ES2914284T3 - Derivados de piperidina como inhibidores de la proteasa específica de la ubiquitina 7 - Google Patents

Derivados de piperidina como inhibidores de la proteasa específica de la ubiquitina 7 Download PDF

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Abstract

Un compuesto de la fórmula (I): **(Ver fórmula)** incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, estereoisómero o N-óxido derivado del mismo, en el que: R1 es H, OH o un grupo alquilo opcionalmente sustituido; R2 es un grupo alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilcicloalquilo C4-C6 opcionalmente sustituido, arilo C4-C6 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C6 opcionalmente sustituido, ariloxi C4-C8 opcionalmente sustituido, arilalquilo C7-C10 opcionalmente sustituido o heteroarilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido; y Q está representado por la fórmula (II): **(Ver fórmula)** en la que: R5a es H, halo, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o amino opcionalmente sustituido; R5b es H, halo, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, bencilo, heteroarilo C3-C6 opcionalmente monosustituido, heterocicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, NR'R", o RaNR'R", en la que Ra es alquilo C1-C6 o alquenilo C2-C6; y en la que R' y R" se seleccionan cada uno independientemente de H, alquilo C1-C6 sustituido con oxo, alquilo C1-C6 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilamina C1-C7 opcionalmente sustituida, alquenilamina C2-C7 opcionalmente sustituida, heterocicloalquilo C3-C10 opcionalmente sustituido, arilo C4-C10 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C10 opcionalmente sustituido, alquilarilo C5-C10 opcionalmente sustituido, alquilheterocicloalquilo C4-C10 opcionalmente sustituido y alquilheteroarilo C4-C6, o la que R' y R" juntos forman un heterocicloalquilo C3-C8 opcionalmente sustituido que incluye el N al que están unidos, en la que para cualquiera de los grupos funcionales para los que uno o más sustituyentes son opcionales, los sustituyentes opcionales se seleccionan independientemente de OH, F, Cl, Br, I, CN, alquilo C1-C6, CF3, CHF2, CHF2, CH2F, CH2OH, COOH, C(O)CH3, CH2NHC(O)OCH2CH3, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, alcoxi C1-C6, amino, alquilamina C1-C6, arilo C5-C6, heteroarilo C3-C6, bencilo, oxo y amida.

Description

DESCRIPCIÓN
Derivados de piperidina como inhibidores de la proteasa específica de la ubiquitina 7
Antecedentes de la invención
En las últimas tres décadas, la ubiquitinación de proteínas se ha convertido en una importante modificación postraslacional con funciones en una plétora de procesos celulares que incluyen: proteólisis, expresión génica, reparación del ADN, respuesta inmunitaria, metabolismo y regulación del ciclo celular. La desregulación del sistema de proteasoma de ubiquitina (UPS) también se ha implicado en la patogenia de múltiples enfermedades humanas que incluyen (pero no se limitan a): cáncer (Hoeller y col., Nat. Rev. Cáncer (2006), 6 , 776-788), infección viral (Gao y col., Can. J. Physiol. Farmacol. (2006), 84, 5-14), trastornos metabólicos o neurodegenerativos (Loosdregt et al., Inmunidad (2013), 39, 259-271; Rubinsztein et al., Naturaleza (2006), 443, 780-786), así como afecciones médicas relacionadas con el sistema inmunitario e inflamatorio (Wang y col., Cell Mol. Immunol. (2006), 3, 255-261; Corn J. et al., Nat. Struct. Mol. Biol. (2014), 21, 297-300; Nicholson y col., Cell Biochem. Biophys. (2011), 60, 61-68).
La aprobación y el éxito clínico de los inhibidores del proteasoma Velcade® (bortezomib) y kyprolis® (carfilzomib) para el tratamiento del linfoma de células del manto y el mieloma múltiple (MM) han validado la UPS como un objetivo de cáncer susceptible de intervención farmacológica. Aunque es eficaz, su utilidad clínica se ha visto gravemente limitada debido a problemas de selectividad y toxicidad aguda. Al inhibir la subunidad 26S del proteasoma, los inhibidores del proteasoma actualmente disponibles alteran indiscriminadamente la proteólisis tanto en células cancerosas como normales y, por lo tanto, se caracterizan por un índice terapéutico bajo. Para eludir este problema, un enfoque alternativo prometedor consiste en apuntar al UPS corriente arriba del proteasoma. Interferir con la maquinaria de conjugación/desconjugación de ubiquitina (Ub), por ejemplo, al nivel de la proteasa específica de ubiquitina (USP), debería permitir el desarrollo de tratamientos mejorados con especificidad mejorada y perfiles de toxicidad reducidos.
Las USP son la subfamilia más grande de enzimas desubiquitinantes (DUB) con más de 60 miembros de la familia informados hasta la fecha (Komander y col., Nat. Rev Mol. Cell Biol. (2009), 10, 550-563; Clague et al., Physiol. Rev. (2013), 93, 1289-1315). Las USP son cisteína proteasas que catalizan la eliminación de Ub de sustratos objetivo específicos, evitando así su degradación inducida por el proteasoma, o regulando su activación y/o localización subcelular (Colland et al., Biochimie (2008), 90, 270-283; Nicholson et al., Cell Biochem. Biophys. (2011), 60, 61-68). Ahora está bien establecido que las USP regulan la estabilidad y la activación de numerosas proteínas involucradas en la patogénesis de enfermedades humanas, incluyendo los oncogenes y los supresores de tumores. Como tal, las USP representan una clase objetivo emergente y atractiva para la intervención farmacológica.
Entre todas las USP, la proteasa 7 específica de ubiquitina (USP7, también conocida como proteasa específica de ubiquitina asociada al herpes HAUSP) ha atraído una atención considerable debido a las implicaciones en múltiples vías oncogénicas (Nicholson et al., Cell Biochem. Biophys. (2011), 60, 61-68). USP7 juega un papel clave en la regulación de la ubiquitinación y la estabilidad de la E3 ligasa MDM2 (y el homólogo humano MDM4) que a su vez promueve la degradación proteosomal del supresor tumoral p53 (Cummins, et al., Cell Cycle (2004), 3, 689-692; Cummins, et al. Nature (2004), 428, 486). La inhibición de USP7 revierte este proceso, restaura los niveles de p53 y, en última instancia, produce efectos antiproliferativos tanto in vitro como en vivo (Cheng et al., Cell Death and Disease (2013), 4, e867; Reverdy et al., Chem. Biol. (2012), 19, 467-477; Colland et al., Mol. Cáncer Ther. (2009), 8 , 2286­ 2295; Chauhan et al., Cancer Cell (2012), 22, 345-358). Además de MDM2, también se ha demostrado que USP7 media la monodesubiquitinación del supresor tumoral PTEN y el factor de transcripción FOXO4, lo que conduce a su exclusión nuclear y su respectiva inactivación (Song et al., Nature (2008), 455, 813-817; van der Horst et al., Nat. Cell Biol. (2006), 8 , 1064-1073). Los sustratos adicionales informados de u Sp7 incluyen (pero no se limitan a): TSPYL5 (Epping et al. Nat. Biol celular. (2011), 13, 102-108), el supresor de tumores p16 (Maertens et al., EMBO J. (2010), 29, 2553-2565), así como diversas proteínas implicadas tanto en la integridad genómica como en la maquinaria de daño del ADN tal como: claspin, Tip60, UHRF1 o DNMT1 (Faustrup y col., J. Cell Biol. (2009), 184, 13-19; Dar et al., Mol Cell Biol. (2013), 33, 3309-3320; Qin et al., J. Cell Biochem. (2011), 112, 439-444; Du et al., Sci. Signal. (2010), 3, ra80; Nicholson et al., Cell Biochem. Biophys. (2011), 60, 61-68; Jackson et al., Nature Cell Biol. (2014), 16, 1016­ 1026). Finalmente, se ha informado la sobreexpresión de USP7 en múltiples cánceres, incluyendo: cáncer de próstata, otras neoplasias malignas hematológicas tales como mieloma múltiple, neuroblastomas y glioblastomas (Song, et al., Nature (2008), 455, 813-817; Cheng et al., Cell Death and Disease (2013), 4, e867; Chauhan et al., Cancer Cell (2012), 22, 345-358; Cheng et al., Oncology Reports (2013), 29, 1730-1736). La sobreexpresión generalmente se correlaciona con la agresividad del tumor y la supervivencia deficiente. Por lo tanto, la inhibición de USP7 puede tener amplias aplicaciones anticancerígenas con el uso potencial de inhibidores de molécula pequeña en modalidades de tratamiento mono y/o combinado. Los inhibidores de USP7 pueden ser particularmente útiles en trastornos provocados por la sobreexpresión de USP7 y/o en trastornos provocados por contextos genéticos (por ejemplo, mutación, variación del número de copias) o epigenéticos.
Además del cáncer, se ha demostrado que USP7 desubiquitina y suprime la actividad transcripcional de FOXO1, lo que conduce a la supresión de la gluconeogénesis en cultivos de células de hepatocitos y estudios en animales (Hall et al., Mol. Endrocrinol. (2014), 28, 912-924). La participación de USP7 en el metabolismo de la glucosa puede proporcionar una estrategia para la intervención clínica en la diabetes, así como en el tratamiento de otros trastornos metabólicos, incluyendo la obesidad. Además, las conexiones e interacciones de USP7 con proteínas virales, incluyendo, por ejemplo, la proteína EBNA1 de Epstein-Bar o la proteína ICPO/VMW110 de los virus herpes simplex tipo 1 (Holowaty et al., J. Biol. Chem. (2003), 278, 29987-29994; Everett et al. J. Virol. (1999), 73, 417-426), sugieren fuertemente que los inhibidores de USP7 también pueden ser beneficiosos en el tratamiento de infecciones virales. Finalmente, la participación de USP7 en la función de las células T reguladoras (Treg) demostrada in vitro e in vivo a través de la modulación de la estabilidad del factor de transcripción FOXP3 (van Loosdregt et al., Immunity (2013), 39, 259-271), puede abrir nuevas vías terapéuticas para los trastornos caracterizados por respuestas inmunitarias inapropiadas.
Las conexiones establecidas y crecientes entre USP7 y numerosas proteínas involucradas en enfermedades humanas indican que los inhibidores de molécula pequeña de USP7 pueden tener amplias aplicaciones terapéuticas beneficiosas para la salud humana. Se han informado inhibidores de USP7 de molécula pequeña en las siguientes solicitudes de patente: US 2008/0103149 A1, WO 2010/114881 A1, WO 2010/081783 A1, WO 2011/086178 A1, WO 2013/030218 A1, EP 2565186 A1, EP 1749822 A1, WO 2016/109515 A1, WO 2016/109480 A1, WO 2016/126929 A1, WO 2016/126926 A1, WO 2016/126935 A1, WO 2016/150800 A1, WO2017/158381, yWO2017/158388.
El documento US 2011/0124626 A1 se relaciona con los derivados de benzazepina y su uso como antagonistas de Histamina H3.
El documento US 2013/0090341 A1 se relaciona con un compuesto heterocíclico que puede tener una acción inhibidora del colesterol 24-hidroxilasa, y con una composición farmacéutica que comprende el mismo.
El documento WO 2014045101 A1 se relaciona con inhibidores de tanquirasa, que incluyen sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, que pueden modular la actividad de la proteína tanquirasa para modular actividades celulares tales como la transducción de señales, la proliferación y la secreción de citoquinas.
El documento US 2014/0288081 A1 se relaciona con compuestos que pueden activar el piruvato quinasa y sales, solvatos e hidratos farmacéuticamente aceptables de los mismos, por ejemplo, compuestos que pueden activar PKR y/o PKM2.
El documento US2016184318 A1 se relaciona con inhibidores de autotaxina, procesos para su preparación, composiciones farmacéuticas y medicamentos que los contienen, que pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades y trastornos mediados por autotaxina.
El documento US 2016/0229833 A1 se relaciona con inhibidores de quinazolinona y azaquinazolinona de la proteasa 7 específica de ubiquitina que pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con las enzimas USP7.
El documento US 2016/0229864 A1 se relaciona con inhibidores de tienopirimidinona de la proteasa 7 específica de ubiquitina que pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con las enzimas USP7.
El documento US 2014/0371247 A1 se relaciona con inhibidores selectivos y reversibles de proteasas específicas de ubiquitina, su proceso de preparación y su uso terapéutico.
El documento US 2016/0229872 A1 se relaciona con inhibidores de isotiazolopirimidinona, pirazolopirimidinona y pirrolopirimidinona de USP7 que pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con las enzimas USP7.
El documento US 2016/0185785 A1 se relaciona con inhibidores de pirrolo y pirazolopirimidina de USP7 que pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con las enzimas USP7.
El documento WO 2018/020242 A1 se relaciona con inhibidores de la proteasa 19 específica de ubiquitina (USP19) y métodos de uso de los mismos.
Resumen de la invención
Se ha asociado USP7 con una serie de enfermedades y afecciones que incluyen (pero no se limitan a) cáncer y afecciones neoplásicas, diabetes e infecciones virales. Por ejemplo, cáncer de próstata, neoplasias malignas hematológicas (por ejemplo, linfoma de células del manto, mieloma múltiple), neuroblastomas y glioblastomas se han asociado con USP7.
Los compuestos descritos en el presente documento pueden inhibir selectivamente la actividad de USP7. Por lo tanto, los compuestos proporcionados en el presente documento pueden ser adecuados para el tratamiento y la prevención de cáncer y afecciones neoplásicas tales como cáncer de próstata, neoplasias malignas hematológicas (por ejemplo, linfoma de células del manto, mieloma múltiple), neuroblastomas y glioblastomas. Los compuestos pueden usarse como monoterapia o como terapia de combinación con radiación y/o agentes terapéuticos adicionales.
Por lo tanto, en un primer aspecto se proporciona un compuesto de la fórmula (I):
Figure imgf000004_0001
incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, estereoisómero o N-óxido derivado del mismo, en el que:
R1 es H, OH o un grupo alquilo opcionalmente sustituido;
R2 es un grupo alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilcicloalquilo C4-C6 opcionalmente sustituido, arilo C4-C6 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C6 opcionalmente sustituido, ariloxi C4-C8 opcionalmente sustituido, arilalquilo C7-C10 opcionalmente sustituido o heteroarilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido; y
Q está representado por la fórmula (II):
Figure imgf000004_0002
en la que:
R5a es H, halo, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o amino opcionalmente sustituido;
R5b es H, halo, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, bencilo, heteroarilo C3-C6 opcionalmente monosustituido, heterocicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, NR'R", o RaNR'R",
en la Ra es alquilo C1-C6 o alquenilo C2-C6; y
en la que R' y R" se seleccionan cada uno independientemente de H, alquilo C1-C6 sustituido con oxo, alquilo C1-C6 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilamina C1-C7 opcionalmente sustituida, alquenilamina C2-C7 opcionalmente sustituida, heterocicloalquilo C3-C10 opcionalmente sustituido, arilo C4-C10 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C10 opcionalmente sustituido, alquilarilo C5-C10 opcionalmente sustituido, alquilheterocicloalquilo C4-C10 opcionalmente sustituido y alquilheteroarilo C4-C6, o en la que R' y R" juntos forman un heterocicloalquilo C3-C8 opcionalmente sustituido que incluye el N al que están unidos, en la que para cualquiera de los grupos funcionales para los que uno o más sustituyentes son opcionales, los sustituyentes opcionales se seleccionan independientemente de OH, F, Cl, Br, I, CN, alquilo C1-C6, CF3 , CHF2 , CH2F, CH2OH, COOH, C(O)CHa, CH2 NHC(O)OCH2CHa, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, alcoxi C1-C6, amino, alquilamina C1-C6, arilo C5-C6, heteroarilo C3-C6, bencilo, oxo y amida.
En un segundo aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula (I) o una de las sales farmacéuticamente aceptables del mismo de acuerdo con el primer aspecto y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
En un tercer aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) de acuerdo con el primer aspecto o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula (I), de acuerdo con el segundo aspecto, para uso en terapia.
En un cuarto aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula (I) para su uso en un método para tratar o prevenir el cáncer, comprendiendo el método administrar dicho compuesto o composición farmacéutica a un sujeto.
También se describe en el presente documento el uso de un compuesto de acuerdo con la fórmula (I) en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir el cáncer.
Los compuestos de acuerdo con la invención son como se definen en las reivindicaciones y las realizaciones de los mismos aparecen a lo largo de la memoria descriptiva y los ejemplos. Compuestos particularmente preferidos de acuerdo con las reivindicaciones son aquellos compuestos mencionados que tienen una mayor actividad según se prueba. Los compuestos de acuerdo con las reivindicaciones que tienen mayor actividad son más preferidos que los que tienen menor actividad.
Cada aspecto o realización como se define en el presente documento puede combinarse con cualquier otro aspecto o realización a menos que se indique claramente lo contrario. En particular, cualquier característica indicada como preferida o ventajosa puede combinarse con cualquier otra característica o características indicadas como preferida o ventajosa.
Figuras
Figura 1: Ensayo de compromiso objetivo representativo con el Ejemplo 29. Las células HCT116 se trataron con vehículo (DMSO) o compuesto (como se indica en j M) durante 2 h y posteriormente se lisaron en hielo y se homogeneizaron. A continuación, se añadió la sonda Ub-VS al lisado celular y se incubó en hielo durante 10 min. Las muestras se analizaron mediante sondeo de transferencia Western para USP7. Los signos y - representan la presencia o ausencia de Ub-VS.
Figura 2: (A) Efectos del Ejemplo 29 sobre los niveles de proteína p53, p21 y MDM2 en HCT116. Las células HCT116 se trataron con vehículo (DMSo ) o el Ejemplo 29 (como se indica) durante 24 h, se lisaron en amortiguador RIPA y las muestras se analizaron posteriormente mediante sondeo de transferencia Western para USP7, p53, p21 y MDM2 (como se indica). Se observó una estabilización de p53 dependiente de la dosis, inducción de p21 y disminución concomitante en los niveles de MDM2. (B) Efectos del Ejemplo 29 sobre los niveles de proteína p53, p21 y MDM2 en SJSA-1. Esta línea celular de osteosarcoma con una vía p53 funcional conocida se utilizó como segundo modelo para estos experimentos. Las células se trataron como se describe anteriormente y las muestras se analizaron mediante transferencia Western como se indica. Se hicieron observaciones similares con la estabilización de p53, la inducción de p21 y los niveles reducidos de MDM2 de una manera dependiente de la concentración.
Figura 3: (A) Perfil de selectividad bioquímica de DUB del Ejemplo 29. Se evaluó in vitro la selectividad frente a un panel de 38 DUB (DUBprofilerMR, Ubiquigente, Dundee). Se realizó el cribado a una concentración fija de 100 j M y los niveles de actividad se determinaron y representaron como un histograma. (B) Experimentos de selectividad DUB global celular representativos del Ejemplo 29 evaluados mediante inmunotransferencia. Se trataron las células HCT116 con vehículo (DMSO) o compuesto (como se indica, en j M) durante 2 horas y posteriormente se lisaron en hielo y se homogeneizaron. A continuación, se añadió la sonda HA-UbVS al lisado celular y se incubó en hielo durante 10 min. Se analizaron las muestras mediante sondeo de transferencia Western para HA. Los signos y - representan la presencia o ausencia de Ub-VS. La flecha roja indica HA-UbVS USP7 etiquetado. (C) Experimentos de selectividad representativos del Ejemplo 29 evaluados en varios USP específicos (como se indica). Los experimentos se realizaron como se describió anteriormente en la Figura 3B utilizando Ub-VS y sondeando las muestras para USP4, USP47, USP11 y USP30. Las concentraciones de compuestos se muestran en j M (como se indica). Como el DUB relacionado más cercano con USP7, se utilizó USP47 como una prueba estricta de selectividad. Se utilizaron USP4, USP11 y USP30 como miembros representativos generales, no familiares de la familia DUB. Los signos y - representan la presencia o ausencia de Ub-VS.
Figura 4: Ensayo clonogénico representativo con el Ejemplo 29. Se trataron las células HCT116 con el compuesto del Ejemplo 29 en placas de 6 pocillos. Las colonias se fijaron y calificaron después de 7 días y las fracciones supervivientes se determinaron y representaron frente a la concentración del compuesto.
Descripción detallada
A menos que se defina de otro modo en el presente documento, los términos científicos y técnicos utilizados en relación con la presente invención tendrán los significados que entienden comúnmente los expertos en la técnica. El significado y el alcance de los términos deben ser claros, sin embargo, en caso de cualquier ambigüedad latente, las definiciones proporcionadas en el presente documento prevalecerán sobre cualquier diccionario o definición extrínseca.
Tal como se utilizan en la memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas, a menos que se especifique lo contrario, los siguientes términos tienen el significado que se indica:
El término "grupo alquilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente de hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que normalmente contiene 1 a 15 átomos de carbono, tal como 1 a 10, 1 a 8, 1 a 6, o 1 a 4 átomos de carbono. Un grupo "alquilo Cn" se refiere a un grupo alifático que contiene n átomos de carbono. Por ejemplo, un grupo alquilo C1-C10 contiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono. La unión al grupo alquilo se produce a través de un átomo de carbono. Los ejemplos de tales sustituyentes incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, tert-butilo, pentilo (ramificado o sin ramificar), hexilo (ramificado o sin ramificar), heptilo (ramificado o sin ramificar), octilo (ramificado o sin ramificar), nonilo (ramificado o sin ramificar) y decilo (ramificado o sin ramificar).
El término "grupo alquenilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente de hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene uno o más dobles enlaces y típicamente 2 a 15 átomos de carbono; tales como 2 a 10, 2 a 8, 2 a 6 o 2 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen etenilo (vinilo), 1-propenilo, 3-propenilo, 1,4-pentadienilo, 1,4-butadienilo, 1 -butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, pentenilo y hexenilo.
El término "grupo alquinilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente de hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene uno o más enlaces triples y típicamente 2 a 15 átomos de carbono; tales como 2 a 10, 2 a 8, 2 a 6 o 2 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen etinilo, 1 -propinilo, 3-propinilo, 1 -butinilo, 3-butinilo y 4-butinilo.
El término "grupo carbociclilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente de hidrocarburo cíclico saturado (es decir, "cicloalquilo"), cíclico parcialmente saturado (es decir, "cicloalquenilo") o completamente insaturado (es decir, "arilo") que contiene de 3 a 14 átomos de carbono en el anillo ("átomos del anillo" son los átomos unidos para formar el anillo o anillos de un sustituyente cíclico). Un carbociclilo puede ser una estructura de anillo único (monocíclico) o de anillo policíclico.
El término "grupo heteroalquilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente hidrocarbilo saturado de cadena lineal o ramificada que normalmente contiene 1 a 15 átomos, tal como 1 a 10, 1 a 8, 1 a 6, o 1 a 4 átomos, en el que al menos uno de los átomos es un heteroátomo (es decir, oxígeno, nitrógeno o azufre), siendo los átomos restantes átomos de carbono, por ejemplo, un grupo alquilo que contiene un enlace éter. Un grupo "heteroalquilo Cn" se refiere a un grupo alifático que contiene n átomos de carbono y uno o más heteroátomos, por ejemplo, un heteroátomo. Por ejemplo, un grupo heteroalquilo C1-C10 contiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono además de uno o más heteroátomos, por ejemplo, un heteroátomo. La unión al grupo heteroalquilo ocurre a través de un átomo de carbono o a través de un heteroátomo.
El término "grupo heteroalquenilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente de hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene uno o más dobles enlaces carbono-carbono y normalmente de 2 a 15 átomos; tales como 2 a 10, 2 a 8, 2 a 6 o 2 a 4 átomos, en el que al menos uno de los átomos es un heteroátomo (es decir, oxígeno, nitrógeno o azufre), siendo los átomos restantes átomos de carbono. Un grupo "heteroalquenilo Cn" se refiere a un grupo alifático que contiene n átomos de carbono y uno o más heteroátomos, por ejemplo, un heteroátomo. Por ejemplo, un grupo heteroalquenilo C2-C10 contiene 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono además de uno o más heteroátomos, por ejemplo, un heteroátomo. La unión al grupo heteroalquenilo ocurre a través de un átomo de carbono o a través de un heteroátomo.
El término "grupo heteroalquinilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente de hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene uno o más enlaces triples carbono-carbono y típicamente de 2 a 15 átomos de carbono; tales como 2 a 10, 2 a 8, 2 a 6 o 2 a 4 átomos de carbono, en el que al menos uno de los átomos es un heteroátomo (es decir, oxígeno, nitrógeno o azufre), siendo los átomos restantes átomos de carbono. Un grupo "heteroalquinilo Cn" se refiere a un grupo alifático que contiene n átomos de carbono y uno o más heteroátomos, por ejemplo, un heteroátomo. Por ejemplo, un heteroalquinilo C2-C10 contiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono además de uno o más heteroátomos, por ejemplo, un heteroátomo. La unión al grupo heteroalquinilo ocurre a través de un átomo de carbono o a través de un heteroátomo.
Un carbociclilo puede ser una estructura de un solo anillo, que típicamente contiene de 3 a 8 átomos en el anillo, más típicamente de 3 a 7 átomos en el anillo y más típicamente de 5 a 6 átomos en el anillo. Los ejemplos de tales carbociclilos de un solo anillo incluyen ciclopropilo (ciclopropanilo), ciclobutilo (ciclobutanilo), ciclopentilo (ciclopentanilo), ciclopentenilo, ciclopentadienilo, ciclohexilo (ciclohexanilo), ciclohexenilo, ciclohexadienilo y fenilo. Como alternativa, un carbociclilo puede ser policíclico (es decir, puede contener más de un anillo). Los ejemplos de carbociclilos policíclicos incluyen carbociclilos con puente, fusionados y espirocíclicos. En un carbociclilo espirocíclico, un átomo es común a dos anillos diferentes. Un ejemplo de carbociclilo espirocíclico es espiropentanilo. En un carbociclilo con puente, los anillos comparten al menos dos átomos comunes no adyacentes. Los ejemplos de carbociclilos con puente incluyen biciclo[2.2.1]heptanilo, biciclo[2.2.1]hept-2-enilo y adamantanilo. En un sistema de carbociclilo de anillos fusionados, dos o más anillos pueden fusionarse, de modo que dos anillos comparten un enlace común. Los ejemplos de carbociclilos de dos o tres anillos fusionados incluyen naftalenilo, tetrahidronaftalenilo (tetralinilo), indenilo, indanilo (dihidroindenilo), antracenilo, fenantrenilo y decalinilo.
El término "grupo cicloalquilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un sustituyente de hidrocarburo cíclico saturado que contiene 3 a 14 átomos de carbono en el anillo. Un cicloalquilo puede ser un anillo de un solo carbono, que típicamente contiene de 3 a 8 átomos de carbono en el anillo y más típicamente de 3 a 6 átomos en el anillo. Se entiende que la unión a un grupo cicloalquilo se realiza a través de un átomo del anillo del grupo cicloalquilo. Los ejemplos de cicloalquilos de un solo anillo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. Como alternativa, un cicloalquilo puede ser policíclico o contener más de un anillo. Los cicloalquilos policíclicos incluyen cicloalquilos con puente, fusionados y espirocíclicos.
El término "alquilcidoalquilo" se refiere a un sustituyente cicloalquilo unido a través de una cadena de alquilo. Los ejemplos de un sustituyente alquilcicloalquilo incluyen ciclohexiletano, donde el ciclohexano se une a través de un enlace de etano. Otros ejemplos incluyen ciclopropiletano, ciclobutiletano, ciclopentiletano, cicloheptiletano, ciclohexilmetano. En un alquilcicloalquilo "Cn", Cn incluye los átomos de carbono en la cadena de alquilo y en el anillo de cicloalquilo. Por ejemplo, el ciclohexiletano es un alquilcicloalquilo C8. Para evitar dudas, un grupo alquilcicloalquilo Cn puede estar sustituido con un sustituyente que contiene carbono (por ejemplo, un grupo cicloalquilo). En tales realizaciones, los carbonos del sustituyente no están incluidos dentro de los carbonos "n".
El término "grupo arilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un carbociclilo aromático que contiene 5 a 14 átomos de carbono en el anillo, opcionalmente 5 a 8, 5 a 7, opcionalmente 5 a 6 átomos de carbono en el anillo. Un grupo "arilo Cn" se refiere a un grupo aromático que contiene n átomos de carbono. Por ejemplo, un grupo arilo C3-C10 contiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono. La unión al grupo arilo se produce a través de un átomo de carbono. Un grupo arilo puede ser monocíclico o policíclico (es decir, puede contener más de un anillo). En el caso de anillos aromáticos policíclicos, solo se requiere que un anillo en el sistema policíclico esté insaturado, mientras que los anillos restantes pueden estar saturados, parcialmente saturados o insaturados. La unión al grupo arilo ocurre a través de un átomo de carbono contenido en el anillo. Los ejemplos de grupos arilo incluyen fenilo, naftilo, acridinilo, indenilo, indanilo y tetrahidronaftilo.
El término "arilalquilo" se refiere a un sustituyente arilo unido a través de una cadena de alquilo. Los ejemplos de un sustituyente arilalquilo incluyen feniletano/etilbenceno, donde la cadena de etano se une a un grupo fenilo hasta el punto de unión. En un arilalquilo "Cn", Cn incluye los átomos de carbono en la cadena alquílica y en el grupo arilo. Por ejemplo, el etilbenceno es un arilalquilo C8.
El término "grupo heterociclilo" (solo o en combinación con otros términos) significa una estructura de anillo saturada (es decir, "heterocicloalquilo"), parcialmente saturada (es decir, "heterocicloalquenilo") o completamente insaturada (es decir, "heteroarilo") que contiene un total de 3 a 14 átomos en el anillo, en el que al menos uno de los átomos del anillo es un heteroátomo (es decir, oxígeno, nitrógeno o azufre), siendo los átomos restantes del anillo átomos de carbono. Un grupo heterociclilo puede contener, por ejemplo, uno, dos, tres, cuatro o cinco heteroátomos. La unión al grupo heterociclilo puede ocurrir a través de un átomo de carbono y/o uno o más heteroátomos que están contenidos en el anillo. Un heterociclilo puede ser una estructura de anillo único (monocíclico) o de anillo policíclico.
Un grupo heterociclilo puede ser un solo anillo, que típicamente contiene de 3 a 7 átomos en el anillo, más típicamente de 3 a 6 átomos en el anillo, e incluso más típicamente de 5 a 6 átomos en el anillo. Los ejemplos de heterociclilos de un solo anillo incluyen furanilo, dihidrofuranilo, tetrahidrofuranilo, tiofenilo (tiofuranilo), dihidrotiofenilo, tetrahidrotiofenilo, pirrolilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, pirazolilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, tiazolinilo, isotiazolinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo, tiodiazolilo, oxadiazolilo (incluyendo 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo (furazanilo) o 1,3,4-oxadiazolilo), oxatriazolilo, dioxazolilo, oxatiolilo, piranilo, dihidropiranilo, tiopiranilo, tetrahidrotiopiranilo, piridinilo (azinilo), piperidinilo, diazinilo (incluyendo piridazinilo (1,2-diazinilo), pirimidinilo (1,3-diazinilo) o pirazinilo (1,4-diazinilo)), piperazinilo, triazinilo (incluyendo 1,3,5-triazinilo, 1,2,4-triazinilo y 1,2,3-triazinilo)), oxazinilo (incluyendo 1,2-oxazinilo, 1,3- oxazinil o 1,4-oxazinil)), oxadiazinilo (incluyendo 1,2,3-oxadiazinilo, 1,2,4-oxadiazinilo, 1,4,2-oxadiazinilo o 1,3,5-oxadiazinilo)), morfolinilo, azepinilo, oxepinilo, tiepinilo y diazepinilo.
Como alternativa, un grupo heterociclilo puede ser policíclico (es decir, puede contener más de un anillo). Los ejemplos de grupos heterociclilo policíclicos incluyen grupos heterociclilo con puente, condensados y espirocíclicos. En un grupo heterociclilo espirocíclico, un átomo es común a dos anillos diferentes. En un grupo heterociclilo con puente, los anillos comparten al menos dos átomos comunes no adyacentes. En un grupo heterociclilo de anillos fusionados, dos o más anillos pueden fusionarse, de modo que dos anillos comparten un enlace común. Los ejemplos de grupos heterociclilo de anillos fusionados que contienen dos o tres anillos incluyen indolizinilo, piranopirrolilo, 4H-quinolizinilo, purinilo, naftiridinilo, piridopiridinilo (incluyendo pirido[3,4-6]-piridinilo, pirido[3,2-6]-piridinilo o pirido[4,3-6]-piridinilo) y pteridinilo. Otros ejemplos de grupos heterociclilo de anillos fusionados incluyen grupos heterociclilo fusionados con benzo, tales como indolilo, isoindolilo (isobenzazolilo, pseudoisoindolilo), indoleninilo (pseudoindolilo), isoindazolilo (benzopirazolilo), benzazinilo (incluyendo quinolinilo (1-benzazinilo) o isoquinolinilo (2-benzazinilo)), ftalazinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, benzodiazinilo (incluyendo cinnolinilo (1,2-benzodiazinilo) o quinazolinilo (1,3-benzodiazinilo)), benzopiranilo (incluyendo cromanilo o isocromanilo) y bencisoxazinilo (incluyendo 1,2-bencisoxazinilo o 1,4-bencisoxazinilo).
El término "grupo heterocicloalquilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un heterociclilo saturado. Un grupo "heterocicloalquilo Cn" se refiere a un grupo alifático cíclico que contiene n átomos de carbono además de al menos un heteroátomo, por ejemplo, nitrógeno. Por ejemplo, un grupo heterocicloalquilo C1-C10 contiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono en el anillo además del al menos un heteroátomo. La unión al grupo heterocicloalquilo se produce a través de un átomo de carbono o uno del al menos un heteroátomo.
El término "alquilheterocidoalquilo" se refiere a un sustituyente heterocicloalquilo unido a través de una cadena de alquilo. En un alquilheterocicloalquilo "Cn", Cn incluye los átomos de carbono en la cadena alquílica y en el anillo heterocicloalquilo. Por ejemplo, la etilpiperidina es un alquilheterocicloalquilo C7.
El término "grupo heterociclilo que contiene nitrógeno" se refiere a un grupo heterociclilo monocíclico o bicíclico que contiene al menos un átomo de nitrógeno en el anillo, en el que cada anillo comprende de 3 a 7 átomos en el anillo y contiene opcionalmente, además del átomo de nitrógeno, cero o uno o dos o más heteroátomos iguales o diferentes, pero preferiblemente cero o un heteroátomo adicional seleccionado del grupo que consiste en un átomo de oxígeno, un átomo de nitrógeno y un átomo de azufre; y el grupo heterociclilo puede estar saturado (es decir, "heterocicloalquilo"), parcialmente saturado (es decir, "heterocicloalquenilo") o completamente insaturado (es decir, "heteroarilo"). El grupo heterociclilo bicíclico puede tener una estructura espiro en la que los dos anillos comparten un mismo átomo en el anillo, o puede tener una estructura biciclo en la que los anillos comparten dos o más átomos en el anillo, por ejemplo, anillos enlazados o fusionados. Los ejemplos del grupo heterociclilo que contiene nitrógeno incluyen, por ejemplo, un grupo pirrolilo, un grupo imidazolilo, un grupo pirazolilo, un grupo tiazolilo, un grupo isotiazolilo, un grupo oxazolilo, un grupo isoxazolilo, un grupo triazolilo, un grupo tetrazolilo, un grupo oxadiazolilo, un grupo 1,2,3-tiadiazolilo, un grupo 1,2,4-tiadiazolilo, un grupo 1,3,4-tiadiazolilo, un grupo piridilo, un grupo pirazinilo, un grupo pirimidinilo, un grupo piridazinilo, un grupo 1,2,4-triazinilo, un grupo 1,3,5-triazinilo, un grupo indolilo, un grupo bencimidazolilo, un grupo benzoxazolilo, un grupo benciisoxazolilo, un grupo benzotiazolilo, un grupo bencisotiazolilo, un grupo indazolilo, un grupo purinilo, un grupo quinolilo, un grupo isoquinolilo, un grupo ftalazinilo, un grupo naftiridinilo, un grupo quinoxalinilo, un grupo quinazolinilo, un grupo cinnolinilo, un grupo pteridinilo, un pirido[3,2-6]piridilo, un grupo azetidinilo, un grupo pirrolidinilo, un grupo dihidro-1,2,4-triazolilo, un grupo dihidro-1,2,4-oxadiazolilo, un grupo dihidro-1,3,4-oxadiazolilo, un grupo dihidro -1,2,4-tiadiazolilo, un grupo piperidinilo, un grupo piperazinilo, un grupo dihidropiridilo, un grupo morfolinilo, un grupo tiomorfolinilo, un grupo 2,6-diazaspiro[3.5]nonilo, un grupo 2,7-diazaspiro[3.5 ]nonilo, un grupo 2,7-diazaespiro[4.5]decilo, un grupo 2,7-diazabiciclo[3.3.0]octilo o un grupo 3,6-diazabiciclo[3.3.0]octilo.
El grupo heterociclilo que contiene nitrógeno puede estar opcionalmente sustituido-es decir, puede ser un grupo heterociclilo que contiene nitrógeno no sustituido o un grupo heterociclilo que contiene nitrógeno sustituido. Un grupo heterociclilo que contiene nitrógeno sustituido está sustituido con uno o más sustituyentes que pueden ser iguales o diferentes. Los posibles sustituyentes se exponen a continuación.
El término "grupo heteroarilo" (solo o en combinación con otros términos) significa un heterociclilo aromático que contiene de 5 a 14 átomos en el anillo. Un grupo "Cn heteroarilo" se refiere a un grupo aromático que contiene n átomos de carbono y al menos un heteroátomo. Por ejemplo, un grupo arilo C2-C10 contiene 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono además de al menos un heteroátomo. La unión al grupo heteroarilo ocurre a través de un átomo de carbono o a través de un heteroátomo. Un grupo heteroarilo puede ser monocíclico o policíclico. Un heteroarilo puede ser un solo anillo o 2 o 3 anillos fusionados. Los ejemplos de grupos heteroarilo monocíclicos incluyen anillos de 6 miembros tales como piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo y 1,3,5-, 1,2,4- o 1,2,3-triazinilo; anillos de 5 miembros tales como imidazolilo, furanilo, tiofenilo, pirazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5- o 1,3,4-oxadiazolilo y isotiazolilo. Los grupos heteroarilo policíclicos pueden ser 2 o 3 anillos fusionados. Los ejemplos de grupos heteroarilo policíclicos incluyen grupos de anillos fusionados de 6/5 miembros tales como benzotiofuranilo, bencisoxazolilo, benzoxazolilo y purinilo; y grupos de anillos fusionados de 6/6 miembros tales como benzopiranilo, quinolinilo, isoquinolinilo, cinolinilo, quinazolinilo y benzoxazinilo. En el caso de grupos heteroarilo policíclicos, solo se requiere que un anillo en el sistema policíclico esté insaturado, mientras que los anillos restantes pueden estar saturados, parcialmente saturados o insaturados.
Un grupo heteroarilo que contiene nitrógeno es un grupo heteroarilo en el que al menos uno del uno o más heteroátomos en el anillo es nitrógeno.
El término "heteroarilalquilo" se refiere a un sustituyente heteroarilo unido a través de una cadena de alquilo. Los ejemplos de un sustituyente heteroarilalquilo incluyen etilpiridina, donde la cadena de etano une un grupo piridina al punto de unión.
El término "grupo amino" se refiere al grupo -NR'R". El grupo amino puede estar opcionalmente sustituido. En un grupo amino no sustituido, R' y R" son hidrógeno. En un grupo amino sustituido R' y R" pueden ser cada uno independientemente, pero no se limitan a, hidrógeno, un alquilo, heteroalquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, alquilcicloalquilo, alquilheterocicloalquilo, alcoxi, sulfonilo, alquenilo, alcanoilo, arilo, arilalquilo o un grupo heteroarilo, siempre que R' y R" no sean ambos hidrógeno. En un grupo amino sustituido, R' y R" pueden formar ciclo para formar un grupo heterocíclico que incluye el nitrógeno al que están unidos (por ejemplo, un grupo pirrolidina). El grupo heterocíclico formado por R' y R" puede incluir opcionalmente heteroátomos adicionales, por ejemplo, nitrógeno u oxígeno (por ejemplo, el grupo NR'R" puede formar morfolina o piperazina). El grupo heterocíclico formado por R' y R" puede ser monocíclico, policíclico (por ejemplo, bicíclico), espirocíclico o un grupo anular con puente (por ejemplo, un grupo diazabiciclo[3.2.1]octano). Dicho grupo amino cíclico puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con un grupo amino, un grupo metilo, un grupo hidroxilo o un grupo oxo.
El término grupo "aminoalquilo" o "alquilamina" (los términos se usan indistintamente en el presente documento) se refiere al grupo -RaNR'R", en el que Ra es una cadena de alquilo como se define anteriormente y NR'R" es un grupo amino opcionalmente sustituido como se define anteriormente. La cadena de alquilo Ra puede ser de cadena lineal o ramificada, o puede ser cíclica. Donde la cadena de alquilo Ra es cíclica, el grupo se denomina "cicloalquilamina" y el grupo está unido por un anillo de carbono al que también está unido el grupo NR'R". El grupo "aminoalquilo Cn" se refiere a un grupo que contiene n átomos de carbono. Por ejemplo, un grupo aminoalquilo C1-C10 contiene 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono. Cuando el grupo amino del grupo aminoalquilo es un grupo amino sustituido, el número de átomos de carbono incluye cualquier átomo de carbono en los grupos sustituyentes. La unión al grupo aminoalquilo ocurre a través de un átomo de carbono del grupo alquilo Ra. Los ejemplos de sustituyentes aminoalquilo incluyen metilamina, etilamina, metilaminometilo, dimetilaminometilo, metilaminoetilo, dimetilaminoetilo, metilpirrolidina y etilpirrolidina.
El término grupo "aminoalquenilo" o "alquenilamina" (los términos se usan indistintamente en el presente documento) se refiere al grupo Rx NR'R", donde Rx es una cadena de alquenilo como se define en el presente documento. La cadena alquenilo Rx puede ser de cadena lineal o ramificada. El grupo "aminoalquenilo Cn" se refiere a un grupo que contiene n átomos de carbono. Por ejemplo, un grupo aminoalquenilo C1-C10 contiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 átomos de carbono. Cuando el grupo amino del grupo aminoalquilo es un grupo amino sustituido, el número de átomos de carbono incluye cualquier átomo de carbono en los grupos sustituyentes. La unión al grupo aminoalquilo ocurre a través de un átomo de carbono del grupo alquenilo Rx.
El término "grupo amido" se refiere al grupo -C(=O)-NR-. La unión puede ser a través del átomo de carbono y/o nitrógeno. Por ejemplo, el grupo amido puede estar unido como un sustituyente solo a través del átomo de carbono, en cuyo caso el átomo de nitrógeno tiene dos grupos R unidos (-C(=O)-NR2). El grupo amido puede estar unido únicamente por el átomo de nitrógeno, en cuyo caso el átomo de carbono tiene un grupo R unido (-NR-C(=O)R).
El término "grupo alcoxi" se relaciona con un grupo -O-alquilo. El grupo alcoxi puede referirse a cadenas de oxihidrocarburos lineales, ramificadas o cíclicas, saturadas o insaturadas, que incluyen, por ejemplo, metoxilo, etoxilo, propoxilo, isopropoxilo, butoxilo, f-butoxilo y pentoxilo. El grupo alcoxi puede estar opcionalmente sustituido (un "alcoxi sustituido") con uno o más sustituyentes del grupo alcoxi.
El término "ariloxi" se refiere a un grupo -O-arilo, por ejemplo, un grupo fenoxi o un grupo benciloxi. Un grupo "ariloxi Cn" se refiere a un grupo ariloxi que tiene n carbonos. Los carbonos pueden formar el anillo de arilo (por ejemplo, el ariloxi C6 puede ser fenoxi) o formar parte de una cadena de alquilo enlazante (por ejemplo, el ariloxi C7 puede ser benciloxi).
El término "alquiléster" se refiere a un grupo -C(O)OR, donde R es un grupo alquilo como se define en el presente documento. Un ejemplo de un alquiléster es el metanoato de etilo, es decir, R es un grupo etilo.
El término "hidroxilo" se refiere a un grupo -OH.
El término "grupo oxo" se refiere al grupo (=O), es decir, un átomo de oxígeno sustituyente conectado a otro átomo por un doble enlace. Por ejemplo, un grupo carbonilo (-C(=O)-) es un átomo de carbono conectado por un doble enlace a un átomo de oxígeno, es decir, un grupo oxo unido a un átomo de carbono.
El término "grupo halo" se refiere a un grupo seleccionado de cloro, flúor, bromo y yodo. Preferiblemente, el grupo halo se selecciona de cloro y flúor.
El término "opcionalmente sustituido" significa que el grupo puede estar sustituido con uno o más sustituyentes, que pueden ser iguales o diferentes, o que el grupo puede no tener sustituyentes. El término "opcionalmente monosustituido" significa que el grupo puede tener un solo sustituyente o puede no estar sustituido.
Un sustituyente se puede unir a través de un átomo de carbono y/o un heteroátomo en el alquilo, alquenilo, alquinilo, carbociclilo (incluyendo cicloalquilo, cicloalquenilo y arilo), heterociclilo (incluyendo heterocicloalquilo, heterocicloalquenilo, heteroarilo, heterociclilo que contiene nitrógeno, heteroarilo que contiene nitrógeno), grupo amino, amido, éster, éter, alcoxi o sulfonamida. El término "sustituyente" (o "radical") incluye, pero no se limita a, alquilo, alquilo sustituido, heteroalquilo, heteroalquilo sustituido, aralquilo, aralquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, halo, hidroxilo, ciano, amino, amido, alquilamino, arilamino, carbociclilo, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, heterocicloalquilo, heterocicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, nitro, tio, alcanoilo, hidroxilo, ariloxilo, alcoxilo, alquiltio, ariltio, aralquiloxilo, aralquiltio, carboxilo, alcoxicarbonilo, oxo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo y sulfoximinilo.
En ciertos aspectos, el sustituyente es alquilo, alquilo sustituido, heteroalquilo, heteroalquilo sustituido, alquenilo, alquenilo sustituido, alquinilo, alquinilo sustituido, halo, hidroxilo, ciano, amino, amido, alquilamino, arilamino, carbociclilo, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, heterocicloalquilo, heterocicloalquilo sustituido, cicloalquenilo, cicloalquenilo sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, nitro, tio, alcanoilo, hidroxilo, ariloxilo, alcoxilo, alquiltio, ariltio, aralquiloxilo, aralquiltio, carboxilo, alcoxicarbonilo, oxo, alquilsulfonilo y arilsulfonilo.
En ciertas realizaciones, cada uno del uno o más sustituyentes de cualquier grupo opcionalmente sustituido se selecciona independientemente de OH, F, Cl, Br, I, CN, alquilo C1-C6, CF3 , CHF2, CH2F, CH2OH, C(O)CH3, CH2NHC(O)OCH2CH3, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, alcoxi C1-C6, amino, alquilamina c 1-C6, arilo C5-C6, heteroarilo C3-C6, bencilo, oxo y amida.
Si un grupo está sustituido con otro grupo opcionalmente sustituido, se entiende que el primer sustituyente puede estar sustituido o no sustituido.
Para completar, también se observa que ciertas fórmulas químicas utilizadas en el presente documento definen sistemas deslocalizados. Esta definición se conoce en la técnica como una definición de aromaticidad y puede indicar la presencia de, por ejemplo, un sistema plano mono, di o tricíclico que contiene (4n+2) electrones donde n es un número entero. En otras palabras, estos sistemas pueden mostrar aromaticidad Hückel.
En cualquier aspecto, los compuestos de la presente invención pueden poseer algún aspecto estereoquímico. Por ejemplo, los compuestos pueden poseer centros quirales y/o planos y/o ejes de simetría. Como tales, los compuestos pueden proporcionarse como estereoisómeros individuales, diastereómeros individuales, mezclas de estereoisómeros o mezclas racémicas, a menos que se especifique lo contrario. Se sabe en la técnica que los estereoisómeros son moléculas que tienen la misma fórmula molecular y secuencia de átomos enlazados, pero que difieren en las orientaciones espaciales de sus átomos y/o grupos.
Además, los compuestos de la presente invención pueden exhibir tautomerismo. Se pretende que cada forma tautomérica caiga dentro del alcance de la invención.
También se describen en el presente documento compuestos que pueden proporcionarse como profármacos. Los profármacos se transforman, generalmente in vivo, de una forma a las formas activas de los fármacos descritos en el presente documento.
Además, se entenderá que los elementos descritos en el presente documento pueden ser el isótopo común o un isótopo distinto del isótopo común. Por ejemplo, un átomo de hidrógeno puede ser 1H, 2H (deuterio) o 3H (tritio).
Además, los compuestos de la presente invención se pueden proporcionar en forma de sus sales farmacéuticamente aceptables.
El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a compuestos iónicos formados por la adición de un ácido a una base. El término se refiere a tales sales que se consideran en la técnica como adecuadas para su uso en contacto con un paciente, por ejemplo, in vivo y las sales farmacéuticamente aceptables se eligen generalmente por sus características no tóxicas y no irritantes.
El término "cocristal" se refiere a un cristal molecular de múltiples componentes, que puede comprender interacciones no iónicas.
Las sales y cocristales farmacéuticamente aceptables pueden prepararse mediante cromatografía de intercambio iónico o haciendo reaccionar la base libre o la forma ácida de un compuesto con cantidades estequiométricas o con un exceso del ácido o base inorgánico u orgánico formador de sal deseado en uno o más solventes, o mezclando el compuesto con otro compuesto farmacéuticamente aceptable capaz de formar un cocristal.
Las sales conocidas en la técnica por ser generalmente adecuadas para usar en contacto con un paciente incluyen sales derivadas de ácidos inorgánicos y/u orgánicos, incluyendo el bromhidrato, clorhidrato, sulfato, bisulfato, nitrato, acetato, oxalato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato y tartrato. Estos pueden incluir cationes con base en metales alcalinos y alcalinotérreos, tales como sodio, potasio, calcio y magnesio, así como amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio. Se hace referencia adicional al número de fuentes bibliográficas que estudian sales farmacéuticamente aceptables adecuadas, por ejemplo, el manual de sales farmacéuticas publicado por IUPAC.
Además, los compuestos de la presente invención a veces pueden existir como iones de zwitter, que se consideran parte de la invención.
En consecuencia, en un primer aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I):
Figure imgf000011_0001
incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, estereoisómero o N-óxido derivado del mismo, en el que: Ri es H, OH o un grupo alquilo opcionalmente sustituido;
R2 es un grupo alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilcicloalquilo C4-C6 opcionalmente sustituido, arilo C4-C6 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C6 opcionalmente sustituido, ariloxi C4-C8 opcionalmente sustituido, arilalquilo C7-C10 opcionalmente sustituido o heteroarilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido; y
Q está representado por la fórmula (II):
Figure imgf000011_0002
en la que:
R5a es H, halo, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o amino opcionalmente sustituido;
R5b es H, halo, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, bencilo, heteroarilo C3-C6 opcionalmente monosustituido, heterocicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, NR'R", o RaNR'R", en la Ra es alquilo C1-C6 o alquenilo C2-C6; y
en la que R' y R" se seleccionan cada uno independientemente de H, alquilo C1-C6 sustituido con oxo, alquilo C1-C6 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilamina C1-C7 opcionalmente sustituida, alquenilamina C2-C7 opcionalmente sustituida, heterocicloalquilo C3-C10 opcionalmente sustituido, arilo C4-C10 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C10 opcionalmente sustituido, alquilarilo C5-C10 opcionalmente sustituido, alquilheterocicloalquilo C4-C10 opcionalmente sustituido y alquilheteroarilo C4-C6, o la que R' y R" juntos forman un heterocicloalquilo C3-C8 opcionalmente sustituido que incluye el N al que están unidos,
en la que para cualquiera de los grupos funcionales para los que uno o más sustituyentes son opcionales, los sustituyentes opcionales se seleccionan independientemente de OH, F, Cl, Br, I, CN, alquilo C1-C6, CF3, CHF2, CH2F, CH2OH, COOH, C(O)CH3, CH2NHC(O)OCH2CH3, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, alcoxi C1-C6, amino, alquilamina C1-C6, arilo C5-C6, heteroarilo C3-C6, bencilo, oxo y amida.
Como apreciará el experto en la técnica, la notación de línea de puntos dentro de las estructuras de anillos fusionados indica que todos los enlaces entre números enteros pueden ser enlaces simples o pueden formar parte de un sistema deslocalizado. Es decir, el anillo puede estar completamente saturado, parcialmente saturado o completamente insaturado (es decir, aromático).
De acuerdo con las reivindicaciones, Q es:
Figure imgf000011_0003
y
R5a es H, halo, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o amino opcionalmente sustituido;
R5b es H, halo, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, bencilo, heteroarilo C3-C6 opcionalmente monosustituido, heterocicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, NR'R", o RaNR'R", en la Ra es alquilo C1-C6 o alquenilo C2-C6; y
en la que R' y R" se seleccionan cada uno independientemente de H, alquilo C1-C6 sustituido con oxo, alquilo C1-C6 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilamina C1-C7 opcionalmente sustituida, alquenilamina C2-C7 opcionalmente sustituida, heterocicloalquilo C3-C10 opcionalmente sustituido, arilo C4-C10 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C10 opcionalmente sustituido, alquilarilo C5-C10 opcionalmente sustituido, alquilheterocicloalquilo C4-C10 opcionalmente sustituido y alquilheteroarilo C4-C6, o la que R' y R" juntos forman un heterocicloalquilo C3-C8 opcionalmente sustituido que incluye el N al que están unidos,
en la que para cualquiera de los grupos funcionales para los cuales los sustituyentes son opcionales, los sustituyentes opcionales se seleccionan independientemente de OH, F, Cl, Br, I, CN, alquilo C1-C6, CF3 , CHF2, CH2F, CH2OH, COOH, C(O)CH3 , CH2NHC(O)OCH2CH3 , alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, alcoxi C1-C6, amino, alquilamina C1-C6, arilo C5-C6, heteroarilo C3-C6, bencilo, oxo y amida.
En ciertas realizaciones, Q es:
Figure imgf000012_0001
R5a es H, y
R5b se selecciona de pirazol opcionalmente sustituido con metilo o etilamina, y NR'R", en la que R' y R" se seleccionan cada uno independientemente de H, metilo, ciclohexilamina, etilamina C2-C7 opcionalmente sustituida con metilo, fluoro o fluorofenilo, fenilo opcionalmente sustituido o en la que R' y R" juntos forman un heterocicloalquilo C3-C8 opcionalmente sustituido que incluye el N al que están unidos. En ciertas realizaciones preferidas, R' es H y R" es etilpirrolidina opcionalmente sustituida con metilo, fluoro o fluorofenilo.
En realizaciones preferidas R5b es un grupo aminopirrolidinilo, un grupo dimetilaminopiperidina, un grupo amino C-i-Ca opcionalmente sustituido con aminoalquilo, o un 3,6-diazabiciclo[3.2.1]octano del tipo:
Figure imgf000012_0002
en la que R5c es hidrógeno, o alquilo Ci-C6opcionalmente sustituido
También se describen en el presente documento compuestos en los que Q es:
Figure imgf000012_0003
y
Rga es Cl, F, Br, I o ciano;
Rgb es H, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, arilo C4-C6 opcionalmente sustituido;
en la que los sustituyentes opcionales se seleccionan de F, Cl, Br, metoxi, OH, CH2OH, alquilamina C1-C6, ciclopropano, dioxolano, metilpirazol.
En ciertos ejemplos, Rga es Cl, F, Br, I o ciano y Rgb es fenilo opcionalmente sustituido con F, Cl, Br, metoxi, OH, alquilamina C1-C6, ciclopropano, dioxolano, metilpirazol opcionalmente sustituido con F y morfolina.
En algunos ejemplos, Rga es Cl o F, preferiblemente Cl. Como se muestra en la Tabla 1, los compuestos en los que Rga es Cl exhiben una potencia mejorada tanto en el ensayo bioquímico USP7 como en el ensayo antiproliferativo LNCaP en comparación con sus análogos directos en los que Rga = H. Además, los compuestos en los que Rga es Cl pueden exhibir una potencia mejorada en comparación con los compuestos en los que R9a es Br o I. Además, los compuestos en los que R9a = Cl pueden exhibir una solubilidad sustancialmente mayor en el ensayo de solubilidad cinética en comparación con R9a = H (Tabla 2).
Tabla 1
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Tabla 2
Figure imgf000013_0002
También se describen en el presente documento compuestos en los que Q es:
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También se describen en el presente documento compuestos en los que Q es:
Figure imgf000014_0002
y
R6a es H, o alquilo C1-C6;
Rab es H, o arilo C4-C6 opcionalmente sustituido;
en la que el sustituyente opcional se selecciona de alquilamina C1-C6.
En ciertos ejemplos de este tipo, R6a es H, o metilo y R6b es H, o fenilo opcionalmente sustituido con CH2NH2 o CH(CH3)NH2.
También se describen en el presente documento compuestos en los que Q es:
Figure imgf000014_0003
y R6b es H, o arilo C4-C6, opcionalmente en la que R6b es fenilo.
También se describen en el presente documento compuestos en los que Q es:
Figure imgf000014_0004
y
R6a es H o alquilo C1-C6, opcionalmente en la que R6a es metilo;
R6b es H, o alquilo C1-C6, opcionalmente en la que R6b es propilo.
También se describen en el presente documento compuestos en los que Q es:
Figure imgf000014_0005
y
R6a es H o alquilo C1-C6;
R6b es H, halo, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, arilo C4-C6 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C6 opcionalmente sustituido; en la que los sustituyentes opcionales se seleccionan independientemente de F, CN, OH, CH2OH, amida, NH2, alquilamina C1-C6, cicloalquilamina C3-C6, CF3, COOH, metilmorfolina, CH(CF3)NH2, CH(CHF2)NH2 y CH2NHC(O)OCH2CH3.
En ciertos ejemplos de este tipo, R6a es H, metilo o etilo; R6b es H, Br, propenilo opcionalmente sustituido, etinilo, propinilo opcionalmente sustituido, pentinilo opcionalmente sustituido, ciclohexano opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, pirazol, piridina;
en la que los sustituyentes opcionales se seleccionan independientemente de F, CN, OH, CH2OH, amida, NH2, alquilamina C1-C6, cicloalquilamina C3-C6, CF3, CH(CF3)NH2, CH(CHF2)NH2.
En ciertos ejemplos de este tipo, R6a es metilo y R6b es fenilo opcionalmente sustituido con uno o más de F, CN, OH, CH2OH, NH2, CH2NH2, CH2CH2NH2, CH(CH3)NH2, amida, ciclopropilamina y ciclobutilamina.
También se describen en el presente documento compuestos en los que Q es:
Figure imgf000015_0001
y R6a es H o alquilo C1-C6, y R6b es arilo C4-C6. En ciertos ejemplos, R6a es fenilo.
En ciertas realizaciones preferidas, el sustituyente en R2 tiene el arreglo CH2CRbRcRd en la que no más de uno de Rb, RC y Rd son hidrógeno. Para evitar dudas, mientras que no más de uno de los sustituyentes en Rb, Rc y Rd es hidrógeno, los sustituyentes en Rb, Rc y Rd de lo contrario, pueden ser cualquier grupo funcional necesario para formar las opciones aplicables para R2 descrito en el presente documento.
En ciertas realizaciones R2 es heteroarilo C3-C5 opcionalmente sustituido, alquilcicloalquilo C4-C6 opcionalmente sustituido, arilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido o grupo heteroarilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido, en la que cada sustituyente opcional se selecciona independientemente de Oh , F, metilo, CF3, CHF2, CH2F, CH2OH, alcoxi C1-C4 y cicloalquilo C3-C4.
En ciertas realizaciones, R2 es etilfenilo opcionalmente sustituido, en el que el grupo etilo está opcionalmente sustituido con metilo, metoximetilo, CF3, CHF2, o CH2F y el grupo fenilo está opcionalmente sustituido con F.
En ciertas realizaciones alternativas R2 es oxazol opcionalmente sustituido con ciclopropano, o pirazol opcionalmente sustituido con metilo.
Se ha identificado de forma nueva y sorprendente que los compuestos de acuerdo con la fórmula (I) en la que R2 es CH2CRaRbRc y en la que no más de uno de Ra, Rb y RC son hidrógeno tienen una ventaja sorprendente e inesperada: es decir, un aumento significativo en la potencia para la inhibición de USP7 en relación con los compuestos en los que más de un Ra, Rb y Rc son hidrógeno. Este efecto sorprendente se demuestra claramente en la Tabla 3 a continuación. Se lograron ganancias de potencia inesperadas de USP7 cuando no más de uno de Ra, Rb y Rc son hidrógeno (columna de la derecha) en comparación con más de uno de Run, Rb y RC son hidrógeno (columna central).
Tabla 3
Figure imgf000015_0002
Figure imgf000016_0001
Preferiblemente, el compuesto de acuerdo con la fórmula (I) se selecciona de:
(R)-6-cloro-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(p¡nd¡n-4-¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(1H-p¡razol-5-¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(femlam¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-am¡no-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-((2-(d¡met¡lammo)et¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-((2-(d¡met¡lam¡no)et¡l)(met¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-met¡lp¡peraz¡n-1-¡l)pmm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡pend¡n-4-¡l)met¡l)-6-metox¡p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(2-(d¡met¡lam¡no)etox¡)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
6-((S)-3-ammop¡rrol¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(3-am¡noazet¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-5-am¡no-6-cloro-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(1-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(1-¡sobut¡MH-p¡razol-4-¡l)pmm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((1,2,3,4-tetrah¡dro-1,4-ep¡m¡nonaftalen-6-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-cloro-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-5-met¡lp¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-5-bromo-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4 (3H)-ona 6-((S)-3-ammop¡pend¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(4-ammop¡pend¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)p¡nm¡dm-4(3H)-ona 6-((S)-3-(d¡met¡lammo)p¡perid¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H-ona (R,E)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop-1-en-1-¡l)pmm¡d¡n- 4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡perid¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)- ona
(R)-6-(1-(2-(d¡met¡lam¡no)et¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H-ona 6-((E)-3-((R)-3-ammop¡rrol¡dm-1-¡l)prop-1-en-1-¡l)-3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
6-((E)-3-((S)-3-ammop¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop-1-en-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((S)-1-feml-3-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)propan-2-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((E)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡pend¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((S)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((E)-1-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)propan-2-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((S)-1-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)propan-2-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 6-((S)-3-(d¡met¡lammo)p¡rrol¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((E)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona rac-6-(((±-frans-1,2)-2-am¡noddohex¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
6-(((±-ds-1,2)-2-ammoddohex¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡pendm-4-¡l)met¡l)-6-((((R)-1-met¡lp¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((((S)-1-met¡lp¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((E)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((S)-2-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((E)-2-(metox¡met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((E)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((S)-3-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 6-((2-((R)-3-fluorop¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 6-((2-((S)-3-fluorop¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H-ona (R)-6-((2-(4-fluoro¡so¡ndol¡n-2-¡l)et¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((1-(4,4-d¡fluoro-3-femlbutano¡l)-4-h¡drox¡p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n- 4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-morfol¡nop¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-[4,5'-b¡p¡rim¡d¡n]-6(1H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-h¡drox¡et¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡pendm-4-¡l)met¡l)-6-((2-metox¡et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((E)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-5-met¡l-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4 (3H)-ona (R)-A/-(1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡dropmm¡d¡n-4-¡l)-A/-(2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)acetam¡da
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((E)-2-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(femletm¡l)pmm¡d¡n-4(3H)-ona
(E)-6-bendl-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡pend¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(feml(2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((1-acet¡l-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((1-(3,3-d¡c¡cloprop¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona 3- ((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((R)-2-(h¡drox¡met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-(metox¡met¡l)azet¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(¡soprop¡lam¡no)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-A/-(2-((1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)ammo)et¡l)acetam¡da (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(femlam¡no)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Tert-but¡l ((1-(1-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)p¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)carbamato
4- (1-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-A/,W,2-tr¡met¡lmoifolm-2-carboxam¡da
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-morfol¡nop¡rrol¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-h¡drox¡-3-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((tetrah¡drofuran-3-¡l)ammo)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2-oxa-7-azasp¡ro[4.4]nonan-7-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(tetrah¡dro-2H-furo[2,3-c]p¡rrol-5(3H)-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((1-met¡MH-p¡razol-5-¡l)met¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((3-met¡loxetan-3-¡l)ammo)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(4-(1H-p¡razol-5-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-((4-dorobenc¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-(p¡r¡d¡n-3-¡lmet¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-(p¡r¡d¡n-2-¡lmet¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-6-(4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-2-((1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-W,A/-d¡met¡lacetam¡da (R)-6-(((2,3-d¡h¡drobenzo[6][1,4]d¡ox¡n-6-¡l)met¡l)am¡no)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)met¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-6-(3-fluoroazet¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-h¡drox¡et¡l)(met¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(c¡dopent¡lam¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-met¡l-3-oxop¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(5-oxa-2-azasp¡ro[3.4]odan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-6-((1,3-d¡met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3Hj-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(8-met¡l-5-oxa-2,8-d¡azasp¡ro[3,5]nonan-2-¡l)p¡r¡m¡dm-4(3H)-ona
(R)-6-(6-acet¡l-2,6-d¡azasp¡ro[3,3]heptan-2-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4 (3H)-ona (R)-6-(5,5-d¡fluoro-2-azasp¡ro[3.3]heptan-2-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4 (3H-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(7-oxa-2-azasp¡ro[3.5]nonan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2-oxa-7-azasp¡ro[3.5]nonan-7-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droX-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡perd¡n-4-¡l)imet¡l)-6-(6-oxa-2-azasp¡ro[3.4]octan-2-¡l)pmim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droX-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡perd¡n-4-¡l)imet¡l)-6-((2-h¡droXet¡l)(p¡rd¡n-3-¡limet¡l)am¡no)p¡nim¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droX-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡perd¡n-4-¡l)imet¡l)-6-(5-met¡l-2,5-d¡azaesp¡ro[3,4]octan-2-¡l)p¡nim¡d¡n-4 (3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droX-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡perd¡n-4-¡l)imet¡l)-6-(2-oxa-6-azasp¡ro[3.4]octan-6-¡l)pmim¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droX-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡perd¡n-4-¡l)imet¡l)-6-((1R,5S)-3-met¡l-3,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]octan-6-¡l)pmim¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droX-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡perd¡n-4-¡l)imet¡l)-6-((1S,5R)-3-met¡l-3,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]octan-6-¡l)pmim¡d¡n-4(3H)-ona
3-((1-(3-c¡clobut¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((1-(2,2-d¡c¡clobut¡lacet¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
0 una sal farmacéut¡camente aceptable, tautómero, estereo¡sómero o N-óx¡do der¡vado del m¡smo.
En c¡ertas real¡zac¡ones, los compuestos de la presente ¡nvenc¡ón t¡enen un valor IC50 para USP7 de aproximadamente 1 nM a aprox¡madamente 10,000 nM, más prefer¡blemente desde aprox¡madamente 1 nM hasta aprox¡madamente 1000 nM, o desde aproximadamente 100 nM hasta aproximadamente 1000 nM, o desde aproximadamente 100 nM hasta aproximadamente 500 nM, o desde aproximadamente 100 nM hasta aproximadamente 300 nM, o desde aproximadamente 100 nM hasta aproximadamente 250 nM. En c¡ertas real¡zac¡ones prefer¡das, los compuestos de la ¡nvenc¡ón t¡enen un valor IC50 para USP7 de menos de 500 nM, más prefer¡blemente menos de 250 nM. Un método para determ¡nar el valor IC50 de un compuesto para USP7 se descr¡be a cont¡nuac¡ón (véanse ejemplos).
En determ¡nadas real¡zac¡ones, se proporc¡ona el compuesto de fórmula (I) de acuerdo con las re¡v¡nd¡cac¡ones y al menos un exc¡p¡ente farmacéut¡camente aceptable.
En un segundo aspecto, la presente ¡nvenc¡ón proporc¡ona una compos¡c¡ón farmacéut¡ca que comprende un compuesto de acuerdo con cualqu¡er real¡zac¡ón del pr¡mer aspecto y al menos un exc¡p¡ente farmacéut¡camente aceptable.
Las compos¡c¡ones farmacéut¡cas pueden formularse de acuerdo con su uso y propós¡to part¡cular mezclando, por ejemplo, exc¡p¡ente, agente aglut¡nante, lubr¡cante, agente d¡sgregante, mater¡al de recubr¡m¡ento, emuls¡onante, agente de suspens¡ón, solvente, estab¡l¡zador, potenc¡ador de la absorc¡ón y/o base para ungüento. La compos¡c¡ón puede ser adecuada para adm¡n¡strac¡ón oral, ¡nyectable, rectal o tóp¡ca.
