostrado que la expresión de AID se correlaciona con leucemia de linaje B de crisis hemoblástica y resistencia a terapia en leucemia mieloide y se asocia, en general, con mal pronóstico en leucemia linfocítica B crónica (Mao et al., Br J Dermatol 2001, 145: 117-122; Chaudhuri et al., Nature 2004, 430:992-8). Se ha informado que la expresión adicional de AID en células tumorales de una variedad de cánceres incluye, pero no se limita a, cáncer de pulmón, mama, gástrico, colon, intestinal, de hígado y coriangiocarcinoma (Greeve et al., Blood 2003, 1010, 3574-3580; Feldhahn et al., J Exp Med 2007, 204, 1157-1166; Kotani et al., PNAS u Sa 2007, 104, 1616-1620; Engels et al., 2008, Appl Immunohistochem Mol Morphol 16, 521 -529; Klemm et al., 2009, Cancer Cell 6, 232-245; Palacios et al., 2010, Blood 115(22), 4488-4496; Leuenberger et al., 2009, Mod Pathol 32, 177-186; Gruber et al., 2010, Cancer Res 70, 7411-7420; cáncer inflamatorio (Marusawa 2008, Int J Biochem Cell Biol.40, 399-402); linfoma folicular (Hardianti et al., 2004, Leukemia 18, 826-831; Shikata et al., 2012, Cancer Sci. 103(3):415-21); cáncer de tiroides (Qiu et al. 2012, Mod Pathol 25(1 ),36-45); cáncer de mama (Borchert et al. 2011, BMC Cancer 11:347); Marusawa, et al., 2011, Adv Immunol 111 : 109-41; zhang et al. 2012, Hum Pathol 43(3):423-34; Komori et al., 2008, Hepatology 47(3):888-896; Hockley 2010, Leukemia 24(5): 1084-6; leucemia de linfocitos T del adulto (Nakamura et al., 2011, Br J Dermatol. 165(2):437-9).
Se ha informado de niveles elevados de AID en artritis (Xu et al. Scand. J. Immunol. 2009, 296, 2033-6) y en el modelo de lupus de ratón MRL/Fas(lpr/lpr) (White et al. 2011, Autoimmunity 44(8), 585-98).
Cuando se inhibe la reparación de DSB, el grado de DSB generadas por AID es muy superior al previamente sospechado y el grado de daño genómico es tan grave que produce muerte celular. Por consiguiente, en una realización de la tecnología descrita en el presente documento, se proporciona un método de tratamiento que comprende: (a) seleccionar un sujeto que tiene células que expresan niveles elevados de citidina desaminasa inducida por activación (AID); y (b) administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de la reparación de roturas bicatenarias (por ejemplo, un compuesto de la presente invención) al sujeto; en donde un elevado nivel de AID es un nivel de AID que es superior al nivel de AID en células del mismo tipo de un individuo sano. En algunas realizaciones, las células que expresan niveles elevados de AID son linfocitos B. En algunas realizaciones, el linfocito B que expresa niveles elevados de AID es un linfocito B canceroso o un linfocito B asociado a enfermedad autoinmunitaria. En algunas realizaciones, el sujeto puede ser un sujeto humano.
Los métodos descritos en el presente documento tratan cánceres y/o trastornos autoinmunitarios inhibiendo la reparación de roturas bicatenarias de ADN. Esta inhibición ha demostrado ser letal para las células que expresan AID, ya que AID genera roturas genómicas generalizadas, y el tratamiento con un inhibidor de la reparación de roturas bicatenarias previene la reparación de estas lesiones que están siendo generadas por la célula en sí. Esto da como resultado la muerte celular en el sujeto que es específica de las células que expresan AID, por ejemplo, linfocitos B cancerosos y/o células autoinmunitarias. Por consiguiente, como se describe en el presente documento, en una realización se proporciona un paradigma de tratamiento que induce selectivamente la autodestrucción de ciertas células enfermas, mientras que se reducen los efectos secundarios no deseados en tejidos sanos.
En algunas realizaciones, un aumento del nivel y/o la actividad de una enzima editora de ADN puede ser un aumento del nivel de ARNm de enzima editora de ADN. Los niveles de ARNm se pueden evaluar usando, por ejemplo, técnicas bioquímicas y de biología molecular, tales como transferencia Northern u otros ensayos de hibridación, ensayo de protección de nucleasas, técnicas de transcripción inversa (RT-PCR cuantitativa), ARN-Seq, secuenciación de alto rendimiento y similares. Dichos ensayos son bien conocidos por los expertos en la técnica. En una realización, se usan ensayos de transcripción nuclear "iniciada" (o "no iniciada") (véanse, por ejemplo, Methods in Molecular Biology, Volume: 49 , Sep-27-1995, intervalo de páginas: 229-238). También se pueden usar matrices; matrices y métodos de análisis de ARNm usando dichas matrices se han descrito previamente, por ejemplo, en los documentos de patente EP0834575, EP0834576, WO96/31622, la patente de EE. UU. N.25.837.832 o WO98/30883. El documento de patente WO97/10365 proporciona métodos de monitorización de los niveles de expresión de una multiplicidad de genes usando matrices de oligonucleótidos de alta densidad.
En algunas realizaciones, se puede determinar que un sujeto tiene un aumento del nivel de daño de ADN que ocurre en uno o más tipos de células con respecto a un nivel de referencia si el sujeto se ha expuesto a un agente que se conoce que causa dicho daño de ADN. Los ejemplos no limitantes de dichos agentes pueden incluir una infección vírica con un virus integrante de ADN (por ejemplo, virus adeno-asociado, retrovirus, virus linfotrópico T humano, VIH-1, oncovirus, virus de la hepatitis, virus de la hepatitis B); productos químicos que dañan el ADN (por ejemplo acetaldehído, hidrocarburos aromáticos policíclicos, bencenos, nitrosaminas, humo del tabaco, aflatoxina y similares); agentes quimioterapéuticos que dañan el ADN (por ejemplo, bleomicina, mitomicina, mostazas nitrogenadas (por ejemplo, mecloretamina, ciclofosfamida, melfalán, clorambucilo, ifosfamida y busulfán), nitrosoureas (por ejemplo, N-nitroso-N-metilurea (m Nu ), carmustina (BCNU), lomustina (CCNU) y semustina (MeCCNU), fotemustina y estreptozotocina), tetrazinas (por ejemplo, dacarbazina, mitozolomida y temozolomida), aziridinas (por ejemplo, tiotepa, mitomicina y diaziquona (AZQ)), cisplatinos (por ejemplo, cisplatino, carboplatino y oxaliplatino), procarbazina y hexametilmelamina); y radiación ionizante o ultravioleta. La exposición a dichos agentes puede ser el resultado de un accidente, una infección y/o exposición medioambiental, o el resultado de una administración terapéutica de dichos agentes.
En algunas realizaciones, el aumento del nivel de daño de ADN puede ser que ocurra en un tipo de célula afectada por el cáncer, enfermedad autoinmunitaria y/o enfermedad neurodegenerativa. En algunas realizaciones, se determina que el sujeto tiene un aumento del nivel de daño de ADN que ocurre en una célula seleccionada del grupo que consiste en: una célula cancerosa; una célula del sistema inmunitario; o una célula del sistema nervioso.
En algunas realizaciones, la enzima editora de ADN puede ser AID. En algunas realizaciones, el nivel de AID puede ser el nivel de AID en un glóbulo sanguíneo. En algunas realizaciones, el nivel de AID puede ser el nivel de AID en un linfocito B.
En algunas realizaciones, un aumento del nivel de AID puede ser un nivel detectable de AID, por ejemplo, como se describe a continuación en el presente documento.
En algunas realizaciones, el sujeto puede ser un sujeto humano.
Los métodos descritos en el presente documento tratan cánceres y/o trastornos autoinmunitarios inhibiendo la reparación de roturas bicatenarias de ADN. Esta inhibición demuestra ser letal para las células que expresan AID, ya que AID genera roturas genómicas generalizadas, y el tratamiento con un inhibidor de la reparación de roturas bicatenarias previene la reparación de estas lesiones que están siendo generadas por la propia célula. Esto produce la muerte celular en el sujeto que es específica para las células que expresan AID, por ejemplo, linfocitos B cancerosos y/o células autoinmunitarias. Por consiguiente, como se describe en el presente documento, en una realización se proporciona un paradigma de tratamiento que induce selectivamente la autodestrucción de ciertas células enfermas, mientras se reducen los efectos secundarios involuntarios en tejidos sanos.
Los métodos de derrota de los cánceres en pacientes con elevados niveles de daño de ADN o elevados niveles de enzimas editoras de ADN se desvelan en el documento de patente WO2016/094897.
En ciertas realizaciones, el cáncer que se va a tratar es un tipo con elevada expresión de una enzima editora de ADN. En ciertas realizaciones, el cáncer que se va a tratar es una neoplasia de linfocitos B.
Otra realización es un método de tratamiento de un cáncer administrando al sujeto una cantidad eficaz de uno o más compuestos desvelados, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o la composición farmacéutica correspondiente. En un aspecto, el cáncer se selecciona del grupo que consiste en linfoma, leucemia y una neoplasia de células plasmáticas. En otro aspecto, el cáncer se selecciona del grupo que consiste en carcinoma y sarcoma.
En ciertas realizaciones, el cáncer que se va a tratar es un linfoma. Los linfomas que se pueden tratar por los métodos desvelados incluyen linfoma no Hodgkin; linfoma de Burkitt; linfoma linfocítico pequeño; linfoma linfoplasmacítico; linfoma MALTA; linfoma folicular; linfoma difuso de linfocitos B grandes; y linfoma de linfocitos T.
El linfoma es un tumor maligno en las células linfáticas del sistema inmunitario (por ejemplo, linfocitos B, linfocitos T o linfocitos citolíticos espontáneos (NK)). Los linfomas se originan frecuentemente en los ganglios linfáticos y están presentes como tumores sólidos. Pueden metastatizar a otros órganos, tales como el cerebro, el hueso o la piel. Los sitios extranodales están frecuentemente localizados en el abdomen. Los linfomas están estrechamente relacionados con la leucemia linfoide y en algunos casos una forma particular de cáncer se clasifica tanto como un linfoma como una leucemia.
Las leucemias que se pueden tratar por los métodos desvelados incluyen leucemia linfoblástica aguda (ALL); leucemia de Burkitt; leucemia de linfocitos B; leucemia linfoblástica aguda de linfocitos B; leucemia linfocítica crónica (CLL); leucemia mielógena aguda (AML); leucemia mielógena crónica (CML); y leucemia linfoblástica aguda de linfocitos T (T-ALL).
En ciertas realizaciones, el cáncer que se va a tratar es neoplasias de linfocitos B, leucemia de linfocito B, leucemia linfoblástica aguda de linfocitos B, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielógena crónica, leucemia de Burkitt, leucemia mielógena aguda y/o T-ALL. La maduración de linfocitos B cesa lo más normalmente o disminuye sustancialmente cuando el antígeno extraño se ha neutralizado. Ocasionalmente, sin embargo, la proliferación de un linfocito B particular continuará sin cesar; dicha proliferación puede dar como resultado un cáncer denominado "linfoma de linfocitos B" o una "leucemia de linfocitos B". En ciertas realizaciones, el cáncer que se va a tratar es leucemia linfocítica crónica (CLL) o leucemia mielógena crónica (CML).
En ciertas realizaciones, el cáncer que se va a tratar es una neoplasia de células plasmáticas. Los ejemplos de neoplasias de células plasmáticas incluyen mieloma múltiple; mieloma de células plasmáticas; leucemia de células plasmáticas y plasmacitoma.
Los carcinomas que se pueden tratar por los métodos desvelados incluyen cáncer de colon; cáncer de hígado; cáncer gástrico; cáncer intestinal; cáncer de esófago; cáncer de mama; cáncer de ovario; cáncer de cabeza y cuello; cáncer de pulmón; y cáncer de tiroides.
Los sarcomas que se pueden tratar por los métodos desvelados incluyen sarcoma de tejido blando y sarcoma de huesos.
Cualquier cáncer caracterizado por altos niveles de daño de ADN y/o expresión de enzimas editoras de ADN se puede tratar con un compuesto como se describe en el presente documento, por ejemplo, un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, sarcomas, cáncer de células epiteliales (carcinomas), cáncer de colon, cáncer gástrico, cáncer intestinal, cáncer de hígado, cáncer hepatocelular, cáncer de mama, cáncer de tiroides, cáncer de esófago, cáncer de pulmón, cáncer cerebral, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, cáncer renal, cáncer de próstata, hemangioma, rabdomiosarcoma, condrosarcoma, osteosarcoma, fibrosarcoma y colangiocarcinoma se pueden caracterizar por altos niveles de una expresión de enzimas editoras de ADN, por ejemplo, AID. En ciertas realizaciones, el cáncer que se va a tratar es cáncer de colon, cáncer de hígado, cáncer gástrico, cáncer intestinal, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de tiroides y/o colangiocarcinoma.
Los cánceres específicos que se pueden tratar por los métodos desvelados incluyen cáncer de vejiga, sangre, hueso, médula ósea, cerebro, mama, colon, esófago, gastrointestino, encías, cabeza, riñón, hígado, pulmón, nasofaringe, cuello, ovario, próstata, piel, estómago, testículo, lengua o útero. Además, el cáncer puede ser específicamente del siguiente tipo histológico, aunque no se limita a estos: neoplasia, maligna; carcinoma; carcinoma, indiferenciado; carcinoma de células gigantes y fusocelular; sarcomas; carcinoma de células pequeñas; carcinoma papilar; carcinoma de células escamosas; carcinoma linfoepitelial; carcinoma de células basales; pilomatrix carcinoma; carcinoma de células transitorias; carcinoma papilar de células transitorias; adenocarcinoma; gastrinoma, maligno; colangiocarcinoma; carcinoma hepatocelular; carcinoma hepatocelular y colangiocarcinoma combinados; adenocarcinoma trabecular; carcinoma quístico adenoide; adenocarcinoma en pólipo adenomatoso; adenocarcinoma, poliposis coli familiar; carcinoma sólido; tumor carcinoide, maligno; adenocarcinoma bronquiolo-alveolar; adenocarcinoma papilar; carcinoma cromófobo; carcinoma acidófilo; adenocarcinoma oxifílico; carcinoma basófilo; adenocarcinoma de células claras; carcinoma de células granulares; adenocarcinoma folicular; adenocarcinoma papilar y folicular; carcinoma esclerosante no encapsulante; carcinoma corticosuprarrenal; carcinoma endometroide; carcinoma de anejos cutáneos; adenocarcinoma apocrino; adenocarcinoma sebáceo; adenocarcinoma ceruminoso; carcinoma mucoepidermoide; cistadenocarcinoma; cistadenocarcinoma papilar; cistadenocarcinoma seroso papilar; cistadenocarcinoma mucinoso; adenocarcinoma mucinoso; carcinoma con células en anillo de sello; carcinoma de los conductos infiltrantes; carcinoma medular; carcinoma lobular; carcinoma inflamatorio; enfermedad de Paget, mamaria; carcinoma de células acinosas; carcinoma adenoescamoso; adenocarcinoma con metaplasia escamosa; timoma, maligno; tumor del estroma de ovario, maligno; tecoma, maligno; tumor de células granulosas, maligno; androblastoma, maligno; carcinoma de células de sertoli; tumor de células de Leydig, maligno; tumor de células lipídicas, maligno; paraganglioma, maligno; paraganglioma extramamario, maligno; feocromocitoma; glomangiosarcoma; melanoma maligno; melanoma amelanótico; melanoma de propagación superficial; melanoma maligno en nevo pigmentado gigante; melanoma de células epitelioides; nevo azul, maligno; sarcoma; fibrosarcoma; histiocitoma fibroso, maligno; mixosarcoma; liposarcoma; leiomiosarcoma; rabdomiosarcoma; rabdomiosarcoma embrionario; rabdomiosarcoma alveolar; sarcoma del estroma; tumor mixto, maligno; tumor mixto mulleriano; nefroblastoma; hepatoblastoma; carcinosarcoma; mesenquimoma, maligno; tumor de Brenner, maligno; tumor filodes, maligno; sarcoma sinovial; mesotelioma, maligno; disgerminoma; carcinoma embrionario; teratoma, maligno; bocio del ovario, maligno; coriocarcinoma; mesonefroma, maligno; hemangiosarcoma; hemangioendotelioma, maligno; sarcoma de Kaposi; hemangiopericitoma, maligno; linfangiosarcoma; osteosarcoma; osteosarcoma yuxtacortical; condrosarcoma; condroblastoma, maligno; condrosarcoma mesenquimatoso; tumor de hueso de células gigantes; sarcoma de Ewing; tumor odontogénico, maligno; odontosarcoma ameloblástico; ameloblastoma, maligno; fibrosarcoma ameloblástico; pinealoma, maligno; cordoma; glioma, maligno; ependimoma; astrocitoma; astrocitoma protoplásmico; astrocitoma fibrilar; astroblastoma; glioblastoma; oligodendroglioma; oligodendroblastoma; neuroectodérmico primitivo; sarcoma cerebeloso; ganglioneuroblastoma; neuroblastoma; retinoblastoma; tumor neurogénico olfativo; meningioma, maligno; neurofibrosarcoma; neurilemoma, maligno; tumor de células granulares, maligno; linfoma maligno; enfermedad de Hodgkin; hodgkin; paragranuloma; linfoma maligno, linfocítico pequeño; linfoma maligno, células grandes, difuso; linfoma maligno, folicular; micosis fungoide; otros linfomas no Hodgkin especificados; histiocitosis maligna; mieloma múltiple; sarcoma de mastocitos; enfermedad intestinal pequeña inmunoproliferativa; leucemia; leucemia linfoide; leucemia de células plasmáticas; eritroleucemia; leucemia de células de linfosarcoma; leucemia mieloide; leucemia basófila; leucemia eosinófila; leucemia monocítica; leucemia de mastocitos; leucemia megacarioblástica; sarcoma mieloide; y leucemia de células pilosas.
En otra realización para el método desvelado, el cáncer se caracteriza por mutaciones en los homólogos de mutS (por ejemplo, MSH2, MSH3 y MSH6), homólogos de mutL (por ejemplo, MLH1) o endonucleasa de reparación de los errores de emparejamiento PMS2. Las mutaciones son cambios en el código genético. Incluyen mutaciones puntuales y mutaciones del marco de lectura. En una mutación puntual, un nucleótido se cambia por otro. Por lo tanto, la mutación ocurre en un único punto o localización dentro de la cadena de ADN. Las mutaciones del marco de lectura son debidas o a inserciones o a deleciones de nucleótidos. Esto hace que se alargue toda la cadena de ADN o se encoja de tamaño. Por lo tanto, las mutaciones del marco de lectura pueden alterar todos los codones que ocurren después de la deleción o inserción. Las mutaciones a las que se hace referencia en el presente documento incluyen, pero no se limitan a, inserciones, deleciones, duplicaciones, inversiones, u otras mutaciones puntuales reconocidas. Ahora se ha encontrado que los inhibidores de RAD51 son particularmente eficaces en el tratamiento de cánceres con mutaciones en MSH (por ejemplo, MSH6), MLH o PMS2.
El homólogo 2 de MutS (MSH2) es una proteína que en los seres humanos está codificada por el gen MSH2, que se localiza en el cromosoma 2. MSH2 es un gen supresor de tumores y más específicamente un gen cuidador que codifica una proteína de reparación de los errores de emparejamiento de ADN (MMR), MSH2, que forma un heterodímero con MSH6 para formar el complejo de reparación de los errores de emparejamiento de MutSa humano. También se dimeriza con MSH3 para formar el complejo de reparación de ADN de MutSp. MSH2 participa en muchas formas diferentes de reparación de ADN, que incluyen reparación acoplada con la transcripción, recombinación homóloga y reparación de cortes de bases. Los ejemplos de las mutaciones en MSH2 incluyen, pero no se limitan a, g.47630253_47630254del, g.47702411_47702421del, g.47709913_47709915inv, g.47635629_47635634del, g.47637227_47637236dup, g.47639550_47639561del, g.(?_47630206)_(47710367_?)del, g.(?_47630206)_(47643569_47656880)del, g.47630263_47643568del, g.(?_47630206)_(47657081_47672686)del, g.47630263_47657080del, g.(?_47630206)_(47672797_47690169)del, g.47630263_47672796del, g.(?_47630206)_(47672797_47690169)del, g.(?_47630206)_(47693948_47698103)del, g.47630263_47693947del, g.(?_47630206)_(47698202_47702163)del, g.(?_47630206)_(47630542_47635539)del, g.(?_47630206)_(47708011_47709917)del, g.(?_47630206)_(47635695_47637232)del, g . 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El homólogo 3 de MutS (MSH3) es un homólogo humano de la proteína bacteriana de reparación de los errores de emparejamiento MutS que participa en el sistema de reparación de los errores de emparejamiento (MMR). MSH3 forma normalmente el heterodímero MutSp con MSH2 para corregir bucles largos de inserción/deleción y errores de emparejamiento base-base en microsatélites durante la síntesis de ADN. La deficiente capacidad de MMR se encuentra en aproximadamente el 15 % de cánceres colorrectales, y mutaciones somáticas en el gen MSH3 se pueden encontrar en casi el 50 % de los cánceres colorrectales deficientes en MMR. Los ejemplos de las mutaciones en MSH3 incluyen, pero no se limitan a, g.79970809del.
MSH6 codifica el homólogo 6 de MutS (MSH6), un miembro de la familia del mutador S (MutS) de proteínas que participan en la reparación de los errores de emparejamiento (MMR) de ADN. La proteína MSH6 forma un heterodímero con el homólogo 2 de MutS (MSH2) en tanto humano como en levadura. MSH2/6 humano reconoce errores de emparejamiento base-base individuales y bucles de inserción/deleción cortos. Tras el reconocimiento de un error de emparejamiento, se une el complejo MSH2/6 e intercambia ADP por ATP, dando como resultado un cambio conformacional en el complejo que precede a la disolución del par de bases, corte de bases y reparación. Las mutaciones MSH6 incluyen desplazamiento del marco y/o mutaciones terminadoras y pueden dar como resultado MSH6 no funcional y pérdida de la expresión de proteínas. Los ejemplos incluyen una mutación del marco de lectura en el resto de aminoácido 290 de MSH6 y una T1189I de aminoácido combinado.
La mutaciones inactivantes de MSH6 se pueden detectar en cánceres por métodos de diagnóstico habituales. Estos métodos incluyen, pero no se limitan a, obtener células cancerosas y otros indicadores de diagnóstico, tales como células mononucleares de sangre periférica (CMSP), subpoblaciones de CMSP, blastos circulantes (células CD34+), células tumorales circulantes y exosomas circulantes-células cancerígenas por biopsia y análisis de sangre y por obtención de líquidos linfáticos u otros líquidos corporales. Entonces se determina a partir de las células cancerosas u otros indicadores de diagnóstico si el cáncer presenta una mutación MSH6 inactivante, como por metodología conocida en la técnica, por ejemplo, secuenciación directa de ADN y amplificación de sondas dependiente de ligación múltiple, secuenciación de ARN (ARN-Seq), micromatriz, PCR cuantitativa o paneles de expresión génica NanoString™, o proteína MSH6 por inmunohistoquímica, citometría de flujo, inmunocitoquímica o transferencia Western. Los métodos de identificación de mutaciones MSH6 inactivantes se desvelan en Houlleberghs H, Goverde A, Lusseveld J, Dekker M, Bruno MJ, et al. (2017) Suspected Lynch syndrome associated MSH6 variants: A functional assay to determine their pathogenicity. PLOS Genetics 13(5): e1006765. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1006765.
Ejemplos de las mutaciones en MSH6 incluyen, pero no se limitan a, g.48032846_48032849del, g.48032846_48032849del, g.48032846_48032849del, g.48033337_48033342del, g.48033420_48033422del, g(?_48010221 )_(48034092)del, g.(?_48010221 )_(48018263_48023032)del, g.47998510_48020183del, g.48007276_48020272del, g.48026207del, g.48026223del, g.48026223del, g.48026257_48026261del, g.48026261_48026265del, g.48026312_48026313del, g.48026398del, g.48026543_48026544dup, g.48026693dup, g.48026702del, g.48026712del, g.48026718dup, g.48026736_48026737delinsAG, g.48026736_48026737delinsG, g.48026750_48026751del,g.48026754_48026757del,g.48026756_48026759del, g.48026759_48026760del, g.48026906del, g.48026928_48026931del, g.48026941dup, g.48026991del, g.48027023_48027024del, g.48027079del, g.48027079_48027082dup, g.48027167_48027168del, g.48027172_48027173dup, g.48027178_48027185del, g.48027184_48027185del, g.48027272_48027275del, g.48027470_48027471del, g.48027501_48027502del, g.48027501_48027502delTG, g.48027657dup, g.48027691_48027694del, g.48027733_48027736dup, g.48027794_48027796delinsC, g.48027841_48027842del, g.48027887del, g.48027890dup, g.48027973_48027980del, g.48028067del, g.48028098del, g.48028106del, g.48028175_48028176del, g.48028241_48028242del, g.48028241_48028242delTT, g.48028272_48028284dup, g.48028277_48028278del, g.48030558_48030559del, g.48030126_48032394del, g.48030568del, g.48030581_48030584del, g.48030584_48030585dup, g.48030607del, g.48030645_48030646insT, g.48030647del, g.48030647dup, g.48030649dup, g.48030654_48030660del, g.48030659dup, g.48030697_48030698del, g.48030698del, g.48030706del, g.48030710dup, g.48030727_48030728insC, g.48030765_48030829del, c.3438+797_3438+798insTATins1839_3439-428, c.3438+797_3438+798insTATins1839_3439-428, g.48032121_48032122del, g.48032123_48032124del, g.48032124dup, g.48032126_48032129del, g.48032129_48032130insA, g.48032129_48032132dup, g.(48032167_48032756)_(48034092_?)del, g.48032809_48032812del, g.48032835dup, g.48032846_48032849del, g.48033374_48033402dup, g.48033395_48033398del, g.48033421_48033433del, g.48033425_48033428dup, g.48033453_48033454insA, g.48033494_48033523del, g.48033495_48033496del, g.48033593dup, g.48033610_48033613dup, g.48033629_48033635del, g.48033636_48033639dup, g.48033676_48033682del, g.48033707dup, g.48033709_48033716dup, g.48033721_48033724dup, g.48033727_48033730dup, g.48033728_48033746dup, g.(48033742_48033743)_(48033742_48033743)ins(32), g.48033746dup, g.48033748_48033751del, g.48033758_48033768del, g.48033773_48033774insATCA, g.48033773_48033776dup, g.48033785_48033789dup, g.48033887_48033910inv, g.(48018263_48023032)_(48032167_48032756)del, g.(48018263_48023032)_(48023203_48025749)del, g.48023097_48023098del, g.48025773dup, g.48025832del, g.48025860_48025861 insT, g.48025884_48025885del, g.48025967dup.
El homólogo 1 de MutL, cáncer de colon, no polipósico de tipo 2 (E. coli) es una proteína que en seres humanos está codificada por el gen MLH1 localizado en el cromosoma 3. Es un gen comúnmente asociado a cáncer colorrectal hereditario no polipósico.
