ES2887953T3 - Procedimiento para la inhibición de hongos en plantas vivas utilizando ácidos carboxílicos y sus sales - Google Patents

Procedimiento para la inhibición de hongos en plantas vivas utilizando ácidos carboxílicos y sus sales Download PDF

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Abstract

Un procedimiento de inhibición del crecimiento de un hongo en césped vivo que comprende el contacto del césped con una cantidad efectiva de una composición que consiste en: propionato de calcio y agua, en el que el propionato de calcio tiene una concentración del 5 % al 12 % (p/v).

Description

DESCRIPCIÓN
Procedimiento para la inhibición de hongos en plantas vivas utilizando ácidos carboxílicos y sus sales
Campo de la invención
La presente invención se refiere al procedimiento de inhibición del crecimiento de un hongo sobre césped vivo que comprende el contacto del césped con una cantidad efectiva de una composición que consiste en: propionato de calcio y agua, en el que el propionato de calcio tiene una concentración del 5 % al 12 % (p/v).
Antecedentes de la invención
El control del crecimiento de los microbios y las enfermedades de las plantas que causan es una gran preocupación en una gran variedad de áreas botánicas y agrícolas, tales como, por ejemplo, la producción y el mantenimiento de las plantas ornamentales, el césped, las verduras, los cereales, y los cultivos frutales. Superar el crecimiento de microbios y las enfermedades es importante para lograr un crecimiento, desarrollo, y producción óptimos de las plantas. La destrucción de plantas valiosas por microbios es una amenaza constante para el suministro de alimentos, a la vez que el crecimiento desenfrenado de la población ha ejercido presión sobre la necesidad de aumentar la producción de alimentos para evitar el hambre.
Además, el aumento del crecimiento de la población y la urbanización durante las últimas décadas han dado lugar a una amplia difusión del cultivo generalizado de césped como un medio para mejorar el valor funcional, recreativo y estético de los espacios urbanos. Este crecimiento ha convertido el cultivo y el mantenimiento del césped en una importante industria hortícola en Norteamérica, con un gasto anual que supera los 45mil millones de dólares. El mantenimiento de un césped sano es de interés para los consumidores no sólo para las residencias privadas, sino también para las empresas. Probablemente el mercado de negocio más importante para el césped es el sector del golf, en el que los cuidadores de los terrenos se esfuerzan por mantener grandes extensiones de césped verde impecable y sano.
El césped, además de muchas otras plantas vivas y cultivos, es susceptible a una serie de enfermedades comunes tales como la mancha del dólar, la mancha marrón, la mancha de verano, la mancha de todo, y la roya del tallo. La mancha del dólar es una de las enfermedades más comunes a las que se enfrentan los gestores del césped durante la temporada de crecimiento. Es una enfermedad foliar que afecta tanto el césped de temporada cálida como de temporada fría alrededor del mundo. Todos los principales tipos de césped de temporada fría pueden ser infectados por la mancha del dólar. Algunos tipos de césped son más susceptibles a la mancha del dólar, tales como ciertos cultivares de bentgrass rastrero o paspalum de costa. Además del paspalum de costa, otros céspedes de temporada cálida impactados son el bermudagrass, el zoysiagrass y el centipedegrass.
Dependiendo del tipo de césped y del segmento de gestión (campo de golf, campo deportivo o césped doméstico), la mancha del dólar puede causar diversos grados de daños en el césped, desde hojas descoloridas y marchitas en el césped doméstico hasta graves cicatrices en los putting greens de los campos de golf. En estas situaciones, la mancha del dólar puede alterar la estética general del césped y tener un impacto negativo en la jugabilidad de las superficies al causar cicatrices perjudiciales.
La mancha del dólar es una enfermedad foliar que provoca el marchitamiento de las hojas. Los síntomas de esta enfermedad pueden ser diferentes dependiendo de la altura de corte. En el césped de corte alto, los síntomas iniciales comienzan como pequeñas lesiones de color bronceado con márgenes de color rojo a granate que a menudo se expanden por el limbo de la hoja. En algunos casos, las lesiones pueden tener un aspecto de reloj de arena. Las áreas infectadas pueden tener un intervalo de 1 a 12 pulgadas de diámetro. En el césped de corte más bajo, los síntomas aparecen primero como manchas circulares de color bronceado de aproximadamente 1 pulgada de diámetro. Estas manchas pueden unirse en áreas infectadas más grandes. Uno de los signos reveladores de la mancha del dólar es la presencia de micelio blanco en los limbos de las hojas por la mañana después de un fuerte rocío.
Mantener el césped sano y reducir el estrés, por ejemplo, mediante la compactación de la tierra, puede ayudar a reducir los daños observados. El riego adecuado y la corrección de las deficiencias de los fertilizantes, especialmente del fósforo y el potasio, también son a veces útiles para reducir el daño causado por los microbios. Sin embargo, la reducción del daño es mínima y en muchos casos no puede eliminarse por completo.
Los pesticidas también están disponibles para proteger las plantas vivas de la destrucción por microbios e insectos. Sin embargo, estos pesticidas tienden a ser productos químicos tóxicos con implicaciones negativas para el medio ambiente, además de tener efectos potencialmente nocivos para la salud y el bienestar de los consumidores que ingieren alimentos procedentes de cultivos tratados. Por ejemplo, el fungicida clorotalonil (el ingrediente activo de muchos pesticidas) es muy tóxico para los peces, los invertebrados acuáticos, los moluscos, y las gambas y, en consecuencia, la Agencia de Protección del Medio Ambiente de Estados Unidos ha impuesto restricciones sobre su uso en el césped y otros cultivos para reducir el riesgo de alteración de los ecosistemas acuáticos. Como otro ejemplo, se ha demostrado que ciertos pesticidas son “disruptores endocrinos”, es decir, que afectan negativamente al sistema hormonal endocrino del organismo, lo cual en algunos casos puede ser permanente e incluso puede ocurrir a dosis bajas o mucho tiempo después de la exposición. (Vincelli, P., et al., “Chemical Control of Turfgrass Diseases 2017”, pp. 1-32, disponible en http://www2.ca.uky.edu/agcomm/pubs/ppa/ppal/ppal.PDF).
También se sabe que los microbios eventualmente desarrollan inmunidad a muchos de los pesticidas fabricados. La resistencia a los fungicidas, por ejemplo, en la enfermedad de la mancha del dólar, es un problema común en los campos de golf, y la forma de gestionar la resistencia a los fungicidas es un tema complejo y controvertido que aún no tiene una respuesta definitiva. (Geunhwa, J., et al., Golf Course Management Magazine, 2008 pp. 117-121).
Por lo tanto, existe la necesidad de procedimientos mejorados de inhibición del crecimiento de microbios en plantas vivas que sean amigables con el medio ambiente, menos tóxicos y los cuales no den como resultado la inmunidad de los microbios o prolonguen el tiempo de inmunidad de los mismos.
El documento US2004167220 A1 de acuerdo con su Resumen expone “Se proporcionan las formulaciones de fungicidas y bactericidas ambientalmente seguras mediante la incorporación de uno o más conservantes en una solución acuosa ligeramente ácida”. Los conservantes incluyen los ácidos orgánicos y las sales y ésteres de los mismos, pero excluyen los conservantes los cuales pueden generar compuestos que contienen azufre o cloro”.