Los exc¡p¡entes farmacéut¡camente aceptables adecuados serían conoc¡dos por el experto en la técn¡ca, por ejemplo: grasas, agua, soluc¡ón sal¡na f¡s¡ológ¡ca, alcohol (por ejemplo, etanol), gl¡cerol, pol¡oles, soluc¡ón acuosa de glucosa, agente de extens¡ón, agente d¡sgregante, aglut¡nante, lubr¡cante, humectante estab¡l¡zador, emuls¡onante, d¡spersante, conservante, edulcorante, colorante, agente sazonador o aromat¡zante, agente concentrador, d¡luyente, sustanc¡a amort¡guadora, solvente o agente solub¡l¡zante, producto quím¡co para lograr el efecto de almacenamiento, sal para mod¡f¡car la pres¡ón osmót¡ca, agente de recubr¡m¡ento o ant¡ox¡dante, sacár¡dos tales como lactosa o glucosa; alm¡dón de maíz, tr¡go o arroz; ác¡dos grasos tales como ác¡do esteár¡co; sales ¡norgán¡cas tales como alum¡nato de metas¡l¡cato de magnes¡o o fosfato de calc¡o anh¡dro; polímeros s¡ntét¡cos tales como pol¡v¡n¡lp¡rrol¡dona o pol¡alqu¡lengl¡col; alcoholes tales como alcohol estearíl¡co o alcohol bencíl¡co; der¡vados de celulosa s¡ntét¡ca tales como met¡lcelulosa, carbox¡met¡lcelulosa, et¡lcelulosa o h¡drox¡prop¡lmet¡lcelulosa; y otros ad¡t¡vos usados convenc¡onalmente tales como gelat¡na, talco, ace¡te vegetal y goma aráb¡ga.
Por ejemplo, la compos¡c¡ón farmacéut¡ca puede usarse en un método en el que la compos¡c¡ón se adm¡n¡stra por vía oral, tal como en forma de tabletas, tabletas recub¡ertas, cápsulas de gelat¡na dura o blanda, soluc¡ones, emuls¡ones o suspens¡ones. La adm¡n¡strac¡ón tamb¡én puede real¡zarse por vía rectal, por ejemplo, ut¡l¡zando supos¡tor¡os, por vía local o percutánea, por ejemplo, ut¡l¡zando ungüentos, cremas, geles o soluc¡ones, o por vía parenteral, por ejemplo, med¡ante soluc¡ones ¡nyectables.
Para la preparac¡ón de compr¡m¡mos, compr¡m¡dos recub¡ertos o cápsulas de gelat¡na dura, los compuestos de la presente ¡nvenc¡ón se pueden mezclar con exc¡p¡entes ¡norgán¡cos u orgán¡cos farmacéut¡camente ¡nertes. Los ejemplos de exc¡p¡entes adecuados ¡ncluyen lactosa, alm¡dón de maíz o der¡vados del m¡smo, talco o ác¡do esteár¡co o sales de los m¡smos. Los exc¡p¡entes adecuados para usar con cápsulas de gelat¡na blanda ¡ncluyen, por ejemplo, ace¡tes vegetales, ceras, grasas y pol¡oles sem¡sól¡dos o líqu¡dos.
Para la preparac¡ón de soluc¡ones y jarabes, los exc¡p¡entes ¡ncluyen, por ejemplo, agua, pol¡oles, sacarosa, azúcar ¡nvert¡do y glucosa.
Para soluc¡ones ¡nyectables, los exc¡p¡entes ¡ncluyen, por ejemplo, agua, alcoholes, pol¡oles, gl¡cer¡na y ace¡te vegetal.
Para supositorios y para aplicación local y percutánea, los excipientes incluyen, por ejemplo, aceites naturales o endurecidos, ceras, grasas y polioles semisólidos o líquidos.
Las composiciones farmacéuticas también pueden contener conservantes, solubilizantes, estabilizantes, humectantes, emulsionantes, edulcorantes, colorantes, odorantes, amortiguadores, agentes de recubrimiento y/o antioxidantes.
Para terapias de combinación, el segundo fármaco se puede proporcionar en una composición farmacéutica con la presente invención o se puede proporcionar por separado.
Así, una formulación farmacéutica para administración oral puede ser, por ejemplo, gránulos, tabletas, tabletas recubiertas con azúcar, cápsulas, píldoras, suspensión o emulsión. Para inyección parenteral para, por ejemplo, uso intravenoso, intramuscular o subcutáneo, se puede proporcionar una solución acuosa estéril que puede contener otras sustancias que incluyen, por ejemplo, sales y/o glucosa para hacer que la solución sea isotónica. El agente anticanceroso también se puede administrar en forma de supositorio o pesario, o se puede aplicar tópicamente en la forma de loción, solución, crema, ungüento o polvo para espolvorear.
En un tercer aspecto, la invención proporciona un compuesto o composición de acuerdo con cualquier realización del primer o segundo aspecto para uso en terapia, preferiblemente en el tratamiento y/o prevención del cáncer. Los cánceres o afecciones neoplásicas adecuados que van a ser tratados con los compuestos o composiciones de acuerdo con la invención incluyen, por ejemplo: cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de riñón, cánceres del SNC (por ejemplo, neuroblastomas, glioblastomas), osteosarcoma, neoplasias malignas hematológicas (por ejemplo, leucemia, mieloma múltiple y linfoma de células del manto). En ciertas realizaciones preferidas, el cáncer está asociado con la desregulación de p53. En ciertas realizaciones preferidas, el cáncer se selecciona de una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, linfoma de células del manto, mieloma múltiple), cáncer de próstata, un neuroblastoma o un glioblastoma.
El compuesto o composición de la invención puede ser para uso en monoterapia y/o una modalidad de combinación. Los agentes adecuados para usar en tales modalidades de combinación con compuestos o composiciones de acuerdo con la invención incluyen uno o más agentes anticancerígenos, agentes antiinflamatorios, agentes inmunomoduladores, agentes inmunosupresores, agentes neurológicos, agentes antidiabéticos, agentes antidiabéticos, -agentes antivirales, agentes antibacterianos y/o radioterapia.
Los agentes para usar en combinación con los compuestos de la presente invención pueden dirigirse a la misma ruta biológica o similar a la dirigida por los compuestos de la presente invención o pueden actuar en una ruta diferente o no relacionada.
Dependiendo de la enfermedad que se va a tratar, se pueden coadministrar una variedad de compañeros de combinación con los compuestos de la presente invención en los métodos en los que se van a usar los compuestos. El segundo ingrediente activo puede incluir, pero no se limita a: agentes alquilantes, incluyendo ciclofosfamida, ifosfamida, tiotepa, melfalán, cloroetilnitrosourea y bendamustina; derivados de platino, incluyendo cisplatino, oxaliplatino, carboplatino y satraplatino; agentes antimitóticos, incluyendo los alcaloides de la vinca (vincristina, vinorelbina y vinblastina), taxanos (paclitaxel, docetaxel), epotilonas e inhibidores de quinasas mitóticas, incluyendo las quinasas aurora y polo; inhibidores de topoisomerasa, incluyendo antraciclinas, epipodofilotoxinas, camptotecina y análogos de camptotecina; antimetabolitos, incluyendo 5-fluorouracilo, capecitabina, citarabina, gemcitabina, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, fludarabina, metotrexato y premetrexed; inhibidores de la proteína quinasa, incluyendo imatinib, gefitinib, sorafenib, sunitinib, erlotinib, dasatinib y lapatinib; inhibidores de proteosomas, incluyendo bortezomib; inhibidores de histona desacetilasa, incluyendo valproato y SAHA; fármacos antiangiogénicos, incluyendo bevacizumab; anticuerpos monoclonales, incluyendo trastuzumab, rituximab, alemtuzumab, tositumomab, cetuximab, panitumumab; conjugados de anticuerpos mioclonales, incluyendo gemtuzumab ozogamicina, ibritumomab tiuxetan; terapias hormonales, incluyendo antiestrógenos (tamoxifeno, raloxifeno, anastrozol, letrozol, examestano), antiandrógenos (flutamida, biclutamida) y análogos o antagonistas de la hormona luteinizante.
En un cuarto aspecto, la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquier realización del primer aspecto de la invención o una composición de acuerdo con cualquier realización del segundo aspecto de la invención para usar en un método para tratar o prevenir el cáncer que comprende administrar dicho compuesto o dicha composición a un sujeto. Los cánceres o afecciones neoplásicas adecuados que van a ser tratadas o prevenidas de acuerdo con estos métodos incluyen, por ejemplo, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de riñón, cánceres del SNC (por ejemplo, neuroblastomas, glioblastomas), osteosarcoma, neoplasias malignas hematológicas (por ejemplo, leucemia, mieloma múltiple y linfoma de células del manto). En ciertas realizaciones preferidas, el cáncer está asociado con la desregulación de p53. En ciertas realizaciones preferidas, el cáncer se selecciona de una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, linfoma de células del manto, mieloma múltiple), cáncer de próstata, un neuroblastoma o un glioblastoma.
Como parte de un método comprendido en el cuarto aspecto, el compuesto o composición puede usarse en monoterapia y/o en una modalidad de combinación. Los agentes adecuados para usar en tales modalidades de combinación con compuestos o composiciones de acuerdo con la invención incluyen uno o más agentes anticancerígenos, agentes antiinflamatorios, agentes inmunomoduladores, agentes inmunosupresores, agentes neurológicos, agentes antidiabéticos, agentes antidiabéticos, -agentes antivirales, agentes antibacterianos y/o radioterapia.
Los agentes para usar en combinación con los compuestos de la presente invención pueden dirigirse a la misma ruta biológica o similar a la dirigida por los compuestos de la presente invención o pueden actuar en una ruta diferente o no relacionada.
Dependiendo de la enfermedad que se va a tratar, se pueden coadministrar una variedad de compañeros de combinación con los compuestos de la presente invención en los métodos en los que se van a usar los compuestos. El segundo ingrediente activo puede incluir, pero no se limita a: agentes alquilantes, incluyendo ciclofosfamida, ifosfamida, tiotepa, melfalán, cloroetilnitrosourea y bendamustina; derivados de platino, incluyendo cisplatino, oxaliplatino, carboplatino y satraplatino; agentes antimitóticos, incluyendo los alcaloides de la vinca (vincristina, vinorelbina y vinblastina), taxanos (paclitaxel, docetaxel), epotilonas e inhibidores de quinasas mitóticas, incluyendo las quinasas aurora y polo; inhibidores de topoisomerasa, incluyendo antraciclinas, epipodofilotoxinas, camptotecina y análogos de camptotecina; antimetabolitos, incluyendo 5-fluorouracilo, capecitabina, citarabina, gemcitabina, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, fludarabina, metotrexato y premetrexed; inhibidores de la proteína quinasa, incluyendo imatinib, gefitinib, sorafenib, sunitinib, erlotinib, dasatinib y lapatinib; inhibidores de proteosomas, incluyendo bortezomib; inhibidores de histona desacetilasa, incluyendo valproato y SAHA; fármacos antiangiogénicos, incluyendo bevacizumab; anticuerpos monoclonales, incluyendo trastuzumab, rituximab, alemtuzumab, tositumomab, cetuximab, panitumumab; conjugados de anticuerpos mioclonales, incluyendo gemtuzumab ozogamicina, ibritumomab tiuxetan; terapias hormonales, incluyendo antiestrógenos (tamoxifeno, raloxifeno, anastrozol, letrozol, examestano), antiandrógenos (flutamida, biclutamida) y análogos o antagonistas de la hormona luteinizante.
También se describe en el presente documento el uso de un compuesto de acuerdo con cualquier realización del primer aspecto en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir el cáncer.
Los cánceres o condiciones neoplásicas adecuados para ser tratados o prevenidos por dicho medicamento incluyen, por ejemplo, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de riñón, cánceres del SNC (por ejemplo, neuroblastomas, glioblastomas), osteosarcoma, neoplasias malignas hematológicas (por ejemplo, leucemia, mieloma múltiple y linfoma de células del manto). En ciertos ejemplos, el cáncer está asociado con la desregulación de p53. En ciertos ejemplos, el cáncer se selecciona de una neoplasia maligna hematológica (por ejemplo, linfoma de células del manto, mieloma múltiple), cáncer de próstata, un neuroblastoma o un glioblastoma.
Con respecto a los aspectos de la invención relacionados con el uso terapéutico de los compuestos de acuerdo con la invención, los compuestos se pueden administrar al sujeto que necesita tratamiento en una "cantidad eficaz". El término "cantidad eficaz" se relaciona con la cantidad o dosis de un compuesto que, tras la administración de dosis única o múltiple a un sujeto, proporciona eficacia terapéutica en el tratamiento de la enfermedad. Las cantidades terapéuticamente eficaces de un compuesto de acuerdo con la invención pueden comprender una cantidad en el intervalo de aproximadamente 0.1 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg por dosis única. El profesional sanitario puede determinar una cantidad terapéuticamente eficaz para cualquier paciente individual mediante métodos que comprenda el experto en la técnica. La cantidad de compuesto administrado en cualquier momento dado se puede variar de manera que se administren cantidades óptimas del compuesto, ya sea que se empleen solos o en combinación con cualquier otro agente terapéutico, durante el curso del tratamiento. En algunas realizaciones, los compuestos de acuerdo con la invención, o las composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos, son para uso en métodos que comprenden la administración de dichos compuestos o composiciones farmacéuticas en combinación con cualquier otro tratamiento contra el cáncer, como una terapia de combinación.
Cuando se introducen elementos de la presente divulgación o las realizaciones preferidas de la misma, los artículos "un", "una", "el" y "dicho" pretenden significar que hay uno o más de los elementos. Los términos "que comprende", "que incluye" y "que tiene" pretenden ser inclusivos y significan que puede haber elementos adicionales además de los elementos enumerados.
La descripción detallada anterior se ha proporcionado a modo de explicación e ilustración, y no pretende limitar el alcance de las reivindicaciones adjuntas. Muchas variaciones en las realizaciones actualmente preferidas ilustradas en el presente documento serán evidentes para un experto en la técnica, y permanecerán dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.
Ejemplos
La presente invención y otros compuestos descritos en el presente documento se describirán ahora en relación con varios ejemplos.
Los Ejemplos indicados a continuación se sintetizaron de acuerdo con los métodos descritos a continuación. Los valores IC50 se determinaron como se describe a continuación y se representan en la siguiente tabla.
Figure imgf000022_0001
Figure imgf000023_0001
Figure imgf000024_0001
Tabla 4: Inhibición de USP7 en el ensayo bioquímico por compuestos ejemplificados.
Para ejemplos representativos en la Tabla 4, las actividades inhibitorias de USP7 se clasifican de la siguiente manera:
Figure imgf000024_0002
Sección experimental
Abreviaciones y acrónimos
AC2O: anhídrido acético; AcOH: ácido acético; ac: acuoso; dba: dibencilidenacetona; Boc: tert-butiloxicarbonilo; DCM: diclorometano; br: ancho; d: doblete; DIPEA: diisopropiletilamina; DMAP: 4-(dimetilamino)piridina; DME: dimetoxietano; DMF: N,N-dimetilformamida; DMSO: dimetilsulfóxido; dppf: 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno; EDC: N-(3-dimetilaminopropil)-N-clorhidrato de etilcarbodiimida; equiv.: equivalentes; EtOAc: acetato de etilo; EtOH: alcohol etílico; ESI: ionización por electropulverización; h; hora; HATU: N-[(dimetilamino)-1H-1,2,3-triazolo-[4,5-b]piridin-1-ilmetileno]-N-metilmetanaminio hexafluorofosfato N-óxido; HPLC: cromatografía líquida de alta presión; IPA: alcohol isopropílico; LC: cromatografía líquida; LCMS: espectrometría de masas por cromatografía líquida; LDA: diisopropilamida de litio; M: molares; m/z: relación masa-carga; mCPBA: ácido 3-cloroperbenzoico; MeCN: acetonitrilo; MeOH: metanol; min: minutos; Ms: metilsulfonilo; EM: espectrometría de masas; m: multiplete (espectral); NBS: N-bromosuccinimida; NMO: N-óxido de morfolina; NMP: N-metil-2-pirrolidona; RMN: resonancia magnética nuclear; OAc: acetato; PE: éter de petróleo (40-60 °C); q: cuarteto; quint: quinteto; Rt: tiempo de retención; TA: temperatura ambiente; RuPhos: 2-diciclohexilfosfino-2',6'-diisopropoxibifenilo; s: singlete; SEM: 2-trimetilsililetoximetilo; SM: material de partida; sxt: sexteto; t: triplete; tert-Butil X-Fos: 2-di-tert-butilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo; TFA: ácido trifluoroacético; THF: tetrahidrofurano; Ts: p-toluenosulfonilo; v/v: volumen por unidad de volumen; Walphos SL-W008-2:(S)-1-{(Sp)-2-[2-(diciclohexilfosfino)fenil]ferrocenil}etilbis[3,5-bis(trifluorometil)fenil]fosfina; Xantofos: 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno.
Condiciones Experimentales Generales
Solventes y reactivos
Los solventes orgánicos comunes que se usaron en las reacciones (por ejemplo, THF, DMF, DCM y metanol) se compraron anhidros de Sigma-Aldrich® en botellas Sure/Seal™ y se manejaron adecuadamente bajo nitrógeno. El agua se desionizó utilizando un Elga PURELAB Option-Q. Todos los demás solventes utilizados (es decir, para procedimientos de elaboración y purificación) eran generalmente de calidad HPLC y se utilizaron tal como los suministraban diversas fuentes comerciales. A menos que se indique lo contrario, todos los materiales de partida utilizados se compraron a proveedores comerciales y se usaron tal como se suministraron.
Síntesis de microondas
Se llevaron a cabo los experimentos de microondas utilizando un sistema Biotage Initiatot™ Fight, a menos que se indique de otro modo para los casos en los que se utilizó un sistema CEM Discover™/Explorer24™ controlado por el software Synergy 1.5. Ambas máquinas ofrecen una buena reproducibilidad y control en intervalos de temperatura de 60 a 250 °C y presiones de hasta un máximo de 20 bar.
Cromatografía ultrarrápida
Se logró la purificación de los compuestos por cromatografía ultrarrápida utilizando un sistema Biotage Isolera Four. A menos que se indique lo contrario, se utilizaron columnas de cartucho Biotage KP-Sil SNAP (10-340 g) junto con el sistema de solventes indicado y un gradiente de solvente adecuado según la polaridad del compuesto. En el caso de compuestos más polares y básicos, se utilizaron columnas de cartucho Biotage KP-NH SNAP (11 g).
Espectroscopia de RMN
Se registraron los espectros de 1H RMN a temperatura ambiente utilizando un espectrómetro Bruker Avance (300 MHz), Bruker Avance III (400 MHz) o Bruker Ascend (500 MHz). Todos los desplazamientos químicos (8) se expresan en ppm. Se usaron las señales de solventes residuales como estándar interno y se corrigieron los picos de solventes característicos a los datos de referencia descritos en J. Org. Chem., 1997, 62, págs. 7512-7515; en otros casos, los solventes de RMN contenían tetrametilsilano, que se utilizó como estándar interno.
Espectrometría de Masas por Cromatografía Líquida (LCMS)
Se realizaron los experimentos de espectrometría de masas de cromatografía líquida (LCMS) para determinar los tiempos de retención (Rt) y los iones de masa asociados utilizando el siguiente método:
Método A: El sistema consistia en un espectrómetro de masas de cuadrupolo Agilent Technologies 6130 conectado a un sistema LC Agilent Technologies 1290 Infinity con detector de matriz de diodos UV y muestreador automático. El espectrómetro consistia en una fuente de ionización por electropulverización que funcionaba en modo de iones positivos y negativos. Los experimentos LCMS se realizaron en cada muestra enviada utilizando las siguientes condiciones: Columna de LC: Agilent Eclipse Plus C18 RRHD, 1.8 pm, 50 x 2.1 mm mantenido a 40 °C. Fases móviles: A) ácido fórmico al 0.1% (v/v) en agua; B) ácido fórmico al 0.1 % (v/v) en acetonitrilo.
Tiempo de gradiente (min) Flujo (mL/min) %A %B
0.00 0.5 80 20
1.80 0.5 0 100
2.20 0.5 0 100
2.50 0.5 80 20
3.00 0.5 80 20
Método B: El sistema consistia en un espectrómetro de masas de un solo cuadrupolo Agilent Technologies 6140 conectado a un sistema LC Agilent Technologies 1290 Infinity con detector de matriz de diodos UV y muestreador automático. El espectrómetro consistia en una fuente de ionización multimodo (ionizaciones químicas por electropulverización y presión atmosférica) que funcionaba en modo de iones positivos y negativos. Los experimentos LCMS se realizaron en cada muestra enviada utilizando las siguientes condiciones: Columna de LC: Zorbax Eclipse Plus C18 RRHD, 1.8 pm, 50 x 2.1 mm mantenido a 40 °C. Fases móviles: A) ácido fórmico al 0.1 % (v/v) en agua; B) ácido fórmico al 0.1 % (v/v) en acetonitrilo.
Tiempo de gradiente (min) Flujo (mL/min) %A %B
0.00 1.0 95 5
1.80 1.0 0 100
2.20 1.0 0 100
2.21 1.0 95 5
2.50 1.0 95 5
Método C: El sistema consistía en un espectrómetro de masas de un solo cuadrupolo Agilent Technologies 6140 conectado a un sistema LC Agilent Technologies 1290 Infinity con detector de matriz de diodos UV y muestreador automático. El espectrómetro consistia en una fuente de ionización multimodo (ionizaciones químicas por electropulverización y presión atmosférica) que funcionaba en modo de iones positivos y negativos. Los experimentos LCMS se realizaron en cada muestra enviada utilizando las siguientes condiciones: Columna de LC: Phenomenex XB-C18, 1.7 |jm, 50 mm x 2.1 mm mantenido a 40 °C. El gradiente estandarizado fue 2-98 % de acetonitrilo de grado HPLC con ácido fórmico al 0.1 % (solvente B) en agua de grado HPLC con ácido fórmico al 0.1 % (solvente A) durante 7 min, y se mantuvo en 98 % B durante 1.5 min después del equilibrio durante 1.5 mín.
Cromatografía Líquida de Alta Presión Preparativa
Método A: Este sistema consistia en un espectrómetro de masas de un solo cuadrupolo Agilent Technologies 6120 conectado a un sistema LC preparativo Agilent Technologies 1200 con detector de múltiples longitudes de onda y automuestreador. El espectrómetro de masas utilizaba una fuente de ionización multimodo (ionizaciones químicas por presión atmosférica y electropulverización) que funcionaba en modo de iones positivos y negativos. La recolección de fracciones se activó en masa (ion positivo y negativo multimodo). Los experimentos de purificación, a menos que se indique lo contrario, se realizaron bajo condiciones básicas en un gradiente de solvente apropiado que normalmente se determinaba por el tiempo de retención encontrado utilizando el método LCMS. En los casos en que las condiciones básicas no tuvieron éxito, se emplearon condiciones ácidas.
Condiciones básicas: Columna de LC: Waters XBridge™ Prep C18 5 jm OBDTM 19 x 50 mm columna a TA. Fase móvil: A) hidróxido de amonio al 0.1 % (v/v) en agua; B) hidróxido de amonio al 0.1 % (v/v) en acetonitrilo/agua 95:5. El tiempo total del experimento fue aproximadamente 10 min y se da un método de ejemplo:
Tiempo de gradiente (min) Flujo (mL/min) %A %B
0.00 20.0 50 50
3.00 20.0 12 88
5.00 20.0 12 88
7.00 20.0 0 100
8.0 20.0 0 100
8.20 20.0 50 50
Condiciones ácidas: Columna de LC: Waters XBridge™ Prep C185 jm OBDTM 19 x 50 mm columna a TA. Fase móvil: A) Agua 0.1 % (v/v) de ácido fórmico en agua; B) ácido fórmico al 0.1 % (v/v) en acetonitrilo/agua 95:5. El tiempo total del experimento fue aproximadamente 10 min y se da un método de ejemplo:
Tiempo de gradiente (min) Flujo (mL/min) %A %B
0.00 20.0 95 5
7.00 20.0 0 100
Tiempo de gradiente (min) Flujo (mL/min) %A %B
9.00 20.0 0 100
9.20 20.0 95 5
Método B: Este sistema consistía en un Waters Autopurification HPLC/MS, con una columna Gemini NX-C18 de Phenomenex, 5 |jm, 50 mm x 30 mm de d.i., funcionando a un caudal de 60 ml/min, 25 °C con detección de arreglo de diodos UV (210-400 nm) y recolección dirigida a masas. Un gradiente típico era 5-50 % de acetonitrilo de calidad HPLC (fase móvil B) en solución de amoníaco al 0.1 % (v/v) agua de calidad HPLC (fase móvil A) durante 10 min, o modificado según fuera necesario. El espectrómetro de masas utilizado fue un espectrómetro Waters Micromass ZQ2000, que funciona en modos de ionización por electropulverización de iones positivos o negativos, con un intervalo de barrido de peso molecular de 150 a 1000.
Las fracciones puras se combinaron y concentraron utilizando un Genevac EZ-2 Elite, a menos que se indique lo contrario.
Cromatografía de Fluidos Supercríticos (SFC)
Se realizó la separación quiral mediante SFC. Se realizaron las separaciones utilizando un PIC Solution Inc SFC-PICLab PREP 100, con una columna Chiralcel OX de Daicel, 5 jm , 150 mm x 21 mm d.i., funcionando a un caudal de 70 mL/min, 40 °C y 100 bar, fracción recolectada utilizando detección de matriz de diodos UV (210-400 nm). Una separación típica usó elución isocrática con metanol de calidad HPLC al 40 % que contenía hidróxido de amonio al 0,1 % (solvente B) en dióxido de carbono supercrítico (solvente A) y un tiempo de ejecución de 6 min, o se modificó según fuera necesario. Se determinó el exceso enantiomérico mediante cromatografía SFC analítica. Se realizaron los análisis se realizaron con un instrumento Waters UPC2, con una columna Chiralcel OX de Daicel, 3 jm , 50 mm x 4.6 mm d.i., funcionando a un caudal de 4.0 ml/min, 40 °C y 105 bar. Un análisis típico utilizó elución isocrática con metanol de calidad HPLC al 45 % que contenía hidróxido de amonio al 0.1 % (solvente B) en dióxido de carbono supercrítico (solvente A) y un tiempo de ejecución de 2.5 min, o se modificó según fuera necesario.
Espectrometría de Masas (MS)
Se recogieron los espectros de masas utilizando un espectrómetro Waters Micromass ZQ2000, que funciona en modos de ionización por electropulverización (ESI) de iones positivos o negativos, con un intervalo de barrido de peso molecular de 150 a 1000.
Nomenclatura
A menos que se indique lo contrario, se determinó la nomenclatura de estructuras utilizando la función 'Convertir Estructura en Nombre' de ChemBioDraw Ultra 12.0.2 para los Ejemplos 1-234 o ChemDraw Professional 15.1.0 para los Ejemplos 235-245 (CambridgeSoft/PerkinElmer).
Procedimientos Generales
Procedimiento 1 General: Apertura de epóxido con una pirimidinona
Se calentó una suspensión de pirimidinona (1 equiv.), epóxido (1-3 equiv.) y Cs2CO3 (1-3 equiv.) en DMF a 80 °C durante 10-24 h. Luego, la reacción se enfrió a t A, se añadióNH4Cl(ac) saturado y se extrajo la mezcla con DCM (x3) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage KP-Sil y KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano o PE, luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el producto.
Procedimiento 2 General: Desprotección N-Boc
Se agitó una solución de la N-Boc piperidina en DCM/TFA durante 1-24 h antes de concentrarla. Luego, el residuo se disolvió en trietilamina y DCM antes de purificarse en una columna Biotage KP-NH (EtOAc al 0-100 % en ciclohexano o PE, luego MeOH al 0-30 % en EtOAc o DCM al 0-100 % en ciclohexano o PE, luego MeOH al 0-30 % en DCM) para dar el producto.
Procedimiento 3 General: Acoplamiento EDC
Se agitó una solución de amina (1 equiv.), ácido carboxílico (1 equiv.) y EDC (3 equiv.) en (DCM) durante 1-24 h. Se inactivó la reacción mediante la adición de agua y se extrajo la mezcla resultante con DCM (x3) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage KP-Sil y KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano o Pe , luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el producto.
Procedimiento 4 General: Acoplamiento HATU en DCM
Se añadió a una suspensión de la amina (1 equiv.), ácido carboxílico (1,5 equiv.) y HATU (1,5 equiv.) en DCM, DIPEA (4 equiv.). Se agitó la reacción durante 1-24 h antes de inactivarse mediante la adición de NaHCO3(ac) saturado y se extrajo la mezcla resultante con DCM (x3) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage KP-Sil y KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano o PE, luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el producto.
Procedimiento 5 General: Acoplamiento suzuki
Se cargó un vial de reacción con una mezcla del bromuro (1 equiv.), el reactivo de organoboro (1-3 equiv.), un catalizador de Pd (0,05-0,1 equiv.) y una base inorgánica (2-5 equiv.) en 1,4-dioxano/agua o DME/agua y el O2 se eliminó evacuando y rellenando con N2 tres veces antes de sellar el tubo de reacción. Se calentó la reacción bajo las condiciones indicadas durante el tiempo indicado antes de enfriarse a TA y se añadió NH4Cl(ac) saturado. A continuación, se extrajo la mezcla con DCM (x3) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage KP-Sil y KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano o PE, luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el producto.
Procedimiento 6 General: Acoplamiento Sonagashira
Se cargó un tubo de reacción con el bromuro (1 equiv.), un catalizador de Cu (0,2-0,4 equiv.) y un catalizador de Pd (0,1-0,2 equiv.) y luego se evacuó y se rellenó con N23 veces. A esto se le añadió tolueno, trietilamina (20-40 equiv.) y luego el alquino (1-4 equiv.) antes de que la mezcla se evacuara nuevamente y se volviera a llenar con N23 veces. Se selló el tubo de reacción y la reacción se calentó bajo las condiciones indicadas. Se enfrío la reacción a temperatura ambiente y se inactivo mediante la adición de NH 4Cl(ac) saturado. Se extrajo la mezcla con DCM (x 3) utilizando un separador de fases Biotage, se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificaron los productos mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage KP-Sil y KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano o PE, luego MeOH al 0-30% en EtOAc) para dar el producto.
Procedimiento 7 General: Desprotección de N-Cbz
Se calentó una suspensión del compuesto N-Cbz (1 equiv.), Pd al 10 % sobre carbón (0.1 equiv.) y formiato de amonio (10-30 equiv.) en EtOH a reflujo durante el tiempo indicado antes de que se enfriara la mezcla de reacción a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH y filtrado a través de Dicalite®. Se lavaron los sólidos con MeOH (x3), se concentraron los filtrados combinados y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-30 % en DCM) para dar el producto.
Procedimiento 8 General: Método A de SNAr para la biblioteca monociclo
Se calentó una mezcla de 6-cloro-3-[[4-hidroxi-1-[(3R)-3-fenilbutanoil]-4-piperidil]metil]pirimidin-4-ona, Producto Intermedio A (30.0 mg, 0.0769 mmol) y amina seleccionada (10 equiv.) [por ejemplo, para el Ejemplo 140, D-prolinol (77.8 mg, 0.769 mmol)] en 1,4-dioxano (2.6 mL) con radiación de microondas a 150 °C durante 45 min. Después de enfriar, se concentró la mezcla de reacción in vacuo, se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (por ejemplo, para el Ejemplo 140, MeOH al 0-100 % en acetato de isopropilo), seguido de HPLC preparativa (Método B) para proporcionar el producto (por ejemplo, para el Ejemplo 140, 36 % de rendimiento).
Procedimiento 9 General: Método B de SNAr para biblioteca monociclo
Se calentó una mezcla de 6-cloro-3-[[4-hidroxi-1-[(3R)-3-fenilbutanoil]-4-piperidil]metil]pirimidin-4-ona, Producto Intermedio A (33.3 mg, 0.0854 mmol) y amina seleccionada (aprox. 5 equiv.) [por ejemplo, para el Ejemplo 144, piperidin-4-ol (48.8 mg, 0.482 mmol) en 1,4-dioxano (2,0 ml) en un recipiente sellado a 100 °C durante 14 h, se dejó enfriar y se concentró in vacuo. Se purificó el residuo crudo por HPLC preparativa (Método B) para dar el producto (por ejemplo, para el Ejemplo 144, 54 % de rendimiento).
Procedimiento 10 General: Método C de SNAr para biblioteca monociclo
Se calentó una mezcla de 6-cloro-3-[[4-hidroxi-1-[(3R)-3-fenilbutanoil]-4-piperidil]metil]pirimidin-4-ona, Producto Intermedio A (30 mg, 0.077 mmol), DIPEA (50 uL, 0.29 mmol) y amina seleccionada (2 equiv.) en 1,4-dioxano (0.8 ml) en un recipiente sellado a 100 °C durante 16 h, se dejó enfriar y se concentró in vacuo. Se purificó el residuo bruto por HPLC preparativa (Método B) para dar el producto.
Procedimiento 11 General: Acoplamiento HATU en DMF
Se le añadió a una suspensión de la amina (1 equiv.), ácido carboxílico (1.5 equiv.) y HATU (1.25 equiv.) en DMF DIPEA (3 equiv.). Se agitó la reacción durante 1-24 h antes de inactivarla mediante la adición de solución saturada de bicarbonato de sodio (ac) y se extrajo la mezcla resultante con DCM (x3) utilizando un separador de fases Biotage. Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron (Na2SO4), se eliminaron los solventes in vacuo. Se purificó el residuo restante mediante HPLC preparativa (Método B), seguido de SFC utilizando una columna de fase inversa, si se requería, para producir el producto.
Epóxido 1: tert-Butil 1-oxa-6-azaspiro[2.5]octano-6-carboxilato
Figure imgf000029_0001
Disponible comercialmente o hecho de acuerdo con una variación de un procedimiento de la literatura (J.Med. Chem.
2008, 51, 2170): Se le añadió a una suspensión de yoduro de trimetilsulfoxonio (22,5 g, 102 mmol) en DME (100 mL) en un matraz de fondo redondo de 3 bocas de 250 mL bajo N2 , KOt-Bu (12.5 g, 111 mmol). Después de 30 min esta suspensión se enfrió a 0 °C y se añadió gota a gota una solución de terf-butil4-oxopiperidin-1-carboxilato (20 g, 100 mmol) en DME (20 mL) desde un embudo de goteo de presión igualada durante 45 min. A continuación, se dejó calentar la reacción a temperatura ambiente durante 16 h antes de apagarse mediante la adición de agua (150 mL). Se extrajo la mezcla con Et2O (3 x 100 mL), se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO4 y se eliminaron los volátiles in vacuo. Luego se agregó tolueno (50 mL) al aceite resultante y se eliminaron los volátiles in vacuo para dar Epóxido 1 (16.5 g, 83 % de rendimiento) como un sólido incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 83.81-3.58 (m, 2H), 3.40 (ddd, 2H), 2.67 (s, 2H), 1.78 (ddd, 2H), 1.56-1.30 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).
Epóxido 2: (R)-3-Fenil-1-(1-oxa-6-azaspiro[2.5]octan-6-il)butan-1-ona
Figure imgf000029_0002
Paso 1: (R)-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-ona: Se añadió al clorhidrato de piperidin-4-ona recién preparado (PCT Int. Solicitud, 2011084402, 14 de julio de 2011) (1.70 g, 12.6 mmol), EDC (2.89 g, 15.1 mmol), DMAP (153 mg, 1.26 mmol), DCM (15 mL) y DIPEA (11 mL, 62.7 mmol). Después de 10 min se añadió una solución de ácido (R)-3-fenilbutanoico (2.47 g, 15.1 mmol) en DCM (10 mL). Después de 20 h, se añadió EDC (2.89 g, 15.1 mmol) y se agitó la reacción durante 4 h más antes de parar la reacción mediante la adición de NaHCO3(ac) saturado (150 mL). Luego, se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 50 mL), se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (50 mL), luego salmuera (50 mL), se secaron sobre MgSO4, se concentró y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (50 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-60 % en PE) para dar (R)-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-ona (2.93 g, 95 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.07 min, m/z = 246 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 87.44-7.13 (m, 5H), 4.30-4.03 (m, 1H), 3.77-3.58 (m, 1H), 3.46 (tdd, 2H), 3.11-2.93 (m, 2H), 2.82-2.61 (m, 4H), 1.86 (m, 1H), 1.77-1.62 (m, 1H), 1.54­ 1.33 (m, 2H).
Paso 2: (R)-3-Fenil-1-(1-oxa-6-azaspiro[2,5]octan-6-il)butan-1-ona (Epóxido 2): Se añadió a una solución de yoduro de trimetilsulfonio (6.09 g, 29.9 mmol) en d Ms O (30 mL), NaH (1.19 g, 29.9 mmol). Se agitó la mezcla resultante a TA durante 1 h antes de agregar una solución de (R)-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-ona (2.93 g, 11.9 mmol) en DMSO (15 mL). Se agitó la mezcla de reacción a 50 °C durante 2 h antes de que se enfriara a temperatura ambiente y se inactivó mediante la adición de agua (100 mL) y se extrajo la mezcla con Et2O (3 x 50 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 , se concentraron y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-70 % en PE) para dar Epóxido 2 (2.68 g, 87 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.16 min, m/z = 260 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 87.43-7.14 (m, 5H), 4.30-3.95 (m, 1H), 3.69-3.18 (m, 4H), 2.84-2.47 (m, 4H), 1.87-1.66 (m, 2H), 1.51-1.31 (m, 2H), 1.37 (d, 3H).
Epóxido 3: 3-Fenil-1-(1-oxa-6-azaspiro[2,5]octan-6-il)propan-1-ona
Figure imgf000029_0003
Paso 1: 1-(3-Fenilpropanoil)piperidin-4-ona: Se añadió a una solución de tert-butil 4-oxopiperidin-1-carboxilato (5 g, 25.1 mmol) en DCM (25 mL),TFA (9.67 ml, 125 mmol). Se agitó La mezcla resultante a Ta durante 24 h antes de eliminar el solvente in vacuo y se secó el producto a alto vacío. Se añadió gota a gota a una suspensión agitada de la sal de TFA en DCM seco (125 mL) bajo N2 , DIPEA (13.2 ml, 75.0 mmol) durante 5 min antes de añadir ácido 3-fenilpropanoico (4.52 g, 30.1 mmol), se añadieron Ed C (6.26 g, 32.6 mmol) y DMAP (0.307 g, 2.510 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a TA durante 18 h antes de diluirla con DCM (150 mL) y se lavó con NaHCO3 saturado (250 mL). Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa adicionalmente con DCM (75 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con HCl(ac) al 3% (150 mL), luego salmuera (150 mL) y se secó utilizando un separador de fases Biotage. A continuación, se concentró la solución resultante y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (100 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-100 % en PE) para dar el producto como un aceite incoloro. 1H RMN (300 Mh z , CDCla): 87.51-6.98 (m, 5H), 3.89 (t, 2H), 3.66 (t, 2H), 3.04 (t, 2H), 2.73 (t, 2H), 2.44 (t, 2H), 2.26 (t, 2H).
Paso 2: 3-Fenil-1-(1-oxa-6-azaspiro[2.5]octan-6-il)propan-1-ona (Epóxido 3): Se añadió a una solución de yoduro de trimetilsulfonio (4.59 g, 22.5 mmol) en Dm SO seco (20 mL), NaH (0.899 g, 22.5 mmol). Se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 1 h antes de agregar una solución de 1-(3-fenilpropanoil)piperidin-4-ona (2.08 g, 8.99 mmol) en DMSO seco (10 mL). Se agitó la mezcla de reacción a 50 °C durante 2 h antes de que se enfriara a temperatura ambiente y se inactivó mediante la adición de agua (100 mL) y se extrajo la mezcla con Et2O (3 x 50 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y se purificó el producto por cromatografía ultrarrápida (50 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-60 % PE) para dar Epóxido 2 (1.41 g, 64 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.07 min, m/z = 246 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 87.44-7.13 (m, 5H), 4.30-4.03 (m, 1H), 3.77-3.58 (m, 1H), 3.46 (tdd, 2H), 3.11-2.93 (m, 2H), 2.82-2.61 (m, 4H), 1.86 (m, 1H), 1.77­ 1.62 (m, 1H), 1.54-1.33 (m, 2H).
Epóxido 4: Bencil 1-oxa-6-azaspiro[2.5]octano-6-carboxilato
Figure imgf000030_0001
Se añadió a una suspensión de yoduro de trimetilsulfoxonio (11.7 g, 53.0 mmol) en DME (50 mL) bajo N2 ,KOt-Bu (6.49 g, 57.8 mmol). Después de 30 min, se enfrió esta suspensión a 0 °C y se añadió gota a gota una solución de bencil 4-oxopiperidin-1-carboxilato (11.2 g, 48.2 mmol) en d Me (20 mL) durante 45 min. Se dejó calentar la reacción a TA durante 16 h antes de apagarse mediante la adición de agua (150 mL). A continuación, se extrajo la mezcla con Et2O (3 x 100 mL), se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO4 y los volátiles se eliminaron in vacuo. Se le añadió al aceite resultante tolueno (50 mL) y se eliminaron los volátiles in vacuo para dar bencil 1-oxa-6-azaspiro[2,5]octano-6-carboxilato(9.00 g, 76 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 87.41-7.28 (m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.93-3.75 (m, 2H), 3.55-3.39 (m, 2H), 2.71 (s, 2H), 1.93-1.73 (m, 2H), 1.53­ 1.37 (m, 2H).
Ejemplo 1: (R)-6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona (Producto Intermedio A)
Figure imgf000030_0002
Se calentó una suspensión de 6-cloropirimidin-4(3H)-ona (Patente de EE. UU. Solicitud Publ., 20090149466, 11 de junio de 2009) (200 mg, 1.53 mmol), Epóxido 2 (397 mg, 1.53 mmol) y DIPEA (401 pl, 2.30 mmol) en DMF (3 mL) a 80 °C durante 16 h. A continuación, se dejó enfriar la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se inactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (20 mL). Se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 20 mL), se secaron los extractos orgánicos combinados sobre Na2SO, se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (25 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (350 mg, 59 %) como un sólido pálido amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.11 min, m/z = 390, 392 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 88.28 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.24 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.38-7.13 (m, 5H), 6.58 (s, 1H), 4.27-4.09 (m, 1H), 4.00 (dd, 0.8H (confórmero A)), 3.84 (dd, 1.2H (confórmero B)), 3.74-3.57 (m, 1H), 3.39-2.86 (m, 3H), 2.86-2.67 (m, 1H), 2.66­ 2.43 (m, 1H), 1.66-1.20 (m, 7H), 0.93-0.79 (m, 0.6H (confórmero B solamente )).
Ejemplo 2: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(piridin-4-il)pirimidin-4(3H)-ona Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), ácido piridin-4-ilborónico (12 mg, 0.096 mmol), Na2CO3 (14 mg, 0.128 mmol), Pd (PPh3)4 (3.7 mg, 3.21 |jmol), 1,4-dioxano (0,4 mL) y agua (0.16 mL) en un tubo sellado bajo calentamiento por microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (24 mg, 86 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.81 min, m/z= 433 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 88.76-8.62 (m, 2H), 8.23 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.13 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.83-7.71 (m, 2H), 7.40-7.13 (m, 5H), 6.95 (s, 1H), 4.49-4.23 (m, 1H), 4.21-3.80 (m, 3H), 3.67-3.47 (m, 1H), 3.44-2.87 (m, 3H), 2.72-2.59 (m, 1H), 2.59-2.42 (m, 1H), 1.68-1.21 (m, 7h ), 0.94-0.71 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 3: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(1H-pirazol-5-il)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000031_0001
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), ácido (1H-pirazol-5-il)borónico (11 mg, 0.096 mmol), Na2CO3 (14 mg, 0.128 mmol), Pd (PPh3)4 (3.7 mg, 3.21 jmol), 1,4-dioxano (0,4 mL) y agua (0.16 ml) en un tubo sellado bajo calentamiento por microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (19 mg, 70 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.921 min, m/z= 422 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 88.28 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.18 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.65-7.56 (m, 1H), 7.37-7.14 (m, 5H), 7.05-6.92 (m, 1H), 6.81-6.71 (m, 1H), 4.44­ 4.20 (m, 1H), 4.21-3.79 (m, 2H), 3.65-2.86 (m, 4H), 2.71-2.57 (m, 1H), 2.57-2.41 (m, 1H), 1.63-1.21 (m, 7H), 0.90-0.73 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 4: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(fenilamino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000031_0002
Se calentó una solución del Producto Intermedio A (30 mg, 0.08 mmol) en anilina (175 jL , 1.92 mmol) bajo condiciones de microondas a 130 °C durante 1 h y se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en Pe y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (22 mg, 64 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.20 min, m/z= 447 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.23 (d, 0.4H (confórmero A)), 8.08 (d, 0.6H (confórmero B)), 7.43-6.92 (m, 10H), 6.56 (s, 0.4H (confórmero A)), 5.65 (s, 0.6H (confórmero B)), 4.26-3.51 (m, 4H), 3.35-2.85 (m, 3H), 2.85-2.65 (m, 1H), 2.64-2.41 (m, 1H), 1.63-1.20 (m, 7H), 0.95­ 0.73 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 5: (R)-6-Amino-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000031_0003
Se calentó una solución del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol) en NH 6 M3 en MeOH (0,5 ml, 3,00 mmol) bajo condiciones de microondas a 120 °C durante 20 min antes de que se concentrara la mezcla de reacción y se purificara el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (16 mg, 67 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.82 min, m/z = 371 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.77 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.66 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.16 (m, 5H), 5.48-5.42 (m, 1H), 4.80 (br s, 2H), 4.50-4.30 (m, 1H), 4.03-3.17 (m, 6 H), 3.07-2.82 (m, 1H), 2.72-2.58 (m, 1H), 2.57­ 2.42 (m, 1H), 1.78-1.11 (m, 7H), 0.63-0.49 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 6: (R)-6-((2-(Dimetilamino)etil)amino)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000032_0001
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), N,N dimetiletilendiamina (85 mg, 0.962 mmol) y etanol (0.5 mL) bajo condiciones de microondas a 120 °C durante 20 min y se purificó la mezcla de reacción por cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (22 mg, 78 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.60 min, m/z = 442 [M+H]+.
1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.71 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.60 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.36-7.15 (m, 5H), 5.68-5.58 (m, 1H), 5.29-5.23 (m, 1H), 4.49-4.32 (m, 1H), 4.00-3.48 (m, 3H), 3.43-3.07 (m, 4H), 3.05-2.84 (m, 1H), 2.71-2.59 (m, 1H), 2.56­ 2.42 (m, 3H), 2.25 (s, 6 H), 1.61-1.11 (m, 7H), 0.62-0.49 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 7: (R)-6-((2-(Dimetilamino)etil)(metil)amino)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000032_0002
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), N,N,N-trimetiletilendiamina (0.083 mL, 0.641 mmol) y 1,4-dioxano (0.5 mL) bajo condiciones de microondas a 150 °C durante 15 min y se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en p E y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (24 mg, 82 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.64 min, m/z= 456 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente) : 8 7.74 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.63 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.36-7.15 (m, 5H), 5.38-5.30 (m, 1H), 4.50-4.33 (m, 1H), 4.00-3.17 (m, 8 H), 3.08-2.84 (m, 4H), 2.72-2.59 (m, 1H), 2.57-2.40 (m, 3H), 2.28 (d, 6 H), 1.62-1.10 (m, 7H), 0.63-0.50 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 8 : (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(4-metilpiperazin-1-il)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000032_0003
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (27 mg, 0.069 mmol), 1-metilpiperazina (77 pL, 0.693 mmol) y 1,4-dioxano (0.5 mL) bajo condiciones de microondas a 150 °C durante 15 min y se purificó la mezcla de reacción por cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (28 mg, 89 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.67 min, m/z= 454 [M+H]+.
1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.78 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.67 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.14 (m, 5H), 5.50-5.40 (m, 1H), 5.00 (br s, 1H), 4.50-4.30 (m, 1H), 4.03-3.17 (m, 9H), 3.06-2.83 (m, 1H), 2.73-2.58 (m, 1H), 2.56-2.28 (m, 8 H), 1.61­ 1.10 (m, 7H), 0.68-0.52 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 9: (R)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-metoxipirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000032_0004
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol) y metóxido de sodio (35 mg, 0.641 mmol) en MeOH (0.5 mL) bajo microondas a 150 °C durante 15 min y se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (14 mg, 56 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.96 min, m/z= 386 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.94 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.82 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.38-7.16 (m, 5H), 5.76 (s, 1H), 4.49-3.69 (m, 5H), 3.66-2.82 (m, 6 H), 2.72-2.58 (m, 1H), 2.57-2.42 (m, 1H), 1.70-1.16 (m, 7H), 0.64-0.50 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 10:
Figure imgf000033_0001
-ona
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol) y 2-(dimetilamino)etanol (200 pL, 1.99 mmol) bajo condiciones de microondas a 150 °C durante 15 min y la mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (17 mg, 59 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.58 min, m/z= 443 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 7.95 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.83 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.16 (m, 5H), 5.78 (s, 1H), 4.47-4.23 (m, 3H), 4.11-4.02 (m, 0.6 (confórmero B solamente), 3.90-3.69 (m, 1.4H (0.4H = confórmero A)), 3.64-3.49 (m, 1H), 3.42-3.16 (m, 2H), 3.10-2.85 (m, 1H), 2.75-2.58 (m, 3H), 2.56-2.42 (m, 1H), 2.32 (d, 6 H), 1.58-1.16 (m, 7H), 0.68-0.52 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 11: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000033_0002
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), 2-(pirrolidin-1-il)etanamina (81 pL, 0.641 mmol) y 1,4-dioxano (0,5 mL) bajo condiciones de microondas a 150 °C durante 15 min y se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (22 mg, 73 %) como un sólido incoloro LCMS (Método A): Rt = 0.61 min, m/z= 468 [m H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 7.69 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.58 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.15 (m, 5H), 5.31-5.23 (m, 1H), 5.12 (s, 0.6H (confórmero B)), 4.94 (s, 0.4H (confórmero A)), 4.51-4.33 (m, 1H), 3.99-3.09 (m, 8 H), 3.06-2.83 (m, 1H), 2.77-2.58 (m, 3H), 2.57-2.41 (m, 5H), 1.85-1.08 (m, 10H), 0.96-0.83 (m, 0.4H (confórmero A)), 0.60-0.46 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 12: 6-((S)-3-Aminopirrolidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000033_0003
Paso 1: tert-Butil ((S)-1-(1-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il)pirrolidin-3-il)carbamato: Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), (S)-ferf-butilpirrolidin-3-ilcarbamato (119 mg, 0.641 mmol) y 1,4-dioxano (0,5 mL) bajo condiciones de microondas a 150 ° C durante 75 min y se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (24 mg, 69 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.23 min, m/z= 540 [M+H]+.
Paso 2: 6-((S)-3-Aminopirrolidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 2 General utilizando tert-butil ((S)-1-(1-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il)pirrolidin-3-il)carbamato (24 mg, 0.048 mmol), TFA (0.5 mL) y DCM (05 mL) dio el compuesto del título (19 mg, 90 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.60 min, m/z = 440 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 7.75 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.65 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.40-7.16 (m, 5H), 5.21 (s, 1H), 4.50-4.32 (m, 1H), 4.03-3.17 (m, 11H), 3.05-2.83 (m, 1H), 2.72-2.58 (m, 1H), 2.57-2.42 (m, 1H), 2.29-2.08 (m, 1H), 1.91-1.70 (m, 1H), 1.69-1.10 (m, 9H), 0.64-0.50 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 13: (R)-6-(3-Aminoazetidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-vi)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000034_0001
Paso 1: (R)-tert-Butil (1-(1-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-6-oxo-1,6-dihidropirímidin-4-il)azetidina -3-il)carbamato: Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), tert-butil azetidin-3-ilcarbamato (110 mg, 0.641 mmol) y 1,4-dioxano (0.5 mL) bajo condiciones de microondas a 150 °C durante 15 min y se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP -NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (24 mg, 71 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.19 min, m/z= 526 [M+H]+.
Paso 2: (R)-6-(3-Aminoazetidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 2 General utilizando (R)-tert-butil (1-(1-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-4-il)azetidin-3-il) carbamato (21 mg, 0.040 mmol), TFA (0.5 mL) y DCM (0.5 mL) dio el compuesto del título (14 mg, 82 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.56 min, m/z= 426 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.75 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.65 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.38-7.15 (m, 5H), 5.15-5.05 (m, 1H), 4.50-4.19 (m, 3H), 4.00­ 3.17 (m, 9H), 3.05-2.83 (m, 1H), 2.72-2.58 (m, 1H), 2.58-2.42 (m, 1H), 1.93-1.10 (m, 9H), 0.63-0.49 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 14: (R)-5-Amino-6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000034_0002
Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 2 (100 mg, 0.386 mmol), 5-amino-6-cloropirimidin-4(3H)-ona (56 mg, 0.386 mmol), DIPEA (101 |jL, 0.578 mmol) y DMF (0.8 mL) dio el compuesto del título (90 mg, 46 %) como una espuma incolora. LCMS (Método A): Rt = 1.03 min, m/z = 405, 407 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.57 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.46 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.14 (m, 5H), 4.45-4.21 (m, 3H), 4.11-3.70 (m, 3H), 3.63-3.45 (m, 1H), 3.40-3.12 (m, 2H), 3.08-2.83 (m, 1H), 2.71-2.58 (m, 1H), 2.57-2.40 (m, 1H), 1.60-1.20 (m, 7H), 0.75-0.60 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 15: (R)-1-((-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-metil-1H-purin-6(9H)-ona
Figure imgf000034_0003
Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 2 ( 8 6 mg, 0.333 mmol), 9-metil-1 H-purin-6(9H)-ona (J. Am. Chem. Soc.
1957, 79, 490) (50 mg, 0.333 mmol), Cs2CO3 (163 mg, 0.500 mmol) y DMF (0.7 mL) dio el compuesto del título (63 mg, 46 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.85 min, m/z= 410 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.22 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.11 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.74 (s, 1H), 7.38-7.12 (m, 5H), 4.58-4.01 (m, 4H), 3.77 (s, 3H), 3.65­ 3.48 (m, 1H), 3.41-3.18 (m, 2H), 3.10-2.86 (m, 1H), 2.69-2.41 (m, 2H), 1.65-1.23 (m, 7H), 1.01-0.85 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 16: (R)-1-((-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)rnet¡l)-9-rnetil-8-fen¡l-1/-/-pur¡n-6(9/-/)-ona
Figure imgf000034_0004
Paso 1: 8-Bromo-9-metil-1H-purin-6(9H)-ona: Se añadió gota a gota a una suspensión agitada de 9-metil-1 H-purin-6(9H)-ona (190 mg, 1.27 mmol) en AcOH (1.3 mL) en un tubo de reacción, Br2 (196 j L, 3.80 mmol). Luego, se selló el tubo de reacción y se calentó la mezcla a 95 °C durante 16 h antes de que se enfriara la reacción a temperatura ambiente. Luego, se le agregó a esta mezcla MeOH (7 mL) y Et2O (7 mL). Se recogió ll precipitado resultante por filtración, se lavó con Et2O y seco in vacuo para dar el compuesto del título (246 mg, 85 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 0.38 min, m/z= 229, 231 [M+H]+.
Paso 2: (R)-8-Bromo-1-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-9-metil-1H-purín-6(9H)-ona: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 2 (45 mg, 0.175 mmol), 8-bromo-9-metil-1H-purin-6(9H)-ona (40 mg, 0.175 mmol), Cs2CO3 (85 mg, 0.262 mmol) y DMF (0.35 mL) dio el compuesto del título (55 mg, 64 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.02 min, m/z= 488, 490 [M+H]+.
Paso 3: (R)-1-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-metil-8-fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Procedimiento 5 General utilizando (R)-8-bromo-1-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-metil-1H-purin-6(9H)-ona (57 mg, 0.117 mmol), ácido fenilborónico (43 mg, 0.350 mmol), K3 PO4 (74 mg, 0.350 mmol), Pd(PPh3)4 (13.5 mg, 0.012 mmol), 1,4-dioxano (0.9 mL) y agua (0.23 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (46 mg, 81 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.17 min, m/z= 486 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente)^ 8.14 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.01 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.86-7.73 (m, 2H), 7.61-7.45 (m, 3H), 7.41-7.12 (m, 5H), 4.42-3.94 (m, 3H), 3.85 (d, 3H), 3.66-2.84 (m, 5H), 2.71-2.40 (m, 2H), 1.65-1.24 (m, 7H), 0.97-0.78 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 17: (R)-1-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona
Figure imgf000035_0001
Paso 1: 9-Fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Se calentó una solución de 6-cloro-W4-fenilpirimidin-4,5-diamina (J. Combinatorial Chem. 2003, 5, 653) (250 mg, 1.133 mmol) y ácido fórmico (1.78 mL, 46.5 mmol) a reflujo durante 8 h. A continuación, se concentró la solución y se añadió NH4OH al residuo hasta que se alcanzó un pH = 10. Se recogió el producto bruto y se recristalizó en agua para dar el compuesto del título como agujas incoloras (127 mg, 53 %). LCMS (Método A): Rt = 0.63 min, m/z= 213 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 8 8.48 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.82-7.73 (m, 2H), 7.65­ 7.54 (m, 2H), 7.53-7.44 (m, 1H).
Paso 2: (R)-1-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 2 (61 mg, 0.236 mmol), 9-fenil-1 H-purin-6(9H)-ona (50 mg, 0.236 mmol), Cs2CO3 (115 mg, 0.353 mmol) y DMF (0.5 mL) dio el compuesto del título (61 mg, 55 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.15 min, m/z= 472 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente) : 8 8.20 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.09 (s, 0.6H (confórmero B)), 8.00 (s, 1H), 7.63­ 7.41 (m, 5H), 7.36-7.12 (m, 5H), 4.41-3.95 (m, 3H), 3.64-3.50 (m, 1H), 3.39-2.89 (m, 3H), 2.69-2.40 (m, 2H), 1.68-1.24 (m, 7H), 1.01-0.83 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 18: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona
Figure imgf000035_0002
Paso 1: (E)-tert-butil 3-((dimetilamino)metileno)-2-oxo-1-oxa-8-azaspiro[4.5]decano-8-carboxilato: Se calentó una solución de tert-butil 2-oxo-1-oxa-8-azaspiro[4.5]decano-8-carboxilato (p Ct Int. Solicitud, 2004058763, 15 de julio de 2004) (1 g, 3.92 mmol) y tert-butoxibis(dimetilamino)metano (1.21 mL, 5.88 mmol) en tolueno ( 8 mL) en un tubo sellado a 90 °C durante 24 h antes de eliminar los volátiles in vacuo. Se purificó el producto bruto por cristalización en DCM/MeOH para dar (E)-tert-butil 3-((dimetilamino)metilen)-2-oxo-1-oxa-8-azaspiro[4.5]decano-8-carboxilato (0.650 g, 53 %) como un sólido amarillo. LCMS (Método A): Rt =1.14 min, m/z= 311 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 7.16 (t, 1H), 3.79 (d, 2H), 3.37-3.19 (m, 2H), 3.02 (s, 6 H), 2.86 (s, 2H), 1.79 (d, 2H), 1.66-1.52 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).
Paso 2: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona: Se calentó una suspensión de (E)-tert-butil 3-((dimetilamino)metileno)-2-oxo-1-oxa-8-azaespiro[4,5]decano-8-carboxilato (120 mg, 0 . 38 7 mmol), piridin-2-amina ( 36 mg, 0.387 mmol) y NaOAc (32 mg, 0.387 mmol) en AcOH (1.5 mL) o a reflujo durante 16 h. Se enfrió la reacción a temperatura ambiente, luego se cargó en un cartucho Biotage SCX-2 de 5 g (preequilibrado con MeOH al 20 % en DCM) y se lavó la columna por gravedad con MeOH al 20 % en DCM (2 * 50 mL) y luego con 7 M NH3 al 20 % en MeOH en DCM (2 * 50 mL). El producto deseado estaba contenido en el NH3 lavados que se concentraron y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en DCM) para dar aproximadamente un 30 % de pureza (3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona (11 mg). Se utilizó este material directamente en el procedimiento general 4 utilizando ácido (R)-3-fenilbutanoico (10.45 mg, 0.064 mmol), HATU (24 mg, 0.064 mmol), DIPEA (30 |jl, 0.170 mmol) y DCM (1 ml) para dar el compuesto del título (2.8 mg, 1.8 % (2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.99 min, m/z= 406 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 9.12-9.05 (m, 1H), 8.30­ 8.13 (m, 1H), 7.83-7.68 (m, 2H), 7.40-7.16 (m, 6 H), 4.53-4.44 (m, 1H), 4.44-4.30 (m, 1H), 3.61-3.47 (m, 1H), 3.43-3.25 (m, 2H), 3.08-2.86 (m, 2H), 2.78-2.71 (m, 1H), 2.71-2.61 (m, 1H), 2.59-2.44 (m, 1H), 1.60-1.28 (m, 6 H), 0.94-0.69 (m, 1H).
Ejemplo 19: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona
Figure imgf000036_0001
Paso 1: 3-Bromo-9-fenil-4H-pirído[1,2-a]pirimidin-4-ona: Se añadió a una solución de 9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona (Org. Biomol. Chem., 2011, 9, p6559-6565) (454 mg, 2.04 mmol) en CCU (20 mL), NBS (436 mg, 2.45 mmol) y se agitó la reacción a TA durante 44 h antes de que la reacción se extinguiera mediante la adición de tiosulfato de sodio saturado(ac) (10 mL). Se extrajo la mezcla con DCM (20 mL) y se lavó la capa orgánica con NaHCO3(ac) saturado (20 mL). Se pasó la capa orgánica a través de un separador de fases, se concentró y se purificó el producto crudo por cromatografía ultrarrápida (50 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-100 % en PE) para dar el compuesto del título (440 mg, 72 %) como un sólido incoloro que se oscureció al reposar. LCMS (Método A): Rt = 1.44 min, m/z= 301, 303 [M+H]+.1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 9.18 (dd, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.81 (dd, 1H), 7.67-7.57 (m, 2H), 7.57-7.42 (m, 3H), 7.32 (t, 1H).
Paso 2: tert-Butil 4-((4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metilen)piperidin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando 3-bromo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona (346 mg, 1,15 mmol), tert-butil 4-((4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)metilen)piperidin-1-carboxilato (PCT Int. Solicitud, 2013027001, 28 de febrero de 2013) (446 mg, 1.38 mmol), Pd (PPh3)4 ( 66 mg, 0.057 mmol), Na2C o 3 (487 mg, 4.60 mmol), DME (5 mL) y agua (1 mL) a 100 °C durante 3 días dio el compuesto del título (354 mg, 74 %) como un sólido amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.84 min, m/z = 418 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 9.13 (dd, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.65-7.55 (m, 2H), 7.52­ 7.38 (m, 3H), 7.21 (t, 1H), 6.35 (s, 1H), 3.52 (t, 2H), 3.40 (t, 2H), 2.52-2.19 (m, 4H), 1.47 (s, 9H).
Paso 3: tert-Butil 2-(4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)-1-oxa-6-azaespiro[2.5]octano-6-carboxilato : Se añadió a una solución de tert-butil 4-((4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metilen)piperidin-1-carboxilato (150 mg, 0.359 mmol) en DCM (0.5 mL), mCPBA al 50-55 % (186 mg, 0.539 mmol). Se agitó la reacción a TA durante 2 h antes de detenerse mediante la adición de tiosulfato de sodio saturado (ac.) (10 mL). Luego, se extrajo la mezcla con DCM (2 x 10 mL) utilizando un separador de fases Biotage y se lavaron las capas orgánicas combinadas con NaHCOa(ac) saturado (10 mL) utilizando un separador de fases. Se concentró la fase orgánica y se purificó el material bruto mediante cromatografía ultrarrápida (25 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-100 % en PE) para dar el compuesto del título (77 mg, 49 %) como un sólido amarillo. LCMS (Método A): Rt =1.71 min, m/z= 434 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 9.11 (dd, 1H), 8.28 (d, 1H), 7.76 (dd, 1H), 7.66-7.56 (m, 2H), 7.53-7.39 (m, 3H), 7.28 (t, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.67 (t, 2H), 3.55-3.29 (m, 2H), 1.96-1.71 (m, 2H),1.56-1.35 (m, 2H), 1.41 (s, 9H).
Paso 4: tert-Butil 4-hidroxi-4-((4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metil)piperidin-1-carboxilato: Se agitó una suspensión de tert-butil 2-(4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)-1-oxa-6-azaespiro[2.5]octano-6-carboxilato (77 mg, 0.178 mmol), Pd/C al 10 % (19 mg, 0.018 mmol), Et3N (248 jL , 1.776 mmol) y ácido fórmico ( 68 jL , 1.776 mmol) en EtOAc (2 mL) a temperatura ambiente durante 18 h antes de filtrar la reacción a través de velocidad plus Dicalite® plus y se repartió el filtrado entre DCM (20 mL) y agua (20 mL). Se extrajo la mezcla con DCM (3 x 20 mL) utilizando un separador de fases Biotage y se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificaron los productos mediante cromatografía ultrarrápida (10 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-100 % en PE) para dar el compuesto del título (49 mg, 63 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt =1.54 min, m/z= 436 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 9.14 (dd, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.67-7.59 (m, 2H), 7.56-7.42 (m, 3H), 7.28 (t, 1H), 4.41 (br s, 1H), 3.99­ 3.60 (m, 2H), 3.20 (t, 2H), 2.89 (s, 2H), 1.68-1.49 (m, 4H), 1.45 (s, 9H).
Paso 5: 3-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona: Procedimiento 2 General utilizando tert-butil 4-hidroxi-4-((4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metil)piperidin-1 -carboxilato (49 mg, 0.113 mmol), TFA (1 mL) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (31 mg, 81 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.65 min, m/z= 336 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 9.14 (dd, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.74 (dd, 1H), 7.70-7.58 (m, 2H), 7.57-7.41 (m, 3H), 7.26 (t, 1H), 3.47 (s, 1H), 3.28-2.66 (m, 4H), 2.91 (s, 2H), 2.00-1.40 (m, 5H).
Paso 6: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirído[1,2-a]pirimidin-4-ona: Procedimiento 4 General utilizando 3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona (31 mg, 0.092 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (23 mg, 0.139 mmol), HATU (53 mg, 0.139 mmol), D iPeA (65 jL , 0.370 mmol) y DCM (2 mL) para dar el compuesto del título (38 mg, 85 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.46 min, m/z= 482 [M+H]+.
1H RMN (300 MHz, CDCls): 89.16-8.98 (m, 1H), 8.32-8.03 (m, 1H), 7.75-7.64 (m, 1H), 7.62-7.51 (m, 2H), 7.50-7.33 (m, 3H), 7.30-7.06 (m, 6H), 4.57-4.39 (m, 1H), 4.37-4.18 (m, 1H), 3.58-3.11 (m, 3H), 3.05-2.34 (m, 5H), 1.60-1.20 (m, 6H), 0.84-0.64 (m, 1H).
Ejemplo 20: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolof[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000037_0001
Paso 1: tert-Butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (284 mg, 1.33 mmol), 2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (PCT Int. Solicitud, 2007013964, 01 de febrero de 2007) (200 mg, 1.33 mmol), CS2CO3 (1.30 mg, 4.00 mmol) y DMF (2 , 6 mL) dio el compuesto del título (389 mg, 80 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.99 min, m/z= 386 [M+Na]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 88.02 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 4.38-4.02 (m, 5H), 3.95-3.74 (m, 2H), 3.26-3.12 (m, 2H), 1.73-1.55 (m, 4H), 1.44 (s, 9H).
Paso 2: 6-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 2 General utilizando tert-butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato (120 mg, 0.330 mmol), TFA (2 mL) y DCM (2 mL) dio el compuesto del título (82 mg, 94 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.23 min, m/z= 264 [M+H]+.
Paso 3: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 3 General 3 utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (28 mg, 0-106), ácido (R)-3-fenilbutanóico (18 mg, 0.106 mmol), e Dc (61 mg, 0.319 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (27 mg, 62 % ) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.91 min, m/z= 410 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 87.91­ 7.74 (m, 2H), 7.36-7.16 (m, 5H), 4.38-3.88 (m, 6H), 3.60-2.90 (m, 5H), 2.69-2.43 (m, 2H), 1.67-1.24 (m, 7H), 0.92-0.78 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 21: (R)-3-Bromo-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (Producto Intermedio B)
Figure imgf000037_0002
Paso 1: 3-Bromo-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió gota a gota a una suspensión agitada de 2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (400 mg, 2.66 mmol) en AcOH (2.664 ml) en un vial de 10 mL Br2 (412 jl, 7.99 mmol). Se selló el vial y se calentó la mezcla a 95 °C durante 16 h antes de enfriar a temperatura ambiente. Se añadió a esta mezcla MeOH (4 mL) y Et2O (4 mL). Se recogió el precipitado resultante por filtración, se lavó con Et2O y seco in vacuo para dar el compuesto del título (555 mg, 91 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 0.40 min, m/z = 229, 231 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 812.06 (br s, 1H), 7.85 (s, 1H), 4.07 (s, 3H).
