ES2905614T3 - Formulación de proteína de fusión recombinante - Google Patents
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Abstract
Una formulación líquida de una proteína de fusión recombinante, que comprende una proteína de fusión recombinante, una sal de tampón, un estabilizante, un tensioactivo y agua estéril para inyección, en donde, la proteína de fusión recombinante tiene una concentración de 5 a 45 mg/ml; la sal de tampón se selecciona de sal de citrato, sal de acetato o cualquier combinación de los mismos, y tiene una concentración de 5 a 25 mmol/l; el estabilizante es un aminoácido o una combinación de un poliol y un aminoácido, en donde el aminoácido es arginina y el poliol es sacarosa; y el aminoácido tiene una concentración de 50 a 350 mmol/l; y el poliol tiene una concentración del 1-15 % en peso, basado en el peso total de la formulación líquida; el tensioactivo se selecciona de polisorbato 20, polisorbato 80, poloxámero 188, o cualquier combinación de los mismos y tiene una concentración del 0,01-0,08 % en peso, basado en el peso total de la formulación líquida; y el pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7,5; la proteína de fusión recombinante es una proteína de fusión recombinante de receptor de factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerpo-receptor de complemento humano 1 que tiene una secuencia de aminoácidos como se muestra en el SEQ ID NO. 1 o el SEQ ID NO. 3.
Description
DESCRIPCIÓN
Formulación de proteína de fusión recombinante
Campo técnico
La presente invención pertenece al campo de las formulaciones farmacéuticas biotécnicas, y en particular se refiere a formulaciones de proteínas de fusión recombinantes estables, a métodos de preparación y uso de las mismas.
Antecedentes de latécnica
La degeneración macular asociada a la edad (DMAE), también conocida como degeneración macular senil, es un cambio senescente de la estructura macular de la retina, y principalmente es una disminución o pérdida irreversible de la visión causada por las células del epitelio pigmentario de la retina y la degeneración de la retina. La enfermedad se divide clínicamente en DMAE seca (atrófica) y DMAE húmeda (exudativa), de las cuales, la DMAE húmeda representa alrededor del 20 % del número total de casos de DMAE. Pero en los países occidentales, la DMAE húmeda es la razón principal de la ceguera para los ancianos. La proliferación vascular anormal intraocular es una de las principales causas de la aparición y el desarrollo de la DMAE húmeda, y el bloqueo de la proliferación vascular anormal es la base del tratamiento de la DMAE húmeda. Puede ralentizar o incluso prevenir el proceso de la enfermedad. El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) es una proteína secretora que puede inducir angiogénesis, aumentar la permeabilidad vascular y causar inflamación. Y estos factores están estrechamente relacionados con el desarrollo de la DMAE húmeda. Por lo tanto, en el desarrollo de medicamentos para el tratamiento de la DMAE húmeda, VEGF es una posible diana terapéutica.
La proteína de fusión recombinante del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerporeceptor del complemento humano 1 (en lo sucesivo denominada IBI302) es una macromolécula diseñada y desarrollada para la enfermedad de DMAE basada en el mecanismo anterior. Es un nuevo fármaco de Categoría Estatal I con propiedad intelectual global diseñado por el solicitante. La vía de administración está diseñada para inyección intravítrea y se espera que la dosis sea de 0,5 a 2 mg/ojo.
Desde el año 1982, después de la introducción del primer fármaco recombinante (insulina artificial), se han desarrollado cada vez más fármacos de proteínas de fusión recombinantes mediante la tecnología de ingeniería de proteínas. Algunos de ellos han sido aceptados como fármacos convencionales. Sin embargo, dado que dicho fármaco es un polipéptido o proteína de gran peso molecular, su rendimiento es muy inestable, propenso al deterioro, y muy probablemente a la autoagregación bajo alta concentración de la proteína. Estos factores desfavorables suponen un gran desafío para convertir estos fármacos en fármacos estables, formulaciones seguras y efectivas.
La proteína de fusión recombinante es una biomacromolécula, cuya estructura es muy compleja. Durante el proceso de producción y almacenamiento, varios cambios físicos y químicos ocurrirán en las moléculas de proteína expresadas. Los cambios físicos son: adsorción, desnaturalización en desarrollo, agregación y precipitación. Los cambios químicos son: desamidación, isomerización, oxidación y así sucesivamente. Estos cambios pueden influir en la seguridad y eficacia del producto final. Por lo tanto, es importante establecer una formulación adecuada para proteger la estabilidad y seguridad del producto.