El documento US 2006/247130 A1 de acuerdo con su Resumen expone “La invención se refiere a una composición para proteger un cultivo agrícola contra amenazas externas, tales como malezas, patógenos, estreses abióticos y bióticos y/o para mejorar la calidad de los productos producidos por el cultivo, cuya composición comprende uno o más polifenoles y uno o más otros ingredientes activos. Los otros ingredientes activos pueden ser compuestos naturales de protección de cultivos, metales, ácidos, los tres opcionalmente combinados entre sí y/o químicos, agentes antimicrobianos, o pueden ser pequeñas partículas de material orgánico, en particular de material orgánico fibroso, compuestos que inducen la tolerancia al estrés, compuestos que estimulan la reparación y el crecimiento de las heridas, o materiales que contienen celulosa”.
El documento US 2007/249699 A1 de acuerdo con su Resumen expone “Esta invención se refiere a composiciones agrícolas, particularmente composiciones pesticidas las cuales encuentran un uso particular como una composición fungicida o herbicida. La composición pesticida puede incluir uno o más ácidos grasos y uno o más ácidos orgánicos diferentes del ácido graso. El ácido orgánico puede, pero no necesita exhibir ninguna una actividad fungicida; sin embargo, cuando se combina con un ácido graso, el ácido orgánico funciona como un potente sinergista para el ácido graso como fungicida. Además, la composición pesticida puede incluir otros componentes tales como emulsionantes, adyuvantes, surfactantes y diluyentes. La composición pesticida reduce significativamente o evita la infección por hongo de los cultivos comerciales, incluyendo verduras, frutas, bayas, semillas, granos y, a tasas de aplicación más altas, también se puede utilizar como un herbicida y/o ayuda a la cosecha o desecante para los cultivos cosechados, tal como las patatas. La adición de una emulsionante mejora aún más las propiedades herbicidas de las composiciones”.
El documento US 4851223 A de acuerdo con su Resumen expone “Un conservante o esterilizante del tipo utilizado en la industria alimentaria y/o cervecera se utiliza para matar plagas en cultivos y plantas ornamentales que comprende aplicar a ellos un conservante o esterilizante del tipo utilizado. Las nuevas composiciones contienen dicho conservante o esterilizante junto con un agente de recubrimiento, por ejemplo, di-1-p-menteno, y posiblemente también un agente tensioactivo”.
El documento JP H05 163109 A de acuerdo con su Resumen, expone “PROPÓSITO: Obtener un agente de conservación de la frescura de las frutas capaz de inhibir los daños debidos al desorden fisiológico y la generación y proliferación de gérmenes patógenos causados por la deficiencia de calcio de las plantas, mejorando el crecimiento saludable de las frutas y la calidad de las mismas y conservando la frescura durante un largo período incluso después de la cosecha. CONSTITUCIÓN: Un agente de conservación de frescura para frutas que contiene propionato de calcio como ingrediente activo. El agente de conservación de frescura se obtiene disolviendo el ingrediente activo en agua en una cantidad de 200-1000 veces, pulverizando directamente el agente en las plantas y frutas o sumergiendo, aplicando y absorbiendo el agente en las plantas o frutas. De este modo, este agente es capaz de inhibir la generación y proliferación de gérmenes patógenos de las plantas, tales como mohos que crecen en las plantas y las frutas, y de suministrar simultáneamente calcio a las plantas, proporcionando efectos fertilizantes eficaces y haciendo crecer cuerpos vegetales sanos. Como resultado, las frutas normalmente nacen y maduran para ofrecer frutas de alta calidad. La frescura se conserva durante un largo periodo incluso después de la cosecha”.
Sumario de la invención
Es un objeto de la invención proporcionar procedimientos de inhibición del crecimiento de un microbio en una planta viva que, al mismo tiempo, sean amigables con el medio ambiente, menos tóxicos, no den como resultado la inmunidad del microbio, prolonguen el tiempo de inmunidad del microbio, o una combinación de los mismos.
Más específicamente, la invención se refiere a un procedimiento de inhibición del crecimiento de un hongo sobre césped vivo que comprende el contacto del césped con una cantidad efectiva de una composición que consiste en: propionato de calcio y agua, en el que el propionato de calcio tiene una concentración del 5 % al 12 % (p/v).
En el presente documento se divulgan procedimientos de inhibición del crecimiento de un microbio sobre una planta viva que comprenden el contacto de la planta viva con una cantidad efectiva de una composición que comprende un ácido carboxílico de Fórmula (I) o una sal del mismo:
Figure imgf000004_0001
en el que R es H, Ph, Ar, o C1-C60 alquilo.
También se divulgan en el presente documento productos de plantas vivas en contacto con una composición que comprende un ácido carboxílico de Fórmula (I) o una sal del mismo.
Otros objetos y ventajas de la invención se expondrán en parte en la descripción que sigue, y en parte serán obvios a partir de la descripción, o podrán ser aprendidos por la práctica de la invención. Los objetos y ventajas de la invención se realizarán y alcanzarán por medio de los elementos y combinaciones particularmente señalados en las reivindicaciones adjuntas.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1A muestra el crecimiento de M. poae tres días después de la inoculación en presencia de 0,1-0,5 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 1B muestra el crecimiento de M. poae siete días después de la inoculación en presencia de 0,1-0,5 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 2A muestra la inhibición del crecimiento de M. poae 2 días después de la inoculación en presencia de 0,5-4,0 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 2B muestra la inhibición del crecimiento de M. poae 5 días después de la inoculación en presencia de 0,5-4,0 (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 2C muestra la inhibición del crecimiento de S. homoeocarpa 2 días después de la inoculación en presencia de 0,5-4,0 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 2D muestra la inhibición del crecimiento de S. homoeocarpa 5 días después de la inoculación en presencia de 0,5-4,0 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 3 muestra los efectos del propionato de calcio (CaP) sin tratar, así como el 1 %, 2 % y 5 % (p/v) en cultivos activos de R. solani, S. homoeocarpa y M. poae tres días después de la eliminación del propionato de calcio.
La Figura 4 muestra los efectos del propionato de calcio (CaP) del1 %, 2 % y 5 % (p/v) en cultivos activos de R. solani, S. homoeocarpa, G. graminis y M. poae 14 días después de la eliminación del propionato de calcio. La Figura 5A muestra la inhibición del crecimiento de F. oxysporum a los 2 días en la presencia de 15 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 5B muestra la inhibición del crecimiento de F. oxysporum a los 4 días en la presencia del 15 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 5C muestra la inhibición del crecimiento de F. oxysporum a los 5 días en la presencia de 15 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
La Figura 5D muestra la inhibición del crecimiento de F. oxysporum a los 7 días en la presencia de 15 % (p/v) de propionato de calcio (CaP).
Descripción detallada de la invención
La presente invención se refiere a procedimientos para la inhibición del crecimiento de un hongo sobre un césped vivo
que comprenden el contacto del césped con una cantidad efectiva de una composición que consiste en: propionato
de calcio y agua, en el que el propionato de calcio tiene una concentración del 5 % al 12 % (p/v). También se describe
en el presente documento, la composición de ácido carboxílico que comprende ácido carboxílico o una sal del mismo.
