ES2899196T3 - Derivados de pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina y de pirazolo[1,5-a]pirimidina como inhibidores de CDK - Google Patents

Abstract

Compuesto según la fórmula (IB): **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable o un estereoisómero del mismo; donde, X es CH o N; el anillo B es cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo o inexistente; R1 es hidrógeno, alquilo o cicloalquilo; R2 es un alquilo, cicloalquilo o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido; donde los sustituyentes opcionales son amino, halo, hidroxi, alquilo, alcoxi, alcoxialcoxi, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo; R3 en cada aparición es independientemente halo, alquilo, hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo; R4 en cada aparición es independientemente **(Ver fórmula)** o **(Ver fórmula)** donde, R5 y R5" en cada aparición son independientemente hidrógeno o alquilo; R5' es hidrógeno, halo, alquilo, alcoxialquilo o -CH2-NRaRb; R6 es hidrógeno o alquilo; Ra y Rb son independientemente hidrógeno o alquilo; o Ra y Rb, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido que presenta 0-2 heteroátomos adicionales seleccionados de entre O, S y N; donde el sustituyente opcional es uno o más de alquilo o halo; L1 es -O- o -NH-; L2 está ausente o es alquileno C1-C6 opcionalmente sustituido, donde una o más unidades de metileno del alquileno está sustituida opcionalmente e independientemente con -C(O)-, -O-, -N(R7)- o cicloalquileno; donde R7 es hidrógeno o alquilo; m es de 0 a 1; n es 0, 1 o 2; p es 1, 2 o 3; y q es de 0 a 1.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina y de pirazolo[1,5-a]pirimidina como inhibidores de CDK

[0001] La presente solicitud reivindica el derecho de la solicitud provisional india número 1128/CHE/2015 presentada el 9 de marzo de 2015.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

[0002] La presente invención se refiere a compuestos que inhiben la actividad de quinasas dependientes de ciclinas (CDK) transcripcionales selectivas incluyendo CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 y CDK18, más particularmente la quinasa transcripcional dependiente de ciclina 7 (CDK7). La invención también proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden compuestos de la presente invención y métodos de uso de dichas composiciones en el tratamiento de enfermedades o trastornos asociados a CDK transcripcionales selectivas.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0003] Uno de los procesos más importantes y fundamentales en biología es la división de las células mediada por el ciclo celular. Este proceso garantiza la producción controlada de generaciones posteriores de células con una función biológica definida. Es un fenómeno muy regulado y responde a un conjunto complejo de señales celulares tanto dentro de la célula como desde fuentes externas. Una red compleja de productos génicos de promoción y supresión de tumores son componentes clave de este proceso de señalización celular. La sobreexpresión de componentes promotores tumorales o la posterior pérdida de los productos de supresión tumoral derivará en una proliferación celular no regulada y la generación de tumores (Pardee, Science 246:603-608, 1989).

[0004] Las quinasas son enzimas celulares importantes que realizan funciones celulares esenciales tales como la regulación de la división celular y la proliferación, y también parecen desempeñar un papel decisivo en muchos estados patológicos que están caracterizados por una proliferación descontrolada y la diferenciación de las células. Estos estados patológicos abarcan una variedad de tipos celulares y enfermedades como cáncer, ateroesclerosis, restenosis y otros trastornos proliferativos (Kris MG et al.; "Efficacy of gefitinib, an inhibitor of the epidermal growth factor receptor tyrosine kinase, in symptomatic patients with non-small cell lung cancer: a randomized trial". JAMA 290 (16): 2149-58, octubre de 2003;.

[0005] Las quinasas dependientes de ciclinas (CDK) son proteínas relativamente pequeñas, con pesos moleculares que oscilan entre 34 y 40 kDa, y contienen poco más que el dominio quinasa. La CDK se une a una proteína reguladora denominada ciclina. Sin la ciclina, la c Dk tiene poca actividad quinasa; solo el complejo ciclina-CDK es una quinasa activa. Las CDK fosforilan sus sustratos en serinas y treoninas, por lo que son quinasas serina-treonina (Morgan, David O., The Cell Cycle: Principles of Control. Londres: New Science Press, 1.a edición, (2007;;.

[0006] Los miembros de la familia de quinasas dependientes de ciclinas (CDK) desempeñan funciones reguladoras críticas en la proliferación celular. Actualmente existen 20 CDK conocidas de mamíferos. Mientras que la CDK7-13 y 18 se han vinculado a la transcripción, solo la CDK1, 2, 4 y 6 muestran una asociación demostrable con el ciclo celular. Siendo única entre las CDK de mamíferos, la CDK7 ha consolidado actividades quinasa, que regulan tanto el ciclo celular como la transcripción. En el citosol, la CDK7 existe como un complejo heterotrimérico y se cree que funciona como una quinasa activadora de CDKl/2 (CAK), por lo que se requiere la fosforilación de residuos conservados en CDK1/2 por CDK7 para la actividad CDK catalítica completa y la progresión del ciclo celular (Desai et al., Mol. Cell Biol. 15, 345-350 (1995;;.

[0007] La CDK7, que se compleja con la ciclina H y MAT1, fosforila las CDK de ciclo celular en la activación del bucle T, para promover sus actividades (véase, p. ej., Fisher et al., 1994). Como tal, se ha propuesto que la inhibición de CDK7 proporcionaría un medio de inhibición potente de la progresión del ciclo celular, que puede ser especialmente relevante puesto que hay pruebas convincentes de estudios de bloqueo de genes en ratones para la carencia de un requisito absoluto de CDK2, CDK4 y CDK6 para el ciclo celular, al menos en la mayoría de tipos celulares (véase, p. ej., Malumbres et al., 2009), mientras que los tumores diferentes parecen requerir algunas, pero ser independientes de otras CDK de interfase (CDK2, CDK4, CDK6). Recientes estudios genéticos y bioquímicos han confirmado la importancia de la CDK7 para la progresión del ciclo celular (véase, p. ej., Larochelle et al., 2007; Ganuza et al., 2012).

[0008] La quinasa dependiente de ciclinas 7 (CDK7) activa las CDK de ciclo celular y es un miembro del factor de transcripción II humano general (TFIIH). La CDK7 también desempeña una función en la transcripción y posiblemente en la reparación de ADN. El complejo Cak trimérico CDK7/CiclinaH/MAT1 es también un componente del TFIIH, el factor de transcripción/reparación de ADN general IIH (revisado en Morgan, D. O., Annu Rev Cell Dev Biol 13, 261-91, (1997;). Como subunidad de TFIIH, la CDK7 fosforila el CTD (dominio carboxi-terminal) de la subunidad más grande de la ARN polimerasa II (pol II). El CTD de la pol II de mamíferos consiste en 52 repeticiones héptadas con la secuencia de consenso 1YSPTSPS7 y el estado de fosforilación de los residuos Ser en las posiciones 2 y 5 ha demostrado ser importante en la activación de RNAP-II, lo que indica que es probable que desempeñe un papel crucial en la función del CTD. La CDK7, que fosforila principalmente la Ser-5 (PS5) de RNAP-11 en el promotor como parte de la iniciación transcripcional (Gomes et al., 2006;, a diferencia de la CDK9, que fosforila tanto la Ser-2 como la Ser-5 de la héptada CTD (Pinhero et al., 2004).

[0009] Además de la CDK7, se ha informado que otras CDK fosforilan y regulan el CTD de la ARN pol (II). Las otras CDK incluyen Cdk9/ Ciclina T1 o T2, que constituyen la forma activa del factor de elongación de la transcripción positiva (P-TEFb) (Peterlin y Price, 2006) y Cdk12/Ciclina K y Cdk13/Ciclina K como los últimos miembros de las quinasas de CTD RNAPII (Bartkowiak et al., 2010; Blazek et al., 2011).

[0010] La interrupción de la fosforilación del CTD RNAP II ha mostrado tener efecto preferentemente en proteínas con vidas medias cortas, incluyendo las de la familia antiapoptótica BCL-2. (Konig et al., "The novel cyclin-dependent kinase inhibitor flavopiridol downregulates Bcl-2 and induces growth arrest and apoptosis in chronic B-cell leukemia lines." (Blood 1,4307-4312 (1997); Gojo et al.) El flavopiridol, inhibidor transcripcional no selectivo de quinasas dependientes de ciclinas, induce la apoptosis en múltiples células de mieloma a través de la represión transcripcional y la regulación a la baja de Mcl-1; (Clin. Cancer Res. 8, 3527-3538 (2002)).

[0011] Esto sugiere que los complejos enzimáticos CDK7 están implicados en múltiples funciones en la célula: control del ciclo celular, regulación de la transcripción y reparación de ADN. Resulta sorprendente descubrir una quinasa implicada en dichos diversos procesos celulares, algunos de los cuales son incluso mutuamente exclusivos. También es desconcertante que múltiples intentos de descubrir cambios dependientes del ciclo celular en la actividad quinasa CDK7 fueron infructuosos. Esto es inesperado puesto que la actividad y el estado de fosforilación de su sustrato, CDC2, fluctúan durante el ciclo celular (Larochelle, S. et al. Genes Dev 12,370-81, (1998)). De hecho, el flavopiridol, un inhibidor pan-CDK no selectivo que se dirige a las quinasas CTD, ha mostrado eficacia para el tratamiento de la leucemia linfocítica crónica (CLL, por sus siglas en inglés), pero adolece de un perfil de toxicidad pobre (Lin et al., "Phase II study of flavopiridol in relapsed chronic lymphocytic leukemia demonstrating high response rates in genetically high-risk disease." J. Clin. Oncol. 27, 6012-6018 (2009); Christian et al., "Flavopiridol in chronic lymphocytic leukemia: a concise review." Clin. Lymphoma Myeloma 9 Supl. 3, S179-S185 (2009)).

[0012] Estudios in vitro han revelado preferencias de sustrato para los diferentes complejos CDK7, lo que indica que la CDK7 puede formar diferentes complejos con distinta especificidad de sustrato y presumiblemente diferentes funciones in vivo (Frit, P. et al., Biochimie 81, 27-38, (1999); Schutz, P. et al. Cell 102, 599-607, (2000)).

[0013] Se han indicado varios inhibidores de CDK en la literatura, incluyendo WO2006052936A2, WO2007038314A2, WO2008119792A1, WO2013169401A1, US20020091263A1, WO20 08151304A1, WO2010103486A1, WO2010003133A2, WO2005026129A1, WO2012045195A1, WO2007038314A2, EP2 634190A1, WO2008151304A1, US20120184557A1, etc.

[0014] Por ejemplo, el documento EP2634190A1 da a conocer derivados de pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina utilizados como inhibidores para CDK7. Estos derivados son útiles para la profilaxis y/o el tratamiento de enfermedades proliferativas celulares, enfermedades inflamatorias e inmunológicas, enfermedades cardiovasculares y enfermedades infecciosas. El documento WO2008151304A1 describe una clase de compuestos derivados de la pirazolo[1,5-a]pirimidina como inhibidores muy específicos de quinasas dependientes de ciclinas. La solicitud da a conocer específicamente derivados de 7-amino 3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina con sustituyentes bencílicos en el grupo amino tan particularmente efectivos como inhibidores específicos de CDK7. El documento US20120184557A1 da a conocer derivados de pirazolo[1,5-a]-1,3,5-triazina que presentan actividad inhibitoria contra proteínas quinasas. Estos derivados resultan particularmente útiles para inhibir quinasas dependientes de ciclinas (CDK), quinasas de caseína 1 (CKl) y DYRKS. También, además de estas referencias, Shiota et al. (Chem Pharm. Bull. 47(7), 928-938 (1999)) da a conocer derivados de pirazolo[1,5-a]pirimidina y análogos del ácido 7-oxo-4,7-dihidropirazol[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico como antagonistas potentes de la angiotensina II en el sistema renina-angiotensina.

[0015] Se advierte la necesidad de nuevos compuestos, formulaciones, tratamientos y terapias para tratas enfermedades y/o trastornos asociados con CDK selectivas transcripcionales que incluyen CDK7, c DK9, CDK12, CDK13 y CDK18; más concretamente, CDK7. Por lo tanto, es un objeto de la presente invención proporcionar compuestos útiles en el tratamiento y/o prevención o mejora de dichas enfermedades y/o trastornos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS ADJUNTOS:

[0016] Figura 1: Actividad antitumoral in vivo del inhibidor de CDK7 en el modelo de xenoinjerto MV4-11 AML en ratones desnudos atímicos.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

[0017] En el presente documento se proporcionan derivados de pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina y pirazolo[1,5-a]pirimidina y composiciones farmacéuticas de los mismos, que son útiles como inhibidores de CDK transcripcionales selectivas. Se describen compuestos según la fórmula (I):

o una sal farmacéuticamente aceptable o un estereoisómero del mismo;

donde,

X es CH o N;

el anillo A es arilo monocíclico o bicíclico, heteroarilo o heterocicloalquilo;

el anillo B es cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo o inexistente;

Ri es hidrógeno, alquilo o cicloalquilo;

R2 es un alquilo, cicloalquilo o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido; donde los sustituyentes opcionales son amino, halo, hidroxi, alquilo, alcoxi, alcoxialcoxi, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo;

R³ en cada aparición es independientemente halo, alquilo, hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo; R⁴ en cada aparición es independientemente halo, alquilo, hidroxi, alcoxi, -(NH)q-S(O)²-

donde Rsy R⁵" en cada aparición son independientemente hidrógeno o alquilo; R⁵' es hidrógeno, halo, alquilo, alcoxialquilo o -CH²-NRaRb;

R6 es hidrógeno o alquilo;

Ra y Rb son independientemente hidrógeno o alquilo; o Ra y Rb, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido que presenta 0-2 heteroátomos adicionales seleccionados de entre O, S y N; donde el sustituyente opcional es uno o más de alquilo o halo;

L1 es -O-, -S-, -NH- o ausente;

L2 está ausente o es alquileno C1-C6 opcionalmente sustituido, donde una o más unidades de metileno del alquileno está sustituida opcionalmente e independientemente con -C(O)-, -O-, -N(R7)- o cicloalquileno; donde R7 es hidrógeno o alquilo;

m es de 0 a 1;

n es 0, 1 o 2;

p es 1,2 o 3; y

q es de 0 a 1.

[0018] En otro aspecto, la presente descripción proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la fórmula (I) y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable (tal como un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable).

[0019] En otro aspecto adicional, la presente descripción se refiere a la preparación de compuestos de la fórmula (I). En el presente documento se describen derivados de pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina y pirazolo[1,5-a]pirimidina según la fórmula (I), que son útiles para uso médico. En concreto, para el tratamiento o la prevención de enfermedades y/o trastornos donde se desea una inhibición de CDK transcripcional selectiva.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

[0020] A no ser que se definan de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado que el que entiende comúnmente un experto en la materia a la que pertenece el objeto del presente documento. Tal y como se usan en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones anexas, a no ser que se especifique lo contrario, los siguientes términos tienen el significado indicado para facilitar la comprensión de la presente invención.

[0021] Tal y como se utiliza en el presente documento, el término «opcionalmente sustituido o «grupos adecuados» se refiere a la sustitución de uno o más radicales de hidrógeno en una estructura determinada con un radical de un sustituyente específico, incluyendo, aunque sin carácter limitativo: halo, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heterociclilo, tiol, alquiltio, ariltio, alquiltioalquilo, ariltioalquilo, alquilsulfonilo, alquilsulfonilalquilo, arilsulfonilalquilo, alcoxi, ariloxi, aralcoxi, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, arilaminocarbonilo, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, haloalquilo, amino, ciano, nitro, alquilamino, arilamino, alquilaminoalquilo, arilaminoalquilo, aminoalquilamino, hidroxi, alcoxialquilo, carboxialquilo, alcoxicarbonilalquilo, aminocarbonilalquilo, acilo, aralcoxicarbonilo, ácido carboxílico, ácido sulfónico, sulfonilo, ácido fosfónico, arilo, heteroarilo y heterocíclico. Se entiende que el sustituyente puede sustituirse más.

[0022] Tal y como se utiliza en el presente documento, a no ser que se defina de otro modo, el término «alquilo» solo o en combinación con otro(s) término(s) implica cadenas de hidrocarburos alifáticos saturados, incluyendo grupos alquilo C¹-C¹⁰ rectos o C¹-C¹⁰ ramificados. Entre los ejemplos de «alquilo» se incluyen, aunque sin carácter limitativo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, isopentilo o neopentilo y similar.

[0023] Tal y como se usa en el presente documento, el término «halo» o «halógeno» solo o en combinación con otro(s) término(s) significa flúor, cloro, bromo o yodo.

[0024] El término «hidroxi» o «hidroxilo» se refiere al grupo -OH.

[0025] El término «amino» se refiere al grupo -NH².

[0026] Tal y como se utiliza en el presente documento, el término «alcoxi» o «alcoxilo» se refiere al grupo alquil-O- o -O­ alquilo, donde los grupos alquilo son los definidos anteriormente. Ejemplos del grupo alquilo C¹-C¹⁰ que contienen grupos alcoxi incluyen, aunque sin carácter limitativo, metoxi, etoxi, n-propoxi, n-butoxi, t-butoxi y similares. Un grupo alcoxi puede estar sustituido o no sustituido con uno o más grupos adecuados.

[0027] Tal y como se utiliza en el presente documento, el término «alcoxilalcoxi» se refiere al grupo alquil-O-alcoxi- o -alcoxi-O-alquilo, donde los grupos alcoxi se han definido anteriormente. Ejemplos de grupos alcoxilalcoxi incluyen, aunque sin carácter limitativo, metoxietoxi, etoxietoxi, metoxipropoxi, etoximetoxi, etoxipropoxi, propoximetoxi, propoxietoxi y similares.

[0028] Como se utiliza en el presente documento, el término «cicloalquilo» solo o en combinación con otro(s) término(s) implica anillo de hidrocarburos cíclicos saturados -C³-C¹⁰. Un cicloalquilo puede ser un único anillo, que normalmente contiene de 3 a 7 átomos de anillo de carbono. Ejemplos de cicloalquilos de anillo único incluyen, aunque sin carácter limitativo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y similares. Un cicloalquilo puede ser alternativamente policíclico o contener más de un anillo. Ejemplos de cicloalquilos policíclicos incluyen carbociclilos puenteados, fusionados y espirocíclicos, y similares.

[0029] Tal y como se utiliza en el presente documento, el término «arilo» es un sistema de anillo de hidrocarburos aromático monocíclico, bicíclico o policíclico opcionalmente sustituido de aproximadamente 6 a 14 átomos de carbono. Ejemplos de un grupo arilo C⁶-C¹⁴ incluyen, aunque sin carácter limitativo, fenilo, naftilo, bifenilo, antrilo, tetrahidronaftilo, fluorenilo, indanilo, bifenilenilo y acenaftilo. El grupo arilo puede estar sustituido o no sustituido con uno o más grupos adecuados.

[0030] El término «heterocicloalquilo» se refiere a un sistema de anillo no aromático, saturado o parcialmente saturado, monocíclico o policíclico de 3 a 15 miembros que tiene al menos un heteroátomo o heterogrupo seleccionado de entre O, N, S, S(O), S(O)², NH o C(O), seleccionándose el resto de átomos del anillo independientemente del grupo que consiste en carbono, oxígeno, nitrógeno y azufre. Ejemplos de «heterocicloalquilo» incluyen, aunque sin carácter limitativo, azetidinilo, oxetanilo, imidazolidinilo, pirrolidinilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo, pirazolidinilo, tetrahidrofuranilo, piperidinilo, piperazinilo, tetrahidropiranilo, morfolinilo, oxapiperazinilo, oxapiperidinilo, tetrahidrofurilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiofenilo, dihidropiranilo, indolinilo, indolinilmetilo, azepanilo y sus N-óxidos de los mismos. La fijación de un sustituyente de heterocicloalquilo puede tener lugar ya sea mediante un átomo de carbono o un heteroátomo. Un grupo heterocicloalquilo puede sustituirse opcionalmente con uno o más grupos adecuados por uno o más grupos anteriormente mencionados.