Paso 2: (R)-3-Bromo-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7( 6H)-ona (Producto Intermedio B): Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 2 (453 mg, 1.75 mmol), 3-bromo-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6h)-ona (400 mg, 1.75 mmol) y Cs2CO3 (854 mg, 2.62 mmol) dio el compuesto del título (529 mg, 62 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.06 min, m/z = 488, 490 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 87.89 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.77 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.38-7.16 (m, 5H), 4.45-4.38 (m, 1H), 4.14 (s, 3H), 4.00-3.84 (m, 2H), 3.62-2.86 (m, 5H), 2.71-2.42 (m, 2H), 1.74-1.23 (m, 7H), 0.80-0.68 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 22: (R)-3-Etinil-6-(-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4.3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000038_0001
Paso 1: tert-Butil 4-((3-bromo-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1- carboxilato (Producto Intermedio C): Procedimiento 1 General 1 utilizando Epóxido 1 (293 mg, 1.28 mmol), 3-bromo-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6h)-ona (300 mg, 1,41 mmol) y Cs2CO3 (500 mg, 1.54 mmol) dio el compuesto del título (223 mg, 39 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1 . 06 min, m/z= 464, 4 6 6 [M+Na]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 7.92 (s, 1H), 4.19-4.02 (m, 2H), 4.16 (s, 3H), 4.00-3.76 (m, 2H), 3.26-3.07 (m, 2H), 1.73-1.52 (m, 4H), 1.46 (s, 9H).
Paso 2: tert-Butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-3-((trimetilsilil)etinil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-ilo) metil)piperidin-lcarboxilato: Procedimiento 6 General utilizando Producto Intermedio I (60 mg, 0.136 mmol), Cul (5,2 mg, 0.027 mmol), Pd (PPh3)2Cl2 (9.5 mg, 0.014 mmol), trietilamina (0.378 ml, 2.71 mmol), etiniltrimetilsilano (75 pl, 0.918 mmol) y tolueno (1.4 ml) a 110 °C durante 16 h dio el compuesto del título (41 mg, 6 6 %) como un aceite amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.60 min, m/z = 460 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 7.94 (s, 1H), 4.27-4.00 (m, 5H), 4.00-3.77 (m, 2H), 3.27-3.06 (m, 3H), 1.75-1.39 (m, 13H), 0.31 (s, 9H).
Paso 3: 3-Etinil-6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 2 General utilizando tert-butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-3-((trimetilsilil)etinil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato (32 mg, 0.070 mmol), TFA (1 mL) y DCM (1 mL) dio una mezcla de TMS y alquino desilado. Se trató este material con K2CO3 (29 mg, 0.209 mmol) en MeOH (1 mL) durante 45 min antes de purificar la reacción directamente mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-40 % en DCM) proporcionando el compuesto del título (16 mg, 80 % (2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.33 min, m/z= 288 [M+H]+.
Paso 4: (R)-3-Etinil-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7( 6H)-ona: Procedimiento 3 General utilizando 3-etinil-6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (12 mg, 0.042 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (7 mg, 0.042 mmol), EDC (24 mg, 0.125 mmol) y DCM (0.4 ml) dio el compuesto del título (9 mg, 50 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.06 min, m/z= 434 [M+H]+.
1H RMN (300 MHz, CDCl3, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.94 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.82 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.39-7.16 (m, 5H), 4.42-4.32 (m, 1H), 4.17 (s, 3H), 4.01-3.88 (m, 2H), 3.61-2.87 (m, 5H), 2.71-2.41 (m, 2H), 1.67-1.23 (m, 8 H), 0.89-0.75 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 23: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000038_0002
Paso 1: 2-Metil-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió gota a gota a una mezcla de 2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (150 mg, 0.999 mmol) y trifluorometanosulfinato de sodio (468 mg, 3.00 mmol) en DCM (4 mL) y agua (1.5 mL), t-BuOOH (484 pL, 5.00 mmol). La reacción mostró una conversión incompleta después de 24 h, por lo que se añadieron más trifluorometanosulfinato de sodio (468 mg, 3.00 mmol) y t-BuOOH (484 pl, 5.00 mmol). Después de 24 h, se diluyó la mezcla de reacción con agua (20 mL) y se extrajo con DCM (5 * 10 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las capas orgánicas combinadas y luego se secaron in vacuo para dar el compuesto del título (147 mg, 68 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 0.61 min, m/z = 219 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 8 12.29 (br s, 1H), 7.96 (d, 1H), 4.21 (s, 3H).
Paso 2: tert-Butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)piperidina -lcarboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (207 mg, 0.972 mmol), 2-metil-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (212 mg, 0.972 mmol), Cs2CO3 (475 mg, 1.458 mmol) y d Mf (2 mL) dio el compuesto del título (243 mg, 58 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.22 min, m/z= 432 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 8.30 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 4.11-3.71 (m, 7H), 3.24-3.07 (m, 2H), 1.76-1.39 (m, 13H).
Paso 3: 6-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 2 General utilizando tert-butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)il)metil)piperidin-1-carboxilato (124 mg, 0.287 mmol), TFA (2 mL) y DCM (2 mL) dio el compuesto del título (85 mg, 89 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.37 min, m/z= 332 [M+H]+.
Paso 4: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-2-metil-3-(trífluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 3 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (30 mg, 0.091 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (15 mg, 0.091 mmol), EDC (52 mg, 0.272 mmol) y DCM (0.9 mL) dio el compuesto del título (23 mg, 53 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.21 min, m/z = 478 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.01 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.90 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.38-7.16 (m, 5H), 4.41-3.86 (m, 6 H), 3.63-3.49 (m, 1H), 3.39-2.86 (m, 4H), 2.71-2.41 (m, 2H), 1.67-1.22 (m, 7H), 0.89-0.75 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 24: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-3-(3-hidroxi-3-metilbut-1-in-1-il)-2-metil-2H-pirazolo[4.3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000039_0001
Procedimiento 6 General utilizando Producto Intermedio B (40 mg, 0.061 mmol), CuBrSMe2 (0.7 mg, 3.28 pmol), Pd(PPh3)4 (1.9 mg, 1.64 pmol), trietilamina (0.46 mL, 3.28 mmol) y 2-metilbut-3-in-2-ol ( 8 mg, 0.090 mmol) a 70 °C durante 1 h dio el compuesto del título (27 mg, 6 8 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.06 min, m/z = 492 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.94 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.86 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.15 (m, 5H), 4.45-3.83 (m, 6 H), 3.63-3.46 (m, 1H), 3.39-3.19 (m, 2H), 3.12-2.90 (m, 1H), 2.71-2.41 (m, 2H), 2.08 (br s, 2H), 1.76-1.21 (m, 13H), 1.01-0.82 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 25: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(1H-pirazol-5-il)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000039_0002
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (40 mg, 0.082 mmol), ácido (1 H-pirazol-5-il)borónico (28 mg, 0.246 mmol), K3PO4 (52 mg, 0.246 mmol), Pd(PPh3)4 (9 mg, 8.19 pmol), 1,4-dioxano (0.65 mL) y agua (0,16 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (26 mg, 67 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.97 min, m/z = 476 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.87 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.81-7.71 (m, 1.6H (+confórmero B)), 7.39-7.15 (m, 6 H), 6.95 (br s, 1H), 4.46-3.90 (m, 6 H), 3.77-3.47 (m, 2H), 3.44-2.88 (m, 3H), 2.72-2.42 (m, 2H), 1.79-1.24 (m, 7H), 0.97-0.74 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 26: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(piridin-4-il)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000039_0003
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (50 mg, 0.102 mmol), ácido piridin-4-ilborónico (38 mg, 0.307 mmol), K3PO4 (65 mg, 0.307 mmol), Pd(PPh3)4 (12 mg, 10.24 pmol), 1,4-dioxano (0.8 mL) y agua (0,2 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (37 mg, 74 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.86 min, m/z= 487 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.87-8.75 (m, 2 H), 7.93 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.82 (s, 0.6 H (confórmero B)), 7.58 (d, 2H), 7.40-7.14 (m, 5H), 4.43-3.91 (m, 6 H), 3.71-3.49 (m, 2H), 3.41-2.87 (m, 3H), 2.72-2.41 (m, 2 H), 1.68-1.24 (m, 7H), 0.98-0.79 (m, 0.6 H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 27: (R)-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000040_0001
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (40 mg, 0.082 mmol), ácido fenilborónico (30 mg, 0.246 mmol), K3 PO4 (52 mg, 0.246 mmol), Pd(PPh3)4 (9.5 mg, 8.19 pmol), 1,4-dioxano (0.7 mL) y agua (0.15 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (31 mg, 78 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.23 min, m/z= 486 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.84 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.73 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.65-7.44 (m, 5H), 7.39-7.14 (m, 5H), 4.43-3.88 (m, 6 H), 3.68-3.44 (m, 2H), 3.40-2.85 (m, 3H), 2.71-2.41 (m, 2H), 1.66-1.23 (m, 7h ), 0.93-0.73 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 28: (R)-3-(6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzamida
Figure imgf000040_0002
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (40 mg, 0.082 mmol), ácido (3-carbamoilfenil)borónico (41 mg, 0.246 mmol), K3PO4 (52 mg, 0.246 mmol), Pd(PPh3)4 (9.5 mg, 8.19 pmol), 1,4-dioxano (0.65 mL) y agua (0.16 ml) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (29 mg, 67 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.96 min, m/z= 433 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.48-8.43 (m, 1 H), 8.19 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.13-8.05 (m, 1.6H (+confórmero B)), 7.99-7.93 (m, 1H), 7.63-7.54 (m, 1H), 7.39-7.17 (m, 5H), 6.97 (s, 1H), 4.51-3.79 (m, 3H), 3.66­ 3.48 (m, 1H), 3.45-2.81 (m, 3H), 2.75-2.44 (m, 2H), 1.75-1.24 (m, 9H), 0.76-0.60 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 29: (R)-3-(3-Aminofenil)-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4.3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000040_0003
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (40 mg, 0.082 mmol), ácido (3-aminofenil)borónico (34 mg, 0.246 mmol), K3PO4 (52 mg, 0.246 mmol), Pd(PPh3)4 (9.5 mg, 8.19 pmol), 1,4-dioxano (0.65 mL) y agua (0.16 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (35 mg, 85 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.99 min, m/z = 371 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.83 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.73 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.387.15 (m, 6 H), 6.87-6.71 (m, 3H), 4.42-3.71 (m, 8 H), 3.59-3.43 (m, 1H), 3.42-3.11 (m, 2H), 3.09-2.82 (m, 1H), 2.71-2.40 (m, 2H), 1.93 (s, 1H), 1.63-1.23 (m, 7H), 0.96-0.73 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 30: (R)-3-(4-(Am¡nomet¡l)fen¡l)-6-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4.3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000041_0001
Paso 1: (R)-tert-Butil 4-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H- pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato: Proced¡m¡ento 5 General ut¡l¡zando Producto Intermed¡o B (25 mg, 0.051 mmol), tert-but¡l 4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)benc¡lcarbamato (43 mg, 0.128 mmol), K3 PO4 (33 mg, 0.154 mmol), Pd(PPhi3)4 ( 6 mg, 5.12 jmol), 1,4-d¡oxano (0,4 mL) y agua (0.1 mL) en un m¡croondas a 130 °C durante 15 m¡n d¡o el compuesto del título (19 mg, 60 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.37 m¡n, m/z = 615 [M+H]+.
Paso 2: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Proced¡m¡ento 2 General 2 ut¡l¡zando (R)-tert-but¡l 4-(6-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benc¡lcarbamato (16 mg, 0.026 mmol), TFA (0.5 mL) y DCM (0.5 mL) d¡o el compuesto del título (11 mg, 82 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.71 m¡n, m/z = 515 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporc¡ón de 2:3 respect¡vamente): 8 7.74 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.63 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.51-7.41 (m, 4H), 7.30-7.08 (m, 5H), 4.37-4.27 (m, 0.6H (confórmero B)), 4.26-4.15 (m, 0.4H (confórmero A)), 4.15-3.78 (m, 7H), 3.56-3.41 (m, 1H), 3.34-3.07 (m, 2H), 3.04-2.75 (m, 1H), 2.64-2.50 (m, 1H), 2.50-2.35 (m, 1H), 1.54-1.14 (m, 9H), 0.77-0.63 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 31: (R)-6-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3-(3-h¡drox¡prop-1-¡n-1-¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000041_0002
Paso 1: 6-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi )prop-1-in-1-il)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Proced¡m¡ento 6 General ut¡l¡zando Producto Intermed¡o B (30 mg, 0.061 mmol), Cul (2.3 mg, 0.012 mmol), Pd(PPh3)2Cl2 (4.3 mg, 6.14 jmol), tr¡et¡lam¡na (0.171 mL, 2.71 mmol), 2-(prop-2-¡n-1-¡lox¡)tetrah¡dro-2H-p¡rano (34 mg, 0.246 mmol) y tolueno (0.6 mL) a 110 °C durante 16 h d¡o el compuesto del título (15 mg, 45 %) como un ace¡te amar¡llo. LCMS (Método A): Rt = 1.31 m¡n, m/z = 548 [M+H]+.
Paso 2: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-3-(3-hidroxiprop-1-in-1-il)-2-metil-2H- pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añad¡ó a una soluc¡ón de 6-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-(3-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-2-¡l)ox¡)prop-1-¡n-1-¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (12 mg, 0.022 mmol) en MeOH (0.2 mL), p-TsOH H2O (0.834 mg, 4.38 jm ol) y se ag¡tó la mezcla de reacc¡ón durante 16 h antes de K2CO3 (0.606 mg, 4.38 |jmol) y se ag¡tó la suspens¡ón resultante durante 30 m¡n. Se d¡luyó la mezcla con agua (20 mL) y se extrajo la mezcla con DCM (3 * 10 mL) ut¡l¡zando un separador de fases B¡otage. Se concentraron las fases orgán¡cas comb¡nadas y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (10 g B¡otage KP-S¡l, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título ( 8 mg, 79 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.95 m¡n, m/z = 464 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporc¡ón de 2:3 respectivamente): 8 7.91 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.81 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.40­ 7.14 (m, 5H), 4.61 (s, 2H), 4.46-3.78 (m, 6 H), 3.65- 3.47 (m, 1H), 3.40-2.82 (m, 3H), 2.72-2.41 (m, 2H), 1.68-1.21 (m, 7H), 0.93-0.77 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 32: (R)-6-((4h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡din-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-(prop-1-en-2-¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]pir¡mid¡n-7(6H,)-ona
Figure imgf000042_0001
Proced¡m¡ento 5 General utilizando Producto Intermedio B (75 mg, 0.154 mmol), isopropeniltrifluoroborato de potasio ( 68 mg, 0.461 mmol), K3PO4 (98 mg, 0.461 mmol), Pd(PPh3)4 (18 mg, 0.015 mmol), 1,4-dioxano (1.2 mL) y agua (0.3 mL) en un microondas a 130 °C durante 45 min dio el compuesto del título (56 mg, 81 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.12 min, m/z= 450 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.85 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.74 (s, 0.6 H (confórmero B)), 7.37-7.13 (m, 5H), 5.66-5.55 (m, 1H), 5.32-5.25 (m, 1H), 4.44-3.88 (m, 6 H), 3.77-3.46 (m, 2H), 3.40­ 3.14 (m, 2H), 3.11-2.85 (m, 1H), 2.71-2.57 (m, 1H), 2.57-2.41 (m, 1H), 2.27 (d, 3H), 1.66-1.21 (m, 7H), 0.93-0.74 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 33: (R)-6-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3-¡soprop¡l-2-metil-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000042_0002
Se hidrogenó una solución (R)-6-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡din-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-(prop-1-en-2-¡l)-2H-pirazolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (50 mg, 0,111 mmol) en MeOH (10 ml) en un H-Cube® (Pd al 10 %/C CatCart®, 1 mLmin' 1, 50 °C, 60 bar H2). Se concentró la solución resultante y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (10 g Biotage Kp-Sil, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (20 mg, 40 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.02 min, m/z = 452 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.70 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.59 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.38-7.15 (m, 5H), 4.48-4.26 (m, 1H), 4.19-3.83 (m, 5H), 3.65­ 2.84 (m, 6 H), 2.72-2.58 (m, 1H), 2.58-2.42 (m, 1H), 1.64-1.21 (m, 13H), 0.79-0.63 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 34: (R)-6-((-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)metil)-3-¡soprop¡l-2-met¡l-5,6-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]pirim¡d¡n-7(4H)-ona
Figure imgf000042_0003
Aislado durante la preparación del Ejemplo 33. (R)-6-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-3-¡soprop¡l-2-metil-5,6-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡din-7(4H)-ona (22 mg, 43%) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.05 min, m/z= 454 [M+H]+. 1H r Mn (300 m Hz , CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.35-7.15 (m, 5H), 4.57-4.23 (m, 3H), 4.15-4.06 (m, 0.6H (confórmero B solamente), 3.86 (s, 3H), 3.69-3.17 (m, 6.4H), 3.11-2.89 (m, 2H), 2.71-2.58 (m, 1H), 2.56-2.43 (m, 1H), 1.74-1.17 (m, 13H), 0.78-0.64 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 35: (R)-6-((-(3,4-d¡met¡lpent-4-eno¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-fen¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]pir¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Paso 1: Ácido (R)-3,4-dimetilpent-4-enoico: Se añadió LiOH ( 88 mg, 3.67 mmol) a una solución de (S)-3-((R)-3,4-dimetilpent-4-enoil)-4-feniloxazolidin-2-ona (Tetrahedron Lett. 1998, 39, 8593) (501 mg, 1.83 mmol) en THF (9 mL) y agua (9 mL) y se agitó la reacción vigorosamente durante 18 h antes de agregar agua (10 mL). Luego, se extrajo la mezcla con DCM (3 * 5 mL) para eliminar el auxiliar y se acidificó la fase acuosa a pH 3-4 mediante la adición gota a gota de HCl(ac) 3 M. Se extrajo la fase acuosa acidificada con DCM (5 * 5 ml) utilizando un separador de fases Biotage y se concentró cuidadosamente para dar el compuesto del título (114 mg, 49 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 8 4.80-4.69 (m, 2H), 2.68 (sxt, 1H), 2.58-2.45 (m, 1H), 2.39-2.25 (m, 1H), 1.74 (s, 3H), 1.11 (d, 3H).
Paso 2: tert-Butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio C (223 mg, 0.504 mmol), ácido fenilborónico (184 mg, 1.51 mmol), PdCh(dppf) (9 mg, 0.013 mmol), K3PO4 (642 mg, 3.03 mmol), 1,4-dioxano (4 mL) y agua (0.8 ml) a 90 °C durante 16 h dio el compuesto del título (161 mg, 73 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.26 min, m/z = 440 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.86 (s, 1H), 7.60-7.41 (m, 5H), 4.08 (s, 3H), 4.22-3.94 (m, 2H), 3.92-3.70 (m, 2H), 3.62-3.41 (m, 1H), 3.23-2.98 (m, 1H), 1.67-1.47 (m, 4H), 1.43 (s, 9H).
Paso 3: 6-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona, Producto Intermedio D: Procedimiento 2 General utilizando Tert-butil 4-hidroxi-4-((2-metil-7-oxo-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato (161 mg, 0.366 mmol), TFA (3 mL) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (89 mg, 72 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.49 min, m/z= 340 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 8 7.91 (s, 1H), 7.66-7.44 (m, 5H), 4.16 (s, 3H), 4.12 (s, 2H), 3.07-2.60 (m, 6 H), 1.78-1.50 (m, 4H).
Paso 4: (R)-6-((1-(3,4-dimetilpent-4-enoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d ]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General 4 utilizando Producto Intermedio D (15 mg, 0.044 mmol), ácido (R)-3,4-dimetilpent-4-enoico (8.5 mg, 0.066 mmol), HATU (25 mg, 0.066 mmol), DIPeA (31 pl, 0.177 mmol) y DCM ( 2 mL) dio el compuesto del título (19 mg, 96 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.17 min, m/z= 450 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 7.84 (m, 1H), 7.62-7.44 (m, 5H), 4.71 (s, 2H), 4.44-4.29 (m, 1H), 4.21 (dd, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.98 (d, 1H), 3.69 (d, 1H), 3.59 (d, 1H), 3.49-3.31 (m, 1H), 3.12-2.96 (m, 1H), 2.74-2.55 (m, 1H), 2.53-2.40 (m, 1H), 2.33-2.18 (m, 1H), 1.73 (s, 3H), 1.68-1.49 (m, 4H), 1.07 (d, 3H).
Ejemplo 36: (R)-6-(-(4-metil-3-(trifluorometil)pent-4-enoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000043_0001
Paso 1: (S,E)-4-Fenil-3-(4,4,4-trifluorobut-2-enoil)oxazolidin-2-ona: Se añadió a una solución de ácido (E)-4,4,4-trifluorobut-2-enoico (2.06 g, 14.7 mmol) en DCM (10 mL) a 0 °C con cloruro de oxalilo (1.07 ml, 12.3 mmol). Después de 5 min, se añadió DMF (50 pL, 0.646 mmol) y se dejó la mezcla en agitación a TA durante 2 h. En un recipiente separado, se añadió NaH (60 % disp., 735 mg, 18.4 mmol) a una solución de (S)-4-feniloxazolidin-2-ona (2 g, 12.3 mmol) en THF (20 mL) a TA y se agitó la mezcla durante 2 h. A continuación, se añadió la solución en DMF del cloruro de ácido a la solución de (S)-4-feniloxazolidin-2-ona sódica a través de jeringuilla. Después de agitar durante 18 h, se diluyó la mezcla con agua (50 mL) y se extrajo la mezcla con DCM (3 * 20 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las capas orgánicas combinadas y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (50 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-100 % en PE) para dar el compuesto del título (1.07 g, 30 % de rendimiento) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.33 min, m/z= 286 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 8 7.93 (dq, 1H), 7.49­ 7.22 (m, 5H), 6.80 (dq, 1H), 5.50 (dd, 1H), 4.77 (t, 1H), 4.36 (dd, 1H).
Paso 2: (S)-3-((R)-4-Metil-3-(trifluorometil)pent-4-enoil)-4-feniloxazolidin-2-ona: Se añadió una solución 0.392 M de bromuro de prop-1-en-2-ilmagnesio en t Hf (6.71 ml, 2.63 mmol) a una suspensión de CuBr.SMe2 (541 mg, 2.63 mmol) en t Hf (12 mL) a -60°C. Después de 1 h se añadió una solución de (S,E)-4-fenil-3-(4,4,4-trifluorobut-2-enoil)oxazolidin-2-ona (500 mg, 1.75 mmol) en THF ( 6 mL) y se agitó la reacción durante 3 h a - 60 °C antes de permitir que se caliente a -20 °C durante 18 h. A continuación, se inactivó la reacción mediante la adición de NH3 saturado4Cl(ac) (50 mL) y se extrajo la mezcla con acetato de etilo (3 x 30 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 , se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (50 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-40 % en PE) para dar el compuesto del título (356 mg, 62 % de rendimiento) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.68 min, m/z= 328 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 7.50-7.00 (m, 5H), 5.35 (dd, 1H), 4.87 (d, 2H), 4.63 (t, 1H), 4.20 (dd, 1H), 3.56-3.27 (m, 2H), 3.19 (dd, 1H), 1.66 (s, 3H).
Paso 3: Ácido (R)-4-metil-3-(trifluorometil)pent-4-enoico: Se añadió LiOH (48 mg, 2.02 mmol) a una solución de (S)-3-((R)-4-met¡l-3-(trifluoromet¡l)pent-4-eno¡l)-4-femloxazolid¡n-2-ona (331 mg, 1.01 mmol) en THF (5 mL) y agua (5 mL y se agitó la reacción vigorosamente durante 18 h antes de añadir agua (10 mL). Luego, se extrajo la mezcla con DCM (3 x 5 mL) para eliminar el auxiliar y se acidificó la fase acuosa pH 3-4 mediante la adición gota a gota de HCl 3 M(ac). Se extrajo la fase acuosa acidificada con DCM (5 * 5 mL), se secaron los lavados de DCM combinados utilizando un separador de fases Biotage y se concentraron cuidadosamente para dar el compuesto del título (116 mg, 63 % de rendimiento) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 8 5.13 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 3.33 (quint 1H), 2.87­ 2.65 (m, 2H), 1.86 (s, 3H).
Paso 4: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(4-metil-3-(trifluorometil)pent-4-enoil)piperídin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo [4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando Producto Intermedio D (16 mg, 0.047 mmol), ácido (R)-4-metil^trifluorometiOpenM-enoico (13 mg, 0.071 mmol), HATU (27 mg, 0.071 mmol), DIPEA (33 pL, 0.189 mmol) y DCM (2 mL) dio el compuesto del título (17 mg, 72%) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.29 min, m/z= 504 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 1:1): 8 7.91-7.70 (m, 1H), 7.62-7.40 (m, 5H), 5.14-5.06 (m, 1H), 5.04-4.95 (m, 1H), 4.43-4.28 (m, 1H), 4.27-4.08 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.04-3.90 (m, 1H), 3.81-3.33 (m, 4H), 3.15-3.00 (m, 1H), 2.82-2.61 (m, 2H), 1.91-1.83 (m, 3H), 1.80­ 1.49 (m, 4H).
Ejemplo 37: (R)-6-((4-H¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-fen¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000044_0001
Paso 1: Ácido (E)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbut-2-enoico: Se añadió LiOH (132 mg, 5.5 mmol) a una solución de (E)-etil 4,4,4-trifluoro-3-fenilbut-2-enoato (J. Fluorine Chem. 2013, 152, 56.) (1.22 g, 5 mmol) en Th F (10 mL) y agua (5 mL) a TA. Después de 1 h, se ajustó el pH de la mezcla de reacción a pH 4 mediante la adición de HCl(ac) 1 M y se extrajo la mezcla con DCM (3 * 10 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se secó el producto in vacuo para dar el compuesto del título (1.06 g, 98 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.27 min, m/z = 215 [M-H]-. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 13.22 (br s, 1H), 7.54-7.38 (m, 3H), 7.36-7.22 (m, 2H), 6.84 (s, 1H).
Paso 2: Ácido (R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoico: Se desgasificó una suspensión de tetrafluoroborato de bis^orbornadieno^odio^) (3.46 mg, 9.25 pmol) y Walphos SL-W008-2 (8.72 mg, 9.25 pmol) en MeOH ( 6 mL) con N2. Después de 30 min se obtuvo una solución y se añadió ácido (E )-4,4,4-trifluoro-3-fenilbut-2-enoico (200 mg, 0.925 mmol). A continuación, se agitó la reacción en un aparato Parr® Shaker a 3.5-4 bar H2 durante 22 h. Como no hubo conversión, se añadieron más tetrafluoroborato de bis^orbornadieno^odio^) (3,46 mg, 9,25 pmol) y Walphos SL-W008-2 (8,72 mg, 9,25 pmol) y se agitó la reacción en un aparato Parr® Shaker a 5 bar H2 durante 24 h. Se concentró la mezcla y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (10 g Biotage KP-Sil, MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título (100 mg, 49 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.24 min, m/z = 217 [M-H]'. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 10.67 (br s, 1H), 7.49-7.21 (m, 5H), 3.89 (m, 1H), 3.20-2.82 (m, 2H).
Paso 3: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4, 3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando Producto Intermedio D (16 mg, 0.047 mmol), ácido (R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoico (15 mg, 0.071 mmol), HATU (27 mg, 0.071 mmol), DIPEA (33 pl, 0.189 mmol) y DCM (2 mL) dio el compuesto del título (21 mg, 84 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método a ): Rt = 1.35 min, m/z= 540 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 1:1): 8 7.79­ 7.71 (m, 1H), 7.61-7.45 (m, 5H), 7.43-7.28 (m, 5H), 4.33-4.21 (m, 1H), 4.17-3.83 (m, 6 H), 3.73-3.28 (m, 3H), 3.04-2.84 (m, 3H), 1.66-1.45 (m, 3H), 1.30-1.08 (m, 1H).
Ejemplo 38: 6-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000044_0002
Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 3 (65 mg, 0.266 mmol), 2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (PCT Int. Solicitud, 2007013964, 01 de febrero de 2007) (40 mg, 0.266 mmol) y Cs2CO3 ( 2 60 mg, 0.799 mmol) dio el compuesto del título (54 mg, 51 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.85 min, m/z = 396 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 7.91 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.31-7.18 (m, 5H), 4.32 (d, 1H), 4.21-3.95 (m, 5H), 3.60 (d, 1H), 3.38-3.30 (m, 1H), 3.10-3.01 (m, 1H), 2.92 (t, 2H), 2.66-2.55 (m, 2H), 1.62-1.37 (m, 4H).
Ejemplo 39: 6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilpropanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000045_0001
Procedimiento 1 General utilizando Epóxído 3 (34 mg, 0.138 mmol), 2-metil-3-(trifluorometil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (30 mg, 0.138 mmol), Cs2CO3 (54 mg, 0.165 mmol) y DMF (0.3 mL) dio el compuesto del título (27 mg, 42 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.16 min, m/z= 464 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 7.95 (s, 1H), 7.38-7.19 (m, 5H), 4.44-4.24 (m, 4H), 4.13-3.95 (m, 2H), 3.66-3.54 (m, 1H), 3.37-3.30 (m, 1H), 3.20­ 2.91 (m, 4H), 2.70-2.56 (m, 2H), 1.63-1.22 (m, 4H).
Ejemplo 40: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000045_0002
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio A (20 mg, 0.051 mmol), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (16 mg, 0.077 mmol), Na2CO3 (11 mg, 0.103 mmol), Pd(PPh3)4 (3.0 mg, 2.56 pmol), 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.2 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (12 mg, 54 %) como un sólido blanquecino. Lc MS (Método B): Rt = 0.89 min, m/z= 436 [M+H]+. 1H Rm N (400 MHz, m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.36 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.33 (s, 0.6H (confórmero B)), 8.02 (s, 1H), 7.35-7.17 (m, 5H), 6.67 (s, 1H), 4.25-4.13 (m, 1H), 4.03 (dd, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.88 (dd, 1H), 3.72-3.65 (m, 1H), 3.28-3.22 (m, 1H), 3.09-2.92 (m, 1H), 2.84-2.73 (m, 1H), 2.64­ 2.49 (m, 1H), 1.65-1.26 (m, 7H), 0.96-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 41: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(1-isobutil-1H-pirazol-4-il)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000045_0003
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio A (20 mg, 0.051 mmol), 1-isobutil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (19 mg, 0.077 mmol), Na2CO3 (11 mg, 0.103 mmol), Pd(PPh3)4 (3.0 mg, 2.56 pmol), 1,4-dioxano (0.5 ml) y agua (0.2 ml) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (22 mg, 91 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método B): Rt = 1.10 min, m/z= 478 [M+H]+. 1H r Mn (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.33 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.29 (s, 0.6H (confórmero B)), 8.24 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.35-7.16 (m, 5H), 6 . 6 8 (s, 1H), 4.25-4.13 (m, 1H), 4.03 (dd, 1H), 4.01 (d, 2H), 3.89 (dd, 1H), 3.72-3.65 (m, 1H), 3.26-3.15 (m, 1H), 3.09-2.92 (m, 1H), 2.84-2.73 (m, 1H), 2.64­ 2.49 (m, 1H), 2.23 (septet, 1H), 1.66-1.31 (m, 7H), 0.99-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)), 0.94 (d, 6 H).
Ejemplo 42: Clorhidrato de 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanovl)piperidin-4-il)metil)-6-((1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000046_0001
Se desgasificó una mezcla del Producto Intermedio A (20 mg, 0.051 mmol), tert-butil 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftaleno-9-carboxilato (20 mg, 0.077 mmol), Xantofos (4.45 mg, 7.69 |jmol) y CS2CO3 (33 mg, 0.103 mmol) en 1,4-dioxano (1 mL) burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 min. Se añadió PD2(dba)3 (2.3 mg, 2.56 jm ol) y se calentó la mezcla de reacción a 125 °C en el microondas durante 30 min. Después de la dilución con DCM, se filtró la mezcla a través de Celite® y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage 10 g KP-Sil, EtOAc al 0­ 100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en EtOAc). Se disolvió el material resultante en DCM (0.5 mL) y se añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (0.5 mL). Después de agitar durante 2 h, se añadió Et2O (2 mL) y se agitó la suspensión resultante durante 10 min. Se eliminó el sobrenadante, además se añadió Et2O (2 mL) al resto y se agitó la suspensión durante 10 min. Después de eliminar el sobrenadante, se liofilizó el sólido resultante para dar el compuesto del título (11 mg, 41 %) como un sólido marrón pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.71 min, m/z= 514 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 8.22 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.18 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.66 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.38-7.17 (m, 5H), 5.25 (m, 2H), 4.25-4.13 (m, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.86 (dd, 1H), 3.75-3.64 (m, 2H), 3.30-3.17 (m, 2H), 3.09-2.94 (m, 1H), 2.85-2.74 (m, 1H), 2.65-2.50 (m, 1H), 2.40-2.30 (m, 2H), 1.71-1.31 (m, 9H), 0.94-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 43: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(fenilamino)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000046_0002
Se disolvió el Producto Intermedio B (30 mg, 0.061 mmol) en 1,4-dioxano (1 mL) y se añadió Cs2CO3 (28 mg, 0.086 mmol), seguido de anilina (5.61 jl, 0.061 mmol). Se desgasificó la mezcla con N2. Se añadió Pd(AcO)2 (1.379 mg, 6.14 jmol) seguido de Xantofos (5.33 mg, 9.21 jm ol) y se selló el tubo. Se calentó la mezcla a 100 °C durante 1 h. Se añadieron otros 2 j l de anilina y se calentó la mezcla a 100 °C durante 16 h. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, se concentró y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (4 g sílice GraceResolv, eludidos con EtOAc al 0-100 %/c-hex, luego con MeOH al 0-30 %/EtOAc; luego con Biotage 11 g KP-NH, eludidos con EtOAc al 0­ 100 % /c-hex luego MeOH al 0-30 %/EtOAc) para dar el compuesto del título como una espuma (11 mg, 36 %). LCMS (Método A): Rt = 1.20 min, m/z= 501 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe): 6 8.35 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.26 (m, 4H), 7.15 (m, 3H), 6.77 (t, 1H), 6.69 (d, 2H), 4.88 (d, 1H), 3.90 (m, 6 H), 3.65 (m, 1H), 3.18 (m, 2H), 2.86 (m, 1H), 2.57 (m, 2H), 1.30 (m, 4H), 1.21 (d, 3H).
Ejemplo 44: (R)-6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-5-metilpirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000046_0003
Paso 1: tert-Butil 4-((4-doro-5-metil-6-oxopirímidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperídin-1-carboxilato: Se calentó una solución de 6-cloro-5-metilpirimidin-4(3H)-ona (300 mg, 2.075 mmol), Epóxido 1 (443 mg, 2.075 mmol) y DIPEA (0.54 ml, 3.11 mmol) en DMF (2.5 ml) a 80 °C durante 16 h. Se dejo enfriar la mezcla a TA, antes de que se inactivara la reacción mediante la adición de NH4Cl(ac )saturado (20 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre Na2SO4 , se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (24 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (148 mg, 20 %) como un sólido blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 6 7.93 (s, 1H), 4.10-3.80 (br m, 4H), 3.20-3.10 (br m, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.63­ 1.50 (br m, 4H), 1.45 (s, 9H).
Paso 2: 6-Cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-5-metilpirimidin-4(3H)-ona. TFA: Se agitó una solución de tert-butil 4-((4-cloro-5-metil-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (150 mg, 0.419 mmol) y TFA (0.5 mL, 6.49 mmol) en DCM (1 mL) a TA durante 1 h y se concentró posteriormente in vacuo. Se eliminó el exceso de TFA añadiendo tres veces DCM seguido de concentración in vacuo. Se trituró el sólido resultante con Et2O (x2) y se secó in vacuo para dar el compuesto del título (145 mg, 93 %) como un sólido blanco que se usó sin purificación. LCMS (Método B): Rt = 0.39 min, m/z = 258.
Paso 3: (R)-6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-5-metilpirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-5-metilpirimidin-4(3H)-ona.TFA (145 mg, 0.390 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (96 mg, 0.585 mmol), HATU (201 mg, 1.56 mmol) y DIPEA (0.273 ml, 1.560 mmol) en DCM (1 mL) dio el compuesto del título (63 mg, 40 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método B): Rt = 1.08 min, m/z= 404 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 8.16 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.11 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.36-7.17 (m, 5H), 4.24-4.12 (m, 1H), 4.02 (dd, 1H), 3.87 (dd, 1H), 3.71-3.64 (m, 1H), 3.28-3.16 (m, 1H), 3.06-2.90 (m, 1H), 2.84-2.72 (m, 1H), 2.63­ 2.49 (m, 1H), 2.17 (s, 1.8H (confórmero B)), 2.17 (s, 1.2H (confórmero A)), 1.63-1.27 (m, 7H), 0.93-0.85 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 45: (R)-5-Bromo-3-((4-hidroxi-1-(3fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000047_0001
Se agitó (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona (50 mg, 0.107 mmol) y NBS (19.0 mg, 0.107 mmol) en DMF (1.5 mL) a Ta durante 3 días. Se añadió más n Bs (9 mg, 0.051 mmol) y se agitó la reacción durante 3 h. Se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4, se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano y luego MeOH al 0-20 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (13 mg, 23 %) como un sólido marrón pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.69 min, m/z = 546/548 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 8.07 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.03 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35­ 7.17 (m, 5H), 4.23-4.11 (m, 1H), 4.11-3.79 (m, 3H), 3.70-3.66 (m, 3H), 3.27-3.16 (m, 2H), 3.08-2.93 (m, 1H), 2.87-2.49 (m, 7H), 1.96-1.84 (m, 3H), 1.61-1.24 (m, 7H), 0.96-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 46: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H -pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000047_0002
Paso 1: Bencil 4-((3-bromo-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 4 (3.24 g, 13.1 mmol), 3-bromo-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (2.00 g, 8.73 mmol), Cs2CO3 (4.27 g, 13.10 mmol) y DMF (40 ml) dio el compuesto del título (4.16 g, cuant.) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 1.13 min, m/z = 476, 478 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 6 7.88 (s, 1H), 7.41-7.28 (m, 5H), 5.13 (s, 2H), 4.15 (s, 3H), 4.25-3.87 (m, 4H), 3.31-3.10 (m, 2H), 2.88 (s, 1H), 1.75-1.48 (m, 4H).
Paso 2: Bencil 4-((3-(4-(((tert-butoxicarbonil)amino)metil)fenil)-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando bencil 4-((3-bromo-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (476 mg, 1.00 mmol), tert-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)bencilcarbamato (1.00 g, 3.00 mmol), Pd(PPh)3)4 (58 mg, 50.0 pmol), K3PO4(1.27 g, 6.00 mmol), 1,4-dioxano (7.5 mL) y agua (2.5 mL) a 130 °C durante 30 min en el microondas dio el compuesto del título (448 mg, 74 %) como una espuma incolora. LCMS (Método A): Rt = 1.44 min, m/z = 603 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 6 7.80 (s, 1H), 7.52 (d, 2H), 7.46 (d, 2H), 7.39-7.28 (m, 5H), 5.12 (s, 2H), 4.39 (d, 2H), 4.11 (s, 3H), 4.08 (s, 2H), 4.00-3.81 (m, 2H), 3.40 (s, 1H), 3.30-3.06 (m, 2H), 1.65-1.51 (m, 4H), 1.48 (s, 9H).
Paso 3: tert-Butil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin- 3-il)bencilcarbamato: Procedimiento 7 General 7 utilizando bencil 4-((3-(4-(((tert-butoxicarbonil)amino)metil)fenil)-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (448 mg, 0.743 mmol), Pd al 10 % sobre carbón (79 mg, 0.074 mmol), formiato de amonio (1.41 g, 22.3 mmol) y EtOH (7.4 mL) después de 45 min dio el compuesto del título (260 mg, 74 %) como un sólido incoloro. 1H RMN (400 MHz, COCh): 8 7.88 (s, 1H), 7.56 (d, 2H), 7.48 (d, 2H), 5.02 (br. s, 1H), 4.40 (d, 2H), 4.15 (s, 3H), 4.11 (s, 2H), 3.01-2.82 (m, 4H), 1.75-1.50 (m, 4H), 1.48 (s, 9H).
Paso 4: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trífluoro-3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-2-metilo -2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando tert-butil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato (80 mg, 0.171 mmol), ácido (R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoico (56 mg, 0.256 mmol), h At U (97 mg, 0.256 mmol), DIPEA (0.119 mL, 0,683 mmol) y Dc M (3.4 mL) y luego Procedimiento 2 General utilizando TFA (1.5 mL) y DCM (1.5 ml) dieron el compuesto del título (79 mg, 81 % (2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 0.81 min, m/z 569 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 8 8.02-7.90 (m, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 7.44-7.22 (m, 5H), 4.91 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 4.16-3.69 (m, 7H), 3.26­ 3.09 (m, 2H), 3.03-2.69 (m, 2H), 2.04 (br. s, 2H), 1.67-1.14 (m, 4H).
Ejemplo 47: Clorhidrato de 6-((S)-3-Aminopiperidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000048_0001
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), (S)-tert-butil piperidin-3-ilcarbamato (64 mg, 0.321 mmol) y 1,4-dioxano (1 mL) en el microondas a 150 °C durante 30 min. Se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua y se extrajo la fase acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4, se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage 11 g KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-10 % en EtOAc). Se disolvió el material resultante en DCM (0.5 mL) y se añadió HCl 4 M/1,4-dioxano (0.5 mL). Después de agitar durante 2 h, se añadió Et2O (2 mL) y se trituró la suspensión durante 10 min. Se eliminó el sobrenadante, y además se añadió Et2O (2 mL) y se trituró la suspensión durante 10 min. Se eliminó el sobrenadante y se liofilizó el sólido para dar el compuesto del título (19 mg, 60%) como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 0.66 min, m/z= 454 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.06 (s, 0.4H (confórmero A)), 8 .01 (s, 0.6 H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.51 (s, 1H), 4.61 (br s, 1H), 4.23-4.09 (m, 2H), 4.02-3.87 (m, 1H), 3.78 (dd, 1H), 3.70-3.64 (m, 1H), 3.52-3.43 (m, 1H), 3.28-2.94 (m, 4H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.63-2.49 (m, 1H), 2.20-1.95 (m, 1H), 1.85­ 1.75 (m, 1H), 1.61-1.24 (m, 10H), 0.96-0.90 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 48: Clorhidrato de (R)-6-(4-Aminopiperidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000048_0002
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), tert-butil piperidin-4-ilcarbamato (64 mg, 0.321 mmol) y 1,4-dioxano (1 mL) en el microondas a 150 °C durante 30 min. Se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4 , se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage 11 g KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-10 % en EtOAc). Se disolvió el material resultante en DCM (0.5 mL) y se añadió HCl 4 M/1,4-dioxano (0.5 mL). Después de agitar durante 2 h, se añadió Et2O (2 mL) y se trituró la suspensión durante 10 min. Se eliminó el sobrenadante, y además se añadió Et2O (2 mL)) y se trituró la suspensión durante 10 min. Se eliminó el sobrenadante y se liofilizó el sólido para dar el compuesto del título (29 mg, 92%) como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 0.66 min, m/z= 454 [M+H]+. 1RMN H (400 MHz, metanol-d4 , esta molécula aparece como dos confórmero s A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.17 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.13 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.19 (m, 5H), 4.89 (s, 1H), 4.49 (br s, 2H), 4.25-4.13 (m, 1H), 3.87 (dd, 1H), 3.73-3.65 (m, 1H), 3.57-3.42 (m, 2H), 3.28-2.95 (m, 4H), 2.84-2.74 (m, 1H), 2.64-2.50 (m, 1H), 2.31-2.26 (m, 1H), 2.13-2.10 (m, 1H), 1.95­ 1.85 (m, 1H), 1.63-1.28 (m, 6 H), 0.92-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 49: Clorhidrato de (R)-3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000049_0001
Se calentó una mezcla del Producto Intermed¡o A (20 mg, 0.051 mmol), tert-buti/2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]decano-2-carbox¡lato (62 mg, 0.256 mmol) y 1,4-d¡oxano (1 mL) en el m¡croondas a 150 °C durante 30 m¡n. Se repart¡ó la mezcla de reacc¡ón entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgán¡cos comb¡nados sobre MgSO4, se concentró y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (11 g B¡otage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en c¡clohexano, luego MeOH al 0-10 % en EtOAc). Se d¡solv¡ó el mater¡al resultante en DCM (0.5 mL) y se añad¡ó HCl 4 M/1,4-d¡oxano (0.5 mL). Después de ag¡tar durante 2 h, se añad¡ó Et2O (2 mL) y se tr¡turó la suspens¡ón durante 10 m¡n. Se el¡m¡nó el sobrenadante, además se añad¡ó Et2O (2 mL) y se tr¡turó la suspens¡ón durante 10 m¡n. Se el¡m¡nó el sobrenadante y se l¡of¡l¡zó el sól¡do para dar el compuesto del título ( 6 mg, 24%) como un sól¡do blanquec¡no. LCMS (Método B): Rt = 0.70 m¡n, m/z= 494 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-cfo, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporc¡ón de 2:3 respectivamente): 6 8.13 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.09 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.29-7.17 (m, 5H), 4.89 (s, 1H), 4.24-4.12 (m, 1H), 3.95-3.94 (m, 1H), 3.89-3.60 (m, 5H), 3.46-3.42 (m, 1H), 3.32-3.14 (m, 4H), 3.10-2.89 (m, 2H), 2.84-2.73 (m, 2H), 2.62-2.50 (m, 1H), 2.06-2.02 (m, 2H), 1.73­ 1.28 (m, 10H), 0.92-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 50: 6-((S)-3-(D¡met¡lam¡no)p¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000049_0002
Se añad¡ó a una mezcla de 6-((S)-3-am¡nop¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4 (3H)-ona (12 mg, 0.024 mmol) y formaldehído (37 % en agua) (12 pL, 0,163 mmol) en metanol (1 mL), tr¡acetox¡boroh¡druro de sod¡o ( 86 mg, 0.408 mmol) y se ag¡tó la mezcla durante 30 m¡nutos.
Después de la concentrac¡ón in vacuo, se d¡solv¡ó el res¡duo en DCM, se lavó (. NaHCO3 ac.), se secó (separador de fases B¡otage) y se volv¡ó a concentrar. La l¡of¡l¡zac¡ón d¡o el compuesto del título ( 8 mg, 70%) como un sól¡do blanquec¡no. Lc MS (Método B): Rt = 0.67 m¡n, m/z= 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-cfo, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporc¡ón de 2:3 respectivamente): 6 8.07 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.02 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.49 (s, 1H), 4.53-4.50 (m, 1H), 4.23-4.05 (m, 2H), 3.89 (dd, 1H), 3.79 (dd, 1H), 3.71-3.63 (m, 1H), 3.28-3.15 (m, 2H), 3.07-2.90 (m, 3H), 2.83-2.72 (m, 1H), 2.63-2.49 (m, 1H), 2.4 (s, 6 H), 2.12-2.05 (m, 1H), 1.89-1.82 (m, 1H), 1.61-1.28 (m, 9H), 0.96-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 51: (R,E)-3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop-1-en-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000049_0003
Se desgas¡f¡có una mezcla del Producto Intermed¡o A (50 mg, 0.128 mmol), ác¡do (E)-(3-cloroprop-1-en-1-¡l)borón¡co (15, mg, 0.128 mmol), p¡rrol¡d¡na (0.021 ml, 0.256 mmol) y K2CO3 (44 mg, 0.321 mmol) en 1,4-d¡oxano (2 mL) - agua (0,4 mL) burbujeando N2 a través de la mezcla y se añad¡ó Pd(Ph3P)4 (7.41 mg, 6.41 pmol). Se calentó la reacc¡ón a 160 °C en el m¡croondas durante 20 m¡n, luego se d¡luyó con EtOAc y se f¡ltró a través de Cel¡te.® Se repart¡ó el f¡ltrado entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se lavaron (agua)los extractos orgán¡cos comb¡nados, se secaron sobre MgSO4 , se concentraron y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (columna 11 g B¡otage KP-NH, EtOAc al 0-100 %/c-hex, luego MeOH al 0-20 %/EtOAc). La pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal por HPLC preparativa (Método A) dio el compuesto del título (13 mg, 22 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método B): Rt = 0.70 min, m/z= 465 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 8.28 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.23 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.31-7.17 (m, 5H), 7.03 (dt, 1H), 6.50 (d, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.24-4.12 (m, 1H), 4.01 (dd, 1H), 3.86 (dd, 1H), 3.71-3.64 (m, 1H), 3.28­ 3.15 (m, 2H), 3.08-2.91 (m, 2H), 2.84-2.72 (m, 1H), 2.66-2.60 (m, 4H), 2.53-2.48 (m, 1H), 1.87-1.84 (m, 4H), 1.63-1.28 (m, 7H), 0.94-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 52: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-(piperidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000050_0001
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), 2-(piperidin-1-il)etanamina (41 mg, 0,321 mmol) y 1,4-dioxano (1 mL) en el microondas a 150 °C durante 30 minutos. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A) para dar el compuesto del título (14 mg, 44 %) como una goma incolora. LCMS (Método B): Rt = 0.68 min, m/z= 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 8.03 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.98 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.29 (s, 1H), 4.24-4.12 (m, 1H), 3.97-3.64 (m, 3H), 3.40-3.35 (m, 2H), 3.28-3.15 (m, 2H), 3.07-2.92 (m, 1H), 2.83-2.72 (m, 1H), 2.63-2.49 (m, 7H), 1.67-1.28 (m, 12H), 0.94-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 53: (R,S)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4-metoxi-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000050_0002
Paso 1: (rac)-Etil 4-metoxi-3-fenilbutanoato: Se disolvió fosfonoacetato de trietilo (0.859 ml, 4.33 mmol) en THF (10 mL) y se enfrió la solución a -78 °C. Se añadió gota a gota butillitio (2.5 M en hexanos, 1.86 mL, 4.66 mmol) y se agitó la mezcla resultante durante 15 min. Se añadió 2-metoxi-1-feniletanona (0.459 ml, 3.33 mmol) como una solución en THF (10 mL). Se agitó la mezcla durante 10 min, luego se dejó volver a TA y se agitó durante 90 min más. Se concentró la mezcla in vacuo. Se inactivó la reacción mediante la adición de HCl diluido y luego se extrajo la mezcla con diclorometano (x 3). Se lavaron los extractos orgánicos combinados secuencialmente con NaHCO diluidos y salmuera, luego se secó sobre MgSO4 y se concentró in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g de Si Grace Resolv; eludido con EtOAc al 0-20 %/c-hex) para dar un aceite incoloro.
Esto fue hidrogenado en un H-Cube® (Pd al 10%/C CatCart ®, 1 ml/min, 50 bar, ta) y se concentró la solución resultante para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (510 mg, 69 %). LCMS (Método A): Rt = 1.50 min, m/z= 223 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 6 7.27 (m, 5H), 4.06 (m, 2H), 3.50 (m, 3H), 3.33 (s, 3H), 2.80 (dd, 1H), 2.56 (dd, 1H), 1.13 (t, 3H).
Paso 2: Ácido (rac)-4-Metoxi-3-fenilbutanoico: Se disolvió (rac)-Etil 4-metoxi-3-fenilbutanoato de) (505 mg, 2.272 mmol) en etanol (10 mL) y se añadió una solución de hidróxido de sodio (182 mg, 4.54 mmol) en agua (10 mL). Se agitó la mezcla resultante a 50 °C durante 2 h. Se eliminaron los componentes volátiles in vacuo luego se acidificó la mezcla con HCl diluido hasta que el pH fue de aproximadamente 1. Se extrajo la mezcla con acetato de etilo (x2). Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4 y se concentró para dar el compuesto del título como un aceite incoloro (290 mg, 6 6 %). LCMS (Método A): Rt = 1.00 min, m/z = 195 [M+H]+.
Paso 3: (rac)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4-metoxi-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo [4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando ácido (rac)-4-metoxi-3-fenilbutanoico (8.3 mg, 0.043 mmol), tert-butil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato (20 mg, 0.043 mmol), h ATu (24 mg, 0.064 mmol), DIPEA (0.030 mL, 0.171 mmol) y Dc M (1 mL) dio el compuesto protegido con Boc como un vidrio incoloro. Esto se disolvió en DCM (1 mL) y TFA (1 mL) y se agitó durante 1 h, luego se concentró in vacuo. Se recogió el residuo en metanol y se añadió a un cartucho SCX-2 de 2 g.
Se enjuagó la columna con MeOH y luego se eludió con NH32 M en MeOH. Se concentraron las fracciones de NH3 para dar un vidrio que se purificó por cromatografía (11 g Biotage KP-NH; eludido EtOAc al 50-100 %/c-hex luego MeOH al 0-40 % /EtOAc) para dar un vidrio que se destiló azeotrópicamente con éter y luego con agua para dar el compuesto del título (13 mg, 56 %) como un sólido ceroso. LCMS (Método A): Rt = 0.68 min, m/z= 545 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-da): 8 7.97 (d, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 7.25 (m, 4H), 7.15 (m, 1H), 4.87 (d, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.97 (m, 3H), 3.80 (m, 2H), 3.65 (m, 1H), 3.45 (m, 2H), 3.20 (d, 3H), 2.60-2.85 (m, 1H), 2.63 (m, 2H), 2.20 (m, 2H), 1.50 (m, 1H), 1.30 (m, 4H).
Ejemplo 54: (R)-6-(1-(2-(Dimetilamino)etil)-1H-pirazol-4-il)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanol)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000051_0001
Paso 1: N,N-Dimetil-2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il)etanamina: Se calentó una mezcla de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (100 mg, 0.515 mmol), clorhidrato de 2-cloro-N,N-dimetiletanamina (82 mg, 0.567 mmol) y Cs2CO3 (504 mg, 1.546 mmol) en acetonitrilo (2 mL) a 90 °C durante 3 días. Después de enfriar a TA, se repartió la mezcla de reacción entre DCM y agua. Se extrajo la capa acuosa con DCM y se lavaron (agua) los extractos combinados, se secaron (MgSO4), y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título ( 76 mg, 56 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método B): Rt = 0.61 min, m/z= 266 [M+H]+.
Paso 2: (R)-6-(1-(2-(Dimetilamino)etil)-1H-pirazol-4-il)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metilo) pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico: Se desgasificó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), N,N-dimetil-2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il)etanamina (34 mg, 0.128 mmol) y Na2CO3 (27 mg, 0.256 mmol) en 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.2 mL) burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 min. Se añadió Pd(PPh3)4 (7.4 mg, 6.4 pmol) y se calentó la reacción en el microondas a 150 °C durante 10 min. Se cargó la mezcla de reacción directamente en un cartucho SCX-2 de 2 g. Después de reposar durante 5 min, se lavó el cartucho con DCM:MeOH (4:1). A continuación, se eludió el producto con Dc M:NH32 M en MeOH (4:1). La purificación por HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) dio el compuesto del título (12 mg, 17 %) como un sólido blanquecino. Lc Ms (Método B): Rt = 0.69 min, m/z= 493 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.46 (s, 1H), 8.34 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.31 (s, 1H), 8.29 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 6 . 6 8 (s, 1H), 4.45 (t, 2H), 4.24-4.12 (m, 1H), 4.01 (dd, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.74-3.65 (m, 1H), 3.28-2.92 (m, 3H), 3.14 (t, 2H), 2.84-2.71 (m, 1H), 2.64-2.49 (m, 1H), 2.54 (s, 6 H), 1.66­ 1.24 (m, 7H), 0.96-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 55: 6-((E)-3-((R)-3-Aminopirrolidin-1-il)prop-1-en-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanol)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000051_0002
Paso 1: (R,E)-tert-butil(1-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)alil)pirrolidin-3-il)carbamato: Se agitó una mezcla de (E)-2-(3-cloroprop-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (50 mg, 0.247 mmol), (R)-tert-butil pirrolidin-3-ilcarbamato (92 mg, 0.494 mmol) y K2CO3 (68.3 mg, 0.494 mmol) en MeCN (1 mL) a TA durante 18 h. Se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4 y se concentró para dar el compuesto del título bruto (80 mg) como un aceite amarillo que se usó como tal sin purificación. LCMS (Método B): Rt = 0.81 min, m/z= 353 [M+H]+.
Paso 2: 6-((E)-3-((R)-3-Aminopirrolidin-1-il)prop-1-en-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona.HCO2H: Se desgasificó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0,128 mmol), (R,E)-tert-butilo (1-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)alil)pirrolidin-3-il)carbamato (54 mg, 0.154 mmol) y Na2cO 3 (27 mg, 0.256 mmol) en 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.2 ml) burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 min. Se añadió Pd(PPh3)4 (7.4 mg, 6.4 pmol) y se calentó la reacción en el microondas a 150 °C durante 10 min. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo. Se disolvió el residuo bruto en DCM (0.5 mL) y se añadió HCl 4 M/1,4-dioxano (0.5 mL). Después de agitar durante 30 min, se cargó la solución directamente en un cartucho SCX-2 de 2 g. Después de reposar durante 5 min, se lavó el cartucho con DCM:MeOH (4:1). A continuación, se eludió el producto con DCM-2 M NH3 en MeOH (4:1). La purificación por HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) dio el compuesto del título (9 mg, 13 %) como una goma amarilla. LCMS (Método B): Rt = 0.57 min, m/z= 480 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente) : 6 8.38 (s, 1H), 8.32 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.29 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.34-7.19 (m, 5H), 6.99 (dt, 1H), 6.54 (d, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 4.02-3.64 (m, 4H), 3.56-3.35 (m, 1H), 3.28-2.90 (m, 6 H), 2.85-2.46 (m, 3H), 2.39-2.23 (m, 1H), 2.19-2.12 (m, 1H), 1.87-1.81 (m, 1H), 1.64-1.29 (m, 6 H), 0.95-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 56: 6-((E)-3-((S)-3-Aminopirrolidin-1-il)prop-1-en-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanol)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000052_0001
Paso 1: (S,E)-tert-Butil (1-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)alil)pirrolidin-3-il)carbamato: Se agitó una mezcla de (E)-2-(3-cloroprop-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (50 mg, 0.247 mmol), (S)-tert-butilpirrolidin-3-ilcarbamato (92 mg, 0.494 mmol) y K2CO3 ( 68 mg, 0.494 mmol) en MeCN (1 mL) a TA durante 18 h. Se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4 y se concentró para dar el compuesto del título bruto (60 mg) como un aceite amarillo que se usó sin purificación. lCm S (Método B): Rt = 0.83 min, m/z= 353 [M+H]+.
Paso 2: 6-((E)-3-((S)-3-Aminopirrolidin-1-il)prop-1-en-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona.HCÜ2H: Se desgasificó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0,128 mmol), (S,E)-tert butil (1-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)alil)pirrolidin-3-il)carbamato (54 mg, 0.154 mmol) y Na2cOa (27 mg, 0.256 mmol) en 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.2 mL) burbujeando N2 a través de la mezcla durante 5 min. Se añadió Pd(PPh3)4 (7.4 mg, 6.4 pmol) y se calentó la reacción en el microondas a 150 °C durante 10 min. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo. Se disolvió el residuo bruto en DCM (0.5 mL) y se añadió HCl 4 M/1,4-dioxano (0.5 mL). Después de agitar durante 30 min, se cargó la solución directamente en un cartucho SCX-2 de 2 g. Después de reposar durante 5 min, se lavó el cartucho con DCM-MeOH (4:1). A continuación, se eludió el producto con DCM-2 M NH3 en MeOH (4:1). La purificación por HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) dio el compuesto del título (12 mg, 18 %) como una goma amarilla. Lc Ms (Método B): Rt = 0.57 min, m/z= 480 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente)^ 8.43 (s, 1H), 8.32 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.28 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.36-7.19 (m, 5H), 6.99 (dt, 1H), 6.54 (d, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 4.02-3.64 (m, 4H), 3.56-3.35 (m, 1H), 3.28-2.90 (m, 6 H), 2.84­ 2.48 (m, 3H), 2.39-2.23 (m, 1H), 2.19-2.12 (m, 1H), 1.87-1.81 (m, 1H), 1.65-1.24 (m, 6 H), 0.96-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 57: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(((S)-1-fenil-3-(pirrolidin-1-il)propan-2-il)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000052_0002
Se calentó una mezcla de Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), (S)-1-fenil-3-(pirrolidin-1-il)propan-2-amina ( 66 mg, 0.321 mmol) y 1,4-dioxano (1 mL) en el microondas a 150 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título ( 8 mg, 20 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.83 min, m/z= 558 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 6 8.56 (s, 1H), 7.99 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.95 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 10H), 5.29 (s, 1H), 4.22-4.11 (m, 1H), 3.94-3.62 (m, 3H), 3.32-2.50 (m, 13H), 1.99-1.85 (br m, 4H), 1.58-1.22 (m, 7H), 0.92-0.86 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 58: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(((R)-2-(pirrolidin-1-il)propil)amino)pirimidin-4(3H )-ona
Figure imgf000053_0001
Paso 1: (R)-2-(Pirrolidin-1-il)propanamida: Se añadió a una mezcla de clorhidrato de (R. )-2-aminopropanamida (685 mg, 5.50 mmol), K2CO3 (760 mg, 5.50 mmol) y Kl (2.74 mg, 0.016 mmol) en acetonitrilo (17 mL), 1,4-dibromobutano (0.657 mL, 5.50 mmol). Después de calentar a 80 °C durante 18 h, se enfrió la reacción a temperatura ambiente y se añadieron HCl 2 N (15 mL) y DCM (20 mL). Se alcalinizó la capa acuosa con NaOH acuoso y se extrajo secuencialmente con DCM, EtOAc y CHCMPA (4:1). Se secaron los extractos orgánicos combinados (Na2SO4) y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (362 mg, 46 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 8 6.85 (br s, 1H), 5.25 (br s, 1H), 2.90 (br m, 1H), 2.50-2.70 (br m, 4H), 1.40-1.60 (br m, 4H), 1.35 (d, 3H).
Paso 2: (R)-2-(Pirrolidin-1-il)propan-1-amina: Se enfrió una solución de (R)-2-(pirrolidin-1-il)propanamida (360 mg, 2.53 mmol) en THF (15 mL) a 0 °C. LiAlH4 (384 mg, 10.13 mmol) y se calentó la mezcla a 50 °C durante 18 h. Además, se añadió LiAlH4 (384 mg, 10.13 mmol) y se continuó calentando a 50 °C durante 3 días. Se inactivó la reacción con una pequeña cantidad de KOH acuoso al 40 % y se agitó durante 30 min. La suspensión resultante se filtró a través de Celite® y se concentró in vacuo para dar el compuesto del título (>100 %) como un aceite amarillo que se usó sin purificación. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 3.76-3.72 (m, 4H), 2.73 (d, 2H), 2.34-2.26 (m, 1H), 1.89-1.84 (m, 4H), 1.10 (d, 3H).
Paso 3: 3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(((R)-2-(pirrolidin-1-il)propil)amino)pirimidina -4(3H)-ona.HCO2H: Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), ((R)-2-(pirrolidin-1-il)propan-1-amina (82 mg, 0.641 mmol) y 1,4-dioxano (1,5 ml) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (27 mg, 40 %) como un sólido de color naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.69 min, m/z = 482 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.52 (s, 1H), 8.12 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.08 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.42 (s, 1H), 4.22-4.10 (m, 1H), 3.99-3.55 (m, 5H), 3.51-2.93 (m, 10H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.11-2.02 (m, 4H), 1.62-1.28 (m, 7H), 0.96-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 59: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(((S)-2-(pirrolidin-1-il)propil)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000053_0002
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), ((S)-2-(pirrolidin-1-il)propan-1-amina (82 mg, 0.641 mmol) (preparado de la misma manera que el enantiómero (R) anterior) y 1,4-dioxano (1.5 mL) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (15 mg, 22 %) como un sólido de color naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.66 min, m/z= 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.53 (s, 1H), 8.12 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.08 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.42 (s, 1H), 4.22-4.11 (m, 1H), 3.98-3.55 (m, 5H), 3.51-2.93 (m, 10H), 2.83­ 2.73 (m, 1H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.10-2.00 (m, 4H), 1.62-1.28 (m, 7H), 0.97-0.90 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 60: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(((R)-1-(pirrolidin-1-il)propan-2-il)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000053_0003
Paso 1: (R)-tert-Butil (1-hidroxipropan-2-il)carbamato: Se enfrió una solución de (R)-2-aminopropan-1-ol (1 mL, 12.85 mmol) en THF (10 mL) a 0 °C y Na2CO3 (1.634 g, 15.42 mmol) seguido de agua ( 2 mL). Se añadió lentamente una solución de Boc2O (3.04 mL, 13.10 mmol) en THF (4 mL) durante 15 min y se agitó la reacción a 0 °C durante 1.5 h más. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo. Se repartió el residuo entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4 y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (2.35 g, 104 %) como un aceite incoloro que se usó como tal sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 4.65 (br s, 1H), 3.77 (br s, 1H), 3.60-3.70 (m, 1H), 3.48-3.53 (m, 1H), 2.61 (br s, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.14 (d, 3H).
Paso 2: Metanosulfonato de (R)-2-((tert-butoxicarbonil)amino)propilo: Se enfrió una solución de (R)-tert-butil (1-hidroxipropan-2 -il)carbamato) (2.25 g, 12.84 mmol) y Et3N (3.58 mL, 25. mmol) en DCM ( 20 mL) a 0 °C y se añadió MsCl (1.20 mL, 15.41 mmol). Después de agitar a TA durante 30 min, se inactivó la reacción con NaHCO3 ac. Se extrajo la capa acuosa con DCM y se secaron los extractos orgánicos combinados (separador de fases Biotage) y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (3.19 g, 98 %) como un sólido amarillo pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 4.61 (br s, 1H), 4.28-4.20 (br m, 1H), 4.17-4.14 (dd, 1H), 4.05-3.95 (br m, 1H), 3.04 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.24 (d, 3H).
Paso 3: (R)-tert-butil (1-(pirrolidin-1-il)propan-2-il)carbamato: Se calentó una solución de metanosulfonato de (R)-2-((tert-butoxicarbonil)amino)propilo (500 mg, 1.97 mmol) y pirrolidina (1.632 ml, 19.74 mmol) en THF (5 ml) a 70 °C durante 18 h. Se repartió la mezcla entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se lavaron los extractos orgánicos combinados (salmuera), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (389 mg, 8 6 %). 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 4.61 (br s, 1H), 3.67 (br m, 1H), 2.60-2.45 (m, 5H), 2.33 (dd, 1H), 1.80-1.72 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 1.17 (d, 3H).
Paso 4: (R)-1-(pirrolidin-1-il)propan-2-amina: Se agitó una solución de (R)-tert-butil (1-(pirrolidin-1-il)propan-2-il)carbamato (389 mg, 1.704 mmol) y TFA (1.5 mL, 19.47 mmol) en DCM (2.5 mL) durante 1 h. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo y se cargó en un cartucho SCX-2 de 5 g. Después de reposar durante 30 min, se lavó el cartucho con DCM:MeOH (4:1). Elución con DCM-2 M NH3 en MeOH (4:1), seguido de concentración in vacuo dio el compuesto del título (178 mg, 81 %) como un aceite marrón pálido que se usó como tal sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 8 3.09-3.02 (m, 1H), 2.65-2.61 (m, 1H), 2.51-2.35 (br m, 6 H), 2.25 (dd, 1H), 1.88-1.74 (m, 4H), 1.08 (d, 3H).