También se describe en el presente documento, la composición de ácido carboxílico que comprende el ácido carboxílico de Fórmula (I) o una sal del mismo:
Figure imgf000005_0001
en el que R es H, fenilo (Ph), Ar, o un Ci-C60 alquilo. Opcionalmente el Ci-C60 alquilo está sustituido con al menos un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en: F, Cl, Br, I, At, O, S, S(O), SO2, N, P, P(O), Si, Si(O), B, Al, y sus combinaciones. De manera adecuada, Ar es un grupo arilo o heteroarilo C6 o C12 opcionalmente sustituido donde el heteroátomo puede ser O o N y el sustituyente puede seleccionarse a partir del grupo que consiste en H, F, Cl, Br, I,
At, SO2, NH2, NHR, NR2 y combinaciones de los mismos, donde R es como se define en el presente documento.
Opcionalmente el C1-C60 alquilo está sustituido con al menos un sustituyente Cl. Opcionalmente el C1-C60 alquilo está sustituido con dos sustituyentes Cl.
Opcionalmente R es H o un C1-C10 alquilo, un C1-C8 alquilo o un C3 alquilo.
El término “alquilo” significa, a menos que se indique lo contrario, un radical hidrocarburo de cadena recta o ramificada, acíclico o cíclico, o una combinación de los mismos, el cual puede ser totalmente saturado, mono o poliinsaturado y
puede incluir radicales di y multivalentes, que tienen el número de átomos de carbono designado (por ejemplo, C1-10 significa de uno a diez carbonos) y puede estar sustituido o sin sustituir. Los ejemplos de radicales hidrocarburos saturados incluyen grupos tales como el metilo, el etilo, el n-propilo, el isopropilo, el n-butilo, el t-butilo, el isobutilo, el sec-butilo, el ciclohexilo, el (ciclohexilo)metilo, el ciclopropilmetilo, los homólogos e isómeros de, por ejemplo, el npentilo, el n-hexilo, el n-heptilo, el n-octilo, y similares. Un grupo alquilo insaturado es aquel que tiene uno o más enlaces dobles o triples. Los ejemplos de grupos alquilos insaturados incluyen el vinilo, el 2-propenilo, el crotilo, el 2-isopentenilo, el 2-(butadienilo), el 2,4-pentadienilo, el 3-(1,4-pentadienilo), el etilo, el 1- y el 3-propinilo, el 3-butinilo y
los homólogos e isómeros superiores.
0025] También se describe en el presente documento, el ácido carboxílico es el ácido propiónico y tiene la siguiente Fórmula (II)
Figure imgf000005_0002
El ácido carboxílico útil en la composición divulgada puede formularse con cualquier sal agrícolamente aceptable. Los ejemplos de sales incluyen, por ejemplo, sales de metal tales como las sales de sodio, potasio, calcio y magnesio, sales de amonio tales como las sales de isopropilamonio y sales de trialquilsulfonio tales como las sales de trimetilsulfonio.
Las sales de ácido carboxílico que son útiles pueden comprender un ácido carboxílico neutralizado con, por ejemplo, un catión tal como Ca+2 , Ba+2, La+3 , Cd+2, Pb+2 , Co+2, Mn+2 , Ce+4 , Mg+2 , Zn+2, Cu+2 , Fe+3, Fe+2 , Ni+2, Sr+2 , Na+1, K+ 1, Rb+1, Cs+ 1, Fr+1, Be+2 , Ra+2, Al+3 , NH 4 + , NH 3 R+ , NH 2 R 2 + , NHR 3 + , NR 4 + , donde R es como se define en el presente documento, y similares. Las sales ejemplares pueden ser sales de metales alcalinos, metales alcalinotérreos
y o sales de amonio. Los iones de metal alcalino incluyen Li+1, Na+1, K+ 1, Rb+ 1, Cs+1, y Fr+1. Los iones de metal alcalinotérreos incluyen el Be+2 , el Mg+2, el Ca+2 , el Sr+ , el Ba+2 , y el Ra+2. Las sales de amonio incluyen sales de
amonio primarias, secundarias, terciarias y cuaternarias, tales como NH4+ , NH3 R+, NH2R2+ , NHR3+ , NR4+ , donde R es
como se define en el presente documento.
La composición de propionato de calcio utilizada en el procedimiento de la invención consiste en 5 % a 12 % (p/v) de propionato de calcio y agua. También se describe en el presente documento la composición de ácido carboxílico que comprende ácido propiónico o una sal del mismo.
También se describe en el presente documento la composición de ácido carboxílico que comprende un portador agrícolamente adecuado. El portador agrícolamente adecuado puede ser un líquido, un sólido, o un surfactante. Los ejemplos de portadores sólidos se describen en Watkins, et al., Handbook of Insecticide Dust Diluents and Carriers,
2nd Ed., Dorland Books, Caldwell, N.J. Los ejemplos de portadores líquidos se describen en Marsden, Solvents Guide, 2nd Ed., Interscience, New York, 1950. McCutcheon's Detergents and Emulsifiers Annual, Allured Publ. Corp., Ridgewood, N.Jasí como Sisely y Wood, Encyclopedia of Surface Active Agents, Chemical Publ. Co., Inc., Nueva York, 1964, lista de surfactantes y usos recomendados. La composición de ácido carboxílico también puede contener aditivos para reducir la espuma, el apelmazamiento, la corrosión, el crecimiento microbiológico y similares, o espesantes para aumentar la viscosidad.
Los surfactantes incluyen, por ejemplo, alcoholes polietoxilados, alquilfenoles polietoxilados, ésteres de ácidos grasos de sorbitán polietoxilados, sulfosuccinatos de dialquilo, sulfatos de alquilo, sulfonatos de alquilbenceno, organosiliconas, N,N-dialkiltauratos, sulfonatos de lignina, condensados de formaldehído de sulfonato de naftaleno, policarboxilatos y copolímeros en bloque de polioxietileno y polioxipropileno.
Los portadores sólidos incluyen, por ejemplo, mazorcas de maíz molidas, arcillas tales como bentonita, montmorillonita, atapulgita y caolín, almidón, azúcar, sílice, talco, tierra de diatomeas, urea, carbonato de calcio, carbonato de sodio, bicarbonato de sodio, y sulfato de sodio.
Los portadores líquidos incluyen, por ejemplo, agua, N,N-dimetilformamida, dimetilsulfóxido, N-alquilpirrolidona, etilenglicol, polipropilenglicol, parafinas, alquilbencenos, alquilnaftalenos, aceites de oliva, ricino, linaza, tung, sésamo, maíz cacahuete, algodón, soja, colza y coco, ésteres de ácidos grasos, cetonas tales como la ciclohexanona, la 2-heptanona, la isoforona y la 4-hidroxi-4-metil-2-pentanona, y alcoholes tales como el metanol, el ciclohexanol, el decanol y el alcohol tetrahidrofurfurílico.
La formulación de la composición de ácido carboxílico puede seleccionarse para que sea consistente con las propiedades físicas del ácido carboxílico, el modo de aplicación, y los factores ambientales tales como el tipo de suelo, la humedad y la temperatura. Las formulaciones divulgadas incluyen líquidos tales como soluciones (incluyendo concentrados emulsionables), suspensiones, emulsiones (incluyendo microemulsiones y/o suspo-emulsiones) y similares los cuales opcionalmente pueden ser espesados en geles.