[0031] Tal y como se utiliza en el presente documento, el término «heteroarilo» solo o en combinación con otro(s) término(s) implica un sistema de anillo completamente insaturado que contiene un total de 5 a 14 átomos de anillo. Al menos uno de los átomos del anillo es un heteroátomo (es decir, oxígeno, nitrógeno o azufre), seleccionándose el resto de átomos/grupos del anillo independientemente del grupo que consiste en carbono, oxígeno, nitrógeno o azufre. Un heteroarilo puede ser un sistema de anillo de anillo único (monocíclico), bicíclico o policíclico. Entre los ejemplos de «heteroarilo» se incluyen, aunque sin carácter limitativo, piridilo, piridina-1-óxido, indolilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo y similares. El término heteroarilo incluye sus N-óxidos de los mismos.

[0032] El término «heteroátomo», según se utiliza en el presente documento, designa un átomo de azufre, nitrógeno u oxígeno.

[0033] Según se utiliza en el presente documento, el término «compuesto(s)» comprende los compuestos dados a conocer en la presente invención.

[0034] Según se utiliza en el presente documento, el término «comprender» o «comprendiendo» se utiliza generalmente en el sentido de incluir, es decir, permite la presencia de una o más características o componentes.

[0035] Según se utiliza en el presente documento, el término «o» significa «y/o» a no ser que se indique lo contrario.

[0036] Según se utiliza en el presente documento, el término «incluyendo», así como otras formas, tales como «incluir», «incluye» e «incluido/a(s)», no es limitativo.

[0037] Según se utiliza en el presente documento, el término «composición» pretende abarcar un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de la combinación de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas. Por «farmacéuticamente aceptable» se entiende que el vehículo, diluyente o excipiente debe ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial para el receptor de la misma.

[0038] Según se utiliza en el presente documento, el término «tratar», «tratando» y «tratamiento» se refieren a un método de alivio o anulación de una enfermedad y/o sus síntomas acompañantes.

[0039] Según se utiliza en el presente documento, el término «prevenir», «previniendo» y «prevención» se refieren a un método de prevención del inicio de una enfermedad y/o sus síntomas acompañantes o de exclusión de un sujeto de adquirir una enfermedad. Según se utiliza en el presente documento, «prevenir», «previniendo» y «prevención» también incluyen retrasar el inicio de una enfermedad y/o sus síntomas acompañantes y reducir el riesgo de un sujeto de adquirir una enfermedad.

[0040] Según se utiliza en el presente documento, el término «sujeto» al que se contempla la administración incluye, aunque sin carácter limitativo, humanos y/o animales no humanos; por ejemplo, mamíferos y aves. En ciertas formas de realización, el animal es un mamífero. Un animal no humano puede ser un animal transgénico.

[0041] Según se utiliza en el presente documento, el término «administrar», «administrando» o «administración» se refiere a implantar, absorber, ingerir, inyectar, inhalar o introducir de otro modo un compuesto de la fórmula (I) o una composición farmacéutica de este.

[0042] Según se utiliza en el presente documento, el término «cantidad terapéuticamente efectiva» se refiere a la cantidad del compuesto administrado que es suficiente para prevenir el desarrollo o para aliviar en cierta medida uno o más de los síntomas de la afección o trastorno tratado.

[0043] «Farmacéuticamente aceptable» significa que es útil para preparar una composición farmacéutica que es generalmente segura, no tóxica ni indeseable biológicamente ni tampoco de otro modo, e incluye la que es aceptable para uso veterinario, así como para uso farmacéutico en humanos.

[0044] El término «estereoisómeros» o «isómeros» se refiere a cualquier enantiómero, diastereoisómero o isómero geométrico de los compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); cuando sean quirales o cuando presenten uno o más enlaces dobles. Cuando los compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); y las fórmulas relacionadas, sean quirales, estos pueden existir en forma racémica u ópticamente activa. Debe entenderse que la invención abarca todas las formas isoméricas estereoquímicas, incluyendo formas diastereoméricas, enantioméricas y epiméricas, así como d-isómeros y /-isómeros y mezclas de los mismos. Pueden prepararse estereoisómeros individuales de compuestos sintéticamente a partir de materiales de partida disponibles comercialmente que contienen centros quirales o mediante la preparación de mezclas de productos enantioméricos seguida de separación, tal como la conversión a una mezcla de diastereómeros seguida por separación o recristalización, técnicas cromatográficas, separación directa de enantiómeros en columnas cromatográficas quirales o cualquier otro método apropiado conocido en la técnica. Los compuestos de partida de estereoquímica particular están disponibles comercialmente o bien pueden realizarse y resolverse mediante técnicas conocidas en la técnica. Asimismo, los compuestos de la presente invención pueden existir como isómeros geométricos. La presente invención incluye todos los isómeros cis, trans, sin, anti, entgegen (E) y zusammen (Z), así como las mezclas apropiadas de los mismos.

[0045] Según se utiliza en el presente documento, el término «CDK» se refiere a una quinasa dependiente de ciclinas. Una CDK se une a una ciclina (p. ej., la ciclina H), que es una proteína reguladora. Las CDK fosforilan sus sustratos en serinas y treoninas. Las CDK incluyen CDK1, CDK2, CDK2, CDK4, CDK5, CDK7, CDK8, CDK9, CDK10, CDK11, CDK12, CDK13, CDK14, CDK16, CDK18 y CDK20. La CDK7 es una CDK en la que el sustrato es ciclina H, MAT1 (p. ej., MNAT1) o un complejo de ciclina H y MAT1. El término inhibidor de CDK se refiere a un inhibidor de CDK transcripcional selectivo.

[0046] Se describen derivados de pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina y pirazolo[1,5-a]pirimidina de la fórmula (I), que son útiles para la inhibición de CDK transcripcionales selectivas, particularmente c Dk7, CDK9, CDK 12, c Dk 13 o CDK18 transcripcionales selectivas, más particularmente la CDK7 transcripcional selectiva.

[0047] Se describen composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos sustituidos de pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina y pirazolo[1,5-a]pirimidina y sus derivados como agentes terapéuticos.

[0048] De acuerdo con una primera forma de realización, se describen compuestos de la fórmula (I)

o una sal farmacéuticamente aceptable o un estereoisómero de los mismos;

donde,

X es CH o N;

el anillo A es arilo monocíclico o bicíclico, heteroarilo o heterocicloalquilo;

el anillo B es cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo o inexistente;

R¹ es hidrógeno, alquilo o cicloalquilo;

R² es un alquilo, cicloalquilo o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido; donde los sustituyentes opcionales son amino, halo, hidroxi, alquilo, alcoxi, alcoxialcoxi, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo;

R³ en cada aparición es independientemente halo, alquilo, hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo; R⁴ en cada aparición es independientemente

donde, R5y R⁵" en cada aparición son independientemente hidrógeno o alquilo; R5' es hidrógeno, halo, alquilo, alcoxialquilo o -CH²-NRaRb;

R⁶ es hidrógeno o alquilo;

Ra y Rb son independientemente hidrógeno o alquilo; o Ra y Rb, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido que presenta ^{0 - 2} heteroátomos adicionales seleccionados de entre O, S y N; donde el sustituyente opcional es uno o más de alquilo o halo;

L¹ es -O-, -NH-;

L² está ausente o es alquileno C¹-C⁶ opcionalmente sustituido, donde una o más unidades de metileno del alquileno está sustituida opcionalmente e independientemente con -C(O)-, -O-, -N(R7)- o cicloalquileno; donde R⁷ es hidrógeno o alquilo;

m es de ⁰ a ¹ ;

n es ⁰ , ¹ o ² ;

p es 1, 2 o 3; y

q es de ⁰ a ¹.

[0049] En otro aspecto de la presente descripción, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (IA): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo;

donde,

el anillo A, anillo B, Li, L², Ri, R² , R³, R⁴, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I).

[0050] De acuerdo con la presente descripción, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (IB):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo;

donde,

X, el anillo B, L1, L2, R1, R2, R3, R4, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I).

[0051] En otro aspecto adicional de la presente descripción, el compuesto de la fórmula (I) es un compuesto de la fórmula (IC):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo;

donde,

R² es cicloalquilo opcionalmente sustituido o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido;

X, el anillo A, el anillo B, L2, R1, R3, R4, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I).

[0052] En otra forma de realización de la presente invención, el compuesto de la fórmula (IB) es un compuesto de la fórmula (ID):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo;

donde,

R² es cicloalquilo opcionalmente sustituido o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido;

X, el anillo B, L2, R1, R3, R4, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I).

[0053] En otra forma de realización de la presente invención, el compuesto de la fórmula (IB) es un compuesto de la fórmula (IE):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo;

donde,

X, el anillo B, L2, Ri, R3, R4, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I).

[0054] En otra forma de realización de la presente invención, el compuesto de la fórmula (IB) es un compuesto de la fórmula (IF):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo;

donde,

X, Li, Ri, R², R³ , R⁴, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I). Se describen compuestos de la fórmula (I) y (IA); donde, el anillo A es arilo, y el anillo B, X, Li, L² , Ri, R² , R³, R⁴, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I).

[0055] Se describen compuestos de la fórmula (I) y (IA); donde el anillo A es heteroarilo o heterocicloalquilo monocíclico o bicíclico y sus N-óxidos del mismo, y el anillo B, X, Li , L2, Ri , R2, R3, R4, R6, m, n y p son iguales que los definidos en la fórmula (I).

[0056] De acuerdo con otra forma de realización adicional, la presente invención proporciona compuestos de la fórmula (IB), (ID), (IE) y (IF); donde X es N.

[0057] De acuerdo con otra forma de realización adicional, la presente invención proporciona compuestos de la fórmula (IB), (ID) y (IE); donde L2 está ausente o se selecciona de entre -NHC(O)-, - C(O)Nh-, -OC(O)-,

[0058] De acuerdo con otra forma de realización adicional, la presente invención proporciona compuestos de la fórmula (IB), (ID) y (IE); donde el anillo B está ausente o se selecciona de entre fenilo, ciclohexilo, piperidinilo, pirrolidinilo, azitidinilo, i-metil-iH-pirazol, piperazinilo y morfolinilo.

[0059] Las formas de realización que se indican abajo son ilustrativas de la presente descripción.

[0060] De acuerdo con ciertas formas de realización de la presente descripción, se proporcionan específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); donde Ri es hidrógeno, alquilo o cicloalquilo; preferiblemente, dicho alquilo es etilo o isopropilo y dicho cicloalquilo es ciclopropilo.

[0061] De acuerdo con ciertas formas de realización de la presente descripción, se proporcionan específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); donde R2 es cicloalquilo o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido; preferiblemente el cicloalquilo opcionalmente sustituido es

y particularmente el heterocicloalquilo opcionalmente sustituido es

[0062] Según ciertas formas de realización de la presente descripción, se proporcionan específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); donde, R2 es alquilo opcionalmente sustituido con amino, alcoxi o alcoxialcoxi; preferiblemente R2 es metilo, aminobutilo, metoxietilo, isobutanilo y metoxietoxietilo.

[0063] De acuerdo con ciertas formas de realización de la presente descripción, se proporcionan específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); donde R6 es hidrógeno o alquilo; preferiblemente, dicho alquilo es metilo.

[0064] Según ciertas formas de realización de la presente descripción, se proporcionan específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA) y (IC); donde el anillo A es fenilo, piperidinilo, piridilo y piridina-N-óxido.

[0065] De acuerdo con ciertas formas de realización de la presente descripción, se proporcionan específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); donde R3 es halo o alquilo; preferiblemente, dicho halo es fluoro y dicho alquilo es metilo o etilo.

[0066] Según ciertas formas de realización de la presente descripción, se proporcionan específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); donde R⁴ es -(NH)q-S(O)²-CH=CH² , -(NH)q-CH²-CH=CH-C(O)-NRaRb,

y R5, R5', R⁵", Ra, Rb y q son los mismos que los definidos en la fórmula (I).

[0067] De acuerdo con la forma de realización anterior, se describen específicamente compuestos de la fórmula (I), (IA), (IB), (IC), (ID), (IE) y (IF); donde R⁴ es

[0068] Según ciertas formas de realización, la presente invención proporciona compuestos de la fórmula (I) en la que 'm' y 'n' son independientemente 0 o 1; y 'p' es 1.

[0069] De acuerdo con ciertas formas de realización, la presente descripción proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo.

[0070] En ciertas formas de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la fórmula (IB), (ID), (IE) y (IF) o una sal farmacéuticamente aceptable de este o un estereoisómero de este según lo descrito en el presente documento y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable (tal como un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable). Preferiblemente, la composición farmacéutica comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto descrito en el presente documento. Los compuestos descritos en la presente solicitud de patente pueden estar asociados con un excipiente farmacéuticamente aceptable (tal como un vehículo o un diluyente) o diluidos por un vehículo o encerrados en un vehículo que puede estar en forma de cápsula, sobre, papel u otro contenedor.

[0071] En otra forma de realización más, se cree que los compuestos de la presente descripción son inhibidores de quinasa. En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores de CDK. En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores de CDK7. En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores de CDK selectivos (p. ej., son más activos en la inhibición de una CDK que una quinasa no CDK). En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores de CDK7 selectivos (p. ej., son más activos en la inhibición de CDK7 que una quinasa no CDK7). En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos de CDK9. En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos de CDK12. En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos de CDK13. En ciertas formas de realización, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos de CDK18.

[0072] En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento y/o prevención de una enfermedad y/o trastorno asociado con CDK transcripcionales selectivas.

[0073] En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un sujeto que padece una enfermedad o afección asociada con una actividad aberrante de las CDK transcripcionales selectivas.

[0074] En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la fórmula (IB), (ID), (IE) y (IF) para su uso en el tratamiento y/o prevención de una enfermedad y/o trastorno asociado con inhibidores selectivos transcripcionales de CDK, particularmente, el inhibidor transcripcional selectivo es CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18; más particularmente, CDK7.

[0075] En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la fórmula (IB), (ID), (IE) y (IF) para su uso en el tratamiento de un sujeto que padece una enfermedad o afección asociada con una actividad aberrante de inhibidores selectivos transcripcionales de CDK, particularmente, el inhibidor transcripcional selectivo es CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18; más particularmente, c Dk 7.

[0076] En otra forma de realización más, la presente descripción proporciona un compuesto para su uso en un método de tratamiento de trastornos o enfermedades o afecciones mediadas por CDK en un sujeto que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención, particularmente la CDK es CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18, más particularmente CDK7 transcripcional selectiva.

[0077] En otra forma de realización más, la presente invención proporciona un compuesto para su uso en un método de inhibición de inhibidores selectivos transcripcionales de CDK, en particular, el inhibidor selectivo transcripcional es CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18; más particularmente, CDK7, en un sujeto que lo necesite, administrando al sujeto uno o más compuestos descritos en el presente documento en la cantidad efectiva para provocar la inhibición de dicho receptor.

[0078] En otro aspecto de la presente invención, se refiere a un compuesto para su uso en métodos de inhibición de la actividad de una quinasa en un sujeto o muestra biológica. En ciertas formas de realización, la quinasa es CDK transcripcional selectiva. En ciertas formas de realización, la quinasa es CDK7 transcripcional selectiva. En otras formas de realización, la quinasa es CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18 transcripcional selectiva.

[0079] En otras formas de realización, la actividad de la quinasa es actividad aberrante de la quinasa. En otras formas de realización, la inhibición de la actividad de la quinasa es irreversible. En otras formas de realización, la inhibición de la actividad de la quinasa es reversible. En otras formas de realización, los métodos de inhibición de la actividad de la quinasa incluyen la unión de un compuesto de la fórmula (I) a la quinasa.

[0080] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos transcripcionales de CDK, que son reguladores clave del ciclo celular.

[0081] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos de CDK transcripcionales, que son reguladores clave del ciclo celular, inhiben tanto la transcripción como la progresión del ciclo celular.

[0082] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos transcripcionales de CDK, que son reguladores clave del ciclo celular, inhiben tanto la transcripción como la progresión del ciclo celular; donde el inhibidor selectivo transcripcional de CDK es CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18.

[0083] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención son inhibidores selectivos transcripcionales de CDK, que son reguladores clave del ciclo celular, inhiben tanto la transcripción como la progresión del ciclo celular; donde el inhibidor selectivo transcripcional de CDK es CDK7.

[0084] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención también inhiben la fosforilación de ser5 del CTD de la ARN polimerasa II, coherente con la inhibición de CDK7 basada en el mecanismo.

[0085] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención también inhiben la fosforilación de ser2 y/o ser7 del CTD de la ARN polimerasa II, coherente con la inhibición de CDK transcripcionales basadas en el mecanismo.

[0086] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención (inhibidores selectivos traslacionales de CDK), cuando se administran in vivo generan una respuesta apoptótica indicada mediante la escisión de PARP.

[0087] En otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención (inhibidores traslacionales selectivos de CDK) tras la administración in vivo pueden mostrar efectos proapoptóticos en la regulación a la baja de proteínas de supervivencia de semivida corta como Mcl-I.

[0088] Los compuestos de la invención se administran normalmente en forma de composición farmacéutica. Dichas composiciones pueden prepararse utilizando procedimientos muy conocidos en la técnica farmacéutica y comprenden al menos un compuesto de la presente invención. La composición farmacéutica de la presente invención comprende uno o más compuestos descritos en el presente documento y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Normalmente, los excipientes farmacéuticamente aceptables están aprobados por las autoridades reguladoras o se consideran generalmente seguros para su uso en humanos o animales. Los excipientes farmacéuticamente aceptables incluyen, aunque sin carácter limitativo, vehículos, diluyentes, fluidificantes y lubricantes, conservantes, agentes tampón, agentes quelantes, polímeros, agentes gelificantes, agentes viscosificantes, disolventes y similares.

[0089] La composición farmacéutica puede administrarse por vía oral, parenteral o por inhalación. Entre los ejemplos de administración parenteral se incluye la administración por inyección, administración percutánea, transmucosa, transnasal y transpulmonar.

[0090] Entre los ejemplos de vehículos adecuados se incluyen, aunque sin carácter limitativo, agua, soluciones salinas, alcoholes, polietilenglicoles, aceite de cacahuete, aceite de oliva, gelatina, lactosa, terra alba, sacarosa, dextrina, carbonato de magnesio, azúcar, amilosa, estearato de magnesio, talco, gelatina, agar, pectina, acacia, ácido esteárico, éteres de alquilo inferior de celulosa, ácido silícico, ácidos grasos, aminas de ácidos grasos, monoglicéridos y diglicéridos de ácidos grasos, ésteres de ácidos grasos y polioxietileno.

[0091] La composición farmacéutica también puede incluir uno o más agentes auxiliares farmacéuticamente aceptables, agentes humectantes, agentes de suspensión, agentes conservantes, tampones, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, colorantes o cualquier combinación de los anteriores.

[0092] Las composiciones farmacéuticas pueden estar en formas convencionales, por ejemplo, comprimidos, cápsulas, soluciones, suspensiones, inyectables o productos para aplicación tópica. Además, la composición farmacéutica de la presente invención puede estar formulada para proporcionar un perfil de liberación deseado.

[0093] La administración de los compuestos de la invención, en forma pura o en una composición farmacéutica apropiada, puede llevarse a cabo utilizando cualquiera de las vías de administración aceptadas de composiciones farmacéuticas. La vía de administración puede ser cualquier vía que transporta efectivamente el compuesto activo de la solicitud de patente al sitio de acción apropiado o deseado. Las vías de administración adecuadas incluyen, aunque sin carácter limitativo, oral, nasal, bucal, cutánea, intradérmica, transdérmica, parenteral, rectal, subcutánea, intravenosa, intrauretral, intramuscular o tópica.

[0094] Las formulaciones orales sólidas incluyen, aunque sin carácter limitativo, comprimidos, cápsulas (gelatina blanda o dura), grageas (que contienen el ingrediente activo en forma de polvo o gránulo), pastillas y píldoras.

[0095] Las formulaciones líquidas incluyen, aunque sin carácter limitativo, jarabes, emulsiones y líquidos inyectables estériles, tales como suspensiones o soluciones.