Los ejemplos de las mutaciones en MSH6 incluyen, pero no se limitan a, g.37089113_37089115del, g.37089175del, g.37090379_37090393del, g.37038201_37038202del, g.37042531_37042542del, g.37053339_37053355del, g.37053354del, g.37053590_37053591 insT, g.37034841_37092337del, g.(?_37034841 )_(37092337_?)del, g.(?_37034841 )_(37061955_37067127)del, g.(?_37034841 )_(37035155_37038109)del, g.(?_37034841 )_(37035155_37038109)del, g.(?_37034841 )_(37070424_37081676)del, g.(?_37034841 )_(37083823_37089009)del, g.37034841_37083822del, g.(?_37034841 )_(37038201_37042445)del, g.(?_37034841 )_(37042545_37045891 )del, g.3703484l_37042544del, g.(?_37034841 )_(37042545_37045891 )del, g.(?_37034841 )_(37042545_37045891 )del, g.(?_37034841 )_(37045966_37048481 )del, g.(?_37034841 )_(37050397_37053310)del, g.(?_37034841 )_(37059091_37061800)del, g.37034658_37038806del, g.36961079_37138741del, g.37061923del, g.37061927del, g.37061933del, g.37061939del, g.37061942dup, g.37035140_37035141del, g.37070417del, 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g.37092094_37092097delins(30), g.37092096_37092106del, g.37092097del, g.37092125_37092126delAA, g.37092125_37092126del, g.37092139_37092142dup, g.37092142dup g.37035060dup, g.37042469_37042470del, g.37042470del, g.37042482dup, g.37042485del, g.37042499del g.37042546dup, g.37044472_37046589del, g.37045648_37049941del, g.37045095_37054651del, g.37045072_37046861del, g.(37042545_37045891)_(37045966_37048481)del, g.(37042545_37045891 )_(37092337_?)del, g.(37042545_37045891 )_(37048555_37050304)del, g.(37042545_37045891 )_(37050397_37053310)del, g.37045892_37050396del, g.37035069del, g.37045926del, g.37045931del, g.37045939_37045940dup, g.37045957_37045958del, g.37045963del, g.37035075del, g.37048067_37049287del g.(37045966_37048481)_(37048555_37050304)del, g.(37045966_37048481 )_(37050397_37053310)del, g.37048483del, g.37048483_37048503delinsT, g.37048486_37048487delinsGTT, g.37048489del, g.37048490del, g.37035076_37035077insCCCA, g.37035077_37035078dup, g.37048505_37048508del g.37048521del, g.37048529dup, g.37035082dup, g.37049873_37052281del, g.37049839_37052249del g.37049800_37052209del, g.37049640_37050445del, g.37050305_37050396del g.(37048555_37050304)_(37050397_37053310)del, g.37050305_37050396del, g.37050319_37050320del g.37050339del, g.37050348del, g.37050353_37050354del, g.37050354du g.37050364del, g.37050375_37050376insGA, g.37035090del, g.37050382_37050383delinsAT, g.37050382_37050383delinsCT, g.37050390_37050396del, g.37052950_37060990del, g.(37050397_37053310)_(37067499_37070274)dup, g.(37050397_37053310)_(37053591_37055922)del, g.(37050397_37053310)_(37056036_37058996)del, g.37053353del, g.37053510_37053511 del, g.37035099del, g.37053545_37053546insT, g.37053562del, g.37053578del, g.37053578dup, g.37053585del, g.37053586_37053589del, g.37053591del, g.37053590_37053591delinsAT, g.37055920_37055921del, g.37055914_37055938del, g.(37053591_37055922)_(37070424_37081676)del, g.(37053591_37055922)_(37083823_37089009)del, g.(37053591_37055922)_(37059091_37061800)del, g.37035105del, g.37055928dup, g.37035106_37035116del, g.37055938del, g.37035108del, g.37055972_37055975del, g.37055976_37055979del, g.37035111del, g.37055990dup, g.37035114del, g.37035116del, g.37056036del, g.37056037dup, g.37058993_37059001del, g.(37056036_37058996)_(37070424_37081676)del, g.(37056036_37058996)_(37059091_37061800)del, g.37058997_37059000del, g.37059014_37059017del, g.37059017_37059021del, g.37059027_37059030dup, g.37035122del, g.37059062_37059063insT, g.37059065_37059066del, g.37059066del, g.37059066dup, g.37059072_37059073del, g.37059072_37059073dup, g.37059090_37059093del, g.37061595_37061913del, g.37061308_37066756del, g.37061207_37063077del, g.(37059091_37061800)_(37092337_?)del, g.(37059091_37061800)_(37061955_37067127)del, g.37061801_37061954del, g.(37059091_37061800)_(37083823_37089009)del, g.37061803dup, g.37061804del, g.37061817del, g.37061837_37061838dup, g.37061844del, g.37061851dup, g.37061855dup, g.37061870del, g.37061904_37061906del, g.37061910del, g.37035047del, g.[37049179_37051317delinsTG;37051667_37054327delinsCA].
Los genes relacionados con PMS2 humano se localizan en las bandas 7p12, 7p13, 7q11 y 7q22. Los exones 1 a 5 de estos homólogos comparten un elevado grado de identidad con PMS2 humano. El producto de este gen participa en la reparación de errores de emparejamiento de ADN. La proteína forma un heterodímero con MLH1 y este complejo interactúa con MSH2 unido a bases erróneamente emparejadas. Los defectos en este gen están asociados con cáncer colorrectal no polipósico hereditario, con el síndrome de Turcot, y son una causa de tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriales.
Ejemplos de las mutaciones en PMS2 incluyen, pero no se limitan a, g.(?_6012870)_(6048737_?)del, g.6012870_6048737del, g.(6027252_6029430)_(6048737_?)del, g.(6045663_6048627)_(6048737_?)del, g.6029554del, g.6029499dup, g.6029495_6029496del, g.6029462_6029463delinsTAAA, g.5992485_6028601del, g.(6018328_6022454)_(6027252_6029430)del, g.(6013174_6017218)_(6027252_6029430)del, g.6027226_6027227ins(20), g.6027175del, g.6027090dup, g.6036705_6044207delinsCG, g.6026666dup, g.6026628del, g.6043671del, g.6026565dup, g.6026565dupT, g.6018315_6018316del, g.6018306_6018310del, g.6018306_6018310delAGTTA, g.6043633_6043634dup, g.6018256_6018259del, g.6015623_6017501del, g.6016429_6017479del, g.6017300_6017303del, g.6045579_6045674delinsATTT, g . (6043690_6045522)_(6045663_6048627)del, g . (?_6012870)_(6042268_6043320)del, g.(6035265_6036956)_(6042268_6043320)del, g.6038283_6039384del, g.6038901del, g.6038851dup, g.(6035265_6036956)_(6037055_6038738)del, g.6037019_6037024delinsCTTCACACACA, g.6036980del, g.6036958dup, g.6035323_6035324insJN866832.1, g.(6022623_6026389)_(6035265_6036956)del, g.(6031689_6035164)_(6035265_6036956)del, g.6035204_6035207del, g.6035205_6035206del, g(?_6012870)_(6031689_6035164)del, g.(6027252_6029430)_(6031689_6035164)del, g.(6029587_6031603)_(6031689_6035164)del, g.6028725_6029882del, g.(?_6012870)_(6029587_6031603)del.
La presente invención proporciona un método de tratamiento de pacientes con síndrome de Lynch para reducir la probabilidad de desarrollar o tratar cánceres derivados del síndrome de Lynch, administrando al sujeto una cantidad eficaz de uno o más compuestos desvelados, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, o la composición farmacéutica correspondiente.
El síndrome de Lynch es un trastorno hereditario causado por una mutación en un gen de reparación de errores de emparejamiento en el que los individuos afectados tienen una probabilidad superior a la normal de desarrollar cáncer colorrectal, cáncer endometrial y diversos otros tipos de cánceres de gran malignidad, frecuentemente en una edad temprana - también denominado cáncer de colon no polipósico hereditario (HNPCC).
Las mutaciones de genes específicos de reparación de errores de emparejamiento (MMR) que incluyen, pero no se limitan a, deleciones de MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 y EPCAM-TACSTD1, son responsables del síndrome de Lynch. Estos genes trabajan reparando los errores realizados cuando el ADN se copia en la preparación para la división celular. Los defectos en los genes no aceptan la reparación de los errores de ADN y a medida que se dividen las células, se apilan los errores y el crecimiento celular incontrolable puede producir el cáncer.
Aquellos con síndrome de Lynch tienen hasta un 85 % de riesgo de contraer cáncer de colon, así como un riesgo superior al medio de cáncer endometrial, cáncer de estómago, cáncer pancreático, cáncer de riñón/uréter, cáncer de la vía hepatobiliar, cáncer gástrico, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer del conducto cístico, cáncer cerebral, cáncer del intestino delgado, cáncer de mama y cáncer de piel.
Por lo tanto, en una realización para el método desvelado, el método es un método de tratamiento de cáncer derivado de síndrome de Lynch, seleccionado del grupo que consiste en cáncer de colon, cáncer endometrial, cáncer de estómago, cáncer pancreático, cáncer de riñón/uréter, cáncer de la vía hepatobiliar, cáncer gástrico, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer del conducto cístico, cáncer cerebral, cáncer del intestino delgado, cáncer de mama y cáncer de piel.
En otra realización más, el método es un método de tratamiento de enfermedad autoinmunitaria. Las enfermedades autoinmunitarias a modo de ejemplo incluyen lupus eritematoso; síndrome de Wiskott-Aldrich; síndrome linfoproliferativo autoinmunitario; miastenia grave; artritis reumatoide (AR); nefritis lúpica; esclerosis múltiple; lupus eritematoso sistémico; lupus discoide; lupus eritematoso cutáneo subagudo; lupus eritematoso cutáneo que incluye lupus eritematoso pernio; artritis crónica; síndrome de Sjogren; rinosinusitis crónica inflamatoria; colitis; celiaquía; enfermedad inflamatoria del intestino; esófago de Barrett; gastritis inflamatoria; nefritis autoinmunitaria; vasculitis autoinmunitaria; hepatitis autoinmunitaria; carditis autoinmunitaria; encefalitis autoinmunitaria; diabetes autoinmunitaria; nefritis por diabetes autoinmunitaria; psoriasis; enfermedad injerto contra huésped (GvHD); y enfermedad hematológica autoinmunitaria.
En un aspecto de esta realización, el método es un método de tratamiento de deficiencia inmunitaria seleccionado del grupo que consiste en síndrome proliferativo autoinmunitario (ALPS), síndrome poliglandular autoinmunitario de tipo 1 (APS-1), enfermedad BENTA, estado de deficiencia de caspasa ocho (CEDS), enfermedad granulomatosa crónica (CGD), inmunodeficiencia variable común (CVID), síndromes de neutropenia congénita, deficiencia de CTLA4, deficiencia de DOCK8, deficiencia de GATA2, trastornos de la glucosilación con inmunodeficiencia, síndrome de hiperinmunoglobulina E (HIES), síndromes de hiper-inmunoglobulina M (hiper-IgM), deficiencia de adhesión leucocitaria (LAD), deficiencia de LRBA, enfermedad de cinasas PI3, deficiencia de anticuerpos asociada a PLCG2 y desregulación inmunitaria (PLAID), inmunodeficiencia combinada grave (SCID), enfermedad de pérdida de función de STAT3, verrugas, hipogammaglobulinemia, infecciones y síndrome de mielocatexis (WHIMS), agammaglobulinemia asociada al X (XLA), enfermedad linfoproliferativa asociada al X (XLP) y enfermedad de XMEN.
Como se usa en el presente documento, el término "deficiencia inmunitaria" se refiere a una afección en la que una porción o algunas porciones de los componentes celulares que constituyen un sistema inmunitario son defectuosas o funcionan erróneamente, de manera que se daña un mecanismo inmunitario normal. En otras palabras, "deficiencia inmunitaria" significa una afección en la que: la inmunidad congénita y/o la inmunidad adquirida son suprimidas y/o reducidas. En algunas realizaciones, el sujeto con deficiencia inmunitaria es un sujeto inmunodeprimido. Los ejemplos no limitantes de deficiencias inmunitarias pueden incluir sida, hipogammaglobulinemia, agammaglobulinemia, deficiencia de granulocitos, enfermedad granulomatosa crónica, asplenia, SCID, deficiencia del complemento y/o anemia de células falciformes.
En otro aspecto de esta realización, el método es un método de tratamiento de un trastorno neurodegenerativo seleccionado del grupo que consiste en esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson (PD), enfermedad de Alzheimer (AD), atrofia dentato-rubro-pálido-luisiana (DRPLA), enfermedad de Huntington (HD), ataxia espinocerebelosa de tipo 1 (SCA1), ataxia espinocerebelosa de tipo 2 (SCA2), ataxia espinocerebelosa de tipo 3 (SCA3), ataxia espinocerebelosa 6 (SCA6), ataxia espinocerebelosa de tipo 7 (SCA7), ataxia espinocerebelosa de tipo 8 (SCA8), ataxia espinocerebelosa de tipo 12 (SCA12), ataxia espinocerebelosa de tipo 17 (SCA17), atrofia muscular espinobulbar/enfermedad de Kennedy (SBMA), síndrome de X frágil (FRAXA), retraso mental de XE frágil (FRAXE) y distrofia miotónica (DM).
Un "sujeto" es un mamífero, preferentemente un humano, pero también puede ser un animal en necesidad de tratamiento veterinario, por ejemplo, animales de compañía (por ejemplo, perros, gatos y similares), animales de granja (por ejemplo, vacas, ovejas, cerdos, caballos y similares) y animales de laboratorio (por ejemplo, ratas, ratones, cobayas y similares).
En ciertas realizaciones, los métodos desvelados en el presente documento comprenden además coadministrar una cantidad eficaz de un inhibidor de la reparación de ADN, un inhibidor de la respuesta al daño de ADN (DDR), un agente que daña el ADN o un agente inmunomodulador al sujeto que está tratándose para el cáncer, además de una cantidad eficaz de un inhibidor de RAD51 desvelado.
El término "inhibidor de la reparación de ADN" se refiere a cualquier agente que dirija componentes/procesos que usa una célula para reparar mutaciones o cambios en ADN y restaurar el ADN a su estado original y previene la reparación de ADN. Los ejemplos de inhibidores de la reparación de ADN incluyen: inhibidores de RPA, inhibidores de APE1, inhibidores de ADN ligasa, inhibidores de ADN polimerasa, inhibidores de Parp, etc.
El término "inhibidor de la respuesta al daño de ADN" se refiere a cualquier agente que dirige los componentes/procesos implicados en la detección de lesiones de ADN, señalización de la presencia de daño de ADN y/o promueven la reparación del daño de ADN. Los ejemplos de inhibidores de la respuesta al daño de ADN incluyen inhibidores del punto de control, inhibidores de ATM y ATR, inhibidores de ADN-PK, etc.
El término "agente que daña el ADN" se refiere a cualquier agente que daña directa o indirectamente el ADN para el que la recombinación homóloga podría reparar el daño. Los agentes que dañan el ADN se seleccionan del grupo que consiste en: exposición a un producto químico que daña el ADN; exposición a un agente quimioterapéutico; exposición a una radioquimioterapia y exposición a radiación ionizante o ultravioleta. Los ejemplos específicos de agentes quimioterapéuticos que dañan el ADN incluyen agentes alquilantes, nitrosoureas, antimetabolitos, alcaloides de las plantas, extractos vegetales y radioisótopos. Los ejemplos específicos de agentes quimioterapéuticos también incluyen fármacos que dañan el ADN, por ejemplo, 5-fluorouracilo (5-FU), capecitabina, S-1 (Tegafur, 5-cloro-2,4-dihidroxipiridina y ácido oxónico), 5-etiniluracilo, arabinosil citosina (ara-C), 5-azacitidina (5-AC), 2',2'-difluoro-2'-desoxicitidina (dFdC), antimetabolitos de purina (mercaptopurina, azatiopurina, tioguanina), clorhidrato de gemcitabina (Gemzar), pentostatina, alopurinol, 2-fluoro-arabinosil-adenina (2F-ara-A), hidroxiurea, mostaza de azufre (biscloroetilsulfuro), mecloretamina, melfalán, clorambucilo, ciclofosfamida, ifosfamida, tiotepa, AZQ, mitomicina C, dianhidrogalactitol, dibromoducitol, sulfonato de alquilo (busulfán), nitrosoureas (BCNU, CCNU, 4-metil CCNU o ACNU), procarbazina, decarbazina, rebecamicina, antraciclinas, tales como doxorubicina (adriamicina; ADR), daunorubicina (Cerubicine), idarubicin (Idamicine) y epirubicina (Ellence), análogos de antraciclinas, tales como mitoxantrona, actinimicina D, inhibidores de la topoisomerasa no intercalantes, tales como epipodofilotoxinas (etopósido o VP16, tenipósido o VM-26), podofilotoxina, bleomicina (Bleo), pepleomicina, compuestos que forman aductos con el ácido nucleico que incluye derivados de platino, por ejemplo, cisplatino (CDDP), análogo trans de cisplatino, carboplatino, iproplatino, tetraplatino y oxaliplatino, así como camptotecina, topotecán, irinotecán (CPT-11) y SN-38. Los ejemplos específicos de tratamientos que dañan el ácido nucleico incluyen radiación, por ejemplo, radiación ultravioleta (UV), de infrarrojos (IR), o alfa, beta o gamma, así como choque medioambiental, por ejemplo, hipertermia.
"Agente inmunomodulador" significa un agente que modula una respuesta inmunitaria a un antígeno, pero que no es el antígeno ni deriva del antígeno. "Modular", como se usa en el presente documento, se refiere a inducir, potenciar, suprimir, dirigir o redirigir una respuesta inmunitaria. Dichos agentes incluyen agentes inmunoestimulantes, tales como adyuvantes, que estimulan (o refuerzan) una respuesta inmunitaria a un antígeno, pero no es un antígeno o derivado de un antígeno. Hay varios tipos distintos de agentes inmunomoduladores, que incluyen, pero no se limitan a, agonistas de receptores de tipo toll (TLR) y antagonistas de receptores de tipo toll (TLR). Dichos agentes también incluyen inmunosupresores. El agente inmunomodulador se selecciona del grupo que consiste en moduladores del punto de control inmunitario, agonistas de receptores del tipo toll (TLR), terapias basadas en células, citocinas y vacunas para el cáncer.
En ciertas realizaciones, se determina que el sujeto tiene un aumento del nivel y/o la actividad de un proceso de daño de ADN o enzima editora de ADN. En un aspecto de esta realización, la enzima editora de ADN se selecciona del grupo que consiste en citidina desaminasa inducida por activación (AID o AICDA), APOBEC2, APOBEC3A, APOBEC3C, APOBEC3D, APOBEC3F, APOBEC3G, APOBEC3H, APOBEC4, una apoisomerasa de tipo 1, una apoisomerasa de tipo 2, gen 1 de activación de la recombinación (RAG 1) y gen 2 de activación de la recombinación (RAG2).
En ciertas realizaciones, se ha determinado que los glóbulos sanguíneos obtenidos del sujeto tienen un nivel detectable de citidina desaminasa inducida por activación (AID).
En ciertas realizaciones, se ha determinado que los linfocitos B obtenidos del sujeto tienen un nivel detectable de citidina desaminasa inducida por activación (AID).
En ciertas realizaciones, el nivel detectable de citidina desaminasa inducida por activación (AID) es estadísticamente significativamente superior al nivel de AID expresada en linfocitos B no activados o células no inmunitarias normales de un sujeto sano.
Métodos de administración y formas farmacéuticas
La cantidad precisa de compuesto administrado para proporcionar una "cantidad eficaz" al sujeto dependerá del modo de administración, el tipo y la intensidad de la enfermedad, y de las características del sujeto, tales como salud general, edad, sexo, peso corporal y tolerancia a fármacos. El experto será capaz de determinar las dosis apropiadas dependiendo de estos y otros factores. Cuando se administran en combinación con otros agentes terapéuticos, por ejemplo, cuando se administran en combinación con un agente antineoplásico, una "cantidad eficaz" de cualquier agente terapéutico adicional dependerá del tipo de fármaco usado. Se conocen dosis adecuadas para agentes terapéuticos autorizados y pueden ser ajustadas por el experto según la afección del sujeto, el (los) tipo(s) de afección que están tratándose y la cantidad de un compuesto de la invención que se usa en consecuencia, por ejemplo, dosis informadas en la bibliografía y recomendadas en el Physician’s Desk Reference (57a ed., 2003).
El término "cantidad eficaz" significa una cantidad que cuando se administra al sujeto produce resultados beneficiosos o deseados, que incluyen resultados clínicos, por ejemplo, inhibe, suprime o reduce los síntomas de la afección que está tratándose en el sujeto en comparación con un control. Por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz puede ser administrada en forma farmacéutica unitaria (por ejemplo, 0,1 mg a aproximadamente 50 g por día, alternativamente desde 1 mg hasta aproximadamente 5 gramos por día).
Los términos "administrar", "que administra", "administración", y similares, como se usan en el presente documento, se refieren a métodos que se pueden usar para permitir la administración de composiciones al sitio de acción biológica. Estos métodos incluyen, pero no se limitan a, intrarticular (en las articulaciones), intravenosa, intramuscular, intratumoral, intradérmica, intraperitoneal, subcutánea, por vía oral, por vía tópica, por vía intratecal, por inhalación, por vía transdérmica, por vía rectal, y similares. Las técnicas de administración que se pueden emplear con los agentes y métodos descritos en el presente documento se encuentran en, por ejemplo, Goodman y Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, ed. actual; Pergamon; y Remington’s, Pharmaceutical Sciences (edición actual), Mack Publishing Co., Easton, Pa.
Además, los inhibidores de RAD51 desvelados se pueden coadministrar con otros agentes terapéuticos. Como se usa en el presente documento, los términos "coadministración", "administrado en combinación con", y sus equivalentes gramaticales, pretenden englobar la administración de dos o más agentes terapéuticos a un único sujeto, y pretenden incluir pautas de tratamiento en las que los agentes se administran por la misma vía de administración o una vía de administración diferente o al mismo tiempo o en tiempos diferentes. En algunas realizaciones, el uno o más compuestos descritos en el presente documento se coadministrarán con otros agentes. Estos términos engloban la administración de dos o más agentes al sujeto de manera que estén presentes ambos agentes y/o sus metabolitos en el sujeto al mismo tiempo. Incluyen la administración simultánea en composiciones separadas, administración en momentos diferentes en composiciones separadas y/o administración en una composición en la que ambos agentes están presentes. Por lo tanto, en algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento y el (los) otro(s) agente(s) se administran en una única composición. En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento y el (los) otro(s) agente(s) se mezclan en la composición.
El modo particular de administración y la pauta posológica se seleccionarán por el médico especialista, teniendo en cuenta los datos del caso (por ejemplo, el sujeto, la enfermedad, el estado de enfermedad en cuestión, el tratamiento particular). El tratamiento puede consistir en dosis diarias o de varias veces al día o inferiores a diarias (tales como semanalmente o mensualmente, etc.) durante un periodo de algunos días a meses, o incluso años. Sin embargo, un experto habitual en la técnica reconocería inmediatamente dosis apropiadas y/o dosis equivalentes observando las dosis de composiciones autorizadas para tratar una enfermedad mediada por RAD51 usando los inhibidores de RAD51 desvelados para orientación.
Los compuestos o las composiciones farmacéuticas correspondientes enseñadas en el presente documento se pueden administrar a un paciente en una variedad de formas dependiendo de la vía de administración seleccionada, como se entenderá por los expertos en la técnica. Los compuestos de las presentes enseñanzas se pueden administrar, por ejemplo, por administración oral, parenteral, bucal, sublingual, nasal, rectal, parche, bomba o administración transdérmica y formularse las composiciones farmacéuticas en consecuencia. La administración parenteral incluye modos de administración intravenosa, intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, transepitelial, nasal, intrapulmonar, intratecal, rectal y tópica. La administración parenteral puede ser por infusión continua durante un periodo de tiempo seleccionado.
La composición farmacéutica de la invención se formula para ser compatible con su vía de administración prevista. En una realización, la composición se formula según procedimientos rutinarios como una composición farmacéutica adaptada para administración intravenosa, subcutánea, intramuscular, oral, intranasal o tópica a seres humanos. En realizaciones preferidas, la composición farmacéutica se formula para administración intravenosa.
Normalmente, para administración terapéutica oral, un compuesto de las presentes enseñanzas se puede incorporar con el excipiente y usar en forma de comprimidos ingeribles, comprimidos bucales, trociscos, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas y similares.
Normalmente para administración parenteral, las disoluciones de un compuesto de las presentes enseñanzas se pueden preparar, en general, en agua adecuadamente mezclada con un tensioactivo, tal como hidroxipropilcelulosa. Las dispersiones también se pueden preparar en glicerol, polietilenglicoles líquidos, DMSO y mezclas de los mismos con o sin alcohol, y en aceites. En condiciones de almacenamiento y uso habituales, estas preparaciones contienen un conservante para prevenir el crecimiento de microorganismos.
Normalmente, para uso inyectable, son apropiadas disoluciones acuosas estériles o dispersión de, y polvos estériles de, un compuesto descrito en el presente documento para la preparación extemporánea de disoluciones o dispersiones inyectables estériles.
EJEMPLOS
Abreviaturas:
Ac acetilo
ACN acetonitrilo
ac. acuosa
Bn bencilo
Boc ferc-butoxicarbonilo
a ancho
d doblete (solo cuando se usa dentro de los espectros de RMN 1H)
DCM diclorometano
DIEA(DIPEA) diisopropiletilamina
DMA dimetilacetamida
DMAP 4-dimetilaminopiridina
DMF N,N-dimetilformamida
DMSO sulfóxido de dimetilo
dppf 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno
eq. equivalente
EtOAc acetato de etilo
h hora
HBTU hexafluorofosfato de N,N,N',N'-tetrametil-O-(1 H-benzotriazol-1 -il)uronio
HPLC cromatografía líquida de alta resolución
CL-EM cromatografía de líquidos acoplada con espectrometría de masas
m multiplete
EM-ESI espectros de masas, ionización por electropulverización
NBS N-bromosuccinimida
RMN resonancia magnética nuclear
prep preparativa
Py piridina
s singlete
sat. saturada
SFC cromatografía de fluidos supercríticos
t triplete
TEA trietilamina
TFA ácido trifluoroacético
THF tetrahidrofurano
CCF cromatografía en capa fina
Tol. tolueno
Figure imgf000033_0001
Ejemplo 1. Síntesis de (4-(2-(4-((bencilcarbamoil)oxi)piperidin-1-il)tiazol-5-il)-3-(N-(tercbutil)sulfamoil)fenil)carbamato de (S)-(1-metilpirrolidin-2-il)metilo
Figure imgf000034_0001
Método general D para la preparación del compuesto de sulfonamida 12.
Figure imgf000034_0002
A una disolución de 5-amino-2-(2-bromotiazol-5-il)-N-terc-butil-bencenosulfonamida (5 g, 12,8 mmoles, 1 eq.) en DCM (30 ml) se añadieron DMAP (156 mg, 1,3 mmoles, 0,1 eq.) y Ac2O (1,96 g, 19,2 mmoles, 1,5 eq.). La mezcla se agitó a 20 °C durante 1 h, y entonces se lavó con HCl 1 M (50 ml) y Na2CO3 ac. sat. (50 ml). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 5:1 a 2:1) dando N-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]acetamida (1,5 g, 3,5 mmoles, 27 % de rendimiento) como un sólido amarillo. ESI [M+H] = 433,9/431,9
Método general A para la preparación del compuesto de sulfonamida 13.
Figure imgf000034_0003
A una disolución de N-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]acetamida (700 mg, 1,6 mmoles, 1 eq.) en DMF (20 ml) se añadieron K2CO3 (448 mg, 3,3 mmoles, 2 eq.) y piperidin-4-ol (246 mg, 2,4 mmoles, 1,5 eq.). La mezcla se agitó a 100 °C durante 12 h y luego se vertieron en H2O (100 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (50 ml x 3), las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 1:2) dando N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-(4-hidroxi-1-piperidil)tiazol-5-il]fenil]acetamida (550 mg, 1,2 mmoles, 13,2 % de rendimiento) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, CL0ROFORMO-d) 5 = 8,26 (dd, J=2,2, 8,6 Hz, 2H), 7,93 (d, J=2,4 Hz, 1 H), 7,37 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,31 (s, 1H), 4,02 - 3,94 (m, 1 H), 3,88 - 3,80 (m, 2H), 3,30 (ddd, J=3,5, 9,2, 13,1 Hz, 2H), 2,21 (s, 3H), 2,03 - 1,95 (m, 2H), 1,67 (dtd, J=4,0, 8,7, 13,0 Hz, 2H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] = 453,1
Método general F para la preparación del compuesto de sulfonamida 15.
Figure imgf000035_0001
Se disolvió N-bencilcarbamato de [1-[5-[4-acetam ido-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidilo] (380 mg, 649 umoles, 1 eq.) en HCl/MeOH (4 M, 20 ml) y la mezcla se agitó a 20 °C durante 1 h. La mezcla se concentró, se diluyó con Na2CO3 ac. sat. (20 ml) y se extrajo con EtOAc (20 ml x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 10:1 a 1:1) dando N-bencilcarbamato de [1-[5-[4-am ino-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidil] (300 mg, 552 umoles, 85 % de rendimiento) como un sólido amarillo. ESI [M+H] = 544,2
Método general H para la preparación del Ejemplo 1.
