ES2887629T3

ES2887629T3 - Compuestos de pirrol-triazina sustituidos con 7 o sales aceptables para uso farmacéutico, y procedimiento de preparación y usos de los mismos

Info

Publication number: ES2887629T3
Application number: ES18820615T
Authority: ES
Inventors: Chunhao Yang; Linghua Meng; Haoyue Xiang; Jing Li; Xi Zhang; Xiang Wang; Cun Tan; Qian He; Jian Ding; Yi Chen
Original assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Current assignee: Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Priority date: 2017-06-23
Filing date: 2018-06-22
Publication date: 2021-12-23
Anticipated expiration: 2038-06-22
Also published as: CN110869371A; KR102413943B1; CA3068114C; PT3643717T; JP2020527541A; AU2018287971B2; RU2745548C1; CA3068114A1; SG11201912827TA; AU2018287971A1; EP3643717A4; US20200157110A1; JP6852199B2; CN109111447A; BR112019027545A2; CN110869371B; AU2018287971B8; US11214572B2; AU2018287971B9; EP3643717A1

Abstract

Un compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por una fórmula general I o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico: **(Ver fórmula)** en el que, R1 es halógeno, o alquilo C1-6 o cicloalquilo C3-8 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, en el que el sustituyente es halógeno; R2 es: -C(OH)R5R6; -COalquiloC1-6 ; -CN; o, alquilo C1-6 no sustituido o con al menos un sustituyente sustituido, -CH2NH-alquilo C1-6, -CH2N(alquilo C1-6) (alquilo C1-6), -CH2-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono), -CH2-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono) -CH2-(grupo espirocíclico saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 4 a 12 átomos de carbono), -CH2-(grupo anular saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 12 átomos de carbono)-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono), o -CH2-(grupo anular saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 12 átomos de carbono) en el que el sustituyente es halógeno; -N(alquilo C1-4)(alquilo C1-4); -O-alquilo C1-4; - CN; -COOH; -CHO; -NHS(O)2-alquilo C1-4; -N(alquilo C1-4)C(alquilo C1-4)(alquilo C1-4)-CONH2; =O; -OH; - S(O)2N(alquilo C1-4)(alquilo C1-4); -S-alquilo C1-4; -S(O)2-alquilo C1-4; -CO-cicloalquilo C3-6; oxetanilo; morfolinilo; cicloalquilo C3-6; alquilo-C1-4-N(alquilo C1-4) (alquilo C1-4); alquiloC1-4-O-alquilo C1-4 no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -CONH2 no sustituido o sustituido con al menos un metilo; alquilo C1-4- CONH2 no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -COO-alquilo C1-4 no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -NH2 no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -NHCO-alquilo C1-4 no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -CO-alquilo C1-4 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente A, en el que el sustituyente A es hidroxilo o metilo; o alquilo C1-4 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente B, en el que el sustituyente B es -NH2, -OCH3, -CONH2, -OH o -CF3; en R2, el heteroátomo se selecciona de al menos uno de N, O y S, R5 y R6 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C1-6; R3 es **(Ver fórmula)** en el que R7, R8, R9 y R10 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C1-6 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, en el que el sustituyente es halógeno o hidroxilo; R4 es -NH2, -NHCONHR11 o -NHCO2R12, en el que R11 y R12 son cada uno independientemente alquilo C1-6, cicloalquilo C3-8 o fenilo no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente seleccionado de al menos uno de halógeno y -C(O)OR13, en el que R13 es alquilo C1-6 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, y el sustituyente en el R13 es halógeno.

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos de pirrol-triazina sustituidos con 7 o sales aceptables para uso farmacéutico, y procedimiento de preparación y usos de los mismos

CAMPO TÉCNICO

La presente divulgación se relaciona con el campo de la química medicinal, y particularmente se refiere a compuestos de pirrolotriazina sustituidos con 7 o sus sales aceptables para uso farmacéutico, y procedimientos de preparación y usos de los mismos.

ANTECEDENTES

La vía de señalización PI3K-Akt-mTOR es una de las principales vías que transmite señales de los receptores tirosina quinasa y de los receptores acoplados a proteínas G y desempeña un papel importante en diversas funciones celulares. Estudios recientes han descubierto que múltiples proteínas nodales clave en la vía de señalización PI3K-Akt-mTOR están sobreactivadas debido a la existencia de mutación o amplificación de genes codificantes en una variedad de tumores humanos [Vivancod et al., Nat Rev Cancer 2 (2002), pp. 489-501]. Entre estas, la PI3K, como molécula puente que conecta las señales extracelulares y los efectos de la respuesta celular, es un factor clave que regula el crecimiento, el metabolismo y la supervivencia de las células, cuya sobreactivación está estrechamente relacionada con la aparición de múltiples tumores en humanos [Sabbah et al., Curr Med Chem 18 (2011), pp. 5528 5544].

La PI3K pertenece a la fosfatidilinositol quinasa intracelular con una actividad fosfatidilinositol quinasa y una actividad serina/treonina quinasa. De acuerdo con las diferentes series de genes, la especificidad del sustrato y las funciones, la superfamilia PI3K se divide principalmente en tres tipos: tipo I, tipo II y tipo III [Engelman et al., Nat Rev Genet 7 (2006), pp. 606-619]. La PI3K de tipo I es, con mucho, la más estudiada; este tipo de PI3K puede dividirse a su vez en cuatro subtipos: PI3Ka, PI3Kp, PI3K6 y PI3Ky. La PI3K de tipo I es una enzima heterodimérica formada por una subunidad catalítica de 110 kDa y una subunidad reguladora de 85 kDa. Debido a la diferencia de las subunidades reguladoras y los mecanismos de activación, estos cuatro subtipos también pueden clasificarse en dos categorías: Clase IA, Clase IB. En la que la PI3Ka, PI3Kp y PI3K6 pertenecen a la clase IA y son activadas por receptores tirosina quinasa (RTK); mientras que PI3Ky pertenece a la clase IB y es activada por receptores acoplados a proteínas G. La posición 3 del fosfatidilinositol-4,5-fosfato (PIP2) puede ser fosforilada por la PI3K tipo I, formando fosfatidilinositol-3,4,5-fosfato (PIP3). Como un segundo mensajero importante, PIP3 puede unirse y activar varias proteínas diana intracelulares (como AKT y PDK1) para formar un complejo de cascada de señales y, en última instancia, regular la proliferación, la diferenciación, la supervivencia y la migración de las células. El dominio quinasa de la PI3K de tipo II o de tipo III tiene una gran homología con el de la PI3K de tipo I, y las PI3K de tipo II y de tipo III tienen funciones de fosforilación similares a las de la PI3K de tipo I. Sin embargo, las funciones fisiológicas de la PI3K de tipo II o de tipo III son poco conocidas. La PI3K de tipo II funciona como un monómero sin subunidad reguladora y se divide en tres subtipos: PI3KC2a, PI3KC2p y PI3KC2y, que participan principalmente en el transporte de materiales intracelulares, la supervivencia celular y el proceso de internalización de las proteínas receptoras de membrana. La PI3K de tipo III, que consiste en un solo subtipo, Vps34 (direccionamiento de proteínas a vacuolas 34 con defectos), ha sido ampliamente conocida por su función de endocitosis y transporte de vesículas de Golgi [Backer, Biochem J 410 (2008), pp. 1-17]. Estudios recientes han demostrado que Vps34 desempeña un papel importante en el proceso de autofagia celular [Ma et al., Cell Res 24 (2014), pp. 912-924].

En la actualidad, hay docenas de inhibidores de PI3K en ensayos clínicos, que pueden dividirse a grandes rasgos en tres categorías: inhibidores no selectivos de PI3K, inhibidores selectivos de PI3K de tipo I e inhibidores selectivos de PI3K de subtipo. A partir del análisis de los datos clínicos existentes, aunque los inhibidores no selectivos de PI3K fueron los primeros candidatos que entraron en el ensayo clínico, avanzaron lentamente debido a la toxicidad que limitaba la dosis. Mientras que los inhibidores de PI3K selectivos de subtipo avanzaron rápidamente en los ensayos clínicos, especialmente los inhibidores de PI3K6. El primer inhibidor de Pl3K en el mercado, Idelalisib, es un inhibidor selectivo de PI3K6, y otro inhibidor selectivo y/5, Duvelisib, ya está en ensayos clínicos de fase III [Winkler et al., Chem Biol 20 (2013), pp. 1362-1372]. Entre las subunidades catalíticas de la Clase IA, la subunidad catalítica p1105 de PI3K6, siendo diferente de P110a y P110p que se expresan ampliamente en varios tejidos de todo el cuerpo, es principalmente altamente expresada selectivamente en el sistema inmunológico, como las células B, las células T, etc., estrechamente relacionadas con las enfermedades de malignidad hematológica y la inflamación, la inmunidad y similares [Fruman et al., N Engl J Med 370 (2014), pp. 1061-1062]. Idelalisib ha sido aprobado por la FDA de los EE.UU. como fármaco para el tratamiento de tres tumores hematológicos de leucemia linfocítica crónica (LLC) recurrente, linfoma no Hodgkin de células B folicular recurrente (FL) y linfoma linfocítico pequeño recurrente. Esto pone de manifiesto la importancia de los inhibidores de PI3K5 en el tratamiento de las neoplasias hematológicas.

Actualmente, los esqueletos de la mayoría de los inhibidores contra PI3K5 se centran en el andamiaje central de Idelalisib, por ejemplo, documento US20140121224A1. Por el contrario, la toxicidad de los compuestos con triazina como andamiaje central fue significativamente menor que la de Idelalisib en base a los datos disponibles. Otro tipo de andamiaje central que ha sido más estudiado es la tienopirimidina, cuyo compuesto representativo es el paninhibidor de PI3K GDC-0941 [Folkes et al., J Med Chem 51 (2008), pp. 5522-5532]. Aunque se ha informado de que los compuestos de tienopirimidina son inhibidores selectivos de PI3K 6[Murray et al., J Med Chem 55 (2012), pp. 7866 7695], los andamiajes centrales de los mismos son muy diferentes de los de la pirrolotriazina en cuanto a propiedades. En la actualidad, sólo se ha informado de unos pocos casos de inhibidores de PI3K basados en la pirrolotriazina como núcleo parental, como los desvelados en el documento CN102675323Ay hasta ahora no se ha informado sobre la actividad inhibidora de la PI3K6.