[0096] Las formas de dosificación tópica de los compuestos incluyen ungüentos, pastas, cremas, lociones, polvos, soluciones, gotas para los ojos o para los oídos, apósitos impregnados y pueden contener aditivos convencionales apropiados, tales como conservantes y disolventes para ayudar a la penetración de los fármacos.

[0097] Las composiciones farmacéuticas de la presente solicitud de patente pueden prepararse mediante técnicas convencionales conocidas en la literatura.

[0098] Las dosis adecuadas de los compuestos para su uso en el tratamiento de las enfermedades o trastornos descritos en el presente documento pueden ser determinadas por los expertos en la materia pertinente. Las dosis terapéuticas se identifican generalmente a través de un estudio de rango de dosis en humanos en función de pruebas preliminares derivadas de los estudios en animales. Las dosis deben ser suficientes para dar como resultado un beneficio terapéutico deseado sin provocar efectos secundarios no deseados. El modo de administración, las formas de dosificación y los excipientes farmacéuticamente adecuados también pueden ser utilizados y ajustados por expertos en la materia. Todos los cambios y modificaciones se contemplan dentro del alcance de la presente solicitud de patente.

[0099] En una forma de realización, los compuestos dados a conocer en la presente invención están formulados para su administración farmacéutica.

[0100] Otra forma de realización más de la presente invención contempla el uso de los compuestos dados a conocer en la presente invención en el tratamiento y prevención de enfermedades o trastornos asociados con inhibidores selectivos transcripcionales de CDK, particularmente, el inhibidor transcripcional selectivo de CDK es CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18; más particularmente, CDK7.

[0101] Otra forma de realización más de la presente invención contempla el uso del compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el tratamiento y/o prevención de una enfermedad para la que sus síntomas se tratan, mejoran, disminuyen y/o previenen mediante la inhibición de inhibidores de CDK transcripcionales selectivos, particularmente el inhibidor transcripcional selectivo es CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18; más particularmente, CDK7.

[0102] Según otra forma de realización más, la enfermedad, trastorno o afección mediada por CDK transcripcional selectiva son afecciones, trastornos o enfermedades proliferativas.

[0103] Según la forma de realización anteriormente mencionada, las afecciones, trastornos o enfermedades proliferativas se seleccionan, aunque sin carácter limitativo, del grupo que consiste en un cáncer, un trastorno inflamatorio, un trastorno autoinflamatorio o una enfermedad infecciosa.

[0104] En otras formas de realización, la enfermedad proliferativa que se quiere tratar o prevenir utilizando los compuestos de la fórmula (I) estará asociada normalmente con actividad aberrante de CDK, más particularmente con CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o 18. La actividad aberrante de CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18 puede ser una actividad elevada y/o inapropiada (p. ej., anómala) de CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18. En ciertas formas de realización, CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18 no están sobreexpresadas, y la actividad de CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18 es elevada y/o inapropiada. En otras ciertas formas de realización, CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18 están sobreexpresadas, y la actividad de CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18 es elevada y/o inapropiada. Los compuestos de la fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables o estereoisómeros, y composiciones de los mismos, pueden inhibir la actividad de CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK18 y están siendo útiles en el tratamiento y/o prevención de enfermedades proliferativas.

[0105] Según otra forma de realización más, se espera que los compuestos de la presente invención sean útiles en la terapia de enfermedades proliferativas, tales como enfermedades virales, enfermedades fúngicas, trastornos neurológicos/neurodegenerativos, enfermedades autoinmunes, inflamación, artritis, enfermedades antiproliferativas (p. ej., retinopatía ocular), enfermedades neuronales, alopecia y enfermedades cardiovasculares.

[0106] De acuerdo con otra forma de realización más, los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de varios cánceres, incluyendo, aunque sin carácter limitativo, carcinoma, incluyendo el de mama, hígado, pulmón, colon, riñón, vejiga, incluyendo cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, de cabeza y cuello, de tiroides, esófago, estómago, páncreas, ovario, de vesícula biliar, de cuello uterino, de próstata y de piel, incluyendo carcinoma de células escamosas; tumores hematopoyéticos de linaje linfoide, incluyendo leucemia, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica aguda, linfoma de Hodgkins, linfoma no de Hodgkins, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de células pilosas, mieloma, linfoma de células del manto y linfoma de Burkett; tumores hematopoyéticos de linaje mieloide, incluyendo leucemias mielógenas agudas y crónicas, síndrome mielodisplásico y leucemia promielocítica; tumores de origen mesenquimal, incluyendo fibrosarcoma y rabdomiosarcoma; tumores del sistema nervioso central y periférico, incluyendo astrocitoma, neuroblastoma, glioma y schwannomas; y otros tumores, incluyendo seminoma, melanoma, osteosarcoma, teratocarcinoma, queratoacantoma, xeroderma pigmentoso, cáncer folicular de tiroides y sarcoma de Kaposi.

[0107] Según otra forma de realización más, el sujeto es un mamífero, incluido un humano.

[0108] Según otra forma de realización más, la presente invención proporciona compuestos para su uso como medicamento.

[0109] Según otra forma de realización más, la invención proporciona el uso de los compuestos de la presente invención en la fabricación de un medicamento.

[0110] Según otra forma de realización más, la invención proporciona el uso de los compuestos de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con la inhibición de CDK transcripcional selectiva.

[0111] Según otra forma de realización más, la presente invención proporciona compuestos para su uso como medicamento para el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con la inhibición de CDK transcripcional selectiva.

[0112] Según otra forma de realización más, la presente invención comprende una etapa adicional de administración al sujeto que lo necesita de uno o más agentes quimioterapéuticos seleccionados independientemente de entre agentes antiproliferativos, agentes anticancerígenos, agentes inmunosupresores y analgésicos.

[0113] El/los método(s) de tratamiento de la presente invención comprende(n) la administración de una cantidad segura y efectiva de un compuesto según la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este a un paciente (particularmente un humano) que lo necesita.

[0114] Los compuestos de la invención se indican en el tratamiento terapéutico y/o profiláctico de las afecciones anteriormente mencionadas. Para los usos terapéuticos anteriormente mencionados, la dosificación administrada variará, evidentemente, con el compuesto empleado, el modo de administración, el tratamiento deseado y la afección o enfermedad indicada.

[0115] Los compuestos de la presente invención pueden utilizarse como fármaco único o como una composición farmacéutica en la que el compuesto se mezcla con varios materiales farmacológicamente aceptables.

[0116] De acuerdo con una forma de realización, los compuestos de la presente invención también pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen tales compuestos. Por ejemplo, la presente invención también abarca variantes marcadas con un isótopo de la presente invención que son idénticas a las indicadas en el presente documento, salvo por el hecho de que uno o más átomos del compuesto se sustituyen por un átomo que presenta la masa atómica o el número de masa distinto de la masa atómica o número de masa predominante hallado habitualmente en la naturaleza en el átomo. Todos los isótopos de cualquier átomo o elemento particular según lo especificado se contemplan dentro del alcance de los compuestos de la invención y sus usos. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, flúor, cloro y yodo, tales como 2H ("D"), 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 180 , 32P, 33P, 35S, 18F, 36Cl, 123I y 125I. Los compuestos marcados con un isótopo de la presente invención pueden prepararse generalmente siguiendo procedimientos análogos a los que se dan a conocer en los esquemas y/o en los ejemplos que se indican abajo, mediante la sustitución de un reactivo no marcado con un isótopo por un reactivo marcado con un isótopo.

Procedimientos generales:

[0117] Pueden prepararse compuestos de la presente descripción mediante procesos químicos sintéticos, ejemplos de los cuales se muestran en el presente documento. Se pretende que se entienda que el orden de las etapas en los procesos puede variar, que los reactivos, disolventes y condiciones de reacción pueden ser sustituidos por aquellos mencionados específicamente y que las porciones vulnerables pueden estar protegidas y desprotegidas, según sea necesario.

[0118] Un enfoque general para la síntesis de compuestos de la fórmula general (I) se representa en los esquemas que se muestran abajo. Según se utiliza en los esquemas que se muestran abajo en el presente documento, los términos 'Ri', 'R² ', 'R³ ', 'R⁴ ', 'R6', 'A', 'B', 'L-T, 'L² ', 'm' 'n' y 'p' son los mismos que los descritos en el compuesto de la fórmula (I).

[0119] La síntesis general para la preparación de intermedios clave (fórmula 1.5) y (fórmula 3.4) se describió en los esquemas a y esquema b proporcionados, respectivamente:

Esquema a:

[0120] El procedimiento general para la preparación del intermedio clave (1.5) se sintetizó en dos rutas utilizando el compuesto de la fórmula -1.0 como material de partida.

Ruta a:

[0121] El compuesto de la fórmula-1.0 puede tratarse con la fórmula-1.1 en presencia de una base adecuada, como DIPEA, TEA y similar, en presencia de disolventes polares adecuados tales como ACN, 1,4-dioxano, DMSO, DCE y similares a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y 35 °C durante aproximadamente de 2 a 24 h para proporcionar los compuestos de la fórmula-1.2. Los compuestos de la fórmula-1.2 pueden tratarse además con mCPBA en presencia de disolventes adecuados tales como DCM, CHCh, DCE y similares a una temperatura de entre aproximadamente 0 °C y 35 °C durante aproximadamente de 2 a 24 h para proporcionar los compuestos de la fórmula-1.3. Los compuestos de la fórmula 1.4 (donde L¹ = NH) pueden sintetizarse mediante el tratamiento de compuestos de la fórmula 1.3 con una amina apropiada con o sin disolvente (disolventes tales como NMP y similares) a una temperatura de entre aproximadamente 100 °C y 150 °C durante aproximadamente de 1 a 24 h. Alternativamente, los compuestos de la fórmula 1.4 (donde L¹ = O) pueden sintetizarse tratando los compuestos de la fórmula 1.3 con un alcohol apropiado en presencia de una base adecuada, como NaH, LiH, KH, K²CO³ o Cs²CO³ y similares en disolventes adecuados tales como THF, DMSO, DMF, 1,4-dioxano o éter dietílico y similares, a una temperatura de entre aproximadamente -30 °C y 100 °C durante aproximadamente 1-24 h. Los compuestos de la fórmula 1.4 se someten a reducción del grupo nitro en presencia de reactivos adecuados como polvo de zinc/NH4Cl o Fe/NH4Cl o Zn/aq.NH4Cl con proporciones combinacionales apropiadas de disolventes, tales como THF:MeOH:agua, THF:EtOH:agua, metanol:agua, etanol:agua, metanol o etanol y similares a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y 120 °C durante aproximadamente 1-24 h para proporcionar los compuestos de la fórmula 1.5.

Ruta b:

[0122] El compuesto de la fórmula 1.5 puede prepararse utilizando el compuesto de la fórmula-1.0, reaccionando con el compuesto de la fórmula 2.1 y procediendo hasta la formación del compuesto de la fórmula 2.4 utilizando el procedimiento similar a la preparación del compuesto de la fórmula 1.4 según lo representado en la ruta a. El compuesto resultante de la fórmula 2.4 se somete además a desprotección de Boc en presencia de reactivos adecuados tales como TFA y similares, en presencia de un disolvente adecuado, como DCM, cloroformo, THF o 1,4-dioxano y similares, a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y 35 °C durante aproximadamente de 2 a 24 h para proporcionar los compuestos de la fórmula-1.5.

[0123] El procedimiento general para la preparación del intermedio clave (3.4) se sintetizó de acuerdo con el esquema b: Esquema b:

[0124] Los compuestos de la fórmula general-3.4 pueden prepararse utilizando el compuesto de la fórmula 1.0 y reaccionando con el compuesto de la fórmula 3.1 y, además, procediendo a la formación del compuesto de la fórmula 3.4 de acuerdo con el procedimiento representado en la ruta b del esquema a.

Esquema general para la preparación del compuesto de la fórmula (I):

[0125] El compuesto de acuerdo con la fórmula general (I) se preparó según el procedimiento representado en la ruta a y la ruta b del esquema I y del esquema II utilizando el compuesto de la fórmula-1.5 como material de partida.

Esquema I:

Ruta a:

[0126] El compuesto de la fórmula (I) puede sintetizarse tratando el compuesto de la fórmula-1.5 con un ácido apropiado en presencia de reactivos adecuados, tales como HATU, EDC.HCl-HOBt y similares, en presencia de una base adecuada, como DIPEA o TEA y similares, en un disolvente adecuado, tal como DMF, THF, Dm SO o DCM y similares a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y 35°C durante aproximadamente 1-24 h.

Ruta b:

[0127] El compuesto de la fórmula 3.4 se preparó de acuerdo con el procedimiento representado en la ruta a del esquema I. El compuesto resultante de la fórmula-3.4 se somete a desprotección de Boc en presencia del reactivo adecuado TFA y similares, en presencia de un disolvente adecuado, como DCM, cloroformo, THF o 1,4-dioxano y similares, a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y 35 °C durante aproximadamente de 2 a 24 h para proporcionar los compuestos de la fórmula-3.5. El compuesto de la fórmula-3.5 puede tratarse con cloruro de ácido apropiado en presencia de la base adecuada TEA o DIPEA y similares, en presencia de un disolvente adecuado como DCM, cloroformo, THF o 1,4-dioxano y similares, a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y 35 °C durante aproximadamente de 2 a 24 h para proporcionar los compuestos de la fórmula-I.

[0128] Alternativamente, el compuesto de la fórmula-I puede sintetizarse tratando la fórmula-3.5 con un ácido apropiado en presencia de reactivos adecuados, tales como HATU, EDC.HCl-HOBt y similares, en presencia de una base adecuada, como DIPEA o TEA y similares, en un disolvente adecuado, tal como DMF, THF, Dm SO o DCM y similares a una temperatura de entre aproximadamente 20 °C y 35 °C durante aproximadamente 1-24 h.

[0129] Alternativamente, el compuesto de la fórmula (IF) del compuesto de la fórmula (I), donde el anillo B está ausente, se preparó de acuerdo con el procedimiento representado en el esquema II, utilizando el compuesto de la fórmula-1.5 como material de partida.

[0130] Los compuestos de la fórmula-IF de la fórmula (I) pueden prepararse tratando el compuesto de la fórmula-1.5 con un respectivo cloruro de ácido (preparado a partir de un respectivo ácido haloalquenoico en presencia de reactivos adecuados tales como cloruro de oxalilo en un disolvente adecuado como DMF o THF y similares) en presencia de una base como DIPEA o TEA en presencia de un disolvente adecuado como DCM, cloroformo, THF o 1,4-dioxano y similares, a una temperatura de aproximadamente 20 °C a 35 °C durante aproximadamente de 2 a 24 h. El compuesto obtenido puede tratarse con varios tipos de aminas en presencia de una base como K2CO3, Na2CO3 y similares en un disolvente adecuado, como ACN, THF, DMF, DMSO y similares, a una temperatura de aproximadamente 20 °C a 100 °C durante aproximadamente de 2 a 24 h.

Abreviaturas:

[0131] Las siguientes abreviaturas se refieren respectivamente a las definiciones en el presente documento: LDA (diisopropilamida de litio); K2CO3 (carbonato de potasio); PdCl2(dppf)2-DCM (1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II); complejo de diclorometano), Dh P (3,4-Dihidro-2H-Piran); PTSA (ácido ptoluenosulfónico); EDCI (1-Etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida; Dikis (dicloruro de Bis(trifenilfosfina)paladio(II)); solución de NH³ (solución de amoniaco); Columna Prep (Columna preparativa); TLC Prep (Cromatografía en capa fina preparativa); rt (Tiempo de retención); RT (Temperatura ambiente); DMF (Dimetilformamida); h (hora); LC-MS (Cromatografía líquida-espectrometría de masas); NaOH (Hidróxido de sodio); Na²SO⁴ (Sulfato de sodio); ACN/CH³CN (Acetonitrilo); HCl (Ácido clorhídrico); THF (tetrahidrofurano); DCM (Diclorometano); t Fa (Ácido trifluoroacético); TLC (Cromatografía en capa fina); DIPEA (Diisopropiletilamina); DMSO-d6 (Dimetilsulfóxido-d); hAt U (hexafluorofosfato de 3-óxido de 1-[Bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio); Boc²O (Dicarbonato de dife/f-butilo); HPLC (Cromatografía líquida de alta presión); NaHCO³ (Bicarbonato de sodio); NaH (Hidruro de sodio); Cloruro SEM (Metilcloruro de 2-(Trimetilsilil)etoxi); Cs2CO3 (Carbonato de cesio); BiNAP (2,2'-Bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil); Pd2(dba)3 (Tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0)); TEA (trietilamina), Tp P (Trifenilfosfina), DIAD (Diisopropilazodicarboxilato), LiBH4 (Borohidruro de litio), TMSCl (Clorotrimetilsilano).

Ejemplos:

[0132] Aunque la invención se ha representado mediante ciertos de los ejemplos anteriores, no debe interpretarse como limitada por estos; en cambio, la invención abarca el área general como se ha dado a conocer anteriormente en el presente documento. Se pueden realizar varias modificaciones y formas de realización sin apartarse del espíritu y el alcance de la misma.

Los datos de MS proporcionados en los ejemplos descritos abajo se obtuvieron de la siguiente manera:

Espectro de masa: LC/MS Agilent 6120 Quadrapole LC/MS.

Los datos de RMN proporcionados en los ejemplos descritos abajo se obtuvieron de la siguiente manera:

1H-RMN: Varian 400 MHz.

La química de microondas se realizó en un CEM Explorer.

Síntesis de intermedios:

[0133] El procedimiento para los compuestos de la fórmula (I) se detallan abajo en el presente documento de manera gradual, incluyendo la síntesis general de varios intermedios implicados en el proceso de fabricación de los compuestos de acuerdo con la presente invención.

Intermedio 1: Síntesis de 4-cloro-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina.

[0134]

[0135] Este intermedio se preparó a partir del procedimiento representado en el documento US2008/045536 utilizando 2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (preparado de acuerdo con el documento US2006/106019) como material de partida; LCMS: m/z = 200,9 (M+H)+.

Intermedio 2: Síntesis de 4-cloro-8-etil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina.

Etapa 1: Síntesis de 2-formilbutanonitrilo.

[0136]

[0137] Se añadió una solución de LDA 2,0M en THF (55 ml) a una solución agitada de butironitrilo (7,5 g, 108,6 mmol) en THF seco (50 ml) a -78 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a -78 °C durante 15 min. Se añadió etilformiato (8,03 g, 108,6 mmol) a -78 °C y después se dejó agitar la mezcla de reacción durante la noche. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua helada, se ajustó a pH 4 utilizando 2NHCl y se extrajo con acetato de etilo (2x100 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO4, se filtró y se concentró para obtener el compuesto del título (5,6 g de crudo). El producto obtenido se llevó a la siguiente etapa sin purificación.

Etapa 2: Síntesis de 4-etil-1H-pirazol-5-amina.

[0138]

[0139] Se añadió hidrato de hidrazina (5,6 ml) a una solución de 2-formilbutanonitrilo (5,6 g, 57,73 mmol) en etanol (112 ml) a temperatura ambiente seguido de ácido acético (0,5 ml). A continuación, la mezcla de reacción se calentó a 90 °C durante ⁶ h. Tras completar la reacción, se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó con agua helada, se ajustó a pH 9 utilizando K²CO³ y la mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró para obtener el compuesto del título (5,6 g de crudo) adoptado para la siguiente etapa sin purificación; LCMS: m/z = 120,3 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 8-etil-2-tioxo-2,3-dihidropirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4(1H)-ona.

[0140]

[0141] A una solución de 4-etil-1H-pirazol-5-amina (5,0 g, 44,6 mmol) en DCM (20 ml) se le añadió carbonisotiocianatidato de O-etilo (5,9 g, 45,03 mmol) gota a gota a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 1 h. El sólido obtenido se filtró y se secó para obtener el intermedio de N-((4-etil-1H-pirazol-5-il)carbamotioil)butiramida (3,5 g, 32,40 %) LCMS: m/z = 242,8 (M+H)+. El intermedio formado se disolvió además en acetonitrilo (100 ml), se añadió K2CO3 (6,2 g, 44,9 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 3 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua y se acidificó con 2N HCl. El sólido obtenido se filtró y se secó para obtener el compuesto del título (2,6 g, 91,22 %); LCMS: m/z = 197,0 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de 8-etil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4(3H)-ona.