Paso 5: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(((R)-1-(pirrolidin-1-il)propano- 2-il)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico: Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0,128 mmol), (R)-1-(pirrolidin-1-il)propan-2-amina (82 mg, 0,641 mmol) y 1,4-dioxano (1.5 mL) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (23 mg, 35 %) como un sólido naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.66 min, m/z= 482 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.52 (s, 1H), 8.12 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.08 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.42 (s, 1H), 4.45 (br s, 1H), 4.22-4.10 (m, 1H), 3.94-3.61 (m, 3H), 3.51-2.94 (m, 10H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.10-2.00 (m, 4H), 1.62-1.26 (m, 9H), 0.98-0.91 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 61: 3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(((S)-1-(pirrolidin-1-il)propan-2-il)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000054_0001
Se calentó una mezcla de Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), (S)-1-(pirrolidin-1-il)propan-2-amina (82 mg, 0.641 mmol) (preparado como el enantiómero (R) anterior) y 1,4-dioxano (1.5 mL) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (15 mg, 22 %) como un sólido de color naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.69 min, m/z = 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.54 (s, 1H), 8.11 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.07 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.41 (s, 1H), 4.45 (br s, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 4.00-3.65 (m, 3H), 3.51-2.93 (m, 10H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.10-2.00 (m, 4H), 1.62-1.26 (m, 9H), 0.95-0.88 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 62: 6-((S)-3-(Dimetilamino)pirrolidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H )-ona
Figure imgf000055_0001
Se añadió a una mezcla de 6-((S)-3-aminopirrolidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1 -((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4 (3H)-ona.HCO2H (50 mg, 0,103 mmol) y formaldehído (37 % en agua) (31 j L, 0,412 mmol) en metanol (2 mL) triacetoxiborohidruro de sodio (218 mg, 1.03 mmol) y se agitó la mezcla durante 30 min. Después de la concentración in vacuo, se disolvió el residuo en DCM, se lavó (NaHCO3 ac), se secó (separador de fases Biotage) y se concentró de nuevo. La liofilización dio el compuesto del título (28 mg, 59%) como un sólido blanquecino. LCMS (Método B): Rt = 0.63 min, m/z= 468 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.08 (s, 0.4H (confórmero A)), 8 .01 (s, 0.6 H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.22 (s, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 4.02-3.64 (m, 5H), 3.30-3.15 (m, 3H), 3.08-2.92 (m, 2H), 2.83-2.72 (m, 1H), 2.63-2.49 (m, 1H), 2.39 (s, 6 H), 2.42-2.27 (m, 1H), 2.00-1.85 (m, 1H), 1.62-1.27 (m, 7H), 0.95-0.88 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 63: rac-6-(((±-trans-1,2)-2-AminocidohexN)amino)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenNbutanol)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000055_0002
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), (rac)-trans-1,2-diaminoddohexano (77 j L, 0.641 mmol) y 1,4-dioxano (1.5 mL) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (14 mg, 21 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.69 min, m/z= 468 [M+H]+. 1H RMN (400 m Hz , metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.53 (s, 1H), 8.10 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.06 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.41 (s, 1H), 4.22-4.10 (m, 1H), 3.99-3.61 (m, 4H), 3.29-2.93 (m, 4H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.18-1.98 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 2H), 1.63-1.29 (m, 10H), 0.99-0.88 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 64: 6-(((±-c/s-1,2)-2-aminociclohexil)amino)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanol)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000055_0003
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), c/s-1,2-diaminociclohexano (77 jl, 0.641 mmol) y 1,4-dioxano (1.5 mL) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (22 mg, 33 %) como un sólido amarillo pálido. LCm S (Método B): Rt = 0.69 min, m/z= 468 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.53 (s, 1H), 8.12 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.08 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.55 (s, 1H), 4.40 (br s, 1H), 4.22-4.10 (m, 1H), 4.00-3.61 (m, 3H), 3.50-3.43 (m, 1H), 3.29-2.96 (m, 3H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.63-2.50 (m, 1H), 1.90-1.29 (m, 15H), 0.98-0.88 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 65: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((((R)-1-metilpirrolidin-2-il)metil)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000056_0001
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), (R)-(1-met¡lp¡rrol¡d¡n-2-¡l)metanam¡na (73 mg, 0.641 mmol) y 1,4-d¡oxano (1.5 mL) en el m¡croondas a 150 °C durante 30 m¡n. Se concentró la mezcla de reacc¡ón y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante HPLC preparat¡va (Método A, cond¡c¡ones ác¡das) para dar el compuesto del título (24 mg, 37 %) como un sól¡do amar¡llo pál¡do. LCMS (Método B): Rt = 0.71 m¡n, m/z= 468 [M+H]+. 1H RMN (400 m Hz , m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporc¡ón de 2:3 respectivamente): 6 8.43 (s, 1H), 8.15 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.11 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.36-7.17 (m, 5H), 5.34 (s, 1H), 4.55 (br s, 1H), 4.21-4.08 (m, 1H), 4.01-3.61 (m, 3H), 3.51-3.43 (m, 1H), 3.32-2.97 (m, 6 H), 2.74 (s, 3H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.25-1.91 (m, 4H), 1.62-1.31 (m, 7H), 1.02-0.92 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 6 6 : 3-((4-H¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((((S)-1-met¡lp¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona, ác¡do fórm¡co
Figure imgf000056_0002
Se calentó una mezcla de Producto Intermed¡o A (50 mg, 0.128 mmol), (S)-(1-met¡lp¡rrol¡d¡n-2-¡l)metanam¡na (73 mg, 0.641 mmol) y 1,4-d¡oxano (1.5 mL) en el m¡croondas a 150 °C durante 30 m¡n. Se concentró la mezcla de reacc¡ón y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante HPLC preparativa (Método A, cond¡c¡ones ác¡das) para dar el compuesto del título (26 mg, 39 %) como un sól¡do amar¡llo pál¡do. LCMS (Método B): Rt = 0.72 m¡n, m/z= 468 [M+H]+. 1H RMN (400 m Hz , m e ta n o ld esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporc¡ón de 2:3 respectivamente): 6 8.44 (s, 1H), 8.15 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.11 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.36-7.17 (m, 5H), 5.34 (s, 1H), 4.55 (br s, 1H), 4.21-3.61 (m, 4H), 3.50-3.40 (m, 1H), 3.32-2.97 (m, 6 H), 2.73 (s, 3H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.25-1.91 (m, 4H), 1.62-1.31 (m, 7H), 0.99-0.88 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 67: (R)-3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000056_0003
Proced¡m¡ento A General ut¡l¡zando p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (22 mg, 0.23 mmol), Cs2CO3 (94 mg, 0.29 mmol), Epóx¡do 2 (50 mg, 0.19 mmol) y DMF (1 mL) d¡o el compuesto del título (27 mg, 39 %) como un sól¡do blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.88 m¡n, m/z= 356 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 6 7.92-8.10 (m, 2H), 7.25 (m, parc¡almente oscurec¡do por solvente, presunto 5H), 6.52 (d, 1H), 4.25-4.50 (m, 1H), 3.48-4.06 (m, 4H), 2.80-3.46 (m, 3H), 2.70 (m, 1H), 2.51 (m, 1H), 1.50 (m, 2H), 1.28 (m, 4H), 0.70 (m, 1H).
Ejemplo 6 8 : (R)-9-(4-(Am¡nomet¡l)fen¡l)-1-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-1H-pur¡n-6(9H)-ona
Figure imgf000056_0004
Paso 1: tert-Butil 4-((6-doro-5-nitropirímidin-4-il)amino)bendlcarbamato: Se añad¡ó lentamente una soluc¡ón de tert-but¡l 4-am¡nobenc¡lcarbamato (2.36 g, 10.6 mmol) (p Ct Int. Sol¡c¡tud, 9905096, 04 de febrero de 1999) en THF (21 mL) a una soluc¡ón de 4,6-d¡cloro-5-n¡trop¡r¡m¡d¡na (2.06 g, 10.6 mmol) y NEt3 (1.78 ml, 12.7 mmol) en THF (21 mL) ut¡l¡zando un embudo de goteo de ¡gualac¡ón de pres¡ón. Después de 16 h, se ¡nact¡vó la reacc¡ón med¡ante la ad¡c¡ón de NaHCO3(ac) saturado (150 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas tenían un precipitado fino, por lo que se añadió DCM (200 mL) para dar una solución homogénea que se pasó a través de un separador de fases Biotage antes de concentrarla. Se suspendió la pasta en una mezcla de MeOH y DCM (1:1 ~75 mL) y se filtró el precipitado. Se concentró el filtrado y se secó el residuo in vacuo para dar el compuesto del título (2.58 g, 64 %) como un sólido amarillo. Se usó este compuesto sin purificación adicional. LCMS (Método A): Rt = 1.57 min, m/z = 380, 382 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-da): 8 8.48 (s, 1H), 7.41 (d, 2H), 7.23 (d, 2H), 4.10 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Paso 2: tert-Butil 4-((5-amino-6-doropirímidin-4-il)amino)bendlcarbamato : Se calentó una suspensión de tert-butil 4-((6-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)bencilcarbamato (2.58 g, 6.79 mmol) y Fe (3.79 g, 67.9 mmol) en AcOH ( 6 8 mL) a 80 °C durante 1 h antes de enfriarse a TA y se filtró la mezcla de reacción para eliminar el Fe sin reaccionar. Se concentró el filtrado, se saturó con NaHCO3(ac) (500 mL) y se extrajo la mezcla con DCM (3 x 200 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (120 g sílice GraceResolv™, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (900 mg, 38 %) como una espuma de color amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.28 min, m/z = 350, 352 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 8.10 (s, 1H), 7.47-7.30 (m, 2H), 7.20-7.00 (m, 2H), 5.03 (br. s, 1H), 4.23 (d, 2H), 3.90 (br. s, 2H), 1.47 (s, 9H).
Paso 3: tert-Butil 4-(6-doro-9H-purin-9-il)bendlcarbamato: Se calentó una solución de tert-butil 4-((5-amino-6-cloropirimidin-4-il)amino)bencilcarbamato (245 mg, 0.700 mmol), ortoformiato de trietilo (0.583 mL, 3.50 mmol) y NEt3 (98 |jL, 0.700 mmol) en MeCN (2.80 mL) en un microondas a 140 °C durante 1 h. Se añadió más ortoformiato de trietilo (0.583 mL, 3.50 mmol) y se calentó la reacción a 140 °C durante 5 h. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (40 g sílice GraceResolv™, EtOAc al 0-70 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (228 mg, 90 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.34 min, m/z = 360, 362 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 8.82 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.53 (d, 2H), 4.99 (br. s, 1H), 4.42 (d, 2H), 1.48 (s, 9H).
Paso 4: tert-Butil 4-(6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bencilcarbamato: Se calentó una mezcla de tert-butil 4-(6-cloro-9H-purin-9-il)bencilcarbamato (201 mg, 0.559 mmol), NaOH(ac) 1 M (2.24 mL, 2.235 mmol) y MeOH (2.24 mL) a 80 °C durante 17 h antes de dejar que se enfriara la reacción a temperatura ambiente. Se ajustó el pH a pH 4 mediante la adición de AcOH y se aisló el precipitado mediante filtración. Se lavó el precipitado con agua (3 x 5 mL) y luego se secó bajo alto vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (89 mg, 46 %) como un sólido beige rosado. A continuación, se extrajeron el filtrado combinado y los lavados acuosos con DCM (3 x 20 mL) utilizando un separador de fases Biotage. A continuación, se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g sílice GraceResolv™, MeOH al 0-40 % en DCM) para dar el compuesto del título (52 mg, 27 %) como un sólido amarillo. LCMS (Método A): Rt = 0.94 min, m/z = 342 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 12.42 (br. s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.52 (t, 1H), 7.42 (d, 2H), 4.19 (d, 2H), 1.40 (s, 9H).
Paso 5: Bencil 4-((9-(4-(((tert-butoxicarbonil)amino)metil)fenil)-6-oxo-6,9-dihidro-1H-purin-1-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1 -carboxilato: Procedimiento 1 General 1 utilizando Epóxido 4 (120 mg, 0.486 mmol), tert-butil 4-(6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bencilcarbamato (83 mg, 0.243 mmol), Cs2CO3 (87 mg, 0.267 mmol) y DMF (0,8 mL) dio el compuesto del título (94 mg, 65 %) como una goma amarilla turbia. LCm S (Método A): Rt = 1.36 min, m/z= 589 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 8.03 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.58 (d, 2H), 7.50 (d, 2H), 7.39-7.30 (m, 5H), 5.31 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.98 (br. s, 1H), 4.41 (d, 2H), 4.08-3.89 (br. m, 2H), 3.34-3.17 (br. m, 2H), 1.6-1.54 (br. m, 4H), 1.48 (s, 9H).
Paso 6: tert-Butil 4-(1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bendlcarbamato: Procedimiento 7 General 7 utilizando bencil 4-((9-(4-(((tert-butoxicarbonil)amino)metil)fenil)-6-oxo-6,9-dihidro-1H-purin-1-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (90 mg, 0.153 mmol), Pd al 10 % sobre carbón (16 mg, 0.015 mmol), formiato de amonio (289 mg, 4.59 mmol) y EtOH (1.5 mL) después de 50 min dio el compuesto del título (54 mg, 78 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.71 min, m/z = 455 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 8.13 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.56 (d, 2H), 7.48 (d, 2H), 4.39 (d, 2H), 4.18 (s, 2H), 2.96-2.85 (m, 4H), 1.75-1.50 (m, 4H), 1.47 (s, 9H).
Paso 7: (R)-9-(4-(Aminometil)fenil)-1-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-1H-purin-6(9H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando tert-butil 4-(1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bencilcarbamato (29 mg, 0.064 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (16 mg, 0.096 mmol), HATU (36 mg, 0.096 mmol), DIPEA (45 j L, 0.255 mmol) y DCM (1.3 mL) y luego el Procedimiento 2 General utilizando TFA (1 mL) y DCM (1 mL) dieron el compuesto del título (24 mg, 65 % (2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.66 min, m/z= 501 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 8.47 (s, 1H), 8.29-8.22 (m, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 7.29­ 7.21 (m, 4H), 7.20-7.11 (m, 1H), 4.91 (d, 1H), 4.25-3.84 (m, 3H), 3.84-3.48 (m, 3H), 3.30-3.08 (m, 2H), 2.99-2.52 (m, 3H), 1.61 (m, 4H), 1.20 (d, 3H).
Ejemplo 69: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-((S)-2-metilpirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000058_0001
Paso 1: Metanosulfonato de 2-((tert-Butoxicarbonil)amino)etilo: Se enfrió una solución de tert-butil (2-hidroxietil)carbamato (1.5 mL, 9.70 mmol) y Et3N (3.38 mL, 24.24 mmol) en DCM (15 mL) a 0 °C y se añadió lentamente cloruro de metanosulfonilo (0.907 mL, 11.64 mmol). Después de agitar a TA durante 30 min, se inactivó la reacción con NaHCO3 ac. Se extrajo la capa acuosa con DCM. Se secaron los extractos combinados(separador de fases Biotage) y se concentraron para dar el compuesto del título (2.54 g, 109 %) como un aceite incoloro que se usó sin purificación. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 4.92 (br s, 1H), 4.29 (t, 2H), 3.50-3.46 (m, 2H), 3.04 (s, 3H), 1.45 (s, 9H).
Paso 2: (S)-tert-Butil (2-(2-metilpirrolidin-1-il)etil)carbamato : Se calentó una solución de metanosulfonato de 2-((tert-butoxicarbonil)amino)etilo (200 mg, 0.836 mmol) y (S)-2-metilpirrolidina (0.211 mL, 2.09 mmol) en THF (2 mL) a 70 °C durante 3 h. Se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4 y se concentraron para dar el compuesto del título crudo (181 mg, < 95 %) como un aceite amarillo que se usó sin purificación. LCMS (Método B): Rt = 0.56 min, m/z= 229 [M+H]+.
Paso 3: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-((S)-2-metilpirrolidin-1-il)etil)amino )pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico: Se agitó una solución de (S)-tert.-butil (2-(2-metilpirrolidin-1-il)etil)carbamato (181 mg, 0.793 mmol) y TFA (0.5 mL, 6.49 mmol) en DCM (2 mL) durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo, y luego se cargó en un cartucho SCX-2 de 2g. Después de reposar durante 30 min, se lavó el cartucho con DCM-MeOH (4:1). Elución con DCM-2 M NH3 en MeOH (4:1), seguido de concentración in vacuo dio (S)-2-(2-metilpirrolidin-1-il)etanamina cruda que se combinó con el Producto Intermedio A (40 mg, 0.103 mmol) y 1,4-dioxano (1.5 mL), y se calentó en el microondas a 175 ° C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (11 mg, 21 %) como un sólido naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.68 min, m/z = 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.53 (s, 1H), 8.11 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.06 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.38 (s, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 3.94 (dd, 1H), 3.80 (dd, 1H), 3.77-3.55 (m, 3H), 3.51-3.38 (m, 1H), 3.29-3.15 (m, 2H), 3.09-2.93 (m, 3H), 2.83-2.72 (m, 1H), 2.63-2.49 (m, 1H), 2.30-2.21 (m, 1H), 2.10-1.98 (m, 4H), 1.74-1.26 (m, 10H), 0.96-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 70: 3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-((R)-2-(metoximetil)pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000058_0002
Paso 1: (R)-tert-Butil (2-(2-(metoximetil)pirrolidin-1-il)etil)carbamato : Siguiendo el procedimiento para (S)-tert-butil(2-(2-metilpirrolidin-1-il)etil)carbamato, se hizo reaccionar (R)-2-(metoximetil)pirrolidina (0.26 ml, 2.09 mmol) para dar (R)-tert-butil (2-(2-(metoximetil)pirrolidin-1-il)etil)carbamato crudo (187 mg, <87 %) que se usó sin purificación. LCMS (Método B): Rt = 0.60 min, m/z= 259 [M+H]+.
Paso 2: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-((R)-2-(metoximetil)pirrolidin-1-il) etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona: Siguiendo el procedimiento para 3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-((S)-2-metilpirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico, se hicieron reaccionar(R)-tert-butil (2-(2-(metoximetil)pirrolidin-1-il)etil)carbamato (187 mg, 0.724 mmol) y el Producto Intermedio A (40 mg, 0.103 mmol) y se purificó la mezcla por HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas ) para dar el compuesto del título (30 mg, 57 %) como un sólido naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.82 min, m/z= 512 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanold4 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.03 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.98 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.29 (s, 1H), 4.24-4.12 (m, 1H), 3.99-3.64 (m, 4H), 3.43-2.92 (m, 7H), 2.83-2.72 (m, 2H), 2.63-2.49 (m, 2H), 2.40-2.33 (m, 1H), 2.05 (s, 3H), 2.00-1.91 (m, 1H), 1.83-1.72 (m, 2H), 1.63-1.28 (m, 8 H), 0.95-0.87 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 71: 3-((4-Hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-((S)-3-metilpirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000059_0001
Paso 1: Dimetanosulfonato de (S)-2-Metilbutano-1,4-diil: Se enfrió una solución de (S)-2-metilbutano-1,4-diol (0.5 mL, 4,76 mmol) y Et3N (3.32 mL, 23.81 mmol) en DCM (10 mL) a 0 °C y se añadió lentamente cloruro de metanosulfonilo (0.891 ml, 11.43 mmol). Después de agitar a TA durante 30 min, se inactivó la reacción con NaHCO3 ac. Se extrajo la capa acuosa con DCM. Se secaron los extractos combinados (separador de fases Biotage) y se concentraron para dar el compuesto del título (crudo, 1.39 g) como un aceite naranja que se usó sin purificación. 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 8 4.37-4.27 (m, 2H), 4.12 (ddd, 2H), 3.03 (s, 6 H), 2.18-2.08 (m, 1H), 2.00-1.91 (m, 1H), 1.70-1.61 (m, 1H), 1.07 (d, 3H).
Paso 2: (S)-tert-Butil (2-(3-metilpirrolidin-1-il)etil)carbamato : Se calentó una mezcla de dimetanosulfonato de (S)-2-metilbutano-1,4-diil (300 mg, 1.152 mmol) y tert-butil (2-aminoetil)carbamato (0.9 mL, 5.76 mmol) a 100 °C bajo condiciones de microondas durante 10 minutos. Se repartió la mezcla de reacción entre DCM y NaHCOaac. Se extrajo la capa acuosa con DCM. Se lavaron los extractos combinados (NaHCO3 ac), se secaron (separador de fases Biotage) y se concentraron para dar el compuesto del título (crudo, 374 mg) como un aceite naranja que se usó sin purificación. LCMS (Método B): Rt = 0.50 min, m/z = 229 [M+H]+.
Paso 3: (S)-2-(3-Metilpirrolidin-1-il)etanamina: Se agitó una solución de (S)-terf-butil (2-(3-metilpirrolidin-1-il)etil)carbamato(263 mg, 1.152 mmol) y TFA (1.0 mL, 12.98 mmol) en DCM (2 mL) durante 1 h. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo, y luego se cargó en un cartucho SCX-2 de 5g. Después de reposar durante 30 min, se lavó el cartucho con DCM-MeOH (4:1). Elución con DCM-2 M NH3 en MeOH (4:1), seguido de concentración in vacuo dio el compuesto del título (en bruto, 135 mg) como un aceite naranja que se usó sin purificación. 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 8 6.67 (br s, 2H), 3.04-2.99 (m, 2H), 2.91-2.63 (m, 5H), 2.36-2.27 (m, 1H), 2.21 (dd, 1H), 2.11-2.03 (m, 1H), 1.47-1.38 (m, 1H), 1.06 (d, 3H).
Paso 4: 3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-((S)-3-metilpirrolidin-1-il)etil)amino )pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico: Se calentó una mezcla de Producto Intermedio A (40 mg, 0.103 mmol), (S)-2-(3-metilpirrolidin-1-il)etanamina ( 66 mg, 0.513 mmol) y 1,4-dioxano (1.5 ml) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (10 mg, 19 %) como un sólido naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.84 min, m/z = 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.52 (s, 1H), 8.11 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.07 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 5H), 5.38 (s, 1H), 4.22-4.10 (m, 1H), 3.99-3.44 (m, 6 H), 3.29-2.93 (m, 6 H), 2.83-2.72 (m, 2H), 2.63-2.44 (m, 2H), 2.28­ 2.19 (m, 1H), 1.70-1.28 (m, 8 H), 1.16 (d, 3H), 0.96-0.89 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 72: (R)-9-(4-(Aminometil)fenil)-1-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-8-metil-1H-purin-6(9H)-ona
Figure imgf000059_0002
Paso 1: tert-Butil 4-(6-cloro-8-metil-9H-purin-9-il)bencilcarbamato : Se calentó una solución de tert-butil 4-((5-amino-6-cloropirimidin-4-il)amino)bencilcarbamato (264 mg, 0.755 mmol), ortoacetato de trimetilo (0.480 mL, 3.77 mmol) y NEt3 (0.105 mL, 0.755 mmol) en MeCN (3 mL) en un microondas a 140 °C durante 1 h. Se añadió más ortoacetato de trimetilo (0.480 mL, 3,77 mmol) y se calentó la reacción a 140 °C durante 15 h. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (40 g sílice GraceResolv™, EtOAc al 0-70 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (200 mg, 71 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.30 min, m/z = 374, 376 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 8.67 (s, 1H), 7.56 (d, 2H), 7.37 (d, 2H), 4.99 (br. s, 1H), 4.45 (d, 2H), 2.62 (s, 3H), 1.49 (s, 9H).
Paso 2: acetato de tert-Butil 4-(8-metil-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bencilcarbamato : Se calentó una mezcla de tert-butil 4-(6-cloro-8-metil-9H-purin-9-il)bencilcarbamato (223 mg, 0.597 mmol), NaOH(ac) 1 M (2.39 mL, 2.39 mmol) y MeOH (2.39 mL) a 80 °C durante 24 h. Además, se añadió NaOH(ac) 1 M (1 mL) y se calentó la reacción a 80 °C durante 16 h más. Se dejó enfriar la reacción a TA y se añadió AcOH para ajustar el pH a ~pH 4. Se diluyó la mezcla con agua (15 mL) y luego se extrajo con DCM (3 x 25 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se secó el residuo in vacuo para dar el compuesto del título (175 mg, 70 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.94 min, 356 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe): 8 12.31 (br. s, 1H), 11.95 (br. s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.53 (t, 1H), 7.49-7.39 (m, 4H), 4.23 (d, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.91 (s, 3H), 1.41 (s, 9H).
Paso 3: Bencil 4-((9-(4-(((tert-butoxicarbonil)amino)metil)fenil)-8-metil-6-oxo-6,9-dihidro-1H-purín-1-il)metil)-4 -hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General 1 utilizando Epóxido 4 (119 mg, 0.481 mmol), acetato de tert-butil 4-(8-metil-6-oxo-1H-purin-9(6H )-il)bencilcarbamato (100 mg, 0.241 mmol), Cs2CO3(165 mg, 0.505 mmol) y DMF (0.8 ml) dio el compuesto del título (100 mg, 69 %) como un sólido incoloro. Lc MS (Método A): 1.35 min, m/z = 603 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 7.96 (s, 1H), 7.47 (d, 2H), 7.41-7.23 (m, 7H), 5.20 (t, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.41 (d, 2H), 4.25-3.83 (m, 5H), 3.33-3.09 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 1.69-1.50 (m, 4H), 1.48 (s, 9H).
Paso 4: tert-Butil 4-(1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-metil-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bencilcarbamato: Procedimiento 7 General utilizando bencil 4-((9-(4-(((terf-butoxicarbonil)amino)metil)fenil)-8-metil-6-oxo-6,9-dihidro-1H-purin-1-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (100 mg, 0.166 mmol), Pd al 10 % sobre carbón (18 mg, 0.017 mmol), formiato de amonio (314 mg, 4.98 mmol) y EtOH (1,7 ml) después de 2 h dio el compuesto del título (56 mg, 72 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.71 min, m/z = 469 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 8.04 (s, 1H), 7.49 (d, 2H), 7.31 (d, 2H), 5.20 (br. s, 1H), 4.41 (d, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.02-2.66 (m, 4H), 2.44 (s, 3H) 1.74-1.50 (m, 4H), 1.48 (s, 9H).
Paso 6: (R)-9-(4-(Aminometil)fenil)-1-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-8-metil-1H-purin-6(9H )-ona: Procedimiento 4 General 4 utilizando tert-butil 4-(1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-metil-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bencilcarbamato (30 mg, 0.065 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (16 mg, 0.097 mmol), HATU (37 mg, 0.097 mmol), DIPEA (45 |jL, 0 . 2 6 0 mmol) y DCM (1.3 mL) y luego el Procedimiento 2 General utilizando TFA (1 mL) y DCM (1 ml) dieron el compuesto del título (24 mg, 73 % ( 2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.66 min, m/z = 515 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 8.15-8.09 (m 1H), 7.55 (d, 2H), 7.42 (d, 2H), 7.32-7.22 (m, 4H), 7.20­ 7.11 (m, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.14-3.84 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.73-3.58 (m, 1H), 3.26-3.05 (m, 3H), 2.94-2.54 (m, 4H), 2.34 (s, 3H), 1.59-1.25 (m, 4H), 1.21 (d, 3H).
Ejemplo 73: 6-((2-((R)-3-fluoropirrolidin-1-il)etil)amino)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000060_0001
Se calentó una solución de metanosulfonato de 2-((tert-butoxicarbonil)amino)etilo (200 mg, 0.836 mmol), Et3N (0.47 mL, 3.34 mmol) y clorhidrato de (R)-3-fluoropirrolidina (210 mg, 1.672 mmol) a 70 °C durante 3 h. Se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4 y se concentraron. Se disolvió el residuo en HCl 4 M en 1,4-dioxano (2 mL) y se agitó durante 18 h, antes de concentrar hasta sequedad. Se combinó el sólido resultante con Producto Intermedio A (40 mg, 0.103 mmol), Et3N (0.1 mL, 0.717 mmol) y 1,4-dioxano (1.5 mL) y se calentó en el microondas a 175 °C durante 60 min. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo y se purificó el residuo resultante por HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (3.0 mg, 6 %) como un sólido naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.67 min, m/z = 486 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.42 (s, 1H), 8.06 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.01 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.19 (m, 5H), 5.32 (s, 1H), 4.23-4.12 (m, 1H), 3.92 (dd, 1H), 3.79 (dd, 1 H), 3.72-3.38 (m, 4H), 3.28-2.72 (m, 8 H), 2.63-2.49 (m, 1H), 2.40-2.03 (m, 2H), 1.63-1.28 (m, 8 H), 0.95-0.87 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 74: 6-((2-((S)-3-Fluoropvrrolidin-1-il)etil)amino)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000060_0002
Siguiendo el procedimiento del Ejemplo 73, se hizo reaccionar clorhidrato de (S)-3-fluoropirrolidina (210 mg, 1.672 mmol) para dar el compuesto del título (4.1 mg, 8 %) como un sólido naranja pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.67 min, m/z = 486 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.40 (s, 1H), 8.06 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.01 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.357.17 (m, 5H), 5.33 (s, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 3.92 (dd, 1H), 3.79 (dd, 1H), 3.72-3.38 (m, 4H), 3.28-2.72 (m, 8 H), 2.63­ 2.49 (m, 1H), 2.38-2.03 (m, 2H), 1.63-1.28 (m, 8 H), 0.95-0.87 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 75: 3-(4-((R)-1-am¡noet¡l)fen¡l)-6-((4-h¡drox¡-1-((R)-4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000061_0001
Paso 1: Ácido (R)-(4-(1-((tert-butoxicarbonil)amino)etil)fenil)borónico: Se añad¡eron Nalo4 (5.99 g, 28.0 mmol) y NH4Cl (2.16 g, 28.0 mmol) a una suspens¡ón de (R)-tert-butil (1-(4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborlan-2-¡l)fen¡l)et¡l)carbamato(3.24 g, 9.33 mmol) (PCT Int. Sol¡c¡tud, 2011123419, 06 de octubre de 2011) en acetona (93 mL) y agua (93 mL) y se ag¡tó la reacc¡ón a TA durante 16 h antes de concentrar la mezcla para el¡m¡nar la mayor parte de la acetona. Se d¡luyó la suspens¡ón acuosa resultante que tenía un pH ¡n¡c¡al de pH 6-7 con agua (50 mL) y DCM (50 mL) y luego se ajustó el pH a pH 5 med¡ante la ad¡c¡ón de HCl(ac) 1 M. A cont¡nuac¡ón, se separaron las fases ut¡l¡zando un separador de fases B¡otage y se extrajo la fase acuosa ad¡c¡onalmente con DCM (2 x 50 mL). Se concentraron las fases orgán¡cas comb¡nadas y se pur¡f¡có el producto por cromatografía ultrarráp¡da (80 g síl¡ce GraceResolv™, MeOH al 0-15 % en DCM) para dar el compuesto del título (1.09 g, 44 %) como un sól¡do ¡ncoloro. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 7.97 (s, 1H), 7.70 (t, 2H), 7.38 (d, 1H), 7.25 (d, 2H), 4.60 (m, 1H), 3.61 (s, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.29 (d, 3H) y señales de borox¡na.
Paso 2: (R)-3-Bromo-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4, 3-d]pirimidin-7(6H)-ona (Producto Intermedio E): Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 3-bromo-6-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (132 mg, 0.385 mmol), ác¡do (R)-4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡co (70 mg, 0.32 mmol), HATU (122 mg, 0.32 mmol), DIPEA (0.224 mL, 1.283 mmol) y d Cm (20 mL) y d¡o el compuesto del título (142 mg, 82 %) como un sól¡do blanco. LCMS (Método B): Rt = 1.19 m¡n, m/z 542,544 [M+H]+.
Paso 3: 3-(4-((R)-1-Aminoetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4 -il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Proced¡m¡ento 5 General ut¡l¡zando Producto Intermed¡o E (30 mg, 0.055 mmol), ác¡do (R)-(4-(1-((tert- butox¡carbon¡l)am¡no)et¡l)fen¡l)borón¡co (29 mg, 0 .111 mmol), Pd(PPh3)4 (6.4 mg, 5.53 pmol), K3PO4 (47 mg, 0.221 mmol), 1,4-d¡oxano (0.415 mL) y agua (0.138 mL) a 130 °C durante 1 h en el m¡croondas, y luego el Proced¡m¡ento 2 General ut¡l¡zando TFA (0.7 mL) y DCM (0,7 mL) d¡eron el compuesto del título (12 mg, 35 % (2 pasos)) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.89 m¡n, m/z = 583 [M+H]+. 1H RMN (300 Mh z , DMSO-d6): 8 8.02-7.93 (m, 1H), 7.70-7.49 (m, 4H), 7.45-7.23 (m, 5H), 4.90 (s, 1H), 4.26-3.64 (m, 7H), 3.56-2.76 (m, 8 H), 1.65­ 0.94 (m, 7H).
Ejemplo 76: 3-(4-((S)-1-am¡noet¡l)fen¡l)-6-((4-h¡drox¡-1-((R)-4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000061_0002
Paso 1: Ácido (S)-(4-(1-((tert-Butoxicarbonil)amino)etil)fenil)borónico: Se añad¡eron Nalo4 (5.53 g, 25.8 mmol) y NH4 Cl (1.99 g, 25.8 mmol) a una suspens¡ón de (S)-tert-butil (1-(4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborlan-2-¡l)fen¡l)et¡l)carbamato (2.99 g, 8.61 mmol) (p Ct Int. Sol¡c¡tud, 2011123419, 0 6 de octubre de 2011) en acetona ( 86 ml) y agua ( 86 ml) y se ag¡tó la reacc¡ón a TA durante 16 h antes de concentrar la mezcla para el¡m¡nar la mayor parte de la acetona. Se d¡luyó la suspens¡ón acuosa resultante, que tenía un pH ¡n¡c¡al de pH 6-7, se d¡luyó con agua (50 mL) y DCM (50 mL) antes de ajustar el pH a pH 5 med¡ante la ad¡c¡ón de HCl(ac) 1 M. A cont¡nuac¡ón, se separaron las fases ut¡l¡zando un separador de fases B¡otage y se extrajo la fase acuosa ad¡c¡onalmente con DCM (2 x 50 mL). Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el producto por cromatografía ultrarrápida (80 g sílice GraceResolv™, MeOH al 0-15 % en DCM) para dar el compuesto del título (928 mg, 40 %) como un sólido incoloro.
1H RMN (300 MHz, DMSO-da): 8 7.97 (s, 1H), 7.70 (t, 2H), 7.38 (d, 1H), 7.25 (d, 2H), 4.60 (m, 1H), 3.61 (s, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.29 (d, 3H) y señales de boroxina.
Pasos 2 y 3: 3-(4-((S)-1-Aminoetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il) metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio E (30 mg, 0.055 mmol), ácido (S)-(4-(1 -((tert- butoxicarbonil)amino)etil)fenil)borónico (29 mg, 0 .111 mmol), Pd(PPh3)4 (6.4 mg, 5.53 pmol), K3PO4 (47 mg, 0.221 mmol), 1,4-dioxano (0.415 mL) y agua (0.138 mL) a 130 °C durante 1 h en el microondas, y luego el Procedimiento 2 General utilizando TFA (0.7 mL) y DCM (0.7 mL) dieron el compuesto del título (11 mg, 34 % (2 pasos)). LCMS (Método A): Rt = 0.89 min, m/z = 583 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 8.00-7.93 (m, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 7.44-7.25 (m, 5H), 4.90 (s, 1H), 4.16-3.71 (m, 7H), 3.54-2.70 (8 H), 1.72-0.96 (m, 7H).
Ejemplo 77: (R)-9-(4-(Aminometil)fenil)-1 -((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-1 H-purin-6(9H)-ona
Figure imgf000062_0001
Procedimiento 4 General utilizando tert-butil 4-(1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-oxo-1H-purin-9(6H)-il)bencilcarbamato (25 mg, 0.055 mmol), ácido (R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoico (18 mg, 0.083 mmol), hAt U (31 mg, 0.083 mmol), DIPEA (0.038 mL, 0.220 mmol) y d Cm (1.1 mL) y luego Procedimiento 2 General utilizando TFA (0.7 ml) y DCM (0.7 ml) dieron el compuesto del título (21 mg, 6 8 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.82 min, m/z = 555 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 8.47 (s, 1H), 8.29-8.20 (m, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.55 (d, 2H), 7.46-7.26 (m, 5H), 4.93 (s, 1H), 4.21-3.72 (m, 7H), 3.47-2.76 (m, 4H), 1.72-0.98 (m, 4H).
Ejemplo 78: (R)-9-(4-(Aminometil)fenil)-1-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-8-metil-1H-purin-6(9H)-ona
Figure imgf000062_0002
Procedimiento 4 General utilizando tert-butil 4-(1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-metil-6-oxo-1H-purin-9(6H-il)bencilcarbamato (27 mg, 0.058 mmol), ácido (R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoico (19 mg, 0.086 mmol), HATU (33 mg, 0.086 mmol), DIPEA (0.040 mL, 0.230 mmol) y Dc M (1.2 mL) y luego Procedimiento 2 General utilizando TFA (0.7 mL) y DCM (0.7 mL) dieron el compuesto del título (24 mg, 73 % (2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.80 min, m/z= 569 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 8.15-8.07 (m, 1H), 7.55 (d, 2H), 7.47-7.22 (m, 7H), 4.91 (s, 1H), 4.24-3.68 (m, 7H), 3.30-3.06 (m, 2H), 3.01-2.73 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.16 (br. s, 2H), 1.66-0.97 (m, 4H).
Ejemplo 79: (R)-3-(4-((Dimetilamino)metil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-thfluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000063_0001
Se añadió a una solución de (R)-3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-6-((4-h¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (25 mg, 0.044 mmol) y formaldehído (soluc¡ón al 37 % en agua, 8 |jL, 0.110 mmol) en una mezcla de THF (2 mL) y metanol (2 mL),c¡anoboroh¡druro de sod¡o (7 mg, 0.110 mmol) ). Se ag¡tó la mezcla a TA durante 5 h. Se añad¡eron más formaldehído (soluc¡ón al 37 % en agua, 8 j l, 0,110 mmol) y c¡anoboroh¡druro de sod¡o (7 mg, 0,110 mmol) y se ag¡tó la mezcla a temperatura amb¡ente durante la noche. Se cargó la mezcla de reacc¡ón en un cartucho B¡otage Isolute SCX-2 prelavado de 2 g, se dejó un¡r durante 10 m¡n, se lavó con 80:20 DCM:metanol antes de elud¡r el producto con 80:20 DCM:2M amoníaco en metanol. Se concentró la soluc¡ón resultante hasta sequedad bajo pres¡ón reduc¡da, se suspend¡ó en éter d¡etíl¡co, se pur¡f¡có por cromatografía ultrarráp¡da (cartucho de 4 g síl¡ce GraceResolv™, DCM: amoníaco 2 M en metanol, grad¡ente de eluc¡ón de 100:0 a 90:10) segu¡do de cromatografía ultrarráp¡da (cartucho B¡otage KP-NH de 11 g, DCM:metanol, grad¡ente de eluc¡ón de 100:0 a 90:10) y se l¡of¡l¡zó para dar el compuesto del título ( 6 mg, 90 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.85 m¡n, m/z = 597 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe): 8 7.98 (d, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.50 (d, 2H), 7.39­ 7.45 (m, 2H), 7.28-7.39 (m, 3H), 4.90 (s, 1H), 4.04-4.19 (m, 4H), 3.85-4.03 (m, 3H), 3.71-3.83 (m, 1H), 3.48 (s, 2H), 3.11-3.32 (m, 2H), 2.78-3.03 (m, 2H), 2.20 (s, 6 H), 1.15-1.68 (m, 4H).
Ejemplo 80: (R)-3-(4-(Am¡nomet¡l)fen¡l)-6-((1-(4,4-d¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000063_0002
Paso 1: Etil 4,4-difluoro-3-fenilbut-2-enoato: Se enfr¡ó una suspens¡ón de h¡druro de sod¡o (60 % en ace¡te m¡neral, 1.54 g, 38.4 mmol) en THF anh¡dro (100 mL) a 0 °C antes de añad¡r gota a gota fosfonoacetato de tr¡et¡lo (7.05 mL, 35.2 mmol). Después de ag¡tar a 0 °C durante 30 m¡n, 2,2-d¡fluoro-1-fen¡letanona (5.0 g, 32.0 mmol) gota a gota y ag¡tar la mezcla a 0 °C durante 60 m¡n más. Se ¡nact¡vo la mezcla de reacc¡ón med¡ante la ad¡c¡ón de agua (100 mL) y se extrajo en EtOAc (3 x 50 mL). Se lavaron las fases orgán¡cas comb¡nadas con salmuera (50 mL), se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron, se concentraron hasta sequedad bajo pres¡ón reduc¡da y se pur¡f¡caron por cromatografía ultrarráp¡da (cartucho de 120 g síl¡ce GraceResolv™, c¡clohexano:acetato de et¡lo, grad¡ente de eluc¡ón de 95:5 a 60:40) para dar el compuesto del título (3.38 g, 47 %) como un ace¡te ¡ncoloro.
Paso 2: Etil 4,4-difluoro-3-fenilbutanoato de etilo: Se h¡drogenó una soluc¡ón de et¡l 4,4-d¡fluoro-3-fen¡lbut-2-enoato (1.00 g, 4.42 mmol) en metanol ( 88 mL) con H-Cube® (cartucho Pd al 10% /C, 60 bar H2 , 60 °C, 1 mL/mín). Se concentró la mezcla de reacc¡ón hasta sequedad bajo pres¡ón reduc¡da y se pur¡f¡có por cromatografía ultrarráp¡da ( cartucho de 80 g síl¡ce GraceResolv™, c¡clohexano:acetato de et¡lo, grad¡ente de eluc¡ón 100:0 a 80:20) para dar el compuesto del título (975 mg, 97 %) como un ace¡te ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.55 m¡n, m/z = 229 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.23-7.39 (m, 5H), 5.94 (td, 1H), 3.98-4.15 (m, 2H), 3.51-3.74 (m, 1H), 2.96 (dd, 1H), 2.78 (dd, 1H), 1.15 (t, 3H).
Paso 3: Ácido 4,4-difluoro-3-fenilbutanoico: Se añad¡ó a una soluc¡ón de et¡l 4,4-d¡fluoro-3-fen¡lbutanoato (975 mg, 4.27 mmol) en 1,4-d¡oxano (8.5 mL), una soluc¡ón de h¡dróx¡do de sod¡o 1 M (8.5 ml, 8.54 mmol) y se ag¡tó la reacc¡ón a temperatura amb¡ente durante 60 m¡n. Se ac¡d¡f¡có la mezcla de reacc¡ón a pH 4 med¡ante la ad¡c¡ón de HCl(ac) 2M, segu¡do de extracc¡ón en EtOAc (3 x 30 mL). Se lavaron las fases orgán¡cas comb¡nadas con salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron, se concentraron hasta sequedad bajo pres¡ón reduc¡da y se suspend¡eron en c¡clohexano (20 mL) para dar el compuesto del título (682 mg, 80 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.10 m¡n, m/z = 199 [M-H]-. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 7.20-7.40 (m, 5H), 5.92 (td, 1H), 3.48-3.72 (m, 1H), 3.02 (dd, 1H), 2.83 (dd, 1H).
Paso 4: (S)-4-Bencil-3-((R)-4,4-difluoro-3-fenilbutanoil)oxazolidin-2-ona: Se enfrió una solución de ácido 4,4-difluoro-3-fenilbutanoico (2.00 g, 10.0 mmol), (S)-4-benciloxazolidin-2-ona (1.95 g, 11.0 mmol) y cloruro de litio (850 mg, 20.0 mmol) en THF anhidro (25 mL) a -20 °C seguido de la adición gota a gota de cloruro de pivaloílo (3.07 mL, 25.0 mmol) luego trietilamina (3.62 mL, 26.0 mmol). Se agitó la mezcla resultante a -20 °C durante 30 min, luego se dejó calentar a temperatura ambiente, se diluyó con solución saturada de cloruro de amonio (30 mL) y se extrajo en EtOAc (3 x 20 ml). Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida y se purificaron por cromatografía ultrarrápida (cartucho de 330 g sílice GraceResolv™, ciclohexano:acetato de etilo, gradiente de elución de 95:5 a 60:40, después se aisló el diastereoisómero) para dar el compuesto del título (1.42 g, 40 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.67 min, m/z = 360 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 8 7.19-7.43 (m, 8 H), 6.96-7.06 (m, 2H), 5.99 (td, 1H), 4.59-4.69 (m, 1H), 4.20 (ddd, 1H), 4.14 (dd, 1H), 3.76-3.90 (m, 1H), 3.69 (dd, 1H), 3.44 (dd, 1H), 3.02 (dd, 1H), 2.62 (dd, 1H).
Paso 5: Ácido (R)-4,4-difluoro-3-fenilbutanoico: Se enfrió una solución de (S)-4-bencil-3-((R)-4,4-difluoro-3-fenilbutanoil)oxazolidin-2-ona (1.42 g, 3.95 mmol) en una mezcla de THF (28 mL) y agua (5.6 ml) a 0 °C antes de una disolución acuosa al 30 %. Se añadió gota a gota una solución de peróxido de hidrógeno (1.01 ml, 9.88 mmol) y se añadió luego una solución de hidróxido de litio (237 mg, 9.88 mmol) en agua (5.6 mL). Se agitó la mezcla de reacción a 0 °C durante 90 min y luego se inactivó mediante la adición de tiosulfato de sodio(ac) 2 M (19.8 mL, 39.5 mmol), diluido con agua (20 mL) y se lavó con EtOAc (3 x 20 mL). Se extrajo la fase orgánica en solución saturada de bicarbonato de sodio (3 x 20 mL) y se combinaron las fases acuosas con las anteriores. Se ajustaron las fases acuosas combinadas a ~pH4 mediante la adición de solución de HCl 2 M, seguido de extracción en EtOAc (3 x 20 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na2SO4 , se filtraron, se concentraron hasta sequedad a presión reducida y se suspendieron en ciclohexano (15 mL) para dar el compuesto del título (683 mg, 86 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.11 min, m/z = 199 [M-H]-. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.23-7.40 (m, 5H), 5.92 (td, 1H), 3.49-3.70 (m, 1H), 3.02 (dd, 1H), 2.82 (dd, 1H).
Paso 6: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((1-(4,4-difluoro-3-fenilbutanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General 4 utilizando tert-butil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato (50 mg, 0.171 mmol), ácido (R )-4,4-difluoro-3-fenilbutanoico (21 mg, 0.107 mmol), HATU (60.9 mg, 0.160 mmol), DIPEA (0.075 mL, 0.427 mmol) y DCM (3.4 mL) y luego Procedimiento 2 General utilizando TFA (1.5 mL) y DCM (1.5 mL) dieron el compuesto del título como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 0.74 min, m/z 551 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 8 7.97 (d, 1 H), 7.64 (d, 2 H), 7.55 (d, 2 H), 7.30 (m, 5 H), 6.23 (td, 1 H), 4.90 (s, 1 H), 3.50-4.15 (m, 9 H), 2.75-3.25 (m, 4 H), 2.30-1.95 (m, 2 H), 1.65-1.15 (m, 5 H).
Ejemplo 81: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-isopropilpirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000064_0001
Paso 1: tert-Butil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Se calentó una solución de 6-cloropirimidin-4(3H)-ona (3.72 g, 28.5 mmol), Epóxido 1 (6.08 g, 28.5 mmol) y DIPEA (7.47 ml, 42.7 mmol) en DMF (35 mL) a 80 °C durante 16 h. Se dejó enfriar la mezcla de reacción a temperatura ambiente antes de inactivarla mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (20 mL) y se extrajo la mezcla resultante con EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4, se concentraron y se purificó el residuo por cromatografía (120 g GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar tert-butil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6H-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (5.87 g, 60 %) como un sólido blanquecino. LCm S (Método B): Rt = 0.99 min, m/z = 342 [M+h ]+.
Paso 2: 3-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-(prop-1-en-2-il)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 5 General utilizando tertbutil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (100 mg, 0.29 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-2-il)-1,3, 2-dioxaborolano (73.3 mg, 0.44 mmol), dioxano (2 mL), carbonato de sodio (61.7 mg, 0.58 mmol), agua (1 mL) y Pd (PPh^^ (16.8 mg, 0.015 mmol) a 150 °C durante 15 min (microondas) dio un sólido vítreo. Esto se disolvió en DCM (1 mL) y TFA (1 mL) y se agitó 15 min, luego se concentró. Se disolvió el residuo en MeOH y se añadió a un cartucho SCX-2 de 2 g. Se lavó la columna con MeOH y luego se eludió con NH32 M /MeOH para dar el compuesto del título (61 mg, 8 4%) como un sólido blanco. 1H Rm N (CDCh, 300 MHz): 8 8.08 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 6.24 (br s, 1H), 5.44 (br s, 1H), 4.00 (s, 2H), 2.92 (m, 4H), 2.06 (s, 3H), 1.56 (m, 4H), 1.43 (s, 1H).
Paso 3: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(prop-1-en-2-il)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando ácido (R)-3-fenilbutanoico (39.5 mg, 0.241 mmol), 3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-(prop-1-en-2-il)pirimidin-4(3H)-ona (60 mg, 0.241 mmol), DIPEA (0.050 ml, 0.289 mmol), DCM (2 ml) y HATU (101 mg, 0.265 mmol) dio el compuesto del título (69 mg, 73 %) como una espuma blanca. LCMS (Método A): Rt = 1.12 min, m/z = 396 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6 ): 8 8.24 (d, 1H), 7.25 (m, 4H), 7.17 (m, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.17 (s, 1H), 5.42 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.00 (m, 1H), 3.89 (d, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.15 (m, 2H), 2.87 (m, 1H), 2.60 (m, 2H), 2.02 (s, 3H), 1.25-1.55 (m, 4H), 1.20 (d, 3H).
Paso 3: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-isopropilpirimidin-4(3H)-ona: Se disolvió (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(prop-1-en-2-il)pirimidin-4(3H)-ona (49 mg, 0.124 mmol) en etanol (2 mL) y se añadió formiato de amonio (78 mg, 1.24 mmol), seguido de paladio al 10 % sobre carbono (13 mg, 0.012 mmol). Se calentó la mezcla a reflujo durante 1 h, luego se enfrió, se filtró a través de Celite® y se concentró. Se recogió el residuo en agua y se extrajo con DCM; se separaron las capas utilizando un cartucho separador de fases y luego se concentró la capa orgánica. Se purificó el residuo por cromatografía (columna de 12 g Grace; EtOAc al 20­ 100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-15 % en EtOAc) y se destiló el vidrio resultante azeotrópicamente con agua para dar el compuesto del título (18 mg, 37 %) como un sólido vítreo. LCMS (Método A): Rt = 1.15 min, m/z = 398 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-da): 8 8.23 (d, 1H), 7.26 (m, 4H), 7.21 (m, 1H), 6.20 (m, 1 H), 4.94 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 3.86 (m, 2H), 3.63 (m, 1H), 3.15 (m, 2H), 2.88 (m, 1H), 2.68 (m, 3H), 1.10-1.55 (m, 13H).
Ejemplo 82: (R)-3-(4-(Aminometil)-3-fluorofenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000065_0001
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio E (24 mg, 0.045 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborlan-2-il)bencilcarbamato (47 mg, 0.134 mmol ) (PCT Int. Solicitud, 2013134219, 12 de septiembre de 2013), Pd(PPh3)4 (5.15 mg, 4.46 pmol), K3PO4 (57 mg, 0.268 mmol), 1,4-dioxano (0,45 mL) y agua (0.15 mL) a 130 °C durante 30 min en el microondas, y luego el Procedimiento 2 General utilizando TFA (0.7 mL) y DCM (0.7 mL) dieron el compuesto del título (10 mg, 39 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.86 min, m/z = 587 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 8.02-7.96 (m, 1H), 7.74-7.66 (m, 1H), 7.57-7.50 (m, 2H), 7.44-7.26 (m, 5H), 4.91 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.16-3.88 (m, 4H), 3.85-3.70 (m, 3H), 3.30-3.10 (m, 2H), 3.02-2.74 (m, 2H), 2.20 (br. s, 2H), 1.66-1.18 (m, 4H).
Ejemplo 83: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-(4-((metilamino)metil)fenil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000065_0002
Paso 1: tert-Butil metil(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)bendl)carbamato: Se desgasificó una solución de tert-butil 4-bromobencil(metil)carbamato (150 mg, 0.50 mmol), bis(pinacolato)diboro (190 mg, 0.75 mmol) y acetato de potasio (147 mg, 1.50 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (2 mL) burbujeando nitrógeno a través de la solución durante 10 min, seguido de la adición de aducto PdCh(dppf)-DCM (20 mg, 0.025 mmol). Se calentó la mezcla de reacción a 95 °C bajo atmósfera de nitrógeno durante la noche, se dejó enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con agua (5 mL) y se extrajo en EtOAc (3 x 5 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na2SO4 , se filtraron, se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida, se purificaron por cromatografía ultrarrápida (cartucho de 12 g sílice GraceResolv™, ciclohexano:acetato de etilo, gradiente de elución de 95:5 a 70:30) para dar el compuesto del título (72 mg, 42 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 2.02 min, m/z = 292 [M-buteno+H]+. 1H RMN (300 m Hz , CDCl3): 8 7.77 (d, 2H), 7.20 (br d, 2H), 4.43 (br s, 2H), 2.68-2.89 (m, 3H), 1.39-1.53 (m, 9H), 1.33 (s, 12H).
Paso 2: (R)-tert-Butil 4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo- 6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencil(metil)carbamato: Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio E (42 mg, 0.077 mmol), tert-butil metil(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)bencil)carbamato (40 mg, 0.116 mmol), K3PO4 (41 mg, 0,232 mmol), aducto de PdCl2(dppf)-DCM (3.2 mg, 3.87 |jmol), 1,4-dioxano (1.7 mL) y agua (0.4 mL) en un microondas a 150 °C durante 15 min dio el compuesto del título (24 mg, 45 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.38 min, m/z = 683 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCls): 87.74 (d, 1H), 7.55 (d, 2H), 7.42 (d, 2H), 7.29-7.39 (m, 5H), 4.51 (br s, 2H), 4.22-4.35 (m, 1H), 3.85-4.22 (m, 6H), 3.58-3.73 (m, 1H), 3.27-3.45 (m, 2H), 2.79-3.03 (m, 6H), 1.44-1.64 (m, 11H), 1.23-1.32 (m, 1H), 1.01-1.10 (m, 1H).
Paso 3: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(4,4,4-trífluoro-3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-2-metil-3-(4-((metilamino)metilo )fenil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió a una solución de (R)-tert-butil 4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencil(metil)carbamato (24 mg, 0.035 mmol) en DCM (1 mL), se agitaron TFA (1 mL) y la mezcla resultante a TA durante 30 min. Se cargó la mezcla de reacción en un cartucho de 5 g Biotage Isolute SCX-2 prelavado, se dejó unir durante 10 min, se lavó con 80:20 DCM:metanol antes de eludir el producto con 80:20 DCM:2m amoníaco en metanol. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida, se suspendió en éter dietílico y se liofilizó para dar el compuesto del título (13 mg, 64 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.80 min, m/z = 583 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 87.97 (d, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.53 (d, 2H), 7.38-7.44 (m, 2H), 7.27-7.38 (m, 3H), 4.89 (s, 1H), 4.03-4.19 (m, 4H), 3.86-4.03 (m, 3H), 3.70-3.83 (m, 3H), 3.09-3.30 (m, 2H), 2.77-3.03 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.13-1.67 (m, 4H).
Ejemplo 84: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((1-(3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pihmidin-7(6H)-ona
Figure imgf000066_0001
Paso 1: Ácido (E)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobut-2-enoico: Se agitó una suspensión de 1 -(3,5-difluorofenil)-2,2,2-trifluoroetanona (860 mg, 4.09 mmol), etil 2-(dietoxifosforil)acetato (0.893 ml, 4.50 mmol) y K3PO4 (2.17 g, 10.2 mmol) en EtOH (8 mL) a TA durante 2.5 h antes de aumentar la temperatura a 30 °C y se agitó la mezcla durante 21 h más. Se diluyó la mezcla con agua (16 mL) y se concentró utilizando el evaporador rotatorio. Se añadió HCl(ac) 3 M al residuo y se aisló el precipitado resultante por filtración. Se lavó el producto con agua (3 x 10 mL) y se secó bajo alto vacío a 65 °C para dar el compuesto del título (800 mg, 78 % (9:1 E/Z)) como sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.36 min, m/z = 251 [M-H]-. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 88.44 (br. s, 1H), 6.91 (tt, 1H), 6.86-6.77 (m, 2H), 6.64 (d, 1H).
Paso 2: Ácido 3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoico: Se redujo una solución de ácido (E)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobut-2-enoico (766 mg, 3.04 mmol) en MeOH (30 mL) utilizando e1H-Cube® (Pd al 10 %/C CatCart®, 1 mLmin-1, 50 °C, 50 bar H2 luego 1 mLmin-1, 60 °C, 60 bar). Se concentró la solución y se secó el producto in vacuo para dar el compuesto del título (660 mg, 85 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.33 min, m/z = 253 [M-H]'. 1H RMN (400 MHz, CDCls): 87.98 (br. s, 1H), 6.93-6.76 (m, 3H), 3.87 (m, 1H), 3.07 (dd, 1H), 2.88 (dd, 1H).
Paso 3: (R)-4-Bencil-3-((R)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoil)oxazolidin-2-ona: Se añadieron cloruro de trimetilacetilo (0.781 mL, 6.34 mmol) y luego NEt3 (0.920 mL, 6.60 mmol) a una suspensión de ácido 3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoico (645 mg, 2.54 mmol), (R)-4-benciloxazolidin-2-ona (495 mg, 2.79 mmol) y LiCl (215 mg, 5.08 mmol) en THF (6 mL) a -20 °C. Después de 30 min, se dejó calentar la reacción a temperatura ambiente antes de apagarse mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (50 mL). Se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 30 mL), se lavaron las capas orgánicas combinadas con salmuera (30 mL) y se secaron sobre MgSO4. Se concentró la mezcla y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (120 g sílice GraceResolv™, EtOAc al 0-40 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (433 mg, 41 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.81 min, m/z = 414 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 87.40-7.24 (m, 3H), 7.23-7.12 (m, 2H), 7.01-6.88 (m, 2H), 6.81 (tt, 1H), 4.64-4.52 (m, 1H), 4.20 (d, 2H), 4.19-4.03 (m, 1H), 3.68 (dd, 1H), 3.58 (dd, 1H), 3.27 (dd, 1H), 2.75 (dd, 1H). La RMN de (R)-4-bencil-3-((R)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoil)oxazolidin-2-ona es consistente con lo informado para (S)-4-bencil-3-((s)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoil)oxazolidin-2-ona en Org. Process Rev. Dev. 2009, 13, 1161­ 1168.
Paso 4: Ácido (R)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoico: Se añadió LiOH (12 mg, 0.484 mmol) a una solución de (R)-4-bencil-3-((R)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoil)oxazolidin-2-ona (100 mg, 0.242 mmol) y H2O2 (solución acuosa al 30 %) (0.099 mL, 0.968 mmol) en THF (1.2 mL) y agua (1.2 mL) a 0 °C. Después de 1 h, se concentró la mezcla de reacción en el evaporador rotatorio sin calor para eliminar el THF. Se diluyó la mezcla con agua (3 mL) y se extrajo con DCM (2 x 5 mL) utilizando un separador de fases Biotage para eliminar el auxiliar quiral. Se inactivó el H2O2 en la fase acuosa mediante la adición de tiosulfato de sodio(ac) saturado(0.2 mL), se ajustó el pH a ~pH 1-2 mediante la adición de HCl(ac) 3 M y se extrajo la fase acuosa con DCM (3 x 5 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas de las extracciones ácidas y se secó el residuo in vacuo para dar el compuesto del título (42 mg, 67 %) como un sólido incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 6.93-6.76 (m, 3H), 3.87 (m, 1H), 3.07 (dd, 1H), 2.88 (dd, 1H).
Paso 5: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((1-(3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trífluorobutanoil)-4-hidroxipiperídin-4-il)metilo )-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando tert-butil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato (33 mg, 0.071 mmol), ácido (R)-3-(3,5-difluorofenil)-4,4,4-trifluorobutanoico (27 mg, 0.106 mmol), HATU (40 mg, 0.106 mmol), DIPEA (49 j L, 0.683 mmol) y DCM (1.4 mL ) y luego el Procedimiento 2 General utilizando TFA (0.7 mL) y DCM (0.7 mL) dieron el compuesto del título (29 mg, 68 % (2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 0.85 min, m/z = 605 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSOds): 8 8.00-7.94 (m, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.53 (d, 2H), 7.34-7.14 (m, 3H), 4.92 (s, 1H), 4.29-4.14 (m, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.03-3.86 (m, 3H), 3.80 (s, 2H), 3.78-3.68 (m, 1H), 3.33-3.17 (m, 2H), 3.05-2.78 (m, 2H), 2.16 (br. s, 2H), 1.70-1.19 (m, 4H).
Ejemplo 85: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-(4-fluorofenil)butanoil)piperidin-4-il)metil)- 2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000067_0001
Paso 1: Ácido (E)-4,4,4-Trifluoro-3-(4-fluorofenil)but-2-enoico: Se calentó una mezcla de 2,2,2-trifluoro-1-(4-fluorofenil)etanona (961 mg, 5 mmol), NaOAc (820 mg, 10.0 mmol) y Ac2O (10 mL, 106 mmol) en un tubo sellado a 130 °C durante 20 h antes de dejar que se enfriara la reacción a TA. Se diluyó la mezcla con agua (40 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 mL). Se secaron las capas orgánicas combinadas sobre Na2SO, se concentraron y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (40 g sílice GraceResolv™, EtOAc al 0-70 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (470 mg, 40 % (4:1 E/Z)) como un sólido amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.31 min, m/z= 233 [M-H]-. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 8 7.31-7.20 (m, 2H), 7.14-7.03 (m, 2H), 6.59 (d, 1H).
Paso 2: Ácido 4,4,4-Trifluoro-3-(4-fluorofenil)butanoico: Se redujo una solución de ácido (E)-4,4,4-trifluoro-3-(4-fluorofenil)but-2-enoico (450 mg, 1.92 mmol) en MeOH (30 mL) utilizando e1H-Cube®(Pd al 10%/C CatCart®, 1 mLmin-1, 50°C; 50 bar H2). Se concentró la solución y se secó el producto in vacuo para dar el compuesto del título (380 mg, 84 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.27 min, m/z = 235 [M-H]-. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 7.36­ 7.20 (m, 2H), 7.11-6.97 (m, 2H), 3.86 (m, 1H), 3.07 (dd, 1H), 2.90 (dd, 1H).
Paso 3: (R)-4-Bencil-3-((R)-4,4,4-trifluoro-3-(4-fluorofenil)butanoil)oxazolidin-2-ona: Se añadió cloruro de trimetilacetilo (0.490 mL, 3.98 mmol) y luego NEt3 (0.577 ml, 4.14 mmol) a una suspensión de ácido 4,4,4-trifluoro-3-(4-fluorofenil)butanoico (376 mg, 1.59 mmol), (R)-4-benciloxazolidin-2-ona (310 mg, 2.79 mmol) y LiCl (135 mg, 3.18 mmol) en THF (4 ml) a -20 °C. Después de 30 min, se dejó la reacción calentar a temperatura ambiente antes de apagarse mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (30 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 20 mL). Se lavaron las capas orgánicas combinadas con salmuera (30 mL), se secaron sobre MgSO4 , se concentraron y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (80 g sílice GraceResolv™, EtOAc al 0-40 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (291 mg, 46 %) como un aceite viscoso incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.78 min, m/z = 396 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCls): 8 7.43-7.24 (m, 5H), 7.22-7.14 (m, 2H), 7.12-7.01 (m, 2H), 4.56 (ddt, 1H), 4.21­ 4.04 (m, 3H), 3.72 (dd, 1H), 3.57 (dd, 1H), 3.25 (dd, 1H), 2.73 (dd, 1H).
Paso 4: Ácido (R)-4,4,4-trifluoro-3-(4-fluorofenil)butanoico: Se añadió LiOH (20 mg, 0.814 mmol) a una solución de (R)-4-bencil-3-((R)-4,4,4-trifluoro-3-(4-fluorofenil)butanoil)oxazolidin-2-ona (161 mg, 0.407 mmol) y H2O2 (solución acuosa al 30 %) (0.166 mL, 1.63 mmol) en THF (2 mL) y agua (2 mL) a 0 °C. Después de 1 h, se concentró la mezcla de reacción en el evaporador rotatorio sin calor para eliminar el THF. Se diluyó la mezcla con agua (3 mL) y se extrajo con DCM (2 x 5 mL) utilizando un separador de fases Biotage para eliminar el auxiliar quiral. Se inactivó H2O2 en la fase acuosa mediante la adición de tiosulfato de sodio(ac) saturado (0.3 mL), se ajustó el pH a ~pH 1-2 mediante la adición de HCl(ac) 3 M y se extrajo la fase acuosa con DCM (3 x 5 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas de las extracciones ácidas y se secó el residuo in vacuo para dar el compuesto del título (76 mg, 79 %) como un sólido incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 7.35-7.25 (m, 2H), 7.11­ 7.01 (m, 2H), 3.87 (m, 1H), 3.08 (dd, 1H), 2.90 (dd, 1H).
Paso 5: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trífluoro-3-(4-fluorofenil)butanoil)piperídin-4-il)metilo )-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General 4 utilizando tert-butil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato (36 mg, 0.076 mmol), ácido (R )-4,4,4-trifluoro-3-(4-fluorofenil)butanoico (27 mg, 0.114 mmol), HATU (43 mg, 0.114 mmol), DIPEA (53 j L, 0.305 mmol) y DCM (1.5 mL), y luego el procedimiento general 2 utilizando TFA (0.7 mL) y DCM (0.7 mL) dieron el compuesto del título (33 mg, 74 % (2 pasos)) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 0.80 min, m/z = 587 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-da): 8 8.01-7.93 (m, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.57-7.41 (m, 4H), 7.24-7.12 (m, 2H), 4.91 (s, 1H), 4.26-4.11 (m, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.02-3.86 (m, 3H), 3.81 (s, 2H), 3.78-3.68 (m, 1H), 3.29-3.11 (m, 2H), 3.04-2.75 (m, 2H), 1.64­ 1.16 (m, 4H).
Ejemplo 8 6 : (R)-6-((2-(4-Fluoroisoindolin-2-il)etil)amino)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000068_0001
Paso 1: tert-Butil (2-(4-fluoroisoindolin-2-il)etil)carbamato: Se calentó una mezcla de metanosulfonato de 2-((tert-butoxicarbonil)amino)etilo (200 mg, 0.836 mmol), 4-fluoroisoindolina.HCl (218 mg, 1.254 mmol) y Et3N (0.349 mL, 2.51 mmol) en THF (2 mL) a 70 °C durante 18 h. Se repartió la mezcla entre EtOAc y agua. Se extrajo la capa acuosa con EtOAc y se lavaron los extractos orgánicos combinados (salmuera), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (Biotage 11 g KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (52 mg, 22 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 7.21-7.16 (m, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.91-6.86 (m, 1H), 5.09 (br s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.34-3.30 (m, 2H), 2.87 (t, 2H), 1.45 (s, 9H).
Paso 2: (R)-6-((2-(4-Fluoroisoindolin-2-il)etil)amino)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4 (3H)-ona, ácido fórmico: Se añadió una solución de tert-butil (2-(4-fluoroisoindolin-2-il)etil)carbamato(53.9 mg, 0.192 mmol) y se agitó HCl (4 M en 1,4-dioxano) (1 mL, 32.9 mmol) en DCM (0.5 mL) durante 30 min. Se añadió Et2O (2 mL) y se agitó la suspensión durante 10 min. Se eliminó el sobrenadante, y además se añadió Et2O (2 mL) y se agitó la suspensión durante 10 min. Después de la eliminación del sobrenadante, se secó el sólido resultante in vacuo durante 5 min y se combinó con Producto Intermedio A (30 mg, 0.077 mmol) y Et3N (0.054 mL, 0.385 mmol) en NMP (0.5 mL). Se calentó la mezcla en el microondas a 175 °C durante 30 min y se purificó la mezcla de reacción mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (12.7 mg, 28 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.77 min, m/z = 534 [M+H]+. 1H RMN (400 Mh z , metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.35 (s, 1H), 8.06 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.01 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.17 (m, 6 H), 7.09 (d, 1H), 6.96 (dd, 1H), 5.35 (s, 1H), 4.23-4.10 (m, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.10 (s, 2H), 4.00-3.65 (m, 3H), 3.60-3.40 (m, 1H), 3.28-3.15 (m, 2H), 3.10-2.92 (m, 3H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.63-2.46 (m, 1H), 1.63-1.28 (m, 7H), 0.95-0.87 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 87: (R)-3-(4-(2-Aminoetil)fenil)-6-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000068_0002
Paso 1: (R)-tert-Butil 4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo- 6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenetilcarbamato: Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio E (30 mg, 0.055 mmol), tert-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenetilcarbamato (PCT Int. Solicitud, 2011123419, 06 de octubre de 2011) (29 mg, 0.083 mmol), K3PO4 (30 mg, 0.166 mmol), aducto de PdCl2 (dppf)-DCM (2.3 mg, 2.77 jmol), 1,4-dioxano (1.2 mL) y agua (0.3 mL) en un microondas a 150 °C durante 15 min dio el compuesto del título (23 mg, 61 %) como un aceite amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.33 min, m/z = 683 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 7.73 (d, 1H), 7.27-7.61 (m, 9H), 5.30 (s, 1H), 4.55-4.72 (m, 2H), 3.80-4.36 (m, 7H), 3.65 (t, 1H), 3.24-3.49 (m, 3H), 2.77-3.04 (m, 4H), 1.35-1.67 (m, 11H), 1.16-1.35 (m, 1H), 0.96-1.17 (m, 1H).
Paso 2: (R)-3-(4-(2-Aminoetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trífluoro-3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-2 -metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió a una solución de (R)-terf-butil 4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro -2H-pirazolo[4,3-d ]pirimidin-3-il)fenetilcarbamato (24 mg, 0.035 mmol) en DCM (1 mL), se agitó TFA (1 mL) y la mezcla resultante a TA durante 30 min. Se cargó la mezcla de reacción en un cartucho Biotage Isolute SCX-2 prelavado de 5 g, se dejó unir durante 10 min, se lavó con 80:20 DCM:metanol antes de eludir el producto con 80:20 DCM:amoníaco 2 M en metanol. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida, se suspendió en éter dietílico y se liofilizó para dar el compuesto del título (16 mg, 78 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.79 min, m/z = 583 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 7.97 (d, 1H), 7.62 (d, 2H), 7.38-7.45 (m, 4H), 7.27-7.38 (m, 3H), 4.89 (s, 1H), 4.03-4.17 (m, 4H), 3.84­ 4.03 (m, 3H), 3.71-3.82 (m, 1H), 3.12-3.30 (m, 2H), 2.77-3.03 (m, 4H), 2.73 (t, 2H), 1.11-1.82 (m, 6 H).
Ejemplo 8 8 : (R)-3-(4-(1-Aminociclobutil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metilo -2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000069_0001
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio E (80 mg, 0.148 mmol), ácido (4-(1 -((tertbutoxicarbonil)amino)ciclobutil)fenil)borónico ( 8 6 mg, 0.295 mmol), Pd(Pph3)4(17 mg, 15.2 pmol), K3PO4(56 mg, 0.490 mmol), 1,4-dioxano (3 mL) y agua (1 mL) a 130 °C durante 1 hora en el microondas, luego el Procedimiento 2 General utilizando TFA (1 mL) y d Cm (1 mL) dieron el compuesto del título (51 mg, 35 % (2 pasos)) como un sólido blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.87 min, m/z= 609 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-da): 8 7.99 (d, 1H), 7.7-7.6 (m, 4H), 7.45-7.25 (m, 5H),4.91 (s, 1H),4.12 (s, 3H), 4.0-3.4 (m, 7H), 3.2-3.1 (m, 2H), 3-2.8 (m, 2H), 2.16 (m, 2H), 2.07 (m, 1H), 1.8-1.6 (m, 2H), 1.4-1.2 (4H).
