ES2836289T3 - Poliaminas biodisponibles - Google Patents

Abstract

Una sal de una forma di-protonada de una poliamina de fórmula AMXT 1501 y un ácido cáprico desprotonado, en donde la sal tiene dos moles de ácido cáprico desprotonado por cada mol de AMXT 1501 protonado. **(Ver fórmula)**

Description

DESCRIPCIÓN

Poliaminas biodisponibles

Referencia cruzada para la solicitud relacionada

Esta solicitud reivindica el beneficio según 35 U.S.C. § 119(e) de la solicitud de patente provisional de EE.UU. N° 62/313.657, presentada el 25 de marzo de 2016.

Campo de la invención

La presente invención se refiere en general a composiciones farmacéuticas, y más específicamente a poliaminas que se encuentran en forma biodisponible, y a la fabricación y el uso de las mismas.

Antecedentes

Las poliaminas han demostrado muchas propiedades biológicas útiles y están en estudio como agentes farmacéuticos activos para muchas afecciones médicas. Véase, por ejemplo, Senanayake T.et al.Essay Biochem., 46:77-94 (2013); Zini M. et al.Chemico-Biological Interactions, 181:409-416 (2009); Kaur N. et al. J. Med. Chem., 51:2551-2560 (2008).); Boncher, T. et al. Biochem. Soc. Trans., 35(2):356-363 (2007); Melchiorre C. et al. J. Med. Chem. 53:5906-5914 (2010); y Polyamine Drug Discovery, editado por Patrick Woster y Robert Casero, RCS Publishing, 2011, DOI:10.1039/9781849733090.

Por ejemplo, se han identificado ciertas poliaminas como inhibidores de la monoamino oxidasa A y B (MAO A y MAO B) y de la proteína de adhesión vascular 1 (VAP-1), lo que sugiere que pueden ser útiles en terapias anti­ neurodegenerativas y antidepresivas, tales como la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer, y trastornos afectivos. Véase, por ejemplo, Bonaiuto E. et al., Eur. J. Med. Chem., 70:88-101 (2013).. Para otros informes de los efectos neuroprotectores de las poliaminas y/o su uso para tratar trastornos mentales y neurológicos, véase por ejemplo, Zhang X. et al. Acta Pharmaceutica Sinica B, 5(1):67-73 (2015); Saiki R. et al. Bioorganic and Medical Chem, Lettters, 23:3901-3904 (2013); Fiori LM et al. J. Psychiatry Neurosci., 33(2):102-110 (2008); y Gilad GM y Gilad VH, J. Pharmacology and Experimental, Therapeutics 291 (1):39-43 (1999).

La quimioterapia y la quimioprevención del cáncer es otra utilidad de los productos farmacéuticos de poliamina. Véase, por ejemplo, Murray-Stewart T. et al. Amino Acids, 46(3):585-594 (2014); Casero RA, Cancer Discovery, 975­ 977 (Sept. 2013); Minarini A. et al. European J. Medicinal Chem., 67:359-366 (2013); Casero RA y Woster PM, J. Med. Chem. 52:4551-4573 (2009); Rossi T. et al. Anticancer Research, 28:2765-2768 (2008); Seiler N. y Raul F. J. Cell. Mol. Med. 9(3):623-642 (2005).

Las poliaminas también se están investigando como tratamiento para enfermedades tropicales. Véase, por ejemplo, Verlinden BK et al. Bioorganic and Medical Chemistry, 23:5131-5143 (2015); y O'Sullivan MC et al. Bioorganic and Medical Chemistry, 23:996-1010 (2015).

El efecto inmunomodulador del aumento del metabolismo de las poliaminas se ha detallado en muchos informes científicos. Varios estudios han demostrado un efecto inhibidor inmunológico por el aumento de los niveles de poliaminas que rodean a los tumores. Por ejemplo, Moulinoux y colaboradores describieron experimentos en los que se logró una disminución completa de los niveles de poliaminas en ratones injertados con carcinoma 3LL (pulmón de Lewis) mediante el tratamiento con DFMO, un inhibidor de la poliamina oxidasa y neomicina para evitar que la flora microbiana intestinal proporcione poliaminas. En estos ratones, se redujo el crecimiento del tumor y se corrigieron las anomalías del sistema inmunológico observadas en los animales que tenían tumores. Véase, por ejemplo, Chamaillard, L. et al. Polyamine deprivation prevents the development of tumor-induced immune suppresion. British Journal of Cancer, 76:365-370 (1997). Se corrigió la producción disminuida de interleuquina 2 (IL-2) de células del bazo y de las poblaciones de linfocitos CD4+ y CD8+ observadas antes del tratamiento con fármacos y se redujeron los niveles de poliamina previamente aumentados en el bazo. Para ver estas supresiones fue necesario mantener un bloqueo total de todas las fuentes principales de poliaminas. La restauración de la población de linfocitos T no dependió de la etapa de crecimiento del tumor. No se requirieron otros antígenos de activación de vacunas o dirigidos a tumores.

Además, Moulinoux y colaboradores examinaron los efectos de una mayor reducción total de poliaminas en ratones injertados con carcinoma 3LL en relación con la re-estimulación del sistema inmunológico no específico que se especializa en la muerte de células tumorales. Véase, por ejemplo, Chamaillard, L., et al. Polyamine deprivation stimulates natural killer cell activity in cancerous mice. Anticancer Research, 13:1027-1033 (1993). La disminución en la actividad citotóxica de las células asesinas naturales (NK) del ratón se corrigió en estos animales con poliaminas disminuidas. Los autores concluyen que las poliaminas, secretadas por el propio tumor y absorbidas a través del tracto gastrointestinal, pueden considerarse no sólo como factores de crecimiento autocrinos sino también como factores inmunosupresores naturales.

Soda y sus colaboradores estudiaron los efectos de las poliaminas en la función inmunitaria celular. Véase, por ejemplo, Kano, Y., et al. Increased blood spermine levels decrease the cytotoxic activity of lymphokine-activated killer cells: a novel mechanism of cáncer evasión, Cáncer Immunology, Immunotherapy, 56:771-781 (2007). Se cultivaron células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) de voluntarios sanos con espermina, espermidina o putrescina y se examinaron los resultados sobre la función de las células inmunes. El tratamiento dio como resultado una menor adhesión de PBMCs no estimuladas al plástico del cultivo de tejidos de una manera dependiente de la dosis y del tiempo sin afectar a la viabilidad o la actividad celular. Esta menor adhesión también se asoció con una disminución en el número de células CD11a positivas y CD56 positivas. En un grupo de 25 pacientes con cáncer, los cambios en los niveles sanguíneos de espermina después de la cirugía se correlacionaron negativamente con los cambios en la citotoxicidad de las células asesinas activadas por linfocinas (LAK). Estos autores concluyeron que el aumento de los niveles de espermina en sangre puede ser un factor importante en la supresión de la función de las células inmunitarias antitumorales.

Un estudio informado por Bowlin observó el efecto inhibidor de DFMO en la biosíntesis de poliaminas sobre la expresión de las células del sistema inmunológico en ratones C57BL/6 normales y portadores de tumores (melanoma B16). Véase, por ejemplo, Bowlin, T.L., et al. Effect of polyamine depletion in vivo by DL-alphadifluoromethylornithine on functionally distinct populations of tumoricidal effector cells in normal and tumor-bearing mice. Cancer Research, 46:5494-5498 (1986). Observaron que el tratamiento con DFMO de estos ratones inmunocompetentes durante 6 días redujo los niveles de poliaminas de leucocitos esplénicos y dio como resultado la inducción de linfocitos T citotóxicos tanto en animales normales como con tumores. Mientras que los niveles de putrescina y espermidina se redujeron significativamente, los niveles de espermina no. Esto llevó a los autores a sugerir que la generación de CTLs es sensible a los niveles de espermina.

Otro estudio de los mismos autores exploró el efecto del tratamiento con cada uno de los tres inhibidores diferentes de la ornitina descarboxilasa sobre las actividades de los macrófagos tumoricidas in vivo. Véase, por ejemplo, Bowlin, T.L., et al. Effects of three irreversible inhibitors of ornithine decarboxylase on macrophage-mediated tumoricidal activity and antitumor activity in B16F1 tumor-bearing mice.. Cancer Research 50:4510-4514 (1990). Los ratones portadores de tumores que se trataron con DFMO oral de 0,5 a 2,0% tenían la citólisis mediada por macrófagos aumentada dos veces más que las células B16F1 ex vivo. Un estudio anterior de Bowlin mostró que la oxidación de poliaminas regula a la baja la producción de IL-2 por las células mononucleares de sangre periférica humana. Véase, por ejemplo, Flescher, E., et al. Polyamine oxidation down-regulates IL-2 production by human peripherical blood mononuclear cells. Journal of Immunology, 142: 907-912 (1989).