[0142]

[0143] Se añadió 2M NaOH (10 ml, 20 mmol) a una solución agitada de 8-etil-2-tioxo-2,3-dihidropirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(1H)-ona (2,0 g, 10,19 mmol) en etanol (40 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a 0 °C durante 10 min. Se añadió yoduro de metilo (1,5 g, 10,50 mmol) a 0 °C; tras completar la adición, la mezcla de reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, se retiraron los volátiles a presión reducida y el residuo obtenido se diluyó con 2N HCl en agua helada, el sólido precipitado se filtró y se secó al vacío para obtener el compuesto del título (1,7 g, 79,43 %). 1HRMN: (DMSO-de): 512,73 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 2,58-2,51 (q, 2H), 2,50 (s, 3H), 1,23-1,19 (t, 3H). LCMS: m/z = 210,9 (M+H)+.

Etapa 5: Síntesis de 4-cloro-8-etil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina.

[0144]

[0145] Se añadió N,N-Dietilanilina (3,6 g, 24,1 mmol) a una solución agitada de 8-etil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4(3H)-ona (1,7 g, 8,08 mmol) en POCh (35 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se calentó a 90 °C durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se diluyó con agua helada. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó utilizando combiflash (0-20 % de EtOAc/Hexano) para obtener el compuesto del título deseado (1,5 g, 81,52 %); LCMS: m/z = 228,9 (M+H)+.

[0146] Los intermedios 3 y 4 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 2) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

Intermedio 5: Síntesis de (3-(aminometil)-4-etilfenil)carbamato de terf-butilo.

Etapa 1: Síntesis de (4-bromo-3-cianofenil)carbamato de tert-butilo.

[0147]

[0148] Se añadió dicarbonato de di-fe/f-butilo (1,14 g, 4,8 mmol) a una solución de 5-amino-2-bromobenzonitrilo (0,8 g, 4 mmol) y DMAP (0,58 g, 4,8 mmol) en DCM (20 ml) y la mezcla de reacción resultante se agitó durante 8 h a temperatura ambiente. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua helada y se extrajo con DCM (3x50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó en una columna de sílice de malla de 100-200 eluyendo con un 15 % de acetato de etilohexano para obtener el compuesto del título (1 g, 83 %). LCMS: m/z = 297.15 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de (3-ciano-4-etilfenil)carbamato de fe/f-butilo.

[0149]

[0150] Se tomaron (4-bromo-3-cianofenil)carbamato de fe/f-butilo (4,0 g, 18,6 mmol), ácido etilborónico (1 g, 3,3 mmol), Cs2CÜ3(3,21 g, 9,9 mmol) en un recipiente a presión. Se añadió una mezcla de tolueno (10 ml) y etanol (1 ml). La suspensión se desgasificó y se lavó con gas nitrógeno durante 15 min. A continuación, se añadió Pd(PPh³⁾⁴ (0,38 g, 0,33 mmol), el recipiente a presión se selló y se calentó durante la noche a 110 °C. Tras completar la reacción, se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó con agua y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SÜ⁴ , se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,28 g, 66 %); LCMS: m/z = 247.2 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de (3-(aminometil)-4-etilfenil)carbamato de fe/f-butilo.

[0151]

[0152] Se añadió hexahidrato de cloruro de níquel (0,17 g, 1,2 mmol) a una solución enfriada de (3-ciano-4-etilfenil)carbamato de fe/f-butilo (0,5 g, 2 mmol) en metanol a 0 °C y se agitó la mezcla de reacción durante 10 min y se añadió borohidruro de sodio (0,53 g, 14 mmol) en lotes a 0 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó durante 1 h a temperatura ambiente y se enfrió a 0 °C y se añadió dietilentriamina (0,24 g, 2,4 mmol) y se agitó durante 1 h a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se diluyó con agua, el sólido precipitado se filtró y se secó. El crudo se purificó utilizando combiflash para obtener el compuesto del título (0,35 g, 65 %); Lc Ms : m/z = 251,1 (M+H)+.

[0153] Los intermedios 6 y 7 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (etapa 1 y 3 del intermedio 5) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

Intermedio 8: Síntesis de ácido 1 -acriloilpiperidina-4-carboxílico.

[0154]

[0155] Se añadió 2M NaOH (7,8 ml, 15,5 mmol) a una solución de ácido piperidina-4-carboxílico (1,0 g, 7,81 mmol) en (20 ml) de THF:agua (6:4) a 0 °C y después se agitó durante 10 min. Se añadió cloruro de acriloil (0,7 g, 7,69 mmol) a 0 °C, después se dejó la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se agitó durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua helada, se ajustó a pH 4 mediante ácido cítrico y se extrajo con acetato de etilo (2x100 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ , se filtró y se concentró. El producto obtenido se trituró con éter dietílico, el sólido se filtró y se secó para obtener el compuesto del título (0,45 g, 32,14 %). 1HRMN (DMSO-^): 5 12,35 (s, 1H), 6,82-6,73 (m, 1H), 6,08-6,02 (dd, 1H), 5,65-5,61 (dd, 1H), 4,24-4,19 (d, 1H), 3,96-3,91 (d, 1H), 3,15-3,05 (t, 1H), 2,82-2,74 (t, 1H), 2,53-2,44 (m, 1H), 1,84-1,79 (m, 2H), 1,43-1,35 (m, 2H); LCMS: m/z = 184 (M+H)+.

[0156] Los intermedios 9 a 14 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 8) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

Intermedio 15: Síntesis de N-(3-aminofenil)-4-nitrobenzamida.

[0157]

[0158] A una solución enfriada de ácido 4-nitrobenzoico (0,3 g, 1,85 mmol) en DMF (2 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,84 g, 2,22 mmol) seguido de DIPEA (0,47 ml, 3,7 mmol) y por último se le añadió 1,3-diaminobenceno (0,2 g, 1,85 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2sO 4, se filtró y se concentró el residuo crudo (0,2 g de crudo). LCMS: m/z = 258,10 (M+H)+.

Intermedio 16: Síntesis de (S)-3-(3-(aminometil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

Etapa 1: Síntesis de (S)-3-(3-cianobenzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0159]

[0160] Se añadieron HATU (1,94 g, 5,1 mmol) y DIPEA (1,25 ml, 6,8 mmol) a una solución enfriada de ácido 3-cianobenzoico (0,5 g, 5,98 mmol) en DMF seco (5 ml) a 0 °C. Se añadió (S)-3-aminopiperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,66 g, 3,4 mmol) a la mezcla de reacción y se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró el residuo crudo (0,8g de crudo). LCMS: m/z = 330 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de (S)-3-(3-(aminometil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0161]

[0162] Se añadió hexahidrato de cloruro de níquel(II) (0,29 g, 1,23 mmol) a una solución de (S)-3-(3-cianobenzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,8 g, 2,47 mmol) en MeOH (10 ml) a 0°C, seguido de NaBH⁴ (0,73 g, 19,32 mmol), que se añadió en porciones. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, después se enfrió a 0 °C y se añadió dietilentriamina (0,25 g, 2,46 mmol) y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío, se diluyó con acetato de etilo (30 ml), se lavó con agua y solución de salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró el residuo crudo (0,5 g de crudo). LCMS: m/z = 334 (M+H)+.

[0163] El intermedio 17 que se muestra abajo se preparó de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 16) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

Intermedio 18: Síntesis de 3-((5-(aminometil)-2-fluorofenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

Etapa 1: Síntesis de 3-((5-ciano-2-fluorofenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0164]

[0165] A una solución enfriada de ácido 1-(fe/f-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxílico (1 g, 4,3 mmol) en piridina (5 ml) a 0 °C se le añadió 3-amino-4-fluorobenzonitrilo (0,59 g, 4,3 mmol) seguido de POCl3 (0,68 g, 4,3 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a residuo crudo (1,1g). LCMS: m/z = 346,15 (M-H)+. Etapa 2: Síntesis de 3-((5-(aminometil)-2-fluorofenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0166]

[0167] Se añadió hexahidrato de cloruro de níquel (0,29 g, 1,21 mmol) a una solución enfriada de 3-((5-ciano-2-fluorofenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (1,1 g, 3,1 mmol) en metanol a 0 °C y se agitó la mezcla de reacción durante 10 min y se añadió borohidruro de sodio (0,84 g, 22,1 mmol) en lotes a 0 °C, se agitó la mezcla de reacción durante 1 h a temperatura ambiente, y además se enfrió a 0 °C y se añadió dietilentriamina (0,32 g, 3,1 mmol) y se agitó durante 1 h a temperatura ambiente y se concentró al vacío. La mezcla de reacción se diluyó con agua, el sólido separado se filtró y se secó. El crudo obtenido se purificó utilizando combiflash para obtener el compuesto del título (0,8 g, 72 %). LCMS: m/z = 352 (M+H)+.

[0168] Los intermedios 19 a 20 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 18) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

Intermedio 21: Síntesis de 3-((3-(1-aminoetil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

Etapa 1: Síntesis de 3-((3-acetilfenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0169]

[0170] El proceso de esta etapa se adoptó a partir del intermedio 15 (1,2 g). LCMS: m/z = 347,1 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de (E)-3-((3-(1-(hidroxiimino)etil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0171]

[0172] A una solución de 3-((3-acetilfenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (1,2 g, 3,4 mmol) en EtOH (20 ml) se le añadió un 50 % de solución acuosa de n H2OH (0,57 mg, 17,3 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró para obtener el compuesto del título deseado (1,1 g, 88 %). LCMS: m/z = 362,1 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 3-((3-(1-aminoetil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0173]

[0174] A una solución de (E)-3-((3-(1-(hidroxiimino)etil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (1 g, 2,7 mmol) en ácido acético (5 ml) se le añadió zinc (0,905 g, 13,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener el compuesto del título deseado (0,9 g, crudo).

LCMS: m/z = 347,7 (M+H)+.

Intermedio 22: Síntesis de 4-(3-aminobenzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

Etapa 1: Síntesis de 4-(3-nitrobenzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0175]

[0176] El proceso de esta etapa se adoptó a partir del intermedio 15 (1,2 g de crudo).

Etapa 2: Síntesis de 4-(3-aminobenzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0177]

[0178] Se añadió secuencialmente NH⁴Cl (3,67 g, 68,7 mmol) y zinc (2,24 g, 34,3 mmol) a una solución de 4-(3-nitrobenzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (1,2 g, 3,4 mmol) en una mezcla de THF:MeOH:agua (2:1:1,40 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de celite y se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró y se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró el residuo crudo (0,9 g). LCMS: m/z = 264,20 (M-fe/f-Bu+1)+.

Intermedio 23: Síntesis de 3-fluoro-1-metilpiperidin-4-ol.

Etapa 1: Síntesis de 3-fluoro-4-hidroxipiperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0179]

[0180] A una solución de 3-fluoro-4-oxopiperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (10 g, 45,87 mmol, WO2015/022662) en MeOH (200 ml) se le añadió borohidruro de sodio (2,5 g, 69,44 mmol) en lotes a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se diluyó con solución de cloruro de amonio saturada con agua helada. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título (9,1 g, crudo). LCMS: m/z = 220,0 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de 4-(benciloxi)-3-fluoropiperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0181]

[0182] Se añadió NaH (60 %) (2,5 g, 104,16 mmol) a una solución de 3-fluoro-4-hidroxipiperidina-1-carboxilato de fe/fbutilo (9,0 g, 0,041 mmol) en d Mf (180 ml) en una atmósfera inerte a 0 °C y se agitó durante 25 min. Se añadió bromuro de bencilo (7,0 g, 0,040 mmol), la mezcla de reacción resultante se dejó a temperatura ambiente y se agitó durante 5 h.

Tras completar la reacción, se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo (25 ml). La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x100 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (0-10 % EtOAc/hexano) para obtener el compuesto del título (10,5 g, 83,33 %). LCMS: m/z = 310,3 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 4-(benciloxi)-3-fluoropiperidina.

[0183]

[0184] A una solución de 4-(benciloxi)-3-fluoropiperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (10,0 g, 32,32 mmol) en DCM (30 ml) se le añadió TFA (15,0 ml) gota a gota a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 5 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se trató con una solución de NaHCO³ en agua helada. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título (7,5 g, crudo). LCMS: m/z = 209,7 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de 4-(benciloxi)-3-fluoro-1-metilpiperidina.

[0185]

[0186] A una solución de 4-(benciloxi)-3-fluoropiperidina (8,0 g, 38,27 mmol) en THF (160 ml) se le añadió TEA (3,9 g, 38,61 mmol), seguido de dimetilsulfato (4,9 g, 38,84 mmol) a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se diluyó con agua y acetato de etilo, se separó la fase orgánica. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título (2,5 g, crudo). LCMS: m/z = 225,4 (M+H)+.

Etapa 5: Síntesis de 3-fluoro-1-metilpiperidin-4-ol.

[0187]

[0188] Se añadió Pd/C (10 %) (0,9 g) a una solución de 4-(benciloxi)-3-fluoro-1-metilpiperidina (2,5 g, 11,19 mmol) en etanol y se tomó en un agitador de par (250 ml), se aplicó 50 psi de presión de hidrógeno, se mantuvo durante 24 h a temperatura ambiente. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de celite y el filtrado se concentró a presión reducida para obtener el compuesto del título (2,0 g, crudo). LCMS: m/z = 134,1 (M+H)+.

Intermedio 24: Síntesis de 8-etil-2-(metiltio)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina.

[0189]

[0190] Se añadió DIPEA (2,0 g, 15,5 mmol) a una solución agitada de (3-nitrofenil)metanamina HCl (1,45 g, 7,71 mmol) en acetonitrilo (50 ml) a 0 °C. A continuación, se añadió 4-doro-8-etil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (1,7 g, 7,43 mmol; intermedio 2). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, se concentró la mezcla de reacción para retirar los volátiles y el residuo se diluyó con agua helada, el sólido obtenido se filtró y se secó para obtener el compuesto del título (2,4 g, 94,11 %). LCMS: m/z = 345,2 (M+H)+.

[0191] Los intermedios 25 a 28 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 24) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

Intermedio 29: Síntesis de N4-(5-amino-2-etilbencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-2,4-diamina.

Etapa 1: Síntesis de (4-etil-3-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamato de fe/f-butilo.

[0192]

[0193] Se añadió m-CPBA (0,45 g, 0,26 mmol) en porciones a una solución de (4-etil-3-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamato de fe/f-butilo (0,4 g, 0,87 mmol, intermedio 27) en DCM (10 ml). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó el residuo en una columna de sílice de malla de 100-200 eluyendo con un 40-50 % de acetato de etilo-hexano para obtener el compuesto del título (0,38 g, 83 %). LCMS: m/z = 489,1 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de (4-etil-3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamato de fe/f-butilo.

[0194]

[0195] Se calentó una mezcla de 4-aminotetrahidropirano (0,44 g, 4,36 mmol) y (4-etil-3-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamato de fe/f-butilo (0,38 g, 0,72 mmol) a 100 °C durante 2 h. Tras completar la reacción, se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,28 g, 66 %). LCMS: m/z = 510,3 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de N4-(5-amino-2-etilbencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

[0196]

[0197] Se añadió TFA (0,5 ml) a una solución de (4-etil-3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamato de fe/f-butilo (0,28 g, 0,48 mmol) en DCM (2,5 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío para obtener el compuesto del título deseado (0,22 g de sal de TFA); LCMS: m/z = 410,2 (M+H)+.

[0198] Los intermedios 30 a 32 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 29) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

^{Intermedio 33: Síntesis de N4-(3-aminobenci} r ^{)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-}diamina.

Etapa 1: Síntesis de 8-isopropil-2-(metilsulfonil)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina.

[0199]

[0200] Se añadió mCPBA (1,73 g, 10,05 mmol) en porciones a una solución de 8-isopropil-2-(metiltio)-N-(3-nitrobenc¡l)p¡razolo[1,5-a][1,3,5]tr¡azin-4-am¡na (1,2 g, 3,35 mmol) en DCM (150 ml). Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se extrajo con 2M de NaOH acuoso y DCM. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener el compuesto del título (1 g, 76 %). LCMS: m/z = 391,1 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de 8-isopropil-N4-(3-nitrobencil)-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

[0201]

[0202] Se dejó calentar una mezcla de 4-aminotetrahidropirano (0,26 g, 2,56 mmol) y 8-isopropil-2-(metilsulfonil)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina (0,2 g, 0,51 mmol) a 100 °C durante 2-12 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,2 g, 95 %). LCMS: m/z = 412,49 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de N4-(3-aminobencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

[0203]

[0204] A una solución de 8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina (0,65 g, 1,52 mmol) en THF:MeOH:agua (3:2:1) se le añadió zinc (0,5 g, 7,64 mmol) y cloruro de amonio (0,4 g, 7,64 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,5 g, 83 %). LCMS: m/z = 382,4 (M+H)+.

[0205] Los intermedios 34 a 38 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 33) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

Intermedio 39: Síntesis de N4-(3-aminofenil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

Etapa 1: Síntesis de 8-isopropil-2-(metiltio)-N-(3-nitrofenil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina.

[0206]

[0207] El proceso de esta etapa se adoptó a partir del intermedio 24 (2 g, 47 %). LCMS: m/z = 345,0 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de 8-isopropil-2-(metilsulfonil)-N-(3-nitrofenil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina.

[0208]

[0209] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del intermedio 29 (2,0 g, 93 %). LCMS: m/z = 376,95 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 8-isopropil-N4-(3-nitrofenil)-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

[0210]

[0211] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del intermedio 29 (1,2 g, 94 %). LCMS: m/z = 398 (M+H)+. Etapa 4: Síntesis de N-4-(3-aminofenil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

[0212]

[0213] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del intermedio 33 (0,9 g, 75 %). LCMS: m/z = 368,5 (M+H)+.

Intermedio 40: Síntesis de N-(3-aminobencil)-8-etil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi) pirazolo[1,5-a][1,3,5]triaz¡n-4-am¡na. Etapa 1: Síntesis de 8-etil-2-(metilsulfonil)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina.

[0214]

[0215] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del intermedio 29 (1,98 g, 72,52 %). LCMS: m/z = 377,2 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de 8-etil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina.

[0216]

[0217] Se añadió NaH (0,25 g, 10,6 mmol) a una solución de 1 -metilpiperidin-4-ol (1,2 g, 10,4 mmol) en THF (40 ml) en una atmósfera inerte a 0 °C y se dejó agitar durante 25 min. A continuación, se añadió 8-etil-2-(metilsulfonil)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina (1,0 g, 2,65 mmol) a la misma temperatura, y la mezcla de reacción resultante se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo (25 ml). La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x100 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S o4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante combiflash (0-10 % MeOH/DCM) para obtener el compuesto del título (0,6 g, 55,04 %). LCMS: m/z = 412,9 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de N-(3-aminobencil)-8-etil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina.

[0218]

[0219] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del intermedio 33 (0,49 g, 81,66 %). LCMS: m/z = 381,48 (M+H)+.

[0220] Los intermedios 41 a 51 que se muestran abajo se prepararon de acuerdo con el protocolo anterior (intermedio 40) utilizando reactivos apropiados, reactivos en condiciones adecuadas. Los datos de caracterización de los intermedios se resumen en el presente documento.

[0221] La presente invención se ejemplifica, además, aunque sin limitarse, mediante los siguientes ejemplos que representan la preparación de compuestos de acuerdo con la invención.

Ejemplo 1: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-3-carboxamida (Compuesto 1).