Las formulaciones divulgadas incluyen además sólidos tales como polvos, polvillos, gránulos, pellets, tabletas, películas, y similares los cuales pueden ser dispersables en agua (“mojables”) o solubles en agua. La composición de ácido carboxílico puede ser propionato de calcio microencapsulado y formado además en una suspensión o formulación sólida; alternativamente, toda la formulación puede ser propionato de calcio encapsulado (o “recubierto”). La solución de propionato de calcio encapsulada puede controlar o retrasar la liberación del ingrediente activo. Las formulaciones pulverizables pueden extenderse en medios adecuados y utilizarse en volúmenes de pulverización que van de uno a varios cientos de litros por hectárea. Las formulaciones de alta resistencia se utilizan principalmente como productos intermedios para su posterior formulación.
La composición de ácido carboxílico está en una formulación líquida. La composición de ácido carboxílico comprende agua como portador. En la formulación líquida utilizada en el procedimiento de la presente invención el propionato de calcio está presente en el agua en un intervalo de concentración del 5 % al 12 % (p/v). También se describe en el presente documento, el ácido carboxílico y/o su sal pueden estar presentes en la formulación líquida o en el agua en un intervalo de concentración del 0,1 % al 50 % (p/v), del 0,5 % al 25 % (p/v), del 0,1 % al 12 % (p/v), o del 5 % al 12 % (p/v). En una realización de la invención, la concentración del carbonato de calcio es de aproximadamente el 5 % (p/v).
También se describen en el presente documento las composiciones de ácidos carboxílicos mezcladas opcionalmente con uno o más fertilizantes, pesticidas, protectores, insecticidas, fungicidas, nematocidas, bactericidas, acaricidas, reguladores del crecimiento, quimioesterilizantes, semioquímicos, repelentes, atrayentes, feromonas, estimulantes de la alimentación u otros compuestos biológicamente activos. Ejemplos de dichos protectores agrícolas con los cuales se pueden formular las composiciones de ácido carboxílico son: insecticidas tales como abamectina, acefato, azinfosmetilo, bifentrina, buprofezina, carbofurano, clorfenapir, clorpirifos, clorpirifos-metilo, ciflutrina, beta-ciflutrina, cihalotrina, lambda-cihalotrina, deltametrina, diafentiurón diazinón, diflubenzurón, dimetoato, esfenvalerato, fenoxicarb, fenpropatrina, fenvalerato, fipronil, flucitrinato, tau fluvalinato, fonofos, imidacloprid, isofenfos, malatión, metaldehído, metamidofos, metidatión, metomilo, metopreno, metoxicloro, 7-cloro-2,5-dihidro-2-[[N-(metoxicarbonilo)-N-[4-(trifluorometoxi)fenil] amino]carbonilo]indeno[1,2-e][1,3,4]oxadiazina-4a(3H)-carboxilato de metilo (DPX-JW062), monocrotofos, oxamilo, paratión, paratión-metilo, permetrina, forato, fosalona, fosmet, fosfamidón, pirimicarb, profenofos, rotenona, sulprofos, tebufenozida, teflutrina, terbufos, tetraclorvinfos, tiodicarb, tralometrina, triclorfón y triflumurón; fungicidas tales como azoxistrobina, benomilo, blasticidina-S, mezcla de Burdeos (sulfato de cobre tribásico), bromuconazol, propionatetafol de calcio, propionatetan de calcio, carbendazima, cloroneb, clorotalonil, oxicloruro de cobre, sales de cobre, cimoxanil, ciproconazol, ciprodinil (CGA 219417) diclomezina, diclorán, difenoconazol, dimetomorfo, diniconazol, diniconazol-M, dodina, edifenfos, epoxiconazol (BAS480F), famoxadona, fenarimol, fenbuconazol, fenpiclonil, fenpropidin, fenpropimorfo, fluazinam, fluguinconazol, flusilazol, flutolanil, flutriafol, folpet, fosetil-aluminio, furalaxil, hexaconazol, ipconazol, iprobenfos, iprodiona, isoprotiolano, kasugamicina, kresoxim metilo, mancozeb, maneb, mepronil, metalaxil, metconazol, S-metil 7-benzotiazolcarbotioato (CGA 245704), miclobutanil, neo-asozin (metanearsonato férrico), oxadixil, penconazol, pencicurón, probenazol, procloraz, propiconazol, pirifenox, piroquilón, quinoxifeno, espiroxamina (KWG4168), azufre, tebuconazol, tetraconazol, tiabendazol, tiofanato-metilo, tiram, triadimefón, triadimenol, triciclazol, triticonazol, validamicina y vinclozolina; nematocidas tales como el aldoxicarb y el fenamifos; bactericidas tales como la estreptomicina; acaricidas tales como el amitraz, el cinometionato, el clorobencilato, la cihexatina, el dicofol, el dienocloro, el etoxazol, la fenazaquina, el óxido de fenbutaestán, la fenpropatrina, el fenpiroximato, el hexitiazox, el propargita, el piridaben y el tebufenpirad; y agentes biológicos.
En ciertos casos, las combinaciones con fungicidas que tienen un espectro de control similar pero un modo de acción diferente, serán particularmente ventajosas para la inhibición del crecimiento microbiano.
Las formulaciones se utilizan en el procedimiento de la invención de la manera habitual, por ejemplo, regando, pulverizando, atomizando, esparciendo, cepillando sobre y como un polvo para el tratamiento de las semillas en seco, una solución para el tratamiento de las semillas, un polvo soluble en agua para el tratamiento de las semillas, un polvo soluble en agua para el tratamiento de los purines, la encapsulación, o por incrustación. En una realización de la invención, las composiciones de ácido carboxílico se ponen en contacto con un césped vivo mediante pulverización.
El procedimiento de la invención es útil para la inhibición del crecimiento de un microbio por hongo sobre el césped vivo. El término “ inhibición” del crecimiento microbiano, o un material el cual “ inhibe” el crecimiento microbiano, se utiliza para referirse a los materiales los cuales evitan el crecimiento microbiano, o que posteriormente matan a los microbios para que la población esté dentro de los límites aceptables, o a los materiales los cuales retardan significativamente los procesos de crecimiento de los microbios o mantienen el nivel o los microbios a un nivel o intervalo prescrito. El nivel prescrito puede variar ampliamente dependiendo del microbio y su patogenicidad; en general, es preferente que los organismos perjudiciales estén presentes a un nivel tal como cualquier enfermedad o enfermedades causadas por el microbio no puedan detectarse visualmente con una visión 20/20 a una distancia de un metro o más de la planta viva. En una realización de la invención, los microbios no pueden ser detectados o permanecen a un nivel el cual no es perjudicial para la planta viva.
En una realización de la invención, el procedimiento de la presente invención puede utilizarse para inhibir un hongo seleccionado del grupo que consiste en Scerotinia homoeocarpa, Rhizoctonia solani, Magnaporthe poae, Gaeumannomyces graminis, Puccinnia striiformis, Fusarium oxysporum, y combinaciones de los mismos.