Ejemplo 89: (R)-3-((1-(4,4-Difluoro-3-fenilbutanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin- 4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000069_0002
Paso 1: 6-Cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (5.87 g, 17.1 mmol) y TFA (20 mL, 260 mmol) en DCM (40 mL) a TA durante 30 min y posteriormente se concentró in vacuo. Se eliminó el exceso de TFA disolviéndolo tres veces en DCM seguido de la eliminación del solvente in vacuo. Se disolvió el residuo en CHCh 4:1/IPA y basificado con NaHCO3 ac. Se separaron las capas y se extrajo la fase acuosa con MeOH al 10 %/EtOAc. Se secaron los extractos orgánicos combinados (MgSO4) y se concentró para dar el compuesto del título (3.09 g, 74 %) como un sólido blanco que se usó sin purificación. lCm S (Método b ): Rt = 0.15 min, m/z= 244 [M+H]+.
Paso 2: (R)-6-Cloro-3-((1-(4,4-difluoro-3-fenilbutanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 4 General 4 utilizando 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona (80 mg, 0.328 mmol), ácido (R)-4,4-difluoro-3-fenilbutanoico (99 mg, 0.492 mmol), DIPEA (0.229 mL, 1.313 mmol), HATU (187 mg, 0.492 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título ( 68 mg, 48 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.01 min, m/z = 426 [M+H]+.
Paso 3: (R)-3-((1-(4,4-Difluoro-3-fenilbutanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino) pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico: Se calentó una solución de (R)-6-cloro-3-((1-(4,4-difluoro-3-fenilbutanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona (60 mg, 0.141 mmol), 2-(pirrolidin-1-il)etanamina (0.089 ml, 0.704 mmol) y Et3N (0.098 ml, 0.704 mmol) en NMP (1 mL) en el microondas a 175 °C durante 30 min. Se purificó la mezcla de reacción mediante HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (22.4 mg, 31 %) como un sólido marrón pálido. Lc Ms (Método B): Rt = 0.67 min, m/z = 504 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.51 (s, 1H), 8.12 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.08 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.40-7.29 (m, 5H), 6.11 (tt, 1H), 5.39 (s, 0.4H (confórmero A)), 5.38 (s, 0.6H (confórmero B)), 4.16-4.08 (m, 1H), 3.95 (dd, 1H), 3.86-3.55 (m, 6 H), 3.07-2.91 (m, 3H), 2.87-2.82 (m, 1H), 2.12­ 2.02 (m, 7H), 1.66-1.31 (m, 5H), 1.19-1.11 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 90: 6-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-(met¡lt¡o)t¡azolo[4,5-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000070_0001
Procedimiento 1 General ut¡l¡zando Epóx¡do 3 (55 mg, 0.224 mmol), 2-(met¡lt¡o)t¡azolo[4,5-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (Preparado de acuerdo con L¡eb¡gs Annalen der Chem¡e, 1989, p409-411) (41 mg, 0.204 mmol), CS2CO3 (80 mg, 0.245 mmol) y DMF (1.5 mL) d¡o el compuesto del título (36 mg, 40 %) como una espuma ¡ncolora. LCMS (Método A): Rt = 1.12 m¡n, m/z = 445 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 8.20 (s, 1H), 7.47-7.06 (m, 5H), 4.69-4.28 (m, 2H), 4.17­ 3.90 (m, 2H), 3.62 (d, 1H), 3.49-3.26 (m, 1H), 3.19-2.87 (m, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.69-2.50 (m, 2H), 1.87-1.32 (m, 4H).
Ejemplo 91: 3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)furo[3,2-d]p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000070_0002
Proced¡m¡ento 1 General ut¡l¡zando Epóx¡do 3 (81 mg, 0.331 mmol), furo[3,2-d]p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (Preparado de acuerdo con el documentoWO2010014930, p39, Compuesto 23) (45 mg, 0.331 mmol), Cs2c O3 (323 mg, 0.992 mmol) y DMF (0.6 mL) d¡o el compuesto del título (100 mg, 79 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.94 m¡n, m/z = 382 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 8.10 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.32-7.19 (m, 5H), 6.80 (d, 1H), 4.35 (d, 1H), 4.17-4.00 (m, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.60 (d, 1H), 3.33 (t, 1H), 3.09-2.92 (m, 3H), 2.65-2.58 (m, 2H), 1.61-1.26 (m, 4H).
Ejemplo 92: 6-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-(met¡lsulfon¡l)t¡azolo[4,5-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000070_0003
Se añad¡ó una soluc¡ón de OXONE® (763 mg, 1.24 mmol) en agua (3 mL) a una soluc¡ón de 6-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-(met¡lt¡o)t¡azolo[ 4,5-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (138 mg, 0,310 mmol) en MeOH (3 mL) y THF (3 mL). Se ag¡tó la reacc¡ón durante 30 m¡n a temperatura amb¡ente, antes de aumentar la temperatura a 50 °C. Después de 4.5 h, se dejó enfr¡ar la reacc¡ón a TA antes de verterla en NaHCO3(ac) saturado (50 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 30 mL). Se secaron las fases orgán¡cas comb¡nadas sobre Na2SO4, se concentraron y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (25 g B¡otage KP-S¡l, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (77 mg, 52 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.07 m¡n, m/z = 477 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 8.45 (s, 1H), 7.63-6.91 (m, 5H), 4.51-3.81 (m, 4H), 3.58 (d, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.36-3.19 (m, 1H), 3.06-2.79 (m, 3H), 2.74-2.44 (m, 2H), 1.75-1.32 (m, 4H).
Ejemplo 93: 6-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-(met¡lam¡no)t¡azolo[4,5-d]p¡hm¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000070_0004
Se calentó una mezcla de 6-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-(met¡lsulfon¡l)t¡azolo[4,5-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (20 mg, 0.042 mmol) y MeNH22 M en MeOH (0.525 ml, 1.05 mmol) en el m¡croondas a 100 °C durante 30 m¡n. Se concentró la reacc¡ón y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (11 g B¡otage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE; luego MeOH al 0-40 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (11 mg, 62 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.88 m¡n, m/z = 428 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3): 8 8.02 (s, 1H), 7.59-7.19 (m, 5H), 6.52 (br. S, 1H), 4.45 (d, 1H), 4.24-3.94 (m, 3H), 3.62 (d, 1H), 3.43-3.27 (m, 1H), 3.11 (s, 3H), 3.06-2.90 (m, 2H), 2.73-2.51 (m, 2H), 1.56-1.33 (m, 4H).
Ejemplo 94: 3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)furo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Paso 1:
Figure imgf000071_0001
Proced¡m¡ento 3 General ut¡l¡zando tert-Butil 4-(am¡nomet¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (Preparado de acuerdo con Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, p7458) (100 mg, 0.434 mmol), ác¡do 2-yodofuran-3-carboxíl¡co (103 mg, 0.434 mmol), EDC (166 mg, 0.868 mmol) y Dc M (5.4 mL) d¡o el compuesto del título (123 mg, 63 %) como un sól¡do amar¡llo. LCMS (Método A): Rt = 1.22 m¡n, m/z = 473 [M+Na]+.
Paso 2: tert-Butil 4-hidroxi-4-((4-oxofuro[2,3-d]pirimidin-3(4H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato : Se calentó una suspens¡ón de tert-but¡l 4-h¡drox¡-4-((2-yodofuran-3-carboxam¡do)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (400 mg, 0.888 mmol), clorh¡drato de formam¡d¡na (358 mg, 4.44 mmol), Cul (17 mg, 0.089 mmol ) y K2CO3 (368 mg, 2.67 mmol) en DMF ( 6 mL) en un m¡croondas a 150 °C durante 8 h. Se repart¡ó la mezcla entre salmuera/agua 1:1 (40 mL) y EtOAc (10 mL) y se f¡ltró la mezcla a través de un lecho de Cel¡te®. Se separó la capa acuosa y se extrajo ut¡l¡zando EtOAc (3 x 10 mL). Se lavaron las capas orgán¡cas comb¡nadas n con salmuera/agua 1:1 (40 mL), se secaron sobre Na2SO4, se concentró y se pur¡f¡có el res¡duo por cromatografía ultrarráp¡da (50 g B¡otage KP-S¡l, EtOAc al 0-100 % en PE) para dar el compuesto del título (34 mg, 11 %) como un sól¡do amar¡llo pál¡do. LCMS (Método A): Rt = 1.17 m¡n, m/z = 372 [M+Na]+.
Paso 3: 3-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)furo[2,3-d]pirimidin-4(3H)-ona: Proced¡m¡ento 2 General ut¡l¡zando tert-but¡l 4-h¡drox¡-4-((4-oxofuro[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3(4H)-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (34 mg, 0.097 mmol), TFA (0.6 mL) y DCM (0.6 mL) d¡o el compuesto del título (23 mg, 95 %) como un sól¡do amarillo pál¡do. LCMS (Método A): Rt = 0.23 m¡n, m/z = 250 [M+H]+.
Paso 4: 3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilpropanoil)piperidin-4-il)metil)furo[2,3-d]pirimidin-4(3H)-ona: Proced¡m¡ento 3 General ut¡l¡zando 3-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)furo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (23 mg, 0.092 mmol), ác¡do 3-fen¡lpropano¡co (14 mg, 0.092 mmol), EDC (53 mg, 0.277 mmol) y DCM (0.9 ml) d¡o el compuesto del título (13 mg, 37 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.91 m¡n, m/z = 382 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 7.99 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.33-7.21 (m, 5H), 6.92 (d, 1H), 4.41 (d, 1H), 4.16-4.00 (m, 2H), 3.56 (d, 1H), 3.32 (t, 1H), 3.08-2.94 (m, 4H), 2.66-2.60 (m, 2H), 1.65-1.27 (m, 4H).
Ejemplo 95: 6-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lpropano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-(tr¡fluoromet¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000071_0002
Proced¡m¡ento 1 General ut¡l¡zando Epóx¡do 3 (34 mg, 0.138 mmol), 2-met¡l-3-(tr¡fluoromet¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (30 mg, 0.138 mmol), Cs2CO3 (54 mg, 0.165 mmol) y DMF (0,3 ml) d¡o el compuesto del título (27 mg, 42 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.16 m¡n, m/z = 464 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.95 (s, 1H), 7.38-7.19 (m, 5H), 4.44-4.24 (m, 4H), 4.13-3.95 (m, 2H), 3.66-3.54 (m, 1H), 3.37-3.30 (m, 1H), 3.20-2.91 (m, 4H), 2.70-2.56 (m, 2H), 1.63-1.22 (m, 4H).
Ejemplo 96: (R)-1-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-9-met¡l-8-(tr¡fluoromet¡l)-1H-pur¡n-6(9H)-ona
Figure imgf000071_0003
Paso 1: 9-Metil-8-(trifluorometil)-1H-purin-6(9H)-ona: Se añad¡ó gota a gota a una mezcla de 9-met¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona (100 mg, 0.666 mmol) y tr¡fluorometanosulf¡nato de sod¡o (312 mg, 2.00 mmol) en DCM (2 mL) y agua (0.75 mL), t-BuOOH (323 |jl, 3.33 mmol). La reacc¡ón mostró una convers¡ón ¡ncompleta después de 24 h de modo que tr¡fluorometanosulf¡nato de sod¡o (312 mg, 2.00 mmol) y t-BuOOH (323 jL , 3.33 mmol). Después de 24 h, se d¡luyó la mezcla de reacción con agua (20 mL) y se extrajo con DCM (5 x 10 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las capas orgánicas combinadas y luego se secaron in vacuo para dar el compuesto del título ( 1 1 0 mg, 76 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 0.58 min, m/z = 219 [M+H]+.
Paso 2: (R)-1-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-metil-8-(trifluorometil)-1H-purin-6(9H)-ona: Procedimiento 1 General 1 utilizando Epóxido 2 (149 mg, 0.573 mmol), 9-metil-8-(trifluorometil)-1H-purin-6(9H)-ona (125 mg, 0.573 mmol), Cs2CO3 (280 mg, 0.860 mmol) y DMF (1.1 ml) dio el compuesto del título (76 mg, 28 %) como un sólido incoloro. lCm S (Método A): Rt = 1.19 min, m/z = 478 [M+H]+. 1H r Mn (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 8.27 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.16 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.35-7.15 (m, 5H), 4.39-3.93 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 3.63-3.49 (m, 1H), 3.40-2.87 (m, 3H), 2.70-2.41 (m, 2H), 1.68-1.23 (m, 7H), 0.99-0.83 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 97: 3-(2-Fluorofenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000072_0001
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (33 mg, 0.068 mmol), ácido (2-fluorofenil)borónico (28 mg, 0.203 mmol), K3PO4 (43 mg, 0.203 mmol), Pd (PPh3)4 (7.8 mg, 6.76 pmol), 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.13 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (24 mg, 71 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.23 min, m/z = 504 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.86 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.74 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.61­ 7.44 (m, 2H), 7.41-7.15 (m, 7H), 4.44-3.89 (m, 6 H), 3.62-2.86 (m, 5H), 2.70-2.41 (m, 2H), 1.63-1.23 (m, 7H), 0.98-0.71 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 98: (R)-3-(6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirmidin-3-il)benzonitrilo
Figure imgf000072_0002
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (33 mg, 0.068 mmol), ácido (3-cianofenil)borónico (30 mg, 0.203 mmol), K3PO4 (43 mg, 0.203 mmol), Pd(PPh3)4 (7.8 mg, 6.76 pmol), 1,4-dioxano (0.5 ml) y agua (0.13 ml) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (24 mg, 70 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.20 min, m/z = 511 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.92-7.67 (m, 5H), 7.33-7.18 (m, 5H), 4.43-3.90 (m, 6 H), 3.65-2.86 (m, 5H), 2.72-2.41 (m, 2H), 1.66-1.23 (m, 7H), 0.92-0.77 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 99: 3-(2-Aminofenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000072_0003
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (40 mg, 0.082 mmol), clorhidrato de ácido 2-aminofenilborónico (36 mg, 0.205 mmol), K3PO4 (70 mg, 0.328 mmol), Pd (PPh3)4 (9.5 mg, 8.19 pmol), 1,4-dioxano (0.7 mL) y agua (0.16 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (33 mg, 80 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.14 min, m/z = 501 [M+H]+. 1H r Mn (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmenos A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 57.82 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.72 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.39-7.13 (m, 5H), 7.13-7.05 (m, 1H), 6.93-6.57 (m, 3H), 4.40-3.84 (m, 6 H), 3.62-2.84 (m, 5H), 2.70-2.41 (m, 2H), 1.64-1.24 (m, 7H), 0.92-0.77 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 100: (R)-3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-morfol¡nop¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000073_0001
Se calentó una mezcla del Producto Intermed¡o A (30 mg, 0.077 mmol), morfol¡na (67 |jL, 0.769 mmol) y 1,4-d¡oxano (0.5 mL) en el m¡croondas a 150 °C durante 15 m¡n. Se pur¡f¡có la mezcla de reacc¡ón d¡rectamente med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (11 g B¡otage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (31 mg, 91 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.00 m¡n, m/z = 441 [M+H]+.
1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporc¡ón de 2:3 respect¡vamente): 57.78 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.67 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.14 (m, 5H), 5.49-5.40 (m, 1H), 5.02 (s, 0.6H (confórmero B)), 4.84 (s, 0.4H (confórmero A)), 4.51-4.31 (m, 1H), 4.16-3.43 (m, 11H), 3.43-3.17 (m, 2H), 3.07-2.84 (m, 1H), 2.71-2.42 (m, 2H), 1.65-1.11 (m, 7H), 0.68-0.52 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 101: 3-(H¡drox¡(4-h¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-4H-p¡r¡do[1,2-un]p¡r¡m¡d¡n-4-ona
Figure imgf000073_0002
Paso 1: tert-Butil 4-((4-oxo-4H-pirido(1,2-a]pirimidin-3-il)metilen)piperidin-1-carboxilato: Proced¡m¡ento 5 General ut¡l¡zando 3-bromo-4H-p¡r¡do[1,2-a]p¡r¡m¡d¡n-4-ona (Preparado de acuerdo con Heterocycles, 2009, 78, p2477) (200 mg, 0.889 mmol), tert-but¡l 4-((4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)met¡len)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (Preparado de acuerdo con el documentowO2013027001) (345 mg, 1.07 mmol), Pd (PPh3)4 (51 mg, 0.044 mmol), Na2CO3 (376 mg, 6.27 mmol), DME (4 ml) y agua (0,8 ml) después de 3 días a 80 °C d¡o el compuesto del título (216 mg, 71 %) como un sól¡do amar¡llo. LCMS (Método A): Rt = 1.29 m¡n, m/z = 342 [M+H]+.
Paso 2: tert-Butil 4-hidroxi-4-(hidroxi(4-oxo-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metil)piperidin-1-carboxilato: Se añad¡ó agua (0.25 mL) a una mezcla v¡gorosamente ag¡tada de tert-but¡l 4-((4-oxo-4H-p¡r¡do[1,2-a]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)met¡len)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (35 mg, 0.103 mmol), K2OsO4.2 H2O (3.8 mg, 10.3 jm ol) y NMO (14 mg, 0.123 mmol) en Dc M (0.75 mL). Después de 24 h, se d¡luyó la mezcla med¡ante la ad¡c¡ón de agua (10 mL) y luego se extrajo con DCM (3 x 10 mL) ut¡l¡zando un separador de fases B¡otage. Se concentraron las fases orgán¡cas comb¡nadas y se pur¡f¡caron los productos med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (10 g B¡otage KP-S¡l, MeOH al 0-40 % en DCM) para dar el compuesto del título (14 mg, 36 %) como un ace¡te amar¡llo. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 59.09 (d, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.89-7.69 (m, 2H), 7.33-7.20 (m, 1H), 4.48 (br. s., 1H), 4.32-3.73 (m, 3H), 3.24-2.99 (m, 2H), 1.94 (dd, 1H), 1.18 - 1.69 (m, 3H), 1.44 (s, 9H).
Paso 3: 3-(Hidroxi(4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona: Proced¡m¡ento 2 General ut¡l¡zando tert-but¡l 4-h¡drox¡-4-(h¡drox¡(4-oxo-4H-p¡r¡do[1,2-a]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (14 mg, 0.037 mmol), DCM (1 mL) y TFA (1 mL) d¡o el compuesto del título (9 mg, 88 %) como un sól¡do amar¡llo pál¡do. 1H RMN (300 MHz, methanold4): 59.17-8.90 (m, 1H), 8.61-8.28 (m, 1H), 8.02-7.83 (m, 1H), 7.75-7.51 (m, 1H), 7.44-7.13 (m, 1H), 3.42-3.07 (m, 4H), 3.00-2.54 (m, 4H), 2.10-0.71 (m, 4H).
Paso 4: 3-(Hidroxi(4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 3-(h¡drox¡(4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-4H-p¡r¡do[1,2-a]p¡r¡m¡d¡n-4-ona (9 mg, 0.033 mmol), ác¡do (R)-3-fen¡lbutano¡co ( 8 mg, 0.049 mmol), HATU (19 mg, 0.049 mmol), DlPEA (23 jl, 0.131 mmol) y DCM (1 mL) d¡o el compuesto del título ( 10 mg, 73 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0 . 8 6 y 0.85 m¡n ( 2 d¡astereo¡sómeros), m/z = 422 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 59.08 (d, 1H), 8.41-8.24 (m, 1H), 7.90-7.71 (m, 2H), 7.34-7.09 (m, 6 H), 4.58-4.33 (m, 2H), 4.27 (d, 1H), 3.73-3.44 (m, 1H), 3.41-3.14 (m, 2H), 2.98-2.82 (m, 1H), 2.72­ 2.37 (m, 2H), 1.98-1.71 (m, 2H), 1.61-1.09 (m, 5H), 1.05-0.62 (m, 1H).
Ejemplo 102: (R)-1-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-[4,5'-b¡p¡r¡m¡d¡n]-6(1H)-ona
Figure imgf000074_0001
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), (ácido pirimidin-5-ilborónico (12 mg, 0.096 mmol), Na2CO3 (14 mg, 0.128 mmol), Pd(PPh3)4 (3.7 mg, 3.21 |jmol), 1,4-dioxano (0.4 mL) y agua (0.16 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (24 mg, 86 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.93 min, m/z = 434 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 9.37-9.21 (m, 3H), 8.28 (s, 0.4H (confórmero A)), 8.17 (s, 0.6 H (confórmero B)), 7.41-7.14 (m, 5H), 6.96 (s, 1H), 4.48-4.35 (m, 0.6H (confórmero B)), 4.35-4.22 (m, 0.4H (confórmero A)), 4.22-3.82 (m, 2H), 3.67-2.86 (m, 5H), 2.74-2.58 (m, 1H), 2.58-2.42 (m, 1H), 1.64-1.24 (m, 7H), 0.84-0.67 (m, 0.6H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 103: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-hidroxietil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000074_0002
Se calentó una mezcla del Producto Intermedio A (25 mg, 0.064 mmol), 2-aminoetanol (59 mg, 0.962 mmol) y etanol (0.5 mL) en el microondas a 120 °C durante 20 min. Se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en PE y luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (20 mg, 75 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.81 min, m/z = 415 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCl3 , esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.83 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.74 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.37-7.15 (m, 5H), 6.08-5.94 (m, 1H), 5.26 (s, 1H), 5.07-4.84 (m, 1H), 4.42-4.23 (m, 1H), 4.02-3.47 (m, 6 H), 3.40-3.15 (m, 4H), 3.07-2.82 (m, 1H), 2.72-2.57 (m, 1H), 2.57-2.43 (m, 1H), 1.54-1.22 (m, 6 H), 0.92-0.80 (m, 0.4H (confórmero A)), 0.80-0.65 (m, 0.6H (confórmero B)).
Ejemplo 104: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-3-(3-hidroxifenil)-2-metil-2H-pirazolo[4.3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000074_0003
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (32 mg, 0.066 mmol), ácido (3-hidroxifenil)borónico (27 mg, 0.197 mmol), K3PO4 (42 mg, 0.197 mmol), Pd (PPh3)4 (7.6 mg, 6.55 jmol), 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.13 mL) en un microondas a 150 °C durante 10 min dio el compuesto del título (21 mg, 64 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.09 min, m/z = 502 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, metanol-d4, esta molécula aparece como dos confórmeros A y B en una proporción de 2:3 respectivamente): 8 7.89 (s, 0.4H (confórmero A)), 7.83 (s, 0.6H (confórmero B)), 7.34-7.01 (m, 6 H), 7.00-6.89 (m, 2H), 6.89-6.78 (m, 1H), 4.19-3.70 (m, 6 H), 3.66-3.47 (m, 1H), 3.26­ 2.31 (m, 5H), 1.60-1.08 (m, 7H), 0.85-0.69 (m, 0.6 H (confórmero B solamente)).
Ejemplo 105: 3-(Hidroxi(4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirido[1.2-un]pirimidin-4-ona
Figure imgf000074_0004
Paso 1: tert-Butil 4-hidroxi-4-(hidroxi(4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metil)piperídin-1-carboxilato: Se añadió agua (0.500 ml) a una mezcla vigorosamente agitada de tert-butil 4-((4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metilen)piperidin-1-carboxilato(100 mg, 0.240 mmol), K2OsO4.2 H2O (2.2 mg, 5.99 |jmol) y NMO (34 mg, 0.287 mmol) en DCM (1.5 mL). Después de 24 h, se añadió adicionalmente t-BuOH (0.5 mL). Después de 4 días, se añadió K2OSO4.2 H2O (2.2 mg, 5.99 jm ol) y se agitó la reacción durante 24 h más. Se diluyo la mezcla con agua (10 mL) y se extrajo con DCM (3 * 10 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (10 g Biotage KP-Sil, MeOH al 0-40 % en DCM) para dar el compuesto del título (93 mg, 86 %) como una espuma amarilla. LCMS (Método A): Rt = 1.32 min, m/z = 452 [M+H]+.
Paso 2: 3-(Hidroxi(4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona: Procedimiento 2 General utilizando tert-butil 4-hidroxi-4-(hidroxi(4-oxo-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-3-il)metil)piperidin-1 -carboxilato (93 mg, 0.206 mmol), TFA (2 mL) y DCM (2 mL) dio el compuesto del título (65 mg, 90 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.46 min, m/z = 352 [M+H]+.
Paso 3: 3-(Hidroxi(4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona: Procedimiento 4 General utilizando 3-(hidroxi(4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-9-fenil-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona (37 mg, 0.105 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (26 mg, 0.158 mmol), HATU (60 mg, 0.158 mmol), DIPEA (74 jL , 0.421 mmol) y DCM (2 mL) dio el compuesto del título (37 mg, 71 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.28 y 1.27 min (2 diastereoisómeros), m/z = 498 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCh): 8 9.15-9.08 (m, 1H), 8.39-8.22 (m, 1H), 7.85-7.76 (m, 1H), 7.68-7.57 (m, 2H), 7.56-7.44 (m, 3H), 7.37-7.07 (m, 6 H), 4.57-4.18 (m, 3H), 3.69-3.44 (m, 1H), 3.41-3.11 (m, 2H), 2.99-2.81 (m, 1H), 2.72-2.38 (m, 2H), 1.97-1.74 (m, 1H), 1.62-1.29 (m, 5H), 0.98-0.73 (m, 1H).
Ejemplo 106: (R)-4-(6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzamida
Figure imgf000075_0001
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (25 mg, 0.051 mmol), ácido (4-carbamoilfenil)borónico (21 mg, 0.128 mmol), K3PO4 (33 mg, 0.154 mmol), Pd (PPh3)4 ( 6 mg, 5.12 jmol), 1,4-dioxano (0.4 mL) y agua (0.1 mL) en un microondas a 130 °C durante 15 min dio el compuesto del título (22 mg, 81 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.94 min, m/z = 529 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.11 (s, 1H), 8.06 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 8.01 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.30 - 7.21 (m, 4H), 7.19 - 7.13 (m, 1H), 4.87 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.15 (s, 3H), 4.05 -3.89 (m, 3H), 3.69 -3.61 (m, 1H), 3.28 -3.12 (m, 3H), 2.90 -2.84 (m, 1H), 2.62 -2.56 (m, 1H), 1.55 - 1.29 (m, 4H), 1.21 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Ejemplo 107: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-3-(4-(hidroximetil)fenil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000075_0002
Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (25 mg, 0.051 mmol), ácido (4-(hidroximetil)fenil)borónico (19 mg, 0.128 mmol), K3PO4 (33 mg, 0.154 mmol), Pd (PPh3)4 ( 6 mg, 5.12 jmol), 1,4-dioxano (0.4 mL) y agua (0.1 mL) en un microondas a 130 °C durante 15 min dio el compuesto del título (19 mg, 72 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.01 min, m/z = 516 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 7.98 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 7.69 -7.65 (m, 2H), 7.54 -7.49 (m, 2H), 7.29 -7.23 (m, 4H), 7.17 -7.14 (m, 1H), 5.32 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.10 (s, 3H), 4.07 - 3.87 (m, 3H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 3.27 - 3.13 (m, 2H), 2.92 - 2.83 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 2H), 1.57 - 1.28 (m, 4H), 1.21 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Ejemplo 108: (R)-6-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-(3-(morfol¡nomet¡l)fen¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H-ona
Figure imgf000076_0001
Proced¡m¡ento 5 General ut¡l¡zando Producto Intermed¡o B (25 mg, 0.051 mmol), 4-(3-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborlan-2-¡l)benc¡l)morfol¡na (39 mg, 0.128 mmol), K3 PO4 (33 mg, 0,154 mmol), pd(PPh3)4 ( 6 mg, 5.12 |jmol), 1,4-d¡oxano (0.4 mL) y agua (0.1 mL) en un m¡croondas a 130 °C durante 15 m¡n d¡o el compuesto del título (19 mg, 63 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método B): Rt = 0.76 m¡n, m/z = 585 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da): 8 7.99 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.60 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.26 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 7.18 -7.12 (m, 1H), 4.88 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.11 (s, 3H), 4.14 -3.86 (m, 4H), 3.70 - 3.53 (m, 6 H), 3.27 - 3.13 (m, 2H), 2.92 - 2.83 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 2H), 2.44 - 2.35 (m, 4H), 1.58 - 1.25 (m, 4H), 1.21 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Ejemplo 109: (R)-3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-metox¡et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000076_0002
Se calentó una mezcla del Producto Intermed¡o A (25 mg, 0.064 mmol), 2-metox¡etanam¡na (0.056 mL, 0.641 mmol) y 1,4-d¡oxano (0.5 mL) durante 15 m¡n a 150 °C en el m¡croondas. Se d¡luyó la mezcla de reacc¡ón con salmuera (15 mL) y se extrajo con DCM (10 mL) ut¡l¡zando un separador de fases B¡otage. Se concentró la capa orgán¡ca y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da para proporc¡onar el compuesto del título (17 mg, 62 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.85 m¡n, m/z = 429 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 7.97 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 7.31 - 7.21 (m, 4H), 7.20 - 7.12 (m, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.99 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 3.84 -3.58 (m, 4H), 3.42 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.28 -3.12 (m, 3H), 2.93 -2.86 (m, 1H), 2.62 -2.53 (m, 2H), 1.48 - 1.22 (m, 4H), 1.20 (d, J = 6 . 8 Hz, 3H).
Ejemplo 110: 3-((4-H¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((R)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000076_0003
Se calentó una mezcla del Producto Intermed¡o A (25 mg, 0.064 mmol), (R)-tert-dut//3-am¡nop¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato (0.109 mL, 0.641 mmol) y 1,4-d¡oxano (0.5 ml) durante 75 m¡n a 150 °C en el m¡croondas. Se d¡luyó la mezcla de reacc¡ón con salmuera (15 mL) y se extrajo con DCM (10 mL) ut¡l¡zando un separador de fases B¡otage. Se concentró la capa orgán¡ca y se pur¡f¡có el res¡duo por cromatografía ultrarráp¡da para produc¡r (R)-tert-but¡l 3-((1-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato. Se ag¡tó este mater¡al en DCM (0.2 mL) y TFA (0.2 mL) durante 2 h antes de concentrarlo. Se d¡solv¡ó el res¡duo en DCM (1 mL) y NEt3 (1 mL) y se pur¡f¡có la mezcla d¡rectamente med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (11 g B¡otage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en Pe y luego MeOH al 0-20 % en EtOAc) para produc¡r el compuesto del título (13 mg, 89 %) como un sól¡do amar¡llo pál¡do. LCMS (Método B): Rt = 0.64 m¡n, m/z = 440 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 7.97 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 7.32 - 7.19 (m, 4H), 7.19 - 7.13 (m, 1H), 7.03 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.03 - 3.93 (m, 1H), 3.87 - 3.57 (m, 4H), 3.23 - 3.09 (m, 2H), 2.99 -2.83 (m, 3H), 2.79 -2.71 (m, 1H), 2.64 -2.53 (m, 2H), 2.00 -1.90 (m, 1H), 1.64 - 1.54 (m, 1H), 1.49 - 1.22 (m, 5H), 1.20 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Ejemplo 111: (R)-3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-5-met¡l-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4 (3H)-ona
Figure imgf000077_0001
Se cargó en un vial de 10 mL (R)-6-cloro-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-5-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (40 mg, 0.099 mmol) (Ejemplo 44) y 2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)etanam¡na (0.126 mL, 0.990 mmol) en 1,4-d¡oxano (1.0 mL) para dar una soluc¡ón amar¡llo pál¡do. Se selló el rec¡p¡ente y se calentó a 150 °C durante 15 m¡n (m¡croondas B¡otage). Deb¡do a la reacc¡ón ¡ncompleta, se calentó la reacc¡ón a 175 °C durante 1 h (m¡croondas B¡otage). Se repart¡ó la mezcla de reacc¡ón entre EtOAc y agua, se separó la mezcla b¡fás¡ca resultante, se extrajo la fase acuosa ut¡l¡zando EtOAc (x 2), se secó la fase orgán¡ca comb¡nada (MgSO4), se el¡m¡naron los solventes in vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo restante med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (columna de 11 g KP-NH, EtOAc al 0-100 %/c¡clohexano, luego MeOH al 0-20 %/EtOAc) para dar el compuesto del título (12 mg, 25 %) como un sól¡do blanquec¡no. LCMS (Método B): Rt = 0.70 m¡n, m/z= 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m etano l^): 8 7.99 (m, 1H), 7.35-7.14 (m, 5H), 4.25-4.10 (m, 1H), 4.02-3.59 (m, 5H), 3.28 - 3.12 (m, 2H, solvente superpuesto), 3.05 - 2.88 (m, 1H), 2.83-2.45 (m, 8 H), 1.90-1.77 (m, 6 H), 1.62-0.85 (m, 8 H).
Ejemplo 112: Benc¡l 4-((3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-2-met¡l-7-oxo-2,7-d¡h¡dro-6H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-6-¡l)met¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1 -carbox¡lato
Figure imgf000077_0002
Se d¡solv¡ó terf-But¡l 4-(6-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benc¡lcarbamato (20 mg, 0.043 mmol) en DCM (1 mL) y se añad¡ó DIPEA (0.022 mL, 0.13 mmol), segu¡do de cloroform¡ato de benc¡lo (6.7 pL, 0.047 mmol). Se ag¡to la mezcla a TA durante 10 m¡n y luego se añad¡ó TFA (1 mL). Se ag¡tó la mezcla a TA durante 10 m¡n más y luego se concentró. Se recog¡ó el res¡duo en metanol y se añad¡ó a un cartucho SCX-2 de 2 g. Se enjuagó la columna con MeOH y luego se elud¡ó con NH32 M en MeOH. Se concentraron las fracc¡ones de NH3 para dar un v¡dr¡o que se pur¡f¡có por cromatografía ultrarráp¡da (11 g B¡otage KP-NH; EtOAc al 50-100 % elud¡do en c¡clohexano y luego MeOH al 0-35 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (14 mg, 65 %) como un sól¡do blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.77 m¡n, m/z = 503 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe): 8 7.99 (s, 1H), 7.63 (d, 2H), 7.53 (d, 2H), 7.35 (m, 5H), 5.07 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.99 (s, 2H), 3.81 (m, 4H), 3.14 (m, 2H), 2.13 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.42 (m, 2H).
Ejemplo 113: (R)-W-(1-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-W-(2-(p¡rrol¡d¡n-1 -¡l)et¡l)acetam¡da, ác¡do fórm¡co
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Se añad¡ó DIPEA (0.045 mL, 0.257 mmol) y Ac2O (0.022 mL, 0.235 mmol) a una soluc¡ón ag¡tada del Producto Intermed¡o A (100 mg, 0.214 mmol) en THF (1 mL) a temperatura amb¡ente en un v¡al sellado. Después de 1 h, se añad¡eron más DIPEA (0.045 mL, 0.257 mmol) y Ac2O (0.022 ml, 0.235 mmol). Después de 1 h más, se añad¡eron más DIPEA (0.045 ml, 0.257 mmol) y Ac2O (0.022 ml, 0.235 mmol). Después de una hora más, se el¡m¡naron los solventes in vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo remanente med¡ante HPLC preparat¡va (Método A, cond¡c¡ones ác¡das) para dar el compuesto del título (6.9 mg, 6 %) como un sól¡do naranja pál¡do. LCMS (Método B): Rt = 0.72 m¡n, m/z = 510 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m e ta n o ^ ): 8 8.48 (br s, 1H), 8.39-8.28 (m, 1H), 7.38-7.14 (m, 5H), 6.50 (s, 1H), 4.28­ 3.98 (m, 4H), 3.96-3.77 (m, 1H), 3.75-3.58 (m, 1H), 3.20-2.43 (m, 8 H, solvente superpuesto), 2.25 (s, 3H), 2.15-1.88 (m, 5H), 1.67-0.78 (m, 9H).
Ejemplo 114: 3-((4-H¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((R)-2-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona, ác¡do fórm¡co
Figure imgf000078_0001
Se colocó en un tubo de reactor de m¡croondas Producto Intermed¡o A (40 mg, 0.103 mmol) y (R)-2-(2-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)etanam¡na (65.8 mg, 0.513 mmol) en 1,4-d¡oxano (1.5 mL) para dar una soluc¡ón de color amar¡llo pál¡do. Se calentó la mezcla de reacc¡ón a 150 °C durante 30 m¡n ut¡l¡zando rad¡ac¡ón de m¡croondas. Deb¡do a la reacc¡ón ¡ncompleta, se calentó la mezcla de reacc¡ón a 175 °C durante 30 m¡n ut¡l¡zando rad¡ac¡ón de m¡croondas. Deb¡do a que la reacc¡ón fue ¡ncompleta, se calentó la mezcla de reacc¡ón a 175 °C durante 1 h ut¡l¡zando rad¡ac¡ón de m¡croondas. Se pur¡f¡có la mezcla de reacc¡ón d¡rectamente med¡ante HPLC preparat¡va (Método A, cond¡c¡ones ác¡das) para dar el compuesto del título (8 . 8 mg, 16 %). LCMS (Método B): Rt = 0.73 m¡n, m/z = 482 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4): 8 8.50 (s, 1H), 8.12-8.01 (m, 1H), 7.35 - 7.14 (m, 5H), 5.37 (s, 1H), 4.15 (ddt, 1H), 3.98 - 3.52 (m, 3H), 3.50-3.38 (m, 1H), 3.28-3.15 (m, 1H, solvente superpuesto), 3.11-2.88 (m, 3H), 2.84-2.69 (m, 1H), 2.66 (s, 1H), 2.54 (ddd, 1H), 2.30-2.19 (m, 1H), 2.11-1.94 (m, 5H), 1.77 -0.84 (m, 12H).
Ejemplo 115: (R)-1-(4-H¡drox¡-4-((5-fen¡lp¡raz¡n-2-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-3-fen¡lbutan-1-ona
Figure imgf000078_0002
Paso 1: tert-Butil hidroxi-4-((5-fenilpirazin-2-il)metil)piperídin-1-carboxilato : Se d¡solv¡ó 2-met¡l-5-fen¡lp¡raz¡na (200 mg, 1.18 mmol) (d¡spon¡ble comerc¡almente) en THF (3 mL) y se enfr¡ó la soluc¡ón a -78 °C bajo N2. Se añad¡ó LDA (2 M en THF/heptano/et¡lbenceno, 1.18 ml, 2.36 mmol) y se ag¡tó la mezcla durante 1 h. Se añad¡ó tert-But¡l 4-oxop¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (351 mg, 1.76 mmol) como una soluc¡ón en THF (3 mL) y se ag¡tó la mezcla durante 30 m¡n a -78 °C, luego se dejó volver a TA con ag¡tac¡ón durante 3 horas. Se añad¡ó soluc¡ón saturada de cloruro de amon¡o (ac) y se extrajo la mezcla en acetato de et¡lo (x 3). Se lavaron las fases orgán¡cas comb¡nadas con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. Se pur¡f¡có el res¡duo por cromatografía ultrarráp¡da (12 g GraceResolv™; elud¡do con EtOAc al 0-50 % en c¡clohexano) para dar tert-but¡l 4-h¡drox¡-4-((5-fen¡lp¡raz¡n-2-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (102 mg, 24 %) como un v¡dr¡o. LCMS (Método A): Rt = 1.55 m¡n, m/z = 370 [M+H]+.
Paso 2: Se d¡solv¡ó 4-((5-Fenilpirazin-2-il)metil)piperidin-4-ol: tert But¡l 4-h¡drox¡-4-((5-fen¡lp¡raz¡n-2-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (102 mg, 0.28 mmol) en DCM (2 mL) y se añad¡ó TFA (2 mL). Se ag¡tó la mezcla a TA durante 15 m¡n y luego se concentró. Se recog¡ó el res¡duo en metanol y se añad¡ó a un cartucho SCX-2 de 2 g. Se enjuagó la columna con MeOH y luego se elud¡ó con NH32 M en MeOH. Se concentraron las fracc¡ones de NH3 para dar un v¡dr¡o que se pur¡f¡có por cromatografía ultrarráp¡da (11 g B¡otage KP-NH; EtOAc al 30-100 % elud¡do en c¡clohexano) para dar 4-((5-fen¡lp¡raz¡n-2-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-4-ol (38 mg, 51 %) como un sól¡do graso. LCMS (Método A): Rt = 0.59 m¡n, m/z = 270 [M+H]+.
Paso 3: (R)-1-(4-Hidroxi-4-((5-fenilpirazin-2-il)metil)piperidin-1-il)-3-fenilbutan-1-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 4-((5-fen¡lp¡raz¡n-2-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-4-ol (35 mg, 0.13 mmol), HATU (54 mg, 0.14 mmol), ác¡do (R)-3-fen¡lbutano¡co (24 mg, 0.14 mmol), DIPEA (0.030 ml, 0.17 mmol) y DCM (2 mL) d¡o el compuesto del título (39 mg, 72 %) como un v¡dr¡o ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.46 m¡n, m/z = 416 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 9.15 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.12 (d, 2H), 7.51 (m, 3H), 7.24 (m, 4H), 7.14 (m, 1H), 4.71 (d, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.62 (m, 1H), 3.15 (m, 2H), 2.85 (m, 3H), 2.60 (m, 2H), 1.05-1.50 (m, 7H).
Ejemplo 116: (R)-3-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(fen¡let¡n¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Figure imgf000078_0003
Paso 1: tert-Butil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Proced¡m¡ento 1 General ut¡l¡zando Epóx¡do 1 (6.08 g, 28.5 mmol), 6-clorop¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (3.72 g, 28.5 mmol), DIPEA (7.47 mL, 42.7 mmol) y DMF (35 mL) dio el compuesto del título (5.87 g, 60 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método B): Rt = 0.99 min, m/z = 224 [M+H-Boc]+.
Paso 2: Se disolvieron 3-((4-Hidroxipiperídin-4-il)metil)-6-(feniletinil)pirimidin-4(3H)-ona: tert-Butil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6M-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (100 mg, 0.29 mmol) y trimetilamina (0.24 mL, 1,75 mmol) en DMF (1 mL) y se añadió fenilacetileno (0.07 mL, 0,64 mmol). Se evacuó la mezcla y se rellenó con N2 tres veces. Se añadió cloruro de trifenilfosfinaoro(I) (7.2 mg, 0.015 mmol) y se selló el tubo. Se calentó la mezcla a 60 °C durante 16 h y luego se enfrió a TA. Se diluyó la mezcla con agua y luego se extrajo con acetato de etilo (x3). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron (MgSO4) y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g GraceResolv ; EtOAc al 0-100 % eludido en ciclohexano) para dar un jarabe naranja. Esto se disolvió en d Cm (1 mL) y TFA (1 mL) y se agitó durante 5 min y luego se concentró. Se disolvió el residuo en metanol y se añadió a un cartucho SCX-2 de 2 g. Se enjuagó la columna con metanol y luego se eludiocon NH32 M en metanol. Se concentraron las fracciones de NH3 n para dar el compuesto del título (60 mg, 67 %). LCMS (Método A): Rt = 0.73 min, m/z = 310 [M+H]+.
Paso 3: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(feniletinil)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-(feniletinil)pirimidin-4(3H)-ona (58 mg, 0.19 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (33.9 mg, 0.21 mmol), DIPeA (0.043 mL, 0.24 mmol), HATU (82 mg, 0.22 mmol) y Dc M (2 mL) dio el compuesto del título (9 mg, 11 %) como un vidrio incoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.25 min, m/z = 456 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 8 8.28 (d, 1H), 7.60 (d, 2H), 7.50 (m, 3H), 7.26 (m, 4H), 7.22 (m, 1H), 6 . 6 8 (m, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 3.94 (m, 2H), 3.71 (m, 1H), 3.21 (m, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.55 (m, 2H), 1.05-1.55 (m, 7H).
Ejemplo 117: (R)-6-Bencil-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
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Paso 1: Se disolvieron 6-Bencil-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona: tert-Butil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (60 mg, 0.18 mmol) y benciltrifluoroborato (31 mg, 0.19 mmol) en tolueno (2 mL). Se añadió trietilamina (0.036 ml, 0.26 mmol), seguido de agua (0.2 mL). Se evacuó la mezcla y se rellenó con N2 tres veces, luego PdCh(dppf) (12.8 mg, 0.017 mmol). Se selló el tubo y se calentó la mezcla a 110 °C durante 16 h. Se enfrió la mezcla y se diluyó con agua, luego se extrajo en acetato de etilo (x3). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera y luego se secaron (MgSO4) y se concentraron. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida ( 12 g GraceResolv ; se eludió con EtOAc al 1 0 - 1 00 % en ciclohexano y luego con MeOH al 0-15 % en EtOAc) para dar un vidrio incoloro. Esto se disolvió en DCM (1 mL) y TFA (1 mL) y se agitó durante 10 min y luego se concentró. Se disolvió el residuo en metanol y se añadió a un cartucho SCX-2 de 2 g. Se enjuagó la columna con metanol y luego se eludió con NH32 M en metanol. Se concentraron las fracciones de NH3 para dar el compuesto del título (11 mg, 21 %) como un vidrio incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.55 min, m/z = 300 [M+H]+.
Paso 2: (R)-6-Bencil-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-bencil-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona (11 mg, 0,037 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (6 . 6 mg, 0.04 mmol), HATU (15.4 mg, 0.040 mmol), DIPEA (7.7 pL, 0.044 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (11 mg, 67 %) como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 1.14 min, m/z = 446 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 8 8.20 (d, 1H), 7.27 (m, 9H), 7.22 (m, 1H), 6.21 (m, 1H), 4.92 (m, 1H), 3.86 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.60 (m, 1H), 3.14 (m, 2H), 2.80 (m, 1H), 2.55 (m, 2H), 1.10-1.50 (m, 7H).
Ejemplo 118: 3-(4-((R)-1-amino-2,2,2-trifluoroetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6Hona
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Paso 1: (S,Z)-N-(4-Bromobencilideno)-2-metilpropano-2-sulfinamida: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 250 mL 4-bromobenzaldehído (10 g, 54.0 mmol) en tolueno (43.2 ml) para dar una solución incolora. A esto se le añadió en porciones (S)-2-metilpropano-2-sulfinamida (6.55 g, 54.0 mmol) seguido de agitación a TA durante 15 min. Se le añadió a la mezcla resultante hidróxido de sodio (2.16 g, 54.0 mmol). Después de 16 h, se añadieron sulfato de sodio (2,5 g) y Celite® (2,5 g). Después de 15 min, se eliminaron los sólidos por filtración y se concentró el filtrado in vacuo, seguido de purificación mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 330 g sílice GraceResolv, EtOAc al 5-30 %/ciclohexano) para dar el compuesto del título (13.5 g, 87 %) como un aceite amarillo que solidificó al reposar. LCMS (Método A): Rt = 1.57 min, m/z = 288, 290 [M+H]+.
Paso 2: (S)-N-((R)-1-(4-Bromofenil)-2,2,2-trífluoroetil)-2-metilpropano-2-sulfínamida: Se añadieron en un tubo de reacción de 40 mL (S,Z)-N-(4-bromobenciliden)-2-metilpropano-2-sulfinamida (1.00 g, 3.47 mmol) y acetato de tetrabutilamonio (1.03 g, 3.47 mmol) en DMF (10 mL) para dar una solución incolora. Se agitó la mezcla de reacción y se enfrió a 0 °C seguido de la adición gota a gota de trimetil(trifluorometil)silano (1.28 mL, 8.67 mmol). Después de 90 min, se diluyó la mezcla de reacción con solución saturada de cloruro de amonio (ac) (50 mL) y se extrajo en acetato de etilo (3 x 25 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua/salmuera 1:1 (3 * 25 mL), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida. Se suspendió el material sólido resultante utilizando ciclohexano (30 mL) y se recogió para dar el compuesto del título (878 mg, 71 %) como un sólido de color canela. LCMS (Método A): Rt = 1.57 min, m/z = 358, 360 [M+H]+.
Paso 3: (S)-2-Metil-N-((R)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-ilo) )fenil)etil)propano-2-sulfinamida: Se añadieron en un tubo de reacción de 40 mL (S)-N-((R)-1-(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (500 mg, 1.40 mmol), bis(pinacolato)diboro (532 mg, 2.09 mmol) y acetato de potasio (411 mg, 4.19 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (5.6 mL). Se desgasificó la solución incolora resultante(burbujeando nitrógeno) durante 10 min, seguido de la adición de PdCh(dppf).DCM (57.0 mg, 0.070 mmol) y se aumentó la temperatura a 95 °C en atmósfera de nitrógeno durante la noche. Se dejó enfriar la mezcla de reacción a TA, se diluyó con agua (10 mL) y se extrajo en acetato de etilo (3 x 10 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas (Na2SO), se filtraron y se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 80 g Grace, EtOAc al 5-60 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (333 mg, 59 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método A): Rt = 1.78 min, m/z = 406 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.84 (d, 2H), 7.42 (d, 2H), 4.83 (quin, 1H), 3.63 (d, 1H), 1.34 (s, 12H), 1.25 (s, 9H).
Paso 4: (S)-2-Metil-N-((R)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4- trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)etil)propano-2-sulfinamida: Se añadió en un tubo de microondas de 10 mL Producto Intermedio E (30 mg, 0.055 mmol), (S)-2-metil-N-((R)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)etil)propano-2-sulfinamida (33.6 mg, 0.083 mmol) y fosfato de potasio, tribásico (28.9 mg, 0.166 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (1.2 mL) y agua (0.3 mL) para dar una solución amarilla. Esto se desgasificó burbujeando nitrógeno durante 10 min, seguido de la adición de PdCh(dppf).DCM (2.3 mg, 2.77 pmol) y calentamiento a 120 °C bajo radiación de microondas durante 15 min. Se diluyó la mezcla de reacción con agua (10 mL) y se extrajo en acetato de etilo (3 x 10 mL). Se lavaron la fases orgánicas combinadas con salmuera (10 mL), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho KP-NH de 28 g, EtOAc al 10-100 %/ciclohexano; luego MeOH al 0-20 %/EtOAc) para dar el compuesto del título (20 mg, 49) como un sólido amarillo. LCMS (Método B): Rt = 1.31 min, m/z = 685 [M-buteno+H]+.
Paso 5: 3-(4-((R)-1-Amino-2,2,2-trifluoroetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3- fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 25 mL (S)-2-metil-N-((R)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)etil)propano-2-sulfinamida (20 mg, 0.027 mmol) en metanol (1 mL) para dar una solución amarilla. A esto se le añadió ácido clorhídrico, 4 M en 1,4-dioxano (0.027 mL, 0.108 mmol) y se agitó la mezcla resultante a TA durante 1 h. Se cargó la mezcla de reacción en un cartucho SCX-2 de 2 g preequilibrado. Después de 10 min, se lavó el cartucho con MeOH al 20 %/DCM, antes de la elución con amoníaco 2 M al 20 % en metanol/DCM. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida, se trituró utilizando éter dietílico y se liofilizó para dar el compuesto del título (12 mg, 70 %) como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 0.98 min, m/z = 637 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSOd6): 8 7.98 (d, 1H), 7.67-7.77 (m, 4H), 7.27-7.44 (m, 5H), 4.89 (s, 1H), 4.61 (sex, 1H), 4.04-4.19 (m, 4H), 3.86-4.02 (m, 3H), 3.71-3.82 (m, 1H), 3.10-3.29 (m, 2H), 2.78-3.02 (m, 2H), 2.61 (d, 2H), 1.12-1.68 (m, 4H).
Ejemplo 119: 3-(4-((S)-1-Amino-2,2,2-trifluoroetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000081_0001
Paso 1: (R,Z)-N-(4-Bromobencilideno)-2-metilpropano-2-sulfinamida: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 100 mL 4-bromobenzaldehído (5 g, 27.0 mmol) en tolueno (22 mL) para dar una solución incolora. A esto se agregó (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (3.28 g, 27.0 mmol) en porciones seguido de agitación a TA durante 15 min. Se le añadió a la mezcla resultante hidróxido de sodio (1.08 g, 27.0 mmol) seguido de agitación a temperatura ambiente. Después de otras 16 h, se agitaron sulfato de sodio sólido (1.3 g) y Celite® (1.3 g) y la suspensión resultante durante 15 min. Se eliminaron los sólidos por filtración y se concentraron los filtrados hasta sequedad bajo presión reducida seguido de purificación por cromatografía ultrarrápida (cartucho de 120 g sílice GraceResolv, EtOAc al 5-30 %/ciclohexano) para dar el compuesto del título (5.10 g, 66 %) como un aceite amarillo que solidificaba al reposar. LCMS (Método B): Rt = 1.45 min, m/z = 288, 290 [M+H]+.
Paso 2: (R)-N-((S)-1-(4-Bromofenil)-2,2,2-trífluoroetil)-2-metilpropano-2-sulfinamida: Se añadieron en un tubo de reacción de 40 mL (R,Z)-N-(4-bromobenciliden)-2-metilpropano-2-sulfinamida (1.00 g, 3.47 mmol) y acetato de tetrabutilamonio (1.03 g, 3.47 mmol) en DMF (10 mL) para dar una solución incolora. Esto se enfrió a 0 °C seguido de la adición gota a gota de trimetil(trifluorometil)silano (1.28 mL, 8.67 mmol) y se agitó a 0 °C durante 90 min. Se diluyó la mezcla de reacción con solución saturada de cloruro de amonio (ac) (50 mL) y se extrajo en acetato de etilo (3 x 25 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua/salmuera 1:1 (3 * 25 mL), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron hasta sequedad a presión reducida y se suspendieron en éter dietílico (20 mL) para dar el compuesto del título (336 mg, 27 %) como un sólido tostado. lCm S (Método B): Rt = 1.35 min, m/z = 358, 360 [M+H]+.
Paso 3: (R)-2-Metil-N-((S)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-ilo)fenil)etil)propano-2-sulfinamida: Se añadió en un tubo de reacción de 15 mL (R)-N-((S)-1-(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (336 mg, 0.938 mmol), bis(pinacolato)diboro (357 mg, 1.41 mmol) y acetato de potasio (276 mg, 2.81 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (3.7 mL para dar una solución incolora. Esto se desgasificó burbujeando nitrógeno a través de la solución durante 10 min, seguido de la adición de PdCh(dppf).DCM (38.3 mg, 0.047 mmol) y calentamiento a 95 °C bajo nitrógeno. Después de 16 h, se enfrió la mezcla de reacción a TA, se diluyó con agua (10 mL) y se extrajo en acetato de etilo (3 x 10 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na2SO4 , se filtraron y se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 80 g sílice GraceResolv, EtOAc al 5-60 %/ciclohexano) para dar el compuesto del título (184 mg, 48 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método B): Rt = 1.52 min, m/z= 406 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.84 (d, 2H), 7.42 (d, 2H), 4.83 (quin, 1H), 3.63 (d, 1H), 1.34 (s, 12H), 1.25 (s, 9H).
Paso 4: (R)-2-Metil-N-((S)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4- trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)etil)propano -2-sulfinamida: Se añadieron en un tubo de microondas de 10 mL Producto Intermedio E (30 mg, 0055 mmol), (R)-2-metil-N-((S)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)etil)propano-2-sulfinamida (33.6 mg, 0.083 mmol) y fosfato de potasio, tribásico (28.9 mg, 0.166 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (1.2 mL) y agua (0.3 mL) para dar una solución amarilla. Esto se desgasificó burbujeando nitrógeno durante 10 min, seguido de la adición de PdCh(dppf).DCM (2.3 mg, 2.77 pmol) y calentamiento a 120 °C bajo radiación de microondas durante 20 min. Se diluyó la mezcla de reacción con agua (10 mL) y se extrajo en acetato de etilo (3 x 10 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera (10 mL), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho KP-NH de 28 g, EtOAc al 10-100 %/ciclohexano; MeOH al 0-20 %/EtOAc) para dar el compuesto del título (30 mg, 73 %) como un sólido amarillo. LCMS (Método B): Rt = 1.31 min, m/z = 685 [M-buteno+H]+.
Paso 5 :3-(4-((S)-1-Amino-2,2,2-trifluoroetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 25 mL (R)-2-metil-N-((S)-2,2,2-trifluoro-1 -(4-(6-((4-hidroxi-1 -((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)etil)propano-2-sulfinamida (30 mg, 0.040 mmol) en metanol (1 mL) para dar una solución amarilla. A esto se le añadió ácido clorhídrico, 4 M en 1,4-dioxano (0.040 mL, 0.162 mmol) y se agitó la mezcla resultante a TA durante 1 h. Se cargó la mezcla de reacción en un cartucho SCX-2 de 2 g preequilibrado, se permitió que se uniera durante 10 min, se lavó con MeOH al 20 %/DCM, antes de la elución con amoníaco 2 M al 20 % en metanol/DCM. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida, se suspendió en éter dietílico y se liofilizó para dar el compuesto del título (19 mg, 74 %) como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 0.99 min, m/z = 637 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 7.98 (d, 1H), 7.67-7.77 (m, 4H), 7.27-7.44 (m, 5H), 4.89 (s, 1H), 4.61 (sex, 1H), 4.04-4.19 (m, 4H), 3.86-4.02 (m, 3H), 3.71-3.82 (m, 1H), 3.10-3.29 (m, 2H), 2.78-3.02 (m, 2H), 2.61 (d, 2H), 1.12-1.68 (m, 4H).
Ejemplo 120: (R)-3-(4-(Am¡nomet¡l)fen¡l)-2-et¡l-6-((4-h¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000082_0001
Paso 1: Metil 1-etil-4-nitro-1H-pirazol-3-carboxilato: Se añad¡ó una d¡spers¡ón al 60 % de h¡druro de sod¡o en ace¡te m¡neral (720 mg, 18 mmol) a una suspens¡ón de met¡l 4-n¡tro-1H-p¡razol-3-carbox¡lato (2.57 g, 15 mmol) en THF (30 mL) a 0 °C. Después de 1 h, se añad¡ó yodoetano (1.46 mL, 18 mmol) y se dejó la reacc¡ón calentar a temperatura amb¡ente antes de calentarla a 60 °C durante 16 h. Se enfr¡ó la reacc¡ón a temperatura amb¡ente, se d¡luyó con agua (60 mL) y se extrajo la mezcla con DCM (3 x 60 mL) ut¡l¡zando un separador de fases B¡otage. Se concentraron las fases orgán¡cas comb¡nadas y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (120 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-70 % en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (1.76 g, 59 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.97 m¡n, m/z = 200 [M+H]+.
Paso 2: Metil 4-amino-1-etil-1H-pirazol-3-carboxilato: Se redujo una soluc¡ón de met¡l 1-et¡l-4-n¡tro-1H-p¡razol-3-carbox¡lato (1.75 g, 8.79 mmol) en MeOH (88 mL)en el H-Cube® (Pd al 10 % /C CatCart® 1 mLmín' 1, TA, 20 bar H2 ; luego 1 mLm¡n_1, 40 °C, 40 bar H2; luego 1.5 mLm¡n' 1, 50 °C, 50 bar H2). Se concentró la soluc¡ón resultante para dar el compuesto del título (1.45 g, 98 %) como un ace¡te de color púrpura. LCMS (Método A): Rt = 0.35 m¡n, m/z = 170 [M+H]+.
Paso 3: 2-Etil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se calentó una suspens¡ón de met¡l 4-am¡no-1-et¡l-1H-p¡razol-3-carbox¡lato (1.45 g, 8.57 mmol) y acetato de formam¡d¡na (0.982 g, 9.43 mmol) en DIPEA (8 mL, 45.8 mmol) y EtOH (8 mL) en el m¡croondas a 110 °C durante 1 h. Se dejó la reacc¡ón durante la noche y se a¡sló el prec¡p¡tado por f¡ltrac¡ón. Se lavó el prec¡p¡tado con Et2O (30 mL) y luego se secó a alto vacío a 75 °C para dar el compuesto del título (1.15 g, 82 %) como un sól¡do ¡ncoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 611.82 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 4.35 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 1.45 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
Paso 4: 3-Bromo-2-etil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añad¡ó Br2 (1.06 mL, 20,7 mmol) a una suspens¡ón de 2-et¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (1.13 g, 6.88 mmol) en AcOH (7 mL) en un tubo de reacc¡ón. Se selló el tubo y se calentó la mezcla a 95 °C durante 18 h antes de enfr¡arse a TA y se añad¡ó 1:1 de EtOH/Et.2O (50 mL). A cont¡nuac¡ón, se a¡sló el prec¡p¡tado resultante por f¡ltrac¡ón y se lavó con Et2O (2 * 30 mL). A cont¡nuac¡ón, se suspend¡ó el prec¡p¡tado en t¡osulfato de sod¡o saturado(ac) (50 mL) y se ag¡tó enérg¡camente durante 30 m¡n antes de a¡slar los sól¡dos por f¡ltrac¡ón. Luego, se lavó el producto con agua (3 x 30 mL) y se secó en alto vacío a 80 °C para dar el compuesto del título (1.47 g, 88 %) como un sól¡do ¡ncoloro. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 6 12.04 (s, 1H), 7.85 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.41 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 1.42 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Paso 5: tert-Butil 4-((3-bromo-2-etil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1- carboxilato: Proced¡m¡ento 1 General ut¡l¡zando Epóx¡do 1 (427 mg, 2.00 mmol), 3-bromo-2-et¡lo-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (243 mg, 1 mmol), Cs2CO3 (358 mg, 1.10 mmol) y DMF (3,3 ml) d¡o el compuesto del título (430 mg, 94 %) como un sól¡do ¡ncoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 67.91 (s, 1H), 4.47 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 4.24 -3.98 (m, 2H), 3.98 -3.73 (m, 2H), 3.27 - 3.03 (m, 2H), 1.77 - 1.47 (m, 7H), 1.44 (s, 9H).
Paso 6: 3-Bromo-2-etil-6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se ag¡tó una soluc¡ón de tert-but¡l 4-((3-bromo-2-et¡l-7-oxo-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-6(7H)-¡l)met¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (430 mg, 0.942 mmol) en DCM (5 mL) y TFA (5 mL) durante 20 m¡n antes de pur¡f¡car la reacc¡ón ut¡l¡zando cartuchos 3 * 10 g B¡otage SCX-2 en paralelo (MeOH al 10 % en DCM y luego 20 % de 7 M en NH3 en MeOH en DCM) se concentraron las fases bás¡cas para dar el compuesto del título (326 mg, 97 %) como un sól¡do ¡ncoloro. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 68.05 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.41 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.93 (s, 2H), 2.90 - 2.56 (m, 4H), 1.51 -1.22 (m, 7H).
Paso 7: (R)-3-Bromo-2-etil-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2H-pirazolo[4, 3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 3-bromo-2-et¡l-6-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (47 mg, 0.131 mmol), ác¡do (R)-4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡co (43 mg, 0.197 mmol), HATU (75 mg, 0.197 mmol), DIPEA (92 pL, 0.526 mmol) y DCM (2.6 mL) d¡o el compuesto del título (59 mg, 81 %) como una espuma beige. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): 57.93 - 7.69 (m, 1H), 7.44 - 7.27 (m, 5H), 4.48 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 4.35 -3.83 (m, 4H), 3.75 -3.56 (m, 1H), 3.43 -3.26 (m, 1H), 3.10 -2.81 (m, 4H), 1.66 -0.96 (m, 7H).
Paso 8: (R)-3-(4-(Aminometil)fenil)-2-etil-6-((4-hidmxi-1-(4,4,4-trífluom-3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metilo) -2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 5 General utilizando (R)-3-bromo-2-etil-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (59 mg, 0.106 mmol), ácido (4-(((tertbutoxicarbonil)amino)metil)fenil)borónico (80 mg, 0.318 mmol), K3PO4 (135 mg, 0.636 mmol), Pd(PPh3)4 ( 6 mg, 5.30 |jnol), 1,4-dioxano (0.9 mL) y agua (0.3 mL) en un microondas a 130 °C durante 1 h dio (R)-tert-butil 4-(2-etil-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato como un sólido incoloro. Se agitó este material en DCM (2 mL) y TFA (2 mL) durante 10 min antes de concentrarlo. Se disolvió el residuo en DCM (2 mL) y NEt3 (2 mL) y se purificó directamente mediante cromatografía ultrarrápida (28 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano y luego MeOH al 0-30 % en DCM) para producir el compuesto del título (327 mg, 53 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 0.81 min, m/z = 583 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 57.99 - 7.91 (m, 1H), 7.59 - 7.48 (m, 4H), 7.46 - 7.24 (m, 5H), 4.89 (s, 1H), 4.38 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.16 -4.03 (m, 1H), 4.02 -3.86 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.29 -3.11 (m, 2H), 3.03 -2.79 (m, 2H), 2.04 (s, 2H), 1.39 (q, J = 8.0, 7.6 Hz, 7H).
Ejemplo 121: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(fenil(2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona, ácido fórmico
Figure imgf000083_0001
Se añadió PD2(dba)3 (5.9 mg, 6.41 jm ol) a una suspensión agitada del Producto Intermedio A (50 mg, 0.128 mmol), N-(2-(pirrolidin-1-il)etil)anilina (36.6 mg, 0.192 mmol), Xantofos (11.1 mg, 0.019 mmol) y Cs2CO3 (84 mg, 0.256 mmol) en 1,4-dioxano (1.0 mL) en un tubo de reacción. Se selló el recipiente y se aumentó la temperatura a 80 °C. Después de 16 h, se diluyó la mezcla de reacción con DCM, se filtró y se eliminaron los solventes in vacuo. Se purificó el residuo remanente por HPLC preparativa (Método A, condiciones ácidas) para dar el compuesto del título (3.3 mg, 4%) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.83 min, m/z = 544 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m etano l^): 58.53 (br s, 1H), 8.21-8.12 (m, 1H), 7.54 (t, 2H), 7.43 (t, 1H), 7.36-7.14 (m, 7H), 7.01 (t, 1H), 4.26-3.59 (m, 6 H), 3.25-2.46 (m, 8 h , solvente superpuesto), 2.09-1.86 (m, 5H), 1.63-0.78 (m, 9H).
Ejemplo 122: 3-(4-((S)-1-Amino-2,2-difluoroetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000083_0002
Paso 1: (R)-N-((S)-1-(4-Bromofenil)-2,2-difluoroetil)-2-metilpropano-2-sulfinamida: Se añadieron en un matraz de fondo redondo de 100 mL (R,Z)-N-(4-bromobenciliden)-2-metilpropano-2-sulfinamida (1.00 g, 3.47 mmol) y (difluorometil)trimetilsilano (1.08 g, 8.67 mmol) en THF anhidro (20 mL) para dar una solución incolora. Esto se agitó y se enfrió a -78 °C, seguido de la adición de una solución de potasio tert-butóxido (0.973 g, 8.67 mmol) en THF anhidro (15 mL). Después de 15 min, se dejó subir la temperatura hasta la temperatura ambiente. Se inactivó la mezcla de reacción con agua (30 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 mL). Se secó la fase orgánica combinada (Na2SO4), se filtró y se eliminaron los solventes in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (120 g Grace, 10-60 %, EtOAc en ciclohexano) para dar el compuesto del título (750 mg, 64 %) como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 1.24 min, m/z = 340, 342 [M+H]+.
Paso 2: (R)-N-((S)-2,2-Difluoro-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)etil)- 2-metilpropano-2-sulfinamida: Se añadió En un matraz de fondo redondo de 100 mL (R)-N-((S)-1-(4-bromofenil)-2,2-difluoroetil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (750 mg, 2.20 mmol), bis(pinacolato)diboro (840 mg, 3.31 mmol) y acetato de potasio (649 mg, 6.61 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (8 . 8 mL). Se desgasificó la solución incolora resultante (burbujeando nitrógeno) durante 10 min. Se añadió PdCh(dppf). DCM (90 mg, 0.110 mmol) y se aumentó la temperatura a 95 °C y se agitó la mezcla de reacción bajo nitrógeno. Después de 16 h, se dejó la mezcla de reacción enfriar a TA y se diluyó con agua (30 mL) y se extrajo utilizando EtOAc (3 * 30 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas (Na2SO), se filtraron y se eliminaron los solventes in vacuo. Se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (80 g Grace, 5­ 60 %, EtOAc en ciclohexano) para dar el compuesto del título (640 mg, 75 %) como un sólido tostado. LCMS (Método B): Rt = 1.40 min, m/z = 388 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.84 (dt, 2H), 7.38 (dt, 2H), 5.96 (td, 1H), 4.66 (tdd, 1H), 3.66 (d, 1H), 1.34 (s, 12H), 1.23 (s, 9H).
Paso 3: (R)-N-((S)-2,2-Difluoro-1-(4-(6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoilo) piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida: Se añadieron en un tubo de microondas de 10 mL Producto Intermedio E (30 mg, 0.055 mmol), (R)-N-((S)-2,2-difluoro-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (32.1 mg, 0.083 mmol) y fosfato de potasio, tribásico (28.9 mg, 0.166 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (1.2 mL) y agua (0.3 mL). Se desgasificó la solución amarilla resultante (burbujeando nitrógeno) durante 10 min. Se añadió PdCh(dppf).DCM (2.3 mg, 2.77 pmol) y se calentó la mezcla de reacción a 120 °C bajo irradiación de microondas durante 20 min. Se diluyó la mezcla de reacción con agua (10 mL) y se extrajo utilizando EtOAc (3 x 10 mL). Se lavó la fase orgánica combinada con salmuera (10 mL), se secó (Na2SO4), se filtró y se eliminaron los solventes in vacuo. Se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho KP-NH de 28 g, EtOAc al 10-100 % en ciclohexano; luego MeOH al 0-20 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (28 mg, 70 %) como un sólido de color marrón pálido. LCMS (Método B): Rt = 1.23 min, m/z= 667 [M-buteno+H]+.