SUMARIO

En base a esto, el objeto de la presente divulgación es proporcionar compuestos de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituidos con 7 representados por la fórmula general I o sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos:

En el que,

R¹es halógeno, o alquilo C^1-6o cicloalquilo C^3-8no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, en el que el sustituyente es halógeno;

R²es: -C(OH)R5R6; -COalquilo C^1-6; -CN; o, alquilo C^1-6no sustituido o con al menos un sustituyente sustituido, -CH²NH-alquilo C^1-6, -CH²N(alquilo C^1-6) (alquilo C^1-6), -CH²-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono) -CH²-(heterociclilo saturado que contiene de ¹a ²heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono)-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono), -CH²-(grupo espirocíclico saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 4 a ¹²átomos de carbono) -CH²-(grupo anular con puente saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de ³a ¹²átomos de carbono)-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono), o -CH²-(grupo anular con puente saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 12 átomos de carbono) en el que el sustituyente es halógeno, -N(alquilo C1-4)(alquilo C^1-4), -O-alquilo C^1-4, -CN, -COOH, -CHO, -NHS(O)²-alquilo C^1-4, -N(alquilo C1-4)C(alquilo C1-4)(alquilo C1-4)-CONH2, =O, -OH -S(O)²N(alquilo C¹-4)(alquilo C^1-4), -S-alquilo C^1-4, -S(O)²-alquilo C^1-4, -Co-cicloalquilo C^3-6, oxetanilo, morfolinilo, cicloalquilo C³-6, -alquilo C1-4-N(alquilo C^1-4) (alquilo C^1-4), alquilo C1-4-O-alquilo C^1-4no sustituido o sustituido con al menos un metilo, -CONH²no sustituido o sustituido con al menos un metilo, alquilo C^1-4-CONH²no sustituido o sustituido con al menos un metilo, -COO-C^1-4alquilo no sustituido o sustituido con al menos un metilo, -NH²que no esté sustituido o esté sustituido con al menos un metilo, -NHCO-alquilo C^1-4que no esté sustituido o esté sustituido con al menos un metilo, -CO-alquilo C^1-4que no esté sustituido o esté sustituido con al menos un sustituyente A, en el que el sustituyente A sea hidroxilo o metilo, o alquilo C^1-4que no esté sustituido o esté sustituido con al menos un sustituyente B, en el que el sustituyente B sea -NH², -OCH³, -CONH², -OH o -CF3.

En R², el heteroátomo se selecciona de al menos uno de N, O y S,

R⁵y R6 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C1-6;

R3 es

en el que R7, R8, R9 y R10 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C1-6 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, en el que el sustituyente es halógeno o hidroxilo;

R4 es -NH2, -NHCONHR11 o -NHCO2R12, en el que R11 y R12 son cada uno independientemente alquilo C1-6, cicloalquilo C3-8 o fenilo no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente seleccionado de al menos uno de los halógenos y -C(O)OR13, en el que R13 es alquilo C1-6 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, el sustituyente en el R13 es halógeno.

En una realización, R1 es halógeno, o alquilo C1-4 o cicloalquilo C3-6 no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente.

En una realización, R1 es -Cl, -F, metilo, trifluorometilo o difluorometilo.

En una realización, R²es: -C(OH)R5R6; -COalquilo C1-4; -CN; o, alquilo C1-4 no sustituido o con al menos un sustituyente sustituido, -CH2NH-alquilo C1-4 , -CH2N(alquilo C1-4)(alquilo C1-4), -X-(heterociclilo saturado de cuatro a seis miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos), -X-(heterociclilo saturado de cuatro a seis miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos)-(heterociclilo saturado de cuatro a seis miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos), -X-(grupo espirobicíclico saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 4 a 8 átomos de carbono) -X-(grupo bicíclico saturado con puente que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 8 átomos de carbono)-(heterociclilo saturado de 4 a 6 miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos), o -X-(grupo bicíclico saturado con puente que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 8 átomos de carbono), en el que X es CH2, y en el que el heterociclilo, el grupo espirocíclico y el grupo anular puenteado están conectados a X a través de un átomo de N, R5 y R6 son, cada uno de ellos, independientemente, hidrógeno o alquilo C1-4.

En una realización, R5 y R6 son cada uno independientemente hidrógeno, metilo o etilo.

En una realización, el sustituyente en R²es -F, -Cl, -Br, -I, -CH³, -CH²CH³, -CH2CH(CH3)2, -CH²NH², -CH2N(CH3)2, -CH²CH²NH², -CH2CH2N(CH3)2, -CH²OH, -CH²OCH³-CH²CH²OH, -C(CH3)2OH, -C(CH3)(CF3)OH, -C(CF3)2OH, -C(CH3)2OCH3, -C(CH3)2NH2, -CH2C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -C(CH3)2CH3, -CN, -CF3, -CO²H, -CHO, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH2OH, -COC(OH)(CH3)2, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -CH2CONH2, -CH2CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, =O, -OH, -OCH³, -S(O)2N(CH3)2, -SCH³, -S(O)2CH3, -C(O)-ciclopropilo, ciclopropilo, ciclobutilo, oxetanilo o morfolinilo.

En una realización, R²es

Rx y Ry son cada uno -N(CH3)2, -S(O)2CH3 o alquilo C1-4, en el que el alquilo C1-4 está no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, el sustituyente es halógeno, hidroxilo, -CONH², -CF³, amino o -OCH³.

En una realización, R²es

En una realización, R³es

en el que R7, R⁸, R9, R10 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C1-4.

En una realización, R7, R⁸, R9 y R10 son cada uno independientemente H o metilo.

En una realización, R³es morfolinilo o (S)-3-metilmorfolinilo.

En una realización, R⁴es -NH², -NHCONHR¹¹o -NHCO²R¹², en el que R¹¹y R¹²son cada uno independientemente alquilo C¹-4, cicloalquilo C3-6 o fenilo no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente seleccionado de al menos uno de fluoro, cloro, bromo y -C(O)OR13, en el que R¹³es alquilo C¹-4.

En una realización, R11 y R12 son cada uno independientemente metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, fenilo, -Ph-CO2Et-p o 4-fluorofenilo.

El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, por ejemplo, tiene una estructura representada por una de las siguientes fórmulas generales:

Las sales aceptables para uso farmacéutico incluyen sales de ácidos orgánicos y sales de ácidos inorgánicos, incluyendo pero sin limitación maleato, succinato, citrato, tartrato, fumarato, acetato, mesilato, hidrocloruro, fosfato, nitrato o sulfato.

Otro objeto de la presente divulgación es proporcionar un procedimiento de preparación de compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I, que se prepara mediante la siguiente vía

Además, los reactivos y las condiciones necesarias para cada etapa incluyen:

Etapa a: añadir gota a gota clorosulfonil isocianato a una solución de compuesto Aa1' y dimetilformamida (DMF) en acetonitrilo anhidro, y hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa2', o etapa b: disolver un compuesto Aa1" en cloroformo y añadir W-clorosuccinimida para reacción y obtener un compuesto Aa2";

Etapa c: añadir una solución de hipoclorito de sodio al 5% en peso a una solución de compuesto Aa2', K2CO3, NH4Cl, amoníaco acuoso concentrado y cloruro de metiltrioctil amonio en éter tert-butílico, y hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa3, o etapa d: disolución de un compuesto Aa2" en dimetilformamida anhidra, adición de NaH, agitación y adición de 0-(2,4-dinitrofenil)-hidroxilamina, hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa3;

Etapa e: disolver el compuesto Aa3 en una solución metanólica saturada de amoníaco o en una solución de amoníaco en metanol, y hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa4;

Etapa f: mezclar el compuesto Aa4 con aldehído, cloruro de cobre anhidro y dimetilsulfóxido, y hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa5;

Etapa g: añadir oxicloruro de fósforo a una mezcla de compuesto Aa5 y N,N-dimetilaminopiridina o dimetilaminopiridina, y hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa6;

Etapa h: añadir tetrahidrofurano anhidro y morfolina al compuesto Aa6, y hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa7;

Etapa i: añadir níquel Raney a una suspensión de compuesto Aa7 y de hipofosfito de sodio monohidratado en ácido acético/agua/piridina, y hacer reaccionar para obtener un compuesto Aa8; y

Etapa j: suspender el compuesto Aa8, cianoborohidruro de sodio y amina en metanol, añadir ácido acético y hacer reaccionar para obtener un producto; o etapa j: añadir bromuro de metilo y magnesio a una solución de compuesto Aa8 en tetrahidrofurano anhidro y hacer reaccionar para obtener un producto; o etapa j: añadir trifluoruro de dietilaminosulfuro (DAST) a una solución de compuesto Aa8 en diclorometano anhidro y hacer reaccionar para obtener un producto.

En una realización, el compuesto P-28 se prepara por la siguiente vía

Específicamente comprende las siguientes etapas:

Etapa 1: disolver el compuesto P-28-1 en una mezcla de diclorometano y agua, añadir a continuación trifluorometilsulfinato de sodio, enfriar el sistema anterior y añadir lentamente una solución acuosa al 70% de hidroperóxido de terc-butilo gota a gota, añadiendo a continuación dimetilsulfóxido y calentar la reacción para obtener un compuesto P-28-2;

Etapa 2: añadir el compuesto P-28-2 y oxicloruro de fósforo al tolueno, luego añadir N, N-dimetilanilina, hacer reaccionar a reflujo para obtener un compuesto clorado bruto, disolver el compuesto clorado bruto en tetrahidrofurano anhidro, y añadir morfolina a 0 °C, agitar a temperatura ambiente hasta que reaccionen completamente las materias primas, luego concentrar para obtener un producto bruto, que se utiliza directamente en la siguiente reacción;

Etapa 3: disolver el producto bruto obtenido en la Etapa 2 en metanol, añadir agua e hidróxido de sodio, hacer reaccionar a reflujo hasta la desaparición total de las materias primas, concentrar, añadir agua y ajustar el valor del pH para precipitar un sólido, secar y utilizar directamente en la siguiente reacción;

Etapa 4: añadir el producto bruto de la etapa 3, benzotriazol-N, N, N', N'-tetrametiluronio hexafluorofosfato (HBTU), trietilamina y 2-(4-piperidil)-2-propanol a N, N-dimetilformamida (DMF), y hacer reaccionar para obtener un compuesto P-28-5; y

Etapa 5: disolver el P-28-5 en tetrahidrofurano anhidro, y añadir lentamente borano/tetrahidrofurano (BH3/THF) gota a gota. Después de completar la adición gota a gota, calentar el sistema de reacción para que reaccione, luego enfriar el sistema de reacción y se añade lentamente ácido clorhídrico concentrado gota a gota, y después de completar la adición gota a gota, calentar la reacción para obtener un compuesto P-28.

Otro objeto de la presente divulgación es proporcionar el uso de compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I o su sal farmacéuticamente aceptable en la preparación de un inhibidor activo de PI3K.

En una realización, el inhibidor de PI3K tiene un efecto inhibidor selectivo sobre PI3K6.

En una realización, el inhibidor de PI3K se utiliza en un medicamento para tratar enfermedades relacionadas con la vía de señalización de PI3K.

Preferentemente, las enfermedades relacionadas con la vía de la señal PI3K incluyen tumores, leucemias y enfermedades autoinmunes.

Además, la presente divulgación proporciona una composición farmacéutica, que comprende una cantidad efectiva para uso terapéutico de compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, la composición farmacéutica se utiliza para tratar enfermedades relacionadas con la vía de señalización PI3K.

Los inventores de la presente divulgación han obtenido un nuevo tipo de compuestos de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituidos mediante un diseño razonable y una consideración global de los factores farmacocinéticos de los compuestos. Estos compuestos muestran una mejor actividad inhibidora de la PI3K e inhiben eficazmente la actividad de la quinasa PI3K. Estos presentan una mejora significativa de las propiedades farmacocinéticas, tal como la biodisponibilidad, debido a la introducción del grupo de posición 7; además, los compuestos de la presente divulgación presentan una alta selectividad impredecible y una fuerte actividad inhibidora sobre PI3K6, y por lo tanto estos compuestos pueden utilizarse para tratar enfermedades relacionadas con la vía de señales PI3K, especialmente para la lucha contra el cáncer o para el tratamiento de tumores, leucemias y enfermedades autoinmunes. Tras su optimización y cribado, se espera que estos compuestos se conviertan en un nuevo tipo de fármacos antitumorales.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE REALIZACIONES

El término "alquilo" descrito en la presente memoria se refiere a un alquilo recto o a un alquilo ramificado.