Figure imgf000035_0002
A una disolución de [(2S)-1-metilpirrolidin-2-il]metanol (42 mg, 367 umoles, 2 eq.) y DIEA (71,11 mg, 550 umoles, 3 eq.) en MeCN (5 ml) se añadió una disolución de N-bencilcarbamato de [1-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[(4-nitrofenoxi)carbonilam ino]fenil]tiazol-2-il]-4-piperidilo] (130 mg, 184 umoles, 1 eq.) en DCM (2 ml) y la mezcla se sometió a reflujo durante 1 h. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por HPLC prep dando (4-(2-(4-((bencilcarbamoil)oxi)piperidin-1-il)tiazol-5-il)-3-(N-(terc-butil)sulfamoil)fenil)carbamato de (S)-(1-m etilp irro lid in-2-il)m etilo (19,87 mg, 28,8 umoles, 15,7 % de rendimiento, 99,3 % de pureza) como un sólido amarillo pálido. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,06 (s, 1H), 8,26 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,71 (t, J=6,2 Hz, 1H), 7,60 (dd, J=2,3, 8,5 Hz, 1 H), 7,37 - 7,14 (m, 7H), 6,94 (s, 1H), 4,81 - 4,71 (m, 1H), 4,16 (a d, J=6,2 Hz, 2H), 4,10 - 4,03 (m, 1H), 4,02 -3,96 (m, 1H), 3,73 - 3,63 (m, 2H), 3,28 (s a, 2H), 2,94 - 2,87 (m, 1H), 2,44 - 2,37 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,18 - 2,05 (m, 1H), 1,99 - 1,82 (m, 3H), 1,68 - 1,52 (m, 5H), 1,12 - 1,03 (m, 9H). ESI [M+H] = 685,2
Ejemplo 2. Síntesis de N-bencilcarbamato de [1-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[1(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metoxicarbonilam ino]fenil]tiazol-2-il]-4-piperidilo].
Se sintetizó el siguiente compuesto po r e l m ismo método po r e l producto intermedio clave 16.
Figure imgf000036_0001
N-bencilcarbama to de [1 -[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[[(2R)-1 -metilpirrolid in-2-il]metoxicarbonilam ino]fenil]tiazol-2-il]-4-piperidilo]. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,07 (s, 1H), 8,29 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,73 (t, J=6,2 Hz, 1H), 7,63 (dd, J=2,3, 8,5 Hz, 1H), 7,39 - 7,19 (m, 7H), 6,94 (s, 1H), 4,80 (td, J=4,1,8,0 Hz, 1H), 4,20 (a d, J=6,1 Hz, 2H), 4,14 - 4,07 (m, 1H), 4,06 - 3,99 (m, 1 H), 3,72 (a d, J=13,6 Hz, 2H), 3,29 - 3,22 (m, 2H), 2,98 - 2,92 (m, 1H), 2,45 - 2,41 (m, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,22 - 2,13 (m, 1H), 2,02 - 1,79 (m, 3H), 1,72 - 1,56 (m, 5H), 1,20 - 1,03 (m, 9H). ESI [M+H] = 685,2
Ejemplo 3. Síntesis de N-isopropilcarbamato de [1-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(tercbutilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidilo].
Figure imgf000036_0002
Preparación del compuesto 23.
Figure imgf000036_0003
Método general A, 1-bencil-3-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-(4-hidroxi-1-piperidil)tiazol-5-il]fenil]urea. ESI [M+H] = 544,1
Preparación del Ej. 3.
Figure imgf000037_0001
A una disolución de 1-bencil-3-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-(4-hidroxi-1-piperidil)tiazol-5-il]fenil]urea (50 mg, 91,96 umoles, 1 eq.) en Tol. (2 ml), se añadieron DmA p (22,47 mg, 183,92 umoles, 2 eq.) y [isopropil(metil)-azaniliden]metanona (78,26 mg, 919,62 umoles, 10 eq.). La mezcla se agitó a 100 °C durante 4 h y entonces se concentró. El residuo se purificó por CCF prep (éter de petróleo/EtOAc=1:3) y luego HPLC prep ácida dando N-isopropilcarbamato de [1-[5-[4-(bencilcarbamoilam ino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidilo] (28,31 mg , 99,2 % de pureza) como un sólido amarillo. 1H Rm N (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,29 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,71 (dd, J=2,0, 8,3 Hz, 1H), 7,43 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,35 (d, J=3,9 Hz, 5H), 7,27 (dt, J=2,7, 5,7 Hz, 1H), 4,98 - 4,93 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 3,90 - 3,59 (m, 5H), 2,19 - 2,07 (m, 2H), 1,99 - 1,86 (m, 2H), 1,22 (s, 9H), 1,16 (d, J=6,8 Hz, 6H). ESI [M+H] = 629,1
Ejemplo 4. Síntesis de 4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(2-piridilmetilcarbamoilamino)fenil]tiazol-2-il]piperidin-1-carboxilato de isopropilo.
Esquema 3:
Figure imgf000037_0002
Preparación del compuesto 45
Figure imgf000038_0001
Método general D, carbamato de 4-nitrofenilo (4-bromo-3-(N-(terc-butil)sulfamoil)fenilo). ESI [M+H] =474,1
Método general E para la preparación del compuesto de sulfonamida 46.
Figure imgf000038_0002
A una disolución de 2-piridilmetanamina (352 mg, 3,3 mmoles, 5 eq.) y DIEA (84 mg, 650 umoles, 1 eq.) en DCM (3 ml) se añadió la disolución de N-[4-bromo-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de (4-nitrofenilo) (307 mg, 650 umoles, 1 eq.) en DCM (3 ml). La mezcla se agitó a 25 °C durante 1 h, luego se diluyó con DCM (30 ml) y se lavó con H2O (20 ml x 2). La fase orgánica se concentró y el residuo se purificó por CCF prep (SiÜ2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 0:1) dando 1-[4-bromo-3-(terc-butilsalfamoil)fenil]-3-(2-piridilmetil)urea (180 mg, en bruto) como un sólido amarillo. eS i [M+H] =441,2/443,2
Preparación del compuesto 47
Figure imgf000038_0003
Una mezcla de 1-[4-bromo-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]-3-(2-piridilmetil)urea (140 mg, 317,21 umoles, 1 eq.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (322,21 mg, 1,27 mmoles, 4 eq.), Pd(dppf)Cl2 (116,05 mg, 158,61 umoles, 0,5 eq.) y KOAc (93,39 mg, 951,64 umoles, 3 eq.) en dioxano (4 ml) se desgasificó y se purgó con N2 durante 3 veces, y entonces la mezcla se agitó a 80 °C durante 12 h bajo atmósfera de N2. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (SiÜ2 , éter de petróleo/acetato de etilo=1/0 a 1:1) dando 1-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]-3-(2-piridilmetil)urea (50 mg, 89,37 umoles, 28,17 % de rendimiento, 87,3 % de pureza). ESI [M+H] =489,4
Método general K para la preparación del Ej. 4 de compuesto
Figure imgf000038_0004
Una mezcla de 1-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan -2-il)fenil]-3-(2-piridilmetil)urea (26,38 mg, 54,01 umoles, 1,2 eq.), 4-(5-bromotiazol-2-il)piperidin-1-carboxilato de isopropilo (15 mg, 45,01 umoles, 1 eq.), Na2CÜ3 (9,54 mg, 90,02 umoles, 2 eq.), KF (7,85 mg, 135,04 umoles, 3 eq.) y Pd(pPh3)4 (5,20 mg, 4,50 umoles, 0,1 eq.) en H2O (0,1 ml)/EtOH (0,3 ml)/Tol. (0,3 ml) se desgasificó y se purgó con N2 durante 3 veces, y entonces la mezcla se agitó a 85 °C durante 12 h bajo atmósfera de N2. La mezcla de reacción se filtró y se concentró. El residuo se purificó por CCF prep (SiÜ2 , éter de petróleo/acetato de etilo=1/2) y luego HPLC prep (condición de TFA) dando 4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(2-piridilmetilcarbamoilamino)fenil]tiazol-2-il]piperidin-1-carboxilato de isopropilo (6,36 mg, 8,21 umoles, 18,24 % de rendimiento, 94,07 % de pureza, TFA) como un sólido amarillo pálido. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,75 (a d, J=5,6 Hz, 1 H), 8,53 (a t, J=7,9 Hz, 1H), 8,34 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,04 (a d, J=8,1 Hz, 1H), 7,92 (a t, J=6,5 Hz, 1 H), 7,75 (s, 1H), 7,69 (dd, J=2,3, 8,4 Hz, 1H), 7,39 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,94 - 4,92 (m, 1 H), 4,77 (s, 2H), 4,24 (a d, J=13,4 Hz, 2H), 3,31 - 3,25 (m, 1 H), 3,02 (s a, 2H), 2,15 (a d, J=11,5 Hz, 2H), 1,76 (dq, J=4,2, 12,3 Hz, 2H), 1,28 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] = 615,2
Ejemplo 5. Síntesis de 4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilam ino)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de isopropilo.
Figure imgf000039_0001
Preparación del compuesto 56
Figure imgf000039_0002
Método general A, 4-[5-[4-acetamido-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de terc-butilo. ESI [M+H] = 538,2
Método general C para la preparación del compuesto de sulfonamida 57.
Figure imgf000040_0001
A una disolución de 4-[5-[4-acetamido-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de tercbutilo (110 mg, 205 umoles, 1 eq.) en DCM (2 ml) se añadió TFA (1 ml) y la mezcla se agitó a 25 °C durante 30 min. La mezcla se concentró dando N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-(2-piperazin-1-iltiazol-5-il)fenil]acetamida (80 mg, 183 umoles, 89,4 % de rendimiento) como un sólido amarillo. ESI [M+H] = 438,2
Preparación del compuesto 58
Figure imgf000040_0002
Método general D, 4-[5-[4-acetamido-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de isopropilo.
ESI [M+H] = 524,1
Preparación del compuesto 59
Figure imgf000040_0003
Método general F, 4-[5-[4-amino-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de isopropilo. ESI [M+H] = 482,1
Preparación del Ej. 5 de compuesto
Figure imgf000040_0004
Método general D, 4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,22 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,56 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,30 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 4,94 - 4,81 (m, 2H), 3,61 - 3,43 (m, 8H), 1,20 (dd, J=6,2, 14,5 Hz, 12H), 1,07 (s, 9H). ESI [M+H] = 568,3
Ejemplo 6. Síntesis de 4-[5-[4-(benciloxicarbonilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de isopropilo Esquema 5:
Preparación del Ej. 6 de compuesto
Figure imgf000041_0001
Método general D, 4-[5-[4-(benciloxicarbonilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]piperazin-1-carboxilato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,33 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,68 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1H), 7,45 - 7,27 (m, 7H), 5,21 (s, 2H), 4,94 - 4,88 (m, 1H), 3,68 - 3,51 (m, 8H), 1,27 (d, J=6,4 Hz, 6H), 1,19 - 1,11 (m, 9H). ESI [M+H] = 616,3
Ejemplo 7. Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(ciclopentoxicarbonilam ino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-isopropilo.
Esquema 6:
Figure imgf000041_0002
Método general B para la preparación del compuesto de sulfonamida 83.
Figure imgf000041_0003
A una mezcla de (trans-4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de terc-butilo (1,3 g, 3,6 mmoles, 2 eq.) y N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]carbamato de isoprop ilo (800 mg, 1,8 mmoles, 1 eq.) en dioxano (12 ml) y H2O (2 ml) se añadieron Na2CO3 (579 mg, 5,5 mmoles, 3 eq.) y Pd(dppf)Cl2 (133 mg, 182 umoles, 0,1 eq.). La mezcla se agitó a 80 °C durante 12 h bajo atmósfera de N2 y entonces se concentró. El residuo se diluyó con H2O (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (5 ml x 3), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 1:0 a 3:1) dando trans-isopropil-N-[4-[2-[4-(terc-butoxicarbonilam ino)ciclohexil]tiazol-5-il]-3- (tercbutilsulfamoil)fenil]carbamato (660 mg, en bruto), en que 60 mg se purificó por HPLC prep (columna: Agela Durashell C18 150X25 5u;fase móvil: [agua (0,04 % deNH3H2O)-ACN]; B % de: 60 %-90 %, 10 min) dando el compuesto 83 puro (40,92 mg, 99,64 % de pureza) como un sólido blanco para la administración. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,06 (s, 1H), 8,32 (d, J=2,1 Hz, 1 H), 7,70 - 7,60 (m, 2H), 7,38 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,81 (a d, J=7,9 Hz, 1 H), 4,99 - 4,87 (m, 1H), 3,27 (s a, 1H), 2,94 - 2,84 (m, 1H), 2,13 (a d, J=11,7 Hz, 2H), 1,90 (a d, J=11,1 Hz, 2H), 1,63 - 1,49 (m, 2H), 1,39 (s, 9H), 1,33 (a d, J=14,4 Hz, 2H), 1,28 (d, J=6,4 Hz, 6H), 1,07 (s, 9H). ESI [M+H] =595,3
Preparación del compuesto 84
Figure imgf000042_0001
Método general F, N-[4-[2-(4-aminociclohexil)tiazol-5-il]-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de transisopropilo. ESI [M+H] = 495,2
Preparación del Ej. 7
Figure imgf000042_0002
Método general D, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(ciclopentoxicarbonilam ino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,04 (s, 1H), 8,29 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,61 - 7,59 (m, 2H),7,35 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,00 (a d, J=7,9 Hz, 1H), 6,96 - 6,93 (m, 1H), 4,96 - 4,87 (m, 2H), 3,29 - 3,22 (m, 1H), 2,87 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,10 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 1,88 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 1,75 (s a, 2H), 1,61 - 1,48 (m, 8H), 1,36 - 1,27 (m, 2H), 1,25 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,04 (s, 9H). ESI [M+Na] = 629,3
Ejemplo 8. Síntesis de N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metilo.
Figure imgf000043_0001
Preparación del compuesto 85
Figure imgf000043_0002
Método general D, N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-(4-nitrofenil)o. ESI [M+H] = 660,2
Preparación del de compuesto Ej. 8
Figure imgf000043_0003
Método general H, N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,38 (s, 1H), 7,80 - 7,73 (m, 1H), 7,69 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1 H), 7,40 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,05 - 5,00 (m, 1H), 4,48 (a dd, J=3,0, 12,8 Hz, 1H), 4,21 (a dd, J=7,2, 12,6 Hz, 1 H), 3,78 - 3,66 (m, 2H), 3,57 - 3,46 (m, 1H), 3,22 (td, J=8,3, 11,2 Hz, 1 H), 3,07 -3,01 (m, 3H), 2,43 - 1,99 (m, 8H), 1,98 - 1,88 (m, 1H), 1,80 - 1,66 (m, 2H), 1,47 (c, J=12,5 Hz, 2H), 1,34 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,20 - 1,12 (m, 9H). ESI [M+H] = 636,2
Ejemplo 9. Síntesis de (3-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(2-((1S,4r)-4-(((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)carbonil)amino)ciclohexil)tiazol-5-il)fenil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 85.
Figure imgf000044_0001
1H RMN (METANOL-d4, 400MHz): 5 = 8,34 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,66 (dd, J=8,5, 2,1 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,93-5,04 (m, 1H), 4,46 (dd, J=13,0, 2,9 Hz, 1H), 4,18 (dd, J=13,0, 7,1 Hz, 1H), 3,64-3,75 (m, 2H), 3,42-3,58 (m, 1H), 3,12-3,25 (m, 1H), 3,00-3,06 (m, 3H), 1,97-2,39 (m, 8H), 1,84-1,96 (m, 1H), 1,64-1,77 (m, 2H), 1,44 (c, J=12,6 Hz, 2H), 1,31 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,13 (s, 9H). ESI [M+H] = 636,3
Ejemplo 10. Síntesis de N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-terc-butilo.
Figure imgf000044_0002
Método general B, N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-terc-butilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,24 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,72 - 7,66 (m, 2H), 7,37 - 7,29 (m, 5H), 7,28 - 7,21 (m, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,39 (a t, J=11,6 Hz, 1H), 2,98 (tt, J=3,4, 12,1 Hz, 1H), 2,25 - 2,17 (m, 2H), 2,04 (a d, J=11,5 Hz, 2H), 1,67 (dq, J=2,9, 12,9 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,41 - 1,32 (m, 2H), 1,10 (s, 9H). ESI [M+H] = 642,3
Ejemplo 11. Síntesis de N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metilo.
Esquema 8:
Figure imgf000045_0001
Preparación del compuesto 86
Figure imgf000045_0002
M é to d o g e n e r a l F , trans-1-[4-[2-(4-aminociclohexil)tiazol-5-il]-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]-3-bencil-urea. E S I [M H ] = 542 ,3
Preparación del compuesto 87
Figure imgf000045_0003
Método general D, N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-(4-nitrofenilo).
Preparación del Ej. 11
Figure imgf000046_0001
Método general H, N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de [(2R)-1-metilpirrolidin-2-il]metilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,30 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,70 (dd, J=2,3, 8,4 Hz, 1H), 7,42 - 7,31 (m, 5H), 7,27 (dt, J=2,6, 5,7 Hz, 1H), 4,54 - 4,41 (m, 3H), 4,21 (dd, J=7,1, 12,7 Hz, 1H), 3,79 - 3,66 (m, 2H), 3,52 (a t, J=11,6 Hz, 1H), 3,26 - 3,17 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,42 - 1,98 (m, 8H), 1,97 - 1,87 (m, 1H), 1,80 - 1,65 (m, 2H), 1,54 - 1,40 (m, 2H), 1,15 (s, 9H). ESI [M+H] = 683,3
Ejemplo 12. Síntesis de ((1r,4S)-4-(5-(4-(3-benc¡lure¡do)-2-(N-(terc-but¡l)sulfamoil)fen¡l)t¡azol-2-il)ciclohexil)carbamato de ((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metilo
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 87.
Figure imgf000046_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,29 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,83 - 7,74 (m, 1H), 7,73 - 7,65 (m, 1H), 7,43 - 7,31 (m, 5H), 7,30 - 7,22 (m, 1H), 4,55 - 4,35 (m, 3H), 4,21 (a dd, J=7,1, 12,7 Hz, 1H), 3,79 - 3,61 (m, 2H), 3,58 - 3,42 (m, 1H), 3,23 (s a, 1H), 3,08 - 3,02 (m, 3H), 2,43 - 1,98 (m, 8H), 1,97 - 1,86 (m, 1H), 1,80 - 1,65 (m, 2H), 1,54 - 1,39 (m, 2H), 1,19 - 1,07 (m, 9H). ESI [M+H] = 683,3
Ejemplo 13. Síntes¡s de (S)-(4-(5-(2-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)-4-(3-(1-fen¡let¡l)ure¡do)fen¡l)t¡azol-2-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de ¡soprop¡lo.
Figure imgf000047_0001
Preparación del compuesto 89
Figure imgf000047_0002
M é to d o g e n e r a l D , 4-(isopropoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octano-1-carboxilato.
Método general O para la preparación del compuesto 90
Figure imgf000048_0001
A una disolución de 4-(isopropoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octano-1- carboxilato de metilo (400 mg, 1,49 mmoles, 1 eq.) en MeOH (5 ml), se añadió LiOH (106,70 mg, 4,46 mmoles, 3 eq.) en H2O (5 ml) y la mezcla se agitó a 50 °C durante 1 h. La mezcla se concentró para retirar MeOH y entonces se extrajo con MTBE (10 ml*2). El pH de fase acuosa se ajustó a 1-2 añadiendo disolución 4 N de HCl y entonces se extrajo con EtOAc (10 ml*3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando ácido 4-(isopropoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (270 mg, en bruto) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 4,86 (a d, J=6,4 Hz, 1H), 4,46 (s a, 1 H), 2,00 - 1,80 (m, 12H), 1,23 (a d, J=5,9 Hz, 6H).
Método general N para la preparación del compuesto 91
Figure imgf000048_0002
A una disolución de ácido 4-(isopropoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (270 mg, 1,06 mmoles, 1 eq.) en DCM (5 ml), se añadieron DMF (7,73 mg, 105,75 umoles, 0,1 eq.) y (COCl)2 (201,34 mg, 1,59 mmoles, 1,5 eq.). La mezcla se agitó a 26 °C durante 0,2 h y entonces se concentró. El residuo se disolvió en THF (5 ml) y se añadió en NH3.H2O (741,24 mg, 5,29 mmoles, 5 eq.) en dioxano (5 ml) gota a gota. Entonces la mezcla se agitó a 26 °C durante 0,3 h. La mezcla se concentró y se diluyó con EtOAc (20 ml) y se lavó con H2O (10 ml). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando N-(1-carbamoil-4-biciclo[2.2.2]octanil)carbamato de isopropilo como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 5,43 (s a, 1H), 5,17 (s a, 1H), 4,85 -4,71 (m, 1H), 4,35 (s a, 1H), 1,82 (s, 12H), 1,13 (d, J=6,2 Hz, 6H). ESI[M+H]=255,2
Método general L para la preparación del compuesto 92
Figure imgf000048_0003
A una disolución de N-(1-carbamoil-4-biciclo[2.2.2]octanil)carbamato de isopropilo (60 mg, 235,92 umoles, 1 eq.) en 2-Me-THF (2 ml), se añadió 2,4-bis(4-metoxifenil)-2,4-ditioxo-1,3.2.4ditiadifosfetano (95,42 mg, 235,92 umoles, 1 eq.) y la mezcla se agitó a 80 °C durante 0,5 h. La mezcla se vertió en Na2CO3 ac. sat. (10 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml*3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por CCF prep (éter de petróleo/acetato de etilo =2:3) dando N-(1-carbamotioil-4-biciclo[2.2.2]octanil)carbamato de isopropilo (30 mg, en bruto) como un sólido amarillo. ESI [M+H]=271,1
Método general M para la preparación del compuesto 93
Figure imgf000049_0001
A una disolución de N-(1-carbamotioil-4-biciclo[2.2.2]octanil)carbamato de isopropilo (85 mg, 314,36 umoles, 1 eq.) en EtOH (2 ml), se añadieron TsOH.H2O (119,59 mg, 628,72 umoles, 2 eq.) y 2-bromo-1,1-dietoxi-etano (123,90 mg, 628,72 umoles, 2 eq.). La mezcla se agitó a 80 °C durante 1 h y entonces se concentró y se diluyó con EtOAc (30 ml). La mezcla se lavó con Na2CO3 ac. sat. (10 ml*2) y la fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por CCF prep (éter de petróleo/acetato de etilo = 3:1) dando N-(1-tiazol-2-il-4-biciclo[2.2.2]octanil)carbamato de isopropilo (80 mg, en bruto) como un sólido amarillo. ESI [M+H]=295,3
Preparación del compuesto 94
Figure imgf000049_0002
Método general J, N-[1-(5-bromotiazol-2-il)-4-biciclo[2.2.2]octanil]carbamato de isopropilo.
ESI[M+H]=375,2/373,2
Preparación del compuesto 95
Figure imgf000049_0003
Método general B, N-[1-[5-[4-amino-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-biciclo[2.2.2]octanil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] = 521,2
Preparación del compuesto 96
Figure imgf000049_0004
Método general D, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)-1-biciclo[2.2.2]octanil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de (4-nitrofenilo). ESI [M+H] = 686,4
Preparación del Ej. 13
Figure imgf000050_0001
Método general E, N-[1-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[[(1S)-1-feniletil]carbamoilamino]fenil]tiazol-2-il]-4-biciclo[2.2.2]octanil]carbamato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,67 (dd, J=2,3, 8,3 Hz, 1H), 7,41 - 7,32 (m, 5H), 7,29 - 7,23 (m, 1H), 4,99 - 4,93 (m, 1H), 4,83 - 4,76 (m, 1H), 2,17 - 2,08 (m, 6H), 2,07 - 1,99 (m, 6H), 1,51 (d, J=7,0 Hz, 3H), 1,22 (a d, J=6,0 Hz, 6H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] = 668,3
Ejemplo 14. Síntesis de (R)-(4-(5-(2-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)-4-(3-(1-fen¡letil)ure¡do)fen¡l)t¡azol-2-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 96.
Figure imgf000050_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,18 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,74 - 7,69 (m, 1H), 7,64 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,38 -7,29 (m, 5H), 7,26 - 7,19 (m, 1H), 4,92 (c, J=7,0 Hz, 1H), 4,82 - 4,71 (m, 1H), 2,15 - 2,05 (m, 6H), 2,04 - 1,95 (m, 6H), 1,48 (d, J=7,0 Hz, 3H), 1,20 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+h ] = 668,3
Ejemplo 15. Síntes¡s de (S)-(4-(5-(2-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)-4-(3-(1-(p¡r¡d¡n-2-¡l)et¡l)ure¡do)fen¡l)t¡azol-2-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 96.
Figure imgf000050_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,72 (d, J=5,6 Hz, 1H), 8,46 (t, J=7,9 Hz, 1H), 8,28 (d, J=2,3 Hz, 1H), 8,02 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,85 (t, J=6,6 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,63 (dd, J=2,3, 8,4 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,13 (c, J=7,1 Hz, 1H), 4,84 - 4,74 (m, 1H), 2,15 - 2,07 (m, 6H), 2,07 - 1,98 (m, 6H), 1,65 (d, J=7,1 Hz, 3H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] = 669,2
Ejemplo 16. Síntes¡s de (R)-(4-(5-(2-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)-4-(3-(1-(p¡r¡d¡n-2-¡l)et¡l)ure¡do)fen¡l)t¡azol-2-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 96.
Figure imgf000051_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,75 (d, J=5,1 Hz, 1H), 8,57 (dt, J=1,5, 7,9 Hz, 1H), 8,29 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,11 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,98 - 7,90 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,62 (dd, J=2,3, 8,3 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,15 (c, J=7,1 Hz, 1H), 4,84 - 4,75 (m, 1H), 2,16 - 2,07 (m, 6H), 2,06 - 1,97 (m, 6H), 1,67 (d, J=7,2 Hz, 3H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] = 669,2
Ejemplo 17. Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)-1-biciclo[2.2.2]octanil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de isopropilo.
Esquema 10:
Preparación del Ej. 17 de compuesto
Figure imgf000051_0002
Método general B, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)-1-biciclo[2.2.2]octanil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,33 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,66 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,03 - 4,91 (m, 1H), 4,78 (a d, J=6,4 Hz, 1H), 2,16 - 2,05 (m, 6H), 2,04 -1,95 (m, 6H), 1,31 (d, J=6,4 Hz, 6H), 1,20 (a d, J=6,0 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] =607,3
Ejemplo 18. Síntesis de (4-(5-(4-(3-bencilureido)-2-(N-(terc-butil)sulfamoil)fenil)tiazol-2-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 94.
Figure imgf000051_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,26 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,72 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 7,38 - 7,33 (m, 5H), 7,27 (td, J=2,6, 8,6 Hz, 1H), 4,80 (a d, J=5,7 Hz, 1H), 4,43 (s, 2H), 2,17 - 2,10 (m, 6H), 2,06 - 2,00 (m, 6H), 1,25 - 1,20 (m, 6H), 1,13 (s, 9H). ESI [M+H] =654,1
Ejemplo 19. Síntesis de (4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(piridin-2-ilmetil)ureido)fenil)tiazol-2-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 94.
Figure imgf000052_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,73 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,51 (dt, J=1,3, 7,9 Hz, 1 H), 8,31 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,02 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 7,90 (t, J=6,8 Hz, 1 H), 7,72 (s, 1 H), 7,66 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,75 (s, 3H), 2,15 - 1,93 (m, 12H), 1,20 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,07 (s, 9H). ESI [M+H] =655,3
Ejemplo 20. Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropilcarbamoiloxi)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de trans-isopropilo.
Esquema 11
TBDPSCI
Figure imgf000052_0003
im idazo. DCM
Figure imgf000052_0002
Figure imgf000052_0004
Ej. 20
Preparación del compuesto 111.
Figure imgf000052_0005
A una disolución de ácido trans-4-hidroxiciclohexanocarboxílico (1 g, 6,94 mmoles, 1 eq.) en MeCN (10 ml), se añadieron HBTU (2,89 g, 7,63 mmoles, 1,1 eq.) y TEA (2,11 g, 20,81 mmoles, 2,90 ml, 3 eq.), seguido por la adición de NH4Cl (742,07 mg, 13,87 mmoles, 2 eq.) y la mezcla se agitó a 26 °C durante 1 h. Entonces se filtró la mezcla y se secó dando trans-4-hidroxiciclohexanocarboxamida (1 g, en bruto) como un sólido blanco que se puede usar sin purificación adicional.
Preparación del compuesto 112.