Paso 4 :3-(4-((S)-1-Amino-2,2-difluoroetil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil) piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 25 mL (R)-N-((S)-2,2-difluoro-1-(4-(6-((4-hidroxi-1-((R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (28 mg, 0.039 mmol) en metanol (1 mL) para dar una solución amarilla. A esto se le añadió ácido clorhídrico, 4 M en 1,4-dioxano (0.039 ml, 0.155 mmol) y se agitó la mezcla resultante a TA durante 60 min. Se cargó la mezcla de reacción en un cartucho SCX-2 de 2 g preequilibrado. Después de 10 min, se lavó el cartucho con DCM/metanol 4:1 antes de eludir el producto con DCM 4:1/amoníaco 2 M en metanol. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida, se suspendió en éter dietílico y se liofilizó para dar un sólido blanco que se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 4g Grace, amoníaco 2 M al 0-25 % en metanol/DCM) y se liofilizó para dar el compuesto del título (5 mg, 21 %) como un sólido blanco. LCMS (Método B): Rt = 0.84 min, m/z = 619 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 7.98 (d, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.38-7.44 (m, 2H), 7.27-7.38 (m, 3H), 6.06 (td, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.03-4.26 (m, 5H), 3.85-4.02 (m, 3H), 3.71-3.82 (m, 1H), 3.11-3.32 (m, 2H), 2.77-3.02 (m, 2H), 2.25 (br s, 2H), 1.12-1.67 (m, 4H).
Ejemplo 123: (R)-3-(4-(Aminometil)-3-(trifluorometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metilo)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000084_0001
Paso 1: tert-Butil 4-bromo-2-(trifluorometil)bencilcarbamato: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 50 mL (4-bromo-2-(trifluorometil)fenil)metanamina (872 mg, 3.43 mmol) (disponible comercialmente) en THF (10 mL) para dar una solución incolora. Esto se enfrió a 0 °C antes de la adición gota a gota de una solución de hidróxido de sodio (549 mg, 13.7 mmol) en agua (5 mL) seguido de una solución de di-tert-butil dicarbonato (1.59 mL, 6 . 8 6 mmol) en THF (5 mL). Se agitó la mezcla de reacción a 0 °C durante 60 min. Se dejó la mezcla de reacción calentar a temperatura ambiente y se extrajo utilizando acetato de etilo (3 x 10 mL). Se secó la fase orgánica combinada (Na2SO4), se filtró, se concentró hasta sequedad bajo presión reducida y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 40 g Grace, 0-30 %, EtOAc en ciclohexano) para dar el compuesto del título (1 . 02 g, 84 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.86 min, m/z = 298 [M-buteno+H]+.
Paso 2: tert-Butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborlan-2-il)-2-(trifluorometil)bencilcarbamato: Se añadió en un tubo de reacción de 40 mL tert-butil 4-bromo-2-(trifluorometil)bencilcarbamato (1.00 g, 2.82 mmol), bis(pinacolato)diboro (1.08 g, 4.24 mmol) y acetato de potasio (0.831 g, 8.47 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (11.3 mL). Se agitó la solución incolora resultante y se desgasificó (burbujeando nitrógeno) durante 10 min. Se añadió PdCh(dppf).DCM (0.115 g, 0.141 mmol) y se aumentó la temperatura a 95 °C bajo nitrógeno. Después de 16 h, se dejó la mezcla de reacción enfriar a TA, se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo utilizando EtOAc (3 * 10 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas (Na2SO4), se filtraron y se concentraron hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 80 g Grace, 0-30 %, EtOAc en ciclohexano) para dar el compuesto del título (884 mg, 78 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método A): Rt = 2.04 min, m/z = 346 [M-buteno+H]+. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 8.05 (s, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 4.91 (t, 1H), 4.51 (d, 2H), 4.44 (s, 9H), 1.34 (s, 12H).
Paso 3: (R)-tert-Butil 4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo- 6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)-2-(trifluorometil)bendlcarbamato: Se añadió en un tubo de microondas de 10 mL Producto Intermedio E (30 mg, 0.055 mmol), tert-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2-(trifluorometil)bencilcarbamato (33.3 mg, 0.083 mmol) y fosfato de potasio, tribásico (28.9 mg, 0.166 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (1.2 mL) y agua (0.3 mL). Se agitó la solución amarilla resultante y se desgasificó (burbujeando nitrógeno) durante 10 min. Se calentó PdCh(dppf).DCM (2.3 mg, 2.77 pmol) y se calentó la mezcla de reacción a 150 °C bajo irradiación de microondas durante 15 min. Se diluyó la mezcla de reacción con agua (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 mL). Se lavó la fase orgánica combinada con salmuera (10 mL), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho KP-NH de 28 g, EtoAc al 10-100 % en ciclohexano; luego, MeOH al 0-20 % en EtOAc) y cromatografía ultrarrápida adicional (cartucho de 12 g Grace, amoníaco 2 M al 0-10 % en metanol/DCM) para dar el compuesto del título (17 mg, 42 %) como un sólido marrón pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.63 min, m/z= 737 [M+H]+.
Paso 4: (R)-3-(4-(Aminometil)-3-(trifluorometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperídin-4-il) metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 25 mL (R)-tert-butil 4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)-2-(trifluorometil)bencilcarbamato (17 mg, 0.023 mmol) en DCM (1 mL) para dar una solución incolora. A esto se le añadió ácido trifluoroacético (1.0 mL, 13.0 mmol) y se agitó la mezcla resultante a TA durante 30 min. Se cargó la mezcla de reacción en un cartucho SCX-2 de 2 g preequilibrado. Después de 10 min, se lavó el cartucho utilizando 4:1 DCM/metanol, antes de eludir con 4:1 DCM/amoníaco 2 M en metanol. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida, se suspendió en éter dietílico y se liofilizó para dar el compuesto del título ( 10 mg, 6 8 %) como un sólido blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.91 min, m/z = 637 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 7.96-8.08 (m, 4H), 7.27-7.45 (m, 5H), 4.91 (s, 1H), 4.03-4.18 (m, 4H), 3.85-4.03 (m, 5H), 3.71-3.83 (m, 1H), 3.11-3.31 (m, 2H), 2.77-3.02 (m, 2H), 1.13-1.68 (m, 4H).
Ejemplo 124: (R)-3-(4-(1-Aminociclopropil)fenil)-6-((4-hidroxiv-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil -2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000085_0001
Paso 1: (R)-tert-Butil (1-(4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil- 7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)ddopropil)carbamato: Se añadieron en un tubo de microondas de 10 mL Producto Intermedio E (30 mg, 0.055 mmol), tert-butil (1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)ciclopropil)carbamato (29.8 mg, 0.083 mmol) (disponible comercialmente) y fosfato de potasio, tribásico (28.9 mg, 0.166 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (1.2 mL) y agua (0.3 mL). Se agitó la solución amarilla resultante y se desgasificó (burbujeando nitrógeno) durante 10 min. Se añadió PdCh(dppf).DCM (2.3 mg, 2.77 pmol) y se calentó la mezcla de reacción a 150 °C bajo irradiación de microondas durante 15 min. Se diluyó la mezcla de reacción con agua (10 mL) y se extrajo utilizando acetato de etilo (3 x 10 mL). Se lavó la fase orgánica combinada con salmuera (10 mL), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho KP-NH 28 g, 10-100 %, EtOAc en ciclohexano; luego, metanol al 0-20 % en EtOAc) y cromatografía ultrarrápida adicional (cartucho de 12 g Grace, 0-10 %, amoníaco 2 M en metanol) /DCM) para dar el compuesto del título (16 mg, 42 %) como un sólido marrón pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.54 min, m/z = 695 [M+H]+.
Paso 2: (R)-3-(4-(1-Aminoddopropil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2 -metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadieron en un matraz de fondo redondo de 25 mL (R)-tert-butil (1-(4-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)ciclopropil)carbamato (16 mg, 0.023 mmol) en DCM (1 mL) para dar una solución incolora. A esto se le añadió ácido trifluoroacético (1 mL, 13.0 mmol) y se agitó la mezcla resultante a TA durante 30 min. Se cargó la mezcla de reacción en un cartucho SCX-2 de 2 g preequilibrado. Después de 10 min, se lavó el cartucho utilizando 4:1 de DCM/metanol antes de eludir el producto con 4:1 de DCM/amoníaco 2 M en metanol. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida, se suspendió en éter dietílico y se liofilizó para dar el compuesto del título ( 8 mg, 58 %) como un sólido blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.87 min, m/z = 595 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 7.96 (d, 1H), 7.61 (d, 2H), 7.49 (d, 2H), 7.38-7.44 (m, 2H), 7.27-7.38 (m, 3H), 4.90 (s, 1H), 4.03-4.19 (m, 4H), 3.82-4.03 (m, 3H), 3.69-3.82 (m, 1H), 3.10-3.32 (m, 2H), 2.76-3.03 (m, 2H), 2.69 (br s, 2H), 1.12-1.70 (m, 4H), 0.95-1.12 (m, 4H).
Ejemplo 125: (S)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoil)piperidin-4-ilo )metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000086_0001
Paso 1: (Z)-Etil 4,4,4-trífluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)but-2-enoato: Se añadió a una suspensión de una dispersión al 60 % de NaH en aceite mineral (205 mg, 5.13 mmol) en THF (7 mL) a 0 °C fosfonoacetato de trietilo (0.685 mL, 3.42 mmol). Se agitó la mezcla durante 30 min para dar una solución amarilla a la que se añadió 2,2,2-trifluoro-1-(5-metiltiofen-2 -il)etanona (664 mg, 3.42 mmol). Se agitó la mezcla se agitó durante 16 horas más a temperatura ambiente antes de que la reacción se extinguiera mediante la adición de agua (30 mL). Se extrajo la mezcla con DCM (3 x 30 ml) utilizando un separador de fases Biotage, se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (columna de 40 g Grace, EtOAc al 0-50 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título. (537 mg, 59%) (E/Z = 1:8) como un aceite amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.82 min, m/z = 265 [M+H]+.
Paso 2: Etil 4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoato: Se redujo una solución de (Z)-etil 4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)but-2-enoato (524 mg, 1.98 mmol) en MeOH (20 mL) utilizando un H-Cube® ( Pd al 10%/C CatCart® TA, 1 mLmin ' 1, 60°C; 60 bar ^(ejecución repetida para obtener la conversión completa)) y se concentró la solución resultante dando el compuesto del título (450 mg, 85 %) como un aceite amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.76 min, m/z = 266 [M-H]-.
Paso 3: Ácido 4,4,4-Trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoico: Se añadió a una solución de etil 4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoato (450 mg, 1.69 mmol) en 1,4-dioxano (3.4 ml) NaOH(ac) 1 M (3.4 ml, 3.4 mmol) y después de agitar a TA durante 2 h, se ajustó el pH a ~pH 2 mediante la adición de HCl(ac) 3 M. Se diluyó la mezcla con agua (10 mL) y se extrajo con DCM (3 x 15 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas dando el compuesto del título (391 mg, 97 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.34 min, m/z = 237 [M-H]-.
Paso 4: (R)-4-Bencil-3-((S)-4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoil)oxazolidin-2-ona: Se añadieron PivCl (0.491 mL, 3.99 mmol) y luego NEt3 (0.578 mL, 4.15 mmol) a una suspensión de ácido 4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoico (380 mg, 1.60 mmol), (R)-4-benciloxazolidin-2-ona (311 mg, 1.76 mmol) y LiCl (135 mg, 3.19 mmol) en THF (4 mL) a -20 °C. Después de 30 min, se dejó la reacción calentar a TA antes de apagarse mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado(30 mL). Se extrajo la mezcla con DCM (3 x 20 mL) utilizando un separador de fases Biotage, se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (80 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-40 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (276 mg, 43 %) como un sólido amarillo pálido y (R)-4-bencil-3-((R)-4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoil)oxazolidin-2-ona (303 mg, 47 %) como un aceite amarillo. (R)-4-bencil-3-((S)-4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoil)oxazolidin-2-ona: LCMS (Método A): Rt = 1 . 86 min, m/z = 246 [M+H]+. (R)-4-bencil-3-((R)-4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoil)oxazolidin-2-ona: Lc Ms (Método A): Rt = 1.82 min, m/z = 398 [M+H]+.
Paso 5: Ácido (S)-4,4,4-Trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoico: Se añadió LiOH (0.033 g, 1.389 mmol) a una solución de (R)-4-bencil-3-((S)-4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoil)oxazolidin-2-ona (276 mg, 0.694 mmol) y peróxido de hidrógeno ( solución acuosa al 30 % en peso) (0.284 ml, 2.78 mmol) en THF (3.5 mL) y agua (3.5 mL) a 0 °C. Después de 10 min se añadió tiosulfato de sodio saturado(ac) (0.5 mL) y la mezcla se dejó calentar a TA. Se diluyó la mezcla con agua (30 mL) y se extrajo con DCM (3 * 20 mL). A continuación, se acidificó la fase acuosa mediante la adición de HCl(ac) 3 M a ~pH 2 y la mezcla se extrajo con DCM (3 * 20 mL). Se pasaron las fases orgánicas combinadas de las extracciones ácidas por un separador de fases Biotage, se concentraron y se secó el residuo in vacuo para dar el compuesto del título (161 mg, 97%) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.37 min, m/z = 237 [M-H]-.
Paso 6: (S)-3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoil)piperidin-4 -il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando tert-butil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato (17 mg, 0.036 mmol), ácido (S)-4,4,4-trifluoro-3-(5-metiltiofen-2-il)butanoico (13 mg, 0.054 mmol), HATU ( 21 mg, 0.054 mmol), DIPeA (0.025 mL, 0.145 mmol) y DCM (0.7 mL) dio (S)-tert-butil 4-(6-((4-h¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-(5-met¡ltiofen-2-¡l)butano¡l)p¡per¡d¡n-4-il)metil)-2-metil- 7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡rim¡d¡n-3-¡l)benc¡lcarbamato como una espuma incolora. A continuación, se agitó este material en DCM (0.7 mL) y TFA (0.7 mL) durante 10 min antes de concentrar la reacción. Se disolvió el residuo en Et3N (1 mL) y DCM (1 mL) y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano y MeOH al 0-30 % en DCM) para dar el compuesto del título (14 mg, 67 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 0.89 min, m/z= 589 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe): 8 8.01 - 7.94 (m, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 2H), 7.57 - 7.41 (m, 2H), 6.96 - 6 . 8 8 (m, 1H), 6.71 - 6.64 (m, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.37 - 4.24 (m, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.06 - 3.90 (m, 3H), 3.80 (s, 2H), 3.78 - 3.67 (m, 1H), 3.30 - 3.17 (m, 1H), 3.16 -2.77 (m, 3H), 2.44 -2.34 (m, 3H), 2.11 (s, 2H), 1.72 - 1.27 (m, 4H).
Ejemplo 126: (R)-1-((4-H¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)¡ndol¡n-2-ona
Figure imgf000087_0001
Se añadió en un vial pequeño tapado ¡ndolin-2-ona (25.7 mg, 0.193 mmol) y Epóxido 2 (50 mg, 0.193 mmol) en DMF (1.0 mL) para dar una solución incolora. Se añadió NaH al 60 % en aceite mineral (8.5 mg, 0.212 mmol) y se agitó la mezcla de reacción a 80 °C. Después de 4 h, se repartió la mezcla de reacción entre EtOAc y agua, se separó la mezcla bifásica resultante y se extrajo la fase acuosa (EtOAc * 3). Se lavó la fase orgánica combinada con agua, se secó (MgSO4), y se eliminaron los solventes in vacuo. Se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (columna de 4g Grace, EtOAc al 0-100 %/ciclohexano; luego MeOH al 0-10 %/EtOAc) para dar el compuesto del título (28.4 mg, 38 %) como un sólido marrón pálido. LCMS (Método B): Rt = 1.11 min, m/z = 393 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, m etanol^): 8 7.33 -7.01 (m, 9H), 4.31 -4.16 (m, 1H), 3.75 -3.50 (m, 5H), 3.28 -3.10 (m, 2H, superposición de solvente), 2.97 - 2.68 (m, 2H), 2.62 - 2.43 (m, 1H), 1.67 - 0.85 (m, 7H).
Ejemplo 127: 3-(4-(Am¡nomet¡l)fen¡l)-6-((1-(3,3-d¡c¡cloprop¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-pirazolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000087_0002
Paso 1: tert-Butil 4-(6-((1-(3,3-diddopropilpropanoil)-4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3- d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato: Se añadieron en un matraz de fondo redondo de 25 mL tert-butil 4-(6-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-dih¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benc¡lcarbamato (30 mg, 0.064 mmol), ácido 3,3-diciclopropilpropanoico (9.9 mg, 0.064 mmol) y Ha TU (29.2 mg, 0.077 mmol) en Dc M anhidro (3.2 mL). Se añadió DIPEA (22.37 pL, 0.128 mmol) a la solución agitada a temperatura ambiente. Después de 2 h, se diluyó la mezcla de reacción con solución saturada de bicarbonato de sodio (acuoso) (10 mL) y se extrajo en DCM (3 * 5 mL). Se secó la fase orgánica combinada ((Na2SO4), se filtró, se eliminaron los solventes in vacuo, y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 28 g KP-NH, 5-100 %, EtOAc/ciclohexano; luego MeOH al 0-20 %/EtOAc) para dar el compuesto del título (34 mg, 88 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método A): Rt = 1.34 min, m/z = 605 [M+H]+.
Paso 2 :3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((1-(3,3-diddopropilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d] pirimidin-7(6H)-ona: Se añadieron en un matraz de fondo redondo de 25 mL tert-butil 4-(6-((1-(3,3-d¡c¡cloprop¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)metil)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-il)bencilcarbamato (17 mg, 0.028 mmol) en DCM (3 mL). Se agitó la solución incolora resultante y se enfrió a 0 °C, seguido de la adición de ácido trifluoroacético (1 mL, 13.0 mmol). Después de 10 min, se permitió que la temperatura aumentara a TA. Después de otros 30 min, se cargó la mezcla de reacción en un cartucho de 5 g SCX-2 preequilibrado. Después de 10 min, se lavó el cartucho con DCM/metanol 4:1 antes de la elución utilizando DCM 4:1/amoníaco 2 M en metanol. Se concentró la solución resultante hasta sequedad bajo presión reducida y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 11 g KP-NH, MeOH al 0-20 %/Dc M) y se liofilizó para dar el compuesto del título (9 mg, 63 %) como un sólido blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.72 min, m/z = 505 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 8 8.00 (s, 1H), 7.65 (dt, 2H), 7.54 (dt, 2H), 4.91 (s, 1H), 3.94-4.12 (m, 6 H), 3.81 (s, 2H), 3.74 (dt, 1H), 2.94 (ddd, 1H), 2.49-2.54 (m, 1H), 2.38-2.43 (m, 2H), 2.24 (br s, 2H), 1.54 (ddd, 1H), 1.35-1.49 (m, 3H), 0.57-0.75 (m, 3H), 0.32-0.42 (m, 2H), 0.23-0.32 (m, 2H), 0.13-0.22 (m, 2H), 0.00-0.10 (m, 2H).
Ejemplo 128: (R)-1-((4-H¡drox¡-1-(4,4,4-tnfluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona
Figure imgf000088_0001
Paso 1: tert-Butil 4-hidroxi-4-((6-oxo-9-fenil-6,9-dihidro-1H-purín-1-il)metil)piperídin-1-carboxilato: Proced¡m¡ento 1 General ut¡l¡zando epóx¡do 1 (121 mg, 0.565 mmol), 9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona (60 mg, 0.283 mmol), CS2CO3 (101 mg, 0.311 mmol) y DMF (0.9 mL) d¡o el compuesto del título (107 mg, 89 %) como una espuma be¡ge. LCMS (Método A): Rt = 1.16 m¡n, m/z = 426 [M+H]+.
Paso 2: 1-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Proced¡m¡ento 2 General ut¡l¡zando tert-but¡l 4-h¡drox¡-4-((6-oxo-9-fen¡l-6,9-d¡h¡dro-1H-pur¡n-1-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (107 mg, 0.251 mmol), DCM (1 mL) y TFA (1 mL) d¡o el compuesto del título (80 mg, 98 %) como una espuma ¡ncolora. LCMS (Método A): Rt = 0.40 m¡n, m/z = 326 [M+H]+.
Paso 3: (R)-1-((4-Hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 1-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona (35 mg, 0.108 mmol), ác¡do (R)-4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡co (35 mg, 0.161 mmol), HATU (61 mg, 0.161 mmol), DIPEA (75 pL, 0.430 mmol) y DCM (2 mL) d¡o el compuesto del título (38 mg, 67 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. LCMS (Método A): Rt = 1.27 m¡n, m/z = 526 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 8 8.51 (s, 1H), 8.26 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.83 -7.75 (m, 2H), 7.66 -7.55 (m, 2H), 7.54 -7.46 (m, 1H), 7.45 -7.26 (m, 5H), 4.92 (s, 1H), 4.19 -3.88 (m, 4H), 3.85 - 3.71 (m, 1H), 3.30 -3.11 (m, 2H), 3.04 -2.75 (m, 2H), 1.68 - 1.27 (m, 4H).
Ejemplo 129: (R)-1-((1-(4,4-D¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona
Figure imgf000088_0002
Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 1-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona (32 mg, 0.098 mmol), ác¡do (R)-4,4-d¡fluoro-3-fen¡lbutano¡co (30 mg, 0.148 mmol), HATU (56 mg, 0.148 mmol), DIPEA (69 pl, 0.393 mmol) y DCM (2 mL) d¡o el compuesto del título (39 mg, 78 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. LCMS (Método A): Rt = 1.17 m¡n, m/z = 508 [M+H]+. 1H RMN (300 MHz, DMSO-de): 8 8.51 (s, 1H), 8.26 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.83 - 7.72 (m, 2H), 7.68 - 7.56 (m, 2H), 7.56 - 7.45 (m, 1H), 7.38 - 7.18 (m, 5H), 6.24 (td, J = 56.5, 3.1 Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.15 -3.90 (m, 3H), 3.80 -3.51 (m, 2H), 3.30 -3.14 (m, 1H), 3.01 -2.73 (m, 3H), 1.63 - 1.20 (m, 4H).
Ejemplo 130: (R)-6-((4-H¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-(1-met¡l-1,2,3,6-tetrah¡drop¡nd¡n-4-¡l)-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000088_0003
Se añad¡ó en un tubo de m¡croondas de 10 mL Producto Intermed¡o E (70 mg, 0.129 mmol), 1-met¡l-4-(4,4,5,5-tetramet¡l-1,3,2-d¡oxaborolan-2-¡l)-1,2,3,6-tetrah¡drop¡r¡d¡na (43.2 mg, 0.194 mmol) y fosfato de potas¡o, tr¡bás¡co (67.4 mg, 0.387 mmol) en una mezcla de 1,4-d¡oxano (2.8 mL) y agua (0.7 mL). Se ag¡tó la soluc¡ón amar¡lla resultante y se desgas¡f¡có (burbujeando n¡trógeno) durante 10 m¡n. Se añad¡ó PdCh(dppf).DCM (5.3 mg, 6.45 pmol) y se calentó la mezcla de reacción a 150 °C bajo irradiación de microondas durante 15 min. Se diluyó la mezcla de reacción con agua (10 mL) y se extrajo utilizando EtOAc (3 x 10 mL). Se lavó la fase orgánica combinada con salmuera (10 mL), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró hasta sequedad bajo presión reducida. Se purificó el aceite amarillo resultante mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 28 g KP-NH, EtOAc al 10-100 %/ciclohexano; luego MeOH al 0-20 %/EtOAc) y más cromatografía ultrarrápida (cartucho de 24 g Grace, amoníaco 2 M al 0-30 % en metanol /DCM) para dar un sólido incoloro que se suspendió en éter dietílico (3 mL) y se liofilizó para dar el compuesto del título (18 mg, 25 %) como un sólido blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.78 min, m/z = 559 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 7.93 (d, 1H), 7.38-7.43 (m, 2H), 7.27-7.38 (m, 3H), 6.12 (t, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.03-4.17 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.82-4.00 (m, 3H), 3.69-3.81 (m, 1H), 3.08-3.30 (m, 4H), 2.75-3.04 (m, 2H), 2.59-2.72 (m, 4H), 2.30-2.40 (m, 3H), 1.11-1.65 (m, 4H).
Ejemplo 131: 6-((1-Acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4.3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000089_0001
Paso 1: Se agitó 3-Bromo-6-((4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: ter-Butil 4-((3-bromo-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (0.8 g, 1.81 mmol) en diclorometano ( 8 mL) y ácido trifluoroacético ( 8 mL) durante 20 min antes de concentrar la reacción in vacuo. Se purificó el residuo utilizando 4 cartuchos de 10 g SCX-2 en paralelo ( metanol al 10 % en diclorometano; luego amoníaco 7 M al 10 % en metanol en diclorometano) para proporcionar el compuesto del título (0.333 g, 54 %) como un sólido incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla): 8 7.96 (s, 1H), 4.14 (s, 3H), 4.09 (s, 2H), 2.95-2.83 (m, 4H), 1.95-1.46 (m, 4H).
Paso 2: 6-((1-Acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-bromo-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió en un vial pequeño tapado 3-bromo-6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (50 mg, 0.146 mmol), anhídrido acético (0.028 mL, 0.292 mmol) y trietilamina (0 . 061 mL, 0.438 mmol) en diclorometano (1 mL). Después de 2 h, se repartió la mezcla entre acetato de etilo y solución saturada de bicarbonato de sodio (ac). Se recogió el precipitado sólido por filtración. Se separaron las fases, se secó la fase orgánica (separador de fases) y se eliminaron los solventes in vacuo. Se combinó el sólido con el precipitado para dar el compuesto del título (41.0 mg, 73 %) que se usó sin más purificación. LCMS (Método A): Rt = 0.27 min, m/z = 384 [M+H]+.
Paso 3: 6-((1-Acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se desgasificó una suspensión en agitación de 6-((1-acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-bromo-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (41 mg, 0.107 mmol), ácido fenilborónico (39 mg, 0.320 mmol) y fosfato de potasio, tribásico (136 mg, 0.640 mmol) en 1,4-dioxano (1.5 mL) y agua (0.3 mL) con nitrógeno durante 5 min. Se añadió luego PdCh(dppf).DCM (2.2 mg, 2.67 pmol) y se desgasificó la mezcla de reacción con nitrógeno durante 5 min antes de calentar a 90 °C y agitar durante 16 h. Después de enfriar, se eliminaron los solventes in vacuo y se repartió la mezcla restante entre solución saturada de cloruro de amonio (ac) (5 mL) y diclorometano (10 mL). Se separaron las capas y se extrajo la fase acuosa con diclorometano (3 x 5 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas (separador de fases), se filtraron y se concentraron in vacuo. Se purificó el residuo resultante mediante cromatografía ultrarrápida (gradiente EtOAc al 0-100 % en ciclohexano; luego metanol al 0-50 %en EtOAc). Se suspendió el residuo en metanol (1 mL) y agua (10 mL) y se liofilizó para dar el compuesto del título (32.7 mg, 80%). lCm S (Método A): Rt = 0.79 min, m/z= 382 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 8.01 (s, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.59 (t, 2H), 7.48-7.55 (m, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.94­ 4.07 (m, 3H), 3.58 (d, 1H), 3.28 (t, 1H), 2.92 (td, 1H), 1.98 (s, 3H), 1.57 (td, 1H), 1.34-1.50 (m, 3H).
Ejemplo 132: 3-((1-Acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000089_0002
Paso 1: 6-Cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, HCl: Se añadió en un matraz de fondo redondo de 25 mL tert-butil 4-((4-cloro-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (257 mg, 0.748 mmol) y HCl 4 M en 1,4-dioxano (2 mL, 8.00 mmol) en DCM (2 mL). Se agitó la solución de color amarillo pálido resultante a TA. Después de 2 h, se eliminaron los solventes in vacuo y se suspendió el residuo utilizando Et2O (x2). Se eliminaron los solventes residuales in vacuo para dar el compuesto del título (en bruto, 201 mg) como un sólido blanco que se usó en el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: 3-((1-Acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-doropirimidin-4(3H)-ona: Se cargó un vial de reacción con 6 -cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, HCl (crudo, 100 mg, supuesto 0.357 mmol), Ac2O (0.067 mL, 0.714 mmol) y EtaN (0.149 ml, 1.07 mmol) en DCM (1 mL). Se agitó la mezcla de reacción a TA. Después de 2 h, se eliminaron los solventes in vacuo para dar el compuesto del título (en bruto, 100 mg) que se usó en el siguiente paso sin purificación.
Paso 3: 3-((1-Acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona: Se cargó un vial de 10 mL con 3-((1-acetil-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-cloropirimidin-4(3H)-ona (crudo, 100 mg, supuesto 0.350 mmol), 2-(pirrolidin-1-il)etanamina (0.222 mL, 1.75 mmol) y 1,4-dioxano (2.0 mL). Se selló el recipiente y se calentó la solución de color amarillo pálido resultante a 150 °C utilizando radiación de microondas durante 30 min. Se eliminaron los solventes fueron in vacuo y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (columna de 11 g KP-NH, EtOAc al 0-100 %/ciclohexano; luego MeOH al 0-20 %/EtOAc) y se liofilizó para dar el compuesto del título (70.4 mg, 55 %) como un sólido amarillo pálido que parecía ser higroscópico (se convirtió en un aceite al reposar). LCMS (Método A): Rt = 0.78 min, m/z = 559 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 8.05 (s, 1H), 6.90 (br s, 1H), 5.11 (br s, 2H), 4.05 (dt, 1H), 3.85 (q, 2H), 3.62 (dt, 1H), 3.33 (ddd, 1H), 2.99 (ddd, 1H), 2.67 (t, 1H), 2.61 (br d aparente, 1H), 2.54 - 2.41 (m, 6 H, solvente superpuesto), 2.03 (s, 3H), 1.79-1.28 (m, 8 H).
Ejemplo 133: 3-((1-(3,3-Diciclopropilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
Figure imgf000090_0001
Paso 1: 6-Cloro-3-((1-(3,3-dicidopropilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona: Se cargó en un vial pequeño tapado 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona, HCl (50 mg, 0.178 mmol), ácido 3,3-diciclopropilpropanoico (41.3 mg, 0.268 mmol) y DIPEA (0.125 mL, 0.714 mmol) en DCM (1 mL). Se agitó la mezcla de reacción y se añadió HATU (102 mg, 0.268 mmol). Después de 1 h, se agregó agua, se separó la mezcla bifásica resultante, se secó la fase orgánica (separador de fases), se eliminaron los solventes in vacuo, y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (columna KP-NH de 11 g, EtOAc al 0-100 %/ciclohexano); luego MeOH al 0-10 %/EtOAc) para dar el compuesto del título (46 mg, 68 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.12 min, m/z= 380 [M+H]+.
Paso 2: 3-((1-(3,3-Dicidopropilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona : Se cargó en un tubo reactor de microondas 6-cloro-3-((1-(3,3-diciclopropilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona (45 mg, 0.118 mmol) y 2-(pirrolidin-1-il)etanamina (0.075 mL, 0.592 mmol) en 1,4-dioxano (2 mL). Se calentó la solución de color amarillo pálido resultante a 150 °C utilizando radiación de microondas durante 30 min. Se eliminaron solventes in vacuo y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (columna de 4 g Grace, EtOAc al 0-100 %/ciclohexano; luego MeOH al 0-30 %/EtOAc) y cromatografía ultrarrápida adicional (columna de 11 g KP-NH, EtOAc al 0-100 %/ciclohexano, luego MeOH al 0-20 %/EtOAc) y se liofilizó para dar el compuesto del título (25.6 mg, 47 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método A): Rt = 0.66 min, m/z= 458 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 7.99 (s, 1H), 6.82 (br s, 1H), 5.10-4.96 (m, 2H), 4.03 (br dt, 1H), 3.86 -3.67 (m, 3H), 3.30 - 3.06 (m, 3H, solvente superpuesto), 2.95 (ddd, 1H), 2.57-2.36 (m, 8 H), 1.72 - 1.62 (m, 4H), 1.51-1.20 (m, 4H), 0.74-0.57 (m, 3H), 0.41-0.01 (m, 8 H).
Ejemplo 134: (R)-3-(Ciclohex-1-en-1-il)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2- metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000090_0002
Se añadió una suspensión del Producto Intermedio E (50 mg, 0.092 mmol), ácido ciclohex-1-en-1-ilborónico (11.6 mg, 0.092 mmol) y fosfato de potasio, tribásico (78 mg, 0.369 mmol) en 1,4-dioxano (1.5 mL) y agua (0.5 mL) en un tubo de reacción. Se desgasificó previamente la mezcla de reacción (burbujeando nitrógeno) durante 20 min. Se añadió Pd(PPh3)4 (10.7 mg, 9.22 |jmol) y se selló el recipiente. Se calentó la mezcla de reacción a 130 °C bajo radiación de microondas durante 30 min. Se enfrió el recipiente a TA y se extinguió la reacción mediante la adición de solución NH4Cl(ac)saturado. Se extrajo la mezcla bifásica resultante utilizando DCM (x 3) (Separador de Fases). Se eliminaron los solventes in vacuo y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida utilizando una columna KP-NH (0-100 %, EtOAc en ciclohexano) para dar el compuesto del título (44,5 mg, 88 %) como un sólido blanco. LCMS (Método A): Rt = 1.45 min, m/z = 544 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 8 7.67 (d, 1H), 7.42-27 (m, 5H), 6.09-6.02 (m, 1H), 4.30 (t, 1H), 4.20-4.04 (m, 4H), 4.03-3.83 (m, 1H), 3.72-3.57 (m, 1H), 3.44-3.28 (m, 2H), 3.03-2.82 (m, 3H), 2.50-2.39 (m, 2H), 2.36-2.25 (m, 2H), 1.90-1.70 (m, 4H), 1.65-1.43 (m, 2H), 1.33-1.17 (m, 3H), 1.07-0.81 (m, 1H).
Ejemplo 135: (R)-3-(3-(Dimetilamino)prop)-1-in-1-il)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-ilo )metil)-2-metil-2H-pirazo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000091_0001
Paso 1: (R)-tert-Butil(3-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trífluoro-3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo -6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)prop-2-in-1-il)carbamato: Se añadieron yoduro de cobre(l) (0.4 mg, 2.31 jm ol) y cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(ll) (3.2 mg, 4.61 jm ol) a una solución predesgasificada del Producto Intermedio E (50.0 mg, 0.092 mmol), tert-butilprop-2-in-1-ilcarbamato (28.6 mg, 0.184 mmol) y yoduro de tetrabutilamonio (68.1 mg, 0.184 mmol) en trietilamina (0.2 mL, 1.44 mmol)/DMF (1.0 mL) en un vial para microondas. Se selló el recipiente de reacción y se calentó la mezcla de reacción utilizando radiación de microondas a 100 °C (80 W de techo) durante 15 min. Se repartió la mezcla de reacción entre éter dietílico y agua/salmuera 1:1, se separó, se extrajo (éter dietílico x 3), se secó (Separador de Fase), se eliminaron los solventes in vacuo, y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (0-100 %, EtOAc en ciclohexano; luego MeOH al 0-10 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (41.4 mg, 73 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.41 min, m/z= 617 [M+H]+.
Paso 2: (R)-3-(3-Aminoprop-1-in-1-il)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil )-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió ácido trifluoroacético (1.0 mL, 13.0 mmol) a una solución agitada de (R)-tert-butil (3-(6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)prop-2-in-1-il)carbamato (41.4 mg, 0.067 mmol) en DCM (2.0 mL) a TA bajo nitrógeno. Después de 30 min, se cargó la mezcla de reacción directamente en un cartucho de 5 g SCX-2 preequilibrado, se lavó con metanol y se eludió el producto con amoníaco 2 M en MeOH. Se eliminaron los solventes in vacuo y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida (0-100 %, EtOAc en ciclohexano; luego MeOH al 0-10 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (13.0 mg, 38 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método A): Rt = 0.86 min, m/z = 517 [M+H]+.
Paso 3: (R)-3-(3-(Dimetilamino)prop-1-in-1-il)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4- il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (26.7 mg, 0,126 mmol) a una solución agitada de (R)-3-(3-aminoprop-1-in-1-il)-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)- 2 -metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (13.0 mg, 0.025 mmol) y formaldehído (37 % en agua) ( 6 jL , 0.076 mmol) en metanol (1.0 mL) a Ta bajo nitrógeno. Después de 1 h, se aumentó la temperatura a 50 °C. Después de 18 h, se enfrió la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se agregaron más formaldehído (al 37 % en agua) (5.6 jL , 0.076 mmol) y una cantidad catalítica de ácido acético (3 gotas). Después de 30 min, se añadió cianoborohidruro de sodio (7.9 mg, 0.126 mmol). Después de 1 h más, se cargó la mezcla de reacción directamente en un cartucho de 2 g SCX-2 preequilibrado, se lavó con metanol y se eludió el producto utilizando amoníaco 2 M en MeOH. Se eliminaron los solventes in vacuo y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida utilizando una columna KP-NH (0-100 %, EtOAc en ciclohexano; luego MeOH al 0-10 % en EtOAc) y cromatografía ultrarrápida adicional utilizando una columna de 12 g Grace (0-100 %, EtOAc en ciclohexano, luego MeOH al 0-25 % en EtOAc) y se liofilizó para dar el compuesto del título (5.8 mg, 40 %) como un sólido blanquecino. LCMS (Método A): Rt = 0.88 min, m/z = 545 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 8.01 (d, 1H), 7.43-7.22 (m, 5H), 4.89 (s, 1H), 4.17-4.03 (m, 4H), 4.01-3.82 (m, 3H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.29-3.10 (m, 2H), 3.00-2.71 (m, 2H), 2.28 (s, 6 H), 1.63-0.85 (m, 4H).
Ejemplo 136: (R)-3-Ciclohexil-6-((4-hidroxi-1-(4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000092_0001
Se pasó una solución de (R)-3-(c¡clohex-1-en-1-¡l)-6-((4-h¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolor[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona (39.4 mg, 0.072 mmol) (Ejemplo 134) en metanol (10 mL) a través de un aparato H-Cube® equ¡pado con un cartucho de Pd-C al 10% bajo los s¡gu¡entes ajustes: Flujo de 1.0 mL/m¡n, TA, h¡drógeno (modo H2 completo). Se el¡m¡naron los solventes in vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo restante por cromatografía ultrarráp¡da ut¡l¡zando una columna de 12 g Grace (0-100 %, EtOAc en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (18.2 mg, 46 %) como un sól¡do blanco. LCMS (Método A): Rt = 1.52 m¡n, m/z= 546 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 7.87 (d, 1H), 7.45-7.25 (m, 5H), 4.87 (s, 1H), 4.16-4.04 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.99-3.80 (m, 3H), 3.79­ 3.70 (m, 1H), 3.28-3.10 (m, 2H), 3.05-2.77 (m, 3H), 2.02-1.68 (m, 6 H), 1.62-1.12 (m, 8 H).
Ejemplo 137: (R)-6-((4-H¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-3-(4-(morfol¡nomet¡l)fen¡l)-2H-p/razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000092_0002
Se desgas¡f¡có prev¡amente una suspens¡ón del Producto Intermed¡o E (50 mg, 0.092 mmol), ác¡do (4-(morfol¡nomet¡l)fen¡l)borón¡co (40.8 mg, 0.184 mmol) y fosfato tr¡potás¡co (78 mg, 0.369 mmol) en 1,4-d¡oxano (1.5 mL) y agua (0.5 mL) en un tubo de reacc¡ón (burbujeo de n¡trógeno) durante 20 m¡n. Se añad¡ó Pd(F3PAG)4 (10.7 mg, 9.22 |jmol) y se selló el rec¡p¡ente de reacc¡ón. Se calentó la mezcla de reacc¡ón a 130 °C ut¡l¡zando rad¡ac¡ón de m¡croondas durante 30 m¡n. Se enfr¡ó el rec¡p¡ente a temperatura amb¡ente y se ¡nact¡vó med¡ante la ad¡c¡ón de soluc¡ón saturada de cloruro de amon¡o (ac) y se extrajo la mezcla ut¡l¡zando DCM (x 3) y se secó (separador de fases). Se el¡m¡naron los solventes in vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo restante med¡ante cromatografía ultrarráp¡da ut¡l¡zando un cartucho KP-NH (0-100 %, EtOAc en c¡clohexano; 0-10 %, MeOH en EtOAc) para dar el compuesto del título (48.0 mg, 82 %) como un sól¡do esponjoso blanco. LCMS (Método A): Rt = 0.90 m¡n, m/z = 639 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 7.97 (d, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.51 (d, 2H), 7.44-7.27 (m, 5H), 4.88 (s, 1H), 4.18-4.03 (m, 4H), 4.02-3.84 (m, 3H), 3.82­ 3.70 (m, 1H), 3.60 (t, 4H), 3.55 (s, 2H), 3.30-3.10 (m, 2H), 3.02-2.78 (m, 2H), 2.40 (t, 4H), 1.66-1.14 (m, 4H).
Ejemplo 138: 3-(4-(Am¡nomet¡l)fen¡l)-6-((1-(3-c¡clobut¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona
Figure imgf000092_0003
Paso 1: tert-Butil 4-(6-((1-(3-ddobut/lpropano/l)-4-h/drox/p/perid/n-4-/l)met/l)-2-met/l-7-oxo-6,7-d/h/dro-2H-p/razolo[ 4,3-d]pirim/din-3-il)benddarbamato: Se añad¡ó DIPEA (0.023 mL, 0.132 mmol) a una soluc¡ón ag¡tada de tert-but¡l 4-(6-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benc¡lcarbamato (31 mg, 0.066 mmol), ác¡do 3-c¡clobut¡lpropano¡co (9.33 mg, 0.073 mmol) y HATU (30.2 mg, 0.079 mmol) en DCM anh¡dro (5.0 mL) a TA bajo n¡trógeno. Después de 2 h, LCMS mostró una reacc¡ón completa. Se d¡luyó la mezcla de reacc¡ón con soluc¡ón saturada de b¡carbonato de sod¡o (ac) y se extrajo en DCM (x 3). Se secó la fase orgán¡ca comb¡nada (separador de fases), se el¡m¡naron los solventes in vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo restante med¡ante cromatografía ultrarrápida utilizando una columna KP-NH (0-100 %, EtOAc en ciclohexano; luego MeOH al 0-10 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (34.5 mg, 90 %) como un sólido blanco. LCMS (Método A): Rt = 1.39 min, m/z = 579 [M+H]+.
Paso 2: 3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((1-(3-ddobutilpropanoil)-4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin- 7(6H)-ona: Se añadió ácido trifluoroacético (1.0 mL, 13.0 mmol) a una solución agitada de tert-butil 4-(6-((1-(3-ciclobutilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato (34.5 mg, 0.060 mmol) en DCM (2.0 mL) a TA bajo nitrógeno. Después de 30 min, LCMS mostró una reacción completa. Se cargó la mezcla de reacción directamente en un cartucho de 5 g SCX-2 preequilibrado, se lavó con metanol y se eludió el producto con amoníaco 2 M en MeOH. Se eliminaron los solventes in vacuo y se purificó el residuo restante mediante cromatografía ultrarrápida utilizando una columna KP-NH (0-100 %, EtOAc en ciclohexano; luego MeOH al 0-10 % en EtOAc). Se concentraron las fracciones puras y se liofilizaron para dar el compuesto del título (20.5 mg, 71 %) como un sólido blanco esponjoso. LCMS (Método A): Rt = 0.75 min, m/z= 479 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 88.00 (s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.14-3.92 (m, 6H), 3.81 (s, 2H), 3.61 (br d, 1H), 3.31-3.20 (m, 1H), 2.97-2.86 (m, 1H), 2.30-2.06 (m, 4H), 2.04-1.93 (m, 2H), 1.86-1.70 (m, 2H), 1.62-1.18 (m, 9H).
Ejemplo 139: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-8-fenilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H-ona
Figure imgf000093_0001
Paso 1: tert-Butil 4-hidroxi-4-((8-yodo-4-oxopirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-3(4H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato: Se agitó una mezcla de 8-yodopirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (300 mg, 1.14 mmol) (disponible comercialmente), Epóxido 1 (244 mg, 1.14 mmol) y DIp Ea en DMF anhidro (3 mL) a 80 °C durante 23 h y se dejó enfriar. Se diluyó la mezcla con acetato de isopropilo y se lavó la fase orgánica separada utilizando agua/salmuera 1:1, seguido de salmuera. Se secó la fase orgánica combinada (Na2SO4), se filtró y se concentró in vacuo. Se trituró el residuo con DCM y se recogió el sólido por filtración y se secó a alto vacío para dar el compuesto del título como un sólido blanco (315 mg). Se concentró el filtrado y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (acetato de isopropilo al 10-100 % en heptano) para obtener una cantidad adicional (110 mg) del compuesto del título (425 mg, 78 %). 1H RMN (400 MHz, DMS0-d6): 88.17 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 4.90 (s, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.75-3.65 (m, 2H), 3.15-2.9 (br s, 2H), 1.56-1.39 (m, 4H), 1.39 (s, 9H). MS (ESI): m/z = 420 [M-buteno+H]+.
Paso 2: tert-Butil 4-hidroxi-4-((4-oxo-8-fenilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-3(4H)-il)metil)piperidin-1- carboxilato: Se suspendieron tert-Butil 4-hidroxi-4-((8-yodo-4-oxopirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-3(4H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato (166 mg 0.35 mmol), ácido fenilborónico (63.7 mg, 0.52 mmol), acetato de potasio (61.5 mg, 0.63 mmol), carbonato de sodio (62.7 mg, 0.59 mmol) y PdCh(dppf).DCM (23.2 mg, 0.028 mmol) juntos en acetonitrilo desgasificado (3.5 mL) y agua (0.7 mL). Se purgó la mezcla al vacío y se rellenó con nitrógeno tres veces y se calentó con irradiación de microondas a 100 °C durante 30 min. Se filtró la mezcla enfriada a través de una almohadilla de Celite®, que se enjuagó con acetato de isopropilo y se diluyó el filtrado con acetato de isopropilo. Se lavó la fase orgánica separada con agua y salmuera, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (acetato de isopropilo al 50-100 % en heptano) para proporcionar el compuesto del título (78.5 mg, 53 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla): 88.27 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.85 (dd, J = 7.5, 1.9 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.34­ 7.28 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.25-3.12 (m, 2H), 2.44 (s, 1H), 1.79-1.52 (m, 4H), 1.45 (s, 9H). MS (ESI): m/z = 370 [M-buteno+H]+.
Paso 3:3-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-fenilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona: Se añadió a una solución de tertbutil 4-hidroxi-4-((4-oxo-8-fenilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-3(4H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato (78.5 mg, 0.18 mmol) en DCM (0.6 mL) y MeOH (0.6 mL) HCl 4 M 1,4-dioxano (0.46 mL) y se calentó la mezcla a 40 °C durante 5 h. Se eliminaron los solventes in vacuo y se eliminó el residuo de sales pasándolo a través de un cartucho de intercambio iónico (resina catiónica fuerte polimérica Strata X-C de 33 pm) para proporcionar el compuesto del título (56.4 mg, 94 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4): 88.45 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.01-7.95 (m, 2H), 7.45-7.38 (m, 2H), 7.32-7.25 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.60 (s, 1H), 3.01-2.84 (m, 4H), 1.81-1.68 (m, 2H), 1.64-1.52 (m, 2H). MS (ESI): m/z= 326 [M+H]+.
Paso 4: (R)-3-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-8-fenilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H )-ona: Se trató una solución de 3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-fenilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (55.0 mg, 0.17 mmol) y ácido (R)-3-fenilbutanoico (41.6 mg, 0.25 mmol) en DCM (3.4 mL) a TA con DIPEA (0.12 mL, 0.68 mmol) y HATU (105 mg, 0.27 mmol). Se agitó la mezcla a 40 °C durante 0.5 h, seguido de TA durante 18 h, se inactivó con solución saturada de bicarbonato de sodio (acuoso) y se extrajo utilizando DCM (x 3). Se secaron las fases orgánicas combinadas (Na2SO4), se filtraron y se concentraron in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida ( metanol al 0-50 % en acetato de isopropilo), seguido de HPLC preparativa (Método B) para proporcionar el compuesto del título (32.0 mg, 36 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 m Hz , DMSO-de): 58.63 (s, 1h ), 8.16 (d, 1H), 8.03 (dd, 1H), 8.02 (dd, 1H), 7.47-7.41 (m, 2H), 7.35-7.20 (m, 5H), 7.19-7.12 (m, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.14-4.03 (m, 1H), 3.99 (q, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.73-3.63 (m, 1H), 3.23-3.13 (m, 2H), 2.85 (t, 1H), 2.66-2.52 (m, 3H), 1.51-1.37 (m, 3H), 1.21 (d, 3H). MS (ESI): m/z = 472 [M+H]+.
Los siguientes Ejemplos se prepararon de acuerdo con los Procedimientos Generales (Gen. Proc.) que se muestran en la tabla. Se prepararon los Ejemplos 180 y 181 por separación quiral de la mezcla racémica correspondiente (que se preparó utilizando el Procedimiento 9 General) por SFC para producir el Ejemplo 180 (primer eludido) y el Ejemplo 181 (segundo eludido) como estereoisómeros únicos desconocidos.
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Ejemplo 182: (R)-3-(4-(1-Ammoddobut¡l)feml)-6-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2H-p¡razolo[4,3-d]pmm¡dm-7(6H)-ona
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Paso 1: Bencil 4-((3-(4-(1-((tert-butoxicarbonil)amino)ddobutil)fenil)-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H) -il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Se desgasificó una suspensión agitada de bencil 4-((3-bromo-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (200 mg, 0.420 mmol), ácido (4-(1-((tertbutoxicarbonil)amino)cidobutil)fenil)borónico (367 mg, 1.26 mmol) y fosfato de potasio, tribásico (535 mg, 2.52 mmol) en 1,4-dioxano (6 mL) y agua (l,2 ml) con nitrógeno durante 5 min. Se añadió PdCh(dppf).DCM (8.6 mg, 10.50 |jmol) y se desgasificó la mezcla de reacción con nitrógeno durante 5 min antes de calentar a 90 °C y agitar durante 2 h. Después de enfriar, se eliminaron los solventes in vacuo y se repartió la mezcla restante entre solución saturada de cloruro de amonio (ac) (20 mL) y diclorometano (40 mL). Se separaron las capas y se extrajo la fase acuosa con diclorometano (3 x 20 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas (separador de fases), se filtraron y se concentraron in vacuo. Se purificó el residuo resultante mediante cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para proporcionar el compuesto del título (110 mg, 41 %). LCMS (Método A): Rt = 1.66 min, m/z = 643 [M+H]+.
Paso 2 tert-Butil (1-(4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d ]pirimidin-3-il)fenil)ddobutil)carbamato: Se calentó a reflujo una solución agitada de bencil 4-((3-(4-(1-((tertbutoxicarbonil)amino)ciclobutil)fenil)-2-metil-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (110 mg, 0.172 mmol) en etanol (2 mL). Se añadió paladio sobre carbono al 10 % p/p (18.3 mg, 0.017 mmol) seguido de la adición en porciones de formiato de amonio (325 mg, 5.15 mmol) y se agitó la suspensión durante 1 h. Se filtró la suspensión a través de Celite® lavado con metanol caliente (4 * 20 mL). Se eliminó el solvente orgánico in vacuo. Se purificó el residuo resultante mediante cromatografía ultrarrápida utilizando una columna KP-NH (se cargó el compuesto utilizando aprox. 3 mL de DCM/trietilamina 1:1, DCM al 0-100 % en ciclohexano; luego metanol al 0-30 % en DCM) para proporcionar el compuesto del título (85.5 mg, 98 %). LCMS (Método A): Rt = 0.96 min, m/z = 509 [M+H]+.
Paso 3: (R)-tert-Butil (1-(4-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7- dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)fenil)ddobutil)carbamato: Se añadió a una solución agitada de tert-butil (1-(4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d ]pirimidin-3-il)fenil)ciclobutil)carbamato (85.5 mg, 0.168 mmol) y diisopropiletilamina (0.060 mL, 0.336 mmol) en d Cm anhidro (4 mL), ácido (R)-3-fenilbutanoico (27.6 mg, 0.168 mmol) luego HATU (77 mg, 0,202 mmol) y se agitó la solución durante 3 h a TA. Se lavó la mezcla con solución saturada de bicarbonato de sodio (ac) (10 mL). Se separó la fase acuosa y se extrajo con diclorometano (3 x 7 mL). Se secó la fase orgánica combinada (separador de fases) y se concentró in vacuo. Se purificó el residuo resultante mediante cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-100 % en ciclohexano; luego, metanol al 0-5 % en EtOAc) para proporcionar el compuesto del título (45.7 mg, 42 %). LCMS (Método A): Rt = 1.60 min, m/z = 655 [M+H]+.
Paso 4: (R)-3-(4-(1-Aminoddobutil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se añadió a una solución en agitación de (R)-tert-butil (1-(4-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d ]pirimidin-3-il)fenil)ciclobutil)carbamato (45.7 mg, 0.070 mmol) en DCM anhidro (2 mL), ácido trifluoroacético (0.5 mL, 0.070 mmol) y se agitó la solución durante 10 min. Se pretrató un cartucho SCX-2 (5 g) con metanol al 20% v/v en diclorometano (50 mL). Se cargó directamente la mezcla de reacción utilizando DCM (3 * 1 mL) para cargar el material residual del matraz de reacción. Después de 5 min, se lavó la columna con metanol al 20 % v/v en diclorometano (50 mL), seguido de 20 % v/v (amoníaco 7 M en metanol) en diclorometano (50 mL. Se redujo la fracción que contenía amoníaco in vacuo. Se disolvió el residuo en metanol (1 mL) y agua (8 mL) y se liofilizó para producir el compuesto del título (36-8 mg, 95 %). LCMS (Método A): Rt = 0.89 min, m/z = 555 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 87.98 (d, 1H), 7.62-7.71 (m, 4H), 7.21-7.31 (m, 4H), 7.12-7.20 (m, 1H), 4.87 (d, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.85-4.08 (m, 3H), 3.59-3.71 (m, 1H), 3.12-3.28 (m, 2H), 2.81-2.94 (m, 1H), 2.52-2.80 (m, 4H), 2.40-2.47 (m, 2H), 2.09-2.23 (m, 2H), 1.95-2.09 (m, 1H), 1.64-1.78 (m, 1H), 1.25-1.59 (m, 4H), 1.21 (d, 3H).
Ejemplo 183: 3-((1-(3-Ciclobutilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
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Paso 1: 3-((4-Hidroxipiperídin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirímidin-4(3H)-ona: Se calentó una solución de tert-butil 4-((4-doro-6-oxopirimidin-1(6H)-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (2.83 g, 8.23 mmol) y 1-(2-aminoetilo)pirrolidina (5.22 mL, 41.2 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) a 140 °C usando irradiación de microondas durante 1 h. Se diluyó la mezcla de reacción con bicarbonato de sodio saturado (ac) (200 mL) y se extrajo la mezcla usando DCM (3 x 60 mL). Se secaron las fases orgánicas combinadas(separador de fases), se concentraron in vacuo y se agitó el residuo restante en DCM/TFA 1:1 (20 mL). Después de 5 min, se concentró la mezcla in vacuo y se purificó el residuo restante utilizando 2 cartuchos de 10 g Biotage SCX-2 preequilibrados en paralelo (MeOH al 10 % en DCM; luego DCM 4:1/N3H 7 N en MeOH). Se concentraron los lavados básicos in vacuo para dar el compuesto del título (1.52 g, 57 %) como una espuma naranja. LCMS (Método A): Rt = 0.27 min, m/z = 322 [M+H]+.
Paso 2: 3-((1-(3-Cidobutilpropanoil)-4-hidroxipipendin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona (50 mg, 0.156 mmol), ácido 3-ciclobutilpropanoico (24 mg, 0.187 mmol), HATU (71 mg, 0.187 mmol), DIPEA (109 j L, 0.622 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (46 mg, 68 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 0.67 min, m/z = 432 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 87.98 (s, 1H), 6.80 (br. s, 1H), 5.05 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 3.99 (ddd, 1H), 3.78 (dd, 2H), 3.58 (ddd, 1H), 3.29-3.06 (m, 3H), 2.93 (ddd, 1H), 2.54 (t, 2H), 2.48-2.40 (m, 4H), 2.23 (dd, 1H), 2.16 (t, 2H), 2.03-1.93 (m, 2H), 2.84-1.71 (m, 2H), 1.71-1.61 (m, 4H), 1.61-1.25 (m, 8H).
Ejemplo 184: 3-((1-(2,2-Diciclobutilacetil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
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Procedimiento 4 General utilizando 3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona (50 mg, 0.156 mmol), ácido 2,2-diciclobutilacético (31 mg, 0.187 mmol), hAt U (71 mg, 0.187 mmol), DIPEA (109 j L, 0.622 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (51 mg, 69 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): RT = 0.85 min, m/z = 472 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 87.99 (s, 1H), 6.80 (br. s, 1H), 5.05 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.01 (ddd, 1H), 3.84 (ddd, 1H), 3.79 (dd, 2H), 3.37-3.27 (m, 1H (señal parcialmente oscurecida por Hd O)), 3.17 (br. s, 2H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.85 (t, 1H), 2.58-2.31 (m, 9H (señales parcialmente oscurecidas por DMSO)), 1.94-1.21 (m, 19H).
Ejemplo 185: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona
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Paso 1: tert-Butil 4-hidroxi-4-((7-oxo-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-6(7H)-il)metil) piperidin-1-carboxilato: Se trató una solución de 3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona (1.00 g, 4.71 mmol) (disponible comercialmente) y Epóxido 1 (1.01 g, 4.72 mmol) en DMF (10 mL) con DIPEA (1.24 ml, 7.08 mmol) y se calentó a 80 °C. Después de 16 h, se dejó la mezcla de reacción enfriar a TA, se trató con una segunda porción de Epóxido 1 (502 mg, 2.35 mmol) y se calentó a 80 °C. Después de 3 días, se diluyó la mezcla enfriada con agua y se extrajo dos veces en acetato de etilo. Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua y salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron a través de una almohadilla Celite® y se concentraron in vacuo para proporcionar un sólido beige (2.25 g). Se absorbió el residuo sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (MeOH al 1-20 % en DCM) para proporcionar un sólido blanco (1.82 g). Este se recristalizó en etanol caliente para dar el compuesto del título (1.38 g, 69 %) como un sólido cristalino blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 88.48 (s, 1H), 8.08-7.99 (m, 2H), 7.68 (dd, J = 8.5, 7.1 Hz, 2H), 7.63-7.54 (m, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.68 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 3.05 (s, 2H), 1.51 (ddd, J = 13.3, 11.2, 4.6 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.43-1.36 (m, 2H). MS (ESI): m/z = 427 [M+H]+.
Paso 2: 6-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona: Se trató una suspensión de tert-butil 4-hidroxi-4-((7-oxo-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-6(7H)-il)metil)piperidin-1-carboxilato (1.11 g, 2.60 mmol) en DCM (30 mL) con TFA (6 mL, 80 mmol) y se agitó la solución resultante a temperatura ambiente. Después de 30 min, se eliminaron los solventes in vacuo hasta dar una espuma blanca. Se disolvió el residuo en agua, se trató con solución saturada de bicarbonato de sodio (acuoso) y se filtró para recuperar el material como la base libre que se secó bajo alto vacío para producir el compuesto del título (703 mg, 83 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 88.49 (s, 1H), 8.08-7.99 (m, 2H), 7.73-7.63 (m, 2H), 7.63-7.54 (m, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.10 (s, 2H), 2.95-2.79 (m, 4H), 1.61 (ddd, J = 14.7, 10.5, 4.7 Hz, 2H), 1.45 (d, J = 13.6 Hz, 2H).MS (ESI) m/z: 327 [MH+].
Paso 3: (R)-6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidina-7(6H)-ona: Procedimiento 11 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazoloÍ4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona (61.7 mg, 0.189 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (45.1 mg, 0.275 mmol), hAt U (91.5 mg, 0.238 mmol), DIPEA (100 |jL, 0.570 mmol) y DMF (1.0 mL), seguido de purificación mediante HPLC preparativa (Método B) y SFC para dar el compuesto del título (18.9 mg, 21 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 88.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.68 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.58 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.33-7.22 (m, 4H), 7.20-7.12 (m, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.17-3.99 (m, 3H), 3.67 (s, 1H), 3.32-3.10 (m, 2H), 2.87 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.68-2.52 (m, 2H), 1.61-1.23 (m, 4H), 1.21 (d, J = 6.9 Hz, 3H). MS (ESI): m/z = 473 [M+H]+.
Ejemplo 186: 6-((1-(3-Ciclobutilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000110_0001
Se realizó el Procedimiento 11 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona y ácido 3-ciclobutilpropanoico de manera similar al procedimiento descrito en el Ejemplo 185 para dar el compuesto del título (16% de rendimiento). RMN (400 MHz, DMSO-d6): 88.49 (s, 1H), 8.04 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.68 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.58 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.10 (m, 3H), 3.63 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 3.29-3.19 (m, 1H), 2.91 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 2.30-2.14 (m, 3H), 2.04-1.93 (m, 2H), 1.86-1.70 (m, 2H), 1.63-1.37 (m, 8H). MS (ESI): m/z = 437 [M+H]+.
Ejemplo 187: 6-((1-(3,3-Diciclopropilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000110_0002
Se realizó el Procedimiento 11 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona y ácido 3,3-diciclopropilpropanoico de manera similar al procedimiento descrito en el Ejemplo 185 para dar el compuesto del título (30 % de rendimiento). RMN (400 MHz, DMSO-d6): 88.49 (s, 1H), 8.04 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.68 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.59 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.18-4.03 (m, 3H), 3.76 (br d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.38-3.24 (m, 1H), 2.99-2.87 (m, 1H), 2.41 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 1.65-1.38 (m, 4H), 0.76-0.59 (m, 3H), 0.42-0.23 (m, 4H), 0.23-0.13 (m, 2H), 0.12-0.02 (m, 2H). MS (ESI): m/z = 463 [M+H]+.
Ejemplo 188: (R)-1-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-8-metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona
Figure imgf000111_0001
Paso 1: 6-Cloro-8-metil-9-fenil-9H-purina: Se calentó una mezcla de 6-doro-W4-femlpmmidm-4,5-d¡am¡na (400 mg, 1.81 mmol), ortoacetato de trimetilo (0.461 mL, 3.63 mmol), HCl(ac) 3 M (10 j L, 0.030 mmol) y EtOH (3.6 mL) a 150 °C utilizando irradiación con microondas durante 20 min, seguido de 175 °C durante 5 min. Se añadió más ortoacetato de trimetilo (0.461 mL, 3.63 mmol) y HCl(ac) 3 M (10 j L, 0.030 mmol) y se calentó la reacción adicionalmente a 175 °C durante 2 h, seguido de 200 °C durante 40 min utilizando radiación de microondas. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo y se disolvió el residuo en DCM (30 mL) antes de lavarlo con NaHCO3(ac) saturado (40 mL), se extrajo la fase acuosa con DCM (2 * 30 mL), se secaron las fases orgánicas combinadas (separador de fases), se concentraron in vacuo, y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (80 g sílice Grace, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (230 mg, 51 %) como un sólido naranja. LCMS (Método A): Rt = 1.05 min, m/z = 245, 247 [M+H]+.
Paso 2: Clorhidrato de 8-Metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Se calentó una solución de 6-cloro-8-metN-9-feml-9H-purina (230 mg, 0,940 mmol) en HCl(ac) 3 M (1 mL, 32.9 mmol) y 1,4-dioxano (3 mL) a 120 °C utilizando radiación de microondas durante 30 min. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo, se destiló el residuo azeotrópicamente utilizando MeOH y se secó el material a 100 °C bajo alto vacío para dar el compuesto del título (232 mg, 94 %) como un sólido beige claro. LCMS (Método A): Rt = 1.05 min, m/z = 227 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-hidroxi-4-((8-metil-6-oxo-9-fenil-6,9-dihidro-1H-purin-1-il)metil)piperídin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando epóxido 1 (375 mg, 1.76 mmol), clorhidrato de 8-metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona (231 mg, 0.879 mmol), Cs2CO3 (602 mg, 1.847 mmol) y DMF (2.9 ml) dio el compuesto del título (329 mg, 85 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.38 min, m/z = 440 [M+H]+.
Paso 4: 1-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-h¡drox¡-4-((8-met¡l-6-oxo-9-fen¡l-6,9-d¡h¡dro-1 H-pur¡n-1-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1 -carboxilato (323 mg, 0.735 mmol) en DCM (2 mL) y TFA (2 mL) durante 10 min antes de que la reacción se purificara utilizando un cartucho de 5 g SCX-2 (MeOH al 10 % en DCM; luego 20 % de 7 M en NH3 en MeOH en DCM). Se combinaron las fases básicas y se concentraron para dar el compuesto del título (230 mg, 92 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.55 min, m/z = 340 [M+H]+.
Paso 5: (R)-1-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperídin-4-il)metil)-8-metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 1-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-8-met¡l-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona (50 mg, 0.147 mmol), ácido (R)-3-fenilbutanoico (29 mg, 0.177 mmol), HATU (67 mg, 0.177 mmol), DlPEA (103 jl, 0.589 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (63 mg, 88 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.18 min, m/z = 486 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 8.15-8.09 (m, 1H), 7.65-7.48 (m, 5H), 7.31-7.23 (m, 4H), 7.20­ 7.12 (m, 1H), 4.88-4.84 (m, 1H), 4.11-3.89 (m, 3H), 3.72-3.58 (m, 1H), 3.29-3.10 (m, 2H), 2.93-2.82 (m, 1H), 2.69-2.50 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.58-1.23 (m, 4H), 1.21 (d, 3H).
Ejemplo 189: (R)-1-((4-H¡drox¡-1-(4,4,4-tr¡fluoro-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-8-met¡l-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona
Figure imgf000111_0002
Procedimiento 4 General utilizando 1-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-8-met¡l-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona (50 mg, 0.147 mmol), ácido (R)-4,4,4-trifluoro-3-fenilbutanoico (39 mg, 0.177 mmol), HATU (67 mg, 0.177 mmol), DIPEA (103 jl, 0.589 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (39 mg, 48 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.29 min, m/z = 540 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 8 8.15-8.09 (m, 1H), 7.65-7.48 (m, 5H), 7.45-7.28 (m, 5H), 4.89 (s, 1H), 4.17-3.88 (m, 4H), 3.83-3.70 (m, 1H), 3.30-3.10 (m, 2H), 3.02-2.78 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.66-1.20 (m, 4H).
Ejemplo 190: 1-((1-(3,3-D¡c¡cloprop¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-8-met¡l-9-fen¡l-1H-pur¡n-6(9H)-ona
Figure imgf000112_0001
Procedimiento 4 General utilizando 1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona (50 mg, 0.147 mmol), ácido 3,3-diciclopropilpropanoico (27 mg, 0.177 mmol), HATU (67 mg, 0.177 mmol), DIPEA (103 j L, 0.589 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (59 mg, 83 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.18 min, m/z = 476 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 88.15 (s, 1H), 7.65-7.48 (m, 5H), 4.91 (s, 1H), 4.13-3.98 (m, 3H), 3.79-3.68 (m, 1H), 3.35-3.24 (m, (señal oscurecida por HDO)), 3.00-2.89 (m, 1H), 2.46­ 2.37 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.60-1.31 (m, 4H), 0.75-0.59 (m, 3H), 0.42-0.33 (m, 2H), 0.32-0.24 (m, 2H), 0.23-0.14 (m, 2H), 0.10-0.01 (m, 2H).
Ejemplo 191: 6-((4-Hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000112_0002
Procedimiento 4 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (50 mg, 0.147 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (22 mg, 0.221 mmol), HATU (84 mg, 0.221 mmol), DIPEA (103 j L, 0.589 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (53 mg, 85 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 0.95 min, m/z = 422 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 88.01 (s, 1H), 7.74-7.69 (m, 2H), 7.62-7.56 (m, 2H), 7.55-7.49 (m, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 4.01 (s, 2H), 4.00-3.96 (m, 1H), 3.96-3.91 (m, 1H), 3.28-3.03 (br. m, 2H), 1.60-1.38 (m, 4H), 1.21 (s, 3H), 0.77 (dd, 2H), 0.52 (dd, 2H).
Ejemplo 192: 6-((4-Hidroxi-1-(oxazol-5-carbonil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000112_0003
Procedimiento 4 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (50 mg, 0.147 mmol), ácido oxazol-5-carboxílico (25 mg, 0.221 mmol), HATU (84 mg, 0.221 mmol), DIPEA (103 j L, 0.589 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (40 mg, 62 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 0.81 min, m/z = 435 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 88.53 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.74-7.70 (m, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.62-7.75 (m, 2H), 7.55-7.49 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.21-3.84 (br. m, 2H), 4.11 (s, 3H), 4.04 (s, 2H), 3.45 (br. s, 1H), 3.17 (br. s, 1H), 1.71-1.56 (m, 2H), 1.54-1.44 (m, 2H).