El término "sustituto" o similar descrito en la presente memoria se refiere a la sustitución de uno o más átomos de hidrógeno. El halógeno en la presente memoria puede seleccionarse de al menos uno de F, Cl, Br e I, preferentemente al menos uno de F y Cl.

La presente divulgación se describirá más adelante con referencia a las realizaciones, pero estas realizaciones no son de ninguna manera una limitación de la presente divulgación. En todos los ejemplos, la RMN de 1H se registró con el espectrómetro de resonancia magnética nuclear Brucher AM-400 y GEMINI-300, y los desplazamientos químicos se expresaron en 6 (ppm); los espectros de masas se registraron con el espectrómetro de masas MAT-95; el gel de sílice para la separación era de malla 200-300.

Etapa a: preparación de 4-ciano-5-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (Aa2')

A una solución de compuesto Aa1' (1,0 g, 6,5 mmol) y DMF (1,3 ml) en acetonitrilo anhidro (20 ml) en un baño de hielo se añadió gota a gota isocianato de clorosulfonilo (0,7 ml, 8,0 mmol), luego la mezcla se llevó a temperatura ambiente y se hizo reaccionar durante la noche. La reacción se enfrió bruscamente con una solución saturada de carbonato sódico (20 ml), se diluyó con agua, se extrajo dos veces con acetato de etilo (50 ml), se combinaron las capas orgánicas, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, y se concentraron a presión reducida para dar un producto bruto, que se purificó por columna cromatográfica (éter de petróleo/acetato de etilo: 3/1) para dar un compuesto blanco (980 mg, 84%).

1H RMN (300 MHz, CDCl3) 610,07 (br s 1H), 7,03 (d, J = 2,53 Hz, 1H), 4,34 (q, J = 7,13 Hz, 2H), 2,47 (s, 3H), 1,37 (t, J= 7,13 Hz, 3H).

Etapa c: preparación de 1-amino-4-ciano-5-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (Aa3')

A una solución de compuesto Aa2' (200 mg, 1,1 mmol), K2CO3 (840 mg, 6,0 mmol), NH4Cl (385 mg, 7,2 mmol), amoníaco acuoso concentrado (1,2 ml) y cloruro de metiltrioctilamonio (0,010 ml) en éter terc-butílico de metilo (50 ml) en un baño de sal de hielo se añadió gota a gota una solución de hipoclorito de sodio al 5% (porcentaje en masa) (12 ml) a través de un embudo de caída a presión constante, luego la mezcla se llevó a temperatura ambiente y se hizo reaccionar durante 4 horas. La reacción se enfrió bruscamente con tiosulfato sódico saturado, se separó la capa de éter terc-butílico de metilo y se extrajo la capa acuosa una vez con acetato de etilo (50 ml), luego se combinaron las capas orgánicas, se lavaron tres veces con agua y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, y luego se concentraron a presión reducida para dar un producto bruto. El producto bruto se purificó mediante columna cromatográfica (éter de petróleo/acetato de etilo: 4/1) para dar un líquido incoloro (183 mg, 86%), que se solidificó tras el reposo.

1H NMR (300 MHz, CDCl3) 67,01 (s, 1H), 5,46 (s, 2H), 4,30 (q, J = 7,13 Hz, 2H), 2,42 (s, 3H), 1,35 (t, J = 7,13 Hz, 3H).

Etapa e: preparación de 1-amino-4-ciano-5-metil-1H-pirrol-2-carboxamida (Aa4')

El compuesto Aa3' (800 mg, 4,1 mmol) se disolvió en 100 ml de solución metanólica saturada de amoníaco o solución de amoníaco en metanol, la mezcla se hizo reaccionar a 80 °C durante 2 días en un tubo sellado, luego se enfrió a temperatura ambiente y se concentró para dar un sólido amarillo (680 mg, 100%).

1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ó 8,01 (br s, 1H), 7,39 br (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,70 (br s, 2H), 2,27 (s, 3H).

Etapa b: preparación de 4-ciano-5-cloro-1 H-pirrol-2-carboxilato de etilo (Aa2")

El compuesto Aa1" (2,0 g, 12,2 mmol) se disolvió en cloroformo, y se añadió W-clorosuccinimida (2,0 g, 15,0 mmol), luego la mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente; la mezcla se diluyó con agua (100 ml), la capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo dos veces con cloroformo (100 ml), luego las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y luego se concentraron bajo presión reducida para dar un producto bruto, que luego se purificó por columna cromatográfica (éter de petróleo/acetato de etilo: 20/1) para dar un sólido blanco (510 mg, 22%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 10,68 (s, 1H), 7,09 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,39 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,39 (t, J= 7,2 Hz, 3H).

Etapa d: preparación de 1-amino-4-ciano-5-cloro-1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (Aa3")

El compuesto Aa2" (300 mg, 1,5 mmol) se disolvió en DMF anhidra (10 ml), luego se añadió NaH (60%, disperso en aceite mineral, 75 mg, 1,9 mmol) en un baño de hielo, después de continuar agitando la mezcla durante 30 minutos, se añadió 0-(2,4-dinitrofenil)-hidroxilamina (360 mg, 1,8 mmol), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. A continuación, la solución de reacción se vertió en agua (50 ml), se extrajo dos veces con acetato de etilo (50 ml), se combinaron las capas orgánicas, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en columna (éter de petróleo/acetato de etilo: 10/1) para dar un sólido blanco (305 mg, 95%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 7,09 (s, 1H), 5,80 (s, 2H), 4,34 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,37 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

Etapa e: preparación de 1-amino-4-ciano-5-cloro-1H-pirrol-2-carboxamida (Aa4")

Utilizando el compuesto Aa3" (350 mg, 1,6 mmol) como materia prima para realizar un proceso de preparación con referencia al de compuesto Aa4', se obtuvo un sólido amarillo (290 mg, 100%).

1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ó 8,12 (br s, 1H), 7,63 (br s, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,86 (br s, 2H).

Etapa f: síntesis de compuesto Aa5

Una solución de compuesto Aa4 (1,0 equiv.), W-(5-formil-4-(trifluorometil)piridil-2-)pivalamida (1,2 equiv., preparada por el grupo de investigación de la presente) y cloruro de cobre anhidro (1,0 equiv.) en dimetilsulfóxido se calentó a 100 °C para la reacción. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se enfrió, se vertió en agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 50/1) para dar un sólido amarillo

Compuesto Aa4' (600 mg, 3,7 mmol), el aldehido correspondiente (1,2 g, 4,4 mmol), cloruro de cobre anhidro (490 mg, 3,7 mmol), dimetilsulfóxido (25 ml); para dar un sólido amarillo (1,3 g, 85%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 8,82 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,43 (br s, 1H), 7,27 (s, 1H), 2,60 (s, 3H), 1,38 (s, 9H).

Compuesto Aa4" (200 mg, 1,1 mmol), el aldehido correspondiente (362 mg, 1,3 mmol), cloruro de cobre anhidro (150 mg, 1,1 mmol), dimetilsulfóxido (15 ml); para dar un sólido amarillo (408 mg, 85%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 8,80 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 1,38 (s, 9H).

Etapas g y h: síntesis de compuesto Aa7

A una mezcla de compuesto Aa5 (1,0 equiv.) y 4-dimetilaminopiridina (2,0 equiv.) se añadió oxicloruro de fósforo y se calentó a reflujo durante 10 horas. Después de enfriar la mezcla, se eliminó el oxicloruro de fósforo a presión reducida, luego se añadieron secuencialmente tetrahidrofurano anhidro y morfolina, y luego se calentó a reflujo la mezcla durante 2 horas. El tetrahidrofurano se destiló a presión reducida, se añadió agua, luego la mezcla se extrajo con acetato de etilo y se lavó una vez a su vez con salmuera saturada y agua, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se concentró y luego se purificó por cromatografía en columna (éter de petróleo/acetato de etilo: 4/1) para dar un sólido blanco.

Compuesto Aa5' (1,0 g, 2,4 mmol), 4-dimetilaminopiridina (583 mg, 4,8 mmol), oxicloruro de fósforo (20 ml), tetrahidrofurano (100 ml), morfolina (5 ml); para dar un sólido blanco (980 mg, 84%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 8,76 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,24 (br s, 1H), 6,99 (s, 1H), 4,06 (t, J = 4,77 Hz, 4H), 3,84 (t, J = 4,73 Hz, 4H), 2,65 (s, 3H), 1,36 (s, 9H).

Compuesto Aa5" (360 mg, 0,8 mmol), 4-dimetilaminopiridina (200 mg, 1,6 mmol), oxicloruro de fósforo (5 ml), tetrahidrofurano (50 ml), morfolina (2 ml); para dar un sólido blanco (370 mg, 88%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 8,75 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,09 (s, 1H), 4,07 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,86 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 1,36 (s, 9H).

Compuesto Aa5' (800 mg, 1,9 mmol), 4-dimetilaminopiridina (466 mg, 3,8 mmol), oxicloruro de fósforo (15 ml), tetrahidrofurano (100 ml), (S)-3-metilmorfolina (5 ml); para dar un sólido amarillo (720 mg, 76%).

Etapa i: síntesis de compuesto Aa8

A una suspensión de compuesto Aa7 (1,0 equiv.) y de hipofosfito de sodio monohidratado (6,7 equiv.) en ácido acético/agua/piridina (v/v/v: 1/1/2) se añadió níquel Raney, y la mezcla se calentó a 60 °C para la reacción. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 3N durante tres veces, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 50/1) para dar un sólido amarillo.

Compuesto Aa7' (1,0 g, 1,0 mmol), hipofosfito de sodio monohidratado (710 mg, 6,7 mmol), ácido acético/agua/piridina (v/v/v: 1/1/2) (50 ml), níquel Raney (750 mg), para dar un sólido amarillo (232 mg, 47%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 10,15 (s, 1H), 8,78 (br s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 4,10 (t, J= 4,8 Hz, 8H), 3,84 (t, J= 4,8 Hz, 8H), 2,79 (s, 3H), 1,36 (s, 9H).

Compuesto Aa7" (300 mg, 0,6 mmol), hipofosfito de sodio monohidratado (426 mg, 4,0 mmol), ácido acético/agua/piridina (v/v/v: 1/1/2) (25 ml), níquel Raney (450 mg), para dar un sólido amarillo (130 mg, 42%).

Compuesto Aa7'' (600 mg, 1,2 mmol), hipofosfito de sodio monohidratado (852 mg, 8,0 mmol), ácido acético/agua/piridina (v/v/v: 1/1/2) (50 ml), níquel Raney (900 mg), para dar un sólido amarillo (420 mg, 83%).

Etapa j: síntesis de compuestos P-(1-9), 12, (29-32), (34-35), (38-43), (45-46)

El compuesto Aa8 (0,2 mmol), el cianoborohidruro de sodio (0,4 mmol) y la amina correspondiente (0,24 mmol) se suspendieron en metanol (20 ml), se añadió ácido acético (0,05 ml) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo dos veces con acetato de etilo (100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1) para dar un producto.