Figure imgf000053_0001
A una disolución de trans-4-hidroxiciclohexanocarboxamida (12 g, 83,81 mmoles, 1 eq.) en DCM (150 ml), se añadieron IMIDAZOL (11,41 g, 167,62 mmoles, 2 eq.) y terc-butil-cloro-difenil-silano (27,64 g, 100,57 mmoles, 25,83 ml, 1,2 eq.). La mezcla se agitó a 26 °C durante 12 h y luego se vertieron en 1N HCl (200 ml) y la fase orgánica se lavó con Na2CO3 ac. sat. (100 ml). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se lavó con una disolución (éter de petróleo : EtOAc=10:1, 100 ml) y luego se filtró. La torta de filtración se secó dando trans4-[terc-butil(difenil)silil]oxiciclohexanocarboxamida (31,5 g, en bruto). 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,72 - 7,64 (m, 4H), 7,49 - 7,36 (m, 6H), 3,69 - 3,55 (m, 1 H), 2,21 - 2,08 (m, 1 H), 1,96 - 1,83 (m, 2H), 1,82 - 1,69 (m, 2H), 1,50 - 1,23 (m, 4H), 1,12 - 0,98 (m, 9H).
Preparación del compuesto 113.
Figure imgf000053_0002
Método general L, trans-4-[terc-butil(difenil)silil]oxiciclohexanocarbotioamida. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,73 - 7,64 (m, 4H), 7,52 - 7,36 (m, 6H), 3,73 - 3,59 (m, 1H), 2,59 - 2,44 (m, 1H), 1,91 (a d, J=8,3 Hz, 2H), 1,80 -1,66 (m, 2H), 1,57 - 1,35 (m, 4H), 1,08 - 1,04 (m, 9H). ESI [M+H] =398,1
Preparación del compuesto 114.
Figure imgf000053_0003
Método general M, trans-terc-butil-difenil-(4-tiazol-2-ilciclohexoxi)silano. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,63 - 7,55 (m, 5H), 7,42 - 7,25 (m, 7H), 4,05 - 3,96 (m, 1H), 2,97 (tt, J=3,7, 11,7 Hz, 1H), 2,05 (dq, J=3,2, 12,5 Hz, 2H), 1,84 - 1,62 (m, 4H), 1,44 (tt, J=2,9, 13,5 Hz, 2H), 1,01 - 0,98 (m, 9H). ESI [M+H] =422,2
Preparación del compuesto 114A.
Figure imgf000053_0004
Método general J, trans-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexoxi]-terc-butil-difenil-silano (1,8 g, en bruto). ESI [M+H] =502,0
Preparación del compuesto 115.
Figure imgf000054_0001
A una disolución de trans-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexoxi]-terc-butil-difenil-silano (1,5 g, 3,00 mmoles, 1 eq.) en THF (10 ml), se añadió TBAF (1 M, 4,49 ml, 1,5 eq.) y la mezcla se agitó a 26 °C durante 12 h y entonces se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo=20:1 -1:1) proporcionando trans-4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexanol (500 mg, 1,91 mmoles, 63,64 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
Preparación del compuesto 116.
Figure imgf000054_0002
A una disolución de trans-4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexanol (500 mg, 1,91 mmoles, 1 eq.) en DMF (5 ml), se añadieron 2-isocianatopropano (486,93 mg, 5,72 mmoles, 3 eq.) y DIEA (739,47 mg, 5,72 mmoles, 3 eq.). La mezcla se agitó a 100 °C durante 40 h y luego se vertió en H2O (50 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml*3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo=10:1 -1:1) proporcionando N-isopropilcarbamato de trans-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexilo] (180 mg, 518,33 umoles, 27,18 % de rendimiento) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,61 (s, 1 H), 3,85 - 3,64 (m, 2H), 3,15 - 2,99 (m, 1 H), 1,98 - 1,83 (m, 6H), 1,73 (a d, J=13,5 Hz, 2H), 1,14 - 1,12 (m, 6H). ESI [M+H] =347,1/349,1
Preparación del Ej.20.
Figure imgf000054_0003
Método general B, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropilcarbamoiloxi)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,34 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,67 (dd, J=2,0, 8,4 Hz, 1 H), 7,37 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,05 - 4,93 (m, 1H), 4,89 (s a, 1 H), 3,83 - 3,64 (m, 1 H), 3,15 (s a, 1 H), 2,12 - 1,88 (m, 6H), 1,84 - 1,64 (m, 2H), 1,31 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,19 - 1,04 (m, 15H). ESI [M+H] =581,4
Ejemplo 21. Síntesis de isopropilcarbamato de (1r,4r)-4-(5-(4-(3-bencilureido)-2-(N-(tercbutil)sulfamoil)fenil)tiazol-2-il)ciclohexilo
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 116.
Figure imgf000055_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,24 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,69 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 7,40 - 7,28 (m, 5H), 7,28 - 7,17 (m, 1H), 4,89 (s a, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,79 - 3,64 (m, 1H), 3,14 (s a, 1H), 2,04 - 1,94 (m, 6H), 1,84 - 1,65 (m, 2H), 1,16 - 1,08 (m, 15H). ESI [M+H] = 628,4
Ejemplo 22. Síntesis de N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(4-piridilmetilcarbamoilamino)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo.
Figure imgf000055_0002
Preparación del compuesto 117.
Figure imgf000055_0003
Método general K, N-[4-[5-[4-amino-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de transisopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,68 - 7,57 (s, 1H), 7,43 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,13 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 6,82 (dd, J=2,4, 8,2 Hz, 1H), 4,84 - 4,77 (m, 1 H), 3,44 (tt, J=3,9, 11,5 Hz, 1H), 2,97 (tt, J=3,6, 12,1 Hz, 1 H), 2,26 - 2,13 (m, 2H), 2,11 - 2,02 (m, 2H), 1,67 (dq, J=3,0, 12,9 Hz, 2H), 1,49 - 1,32 (m, 2H), 1,22 (dd, J=2,5, 6,7 Hz, 6H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] =495,2
Preparación del compuesto118.
Figure imgf000056_0001
Método general D, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de trans-(4-nitrofenilo). ESI [M+H] =660,1
Preparación del Ej. 22.
Figure imgf000056_0002
Método general E, N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(4-piridilmetilcarbamoilamino)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,79 (d, J=6,7 Hz, 2H), 8,34 (d, J=2,3 Hz, 1 H), 8,07 (d, J=6,6 Hz, 2H), 7,76 (s, 1H), 7,69 (dd, J=2,3, 8,4 Hz, 1 H), 7,39 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,85 - 4,83 (m, 1 H), 4,73 (s, 2H), 3,47 (tt, J=3,6, 11,5 Hz, 1H), 3,04 (tt, J=3,4, 12,0 Hz, 1H), 2,30 - 2,19 (m, 2H), 2,09 (a d, J=10,1 Hz, 2H), 1,71 (dq, J=3,0, 12,9 Hz, 2H), 1,43 (dq, J=3,3, 12,6 Hz, 2H), 1,24 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] =629,2
Ejemplo 23. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(4-fluorobencil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.1
Figure imgf000056_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,27 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,77 (s, 1 H), 7,71 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1 H), 7,38 (td, J=2,7, 8,6 Hz, 3H), 7,12 - 7,04 (m, 2H), 5,00 - 4,92 (m, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,54 - 3,41 (m, 1H), 3,05 (tt, J=3,5, 12,0 Hz, 1 H),2,13 - 2,05 (m, 2H), 2,05 - 2,04 (m, 2H), 1,72 (dq, J=3,0, 12,8 Hz, 2H), 1,43 (dq, J=3,2, 12,5 Hz, 2H), 1,24 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+H] =646,2
Ejemplo 24. Síntesis de ((1R,4r)-4-(5-(2-(N-isopropilsulfamoil)-4-(3-((R)-1-feniletil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de ¡soprop¡lo
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000057_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,20 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,64 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 7,38 - 7,29 (m, 5H), 7,26 - 7,19 (m, 1H), 4,94 - 4,89 (m, 1H), 4,81 (a d, J=6,2 Hz, 1H), 3,44 (tt, J=3,9, 11,6 Hz, 1H), 3,01 (tt, J=3,5, 12,0 Hz, 1H), 2,26 - 2,17 (m, 2H), 2,10 - 2,01 (m, 2H), 1,68 (dq, J=2,9, 12,8 Hz, 2H), 1,48 (d, J=7,1 Hz, 3H), 1,43 - 1,33 (m, 2H), 1,21 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,10 (s, 9H). ESI [M+H] =642,3
Ejemplo 25. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(piridin-3-ilmetil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000057_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,84 (s, 1H), 8,74 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,60 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,30 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,04 (dd, J=5,8, 7,8 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,65 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,85 - 4,77 (m, 1H), 4,60 (s, 2H), 3,44 (tt, J=3,9, 11,5 Hz, 1H), 3,10 - 2,93 (m, 1H), 2,28 - 2,17 (m, 2H), 2,13 - 2,01 (m, 2H), 1,69 (dq, J=3,0, 12,8 Hz, 2H), 1,50 - 1,33 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] =629,3
Ejemplo 26. Síntesis de ((1S,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((S)-1-feniletil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000057_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,19 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,65 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 7,39 - 7,30 (m, 5H), 7,26 - 7,21 (m, 1H), 4,93 (c, J=6,5 Hz, 1H), 4,83 - 4,81 (m, 1H), 3,49 - 3,40 (m, 1H), 3,05 - 2,96 (m, 1H), 2,22 (a d, J=11,7 Hz, 2H), 2,06 (a d, J=11,5 Hz, 2H), 1,73 - 1,62 (m, 2H), 1,49 (d, J=6,8 Hz, 3H), 1,43 - 1,36 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,0 Hz, 6H), 1,10 (s, 9H). ESI[M+H] =642,3
Ejemplo 27. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(3-fluorobencil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000058_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,27 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,71 (dd, J=2,3, 8,3 Hz, 1H), 7,40 - 7,32 (m, 2H), 7,18 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,10 (a d, J=9,9 Hz, 1H), 6,99 (dt, J=2,2, 8,5 Hz, 1H), 4,87 (s a, 1H), 4,44 (s, 2H), 3,47 (tt, J=3,8, 11,6 Hz, 1H), 3,02 (tt, J=3,5, 12,0 Hz, 1H), 2,24 (a d, J=12,2 Hz, 2H), 2,14 - 2,04 (m, 2H), 1,71 (dq, J=3,0, 12,9 Hz, 2H), 1,50 - 1,36 (m, 2H), 1,24 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+h ] =646,2
Ejemplo 28. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(2-fluorobencil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000058_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,23 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,68 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 7,41 (dt, J=1,5, 7,6 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,29 (ddt, J=1,8, 5,5, 7,7 Hz, 1H), 7,15 (dt, J=1,0, 7,6 Hz, 1H), 7,11 - 7,05 (m, 1H), 4,81 (s a, 1H), 4,46 (s, 2H), 3,45 (tt, J=3,7, 11,6 Hz, 1H), 3,00 (tt, J=3,5, 12,0 Hz, 1H), 2,27 - 2,18 (m, 2H), 2,06 (a d, J=10,1 Hz, 2H), 1,69 (dq, J=3,1, 12,9 Hz, 2H), 1,46 - 1,34 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] =646,2
Ejemplo 29. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(piridin-2-ilmetil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000058_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,79 - 8,73 (m, 1H), 8,56 (dt, J=1,5, 7,9 Hz, 1H), 8,35 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,06 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,94 (t, J=6,4 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,69 (dd, J=2,3, 8,4 Hz, 1H), 7,39 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,86 - 4,83 (m, 1H), 4,79 (s, 2H), 3,47 (tt, J=3,9, 11,6 Hz, 1H), 3,05 (tt, J=3,5, 12,0 Hz, 1H), 2,29 - 2,21 (m, 2H), 2,09 (a d, J=10,1 Hz, 2H), 1,71 (dq, J=2,9, 12,8 Hz, 2H), 1,43 (dq, J=3,3, 12,6 Hz, 2H), 1,24 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] =629,3
Ejemplo 30. Síntesis de ((1R,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((R)-1-(piridin-2-il)etil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000059_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,73 (d, J=5,7 Hz, 1H), 8,53 (dt, J=1,8, 7,9 Hz, 1H), 8,28 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,08 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,94 - 7,85 (m, 1H), 7,80 - 7,68 (m, 1H), 7,61 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,13 (c, J=7,0 Hz, 1H), 4,85 - 4,78 (m, 1H), 3,49 - 3,39 (m, 1H), 3,08 - 2,96 (m, 1H), 2,22 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,06 (a d, J=10,1 Hz, 2H), 1,76 - 1,61 (m, 5H), 1,49 - 1,34 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 - 1,02 (m, 9H). ESI [M+H] =643,3
Ejemplo 31. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((3-fluoropiridin-2-¡l)met¡l)ure¡do)fen¡l)t¡azol-2-¡l)c¡clohex¡l)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000059_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,42 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,28 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,78 - 7,62 (m, 3H), 7,44 (td, J=4,4, 8,5 Hz, 1H), 7,38 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,86 - 4,81 (m, 1H), 4,65 (s, 2H), 3,47 (ddd, J=4,0, 7,7, 11,4 Hz, 1H), 3,10 - 3,00 (m, 1H), 2,25 (a d, J=12,1 Hz, 2H), 2,09 (a d, J=10,5 Hz, 2H), 1,72 (dq, J=3,0, 12,9 Hz, 2H), 1,43 (dq, J=3,2, 12,6 Hz, 2H), 1,24 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+H] =647,2
Ejemplo 32. Síntesis de ((1S,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((S)-1-(piridin-2-il)etil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000060_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,72 (d, J=5,3 Hz, 1H), 8,50 (dt, J=1,8, 7,9 Hz, 1H), 8,27 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,05 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,88 (t, J=6,6 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,61 (dd, J=2,6, 8,3 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,12 (c, J=7,0 Hz, 1 H), 4,87 - 4,68 (m, 1H), 3,51 - 3,38 (m, 1H), 3,01 (tt, J=3,3, 12,0 Hz, 1H), 2,21 (a d, J=11,8 Hz, 2H), 2,10­ 1,97 (m, 2H), 1,76 - 1,57 (m, 5H), 1,48 - 1,33 (m, 2H), 1,22 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,13 - 1,00 (m, 9H).
ESI [M+H] =643,3
Ejemplo 33. Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-4-piperidilmetilo.
Figure imgf000060_0002
Preparación del compuesto 119.
Figure imgf000060_0003
Método general H, 4-[[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam oiloxim etil]p iperidin-1-carboxilato de trans-terc-butilo. ESI [M+H] =736,5
Preparación del Ej. 33.
Figure imgf000061_0001
Método general C, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de trans-4-piperidilmetilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,37 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,68 (a d, J=7,9 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,86 - 4,78 (m, 1H), 4,11 (d, J=6,2 Hz, 2H), 3,50 - 3,39 (m, 3H), 3,11 - 2,96 (m, 3H), 2,23 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,13 - 1,98 (m, 5H), 1,70 (dq, J=2,8, 12,8 Hz, 2H), 1,60 - 1,34 (m, 4H), 1,22 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M/2+H] = 318,6
Ejemplo 34. Síntesis de ((1R,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(((((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)carbonil)amino)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000061_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,41 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,80 - 7,73 (m, 2H), 7,45 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,86 - 4,81 (m, 1H), 4,67 (dd, J=3,2, 12,8 Hz, 1H), 4,35 (dd, J=7,1, 12,8 Hz, 1H), 3,85 - 3,71 (m, 2H), 3,47 (tt, J=3,9, 11,6 Hz, 1H), 3,26 (td, J=8,1, 11,5 Hz, 1H), 3,10 (s, 3H), 3,08 - 2,98 (m, 1H), 2,46 - 2,35 (m, 1H), 2,30 - 2,18 (m, 3H), 2,15 - 1,95 (m, 4H), 1,72 (dq, J=3,1, 12,9 Hz, 2H), 1,43 (dq, J=3,3, 12,6 Hz, 2H), 1,25 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,13 (s, 9H).
ESI [M+H] = 636,3
Ejemplo 35. Síntesis de ((1S,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(((((S)-1-metilpirrolidin-2-il)metoxi)carbonil)amino)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000061_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,41 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,80 - 7,71 (m, 2H), 7,44 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,86 - 4,79 (m, 1H), 4,67 (dd, J=3,2, 13,0 Hz, 1H), 4,40 - 4,31 (m, 1H), 3,87 - 3,66 (m, 2H), 3,47 (tt, J=3,8, 11,6 Hz, 1H), 3,26 (td, J=8,3, 11,4 Hz, 1H), 3,10 (s, 3H), 3,04 (tt, J=3,4, 12,0 Hz, 1H), 2,48 - 2,33 (m, 1H), 2,30 - 2,16 (m, 3H), 2,15 - 1,92 (m, 4H), 1,72 (dq, J=2,7, 12,8 Hz, 2H), 1,51 - 1,36 (m, 2H), 1,25 (a d, J=6,4 Hz, 6H), 1,13 (s, 9H). ESI [M/2+H] = 318,6 Ejemplo 36. Síntesis de ((1R,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(((((R)-pirrolidin-2-il)metoxi)carbonil)amino)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000062_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,38 (a d, J=2,2 Hz, 1H), 7,75 - 7,66 (m, 2H), 7,41 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,81 (s a, 1H), 4,48 (a dd, J=3,4, 12,5 Hz, 1H), 4,33 (dd, J=7,8, 12,5 Hz, 1H), 3,93 (dq, J=3,6, 8,0 Hz, 1H), 3,49 - 3,33 (m, 3H), 3,00 (ddd, J=3,5, 8,5, 12,0 Hz, 1H), 2,30 - 2,18 (m, 3H), 2,10 - 2,00 (m, 3H), 1,85 (qd, J=8,5, 12,9 Hz, 2H), 1,74 - 1,61 (m, 2H), 1,46 - 1,34 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,09 (s, 9H). ESI [M/2+H] = 311,6
Ejemplo 37. Síntesis de ((1S,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(((((S)-pirrolidin-2-il)metoxi)carbonil)amino)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de ¡soprop¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000062_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,38 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,79 - 7,68 (m, 2H), 7,41 (d, J=8,2 Hz, 1H), 4,85 - 4,78 (m, 1H), 4,49 (dd, J=3,4, 12,5 Hz, 1H), 4,33 (dd, J=7,9, 12,3 Hz, 1H), 3,94 (dq, J=3,4, 8,0 Hz, 1H), 3,49 - 3,40 (m, 1H), 3,40 - 3,33 (m, 2H), 3,08 - 2,97 (m, 1H), 2,31 - 2,19 (m, 3H), 2,17 - 2,00 (m, 4H), 1,85 (qd, J=8,5, 13,0 Hz, 1H), 1,75 -1,62 (m, 2H), 1,46 - 1,35 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,10 (s, 9H). ESI [M/2+H] = 311,6
Ejemplo 38. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(((oxetan-3-iloxi)carbonil)amino)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000062_0003
1H RMN (METANOL-d4, 400MHz): 5 = 8,33 (s, 1H), 7,63-7,72 (m, 2H), 7,38 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,50 (a t, J=5,5 Hz, 1H), 4,92 (t, J=6,9 Hz, 2H), 4,81 -4,83 (m, 1H), 4,64-4,73 (m, 2H), 3,44 (a t, J=11,7 Hz, 1H), 2,99 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,21 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,06 (a d, J=11,7 Hz, 2H), 1,59-1,75 (m, 2H), 1,30-1,47 (m, 2H), 1,21 (a d, J=6,0 Hz, 6H), 1,10 ppm (s, 9H). ESI [M+H] = 595,1
Ejemplo 39. Síntesis de (3-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(2-((1r,4r)-4-((isopropoxicarbonil)amino)ciclohexil)tiazol-5-il)fenil)carbamato de bencilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000063_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,36 (s, 1H), 7,75 - 7,67 (m, 2H), 7,46 - 7,28 (m, 6H), 5,28 - 5,14 (m, 2H), 4,85 - 4,76 (m, 1H), 3,47 (a d, J=11,8 Hz, 1H), 3,01 (s a, 1H), 2,23 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 2,07 (a d, J=14,5 Hz, 2H), 1,70 (a d, J=11,0 Hz, 2H), 1,40 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] = 629,2
Ejemplo 40. Síntesis de (3-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(2-((1r,4r)-4-((isopropoxicarbonil)amino)ciclohexil)tiazol-5-il)fenil)carbamato de 2-fluorobenc¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000063_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,36 (s, 1H), 7,77 - 7,63 (m, 2H), 7,52 (t, J=7,0 Hz, 1H), 7,44 - 7,31 (m, 2H), 7,23 - 7,08 (m, 2H), 5,29 (s, 2H), 4,83 (s a, 1H), 3,46 (a d, J=11,8 Hz, 1H), 3,00 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,22 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 2,07 (a d, J=11,4 Hz, 2H), 1,76 - 1,62 (m, 2H), 1,47 - 1,35 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] = 647,2
Ejemplo 41. Síntesis de (3-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(2-((1r,4S)-4-((isopropoxicarbonil)amino)ciclohexil)tiazol-5-il)fenil)carbamato de (S)-1 -fen iletilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000063_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,35 (s a, 1H), 7,81 - 7,65 (m, 2H), 7,48 - 7,36 (m, 5H), 7,31 (a d, J=6,8 Hz, 1H), 5,89 (a d, J=6,2 Hz, 1H), 4,85 (a d, J=5,5 Hz, 1H), 3,47 (s a, 1H), 3,03 (s a, 1H), 2,24 (a d, J=11,2 Hz, 2H), 2,08 (a d, J=11,0 Hz, 2H), 1,71 (c, J=11,9 Hz, 2H), 1,61 (a d, J=6,4 Hz, 3H), 1,49 - 1,37 (m, 2H), 1,24 (a d, J=5,4 Hz, 6H), 1,13 (s, 9H). ESI [M+H] =643,2
Ejemplo 42. Síntesis de (3-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(2-((1r,4r)-4-((isopropoxicarbonil)amino)ciclohexil)tiazol-5-il)fenil)carbamato de piridin-2-ilmetilo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000064_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,56 (a d, J=4,5 Hz, 1H), 8,38 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,94 - 7,87 (m, 1H), 7,78 - 7,72 (m, 2H), 7,59 (a d, J=7,8 Hz, 1H), 7,44 - 7,38 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 4,85 (td, J=5,9, 12,0 Hz, 1H), 3,47 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 3,07 - 2,96 (m, 1H), 2,24 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,13 - 2,04 (m, 2H), 1,77 - 1,65 (m, 2H), 1,48 - 1,37 (m, 2H), 1,24 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+H] =630,2
Ejemplo 43. Síntesis de (3-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)-4-(2-((1r,4R)-4-((¡sopropox¡carbon¡l)am¡no)c¡clohex¡l)t¡azol-5-¡l)fenil)carbamato de (R)-1-fen¡let¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 118.
Figure imgf000064_0002
1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 8,28 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,70 - 7,57 (m, 2H), 7,47 - 7,24 (m, 7H), 7,05 - 6,84 (m, 2H), 5,82 (c, J=6,6 Hz, 1H), 4,79 - 4,65 (m, 1H), 3,35 - 3,24 (m, 1H), 2,88 (tt, J=3,4, 11,9 Hz, 1H), 2,11 (a d, J=11,7 Hz, 2H), 1,89 (a d, J=9,9 Hz, 2H), 1,54 (d, J=6,6 Hz, 5H), 1,30 (s a, 2H), 1,14 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,08 - 0,99 (m, 9H). ESI [M+h ] = 643,3
Ejemplo 44. Síntes¡s de N-[4-[2-[4-(terc-butoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]-3-(tercbutilsulfamoil)fenil]carbamato de trans-isopropilo.
Figure imgf000064_0003
Método general B, N-[4-[2-[4-(terc-butoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]-3-(tercbutilsulfamoil)fenil]carbamato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,06 (s, 1H), 8,32 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,70 - 7,60 (m, 2H), 7,38 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,81 (a d, J=7,9 Hz, 1H), 4,99 - 4,87 (m, 1H), 3,27 (s a, 1H), 2,94 - 2,84 (m, 1H), 2,13 (a d, J=11,7 Hz, 2H), 1,90 (a d, J=11,1 Hz, 2H), 1,63 - 1,49 (m, 2H), 1,39 (s, 9H), 1,33 (a d, J=14,4 Hz, 2H), 1,28 (d, J=6,4 Hz, 6H), 1,07 (s, 9H). ESI [M+H] =595,1
Ejemplo 45. Síntes¡s de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-but¡l)sulfamo¡l)-4-(3-(p¡r¡d¡n-2-¡lmet¡l)ure¡do)fen¡l)t¡azol-2-¡l)c¡clohex¡l)carbamato de terc-but¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó por el mismo método por el producto intermedio clave 82.
Figure imgf000065_0001
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,17 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,75 - 7,59 (m, 2H), 7,43 - 7,22 (m, 3H), 7,21 - 7,03 (m, 2H), 4,53 (m, 2H), 3,43 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,99 (a t, J=12,1 Hz, 1H), 2,22 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 2,06 (a d, J=10,5 Hz, 2H), 1,77 - 1,60 (m, 2H), 1,58 - 1,34 (m, 11H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] =643,3
Ejemplo 46. Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[3-(isopropoxicarbonilamino)azetidin-1-il]tiazol-5-il]fenil]carbamato de isopropilo.
Esquema 15:
Figure imgf000065_0002
Preparación del compuesto 129.
Figure imgf000065_0003
Una mezcla de N-(azetidin-3-il)carbamato;clorhidrato de terc-butilo (72,40 mg, 346,94 umoles, 1,50 eq.), N-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]acetamida (100 mg, 231,29 umoles, 1 eq.), t-BuONa (66,68 mg, 693,87 umoles, 3 eq.), [2-(2-aminoetil)fenil]-doro-paladio; di-terc-butil-[2-(2,4,6-triisopropMfenil)fenM]fosfano (15,88 mg, 23,13 umoles, 0,1 eq.) en alcohol terc-amílico (2 ml) se desgasificó y se purgó con N2 durante 3 veces, y entonces la mezcla se agitó a 100 °C durante 12 h bajo atmósfera de N2 y luego se concentró. El residuo se diluyó con acetato de etilo (20 ml) y se lavó con H2O (20 ml). La fase orgánica se secó y se concentró y el residuo se purificó por CCF prep (EtOAc) dando N-[1-[5-[4-acetamido-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]azetidin-3-il]carbamato de terc-butilo (46 mg, en bruto) como un sólido amarillo. ESI [M+H] =524,3
Preparación del compuesto 130.
Figure imgf000066_0001
Método general F, 5-amino-2-[2-(3-aminoazetidin-1-il)tiazol-5-il]-N-terc-butil-bencenosulfonamida. ESI [M+H] =382,0
Preparación del ejemplo 46
Figure imgf000066_0002
Método general D, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[3-(isopropoxicarbonilamino)azetidin-1-il]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,35 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,67 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1H), 7,45 - 7,32 (m, 2H), 5,04 - 4,94 (m, 1H), 4,92 - 4,88 (m, 1 H), 4,73 - 4,63 (m, 1 H), 4,56 (a t, J=8,5 Hz, 2H), 4,27 (s a, 2H), 1,31 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,27 - 1,19 (m, 15H). ESI [M+H] =554,2
Ejemplo 47. Síntesis de N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-oxetan-3-ilo
Esquema 16:
Figure imgf000066_0003
Ej. 47
Preparación del compuesto 131.
Figure imgf000067_0001
Método general F, trans-4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexanamina. ESI [M+H] =260,9/262,9
Preparación del compuesto 132.
Figure imgf000067_0002
131 132
A una disolución de oxetan-3-ol (1,15 g, 15,51 mmoles, 3 eq.) en DCE (10 ml) se añadieron DIEA (3,34 g, 25,84 mmoles, 4,50 ml, 5 eq.) y TRIFOSGENO (1,53 g, 5,17 mmoles, 1 eq.). La mezcla se agitó a 25-50 °C durante 1 h y luego se añadió una disolución de trans-4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexanamina (1,35 g, 5,17 mmoles, 1 eq.), DIEA (3,34 g, 25,84 mmoles, 4,50 ml, 5 eq.) en DCE (10 ml). La mezcla se agitó a 25 °C durante 0,5 h. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo/acetato de etilo=30/1 a 5:1) dando N-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-oxetan-3-ilo (1,5 g, en bruto) como un sólido blanco.