En otra realización de la invención el microbio es Scerotinia homoeocarpa, Rhizoctonia solani, Magnaporthe poae, Gaeumannomyces graminis, Puccinnia striiformis, o Fusarium Oxysporum
Ejemplos específicos de enfermedades causadas por el microbio incluyen la mancha del dólar (Scerotinia homoeocarpa), la mancha marrón (Rhizoctonia solani), la mancha grande (Rhizoctonia solani), la mancha de verano (Magnaporthe poae), la mancha de todo (Gaeumannomyces graminis), la roya del tallo (Puccinnia striiformis), y la enfermedad de Panamá, o raza tropical (TR4), o la marchitez por fusarium (Fusarium Oxysporum).
Según la invención, “no vivo” se aplica, en general, a una planta que alguna vez tuvo, pero ya no tiene, vida física, en cambio “vivo” o “viviente” se aplica a una planta que tiene vida física, es decir, una planta viva es aquella que está creciendo activamente (o es capaz de crecer activamente) en comparación con el material vegetal cosechado y la cual, por ejemplo, todavía tiene raíces funcionales. Simplemente a modo de ejemplo, el césped que se corta, por ejemplo, con una segadora, y, por lo tanto, se separa de la raíz es “no vivo”, a la vez que las partes del césped que permanecen creciendo en el medio de cultivo, por ejemplo, el suelo, es “vivo” o “viviente” Del mismo modo, las plantas que han sido cortadas para, por ejemplo, su consumo, tales como la alfalfa, el heno, los cacahuetes, el trigo, el maíz, los cereales y similares, son “no vivas” de acuerdo con la invención. Simplemente a modo de ejemplo, una planta “viva” de acuerdo con la invención puede incluir el césped en forma de tepes, tanto cuando se cultiva en un medio de cultivo superficial, por ejemplo, el suelo, como cuando se corta horizontalmente en una capa fina para su uso en un lugar distinto al de su cultivo. En otras palabras, el césped en forma de tepes no es “no vivo” de acuerdo con la invención simplemente porque se retire del suelo superficial en una capa fina, ya que el césped en forma de tepes puede ser transportado y continuar creciendo en una nueva ubicación.
Las “plantas” vivas de acuerdo con la invención pueden estar en cualquier fase de desarrollo, por ejemplo, semilla, bulbo, inmaduro o maduro.
En una realización de la invención, la planta viva es una planta angiosperma. En otra realización de la invención, la planta viva está madura. En el procedimiento de la invención, la planta viva es un césped. Tal como se utiliza en el presente documento, el término “césped” se refiere a una hierba cultivada que cubre el suelo, por ejemplo, un césped o pasto que se corta periódicamente o se siega para mantener una altura constante.
Ejemplos de césped de temporada fría incluyen, sin limitación: pastos azules (Poa spp.), tal como el pasto azul de Kentucky (Poa pratensis L.), el pasto azul supina (Poa supina), el pasto azul rugoso (Poa trivialis L.), el pasto azul de Canadá (Poa compressa L.), el pasto azul anual (Poa annua L.), el pasto agrostis de secano (Agrostis castellena), el pasto azul de montaña (Poa glaucantha Gaudin), el pasto azul de madera (Poa nemoralis L.), y el pasto azul bulboso (Poa bulbosa L.); el pasto agrostis y el Redtop (Agrostis spp.), tales como el pasto agrostis rastrero (Agrostis palustris Huds. o Agrostis stolonifera), el pasto agrostis colonial (Agrostis tenuis Sibth.), el pasto agrostis terciopelo (Agrostis canina L.), el pasto agrostis mixto del sur de Alemania (Agrostis spp. incluyendo Agrostis tenius sibth, Agrostis canina L., y Agrostis palustris Huds.), y Redtop (Agrostis alba L.); las festucas (Festuca spp.), tales como la festuca roja (Festuca rubra L. spp. rubra) la festuca rastrera (Festuca rubra L.), la festuca masticable (Festuca rubra commutata Gaud.), la festuca ovina (Festuca ovina L.), la festuca dura (Festuca longifolia Thuill.), la festuca capilar (Festuca calcium propionateillata Lam.), la festuca alta (Festuca arundinacea Schreb.), la festuca de los prados (Festuca elanor L.); los raygrass (Lolium spp.), tales como el raygrass anual (Lolium multiflorum Lam.), el raygrass perenne (Lolium perenne L.), y el raigrás italiano (Lolium multiflorum Lam.); y los agropiros (Agropyron spp.), tales como el agropiro de trigo de calle (Agropyron cristatum (L.) Gaertn.), el agropiro de cresta (Agropyron desertorum (Fisch.) Schult.), y el agropiro occidental (Agropyron smithii Rydb.). Otros tipos de césped de temporada fría incluyen el pasto de playa (Ammophila breviligulata Fern.), el bromo liso (Bromus inermis Leyss.), los rabos de gato tales como el fleo (Phleum pratense L.), la espadaña de arena (Phleum subulatum L.), el pasto de huerta (Dactylis glomerata L.), el pasto alcalino llorón (Puccinellia distans (L.) Parl.) y la cola de perro crestada (Cynosurus cristatus L.).
Ejemplos de césped de temporada cálida incluyen el pasto Bermuda (Cynodon spp. L. C. Rich), el pasto Zoysi (Zoysia spp. Willd.), el pasto San Agustín (Stenotaphrum secundatum Walt Kuntze), el pasto Ciempiés (Eremochloa ophiuroides Munro Hack.), el pasto alfombra (Axonopus affinis Chase), el pasto bahia (Paspalum notatum Flugge), el pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum Hochst. ex Chiov.), el pasto bufal (Buchloe dactyloids (Nutt.) Engelm.), Gramma azul (Bouteloua gracilis (H.B.K.) Lag. ex Griffiths), Seashore paspalum (Paspalum vaginatum Swartz), y Sideoats grama (Bouteloua curtipendula (Michx. Torr.)).
De acuerdo con una realización de la invención, la composición de ácido carboxílico de la invención se pone en contacto con un césped de temporada fría. En otra realización de la invención, el césped de temporada fría se selecciona del grupo que consiste en variedades de festuca, centeno y pasto azul de Kentucky.
El césped vivo puede ser contactado de acuerdo con el procedimiento de la invención diariamente, semanalmente, cada 10 días, quincenalmente, o mensualmente. Se puede seguir cualquier programa de tratamiento siempre que se obtenga una inhibición óptima del crecimiento de los microbios y/o de la enfermedad. En una realización de la invención, las composiciones de propionato de calcio se ponen en contacto con un césped vivo aproximadamente una vez cada 2 a 30 días, 5 a 21 días, 7 a 21 días o 7 a 14 días. El tratamiento puede ocurrir con menos frecuencia en las temporadas más frías.
Una o más porciones de un césped vivo pueden ponerse en contacto con las composiciones de propionato de calcio de acuerdo con el procedimiento de la invención, tales como hojas, coronas, raíces, estolones, tallos, follaje, frutas, semillas, plántulas, tubérculos o bulbos. En una realización de la invención, la composición de propionato de calcio se pone en contacto con al menos una porción de un césped seleccionada del grupo que consiste en hoja, corona, estolón, raíz, y combinaciones de los mismos. En otra realización de la invención, el medio (por ejemplo, el suelo o la arena) en el cual la planta viva está creciendo o va a crecer se pone en contacto con las composiciones de propionato de calcio de acuerdo con los procedimientos de la invención.