IBI302 es una proteína de fusión específica de doble diana y es un nuevo fármaco de la categoría estatal I. Debido a su estructura compleja, la proteína es inestable en propiedades químicas y es propensa a la agregación y los isómeros de carga se convierten fácilmente del componente alcalino al componente ácido. IBI302 se analiza en una reunión de ARVO Resumen de Wang et al (Vol. 55, abril de 2014).
El documento WO2013/082563 proporciona proteínas de fusión biespecíficas que inhiben la activación de la vía del complemento y la vía del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y métodos para usar estas proteínas de fusión. El documento WO2007/062040 proporciona composiciones de proteínas de fusión de Ig, especialmente composiciones que incluyen una proteína de fusión de Ig, un agente espesante, un disacárido, un tensioactivo y un tampón. El documento WO2006/104852 desvela formulaciones de un antagonista de la proteína de fusión del factor de crecimiento endotelial vascular (específico de VEGF) que incluye una formulación preliofilizada, una formulación liofilizada reconstituida y una formulación líquida estable. La proteína de fusión puede tener la secuencia del SEQ ID NO: 4. El documento EP3199555 desvela una formulación líquida que permite el almacenamiento estable de proteínas de fusión recombinantes, que comprende una proteína de fusión recombinante, una sal de tampón, un estabilizante y un tensioactivo. El documento CN103212075 desvela un colirio que contiene antagonista de VEGF (0,05-9,0 mg/ml).
Por lo tanto, todavía existe la necesidad en la técnica de desarrollar una formulación de proteína recombinante para proteger la estabilidad del producto.
Sumario de la invención
Un objetivo de la presente invención es proporcionar una formulación de proteína de fusión recombinante, que puede
estabilizar la proteína de fusión a una concentración más alta. Además, la formulación puede mantener su estabilidad en condiciones de aceleración de alta temperatura, refrigeración a largo plazo y congelación y descongelación repetidas, mejorando así la seguridad del uso clínico.
La invención se establece en las reivindicaciones. En el primer aspecto de la presente invención, se proporciona una formulación líquida de una proteína de fusión recombinante, que comprende una proteína de fusión recombinante, una sal de tampón, un estabilizante, un tensioactivo y agua estéril para inyección, en donde,
la concentración de la proteína de fusión recombinante es de 5 a 45 mg/ml;
la sal de tampón se selecciona de sal de citrato, sal de acetato o cualquier combinación de los mismos, y la concentración de la sal es de 5 a 25 mmol/l, preferentemente 8-22 mmol/l;
el estabilizante es un aminoácido o una combinación de un poliol (alcohol polihídrico) y un aminoácido, donde el aminoácido se selecciona de arginina y el poliol se selecciona de sacarosa; y la concentración de aminoácido es de 50 a 350 mmol/l; y la concentración de poliol es 1-15 % en peso, basado en el peso total de la formulación líquida;
el tensioactivo se selecciona de polisorbato 20, polisorbato 80, poloxámero 188, o cualquier combinación de los mismos y la concentración del tensioactivo es 0,01-0,08% en peso, basado en el peso total de la formulación líquida;
y el pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7,5; la proteína de fusión recombinante es una proteína de fusión recombinante de receptor de factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerpo-receptor de complemento humano 1, que tiene una secuencia de aminoácidos como se muestra en el SEQ ID NO. 1 o el SEQ ID NO. 3.
En otra realización preferida, el estabilizante es una combinación de arginina y sacarosa.
En otra realización preferida, la concentración de aminoácido es de 70 a 260 mmol/l.
En otra realización preferida, la concentración de poliol es 3-10 % en peso.
En otra realización preferida, la concentración de poliol es de 200 a 300 mmol/l, preferentemente de 220 a 270 mmol/l. En otra realización preferida, el pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7,0.
En otra realización preferida, la sal de tampón es citrato; el aminoácido es arginina; el poliol es sacarosa; y el tensioactivo es polisorbato 20.
En la presente invención, la sal de tampón es citrato de sodio, acetato de sodio o una combinación de los mismos. En el segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un kit que comprende una formulación líquida según el primer aspecto de la presente invención y un recipiente que contiene la formulación líquida.
Además, el kit contiene además una instrucción.
En el tercer aspecto de la presente invención, la formulación líquida se proporciona según el primer aspecto de la presente invención para su uso en la prevención y/o tratamiento de la degeneración macular asociada a la edad. En otra realización preferida, la degeneración macular asociada a la edad es la degeneración macular asociada a la edad húmeda.