ESI [M+H] =363,1/361,1
Preparación del Ej. 47
Figure imgf000067_0003
Método general K, N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-oxetan-3-ilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,23 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,71 - 7,66 (m, 2H), 7,37 - 7,29 (m, 5H), 7,24 (s a, 1H), 5,40 - 5,27 (m, 2H), 4,66 - 4,55 (m, 3H), 4,40 (s, 2H), 3,45 (a d, J=11,0 Hz, 1H), 3,00 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,22 (a d, J=13,0 Hz, 2H), 2,07 (a d, J=11,2 Hz, 2H), 1,74 - 1,63 (m, 2H), 1,47 - 1,37 (m, 2H), 1,10 (s, 9H). ESI [M+H] =642,3
Ejemplo 48. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-((isopropoxicarbonil)amino)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de oxetan-3-ilo.
El siguiente compuesto se sintetizó po r e l m ismo método po r e l producto intermedio clave 132.
Figure imgf000067_0004
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,33 (d, J=2,0 Hz, 1 H), 7,71 - 7,64 (m, 2H), 7,36 (d, J=8,4 Hz, 1 H), 5,41 - 5,27 (m, 2H), 4,98 (td, J=6,4, 12,6 Hz, 1H), 4,87 (s a, 1H), 4,63 - 4,56 (m, 2H), 3,45 (a d, J=12,3 Hz, 1H), 3,00 (a t, J=12,0 Hz, 1H), 2,22 (a d, J=13,0 Hz, 2H), 2,11 - 2,02 (m, 2H), 1,74 - 1,63 (m, 2H), 1,42 (c, J=12,7 Hz, 2H), 1,31 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] =595,3
Ejemplo 49. Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(oxetan-3-iloxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-oxetan-3-ilo
Figure imgf000068_0001
Preparación del compuesto 133.
Figure imgf000068_0002
Método general K, N-[4-[5-[4-amino-2-(terc-butilsulfamoil) fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-oxetan-3-ilo. ESI [M+H] =509.0
Preparación del compuesto 134.
Figure imgf000068_0003
Método general D, N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[(4-nitrofenoxi)carbonilamino]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-oxetan-3-ilo. ESI [M+H] =674,2
Preparación del ejemplo 49.
Figure imgf000069_0001
Método general H, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(oxetan-3-iloxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-oxetan-3-ilo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,39 (s, 1H), 8,28 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,71 - 7,58 (m, 2H), 7,48 - 7,34 (m, 2H), 6,97 (s, 1H), 5,50 - 5,39 (m, 1H), 5,32 - 5,20 (m, 1H), 4,87 - 4,68 (m, 4H), 4,61 - 4,36 (m, 4H), 3,30 - 3,23 (m, 1H), 3,01 - 2,82 (m, 1H), 2,12 (a d, J=11,7 Hz, 2H), 1,90 (a d, J=10,4 Hz, 2H), 1,66 -1,47 (m, 2H), 1,43 - 1,26 (m, 2H), 1,04 (s, 9H). ESI [M+H] =609,2
Ejemplo 50. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(piridin-2-ilmetil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de oxetan-3-¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó p o r e l m ismo método p o r e l producto intermedio clave 134.
Figure imgf000069_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,49 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,25 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,82 (dt, J=1,8, 7,7 Hz, 1H), 7,73 - 7,63 (m, 2H), 7,45 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,38 - 7,26 (m, 2H), 5,39 - 5,28 (m, 1H), 4,84 (s a, 1H), 4,70 - 4,56 (m, 3H), 4,53 (s, 2H), 3,44 (a t, J=12,1 Hz, 1H), 3,06 - 2,92 (m, 1H), 2,22 (a d, J=13,2 Hz, 2H), 2,07 (a d, J=11,0 Hz, 2H), 1,79 - 1,60 (m, 2H), 1,50 - 1,35 (m, 2H), 1,10 (s, 9H). ESI [M+H] =643,2
Ejemplo 51. Síntesis de ((1S,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((S)-1-feniletil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de oxetan-3-ilo.
El siguiente compuesto se sintetizó p o r e l m ismo método p o r e l producto intermedio clave 134.
Figure imgf000069_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,19 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,70 - 7,63 (m, 2H), 7,39 - 7,30 (m, 5H), 7,27 - 7,20 (m, 1H), 5,35 (t, J=5,7 Hz, 1H), 4,92 (c, J=6,8 Hz, 2H), 4,84 (s a, 1H), 4,60 (t, J=6,4 Hz, 2H), 3,49 - 3,38 (m, 1H), 3,05 -2,95 (m, 1H), 2,22 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,10 - 2,02 (m, 2H), 1,74 - 1,61 (m, 2H), 1,49 (d, J=7,1 Hz, 3H), 1,45 - 1,34 (m, 2H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] =656,3
Ejemplo 52. Síntesis de ((1R,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((R)-1-feniletil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de oxetan-3-ilo.
El siguiente compuesto se sintetizó p o r e l m ismo método p o r e l producto intermedio clave 134.
Figure imgf000070_0001
1HNMR (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,19 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,75 - 7,61 (m, 2H), 7,42 - 7,18 (m, 6H), 5,35 (quin, J=5,7 Hz, 1H), 5,01 - 4,87 (m, 3H), 4,70 - 4,52 (m, 2H), 3,51 - 3,38 (m, 1H), 3,06 - 2,92 (m, 1H), 2,22 (a d, J=11,9 Hz, 2H), 2,07 (a d, J=11,7 Hz, 2H), 1,77 - 1,62 (m, 2H), 1,54 - 1,35 (m, 5H), 1,10 (s, 9H). ESI [M+H] =656,2
Ejemplo 53. Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(2-fluorobencil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de oxetan-3-¡lo.
El siguiente compuesto se sintetizó p o r e l m ismo método por e l producto intermedio clave 134.
Figure imgf000070_0002
1HNMR (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,23 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,75 - 7,63 (m, 2H), 7,46 - 7,24 (m, 3H), 7,20 - 7,03 (m, 2H), 5,43 - 5,28 (m, 1H), 4,85 (s a, 2H), 4,67 - 4,56 (m, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,53 - 3,37 (m, 1H), 3,08 - 2,93 (m, 1H), 2,29 - 1,99 (m, 4H), 1,78 - 1,61 (m, 2H), 1,53 - 1,35 (m, 2H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] =660,2
Ejemplo 54. Síntesis de ((1R,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((R)-1-(2-fluorofenil)etil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de oxetan-3-ilo.
El siguiente compuesto se sintetizó p o r e l m ismo método p o r e l producto intermedio clave 134.
Figure imgf000070_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,20 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,73 - 7,65 (m, 2H), 7,45 - 7,39 (m, 1H), 7,38 - 7,26 (m, 2H), 7,21 - 7,04 (m, 2H), 5,37 (quin, J=5,7 Hz, 1H), 5,20 (c, J=7,0 Hz, 1H), 4,89 - 4,86 (m, 2H), 4,65 - 4,59 (m, 2H), 3,52 - 3,41 (m, 1H), 3,08 - 2,96 (m, 1H), 2,24 (a d, J=12,2 Hz, 2H), 2,13 - 2,05 (m, 2H), 1,76 - 1,64 (m, 2H), 1,52 (d, J=7,0 Hz, 3H), 1,47 - 1,39 (m, 2H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] =674,2
Ejemplo 55. Síntesis de ((1S,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-((S)-1-(2-fluorofenil)etil)ureido)fenil)tiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de oxetan-3-ilo.
El siguiente compuesto se sintetizó p o r e l m ismo método por e l producto intermedio clave 134.
Figure imgf000071_0001
1HNMR (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,17 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,75 - 7,59 (m, 2H), 7,43 - 7,22 (m, 3H), 7,21 - 7,03 (m, 2H), 5,39 - 5,28 (m, 1H), 5,17 (c, J=7,0 Hz, 1H), 4,90 - 4,87 (m, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,66 - 4,54 (m, 2H), 3,43 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,99 (a t, J=12,1 Hz, 1H), 2,22 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 2,06 (a d, J=10,5 Hz, 2H), 1,77 - 1,60 (m, 2H), 1,58 - 1,34 (m, 5H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] =674,2
Ejemplo 56. Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[5-(isopropoxicarbonilamino)-3-metoxi-2-piridil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de 4-piperidilmetilo
Figure imgf000071_0002
Figure imgf000072_0001
Preparación del compuesto 136.
Figure imgf000072_0002
Se añadió Na (8,75 g, 380,60 mmoles, 9,02 ml, 1,51 eq.) en MeOH (300 ml) en porciones y después de que se disolviera el Na, la mezcla se concentró a sequedad. El sólido gris resultante (NaOMe) se añadió a DMF (300 ml) y se añadió 3-cloropirid in-2-carbonitrilo (35 g, 252,61 mmoles, 1 eq.) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 12 h y entonces se diluyó con H2O (800 ml) y se filtró. La torta se secó dando 3-metoxipiridin-2-carbonitrilo (25 g, en bruto) como un sólido blanco. ESI [M+H] =135,1
Preparación del compuesto 137
Figure imgf000072_0003
A una disolución de 3-metoxipiridin-2-carbonitrilo (24,5 g, 182,65 mmoles, 1 eq.) en DCM (450 ml) se añadió una mezcla de Bu4NNO3 (83,30 g, 273,59 mmoles, 1,5 eq.) y TFAA (57,54 g, 273,98 mmoles, 38,11 ml, 1,5 eq.) en DCM (150 ml) gota a gota a 0 °C. La mezcla se agitó a 20 °C durante 12 h y luego se vertió en NaHCO3 ac. sat. (300 ml) a 0 °C y la fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo/acetato de etilo=20/1 a 10:1) dando 3-m etoxi-5-nitro-piridin-2-carbonitrilo (27 g, en bruto) como un sólido blanco. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 9,06 (d, J=2,2 Hz, 1H), 8,13 (d, J=2,2 Hz, 1H), 4,16 - 4,08 (m, 3H). ESI [M+H] =180,1
Método general G para la preparación del compuesto 138.
Figure imgf000073_0001
137 138
A una disolución de 3-metoxi-5-nitro-piridin-2-carbonitrilo (27 g, 151 mmoles, 1 eq.) en THF (100 ml)/EtOH (500 ml) se añadieron Fe (4 g, 754 mmoles, 5 eq.) y una disolución de NH4Cl (24,2 g, 452 mmoles, 3 eq.) en H2O (50 ml). La mezcla se agitó a 80 °C durante 30 min, entonces se diluyó con THF (500 ml) y se filtró. El filtrado se concentró, se diluyó con H2O (500 ml) y entonces se extrajo con DCM (400 ml x 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron dando 5-amino-3-metoxi-piridin-2-carbonitrilo (14,5 g, en bruto) como un sólido amarillo pálido. ESI [M+H] =150,1
Preparación del compuesto 139.
Figure imgf000073_0002
Método general D, N-(6-ciano-5-metoxi-3-piridil)carbamato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,13 (d, J=2,2 Hz, 1 H), 7,95 (d, J=1,8 Hz, 1H), 5,04 - 4,95 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 1,31 (d, J=6,2 Hz, 6H). ESI [M+H] =236,1
Preparación del compuesto 140.
Figure imgf000073_0003
A una disolución de N-(6-ciano-5-metoxi-3-piridil)carbamato de isopropilo (16 g, 68,02 mmoles, 1 e q j en DMF (200 ml) se añadieron NaHS (19,06 g, 340,08 mmoles, 5 eq.) y luego MgCl2 (19,43 g, 204,05 mmoles, 8,37 ml, 3 eq.). La mezcla se agitó a 25 °C durante 12 h y luego se vertió en H2O (500 ml) y se extrajo con DCM (40 ml * 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se lavó con una disolución (éter de petróleo : EtOAc= 8:1), se filtró y la torta de filtración se secó dando N-(6-carbamotioil-5-metoxi-3-piridil)carbamato de isopropilo (21 g, en bruto) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 9,92 -9,84 (m, 2H), 9,38 (s a, 1H), 8,08 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 4,89 (spt, J=6,3 Hz, 1H), 3,74 (s, 3H), 1,24 (d, J=6,1 Hz, 6H). ESI [M+H] =270,0
Preparación del compuesto 141.
Figure imgf000073_0004
Método general M, N-(5-metoxi-6-tiazol-2-il-3-piridil)carbamato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,07 (s, 1 H), 8,26 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,88 (d, J=3,1 Hz, 1H), 7,85 (d, J=1,3 Hz, 1 H), 7,71 (d, J=3,3 Hz, 1 H), 4,91 (spt, J=6,2 Hz, 1H), 3,88 (s, 3H), 1,26 (d, J=6,4 Hz, 6H). ESI [M+H] =294,1
Preparación del compuesto 142.
Figure imgf000074_0001
Método general J, N-[6-(5-bromotiazol-2-il)-5-metoxi-3-piridil]carbamato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,17 (s, 1H), 8,28 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,08 - 7,86 (m, 2H), 4,99 (s a, 1H), 3,93 (s, 3H), 1,29 (d, J=6,4 Hz, 6H). ESI [M+H] =371,8/373,8
Preparación del compuesto 143.
Figure imgf000074_0002
Método general B, N-[6-[5-[4-acetamido-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-5-metoxi-3-piridil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] =562,0
Preparación del compuesto 144.
Figure imgf000074_0003
Método general F, N-[6-[5-[4-amino-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-5-metoxi-3-piridil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] =520,2
Preparación del compuesto 145.
Figure imgf000074_0004
Método general D, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[5-(isopropoxicarbonilamino)-3-metoxi-2-piridil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de (4-nitrofenilo). ESI [M+H] =685,1
Preparación del compuesto 146.
Figure imgf000075_0001
Método general H, 4-[[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[5-(isopropoxicarbonilamino)-3-metoxi-2-piridil]tiazol-5-il]fenil]carbam oiloxim etil]p iperidin-1-carboxilato de terc-butilo. ESI [M+H] =761,4
Preparación del Ej. 56
Figure imgf000075_0002
Método general C, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[5-(isopropoxicarbonilamino)-3-metoxi-2-piridil]tiazol-5-il]pheny]jcarbamato de 4-piperidilmetilo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 10,19 - 10,10 (m, 2H), 8,35 (d, J=2,1 Hz, 1 H), 8,30 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,89 (s, 2H), 7,68 (dd, J=2,0, 8,4 Hz, 1H), 7,46 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,12 (s a, 1H), 4,95 (td, J=6,2, 12,5 Hz, 1H), 3,98 (d, J=6,5 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,00 (a d, J=12,1 Hz, 2H), 2,70 - 2,56 (m, 2H), 1,77 (a d, J=4,0 Hz, 1 H), 1,67 (a d, J=12,1 Hz, 2H), 1,30 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,16 (a dd, J=3,4, 12,0 Hz, 2H), 1,09 (s, 9H). ESI [M+H] =661,3
Ejemplo 57 Síntesis de N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]-4-fluoro-tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo.
Esquema 19:
Figure imgf000075_0003
Preparación del compuesto 147
Figure imgf000076_0001
A una disolución de N-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (1,50 g, 4,32 mmoles, 1 eq.) en ACN (20 ml) se añadió 1-(clorometil)-4-fluoro-1,4-diazoniabiciclo[2.2.2]octano;ditetrafluoroborato (3,06 g, 8,64 mmoles, 2 eq.) y la mezcla se agitó a 80 °C durante 12 h. Entonces se concentró la mezcla y el residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo/acetato de etilo=3/1 a 3:1) dando N-[4-(5-bromo-4-fluoro-tiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (0,2 g, 547,55 umoles, 12,68 % de rendimiento) como una goma amarilla. ESI [M+H] =365,1/367,1
Preparación del Ej. 57
Figure imgf000076_0002
Método general B, N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]-4-fluoro-tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,24 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,67 (dd, J=2,0, 8,4 Hz, 1 H), 7,37 - 7,29 (m, 5H), 7,24 (a d, J=2,6 Hz, 1H), 4,82 - 4,77 (m, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,42 (a t, J=11,6 Hz, 1H), 2,87 (a t, J=12,0 Hz, 1H), 2,20 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,05 (a d, J=11,0 Hz, 2H), 1,69 - 1,57 (m, 2H), 1,43 - 1,30 (m, 2H), 1,21 (a d, J=5,7 Hz, 6H), 1,15 (s, 9H). ESI [M+H] =646,2
Ejemplo 58 Síntesis de ((1r,4r)-4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-((isopropoxicarbonil)amino)fenil)-4-fluorotiazol-2-il)ciclohexil)carbamato de isopropilo
El siguiente compuesto se sintetizó po r e l m ismo método po r e l producto intermedio clave 147.
Figure imgf000076_0003
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,35 (s, 1 H), 7,69 (a d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,37 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,01 (td, J=6,1, 12,4 Hz, 1H), 4,83 (s a, 1H), 3,53 - 3,39 (m, 1H), 2,96 - 2,85 (m, 1H), 2,23 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,08 (a d, J=10,5 Hz, 2H), 1,75 - 1,60 (m, 2H), 1,47 - 1,38 (m, 2H), 1,34 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,24 (a d, J=6,0 Hz, 6H), 1,18 (s, 9H). ESI [M+H] =599,2
Ejemplo 59 Síntesis de N-[6-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]tetrahidropiran-3-il]carbamato de trans-isopropilo
Esquema 20:
Figure imgf000077_0001
Preparación del compuesto149
Figure imgf000077_0002
A una disolución de 2-oxoacetato de etilo (250 g, 1,22 moles, 1 eq.) en Tol. (1,5 L), se añadieron buta-1,3-dieno (92,72 g, 1,71 moles, 149,55 ml, 1,4 eq.) y 2,6-diterc-butil-4-metil-fenol (5,40 g, 24,49 mmoles, 0,02 eq.). La mezcla se agitó a 170 °C durante 8 h en un tubo de alta presión bajo 1 MPa y entonces se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo=100:1 -10:1) proporcionando 3,6-dihidro-2H-piran-2-carboxilato de etilo (26 g, 166,48 mmoles, 13,60 % de rendimiento) como un aceite amarillo. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 5,82 - 5,74 (m, 1 H), 5,71 - 5,64 (m, 1H), 4,36 - 4,27 (m, 1H), 4,23 - 4,12 (m, 4H), 2,39 - 2,23 (m, 2H), 1,24 (t, J=7,1 Hz, 3H).
Preparación del compuesto 150
Figure imgf000078_0001
Método general O, ácido 3,6-dihidro-2H-piran-2-carboxílico. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 5,88 (qdd, J=2,3, 5,1, 10,2 Hz, 1H), 5,80 - 5,71 (m, 1H), 4,43 - 4,19 (m, 3H), 2,53 - 2,31 (m, 2H)
Preparación del compuesto 151
Figure imgf000078_0002
Método general N, 3,6-dihidro-2H-piran-2-carboxamida. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 6,50 (s a, 1H), 5,89 - 5,76 (m, 1H), 5,67 (a d, J=9,8 Hz, 1 H), 5,50 (s a, 1H), 4,22 (s a, 2H), 3,97 (dd, J=3,9, 10,8 Hz, 1H), 2,49 - 2,35 (m, 1 H), 2,28 - 2,09 (m, 1H)
Preparación del compuesto 152
Figure imgf000078_0003
Método general L, 3,6-dihidro-2H-piran-2-carbotioamida. ESI [M+H]=144,1
Preparación del compuesto 153
Figure imgf000078_0004
Método general M, 2-(3,6-dihidro-2H-piran-2-il)tiazol. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 7,69 (d, J=2,9 Hz, 1H), 7,26 (d, J=2,9 Hz, 1H), 5,93 - 5,83 (m, 1H), 5,70 - 5,63 (m, 1 H), 4,86 (dd, J=3,9, 9,8 Hz, 1 H), 4,33 (s a, 2H), 2,61 - 2,37 (m, 2H). ESI [M+H]=168,1
Preparación del compuesto 154
Figure imgf000079_0001
A una disolución de 2-(3,6-dihidro-2H-piran-2-il)tiazol (13 g, 77,74 mmoles, 1 eq.) en THF (150 ml), se añadió BH3-Me2S (10 M, 15,55 ml, 2 eq.) a 0 °C gota a gota y la mezcla se agitó a 26 °C durante 2 h. Entonces la mezcla se inactivó por NaOH (62,19 g, 1,55 moles, 20 eq.) en H2O (150 ml) lentamente a 0 °C seguido por la adición de H2O2 (264,42 g, 2,33 moles, 224,09 ml, 30 % de pureza, 30 eq.). La mezcla se agitó a 26 °C durante otras 12 h. La mezcla se inactivó por disolución ac. sat. de Na2SO3 (1 l) y se extrajo con EtOAc (1 L*2). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por columna (éter de petróleo : EtOAc= 5:1 -1:1) proporcionando 6-tiazol-2-iltetrahidropiran-3-ol (7 g, en bruto) como un sólido amarillo. ESI [M+H]=186,2
Preparación del compuesto 155
Figure imgf000079_0002
A una disolución de 6-tiazol-2-iltetrahidropiran-3-ol (7 g, 37,79 mmoles, 1 eq.) en DCM (100 ml), se añadieron TEA (7,65 g, 75,58 mmoles, 10,52 ml, 2 eq.) y cloruro de metanosulfonilo (6,49 g, 56,68 mmoles, 4,39 ml, 1,5 eq.) gota a gota a 0 °C y la mezcla se agitó a 26 °C durante 2 h. La mezcla se diluyó con DCM (100 ml) y se lavó con agua (200 ml). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando metanosulfonato de (6-tiazol-2-iltetrahidropiran-3-il) (7 g, en bruto) en bruto como un aceite amarillo que se puede usar directamente.
A una disolución de metanosulfonato de (6-tiazol-2-iltetrahidropiran-3-ilo) (7 g, 26,58 mmoles, 1 e q j en DMF (60 ml), se añadió azidosodio (8,64 g, 132,91 mmoles, 5 e q j y la mezcla se agitó a 80 °C durante 12 h y luego se vertió en Na2CO3 ac. sat. (500 ml) y se extrajo con EtOAc (200 ml*3). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera (200 ml) y se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando 2-(5-azidotetrahidropiran-2-il)tiazol (5 g, en bruto) en bruto como un aceite amarillo que se puede usar sin purificación.
Preparación del compuesto 156
Figure imgf000079_0003
A una disolución de 2-(5-azidotetrahidropiran-2-il)tiazol (5 g, 23,78 mmoles, 1 eq.) en THF (80 ml) y H2O (40 ml), se añadió PPh3 (9,36 g, 35,67 mmoles, 1,5 eq.). La mezcla se agitó a 50 °C durante 12 h y luego se vertió en disolución 4 N de HCl (100 ml) y se extrajo con EtOAc (50 ml*2). Entonces se basificó la fase acuosa con Na2CO3 ac. sat. hasta pH>12 y se extrajo con una disolución (DCM/MeOH = 5:1) (100 ml*3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando 6-tiazol-2-iltetrahidropiran-3-amina (3 g, en bruto) en bruto como un aceite amarillo. ESI [M+H] =185,2
Preparación del compuesto 157
Figure imgf000080_0001
Método general D, N-(6-tiazol-2-iltetrahidropiran-3-il)carbamato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,74 (d, J=3,3 Hz, 1 H), 7,55 (d, J=3,3 Hz, 1H), 4,86 - 4,77 (m, 2H), 4,64 (dd, J=2,4, 10,8 Hz, 1H), 4,12 (ddd, J=2,0, 4,6, 10,8 Hz, 1H), 3,75 - 3,55 (m, 1H), 2,32 - 2,20 (m, 1H), 2,16 - 2,03 (m, 1H), 1,81 - 1,54 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,2 Hz, 6H). ESI [M+H] = 271,2
Note: el Comp. 157 se purificó por CCF prep y luego por HPLC prep para separar otros isómeros.
Preparación del compuesto 158
Figure imgf000080_0002
Método general J, N-[6-(5-bromotiazol-2-il)tetrahidropiran-3-il]carbamato de trans-isopropilo. ESI [M+H]=351,1/349,1
Preparación del Ej. 59 de compuesto
Figure imgf000080_0003
Método general B, N-[6-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]tetrahidropiran-3-il]carbamato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,24 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,68 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1H), 7,37 - 7,29 (m, 5H), 7,27 - 7,19 (m, 1H), 4,84 - 4,78 (m, 2H), 4,64 (dd, J=2,0, 11,0 Hz, 1 H), 4,40 (s, 2H), 4,12 (a dd, J=3,2, 10,7 Hz, 1H), 3,69 - 3,58 (m, 1H), 2,33 - 2,26 (m, 1H), 2,13 (a d, J=10,4 Hz, 1H), 1,82 - 1,71 (m, 1 H), 1,69 - 1,57 (m, 1H), 1,26 - 1,19 (m, 6H), 1,10 (s, 9H). ESI [M+H] =630,3
Preparación del de compuesto Ej. 59A y Ej. 59B
Figure imgf000081_0001
El Ej. 59 se separó adicionalmente por SFC (condición: Instrumento: SFC preparativa Thar SFC80; columna: Chiralpak IC-H 250*30mm i.d. 5 u; fase móvil: A para CO2 y B para MeOH(0,1 % de NH3.H2O); gradiente: % de B = 42 %; caudal 70 g/min; longitud de onda: 220 nm; temperatura de la columna: 40 °C; retropresión del sistema: 100 bar dando Ej.
59A. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,27 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,72 (dd, J=2,3, 8,3 Hz, 1H), 7,40 -7,33 (m, 5H), 7,30 - 7,23 (m, 1H), 4,89 - 4,79 (m, 2H), 4,67 (dd, J=2,3, 11,0 Hz, 1H), 4,43 (s, 2H), 4,16 (a dd, J=3,0, 10,9 Hz, 1H), 3,67 (a t, J=10,9 Hz, 1H), 2,33 (a dd, J=2,6, 13,1 Hz, 1H), 2,16 (a d, J=10,6 Hz, 1H), 1,88 - 1,58 (m, 2H), 1,31 - 1,22 (m, 6H), 1,13 (s, 9H). ESI [M+H] =630,2
Ej. 59B: 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,25 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,70 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,36 - 7,31 (m, 4H), 7,28 - 7,18 (m, 1H), 4,87 - 4,74 (m, 1H), 4,65 (a d, J=9,2 Hz, 1H), 4,41 (s, 2H), 4,19 - 4,04 (m, 1H), 3,63 (a d, J=10,5 Hz, 1H), 3,34 (s a, 1H), 2,31 (a d, J=13,2 Hz, 1H), 2,13 (a d, J=10,1 Hz, 1H), 1,84 - 1,72 (m, 1H), 1,71 - 1,58 (m, 1H), 1,22 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] =630,3
Ejemplo 60 Síntesis de N-[6-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]tetrahidropiran-3-il]carbamato de trans-isopropilo
Figure imgf000081_0002
Preparación del Ej. 60
Figure imgf000082_0001
Método general B, N-16-15-12-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]tetrahidropiran-3-il]carbamato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,37 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,70 (dd, J=2,4, 8,3 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,01 (spt, J=6,3 Hz, 1H), 4,87 - 4,79 (m, 1H), 4,68 (dd, J=2,4, 11,2 Hz, 1H), 4,16 (dd, J=2,9, 10,8 Hz, 1H), 3,72 - 3,60 (m, 1H), 3,38 - 3,34 (m, 1H), 2,39 - 2,29 (m, 1H), 2,16 (a d, J=12,2 Hz, 1H), 1,89 - 1,74 (m, 1H), 1,72 - 1,59 (m, 1H), 1,39 - 1,21 (m, 12H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+H] =583,3
Preparación del de compuesto Ej. 60A y Ej. 60B
Figure imgf000082_0002
El Ej. 60 se separó adicionalmente por SFC (condición: Instrumento: SFC preparativa Thar SFC80; columna: Chiralpak IC-H 250*30mm i.d. 5u; fase móvil: A para CO2 y B para MeOH(0,1 % de NH3.H2O); gradiente: % de B = 38 %; caudal: 65 g/min; longitud de onda: 220 nm; temperatura de la columna: 40 °C; retropresión del sistema: 100 bar) dando el Ej. 60A: 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,37 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,70 (dd, J=2,0, 8,4 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,05 - 4,95 (m, 1H), 4,90 - 4,81 (m, 1H), 4,67 (dd, J=2,4, 11,1 Hz, 1H), 4,70 - 4,64 (m, 1H), 4,16 (a dd, J=2,9, 10,9 Hz, 1H), 3,73 - 3,62 (m, 1H), 2,33 (a dd, J=2,8, 13,2 Hz, 1H), 2,16 (a d, J=11,9 Hz, 1H), 1,86 -1,74 (m, 1H), 1,70 - 1,61 (m, 1H), 1,34 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,25 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+h ] =583,3
Ej. 60B: 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,34 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,80 - 7,72 (m, 1H), 7,67 (dd, J=2,0, 8,6 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,98 (spt, J=6,2 Hz, 1H), 4,85 - 4,75 (m, 1H), 4,65 (dd, J=2,4, 11,2 Hz, 1H), 4,13 (a dd, J=3,1, 11,0 Hz, 1H), 3,72 - 3,56 (m, 1H), 3,33 (s, 1H), 2,30 (a dd, J=2,6, 13,2 Hz, 1H), 2,13 (a d, J=11,4 Hz, 1H), 1,85 - 1,71 (m, 1H), 1,69 - 1,57 (m, 1H), 1,31 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,27 - 1,17 (m, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] =583,2
Ejemplo 61 Síntesis de N-isopropilcarbamato de [1-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(tercbutilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-biciclo[2.2.2]octanilo].