Gensler informó de estudios que exploran la capacidad de DFMO para prevenir la carcinogénesis cutánea y la inmunosupresión inducida por irradiación ultravioleta en ratones BALB/c inmunocompetentes. Gensler, H.L. Prevention by alpha-difluoromethylornithine of skin carcinogénesis and immunosuppresion induced by ultraviolet irradiation. Journal of Cancer Research and Clinical Oncology 117:345-350 (1991). Los ratones pretratados durante 3 semanas con DFMO al 1% en el agua de bebida e irradiados después con radiación UVB tuvieron una incidencia reducida del 9% de cáncer de piel, mientras que el grupo de control no tratado desarrolló cánceres en el 38% de los ratones. El grado de eliminación de la inmunosupresión en los ratones tratados con DFMO se midió mediante un ensayo de transferencia pasiva. Cuando se transfirieron los esplenocitos de ratones irradiados con UV a ratones sin tratamiento previo se impidió su capacidad normal para oponerse a los desafíos tumorales inducidos por UV (20 de 24 de los ratones desarrollaron tumores). Cuando los esplenocitos de ratones irradiados con UV que se trataron con DFMO se transfirieron a ratones sin tratamiento previo, la mayoría de los tumores fueron rechazados (sólo crecieron 2 de 24).

Gervais informó sobre experimentos que analizaron el fenotipo y la actividad funcional de las células dendríticas de pacientes con cáncer e investigó el efecto de la putrescina en estas células inmunes. Véase, por ejemplo, Gervais, A., et al. Dendritic cells are defective in breast cancer patients: a potential role for polyamine in this immunodeficiency. Breast Cancer Res. 7:R326-335 (2005). Las células de pacientes con cáncer produjeron un menor rendimiento de células dendríticas y estas células mostraron una expresión más débil de moléculas MHC de clase II. Añadiendo putrescina a las células dendríticas de donantes normales, fue posible reducir la actividad citolítica final de los linfocitos, imitando la función defectuosa de las células dendríticas de los pacientes con cáncer.

Evans observó que la espermina suprime la sensibilidad de las células del carcinoma de cuello uterino a los linfocitos citotóxicos LAK recogidos en más de la mitad de los sujetos humanos estudiados. Véase, por ejemplo, Evans, et al. Spermine-directed immunosuppresion of cervical carcinoma cell sensivity to a majority of lymphokineactivated killer lymphocyte cytotoxicity. Nat. Immun., 14:157-163 (1995).

Tracey ha informado que la espermina tiene un efecto inhibidor inmunológico. Véase, por ejemplo, Zhang, M., et al. Spermine inhibits pro-inflammatory cytokine synthesis in human mononuclear cells: a counterregulatory mechanism that restrains the immune response. J Exp. Med., 185:1759-1768 (1997). Específicamente, Tracey observó que la estimulación de los monocitos con LPS provoca un aumento en la captación de espermina por el aparato de transporte de poliaminas de la célula. Utilizaron un inhibidor del transporte de poliaminas, 4-bis(3-aminopropil)-piperazina (BAP) para bloquear la actividad inhibidora de la espermina en la producción de TNF de monocitos.

Los experimentos que utilizaron la inflamación inducida por carragenina en ratas mostraron que BAP mejora la producción de TNFa y aumenta el edema resultante en la almohadilla del pie. Véase, por ejemplo, Zhang, M., et al. Spermine inhibition of monocyte activation and inflammation. Mol. Med., 5:595-605 (1999). Véase también Gervais, A., et al. Ex vivo expansion of antitumor cytotoxic lymphocytes with tumor-associated antigen-loaded dendritic cells.

Anticancer Research 25, 2177-2185 (2005) y Susskind, B.M. y Chandrasekaran, J. Inhibition of cytolytic T lymphocyte maturation with ornithine, arginine, and putrescine. Journal of Immunology, 139:905-912 (1987).

Szabo y sus colegas presentaron estudios que exploran el mecanismo del efecto inhibidor de las poliaminas sobre la inducción de la óxido nítrico sintasa (NOS). Véase, por ejemplo, Szabo, C., et al. The mechanism of the inhibitory effect of polyamines on the induction of nitric oxidase synthase: role of aldehyde metabolites. Br. J. Pharmacol., 113:757-766 (1994).

El NO producido por la enzima iNOS es una molécula efectora central en la respuesta inmune innata a los patógenos y es el foco de muchos grupos que trabajan para comprender el papel que juega el microbio H. pylori en la patogénesis de las úlceras de estómago y el cáncer gástrico. Casero y Wilson observaron que la espermina puede inhibir la producción de NO derivado de macrófagos proveniente de la NO sintasa inducible (iNOS). Véase, por ejemplo, Bussiere, F.I., et al. Spermine causes loss of innate immune response to Helicobacter pylori by inhibition of inducible nitric-oxidase synthase translation. The Journal of Biological Chemistry 280:2409-2412 (2005).) y Chaturvedi, R., et al. Induction of polyamine oxidase 1 by Helicobacter pylori causes macrophage apoptosis by hydrogen peroxidase release and mitochondrial membrane depolarization. The Journal of Biological Chemistry, 279:40161-40173 (2004).

Un artículo de revisión de Soda proporciona una descripción general del papel inmunosupresor que desempeña el aumento del metabolismo de las poliaminas. Véase, por ejemplo, Soda, K. The mechanisms by which polyamines accelerate tumor spread. J. Exp. Clin. Cancer Res., 30:95 (2011). Sin embargo, a pesar de la promesa de los agentes farmacéuticos de poliamina, no todos los experimentos publicados demuestran una buena eficacia clínica para estos agentes.

Se evaluó clínicamente el efecto terapéutico de N1, N11-dietilnorespermina (DENSpm; DENSPM) contra el cáncer de mama metastásico tratado previamente, véase, por ejemplo, Wolff, et al. Clinical Cancer Res., 9:5922-5928 (2003) . En este estudio, DENSpm se administró como base libre mediante infusiones intravenosas durante un período de 15 minutos. Los ciclos de tratamiento incluyeron inyecciones de 100 mg/m2/día durante 5 días cada 21 días. Se observó una semivida plasmática corta de 0,5 a 3,7 horas. Un informe adicional utilizando infusiones DENSpm i.v. para el tratamiento del cáncer de pulmón de células no pequeñas tampoco demostró beneficios clínicos (Hahm, H.A. et al Clinical Cancer Res., 8:684-690 (2002)).

N1, N14-dietilhomoespermina (DEHSpm; DEHSPM) es un análogo adicional de poliamina bis-etilada ensayado para su eficacia clínica en ensayos de oncología humana. Las inyecciones subcutáneas dos veces al día de este agente como su sal de tetrahidrocloruro a 12,5, 25 y 37,5 mg/kg en pacientes con tumores sólidos mostraron niveles máximos de fármaco entre 15 y 30 minutos después de la inyección. El fármaco no se observó en el plasma de los pacientes tratados de 2 a 4 horas después de la inyección (Wilding, G. et al. Investigational New Drugs, 22:131-138 (2004) ). No se encontró que ninguno de los 15 pacientes tuviera una respuesta objetiva y toxicidades significativas a la dosis más alta limitó la evaluación adicional en pacientes con cáncer.

La escualamina es un aminosterol sintetizado químicamente, aislado originalmente del hígado del tiburón cazón. Los estudios en ratones portadores de tumores han demostrado que la escualamina actúa como inhibidor de la angiogénesis y muestra actividad contra varios modelos de cáncer en ratones, incluidos el cáncer de pulmón, mama, ovario y próstata. Se han informado pruebas clínicas de escualamina, como su sal de lactato, contra el cáncer de pulmón de células no pequeñas avanzado (Herbst, R.S. Clinical Cancer Res., 9:4108-4115 (2003)). Se observó una actividad clínica limitada en este ensayo, en el que se administró escualamina mediante infusiones i.v. durante 3 horas a niveles de dosis de 100 a 400 mg/m2/día. Se midió la semivida plasmática de la escualamina entre 1 y 2 horas. Un informe anterior sobre el ensayo clínico de la sal de lactato de escualamina empleó 120 horas de infusión i.v. continua como método de administración (Bhargava, P. et al. Clinical Cancer Res. 7:3912-3919 (2001)).

La desoxiespergualina es un análogo sintético de la espercualina derivada de bacterias y tiene fuertes efectos inmunomoduladores sobre linfocitos, macrófagos y neutrófilos. Está aprobada en Japón para el tratamiento del rechazo de trasplantes resistentes a los esteroides. Se administra mediante inyecciones subcutáneas a 0,5 mg/kg/día durante un máximo de 21 días. Se ha notificado el comportamiento farmacocinético de la liberación de desoxiespergualina mediante perfusiones intravenosas de 3 horas (Dhingra, K. et al Cancer Research, 55:3060-3067 (1995)) y mostró una vida media muy corta de 1,8 horas.

F14512 es un conjugado de poliamina-epipodofilotoxina que es capaz de dirigirse a las células cancerosas con alta actividad transportadora de poliaminas (Kruczynski, A. et al Leukemia 27:2139-2148 (2013)). Se está desarrollando para su uso contra la AML y los tumores sólidos y una publicación reciente que muestra su desarrollo contra el tumor canino mostró que se administra mediante inyecciones i.v. (Tierny, D. Clinical Cancer Res., 21(23):5314-5323 (2015)). Los niveles plasmáticos de F14512 en perros tratados con 0,05, 0,060, 0,070, 0,075 y 0,085 mg/kg mediante infusiones por vía intravenosa durante 3 horas aumentaron con la dosis y se estimó que estaban dentro del intervalo terapéutico en aproximadamente 2 a 3 horas para la mayoría de los perros.