El producto resultante se disolvió en metanol (15 ml), se añadieron 10 equivalentes de solución de hidróxido de potasio 1M y se calentó a reflujo. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1).

Sólido amarillo (38 mg, rendimiento total de dos etapas: 44%). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) 68,62 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 4,90 (br s, 2H), 4,03 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 3,81 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 3,50 (s, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,28 (s, 6H).

Sólido amarillo (44 mg, rendimiento total de dos etapas: 45%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 68,63 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,89 (br s, 2H), 4,04 (br s, 4H), 3,87 (s, 2H), 3,82 (br s, 4H), 2,77 (t, J = 3,3 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,35 (t, J= 6,3 Hz, 2H), 2,23 (s, 6H), 1,80 - 1,64 (m, 2H).

Sólido amarillo (49 mg, rendimiento total de dos etapas: 52%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 68,62 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 4,88 (br s, 2H), 4,04 (t, J = 3,9 Hz, 4H), 3,91 - 3,73 (m, 6H), 3,46 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,32 (s, 3H), 2,77 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 1,89 - 1,72 (m, 2H), 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 6 158,83, 153,94, 151,95, 151,83, 138,11 (q, J = 32,4 Hz), 126,24, 122,95 (q, J = 274,3 Hz), 122,44, 121,65, 111,79, 105,21 (q, J= 5,5 Hz), 103,35, 71,40, 66,81, 58,71,47,06, 45,94, 45,66, 29,90, 9,24.

Sólido amarillo (38 mg, rendimiento total de dos etapas: 38%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 68,63 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,76 (s, 1H), 4,84 (br s, 2H), 4,03 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 3,82 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,63 (s, 2H), 3,53 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,35 (s, 3H), 2,63 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 13C RMN (101 MHz, CDCl3) 6 158,77, 153,94, 151,95, 151,77, 138,13 (q, J = 32,8 Hz), 127,07, 122,28 (q, J= 275,7 Hz), 121,72, 120,25, 111,93, 105,22 (q, J= 5,6 Hz), 104,45, 70,60, 66,81, 58,92, 56,06, 54,13, 45,91,42,68, 9,36.

Sólido amarillo (68 mg, rendimiento total de dos etapas: 64%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 68,65 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 4,94 - 4,88 (m, 2H), 4,06 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,84 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,59 (s, 2H), 3,06 (d, J = 10,7 Hz, 2H), 2,51 (s, 3H), 1,97 (t, J = 11,3 Hz, 2H), 1,81 - 1,67 (m, 2H), 1,35 - 1,25 (m, 3H), 1,19 (s, 6H), 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 6158,79, 153,93, 151,95, 151,77, 138,12 (q, J = 32,3 Hz), 127,33, 122,95 (q, J = 274,5 Hz), 121,68, 120,06, 111,82, 105,23 (q, J = 6,2 Hz), 104,54, 72,47, 66,81, 54,58, 54,06, 47,40, 45,93, 27,00, 26,84, 9,48.

Sólido amarillo (58 mg, rendimiento total de dos etapas: 58%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 68,62 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 4,84 (br s, 2H), 4,03 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,82 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,57 (s, 2H), 2,68 - 2,45 (m, 8H), 2,41 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,07 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 6 158,78, 153,94, 151,93, 151,79, 138,15 (q, J = 32,5 Hz, CF3C), 127,42, 122,94 (q, J = 274,4 Hz, CF3), 121,71, 119,89, 111,77, 105,23 (q, J = 5,5 Hz, CF3CCH), 104,57, 66,81, 54,42, 52,97, 52,83, 52,28, 45,94, 12,01, 9,45.

Sólido amarillo (55 mg, rendimiento total de dos etapas: 53%). 1H RMN (500 MHz, CDCl3) 68,64 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,71 (s, 1H), 4,99 (br s, 2H), 4,04 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,83 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,56 (s, 2H), 3,09 - 2,86 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,29 (s, 6H), 2,21 - 2,07 (m, 1H), 2,05 - 1,93 (m, 2H), 1,87 - 1,75 (m, 2H), 1,65 - 1,44 (m, 2H), 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 6 158,88, 153,92, 151,93, 151,77, 138,07 (q, J= 32,5 Hz), 127,26, 122,95 (q, J= 274,6 Hz), 121,58, 120,29, 111,78, 105,21 (q, J= 5,7 Hz), 104,45, 66,80, 62,32, 54,34, 52,93, 45,92, 41,72, 28,29, 9,45.

Sólido amarillo (46 mg, rendimiento total de dos etapas: 47%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 88,62 (s, 1H), 6,81 (s, 2H), 4,87 (br s, 2H), 4,05 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 3,83 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 3,70 (s, 2H), 2,85 (s, 4H), 2,78 (s, 4H), 2,49 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 8158,82, 153,96, 152,08, 151,89, 138,16 (q, J = 32,3 Hz), 127,58, 122,93 (q, J = 274,6 Hz), 121,55, 112,14, 105,29 (q, J = 5,4 Hz), 105,03, 66,80, 54,99, 54,49, 45,96, 27,36, 9,47.

Sólido amarillo (79 mg, rendimiento total de dos etapas: 72%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 88,62 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,84 (br s, 2H), 4,03 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 3,82 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 3,60 (s, 2H), 3,24 (t, J= 5,0 Hz,4H), 2,77 (s, 3H), 2,58 (t, J= 4,9 Hz, 4H), 2,49 (s, 3H), 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 8 158,83, 153,95, 151,99, 151,95, 138,12 (q, J = 32,4 Hz, CF3C), 127,42, 122,95 (q, J = 274,4 Hz, CF3), 121,57, 119,23, 111,90, 105,25 (q, J = 5,5 Hz, CF3CCH), 104,48, 66,79, 54,26, 52,19, 45,95, 45,84, 34,28, 9,44.

A una solución de compuesto P-9 (160 mg, 0,3 mmol) en cloroformo (10 ml) se añadió ácido metanosulfónico (370 pl_, 0,3 mmol). Tras 2 horas de reacción a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con éter anhidro (50 ml), se filtró y se secó para dar sulfonato de metano P-9 (145 mg, 77%) como un compuesto amarillo.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 89,89 (br s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,47 (br s, 2H), 4,02 (t, J = 5,0 Hz, 4H), 3.76 (t, J = 4,9 Hz,, 4H), 3,73 (s, 2H), 3,57 - 3,47 (m, 2H), 3,30 - 3,09 (m, 4H), 3,01 (s, 3H), 2,52 (br s, 2H), 2,43 (br s, 6H). 13C RMN (126 MHz, DMSO-d6) 8 157,47, 153,93, 151,45, 145,46, 138,57 (q, J = 33,3 Hz), 129,45, 122,77 (q, J = 275,06 Hz), 118,65, 112,36, 111,92, 110,13, 107,64, 66,42, 51,32, 50,27, 46,01, 42,96, 40,23, 35,51, 9,65.

Sólido amarillo (63 mg, rendimiento total de dos etapas: 53%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 88,63 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 6,70 (s, 1H), 4,99 (br s, 2H), 4,24 - 3,98 (m, 4H), 3,96 - 3,78 (m, 4H), 3,60 (s, 2H), 3,46 (br s, 4H), 2,51 (s, 3H), 2,44 (br s, 4H), 1,47 (s, 9H), 13C RMN (126 MHz, CDCI3) 8 158,91, 154,77, 153,94, 151,85, 151,72, 138,18 (q, J = 32,6 Hz), 127,40, 122,93 (q, J = 274,1 Hz), 121,50, 119,51, 111,85, 105,39 (q, J = 5,6 Hz), 104,52, 79,65, 66,79, 54,45, 52,74, 45,93, 28,43, 9,45.

Sólido amarillo (45 mg, rendimiento total de dos etapas: 43%). 1H RMN (500 MHz, Cloroformo-d) 88,62 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,70 (s, 1H), 4,84 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 4,06 - 4,00 (m, 4H), 3,95 (d, J = 11,4 Hz, 2H), 3,83 - 3,80 (m, 4H), 3,65 (s, 2H), 3,47 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 3,36 (t, J = 11,7 Hz, 2H), 2,88 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,32 - 2,16 (m, 2H), 1,71 - 1,57 (m, 2H), 1,52 (ddd, J = 13,2, 3,8, 1,9 Hz, 2H).

Sólido amarillo (40 mg, rendimiento total de dos etapas: 41%). 1H RMN (500 MHz, Cloroformo-d) 88,62 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,65 (s, 1H), 4,85 (d, J= 5,3 Hz, 2H), 4,75 (s, 4H), 4,05 - 4,00 (m, 4H), 3,82 (t, J = 4,9 Hz, 4H 3,61 (s, 2H 3,42 (s, 3H), 2,48 (s, 4H).

Sólido amarillo (36 mg, rendimiento total de dos etapas: 32%). 1H RMN (300 MHz, Cloroformo-d) 88,61 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 4,90 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 4,02 (t, J = 4,7 Hz, 4H), 3,81 (t, J = 4,8 Hz, 5H), 3,73 - 3,68 (m, 4H), 3,57 (s, 2H), 3,00 (d, J = 11,1 Hz, 2H), 2,58 - 2,46 (m, 8H), 2,18 (dq, J = 11,2, 5,9, 4,2 Hz, 1H), 2,01 (t, J = 11,1 Hz, 2H), 1,82 (d, J = 13,4 Hz, 2H), 1,58 (td, J = 12,1, 3,6 Hz, 2H).

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia el documento WO2010138589 (A1). Sólido amarillo (20 mg, rendimiento total de dos etapas: 18%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 88,61 (s, 1H), 7,74 - 7,50 (m, 1H), 6,81 (s, 1H), 4,84 (s, 2H), 4,67 - 4,60 (m, 2H), 4,59 - 4,51 (m, 2H), 4,32 - 4,13 (m, 2H), 4,10 - 3,98 (m, 4H), 3,83 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 2,92 - 2,74 (m, 1H), 2,50 (s, 3H), 2,21 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 2,06 - 1,97 (m, 4H), 1,00 - 0,84 (m, 6H).

Sólido amarillo (52 mg, rendimiento total de dos etapas: 52%). 1H RMN (300 MHz, Cloroformo-d) 58,62 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,67 (d, J= 1 ,3 Hz, 1H), 4,84 (d, J= 4,0 Hz, 2H), 4,08 - 3,98 (m, 4H), 3,81 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 3,62 (s, 2H), 3,37 (dd, J= 4,3, 1,5 Hz, 8H), 2,47 (d, J= 1,5 Hz, 3H), 2,32 (d, J= 1,5 Hz, 3H).

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia el documento WO2010138589 (A1). Sólido amarillo (75 mg, rendimiento total de dos etapas: 67%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,61 (s, 1H), 7,14 (d, J= 5,3 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 5,54 (d, J= 5,3 Hz, 1H), 4,93 (s, 2H), 4,03 (dd, J= 5,7, 4,0 Hz, 4H), 3,82 (dd, J= 5,7, 4,0 Hz, 4H), 3,58 (s, 2H), 2,59 - 2,52 (m, 6H), 2,49 (s, 3H), 1,20 (s, 8H).