[0222]

[0223] A una solución enfriada de ácido 1 -acriloilpiperidina-3-carboxílico (0,086 g, 0,47 mmol, intermedio 12) en DMF (4 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,22 g, 0,59 mmol) y DiPEA (0,2 ml, 1,18 mmol) y, por último, se añadió N4-(3-aminobencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-2,4-diamina (0,15 g, 0,39 mmol, intermedio 33). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a residuo crudo. El residuo se purificó mediante combiflash para obtener el compuesto del título (0,05 g, 25 %). 1HRMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 59,99-9,96 (d, 1H), 8,95-8,70 (m, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,51 (s, 2H), 7,25-7,21 (t, 1H), 7,03-7,01 (d, 1H), 6,90-6,79 (m, 2H), 6,11-6,07 (d, 1H), 5,68-5,63 (t, 1H), 4,59-4,46 (m, 2H), 4,32-4,28 (d, 1H), 4,10-4,00 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,18­ 3,16 (d, 1H), 3,07-3,00 (t, 1H), 2,91 (s, 1H), 2,78-2,67 (m, 1H), 2,46 (m, 1H), 1,95-1,92 (m, 1H), 1,84 (s, 1H), 1,73-1,63 (m, 3H), 1,46-1,35 (m, 3H), 1,23-1,22 (d, 6H); LCMS: m/z = 547,9 (M+H)+.

[0224] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 1 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

90

Ejemplo 2: Síntesis de 1-acrilo¡l-N-(3-(((2-(((3R,4R)-3-fluorop¡perid¡n-4-¡l)am¡no)-8-¡soprop¡lp¡razolo[1,5-a][1,3,5]triaz¡n-4-il)amino)metil)fenil)pirrolidina-3-carboxamida (Compuesto 14).

Etapa 1: Síntes¡s de (3R4ft)-4-((4-((3-(1-acrilo¡lp¡rrol¡d¡na-3-carboxam¡do) benc¡l)am¡no)-8-isoprop¡lp¡razoloH,5-a1[1,3,51triazin-2-il)amino)-3-fluoropiperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0225]

[0226] A una solución enfriada de ácido 1 -acriloilpirrolidina-3-carboxílico (0,05 g, 0,30 mmol, intermedio 10) en DMF (2 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,11 g, 0,30 mmol) y DIPEA (0,07 ml, 0,40 mmol) y, por último, se añadió (3R4R)-4-((4-((3-am¡nobenc¡l)am¡no)-8-¡soprop¡lp¡razolo[1,5-a][1,3,5]triaz¡n-2-¡l)am¡no)-3-fluorop¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de fe/f-butilo (0,1 g, 0,20 mmol, intermedio 38). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x20 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a residuo crudo. El residuo se purificó mediante combiflash para obtener el compuesto del título deseado (0,1 g, 76 %). Etapa 2: Síntesis de 1-acr¡lo¡l-N-(3-(((2-(((3R,4R)-3-fluorop¡per¡d¡n-4-¡l)am¡no)-8-¡soprop¡lp¡razoloM,5-a1M,3,51tr¡az¡n-4-il)amino)metil)fenil)pirrolidina-3-carboxamida.

[0227]

[0228] Se añadió TFA (1 ml) a una solución de (3R,4R)-4-((4-((3-(1-acrilo¡lp¡rrol¡d¡na-3-carboxam¡do)benc¡l)am¡no)-8-¡soprop¡lp¡razolo[1,5-a][1,3,5]triaz¡n-2-¡l)am¡no)-3-fluorop¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de fe/f-butilo (0,1 g, 0,15 mmol) en DCM (5 ml) a 0 °C. Después, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 12 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se evaporó para obtener amina. El residuo se purificó mediante HPLC prep. (Método: A: 0,1 % TFA, B: Acetonitrilo:MeOH, Columna: XBRIDGE C-18 (19 mm*150 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado (0,04 g, 50 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 5 10,09-10,07 (d, 1H), 8,80 (s, 3H), 7,79 (s, 1H), 7,62-7,51 (m, 2H), 7,26-7,22 (t, 1H), 7,09-6,96 (m, 1H), 6,61-6,54 (m, 1H), 6,15-6,10 (m, 1H), 5,75-5,65 (m, 2H), 4,63 (s, 2H), 4,25 (m, 2H), 3,82-3,63 (m, 3H), 3,66-3,45 (m, 2H), 3,37-3,10 (m, 4H), 2,93-2,90 (t, 2H), 2,22-1,92 (m, 2H), 1,71 (s, 2H), 1,39 (s, 6H); LCMS: m/z = 550,65 (M+H)+.

[0229] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 2 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 3: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-(((S)-tetrahidro-2H-piran-3-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-2-carboxamida (Compuesto ¹⁶ ).

Etapa 1: Síntesis de 2-((3-(((8-isopropil-2-(((S)-tetrahidro-2H-piran-3-il)amino)pirazoloM,5-a1M,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)piperidina-¹-carboxilato.

[0230]

[0231] A una solución enfriada de ácido 1-(fe/f-butoxicarbonil)piperidina-2-carboxílico (0,13 g, 0,577 mmol) en DMF (10 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,26 g, ^{0 , 68} mmol) seguido de DlPEA (^{0 , 2} ml, 1,04 mmol) y, por último, se añadió (S)-N4-(3-aminobencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-3-il)pirazolo[1,5-al[1,3,51triazina-2,4-diamina (0,2 g, 0,524 mmol, intermedio 34). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO4, se filtró y se concentró, el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,14 g, 42 %). LCMS: m/z = 593 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de N-(3-(((8-isopropil-2-(((S)-tetrahidro-2H-piran-3-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-² -carboxamida.

[0232]

[0233] Se añadió TFA (0,5 ml) a una solución de 2-((3-(((8-isopropil-2-(((S)-tetrahidro-2H-piran-3-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,14 g, 0,23 mmol) en DCM (5 ml) a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío, para obtener el compuesto del título deseado (0,12g, crudo). LCMS: m/z = 493 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-(((S)-tetrahidro-2H-piran-3-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-² -carboxamida.

[0234]

[0235] A una solución enfriada de N-(3-(((8-isopropil-2-(((S)-tetrahidro-2H-piran-3-N)amino)pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-2-carboxamida (0,12 g, 0,24 mmol) en DCM (5 ml) se le añadió TEA (0,1 ml, 0,72 mmol) y se agitó durante 5 min y se añadió cloruro de acriloil (0,022 g, 0,24 mmol) diluido en DCM (1 ml) gota a gota a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua y después se diluyó con DCM (10 ml). La capa orgánica se lavó con agua y después con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: agua, B: Acetonitrilo, Columna: Kinetex EVO C-18 (150 mm*21,2, 5 ^m) para obtener el compuesto del título deseado (0,03 g, 30 %) como base libre. 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 59,92 (s, 1H), 8,90-8,68 (d, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,50 (s, 2H), 7,25-7,21 (t, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,88-6,82 (m, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,10-6,06 (d, 1H), 5,68-5,66 (d, 1H), 5,12 (s, 1H), 4,58 (s, 2H), 3,98­ 3,71 (m, 4H), 3,51-3,46 (t, 2H), 3,21 (t, 1H), 3,02 (t, 1H), 3,02-2,91 (m, 3H), 2,12-2,09 (d, 1H), 1,66-1,52 (m, 4H), 1,38 (s, 2H), 1,23 (s, 6H); LCMS: m/z = 547,3 (M+H)+.

[0236] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 3 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 4: Síntesis de (S)-N-(1-acriloilpiperidin-3-il)-3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)benzamida (Compuesto 41).

Etapa 1: Síntesis de (S)-3-(3-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0237]

[0238] Se añadió DIPEA (0,5 ml, 2,47 mmol) a una solución de 4-cloro-8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (0,3 g, 1,23 mmol, intermedio 4) y (S)-3-(3-(aminometil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,495 g, 1,48 mmol, Intermedio 16) en acetonitrilo (10 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna utilizando un gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título (0,4 g, 66 %). LCMS: m/z = 540 (M+H)+.

Etapa_______ 2 _______ Síntesis_______ de_______ (S)-3-(3-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0239]

[0240] Se añadió mCPBA (1,53 g, 5,79 mmol) en porciones a una solución de (S)-3-(3-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,8 g, 1,44 mmol) en DCM (10 ml) y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se extrajo con 2M de NaOH acuoso y DCM (10 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ , se filtró y se concentró para obtener el compuesto del título (0,7 g, crudo). LCMS: m/z = 572 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de (S)-3-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazoloM,5-a]M,3,5]triazin-4-il)amino)metil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0241]

[0242] Se dejó calentar una mezcla de 4-aminotetrahidropirano (0,25 g, 2,45 mmol) y (S)-3-(3-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,35 g, 0,614 mmol) a 100 °C durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,16 g, 44 %). LCMS: m/z = 592,9 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de (S)-3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)-N-(piperidin-3-il)benzamida.

[0243]

[0244] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 3 (0,10 g, crudo). LCMS: m/z = 493,4 (M+H)+. Etapa 5: Síntesis de (S)-N-(1-acriloilpiperidin-3-il)-3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazoloM,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)benzamida

[0245]

[0246] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 3. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: agua, B: Acetonitrilo, Columna: X Bridge C-18 (150 mm*21,2, 5 ^m) para obtener el compuesto del título deseado (0,014 g, 20 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 59,00 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,32-8,30 (m, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,71-7,68 (m, 2H), 7,51-7,49 (m, 1H), 7,41-7,37 (m, 1H), 6,92-6,67 (m, 2H), 6,07-6,03 (t, 1H), 5,65-5,61 (m, 1H), 4,69 (s, 2H), 3,96-3,79 (m, 6H), 3,17-3,15 (d, 1H), 2,89 (s, 2H), 1,92-1,76 (m, 3H), 1,64-1,57 (m, 2H), 1,42 (s, 2H), 1,28-1,21 (m, 7H); LCMS: m/z = 546,8 (M+H)+.

[0247] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 4 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 5: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil 4-acriloilpiperazina-1-carboxilato (Compuesto 46).

Etapa 1: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenol.

[0248]

[0249] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 4 (0,5 g, 73 %). LCMS: m/z = 330,2 (M+H)+. Etapa 2: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenol.

[0250]

[0251] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 4 (0,35 g, 63 %). LCMS: m/z = 362,3 (M+H)+. Etapa 3: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenol.

[0252]

[0253] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 4 (0,22 g, 70 %). LCMS: m/z = 383,2 (M+H)+. Etapa 4: Síntesis de 4-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperazina-1,4-dicarboxilato de 1-(fe/f-butilo).

[0254]

[0255] A una solución de 3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenol (0,227 g, 0,59 mmol) en 10 ml de DCM, se añadió DMAP (0,086 g, 0,70 mmol), seguido de 4-(clorocarbonil)piperazina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,147 g, 0,59 mmol, se sintetizó conforme al procedimiento representado en el documento US2007/270433A1). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a temperatura ambiente. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó en agua helada y se dividió entre agua y DCM. El producto se extrajo con DCM (3x25 ml), se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró hasta que se secó. El producto se purificó en una columna de sílice de malla de 100-200 eluyendo con 30 % - 50 % de acetato de etilohexano para obtener el compuesto del título (0,15 g, 42 %). LCMS: m/z = 595,8 (M+H)+.

Etapa_____5:_____ Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenilpiperazina-1-carboxilato.

[0256]

[0257] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 3 (0,1 g de sal de TFA). LCMS: m/z = 495,4 (M+H)+.

Etapa 6: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil 4-acriloilpiperazina-1-carboxilato.

[0258]

[0259] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 3. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (0,01 % de NH4OH en agua, B: Acetonitrilo, Columna: Gemini NX C-18 (21,2 mm*150 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado (0,035 g, 26 %). 1H RMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 58,95-8,66 (d, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,31-7,14 (m, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 7,98-7,96 (d, 1H), 6,90-6,87 (m, 1H), 6,81-6,74 (m, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,13-6,08 (m, 1H), 5,70-5,67 (m, 1H), 4,62-4,56 (m, 2H), 3,80-3,78 (m, 4H), 3,60-3,56 (m, 6H), 3,40-3,33 (m, 2H), 2,86 (s, 1H), 1,80-1,60 (m, 1H), 1,50-1,38 (m, 4H) 1,18 (s, 6H); LCMS: m/z = 549,6 (M+H)+.

Ejemplo 6: Síntesis de 3-acrilamido-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)benzamida (Compuesto 47).

Etapa 1: Síntesis de N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)-3-nitrobenzamida.

[0260]

[0261] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 3 (0,38 g). LCMS: m/z = 531,60 (M+H)+. Etapa 2: Síntesis de 3-amino-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)benzamida.

[0262]

[0263] A una solución de N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)-3-nitrobenzamida (0,38 g, 0,71 mmol) en THF:MeOH:agua (3:2:l) se le añadió zinc (0,465 g, 7,1 mmol) y cloruro de amonio (0,76 g, 14,3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,3 g, 70 %). LCMS: m/z = 501,20 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 3-acrilamido-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)benzamida.

[0264]

[0265] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 3. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: ZORBAX XDB C-18 (21,1mm*150 mm, 5 ^m) para obtener el compuesto del título deseado (0,022 g, 25 %). 1H RMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 510,33 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,70 (m, 2H), 7,61-7,59 (d, 2H), 7,47 (t, 1H), 7,28 (t, 1H), 7,08 (m, 1H), 6,70 (m, 1H), 6,53 (m, 1H), 6,30 (d, 1H), 5,79-5,75 (m, 2H), 4,62 (m, 2H), 3,81 (m, 3H), 2,90 (m, 1H), 1,81-1,50 (m, 3H), 1,49-1,2 (m, 3H), 1,21 (d, 6H); LCMS: m/z = 555,2 (M+H)+.

[0266] El compuesto que se muestra abajo se preparó mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 6 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 7: Síntesis de (£)-4-((3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)amino)-N,N-dimetilbut-2-enamida (Compuesto 49).

[0267]

[0268] A una solución de N4-(3-aminobencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,5]triazina-2,4-diamina (0,1 g, 0,26 mmol, intermedio 33) y (E)-4-bromo-N,N-dimetilbut-2-enamida (^{0 , 061} g, 31,4 mmol) en CAN (3 ml) se le añadió K²CO³ (0,157 g, 1,136 mmol) a temperatura ambiente, y después se agitó a 80 °C durante 4h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó con agua y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x15 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: NH³ al 0,02 % en agua, B: ACN, Columna: Gemini NX C18 : 150 mm*21,2 mm) para obtener el compuesto del título deseado (0,028 g, 20 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 58,40-8,80 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,02-6,99 (t, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,66-6,63 (m, 2H), 6,60-6,54 (d, 2H), 6,44-6,42 (d, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,44 (s, 2H), 3,89 (s, 5H), 3,30 (m, 4H), 2,89 (s, 4H), 2,82 (s, 3H), 1,89 (s, 1H), 1,23 (s, 1H), 1,10 (s, ⁶ H); LCMS: m/z = 493,6 (M+H)+.

Ejemplo 8: Síntesis de (£)-4-(dietilamino)-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)but-2-enamida (Compuesto 50).

Etapa 1: Síntesis de (£)-4-bromo-N-(3-(((8-isopropil)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)but-² -enamida.

[0269]

[0270] A una solución enfriada de ácido (£)-4-bromobut-2-enoico (0,86 g, 5,24 mmol) en DCM (10 ml) se le añadieron 2 gotas de DMF seguido de cloruro de oxalilo (0,9 ml,10,49 mmol) a 0°C, después se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, se evaporó el disolvente completamente al vacío y se volvió a disolver en DCM (5 ml). En otro matraz, una solución de N4-(3-aminobencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-2,4-diamina (1 g, 2,62 mmol, Intermedio 33) en DCM (10 ml) y DIPEA (1,45 ml, 7,87 mmol) se enfrió a 0 °C. A esta se añadió lentamente, gota a gota, el cloruro de ácido anterior en DCM, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua y después se diluyó con DCM (20 ml). La fase orgánica se lavó con agua y después con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró, el residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice de malla 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,7 g, 60 %). LCMS: m/z = 530,05 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de (E)-4-(dietilamino)-N-(3-(((8-isopropN)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)but-2-enamida.

[0271]

[0272] A una solución agitada de (£)-4-bromo-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triaz¡n4¡l)am¡no)met¡l)fen¡l)butenam¡da (0,15 g, 0,28 mmol) y dietilamina (0,042 g, 0,568 mmol) en a Cn (3 ml) se le añadió K2CO3 (0,1 g, 0,71 mmol) a temperatura ambiente, y después se agitó a 80 °C durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó con agua y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x15 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ , se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 0,1 % TFA en agua, B: Acetonitrilo, Columna: X Bridge : 150 mm*19,0 mm) para obtener el compuesto del título deseado como sal de TFA, después de esto se pasó esta sal de TFA a través de una columna de resina básica pura Vari para retirar TFA para obtener el compuesto final (0,027 g, 54 %). 1HRMN (DMSO-da, 400 MHz): 1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 5 10,35 (s, 1H), 9,70 (s, 1H), 9,60 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,34-7,30 (t, 1H), 7,15 (s, 1H), 6,81-6,73 (m, 1H), 6,53-6,49 (d, 1H), 4,66 (s, 2H), 4,02-4,00 (t, 2H), 3,92-3,91 (m, 2H), 3,82 (m, 3H), 3,20 (s, 2H), 3,18­ 3,14 (m, 4H), 3,02-2,97 (m, 1H), 1,69 (s, 1H), 1,48 (s, 2H), 1,27-1,23 (m, 10H); LCMS: m/z = 521,65 (M+H)+.

[0273] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 8 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 9: Síntesis de (£)-1-(4-(dimetNamino)but-2-enoil)-N-(2-fluoro-5-(((8-isopropN-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)pirrolidina-3-carboxamida (Compuesto 64).

[0274]

[0275] A una solución enfriada de clorhidrato de ácido (E)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (0,050 g, 0,3 mmol) en DMF (2 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,137 g, 0,30 mmol) seguido de DIPEA (0,1 ml, 0,6 mmol) y, por último, se añadió N-(2-fluoro-5-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenN)pirrolidina-3-carboxamida (0,150 g, 0,3 mmol; esta se preparó utilizando el procedimiento del ejemplo 3. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2sO4, se filtró y se concentró y se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 0,01 % en amoniaco en agua, B: Acetonitrilo-MeOH, Columna: EVO C-18 (150 mm*21,2, 5 ^m) para obtener el compuesto del título deseado (0,04 g, 24 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 59,98-9,88 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,22-7,15 (m, 2H), 6,64 (m, 1H), 6,63-6,58 (m, 1H), 6,38-6,33 (dd, 1H), 4,54 (s, 2H), 3,82-3,78 (m, 3H), 3,67-3,60 (m, 2H), 3,54 (m, 2H), 3,53-3,51 (m, 1H), 3,34-3,27 (m, 1H), 3,02-3,01 (d, 2H), 2,89 (m, 1H), 2,20-2,14 (m, 7H), 2,00-1,98 (m, 1H), 1,83 (m, 1H), 1,64 (m, 1H), 1,45 (m, 2H), 1,21 (d, 6H); LCMS: m/z = 608,75 (M+H)+.

[0276] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 9 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 10: Síntesis de (£)-1-(4-(dimetilamino)-4-oxobut-2-en-1-il)-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)azetidina-2-carboxamida (Compuesto 76).

[0277]

[0278] A una solución de N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)azetidina-2-carboxamida (0,1 g, 0,21 mmol) en ACN (3 ml) se le añadió DIPEA (0,07 ml, 0,43 mmol) y (E)-4-bromo-N,N-dimetilbut-2-enamida (0,05 g, 0,25 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 12 h a temperatura ambiente. Se añadió agua y se extrajo con diclorometano. La capa acuosa se separó y se extrajo con diclorometano (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener un residuo crudo. El residuo se purificó mediante HPLC prep. (Método: A: 0,02 % amoniaco en agua, B:

Acetonitrilo, Columna: WATER X BRIDGE (19 mm*150 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado (0,05 g, 41 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 59,63 (s, 1H), 8,90-8,60 (m, 1H), 7,70-7,53 (m, 3H), 7,25-7,21 (t, 1H), 7,04 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,55 (s, 2H), 4,58 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,67-3,63 (t, 1H), 3,35-3,19 (m, 5H), 2,96-2,90 (m, 5H), 2,79 (s, 3H), 2,66 (s, 1H), 2,32-2,65 (m, 1H), 2,13-2,09 (m, 1H), 1,82 (s, 2H), 1,45-1,32 (m, 2H), 1,22 (s, 6H); LCMS: m/z = 576,45 (M+H)+.