Mozobil es un fármaco que contiene poliamina biciclam aprobado para la movilización de células madre antes de los trasplantes de células progenitoras hematopoyéticas durante la quimioterapia contra el cáncer (De Clercq, E.

Pharmacology and Therapeutics, 128:509-518 (2010)). Este fármaco se administra mediante inyección subcutánea. La administración subcutánea a pacientes voluntarios sanos a 40, 80, 160, 240 y 360 pg/kg mostró una farmacocinética proporcional a la dosis y un aclaramiento a las 10 horas. La vida media plasmática de Mozobil es de 3 horas. (Lack, N. A., et al. Clin. Pharmacol. Ther. 77:427-436 (2005)).

La trientina es un análogo de poliamina aprobado para su uso en la enfermedad de Wilson. Este análogo de poliamina actúa como un agente quelante del cobre, ayudando a eliminar el exceso de cobre asociado con la enfermedad de Wilson. Aunque la Trientina se administra por vía oral, como su sal de clorhidrato en la clínica, su biodisponibilidad oral es pobre (8 a 30%). Tiene una vida media relativamente corta en seres humanos (de 2 a 4 horas). Se ha publicado una revisión que cubre las aplicaciones clínicas y preclínicas de la Trientina. Véase Lu, J. Triethylenetetramine pharmacology and its clinical applications. Molecular Cancer Therapeutics, 9:2458-2467 (2010). El metilglioxal bis(guanilhidrazona), también conocido como 1,1'[metiletanodiiliden]dinitrilodiguanidina y a menudo abreviado como MGBG, es una poliamina que funciona como un inhibidor competitivo de poliaminas de 2-adenosil metionina descarboxilasa (AMD-1), que cataliza la síntesis de espermidina. Se describe como útil, por ejemplo, en el tratamiento del dolor, tal como el dolor inflamatorio. Véanse las Patentes U.S. Nos 8.258.186 y 8.609.734.

Recientemente se ha demostrado que la administración oral de espermidina mejora la salud del corazón y la longevidad de los ratones (Eisenburg, T. et al. Nature Medicine, 22(12):1428-1438 (2016))). La espermidina proporcionada en la dieta de ratones mejoró la autofagia cardíaca, la mitofagia y la respiración mitocondrial y mejoró las propiedades mecanoelásticas de los cardiomiocitos. in ^vívo. Los autores atribuyeron la extensión de la vida útil de la espermidina de los ratones para inducir las actividades de autofagia de la espermidina (Eisenburg, T. et al. Autophagy, 13(4):1-3 (2017)).

Lipinski ideó un conjunto de parámetros que podrían predecir la capacidad de las sustancias químicas para ser biodisponibles por vía oral (Lipinski CA, et al. Adv. Drug Deliv. Rev, 46(1-3):3-26 (2001)). Conocidos en la técnica como "La Regla de 5", estos parámetros se basan en la estructura química de la molécula e incluyen el número de donantes de enlaces de hidrógeno, los aceptores de enlaces de hidrógeno, el peso molecular y las medidas de lipofilia. Se han encontrado muchas excepciones a estas reglas y estos parámetros ahora se consideran más una guía utilizada para predecir la biodisponibilidad oral de una molécula. La Patente US 2006/0122279 A1 describe conjugados de lisina-espermina con un sustituyente alifático de cadena larga y las sales de los mismos.

Aunque las poliaminas tienen propiedades biológicas deseables, los inventores consideran que su limitada biodisponibilidad oral sigue siendo un obstáculo sin resolver en un esfuerzo por llevar estos materiales a un uso terapéutico práctico. En particular, ha sido un problema la biodisponibilidad de las poliaminas por administración oral. Sorprendentemente, la administración oral de fármacos de poliamina como sales con ácidos carboxílicos hidrófobos mejora en gran medida sus biodisponibilidades. Por tanto, existe la necesidad de una composición farmacéutica que pueda suministrar poliaminas y formas protonadas de las mismas a un paciente que lo necesite, y que supere uno o más de los defectos asociados con la técnica anterior.

Compendio

La presente divulgación se refiere a sales entre agentes farmacéuticos de poliamina protonada (PPA) y ácidos carboxílicos hidrófobos desprotonados (HCA). En un aspecto, la invención proporciona una sal de una forma diprotonada de una poliamina de fórmula AMXT 1501 y un ácido cáprico desprotonado, donde la sal tiene dos moles de ácido cáprico desprotonado por cada mol de AMXT 1501 desprotonado.

El agente farmacéutico de poliamina catiónica protonada es una forma di-protonada de una poliamina de fórmula AMXT 1501 y el carboxilato aniónico hidrófobo es ácido cáprico desprotonado, y la sal tiene dos moles de ácido cáprico desprotonado por cada mol de AMXT 1501 protonado, con el fin de proporcionar la sal dicaprato de AMXT 1501, designado opcionalmente como AMXT 1501 :(caprato)2. La sal puede ser esencialmente pura, por ejemplo, no está mezclada con más del 5% en peso de cualquier otro químico sólido o líquido. La sal puede ser una sal activa farmacéuticamente.

La presente divulgación también proporciona, por ejemplo, métodos para producir sales de PPA-HCA, métodos para formular las sales en una composición farmacéutica o un precursor de la misma, formas de dosificación sólidas de estas sales, métodos para administrar las sales a un sujeto que lo necesite, y otras composiciones que incluyen una sal de la presente divulgación como componente. Por ejemplo, la presente divulgación proporciona composiciones farmacéuticas que contienen una sal de PPA:HCA como se describe en la presente memoria. La composición farmacéutica puede estar en una forma como se describe en la presente memoria, por ejemplo, una forma sólida para dosificación oral, es decir, una forma sólida de dosificación oral, tal como una pastilla o comprimido.

Por tanto, la presente divulgación proporciona métodos para producir sales de PPA-HCA. Por ejemplo, en una realización, la presente divulgación proporciona un método que comprende: combinar una poliamina, un ácido carboxílico hidrófobo y un disolvente para proporcionar una disolución; y posteriormente aislar un residuo sólido de la disolución, en donde el residuo comprende una sal de PPA-HCA formada entre la poliamina y el ácido carboxílico hidrófobo. Opcionalmente, el método se puede caracterizar además por uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro) de lo siguiente: la poliamina es cualquiera de las poliaminas activas farmacéuticamente identificadas en la presente memoria; el ácido carboxílico hidrófobo es cualquiera de los ácidos carboxílicos hidrófobos identificados en la presente memoria; cada una de las poliaminas y el ácido carboxílico hidrófobo es al menos 90% o al menos 95% puro en peso; aproximadamente 2,0 moles, por ejemplo, 1,8-2,2 moles de ácido carboxílico hidrófobo se combinan por cada 1,0 mol de poliamina; el disolvente se selecciona a partir de un disolvente prótico polar puro y una mezcla de disolventes que comprende un disolvente prótico polar; el disolvente comprende agua, por ejemplo, agua seleccionada entre agua desionizada y agua destilada; el disolvente comprende metanol; la poliamina y el ácido carboxílico hidrófobo se añaden al disolvente para proporcionar la disolución; el método se realiza en un proceso por lotes; el disolvente se elimina de la disolución mediante un proceso seleccionado entre evaporación y destilación, para aislar el residuo de la disolución, o se añade un co-disolvente (por ejemplo, acetonitrilo (ACN)) a la disolución para formar un sobrenadante y el residuo en forma de precipitado, y en donde el sobrenadante se separa del residuo para aislar el residuo de la disolución, o la disolución se enfría para formar un sobrenadante y el residuo en forma de precipitado, y en donde el sobrenadante se separa del residuo para aislar el residuo de la disolución; la poliamina, el ácido carboxílico hidrófobo y el disolvente se combinan para proporcionar una disolución transparente; la poliamina, el ácido carboxílico hidrófobo y el disolvente se combinan a una temperatura dentro del intervalo de 10 a 30°C; el residuo comprende al menos 50%, o al menos 95%, o al menos 99% en peso de la sal; el método comprende además combinar el residuo o una porción del mismo con componentes adicionales para formar una composición farmacéutica adecuada para la ingestión, por ejemplo, el método comprende además formar una forma de dosificación sólida seleccionada de una píldora, un comprimido, una cápsula,, y una pastilla, a partir del residuo o una porción del mismo. Además, se podrían utilizar técnicas de flujo continuo para la producción y el aislamiento de las formas de sal de PPA:HCA descritas. El uso de un aparato de flujo disponible, en donde las disoluciones de la base libre de poliamina, en un disolvente adecuado, tal como metanol, se mezclan con un co-disolvente en el que la sal no es soluble, tal como acetonitrilo, en un aparato de celda de flujo, permite la producción continua de la forma soluble o insoluble de la sal PPA: HCA.

Además, la presente divulgación proporciona el uso terapéutico de las sales de PPA:HCA. Por ejemplo, la presente divulgación proporciona un método para tratar el cáncer que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad eficaz terapéuticamente de una sal de PPA:HCA. Opcionalmente, la cantidad eficaz terapéuticamente de la sal se administra al sujeto como una forma de dosificación sólida.