La formulación líquida de la presente invención puede mantener estable la proteína de fusión recombinante, para que la proteína recombinante pueda estar presente de manera estable en los medicamentos recetados, se puede mejorar la calidad del producto, se prolonga la vida útil y se mejora la seguridad del uso clínico. La formulación líquida tiene buena estabilidad térmica y puede permanecer estable en la aceleración de alta temperatura, refrigeración a largo plazo y condiciones repetidas de congelación y descongelación.
Debe entenderse que, en la presente invención, las características técnicas descritas específicamente anteriormente y a continuación (tales como los ejemplos) pueden combinarse entre sí, constituyendo así una solución técnica nueva o preferida, que no es necesario especificar uno por uno.
Descripción detallada de la invención
A través de extensas e intensas investigaciones, los inventores han descubierto inesperadamente y por primera vez una formulación de proteína de fusión recombinante que puede mantener el producto estable bajo la aceleración, condiciones de congelación y descongelación a largo plazo. Las proteínas de fusión recombinantes (inhibidores de VEGF) que pueden usarse en la presente invención también incluyen proteínas de fusión recombinantes (inhibidores de VEGF) obtenidas mediante otras técnicas de ingeniería genética. Basándose en este descubrimiento, los inventores
han completado la presente invención.
Proteína defusión recombinante de receptorde factor de crecimientoendotelial vascular humano-anticuerporeceptor de complemento humano1
La proteína recombinante de la presente invención es una proteína de fusión recombinante de receptor de factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerpo-receptor de complemento humano 1 (véase US61/629.932 (PCT/US2012/067489); título de la invención: Inhibidores de proteínas del complemento y vías de VEGF y Métodos de uso de los mismos); cuya secuencia de aminoácidos se muestra en el SEQ ID NO. 1 o el SEQ ID NO. 3.
Formulación líquida
La formulación líquida de una proteína de fusión recombinante de la presente divulgación comprende una proteína de fusión recombinante, una sal de tampón, un estabilizante, un tensioactivo y agua estéril para inyección.
En otro aspecto de la divulgación, la formulación líquida comprende una proteína de fusión recombinante, una sal de tampón, un aminoácido, un tensioactivo y agua estéril para inyección.
En otro aspecto de la divulgación, la formulación líquida comprende una proteína de fusión recombinante, una sal de tampón, un poliol, un aminoácido, un tensioactivo y agua estéril para inyección.
La concentración de proteína de fusión recombinante es de 5 a 45 mg/ml.
La sal de tampón es uno o una combinación de dos o más tipos de sal de citrato y sal de acetato, y la concentración de la sal es de 5 a 25 mmol/l, preferentemente de 8-22 mmol/l.
El estabilizante es uno o una combinación de dos o más clases de un aminoácido y un poliol.
El aminoácido es la arginina. La concentración de aminoácido es de 50 a 350 mmol/l, preferentemente de 70-260 mmol/l.
El poliol es sacarosa. La concentración de poliol es 1-15 % en peso, preferentemente del 3-10 % en peso.
El tensioactivo es uno o una combinación de dos o más tipos de polisorbato 20, polisorbato 80, poloxámero 188. La concentración de tensioactivo es 0,01-0,08 % en peso, preferentemente del 0,02-0,06 % en peso, basado en el peso total de la formulación líquida.
El pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7,5.
La formulación líquida de la presente invención o un kit que comprende la formulación líquida se puede usar para la prevención y/o el tratamiento de la degeneración macular asociada a la edad como se establece en las reivindicaciones. La proteína recombinante se puede mantener estable, el producto puede ser de alta calidad y larga vida útil y se mejora la seguridad del uso clínico.
Las principales ventajas de la presenteinvención comprenden:
(1) La presente invención proporciona una formulación novedosa con una vida útil más larga que permite que la proteína de fusión recombinante, tal como la proteína de fusión recombinante del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerpo-receptor del complemento humano 1 permanecen estables. La formulación puede permanecer estable bajo la aceleración de alta temperatura, refrigeración a largo plazo y condiciones repetidas de congelación y descongelación.
(2) En la formulación líquida de la presente invención, se puede mejorar la estabilidad fisicoquímica de la formulación de proteína de fusión recombinante, para que la proteína recombinante pueda estar presente de manera estable en el medicamento recetado, se mejora la calidad del producto, se prolonga la vida útil y se mejora la seguridad del uso clínico.