Ejemplo 11: Síntesis de (£)-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-(4-(pirrolidin-1-il)but-2-enoil)piperidina-2-carboxamida (Compuesto 77).

[0279]

[0280] A una solución enfriada de ácido (£)-4-bromobut-2-enoico (0,28 g, 1,71 mmol) en DMF (10 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,65 g, 1,71 mmol) seguido de DIPEA (0,31 ml, 1,71 mmol) y, por último, se añadió N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-2-carboxamida (0,42 g, 0,855 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró, el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el intermedio deseado (0,3 g, 46 %). LCMS: m/z = 641 (M+2H)+. El intermedio se disolvió en ACN (5 ml) y se añadió pirrolidina (0,067 g, 0,93 mmol) y K2CO3 (0,13 g, 0,93 mmol) a temperatura ambiente, se agitó a 80 °C durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó con agua y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x15 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 0,01 % TFA en agua, B: MeOH:CAN (1:1), Columna: Zorbax XDB C18: 150 mm*21,2 mm) para obtener el compuesto del título deseado como sal de TFA, después de esto se pasó esta sal de TFA a través de una columna de resina básica pura Vari para retirar el TFA del compuesto para obtener el compuesto final (0,04 g, 26 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 59,91 (s, 1H), 8,95-8,66 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,54-7,48 (m, 1H), 7,24-7,20 (t, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,89-6,81 (d, 2H), 6,63 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,57 (m, 2H), 3,95-3,92 (m, 4H), 3,40-3,39 (m, 2H), 3,19-3,18 (d, 1H), 3,00 (s, 1H), 2,89 (s, 1H), 2,67 (s, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,33­ 2,32 (d, 1H), 2,11-2,08 (d, 1H), 1,98 (s, 1H), 1,83-1,61 (m, 6H), 1,53 (s, 3H), 1,37 (s, 3H), 1,23 (s, 6H); LCMS: m/z = 630,3 (M+H)+.

Ejemplo 12: Síntesis de N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-(vinilsulfonil)piperidina-2-carboxamida (Compuesto 78).

[0281]

[0282] A la solución de N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-2-carboxamida (0,15 g, 0,3 mmol; preparada de acuerdo con el ejemplo 3) en DCM (10 ml) se le añadió Et3N (0,123 ml, 0,9 mmol) y cloruro de 2-cloroetano-1-sulfonilo (0,5 g, 0,3 mmol) a 0 °C. Tras agitar 2 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con DCM. La capa acuosa se separó y se extrajo con DCM (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ , se filtró y se concentró y el residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: agua, B: ACN, Columna: Zorbax XDB C18 (21,2 mm X 150 mm, 5 ^) para obtener el compuesto del título deseado (0,025 g, 10,5 %). 1H RMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 59,99 (s, 1H), 8,80 (d, 1H), 7,71 (s,1H), 7,60-7,40 (m, 2H), 7,23 (t, 1H), 7,04-7,02 (d, 1H), 6,95-6,75 (m, 1H), 6,66-6,60 (m, 1H), 6,05-5,96 (m, 2H), 4,58 (brs, 2H), 4,49-4,48 (d ,1H), 3,90-3,70 (m, 4H), 3,55-3,45 (m, 2H), 2,89 (brs, 1H), 2,03-2,00 (m, 1H), 1,85-1,58 (m, 6H), 1,39-1,33 (m, 4H), 1,22 (s, 6H); LCMS: m/z = 583,0 (M+H)+.

Ejemplo 13: Síntesis de N-(2-((3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)amino)-2-oxoetil)acrilamida (Compuesto 79).

Etapa 1: Síntesis de (2-((3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazoloM,5-a]M,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)amino)-2-oxoetil)carbamato de fe/f-butilo.

[0283]

[0284] A una solución enfriada de (fe/f-butoxicarbonil)glicina (0,033 g, 0,3 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,152 g, 0,4 mmol) seguido de DIPEA (0,1 ml, 0,62 mmol) y, por último, se añadió N4-(3-aminobencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-2,4-diamina (0,1 g, 0,26 mmol; Intermedio 33). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró, el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,12 g, crudo). LCMS: m/z = 539 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de 2-amino-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)acetamida.

[0285]

[0286] Se añadió TFA (1 ml) a una solución de (2-((3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)amino)-2-oxoetil)carbamato de fe/f-butilo (0,15 g, 0,34 mmol) en DCM (3 ml) a 0 °C.

A continuación, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío para obtener el compuesto del título deseado (0,15 g, crudo). LCMS: m/z = 439 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de N-(2-((3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazoloM,5-a]M,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)amino)-2-oxoetil)acrilamida.

[0287]

[0288] A una solución enfriada de 2-amino-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)acetamida (0,127 g, 0,28 mmol) en Dc M (5 ml) se le añadió TEA (0,08 ml, 0,56 mmol) y se agitó durante 5 min y se añadió cloruro de acriloil (0,026 g, 0,28 mmol) gota a gota a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua y después se diluyó con DCM (10 ml). La capa orgánica se lavó con agua y después con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 0,02 % en amoniaco en agua, B: MeOH: Acetonitrilo (1:1), Columna: Gemini NX C-18 (150 mm*21,2, 5 ^m) para obtener el compuesto del título (0,043 g, 43 %) como base libre. 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 510,08 (s, 1H), 9,92 (s, 1H), 8,50-8,47 (t, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,52 (s, 2H), 7,31-7,27 (t, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,41-6,34 (m, 1H), 6,17-6,12 (m, 1H), 5,68-5,65 (m, 1H), 4,64 (s, 2H), 3,99-3,97 (d, 2H), 3,87 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 1,87 (s, 2H), 1,50 (s, 2H), 1,28 (s, 6H); LCMS: m/z = 493,3 (M+H)+.

[0289] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 13 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 14: Síntesis de 4-acrilamido-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxamida (Compuesto 85).

Etapa 1: Síntesis de N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazoloM,5-a]M,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-carboxamida.

[0290]

[0291] A una solución enfriada de ácido 1-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-carboxílico (0,108 g, 0,62 mmol; US 2009/156582A1) en d Mf (10 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,3 g, 0,78 mmol) seguido de DIPEA (0,2 ml, 1,04 mmol) y, por último, se añadió N4-(3-aminobencil)-8-isopropil-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-2,4-diamina (0,2 g, 0,52 mmol; intermedio 33). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró, el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título (0,23 g, 82 %). LCMS: m/z = 535,1 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de: 4-amino-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxamida.

[0292]

[0293] A una solución de N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-carboxamida (0,35 g, 0,655 mmol) en THF:MeOH:agua (relación 3:2:1, 15 ml) se le añadió zinc (0,43 g, 6,554 mmol) y cloruro de amonio (0,7 g, 13,1 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de celite y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,3 g, 90 %). LCMS: m/z = 504,9 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 4-acrilamido-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxamida.

[0294]

[0295] A una solución enfriada de 4-amino-N-(3-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxamida (0,2 g, 0,39 mmol) en DCM (5 ml) se le añadió TEA (0,01 ml, 0,79 mmol) y se agitó durante 5 min y se añadió cloruro de acriloil (0,035 g, 0,39 mmol) en DCM (1 ml) gota a gota a 0 °C. La mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua y después se diluyó con DCM (10 ml). La capa orgánica se lavó con agua y después con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío y se purificó mediante columna combiflash utilizando gel de sílice 100-200 y acetato de etilo y hexano como eluyente para obtener el compuesto del título (0,062 g, 28 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 510,29 (s, 1H), 9,85 (s, 1H), 8,95-8,70 (m, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,74 (s, 2H), 7,32-7,30 (t, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,68-6,64 (m, 1H), 6,31-6,26 (d, 1H), 5,82-5,79 (d, 1H), 4,67 (s, 2H), 4,00 (s, 4H), 3,87 (s, 4H), 2,93 (s, 2H), 1,90 (s, 2H), 1,52 (s, 2H), 1,28 (s, 6H); LCMS: m/z = 559,1 (M+H)+.

Ejemplo 15: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)fenil)azetidina-2-carboxamida (Compuesto 86).

Etapa 1: Síntesis de 2-((3-((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)carbamoil)azetidina-1-carboxilato.

[0296]

[0297] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 3 (0,18 g, 48 %). LCMS: m/z = 551,6 (M+H)+. Etapa 2: Síntesis de N-(3-((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)azetidina-2-carboxamida.

[0298]

[0299] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 3 (0,11 g, crudo). LCMS: m/z = 451,3 (M+H)+. Etapa 3: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)azetidina-2-carboxamida.

[0300]

[0301] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 3. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: KINETEX C18: 21,2 mm*150 mm) para obtener el compuesto del título deseado (0,035 g, 35 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 510,3-10,1 (m, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,50-7,70 (m, 1H), 7,34-7,30 (t, 1H), 7,20-6,90 (d, 1H), 6,40-6,33 (m, 1H), 6,18-6,10 (m, 1H), 5,77-5,62 (m, 1H), 5,61-4,90 (m, 1H), 4,88-4,22 (m, 1H), 4,20-3,91 (m, 4H), 3,42-3,30 (m, 2H), 3,30-2,96 (m, 1H), 2,92-2,68 (m, 2H), 2,34-2,33 (m, 2H), 2,26 (s, 1H), 1,87 (s, 2H), 1,48 (s, 2H), 1,27-1,25 (d, 6H); LCMS: m/z = 505,3 (M+H)+.

[0302] El compuesto que se muestra abajo se preparó mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 15 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 16: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-etil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5] triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-4-carboxamida (Compuesto 88).

[0303]

[0304] Se añadió HATU (0,15 g, 0,39 mmol) y después DIPEA (0,15 g, 1,16 mmol) a una solución enfriada de ácido 1-acriloilpiperidina-4-carboxílico (0,08 g, 0,43 mmol) en DMF seco (5 ml) a 0 °C. Se añadió N-(3-aminobencil)-8-etil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (0,15 g, 0,39 mmol, intermedio 40) a la mezcla de reacción anterior, y la mezcla de reacción resultante se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ , se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC prep., Columna: XBRIDGE (19 mm x 150 mm), HCOOH al 0,01 % (A), Acetonitrilo (B) para obtener el compuesto del título deseado (0,04 g, 18,69 %). 1HRMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 59,93 (s, 1H), 9,30-9,27 (t, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,51-7,49 (d, 1H), 7,25-7,21 (t, 1H), 7,01-6,99 (d, 1H), 6,84-6,77 (m, 1H), 6,11-6,06 (m, 1H), 5,68-5,64 (m, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,61-4,60 (d, 2H), 4,44-4,41 (d, 1H), 4,10-4,07 (d, 1H), 3,15-3,05 (m, 2H), 2,74-2,52 (m, 4H), 2,35-2,25 (m, 4H), 1,95-1,85 (m, 2H), 1,81-1,78 (d, 2H), 1,75-1,65 (m, 3H), 1,55-1,35 (m, 3H), 1,23-1,17 (m, 3H); LCMS: m/z = 548,1 (M+1)+.

[0305] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 16 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

), m,

Ejemplo______ 17: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-(piperidin-4-iloxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-4-carboxamida (Compuesto 106).

Etapa 1: Síntesis de 4-((4-((3-(1-acriloilpiperidina-4-carboxamido)bencil)amino)-8-isopropilpirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-2-il)oxi)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0306]

[0307] El proceso de esta etapa se adoptó a partir del ejemplo 16. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante combiflash para obtener el compuesto del título (0,1 g, 50 %). LCMS: m/z = 647,4 (M+H)+.

Etapa_____ 2 _____ Síntesis_____ de______1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-(piperidin-4-iloxi)pirazolo[1,5-a][1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-4-carboxamida.

[0308]

[0309] Se añadió TFA (1 ml) a una solución de 4-((4-((3-(1-acriloilpiperidina-4-carboxamido)bencil)amino)-8-isopropilpirazolo[1,5-a1[1,3,5]triazin-2-il)oxi)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,1 g, 0,15 mmol) en DCM (10 ml) a 0 °C. Después, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC prep. (Método: A: amoniaco al 0,01 % en agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: EVA-C-18 (21,2 mm*150 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado (0,06 g, 22 %). 1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 59,93 (s, 1H), 9,39-9,36 (t, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,48-7,46 (d, 1H), 7,25-7,21 (t, 1H), 7,02-7,00 (d, 1H), 6,84-6,77 (m, 1H), 6,11-6,07 (m, 1H), 5,68-5,65 (m, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,63-4,61 (d, 2H), 4,45-4,42 (d, 1H), 4,11-4,08 (m, 2H), 3,23 (m, 2H), 3,11-3,08 (m, 3H), 3,01-2,94 (m, 1H), 2,70­ 2,64 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 2,08 (m, 2H), 1,86-1,78 (m, 3H), 1,49-1,40 (m, 2H), 1,27-1,25 (d, 5H); LCMS: m/z = 547,4 (M+H)+.

[0310] El compuesto que se muestra abajo se preparó mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 17 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 18: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5] triazin-4-il)amino)metil)fenil)pirrolidina-3-carboxamida (Compuesto 108).

Etapa______1______Síntesis______de______3-((3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)pirrolidina-1-carboxilato.

[0311]

[0312] A una solución enfriada de ácido 1-(tert-butoxicarbonil)pirrolidina-3-carboxílico (0,16 g, 0,75 mmol) en DMF (4 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,36 g, 0,94 mmol) y DIPEA (0,21 ml, 1,26 mmol) y finalmente se le añadió N-(3-aminobencil)-8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (0,25 g, 0,63 mmol, Intermedio 41). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a residuo crudo. El residuo se purificó mediante combiflash para obtener el compuesto del título (0,1 g, 50 %). LCMS: m/z = 593,4 (M+H)+.

Etapa______2:______Síntesis______de_____ N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazoloM,5-a]M,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)pirrolidina-3-carboxamida.

[0313]

[0314] Se añadió TFA (3 ml) a una solución de 3-((3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)pirrolidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,3 g, 0,50 mmol) en DCM (10 ml) a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 2 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío (0,25 g, crudo). LCMS: m/z = 493,4 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)pirrolidina-3-carboxamida.

[0315]

[0316] A una solución de N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)pirrolidina-3-carboxamida (0,25 g, 0,50 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió DIPeA (0,17 m, 1,01 mmol) y cloruro de acriloil (0,05 g, 0,55 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. Se añadió agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con diclorometano (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener un crudo, y se purificó mediante HPLC prep. (Método: A: amoniaco al 0,01 % en agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: EVA-C-18 (21,2 mm*150 mm, 5 ^m) para obtener el compuesto del título deseado (0,06 g, 22 %). LCMS: m/z = 547,21 (M+H)+. 1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 5 10,50 (s, 1H), 9,95 (s, 1H), 8,18 (s, 2H), 8,06-8,02 (m, 2H), 7,94 (s, 1H), 7,50-7,48 (d, 1H), 7,34­ 7,30 (m, 2H), 6,36-6,33 (m, 1H), 6,09-6,04 (m, 1H), 5,56-5,53 (m, 1H), 4,90 (s, 1H), 3,91 (m, 2H), 3,03-2,99 (m, 2H), 2,71­ 2,67 (m, 3H), 2,01-1,99 (m, 3H), 1,84-1,57 (m, 8H), 1,29-1,27 (d, 6H); LCMS: m/z = 547,4 (M+H)+.

[0317] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 18 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 19: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5] triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-3-carboxamida (Compuesto 116).

Etapa 1: Síntesis de 3-((3-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0318]

[0319] Se añadió DIPEA (1,2 ml, 7,23 mmol) a una solución agitada de 4-cloro-8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (0,35 g, 1,44 mmol; intermedio 4) y 3-((3-(aminometil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo (0,48 g, 1,44 mmol, intermedio 17) en acetonitrilo (10 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó el residuo en una columna de sílice de malla de 100-200 eluyendo con un 15 % de acetato de etilo-hexano para obtener el compuesto del título (0,5 g, 64 %). LCMS: m/z = 540,1 (M+H)+.

Etapa________ 2 ________ Síntesis________ de________ 3-((3-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0320]

[0321] Se añadió mCPBA (0,48 g, 2,78 mmol) en porciones a una solución agitada de 3-((3-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de tert-butilo (0,5 g, 0,92 mmol) en DCM (100 ml). Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se extrajo con 2M de NaOH acuoso y DCM. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener el compuesto del título (0,5 g, 94 %). LCMS: m/z = 572,2 (M+H)+.

Etapa______3:______Síntesis_____ de_____ 3-((3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazoloM,5-a1M,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato.

[0322]

[0323] Se añadió NaH (0,042 g, 1,05 mmol) a DMSO (4 ml) en una atmósfera inerte y se agitó durante 15 min. Se añadió 1 -metilpiperidin-4-ol (0,12 g, 1,05 mmol) a la mezcla de reacción y se siguió agitando durante 10 min. Se añadió 3-((3-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de tert-butilo (0,2 g, 0,35 mmol) y se siguió agitando durante 10 min. La mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice de malla 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,2 g, 94 %). LCMS: m/z = 607,2 (M+H)+.

Etapa______4 ______Síntesis______de______N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-3-carboxamida.

[0324]

[0325] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 18 (0,15 g, crudo). LCMS: m/z = 507,2 (M+H)+. Etapa 5: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,511triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-3-carboxamida.

[0326]

[0327] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 18. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 5 mm acetato de amonio en agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: Zorbax XDB-C-18 (150 mm*2l,2 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado como sal de acetato (0,02 g, 18 %). 1HRMN (DMSO-d6, 400 MHz): 510,0 (d, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,49-7,52 (m, 2H), 7,24 (t, 1H), 7,0 (d, 1H), 6,83-6,85 (m, 2H), 6,08 (m, 1H), 5,63 (t, 1H), 4,82-4,83 (m, 1H), 4,61 (s, 2H), 4,43-4,5 (m, 1H), 4,29-4,32 (m, 1H), 4,0-4,1 (m, 1H), 2,93-3,06 (m, 1H), 2,59-2,62 (m, 2H), 2,16 (s, 2H), 2,06-2.11 (m, 2H), 1,91-1,93 (m, 2H), 1,84 (s, 6H), 1,60-1,84 (m, 3H), 1,26 (dd, 6H). LCMS: m/z = 561,25 (M+H)+.

[0328] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 19 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 20: Síntesis de 2-(1-acriloilpiperidin-3-carboxamido)-5-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)piridina 1-óxido (Compuesto 120).

Etapa 1: Síntesis de 3-((5-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piridin-2-il)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0329]

[0330] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 19 (0,58 g, 52 %). LCMS: m/z = 540,9 (M+H)+. Etapa 2: Síntesis de 2-(1-(fe/f-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxamido)-5-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piridina 1-óxido.

[0331]

[0332] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 19 (0,6 g). LCMS: m/z = 589,35 (M+H)+. Etapa 3: Síntesis de 2-(1-(fe/f-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxamido)-5-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piridina 1-óxido.

[0333]

[0334] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 19 (0,5 g, 50 %). LCMS: m/z = 624,45 (M+H)+. Etapa 4: Síntesis de 5-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)-2-(piperidina-3-carboxamido)piridina 1-óxido.

[0335]

[0336] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 18 (0,4 g, crudo). LCMS: m/z = 524,1 (M+H). Etapa 5: Síntesis de 1-acriloil-N-(5-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)-1-(11-oxidanil)-114-piridin-2-il)piperidina-3-carboxamida.

[0337]

[0338] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 18. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: amoniaco al 0,01 % en agua, B: Acetonitrilo, Columna: KINETEX EVO C-18 (21,1 mm*150 mm, 5 ^m) para obtener el compuesto del título deseado (0,007 g, 10,2 %). 1H RMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 5 10,62-10,56 (m, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,22-8,20 (d, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,40-7,38 (d, 1H), 6,88-6,78 (m, 1H), 6,1­ 6,03 (t, 1H), 5,68-5,61 (m, 1H), 4,84 (m, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,46-4,43 (m, 1H), 4,19-3,95 (m, 1H), 2,99-2,92 (m, 1H), 2,85­ 2,79 (m, 1H), 2,66-2,59 (m, 2H), 2,16-2,13 (m, 3H), 1,95-1,92 (m, 2H), 1,67-1,62 (m, 2H), 1,36 (m, 1H), 1,25-1,24 (d, 6H), 1,53 (m, 2H), 1,29-1,27 (d, 6H); LCMS: m/z = 578,4 (M+H)+.