Además, la presente divulgación proporciona sales de PPA:HCA como se describe en la presente memoria para emplear en medicina, o para emplear como un medicamento, o para emplear en la fabricación de un medicamento. Por ejemplo, la presente divulgación proporciona sales de PPA de AMXT 1501, donde el componente HCA se deriva del ácido decanoico, también conocido como ácido cáprico, para emplear en medicina, por ejemplo, para emplear como un medicamento. Además, la presente divulgación proporciona sales de PPA:HCA como se describe en la presente memoria para emplearse en el tratamiento del cáncer. Por lo tanto, la presente divulgación proporciona sales PPA:(HCA)2, que incluyen las sales en donde el PPA se conoce como AMXT 1501, y en donde el componente HCA deriva del ácido cáprico, incluido el empleo de esas sales en el tratamiento del cáncer. En una realización, la presente divulgación proporciona sales PPA:(HCA)2, en donde el PPA se conoce como AMXT 1501, y en donde el componente HCA es ácido cáprico, incluido el empleo de esa sal en el tratamiento del cáncer.

Este breve compendio se ha proporcionado para presentar determinados conceptos en una forma simplificada que se describen con más detalle a continuación en la descripción detallada. Salvo que se indique expresamente lo contrario, este breve compendio no pretende identificar características clave o esenciales del tema reivindicado, ni pretende limitar el alcance del tema reivindicado.

Los detalles de una o más realizaciones se establecen en la descripción de a continuación. Las características ilustradas o descritas en relación con una realización ejemplar se pueden combinar con las características de otras realizaciones. Por tanto, cualquiera de las diversas realizaciones descritas en la presente memoria se puede combinar para proporcionar realizaciones adicionales. Las realizaciones de las realizaciones pueden modificarse, si es necesario, para emplear conceptos de las diversas patentes, solicitudes y publicaciones como se identifican en la presente memoria para proporcionar aún más realizaciones. Otras características, objetivos y ventajas resultarán evidentes a partir de la descripción, los dibujos, y las reivindicaciones.

Breve descripción de los dibujos

Las características ejemplares de la presente divulgación, su naturaleza y diversas ventajas serán evidentes a partir de los dibujos adjuntos y la siguiente descripción detallada de varias realizaciones. Se describen realizaciones no limitativas y no exhaustivas en referencia a los dibujos adjuntos. Aquí en lo sucesivo se describen una o más realizaciones con referencia a los dibujos adjuntos en los que:

FIG. 1 muestra las estructuras químicas de algunos ejemplos de poliaminas activas farmacéuticamente (PPA en forma neutra).

FIG. 2 muestra una exploración DSC para el dicaprato de AMXT 1501, una sal de la presente divulgación.

FIG. 3 muestra una exploración TGA para el dicaprato de AMXT 1501, una sal de la presente divulgación.

FIGS. 4A, 4B, 4C y 4D muestran los niveles plasmáticos de AMXT 1501 de animales individuales después de una única dosis oral a perros de la base libre de AMXT 1501 (FIG. 4A) y varias formas de la sal de AMXT 1501 (FIGS.

4B (Dicolato), 4C (Fosfato) y 4D (Dicaprato))..

FIG. 5A, 5B, 5C y 5D muestran los niveles plasmáticos medios de AMXT 1501 después de una única dosis oral a grupos de perros en los que el AMXT 1501 en forma de base libre o en varias formas de sal de AMXT 1501 (Figuras 5B (Dicolato), 5C (Fosfato) y 5D ( Dicaprato)) se dosificaron una vez por vía oral.

FIGS. 6A, 6B, 6C y 6D muestran las concentraciones plasmáticas de AMXT 1501 (ng/ml) en animales individuales después de una única dosis oral de dicaprato de AMXT 1501 (8, 16 y 32 mg/kg/día y 16 mg/kg/día con 200 mg/kg/día de DFMO) a perros beagle machos y hembras el día 1, según un estudio como se describe en la presente memoria. FIGS. 7A, 7B, 7C y 7D muestran la concentración plasmática de AMXT 1501 (ng/ml) en animales individuales después de repetir la dosificación oral una vez al día de dicaprato de AMXT 1501 (8, 16 y 32 mg/kg/día y 16 mg/kg/día con 200 mg/kg/día de DFMO) a perros beagle machos y hembras el día 5, según un estudio como se describe en la presente memoria.

FIGS. 8A y 8B muestran concentraciones plasmáticas medias (±DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis única (Día 1; FIG. 8A) o repetida una vez al día (Día 5; FIG. 8B) por vía oral de AMXT 1501 en monoterapia con dicaprato de AMXT 1501 (8, 16 y 32 mg/kg/día) a perros beagle machos y hembras, según un estudio como se describe en la presente memoria.

FIGS. 9A y 9B muestran concentraciones plasmáticas medias (±DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis única (Día 1; FIG 9A) o repetida una vez al día (Día 5; FIG. 9B) por vía oral de 16 mg/kg/día de monoterapia con AMXT 1501 frente a la combinación con DFMO (200 mg/kg/día) a perros beagle machos y hembras, según un estudio como se describe en la presente memoria.

FIGS. 10A, 10B, 10C y 10D muestran concentraciones plasmáticas medias (±DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis única (Día 1) o repetida una vez al día (Día 5) por vía oral de dicaprato de AMXT 1501 (8, 16 y 32 mg/kg/día y 16 mg/kg/día con 200 mg/kg/día de DFMO) a perros beagle machos y hembras, Día 1 frente a día 5, según un estudio como se describe en la presente memoria.

FIGS. 11A y 11B muestran concentraciones plasmáticas medias (DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis oral única (Día 1, FIG. 11A) o repetida (Día 28, FIG. 11B) a perros Beagle macho y hembra; Comparación de niveles de dosis de dicaprato de AMXT 1501 (80, 160 ó 320 mg de dicaprato de AMXT 1501) sin DFMO (machos y hembras combinados), según un estudio como se describe en la presente memoria.

FIGS. 12A, 12B, 12C, 12D, 12E y 12F muestran concentraciones plasmáticas medias (DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis oral única (Día 1) o repetida (Día 28) a perros beagle macho y hembra; Machos frente a hembras. La FIG. 12A muestra datos para el Grupo 2 (dosis baja, dosis de 80 mg), Día 1. La FIG. 12B muestra datos para el Grupo 3 (dosis media, dosis de 160 mg), Día 1. La FIG. 12C muestra datos para el Grupo 4 (dosis alta, dosis de 320 mg), Día 1. La FIG. 12D muestra datos para el Grupo 2 (dosis baja, dosis de 80 mg), Día 28. La FIG.

12E muestra datos para el Grupo 3 (dosis media, dosis de 160 mg), Día 28. La FIG. 12F muestra datos para el Grupo 4 (dosis alta, dosis de 320 mg), Día 28, según un estudio como se describe en la presente memoria..

FIGS. 13A, 13B, 13C y 13D muestran proporcionalidad respecto a la dosis de la administración oral de comprimidos con recubrimiento entérico de dicaprato AMXT 1501 para perros beagle.

Descripción detallada

La evaluación clínica de las poliaminas y los análogos de poliamina se ha visto obstaculizada por las dificultades de administración asociadas con su naturaleza policatiónica. Las limitaciones de su biodisponibilidad oral han dado lugar a que su evaluación preclínica y clínica emplee métodos de inyección intravenosa o intraperitoneal menos deseables. Estos métodos de administración, si bien son suficientes para la evaluación preclínica temprana en modelos animales, no son satisfactorios para el desarrollo farmacéutico final. Es importante destacar que las inyecciones intravenosas o intraperitoneales de análogos de poliaminas tienden a exacerbar sus efectos secundarios tóxicos. Las altas concentraciones plasmáticas de estos agentes policatiónicos conducen a acciones perjudiciales debido a las propiedades físicas y químicas de los agentes. Las inyecciones intravenosas o intraperitoneales dan lugar a concentraciones plasmáticas iniciales elevadas seguidas de una eliminación normal. Para muchas dianas farmacológicas en sistemas de mamíferos, los métodos de administración que conducen a niveles plasmáticos moderados y sostenidos de fármacos son muy deseables. Por esta razón, se prefiere la administración oral, con una exposición plasmática prolongada y retardada al agente. También es muy deseable que cada paciente absorba la misma cantidad de fármaco en función de la dosis dada de fármaco que se esté administrando. En otras palabras, aunque a dos pacientes se les puede administrar la misma dosis de fármaco, es posible que el fármaco no esté igualmente biodisponible para los dos pacientes, debido a, por ejemplo, diferencias en la composición del paciente. Un componente deseable de la biodisponibilidad es que los sujetos que reciben la misma dosis de un fármaco también alcancen concentraciones plasmáticas iguales o similares del ingrediente o ingredientes activos en el fármaco. La presente divulgación reconoce y aborda estos problemas.