Sólido amarillo (49 mg, rendimiento total de dos etapas: 47%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,61 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 4,86 (s, 2H), 4,04 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 3,82 (q, J = 4,8, 3,6 Hz, 8H), 3,58 (t, J = 5,3 Hz, 4H), 3,28 -3,25 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 1,81 (t, J = 5,6 Hz, 4H).

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia WO2010138589 (A1). Sólido amarillo (47 mg, rendimiento total de dos etapas: 44%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,61 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,88 (s, 2H), 4,03 (dd, J = 5,7, 4,1 Hz, 4H), 3,82 (dd, J = 5,6, 4,0 Hz, 4H), 3,75 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 3,47 (s, 2H), 3,42 (d, J = 12,1 Hz, 2H), 3,32 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 3,20 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 3,01 (s, 1H), 2,78 (dd, J = 9,2, 2,4 Hz, 1H), 2,66 (d, J = 2,4 Hz, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,24 - 2,14 (m, 1H), 1,75 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 1,51 (d, J = 9,7 Hz, 1H).

Sólido amarillo (56 mg, rendimiento total de dos etapas: 51%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,59 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 4,97 (s, 2H), 4,74 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 4,55 - 4,44 (m, 2H), 4,26 - 4,14 (m, 2H), 4,07 (dd, J = 5,7, 4,0 Hz, 4H), 4,03 - 3,87 (m, 2H), 3,86 - 3,80 (m, 4H), 3,49 (s, 1H), 3,35 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 2,82 - 2,62 (m, 1H), 2,51 (s, 3H), 2,21 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,04 - 1,97 (m, 2H), 0,90 - 0,82 (m, 1H).

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia el documento WO2010138589(A1). Sólido amarillo (53 mg, rendimiento total de dos etapas: 47%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,62 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,81 (s, 2H), 4,03 (dd, J = 5,7, 4,1 Hz, 4H), 3,83 - 3,81 (m, 4H), 3,72 (d, J = 4,7 Hz, 4H), 3,60 (s, 2H), 3,04 (s, 3H), 2,50 (s, 3H), 2,32 (d, J = 5,3 Hz, 4H), 1,70 (s, 6H).

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia el documento WO2010138589(A1). Sólido amarillo (52 mg, rendimiento total de dos etapas: 48%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,61 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,71 (s, 1H), 4,88 (s, 2H), 4,03 (dq, J = 6,3, 2.8, 2,3 Hz, 4H), 3,85 - 3,79 (m, 4H), 3,59 (s, 2H), 3,34 (s, 2H), 2,67 -2,42 (m, 15H), 1,04 (s, 6H).

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia el documento WO2010138589(A1). Sólido amarillo (52 mg, rendimiento total de dos etapas: 48%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,62 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,86 (s, 2H), 4,04 (dd, J = 5,7, 4,1 Hz, 4H), 3,84 - 3,79 (m, 4H), 3,62 (s, 2H), 3,16 (d, J = 1,4 Hz, 2H), 3,09 - 3,04 (m, 2H), 2,48 (d, J= 1,5 Hz, 3H), 2,02 (d, J= 13,2 Hz, 2H), 1,67 (d, J= 8,8 Hz, 2H, 1,45 (s, 2H), 1,08 (s, 6H).

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia el documento WO2013134226. Sólido amarillo (50 mg, rendimiento total de dos etapas: 43%). LC-MS m/z: [M+H]+=588,0.

La amina correspondiente se sintetizó tomando como referencia el documento WO2013134226. Sólido amarillo (61 mg, rendimiento total de dos etapas: 48%). LC-MS m/z: [M+H]+=641,9.

Etapa j: síntesis de compuestos P-33, 36, 37

El compuesto Aa8 (0,2 mmol), cianoborohidruro de sodio (0,4 mmol) y la amina protegida por Boc correspondiente (0,24 mmol) se suspendieron en metanol (20 ml), se añadió ácido acético (0,05 ml) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo dos veces con acetato de etilo (100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1) para dar un producto.

El producto se disolvió en diclorometano (10 ml), y se añadió el equivalente a 10 veces el ácido trifluoroacético, luego la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días, y luego se evaporó directamente después de que se completara la reacción.

El producto resultante se disolvió en metanol (15 ml), y se añadieron 10 equivalentes de solución de hidróxido de potasio 1M, luego se calentó a reflujo la mezcla. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1).

Sólido amarillo (52 mg, rendimiento total de dos etapas: 50%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,62 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,68 (d, J= 3,4 Hz, 1H), 4,83 (s, 2H), 4,03 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 3,82 (t, J= 5,0 Hz, 4H), 3,49 (d, J = 3,3 Hz, 2H), 3,36 (s, 2H), 2,47 (d, J = 3,4 Hz, 3H), 2,34 (s, 2H), 1,93 (s, 4H), 1,79 (t, J = 5,3 Hz, 4H).

Sólido amarillo (50 mg, rendimiento total de dos etapas: 48%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,60 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,67 (s, 1H), 4,90 (s, 2H), 4,02 (dd, J = 5,7, 4,1 Hz, 4H), 3,84 - 3,77 (m, 4H), 3,67 (s, 2H), 3,05 (s, 4H), 2,77 (dd, J = 6,6, 4,0 Hz, 4H), 2,49 (s, 3H), 1,76 - 1,69 (m, 4H).

Sólido amarillo (45 mg, rendimiento total de dos etapas: 46%). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 58,62 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,65 (d, J= 3,8 Hz, 1H), 4,80 (s, 2H), 4,03 (q, J= 4,1, 3,2 Hz, 4H), 3,82 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,74 (s, 2H), 3,60 (d, J = 2,5 Hz, 2H), 3,35 (s, 3H), 3,30 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 2,51 - 2,46 (m, 4H).

Etapa j: síntesis de compuesto P-44

El compuesto Aa8 (0,2 mmol), cianoborohidruro de sodio (0,4 mmol) y N-acetil-2-(4-piperidil)-2-propilamina (0,24 mmol) se suspendieron en metanol (20 ml), y se añadió ácido acético (0,05 ml), después se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo dos veces con acetato de etilo (100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1) para dar un producto.

El producto resultante se disolvió en ácido clorhídrico concentrado (10 ml), y se calentó a reflujo durante 7 días. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se neutralizó y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 10/1).

N-acetil-2-(4-piperidil)-2-propilamina se sintetizó tomando como referencia el documento WO2014043068. Sólido amarillo (12 mg, rendimiento total de dos etapas: 11%). LC-MS m/z: [M+H]+=533,0.

Etapa j: síntesis de compuesto P-10

El compuesto Aa8" (0,2 mmol), cianoborohidruro de sodio (0,4 mmol) y la amina correspondiente (0,24 mmol) se suspendieron en metanol (20 ml), y se añadió ácido acético (0,05 ml), después se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo dos veces con acetato de etilo (100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1) para dar un producto.

Sólido amarillo (55 mg, rendimiento total de dos etapas: 48%). 1H RMN (300 MHz, Cloroformo-d) ó 8,63 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 6,65 (s, 1H), 4,93 (br s, 1H), 4,83 (s, 2H), 4,56 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,09 - 3,97 (m, 1H), 3,89 - 3,74 (m, 2H), 3,72 - 3,53 (m, 4H), 3,26 (s, 4H), 2,78 (s, 3H), 2,60 (s,4H), 2,49 (s, 3H), 1,45 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 13C RMN (126 MHz, Cloroformo-d) ó 158,81 , 153,66 , 152,06 , 151,91 , 138,12 (q, J = 32,3 Hz), 127,41 , 122,94 (d, J = 274,5 Hz), 121,65 , 111,92 , 105,26 (d, J = 6,7 Hz), 104 ,58 ,71,03 ,66 ,98,54 ,26 ,52,16 ,45 ,83,34 ,28 , 15,27, 9,49.

Etapa j: síntesis de compuestos P-11, (25-27)

El compuesto Aa8''' (0,2 mmol), cianoborohidruro de sodio (0,4 mmol) y la amina correspondiente (0,24 mmol) se suspendieron en metanol (20 ml), y se añadió ácido acético (0,05 ml), después se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo dos veces con acetato de etilo (100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1) para dar un producto.

Sólido amarillo (34 mg, rendimiento total de dos etapas: 30%). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) 58,59 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 4,87 (br s, 2H), 4,04 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,83 (t, J = 4,7 Hz, 4H), 3,67 (s, 2H), 3,27 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 2,78 (s, 2H), 2,64 (t, J = 5,1 Hz, 4H), 13C RMN (126 MHz, CDCl3) 5 159,02, 153,50, 153,30, 151,82, 138,25 (q, J = 32,8 Hz), 122,85 (q, J= 274,3 Hz), 120,96, 118,53, 115,86, 112,74, 105,24 (q, J= 6,1 Hz), 104,61, 66,69, 53,04, 52,06, 46,00, 45,79, 34,38.

Sólido blanco (35 mg, rendimiento: 45%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,31(s, 1H), 7,00(s, 1H), 6,82(s, 1H), 3,97(m, 4H), 3,72(m, 4H), 3,68(s, 2H), 3,23(s, 2H), 3,06(d, 2H), 2,16(t, 2H), 1,72(d, 2H), 1,33(m, 4H), 1,05(s, 6H).

Sólido blanco (30 mg, rendimiento: 40%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,32(s, 1H), 6,94(s, 1H), 6,83(s, 1H), 3,97(m, 4H), 3,72(m, 4H), 3,55(br, s, 1H), 3,22(d, 2H), 2,92(d, 2H), 2,23(s, 6H), 2,03(d, 2H), 1,78(d, 2H), 1,47(d, 2H), 1,18(d, 2H).

Sólido blanco (38 mg, rendimiento: 42%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 58,30(s, 1H), 6,97(s, 1H), 6,83(s, 1H), 4,00(m, 4H), 3,73(m, 4H), 3,65(s, 2H), 3,23(d, 2H), 2,66(m, 4H), 1,16(t, 3H).

Síntesis de compuestos P-13, 14

El compuesto P-12 (500 mg,) se disolvió en 40 ml de diclorometano, se añadieron 2,5 ml de ácido trifluoroacético y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Una vez completada la reacción, el disolvente se eliminó a presión reducida para dar un aceite. El aceite se disolvió añadiendo 10 ml de metanol, y se añadió éter dietílico (80 ml) para precipitar un sólido, que se filtró para dar 420 mg de la sal de trifluoroacetato del producto desprotegido con Boc.

La sal obtenida anteriormente (calculada conteniendo una molécula de ácido trifluoroacético, 114 mg, 0,2 mmol), el ácido correspondiente (1,5 equiv.), clorhidrato de 1-etil-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC-HCl) (1.5 equiv.), 1-hidroxibenzotriazol (HOBT) (1,5 equiv.) y W,W-diisopropiletilamina (DIPEA) (3 equiv.) se suspendieron en DMF, y luego se hizo hacer reaccionar a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se purificaron por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 20/1) para dar un producto.

Sólido amarillo (67 mg, 60%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3) ó 8,65 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 4,91 (s, 2H), 4,53 (br s, 1H), 4,06 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,85 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,79 - 3,65 (m, 4H), 3,60 (s, 2H), 2,51 (s,7H), 1,50 (s, 6H), 13C RMN (126 MHz, CDCI3) ó 174,93, 158,85, 153,94, 151,94, 151,92, 138,12 (q, J= 32,6 Hz), 127,36, 122,90 (q, J= 274,06 Hz), 121,55, 119,38, 111,87, 105,27 (q, J= 6,3 Hz), 104,42, 71,53, 66,79, 54,40, 52,96, 45,94, 27,83, 9,44.