Esquema 22:
Figure imgf000083_0001
Ej. 61
Preparación del compuesto 160.
Figure imgf000083_0002
A una disolución de 4-hidroxibiciclo[2.2.2]octano-1-carboxilato de m etilo (0,4 g, 2,17 mmoles, 1 eq.) en DCM (10 ml) se añadieron TMSCl (23,59 mg, 217,12 umoles, 0,1 eq.) y 2-isocianatopropano (554,33 mg, 6,51 mmoles, 3 eq.). La mezcla se agitó a 25 °C durante 12 h y entonces se lavó con HCl 1 N (20 ml) y Na2CO3 ac. sat. (20 ml). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando 4-(isopropilcarbamoiloxi)biciclo[2.2.2]octano-1-carboxilato de m etilo (0,45 g, en bruto) como una goma amarilla. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 4,34 (s a, 1H), 3,72 - 3,61 (m, 1 H), 3,56 (s, 3H), 1,94 (a d, J=7,7 Hz, 6H), 1,90 - 1,81 (m, 6H), 1,08 - 1,00 (m, 6H). ESI [M+H] =269,9
Preparación del compuesto 161.
Figure imgf000083_0003
Método general O, ácido 4-(isopropilcarbamoiloxi)biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 4,32 (s a, 1H), 3,71 - 3,60 (m, 1H), 1,93 (s a, 6H), 1,88 (a d, J=9,3 Hz, 6H), 1,05 (d, J=6,5 Hz, 6H). ESI [M+H] =256,0
Preparación del compuesto 162.
Figure imgf000084_0001
Método general N, N-isopropilcarbamato de (1-carbamoil-4-biciclo[2.2.2]octanilo). 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 5,56 - 5,31 (m, 2H), 4,34 (s a, 1 H), 3,72 - 3,57 (m, 1H), 1,96 (s a, 6H), 1,97 - 1,93 (m, 1H), 1,92 - 1,80 (m, 6H), 1,05 (d, J=6,6 Hz, 6H). ESI [M+H] =255,3
Preparación del compuesto 163.
Figure imgf000084_0002
Método general L, N-isopropilcarbamato de (1-carbamotioil-4-biciclo[2.2.2]octanilo). ESI [M+H] =271,3 Preparación del compuesto 164.
Figure imgf000084_0003
Método general M, N-isopropilcarbamato de (1-tiazol-2-il-4-biciclo[2.2.2]octanilo). ESI [M+H] =295,0 Preparación del compuesto 165
Figure imgf000084_0004
Método general J, N-isopropilcarbamato de [1-(5-bromotiazol-2-il)-4-biciclo[2.2.2Joctanilo]. ESI [M+H] =372.8/374.8
Preparación del Ej. 61.
Figure imgf000085_0001
Método general K, N-isopropilcarbamato de [1-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-Íl]-4-bÍcÍclo[2.2.2]octanÍlo]. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,26 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,74 - 7,68 (m, 2H), 7,38 -7,32 (m, 4H), 7,30 - 7,23 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 3,71 - 3,61 (m, 1H), 2,18 (s, 12H), 1,16 - 1,09 (m, 15H). ESI [M+H] =654,3
Ejemplo 62 Síntesis de isopropilcarbamato de 4-(5-(2-(N-(terc-butil)sulfamoil)-4-(3-(piridin-2-ilmetil)ureido)fenil)tiazol-2-il)biciclo[2.2.2]octan-1-ilo.
El siguiente compuesto se sintetizó p o r e l m ismo método p o r e l producto intermedio clave 165.
Figure imgf000085_0002
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,77 (s a, 1H), 8,62 - 8,52 (m, 1H), 8,34 (s a, 1H), 8,12 - 8,03 (m, 1H), 7,96 (a d, J=5,5 Hz, 1H), 7,79 - 7,66 (m, 2H), 7,43 - 7,35 (m, 1H), 4,78 (s a, 2H), 3,67 (a dd, J=6,2, 13,0 Hz, 1H), 2,19 (s a, 12H), 1,17 - 1,09 (m, 15H). ESI [M/2+H] = 328,2
Ejemplo 63 Síntesis de N-[6-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil)tiazol-2-il]-3-piperidil]carbam ato de trans-isopropilo
Figure imgf000085_0003
Figure imgf000086_0001
Método general I para la preparación del compuesto 167.
Figure imgf000086_0002
A una disolución de ácido 5-hidroxipiridin-2-carboxílico (60 g, 431 mmoles, 1 eq.) en AcOH (200 ml)/H2Ü (600 ml) se añadió Pd/C húmedo (2 g, 10 % de contenido) bajo N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La mezcla se agitó bajo H2 (50 psi) a 50 °C durante 12 h, entonces se filtró y se concentró dando ácido 5-hidroxipiperidin-2-carboxílico (62,61 g, en bruto) como un aceite amarillo. ESI [M+H] =146,5
Preparación del compuesto 168
Figure imgf000086_0003
A una mezcla de ácido 5-hidroxipiperidin-2-carboxílico (62 g, 427,13 mmoles, 1 eq.) y Boc2O (102,54 g, 469,84 mmoles, 107,94 ml, 1,1 eq.) en dioxano (500 ml) se añadió NaOH (34,17 g, 854,25 mmoles, 2 eq.) y la mezcla se agitó a 25 °C durante 18 h. Entonces se concentró la mezcla para retirar el dioxano y el pH se ajustó a 2-3 mediante la adición de disolución 1 N de HCl. La fase acuosa se extrajo con 2-Me-THF (500 ml * 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron dando ácido 1-terc-butoxicarbonil-5-hidroxipiperidin-2-carboxílico (40 g, en bruto) como un aceite amarillo. ESI [M+Na] =267,9
Preparación del compuesto 169
Figure imgf000086_0004
Método general A, O1-terc-butil 5-hidroxipiperidin-1,2-dicarboxilato de O2-bencilo. ESI [M+Na+] =358,0 Preparación del compuesto 170
Figure imgf000087_0001
A una mezcla de O1-terc-butil5-hidroxipiperidin-1,2-dicarboxilato de Ü2-bencilo (10 g, 29,82 mmoles, 1 eq j, TEA (3,62 g, 35,78 mmoles, 4,98 ml, 1,2 eq.) en DCM (100 ml) se añadió cloruro de metanosulfonilo (4,10 g, 35,78 mmoles, 2,77 ml, 1,2 eq.) a 0 °C y la mezcla se agitó a 25 °C 1 h. Entonces se lavó la mezcla con H2O (50 ml) y la fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo/acetato de etilo=40/1 a 5:1) proporcionando O1-terc-butil 5-m etilsulfoniloxipiperidin-1,2-dicarboxilato de Ü2-bencilo (9,5 g, 18.98 mmoles, 63,65 % de rendimiento, 82,6 % de pureza) como un aceite amarillo.
Se agitó una mezcla de O1-terc-butil 5-m etilsulfoniloxipiperidin-1,2-dicarboxilato de Ü2 -bencilo (9,5 g, 22.98 mmoles, 1 eq.), NaN3 (8,96 g, 137,85 mmoles, 6 eq.) en DMF (20 ml) a 100 °C durante 4 h. Entonces la mezcla se inactivó con Na2SO3 ac. sat. (30 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml * 3). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (40 ml * 3), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron dando O1-terc-butil 5-azidopiperidin-1,2-dicarboxilato de O2-bencilo (8,82 g, en bruto) como un aceite amarillo.
Preparación del compuesto 171
Figure imgf000087_0002
Se agitó una mezcla de O1-terc-butil 5-azidopiperidin-1,2-dicarboxilato de O2-bencilo (8 g, 22,20 mmoles, 1 eq.), trifenilfosfano (8,73 g, 33,30 mmoles, 1,5 eq.), en H2O (50 ml) y THF (50 ml) a 45 °C durante 4 h. La mezcla se concentró para retirar el THF y pH se ajustó a 2-3 mediante la adición de disolución 1 N HCl. La fase acuosa se extrajo con MTBE (30 ml) y entonces se basificó fase acuosa para ajustar el pH a 9 y se extrajo con EtOAc (50 ml * 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron dando O2-bencil O1-terc-butil 5-aminopiperidin-1,2-dicarboxilato (6 g, en bruto) como un aceite amarillo. ESI [M+H]=335,2
Preparación del compuesto 172
Figure imgf000087_0003
Método general D, O1-terc-butil 5-(isopropoxicarbonilamino)piperidin-1,2-dicarboxilato de O2-bencilo. ESI [M+H] =421,2
Preparación del compuesto 173
Figure imgf000087_0004
Método general O, ácido 1-terc-butoxicarbonil-5-isopropoxicarboniloxi-piperidin-2-carboxílico. ESI [M+H] =331,2
Preparación del compuesto 174
Figure imgf000088_0001
Una mezcla de ácido 1-terc-butoxicarbonil-5-(isopropoxicarbonilam ino)piperidin-2-carboxílico (1,3 g, 3,93 mmoles, 1 eq.), NH4Cl (315,73 mg, 5,90 mmoles, 1,5 eq.), TEA (1,19 g, 11,80 mmoles, 1,64 ml, 3 eq.) y HBTU (1,64 g, 4,33 mmoles, 1,1 eq.) en ACN (10 ml) se agitó a 25 °C durante 2 h y luego se concentró. La mezcla se vertió entonces en H2O (20 ml) y se extrajo con EtOAc (20 ml*3). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. La mezcla se purificó por HPLC prep (columna: Phenomenex Gemini C18250*50 10u; fase móvil: [agua (0,05 % de hidróxido de amoniaco v/v)-ACN]; % de B: 10 %-40 %, 20 min) dando 2-carbamoil-5-(isopropoxicarbonilam ino)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (1 g, 3,01 mmoles, 76,38 % de rendimiento, 99 % de pureza) como un sólido blanco. ESI [M+H] =330,2
Preparación del compuesto 175
Figure imgf000088_0002
Método general L, 2-carbamotioil-5-(isopropoxicarbonilamino)piperidin-1-carboxilato de trans-terc-butilo. ESI [M+H] =346,1
Preparación del compuesto 176
Figure imgf000088_0003
A una disolución de 2-carbamotioil-5-(isopropoxicarbonilamino)piperidin-1-carboxilato de trans-terc-butilo (650 mg, 1,88 mmoles, 1,0 e q j en tol. ( 20 ml) se añadieron TAMPÓN (784,76 mg, 2,82 mmoles, 1,5 eq.) y 2-cloroacetaldehído (3,69 g, 18,82 mmoles, 3,03 ml, 10 eq.). La mezcla se agitó a 100 °C durante 1,5 h y luego se vertió en agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por HPLC prep básica dando 5-(isopropoxicarbonilamino)-2-tiazol-2-il-piperidin-1-carboxilato de trans-terc-butilo (80 mg, 216,52 umoles, 11,51 % de rendimiento) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,75 (d, J=3,4 Hz, 1H), 7,58 (d, J=2,9 Hz, 1 H), 5,60 (s a, 1 H), 4,95 - 4,90 (m, 1H), 4,23 (a d, J=14,7 Hz, 1H), 3,68 (s a, 1H), 3,11 - 2,94 (m, 1H), 2,42 - 2,31 (m, 1H), 2,30 - 2,17 (m, 1H), 1,93 - 1,79 (m, 1H), 1,75 - 1,64 (m, 1H), 1,50 (s, 9H), 1,30 - 1,23 (m, 6H)
Preparación del compuesto 177
Figure imgf000089_0001
Método general J, 2-(5-bromotiazol-2-il)-5-(isopropoxicarbonilamino)piperidin-1-carboxilato de trans-tercbutilo. ESI [M+H] =450,2/448,2
Preparación del compuesto 178
Figure imgf000089_0002
Método general B, 2-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilam ino)fenil]tiazol-2-il]-5-(isopropoxicarbonilam ino)piperidin-1-carboxilato de trans-terc-butilo. ESI [M+H] =682,3
Preparación del Ej. 63
Figure imgf000089_0003
Método general C, N-[6-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]-3-piperidil]carbam ato de trans-isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,40 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,65 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1H), 7,38 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,05 - 4,94 (m, 1 H), 4,85 - 4,81 (m, 1H), 4,67 (dd, J=2,9, 11,9 Hz, 1H), 3,92 - 3,82 (m, 1 H), 3,60 (a dd, J=3,6, 11,8 Hz, 1 H), 2,92 (t, J=11,9 Hz, 1H), 2,48 (a dd, J=3,2, 14,2 Hz, 1H), 2,22 - 2,03 (m, 2H), 1,82 - 1,70 (m, 1H), 1,32 (d, J=6,4 Hz, 6H), 1,24 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,19 (s, 9H). ESI [M+H] =582,2
Ejemplo 64 Síntesis de ((3R,6S)-6-(5-(4-(3-bencilureido)-2-(N-(terc-butil)sulfamoil)fenil)tiazol-2-il)piperidin-3-il)carbamato de isopropilo.
El siguiente compuesto se sintetizó po r e l m ismo método po r e l producto intermedio clave 178.1
Figure imgf000089_0004
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,30 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,66 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1H), 7,38 - 7,20 (m, 6H), 4,85 - 4,82 (m, 1H), 4,70 (dd, J=3,2, 12,0 Hz, 1 H), 4,42 (s, 2H), 3,93 - 3,82 (m, 1H), 3,62 (a dd, J=3,5, 11,7 Hz, 1H), 3,00 - 2,90 (m, 1H), 2,52 - 2,44 (m, 1H), 2,23 - 2,04 (m, 2H), 1,84 - 1,70 (m, 1H), 1,26 - 1,21 (m, 6H), 1,18 (s, 9H). ESI [M+H] =629,2
Ejemplo 65 Síntesis de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[3-(isopropoxicarbonilamino)ciclobutil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de isopropilo
Figure imgf000090_0001
Preparación del compuesto 180
Figure imgf000090_0002
179 180
A una disolución de ácido trans-3-(terc-butoxicarbonilamino)ciclobutanocarboxílico (500 mg, 2,32 mmoles, 1 eq.), DIEA (750,54 mg, 5,81 mmoles, 1,01 ml, 2,5 eq.) en THF (10 ml) se añadió CLOROFORMiAt O DE ETILO (277,29 mg, 2,56 mmoles, 1,1 eq.) y la mezcla se agitó 0 °C durante 1 h. Entonces se añadió en NH3.H2O (1,30 g, 9,29 mmoles, 1,43 ml, 25 % de pureza, 4 eq.) en THF (10 ml) y dioxano (10 ml) y la mezcla se agitó a 25 °C durante 1 h. La mezcla se lavó con HCl 1 N (20 ml), Na2CO3 ac. sat. (20 ml) y la fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando N-(3-carbamoilciclobutil)carbamato de trans-terc-butilo (0,39 g, en bruto) como un sólido blanco. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 7,20 - 7,07 (m, 2H), 6,71 (s a, 1H), 4,09 - 4,00 (m, 1H), 2,72 (a t, J=9,3 Hz, 1H), 2,23 (a t, J=8,7 Hz, 2H), 2,01 (c, J=9,8 Hz, 2H), 1,34 (s, 9H. ESI [M+Na]=237,1
Preparación del compuesto 181
Figure imgf000091_0001
Método general L, N-(3-carbamotioilciclobutil)carbamato de trans-terc-butilo. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 9,33 (s a, 1 H), 9,02 (s a, 1H), 7,18 (a d, J=5,5 Hz, 1H), 4,16 - 4,03 (m, 1H), 3,33 (s a, 1H), 2,45 (a d, J=12,2 Hz, 2H), 2,15 (a d, J=6,5 Hz, 2H), 1,37 (s a, 9H)
Preparación del compuesto 182
Figure imgf000091_0002
Método general M, N-(3-tiazol-2-ilciclobutil)carbamato de trans-terc-butilo. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 7,62 (d, J=3,2 Hz, 1H), 7,14 (dd, J=3,3, 8,3 Hz, 1 H), 4,79 (s a, 1H), 4,34 (s a, 1H), 3,47 - 3,36 (m, 1H), 2,81 (a d, J=8,8 Hz, 1H), 2,66 (ddd, J=4,5, 7,9, 12,8 Hz, 1H), 2,46 - 2,34 (m, 1H), 2,17 - 2,09 (m, 1H), 1,38 (s, 9H). ESI[M+H]=255,3
Preparación del compuesto 183
Figure imgf000091_0003
Método general J, N-[3-(5-bromotiazol-2-il)ciclobutil]carbamato de trans-terc-butilo. ESI[M+H]=335,1/333,1 Preparación del compuesto 184
Figure imgf000091_0004
Método general K, N-[3-[5-[4-am ino-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclobutil]carbamato de trans-tercbutilo. ESI [M+H]=481,0
Preparación del compuesto 185
Figure imgf000092_0001
Método general F, trans-5-amino-2-[2-(3-aminociclobutil)tiazol-5-il]-N-terc-butil-bencenosulfonamida. ESI [M+H] =381,2
Preparación del Ej. 65
Figure imgf000092_0002
Método general D, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[3-(isopropoxicarbonilamino)ciclobutil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,34 (d, J=1,5 Hz, 1H), 7,76 - 7,65 (m, 2H), 7,38 (t, J=8,5 Hz, 1H), 5,04 - 4,94 (m, 1H), 4,82 (a d, J=6,4 Hz, 1 H), 4,42 - 4,32 (m, 0,5H), 4,13 (a t, J=8,0 Hz, 0,5H), 3,87 - 3,78 (m, 0,5H), 3,58 - 3,48 (m, 0,5H), 2,82 (dq, J=2,6, 7,9 Hz, 1 H), 2,72 - 2,64 (m, 1 H), 2,60 - 2,50 (m, 1H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 1,31 (d, J=6,2 H]z, 6H), 1,22 (a d, J=6,0 Hz, 6H), 1,13 (s, 9H). ESI [M+H] =553,4
Ejemplos 66A y 66B
Esquema 25:
Figure imgf000092_0003
Figure imgf000093_0001
Preparación del compuesto 31.
Figure imgf000093_0002
A una disolución de cloruro de 2-bromobencenosulfonilo (100,00 g, 391,36 mmoles, 1,00 eq.) en H2SO4 (1,0 l) se añadió una disolución de HNO3 (79,95 g, 1,21 moles, 57,11 ml, 95 % de pureza, 3,08 eq.) en H2SO4 (0,50 L) gota a gota a 0 °C. La mezcla se agitó a 26 °C durante 2 h. La CCF (éter de petróleo: EtOAc =10:1, Rf=0,40) mostró que la reacción estaba completa. La mezcla se añadió lentamente a agua con hielo (5 l) con agitación vigorosa y luego se filtró. La torta de filtración se lavó con H2O (1 l x 3) y se secó dando cloruro de 2-bromo-5-nitro-bencenosulfonilo (105,00 g, en bruto) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, CLOROFORMO-d) 5 = 8,98 (d, J=2,4 Hz, 1H), 8,37 (dd, J=2,5, 8,7 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,6 Hz, 1 H).
Preparación del compuesto 32.
Figure imgf000093_0003
A una mezcla de 2-metilpropan-2-amina (200 g, 2,73 moles, 287,36 ml, 3,29 eq.) y DMAP (10 g, 81,85 mmoles, 0,1 eq.) en DCM (2 l) se añadió cloruro de 2-bromo-5-nitro-bencenosulfonilo (250 g, 831,91 mmoles, 1 eq.) en porciones a 0 °C. La mezcla se calentó hasta 15 °C y se agitó durante 1 h. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa. La mezcla se lavó con HCl (1 N, 2 l), NaHCO3 ac. sat. (500 ml) y salmuera (500 ml), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando 2-bromo-N-terc-butil-5-nitro-bencenosulfonamida (240 g, en bruto) como un sólido gris. ESI [M+H] = 336,9/338,9.
Preparación del compuesto 33.
Figure imgf000094_0001
A una disolución de 2-bromo-N-terc-butil-5-nitro-bencenosulfonamida (35 g, 103,80 mmoles, 1 eq.) en DMA (300 ml), se añadieron tiazol (26,51 g, 311,40 mmoles, 3 eq.), Pd(OAc)2 (2,33 g, 10,38 mmoles, 0,1 eq.) y k Oac (30,56 g, 311,40 mmoles, 3 eq.). La mezcla se agitó a 140 °C durante 16 h bajo N2. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa, la mezcla se vertió en agua (3 l) y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua (200 ml x 3) y luego se secó dando N-terc-butil-5-nitro-2-tiazol-5-il-bencenosulfonamida (25,1 g, en bruto) como un sólido de color negromarrón. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 9,30 (s, 1H), 8,81 (d, J=2,4 Hz, 1H), 8,46 (dd, J=2,4, 8,3 Hz, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,83 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 7,60 (s, 1H), 1,07 (s, 9H). ESI [M+H] = 342,0.
Preparación del compuesto 34.
Figure imgf000094_0002
A una disolución de N-terc-butil-5-nitro-2-tiazol-5-il-bencenosulfonamida (15 g, 43,94 mmoles, 1 eq.) en AcOH (200 ml), se añadieron KOAc (21,56 g, 219,68 mmoles, 5 eq.) y Br2 (35,11 g, 219,68 mmoles, 5 eq.). La mezcla se agitó a 80 °C durante 3 h. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa, la mezcla se inactivó por Na2CO3 ac. sat. (1 l) y se extrajo con EtOAc (300 ml x 3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando 2-(2-bromotiazol-5-il)-N-terc-butil-5-nitro-bencenosulfonamida (18 g, en bruto) como un sólido verde que se usó sin purificación.
Preparación del compuesto 35.
Figure imgf000094_0003
A una disolución de 2-(2-bromotiazol-5-il)-N-terc-butil-5-nitro-bencenosulfonamida (8,5 g, 20,22 mmoles, 1 eq.) en EtOH (70 ml), THF (40 ml) y H2O (20 ml), se añadieron Fe (3,39 g, 60,67 mmoles, 3 eq.) y NH4Cl (3,25 g, 60,67 mmoles, 2,12 ml, 3 eq.). La mezcla se agitó a 90 °C durante 1 h. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa. La mezcla se filtró, el filtrado se concentró para retirar disolvente orgánico y se extrajo con DCM (200 ml x 2). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró proporcionando 5-amino-2-(2-bromotiazol-5-il)-N-terc-butil-bencenosulfonamida (6 g, en bruto) como un sólido amarillo. La RMN 1H mostro que la estructura era correcta. 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 5 = 7,58 - 7,52 (m, 1 H), 7,30 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,11 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 6,99 (s, 1H), 6,73 (dd, J=2,4, 8,3 Hz, 1H), 5,94 (s, 2H), 1,07 (s, 9H). ESI [M+H] = 390,0/392,0.
Preparación del compuesto 36.
Figure imgf000095_0001
Método general D, N-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de (4-nitrofenilo) como disolución de DCM. ESI [M+H] = 555,0/557,0
Preparación del compuesto 37.
Figure imgf000095_0002
Método general H, 1-bencil-3-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil) fenil]urea. ESI [M+H] = 523,0/525,0. Preparación del compuesto 38.
Figure imgf000095_0003
Método general B (Reacción de Suzuki), terc-butil-N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(tercbutilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohex-3-en-1-il]carbamato (Compuesto 38).
A una disolución del Compuesto 17 (1 eq.) en dioxano y H2O, se añadieron Pd(dppf)Cl2 (0,1 eq.), el Compuesto 37 (0,9 eq.) y Na2CO3 (3 eq.). La mezcla se agitó a 80 °C durante 12 h bajo N2. La Cl-EM mostró que la reacción estaba completa. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por CCF prep (PE/EtOAc=1:1) dando el producto 38. ESI [M+H] = 640,5
Preparación del compuesto 39.
Figure imgf000095_0004
N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc- butilsulfam oil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de terc-butilo. A una disolución del Compuesto 38 (1 eq.) y AcOH (0,1 eq.) en EtOAc se añadió Pd/C (10 % de pureza, 1,00 eq.). La mezcla se agitó bajo H2 (15 psi) a 40 °C durante 1 h. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa y entonces la mezcla se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiÜ2 , éter de petróleo/acetato de etilo =10/1 a 1:1) dando el Compuesto 39. ESI [M+H] = 642,5
Preparación del compuesto 40.
Figure imgf000096_0001
Método general F, 1-[4-[2-(4-aminociclohexil)tiazol-5-il]-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]-3-bencil-urea. ESI [M+H] = 542,5.
Preparación del compuesto 41
Figure imgf000096_0002
Método general D, N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de isopropilo, ESI [M+H] = 628,3.
Preparación del Ej. 66A y Ej. 66B. de compuesto
Figure imgf000096_0003
El compuesto 41 se separó por SFC (Instrumento: SFC preparativa Thar SFC80; columna: Chiralpak AD-H 250*30 mm i.d. 5u; fase móvil: A para CO2 y B para IPA (0,1 % deNH3H2Ü); gradiente: % de B = 42 %; caudal: 70 g/min; longitud de onda: 220 nm; temperatura de la columna: 40 °C; retropresión del sistema: 100 bar; tiempo por ciclo: 20 min; cantidad de inyección: 4 mg por inyección), y luego se purificó por HPLC prep (columna: La C18100*305u; fase móvil:
[agua (0,1 % de TFA)-ACN]; % de B: 35 %-75 %, 5 min). Se obtuvieron N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(tercbutilsulfam oil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo Ej. 66A (11,54 mg, 18,38 umoles, 5,53 % de rendimiento, 100 % de pureza) y N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de cis-isopropilo Ej. 66B (9,38 mg, 14,94 umoles, 4,50 % de rendimiento, 100 % de pureza).
N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de transisopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,24 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,69 (dd, J=2,6, 8,3 Hz, 1H), 7,37 - 7,30 (m, 5H), 7,27 - 7,22 (m, 1H), 4,85 - 4,78 (m, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,50 - 3,39 (m, 1H), 3,06 - 2,96 (m, 1H), 2,22 (a d, J=11,8 Hz, 2H), 2,07 (a d, J=10,1 Hz, 2H), 1,76 - 1,62 (m, 2H), 1,41 (dq, J=3,1, 12,7 Hz, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,11 (s, 9H). ESI [M+H] = 628,2.
N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de cis-isopropilo.
1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,25 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,70 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,38 - 7,30 (m, 5H), 7,28 - 7,22 (m, 1H), 4,82 (a d, J=6,1 Hz, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,74 (s a, 1H), 3,20 - 3,13 (m, 1H), 2,03 - 1,95 (m, 4H), 1,86 - 1,72 (m, 4H), 1,23 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] = 628,2.
Ejemplos 67A y 67B
Esquema 26:
Figure imgf000097_0001
Preparación del compuesto 42.
Figure imgf000098_0001
Método general D, N-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] =476,0/478,0.
Preparación del compuesto 43
Figure imgf000098_0002
Método general B, N-[4-[2-[4-(terc-butoxicarbonilamino)ciclohexen-1-il]tiazol-5-il]-3-(tercbutilsulfamoil)fenil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] =593,3.
Preparación del compuesto 44.
Figure imgf000098_0003
Método general I, N-[4-[2-[4-(terc-butoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]-3-(tercbutilsulfamoil)fenil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] =595,3.
Preparación del compuesto 45.
Figure imgf000098_0004
Método general F, N-[4-[2-(4-aminociclohexil)tiazol-5-il]-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] =495,2.
Preparación del compuesto 46.
Figure imgf000099_0001
Método general D, N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de isopropilo. ESI [M+H] =581,2.
Preparación del Ej. 67A y Ej. 67B.