Dicho brevemente, en una realización la presente divulgación se refiere a sales, y más particularmente a sales que comprenden una primera molécula que tiene un grupo amonio y una segunda molécula que tiene un grupo carboxilato. El grupo amonio de la primera molécula se selecciona de las formas protonadas de aminas primarias, secundarias y terciarias, es decir, grupos amonio que tienen 3, 2 ó 1 átomo de hidrógeno unidos al átomo de nitrógeno del grupo amonio, respectivamente. La primera molécula puede denominarse poliamina protonada (PPA), lo que indica que contiene dos o más grupos amina, donde cada uno de los grupos amina puede estar en forma protonada o no protonada, aunque al menos uno de los grupos amina está en forma protonada para proporcionar el grupo amonio necesario para formar la sal. La primera molécula es orgánica activa y biológicamente, por ejemplo, puede ser un agente farmacéutico orgánico o un ingrediente farmacéutico activo orgánico (API) en una formulación. La segunda molécula es igualmente orgánica, y en una realización es una molécula pequeña. La segunda molécula es hidrófoba, lo que significa que la segunda molécula está formada, al menos en parte, a partir de una pluralidad de átomos de carbono unidos a átomos de hidrógeno, y que una forma no cargada de la segunda molécula no es soluble en agua. Por conveniencia, la segunda molécula se puede denominar en la presente memoria como un ácido carboxílico hidrófobo (HCA).

Por tanto, en una realización, la presente divulgación se dirige a la combinación de un agente farmacéutico de poliamina y un ácido carboxílico hidrófobo, tal como un ácido graso. En otra realización, la presente divulgación se dirige a la preparación de sales de la presente divulgación. En otra realización, la presente divulgación se dirige a la administración de una sal formada entre un agente farmacéutico de poliamina y un ácido carboxílico hidrófobo, tal como un ácido graso, a un sujeto que lo necesite, para lograr un resultado terapéutico. En una realización adicional, la presente invención se refiere a la biodisponibilidad aumentada de manera sorprendente de fármacos de poliamina cuando se administran como sales asociadas con ácidos carboxílicos hidrófobos. Antes de exponer esta descripción con más detalle, puede ser útil para comprender la misma proporcionar definiciones de determinados términos que se emplean en la presente memoria. Se establecen definiciones adicionales a lo largo de esta divulgación. Es decir, la presente divulgación puede entenderse más fácilmente haciendo referencia a la siguiente descripción detallada de las realizaciones preferidas de la invención y los ejemplos incluidos en la presente memoria.

El término "sal" tiene su significado estándar en la técnica, y se refiere a especies cargadas positivamente (catión) y especies cargadas negativamente (anión) que forman complejos entre sí a través de una interacción iónica. Generalmente, estas sales no implican enlaces covalentes entre componentes moleculares asociados. La sal posee diferentes propiedades biológicas y farmacológicas en comparación con sus especies catiónica y aniónica que la componen, administradas por separado. El término sal también se refiere a todos los solvatos, por ejemplo, hidratos de un compuesto de sal original. Las sales se pueden obtener mediante métodos habituales conocidos por los expertos en la técnica, por ejemplo, mediante combinación de un compuesto con un ácido o base orgánico o inorgánico en un disolvente o diluyente, o a partir de otras sales mediante intercambio catiónico o intercambio aniónico.

"Tratamiento", "tratar" o "aliviar" se refiere al control médico de una enfermedad, trastorno, o afección de un sujeto (es decir, paciente), que puede ser terapéutico, profiláctico/preventivo, o un tratamiento combinado de los mismos. Un tratamiento puede mejorar o disminuir la gravedad de al menos un síntoma de una enfermedad, retrasar el empeoramiento o la progresión de una enfermedad, retrasar o prevenir la aparición de enfermedades asociadas adicionales, o mejorar la remodelación de las lesiones en tejido funcional (parcial o totalmente).

Una "cantidad (o dosis) eficaz terapéuticamente" o "cantidad (o dosis) eficaz" de un compuesto se refiere a la cantidad suficiente para dar como resultado la mejora de uno o más síntomas de la enfermedad que se está tratando, de una manera significativa estadísticamente. Cuando se hace referencia a un ingrediente activo individual administrado en solitario, una dosis eficaz terapéuticamente se refiere a ese ingrediente en solitario. Cuando se hace referencia a una combinación, una dosis eficaz terapéuticamente se refiere a cantidades combinadas de los ingredientes activos que dan como resultado el efecto terapéutico, ya sea que se administren en serie o simultáneamente.

"Aceptable farmacéuticamente" se refiere a entidades y composiciones moleculares que no producen reacciones adversas alérgicas u otras reacciones adversas graves cuando se administran a un sujeto empleando vías bien conocidas en la técnica. El término "aceptable farmacéuticamente" se emplea para especificar que un objeto (por ejemplo, una sal, forma de dosificación, diluyente o vehículo) es adecuado para su uso en pacientes. Se puede encontrar una lista de ejemplos de sales aceptables farmacéuticamente en the Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, editores de P. H. Stahl y C. G. Wermuth, Weinheim/Zurich: Wiley-VCHA/VHCA, 2002.

Un "sujeto que lo necesita" se refiere a un sujeto que tiene, o está en riesgo de tener, una enfermedad, trastorno o afección (por ejemplo, cáncer) que es susceptible de tratamiento o mejora con un compuesto o una composición del mismo proporcionado en la presente memoria. En determinadas realizaciones, un sujeto que lo necesita es un mamífero, por ejemplo, un ser humano. El sujeto puede ser un animal de sangre caliente, tal como ratones, ratas, caballos, vacas, ovejas, perros, gatos, monos, etc.

Como se mencionó anteriormente, una realización de la presente divulgación se refiere a sales que comprenden primeras moléculas cargadas positivamente y segundas moléculas cargadas negativamente, cada una como se define en la presente memoria. Más particularmente, la sal comprende una primera molécula que es un agente farmacéutico de poliamina protonada (PPA), y una segunda molécula que es o comprende un grupo carboxilato unido a un resto hidrófobo (HCA). El término PPA:HCA como se emplea en la presente memoria se refiere a sales que comprenden moléculas de PPA protonado y HCA desprotonado, donde el término PPA:HCA no especifica ninguna estequiometría particular entre el PPA y el HCA presentes en la sal, por ejemplo, PPA:HCA se refiere ampliamente a todas o cualquiera de las sales de PPA:HCA que tienen una estequiometría de PPA:HCA 1:1 (también conocida como PPA:(HCA)1), y sales que tienen una estequiometría de PPA:HCA 1:2 (también conocida como PPA:(HCA)2), y también se refiere a las sales que tienen una estequiometría de PPA:HCA 1:3 (también conocida como PPA:(HCA)3), así como las sales que tienen una estequiometría PPA:HCA 1:4 (también conocida como PPA:(HCA)4), etc., dependiendo de cuántos grupos amina protonables están presentes en el PPA y cuántos equivalentes de HCA se combinan con el PPA. En una realización, PPA:HCA como se emplea en la presente memoria se refiere a sales de estequiometría PPA:(HCA)2.

La sal puede comprender más de una segunda molécula, por ejemplo, dos moléculas de carboxilato cargadas negativamente pueden formar complejos cada una con una única poliamina que tiene dos sitios cargados positivamente. La sal puede comprender algo más que la primera y segunda moléculas. Por ejemplo, la sal puede ser un solvato, en cuyo caso una o más moléculas de disolvente forman complejos con la sal. Además, la sal puede comprender más de una especie aniónica, donde una o más especies aniónicas adicionales pueden ser o no una segunda molécula como se define en la presente memoria. Por ejemplo, la sal puede comprender una primera molécula complejada con un HCA como se define en la presente memoria, y una segunda especie aniónica, por ejemplo, cloruro, que no es un HCA como se define en la presente memoria. Por conveniencia, y a menos que se especifique lo contrario, una posición protonada de una primera molécula se asocia necesariamente con un HCA cargado negativamente como se define en la presente memoria. El control de la producción y de la composición de las sales de PPA:HCA también permite la formación de polimorfos específicos de las sales especificadas.

Agente farmacéutico de poliamina protonada

La presente divulgación proporciona sales que se pueden emplear para administrar moléculas a un sujeto, donde después de su administración las sales pueden sufrir algún cambio o cambios en la forma, y es esta forma cambiada la que ejerce realmente el efecto biológico deseado. Por ejemplo, la primera molécula puede ser un compuesto activo farmacéuticamente en al menos una de las formas protonadas o no protonadas. En otras palabras, aunque la primera molécula está necesariamente protonada en las sales de la presente divulgación que se administran al sujeto, la forma activa biológicamente de la primera molécula puede tener o no la misma cantidad de protonación que está presente en la sal. Como otro ejemplo, la primera molécula puede ser un profármaco para el fármaco activo biológicamente. Por tanto, la primera molécula puede sufrir algunos cambios in vivo, después de la administración, para generar la forma activa biológicamente deseada. En la presente memoria se hará referencia a la primera molécula como activa farmacéuticamente, con el entendimiento de que la forma activa biológicamente deseada de la primera molécula puede no surgir hasta después de que se administre a un sujeto la sal formada a partir de la primera molécula.

La primera molécula es una molécula pequeña, lo que significa que tiene un peso molecular inferior a 10.000 g/mol, y es una forma protonada de una poliamina que tiene la fórmula (1501), donde uno o más de los grupos NH o NH2 se pueden protonar para proporcionar una forma protonada del PPA, con la excepción de que los grupos NH no sean básicos, tal como los grupos NH adyacentes a un grupo carbonilo, es decir, los grupos NH que forman parte de un grupo amida, ya que tales grupos NH no se protonan fácilmente.

donde una sal ejemplar se forma a partir de componentes que tienen las estructuras

Las poliaminas de fórmula 1501 son poliaminas ejemplares que en forma protonada pueden ser un agente farmacéutico de poliamina protonada de la presente divulgación. También se pueden utilizar otras moléculas que tienen una pluralidad de grupos amina y una actividad biológica adecuada para proporcionar un PPA de la presente divulgación.