El propionato de calcio en la composición utilizada en los procedimientos de la presente invención puede aplicarse en forma de pulverizadores mediante procedimientos comúnmente empleados, tales como pulverizadores hidráulicos convencionales de alto galonaje, pulverizadores de bajo galonaje, por chorro de aire, pulverizadores aéreos y polvos. La dilución y la tasa de aplicación dependerán del tipo de equipo empleado, del procedimiento y de la frecuencia de aplicación deseada y de las enfermedades a controlar. El propionato de calcio en la composición utilizada en los procedimientos de la invención puede aplicarse en un intervalo de 9 a 227 litros (2 a 50 galones) por 1000 metros cuadrados.
Una cantidad efectiva del propionato de calcio en la composición utilizada en los procedimientos de acuerdo con la presente invención para la aplicación a céspedes y otras áreas similares de plantas vivas es típicamente de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 30 gramos por metro cuadrado, de aproximadamente 1,0 a aproximadamente 10 gramos por metro cuadrado, de aproximadamente 2,5 a aproximadamente 7,5 gramos por metro cuadrado, o de aproximadamente 3,0 a 5,0 gramos por metro cuadrado de área a tratar.
En otra realización, una cantidad efectiva del propionato de calcio en la composición utilizada en el procedimiento de acuerdo con la presente invención para su aplicación a las semillas es de aproximadamente 10 a aproximadamente 20 gramos por 50 kilogramos de semilla. En aún otra realización, una cantidad efectiva del propionato de calcio en la composición utilizada en los procedimientos de acuerdo con la presente invención puede incorporarse al suelo o aplicarse a la superficie del suelo a una tasa de dosificación de aproximadamente 0,5 kg a aproximadamente 300 kg o de aproximadamente 1 kg a aproximadamente 75 kg por hectárea.
También se divulgan productos vegetales puestos en contacto con composiciones que consisten en propionato de calcio y agua. También se describe en el presente documento, el producto vegetal vivo es un suelo que está en contacto con una composición que consiste en propionato de calcio y agua. También se describe en el presente documento, que el producto vegetal vivo es un bulbo de flor, tal como un bulbo de tulipán, que está en contacto con una composición que consiste en propionato de calcio y agua. También se describe en el presente documento que el producto vegetal vivo es un plátano que está en contacto con una composición que consiste en propionato de calcio y agua. Los procedimientos de la invención pueden, por lo tanto, utilizarse para inhibir el crecimiento de un hongo en el entorno de una planta viva. Las características preferentes de cada realización descrita en el presente documento pueden combinarse con las características preferentes de otras realizaciones descritas en el presente documento.
EJEMPLOS
Los siguientes ejemplos no pretenden ser limitantes y representan ciertas realizaciones de la presente invención.
Ejemplo 1
Establecimiento de un Intervalo de Dosis Efectiva para el Tratamiento con Propionato de Calcio en una Nueva Infección en medio semisólido mediante un ensayo de zona de inhibición: intervalo de dosis de 0,1 a 0,5 % de propionato de calcio (p/v)
Se prepararon cultivos líquidos de cuatro microbios comunes que se enumeran a continuación junto con las enfermedades que causan en el césped:
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Para probar la eficacia del propionato de calcio (CaP) contra los cuatro microbios mencionados anteriormente, se realizaron ensayos de zona de inhibición. Se perforaron pozos en placas de agarosa dextrosa de patata (PDA) y luego se modificaron con 100|jl/pocillo de propionato de calcio a concentraciones de 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 % y 0,5 % (p/v). Las placas de control se modificaron con 100pl/pocillo de dH2O. Las placas fueron inoculadas utilizando tapones de cultivos activos. Se observaron los patrones de crecimiento durante siete días. Se muestran resultados representativos con M. poae tres días después de la inoculación (Figura 1A) y siete días después de la inoculación (Figura 1B).
Como se demuestra en las Figuras 1A y 1B, no se observó ninguna inhibición del crecimiento. Se observaron resultados similares con S. homoeocarpa, G. graminis y R. solani. Este experimento sugiere que las concentraciones de 0,5 % (p/v) de propionato de calcio o inferiores no son efectivas como un tratamiento de fungicida.
Ejemplo 2
Establecimiento de un Intervalo de Dosis Efectiva para el Tratamiento con propionato de calcio en una Nueva Infección en medio semisólido mediante un ensayo de zona de inhibición: intervalo de dosis de 0,5 - 4 % de propionato de calcio (p/v)
Los ensayos de zona de inhibición descritos en el Ejemplo 1 se realizaron utilizando dosis de propionato de calcio de 0,5 %, 1 %, 2 %, 3 % y 4 % (p/v). El diámetro de crecimiento se registró a los 2, 5 y 7 días después de la inoculación. Los datos mostrados en la Tabla 1 representan el promedio ± de desviación estándar (DE) de dos placas replicadas para cada cepa probada.
Tabla 1
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Como se muestra en la Tabla 1 y las Figuras 2A-2D, S. homoeocarpa y M. poae mostraron una clara inhibición del crecimiento durante un período de crecimiento de siete días. La inhibición del crecimiento se observó a partir de los dos días posteriores a la inoculación (Figuras 2A y 2C) con una inhibición pronunciada mostrada a los cinco días (Figuras 2B y 2D). El crecimiento a los cinco días se dirigió claramente hacia los pozos de propionato de calcio al 0,5­ 1 % (p/v), lo que sugiere el efecto inhibidor a una concentración del 2-4 % (p/v).
Como se muestra en la Tabla 1, siete días después de la inoculación el crecimiento de S. homoeocarpa en presencia de propionato de calcio se midió en 6,08 ± 0,57 cm en comparación con 8,5 ± 0 cm para las placas de control. M. poae fueron inhibidos en un grado similar. Los inoculantes de G. graminis mostraron una inhibición del crecimiento a los 2 y 5 días después de la inoculación; sin embargo, no se observó ninguna diferencia de crecimiento entre las placas modificadas con propionato de calcio y las de control a los 7 días después de la inoculación. En contraste con la inhibición del crecimiento observada en las otras tres cepas, el crecimiento de R. solani no se vio inhibido en presencia de propionato de calcio.
Se repitieron los experimentos de zona de inhibición para confirmar el efecto del 2-4 % (p/v) de propionato de calcio en la inhibición del crecimiento de S. homoeocarpa y M. poae. Los resultados de estos experimentos fueron mixtos, observándose una inhibición en el intervalo del 2-4 % (p/v) pero no de forma consistente (no se muestran datos). Estos resultados inconsistentes sugieren que las concentraciones de propionato de calcio en el intervalo del 2-4 % no son lo suficientemente altas como para inhibir el crecimiento en los cultivos recién iniciados.
Ejemplo 3
Establecimiento de un Intervalo de Dosis Efectiva para el Tratamiento con propionato de calcio en una Nueva Infección en medio semisólido mediante un ensayo de zona de inhibición: intervalo de dosis de 5 a 12 % de propionato de calcio (p/v)
Se realizaron ensayos de zona de inhibición utilizando placas de PDA modificadas con 5-12 % (p/v) de propionato de calcio como se describe anteriormente. Como control, las placas se modificaron con una composición que incluía propiconazol, un tratamiento fungicida comúnmente utilizado para la infección de microbios en el césped, vendido bajo la marca comercial Banner MaxxII®. El diámetro de crecimiento se registró durante 13 días después de la inoculación. Los datos que se muestran en la Tabla 2 representan el promedio ± de desviación estándar (DE) de tres placas replicadas para cada cepa probada. Los inoculantes de S. homoeocarpa, M. poae y R. solani en general crecen hasta alcanzar un cultivo exuberante, cubriendo toda la superficie de la placa crecimiento de (8,5 cm) en 7 días. G. graminis es una cepa de crecimiento más lento, que alcanza un crecimiento exuberante en 12-14 días.