Sólido amarillo (55 mg, 50%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3) ó 8,66 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 4,87 (s, 2H), 4,47 (t, J= 6,7 Hz, 1H), 4,07 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 3,90 (d, J= 7,3 Hz, 1H), 3,86 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,82 - 3,71 (m, 1H), 3,69 -3,62 (m, 1H), 3,61 (s, 1H), 3,43 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 2,58 - 2,35 (m, 7H), 1,34 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 13C RMN (126 MHz, CDCl3) ó 173,50, 158,83, 153,95, 151,97, 138,26, 138,13 (d, J = 32,8 Hz), 127,37, 122,95 (q, J = 274,6 Hz), 121,59, 119,28, 111,89, 105,27, 104,41, 66,79, 64,02, 54,42, 52,70, 52,56, 45,94, 44,87, 42,53, 21,50, 9,44.

Síntesis de compuesto P-15

A una solución de compuesto Aa8' (600 mg, 1,2 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (40 ml) se añadió bromuro de metilmagnesio 1M (4,8 ml, 4,8 mmol) en un baño de hielo bajo protección de nitrógeno, y la mezcla se llevó a temperatura ambiente para la reacción. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con 50 ml de agua y se extrajo dos veces con acetato de etilo (100 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 40/1) para dar un compuesto amarillo (520 mg, 86%).

El producto obtenido arriba (400mg, 0.8mmol) se disolvió en 15 ml de metanol, y se añadieron 10 equivalentes de solución de hidróxido de potasio 1M (8 ml), luego la mezcla se hizo hacer reaccionar a reflujo. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol=40/1) para dar un compuesto amarillo (270 mg, 80%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3), ó 8,59 (s, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 5,14 (q, J = 4,8 Hz, 1H), 4,82 (s, 2H), 4,04 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 3,82 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 2,53 (s, 3H), 1,99 (br s, 1H), 1,58 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 13C RMN (126 MHz, CDCI3) ó 158,78, 154,14, 152,05, 151,93, 128,13, 125,24, 111,85, 105,25 (q, J = 5,5 Hz), 100,27, 66,80, 63,82, 45,97, 24,52, 9,38.

Síntesis de compuesto P-16

A una solución de compuesto Aa8' (100 mg, 0,2 mmol) en diclorometano anhidro (20 ml) se añadió 1ml de trifluoruro de dietilaminosulfuro (DAST) en un baño de hielo bajo protección de nitrógeno, y la mezcla se llevó a temperatura ambiente para la reacción. Una vez completada la reacción, se añadieron lentamente 10 ml de agua helada para enfriar, luego la mezcla de reacción se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo dos veces con diclorometano (50 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se utilizaron directamente en la siguiente reacción.

El producto obtenido anteriormente se disolvió en 15 ml de metanol, y se añadieron 10 equivalentes de solución de hidróxido de potasio 1M (2 ml), luego la mezcla se sometió a reflujo. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol = 40/1) para dar un compuesto amarillo (38 mg, rendimiento total de dos etapas: 44%).

1H RMN (300 MHz, CDCI3), ó 8,63 (s, 1H), 6,86 (t, J= 56,4 Hz, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 4,85 (br s, 2H), 4,06 (t, J= 4,9 Hz, 4H), 3,84 (t, J= 4,8 Hz, 4H), 2,58 (s, 3H), 13C RMN (101 MHz, CDCl3) ó 158,98, 154,52, 152,94, 151,96, 138,17 (q, J= 32,6 Hz), 127,09 (t, J= 6,3 Hz), 122,88 (q, J= 274,3 Hz), 121,13, 117,39 (t, J = 25,8 Hz), 112,40 (t, J = 233,7 Hz), 112,24, 105,29 (q, J = 6,1 Hz), 101,21 (t, J = 5,0 Hz), 66,71, 45,96, 9,46.

Síntesis de compuestos P-17, 18

A una solución de compuesto P-9 (110 mg, 0,2 mmol) en cloroformo anhidro (10 ml) se añadió trietilamina anhidra (30 pl_, 0,25 mmol) a -30 °C, y se añadió gota a gota una solución del correspondiente cloroformato (0,6 mmol) en cloroformo (5 ml), y la reacción se mantuvo a esta temperatura. Una vez completada la reacción, se añadieron lentamente 10 ml de agua helada para apagar y se añadió diclorometano (40 ml) para diluir. La capa orgánica se separó, se lavó una vez con salmuera saturada (50 ml) y se secó sobre sulfato sódico anhidro, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 50/1 para dar un sólido amarillo.

Sólido amarillo (55 mg, 45%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ó 9,18 (br s, 1H), 8,84 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 4,05 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 3,86 (s, 3H), 3,84 - 3,78 (m, 4H), 3,62 (s, 2H), 3,25 (s, 4H), 2,78 (s, 3H), 2,59 (s, 4H), 2,50 (s, 3H), 13C RMN (101 MHz, CDCI3) ó 153,87, 153,54, 152,67, 151,39, 150,80, 138,69 (q, J = 32,9 Hz, CF3C), 127,50, 126,60, 122,72 (q, J = 275,83 Hz, CF3), 119,55, 111,79, 109,21 (q, J = 5,2 Hz, CF3CCH), 104,69, 66,70, 54,19, 52,72, 52,18, 45,89, 45,84, 34,22, 9,40.

Se hizo referencia al procedimiento de preparación del sulfonato de metano de compuesto P-9. Utilizando el compuesto P-17 (200 mg, 0,3 mmol) como materia prima, se obtuvo el sulfonato de metano (190 mg, 81%) de compuesto P-17 como un compuesto amarillo.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ó 10,91 (s, 1H), 9,83 (br s, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,01 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,82 - 3,68 (m, 7H), 3,62 - 3,41 (m, 4H), 3,28 - 3,04 (m, 4H), 3,00 (s, 3H), 2,50 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 13C RMN (126 MHz, DMSO-d6) ó 154,58, 154,11, 153,99, 152,04, 151,38, 136,87 (q, J = 31,6 Hz, CF3C), 129,53, 125,47, 123,08 (q, J = 274,9 Hz, CF3) , 112,40, 112,00, 108,63 (q, J = 6,9 Hz, CF3CCH), 107,63, 66,41, 52,76, 51,36, 50,31,46,02, 42,98, 40,23, 35,54, 9,69.

Sólido amarillo (55 mg, 74%). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) 89,69 (s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,51 (s, 1H), 7,41 (t, J= 7,2 Hz, 2H), 7,36 - 7,19 (m, 3H), 6,67 (s, 1H), 4,13 - 3,91 (m, 4H), 3,79 (s, 4H), 3,61 (s, 2H), 3,25 (s, 4H), 2,78 (s, 3H), 2,58 (s, 4H), 2,41 (s, 3H).

Síntesis de compuesto P-19

En un tubo de reacción de microondas de 10 ml, se añadió el compuesto P-17 (122 mg, 0,2 mmol), cloruro de calcio anhidro (10 mg, 0,09 mmol) y solución metanólica de metilamina (2 ml), se hizo hacer reaccionar a 100 °C durante 30 minutos bajo microondas, se concentró y se purificó por cromatografía en capa fina (diclorometano/metanol: 20/1) para dar un sólido blanco (30 mg, 33%).

1H RMN (400 MHz, CDCI3). 89,37 (s, 1H), 9,06 (br s, 1H), 8,74 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 4,05 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,84 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 3,61 (s, 2H), 3,25 (br s, 4H), 3,01 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 2,78 (s, 3H), 2,59 (br s, 4H), 2,50 (s, 3H), 13C RMN (126 MHz, CDCI3) 8 156,42, 153,99 (q, J = 13,5 Hz), 151,34, 149,71, 138,66, 138,39, 127,59, 124,36, 122,56 (q, J = 274,93 Hz), 119,56, 111,84, 109,33 (q, J = 5,4 Hz), 104,70, 66,78, 54,26, 52,23, 45,95, 45,90, 34,27, 26,54, 9,45.

Síntesis de compuesto P-20

A una solución de compuesto P-18 (75 mg, 0,1 mmol) en DMF (3 ml) se añadió ciclopropilamina (1 ml), y la mezcla se calentó a 60 °C. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua (30 ml) y se extrajo dos veces con acetato de etilo (50 ml). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con salmuera saturada (100 ml) y se secaron sobre sulfato sódico anhidro, se concentraron y se sometieron a cromatografía en capa fina (diclorometano/metanol: 40/1) para dar un compuesto amarillo (26 mg, 40%).

1H RMN (400 MHz, CDCI3). 89,47 (s. b., 1H), 9,09 (s, b., 1H), 8,73 (s., 1H), 7,40 (s., 1H), 6,67 (s., 1H), 4,05 (t., J = 4,7 Hz, 4H), 3,84 (t., J = 4,8 Hz, 4H), 3,61 (s, 2H), 3,25 (t, J = 4,7 Hz, 4H), 2,78 (br s, 4H), 2,59 (s, 4H), 2,49 (s, 3H), 0,95 - 0,78 (m, 2H), 0,71 - 0,61 (m, 2H), 13C RMN (126 MHz, CDCI3) 8156,70, 153,93, 153,85, 151,32, 149,81, 138,53 (q, J= 33,2 Hz), 127,59, 124,65, 122,57 (q, J = 274,7 Hz), 119,57, 111,83, 109,48 (q, J = 6,6 Hz), 104,69, 66,77, 54,26, 52,23, 45,95, 45,90, 34,27, 22,58, 9,45, 6,80.

Síntesis de compuestos P-21-24

A una solución de compuesto P-9 (1 equiv.) y 1,8-diazaciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU, 6 equiv.) en diclorometano se añadió el isocianato correspondiente (6 equiv.) y se hizo hacer reaccionar a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua, se extrajo una vez con diclorometano, se lavó una vez con salmuera saturada y se secó sobre sulfato sódico anhidro, se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol: 50/1) para dar un sólido amarillo.

Utilizando el compuesto P-9 (160 mg, 0,3 mmol) como material de partida, se obtuvo un sólido amarillo (54 mg, 29%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ó 9,62 (s, 1H), 8,71 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,45 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 3,96 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 373 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,56 (s, 2H), 3,18 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,08 (s, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,48 (s, 4H), 2,42 (s, 3H), 1,09 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 13C RMN (126 MHz, DMSO-d6) ó 154,81, 154,58, 153,78, 151,31, 150,88, 136,71 (q, J = 31,8 Hz), 127,20, 124,08, 123,23 (q, J = 274,81 Hz), 120,27, 111,34, 108,29 (q, J = 6,2 Hz), 106,21, 66,46, 53,80, 52,14, 45,94, 34,44, 34,06, 15,69, 9,67.

Se hizo referencia al procedimiento de preparación del sulfonato de metano de compuesto P-9. Utilizando el compuesto P-21 (75 mg, 0,31 mmol) como materia prima, se obtuvo el sulfonato de metano (70 mg, 81%) de compuesto P-21 como un compuesto amarillo.