La presente invención se ilustrará adicionalmente a continuación con referencia a los ejemplos específicos. Debe entenderse que estos ejemplos son solo para ilustrar la invención, no limitar el alcance de la invención. Los métodos experimentales sin condiciones específicas descritos en los siguientes ejemplos se realizan generalmente en las condiciones convencionales (por ejemplo, las condiciones descritas por Sambrook et al., Molecular Cloning-A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989), o según las instrucciones del fabricante. Salvo que se indique de otro modo, las partes y el porcentaje se calculan en peso.
A menos que se defina de otra forma, todos los términos profesionales y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado con el que están familiarizados los expertos en la materia. Además, cualquier método y
material similar o equivalente a los contenidos descritos en el presente documento se puede aplicar al método de la presente invención. Las realizaciones preferidas y los materiales descritos en el presente documento son solo para fines de ejemplo.
Método general
Método SEC-HPLC: se realiza de acuerdo con el Apéndice III B de la "Farmacopea de la República Popular China" (edición de 2010, tercera parte), en la detección se utiliza una columna de exclusión por tamaño de gel de sílice hidrofílica y la pureza de la muestra se calcula con el método de normalización del área.
Isomerización de carga (cIEF): la muestra se ionizó aplicando un voltaje en ambos extremos del capilar usando una electroforesis capilar Beckman (Modelo: PA800 plus) y un capilar neutro recubierto (50 p m i.d x 45 cm). Después de la ionización, el gráfico se integró y analizó con el programa informático 32Karat, y se calculó según el método de normalización de áreas.
CDB: Se utilizó MIcroCal VP-DSC, la temperatura inicial fue de 10 °C, la temperatura final fue de 110 °C y la velocidad de exploración fue de 60 °C/h. Los valores finales de Tm de cada muestra se obtuvieron después de restar el tampón correspondiente.
Ejemplo 1
El efecto de los aminoácidos, polioles y cloruro de sodio en la estabilidad de la proteínade fusión
Se prepararon varias soluciones con agua inyectable estéril como se muestra en la Tabla 1, y la proteína de fusión (secuencia de aminoácidos como se muestra en el SEQ ID NO. 3) se sometió a sustitución por ultrafiltración con las respectivas soluciones preparadas.
El fluido de sustitución de ultrafiltración con la concentración de proteína de fusión de 10 mg/ml se diluyó a 1,5 mg/ml con la solución correspondiente. Después, se tomó 1,5 ml de la dilución y se añadió una cantidad adecuada de polisorbato 20 hasta una concentración final de 0,03 % en peso. Se obtuvo una muestra para la detección después de la filtración utilizando un filtro de 0,2 pm.
Además, se tomaron 5 ml de la solución descrita en la Tabla 1 y se adicionó una cantidad adecuada de polisorbato 20 para que la concentración final de la misma fuera de 0,03 % y luego se filtró a través de un filtro de 0,2 pm como tampón blanco de control. Los valores de Tm para diferentes estabilizantes de proteínas se midieron mediante el método DSC. Los resultados experimentales se mostraron en la Tabla 2.
^
2 s
Los valores finales de Tm de las muestras respectivas se obtuvieron restando los blancos de solución correspondientes de 14 muestras diferentes. Los resultados mostraron que las 14 muestras presentaron una alta estabilidad térmica. En donde la estabilidad térmica de los grupos de muestra 1-1, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 1-6, 1-7, 2-3, 2-4, 2-6, 2-7 fue la mejor seguida por la de los grupos muestrales 2-1,2-2, 2-5. Los resultados mostraron que las formulaciones de proteína de fusión recombinante que constaban de los componentes de la Tabla 1 y la proteína de fusión recombinante presentaban una mejor estabilidad térmica.
Ejemplo 2
Estabilidad del pH
Las soluciones de cada pH se prepararon con agua inyectable estéril de acuerdo con la Tabla 3, y la proteína de fusión (secuencia de aminoácidos como se muestra en el SEQ ID NO. 3) se sometió a sustitución por ultrafiltración con las soluciones preparadas.
El fluido de sustitución de ultrafiltración con la concentración de proteína de fusión de 10 mg/ml se diluyó a 1,5 mg/ml con la solución correspondiente. Después, se tomó 1,5 ml de la dilución y se añadió una cantidad adecuada de polisorbato 20 hasta una concentración final de 0,03 % en peso. Se obtuvo una muestra para la detección después de la filtración utilizando un filtro de 0,2 pm.