Después de siete días de crecimiento en presencia de 5-12 % (p/v) de propionato de calcio, se observó una inhibición sustancial del crecimiento en S. homoeocarpa, M. poae y G. graminis (4,3 ± 0,3 cm, 3,1 ± 0,4 cm y 4,0 ± 0,6 cm, respectivamente). La inhibición del crecimiento continuó hasta el día 10; sin embargo, en el día 13 los efectos inhibitorios disminuyeron y los cultivos se volvieron exuberantes. A diferencia, no se observó ninguna inhibición del crecimiento de R. solani por concentraciones de propionato de calcio de hasta el 12 % (p/v) (Tabla 2). Como era de esperar, los cultivos inoculados en placas suplementadas con un 6 % de Banner MaxxII® (propiconazol) también mostraron una inhibición del crecimiento. Los experimentos repetidos en los que se probó la concentración de propionato de calcio del 5 al 12 % (p/v) mostraron resultados similares, lo que sugiere que este intervalo de concentración de propionato de calcio es efectivo hasta 10 días como agente antifúngico contra la infección microbiana recién establecida.
Tabla 2
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Ejemplo 4
Establecimiento del Intervalo de Dosis Efectiva para el Tratamiento con propionato de calcio en una Nueva Infección en un medio semisólido que contiene una distribución homogénea de propionato de calcio.
A diferencia de los ensayos de zona de inhibición descritos en los Ejemplos 1-3, para este experimento se preparó PDA con propionato de calcio totalmente incorporado en la agarosa. Así, los inoculantes se cultivaron en placas en las cuales el propionato de calcio se incorporó a una concentración uniforme en toda la placa, en lugar de las zonas de concentración establecidas por simple difusión en la zona de ensayos de inhibición. Las placas de PDA se modificaron con propionato de calcio al 5, 7,5, 10 o 12 % (p/v). El diámetro de crecimiento se registró durante 15 días después de la inoculación. Los datos que se muestran en la Tabla 3 representan los resultados de las pruebas con una sola placa.
En contraste con lo observado en la zona de ensayos de inhibición, los inoculantes de R. solani mostraron una clara inhibición del crecimiento a concentraciones de propionato de calcio al 5 % y 7,5 % (p/v) después de 15 días de observación (4,6 cm y 2,0 cm, respectivamente, en comparación con 8,5 cm de crecimiento después de 7 días en ausencia de propionato de calcio). Las concentraciones de propionato de calcio al 10 % y 12 % (p/v) inhibieron completamente el crecimiento durante 15 días. Las placas inoculadas con S. homoeocarpa, M. poae o G. graminis no mostraron crecimiento en ninguna de las concentraciones de propionato de calcio probadas. Los experimentos repetidos mostraron resultados similares.
Tomados en conjunto, estos datos sugieren que las concentraciones de propionato de calcio del 5 % (p/v) o superiores son efectivas para evitar el crecimiento de los cultivos recién iniciados de tres de los cuatro microbios probados. Además, estos estudios sugieren que el propionato de calcio también es efectivo contra R. solani en concentraciones más altas (10 % (p/v) o más).
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Para determinar si la inhibición completa del crecimiento observada se debía a un efecto fungistático o fungicida del propionato de calcio, los inoculantes de tapón utilizados para iniciar los cultivos en presencia de propionato de calcio (descritos en la Tabla 3 anterior) se transfirieron a placas de PDA sin propionato de calcio. Las placas se observaron durante 14 días. No se observó ningún crecimiento en las placas de PDA no modificadas después la transferencia de tapones de S. homoeocarpa, M. poae y G. graminis cultivados inicialmente en propionato de calcio al 5, 7,5, 10 o 12 % (p/v). Del mismo modo, los tapones de R. solani que no mostraron crecimiento en propionato de calcio al 10 % y el 12 % (p/v) de, no crecieron cuando se movieron a un entorno sin propionato de calcio. Por el contrario, la transferencia de tapones de R. solani, que mostró una inhibición del crecimiento en placas de propionato de calcio al 5 % y al 7,5 % (p/v), dio como resultado un crecimiento exuberante 6-7 días después de la transferencia del tapón. Estos datos sugieren que el propionato de calcio al 5 % (p/v) muestra un efecto fungicida sobre tres de los cuatro microbios probados.
Sin embargo, aunque esta concentración de propionato de calcio parece tener un efecto inhibidor del crecimiento de R. solani, es fungistático más que fungicida; se requiere un 10-12 % (p/v) de propionato de calcio para lograr un efecto fungicida sobre R. solani. Los resultados observados demuestran la efectividad del tratamiento con propionato de calcio en los cultivos recién iniciados y sugieren que el propionato de calcio puede ser útil como tratamiento profiláctico en el césped para evitar la infección microbiana y/o tratar las infecciones en fase inicial.
Ejemplo 5
Establecimiento del Intervalo de Dosis Efectiva para el Tratamiento con propionato de calcio en una Nueva Infección en un medio de cultivo líquido que contiene una distribución homogénea de propionato de calcio.
Para examinar el intervalo de dosis efectiva en un cultivo líquido, se preparó caldo de extracto de malta (MEB) y se modificó con propionato de calcio en concentraciones de 1, 2, 5 y 10 % (p/v). El MEB no modificado se utilizó como control de crecimiento. Cada uno de los cuatro microbios identificados en el Ejemplo 1 se probó dos veces inoculando MEB utilizando tapones de agarosa de cultivos exuberantes. Se observó el crecimiento durante cinco días. En cada uno de los microbios examinados, el crecimiento visible en el cultivo líquido fue aparente al segundo día después de la inoculación, con un crecimiento bien establecido a los 4 días en ausencia de propionato de calcio. Por el contrario, no se observó ningún crecimiento en los cultivos que contenían propionato de calcio, incluso con la dosis más baja del 1 % (p/v). Para confirmar este resultado, se repitieron los experimentos con resultados similares, lo que sugiere que dosis de propionato de calcio tan bajas como el 1 % (p/v) son efectivas para evitar el crecimiento de nuevos inoculantes en el cultivo líquido MEB.
Ejemplo 6
Efectividad del Tratamiento con propionato de calcio en Infecciones Microbianas Establecidas
Para examinar el efecto del propionato de calcio en cultivos bien establecidos de S. homoeocarpa y M. poae, se inoculó MEB con tapones de agarosa como se describió anteriormente. Se permitió que los cultivos crecieran durante 10 días para que se estableciera una estera hifal robusta. después de 10 días, las esteras de hifas se rompieron mediante pipeteo para romper el micelio (cultivo interrumpido). Se transfirió un mililitro de cultivo interrumpido a MEB modificado con propionato de calcio al 1 %, 2 %, 5 % o 10 % (p/v). Se utilizó MEB sin propionato de calcio como control. Se permitió que los cultivos crecieran durante cinco días después de la inoculación con micelio alterado.