1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ó 9,80 (br s, 1H), 9,65 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,44 (br s, 1H), 7,20 (s, 1H), 4,45 (s, 2H), 4,13 (s, 2H), 4,01 (t, J= 4,9 Hz, 4H), 3,75 (s, 6H), 3,49 (s, 2H), 3,27 - 3,03 (m, 7H), 3,00 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 1,09 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 13C RMN (126 MHz, DMSO-d6) ó 155,00, 154,56, 153,98, 152,13, 150,91, 136,74 (q, J = 31,4 Hz), 129,46, 123,69, 123,29 (q, J = 274,3 Hz), 112,39, 111,93, 108,36 (q, J= 6,4 Hz), 107,53, 66,41, 51,36, 40,24, 50,30, 46,00, 42,99, 35,51, 34,45, 15,68, 9,69.

Utilizando el compuesto P-9 (160 mg, 0,3 mmol) como material de partida, se obtuvo un sólido amarillo (128 mg, 67%). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 9,45 (s, 1H), 8,93 (br s, 1H), 8,74 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,67 (s, 1H), 4,10-4,16 (m, 1H), 4,05 (t, J = 4,4 Hz, 4H), 3,84 (t, J = 4,3 Hz, 4H), 3,61 (s, 2H), 3,25 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 2,78 (s, 3H), 2,59 (t, J = 4,7 Hz, 4H), 2,50 (s, 3H), 1,30 (d, J = 6,4 Hz, 6H), 13C RMN (126 MHz, CDCI3) ó 155,16, 154,33, 153,93, 151,41, 149,67, 138,39 (q, J = 32,9 Hz), 127,55, 124,19, 122,61 (q, J = 274,4 Hz), 119,53, 111,83, 109,53 (q, J = 5,6 Hz), 104,66, 66,78, 54,26, 52,23, 45,95, 45,91, 42,21, 34,25, 23,08, 9,45.

Utilizando el compuesto P-9 (110 mg, 0,2 mmol) como material de partida, se obtuvo un sólido amarillo (40 mg, 29%). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) ó 11,45 (s, 1H), 9,44 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 7,60 (dd, J = 8,9, 4,7 Hz, 2H), 7,35 (s, 1H), 7,07 (t, J= 8,2 Hz, 2H), 6,69 (s, 1H), 4,07 (br s, 4H), 3,86 (t, J = 5,1 Hz, 4H), 3,63 (s, 2H), 3,26 (s, 4H), 2,79 (s, 3H), 2,60 (s, 4H), 2,52 (s, 3H), 13C RMN (126 MHz, CDCI3) ó 159,29 (d, J= 242,9 Hz), 153,74 (d, J= 54,9 Hz), 153,50, 151,09, 149,67, 138,93 (q, J= 32,9 Hz), 133,94 (q, J= 2,9 Hz), 127,67, 125,13, 122,05 (q, J= 7,8 Hz), 119,69, 115,66 (q, J= 22,6 Hz), 111,82, 109,78, 104,83, 66,78, 54,27, 52,25, 45,96, 45,91, 34,28, 9,47.

Utilizando el compuesto P-9 (110 mg, 0,2 mmol) como material de partida, se obtuvo un sólido amarillo (46 mg, 31%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) ó 10,04 (s, 1H), 9,92 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,91 (d, J = 8,7 Hz,, 2H), 7,65 (d, J = 8,8 Hz,, 2H), 6,94 (s, 1H), 4,27 (q, J = 6,9 Hz, 2H), 3,97 (t, J= 4,9 Hz, 4H), 3,82 - 3,66 (m, 4H), 3,57 (s, 2H), 3,08 (s, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,48-2,43 (m, 7H), 1,30 (t, J= 7,0 Hz, 3H), 13C RMN (126 MHz, DMSO-d6) ó 165,79, 153,90, 153,79, 152,07, 151,17, 143,65, 136,95 (q, J = 32,2 Hz), 130,89, 127,27, 125,30, 123,23 (q, J = 274,93 Hz), 124,16, 120,35, 118,45, 111,35, 108,74, 106,31, 66,47, 60,89, 53,80, 52,14, 45,94, 34,07, 14,71, 9,68.

Síntesis de compuesto P-28

Etapa 1: P-28-1 (437,0 mg, 1,0 mmol, para el procedimiento de preparación del mismo, véase el documento CN201210177980.3) se disolvió en una mezcla de diclorometano: agua (10:1, 20 ml), y luego se añadió trifluorometilsulfinato de sodio (936,0 mg, 6 mmol), el sistema anterior se enfrió a 0 °C y se añadió lentamente, gota a gota, una solución acuosa al 70% de hidroperóxido de t-butilo (1,4 ml, 10,0 mmol). Una vez completada la adición gota a gota, se continuó agitando durante 30 min; después se añadió dimetilsulfóxido (4,0 ml) y se calentó a 40 °C para que hacer reaccionara durante la noche. El final de la reacción se detectó y analizó mediante LC-MS. Se añadieron diclorometano y agua y se agitó, se reposó y se separó la fase orgánica, se secó y se concentró para dar un producto bruto. El producto bruto se eluyó por cromatografía con éter de petróleo: acetato de etilo (10: 1 a 4: 1) para dar P-28-2 (300 mg). LC-MS: 506,2 (M+1).

Etapa 2: Se añadieron P-28-2 (300 mg, 0,6 mmol) y oxicloruro de fósforo (1,85 g, 11,9 mmol) a tolueno (20 ml), luego se añadió N, N-dimetilanilina (215,6 mg, 18,0 mmol) y se calentó a reflujo durante la noche. Una vez completada la reacción mediante análisis TCL, se concentró el sistema de reacción. A continuación, se añadió acetato de etilo y agua helada y se agitó, obteniéndose la fase de acetato de etilo por separación. La fase de acetato de etilo se secó y se concentró para dar un compuesto clorado bruto. El compuesto clorado bruto se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (10 ml), se añadió morfolina (155,0 mg, 1,8 mmol) a 0 °C y la mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que las materias primas se consumieron por completo, y luego se concentró para dar un producto bruto, que se utilizó directamente en la siguiente etapa.

Etapa 3: el producto bruto obtenido en la etapa 2 se disolvió en metanol (20 ml), luego se añadió agua (1 ml) e hidróxido de sodio (237,6 mg) y se calentó a reflujo hasta que las materias primas desaparecieron por completo, se concentró, se añadió agua, se ajustó el valor del pH a 5-6 para precipitar un sólido, se secó y se utilizó directamente en la siguiente etapa. LC-MS: 477,2 (M+H>+.

Etapa 4: el producto bruto de la etapa 3, HBTU (455,0 mg, 1,2 mmol), trietilamina (121 mg, 1,2 mmol) y 2-(4-piperidil)-2-propanol (Aa9', 93,2 mg, 0,65 mmol) se añadieron a DMF (10 ml) y se hicieron reaccionar a temperatura ambiente durante la noche. El final de la reacción se supervisó mediante LC-MS. El sistema de reacción se vertió en agua helada y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó, se concentró y se pasó por una columna (DCM: MeOH = 100: 1 ~ 40: 1) para dar P-28-5 (140 mg) como un sólido de color claro.

1H RMN (300 MHz, CD3OD) ó 8,48 (s, 1H), 7,79 (d, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,34~7,42 (brs, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,70 (s, 1H), 5,26 (s, 1H), 4,76 (d, 1H), 4,02 (s, 4H), 3,80 (s, 4H), 1,82~1,95 (m, 2H), 1,47~1,69 (m, 2H), 1,24 (s, 6H), LC-MS: 602,3 (M+1).

Etapa 5: Bajo protección de N2, se disolvió P-28-5 (100 mg, 0,17 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) y se enfrió a -20 °C, después se añadió lentamente BH3/THF (IN, 1,7 ml, 1,7 mmol) gota a gota. Una vez completada la adición gota a gota, el sistema de reacción se calentó a 60 °C y se hizo reaccionar durante 1 h, y luego el sistema de reacción se enfrió a -20 °C y se añadió ácido clorhídrico concentrado (0,8 ml) gota a gota, y luego se calentó a 60 °C para la reacción después de la adición. Se detectó por LC-MS que todos los intermedios se convirtieron en los compuestos objetivo. La mezcla se enfrió, y luego se añadió acetato de etilo y agua para separar el líquido y obtener la fase acuosa. La fase acuosa se ajustó a un pH de aproximadamente 10 con hidróxido de sodio, se extrajo con DCM, se secó y se concentró, y luego se eluyó rápidamente mediante una columna (DCM: MeOH = 100: 1 a 40: 1) para dar P-28 (20 mg).

1H RMN (300 MHz, CD3OD) ó: 8,36 (s, 1H), 7,09 (s, 1H), 6,84 (s , 1H), 5,42 (s, 1H), 4,05 (t, 4H), 3,99 (s, 2H), 3,77 (t, 4H), 3,50 (brs, 1H), 2,39 (t,2H), 1,80 (t, 2H), 1,36~1,52 (m, 4H), 1,08 (s, 6H), LC-MS: 588,2 (M+1).

El efecto de los compuestos sobre la actividad quinasa de PI3K

Ajuste de la concentración para cribado preliminar: los compuestos a ensayar se disolvieron en DMSO (dimetilsulfóxido) hasta 100 pM o 10 pM como soluciones de almacenamiento; para cada uno, se tomaron 2 pL que se añadieron a 48 pL de 1 * Tampón de Reacción para obtener una solución de compuesto de 4 pM o 400 nM que contenía 4% de DMSO. Después de mezclar bien, la mezcla se diluyó con DMSO al 4% en 1 * Tampón de Reacción para obtener una solución de compuesto de 4pM o 400 nM. Se tomaron 5 pL de cada solución diluida para añadirla a una placa de 384 pocillos, de modo que la concentración final de compuesto en los 20 pL finales del sistema de reacción de la quinasa sea de 1 pM y 100 nM o de 100 nM y 20 nM, respectivamente, y que contenga 1% de DMSO.

Ajuste de la concentración para la determinación de IC ⁵⁰ : Para las diferentes enzimas, se seleccionaron 10 pM y 100 pM como concentraciones iniciales. Los compuestos a ensayar se disolvieron en DMSO hasta 1 mM o 10 mM como soluciones de trabajo, se tomó 1 pl de cada solución de trabajo para añadirla a 24 pl de tampón de quinasa A de 1 * para obtener una solución de compuesto de 40 pM o 400 pM que contenía 4% de DMSO. La solución de compuesto se diluyó en gradiente 4x en secuencia, 10 concentraciones de dilución. Se tomaron 2,5 pL de cada solución diluida para añadirla a una placa de 384 pocillos, de modo que la concentración final de compuesto en los 10 pL finales del sistema de reacción de la quinasa sea de 10 pM, 2,5 pM y 0,625 pM, sucesivamente, y que contenga 1% de DMSO.

Etapas experimentales: A temperatura ambiente, la PI3K quinasa se hizo reaccionar durante 30 minutos y luego se dio por terminada, se añadieron soluciones de detección a cada pocillo, se mezclaron bien y se incubaron durante 2 horas a temperatura ambiente, luego se detectaron mediante un lector de microplacas multifuncional (2104 EnVision® Multilabel Reader (Cat: 2104-0010, PerkinElmer)) y se registraron los resultados de las pruebas.