Ácido carboxílico hidrófobo

Como se menciona en la presente memoria, en una realización la presente divulgación se refiere a sales de poliaminas catiónicas protonadas en combinación con moléculas aniónicas que comprenden un grupo carboxilato unido a un resto hidrófobo. Estas especies aniónicas se denominarán por conveniencia en la presente memoria como ácidos carboxílicos hidrófobos (HCAs).

En una realización, si una molécula particular que contiene carboxilato es un HCA depende de la solubilidad en agua del correspondiente compuesto de ácido carboxílico. En otras palabras, si un compuesto carboxilato de fórmula R-C (=O)O- es un HCA depende de la solubilidad en agua del correspondiente compuesto de ácido carboxílico de fórmula R-C(=O)OH. En varias realizaciones, un HCA de la presente divulgación es la forma carboxilato de un ácido carboxílico correspondiente donde el compuesto que contiene ácido carboxílico tiene una solubilidad en agua inferior a 10 g/L, o inferior a 1 g/L, o inferior a 0,1 g/L, o inferior a 0,01 g/L en agua, según se determina a una temperatura de 25°C y un pH de 7. Pueden encontrarse compendios de la solubilidad en agua de compuestos que contienen ácido carboxílico en, por ejemplo, Yalkowsky SH, Dannenfelser RM; La base de datos AQUASOL de solubilidad acuosa. Quinta ed., Tucson, AZ: Univ. AZ, Facultad de Farmacia (1992); Yalkowsky SH et al; Base de datos de Arizona sobre solubilidad en agua (1989); y The Handbook of Aqueous Solubility Data, segunda edición, editado por Yalkowsky SH, He, Y, y Jain, P, CRC Press (2010).

En una realización, el HCA de fórmula R-C(=O)O- se caracteriza en términos del número de átomos de carbono que forman el grupo R.

Cuando el HCA se caracteriza en términos del número de átomos de carbono que forman el grupo R, la caracterización puede tomar la forma de una serie de átomos de carbono.

Los ácidos grasos de fórmula R-COOH son un precursor conveniente del componente HCA de fórmula R-COO- de las sales de la presente divulgación. Opcionalmente, el HCA se deriva de un ácido graso, donde el ácido graso es un ácido graso de calidad farmacéutica. Los ácidos grasos adecuados están disponibles a partir de muchos proveedores comerciales. Por ejemplo, Sigma-Aldrich (St. Louis, MI, EE.UU.) O Spectrum Chemical (New Brunswick, NJ, EE.UU.) proporcionan ácidos grasos adecuados.

Por ejemplo, en una realización, el ácido graso es ácido decanoico.

El HCA puede ser o no un agente activo farmacéuticamente, aunque en una realización e1HCA no es un agente activo farmacéuticamente.

En una realización, el HCA es puro. En otras palabras, el HCA constituye más del 90% en peso, o más del 95% en peso, o más del 96% en peso, o más del 97% en peso, o más del 98% en peso, o más del 99 % en peso de los compuestos que contienen carboxilato presentes en la molécula de sal.

Si bien el HCA puede ser la forma carboxilato de un ácido graso, el HCA no es necesariamente la forma carboxilato de un ácido graso. Otros compuestos que contienen ácido carboxílico de fórmula R-COOH que pueden dar lugar a un HCA de fórmula R-C(=O)O- incluyen ácido cólico. En realizaciones adicionales, se pueden emplear ácidos carboxílicos orgánicos de funcionalidad polietilenglicol, es decir, el grupo R de R-COOH puede incluir el grupo (CH²-CH²-O)ⁿ donde n es 1-20. En una realización, el HCA puede contener más de un grupo carboxilato, por ejemplo, puede ser un dicarboxilato o tricarboxilato HCA, donde los ejemplos incluyen ácidos oxálico y cítrico. En una realización, las sales de la presente divulgación se forman entre una poliamina protonada y un lípido sulfonato formado a partir de un ácido sulfónico lipídico.

Combinación de poliamina y ácido carboxílico

Como se menciona en la presente memoria, en una realización la presente invención proporciona sales de poliaminas protonadas catiónicas y carboxilatos hidrófobos aniónicos. Las sales se pueden designar opcionalmente mediante el término (poliamina mH⁺) (R-COO-)^m donde m es 1 cuando la sal es una sal monocarboxilato, m es 2 cuando la sal es una sal dicarboxilato, m es 3 cuando la sal es una sal tricarboxilato, m es 4 cuando la sal es una sal tetracarboxilato, etc. El grupo R se selecciona para que el compuesto de fórmula R-COOH sea hidrófobo (lipófilo), es decir, no muy soluble en agua y puede describirse opcionalmente como insoluble en agua.

La poliamina estará en forma protonada donde, en general, los grupos amina más básicos se protonarán primero, donde los grupos de amina terciaria son generalmente más básicos que los grupos de amina secundaria, y los grupos de amina secundaria son generalmente más básicos que los grupos de amina primaria.

La composición de las sales de la presente divulgación dependerá, en gran parte, de los componentes específicos empleados para preparar la sal, y de las cantidades relativas de los componentes que se emplean para preparar la sal. En general, cuando se preparan las sales, el componente de poliamina se puede proporcionar como la forma de la base libre neutra o como una forma de sal cargada que incluye un contraión, y más específicamente un anión. Asimismo, el componente carboxilato se puede proporcionar como la forma de ácido carboxílico libre neutro o como una forma de sal cargada que incluye un contraión, y más específicamente un catión. La forma de sal cargada de la poliamina puede denominarse como una sal de adición de ácido de la poliamina, mientras que la forma de sal cargada del carboxilato hidrófobo se puede denominar como la sal de adición de base del ácido carboxílico. Estas sales pueden prepararse mediante métodos como se describe en la presente memoria. Una sal aceptable terapéuticamente de la presente divulgación comprende un agente farmacéutico de poliamina en forma catiónica (protonada) y una especie de ácido carboxílico hidrófobo aceptable farmacéuticamente en forma aniónica (desprotonada), tal como se describe en la presente memoria.

Por ejemplo, en una realización la presente divulgación proporciona una sal formada entre una especie catiónica orgánica y una especie aniónica orgánica. La especie catiónica es un agente farmacéutico de poliamina protonada, que se refiere a un agente farmacéutico que tiene al menos un grupo amina en forma protonada. La especie aniónica es un ácido carboxílico desprotonado, que se refiere a un ácido carboxílico que ha transferido su protón ácido al agente farmacéutico de poliamina, proporcionando así un agente farmacéutico protonado y un ácido carboxílico desprotonado. La sal puede estar opcionalmente en una forma de dosificación sólida, adecuada para la administración a un paciente en un método terapéutico. Opcionalmente, el agente farmacéutico de poliamina catiónica protonada es una forma di-protonada de una poliamina de fórmula AMXT 1501 y el carboxilato aniónico hidrófobo es ácido cáprico desprotonado, y la sal tiene dos moles de ácido cáprico desprotonado por cada mol de AMXT 1501 protonado que tiene la fórmula

la sal no está mezclada con más del 5% en peso de cualquier otro químico sólido o líquido; la sal está en forma de una composición farmacéutica; la sal está en forma de una composición farmacéutica para la administración de dosificación sólida.

En un proceso conveniente para preparar sales de la presente divulgación, la combinación de poliamina y ácido graso u otro ácido carboxílico hidrófobo no incluye aniones o cationes adicionales. Tal combinación se puede preparar combinando la forma de base libre de la poliamina con la forma de ácido libre del ácido graso o HCA. La combinación estará en forma de sal, donde la sal se forma entre la poliamina protonada y el ácido graso desprotonado (o HCA desprotonado). Por tanto, un proceso conveniente para preparar las sales de la presente divulgación es mediante la combinación de un producto farmacéutico de poliamina no cargada con un ácido carboxílico hidrófobo no cargado en un disolvente en condiciones de transferencia de protones para formar una sal de un producto farmacéutico de poliamina cargada positivamente, es decir, un producto farmacéutico de poliamina catiónica y un carboxilato hidrófobo cargado negativamente, es decir, un carboxilato hidrófobo aniónico, y mediante la separación de la sal del disolvente.

Por ejemplo, un proceso conveniente para preparar sales de la presente divulgación implica combinar la forma de base libre de la poliamina con la forma de ácido libre del ácido carboxílico hidrófobo en un disolvente que permite la transferencia de protones que implica el ácido carboxílico y la poliamina. Por tanto, la presente divulgación proporciona un método que comprende: combinar una poliamina, un ácido carboxílico hidrófobo y un disolvente para proporcionar una disolución; y posteriormente aislar un residuo sólido de la disolución, en donde el residuo comprende una sal formada entre la poliamina y el ácido carboxílico hidrófobo. Opcionalmente, el método puede caracterizarse además por uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro) de lo siguiente.