Ejemplo 21: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-((1 -metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil 4-acriloilpiperazina-1-carboxilato (Compuesto 121).

Etapa 1: Síntesis de 3-3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenol.

[0339]

[0340] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 19 (0,25 g, 60 %). LCMS: m/z = 397,4 (M+H)+.

Etapa______2:______Síntesis______de______4-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperazina-1,4-carboxilato de 1 -(fe/f-butilo).

[0341]

[0342] A una solución de 3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenol (0,25 g, 0,63 mmol) en 10 ml de MDC, se le añadió DMAP (0,092 g, 0,75 mmol), seguido de 4-(clorocarbonil)piperazina-1-carboxilato de fe/f-butilo (sintetizado conforme al procedimiento de la literatura explicado en el documento US2007/270433A1) (0,157 g, 0,63 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a temperatura ambiente, y después la mezcla se neutralizó en agua helada y se dividió entre agua y MDC. El producto se extrajo tres veces con MDC (25 ml x 3), se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró hasta que se secó. El producto se purificó mediante columna de combiflash eluyendo con 30 % - 50 % de acetato de etilo-hexano para obtener el compuesto del título (0,22 g, 57 %). LCMS: m/z = 609,5 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil piperazina-1-carboxilato.

[0343]

[0344] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 18 (0,1 g de sal de TFA). LCMS: m/z = 509,5 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de 3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil 4-acriloilpiperazina-1-carboxilato.

[0345]

[0346] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 18. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (0,01 % de NH4OH en agua, B: Acetonitrilo, Columna: Gemini NX C-18 (21,2 mm*150 mm, 5 ^m) para obtener el compuesto del título deseado (0,25 g, 12 %). 1H RMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 59,33-9,30 (m, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,36-7,33 (m, 1H), 7,22-7,20 (m, 1H), 7,12 (s, 1H), 6,85-6,78 (m, 1H), 6,17-6,12 (m, 1H), 5,74-5,72 (m, 1H), 4,88-4,75 (m, 1H), 4,65-4,64 (m, 2H), 3,65-3,60 (m, 5H), 3,44-3,38 (m, 4H), 3,30-2,93 (m, 1H), 2,71-2,60 (m, 2H), 2,20 (s, 3H), 2,0-1,90 (m, 2H), 1,72-1,61 (m, 2H), 1,18 (s, 6H); LCMS: m/z = 563,5 (M+H)+.

Ejemplo 22: Síntesis de (£)-1-(4-(dimetilamino)but-2-enoil)-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metil-piperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)-piperidina-3-carboxamida (Compuesto 122).

[0347]

[0348] A una solución enfriada de ácido (E)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (0,02 g, 0,118 mmol) en DMF (4 ml) se le añadió HATU (0,067 g, 0,177 mmol) seguido de DIPEA (0,04 ml, 0,23 mmol) y, por último, se añadió N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-3-carboxamida (0,06 g, 0,118 mmol, producto de la etapa 4 del ejemplo 19). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ , se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC prep. (Método: A: 0,1 % TFA en agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: X bridge C-18 (150 mm*19 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado (0,15 g, 23 %). 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 5 10,01 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,47-7,57 (m, 2H), 7,26 (t, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,94 (t, 1H), 6,56-6,57 (m, 1H), 5,21 (s, 1H), 5,02-5,03 (m, 1H), 4,65-4,66 (m, 2H), 4,47 (d, 1H), 4,25 (d, 1H), 4,06-4,07 (m, 2H), 3,87-3,89 (m, 3H), 3,40-3,41 (m, 4H), 2,97-2,99 (m, 2H), 2,76-2,77 (m, 6H), 2,28 (d, 2H), 2,28 (d, 2H), 1,99 (d, 2H), 1,80 (m, 3H), 1,66 (m, 1H), 1,26 (d, 6H). LCMS: m/z = 618,25 (M+H)+.

[0349] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 22 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 23: Síntesis de 4-acrilamido-N-(3-((8-isopropil-2-((1 -metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)fenil)benzamida (Compuesto 125).

[0350]

Etapa 1: Síntesis de N-(3-((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)-4-nitrobenzamida.

[0351]

[0352] Se añadió DIPEA (0,7 ml, 4,13 mmol) a una solución agitada de 4-cloro-8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina, (0,2 g, 0,82 mmol; Intermedio 4) (sintetizado de acuerdo con el procedimiento descrito en el documento WO2013/128028) y N-(3-aminofenil)-4-nitrobenzamida (0,21 g, 0,82 mmol, Intermedio 15) en acetonitrilo (5 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó el residuo en una columna de sílice de malla de 100-200 eluyendo con un 15 % de acetato de etilo-hexano para obtener el compuesto del título (0,15 g, 40 %). LCMS: m/z = 464,05 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de N-(3-((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)-4-nitrobenzamida.

[0353]

[0354] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 19 (0,15 g, 93 %). LCMS: m/z = 496,1 (M+H)+. Etapa 3: Síntesis de N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)-4-nitrobenzamida.

[0355]

[0356] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 19 (0,1 g, 66 %). LCMS: m/z = 531,15 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de 4-amino-N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)benzamida.

[0357]

[0358] Se añadió Pd/C al 10 % (0,02 g) a una solución de N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)fenil)-4-nitrobenzamida (0,1 g, 0,18 mmol) en metanol (5 ml). La mezcla de reacción se agitó bajo presión de globo de hidrógeno durante 4 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró sobre un lecho de celite, y el lecho de celite se lavó con metanol. El filtrado se concentró para obtener el compuesto del título (0,08 g de crudo). LCMS: m/z = 501,15 (M+H)+.

Etapa 5: Síntesis de 4-acrilamido-N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi) pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)benzamida.

[0359]

[0360] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 18. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC prep. (Método: A: 10 mm de acetato de amonio en agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: XDB-C-18 (250 mm*21,2 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado como sal de acetato (0,008 g, 10 %). 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 510,5 (s, 1H), 10,2 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,98 (d, 2H), 7,81 (d, 2H), 7,53-7,54 (m, 1H), 7,41 (d, 1H), 7,37 (d, 1H), 6,44-6,52 (m, 2H), 6,30 (dd, 1H), 5,81 (dd, 1H), 4,9-4,92 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,94-3,05 (m, 4H), 2,59-2,60 (m, 3H), 1,62-1,65 (m, 2H), 1,28 (d, 6H). LCMS: m/z = 555,45 (M+H)+.

[0361] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 23 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 24: Síntesis de N-(1-acriloilpiperidin-4-il)-3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino) benzamida (Compuesto 128).

Etapa 1: Síntesis de fe/f-butil-4-(3-((8-isopropil-2-(metiltio)pirazoloM,5-a1M,3,51triazin-4-il)amino)benzamido)piperidina-1-carboxilato.

[0362]

[0363] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 23 (0,5 g crudo); LCMS: m/z = 526,40 (M+H)+. Etapa 2: Síntesis de 4-(3-((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0364]

[0365] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 19 (0,4 g, 75 %). LCMS: m/z = 556,26 (M-H)+.

Etapa______3:______ Síntesis______de______4-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)benzamido)piperidina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0366]

[0367] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 19 (0,2 g, 47 %). LCMS: m/z = 593,90 (M+1)+. Etapa 4: Síntesis de 3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)-N-(piperidin-4-il)benzamida.

[0368]

[0369] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 18 (0,15 g crudo). LCMS: m/z = 493,40 (M+H)+.

Etapa 5: Síntesis de N-(1-acriloilpiperidin-4-il)-3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino) benzamida.

[0370]

[0371] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 19. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 0,01 % NH4OH en agua, B: Acetonitrilo, Columna: Kinetex EVO C-18 (21,2 mm*150 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título (0,010 g, 9 %). 1HRMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 58,35-8,33 (d, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,86-7,84 (d, 1H), 7,65-7,63 (d, 1H), 7,50-7,46 (t, 1H), 6,85-6,78 (m, 1H), 6,11-6,07 (m, 1H), 5,69-5,66 (m, 1H), 4,87-4,84 (m, 1H), 4,39-4,36 (m, 1H), 4,07-3,98 (m, 2H), 3,22-3,14 (m, 2H), 3,04-2,97 (m, 1H), 2,83-2,80 (m, 2H), 2,67-2,61 (m, 2H), 2,15-2,10 (m, 4H), 2,08-1,98 (m, 2H), 1,88 (m, 2H), 1,87-1,68 (m, 2H), 1,66-1,45 (m, 2H), 1,28-1,27 (d, 6H); LCMS: m/z = 547,40 (M+H)+.

[0372] El compuesto que se muestra abajo se preparó mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 24 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 25: Síntesis de (£)-4-(4-(dimetilamino)but-2-enamido)-N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)fenil)benzamida (Compuesto 130).

[0373]

[0374] Se añadió cloruro de oxalilo (0,025 g, 0,2 mmol) a una solución de ácido bromocrotonoico (0,033 g, 0,2 mmol) en DCM seco (2 ml) y se añadió después de una gota de DMF. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y se evaporó a presión reducida para obtener cloruro de (£)-4-bromobut-2-enoil. Este se disolvió en d Cm seco (5 ml) y se añadió a una solución de 4-amino-N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)fenil)benzamida (0,05 g, 0,1 mmol; producto de la etapa 5 del ejemplo 23) en acetonitrilo (2 ml) a 0° C. La mezcla resultante se agitó durante 1 h a la misma temperatura y se añadió dimetilamina (1 ml, 20 mmol) y se siguió agitando durante 4 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC prep. (Método: A: Acetato de amonio, B: Acetonitrilo-Agua (1:1), Columna: Gemini-NX para obtener el compuesto del título deseado (0,05 g, 20 %). 1HRMN (DMSO-da, 400 MHz): 510,68-10,65 (d, 2H), 10,32-10,29 (d, 1H), 9,91 (s, 1H), 8,25-8,19 (d, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,00-7,98 (d, 2H), 7,84-7,82 (d, 2H), 7,55-7,52 (t, 1H), 7,47-7,37 (m, 2H), 6,82-6,75 (m, 1H), 6,51-6,48 (d, 1H), 5,33 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,51-3,48 (d, 2H), 3,35-3,32 (m, 2H), 3,17-3,02 (m, 4H), 2,82 (s, 7H), 2,72-2,71 (m, 2H), 2,33 (s, 1H), 2,24-2,21 (d, 1H), 2,05-1,98 (t, 1H), 1,81-1,78 (m, 1H), 1,31-1,29 (d, 6H); LCMS: m/z = 612,4 (M+H)+.

Ejemplo 26: Síntesis de (1 s,4s)-4-((£)-4-(dimetilamino)but-2-enamido)-N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)fenil)ciclohexano-1-carboxamida (Compuesto 131).

[0375]

[0376] A una solución enfriada de clorhidrato de ácido (E)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (0,025 g, 0,15 mmol) en DMF (2 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,068 g, 0,18 mmol) seguido de DIPEA (0,52 ml, 0,30 mmol) y se añadió (1,4-c/s)-4-amino-N-(3-((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)fenil)ciclohexano-1-carboxamida (0,076 g, 0,15 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró (0,025 g, 26 %). 1HRMN (DMSO-de, 400 MHz): 510,52 (s, 1H), 9,94 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,98-7,94 (m, 2H), 7,50-7,48 (d, 1H), 7,36­ 7,28 (m, 2H), 6,56-6,49 (m, 1H), 6,21-6,17 (d, 1H), 4,91-4,86 (m, 1H), 3,89 (m, 1H), 3,41-3,40 (m, 2H), 3,17 (d, 1H), 2,99­ 2,66 (m, 2H), 2,66-2,51 (m, 2H), 2,50-2,49 (m, 1H), 2,44-2,32 (m, 2H), 2,09-2,00 (m, 7H), 1,98-1,97 (m, 2H), 1,86-1,81 (m, 2H), 1,73-1,55 (m, 6H), 1,25-1,23 (d, 6H), 1,10-1,07 (m, 2H); LCMS: m/z = 618,50 (M+H)+.

[0377] Los compuestos que se muestran abajo se prepararon mediante un procedimiento similar al que se ha descrito en el Ejemplo 26 con variaciones apropiadas en reactivos, cantidades de reactivos, en presencia de disolventes adecuados en condiciones de reacción adecuadas. Las características fisicoquímicas de los compuestos se resumen en el presente documento en la tabla que se muestra abajo.

Ejemplo 27: Síntesis de (1s,4s)-4-(((£)-4-(dimetilamino)-4-oxobut-2-en-1-il)amino)-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)fenil)ciclohexano-1-carboxamida (Compuesto 135).

Etapa 1: Síntesis de ((1s,4s)-4-((3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1M,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)carbamoil)ciclohexil) carbamato de fe/f-butilo.

[0378]

[0379] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 18 (0,3 g, 95 %). LCMS: m/z = 621,85 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de (1s,4s)-4-amino-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)ciclohexano-¹ -carboxamida.

[0380]

[0381] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 18 (0,2 g, 94,7). LCMS: m/z = 521,45 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de (1s,4s)-4-(((E)-4-(dimetilamino)-4-oxobut-2-en-1-N)amino)-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)ciclohexano-1-carboxamida:

[0382]

[0383] A una solución de (1,4-c/s)-4-amino-N-(3-(((8-isopropil-2-((1-metilpiperidin-4-il)oxi)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)ciclohexano-1-carboxamida (0,1 g, 0,19 mmol) y (E)-4-bromo-N,N-dimetilbut-2-enamida (0,044 g, 0,23 mmol) en ACN (3 ml) se le añadió DIPEA (0,06 ml, 0,384 mmol) a temperatura ambiente, después se agitó durante 12 h.

Tras completar la reacción, se neutralizó con agua y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x15 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 0,1 % de TFA en agua, B:ACN, Columna: EVO C18 (21,2 mm x 150 mm tamaño de partícula 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado (0,030 g, 20 %). 1H RMN (DMSO-da, 400 MHz): 59,84 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,55-7,53 (d, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,25-7,21 (t, 1H), 7,05-6,96 (m, 2H), 6,70-6,66 (m, 1H), 5,12 (s, 1H), 4,62 (s, 2H), 4,25-4,19 (m, 3H), 3,44-3,43 (d, 5H), 3,09-2,89 (m, 4H), 2,80-2,77 (m, 3H), 2,66 (s, 1H), 2,32-2,35 (m, 3H), 2,11-2,10 (m, 2H), 1,86-1,84 (d, 2H), 1,74-1,68 (m, 4H), 1,62-1,57 (m, 2H), 1,22 (s, ⁶ H); LCMS: m/z = 632,80 (M+H)+.

Ejemplo 28: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-metoxipirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-4-carboxamida (Compuesto 136). Etapa 1: Síntesis de 8-isopropil-2-metoxi-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina:

[0384]

[0385] Se añadió NaH (0,08 g, 2,05 mmol) a DMSO (4 ml) en una atmósfera inerte y se agitó durante 15 min. Se añadió (4-hidroxibutil)carbamato de fe/f-butilo (0,38 g, 2,05 mmol) a la mezcla de reacción y se siguió agitando durante ¹⁰ min.

Se añadió 8-isopropil-2-(metilsulfonil)-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina (^{0 , 2} g, 0,51 mmol) y se agitó durante 10 min. A continuación, la mezcla de reacción se dejó calentar a ^{6 0} °C durante 1 h. Tras completar la reacción, se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,1 g, 57 %). LCMS: m/z = 343,2 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de N-(3-aminobencil)-8-isopropil-2-metoxipirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-amina:

[0386]

[0387] A una solución de 8-¡soprop¡l-2-metox¡-N-(3-nitrobenc¡l)p¡razolo[1,5-a][1,3,5]tr¡az¡n-4-am¡na (0,1 g, 0,29 mmol) en THF:MeOH:agua (3:2:1) se le añadió zinc (0,08 g, 1,46 mmol) y cloruro de amonio (0,078 g, 1,46 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,06 g, crudo). LCMS: m/z = 313,25 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((8-isopropil-2-metoxipirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperidina-4-carboxamida:

[0388]

[0389] El proceso de esta etapa se adoptó a partir del ejemplo 16. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante combiflash para obtener el compuesto del título (0,05 g, 65,7 %). 1HRMN (d Ms O-cÍ6, 400 MHz): 59,92 (s, 1H), 9,30-9,27 (t, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,55-7,51 (m, 2H), 7,25-7,21 (t, 1H), 7,02-7,01 (d, 1H), 6,84-6,77 (m, 1H), 6,11-6,06 (d, 1H), 5,67-5,64 (d, 1H), 4,60-4,59 (d, 2H), 4,44-4,41 (d, 1H), 4,10-4,07 (d, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,59 (s, 1H), 3,07-2,98 (m, 2H), 2,67-2,57 (m, 4H), 1,81-1,75 (t, 2H), 1,49-1,46 (m, 3H), 1,27-1,25 (d, 6H); LCMS: m/z = 478,3 (M+H)+.

Ejemplo 29: Síntesis de (E)-4-(dimetilamino)-1-(4-(2-(((8-isopropil)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triaz¡n-4-¡l)am¡no)met¡l)fen¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)but-2-en-1-ona (Compuesto 137).

Etapa 1: Síntesis de 4-(2-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperazina-1-carboxilato de fe/f-butilo.

[0390]

[0391] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 4 (0,8 g, 80 %). LCMS: m/z = 498,2 (M+H)+. Etapa 2: Síntesis de 4-(fe/f-butoxicarbonil)-1-(2-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperazina 1-óxido.

[0392]

[0393] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 4 (0,7 g, crudo). LCMS: m/z = 546,3 (M+H)+. Etapa 3: Síntesis de 4-(fe/f-butoxicarboniD-1-(2-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperazina 1-óxido.

[0394]

[0395] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 4 (0,6 g, crudo). LCMS: m/z = 567,7 (M+H)+. Etapa 4: Síntesis de 8-isopropil-N4-(2-(piperazin-1-il)bencil)-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

[0396]

[0397] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 4 del ejemplo 4 (0,40 g, crudo). LCMS: m/z = 451,3 (M+H)+. Etapa 6: Síntesis de (£)-4-(dimetilamino)-1-(4-(2-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)fenil)piperazin-1-il)but-2-en-1-ona.

[0398]

[0399] A una solución enfriada de ácido (£)-4-(dimetilamino)but-2-enoico (0,073 g, 0,44 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,25 g, 0,666 mmol) seguido de DIPEA (0,32 ml, 1,77 mmol) y, por último, se añadió 8-isopropil-N4-(2-(piperazin-1-il)bencil)-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-2,4-diamina (0,2 g, 0,444 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴ , se filtró y se concentró y el residuo crudo se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: 0,01% TFA en agua, B: ACN: MeOH, Columna: Kinetex Evo C18:(150 mm*21,2 mm) para obtener el compuesto del título deseado como sal de TFA. Para la eliminación de TFA, se pasó el compuesto a través de una columna de resina básica pura Vari utilizando MeOH como eluyente para obtener el compuesto del título como base libre (0,07 g, 38 %). 1H RMN (DMSO-de, 400 MHz): 58,80-8,50 (d, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,23-7,16 (m, 3H), 7,06 (t, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,64-6,63 (m, 2H), 4,76-4,74 (d, 2H), 3,82-3,73 (m, 8H), 3,04-3,03 (d, 2H), 2,92-2,86 (m, 5H), 2,67 (s, 1H), 2,45 (s, 1H), 2,15 (s, 6H); 1,82 (s, 1H), 1,46 (s, 2H), 1,24-1,22 (d, 7H); LCMS: m/z = 562,45 (M+H)+.

Ejemplo 30: Síntesis de (E)-1-(4-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino)metil)piperidin-1 -il)-4-(pirrolidin-1-il)but-2-en-1-ona (Compuesto 138).