Resultados experimentales:

Cálculo de la tasa de emisión de cada pocilio

Relación de emisión (ER) = 665 nM de Señal de emisión/620 nm de Señal de emisión

La relación de emisión promedio del control de inhibición de 100% se registró como: ER100%

La relación de emisión promedio del control de inhibición de 0% se registró como: ER0%

Cálculo de la tasa de inhibición

La tasa de inhibición se calculó mediante la siguiente fórmula:

Como se muestra en la Tabla 1 y la Tabla 2, todos los compuestos de las tablas muestran buenos efectos inhibitorios sobre la PI3K quinasa, especialmente los compuestos P-5/6/7 muestran un efecto inhibidor selectivo sobre la PI3K6.

Tabla 1 Efecto inhibitorio de algunos compuestos sobre varias isoformas de PI3K quinasa a concentraciones específicas

Tabla 2 Efectos inhibitorios de algunos compuestos sobre varias isformas de PI3K quinasa

Se puede observar en las tablas que los compuestos P-5, P-6, P-7, etc., tienen buenas selectividades para PI3K6.

GDC0941 es un compuesto positivo cuyo nombre químico es 2-(1H-indazol-4-il)-6-[[4-(metilsulfonil)-1-piperazinil]metil]-4-(4-morfolinil)tieno[3,2-D]pirimidina (4-[2-(1H-indazol-4-il)-6-[(4-metilsulfonilpiperazin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4-il]morfolina).

Prueba farmacocinética preliminar

1. Se tomaron 14 ratas SD sanas, machos, con un peso de 200-220 g, para dividirlas aleatoriamente en 4 grupos, 3 4 en cada grupo, y se les administró el compuesto P-17 y el compuesto CYH33 (comparado con el compuesto P-17, al que le faltaba un grupo metilo en la posición 7) mediante administración intragástrica (10 mg/kg) e inyección intravenosa (5 mg/kg) respectivamente, las disposiciones específicas se muestran en la siguiente tabla 3:

Las ratas fueron sometidas a ayuno durante 12 horas antes del experimento, el agua fue suministrada libremente. Las ratas fueron alimentadas 2 h después de la dosificación.

2. Puntos de tiempo de muestreo de sangre y procesamiento de muestras

Dosificación por administración intragástrica: 0,25 h, 0,5 h, 1,0 h, 2,0 h, 3,0 h, 4,0 h, 6,0 h, 8,0 h y 24 h después de la dosis.

Dosificación por vía intravenosa: 5 min, 0,25 h, 0,5 h, 1,0 h, 2,0 h, 4,0 h, 6,0 h, 8,0 h, y 24 h después de la dosis. En los puntos de tiempo de ajuste mencionados, se tomaron 0,3 ml de sangre venosa del plexo venoso retroorbital de la rata, y se colocaron en un tubo de ensayo heparinizado, se centrifugaron a 11.000 rpm durante 5 minutos, luego se separó el plasma y se congeló en un refrigerador a -20 °C.

3. Pruebas de muestras y análisis de datos

Se utilizó el procedimiento LC/MS/MS para determinar la concentración de los compuestos en el plasma de las ratas. Se utilizó el modelo no compartimental del software Phoenix 1.3 (Pharsight Corporation, EE.UU.) para calcular los parámetros farmacocinéticos después de la dosificación.

(ID es el número de animal, Tmáx es el tiempo de pico, Cmáx es el pico de concentración del fármaco en sangre, AUC es el área bajo la curva durante la medicación, m Rt es el tiempo promedio de residencia, Cl es la tasa de eliminación del fármaco, Vss es el volumen de distribución en estado estacionario, F es la biodisponibilidad absoluta)

Como puede observarse en la tabla anterior, aunque P-17 difiere de CYH33 en un metilo, el volumen de distribución en estado estacionario Vss, el tiempo promedio de residencia MRT, la vida útil T1/2 y la biodisponibilidad absoluta F del P-17 se han mejorado, especialmente la biodisponibilidad absoluta se ha incrementado en gran medida (los compuestos probados son monomesilatos de CYH33 y P17, las estructuras de los compuestos son las siguientes)

Los ejemplos mencionados anteriormente son meramente ilustrativos de varias realizaciones de la presente divulgación, que se describen específicamente y en detalle, pero no debe entenderse que limiten el ámbito de la presente divulgación. Cabe señalar que, para los expertos ordinarios en la técnica, pueden realizarse diversas variaciones y mejoras sin apartarse del concepto de la presente divulgación, y todas ellas están dentro del ámbito de protección de la presente divulgación. Por lo tanto, el ámbito de protección de la presente divulgación se definirá mediante las reivindicaciones adjuntas.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por una fórmula general I o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico:

en el que,

R²es: -C(OH)R5R6; -COalquiloC^1-6; -CN; o, alquilo C^1-6no sustituido o con al menos un sustituyente sustituido, -CH²NH-alquilo C^1-6, -CH²N(alquilo C^1-6) (alquilo C^1-6), -CH²-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono), -CH²-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono) -CH²-(grupo espirocíclico saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 4 a 12 átomos de carbono), -CH²-(grupo anular saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 12 átomos de carbono)-(heterociclilo saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 6 átomos de carbono), o -CH2-(grupo anular saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 12 átomos de carbono) en el que el sustituyente es halógeno; -N(alquilo C1-4)(alquilo C^1-4); -O-alquilo C^1-4; -CN; -COOH; -CHO; -NHS(O)²-alquilo C^1-4; -N(alquilo C1-4)C(alquilo C1-4)(alquilo C1-4)-CONH2; =O; -OH; -S(O)²N(alquilo C1-4)(alquilo C^1-4); -S-alquilo C^1-4; -S(O)2-alquilo C^1-4; -CO-cicloalquilo C^3-6; oxetanilo; morfolinilo; cicloalquilo C^3-6; alquilo-C1-4-N(alquilo C^1-4) (alquilo C^1-4); alquiloC1-4-O-alquilo C^1-4no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -CONH²no sustituido o sustituido con al menos un metilo; alquilo C1-4-CONH²no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -COO-alquilo C^1-4no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -NH²no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -NHCO-alquilo C^1-4no sustituido o sustituido con al menos un metilo; -CO-alquilo C^1-4no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente A, en el que el sustituyente A es hidroxilo o metilo; o alquilo C^1-4no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente B, en el que el sustituyente B es -NH², -OCH³, -CONH², -OH o -CF³;

en R², el heteroátomo se selecciona de al menos uno de N, O y S,

R⁵y R6 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C1-6;

R3 es

en el que R⁷, R8, R⁹y R¹⁰son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C^1-6no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, en el que el sustituyente es halógeno o hidroxilo;

R⁴es -NH², -NHCONHR¹¹o -NHCO²R¹², en el que R¹¹y R¹²son cada uno independientemente alquilo C^1-6, cicloalquilo C^3-8o fenilo no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente seleccionado de al menos uno de halógeno y -C(O)OR13, en el que R¹³es alquilo C^1-6no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, y el sustituyente en el R¹³es halógeno.

2. El compuesto de pirrolo[2,1 -f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 1 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R¹es halógeno, o alquilo C^1-4o cicloalquilo C^3-6que no está sustituido o está sustituido con al menos un sustituyente.

3. El compuesto de pirrolo[2,1 -f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 2 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R1 es -Cl, -F, metilo, trifluorometilo o difluorometilo.

4. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 1 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R²es: -C(OH)RsR6; -COalquilo C^1-4; -CN; o, alquilo C1-4 no sustituido o con al menos un sustituyente sustituido , -CH²NH-alquilo C^1-4, -CH2N(alquilo C1-4)(alquilo C1-4), -X-(heterociclilo saturado de cuatro a seis miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos), -X-(heterociclilo saturado de cuatro a seis miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos)-(heterociclilo saturado de cuatro a seis miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos), -X-(grupo espirocíclico bicíclico saturado que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 4 a 8 átomos de carbono) -X-(grupo bicíclico saturado con puente que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 8 átomos de carbono)-(heterociclilo saturado de 4 a 6 miembros que contiene de 1 a 2 heteroátomos), o -X-(grupo bicíclico saturado con puente que contiene de 1 a 2 heteroátomos y de 3 a 8 átomos de carbono), en el que X es CH², y en el que el heterociclilo, el grupo espirocíclico y el grupo anular puenteado están conectados a X a través de un átomo de N, R⁵y R6 son, cada uno de ellos, independientemente, hidrógeno o alquilo C^1-4.

5. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 4 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que el sustituyente en R²es -F, -Cl, -Br, -I -CH³, -CH²CH³, -CH2CH(CH3)2, -CH²NH², -CH2N(CH3)2, -CH²CH²NH², -CH2CH2N(CH3)2, -CH²OH, -CH²OCH³, -CH²CH²OH -C(CH3)2OH, -C(CH3)(CF3)OH, -C(CF3)2OH, -C(CH3)2OCH3, -C(CH3)2NH2, -CH2C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -C(CH3)2CH2OCH3, -CN, -CF³, -CO²H, -CHO, -COCH³, -CO2C(CH3)3, -COCH²OH, -COC(OH)(CH3)2, -COCH(OH)CH3, -CONH², -CONHCH³, -CON(CH3)2, -CH²CONH², -CH2CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NH², -NHCH³, -N(CH3)2, -NHCOCH³, -N(CH3)COCH3, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, =O, -OH, -OCH³, -S(O)2N(CH3)2, -SCH³, -S(O)2CH3, -C(O)-ciclopropilo, ciclopropilo, ciclobutilo, oxetanilo o morfolinilo.

6. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 1 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R²es

o

Rx y Ry son cada uno -N(CH3)2, -S(O)2CH3 o alquilo C^1-4, en el que el C^1-4alquilo está no sustituido o sustituido con al menos un sustituyente, el sustituyente es halógeno, hidroxilo, -CONH², -CF³, amino u -OCH³.

7. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 1 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R²es

8. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 1 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R³es

y en el que R⁷, Rs, R⁹y R¹⁰son cada uno independientemente hidrógeno o C^1-4alquilo.

9. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 8 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R³es morfolinilo o (S)-3-metilmorfolinilo.

10. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 1 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R4 es -NH2, -NHCONHR11 o -NHCO²R¹², en el que R¹¹y R¹²son cada uno independientemente alquilo C¹-⁴, cicloalquilo C^3-6o fenilo que no está sustituido o está sustituido con al menos un sustituyente seleccionado entre al menos uno de fluoro, cloro, bromo y -C(O)OR13, en el que R¹³es alquilo C¹-⁴.

11. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 10 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que R¹¹y R¹²son cada uno independientemente metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, fenilo, -Ph-CO²Et-p o 4-fluorofenilo.

12. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de la reivindicación 1 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico, en el que el compuesto tiene una estructura representada por una de las siguientes fórmulas generales:

13. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico para uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con la vía PI3K.

14. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico para uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con la vía de PI3K de acuerdo con la reivindicación 13, en el que el compuesto tiene una actividad inhibidora selectiva sobre PI3K6.

15. El compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico para uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con la vía de PI3K de acuerdo con la reivindicación 13, en el que la enfermedad relacionada con la vía PI3K es al menos uno de tumores, leucemias y enfermedades autoinmunes.

16. Una composición farmacéutica para uso en el tratamiento de una enfermedad relacionada con la vía PI3K, que comprende una cantidad efectiva para uso terapéutico de compuesto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sustituido con 7 representado por la fórmula general I de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 o una de sus sales aceptables para uso farmacéutico.