No se observó ningún crecimiento en los cultivos interrumpidos de S. homoeocarpa y M. poae durante cinco días en todas las dosis de propionato de calcio probadas, a la vez que los cultivos interrumpidos crecidos en ausencia de propionato de calcio mostraron un crecimiento exuberante. Estos datos sugieren que el propionato de calcio puede ser efectiva como tratamiento de la infección robusta de al menos dos microbios comunes.
Para examinar más a fondo el impacto del propionato de calcio en los cultivos líquidos establecidos se inoculó MEB por transferencia de tapones y se dejó que los cultivos crecieran de uno a seis días. Después de esto, se añadió propionato de calcio a los cultivos activos hasta una concentración final del 1 %, 2 % o 5 % (p/v); los cultivos de control no tenían propionato de calcio. Luego, se añadió propionato de calcio a los cultivos establecidos de uno a seis días de edad y se dejó que los cultivos crecieran en presencia de propionato de calcio durante dos días, después de lo cual, se lavó el propionato de calcio y se devolvieron los cultivos sólo a MEB. Se registró el crecimiento después del lavado de propionato de calcio durante 14 días.
Los cultivos de control no tratados mostraron patrones de crecimiento normales para los cuatro microbios probados (Figura 3). En los cultivos tratados con propionato de calcio, se inhibió el crecimiento a la vez que el propionato de calcio estaba presente en todas las concentraciones probadas. Tres días después de la eliminación del propionato de calcio, S. homoeocarpa, G. graminis (no se muestran datos) y M. poae mostraron una inhibición continua del crecimiento en todas las concentraciones probadas; en los cultivos de R. solani, se observó un crecimiento robusto después de la eliminación del propionato de calcio en las concentraciones examinadas. Estos resultados sugieren que la exposición a corto plazo de propionato de calcio en concentraciones entre el 1-5 % (p/v) produce un efecto fungistático en los cultivos establecidos de S. homoeocarpa, G. graminis y M. poae durante al menos tres días después de la eliminación del propionato de calcio.
La observación adicional durante 14 días reveló cierta recuperación del crecimiento (Figura 4). En cultivos de G. graminis, concentraciones tan bajas como el 1 % (p/v) parecen tener un efecto fungicida, ya que no se observó ningún crecimiento hasta dos semanas después de la eliminación del propionato de calcio. Por el contrario, S. homoeocarpa y M. poae demostraron diversos grados de recuperación del crecimiento al 1 % o al 2 % (p/v) de propionato de calcio, a la vez que no se observó ninguna recuperación del crecimiento después de un tratamiento al 5 % (p/v), lo que sugiere un efecto fungistático a esta concentración. Los cultivos de R. solani mostraron una pequeña inhibición del crecimiento en el transcurso de dos semanas en todas las concentraciones probadas, lo que sugiere que concentraciones más altas de propionato de calcio podrían ser efectivas contra esta cepa (Figura 4).
Ejemplo 7
Establecimiento de un Intervalo de Dosis Efectiva para el Tratamiento con propionato de Calcio en una Nueva Infección en medio semisólido mediante un ensayo de zona de inhibición: intervalo de dosis de 1 a 15 % de propionato de calcio (p/v)
Los cultivos de F. oxysporum se cultivaron en medio PDA hasta que fueron exuberantes. Para probar el efecto del propionato de calcio (CaP), se transfirieron tapones de hongos a YPA o PDA modificados con CaP y se supervisó el crecimiento durante siete días. Se modificaron las placas YPA con 1 %, 4 % o 15 % de CaP. El crecimiento en presencia del 1 % de CaP no se vio afectado, a la vez que F. oxysporum no pudo crecer en presencia del 4 % o del 15 % de CaP (no se muestran datos). Se observaron resultados similares para el crecimiento en PDA modificado con 15 % de propionato de calcio (Figura 5). Estos resultados sugieren que concentraciones de CaP del 4 % o superiores son efectivas para la inhibición del crecimiento de F. oxysporum.
Ejemplo 8
Efectividad del Tratamiento con propionato de calcio en cultivos de césped vivo infectado
Campo de golf 1
El propionato de calcio se disolvió en agua para formar una solución al 5 % (p/v). El césped vivo de un campo de golf que exhibía una infección severa de la mancha del dólar se dividió en cuatro zonas. La zona 1 se dejó sin tratar, la zona 2 se trató con 2,5 gramos de propionato de calcio por metro cuadrado, la zona 3 se trató con 5 gramos de propionato de calcio por metro cuadrado y la zona 4 se trató con 10 gramos de propionato de calcio por metro cuadrado. El césped estaba compuesto principalmente por Festuca rubra. La solución de propionato de calcio al 5 % (p/v) se pulverizó sobre el césped.
Se inspeccionaron las cuatro zonas visualmente en busca de la mancha del dólar después de 10 días. La mancha del dólar ya no se podía detectar visualmente en las zonas 2, 3 o 4. Por el contrario, la mancha del dólar todavía podía detectarse visualmente en la zona 1 no tratada. En la zona 4 se observó un efecto de quema en el césped. El césped de las zonas 2 y 3 parecía sano.
A continuación, todas las zonas (1-4) fueron tratadas con 5 gramos de propionato de calcio por metro cuadrado. La solución de propionato de calcio al 5 % (p/v) se pulverizó sobre el césped cada 10 a 14 días. Durante un período de varios meses (desde finales del verano hasta principios de la primavera), no se pudo detectar visualmente la mancha del dólar en ninguna de las zonas 1-4.
Campo de golf 2
El propionato de calcio se disolvió en agua para formar una solución al 5 % (p/v). Se trató el césped vivo de un campo de golf que presentaba infecciones tanto de la mancha del dólar como de fusarium oxysporum. El césped estaba compuesto principalmente por Agrostis capillaris. La solución de propionato de calcio al 5 % (p/v) se pulverizó sobre el césped a una concentración de 3-4 gramos por metro cuadrado cada 10 días. La mancha del dólar y las infecciones por fusarium oxysporum ya no se pudieron detectar visualmente y el césped parecía sano 10 días después de la aplicación inicial.

Claims (9)

REIVINDICACIONES
1. Un procedimiento de inhibición del crecimiento de un hongo en césped vivo que comprende el contacto del césped con una cantidad efectiva de una composición que consiste en: propionato de calcio y agua, en el que el propionato de calcio tiene una concentración del 5 % al 12 % (p/v).
2. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la composición se aplica una vez cada semana a tres semanas.
3. El procedimiento de la reivindicación 2, en el que la composición comprende propionato de calcio en una concentración de aproximadamente el 5 % (p/v).
4. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el césped es un césped de temporada fría.
5. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el hongo se selecciona del grupo que consiste en Scerotinia homoeocarpa, Rhizoctonia solani, Magnaporthe poae, Gaeumannomyces graminis, Puccinnia striiformis, Fusarium oxysporum, y combinaciones de los mismos.
6. El procedimiento de la reivindicación 5, en el que el hongo es Scerotinia homoeocarpa.
7. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que se ponen en contacto de 2,5 a 7,5 gramos de propionato de calcio por metro cuadrado de césped.
8. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que se ponen en contacto de 3,0 a 5,0 gramos de propionato de calcio por metro cuadrado de césped.
9. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el césped está maduro.
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