La poliamina es una poliamina activa farmacéuticamente tal como se identifica en la presente memoria. Por ejemplo, la poliamina 1501 se puede emplear en el método. El ácido carboxílico hidrófobo es cualquiera de los ácidos carboxílicos hidrófobos identificados en la presente memoria. Por ejemplo, el ácido carboxílico hidrófobo puede tener una solubilidad en agua inferior a 10 g/L de agua, puede tener la fórmula R-COOH donde R tiene 6-20 átomos de carbono, o 8-16 átomos de carbono, o 10-14 átomos de carbono, o puede ser un ácido graso seleccionado entre el ácido octanoico, ácido decanoico, ácido dodecanoico, ácido tetradecanoico y ácido hexadecanoico. El ácido carboxílico hidrófobo puede ser una mezcla de ácidos carboxílicos hidrófobos. Para preparar una sal de PPA-HCA de alta pureza, cada poliamina y el ácido carboxílico hidrófobo pueden ser de alta pureza, por ejemplo, uno o ambos componentes pueden ser, por ejemplo, al menos 90%, o al menos 95%, o al menos 96%, o al menos 97%, o al menos 98%, o al menos 99%, o al menos 99,5% puro en peso. Uno o ambos de la poliamina y el ácido carboxílico hidrófobo pueden ser de calidad farmacéutica, preparadas mediante GMP. En una realización, la poliamina es AMXT 1501 y el ácido carboxílico hidrófobo es ácido cáprico.

La poliamina y el ácido carboxílico hidrófobo se pueden combinar en cantidades relativas para proporcionar la estequiometría de sal deseada. Si se desea una sal de PPA:HCA de estequiometría molar 1:2, entonces se combinan exactamente o aproximadamente 2,0 moles, por ejemplo, 1,8-2,2 moles de ácido carboxílico hidrófobo con cada 1,0 moles de poliamina. En una realización, 1 mol de la poliamina AMXT 1501 se combina con 2 moles del ácido cáprico ácido carboxílico hidrófobo. Para ser claros, cuando se hace referencia a, por ejemplo, 1,8-2,2 moles de ácido carboxílico hidrófobo que se combinan con cada 1,0 moles de poliamina, eso excluye la combinación de menos de aproximadamente 1,8 moles o más de aproximadamente 2,2 moles de ácido carboxílico hidrófobo por cada 1,0 moles de poliamina.

El disolvente debería facilitar la transferencia de protones entre el ácido carboxílico hidrófobo y la poliamina. Por ejemplo, el disolvente puede ser un disolvente prótico polar puro o puede ser una mezcla de disolventes que comprende un disolvente prótico polar. Un disolvente prótico polar adecuado es agua, por ejemplo, agua seleccionada a partir de agua desionizada y agua destilada. Otro disolvente prótico polar adecuado es un alcohol de cadena corta, por ejemplo, metanol o etanol. En una realización, 1 mol de la poliamina AMXT 1501 se combina con 2 moles del ácido carboxílico hidrófobo ácido cáprico en un disolvente seleccionado a partir de agua y metanol.

Los componentes pueden combinarse en cualquier orden para formar una disolución. Por ejemplo, la poliamina y el ácido carboxílico hidrófobo pueden añadirse al disolvente para proporcionar la disolución. En una realización, la poliamina se disuelve en el disolvente, y después se añade gradualmente el ácido carboxílico hidrófobo a la disolución de disolvente y poliamina. El proceso se puede realizar en un modo discontinuo o continuo. En un modo discontinuo, un recipiente recibe la carga completa de disolvente, poliamina y ácido carboxílico hidrófobo, la sal se forma en el recipiente. La poliamina, el ácido carboxílico hidrófobo y el disolvente se pueden combinar para proporcionar una disolución clara, en otras palabras, no hay material insoluble presente en la disolución. Normalmente, la poliamina, el ácido carboxílico hidrófobo y el disolvente se combinan a una temperatura dentro del intervalo de 10-30°C, aunque se pueden emplear otras temperaturas. En un modo continuo, se podrían utilizar técnicas de flujo continuo para la producción y aislamiento de las formas de sal de PPA:HCA descritas. El uso de un aparato de flujo disponible, en donde las disoluciones de la base libre de poliamina, en un disolvente adecuado, tal como metanol, se mezclan con un co-disolvente en el que la sal no es soluble, tal como acetonitrilo, en un aparato de celda de flujo, permite la producción continua de la forma soluble o insoluble de la sal PPA:HCA.

Una vez formada la sal, el disolvente se separa de la sal para proporcionar un residuo que es, o incluye, la sal. Cuando el disolvente no es demasiado volátil, puede eliminarse después de la disolución mediante un proceso, tal como la evaporación o la destilación, para aislar el residuo de la disolución. Como otra opción, se puede añadir un co-disolvente (por ejemplo, acetonitrilo) a la disolución, tras lo cual da como resultado el precipitado de la disolución, y la disolución resultante se denomina como el sobrenadante. El co-disolvente también puede denominarse como no disolvente, ya que la sal no es soluble en el no disolvente. El precipitado, también denominado residuo, puede separarse del residuo, por ejemplo, por decantación, para aislar el residuo de la disolución. Como otra opción más, la disolución se puede enfriar a una temperatura tal que la sal ya no sea soluble en el disolvente y forme, por tanto, el residuo en forma de un precipitado. Como en el caso en el que se emplea un co-disolvente para formar el precipitado, el sobrenadante se puede separar del residuo para aislar el residuo de la disolución.

En una realización, el residuo comprende al menos el 50%, o al menos el 95%, o al menos el 99% en peso de la sal. En otras palabras, al menos el 50% del peso del residuo es la sal PPA:HCA, o al menos el 95% del peso del residuo es la sal PPA:HCA, o al menos el 99% del peso del residuo es la sal PPA:HCA. Por ejemplo, para obtener este rendimiento, la mayor parte o todo el disolvente se elimina del residuo de modo que está esencialmente libre de disolvente. Además, en una realización, el residuo sólo contiene PPA:HCA y no contiene otros materiales, o contiene sólo una pequeña cantidad (por ejemplo, menos de 1, o menos de 2, o menos del 3% en peso) de otros materiales, tales como residuos de poliamina o de ácido carboxílico hidrófobo residual. Sin embargo, se pueden combinar otros materiales con el disolvente, por ejemplo, un conservante o un agente antimicrobiano, de modo que el residuo no esté completamente compuesto de PPA:HCA. En una realización, el residuo contiene pocas o ninguna (por ejemplo, menos de 1, o menos de 2, o menos del 3% en peso) especie inorgánica, tales como cloruro o fosfato. En una realización el residuo consiste en, o consiste esencialmente en, poliamina, ácido carboxílico hidrófobo, y la sal formada entre ellos.

Una vez que se forma el residuo, éste o una parte del mismo puede combinarse con componentes adicionales como se describe en la presente memoria para formar una composición farmacéutica adecuada para la administración a un sujeto, por ejemplo, por ingestión. Esos componentes adicionales pueden incluir diluyentes, por ejemplo, lactosa y celulosa microcristalina, disgregantes, por ejemplo, almidón glicolato de sodio y croscarmelosa sódica, aglutinantes, por ejemplo, PVP y HPMC, lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, y deslizantes, por ejemplo, SiO2 coloidal. Por ejemplo, el método puede comprender además formar una forma de dosificación sólida seleccionada de una píldora, un comprimido, una cápsula, y una pastilla, a partir del residuo o una porción del mismo. La sal de PPA-HCA puede estar en forma estéril, para emplearse en la fabricación de un agente farmacéutico.

Como se mencionó anteriormente, se puede utilizar una forma cargada de la poliamina y/o una forma cargada del ácido carboxílico hidrófobo como reactivo para preparar un PPA:HCA de la presente divulgación.

Una sal de adición de ácido de una poliamina se puede formar poniendo la poliamina en contacto con un ácido orgánico o inorgánico adecuado en condiciones conocidas por el experto. Una sal de adición de ácido se puede formar, por ejemplo, empleando un ácido inorgánico. Los ácidos inorgánicos adecuados se pueden seleccionar del grupo que consiste en ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico. También se puede formar una sal de adición de ácido empleando un ácido orgánico. Los ácidos orgánicos adecuados se pueden seleccionar del grupo que consiste en ácido trifluoroacético, ácido cítrico, ácido maleico, ácido oxálico, ácido acético, ácido fórmico, ácido benzoico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico y ácido paratoluenosulfónico.

Una sal de adición de base de un ácido carboxílico se puede formar poniendo el ácido carboxílico en contacto con una base orgánica o inorgánica adecuada en condiciones conocidas por el experto. Las bases inorgánicas adecuadas que forman sales de adición de bases adecuadas incluyen la forma de hidróxido de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio o bario. Las bases orgánicas adecuadas que forman sales de adición de bases adecuadas incluyen aminas orgánicas alifáticas, alicíclicas o aromáticas, tales como metilamina, trimetilamina y picolina, alquilamoníaco y amoníaco.