Ejemplo 193: 6-((1-(3,3-Diciclopropilpropanoil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona
Procedimiento 4 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (50 mg, 0.147 mmol), ácido 3,3-diciclopropilpropanoico (34 mg, 0.221 mmol), HATU (84 mg, 0.221 mmol), DIPEA (103 |jL, 0.589 mmol) y DCM (3 mL) dio el compuesto del título (55 mg, 78 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.24 min, m/z = 476 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 88.01 (s, 1H), 7.76­ 7.67 (m, 2H), 7.62-7.56 (m, 2H), 7.55-7.49 (m, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.15-4.04 (m, 1H), 4.11 (s, 3H), 4.00 (dd, 2H), 3.74 (ddd, 1H), 3.37-3.25 (m, (señal oscurecida por HDO)), 2.94 (ddd, 1H), 2.46-2.34 (m, 2H), 1.60-1.36 (m, 4H), 0.76-0.58 (m, 3H), 0.42-0.23 (m, 4H), 0.22-0.14 (m, 2H), 0.11-0.01 (m, 2H).
Ejemplo 194: (R)-Etil 4-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencilcarbamato
Figure imgf000113_0001
Se añadió a la solución agitada de (R)-3-(4-(aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (50 mg, 0.097 mmol) en DCM (1 mL), NEt3 (27 j L, 0.194 mmol) y cloroformiato de etilo (18 j L, 0.194 mmol). Después de 30 min, se inactivó la reacción mediante la adición de NaHCO3(ac)saturado (15 mL) y se extrajo la mezcla con DCM (3 * 10 mL) utilizando un separador de fases. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g sílice GraceResolv, MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título (45 mg, 80 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.22 min, m/z = 587 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 87.97 (d, 1H), 7.75 (t, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.45 (d, 2H), 7.30-7.22 (m, 4H), 7.19-7.11 (m, 1H), 4.87 (d, 1H), 4.27 (d, 2H), 4.10 (s, 3H), 4.02 (q, 2H), 4.07-3.85 (m, 3H), 3.74-3.58 (m, 1H), 3.29-3.10 (m, 2H), 2.94-2.81 (m, 1H), 2.69-2.51 (m, 2H), 1.61-1.24 (m, 4H), 1.21 (d, 3H), 1.18 (t, 3H).
Ejemplo 195: 1-((1-(2-Ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona
Figure imgf000113_0002
Procedimiento 4 General utilizando 1-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-8-metil-9-fenil-1H-purin-6(9H)-ona (41.2 mg, 0.121 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (22.3 mg, 0.146 mmol), HATU (55.4 mg, 0.146), DIPeA (42 j L, 0.243 mmol) y DCM (2 mL) dio el compuesto del título (49.1 mg, 85 %) como un sólido incoloro. lCm S (Método B): RT = 0.81 min, m/z = 475 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 88.15 (s, 1H), 7.49-7.64 (m, 6H), 5.01 (s, 1H), 3.90-4.11 (m, 4H), 2.33-2.37 (m, 3H), 2.14-2.20 (m, 1H), 1.55-1.65 (m, 2H), 1.42-1.49 (m, 2H), 1.22-1.28 (m, 2H), 1.06-1.12 (m, 2H), 0.95-1.01 (m, 2H).
Ejemplo 196: 6-((1-(2-Ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]p¡rim¡d¡n-7(6/-/)-ona
Procedimiento 4 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-3-fenil-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7(6H)-ona (50 mg, 0.147 mmol), ácido 2-cidopropiloxazol-5-carboxílico (27.1 mg, 0.177 mmol), HATU (67.2 mg, 0.177 mmol), DIPEA (51 |jL, 0.295 mmol) y DCM (2 mL ) dio el compuesto del título (69.4 mg, 99 %) como un sólido incoloro. LCm S (Método B): Rt = 0.88 min, m/z = 475 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da): 88.01 (s, 1H), 7.74-7.70 (m, 2H), 7.59 (t, 2H), 7.55-7.49 (m, 2H), 5.00 (s, 1H), 4.11 (s, 3H), 4.07-3.91 (m, 4H), 2.20-2.14 (m, 1H), 1.65-1.55 (m, 2H), 1.51­ 1.46 (m, 2H), 1.29-1.20 (m, 2H), 1.12-1.06 (m, 2H), 1.01-0.96 (m, 2H).
Ejemplo 197: 6-((4-Hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000114_0001
Se realizó el Procedimiento 11 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona y ácido 1-metilciclopropanocarboxílico de manera similar al procedimiento descrito en el Ejemplo 185 para dar el compuesto del título (59 % de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 88.49 (s, 1H), 8.04 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.69 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.59 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.11 (s, 2H), 3.98 (dt, J = 13.3, 4.0 Hz, 2H), 3.21-3.05 (m, 2H), 1.62-1.51 (m, 2H), 1.45 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 1.22 (s, 3H), 0.78 (q, J = 4.0 Hz, 2H), 0.52 (q, J = 4.2 Hz, 2H). MS (ESI): m/z = 409 [M+H]+.
Ejemplo 198: 6-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona
Figure imgf000114_0002
Se realizó el Procedimiento 11 General utilizando 6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3-fenil-3H-[1,2,3]triazolo[4,5-d]pirimidin-7(6H)-ona y ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico de manera similar al procedimiento descrito en el Ejemplo 185 para dar el compuesto del título (32 % de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de): 88.50 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.69 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 7.59 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.13 (s, 2H), 4.10­ 3.93 (m, 2H), 3.5-3.0 (br m, 2H), 2.17 (ddd, J = 8.3, 4.9, 3.5 Hz, 1H), 1.71-1.59 (m, 2H), 1.55-1.47 (m, 2H), 1.14-1.05 (m, 2H), 1.03-0.94 (m, 2H). MS (ESI): m/z = 462 [M+H]+.
Ejemplo 199: 7-Ciclopropil-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilpropanoil)piperidin-4-il)metil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (Producto Intermedio F)
Figure imgf000114_0003
Paso 1: 4,6-Didoro-7-((2-(trímetilsilil)etoxi)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se añadió una dispersión al 60 % de NaH en aceite mineral (255 mg, 6.38 mmol) a una solución de 4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1 g, 5.32 mmol) en DMF (21 mL) a 0 °C. Después de 1 h, se añadió lentamente SEM-Cl (1.13 mL, 6.38 mmol) y se agitó la reacción a 0 °C durante 2 h 15 min antes de detenerla mediante la adición de agua (400 mL). Se extrajo la mezcla con DCM (3 * 100 mL) utilizando un separador de fases, se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (120 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-30 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (1.13 g, 66 %) como un aceite incoloro. LCMS (Método A): Rt = 2.14 min, m/z = 318, 320 [M+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentó a reflujo una mezcla de 4,6-dicloro-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1.13 g, 3.55 mmol), NaOH(ac) 5 M (14.2 ml, 71.0 mmol) y 1,4-dioxano (7.1 mL) durante 18 h. Se dejó enfriar la reacción a TA y se repartió con agua (150 mL) y DCM (150 mL). Se ajustó el pH a pH 4-5 mediante la adición de AcOH y se separaron las fases utilizando un separador de fases. Se extrajo la fase acuosa con DCM (2 * 75 mL), se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se secó el producto en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (790 mg, 74 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 1.51 min, m/z = 300, 302 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-((6-cloro-4-oxo-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (1.12 g, 5.27 mmol), 6-cloro-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (790 mg, 2.63 mmol), Cs2CO3 (944 mg, 2.90 mmol) y d Mf (9 mL) dio el compuesto del título (993 mg, 73 %) como una espuma naranja. LCMS (Método A): Rt = 1.94 min, m/z = 513, 515 [M+H]+.
Paso 4: 6-Cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se añadió TFA (2 mL) a una solución de tert-butil 4-((6-cloro-4-oxo-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (988 mg, 1.93 mmol) en DCM (10 mL) a 0 °C. Después de 3 h, se inactivó la reacción mediante la adición de NaOH(ac) 1 M (60 mL), se diluyo con agua (60 mL) y se extrajo con DCM (3 * 100 mL) utilizando un separador de fases. Se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se secó el producto en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (699 mg, 88 %) como una espuma naranja. LCMS (Método A): Rt = 0.95 min, m/z = 413, 415 [M+H]+.
Paso 5: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilcidopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (694 mg, 1.68 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (185 mg, 1.85 mmol), HATU (703 mg, 1.85 mmol), DIPEA (1.17 ml, 6.72 mmol) y DCM (34 mL) dio el compuesto del título (717 mg, 86 %) como una espuma incolora. LCMS (Método A): Rt = 1.59 min, m/z = 495, 497 [M+H]+.
Paso 6: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilcidopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (Producto Intermedio F) : Se agitó una solución de 6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (717 mg, 1.448 mmol) en TFA (1.67 mL, 21.7 mmol) a TA durante 1 h antes de concentrar la mezcla. Se agitó el residuo en NH4OH (1.41 mL, 36.2 mmol) durante 16 h antes de diluir la mezcla con DCM (10 mL) para dar un precipitado. Se decantaron los fluidos y se lavó el residuo con DCM (2 * 10 mL) por decantación de los fluidos. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (100 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano; luego MeOH al 0-30 % en EtOAc) para dar el compuesto del título (202 mg, 38 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.74 min, m/z = 365, 367 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 12.7 (br. s, 1H), 8.06 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.98-3.89 (m, 2H), 3.25-3.03 (br. m, 2H), 1.55-1.44 (m, 2H), 1.42-1.32 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 0.79-0.72 (m, 2H), 0.54-0.46 (m, 2H).
Ejemplo 200: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000115_0001
Se calentó una suspensión del Producto Intermedio F (30 mg, 0.082 mmol), PhB(OH)2 (20 mg, 0.164 mmol), Cu(OAc)2 (15 mg, 0.082 mmol) y piridina (53 pl, 0.658 mmol) en DMF (0.8 mL) a 80 °C durante 16 h. Se enfrió la reacción a t A, se diluyó con NH4Cl(ac) saturado (60 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 20 mL). Se pasaron las fases orgánicas combinadas a través de un separador de fases, se concentraron y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en EtOAc; 11 g Biotage KP-NH, 0- EtOAc al 100 % en ciclohexano; luego MeOH al 0-20 % en EtOAc; luego 12 g sílice GraceResolv, MeOH al 0­ 20 % en DCM) para dar el compuesto del título (7 mg, 19 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.37 min, m/z = 441, 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 8.08 (s, 1H), 7.64-7.40 (m, 5H), 6.82 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.99-3.88 (m, 2H), 3.15 (br. s, 2H), 1.58-1.46 (m, 2H), 1.45-1.34 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.81-0.72 (m, 2H), 0.56-0.47 (m, 2H).
Ejemplo 201: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-(5-(hidroximetil)tiofen-3-il)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000116_0001
Se agitó una suspensión de Producto Intermedio F (50 mg, 0.137 mmol), Cu(OAc)2 (50 mg, 0.274 mmol) y 1,10-fenantrolina (49 mg, 0.274 mmol) en DMF (0.7 mL) durante 1 h antes de añadir una solución gota a gota de ácido (5-(hidroximetil)tiofen-3-il)borónico (65 mg, 0.411 mmol) en DMF (2.1 mL) en tres porciones (~0.7 mL) en intervalos de 40 min. Se lavó la reacción con O2 y se agitó durante 4 días. Debido a la mala conversión, se añadió más DIPEA (0.120 mL, 0.685 mmol). Después de 3 h 25 min, no hubo cambios aparentes y, por lo tanto, se diluyó la reacción con NH4OH (30 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 15 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (3 x 15 mL) y salmuera (15 mL), antes de pasarlas por un separador de fases y concentrarlas in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano; luego MeOH al 0-20 % en EtOAc; luego 12 g sílice GraceResolv, MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título. compuesto (7.2 mg, 11 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.35 min, m/z = 477, 479 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe): 8 8.10 (s, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.10-7.06 (m, 1H), 6.79 (s, 1H), 5.66 (t, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.68 (d, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.99-3.90 (m, 2H), 3.15 (br. s, 2H), 1.56-1.46 (m, 2H), 1.42-1.35 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 0.80-0.72 (m, 2H), 0.55-0.48 (m, 2H).
Ejemplo 202: 7-(Benzo[d][1,3]dioxol-5-il)-6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000116_0002
Se agitó una solución de Producto Intermedio F (52 mg, 0.143 mmol), ácido benzo[d][1,3]dioxol-5-ilborónico (71 mg, 0.428 mmol), Cu(OAc)2 (52 mg, 0.285 mmol) y 1,10-fenantrolina (51 mg, 0.285 mmol) en Dm F (1.4 mL) a TA durante 22 h. Se aumentó la temperatura a 50°C. Después de 42 h, la mezcla de reacción se dejó enfriar a TA, se diluyó con NH4OH (45 ml) y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 30 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (3 x 15 mL) y salmuera (15 mL) antes de pasarlas por un separador de fases y concentrarlas. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage Kp -NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en EtOAc; luego 12 g sílice GraceResolv, MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título(14 mg, 20 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.09 min, m/z = 485, 487 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8 8.08 (s, 1H), 7.11-7.06 (m, 2H), 6.93-6.86 (m, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.16 (s, 2H), 4.92 (s, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.99-3.89 (m, 2H), 3.15 (br. s, 2H), 1.57-1.45 (m, 2H), 1.43-1.33 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 0.80-0.71 (m, 2H), 0.58­ 0.46 (m, 2H).
Ejemplo 203: 6-Cloro-7-(4-clorofenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000116_0003
Se calentó una mezcla de Producto Intermedio F (100 mg, 0.274 mmol), ácido (4-clorofenil)borónico (129 mg, 0.822 mmol), Cu(OAc)2 (100 mg, 0.548 mmol) y 1,10-fenantrolina (99 mg, 0.548 mmol) en DMF (2.7 ml) a 50 °C durante 18 h. La reacción se dejó enfriar a TA, se diluyó con NH4OH (45 mL) y se extrajo la mezcla con EtOAc (3 x 30 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (3 x 15 mL) y salmuera (15 mL) antes de pasarlas por un separador de fases y concentrarlas in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, MeOH al 0-20 % en EtOAc; luego 12 g sílice GraceResolv, MeOH al 0-15 % en DCM) para dar el compuesto del título (10mg, 7 %). LCMS (Método A): Rt = 1.36 min, m/z = 475, 477 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 8.10 (s, 1H), 7.72 - 7.63 (m, 2H), 7.57 - 7.48 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.3, 4.1 Hz, 2H), 3.14 (s, 2H), 1.53 - 1.45 (m, 2H), 1.43 - 1.34 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 0.80 - 0.72 (m, 2H), 0.57 -0.47 (m, 2H).
Ejemplo 204: 6-Cloro-7-(4-fluorofenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000117_0001
Paso 1: 4,6-Didoro-7-(4-fluorofenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se agitó una mezcla de 4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-djpirimidina (188 mg, 1 mmol), ácido (4-fluorofenil)borónico (420 mg, 3 mmol), Cu(OAc)2 (363 mg, 2 mmol) y 1,10-fenantrolina (360 mg, 2 mmol) en DMF (20 mL) durante 22 h antes de inactivar la reacción mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (200 mL) y agua (200 mL). Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 x 50 mL), se pasaron las fases orgánicas combinadas a través de un separador de fases, se concentraron in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (24 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (126 mg, 44 %) como un sólido beige pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.68 min, m/z = 282, 284 [M+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-7-(4-fluorofenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentaron 4,6-Dicloro-7-(4-fluorofenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (126 mg, 0.447 mmol) y HCl(ac)1 M (0.893 mL, 0.893 mmol) en un microondas a 120 °C durante 1.5 h. Se diluyó la reacción con agua (5 mL) y se aisló el precipitado por filtración. Se secó el precipitado durante la noche en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (103 mg, 87 %) como un sólido de color rosa claro. LCMS (Método A): Rt = 1.07 min, m/z = 264, 266 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-((6-doro-7-(4-fluorofenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipipendin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (162 mg, 0.759 mmol), 6-cloro-7-(4-fluorofenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (100 mg, 0.379 mmol), Cs2cOa (136 mg, 0.417 mmol) y DMF (2.5 mL) dio el compuesto del título ( 1 83 mg, 101 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 1.55 min, m/z= 477, 479 [M+H]+.
Paso 4: Se agitó 6-Cloro-7-(4-fluorofenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: ter-Butil 4-((6-cloro-7-(4-fluorofenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (178 mg, 0.373 mmol) en DCM (2 mL) y TFA (1 mL) durante 15 min antes de que la reacción se purificara utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título (124 mg, 8 8 %) como un sólido beige claro. LCMS (Método A): Rt = 0.76 min, m/z = 377, 379 [M+H]+.
Paso 5: 6-Cloro-7-(4-fluorofenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilddopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4( 7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-fluorofenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (73 mg, 0.194 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (21 mg, 0.213 mmol), HATU (81 mg, 0.213 mmol), DIPEA (135 pL, 0.775 mmol) y DCM (3.9 mL) dio el compuesto del título (57 mg, 64 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.23 min, m/z = 459, 461 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 8.09 (s, 1H), 7.59 - 7.49 (m, 2H), 7.49 - 7.38 (m, 2H), 6.82 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.99 - 3.90 (m, 2H), 3.15 (s, 2H), 1.63 - 1.45 (m, 2H), 1.43 - 1.35 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 0.80 - 0.71 (m, 2H), 0.55 - 0.47 (m, 2H).
Ejemplo 205: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-fluorofenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000118_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-fluorofenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (51 mg, 0.135 mmol), ácido 2-cidopropiloxazol-5-carboxílico (23 mg, 0.149 mmol), HATU (57 mg, 0.149 mmol), DIPEA (95 j L, 0.541 mmol) y DCM (2.7 mL) dio el compuesto del título (45 mg, 65 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.23 min, m/z = 512, 514 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da): 8 8.10 (s, 1H), 7.54 (ddt, J = 8.3, 5.6, 2.8 Hz, 2H), 7.50 (s, 1H), 7.48 -7.39 (m, 2H), 6.82 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.18 -3.83 (m, 4H), 3.56 - 3.00 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.17 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.68 - 1.54 (m, 2H), 1.49 -1.40 (m, 2H), 1.14 -1.04 (m, 2H), 1.02 -0.93 (m, 2H).
Ejemplo 206: 6-Cloro-3-((1-(2-cidopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000118_0002
Paso 1: 4,6-Didoro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirímidina: Se agitó una mezcla de 4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (188 mg, 1 mmol), ácido (4-fluoro-3-metoxifenil)borónico (510 mg, 3 mmol), Cu(OAc)2(363 mg, 2 mmol) y 1,10-fenantrolina (360 mg, 2 mmol) en DMF (20 mL) durante 18 h antes de detener la reacción mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (200 mL) y agua (200 mL). Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 x 50 mL), se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (50 mL), luego con salmuera (50 mL) y se pasaron a través de un separador de fases. Se concentraron las fases orgánicas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (40 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-60 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (81 mg, 26 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.40 min, m/z = 312, 314 [M+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentó una mezcla de 4,6-dicloro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (81 mg, 0.260 mmol), HCl(ac) 1 M (0.5 mL, 0.5 mmol) y 1,4-dioxano (1 mL) en un microondas a 120 °C durante 1.5 h. Se aisló el producto por filtración y se secó en un horno de vacío a 50 °C durante 1 h para dar el compuesto del título (52 mg, 6 8 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 0.96 min, m/z = 294, 296 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-((6-cloro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3- il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (76 mg, 0.354 mmol), 6-cloro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (52 mg, 0,177 mmol), Cs2Co3(63 mg, 0.195 mmol) y DMF (1.2 mL) dio el compuesto del título ( 86 mg, 96 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 1.55 min, m/z = 507, 509 [M+H]+.
Paso 4: 6-Cloro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-cloro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato ( 86 mg, 0.170 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (0.5 mL) durante 15 min antes de que la reacción se purificara utilizando un cartucho de 2 g SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido con 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título (60 mg, 87 %) como una espuma incolora. LCMS (Método A): Rt = 0.76 min, m/z = 407, 409 [M+H]+.
Paso 5: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-3H-pirrolo[2,3 -d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-fluoro-3-metoxifenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (37 mg, 0.0909 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (15 mg, 0.100 mmol), HATU (38 mg, 0.100 mmol), DIPEA (63 j L, 0.364 mmol) y DCM (1.8 mL) dio el compuesto del título (38 mg, 78%) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.24 min, m/z = 542, 544 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da): 58.10 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.43 (dd, J = 11.2, 8 . 6 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 7.7, 2.5 Hz, 1H), 7.04 (ddd, J = 8.6 , 3.9, 2.5 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.04 (s, 2H), 4.11­ 3.89 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.53-3.00 (m, 2H (señal ancha que se superpone con la seña1HDO)), 2.17 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.66 - 1.52 (m, 2H), 1.50 - 1.38 (m, 2H), 1.13 -1.05 (m, 2H), 1.01 -0.94 (m, 2H).
Ejemplo 207: 6-Cloro-7-(4-fluoro-3-metox¡fen¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropanocarbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000119_0001
Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 6-cloro-7-(4-fluoro-3-metox¡fen¡l)-3-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona (32 mg, 0.0787 mmol), ác¡do 1-met¡lddopropanocarboxíl¡co (9 mg, 0.0865 mmol), HATU (33 mg, 0.0865 mmol), DIPEA (54 pl, 0.315 mmol) y DCM (1.8 mL) d¡o el compuesto del título (28.5 mg, 74 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. LCMS (Método A): Rt = 1.25 m¡n, m/z = 489, 491 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 58.10 (s, 1H), 7.43 (dd, J = 11.2, 8 . 6 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 7.7, 2.5 Hz, 1H), 7.04 (ddd, J = 8.6 , 3.9, 2.5 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.2, 4.3 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.16 (s, 2H), 1.60 - 1.47 (m, 2H), 1.42 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 - 0.74 (m, 2H), 0.55 - 0.49 (m, 2H).
Ejemplo 208: 6-Cloro-3-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropanocarbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-7-(3-(1-met¡l-1)H-p¡razol-5-¡l)fen¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000119_0002
Paso 1: 7-(3-Bromofenil)-4-doro-5H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6(7H)-ona: Se calentó una mezcla de met¡l 2-(4,6-d¡clorop¡r¡m¡d¡n-5-¡l)acetato (884 mg, 4 mmol) y 3-bromoan¡l¡na ( 6 8 8 mg, 4 mmol) en EtOH ( 8 mL) a 120 °C durante 2 h en el m¡croondas. Se concentró la mezcla de reacc¡ón y se saturó con NaHCO3(ac) (75 ml) al res¡duo. Se extrajo la mezcla resultante con DCM (3 * 50 mL) ut¡l¡zando un separador de fases, se concentraron las fases orgán¡cas comb¡nadas ¡n vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (80 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-40 % en c¡clohexano) para dar et¡l 2-(4-((3-bromofen¡l)am¡no)-6-clorop¡r¡m¡d¡n-5-¡l)acetato (384 mg, 26 %) como un sól¡do ¡ncoloro (LCMS (Método B): Rt = 1.40 m¡n, m/z = 370, 372, 374 [M+H]+) y el compuesto del título ( 4 64 mg, 36 %) como un sól¡do be¡ge (LCMS (Método B): Rt = 1.18 m¡n, m/z = 324, 3 2 6 , 328 [M+H]+). Se calentó a reflujo una soluc¡ón de et¡l 2-(4-((3-bromofen¡l)am¡no)-6-clorop¡r¡m¡d¡n-5-¡l)acetato (348 mg, 0.939 mmol) y p-TSA (36 mg, 0.188 mmol) en tolueno (7.5 mL) durante 1 h, se concentró la mezcla de reacc¡ón y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (40 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-30 % en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (276 mg, 82 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.18 m¡n, m/z = 324, 326, 328 [M+h ]+.
Paso 2: 7-(3-Bromofenil)-4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se añad¡ó agua (123 pL, 6.84 mmol) a una mezcla de 7-(3-bromofen¡l)-4-cloro-5H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-6(7H)-ona (740 mg, 2,28 mmol), POCl3 (1.3 mL, 13,7 mmol) y PhNEt2 (544 pL, 3.42 mmol) en un v¡al de reacc¡ón. Una vez que d¡sm¡nuyó la efervescenc¡a, se tapó el v¡al y se calentó la mezcla a 115 °C durante 1,5 h. Después de enfr¡ar a TA, se d¡luyó la mezcla de reacc¡ón con DCM (~2 mL) y luego se vert¡ó sobre h¡elo (-5 g). Una vez que el h¡elo se había derret¡do, NaHCO3(ac) saturado (75 mL) y DCM (200 mL) y se ag¡tó la mezcla durante 1 h. Se extrajo la mezcla resultante con DCM (3 x 50 mL) y se pasaron las fases orgán¡cas comb¡nadas por un separador de fases. Se concentró la soluc¡ón resultante y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (80 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-40 % en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (419 mg, 53 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.55 m¡n, m/z = 342, 344, 346 [M+h ]+.
Paso 3: 7-(3-Bromofenil)-6-cloro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentó una suspens¡ón de 7-(3-bromofen¡l)-4,6-d¡cloro-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (402 mg, 1.17 mmol) en HCl(ac) 2 M (2.34 mL, 4.68 mmol) y 1,4-d¡oxano (2.34 mL) a 120 °C durante 3 h en el m¡croondas. Se concentró la mezcla de reacc¡ón y se secó el res¡duo en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (370 mg, 97 %) como un sólido beige. LCMS (Método B): Rt = 1.08 min, m /z = 324, 326, 328 [M+H]+.
Paso 4: tert-Butil 4-((7-(3-bromofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil) -4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (484 mg, 2.67 mmol), 7-(3-bromofenil)-6-cloro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (368 mg, 1.13 mmol), Cs2CO3 (406 mg, 1.25 mmol) y DMF (3,8 ml) dio el compuesto del título (572 mg, 93 %) como una espuma beige. LCMS (Método B): Rt = 1.45 min, m/z = 481, 483, 485 [M-buteno+H]+.
Paso 5: tert-Butil 4-((6-cloro-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando tert-butil 4-((7-(3-bromofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (125 mg, 0.232 mmol), 1-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-1H-pirazol (53 mg, 0.256 mmol), Pd(PPh3)4 (13 mg, 0.0116 mmol) y Na2CO3 (49 mg, 0.465 mmol) en 1,4-dioxano (1.5 mL) y agua (0.6 mL) a 140 °C durante 30 min en el microondas dio el compuesto del título (115 mg, 91 %) como una espuma de color amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.44 min, m/z = 539, 541 [M+H]+.
Paso 6: 6-Cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((7-(3-bromofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (132 mg, 0.245 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (0.5 mL) durante 15 min antes de que la reacción se purificara utilizando cartucho de 2 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron in vacuo, y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título (crudo, 121 mg, >100 %) como una espuma incolora. Se usó el material sin purificación adicional. LCMS (Método A): Rt = 0.73 min, m/z = 439, 441 [M+H]+.
Paso 7: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3H -pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (61 mg, 0.139 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (15 mg, 0.153 mmol), HATU (58 mg, 0.153 mmol), DIPEA (96 pL, 0.556 mmol) y DCM (2.8 mL) dio el compuesto del título (40 mg, 56 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.04 min, m/z = 521, 523 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.10 (s, 1H), 7.74 -7.69 (m, 2H), 7.68 (dt, J = 2.1, 1.0 Hz, 1H), 7.56 - 7.52 (m, 1H), 7.50 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.52 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.98 - 3.90 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.16 (s, 2H), 1.57 - 1.45 (m, 2H), 1.44 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 - 0.74 (m, 2H), 0.55 - 0.48 (m, 2H).
Ejemplo 209: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-metil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000120_0001
Se añadió yodometano (21.4 mg, 0.151 mmol) a una suspensión agitada de 6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (50 mg, 0.137 mmol) y carbonato de potasio (22.7 mg, 0.165 mmol) en DMF anhidro (0.5 mL). Después de 16 h, se repartió la mezcla de reacción entre salmuera/agua 1:1 (40 mL) y acetato de etilo (10 mL). Después de la separación, se extrajo la fase acuosa con acetato de etilo (3 x 10 mL). Se lavó la fase orgánica combinada con salmuera/agua 1:1 (4 * 10 mL), se secó (Na2SO4), se filtró y se eliminaron los solventes in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida ( acetato de etilo al 0-100 % en ciclohexano, luego metanol al 0-20 % en acetato de etilo). Se suspendió el residuo en acetonitrilo (2 mL) y agua (10 mL) y se liofilizó para producir el compuesto del título (37.6 mg, 72 %). LCMS (Método B): Rt = 0.85 min, m/z = 379 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.15 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.93 (dt, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.01-3.26 (m, 2H), 1.42-1.56 (m, 2H), 1.32-1.42 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 0.70-0.80 (m, 2H), 0.44-0.56 (m, 2H).
Ejemplo 210: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1)H-pirazol-5-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000121_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (60 mg, 0.137 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (23 mg, 0.150 mmol), HATU (57 mg, 0.150 mmol), DIPEA (95 |jL, 0.547 mmol) y DCM (2.8 mL) dio el compuesto del título (43 mg, 55 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.04 min, m/z = 574, 576 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.11 (s, 1H), 7.74 - 7.66 (m, 3H), 7.57 - 7.52 (m, 1H), 7.52 - 7.47 (m, 2H), 6.85 (s, 1H), 6.52 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.10 -3.95 (br. s, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.50-3.01 (br. S, 2H (señal superpuesta con HDO)) 2.17 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.66 - 1.53 (m, 2H), 1.50 - 1.42 (m, 2H), 1.11 - 1.05 (m, 2H), 1.02 - 0.94 (m, 2H).
Ejemplo 211: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1)H-pirazol-4-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000121_0002
Paso 1: tert-Butil 4-((6-doro-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando tert-butil 4-((7-(3-bromofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1 -carboxilato (128 mg, 0,238 mmol), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-1H-pirazol (55 mg, 0.262 mmol), Pd(PPh3)4 (14 mg, 0.0119 mmol) y Na2CO3 (50 mg, 0.476 mmol), en 1,4-dioxano (1.75 mL) y agua (0.7 mL) a 140 °C durante 30 min en el microondas dio el compuesto del título (131 mg, 102 %) como una espuma de color amarillo pálido. Se usó este material sin purificación adicional. LCMS (Método B): Rt = 1.02 min, m/z = 481, 483, 485 [M-buteno+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-cloro-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (131 mg, 0,243 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (0.5 mL) durante 30 min antes de que la reacción se purificara utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título (91 mg, 85 %) como una goma de color amarillo pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.71 min, m/z = 439, 441 [M+H]+.
Paso 3: 6-Cloro-3-((1-(2-cidopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil )-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (42 mg, 0.0957 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (16 mg, 0.105 mmol), HATU (40 mg, 0.105 mmol), DlPEA (63 j L, 0.364 mmol) y DCM (1.9 mL) dio el compuesto del título (24 mg, 43 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.02 min, m/z = 574, 576 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.24 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.95 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.75 (dt, J = 7.9, 1.3 Hz, 1H), 7.67 -7.64 (m, 1H), 7.56 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.24 (ddd, J = 7.9, 2.1, 1.0 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.10 - 3.91 (br. s, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.60 - 2.97 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.17 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.66 - 1.52 (m, 2H), 1.50 - 1.41 (m, 2H), 1.13 - 1.05 (m, 2H), 1.02 - 0.95 (m, 2H).
Ejemplo 212: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1)H-pirazol-4-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000122_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (49 mg, 0,112 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico ( l2 mg, 0.123 mmol), HATU (47 mg, 0.123 mmol), DIPEA (78 pl, 0.447 mmol) y DCM (2.2 ml) dio el compuesto del título (27 mg, 47 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.02 min, m/z = 521, 523 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.24 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.95 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.75 (dt, J = 7.9, 1.3 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.24 (ddd, J = 7.8, 2.1, 1.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 12.3, 3.8 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.16 (s, 2H), 1.60 - 1.47 (m, 2H), 1.43 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 -0.74 (m, 2H), 0.55 - 0.49 (m, 2H).
Ejemplo 213: 7-(3-Bromofenil)-6-cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000122_0002
Paso 1: 7-(3-Bromofenil)-6-doro-3-((4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((7-(3-bromofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (61 mg, 0.113 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (0.5 mL) durante 30 min antes de que se purificara la reacción utilizando un cartucho de 2 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron in vacuo y se secó el residuo in vacuo para dar el compuesto del título (46 mg, 92 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método B): Rt = 0.82 min, m/z = 437, 439 [M+H]+.
Paso 2: 7-(3-Bromofenil)-6-doro-3-((1-(2-cidopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidina -4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 7-(3-bromofenil)-6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (24 mg, 0.0458 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (9 mg, 0.0603 mmol), h At U (23 mg, 0.0603 mmol), DIPEA (38 pL, 0.219 mmol) y DCM (1.1 mL) dio el compuesto del título (16 mg, 50 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.21 min, m/z = 572, 574 [m H]+.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.11 (s, 1H), 7.82 - 7.74 (m, 2H), 7.59 - 7.54 (m, 1H), 7.53 - 7.50 (m, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.11 - 3.88 (br. s, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.46 - 3.06 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.17 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.66 - 1.52 (m, 2H), 1.50 - 1.40 (m, 2H), 1.12 -1.05 (m, 2H), 1.01 -0.94 (m, 2H).
Ejemplo 214: 7-(3-Bromofenil)-6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000122_0003
Procedimiento 4 General utilizando 7-(3-bromofenil)-6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (22 mg, 0.0503 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (5.5 mg, 0.0553 mmol), HATU (21 mg, 0.0553 mmol), DIPEA (35 pl, 0.201 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (11 mg, 43 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.21 min, m/z = 519, 521 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.11 (s, 1H), 7.81 - 7.74 (m, 2H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 7.51 (ddd, J = 8.0, 1.9, 1.2 Hz, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.99 - 3.91 (m, 2H), 3.16 (s, 2H), 1.58 - 1.45 (m, 2H), 1.43 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 - 0.74 (m, 2H), 0.55 -0.48 (m, 2H).
Ejemplo 215: 6-Cloro-3-((1-(2-c¡cloprop¡loxazol-5-carbon¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-7-fen¡l-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000123_0001
Paso 1: 4,6-Didoro-7-fenil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se ag¡tó una mezcla de 4,6-d¡cloro-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (188 mg, 1 mmol), ác¡do fen¡lborón¡co (420 mg, 3 mmol), Cu(OAc)2 (363 mg, 2 mmol) y 1,10-fenantrol¡na (360 mg, 2 mmol) en DMF (10 ml) durante 16 h antes de detener la reacc¡ón med¡ante la ad¡c¡ón de NH4Cl(ac) saturado (300 mL). Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 * 50 mL), se lavaron las fases orgán¡cas comb¡nadas con salmuera y se pasaron a través de un separador de fases B¡otage, se concentraron in vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (24 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (128 mg, 48 %) como un sól¡do be¡ge pál¡do. LCMS (Método B): Rt = 1.51 m¡n, m/z = 264, 266 [M+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentaron 4,6-D¡cloro-7-fen¡l-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (125 mg, 0.473 mmol), HCl(ac) 1 M(2 mL, 2 mmol) y 1,4-d¡oxano (2 mL) a 120 °C ut¡l¡zando rad¡ac¡ón de m¡croondas durante 2 h. Después de enfr¡ar, se d¡luyó la mezcla de reacc¡ón con agua (5 ml) y se a¡sló el prec¡p¡tado resultante por f¡ltrac¡ón. Se secó el mater¡al durante la noche en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (77 mg, 66 %) como un sól¡do rosa claro. LCMS (Método B): Rt = 0.91 m¡n, m/z = 246, 248 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-((6-doro-4-oxo-7-fenil-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidina -1-carboxilato: Proced¡m¡ento 1 General ut¡l¡zando Epóx¡do 1 (134 mg, 0.627 mmol), 6-cloro-7-fen¡l-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona (77 mg, 0.313 mmol), Cs2CO3 (112 mg, 0.345 mmol) y DMF (1 mL) d¡o el compuesto del título (125 mg, 86 %) como un sól¡do be¡ge. LCMS (Método B): Rt = 1.32 m¡n, m/z = 403, 405 [M-buteno+H]+. Paso 4: Se ag¡tó 6-Cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: tert-Butil 4-((6-cloro-4-oxo-7-fen¡l-4,7-d¡h¡dro-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)met¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (125 mg, 0.272 mmol) en DCM (2 mL) y TFA (2 mL) durante 15 m¡n antes de que se pur¡f¡cara la reacc¡ón ut¡l¡zando un cartucho de 5 g B¡otage SCX-2 (preequ¡l¡brado con, luego lavado con 4:1 DCM/MeOH, elud¡do ut¡l¡zando 4:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se comb¡naron las fases bás¡cas y se concentraron para dar el compuesto del título (90 mg, 92 %) como un sól¡do de color be¡ge claro. LCMS (Método B): Rt = 0.70 m¡n, m/z = 359, 361 [M+H]+.
Paso 5: 6-Cloro-3-((1-(2-ddopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H) )-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 6-cloro-3-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-7-fen¡l-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona (45 mg, 0.125 mmol), ác¡do 2-c¡cloprop¡loxazol-5-carboxíl¡co (21 mg, 0.138 mmol), HATU (57 mg, 0.150 mmol), DIPEA (66 pL, 0.376 mmol) y DCM (1.5 mL) d¡o el compuesto del título (47 mg, 76 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. Lc Ms (Método B): Rt = 1.07 m¡n, m/z = 494, 496 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 68.09 (s, 1H), 7.63 - 7.53 (m, 3H), 7.49 (s, 1H), 7.48 - 7.44 (m, 2H), 6.82 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.13 - 3.87 (m, 4H), 3.60 - 2.97 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.21 - 2.13 (m, 1H), 1.98 - 1.51 (m, 2H), 1.51 -1.41 (m, 2H), 1.13 -1.04 (m, 2H), 1.02 -0.95 (m, 2H).
Ejemplo 216: 6-Cloro-3-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡l-1H-p¡razol-4-carbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-7-fen¡l-3H-p¡rrolo[2.3-d ]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000123_0002
Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 6-cloro-3-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-7-fen¡l-3H-p¡rrolo[2,3-d ]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona (45 mg, 0.125 mmol), ác¡do 1-met¡l-1H-p¡razol-4-carboxíl¡co (17 mg, 0.138 mmol), Ha Tu (57 mg, 0.150 mmol), DIPEA (66 pl, 0.376 mmol) y DCM (1.5 mL) d¡o el compuesto del título (24 mg, 41 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. LCMS (Método B): Rt = 1.07 m¡n, m/z = 467, 469 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 68.08 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.64 - 7.53 (m, 4H), 7.48 - 7.42 (m, 2H), 6.81 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.17 - 3.78 (m, 7H), 3.48 - 2.98 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 1.61 -1.52 (m, 2H), 1.46 - 1.38 (m, 2H).
Ejemplo 217: 6-Cloro-3-((1-(2-c¡cloprop¡loxazol-5-carbon¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-7-(3-c¡cloprop¡lfen¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000124_0001
Paso 1: 4,6-Didoro-7-(3-ddopropilfenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se ag¡tó una mezcla de 4,6-d¡cloro-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (387 mg, 2.06 mmol), ác¡do (3-c¡cloprop¡lfen¡l)borón¡co (1 g, 6.17 mmol), Cu(OAc)2 (748 mg, 4.12 mmol) y 1,10-fenantrol¡na (742 mg, 4.12 mmol) en DMF (20 mL) durante 16 h antes de detener la reacc¡ón med¡ante la ad¡c¡ón de NH4Cl(ac) saturado (400 mL). Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 x 75 mL), se lavaron las fases orgán¡cas comb¡nadas con salmuera y se pasaron a través de un separador de fases, se concentraron in vacuo, y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (40 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (210 mg, 34 %) como un sól¡do be¡ge pál¡do. LCMS (Método B): Rt = 1.61 m¡n, m/z = 304, 306 [M+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-7-(3-cidopropilfenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentaron 4,6-D¡cloro-7-(3-c¡cloprop¡lfen¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (210 mg, 0.690 mmol), HCl(ac) 1 M(3 mL, 3 mmol) y 1,4-d¡oxano (2 mL) en un m¡croondas a 120 °C durante 2 h. Se d¡luyó la mezcla de reacc¡ón con agua (5 mL) y se a¡sló el prec¡p¡tado resultante por f¡ltrac¡ón. Se secó el prec¡p¡tado durante la noche en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (172 mg, 87 %) como un sól¡do rosa claro. LCMS (Método B): Rt = 1.13 m¡n, m/z = 286, 288 [M+H]+.
Paso 3: tert Butil 4-((6-doro-7-(3-cidopropilfenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil) -4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Proced¡m¡ento 1 General ut¡l¡zando Epóx¡do 1 (254 mg, 1.19 mmol), 6-cloro-7-(3-c¡cloprop¡lfen¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona (170 mg, 0.595 mmol), Cs2CO3 (213 mg, 0.655 mmol) y DMF (2 ml) d¡o el compuesto del título (320 mg, cuant.) como un sól¡do be¡ge. LCMS (Método B): Rt = 1.49 m¡n, m/z = 443, 445 [M-buteno+H]+.
Paso 4: 6-Cloro-7-(3-cidopropilfenil)-3-((4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se ag¡tó tert-Butil 4-((6-cloro-7-(3-c¡cloprop¡lfen¡l)-4-oxo-4,7-d¡h¡dro-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)met¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (320 mg, 0.601 mmol) en DCM (3 mL) y TFA (3 mL) durante 15 m¡n antes de que la reacc¡ón se pur¡f¡cara ut¡l¡zando un cartucho 5 g B¡otage SCX-2 (preequ¡l¡brado con, luego lavado con 4:1 DCM/MeOH, elud¡do ut¡l¡zando 4:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se comb¡naron las fases bás¡cas y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (190 mg, 79 %) como un sól¡do be¡ge claro. LCMS (Método B): Rt = 0.84 m¡n, m/z = 399, 401 [M+H]+.
Paso 5: 6-Cloro-3-((1-(2-ddopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3-ddopropilfenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidina -4(7H)-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 6-cloro-7-(3-c¡cloprop¡lfen¡l)-3-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona (45 mg, 0.113 mmol), ác¡do 2-c¡cloprop¡loxazol-5-carboxíl¡co (19 mg, 0.124 mmol), HATU (52 mg, 0.135 mmol), DIPEA (59 pL, 0.338 mmol) y DCM (1.5 mL) d¡o el compuesto del título (42 mg, 69 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. LCMS (Método B): Rt = 1.25 m¡n, m/z = 534, 536 [M+H]+.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 6 8.08 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.16 (t, 1H), 6.79 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.14 - 3.84 (m, 4H), 3.50 - 3.03 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.20 - 2.12 (m, 1H), 2.05 - 1.97 (m, 1H), 1.66 - 1.52 (m, 2H), 1.52 - 1.39 (m, 2H), 1.11 - 1.05 (m, 2H), 1.04 - 0.93 (m, 4H), 0.79 - 0.69 (m, 2H).
Ejemplo 218: 6-Cloro-7-(3-c¡cloprop¡lfen¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropanocarbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000125_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(3-ciclopropilfenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (45 mg, 0.113 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (12 mg, 0.124 mmol), HATU (52 mg, 0.135 mmol), DIPEA (59 pl, 0.338 mmol) y DCM (1.5 mL) dio el compuesto del título (39 mg, 72 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.25 min, m/z = 481, 483 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe): 88.08 (s, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.16 (t, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.95 (dt, 2H), 3.26 -3.02 (m, 2H), 2.06 - 1.98 (m, 1H), 1.56 -1.45 (m, 2H), 1.44 -1.34 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 1.04 -0.98 (m, 2H), 0.81 - 0.69 (m, 4H), 0.47 - 0.56 (m, 2H).
Ejemplo 219: 6-Cloro-7-(3-ciclopropilfenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metil-1H-pirazol-4-carbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000125_0002
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(3-ciclopropilfenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (45 mg, 0.113 mmol), ácido 1-metil-1H-pirazol-4-carboxílico (16 mg, 0.124 mmol), Ha Tu (52 mg, 0.135 mmol), DIPEA (59 pL, 0.338 mmol) y DCM (1.5 mL) dio el compuesto del título (24 mg, 42 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.11 min, m/z = 507, 509 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 88.08 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.16 (t, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 4.13 - 3.87 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 3.45 - 3.02 (m, 2H), 2.05 - 1.98 (m, 1H), 1.61 -1.51 (m, 2H), 1.45 -1.37 (m, 2H), 1.06 - 0.95 (m, 2H), 0.79 - 0.69 (m, 2H).
Ejemplo 220: 6-Cloro-7-(4-ciclopropilfenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2.3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000125_0003
Paso 1: 4,6-Didoro-7-(4-ddopropilfenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se agitó una mezcla de 4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (387 mg, 2.06 mmol), ácido (4-ciclopropilfenil)borónico (1 g, 6.17 mmol), Cu(OAc)2 (748 mg, 4.12 mmol) y 1,10-fenantrolina (742 mg, 4,12 mmol) en DMF (40 mL) durante 20 h antes de detener la reacción mediante la adición de NH4Cl(ac)saturado(400 mL) y agua (200 mL). Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 * 200 mL), se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (250 mL), se pasaron a través de un separador de fases, se concentraron in vacuo, y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (100 g Biotage KP-Sil, EtOAc al 0-40 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (281 mg, 45 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.62 min, m/z = 304, 306 [M+H]+.
Paso 2: 6-Clom-7-(4-cidopropilfenil)-3H-pirmlo[2,3-d]pirímidin-4(7H)-ona: Se calentó una suspensión de 4,6-dicloro-7-(4-ciclopropilfenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (277 mg, 0.911 mmol) en HCl(ac) 1 M (1.8 mL, 1.8 mmol) y 1,4-dioxano (3 mL) a 120 °C mediante irradiación con microondas durante 90 min. Se concentró la mezcla de reacción y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (259 mg, 99 %) como un sólido naranja rosado claro. LCMS (Método B): Rt = 1.17 min, m /z = 286, 288 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-((6-doro-7-(4-ddopropilfenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperídin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (381 mg, 1.78 mmol), 6-cloro-7-(4-ciclopropilfenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (255 mg, 0.892 mmol), Cs2CO3 (320 mg, 0.982 mmol) y DMF (3 mL) dio el compuesto del título (360 mg, 80 %) como una espuma beige. LCMS (Método B): Rt = 1.49 min, m/z = 443, 445 [M-buteno+H]+.
Paso 4: 6-Cloro-7-(4-ddopropilfenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-cloro-7-(4-ciclopropilfenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (360 mg, 0.721 mmol) en DCM (2 mL) y TFA (1 mL) durante 30 min antes de que se purificara la reacción utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (28 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-20 % en DCM) para dar el compuesto del título (290 mg, 100 %) como una espuma beige. LCMS (Método B): Rt = 0.85 min, m/z = 399, 401 [M+H]+.
Paso 5: 6-Cloro-7-(4-ddopropilfenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilddopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4( 7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-ciclopropilfenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (40 mg, 0,100 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (11 mg, 0.110 mmol), HATU (46 mg, 0.120 mmol), DIPEA (53 pL, 0.301 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (25 mg, 52 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.26 min, m/z = 481, 483 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.06 (s, 1H), 7.28 (m, 4H), 6.79 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.94 (dt, 2H), 3.26 -3.05 (m, 2H), 2.07 -2.00 (m, 1H), 1.55 - 1.45 (m, 2H), 1.48 -1.40 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 1.06 - 1.00 (m, 2H), 0.80 -0.74 (m, 4H), 0.54 -0.49 (m, 2H).
Ejemplo 221: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-ciclopropilfenil)-3H-pirrolo[2.3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000126_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-ciclopropilfenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (40 mg, 0.100 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (17 mg, 0.110 mmol), HATU (46 mg, 0.120 mmol), DIp Ea (52 pL, 0.301 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (27 mg, 50 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.25 min, m/z = 534, 536 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.07 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.28 (m, 4H), 6.78 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.12 - 3.90 (m, 4H), 3.49 - 3.03 (br. s, señal 2H superpuesta con HDO)), 2.20 - 2.13 (m, 1H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.65 - 1.53 (m, 2H), 1.48 - 1.40 (m, 2H), 1.11 -1.06 (m, 2H), 1.06 -1.01 (m, 2H), 1.00 -0.95 (m, 2H), 0.79 -0.74 (m, 2H).
Ejemplo 222: 6-Bromo-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000126_0002
Paso 1: 6-Bromo-4-doro-7-fenil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se agitó una mezcla de 6-bromo-4-cloro-7H-pirrolo[2,3-djpirimidina (232 mg, 1 mmol), PhB(OH)2 (365 mg, 3 mmol), Cu(OAc)2 (363 mg, 2 mmol) y 1,10-fenantrolina (360 mg, 2 mmol) en DMF (20 mL) durante 16 h antes de diluir la reacción con NH4Cl(ac) saturado (200 mL) y agua (200 mL). Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 x 50 mL), se pasaron las fases orgánicas combinadas a través de un separador de fases, se concentraron in vacuo, y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (40 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-60 en ciclohexano) para dar el compuesto del título (170 mg, 55 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.42 min, m /z = 308, 310, 312 [M+H]+.
Paso 2: 6-Bromo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentó a reflujo una solución de 6-bromo-4-cloro-7-fenil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (170 mg, 0.551 mmol) en NaOH(ac) 4 M (1 mL, 4 mmol) y 1,4-dioxano (2 mL). Después de 16 h, se dejó la mezcla de reacción enfriar a TA y se ajustó el pH a ~pH 2 mediante la adición de HCl(ac) 1 M. Se aisló el precipitado por filtración y se secó a 50 °C en un horno de vacío para dar el compuesto del título (crudo, 178 mg, >100 %) como un sólido marrón que se usó en el siguiente paso sin más purificación. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da: 8 12.14 (br. s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.60 - 7.50 (m, 3H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 6.85 (s, 1H).
Paso 3: tert-Butil 4-((6-bromo-4-oxo-7-fenil-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidina -1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (175 mg, 0.603 mmol), 6-bromo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (106 mg, 0.365 mmol), Cs2CO3 (216 mg, 0.663 mmol) y DMF (2 mL) dio el compuesto del título (192 mg, 63 %) como un sólido beige. LCMS (Método B): Rt = 1.33 min, m/z = 447, 449 [M-buteno+H]+.
Paso 4: 6-Bromo-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-bromo-4-oxo-7-fenil-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (131 mg, 0.243 mmol) en DCM (4 mL) y TFA (2 mL) durante 10 min antes de que se purificara la reacción utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron in vacuo y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-30 % en DCM) para dar el compuesto del título (120 mg, 78 %) como una espuma beige. LCMS (Método B): Rt = 0.71 min, m/z = 403, 405 [M+H]+.
Paso 5: 6-Bromo-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H) -ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-bromo-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (30 mg, 0.0744 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (12.5 mg, 0.0818 mmol), HATU (31 mg, 0.0818 mmol), DIPEA (52 pL, 0.298 mmol) y DCM (1.5 mL) dio el compuesto del título (37 mg, 93 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.07 min, m/z = 538, 540 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.06 (s, 1H), 7.63 - 7.52 (m, 3H), 7.49 (s, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 2H), 6.89 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.09 -3.92 (m, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.56 -3.00 (m, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.17 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.68 -1.55 (m, 2H), 1.49 - 1.42 (m, 2H), 1.13 -1.04 (m, 2H), 1.02 -0.94 (m, 2H).
Ejemplo 223: 6-Bromo-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2.3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000127_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-bromo-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (30 mg, 0.0744 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (8,2 mg, 0.0818 mmol), HATU (31 mg, 0.0818 mmol), DIPEA (52 pl, 0.298 mmol) y DCM (1.5 mL) dio el compuesto del título (24 mg, 6 6 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.08 min, m/z = 485, 487 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.05 (s, 1H), 7.63 - 7.52 (m, 3H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 6.90 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.3, 4.2 Hz, 2H), 3.15 (s, 2H), 1.56 - 1.45 (m, 2H), 1.43 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 - 0.74 (m, 2H), 0.55 - 0.48 (m, 2H).
Ejemplo 224: 3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-yodo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000127_0002
Paso 1: 4-Cloro-6-yodo-7-fenil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se agitó una mezcla de 4-cloro-6-yodo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (400 mg, 1.43 mmol), ácido fenilborónico (524 mg, 4.29 mmol), acetato de cobre (II) (520 mg, 2.86 mmol) y 1,10-fenantrolina (516 mg, 2.86 mmol) en dimetilformamida anhidra (16 mL) durante 16 h. Se repartió la mezcla de reacción s entre cloruro de amonio saturado (80 mL), agua (80 mL) y acetato de etilo (80 mL). Se extrajo la fase acuosa separada con acetato de etilo (3 x 80 mL). Se lavó la fase orgánica combinada con salmuera/agua 1:1 (4 * 80 mL), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-30 % en ciclohexano) para proporcionar el compuesto del título (207 mg, 41 %). LCMS (Método B): Rt = 1.42 min, m/z = 356 [M+H]+.
Paso 2: 6-Yodo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se añadió hidróxido de sodio, 4 M (84.4 mg, 2.11 mmol) (0,53 ml) a una solución agitada de 4-cloro-6-yodo-7-fenil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (50 mg, 0.141 mmol) en 1,4-dioxano (1 mL). Se calentó la solución a 100 °C. Después de 16 h, se enfrió la mezcla de reacción y se eliminaron los solventes in vacuo. Se añadió agua (3 mL) y se ajustó el pH mediante la adición gota a gota de ácido clorhídrico 2 M hasta aprox. pH 4. Se recogió el sólido por filtración y se secó al vacío. Se disolvió el material en DCM y se eliminaron los solventes in vacuo para proporcionar el compuesto del título (44.2 mg, 93 %) que se usó sin más purificación. LCMS (Método B): Rt = 0.93 min, m/z = 338 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-hidroxi-4-((6-yodo-4-oxo-7-fenil-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil) piperidin-1-carboxilato: Se añadió tert-Butil 1-oxa-6-azaspiro[2,5]octano-6-carboxilato (33.6 mg, 0.157 mmol) a una solución agitada de 6-yodo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (44.2 mg, 0.131 mmol) y carbonato de cesio (128 mg, 0.393 mmol) en DMF (1 mL). Se calentó la solución a 80 °C y se agitó durante 16 h. Después de enfriar, se repartió la mezcla entre salmuera/agua 1:1 (10 mL) y acetato de etilo (10 mL). Se extrajo la fase acuosa separada con acetato de etilo (3 x 5 mL). Se lavaron las fracciones de acetato de etilo combinadas con salmuera/agua 1:1 (4 * 5 mL), se secaron Na2SO4), se filtraron y se redujeron in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para proporcionar el compuesto del título (41,5 mg, 58 %). LCMS (Método B): Rt = 1.33 min, m/z = 495 [M-buteno+H]+.
Paso 4: 3-((4-Hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-yodo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se añadió ácido trifluoroacético (0.5 mL) a una solución agitada de tert-butil 4-hidroxi-4-((6-yodo-4-oxo-7-fenil-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)piperidin-1-carboxilato (41.5 mg, 0.0754 mmol) en DCM (2 mL) y se agitó la solución durante 15 min. Se preequilibró un cartucho de sílice SCX-2 (5 g) con metanol al 20 % v/v en d Cm (50 ml) y se cargó con DCM (3 * 1 mL) para transferir la mezcla de reacción. Después de 5 minutos, se enjuagó la columna utilizando metanol al 20 % v/v en DCM (50 mL) seguido de 20 % v/v (amoníaco 7 M en metanol) en DCM (25 mL). Se concentró la fracción que contenía amoníaco in vacuo para proporcionar el compuesto del título (32.7 mg, 96 %). LCMS (Método B): Rt = 0.72 min, m/z = 451 [M+H]+.
Paso 5: 3-((1-(2-Cidopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-yodo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se añadió a una solución agitada de 3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-6-yodo-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (16.4 mg, 0.0364 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (5.6 mg, 0.0364 mmol) y HATU (16.6 mg, 0.0437 mmol) en DCM anhidro (1 mL), DIPEA (9.4 mg, 0.0728 mmol). Después de 30 min, se lavó la mezcla de reacción con solución saturada de bicarbonato de sodio (ac) (0.5 mL). Se extrajo la fase acuosa separada con DCM (3 * 0.5 mL). Se secaron las fracciones de DCMf combinadas (separador de fases) y se purificaron mediante cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, luego metanol al 0-8 % en EtOAc). Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (metanol al 0-4 % en DCM). Se suspendió el residuo en acetonitrilo (1 mL) y agua (10 mL) y se liofilizó para producir el compuesto del título (16.7 mg, 78 %). LCMS (Método B): Rt = 1.08 min, m/z = 586 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 87.99 (s, 1H), 7.53-7.61 (m, 3H), 7.49 (s, 1H), 7.37 (dd, 2H), 6.99 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 3.90-4.10 (m, 4H), 3.32-3.50 (m, 1H), 3.07-3.26 (m, 2H), 2.12-2.20 (m, 1H), 1.53-1.65 (m, 2H), 1.40-1.49 (m, 2H), 1.069-1.12 (m, 2H), 0.95-1.00 (m, 2H).
Ejemplo 225: 6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-(3-(4-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000128_0001
Paso 1: tert-Butil 4-((6-cloro-4-oxo-7-(3-(4-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il)fenil)-4,7-dihidro-3H-pirrolo [2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Se desgasificó una suspensión de tert-butil 4-((7-(3-bromofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1 -carboxilato (50 mg, 0.0930 mmol), 4(tnfluorometil)-IH-pirazol (15 mg, 0.112 mmol), Cul (18 mg, 0.186 mmol), frans-W,W-d¡met¡lcidohexano-1,2-d¡am¡na (26 mg, 0.186 mmol) y K2CO3 (51 mg, 0.372 mmol) en DMF (1 mL) en un tubo de reacción sellado con N2 y se calentó a 110 °C durante 4 h. Se dejó enfriar la mezcla a TA, se diluyó con solución saturada de NH4Cl(ac) (15 mL) y se extrajo la mezcla resultante utilizando DCM (3 * 10 mL). Se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (51 mg, 92 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.50 min, m/z = 537, 539 [M-buteno+H]+.
Paso 2: 6-doro-3-((4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-7-(3-(4-(trífluorometil)-1H-pirazol-1-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-cloro-4-oxo-7-(3-(4-(t^fluoromet¡l)-1H-p¡razol-1-¡l)fen¡l)-4,7-d¡h¡dro-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)met¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1 -carboxilato (51 mg, 0.0860 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (0.5 mL) durante 10 min antes de que se purificara la reacción utilizando un cartucho de 2 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas, se concentraron y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (11 g Biotage KP-NH, DCM al 0­ 100 % en ciclohexano, luego MeOH al 0-30 % en DCM) para dar el compuesto del título (35 mg, 82 %) como un sólido vítreo. LCMS (Método B): Rt = 0.91 min, m/z = 493, 495 [M+H]+.
Paso 3: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilcidopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-(3-(4-(trifluorometil)-1H-pirazol-1-il)fenil) -3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-3-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-7-(3-(4-(tr¡fluoromet¡l)-1H-p¡razol-1-¡l)fen¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona (35 mg, 0.0710 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico ( 8 mg, 0.0781 mmol), hAt U (30 mg, 0.781 mmol), DIPEA (50 pL, 0.284 mmol) y DCM (1.5 mL) después de HPLC preparativa (Método A) dio el compuesto del título (16 mg, 40 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.49 min, m/z = 575, 577 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 9.31 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.14 -8.10 (m, 2H), 8.08 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 7.78 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.53 (ddd, J = 7.9, 2.0, 0.9 Hz, 1H), 6 . 8 8 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.3, 4.2 Hz, 2H), 3.16 (s, 2H), 1.59 - 1.48 (m, 2H), 1.43 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 - 0.74 (m, 2H), 0.55 - 0.49 (m, 2H).
Ejemplo 226: 6-Cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-(3-morfolinofenil)-3H-p irrolop^-cdpinm idin^^H^ona
Figure imgf000129_0001
Se agitó una mezcla de Producto Intermedio F (142 mg, 0.389 mmol), ácido (3-morfoNnofeml)borómco (241 mg, 1.17 mmol), Cu(OAc)2 (141 mg, 0.778 mmol) y 1,10-fenantrolina (140 mg, 0.778 mmol) en DMF (3.9 mL) durante 18 h a TA antes de diluir la reacción con NH4OH (50 mL) y agua (50 mL). Se extrajo la mezcla resultante con DCM (5 * 30 mL) utilizando un separador de fases, se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (28 g KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, luego MeOH 0-15 % en EtOAc; luego 40 g sílice GraceResolv, MeOH al 0-15 % en DCM) para dar el compuesto del título (70 mg, 34 %) como un sólido de color rosa pálido después de la liofilización. Lc MS (Método A): RT = 1.18 min, m/z = 526, 528 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.07 (s, 1H), 7.41 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.10 (ddd, J = 8.6 , 2.6, 0.9 Hz, 1H), 6.96 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 6.82 (ddd, J = 7.7, 1.9, 0.8 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.2, 4.2 Hz, 2H), 3.77 -3.71 (m, 4H), 3.27 -3.04 (m, 6 H), 1.56 -1.47 (m, 2H), 1.42 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 -0.74 (m, 2H), 0.55 - 0.48 (m, 2H).
Ejemplo 227: 6-Cloro-7-(3-(4-fluoro-1H-p¡razol-1-¡l)fen¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropanocarbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3H-p¡rrolo[2.3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000130_0001
Paso 1: tert-Butil 4-((6-doro-7-(3-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Se desgasificó tert-Butil 4-((7-(3-bromofeml)-6-doro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (50 mg, 0.093 mmol), 4-fluoro-1H-pirazol (10 mg, 0.112 mmol), Cul (18 mg, 0.186 mmol), trans-W,W-d¡met¡lc¡dohexano-1,2-d¡am¡na (26 mg, 0.186 mmol) y K2CO3 (51 mg, 0.372 mmol) en DMF (1 mL) en un tubo de reacdón sellado con N2 y se calentó a 110 °C durante 4 h. Se dejó enfr¡ar la mezcla de reacc¡ón a TA, se d¡luyó con NH4Cl(ac) saturado (15 mL) y se extrajo la mezcla resultante con DCM (3 * 10 mL) ut¡l¡zando un separador de fases. Se concentraron las fases orgán¡cas comb¡nadas in vacuo y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (12 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (50 mg, 99 %) como un sól¡do ¡ncoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.62 m¡n, m/z = 543, 545 [M+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-7-(3-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)fenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d] pirimidin-4(7H)-ona: Se ag¡tó una soluc¡ón de tert-but¡l 4-((6-doro-7-(3-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (50 mg, 0.0921 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (0.5 mL) durante 10 m¡n antes de que se pur¡f¡cara la reacc¡ón ut¡l¡zando un cartucho de 2 g B¡otage SCX-2 (preequ¡l¡brado con, luego lavado con 1:1 DCM/MeOH, elud¡do ut¡l¡zando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se comb¡naron las fases bás¡cas y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (crudo, 49 mg, >100 %) como un sól¡do vitreo que se usó s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. LCMS (Método A): Rt = 0.84 m¡n, m/z = 443, 445 [M+H]+.
Paso 3: 6-Cloro-7-(3-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)fenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 6-doro-7-(3-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)fenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (41 mg, 0.0926 mmol), ác¡do 1-metilddopropanocarboxílico (10 mg, 0.102 mmol), HATU (39 mg, 0.102 mmol), DIPEA (64 pl, 0.370 mmol) y DCM (1.8 ml) d¡o el compuesto del título (28 mg, 58 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. LCMS (Método A): Rt = 1.32 m¡n, m/z = 525, 527 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 88.81 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.01 (ddd, J = 8.3, 2.3, 0.9 Hz, 1H), 7.94 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 7.73 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.43 (ddd, J = 7.9, 2.0, 0.9 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.2, 4.2 Hz, 2H), 3.16 (s, 2H), 1.59 - 1.46 (m, 2H), 1.44 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 - 0.74 (m, 2H), 0.55 - 0.49 (m, 2H).
Ejemplo 228: 6-Cloro-7-(4-dorofen¡l)-3-(1-(2-ddoprop¡loxazol-5-carbon¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona
Figure imgf000130_0002
Paso 1: 4,6-Didoro-7-(4-clorofenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se añad¡ó a una mezcla de 4,6-d¡cloro-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (300 mg, 1.60 mmol), ác¡do (4-clorofen¡l)borón¡co (499 mg, 3.19 mmol), Cu(OAc)2 (580 mg, 3.19 mmol) en DMF (10 mL), p¡r¡d¡na (1 mL, 12,8 mmol) y se ag¡tó durante 16 h antes de que la reacc¡ón se ¡nact¡vará med¡ante la ad¡c¡ón de NH4Cl(ac)saturado (300 mL). Se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 * 50 mL), se lavaron las fases orgán¡cas comb¡nadas con salmuera, se secaron (separador de fases), se concentraron in vacuo, y se pur¡f¡có el res¡duo med¡ante cromatografía ultrarráp¡da (24 g síl¡ce GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en c¡clohexano) para dar el compuesto del título (100 mg, 21 %) como un sól¡do be¡ge pál¡do. LCMS (Método B): Rt = 1.74 m¡n, m/z = 298, 300, 302 [M+H]+.
Paso 2: 6-Cloro-7-(4-clorofenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentó 4,6-D¡cloro-7-(4-clorofen¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (100 mg, 0,335 mmol), 1 M(ac) HCl (2 mL, 2 mmol) y 1,4-d¡oxano (2 mL) en un m¡croondas a 120 °C durante 1.5 h. Se d¡luyó la reacc¡ón con agua (5 mL) y se a¡sló el prec¡p¡tado por f¡ltrac¡ón. Se secó el mater¡al durante la noche en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (57 mg, 61 %) como un sólido de color rosa pálido. LCMS (Método B): Rt = 1.06 min, m/z = 280, 282 [M+H]+.
Paso 3: tert-Butil 4-((6-doro-7-(4-dorofenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirímidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperídin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (85 mg, 0.400 mmol), 6-cloro-7-(4-clorofenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (56 mg, 0.200 mmol), Cs2CO3 (72 mg, 0,220 mmol) y DMF (1 mL) dio el compuesto del título (80 mg, 81 %) como un sólido beige. LCMS (Método B): Rt = 1.43 min, m/z = 437, 439 [M-buteno+H]+.
Paso 4: 6-Cloro-7-(4-dorofenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó tert-Butil 4-((6-cloro-7-(4-clorofenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (80 mg, 0.162 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (1 mL) durante 15 min antes de que la reacción se purificara utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 4:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 4:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (70 mg, cuant.) como un sólido beige claro. LCMS (Método B): Rt = 0.80 min, m/z = 393, 395 [M+H]+.
Paso 5: 6-Cloro-7-(4-dorofenil)-3-((1-(2-cidopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-clorofenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (35 mg, 0.089 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (15 mg, 0.098 mmol), HATU (41 mg, 0.107 mmol), DIPEA (47 |jL, 0.277 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (26 mg, 55 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.35 min, m/z = 528, 530 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 88.10 (s, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 2H), 7.54 - 7.50 (m, 2H), 7.49 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.13 -3.87 (m, 4H), 3.63 -2.94 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.20 -2.13 (m, 1H), 1.67 -1.51 (m, 2H), 1.51 -1.40 (m, 2H), 1.15 -1.03 (m, 2H), 1.03 - 0.93 (m, 2H).
Ejemplo 229: 6-Cloro-7-(4-clorofenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metil-1H-pirazol-4-carbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000131_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-clorofenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona o (35 mg, 0.089 mmol), ácido 1-metil-1H-pirazol-4-carboxílico (12 mg, 0.098 mmol), HATU (41 mg, 0.107 mmol), DIPEA (47 j L, 0.277 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (26 mg, 55 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.18 min, m/z = 501, 503 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.10 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.69 - 7.65 (m, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.17 - 3.75 (m, 7H), 3.63 - 2.97 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 1.62 - 1.49 (m, 2H), 1.47 - 1.36 (m, 2H).
Ejemplo 230: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1)H-pirazol-5-vl)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000131_0002
Paso 1: 7-(3-Bromo-4-fluorofenil)-4-doro-5H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6(7H)-ona: Se calentó una mezcla de metil 2-(4,6-dicloropirimidin-5-il)acetato (884 mg, 4 mmol) y 3-bromo-4-fluoroanilina (760 mg, 4 mmol) en EtOH (8 mL) a 120 °C utilizando irradiación de microondas. Después de 2 h, se concentró la mezcla de reacción in vacuo y se añadió NaHCO3(ac) saturado (75 mL) al residuo. Se extrajo la mezcla resultante utilizando DCM (3 * 50 mL), se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (80 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-40 % en ciclohexano) para dar etil 2-(4-((3-bromo-4-fluorofenil)amino)-6-cloropirimidin-5-il)acetato (344 mg, 23 %) como un sólido incoloro (LCMS (Método B): Rt = 1.38 min, m/z = 388, 390, 392 [M+H]+) y el compuesto del título (369 mg, 26 %) como un sólido beige (LCMS (Método B): Rt = 1.18 min, m/z = 342, 344, 346 [M+H]+). Se calentó a reflujo una solución de etil 2-(4-((3-bromo-4-fluorofenil)amino)-6-doropirimidin-5-il)acetato (344 mg, 0.885 mmol) y p-TSA (34 mg, 0.177 mmol) en tolueno (9 mL) durante 75 min antes de concentrar la mezcla de reacción in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (40 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-30 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (285 mg, 94 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = I . 19 min, m/z = 342, 344, 346 [M+H]+.