Además, se tomaron 5 ml de la solución de cada valor de pH y se adicionó una cantidad adecuada de polisorbato 20 para que la concentración final del mismo fuera del 0,03 % y luego se filtró a través de un filtro de 0,2 pm como tampón blanco de control. Los valores de Tm para diferentes valores de pH se midieron mediante el método DSC. Los resultados experimentales se mostraron en la Tabla 4.
T l : M r iliz n l m l ili H
T l 4: R l D ili l H
Los valores de Tm de las diferentes muestras de 6 grupos obtenidos al restar el tampón correspondiente mostraron que las muestras 1-4 presentaron una alta estabilidad térmica seguida por la muestra 5, y la Tm de la muestra 6 fue ligeramente más baja, lo que indica que la proteína de fusión recombinante presentó una alta estabilidad térmica dentro de un pH de 5,5 a 7,0.
Ejemplo 3
Formulación de proteína de fusión recombinante receptor de factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerpo-receptorde complemento humano 1
La formulación se preparó de acuerdo con la siguiente fórmula y la secuencia de aminoácidos de la proteína de fusión se mostró en el SEQ ID NO. 3.
Formulación A
la proteína de fusión recombinante 10mg/ml;
Citrato de sodio 10 mmol/l;
Arginina 80mmol/l;
Sacarosa 5 % en peso;
Polisorbato 20 0,03 % en peso;
pH 6,2
Disolvente el agua estéril para inyección
Bajo la condición estéril, el producto semiacabado se subenvasó en viales y se estamparon con tapones de goma y cubiertas de plástico de aluminio para obtener productos terminados.
Formulación B
La proteína de fusión recombinante 40mg/ml;
Citrato de sodio 10 mmol/l;
Arginina 80mmol/l;
Sacarosa 5 % en peso;
Polisorbato 20 0,03 % en peso;
pH 6,2
Disolvente el agua estéril para inyección
Bajo la condición estéril, el producto semiacabado se subenvasó en viales y se estamparon con tapones de goma y cubiertas de plástico de aluminio para obtener productos terminados.
Ejemplo 4
Experimento de estabilidad acelerada
Las muestras del Ejemplo 3 se almacenaron en una incubadora a 25 °C para experimentos de estabilidad acelerada. Después de un mes, se tomaron las muestras y se compararon con los resultados de la prueba a los 0 días para medir la estabilidad acelerada de la formulación en condiciones de alta temperatura. Los resultados detallados se mostraron en la tabla 5 y la tabla 6.
Tabla 5: L r l l m i n l i m riz i n r r ín 2 ° ± 2 ° (PI > 8,0)
Tabla 6: Los resultados de los cambios en la pureza de la proteína a 25 °C±2 °C (porcentaje del pico principal de
SEC
La estabilidad química de la proteína de fusión recombinante se caracterizó por enfoque isoeléctrico capilar (cIEF) y pureza de la proteína (SEC-HPLC). Se utilizaron como medios de determinación el cambio en el porcentaje de punto isoeléctrico PI > 8,0 y el contenido del pico principal de pureza proteica (SEC-HPLC). Los resultados mostraron que el contenido de isómeros de carga en las Formulaciones A y B no cambió significativamente después de 1 mes de experimento acelerado (véase la Tabla 5). Al mismo tiempo, el contenido del pico principal en las Formulaciones A y
B no cambió significativamente (véase la Tabla 6), mientras que otros indicadores, tales como el aspecto, la concentración de proteínas, la turbidez y demás en las condiciones aceleradas no cambiaron significativamente. Los resultados demostraron que, a 25 °C, la proteína de fusión recombinante en ambas formulaciones podría mantenerse estable durante al menos 1 mes.
Ejemplo 5
Experimento de estabilidad a largo plazo
La muestra utilizada en este ejemplo fue la misma que la del Ejemplo 4, es decir, la formulación preparada en el Ejemplo 3. Las muestras se almacenaron en una incubadora a 2-8 °C para experimentos de estabilidad a largo plazo. Las muestras se tomaron al tercer y sexto mes y se compararon con los resultados de la prueba al día 0 para medir la estabilidad a largo plazo de la formulación a baja temperatura.
Los resultados experimentales se mostraron en las Tablas 7 y 8.