Figure imgf000099_0002
El compuesto 46 se separó por SFC (Instrumento: SFC preparativa Thar SFC80; columna: ChiralpakAD-H 250*30 mm i.d. 5 u; fase móvil: A para CO2 y B para IPA (0,1 % de NH3H2O); gradiente: % de B =30 %; caudal: 70 g/min; longitud de onda: 220 nm; temperatura de la columna: 40 °C; retropresión del sistema: 100 bar; tiempo de ciclo: 8 min; cantidad de inyección: 3 mg por inyección); y luego se purificó por HPLC prep (columna: Agela Durashell C18 150*255 u; fase móvil: [agua (0,1 % de TFA)-ACN]; % de B: 55 %-85 %,12 min), N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilam ino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de trans-isopropilo Ej. 67A (5,76 mg, 100 % de pureza) y N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de cis-isopropilo Ej. 67B (3,95 mg, 100 % de pureza) se obtuvieron como un só lido amarillo pálido.
N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de transisoprop ilo (Compuesto S12). 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,37 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,69 (dd, J=2,2, 8,4 Hz, 1 H), 7,40 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,01 (td, J=6,3, 12,5 Hz, 1H), 4,86 - 4,82 (m, 1H), 3,52 - 3,42 (m, 1 H), 3,04 (tt, J=3,5, 12,0 Hz, 1 H), 2,35 - 2,19 (m, 2H), 2,15 - 1,99 (m, 2H), 1,72 (dq, J=3,0, 12,9 Hz, 2H), 1,43 (dq, J=3,3, 12,6 Hz, 2H), 1,34 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,25 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+H] = 581,2.
N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de cisisoprop ilo (Compuesto S13). 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,37 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,70 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,40 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,01 (td, J=6,3, 12,5 Hz, 1 H), 4,84 (s a, 1H), 3,77 (s a, 1H), 3,23 - 3,15 (m, 1H), 2,05 - 1,98 (m, 4H), 1,89 - 1,72 (m, 4H), 1,34 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,25 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,16 (s, 9H). ESI [M+H] = 581,2
Ejemplo 68 Síntesis de N-[1-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidil]carbam ato de isopropilo.
Figure imgf000100_0001
Preparación del compuesto 24.
Figure imgf000100_0002
Una mezcla de 1-bencil-3-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]urea (0,06 g, 114,62 umoles, 1,0 eq.), N-(4-piperidil)carbamato de terc-butilo (40 mg, 199,72 umoles, 1,74 eq.), Xantphos (6,63 mg, 11,46 umoles, 0,1 eq.), Pd(OAc)2 (2,57 mg, 11,46 umoles, 0,1 eq.) y Cs2CO3 (112,04 mg, 343,86 umoles, 3,0 eq.) en ACN (3 ml) se calentó hasta 80 °C durante 12 h bajo N2. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa y la mezcla se concentró. El residuo se purificó por CCF prep (éter de petróleo: acetato de etilo = 1:1) dando N-[1-[5-[4-(bencilcarbamo)-2-(tercbutilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidil]carbamato de terc-butilo (0,03 g, en bruto) como un sólido amarillo. ESI [M+H] = 643,1.
Preparación del compuesto 25.
Figure imgf000100_0003
Se disolvió N-(1-(5-(4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidil]carbamato de terc-butilo (30 mg, 46,67 umoles, 1,0 eq.) en HCl/MeOH (4 M, 1 ml) y la mezcla se agitó a 20 °C durante 0,5 h. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa y la mezcla se concentró dando 1-[4-[2-(4-amino-1-piperidil)tiazol-5-il]-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]-3-bencil-urea (27 mg, en bruto, sal de HCl) como un sólido amarillo. ESI [M+H] = 543,2.
Preparación del Ej. 68.
Figure imgf000101_0001
Método general D, N-[1-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-(terc-butil-sulfamoil)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidil]carbamato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,24 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,69 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1 H), 7,39 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,36 - 7,19 (m, 6H), 4,82 - 4,73 (m, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,92 (a d, J=13,7 Hz, 2H), 3,75 - 3,68 (m, 1H), 3,43 (a t, J=11,0 Hz, 2H), 2,10 - 2,02 (m, 2H), 1,71 - 1,60 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,18 (s, 9H). ESI [M+H] = 629,2.
Ejemplo 69 Síntesis de N-[1-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil)tiazol-2-il]-4-piperidil]carbamato de isopropilo.
Esquema 28:
Figure imgf000101_0002
Preparación del compuesto 26.
Figure imgf000101_0003
Método general D, N-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de isopropilo. ESI [M+H] = 478,0/476,0.
Preparación del compuesto 27.
Figure imgf000102_0001
A una disolución de N-[4-(2-bromotiazol-5-il)-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de isoprop ilo (0,05 g, 104.95 umoles, 1,0 eq.) en MeCN (2 ml) se añadieron Cs2CO3 (102,59 mg, 314,86 umoles, 3,0 eq.), KI (17,42 mg, 104.95 umoles, 1,0 eq.) y N-(4-piperidil)carbamato de terc-butilo (105,10 mg, 524,76 umoles, 5,0 eq.). La mezcla se agitó a 95 °C durante 12 h y entonces se concentró. El residuo se purificó por CCF prep (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 4:3) dando N-[4-[2-[4-(terc-butoxicarbonilamino)-1-piperidil]tiazol-5-il]-3-(tercbutilsulfamoil)fenil]carbamato (0,025 g, en bruto) como un sólido blanco. ESI [M+H] = 596,2.
Preparación del compuesto 28.
Figure imgf000102_0002
Se disolvió N-[4-[2-[4-(terc-butoxicarbonilamino)-1-piperidil]tiazol-5-il]-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato de isoprop ilo (0,025 g, 41,96 umoles, 1,0 eq.) en HCl/MeOH (4 M, 1,5 ml) y la mezcla se agitó a 20 °C durante 0,5 h. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa y la mezcla se concentró dando el N-[4-[2-(4-amino-1-piperidil)tiazol-5-il]-3-(terc-butilsulfamoil)fenil]carbamato (0,02 g, en bruto, sal de HCl) como un sólido blanco. ESI [M+H] = 496,2. Preparación del Ej. 69.
Figure imgf000102_0003
Método general D, N-[1-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-(isopropoxicarbonilamino)fenil]tiazol-2-il]-4-piperidil]carbam ato de isopropilo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,35 (s, 1H), 7,66 (a d, J=8,4 Hz, 1H), 7,42 (d, J=8,4 Hz, 1 H), 7,31 (s, 1H), 4,98 (td, J=6,2, 12,5 Hz, 1H), 4,84 - 4,77 (m, 1H), 3,93 (a d, J=13,5 Hz, 2H), 3,77 - 3,67 (m, 1 H), 3,44 (a t, J=12,3 Hz, 2H), 2,06 (a dd, J=3,1, 13,2 Hz, 2H), 1,71 - 1,61 (m, 2H), 1,31 (d, J=6,4 Hz, 6H), 1,23 (a d, J=6,2 Hz, 6H), 1,19 (s, 9H). ESI [M+H] = 582,2.
Ejemplo 70 Síntesis de N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[(2-fluorofenil)metoxicarbonilamino]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo.
Esquema 29:
Figure imgf000103_0001
Preparación del compuesto 2.
Figure imgf000103_0002
A una mezcla de ácido trans-4-(terc-butoxicarbonilamino)ciclohexanocarboxílico (65,0 g, 267,2 mmoles, 1,0 eq.), NH4CI (21,4 g, 400,7 mmoles, 1,5 eq.) y TEA (801,5 mmoles, 111,6 ml, 3 eq.) en MeCN (1,3 l) se añadió HBTU (111,5 g, 293,9 mmoles, 1,1 eq.) y la mezcla se agitó a 25 °C durante 3 h. La mezcla se filtró y entonces la torta de filtración se lavó con éter de petróleo (200 ml) y se secó dando N-(4-carbamoilciclohexil)carbamato de trans-terc-butilo (140 g, en bruto, 2 lotes) como un sólido blanco. 1H RMN (METANOL-d4, 400MHz) 5 = 3,25-3,34 (m, 1H), 2,14 (tt, J=12,3, 3,5 Hz, 1H), 1,83-1,99 (m, 4H), 1,52 (qd, J=13,1,2,9 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,21 (qd, J=12,7, 3,5 Hz, 2H)
Preparación del compuesto 3.
Figure imgf000103_0003
Una mezcla de N-(4-carbamoilciclohexil)carbamato de trans-terc-butilo (90,0 g, 371,4 mmoles, 1,0 eq.), Na2CÜ3 (39,4 g, 371,4 mmoles, 1,0 eq.) y reactivo de Lawesson (82,6 g, 204,3 mmoles, 0,55 eq.) en 2-Me-THF (600 ml) se agitó a 80 °C durante 2 h y entonces la mezcla de reacción se vertió en H2O (200 ml). La fase acuosa se extrajo con EtÜAc (500 ml x 2). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4, se filtraron y se concentraron dando N-(4-carbamotioilciclohexil)carbamato de trans-terc-butilo (180 g, en bruto, 2 lotes) como un sólido blanco. 1H RMN (METANOL-d4, 400MHz) 5 = 3,35-3,46 (m, 1H), 2,87-3,00 (m, 1H), 2,09-2,20 (m, 2H), 1,99-2,09 (m, 2H), 1,54­ 1,68 (m, 2H), 1,26-1,45 (m, 2H), 1,14-1,25 (m, 9H)
Preparación del compuesto 4.
Figure imgf000104_0001
Una mezcla de N-(4-carbamotioilciclohexil)carbamato de trans-terc-butilo (180,0 g, 696,7 mmoles, 1,0 eq.), 2-bromo-1,1-dietoxi-etano (137,3 g, 696,7 mmoles, 1,0 eq.) y TsÜH.H2Ü (265 g, 1,4 moles, 2 eq.) en EtÜH (2,0 l) se agitó a 80 °C durante 6 h. Entonces la mezcla se enfrió hasta TA y se ajustó a pH=9 con Na2CÜ3 ac. sat. y se añadió Boc2Ü (152 g, 696,7 mmoles, 1 eq.). La mezcla se agitó a 30 °C durante 3 h, entonces se concentró y se diluyó con H2Ü (2 l). La mezcla se extrajo con EtÜAc (800 ml x 3) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SÜ4 , se filtraron y se concentraron. El residuo se trituró con éter de petróleo (1,5 l) dando N-(4-tiazol-2-ilc iclohexil)carbamato de trans-terc-butilo (70 g, 247,87 mmoles, 35,58 % de rendimiento) como un sólido blanco.
1H RMN (METANÜL-d4, 400MHz) 5 = 7,67 (d, J=3,1 Hz, 1 H), 7,44 (d, J=3,5 Hz, 1H), 3,33-3,44 (m, 1H), 2,93-3,06 (m, 1H), 2,12-2,21 (m, 2H), 2,00-2,09 (m, 2H), 1,57-1,71 (m, 2H), 1,41-1,48 (m, 9H), 1,29-1,38 (m, 1H), 1,13-1,28 (m, 1H).
Preparación del compuesto 5.
Figure imgf000104_0002
Una mezcla de N-(4-tiazol-2-ilciclohexil)carbamato de trans-terc-butilo (68 g, 240,8 mmoles, 1 eq.) y NBS (47,1 g, 264,9 mmoles, 1,1 eq.) en DMF (500 ml) se agitó a 25 °C durante 10 h y luego se vertió en H2Ü (2 l) y se extrajo con EtÜAc (500 ml x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (300 ml x 5), se secaron sobre Na2SÜ4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiÜ2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 20:1 a 10:1) dando N-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-terc-butilo (78 g, en bruto) como un sólido amarillo. ESI [M+H] = 363,0/361,0
Preparación del compuesto 6.
Figure imgf000104_0003
Una mezcla de N-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-terc-butilo (50 g, 138,4 mmoles, 1 eq.) en HCl/MeÜH (4 M, 700 ml) se agitó a 25 °C durante 0,5 h y entonces se concentró dando trans-4-(5-bromotiazol-2-il) ciclohexanamina (45 g, en bruto, sal de HCl) como un sólido amarillo. ESI [M+H] = 363,0/361,0
Preparación del compuesto 7.
Figure imgf000105_0001
A una disolución de trans-4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexanamina (45 g, sal de HCl, 172,3 mmoles, 1 eq.), piridina (61,5 mmoles, 69,5 ml, 5 eq.) y DMAP (4,2 g, 34,5 mmoles, 0,2 eq.) en DCM (300 ml) se añadió carbonoclorhidrato de isopropilo (258,5 mmoles, 35,9 ml, 1,5 eq.) gota a gota a 0 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 0,5 h y entonces se lavó con HCl (1 N, 1 l) y Na2CO3 ac. sat. (1 l). Las fases orgánicas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo =15:1 a 10:1) dando N-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (37 g, 106,55 mmoles, 61,84 % de rendimiento) como un sólido amarillo. 1H RMN (METANOL-d4, 400MHz) 5 = 7,60 (s, 1H), 4,81 (dt, J=12,2, 6,2 Hz, 1H), 3,41 (tt, J=11,6, 4,0 Hz, 1 H), 2,88-3,00 (m, 1H), 2,10-2,20 (m, 2H), 1,98-2,07 (m, 2H), 1,55-1,68 (m, 2H), 1,30-1,43 (m, 2H), 1,21 (a d, J=6,2 Hz, 6H).
Preparación del compuesto 8.
Figure imgf000105_0002
Una mezcla de N-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (16,2 g, 46,7 mmoles, 1 eq.), 5-amino-N-terc-butil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)bencenosulfonamida (19,9 g, 56,1 mmoles, 1,2 eq.), KF (4,1 g, 70,1 mmoles, 1,5 eq.), Na2CO3 (14,9 g, 140,2 mmoles, 3 eq.) y Pd(PPh3)4 (1,6 g, 1,4 mmoles, 0,03 eq.) en tolueno (150 ml), EtOH (150 ml) y H2O (50 ml) se agitó a 80 °C durante 6 h bajo atmósfera de N2. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se diluyó con H2O (100 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml x 2). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo= 20:1 a 1:1) dando N-[4-[5-[4-amino-2-(tercbutilsulfam oil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo (13 g, 26,3 mmoles, 56,2 % de rendimiento) como un sólido blanco. 1H r Mn (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,65 - 7,60 (m, 1H), 7,43 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,13 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,83 (dd, J=2,6, 8,3 Hz, 1 H), 4,81 (s a, 1H), 3,76 - 3,71 (m, 1 H), 3,05 - 2,86 (m, 1H), 2,20 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,06 (a d, J=10,5 Hz, 2H), 1,75 - 1,60 (m, 2H), 1,47 - 1,34 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,09 (s, 9H).
Preparación del compuesto 9.
Figure imgf000105_0003
A una disolución de N-[4-[5-[4-amino-2-(terc-butilsulfamoil)fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de transisoprop ilo (250 mg, 505,4 umoles, 1 eq.) en DCM (4 ml) se añadieron DMAP (6,2 mg, 50,5 umoles, 0,1 eq.), piridina (120 mg, 1,5 mmoles, 3 eq.) y (4-nitrofenil)carbonoclorhidrato (153 mg, 758 umoles, 1,5 eq.). La mezcla se agitó a 25 °C durante 0,5 h y se usó directamente para la siguiente etapa. ESI [M+H] = 660,2
Preparación del Ej. 70 de compuesto.
Figure imgf000106_0001
A una disolución de (2-fluorofenil)metanol (45,9 mg, 363,8 umoles, 3 eq.) y DIEA (47 mg, 363,8 umoles, 3 eq.) en MeCN (1 ml) se añadió la disolución anterior (1 ml). La mezcla se agitó a 80 °C durante 1 h, entonces se concentró y el residuo se purificó por HPLC prep (columna: Waters Xbridge 150*255 u; fase móvil: [agua (NH4HCO310 mM)-ACN];
% de B: 42 %-72 %, 12 min) dando N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[(2-fluorofenil)metoxicarbonilam ino]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (16,34 mg, 25,26 umoles, 20,83 % de rendimiento, 100 % de pureza) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,36 (s, 1H), 7,77 - 7,63 (m, 2H), 7,52 (t, J=7,0 Hz, 1H), 7,44 - 7,31 (m, 2H), 7,23 - 7,08 (m, 2H), 5,29 (s, 2H), 4,83 (s a, 1H), 3,46 (a d, J=11,8 Hz, 1H), 3,00 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,22 (a d, J=12,7 Hz, 2H), 2,07 (a d, J=11,4 Hz, 2H), 1,76 - 1,62 (m, 2H), 1,47 - 1,35 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] = 647,2
Ejemplo 71 Síntesis de N-[3-(terc-but¡lsulfamo¡l)-4-[2-[4-(/sopropox/carbon/7amino)c¡clohex¡l]t¡azol-5-il]fenil]carbamato de trans-[(1S)-1-fen¡let¡lo].
Figure imgf000106_0002
Preparación del Ej. 71.
A una disolución de (1S)-1-feniletanol (29,6 mg, 242,5 umoles, 2 eq.) y DIEA (47 mg, 363,8 umoles, 3 eq.) en MeCN (2 ml) se añadió una disolución de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazo1-5-il]fenil]carbamato de trans-(4-nitrofenilo) (80 mg, 121,25 umoles, 1 eq.) en DCM (1 ml). La mezcla se agitó a 80 °C durante 1 h, entonces se concentró y el residuo se purificó por HPLC prep (columna: Nano-Micro UniSil 5-100 C18 ULTRA 100*250 mm 5 um; fase móvil: [agua (0,1 % deTFA)-ACN]; % de B: 55 %-80 %,11 min) dando N-[3-(tercbutilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilam ino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de trans-[(1S)-1-fen ile tilo ] (12,19 mg, 18,77 umoles, 15,48 % de rendimiento, 99 % de pureza) como un sólido blanco. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,35 (s a, 1H), 7,81 - 7,65 (m, 2H), 7,48 - 7,36 (m, 5H), 7,31 (a d, J=6,8 Hz, 1H), 5,89 (a d, J=6,2 Hz, 1H), 4,85 (a d, J=5,5 Hz, 1H), 3,47 (s a, 1H), 3,03 (s a, 1H), 2,24 (a d, J=11,2 Hz, 2H), 2,08 (a d, J=11,0 Hz, 2H), 1,71 (c, J=11,9 Hz, 2H), 1,61 (a d, J=6,4 Hz, 3H), 1,49 - 1,37 (m, 2H), 1,24 (a d, J=5,4 Hz, 6H), 1,13 (s, 9H).
ESI [M+H] = 643,2
Ejemplo 72 Síntes¡s de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-¡l]fen¡l]carbamato.
Figure imgf000106_0003
Preparación del Ej. 72.
A una disolución de 2-piridilmetanol (26,5 mg, 242,5 umoles, 2 eq.) y DIEA (47 mg, 363,8umol, 3 eq.) en MeCN (2 ml) se añadió una disolución de N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-(4-nitrofenilo) (80 mg, 121,3 umoles, 1 eq.) en DCM (1 ml). La mezcla se agitó a 80 °C durante 1 h, entonces se concentró y el residuo se purificó por HPLC prep (columna: Waters Xbridge 150*255 u; fase móvil: [agua (0,04 % de NH3H2O NH4HCO3 10 mM)-ACN]; % de B: 35 %-65 %, 10 min) dando N-[3-(tercbutilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilam ino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbamato de trans-2-pirid ilmetilo (18,59 mg, 28,82 umoles, 23,77 % de rendimiento, 97,65 % de pureza) como un sólido amarillo pálido. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,56 (a d, J=4,5 Hz, 1H), 8,38 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,94 - 7,87 (m, 1H), 7,78 - 7,72 (m, 2H), 7,59 (a d, J=7,8 Hz, 1H), 7,44 - 7,38 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 4,85 (td, J=5,9, 12,0 Hz, 1H), 3,47 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 3,07 - 2,96 (m, 1H), 2,24 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,13 - 2,04 (m, 2H), 1,77 - 1,65 (m, 2H), 1,48 - 1,37 (m, 2H), 1,24 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,14 (s, 9H). ESI [M+H] = 630,2
Ejemplo 73 Síntesis de N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[(4-hidroxifenil)metilcarbamoilamino]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo.
Figure imgf000107_0001
Preparación del Ej. 73.
A una disolución 4-(aminometil) fenol (74,7 mg, 606,5 umoles, 3 eq.) y DIEA (78,4 mg, 606,5 umoles, 3 eq.) en DCM (2 ml) se añadió N-[3-(terc-butilsulfamoil)-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilamino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-(4-nitrofenilo) (133,4 mg, 202,2 umoles, 1 eq.) en DCM (2 ml). La mezcla se agitó a 25 °C durante 1 h, entonces se concentró y el residuo se purificó por HPLC prep (condición de TFA) dando N-[4-[5-[2-(terc-butilsulfamoil)-4-[(4-hidroxifenil)metilcarbamoilam ino]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de transisopropilo (23,56 mg, 35,99 umoles, 17,80 % de rendimiento, 98,357 % de pureza) como un sólido blanco. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,24 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,69 (dd, J=2,2, 8,3 Hz, 1H), 7,36 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,16 (d, J=8,8 Hz, 2H), 6,75 (d, J=8,3 Hz, 2H), 4,85 - 4,74 (m, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,45 (s, 1H), 3,15 - 2,97 (m, 1H), 2,23 (a d, J=12,3 Hz, 2H), 2,08 (a d, J=13,2 Hz, 2H), 1,79 - 1,63 (m, 2H), 1,48 - 1,34 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,12 (s, 9H). ESI [M+H] = 644,2
Ejemplo 74 Síntesis de N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-[(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)sulfamoil]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo.
Esquema 33:
Figure imgf000107_0002
Figure imgf000108_0001
Preparación del compuesto 11.
Figure imgf000108_0002
A una mezcla de 2-amino-2-metil-propan-1-ol (3 g, 33,7 mmoles, 5,1 eq.) y DMAP (80 mg, 654,8 umoles, 0,98 eq.) en DCM (50 ml) se añadió cloruro de 2-bromo-5-nitro-benceno su lfon ilo (2 g, 6,66 mmoles, 1 eq.). La mezcla se agitó a 20 °C durante 30 min, entonces se lavó con HCl 1 N (20 ml) y NaHCO3 ac. sat. (20 ml). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando 2-bromo-N-(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)-5-nitrobencenosulfonamida (1,7 g, 4,8 mmoles, 72,3 % de rendimiento) como una goma amarilla. ESI [M+H] = 355,0/353,0
Preparación del compuesto 12.
Figure imgf000108_0003
Una mezcla de 2-bromo-N-(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)-5-nitro-bencenosulfonamida (1,7 g, 4,8 mmoles, 1 eq.), Fe (1,5 g, 26,9 mmoles, 5,6 eq.) y NH4Cl (800 mg, 14,9 mmoles, 3,1 eq.) en EtOH (15 ml)/H2O (7,5 ml)/THF (7,5 ml) se agitó a 80 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró para retirar el EtOH, se diluyó con H2O (100 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml x 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 100:1 a 1:1) dando 5-amino-2-bromo-N-(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)bencenosulfonamida (1,1 g, 3,4 mmoles, 70,7 % de rendimiento) como un sólido amarillo pálido. ESI [M+H] = 325,0/323,0
Preparación del compuesto 13.
Figure imgf000108_0004
Una mezcla de 5-amino-2-bromo-N-(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)bencenosulfonamida (400 mg, 1,24 mmoles, 1 eq.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (942,8 mg, 3,7 mmoles, 3 eq.), Pd(dppf)Cl2 (90,6 mg, 123,8 umoles, 0,1 eq.) y KOAc (364,4 mg, 3,7 mmoles, 3 eq.) en dioxano (4 ml) se agitó a 80 °C durante 12 h bajo atmósfera de N2 y entonces se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (SÍO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 50:1 a 3:1) dando 5-amino-N-(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)bencenosulfonamida (201 mg, en bruto) como un sólido blanco. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,53 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,28 (d, J=2,4 Hz, 1H), 6,75 (dd, J=6,4 Hz, 1H), 3,35 (s, 2H), 1,36 (s, 12H), 1,10 (s, 6H).
Preparación del compuesto 14.
Figure imgf000109_0001
Una mezcla de 5-amino-N-(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)bencenosulfonamida (140,7 mg, 380,1 umoles, 1,2 eq.), N-[4-(5-bromotiazol-2-il)ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (110 mg, 316,7 umoles, 1 e q j, Na2CO3 (100,7 mg, 950,3 umoles, 3 e q j, KF (27,6 mg, 475,1 umoles, 1,5 eq.) y Pd(PPh3)4 (36,6 mg, 31,7 umoles, 0,1 eq.) en tolueno (1 ml)/EtOH (1 ml)/H2O (0,3 ml) se agitó a 80 °C durante 12 h bajo atmósfera de N2. La mezcla de reacción se concentró, se diluyó con H2O (10 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por Cc f prep (SiO2 , acetato de etilo) dando N-[4-[5-[4-amino-2-[(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)sulfamoil] fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (117 mg, en bruto) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 7,63 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,15 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,83 (dd, J=2,4, 8,1 Hz, 1H), 4,85 - 4,78 (m, 1H), 3,50 - 3,39 (m, 1H), 3,25 (s, 2H), 3,03 - 2,91 (m, 1H), 2,21 (a t, J=6,1 Hz, 2H), 2,12 -2,00 (m, 2H), 1,75 - 1,60 (m, 2H), 1,45 - 1,33 (m, 2H), 1,28 - 1,19 (s, 6H), 1,03 (s, 6H)
Preparación del compuesto 15.
Figure imgf000109_0002
A una disolución de N-[4-[5-[4-amino-2-[(2-hidroxi-1,1-dimetil-etil)sulfamoil]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (90 mg, 176,3 umoles, 1 eq.) en DCM (1 ml) se añadieron TEA (53,5 mg, 528,7 umoles, 3 eq.), DMAP (2,2 mg, 17,6 umoles, 0,1 eq.) y TBSC1 (66,4 mg, 440,6 umoles, 2,5 eq.). La mezcla se agitó a 30 °C durante 12 h y entonces se concentró. El residuo se purificó por CCF prep (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 2:1) dando N-[4-[5-[4-am ino-2-[[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1,1-dimetil-etil]sulfamoil]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (120 mg, en bruto) como un sólido amarillo pálido. ESI [M+H] = 625,2
Preparación del compuesto 16.
Figure imgf000109_0003
A una disolución de N-[4-[5-[4-am ino-2-[[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1,1-dimetil-etil]sulfamoil]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo (90 mg, 144 umoles, 1 eq.) en DCM (1 ml) se añadieron DMAP (1,8 mg, 14,4 umoles, 0,1 eq.), piridina (34,2 mg, 432 umoles, 3 eq.) y (4-nitrofenil)carbonoclorhidrato (43,5 mg, 216 umoles, 1,5 eq.). La mezcla se agitó a 25 °C durante 0,5 h y se usó en la siguiente etapa directamente sin más purificación. ESI [M+H] = 790,3
Preparación del compuesto 17.
Figure imgf000110_0001
A una disolución de fenilmetanamina (36 mg, 336 umoles, 3 eq.) en DCM (1 ml) se añadió una disolución de N-[3-[[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1,1-dimetiletil]sulfamoil]-4-[2-[4-(isopropoxicarbonilam ino)ciclohexil]tiazol-5-il]fenil]carbam ato de trans-(4-nitrofenilo) (88,5 mg, 112 umoles, 1 eq.) en DCM (1 ml) y la mezcla se agitó a 25 °C durante 0,5 h. La mezcla de reacción se diluyó con H2O (10 ml) y se extrajo con EtOAc (10 ml x 2). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por CCF prep (SiO2 , éter de petróleo: acetato de etilo = 1:1) dando N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-[[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1, 1-dim etil-etil]sulfam oil]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo (93 mg, en bruto) como una goma amarilla. ESI [M+H] = 758,4
Preparación del Ej. 74.