Paso 2: 7-(3-Bromo-4-fluorofenil)-4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se añadió agua (103 j L, 5.72 mmol) a una mezcla de 7-(3-bromo-4-fluorofenil)-4-cloro-5H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6(7H)-ona (654 mg, 1.91 mmol), POCl3(1,07 mL, I I , 4 mmol) y PhNEt2 (456 j L, 2.86 mmol) en un vial de reacción. Una vez que disminuyó la efervescencia, se tapó el vial y se calentó la mezcla a 115 °C durante 1.5 h. Una vez que la reacción se hubo enfriado a TA, se diluyó con DCM (~2 mL) y se vertió sobre hielo (~5 g). Una vez que el hielo se había derretido, se añadieron NaHCO3(ac) saturado (75 mL) y DCM (200 mL) y se agitó la mezcla durante 1 h. Se extrajo las mezcla resultantes con DCM (3 * 50 mL). Se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (80 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-40 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (358 mg, 51 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método B): Rt = 1.55 min, m/z = 360, 362, 364 [M+H]+.
Paso 3: 7-(3-Bromo-4-fluorofenil)-6-cloro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se calentó una suspensión de 7-(3-bromo-4-fluorofenil)-4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (347 mg, 0.961 mmol) en HCl(ac) 2 M (1.92 mL, 3.84 mmol) y 1,4-dioxano (3.8 mL) a 120 °C utilizando irradiación con microondas durante 1.5. Se añadió más 1,4-dioxano (1.8 mL) y se calentó la reacción a 120 °C utilizando irradiación con microondas durante 1,5 h. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (325 mg, 98 %) como un sólido beige. LCMS (Método B): Rt = 1.09 min, m/z = 342, 344, 346 [M+H]+.
Paso 4: tert-Butil 4-((7-(3-bromo-4-fluorofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3- il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (402 mg, 1.88 mmol), 7-(3-bromo-4-fluorofenil)-6-cloro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (323 mg, 0.942 mmol), Cs2CO3 (338 mg, 1.04 mmol) y DMF (9 mL) dio el compuesto del título (446 mg, 85 %) como una espuma beige. LCMS (Método B): Rt = 1.46 min, m/z = 499, 501, 503 [M-buteno+H]+.
Paso 5: tert-Butil 4-((6-cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H -pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando tert-butil 4-((7-(3-bromo-4-fluorofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (150 mg, 0.270 mmol), 1-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-1H-pirazol (124 mg, 0.594 mmol), Pd(Pph3)4 (31 mg, 0.027 mmol) y Na2CO3 ( 86 mg, 0.810 mmol) en 1,4-dioxano (1.5 ml) y agua (0.6 mL) a 140 °C durante 1 h en el microondas dio el compuesto del título (122 mg, 81 %) como una espuma de color amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.46 min, m/z = 501, 503 [M-buteno+H]+.
Paso 6: 6-Cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1 -carboxilato (120 mg, 0.215 mmol) en Dc M (2 mL) y TFA (2 mL) durante 15 min antes de que se purificara la reacción utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 4:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 4:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (85 mg, 86 %) como un sólido beige claro. LCMS (Método A): Rt = 0.76 min, m/z = 457, 459 [M+H]+.
Paso 7: 6-Cloro-3-((1-(2-ddopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-5 -il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (40 mg, 0.088 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (15 mg, 0.096 mmol), HAt U (40 mg, 0.105 mmol), DIPEA (46 j L, 0.263 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (33 mg, 63 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.17 min, m/z = 592, 594 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.12 (s, 1H), 7.73 - 7.69 (m, 1H), 7.69 -7.60 (m, 2H), 7.57 -7.54 (m, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.13 -3.87 (m, 4H), 3.82 (s, 3H), 3.60 -2.96 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.20 -2.13 (m, 1H), 1.69 -1.51 (m, 2H), 1.51 -1.39 (m, 2H), 1.14 -1.03 (m, 2H), 1.13 -0.94 (m, 2H).
Ejemplo 231: 6-Cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000133_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-5-il)fenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (40 mg, 0.088 mmol), ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (11 mg, 0.108 mmol), HATU (40 mg, 0.105 mmol), DIPEA (46 |jL, 0.263 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (23 mg, 43 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.17 min, m/z = 539, 541 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 6 8.11 (s, 1H), 7.73 -7.69 (m, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 2H), 7.57 -7.54 (m, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.53 -6.49 (m, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.94 (dt, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.28 - 2.97 (br. s, 2H), 1.59 - 1.45 (m, 2H), 1.44 - 1.34 (m, 2H), 1.20 (s, 3H), 0.81 - 0.72 (m, 2H), 0.57 - 0.47 (m, 2H).
Ejemplo 232: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1)H-pirazol-4-il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000133_0002
Paso 1: tert-Butil 4-((6-doro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H -pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperídin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando tert-butil 4-((7-(3-bromo-4-fluorofenil)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (150 mg, 0.270 mmol), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-1H-pirazol (124 mg, 0.594 mmol), Pd(Pph3)4 (31 mg, 0.027 mmol) y Na2cO 3 ( 86 mg, 0.810 mmol) en 1,4-dioxano (1.5 mL) y agua (0.6 mL) a 140 °C durante 40 min en el microondas dio el compuesto del título (142 mg, 94 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 1.47 min, m/z = 501, 503 [M-buteno+H]+.
Paso 2: 6-Clom-7-(4-fluom-3-(1-metil-1H-pimzol-4-il)fenil)-3-((4-hidmxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirmlo[2, 3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1 -carboxilato (140 mg, 0,251 mmol) en Dc M ( 2 mL) y TFA (2 ml) durante 1 h antes de que se purificara la reacción utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado con, luego lavado con 4:1 DCM/MeOH, eludido utilizando 4:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se combinaron las fases básicas y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (92 mg, 81 %) como un sólido beige claro. LCMS (Método A): Rt = 0.78 min, m/z = 457, 459 [M+H]+.
Paso 3: 6-Clom-3-((1-(2-ddopmpiloxazol-5-carbonil)-4-hidmxipiperidin-4-il)metil)-7-(4-fluom-3-(1-metil-1H-pimzol-4 -il)fenil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (45 mg, 0.098 mmol), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (17 mg, 0.108 mmol), HAt U (45 mg, 0.118 mmol), DIPEA (52 j L, 0.295 mmol) y DCM (1 mL). La purificación adicional por HPLC preparativa (Método A) dio el compuesto del título (19 mg, 32 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. Lc Ms (Método A): Rt = 1.18 min, m/z = 592, 594 [M+H]+. 1H Rm N (500 MHz, DMSO-de): 6 8.24 (d, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 2H), 7.35 - 7.30 m, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.11 -3.92 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.62 -2.99 (br. s, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.20 -2.14 (m, 1H), 1.66 - 1.54 (m, 2H), 1.49 -1.41 (m, 2H), 1.12 -1.04 (m, 2H), 1.03 -0.95 (m, 2H).
Ejemplo 233: 6-Cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d ]pirimidin-4(7H)-ona
Figure imgf000134_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(4-fluoro-3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)fenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (45 mg, 0,098 mmol), ácido 1-metilcidopropanocarboxílico (11 mg, 0.108 mmol), HATU (45 mg, 0,118 mmol), DIPEA (52 |jl, 0.295 mmol) y DCM (1 mL) dio el compuesto del título (21 mg, 39 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.18 min, m/z = 539, 541 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe): 88.24 (d, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.99 - 3.92 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.27 -2.99 (br. s, 2H), 1.57 - 1.45 (m, 2H), 1.45 -1.35 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.81 - 0.72 (m, 2H), 0.57 - 0.47 (m, 2H).
Ejemplo 234: 3-((4-Hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-4-oxo-7-fenil-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2.3-d]pirimidin-6-carbonitrilo
Figure imgf000134_0002
Se desgasificó una suspensión de 6-bromo-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropanocarbonil)piperidin-4-il)metil)-7-fenil-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(7H)-ona (27 mg, 0.0556 mmol), Zn(cN)2 (6.5 mg, 0.0556 mmol), dppf (6.2 mg, 0.0111 mmol), Pd2(dba)3 (5.1 mg, 0.0056 mmol) y Zn (0,7 mg, 0,0111 mmol) en AcOH diluido 100:1 en DMF (275 jL en 1 L)/agua (0.5 mL) en un tubo de reacción sellado burbujeando N2 a través de la mezcla de reacción durante 20 min antes de calentarse a 100 °C durante 19 h. Se añadió más Zn(CN)2 (6.5 mg, 0.0556 mmol), dppf (6.2 mg, 0.0111 mmol), Pd2(dba)3 (5.1 mg, 0.0056 mmol) y Zn (0-7 mg, 0.0111 mmol) y se agitó la reacción durante 1 hora a 100 °C. Se enfrió la reacción a temperatura ambiente, se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo la mezcla con DCM (3 x 5 mL) utilizando un separador de fases. Se concentraron las fases orgánicas combinadas y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano, luego de MeOH al 0-15 % en EtOAc; luego 12 g sílice GraceResolv, MeOH al 0-10 % en DCM) y HPLC preparativa (Método A) para dar el compuesto del título (7 mg, 29%) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.11 min, m/z = 432 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 88.25 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.67 - 7.54 (m, 5H), 4.93 (s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.6, 3.9 Hz, 2H), 3.15 (s, 2H), 1.56 - 1.47 (m, 2H), 1.43 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.81 - 0.72 (m, 2H), 0.56 -0.47 (m, 2H).
Ejemplo 235: 7-(Benzo[d][1,3]dioxol-5-il-2,2-d2)-6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo]2,3-d]pirimidin-4-ona
Figure imgf000134_0003
Paso 1: 5-Bromobenzo[d][1,3]dioxol-2,2-d2: Se agitó una suspensión de 4-bromobenceno-1,2-diol (690 mg, 3.65 mmol) en óxido de deuterio (2 mL) y THF (2 mL) durante 20 h antes de eliminar los volátiles in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C para dar un sólido amarillo parduzco. Esto se repitió antes de agitar el sólido en CD3OD (2 mL) y óxido de deuterio (2 mL) durante 3 días. Se eliminaron los volátiles in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 60 °C para dar un sólido gris pardusco. 1H RMN indicó -60 % de intercambio de H a D. Se añadió una solución de este material y dibromometanod (2.21 mL, 31.4 mmol) en NMP (2 mL) lentamente gota a gota mediante una jeringa a una suspensión de carbonato de potasio (870 mg, 6.29 mmol) en NMP ( 6 mL) a 110 °C en un RBF de 3 cuellos de 100 mL bajo una atmósfera N2. Después de 90 min, se dejó enfriar la mezcla de reacción a TA, se diluyó con agua (60 mL) y se extrajo la mezcla resultante con EtOAc (3 x 20 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua ( 2 x 20 mL) y salmuera (20 mL). Se pasó la fase orgánica por un separador de fases Biotage, se concentró in vacuo y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (cartucho de 40 g sílice GraceResolv, ciclohexano al 100 %) para dar el compuesto del título (486 mg, 76 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (500 MHz, CDCh): 8 6.98 -6.91 (m, 2H), 6.72 -6.65 (m, 1H).
Paso 2: Ácido (Benzo[d][1,3]dioxol-5-il-2,2-d2)borónico: Se añadió gota a gota a una solución agitada de 5-bromobenzo[d][1 ,3 ]dioxol-2 ,2 -d2 (486 mg, 2.39 mmol) en THF (4.8 mL) a 0 °C, complejo de cloruro de litio y cloruro de isopropilmagnesio (1.09 M en THF, 2.64 mL, 2.87 mmol). Después de 25 min, se retiró el baño de hielo y se dejó calentar la reacción hasta TA. Después de 1 h, se añadió 1,4-dioxano (5 mL). Después de 1 h más, no hubo una reacción significativa y, por lo tanto, se añadió más complejo de cloruro de litio y cloruro de isopropilmagnesio (1.09 M en THF, 2.64 ml, 2.87 mmol). Después de 16 h, se añadió borato de triisopropilo (0.67 mL, 2.87 mmol). Después de 1 h más, se añadió HCl(ac) 2 M y se agitó la suspensión resultante durante 23 h. Se añadió agua (30 mL) a la solución amarilla resultante y se extrajo la mezcla con DCM (3 x 20 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (258 mg, 64 %) como un semisólido amarillo. Se usó este material en el siguiente paso sin más purificación.
Paso 3: 7-(Benzo[d][1,3]dioxol-5-il-2,2-d2)-4,6-didoro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se agitó una suspensión de ácido 4.6- dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (96 mg, 0.511 mmol), ácido (benzo[d][1 ,3 ]dioxol-5 -il-2 ,2 -d2)borónico (257 mg, 1.53 mmol), 1,10-fenantrolina (184 mg, 1.02 mmol) y acetato de cobre (II) ( 1 85 mg, 1.02 mmol) en DMF (10 mL) a TA durante 3 días antes de ser extinguido por la adición de NH4Cl(ac) saturado (150 mL). Se diluyó la mezcla resultante con agua (350 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera (300 mL) y se pasaron a través de un separador de fases Biotage. Se concentró la solución púrpura resultante s in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 40 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0 % y luego 10 % en ciclohexano (isocrático)) para dar el compuesto del título (85 mg, 53 %) como un sólido color melocotón claro. LCMS (Método A): Rt = 1.63 min, m/z = 310, 312 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, CDCla): 8 8.62 (s, 1H), 6.97 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.89 -6.82 (m, 2H), 6.71 (s, 1H).
Paso 4: 7-(Benzo[d][1,3]dioxol-5-il-2,2-d2)-6-cloro-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona: Se calentó una suspensión de 7 -(benzo[d][1 ,3 ]dioxol-5 -il-2 ,2 -d2)-4 ,6 -dicloro-7 H-pirrolo[2 ,3 -d]pirimidina (84 mg, 0.271 mmol) en HCl(ac) 2 M (0.54 mL, 1.08 mmol) y 1,4-dioxano (1.08 mL) con radiación de microondas a 120 °C durante 2 h antes de concentrar la mezcla in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título bruto (85 mg, >100 %) como un sólido de aspecto heterogéneo verde/beige pardusco que se usó sin más purificación. LCMS (Método A): Rt = 1.02 min, m/z = 292, 294 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 12.18 -12.08 (m, 1H), 7.86 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H).
Paso 5: tert-Butil 4-((7-(benzo[d][1,3jdioxol-5-il-2,2-d2)-6-cloro-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando Epóxido 1 (123 mg, 0.576 mmol), 7-(benzo[d][1 ,3 ]dioxol-5 -il-2 ,2 -d2)-6 -cloro-3 ,7 -dihidro-4 H-pirrolo[2 ,3 -d)pirimidin-4 -ona (84 mg, 0.288 mmol) y carbonato de cesio (103 mg, 0.317 mmol) en DMF (1.9 mL) dio el compuesto del título (80 mg, 55 %) como una espuma beige claro. LCMS (Método A): Rt = 1.50 min, m/z = 505, 507 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.07 (s, 1H), 7.08 (d, J = 82 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.70 -3.59 (m, 2H), 3.11 -2.99 (m, 2H), 1.58 -1.19 (m, 4H), 1.39 (s, 9H).
Paso 6: 7-(Benzo[d][1,3]dioxol-5-il-2,2-d2)-6-cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona: Se agitó una solución de tert-butil 4 -((7 -(benzo[d][1 ,3 ]dioxol-5 -il-2 ,2 -d2)-6 -cloro-4 -oxo-4 ,7 -dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1 -carboxilato (80 mg, 0.158 mmol) en TFA (0.8 mL) y DCM (1.6 mL) durante 20 min antes de purificar la mezcla de reacción utilizando un cartucho de 2g Biotage SCX-2 (preequilibrado y lavado con 1:1 DCM/MeoH, luego se eludió utilizando 1:1 DCM/7 M NH3 en MeOH), se concentró la fase básica in vacuo para dar el compuesto del título (52 mg, 81 %) como una espuma beige claro. LCMS (Método A): Rt = 0.79 min, m/z = 405, 407 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.07 (s, 1H), 7.08 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.95 (s, 2H), 2.75 - 2.61 (m, 4H), 2.00 (s, 1H), 1.43 (ddd, J = 13.9, 9.8, 4.5 Hz, 2H), 1.27 (dt, J = 13.0, 3.8 Hz, 2H).
Paso 7: 7-(Benzo[d][1,3]dioxol-5-il-2,2-d2)-6-doro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilcidopropano-1-carbonil)piperidin- 4-il)metil)-3.7- dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona: Procedimiento 4 General utilizando 7 -(benzo[d][1 ,3 ]dioxol-5 -il-2 ,2 -d2)-6 -cloro-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (43 mg, 0.106 mmol), ácido 1-metilciclopropano-1-carboxílico (12 mg, 0.117 mmol), Ha Tu (44 mg, 0.117 mmol) y DIPEA (74 pL, 0.425 mmol) en DCM ( 2 mL) dio el compuesto del título (50.9 mg, 97 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 1.07 min, m/z = 487, 489 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.08 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 8.2, 2.2 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.90 (br s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.94 (dt, J = 13.3, 4.2 Hz, 2H), 3.23 - 2.97 (m, 2H), 1.59 - 1.46 (m, 2H), 1.45 - 1.34 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.81 - 0.70 (m, 2H), 0.57 - 0.46 (m, 2H).
Ejemplo 236: 7-(Benzo[d][1,3]d¡oxol-5-¡l-2,2-d2)-6-cloro-3-((1-(2-c¡cloprop¡loxazol-5-carbon¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3,7-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4-ona
Figure imgf000136_0001
Procedimiento 4 General ut¡l¡zando 7-(benzo[d][1,3]d¡oxol-5-¡l-2,2-d2)-6-cloro-3-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-3,7-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4-ona (10 mg, 24.7 jmol), ác¡do 2-ddoprop¡loxazol-5-carboxíl¡co (4.2 mg, 27.2 jmol), DIPEA (17 |jL, 98.8 jm ol) y HATU (10 mg, 27.2 jm ol) en DCM ( 0.5 mL) d¡o el compuesto del título (11 mg, 81 %) como un sól¡do ¡ncoloro después de la l¡of¡l¡zac¡ón. Lc Ms (Método B): Rt = 1.09 m¡n, m/z = 540, 542 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da): 68.09 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.99 (br s, 1H), 4.13 -3.89 (m, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.49 - 3.05 (m, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.17 (tt, J = 8.4, 4.9 Hz, 1H), 1.65 - 1.54 (m, 2H), 1.50 -1.41 (m, 2H), 1.12 - 1.06 (m, 2H), 1.01 - 0.94 (m, 2H).
Ejemplo 237: 3-(4-(Am¡nomet¡l)fen¡l)-6-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropano-1-carbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2,6-d¡h¡dro-7H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7-ona
Figure imgf000136_0002
Paso 1: 3-Bromo-6-((4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona: Se ag¡tó el Producto Intermed¡o C (10 g, 22.6 mmol) en DCM (75 mL) y TFA (37.5 mL) durante 5 m¡n antes de pur¡f¡car la mezcla de reacc¡ón ut¡l¡zando 2 cartuchos de 70 g B¡otage SCX-2 en paralelo (preequ¡l¡brados y lavados con 1:1 DCM/MeOH, luego se elude ut¡l¡zando 1:1 DCM/7 M NH3 en MeOH). Se comb¡naron las fases bás¡cas y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (7.69 g, 99 %) como una espuma ¡ncolora. LCMS (Método A): Rt= 0.32 m¡n, m/z = 342, 344 [M+H]+.
Paso 2: 3-Bromo-6-((4-hidroxi-1-(1-metilcidopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3- d]pirimidin-7-ona: Proced¡m¡ento 4 General ut¡l¡zando 3-bromo-6-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2,6-d¡h¡dro-7H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7-ona (342 mg, 1 mmol), ác¡do 1-met¡lc¡clopropano-1-carboxíl¡co (100 mg, 1 mmol), HATU (380 mg, 1 mmol) y DIPEA (0.699 mL, 4 mmol) en DCM ( 20 mL) d¡o el compuesto del título (348 mg, 82 %) como una espuma de color amar¡llo muy pál¡do. LCMS (Método A): Rt = 0.63 m¡n, m/z = 424, 426 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 68.05 (s, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.99 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.2, 4.2 Hz, 2H), 3.15 (s, 2H), 1.55 - 1.45 (m, 2H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.80 - 0.72 (m, 2H), 0.54 - 0.47 (m, 2H).
Paso 3: tert-Butil (4-(6-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7- dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencil)carbamato: Proced¡m¡ento 5 General ut¡l¡zando 3-bromo-6-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropano-1-carbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-2,6-d¡h¡dro-7H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-7-ona (348 mg, 0.820 mmol), ác¡do (4-(((tert-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)fen¡l)borón¡co (618 mg, 2.46 mmol), K3PO4 (1.04 g, 4.92 mmol), Pd(PPh3)4 (47 mg, 41.0 jmol), 1,4-d¡oxano (6 mL) y agua (2 mL) a 130 °C durante 1 h en un m¡croondas d¡o el compuesto del título (453 mg, 100 %) como una espuma amar¡llo pál¡do. LCMS (Método A): Rt = 1.06 m¡n, m/z = 551 [M+H]+.
Paso 4: 3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H -pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona: Se ag¡tó una soluc¡ón de tert-but¡l (4-(6-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropano-1-carbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benc¡l)carbamato (453 mg, 0.823 mmol) en TFA (4 mL) y DCM ( 8 mL) durante 90 min antes de purificar la mezcla de reacción utilizando un cartucho de 10 g Biotage Sc X-2 (preequilibrado y lavado con 1:1 DCM/MeOH, luego eludido utilizando 1:1 DCM/7 M NH3 en MeOH). Se concentró la fase básica in vacuo y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (cartucho de 40 g sílice GraceResolv, NH3 al 0-30% aprox. 1% en MeOH/DCM) para dar el compuesto del título (278 mg, 73 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt = 0.63 min, m/z = 451 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe): 8 8.00 (s, 1H), 7.71 - 7.60 (m, 2H), 7.56 - 7.43 (m, 2H), 4.89 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.01 (s, 2H), 3.96 (dt, J = 13.1, 4.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.23 - 3.08 (m, 2H), 2.40 (br s, 2H (superpuesto con DMSO)), 1.59 - 1.47 (m, 2H), 1.47 - 1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.83 - 0.72 (m, 2H), 0.58 - 0.45 (m, 2H).
Ejemplo 238: 3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona
Figure imgf000137_0001
Paso 1: 3-Bromo-6-((1-(2-ddopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d ]pirimidin-7-ona: Procedimiento 4 General utilizando 3-bromo-6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (342 mg, 1 mmol) (Ejemplo 237, Paso 1), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (153 mg, 1 mmol), HATU (380 mg, 1 mmol) y DIPEA (0,699 mL, 4 mmol) en Dc M (20 mL) dio el compuesto del título (287 mg, 60 %) como una espuma de color amarillo muy pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.67 min, m/z = 477, 479 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.06 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 4.06 -3.90 (m, 2H), 4.00 (s, 2H), 3.47 - 3.08 (m, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.16 (tt, J= 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.65 - 1.53 (m, 2H), 1.51 - 1.42 (m, 2H), 1.12 -1.06 (m, 2H), 1.01 - 0.95 (m, 2H).
Paso 2: tert-Butil (4-(6-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro -2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencil)carbamato: Procedimiento 5 General utilizando 3-bromo-6-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona (287 mg, 0.601 mmol), ácido (4-(((tert-butoxicarbonil)amino)metil)fenil) borónico (453 mg, 1.80 mmol), K3PO4(766 mg, 3.61 mmol), Pd(PPh3)4 (35 mg, 30.1 pmol), 1,4-dioxano (4.5 mL) y agua (1.5 mL) a 130 °C durante 1 h en un microondas dio el compuesto del título (334 mg, 92 %) como una espuma amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.06 min, m/z = 604 [M+H]+.
Paso 3: 3-(4-(Aminometil)fenil)-6-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-2,6-dihidro-7H- pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona: Se agitó una solución de tert-butil (4-(6-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)bencil)carbamato (334 mg, 0.553 mmol) en TFA (3 mL) y DCM ( 6 mL) durante 90 min antes de purificar la mezcla de reacción utilizando un cartucho Biotage SCX-2 de 10 g ( preequilibrado y lavado con 1:1 DCM/MeOH, luego eludido utilizando 1:1 DCM/7 M NH3 en MeOH). Se concentró la fase básica in vacuo y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (cartucho de 40 g sílice GraceResolv, NH3 al 0-30% aprox. 1% en MeOH/DCM) para dar el compuesto del título (123 mg, 43 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método B): Rt= 0.66 min, m/z = 504 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 8 8.00 (s, 1H), 7.70 -7.60 (m, 2H), 7.56 -7.43 (m, 2H), 7.49 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.19 -3.85 (m, 2H), 4.10 (s, 3H), 4.03 (s, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.55 - 3.03 (m, 2H (señal superpuesta con seña1HDO)), 2.17 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.97 (br s, 2H), 1.65 - 1.55 (m, 2H), 1.53 - 1.44 (m, 2H), 1.15 -1.04 (m, 2H), 1.02 - 0.94 (m, 2H).
Ejemplo 239: 6-Cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona
Paso 1: 4,6-Didoro-7-(3,4-dimetoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina: Se agitó una suspensión de 4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (282 mg, 1.50 mmol), ácido (3,4-dimetoxifenil)borónico (819 mg, 4.50 mmol), 1,10-fenantrolina (541 mg, 3.00 mmol) y acetato de cobre (II) (545 mg, 3.00 mmol) en DMF (30 mL) a TA durante 87 h y se inactivó mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado(100 mL). Se diluyó la mezcla resultante con agua (200 mL) y se extrajo con EtOAc (4 x 50 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se pasaron a través de un separador de fases Biotage y se concentraron in vacuo. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 40 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-80 % en ciclohexano; luego cartucho de 40 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0 % en DCM y luego EtOAc al 5 % en DCM (isocrático)) para dar el compuesto del título (300 mg, 61 %) como un sólido cristalino incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.53 min, m/z = 324, 326 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da): 88.62 (s, 1H), 7.17 - 7.13 (m, 2H), 7.06 - 7.03 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.76 (s, 3H).
Paso 2: 6-Cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona: Se calentó una suspensión de 4,6-dicloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (300 mg, 0.926 mmol) en HCl(ac) 2 M (1.85 mL, 3.70 mmol) y 1,4-dioxano (3 mL) con radiación de microondas a 120 °C durante 2 h antes de concentrar la mezcla de reacción in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (281 mg, 99 %) como un sólido beige. LCMS (Método A): Rt = 0.85 min, m/z = 306, 308 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 812.11 (s, 1H), 7.86 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 6.73 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.76 (s, 3H).
Paso 3: tert-Butil 4-((6-cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il) metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato: Procedimiento 1 General utilizando epóxido 1 (385 mg, 1.81 mmol), 6-cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d ]pirimidin-4-ona (276 mg, 0.903 mmol), carbonato de cesio (324 mg, 0.993 mmol) y Dm F (6 mL) dio el compuesto del título (219 mg, 46 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.42 min, m/z = 519, 521 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 88.07 (s, 1H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.70 -3.61 (m, 2H), 3.12 -2.97 (m, 2H), 1.47 (ddd, J = 13.2, 11.0, 4.5 Hz, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.37 - 1.30 (m, 2H).
Paso 4: 6-Cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona : Se agitó una solución de tert-butil 4-((6-cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-3-il)metil)-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato (219 mg, 0.422 mmol) en TFA (2 mL) y DCM (4 mL) durante 15 min antes de que la mezcla de reacción se purificara utilizando un cartucho de 5 g Biotage SCX-2 (preequilibrado y lavado con 1:1 DCM/MeOH, luego eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se concentró la fase básica in vacuo para dar el compuesto del título (137 mg, 77 %) como un sólido incoloro. Lc Ms (Método A): Rt = 0.68 min, m/z = 419, 421 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 88.07 (s, 1H), 7.12 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 2.75 - 2.62 (m, 4H), 2.03 (s, 1H), 1.43 (ddd, J = 13.9, 9.8, 4.5 Hz, 2H), 1.34 -1.18 (m, 2H).
Paso 5: 6-Cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-3-((4-hidroxi-1-(1-metilcidopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona: Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (70 mg, 0.167 mmol), ácido 1-metilciclopropano-1-carboxílico (18.4 mg, 0.184 mmol), HATU (70 mg, 0.184 mmol) y DIPEA (0.117 ml, 0.669 mmol) en DCM ( 3.2 mL) dio el compuesto del título (82.4 mg, 97 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.14 min, m/z = 501, 503 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 88.08 (s, 1H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.94 (dt, J = 13.2, 4.3 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.17 (s, 2H), 1.57 - 1.47 (m, 2H), 1.43 -1.36 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.81 -0.73 (m, 2H), 0.56 -0.48 (m, 2H).
Ejemplo 240: 6-Cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-7-(3,4-dimetoxifenil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona
Figure imgf000138_0001
Procedimiento 4 General utilizando 6-cloro-7-(3,4-dimetoxifenil)-3-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (70 mg, 0.167 mmol) (Ejemplo 239, Paso 4), ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (28,2 mg, 0,184 mmol), HATU (70 mg, 0,184 mmol) y D ip Ea (0.117 mL, 0.669 mmol) en DCM (3,2 ml) dio el compuesto del título (92.5 mg, 98 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.14 min, m/z = 554, 556 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 88.08 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.11 - 3.91 (m, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.50 - 3.10 (m, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.17 (tt, J = 8.4, 4.9 Hz, 1H), 1.65- 1.55 (m, 2H), 1.50 - 1.42 (m, 2H), 1.12 -1.05 (m, 2H), 1.01 - 0.94 (m, 2H).
Ejemplo 241: 7-(4-(Aminometil)fenil)-6-doro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilcidopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-3,7-d¡h¡dro-4H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4-ona
Figure imgf000139_0001
Paso 1: Se añadió 1-(1-Metilddopropano-1-carbonil)piperídin-4-ona:4 HCl M en 1,4-dioxano (7.5 mL, 30,0 mmol) a una solución de tert-butil 4-oxop¡per¡d¡n-1-carbox¡lato (598 mg, 3.00 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) y después de 20 h, se concentró la reacción in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C. Se le añadió a este material ácido 1-met¡lc¡clopropano-1-carboxíl¡co (300 mg, 3.00 mmol), HATU (1.14 g, 3.00 mmol), DCM (60 mL) y DIPEA (2.10 mL, 12.0 mmol). Se agitó la reacción durante 1 h 45 min, se diluyó con NaHCO3(ac) saturado (60 mL) y se extrajo la mezcla resultante con DCM (3 x 30 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho Biotage KP-NH de 28 g, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (328 mg, 60 %) como un aceite incoloro que solidificó al reposar. LCMS (Método A): Rt = 0.42 min, m/z = 182 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 83.80 (t, J= 6.3 Hz, 4H), 2.38 (t, J= 6.3 Hz, 4H), 1.27 (s, 3H), 0.89 - 0.84 (m, 2H), 0.59 - 0.53 (m, 2H).
Paso 2: (1 -Metilcidopropil)(1-oxa-6-azaspiro[2.5]odan-6-il)metanona: Se añadió una dispersión al 60 % de hidruro de sodio en aceite mineral (109 mg, 2.71 mmol) a una suspensión agitada de yoduro de trimetilsulfonio (554 mg, 2.71 mmol) en DMF (4.5 mL) a temperatura ambiente. Después de 1 h, se añadió gota a gota una solución de 1-(1-met¡lc¡clopropano-1-carbon¡l)p¡per¡d¡n-4-ona (328 mg, 1.81 mmol) en DMF (4.5 mL). Después de 16 h, se diluyó la reacción con agua/NH4Cl(ac) saturado 1:1 (40 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (20 mL) y salmuera (20 mL) antes de pasar por un separador de fases Biotage. Se concentró la solución resultante in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 24 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (136 mg, 38 %) como un aceite amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.61 min, m/z = 196 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 83.79 - 3.66 (m, 2H), 3.63 - 3.43 (m, 2H), 2.68 (s, 2H), 1.69 (ddd, J= 13.1, 8.6, 4.2 Hz, 2H), 1.43 (ddd, J= 13.3, 6.5, 3.8 Hz, 2H), 1.23 (s, 3H), 0.86 - 0.75 (m, 2H), 0.60 - 0.48 (m, 2H).
Paso 3: tert-Butil (4-(4,6-dicloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato: Se agitó una suspensión de 4,6-d¡cloro-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na (940 mg, 5.00 mmol), ácido (4-(((tert- butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)fen¡l)borón¡co (3.77 g, 15.0 mmol), 1,10-fenantrolina (1.80 g, 10.0 mmol) y acetato de cobre (II) (1.82 g, 10.0 mmol) en DMF (100 mL) a TA durante 19 h antes de apagarse mediante la adición de NH4Cl(ac) saturado (150 mL). Se diluyó la mezcla resultante con agua (600 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 150 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (150 mL) y salmuera (150 mL), se pasaron a través de un separador de fases Biotage y se concentraron in vacuo. Se cargó el residuo en seco sobre sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho Biotage KP-S¡l de 100 g, EtOAc al 0-15 % en ciclohexano) para dar una mezcla de material de partida, producto y lo que se supone que es ácido borónico homoacoplado. Se cargó este material en seco sobre sílice y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho Biotage KP-S¡l de 100 g, EtOAc al 0-20 %en DCM) para dar una mezcla 1.5:1 de material de partida y producto (1.06 g). Se suspendió este sólido incoloro en ciclohexano (-200 mL) y se agitó la mezcla resultante durante 20 min antes de filtrarla. Se concentró el filtrado in vacuo para dar el compuesto del título (263 mg, 13 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.71 min, m/z = 393, 395 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 8.61 (s, 1H), 7.53 -7.44 (m, 5H), 7.08 (s, 1H), 4.25 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H).
Paso 4: Acetato de tert-Butil (4-(6-cloro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato: Se calentó a reflujo una mezcla de tert-but¡l(4-(4,6-d¡cloro-7H-p¡rrolo[2,3-d)p¡r¡m¡d¡n-7-¡l)benc¡l)carbamato (260 mg, 0.661 mmol), NaOH(ac) 4 M (0.165 mL, 0.661 mmol) y 1,4-dioxano (2.6 mL). Después de 20,5 h, se añadieron NaOH(ac) 4 M (0.165 mL, 0.661 mmol), agua (0.5 mL) y 1,4-dioxano (2.6 mL). Después de 5,5 h, se añadió más NaOH(ac) 4 M (0.3 mL, 1.2 mmol), 1,4-dioxano (2 mL) y agua (0.5 mL). Después de 20 h, se añadió más NaOH 4 M (0.3 mL, 1.2 mmol). Después de 6 h, se añadió más NaOH 4 M (1.5 mL, 6 mmol). Después de otras 17.5 h, se enfrió la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se diluyó con agua (10 mL). Se ajustó el pH de la mezcla resultante a ~pH 4 mediante la adición de AcOH y se extrajo la mezcla con DCM (3 x 40 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se secó el residuo en un horno de vacío a 50 °C para dar el compuesto del título (247 mg, 85 %) como un sólido marrón. LCMS (Método A): Rt = 1.21 min, m/z = 375, 377 [Macetato]*. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da): 5 12.23 - 11.71 (br m, 2H), 7.85 (s, 1H), 7.53 - 7.33 (m, 5H), 6.76 (s, 1H), 4.23 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 1.91 (s, 3H), 1.41 (s, 9H).
Paso 5: tert-Butil (4-(6-doro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilddopropano-1-carbonil)piperídin-4-il)metil)-4-oxo-3,4- dihidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato: Procedimiento 1 General utilizando (1-metilciclopropil)(1-oxa-6-azaspiro[2,5]octan-6-il)metanona (29 mg, 0.150 mmol), acetato de tert-butil (4-(6-cloro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato (65 mg, 0.150 mmol), carbonato de cesio (107 mg, 0.329 mmol) y DMF (1 mL) dio el compuesto del título (50.9 mg, 59 %) como un sólido amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.35 min, m/z = 570, 572 [M+H]+.
Paso 6: 7-(4-(Aminometil)fenil)-6-doro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilddopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H -pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona: Se agitó una solución de tert-butil (4-(6-cloro-3-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato (50.9 mg, 89.3 pmol) en TFA (0.5 mL) y DCM (1 mL) a TA durante 25 min antes de que se purificara la mezcla de reacción con un cartucho de 2 g Biotage SCX-2 (preequilibrado y lavado con 1:1 DCM/MeOH, luego eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se concentró la fase básica in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 11 g Biotage KP-NH, MeOH al 0-10 % en DCM) para dar el compuesto del título (31.2 mg, 73 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 0.61 min, m/z = 470, 472 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-de): 58.07 (s, 1H), 7.55 - 7.44 (m, 2H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 6.79 (s, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.95 (dt, J = 13.2, 4.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.22 -3.06 (m, 2H), 2.28 (br s, 2H), 1.58 - 1.46 (m, 2H), 1.46 - 1.34 (m, 2H), 1.21 (s, 3H), 0.81 - 0.71 (m, 2H), 0.57 - 0.47 (m, 2H).
Ejemplo 242: 7-(4-(Aminometil)fenil)-6-cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona
Figure imgf000140_0001
Paso 1 :1-(2-Cidopropiloxazol-5-carbonil)piperidin-4-ona: Se añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (7.5 ml, 30.0 mmol) a una solución agitada de tert-butil-4-oxopiperidin-1-carboxilato (598 mg, 3.00 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) y después de 20 h, se concentró la reacción in vacuo y se secó el residuo en una estufa de vacío a 50 °C. A este material se le añadió ácido 2-ciclopropiloxazol-5-carboxílico (459 mg, 3.00 mmol), HATU (1.14 g, 3.00 mmol), DCM (60 mL) y DIPEA (2 . 1 0 mL, 12 . 0 mmol). Después de 1 h 45 min, se diluyó la mezcla de reacción con NaHCO3(ac saturado) (60 mL) y se extrajo la mezcla bifásica resultante con DCM (3 x 30 mL) utilizando un separador de fases Biotage. Se concentraron las fases orgánicas combinadas in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 28 g Biotage KP-NH, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título (280 mg, 39 %) como un aceite incoloro que solidificó al reposar. LCMS (Método A): Rt = 0.49 min, m/z = 235 [M+H]+. 1H RMN (500 Mhz , DMSO-de): 5 7.59 (s, 1H), 3.97 - 3.82 (m, 4H), 2.49 - 2.45 (m, 4H (señal superpuesta con DMSO)), 2.19 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.14 -1.07 (m, 2H), 1.04 - 0.96 (m, 2H).
Paso 2: (2-Cidopropiloxazol-5-il)(1-oxa-6-azaspiro[2.5]octan-6-il)metanona: Se añadió una dispersión al 60 % de hidruro de sodio en aceite mineral (72 mg, 1.79 mmol) a una suspensión agitada de yoduro de trimetilsulfonio (366 mg, 1.79 mmol) en DMF (4 mL) a TA. Después de 1 h, se añadió gota a gota una solución de 1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)piperidin-4-ona (280 mg, 1.12 mmol) en DMF (4 mL). Después de 16 h, se diluyó la reacción con agua/NH4Cl(ac) saturado 1:1 (40 mL) y se extrajo utilizando EtOAc (3 x 20 mL). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua (20 mL) y salmuera (20 mL) antes de pasar por un separador de fases Biotage. Se concentró la solución resultante in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 24 g sílice GraceResolv, EtOAc al 0-100 % en ciclohexano) para dar el compuesto del título ( 86 mg, 28 %) como un aceite amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 0.67 min, m/z = 249 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 57.53 (s, 1H), 3.83 (ddd, J = 13.3, 6.5, 4.3 Hz, 2H), 3.72 - 3.54 (m, 2H), 2.70 (s, 2H), 2.18 (tt, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.78 (ddd, J = 13.2, 8.7, 4.2 Hz, 2H), 1.49 (ddd, J = 13.5, 6.5, 3.9 Hz, 2H), 1.14 -1.06 (m, 2H), 1.03 -0.96 (m, 2H).
Paso 3: tert-Butil (4-(6-doro-3-((1-(2-cidopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-4-oxo-3,4-dihidro -7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato: Procedimiento 1 General utilizando (2-ciclopropiloxazol-5-il)(1-oxa-6-azaspiro[2,5]octan-6-il)metanona (37 mg, 0.150 mmol), acetato de tert-butil (4-(6-cloro-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato (65 mg, 0.150 mmol) (Ejemplo 241, Etapa 4), carbonato de cesio (107 mg, 0.329 mmol) y DMF (1 mL) dio el compuesto del título (47.8 mg, 51 %) como un sólido amarillo. LCMS (Método A): Rt = 1.34 min, m/z = 623, 625 [M+H]+.
Paso 4: 7-(4-(Aminometil)fenil)-6-doro-3-((1-(2-ddopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperídin-4-il)metil)-3,7-dihidro-4H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona: Se agito una solución de tert-butil (4-(6-cloro-3-((1-(2-ciclopropiloxazol-5-carbonil)-4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-4-oxo-3,4-dihidro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)bencil)carbamato (47.8 mg, 76.7 |jmol) en TFA (0.5 mL) y DCM (1 mL) a TA durante 30 min antes de que se purificara la mezcla de reacción utilizando un cartucho de 2 g Biotage Sc X-2 (preequilibrado y lavado con 1:1 DCM/MeOH, luego eludido utilizando 1:1 DCM/7 M en NH3 en MeOH). Se concentró la fase básica in vacuo y se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida (cartucho de 11 g Biotage KP-NH, MeOH al 0-10 % en d Cm ) para dar el compuesto del título (29.8 mg, 72 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 0.65 min, m/z = 523, 523 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-da): 8 8.08 (s, 1H), 7.57 -7.43 (m, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.41 -7.33 (m, 2H), 6.79 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.11 -3.88 (m, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.48 - 3.12 (m, 2H (señal superpuesta con HDO)), 2.57 (br s, 2H (señal superpuesta con DMSO)), 2.17 (tt, J =8.3, 4.9 Hz, 1H), 1.65 - 1.54 (m, 2H), 1.50 - 1.41 (m, 2H), 1.13 - 1.04 (m, 2H), 1.02 -0.93 (m, 2H).
Ejemplo 243: ácido (R)-4-(6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutano)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoico
Figure imgf000141_0001
Paso 1: tert-Butil (R)-4-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro -2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoato: Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (44 mg, 0.090 mmol), ácido (4-(tert -butoxicarbonil)fenil)borónico (60 mg, 0.270 mmol), K3PO4 (115 mg, 0.541 mmol), Pd(PPh3)4 (5.2 mg, 4.5 jmol), 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.2 mL) en un microondas a 120 °C durante 30 min dio el compuesto del título (45 mg, 85 %) como un sólido incoloro. LCm S (Método A): Rt = 1.53 min, m/z = 586 [M+H]+.
Paso 2: Ácido (R)-4-(6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoico: Se agitó una solución de tert-butil (R)-4-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoato (45 mg, 0.077 mmol) en DCM (1 mL) y TFA (0.2 mL) a TA durante 4 h. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo y la purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g sílice GraceResolv, ácido fórmico al 0-30 % aprox. 0.1 % en MeOH/DCM) dio el compuesto del título (29,7 mg, 71 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.06 min, m/z = 530 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 8 13.14 (s, 1H), 8.15 -8.09 (m, 2H), 8.02 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.91 - 7.85 (m, 2H), 7.26 (dd, J = 7.5, 5.6 Hz, 4H), 7.16 (ddt, J = 9.7, 6.4, 2.5 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H), 4.08 -3.87 (m, 3H), 3.65 (s, 1H), 3.27 -3.13 (m, 2H), 2.88 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.62 -2.53 (m, 2H), 1.47 - 1.23 (m, 4H), 1.21 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Ejemplo 244: Ácido (R)-3-(6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoico
Figure imgf000141_0002
Paso 1: tert-Butil (R)-3-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoato: Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio B (40 mg, 0.082 mmol), ácido (3-(tert-butoxicarbonil)fenil)borónico (55 mg, 0.246 mmol), K3PO4 O 04 mg, 0.491 mmol), Pd(PPh3)4 (4.73 mg, 4.1 jmol), 1,4-dioxano (0.5 mL) y agua (0.2 mL) en un microondas a 120 °C durante 15 min dio el compuesto del título (41 mg, 85 %) como un sólido amarillo pálido. LCMS (Método A): Rt = 1.60 min, m/z = 586 [M+H]+.
Paso 2: Ácido (R)-3-(6-((4-Hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoico: Se agitó una solución de tert-butil (R)-3-(6-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-2 met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benzoato (41 mg) en DCM (1 mL) y TFA (0.2 mL) a TA durante 2 h. Se concentró la mezcla de reacción in vacuo y la purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida (12 g sílice GraceResolv, ácido fórmico al 0-30 % aprox. 0.1 % en MeOH/DCM) dio el compuesto del título (31.5 mg, 84 %) como un sólido incoloro después de la liofilización. LCMS (Método A): Rt = 1.13 min, m/z = 530 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe): 613.19 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.07 (dt, J = 7.9, 1.4 Hz, 1H), 8.05 - 7.95 (m, 2H), 7.72 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.26 (dd, J = 7.5, 5.6 Hz, 4H), 7.16 (dq, J = 6.3, 3.3, 2.5 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.08 - 3.87 (m, 3H), 3.65 (s, 1H), 3.28 -3.13 (m, 3H), 2.93 -2.83 (m, 1H), 2.62 -2.56 (m, 1H), 1.33 (dddd, J = 44.1,28.7, 10.6, 4.0 Hz, 4H), 1.21 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Ejemplo 245: Ácido 4-(6-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropano-1-carbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benzo¡co
Figure imgf000142_0001
Paso 1: tert-Butil 4-hidroxi-4-((3-(4-(metoxicarbonil)fenil)-2-metil-7-oxo-2,7-dihidro-6H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-6-il)metil)piperidin-1-carboxilato: Procedimiento 5 General utilizando Producto Intermedio C (300 mg, 0.678 mmol), ácido (4-(metox¡carbon¡l)fen¡l)borón¡co (366 mg, 2.04 mmol), K3PO4 (863 mg, 4.07 mmol), Pd(PPh3)4 (39.2 mg, 33.9 pmol), 1,4-dioxano (2.25 mL) y agua (0.9 mL) en un microondas a 130 °C durante 30 min dio el compuesto del título (240 mg, 71 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 1.22 min, m/z = 498 [M+H]+.
Paso 2: Metil 4-(6-((4-hidroxipiperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoato: Procedimiento 2 General utilizando tert-butil 4-h¡drox¡-4-((3-(4-(metox¡carbon¡l)fen¡l)-2-met¡l-7-oxo-2,7-d¡h¡dro-6H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-6-¡l)met¡l)p¡per¡d¡n-1 -carboxilato (240 mg, 0.482 mmol), Dc M (4 mL) y TFA (2 mL) agitado a TA durante 20 min dio el compuesto del título (170 mg, 88 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.46 min, m/z = 398 [M+H]+.
Paso 3: Metil 4-(6-((4-hidroxi-1-(1-metilciclopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[ 4,3-d]pirimidin-3-il)benzoato: Procedimiento 4 General utilizando metil 4-(6-((4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benzoato (55 mg, 0.138 mmol), ácido 1-met¡lc¡clopropano-1-carboxílico (15.2 mg, 0.152 mmol), HATU (63.1 mg, 0.166 mmol), DIPEA (72.5 pL, 0.415 mmol) y DCM (2 mL) agitado a TA durante 1 h dio el compuesto del título (60 mg, 90 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.93 min, m/z = 480 [M+H]+.
Paso 4: ácido 4-(6-((4-Hidroxi-1-(1-metilcidopropano-1-carbonil)piperidin-4-il)metil)-2-metil-7-oxo-6,7-dihidro-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-3-il)benzoico: Se agitó una mezcla de metil 4-(6-((4-h¡drox¡-1-(1-met¡lc¡clopropano-1-carbon¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-2-met¡l-7-oxo-6,7-d¡h¡dro-2H-p¡razolo[4,3-d]p¡r¡m¡d¡n-3-¡l)benzoato (20 mg, 41.7 pmol) e hidróxido de litio (1.2 mg, 50.0 pmol) en THF (0.25 mL) y agua (0.125 ml) durante 1 hora a 50 °C. Se diluyó en la mezcla de reacción con agua, se acidificó mediante la adición de HCl(ac) 2 M y se extrajo utilizando EtOAc (x 3). Se pasaron las fases orgánicas combinadas por un separador de fases Biotage, se concentraron in vacuo y se purificó el material bruto mediante cromatografía ultrarrápida (4 g Grace Resolv, ácido fórmico al 0-30 % aprox. 0.1 % en MeOH/DCM) para dar el compuesto del título (9.9 mg, 50 %) como un sólido incoloro. LCMS (Método A): Rt = 0.60 min, m/z = 466 [M+H]+. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6): 6 13.17 (s, 1H), 8.12 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 8.05 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.90 (s, 1H), 4.16 (d, J = 2.9 Hz, 3H), 4.02 (s, 2H), 3.96 (dt, J= 13.3, 4.0 Hz, 2H), 3.15 (s, 2H), 1.52 (s, 2H), 1.43 (d, J= 13.2 Hz, 2H), 1.21 (d, J = 2.9 Hz, 3H), 0.77 (s, 2H), 0.52 (s, 2H).
Medición de la actividad inhibidora de USP7
Se controló la actividad de USP7 en un ensayo homogéneo de polarización de fluorescencia (FP) utilizando el sustrato ¡sopéptido ub¡qu¡t¡n-Lys-TAMRA (U-558, Boston Biochem). Se adquirió USP7 de longitud completa de Boston Biochem (H¡s6-USP7FL, E-519). A menos que se indique lo contrario, se adquirieron todos los demás reactivos de Sigma-Aldrich. Se llevaron a cabo las reacciones enzimáticas en placas negras de poliestireno de fondo plano de 384 pocillos (Nunc) y un volumen total de 15 pL. Se incubó USP7 (2.5 nM, 5 pL) en amortiguador de ensayo (HEPES 50 mM (pH 7.2), NaCl 150 mM, EDTA 0.5 mM, DTT 5 mM, BSA al 0-05 % (p/v), CHAPS al 0.05 %) en presencia o ausencia de inhibidor (5 pl). Se almacenaron los inhibidores como licores madre de DMSO 10 mM en un ambiente inerte (baja humedad, oscuridad, poco oxígeno, temperatura ambiente) utilizando un sistema Storage Pod y se prepararon diluciones en serie en amortiguador justo antes del ensayo (de 200 a 0.1 pM, 8 dp curva). Después de la incubación a temperatura ambiente durante 30 min, se iniciaron las reacciones enzimáticas dispensando el sustrato Ub (250 nM, 5 |jL). Se midió FP cada 15 min durante un período de 1.5 h (dentro del intervalo lineal del ensayo) utilizando un lector de placas Synergy 4 (BioTek) excitando a 530 nm y midiendo la cantidad de luz paralela y perpendicular a 575 nm. Se normalizó la señal de FP posteriormente al control sin compuesto presente. Se trazaron y ajustaron los datos, y se calcularon las concentraciones resultaron en una inhibición del 50 % (IC50) utilizando el modelo de ajuste de la curva de regresión no lineal utilizando GraphPad (Prism). Se pueden encontrar los valores de IC50 para los inhibidores de la invención entre los valores de la Tabla 1 anterior y representan el promedio de al menos experimentos por duplicado.
Ensayo de proliferación
Se sembraron células LNCaP de ATCC en formato de placa de 96 pocillos (típicamente 2500 células/pocillo) en sus medios de crecimiento (RPMI, Life Technologies #52400-025 10 % Fetal Calf Serum, Life Technologies #10500-064) y se trataron después de 24 h con concentración creciente de compuesto de 0 a 30 j M. Se evaluó la viabilidad celular después de 168 h por CellTiter-Glo® según lo recomendado por las instrucciones del fabricante (Promega). Se derivaron los valores de Análisis y EC50 utilizando GraphPadPrism.
Ensayo de compromiso objetivo
Se llevó a cabo un ensayo de interacción con el objetivo para demostrar la inhibición de USP7 por parte de los compuestos ejemplificados en las células mediante la competencia con el sustrato de ubiquitina vinil sulfona (Ub-VS). Se trataron las células HCT116 con vehículo (DMSO) o compuesto a diversas concentraciones durante 2 h y posteriormente se lisaron en hielo y se homogeneizaron. A continuación, se añadió la sonda Ub-VS al lisado celular y se incubó en hielo durante 10 min. Las muestras se analizaron mediante sondeo de transferencia Western para USP7.
Se muestran los resultados representativos de este ensayo (del Ejemplo 29) en la Figura 1. Se representan más datos para otros ejemplos a continuación:
Niveles de proteína p53, p21 y MDM2
Se demostró la estabilización de p53, la inducción de p21 y la disminución de MDM2 después del tratamiento con el Ejemplo 29 en 2 líneas celulares (células HCT116 y células SJSA-1) (Figura 2A y 2B respectivamente). Se trataron las células con vehículo (DMSO) o el Ejemplo 29 durante 24 h, se lisaron en amortiguador RIPA y se analizaron las muestras posteriormente mediante sondeo de transferencia Western para USP7, p53, p21 y MDM2. Se observó una estabilización de p53 dependiente de la dosis, inducción de p21 y disminución concomitante en los niveles de MDM2 en ambas líneas celulares.
Selectividad para enzimas desubiquitilantes (DUB)
Se realizaron ensayos bioquímicos y celulares que demostraron la selectividad de los compuestos de la invención por USP7 frente a otras USP, así como clases más amplias de enzimas desubiquitilantes (DUB).
La Figura 3A muestra la selectividad evaluada frente a un panel de 38 DUB (DUBprofiler™, Ubiquigent, Dundee) para el Ejemplo 29 representativo. Se realizó el cribado a una concentración fija de 100 j M y se determinaron los niveles de actividad.
Las Figuras 3B y 3C muestran los resultados de los ensayos celulares de selectividad. Se trataron en la Figura 3B, las células HCT116 con vehículo (DMSO) o compuesto (como se indica, en j M) durante 2 h y posteriormente se lisaron en hielo y se homogeneizaron. A continuación, se añadió la sonda HA-UbVS al lisado celular y se incubó en hielo durante 10 min. Se analizaron las muestras mediante sondeo de transferencia Western para Ha . Los signos y -representan la presencia o ausencia de Ub-VS. La flecha roja indica HA-UbVS USP7 etiquetado. Los datos presentados son para el Ejemplo 29 y son representativos de los datos de los compuestos de la invención. Para la Figura 3C, se aplicó el mismo método que para la Figura 3B utilizando Ub-VS y sondeando las muestras para USP4, USP47, USP11 y USP30. Las concentraciones de compuestos se muestran en j M (como se indica).
Como el DUB relacionado más cercano con USP7, se utilizó USP47 como una prueba estricta de selectividad. Se utilizaron USP4, USP11 y USP30 como miembros representativos generales, no familiares de la familia DUB. Los signos y - representan la presencia o ausencia de Ub-VS. Es sorprendente lo selectivos que son los compuestos de la invención, ya que la homología global entre los DUB daría lugar a una expectativa de reactividad cruzada.
Efecto antiproliferativo del inhibidor de USP7 Ejemplo 29
La Figura 4 muestra un ensayo clonogénico representativo para el compuesto del Ejemplo 29 en células HCT116. Se trataron las células durante 7 días con una concentración creciente del compuesto como se indica.
A continuación, se presentan datos adicionales de los ensayos anteriores para otros compuestos ejemplificados:
Ejemplo 27: EC50 en el intervalo de 50-100 nM en el compromiso del objetivo.
Ejemplo 30: EC50 en el intervalo de 50-100 nM en el compromiso del objetivo.
Ensayo de solubilidad cinética
Procedimiento de ensayo
Se prepararon las muestras añadiendo 4 pL de las soluciones madre de DMSO compuesto 10 mM en 196 pL de amortiguador PBS pH 7.4 en las placas de filtración de 96 pocillos, lo que produjo una concentración de compuesto de 200 pM y DMSO al 2 %. Se preparó el tampón PBS pH 7.4 por el laboratorio de medios de Genentech. Se sellaron las placas de filtro con una película de sellado de aluminio y se agitaron a TA a 1000 rpm. Después de 24 h, se filtraron las soluciones en placas limpias de 96 pocillos utilizando un colector de vacío. Después de la filtración, a menudo se observaba algo de precipitado en el fondo de los pocillos de la placa de filtración. La mayoría de los precipitados parecían ser cristalinos bajo un microscopio de luz polarizante. Se diluyeron las muestras de filtrado por un factor de 2 utilizando amortiguador PBS pH 7.4 y se transfirieron a una placa de 384 pocillos para su análisis mediante UHPLC-CLND (CLND: detector de nitrógeno por quimioluminiscencia). Se inyectaron 5 pL de cada muestra dos veces en UHPLC-CLND para dos análisis repetidos.
Procesamiento de datos y determinación de solubilidad
Se detectaron y analizaron las muestras utilizando UV 254nm y CLND. Se usa UV 254 nm principalmente para confirmar la pureza de la muestra, pero en casos excepcionales también se usa para cuantificar la concentración de compuestos sin nitrógeno, donde se realizó un trabajo adicional para crear una curva de calibración específica del compuesto. Se confirmó la identificación de los picos objetivo CLND de cada compuesto mediante LCMS. Se realizó la cuantificación de la muestra mediante la intensidad máxima de CLND, la curva de calibración y la cantidad de nitrógeno contenido en el compuesto. Se usó una curva de calibración de cafeína para la determinación cuantitativa de la solubilidad. Se creó una nueva curva de calibración para cada lote. Se debe corregir el número de nitrógenos en un compuesto utilizado para esta cuantificación para la configuración real del nitrógeno en el compuesto. [Referencia bibliográfica: Lin et al., J. Pharm. Biomed. Anal., 2016, 122, p126-140].

Claims (13)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de la fórmula (I):
Figure imgf000145_0001
incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable, tautómero, estereoisómero o N-óxido derivado del mismo, en el que:
R1 es H, OH o un grupo alquilo opcionalmente sustituido;
R2 es un grupo alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilcicloalquilo C4-C6 opcionalmente sustituido, arilo C4-C6 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C6 opcionalmente sustituido, ariloxi C4-C8 opcionalmente sustituido, arilalquilo C7-C10 opcionalmente sustituido o heteroarilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido; y
Q está representado por la fórmula (II):
Figure imgf000145_0002
en la que:
R5a es H, halo, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o amino opcionalmente sustituido;
R5b es H, halo, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, bencilo, heteroarilo C3-C6 opcionalmente monosustituido, heterocicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, NR'R", o RaNR'R",
en la que Ra es alquilo C1-C6 o alquenilo C2-C6; y
en la que R' y R" se seleccionan cada uno independientemente de H, alquilo C1-C6 sustituido con oxo, alquilo C1-C6 sustituido con hidroxi, alcoxi C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilamina C1-C7 opcionalmente sustituida, alquenilamina C2-C7 opcionalmente sustituida, heterocicloalquilo C3-C10 opcionalmente sustituido, arilo C4-C10 opcionalmente sustituido, heteroarilo C3-C10 opcionalmente sustituido, alquilarilo C5-C10 opcionalmente sustituido, alquilheterocicloalquilo C4-C10 opcionalmente sustituido y alquilheteroarilo C4-C6, o la que R' y R" juntos forman un heterocicloalquilo C3-C8 opcionalmente sustituido que incluye el N al que están unidos,
en la que para cualquiera de los grupos funcionales para los que uno o más sustituyentes son opcionales, los sustituyentes opcionales se seleccionan independientemente de OH, F, Cl, Br, I, CN, alquilo C1-C6, CF3, CHF2, CHF2 , CH2F, CH2OH, COOH, C(O)CH3 , CH2NHC(O)OCH2CH3, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C3-C6, alcoxi C1-C6, amino, alquilamina C1-C6, arilo C5-C6, heteroarilo C3-C6, bencilo, oxo y amida.
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Q está representado por la fórmula (II):
Figure imgf000145_0003
y:
R5a es H,
R5b se selecciona de pirazol opcionalmente sustituido con metilo o etilamina, y
NR'R", en la que R' y R" se seleccionan cada uno independientemente de H, metilo, ciclohexilamina, etilamina C2-C7 opcionalmente sustituida con metilo, fluoro, fluorofenilo, fenilo opcionalmente sustituido o en la que R' y R" juntos forman un heterocicloalquilo C3-C8 opcionalmente sustituido que incluye el N al que están unidos.
3. Un compuesto de la reivindicación 2, en el que R' es H y R'' es etilpirrolidina opcionalmente sustituida con metilo, fluoro o fluorofenilo.
4. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R2 es CH2CRbRCRd y en el que no más de uno de Rb, RC y Rd son hidrógeno.
5. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que R2 es heteroarilo C3-C5 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, alquilcicloalquilo C4-C6 opcionalmente sustituido, arilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido o grupo heteroarilalquilo C5-C10 opcionalmente sustituido, en el que cada sustituyente opcional se selecciona independientemente de OH, F, metilo, CF3, CHF2, CH2F, CH2OH, alcoxi C1-C4 y cicloalquilo C3-C4.
6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, en el que R2 es etilfenilo opcionalmente sustituido, en el que el grupo etilo está opcionalmente sustituido con metilo, metoximetilo, CF3, CHF2, o CH2F y el grupo fenilo está opcionalmente sustituido con F.
7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 o 6, en el que cuando R2 tiene la estructura CH2CRbRCRd, no más de uno de Rb, RC y Rd es hidrógeno.
8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, en el que el R2 es oxazol opcionalmente sustituido con ciclopropano, o pirazol opcionalmente sustituido con metilo.
9. Un compuesto de la reivindicación 1 que es:
(R)-6-cloro-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(piridin-4-il)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(1H-pirazol-5-il)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(fenilamino)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-6-amino-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-6-((2-(dimetilamino)etil)amino)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-6-((2-(dimetilamino)etil)(metil)amino)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona (R)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(4-metilpiperazin-1-il)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-metoxipirimidin-4(3H)-ona
(R)-6-(2-(dimetilamino)etoxi)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4(3H)-ona
6-((S)-3-aminopirrolidin-1-il)-3-((4-hidroxM-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-6-(3-aminoazetidin-1-il)-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-5-amino-6-cloro-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-(1-isobutil-1H-pirazol-4-il)pirimidin-4(3H)-ona
3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-6-cloro-3-((4-hidroxM-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-5-metilpirimidin-4(3H)-ona
(R)-5-bromo-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)-6-((2-(pirrolidin-1-il)etil)amino)pirimidin-4 (3H)-ona 6-((S)-3-aminopiperidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-((R)-3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona
(R)-6-(4-aminopiperidin-1-il)-3-((4-hidroxi-1-(3-fenilbutanoil)piperidin-4-il)metil)pirimidin-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)pmm¡d¡n-4(3H)-ona 6-((S)-3-(d¡met¡lammo)p¡perid¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H-ona (R,E)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop-1-en-1-¡l)pmm¡d¡n- 4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡perid¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)- ona
(R)-6-(1-(2-(d¡met¡lam¡no)et¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H-ona 6-((E)-3-((R)-3-ammop¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop-1-en-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
6-((E)-3-((S)-3-ammop¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop-1-en-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((S)-1-feml-3-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)propan-2-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((E)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((S)-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((E)-1-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)propan-2-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((S)-1-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)propan-2-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 6-((S)-3-(d¡met¡lammo)p¡rrol¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-((E)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona rac-6-(((±-frans-1,2)-2-am¡noc¡dohex¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
6-(((±-c¡s-1,2)-2-ammoc¡dohex¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡pend¡n-4-¡l)met¡l)-6-((((R)-1-met¡lp¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((((S)-1-met¡lp¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((E)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((S)-2-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((E)-2-(metox¡met¡l)p¡rrol¡dm-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((E)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((S)-3-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 6-((2-((R)-3-fluorop¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡pendm-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona 6-((2-((S)-3-fluorop¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡rim¡d¡n-4(3H-ona (R)-6-((2-(4-fluoro¡so¡ndol¡n-2-¡l)et¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((1-(4,4-d¡fluoro-3-femlbutano¡l)-4-h¡drox¡p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n- 4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-morfol¡nop¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-[4,5'-b¡p¡rim¡d¡n]-6(1H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-h¡drox¡et¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-metox¡et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((R)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)ammo)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-5-met¡l-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4 (3H)-ona (R)-A/-(1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡dropmm¡d¡n-4-¡l)-A/-(2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)acetam¡da
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡perid¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-((E)-2-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡nm¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(femletm¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-benc¡l-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(feml(2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona 3-((1-acet¡l-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((1-(3,3-d¡c¡doprop¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona 3- ((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((R)-2-(h¡drox¡met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-(metox¡met¡l)azet¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(¡soprop¡lam¡no)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-A/-(2-((1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)ammo)et¡l)acetam¡da (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(femlam¡no)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
Tert-but¡l ((1-(1-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)p¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)carbamato
4- (1-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-A/,W,2-tr¡met¡lmorfol¡n-2-carboxam¡da
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-morfol¡nop¡rrol¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(3-h¡drox¡-3-met¡lp¡rrol¡d¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((tetrah¡drofuran-3-¡l)ammo)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡droxM-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2-oxa-7-azasp¡ro[4.4]nonan-7-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona 3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(tetrah¡dro-2H-furo[2,3-c]p¡rrol-5(3H)-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((1-met¡MH-p¡razol-5-¡l)met¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((3-met¡loxetan-3-¡l)ammo)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(4-(1H-p¡razol-5-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-((4-dorobenc¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-(p¡r¡d¡n-3-¡lmet¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-(p¡r¡d¡n-2-¡lmet¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-6-(4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-2-((1-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-W,A/-d¡met¡lacetam¡da (R)-6-(((2,3-d¡h¡drobenzo[6][1,4]d¡ox¡n-6-¡l)met¡l)am¡no)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H-ona
(R)-3-((4-h¡droxM-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)met¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-6-(3-fluoroazet¡d¡n-1-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-h¡drox¡et¡l)(met¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(ddopent¡lam¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(4-met¡l-3-oxop¡peraz¡n-1-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-femlbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(5-oxa-2-azasp¡ro[3.4]odan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-6-((1,3-d¡met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)am¡no)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3Hj-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(8-met¡l-5-oxa-2,8-d¡azasp¡ro[3,5]nonan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-6-(6-acet¡l-2,6-d¡azasp¡ro[3,3]heptan-2-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4 (3H)-ona (R)-6-(5,5-d¡fluoro-2-azasp¡ro[3.3]heptan-2-¡l)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-4 (3H-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(7-oxa-2-azasp¡ro[3.5]nonan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2-oxa-7-azasp¡ro[3.5]nonan-7-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(6-oxa-2-azasp¡ro[3.4]octan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
(R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-h¡drox¡et¡l)(p¡r¡d¡n-3-¡lmet¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(5-met¡l-2,5-d¡azaesp¡ro[3,4]octan-2-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4 (3H)-ona (R)-3-((4-h¡drox¡-1-(3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-(2-oxa-6-azasp¡ro[3.4]octan-6-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((1R,5S)-3-met¡l-3,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]octan-6-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((4-h¡drox¡-1-((R)-3-fen¡lbutano¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((1S,5R)-3-met¡l-3,6-d¡azab¡c¡clo[3.2.1]octan-6-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((1-(3-c¡clobut¡lpropano¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona
3-((1-(2,2-d¡c¡clobut¡lacet¡l)-4-h¡drox¡p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)-6-((2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona o una sal farmacéut¡camente aceptable, tautómero, estereo¡sómero o N-óx¡do der¡vado del m¡smo.
10. Una compos¡c¡ón farmacéut¡ca que comprende un compuesto de acuerdo con una cualqu¡era de las re¡v¡nd¡cac¡ones 1-9 o una sal farmacéut¡camente aceptable del m¡smo y al menos un exc¡p¡ente farmacéut¡camente aceptable.
11. Un compuesto o compos¡c¡ón de acuerdo con una cualqu¡era de las re¡v¡nd¡cac¡ones 1-10 para uso en terap¡a.
12. Un compuesto o compos¡c¡ón de acuerdo con cualqu¡era de las re¡v¡nd¡cac¡ones 1-10 para su uso en el tratam¡ento del cáncer, opc¡onalmente en el que el cáncer está asoc¡ado con la desregulac¡ón de p53, opc¡onalmente en el que el cáncer se selecc¡ona de una neoplas¡a mal¡gna hematológ¡ca, cáncer de próstata, un neuroblastoma o un gl¡oblastoma.
13. Un compuesto o compos¡c¡ón para usar de acuerdo con una cualqu¡era de las re¡v¡nd¡cac¡ones 11 o 12, en el que el compuesto o compos¡c¡ón se usa en comb¡nac¡ón con uno o más de un agente ant¡cancerígeno, un agente ant¡¡nflamator¡o, un agente ¡nmunomodulador, un agente ¡nmunosupresor, un agente neurológ¡co, un agente ant¡d¡abét¡co, un agente ant¡v¡ral, un agente ant¡bacter¡ano y rad¡oterap¡a.
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