Tabla 7: L r l l m i n l i m riz i n r r ín 2- ° PI> 8,0)
Tabla 8: L r l l m i n l r z l r ín 2- ° r n l i rin i l de SEC)
Los resultados mostraron que no hubo cambios significativos en la isomerización de carga (cIEF) y la pureza de la proteína (SEC-HPLC) dentro de los 6 meses en condiciones de almacenamiento a largo plazo a 2-8 °C. Mientras que otros indicadores, tales como el aspecto, la concentración de proteínas, la turbidez y demás no cambiaron significativamente bajo las condiciones de aceleración. Los resultados mostraron que ambas formulaciones podían almacenarse durante al menos 6 meses en condiciones a largo plazo.
Ejemplo 6
Estabilidad de congelación-descongelación
La muestra utilizada en este ejemplo fue sustancialmente la misma que la formulación del Ejemplo 3, excepto que la secuencia de aminoácidos de la proteína de fusión se muestra en el SEQ ID NO. 1. Las muestras se congelaron a -80 °C y se descongelaron a temperatura ambiente. Las muestras se congelaron y descongelaron repetidamente tres veces o seis veces. Los resultados se mostraron en las Tablas 9 y 10.
Tabla 9: Los resultados de los cambios en la isomerización de la carga de proteínas en condiciones de congelación y descon elación PI> 80
Tabla 10: Los resultados de los cambios en la pureza de la proteína en condiciones de congelación y
n l i n r n l i rin i l E
Los resultados mostraron que no hubo cambios significativos en la isomerización de carga (cIEF) y la pureza de la proteína (SEC-HPLC) para los tres grupos de muestra después de congelar y descongelar 6 veces y otros indicadores de prueba, tales como el aspecto y la materia extraña visible relacionada con las propiedades físicas fueron calificados. Los resultados mostraron que las propiedades físicas y químicas de la formulación se mantuvieron estables después
Claims (13)
1. Una formulación líquida de una proteína de fusión recombinante, que comprende una proteína de fusión recombinante, una sal de tampón, un estabilizante, un tensioactivo y agua estéril para inyección, en donde, la proteína de fusión recombinante tiene una concentración de 5 a 45 mg/ml;
la sal de tampón se selecciona de sal de citrato, sal de acetato o cualquier combinación de los mismos, y tiene una concentración de 5 a 25 mmol/l;
el estabilizante es un aminoácido o una combinación de un poliol y un aminoácido, en donde el aminoácido es arginina y el poliol es sacarosa; y el aminoácido tiene una concentración de 50 a 350 mmol/l; y el poliol tiene una concentración del 1-15 % en peso, basado en el peso total de la formulación líquida;
el tensioactivo se selecciona de polisorbato 20, polisorbato 80, poloxámero 188, o cualquier combinación de los mismos y tiene una concentración del 0,01-0,08 % en peso, basado en el peso total de la formulación líquida; y el pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7,5;
la proteína de fusión recombinante es una proteína de fusión recombinante de receptor de factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerpo-receptor de complemento humano 1 que tiene una secuencia de aminoácidos como se muestra en el SEQ ID NO. 1 o el SEQ ID NO. 3.
2. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde la proteína de fusión recombinante es una proteína de fusión recombinante de receptor de factor de crecimiento endotelial vascular humano-anticuerpo-receptor de complemento humano 1 que tiene una secuencia de aminoácidos como se muestra en el SEQ ID NO. 1.
3. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde el estabilizante es una combinación de arginina y sacarosa.
4. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde el aminoácido tiene una concentración de 70 a 260 mmol/l.
5. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde el poliol tiene una concentración de 220 a 270 mmol/l.
6. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde el pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7,2.
7. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde el pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7, y la formulación líquida comprende:
la proteína de fusión recombinante 5-45mg/ml;
citrato 5-15 mmol/l;
arginina 50-100 mmol/l;
sacarosa 2-8 % en peso;
polisorbato 20 0,02-0,06 % en peso;
y el agua estéril para inyección.
8. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde la sal de tampón es citrato; el poliol es sacarosa; y el tensioactivo es polisorbato 20.
9. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde el pH de la formulación líquida es de 5,5 a 7,0.
10. La formulación líquida de la reivindicación 1, en donde la sal de tampón se selecciona de citrato, acetato o cualquier combinación de los mismos, y tiene una concentración de 8 a 22 mmol/l.
11. Un kit que comprende una formulación líquida según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 y un recipiente que contiene la formulación líquida.
12. Una formulación líquida según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 o un kit según la reivindicación 11 para su uso en la prevención y/o el tratamiento de la degeneración macular asociada a la edad.
13. La formulación líquida o kit para uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde la degeneración macular asociada a la edad es degeneración macular asociada a la edad húmeda.
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