Etapa 1: Síntesis de 4-(((8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piperidina-1-carboxilato de tert-butilo.

[0400]

[0401] Se añadió 4-(aminometil)piperidina-1-carboxilato de tert-butilo (0,619 g, 2,89 mmol) a una solución de 4-cloro-8-isopropil-2-(metiltio)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (0,7 g, 2,89 mmol) en acetonitrilo (50 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó el residuo en una columna de sílice de malla 100-200 eluyendo con un 5 % de acetato de etilohexano para obtener el compuesto del título (0,9 g, 74 %). LCMS: m/z = 421,4 (M+H)+.

Etapa 2: Síntesis de 4-(((8-isopropil-2-(metilsulfonil)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piperidina-1-carboxilato de tert-butilo.

[0402]

[0403] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 4 (0,5 g, 58 %). LCMS: m/z = 453,4 (M+H)+. Etapa_____3 _____ Síntesis_____de 4-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piperidina-1-carboxilato de tert-butilo.

[0404]

[0405] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 3 del ejemplo 4 (0,32 g, 67,6 %). LCMS: m/z = 474,5 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de 8-isopropil-N4-(piperidin-4-ilmetil)-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazina-2,4-diamina.

[0406]

[0407] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 4 del ejemplo 4 (0,22 g, 93,6 %). LCMS: m/z = 374,1 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de (E)-4-bromo-1-(4-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil))metil)piperidin-1-il)but-2-en-1-ona.

[0408]

[0409] A una solución enfriada de ácido (£)-4-bromobut-2-enoico (0,66 g, 0,8 mmol) en DMF (10 ml) a 0 °C se le añadió HATU (0,3 g, 0,8 mmol) seguido de DIPeA (0,139 ml, 0,8 mmol) y, por último, se añadió 8-isopropil-N4-(piperidin-4-ilmetil)-N2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) pirazolo[1,5-a][1,3,5]tr¡azina-2,4-d¡am¡na (0,15 g, 0,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con agua helada y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,135 g, 86,5 %). LCMS: m/z = 522,0 (M+H)+. Etapa 5: Síntesis de (£)-1-(4-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piperidin-1 -il)-4-(pirrolidin-1-il)but-2-en-1-ona.

[0410]

[0411] Se añadieron secuencialmente K²CO³ (0,09 g, 0,65 mmol) y pirrolidina (0,028 g, 0,39 mmol) a una solución de (E)-4-bromo-1-(4-(((8-isopropil-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1[1,3,51triazin-4-il)amino)metil)piperidin-1-il)but-2-en-1-ona (0,17 g, 0,33 mmol) en ACN (10 ml), y la mezcla resultante se dejó agitar durante 4 h a ^{6 0} °C. La mezcla de reacción se neutralizó con agua y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC prep. (Método-A: 0,1 % de ácido fórmico en agua, B: Acetonitrilo-Metanol, Columna: KINETEXC18 (21,2 mm*150 mm, 5 ^m)) para obtener el compuesto del título deseado (0,02 g, 11,9 %). 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 58,30 (d, 1H), 7,68 (s, 1H), 6,89 (d, 1H), 6,54-6,64 (m, 2H), 4,38-4,35 (d, 1H), 4,02-3,99 (d, 1H), 4,87-4,84 (d, 2H), 3,40-3,29 (m, 2H), 3,16 (d, 2H), 3,04-2,86 (m, 2H), 2,58-2,41 (m, ⁸ H), 2,02-1,97 (m, 2H), 1,88-1,78 (m, 2H), 1,68­ 1,67 (m, 5H), 1,53-1,45 (m, 2H), 1,23-1,2 (m, 6H),1,06-1,04 (m, 2H); LCMS: m/z = 511,80 (M+H)+.

Ejemplo 31: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((3-isopropil-5-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino)metil)fenil)azetidina-² -carboxamida (Compuesto 139).

Etapa 1: Síntesis de 5-cloro-3-isopropil-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-amina.

[0412]

[0413] proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 1 del ejemplo 4 (0,8 g, 99 %). LCMS: m/z = 346 (M+H)+. Etapa 2: Síntesis de (5-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)(3-nitrobencil)carbamato de fe/f-butilo.

[0414]

[0415] A una solución de 5-cloro-3-isopropil-N-(3-nitrobencil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (0,8 g, 2,31 mmol) en CCl4 (20 ml) se le añadió (BOC)2O (0,6 g, 2,78 mmol), seguido de DMAP (o,o28 g, 0,23 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se concentró para obtener el compuesto del título (1 g, 86 %). LCMS: m/z = 446 (M+H)+.

Etapa 3: Síntesis de (3-isopropil-5-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)(3-nitrobencil)carbamato de fe/f-butilo.

[0416]

[0417] A una solución de (5-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)(3-nitrobencil)carbamato de fe/f-butilo (1 g, 2,24 mmol) y tetrahidro-2H-piran-4-amina (0,68 g, 6,74 mmol) en tolueno (20 ml) se le añadió NaOfBu (0,31 g, 3,28 mmol) y se desgasificó con gas N² durante 10 min. A continuación, se añadió BINAP (0,2 g, 0,33 mmol) seguido de Pd²(dba⁾³ (0,1 g, 0,11 mmol), y después la mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 12 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de un lecho de celite y se lavó con acetato de etilo (2x20 ml). El filtrado se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna utilizando un gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título (0,8 g, 70 %). LCMS: m/z = 511 (M+H)+.

Etapa 4: Síntesis de (3-aminobencil)(3-isopropil-5-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)carbamato de fe/f-butilo.

[0418]

[0419] A una solución de (3-isopropil-5-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)(3-nitrobencil)carbamato de fe/f-butilo (0,8 g, 1,56 mmol) en THF:MeOH:agua (relación 3:2:1,20 ml) se le añadió zinc (1,02 g, 15,68 mmol) y cloruro de amonio (1,7 g, 31,36 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Tras completar la reacción, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se diluyó con acetato de etilo. La capa acuosa se separó y se extrajo con acetato de etilo (2x25 ml). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice 100-200 para obtener el compuesto del título deseado (0,6 g, 87 %). LCMS: m/z = 480,8 (M+H)+.

Etapa 5: Síntesis de (3-(1-acriloilazetidina-2-carboxamido)bencil)(3-isopropil-5-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)carbamato de fe/f-butilo.

[0420]

[0421] El proceso de esta etapa se adoptó a partir del ejemplo 1 (0,3 g, crudo). LCMS: m/z = 617,9 (M+H)+.

Etapa 6: Síntesis de 1-acriloil-N-(3-(((3-isopropil-5-((tetrahidro-2H-piran-4-iDamino)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino)metil)fenil)azetidina-2-carboxamida.

[0422]

[0423] El proceso de esta etapa se adoptó a partir de la etapa 2 del ejemplo 2. El compuesto crudo obtenido se purificó mediante HPLC preparativa (Método: A: amoniaco al 0,02 % en agua, B: ACN:MeOH (1:1), Columna: X bridge C18 : (150 mm*21,2 mm) para obtener el compuesto del título deseado como base libre (0,1 g, 10 %). 1HRMN (DMSO-CÍ6, 400 MHz): 5 10,17 (s, 1H), 7,83-7,81 (m, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,58-7,52 (m, 2H), 7,29-7,25 (m, 1H), 7,05-7,02 (t, 1H), 6,57-6,55 (m, 2H), 6,36-6,29 (m, 1H), 6,13-6,05 (m, 2H), 5,72-5,69 (m, 1H), 5,58-5,57 (m, 1H), 5,01 (s, 2H), 4,43-4,42 (d, 2H), 4,21-4,15 (m, 1H), 3,88-3,79 (m, 2H), 3,37-3,34 (m, 2H), 2,95-2,92 (m, 1H), 2,20 (m, 1H), 1,84-1,81 (d, 2H), 1,38-1,33 (m, 2H), 1,24-1,22 (d, 6H); LCMS: m/z = 518,8 (M+H)+.

Ejemplo 32: Ensayo bioquímico para CDK7:

[0424] La capacidad de los compuestos para inhibir la actividad quinasa CDK7 se analizó en un ensayo TR-FRET usando 5 nM de CDK7/CycH/MNAT1 obtenido de Invitrogen, EE. UU. Los compuestos de la prueba se preincubaron con la quinasa a temperatura ambiente durante 60 min. Tras la incubación, se añadió la mezcla de sustrato [100 nM de Ultralight MBP (Perkin Elmer, EE. UU.) y 1 mM de ATP (Sigma)]. La reacción que se muestra arriba se detuvo mediante la adición de 40 mM de EDTA después de 60 minutos de reacción de la quinasa. Se añadió 1 nM de anticuerpo antifosfo-MBP marcado con Eu [Perkin Elmer, USA], se mezcló bien y se midió la emisión de fluorescencia a 615 nm y 665 nm [excitación a 340 nm]. La concentración de DMSO final en el ensayo fue del 1 %. Para la determinación de la IC⁵⁰, se consiguieron las concentraciones apropiadas mediante diluciones en serie 1/3 de 10 mM de solución madre de DMSO del compuesto de la prueba. Todas las mediciones de fluorescencia se realizaron en un contador Victor 3 Multilabel [Perkin Elmer, EE. UU.]. La IC⁵⁰ se determinó ajustando los datos de respuesta a la dosis a la ecuación de ajuste de la curva sigmoidea utilizando el software GraphPad Prism V5. Para identificar los compuestos que inhiben irreversiblemente la CDK7, se llevaron a cabo estudios de inhibición dependientes del tiempo preincubando el compuesto con la enzima en tres puntos temporales (20, 60 y 180 min) y realizando el ensayo como se ha descrito arriba.

[0425] Los compuestos seleccionados se cribaron en el procedimiento de ensayo mencionado anteriormente. El % de inhibición de los compuestos seleccionados y los valores de IC⁵⁰ se resumen en la tabla que se muestra abajo; donde el grupo «A» se refiere a un valor de IC⁵⁰ menor o igual a 300 nM, el grupo «B» se refiere a un valor de IC⁵⁰ en el intervalo de 300,01 a 1000 nM y el grupo «C» se refiere a un valor de IC⁵⁰ mayor de 1000 nM.

Ejemplo 33: Eficacia in vivo del inh ib idor de CDK7 en el modelo de xenoinjerto de cáncer de leucemia mieloide aguda (AML) humana MV4-11.

[0426] Se evaluó el efecto del inhibidor de CDK7 para inhibir el crecimiento de tumores de xenoinjerto MV4-11 implantados en ratones. En pocas palabras, las células MV4-11 se cultivaron en medio de Dulbecco modificado de Iscove (Sigma Aldrich) complementado con un 10 % de FBS (Invitrogen) y un 1 % de penicilina estreptomicina (Invitrogen). Para establecer los tumores, se inyectaron 15 X 106 células MV4-1l subcutáneamente en 200 pl de 1:1 HBSS (Sigma: H4641) y gel ECM (Corning) en el flanco trasero derecho de ratones macho desnudos atímicos (Envigo). El volumen tumoral se midió tres veces a la semana, y el peso corporal se monitorizó cada día. Para estimar los volúmenes tumorales, se midió la longitud (D) y la anchura (d) de los tumores de xenoinjerto manualmente con calibradores, y el volumen tumoral se calculó empleando la fórmula: volumen tumoral = (D x d2)/2. El tratamiento se inició cuando el tamaño tumoral medio había alcanzado aproximadamente 250 mm3. Los animales se aleatorizaron en función de los volúmenes tumorales en dos grupos de siete animales cada uno. Para evaluar la eficacia, el compuesto 115 se administró por vía intraperitoneal una vez al día (programa q24h/ qd). El período de tratamiento fue de 14 días, tras el cual se evaluó la eficacia general en función de los cambios en el volumen del tumor observados durante el período de tratamiento. Los volúmenes tumorales se analizaron utilizando una ANOVA unidireccional con comparaciones múltiples de Dunnett para comparar el tratamiento frente al grupo control. Los resultados se muestran en el gráfico (figura 1).

Ejemplo 34: Inhibición de fosforilación de CTD de ARN polimerasa II en ensayo Western celular:

[0427] Se sembraron 25000 células (MDA-MB-231/NCI-H358) en una placa negra de fondo claro de 96 pocillos incubada durante la noche antes de la adición del compuesto seleccionado. Se realizaron diluciones 3 veces del compuesto seleccionado diluido en DMSO partiendo de 10 pM, se añadió a las células y se incubó durante 4 horas a 37 °C, en un incubador con 5 % de CO². Las células se lavaron una vez con 100 pl de solución salina tamponada con fosfato (sigma # P3813), después se fijaron con 100 pl/pocillo de paraformaldehído al 4 % durante 60 min a temperatura ambiente, en la oscuridad. Las células se lavaron 3 veces con 100 pl de tampón de lavado (PBS con 0,1 % de Triton-X-100), posteriormente se bloquearon durante 2 horas a temperatura ambiente en tampón de bloqueo (5 % de BSA en PBST). Las células se tiñeron durante la noche a 4 °C con Fosfo ARN Pol II (S5) (Millipore n.° 04-1572, Abcam n.° 5131) o Fosfo ARN Pol II (Ser-2), anticuerpo (Bethyl Labs n.° A300-654-A) en tampón de bloqueo. Las células tras la incubación se lavaron con tampón de lavado Delifia (Perkin Elmer n.° 4010-0010). Las células se trataron con anticuerpos secundarios LANCE (LANCE® Eu-W1024 perkin elmer n.° AD-0076 para fosfo Ser-5 CTD ARN pol-II y Delfia Eu-N1 anti-conejo IgG Perkin elmer n.° AD0106 para fosfo Ser-2 CTD ARN pol-II) durante 2 horas en tampón de ensayo (Perkin Elmer n.° 1244­ 111). Las células se lavaron 3 veces con el tampón de lavado Delfia después de la incubación, se añadió la solución de mejora (Perkin Elmer n.° 1244-105) y se incubó durante 20 min. Las lecturas de europio se tomaron en un instrumento Victor-3. La normalización celular se realizó utilizando una tinción de Hoechst (0,5 pg/ml).

[0428] La inhibición (EC⁵⁰ en j M) de la fosforilación del CTD de ARN polimerasa II para los compuestos seleccionados se evaluó en la tabla que se muestra abajo:

Los compuestos seleccionados se cribaron en el procedimiento de ensayo mencionado anteriormente. Los valores de EC⁵⁰ se resumen en la tabla que se muestra abajo; donde el grupo «A» se refiere a un valor de EC⁵⁰ menor o igual a 1 j M, el grupo «B» se refiere a un valor de EC⁵⁰ en el intervalo de 1 a 10 j M y el grupo «C» se refiere a un valor de EC⁵⁰ mayor de 10 j M.

Claims (20)

REIVINDICACIONES

1. Compuesto según la fórmula (IB):

o una sal farmacéuticamente aceptable o un estereoisómero del mismo;

donde,

X es CH o N;

el anillo B es cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo o inexistente;

Ri es hidrógeno, alquilo o cicloalquilo;

R2 es un alquilo, cicloalquilo o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido; donde los sustituyentes opcionales son amino, halo, hidroxi, alquilo, alcoxi, alcoxialcoxi, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo;

R3 en cada aparición es independientemente halo, alquilo, hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, ciano, nitro o haloalquilo; R4 en cada aparición es independientemente

donde, Rsy R⁵" en cada aparición son independientemente hidrógeno o alquilo; R⁵' es hidrógeno, halo, alquilo, alcoxialquilo o -CH²-NRaRb;

R6 es hidrógeno o alquilo;

Ra y Rb son independientemente hidrógeno o alquilo; o Ra y Rb, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido que presenta 0-2 heteroátomos adicionales seleccionados de entre O, S y N; donde el sustituyente opcional es uno o más de alquilo o halo;

Li es -O -o -NH-;

L2 está ausente o es alquileno Ci-C6 opcionalmente sustituido, donde una o más unidades de metileno del alquileno está sustituida opcionalmente e independientemente con -C(O)-, -O-, -N(R7)- o cicloalquileno; donde R7 es hidrógeno o alquilo;

m es de 0 a 1;

n es 0, 1 o 2;

p es 1, 2 o 3; y

q es de 0 a 1.

2. Compuesto según la reivindicación 1, donde el compuesto de la fórmula (IB) es un compuesto de la fórmula (ID):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo.

3. Compuesto según la reivindicación 1, donde el compuesto de la fórmula (IB) es un compuesto de la fórmula (IE):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo.

4. Compuesto según la reivindicación 1, donde el compuesto de la fórmula (IB) es un compuesto de la fórmula (IF):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un estereoisómero del mismo.

5. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde el anillo B es cicloalquilo, arilo, heterocicloalquilo o heteroarilo.

6. Compuesto según las reivindicaciones 1,2 y 4, donde R² es cicloalquilo opcionalmente sustituido o heterocicloalquilo opcionalmente sustituido.

7. Compuesto según la reivindicación 6; donde dicho cicloalquilo es preferiblemente ciclohexilo y dicho heterocicloalquilo es preferiblemente N-metil-4-piperidinil o tetrahidro-4-piranil.

8. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1,2 y 4, donde R¹ es hidrógeno o alquilo; preferiblemente dicho alquilo es isopropilo.

9. Compuesto según las reivindicaciones 1, 2 y 4, donde R5' es preferiblemente -CH2-NRaRb; donde Ray Rb son independientemente hidrógeno o alquilo.

10. Compuesto según la reivindicación 9, donde Ra y Rb, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido que presenta 0-2 heteroátomos adicionales seleccionados de entre O, S y N.

11. Compuesto según la reivindicación 1 seleccionado del grupo que consiste en:

l(E)-

o una sal farmacéuticamente aceptable o un estereoisómero del mismo.

12. Compuesto según la reivindicación 1 seleccionado del grupo que consiste en:

o una sal farmacéuticamente aceptable o un estereoisómero del mismo.

13. Composición farmacéutica que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable o un estereoisómero del mismo y al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

14. Composición farmacéutica según la reivindicación 13 para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afección asociada con actividad aberrante de una CDK transcripcional selectiva.

15. Composición farmacéutica según la reivindicación 14, donde la CDK transcripcional selectiva es CDK7.

16. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-12 o la composición farmacéutica según la reivindicación 15 para su uso en el tratamiento de enfermedades, afecciones o trastornos mediados por CDK transcripcionales selectivas.

17. Compuesto o composición farmacéutica según la reivindicación 16 para su uso, donde las enfermedades, afecciones o trastornos mediados por CDK transcripcionales selectivas se seleccionan del grupo que consiste en un cáncer, un trastorno inflamatorio, un trastorno autoinflamatorio y una enfermedad infecciosa.

18. Compuesto o composición farmacéutica según la reivindicación 17 para su uso, donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste en un carcinoma, incluyendo el de mama, hígado, pulmón, colon, riñón, incluyendo el de vejiga, incluyendo cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer de cabeza y cuello, de tiroides, esófago, estómago, páncreas, ovario, vesícula biliar, cuello uterino, de próstata y de piel, incluyendo carcinoma de células escamosas, tumores hematopoyéticos de linaje linfoide, incluyendo leucemia, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica aguda, linfoma de Hodgkins, linfoma no de Hodgkins, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de células pilosas, mieloma, linfoma de células del manto y linfoma de Burkett, tumores hematopoyéticos de linaje mieloide, incluyendo leucemias mielógenas agudas y crónicas, síndrome mielodisplásico y leucemia promielocítica, fibrosarcoma y rabdomiosarcoma, tumores del sistema nervioso central y periférico, incluyendo astrocitoma, neuroblastoma, glioma y schwannomas, y otros tumores, incluyendo seminoma, melanoma, osteosarcoma, teratocarcinoma, queratoacantoma, xeroderma pigmentoso, cáncer folicular de tiroides y sarcoma de Kaposi.

19. Compuesto o composición farmacéutica para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 16 a 18 en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos adicionales seleccionados independientemente de entre agentes antiproliferativos, agentes anticancerígenos, agentes inmunosupresores y agentes analgésicos.

20. Compuesto o composición farmacéutica según la reivindicación 16 o 17 para su uso, donde las CDK transcripcionales selectivas son CDK7, CDK9, CDK12, CDK13 o CDK 18.