Figure imgf000110_0002
Una mezcla de N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-[[2-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1,1-dimetiletil]sulfamoil]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbam ato de trans-isopropilo (84,9 mg, 112 umoles, 1 eq.) en AcOH (0,5 ml)/THF (0,5 ml)/H2O (0,5 ml) se agitó a 80 °C durante 0,5 h. Entonces la mezcla se concentró y el residuo se purificó por HPLC prep (condición de TFA) dando N-[4-[5-[4-(bencilcarbamoilamino)-2-[(2-hidroxi-1,1-dimetiletil)sulfam oil]fenil]tiazol-2-il]ciclohexil]carbamato de trans-isopropilo (5,86 mg, 9,10 umoles, 8,13 % de rendimiento, 100 % de pureza) como un sólido amarillo. 1H RMN (400MHz, METANOL-d4) 5 = 8,25 (d, J=2,6 Hz, 1H), 7,81 - 7,66 (m, 2H), 7,40 - 7,30 (m, 5H), 7,28 - 7,22 (m, 1H), 4,82 (td, J=6,0, 12,5 Hz, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,45 (a t, J=11,6 Hz, 1H), 3,28 (s, 2H), 3,00 (a t, J=11,8 Hz, 1H), 2,23 (a d, J=13,2 Hz, 2H), 2,11 - 2,00 (m, 2H), 1,77 - 1,60 (m, 2H), 1,48 - 1,32 (m, 2H), 1,22 (a d, J=6,1 Hz, 6H), 1,05 (s, 6H). ESI [M+H] = 644,3
Ejemplo 75 Cribado primario de compuestos
1 . ANTECEDENTES
El cribado primario fue un cribado fenotípico que utilizó la interacción letal sintética entre AID y RAD51 para identificar compuestos que fueron tanto potentes como específicos. Las células que expresan AID dependen de RAD51 para la supervivencia; la inhibición de RAD51 en células AID positivas da como resultado un efecto citotóxico. Basándose en dicho efecto, se identificaron compuestos que fueron potentes en células AID positivas y fueron significativamente menos potentes en células AID negativas.
2. MATERIALES Y SUMINISTROS
Los artículos de plástico y consumibles necesarios para este experimentos incluyen: medios de cultivo celular; medios de tampón de evaporación; 100 % de DMSO; placas de cultivo estériles de fondo en U de 96 pocillos; frasco de 250 ml; tubo epi ámbar Opaque de 1,5 ml; gradilla para tubos Epi; depósitos de 300 ml; depósito de 25 ml; puntas de pipeta serológica de 25 ml; puntas de pipeta serológica de 5 ml puntas de pipeta P1000; y puntas de pipeta P200.
El equipo necesario para este experimento incluye: manipulador de líquidos Viaflo 384; pipeta serológica Eppendorf; pipeta Eppendorf P1000; y pipeta Eppendorf P200
También se necesitaron cultivo de células Daudi y cultivos celulares WI-38 para este experimento.
Por último, se necesitan los compuestos a probar (por ejemplo, los compuestos de la presente invención).
3. PROCEDIMIENTO
Todas las etapas se realizaron en un entorno estéril dentro de la vitrina de seguridad biológica.
La primera etapa fue establecer un ensayo de destrucción de células en la estirpe celular Daudi (AID positiva). Se preparó una placa de fondo en U de 96 pocillos escribiendo el número de experimento, número de placa, fecha e iniciales en la esquina superior derecha de la tapa de la placa. Con un depósito estéril de 300 ml, y la pipeta serológica de 25 ml, se pipeteó el medio de tampón de evaporación en el depósito en incrementos de 25 ml. Usando el manipulador de líquidos, se pipeteó 150 ul de tampón de evaporación del depósito en las filas A y H y las columnas 1 y 12 de la placa de fondo en U de 96 pocillos. Se contaron los cultivos celulares para obtener la densidad de células por ml, y la viabilidad del cultivo. Se usó la información de la densidad celular para obtener 1.000.000 células del cultivo usando una pipeta serológica de 5 ml en un tubo epi. Se usó la información de la densidad celular del cultivo para calcular el número de células y el volumen de medio necesarios para el ensayo para sembrar 1250 células en 130 ul de medio por pocillo de cultivo disponible en la placa de fondo en U de 96 pocillos. Se usaron las filas B a F para las células (50 pocillos en total), quedando la fila G para control de medio vacío. El cálculo se sobreestimó en 10 ml para tener en cuenta el volumen muerto en el depósito de 300 ml. Una vez se calculó el volumen de medio, se pipeteó el volumen apropiado de medio en incrementos de 25 ml en el frasco de 250 ml usando una pipeta serológica de 25 ml. Se cerró fuertemente el frasco de 250 ml, y se puso en un baño de agua a 37 °C durante 2 minutos. Mientras que se estaba calentando el medio de cultivo, se pipetearon 10 ml de medio nuevo del frasco de medio de cultivo de 500 ml en un depósito estéril de 25 ml. Usando la pipeta multicanal Eppendorf, se pipetearon 130 ul de medio del depósito de 25 ml en la fila G de la placa de fondo en U de 96 pocillos. Una vez se calentó el frasco de medio de 250 ml, se pipeteó el volumen de cultivo necesario en la botella, y se mezcló suavemente con una pipeta serológica de 25 ml para no crear burbujas, y entonces se pipeteó el contenido de la botella en un nuevo depósito de 300 ml. Usando el manipulador de líquidos, se pipetearon 130 ul de cultivo del depósito de 300 ml en las filas B a F de la placa de fondo en U de 96 pocillos. Una vez se añadió el cultivo, la placa se colocó en una estufa de incubación a 37 °C hasta que se preparó la placa madre de compuesto para su uso.
Se prepararon dos placas de fondo en U de 96 pocillos escribiendo el nombre de la placa madre en la esquina superior derecha de la tapa de la placa. Etiquetando una madre de DMSO y la otra madre de medio. Los compuestos de interés se obtuvieron del congelador del laboratorio y se sembraron en una caja de almacenamiento de 25 pocillos con una tapa, y se dejó la caja a un lado. Los compuestos se agitaron con vórtex después de la descongelación, pero antes de uso. Usando una pipeta multicanal automática, se pipetearon 20 ul de 100 % de DMSO en los pocillos B3-B11 a G3-G11 de la placa madre de DMSO. Para cada compuesto en la placa madre, se pipetearon 50 ul del compuesto en el pocillo apropiado de la fila 2 (mapa de la placa de referencia para determinar el pocillo apropiado). Se hizo una dilución sucesiva empezando aspirando 20 ul de la fila 2 y mezclando con la fila 3, repitiendo hasta que se llegó a la fila 11. Usando el manipulador de líquidos, se dispensaron 194 ul de medio de Daudi en los pocillos B2-B11 a G2-G11 de la placa madre de medio. Usando el manipulador de líquidos, se aspiró 6 ul de la placa madre de DMSO y se dispensó en la placa madre de medio, mezclando 100 ul dos veces.
Entonces se añadieron los compuestos de la placa madre a la placa de cultivo. Las placas de cultivo se sacaron de la estufa de incubación y se pusieron dentro de la vitrina de seguridad biológica. Usando un manipulador de líquidos, se aspiraron 20 ul de los pocillos B2 a B11 a G2 a G11 de la placa madre, y se dispensaron en los pocillos b 2 a B11 a G2 a G11 de la placa de cultivo. Esta serie continuó con cada placa de cultivo. Una vez las placas de cultivo adquirieron sus 20 ul de diluciones de compuesto, se volvieron a poner en la estufa de incubación, hasta sus lecturas en el día 7 del experimento. La muerte celular se midió en el día 7 del experimento usando Cell-Titer Glo y un lector de placas de Promega.
Se calcularon el porcentaje de muerte celular y los valores de CE50 comparando la viabilidad celular de los pocillos tratados con compuesto con los pocillos no tratados. Los valores de RLU normalizados se obtuvieron restando los valores medios de los pocillos de cada uno de los pocillos en la misma columna, y luego dividiendo ese valor entre los valores de células tratadas con DMSO. El porcentaje de destrucción se calculó entonces restando el valor de RLU normalizado de 1 y multiplicando por 100. Entonces se calculó el valor de destrucción en porcentaje normalizado promedio y el error estándar de la media. Entonces se entraron los valores de destrucción en Prism con los errores estándar correspondientes. En Prism se representó una línea de regresión no lineal con los puntos de datos usando una escala semilogarítmica, y se calculó el valor de CE50. Para los compuestos que mostraron buena potencia en la estirpe celular de Daudi, el ensayo se repitió usando células WI-38 (AID negativa).
Datos de cribado
Tabla 1:
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Figure imgf000121_0001
Figure imgf000122_0001
Ejemplo 76. Permeabilidad bidireccional de Caco-2
Se ensayó la permeabilidad bidireccional de Caco-2. Se sembraron células Caco-2 sobre soportes permeables de policarbonato y se dejó que se diferenciaran durante aproximadamente 3 semanas antes de ser usados en los ensayos. Las células se expusieron entonces a los compuestos desde tanto los lados apical como basolateral y se incubaron a 37 °C durante hasta 90 minutos con una ligera agitación. Entonces se midió el transporte de compuestos usando análisis de CL/EM/EM a los 30, 60 y 90 minutos.
Tabla 2
Figure imgf000122_0002
Figure imgf000123_0001
Figure imgf000124_0003
Ejemplo 77. Estabilidad de m icrosomas de hígado humano
Se determinó la estabilidad de los compuestos reivindicados en presencia de microsomas de hígado humano. Los compuestos se incubaron con los microsomas a 37 °C durante 45 minutos. Se analizaron las muestras usando CL-EM/EM. El análisis de datos incluyó la semivida, la tasa de depuración y el porcentaje de circulación sanguínea hepática (% de QH) para cada uno de los compuestos en las diferentes especies. A continuación están datos del ensayo de microsomas hepáticos de compuestos representativos, que muestran que los compuestos reivindicados tienen estabilidad metabólica superior.
Tabla 3
Figure imgf000124_0002
Ejemplo 78. Cribado de estirpes celulares
La actividad de los compuestos reivindicados se midió en una variedad de estirpes celulares con diferentes niveles de expresión de citidina desaminasa inducida por activación (AICDA). Se repitió el ensayo de potencia en todas las estirpes celulares y se registraron los valores de CE50.
Tabla 4
Figure imgf000124_0001
Figure imgf000125_0002
Ejemplo 79. Farmacocinética (FC)
Se usaron estudios de FC en ratones para determinar el destino de los compuestos en un organismo completo. Se trataron ratas con los compuestos ya fuera por vía oral o por vía IV en las dosis indicadas y se siguieron durante hasta 24 horas. Las muestras de plasma se tomaron en diferentes momentos de tiempo y se analizaron por CL-EM.
Tabla 5
Figure imgf000125_0001

Claims (22)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto representado por la siguiente fórmula estructural:
Figure imgf000126_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
el anillo de tiazol está sustituido opcionalmente con F o Cl;
Cy es cicloalquilo (C3-C7), cicloalquilo (C6-C12) puenteado, o un anillo heterocíclico de 4-10 miembros, cada uno de los cuales está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, OH, alquilo (C1-C4) y alcoxi (C1-C4);
cuando X5 está conectado con un átomo de nitrógeno del anillo de Cy, X5 está ausente;
cuando X5 está conectado con un átomo de carbono del anillo de Cy, X5 es NRa u O;
X6 es NRa u O;
R1 es alquilo (C1-C5) opcionalmente sustituido con OH;
R3 es alquilo (C1-C5), -CH2-fenilo, cicloalquilo (C3-C7), -CH2-cicloalquilo (C3-C7), -CH2-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, o anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, en donde el alquilo (C1-C5), cicloalquilo (C3-C7), fenilo o anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico representado por R3 o en el grupo representado por R3 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, OH, alquilo (C1-C4), halometilo, halometoxi, CN y alcoxi (C1-C4);
R2 es -NRaC(O)Oalquilo (C1-C4), -NRaC(O)NRaalquilo (C1-C4), -NRaC(O)Oalquenilo (C2-C4), -NRaC(O)NRaalquenilo (C2-C4), -NRaC(O)O-cicloalquilo (C3-C6), -NRaC(O)NRa-cicloalquilo (C3-C7), -NRaC(O)O-fenilo, -NRaC(O)NRa-fenilo, -NRaC(O)O-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, -NRaC(O)NRa-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, -NRaC(O)O-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico, o -NRaC(O)NRa-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico,
en donde el alquilo (C1-C4) y el alquenilo (C2-C4) en el grupo representado por R2 están cada uno opcionalmente e independientemente sustituidos con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, N3 , ORa, NRaRa, cicloalquilo (C3-C6), fenilo, un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico y un anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico;
en donde el cicloalquilo (C3-C7) en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, CH3 , =O, ORa y NRaRa;
en donde el fenilo en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, CH3 , halometilo, halometoxi, CN, ORa y N3 ;
en donde el anillo heterocíclico en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en =O, halógeno, ORa, CH3 , halometilo y halometoxi;
en donde el anillo heteroaromático en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, CN, CH3 , halometilo, halometoxi, ORa y NRaRa; y cada Ra es independientemente H o CH3.
2. Un compuesto representado por la siguiente fórmula estructural:
Figure imgf000127_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
el anillo de tiazol está sustituido opcionalmente con F o Cl;
Cy es ciclohexilo o un anillo heterocíclico monocíclico de 6 miembros;
X5 y X6 son cada uno independientemente NRa u O;
R1 es alquilo (C1-C5);
R3 es alquilo (C1-C5) o anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros;
R2 es -NRaC(O)Oalquilo (C1-C4), -NRaC(O)NRaalquilo (C1-C4), -NRaC(O)Oalquenilo (C2-C4), -NRaC(O)NRaalquenilo (C2-C4), -NRaC(O)-Ocicloalquilo (C3-C6), -NRaC(O)NRa-cicloalquilo (C3-C6), -NRaC(O)O-fenilo, -NRaC(O)NRa-fenilo, -NRaC(O)O-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, -NRaC(O)NRa-anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, -NRaC(O)O-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico o -NRaC(O)NRa-anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico,
en donde el alquilo (C1-C4) y el alquenilo (C2-C4) en el grupo representado por R2 están cada uno opcionalmente e independientemente sustituidos con uno o más de halógeno, N3 , ORa, NRaRa, cicloalquilo (C3-C6), fenilo, anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros o anillo heteroaromático monocíclico de 5-6 miembros;
en donde el cicloalquilo (C3-C6) en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, CH3, ORa, o NRaRa;
en donde el fenilo en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, CH3 , halometilo, halometoxi, ORa, o N3 ;
en donde el anillo heterocíclico en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de =O, halógeno, CH3 , halometilo o halometoxi;
en donde el anillo heteroaromático en el grupo representado por R2 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, CH3 , halometilo, halometoxi, ORa o NRaRa; y
cada Ra es independientemente H o CH3.
3. El compuesto de la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Cy es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo,
azetidinilo, azepanilo, diazaespiro[4.4]nonilo, diazaespiro[3.5]nonilo, diazepanilo, dihidroimidazol, dihidrofuranilo, dihidropiranilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidrotienilo, dihidrotiofenilo, dihidrotiopiranilo, hexahidropiridazinilo, hexahidropirimidinilo, hidantoinilo, indolinilo, isoindolinilo, morfolinilo, oxiranilo, oxetanilo, piperidinilo, piperazinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroimidazol, tetrahidroindolilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiopiranilo, tiomorfolinilo, tropanilo, valerolactamilo,
biciclo[2.1.1]hexilo, biciclo[2.2.1]heptilo, biciclo[2.2.2]octilo, biciclo[3.2.1]octilo, biciclo[4.3.1]decilo, biciclo[3.3.1 ]nonilo, bornilo, bornenilo, norbornilo, norbornenilo, 6,6-dimetilbiciclo[3.1.1]heptilo, triciclobutilo, adamantilo;
azanorbornilo, quinuclidinilo, isoquinuclidinilo, tropanilo, azabiciclo[2.2.1]heptanilo, 2-azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.2]nonanilo, azabiciclo[3.3.0]nonanilo, azabiciclo[3.3.1]nonanilo, diazabiciclo[2.2.1]heptanilo, diazabiciclo[3.2.1]octanilo, octahidropirrolo[3,4-b]pirrolilo u octahidropirrolo[3,4-c]pirrolilo.4
4. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Cy es ciclohexilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperidinilo, piperazinilo, hexahidropiridazinilo, hexahidropirimidinilo, valerolactamilo, dihidropiranilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidrotiopiranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo o tetrahidrotiopiranilo.
5. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, representado por la siguiente fórmula estructural:
Figure imgf000128_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
X7 es NH u O;
R4 es alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C3-C6) o un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico,
en donde el alquilo (C1-C4) representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, N3 , ORa, NRaRa, cicloalquilo (C3-C6), fenilo, un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico y un anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico, en donde el cicloalquilo (C3-C6) o el anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico representado por R4 o el cicloalquilo (C3-C6) o el anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, ORa, =O y CH3,
en donde el fenilo en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, CH3 , halometilo, halometoxi, ORa y N3 ;
en donde el anillo heteroaromático en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno y CH3.
6. El compuesto de la reivindicación 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde
X7 es NH u O;
R3 es alquilo (C1-C5); y
R4 es alquilo (C1-C4) en donde el alquilo (C1-C4) representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más de halógeno, ORa, NRaRa, cicloalquilo (C3-C6), fenilo (opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno, CH3 , halometilo, halometoxi, ORa o N3), anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros (opcionalmente sustituido con =O, halógeno o CH3), o anillo heteroaromático monocíclico de 5-6 miembros (opcionalmente sustituido con halógeno o CH3).
7. El compuesto una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-6, en donde el compuesto se selecciona de las siguientes fórmulas estructurales:
Figure imgf000128_0002
Figure imgf000129_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
8. El compuesto una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-6, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Cy es azetidinilo o pirrolidinilo, y el átomo de nitrógeno del anillo está conectado con el anillo de tiazol, o en donde Cy es 1,7-diazaespiro[4.4]nonilo, 2,7-diazaespiro[4.4]nonilo, 2,7-diazaespiro[3.5]nonilo,1,4-diazepanilo, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanilo, 3,8-diazabiciclo[3.2.1]octanilo, octahidropirrolo[3,4-b]pirrolilo u octahidropirrolo[3,4-c]pirrolilo, y los dos átomos de nitrógeno del anillo están conectados con el anillo de tiazol y el resto -X5C(O)X6R3, respectivamente.
9. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 5 y 7-8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
(i) R4 es -alquilo (C1-C3), cicloalquilo (C3-C6) o un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico, en donde el -alquilo (C1-C3) está sustituido opcionalmente con (i) fenilo opcionalmente sustituido con uno o más halógeno o -CH3 ; (ii) un anillo heteroaromático de 5-6 miembros monocíclico opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno o -CH3 ; o (iii) un anillo heterocíclico de 3-7 miembros monocíclico opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno y -CH3, o
(ii) R4 es -alquilo (C1-C3), -CHRa-fenilo, -CHRa-anillo heteroaromático de 5-6 miembros o -CHRa-anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros, en donde el fenilo, el anillo heteroaromático de 5-6 miembros o el anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros en el grupo representado por R4 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno y -CH3.
10. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 5-8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es -alquilo (C1-C3), opcionalmente sustituido con (i) fenilo opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, -ORa o -N3 ; (ii) un anillo heteroaromático monocíclico de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con uno o más de halógeno o -CH3 ; o (iii) un anillo heterocíclico monocíclico de 3-7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más de =O -CH3 ;
preferentemente en donde R4 es (i) -alquilo (C1-C3); (ii) -CH2-fenilo opcionalmente sustituido con halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, -ORa o -N3 ; (iii) -CH(CH3)-fenilo opcionalmente sustituido con halógeno, -CH3 , halometilo, halometoxi, -ORa o -N3 ; (iv) -CH2-anillo heteroaromático de 5-6 miembros opcionalmente sustituido con halógeno o -CH3 ; o (v) -CH2-anillo heterocíclico monocíclico de 3-7-miembros opcionalmente sustituido con =O -CH3.
11. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1,3-5 y 7-10, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es alquilo (C1-C4), cicloalquilo (C4 -C6), -CH2-fenilo, -CH2-anillo heterocíclico monocíclico de 4-6 miembros, o anillo heterocíclico monocíclico de 4-6 miembros, en donde el fenilo o el anillo heterocíclico monocíclico de 4-6 miembros representado por R3 o en el grupo representado por R3 está sustituido opcionalmente con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halógeno, ORa y CH3.
12. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-7 y 9-11, representado por la siguiente fórmula estructural:
Figure imgf000129_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;
preferentemente por la fórmula:
Figure imgf000130_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
13. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, y 9-11, representado por la siguiente fórmula estructural:
Figure imgf000130_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;
preferentemente por la fórmula:
Figure imgf000130_0004
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;
o por la fórmula:
Figure imgf000130_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
14. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5 y 7-13, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R3 es isopropilo, terc-butilo, ciclobutilo, ciclopentilo, bencilo, oxetanilo, tetrahidro-2H-piranilo, o
Figure imgf000131_0001
preferentemente en donde R3 es isopropilo u oxetanilo; y preferentemente R3 es isopropilo.
15. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R1 es terc-butilo.
16. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 5-15, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde R4 es
Figure imgf000131_0002
preferentemente en donde:
(i) R4 es
Figure imgf000131_0003
Figure imgf000132_0001
o
(ii) R4 es
Figure imgf000132_0002
preferentemente en donde R4 es
Figure imgf000132_0003
o
(iii) R4 es
Figure imgf000132_0004
; y preferentemente en donde R4 es
Figure imgf000133_0001
17. Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado de:
Figure imgf000133_0002
Figure imgf000134_0001

Figure imgf000135_0001

Figure imgf000136_0001

Figure imgf000137_0001

Figure imgf000138_0001

Figure imgf000139_0001

Figure imgf000140_0001
Figure imgf000141_0001
Figure imgf000142_0001
Figure imgf000143_0001
ı43
Figure imgf000144_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
18. Un compuesto de la reivindicación 1 de la siguiente estructura
Figure imgf000144_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
19. Una composición farmacéutica que comprende un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable y un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-18 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
20. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-18 o una composición según la reivindicación 19 para su uso en el tratamiento de cáncer, enfermedad autoinmunitaria, deficiencia inmunitaria o enfermedad neurodegenerativa;
preferentemente en donde:
(a) el cáncer
(i) se selecciona del grupo que consiste en linfoma, leucemia y una neoplasia de células plasmáticas; preferentemente en donde
el cáncer es un linfoma seleccionado del grupo que consiste en linfoma no Hodgkin, linfoma de Burkitt, linfoma linfocítico pequeño, linfoma linfoplasmacítico, linfoma MALTA, linfoma folicular, linfoma difuso de linfocitos B grandes y linfoma de linfocitos T; o
el cáncer es una leucemia seleccionada del grupo que consiste en leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia de Burkitt, leucemia de linfocitos B, leucemia linfoblástica aguda de linfocitos B, leucemia linfocítica crónica (CLL), leucemia mielógena aguda (AML), leucemia mielógena crónica (CML) y leucemia linfoblástica aguda de linfocitos T (T-ALL); o
el cáncer es neoplasia de células plasmáticas seleccionada del grupo que consiste en mieloma múltiple; mieloma de células plasmáticas; leucemia de células plasmáticas; y plasmacitoma; o
(ii) se selecciona del grupo que consiste en carcinoma y sarcoma; preferentemente en donde el cáncer es carcinoma seleccionado del grupo que consiste en cáncer de colon, cáncer de hígado, cáncer gástrico, cáncer intestinal, cáncer de esófago, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de pulmón y cáncer de tiroides; o
(iii) se selecciona del grupo que consiste en cáncer de colon, cáncer endometrial, cáncer de estómago, cáncer pancreático, cáncer de riñón/uréter, cáncer de la vía hepatobiliar, cáncer gástrico, cáncer de próstata, cáncer de ovario, cáncer del conducto cístico, cáncer cerebral, cáncer del intestino delgado, cáncer de mama y cáncer de piel; o
(iv) caracterizado por mutaciones en el homólogo 6 de mutS (MSH6); o
(b) la enfermedad autoinmunitaria se selecciona del grupo que consiste en lupus eritematoso, síndrome de Wiskott-Aldrich, síndrome linfoproliferativo autoinmunitario, miastenia grave, artritis reumatoide (RA), nefritis lúpica, lupus eritematoso sistémico, lupus discoide, lupus eritematoso cutáneo subagudo, lupus eritematoso cutáneo que incluye lupus eritematoso pernio, artritis crónica, síndrome de Sjogren, rinosinusitis crónica inflamatoria, colitis, celiaquía, enfermedad inflamatoria del intestino, esófago de Barrett, gastritis inflamatoria, nefritis autoinmunitaria, vasculitis autoinmunitaria, hepatitis autoinmunitaria, carditis autoinmunitaria, encefalitis autoinmunitaria, diabetes autoinmunitaria, nefritis por diabetes autoinmunitaria, psoriasis, enfermedad injerto contra huésped (GvHD) y enfermedad hematológica autoinmunitaria; o
(c) la deficiencia inmunitaria se selecciona del grupo que consiste en síndrome proliferativo autoinmunitario (ALPS), síndrome poliglandular autoinmunitario de tipo 1 (APS-1), enfermedad BENTA, estado de deficiencia de caspasa ocho (CEDS), enfermedad granulomatosa crónica (CGD), inmunodeficiencia variable común (CVID), síndromes de neutropenia congénita, deficiencia de CTLA4, deficiencia de DOCK8, deficiencia de GATA2, trastornos de la glucosilación con inmunodeficiencia, síndrome de hiper-inmunoglobulina E (HIES), síndromes de hiper-inmunoglobulina M (hiper-IgM), deficiencia de adhesión leucocitaria (LAD), deficiencia de LRBA, enfermedad de cinasas PI3, deficiencia de anticuerpos asociada a PLCG2 y desregulación inmunitaria (PLAID), inmunodeficiencia combinada grave (SCID), enfermedad de pérdida de función de STAT3, verrugas, hipogammaglobulinemia, infecciones y síndrome de mielocatexis (WHIMS), agammaglobulinemia asociada al X (XLA), enfermedad linfoproliferativa asociada al X (XLP) y enfermedad de XMEN; o
(d) el trastorno neurodegenerativo se selecciona del grupo que consiste en esclerosis múltiple, enfermedad de Parkinson (PD), enfermedad de Alzheimer (AD), atrofia dentato-rubro-pálido-luisiana (DRPLA), enfermedad de Huntington (HD), ataxia espinocerebelosa de tipo 1 (SCA1), ataxia espinocerebelosa de tipo 2 (SCA2), ataxia espinocerebelosa de tipo 3 (SCA3), ataxia espinocerebelosa 6 (SCA6), ataxia espinocerebelosa de tipo 7 (SCA7), ataxia espinocerebelosa de tipo 8 (SCA8), ataxia espinocerebelosa de tipo 12 (SCA12), ataxia espinocerebelosa de tipo 17 (SCA17), atrofia muscular espinobulbar/enfermedad de Kennedy (SBMA), síndrome de X frágil (FRAXA), retraso mental de XE frágil (FRAXE) y distrofia miotónica (DM).
21. El compuesto o composición para el uso de la reivindicación 20, en donde se coadministra una cantidad eficaz de un inhibidor de la reparación de ADN, un inhibidor de la respuesta al daño de ADN (DDR), un agente que daña el ADN o un agente inmunomodulador;
preferentemente en donde el agente que daña el ADN se selecciona del grupo que consiste en: exposición a un producto químico que daña el ADN, exposición a un agente quimioterapéutico, exposición a una radioquimioterapia y exposición a radiación ionizante o ultravioleta; o en donde el agente inmunomodulador se selecciona del grupo que consiste en moduladores del punto de control inmunitario, agonistas de receptores del tipo toll (TLR), terapias basadas en células, citocinas y vacunas para el cáncer.
22. El compuesto o composición para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 20-21, en donde
(a) se determina que el sujeto tiene un aumento del nivel y/o la actividad de un proceso de daño de ADN o enzima editora de ADN; preferentemente en donde la enzima editora de ADN se selecciona del grupo que consiste en citidina desaminasa inducida por activación (AID o AICDA), APOBEC2, APOBEC3A, APOBEC3C, APOBEC3D, APOBEC3F, APOBEC3G, APOBEC3H, APOBEC4, una apoisomerasa de tipo 1, una apoisomerasa de tipo 2, gen 1 de activación de la recombinación (RAG 1) y gen 2 de activación de la recombinación (RAG2); o
(b) se ha determinado que los glóbulos sanguíneos obtenidos del sujeto tienen un nivel detectable de citidina desaminasa inducida por activación (AID), o
(c) se ha determinado que los linfocitos B obtenidos del sujeto tienen un nivel detectable de citidina desaminasa inducida por activación (AID);
preferentemente en donde el nivel detectable de citidina desaminasa inducida por activación (AID) es estadísticamente significativamente superior al nivel de AID expresada en linfocitos B no activados o células no inmunitarias normales de un sujeto sano.
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