En un proceso conveniente para preparar sales de la presente divulgación, la poliamina se proporciona como su forma de base libre, mientras que el ácido carboxílico se proporciona como su forma de ácido protonado, y estos componentes se mezclan entre sí. En este caso, y dependiendo de la estequiometría de los componentes, la combinación de poliamina y ácido carboxílico puede dar como resultado cuatro especies: poliamina, ácido carboxílico, catión y anión. El catión se puede seleccionar entre, por ejemplo, protón, amonio, sodio y calcio. El anión se puede seleccionar a partir de, por ejemplo, el hidróxido, el carboxilato, y el haluro, tal como fluoruro, cloruro y yoduro. Al mezclar, el catión y el anión formarán una sal, y la poliamina y el ácido carboxílico formarán una sal de la presente divulgación, suponiendo que la mezcla se realice en condiciones que permitan la formación de la sal PPA:HCA, que normalmente requiere la presencia de agua.

La combinación de poliamina (en forma cargada o no cargada) y ácido carboxílico (en forma cargada o no cargada) se puede caracterizar en términos de la relación molar de los dos componentes. En la siguiente discusión, el término poliamina se refiere tanto a la poliamina cargada como a la no cargada, y el término ácido carboxílico se refiere tanto al ácido carboxílico cargado como al no cargado. Las cantidades relativas de poliamina y ácido carboxílico presentes en la composición pueden variar. En parte, las cantidades relativas pueden reflejar el número de grupos amina presentes en la poliamina. Como se mencionó anteriormente, en una realización la poliamina tiene dos grupos amina, mientras que en otra realización la poliamina tiene tres grupos amina, y en otra realización más la poliamina tiene cuatro grupos amina, mientras que en otra realización la poliamina tiene cinco grupos amina, y en una realización adicional, la poliamina tiene seis o más grupos amina, en donde los grupos amina se seleccionan a partir de aminas primarias, secundarias y terciarias, seleccionadas independientemente en cada caso. Los grupos amina son los denominados grupos amina protonables, que se refieren a un grupo amina que es capaz de unirse a un protón para formar una especie de amonio cargada. Los grupos NH adyacentes a un grupo carbonilo, es decir, grupos amida, no son grupos amina protonables ya que la forma protonada de un grupo amida es inestable. El químico orgánico experto reconoce y/o puede determinar fácilmente empleando técnicas conocidas, qué grupos amina pueden protonarse en disolución diluida con un ácido protónico. En general, los grupos amina primaria, secundaria y terciaria son normalmente protonables.

En una realización, la presente divulgación proporciona una sal que tiene una relación molar de 1:2 de PPA para HCA, denominada opcionalmente como PPA:(HCA)² , donde esta sal puede estar en combinación con una sal que tiene una relación molar 1:1 de PPA para HCA. En una realización, cada mol de poliamina se asocia con 2, o con aproximadamente 2 moles de HCA para formar una sal de la presente divulgación. Tal sal tiene una relación molar de 1:2, o aproximadamente 1:2, de PPA para HCA.

Las cantidades relativas de poliamina y ácido carboxílico se pueden describir en términos de equivalentes, donde 1 mol de poliamina con 5 grupos amina tiene 5 equivalentes de amina y 1 mol de ácido carboxílico con 1 grupo ácido carboxílico tiene 1 equivalente de ácido carboxílico. Por ejemplo, cuando la poliamina es AMXT 1501, hay cuatro grupos amina presentes en la molécula. En una realización de la invención, dos moles de AMXT 1501 se combinan con 1 mol de ácido carboxílico, de modo que la poliamina y el ácido carboxílico se combinan en una proporción equivalente de 8:1 (8 equivalentes de grupos amina y 1 equivalente de grupos carboxilo). En otra realización de la invención, se combina 1 mol de AMXT 1501 con 4 moles de ácido carboxílico, de manera que la poliamina y el ácido carboxílico se combinan en una proporción equivalente de 1:1. Como ejemplo adicional, 1 mol de AMXT 1501 se combina con 8 moles de ácido carboxílico, de modo que la poliamina y el ácido carboxílico se combinan en una proporción equivalente de 1: 2 (habiendo 4 grupos amina por cada 8 grupos carboxilo, proporcionando una relación equivalente 1:2). Por tanto, a modo de ilustración, una sal AMXT 1501 :(ácido cáprico)² , es decir, la sal dicaprato de AMXT 1501, puede estar mezclada con, por ejemplo, algo de sal AMXT 1501:(ácido cáprico)¹, es decir, la sal monocaprato de AMXT 1501 y/o algo de sal AMXT 1501 (ácido cáprico)³ , es decir, la sal tricaprato de AMXT 1501. Asimismo, una sal de AMXT 1501:(ácido cáprico)¹ la sal puede estar mezclada con, por ejemplo, algo de AMXT 1501 y/o algo de sal AMXT 1501 (ácido cáprico)². En esta ilustración, AMXT 1501 se emplea como una poliamina ejemplar, sin embargo, otras poliaminas como se describen en la presente memoria pueden sustituir a AMXT 1501 en esta ilustración.

En una realización, la presente divulgación proporciona un método para preparar una sal de la presente divulgación, donde el método comprende combinar un agente farmacéutico de poliamina, un ácido carboxílico hidrófobo y un disolvente para proporcionar una disolución; y aislar un residuo sólido de la disolución, en donde el residuo sólido comprende una sal de la presente divulgación. Opcionalmente, el método puede describirse mediante una o más de las siguientes características: el disolvente comprende agua, metanol o una combinación de los mismos; se combinan 1,8-2,2 moles de ácido carboxílico hidrófobo con cada 1,0 mol de agente farmacéutico de poliamina; el residuo sólido se forma por precipitación de la disolución; el método comprende además formular el residuo sólido o una porción del mismo en una forma farmacéutica de dosificación sólida.

Las siguientes son realizaciones ejemplares adicionales de sales de PPA: HCA de la presente divulgación. En una realización la presente divulgación proporciona una composición de dicaprato de AMXT 1501 que es una forma de sal de los componentes que tienen las fórmulas y estructuras moleculares que se muestran a continuación:

donde los componentes forman una sal dicaprato de la poliamina y ácido cáprico. El dicaprato AMXT 1501 también podría denominarse con el término (AMXT 15012H⁺) (R-COO-)² donde R es C⁹ , por ejemplo, n-nonilo. En general, el R-COOH no es muy soluble en agua y puede describirse como insoluble en agua, donde los grupos R ejemplares tienen aproximadamente de 9 carbonos (por ejemplo, ácido cáprico) hasta aproximadamente 23 carbonos (por ejemplo, ácido cólico). La sal dicaprato puede incluir dos cualesquiera de los grupos amina primaria y secundaria presentes como se muestra en la poliamina en forma protonada. Por ejemplo, se pueden protonar ambos grupos amina primaria, o se pueden protonar ambos grupos amina secundaria, o se pueden protonar un grupo amina primaria y otro grupo de amina secundaria. En general, los grupos amina más básicos se protonarán primero, donde los grupos amina terciaria son generalmente más básicos que los grupos amina secundaria, y los grupos amina secundaria son generalmente más básicos que los grupos amina primaria. Una de esas estructuras se muestra a continuación:

Los anteriores son ejemplos de sales de PPA:HCA de la presente divulgación, que se pueden preparar mediante métodos como se describe en la presente memoria. En general, las sales de PPA:HCA se pueden preparar convenientemente mediante la neutralización de un ácido (el componente HCA) por la base (el componente PPA) en un disolvente adecuado, tal como el agua. En una realización, la presente invención proporciona una composición que comprende PPA, HCA y un disolvente adecuado para permitir la formación de la sal entre el PPA y e1HCA, por ejemplo, agua, metanol y mezclas de los mismos, así como una composición que consiste en, y una composición que consiste esencialmente en PPA, HCA y el disolvente adecuado. Tal composición proporcionará una sal de la presente invención en disolución, a partir de la cual se puede aislar una sal de la presente divulgación.

Formulaciones farmacéuticas

Las sales de la presente divulgación pueden administrarse por vía oral, parenteral (por ejemplo, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, ICV, inyección o infusión intracisternal, inyección subcutánea, o implante), por inhalación en aerosol, por vía de administracion nasal, vaginal, rectal, sublingual, o tópica. Las sales se pueden formular, en solitario o juntas, en formulaciones de unidades de dosificación adecuadas, también conocidas como formas de dosificación, que contienen componentes inertes (es decir, no activos biológicamente) no tóxicos convencionales, aceptables farmacéuticamente, tales como portadores, adyuvantes y vehículos apropiados para cada vía de administración. Además del tratamiento de animales de sangre caliente, tales como ratones, ratas, caballos, vacas, ovejas, perros, gatos, monos, etc, las sales de la divulgación son eficaces para su uso en seres humanos.

Las composiciones farmacéuticas para la administración de las sales de esta divulgación pueden presentarse convenientemente en forma de unidad de dosificación y pueden prepararse mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de la farmacia. El campo científico de los productos farmacéuticos se centra en la administración de agentes farmacéuticos en una forma que maximice el beneficio para el paciente en tratamiento. Sin pretender imponer ninguna teoría, la formulación de fármacos de poliamina como sus sales de ácido carboxílico puede aumentar la lipofilia de la composición de sal resultante, facilitando la absorción por los componentes celulares del tracto gastrointestinal de los animales tratados. De hecho, el aparato digestivo de los mamíferos utiliza la secreción de ácidos biliares para facilitar la absorción de los componentes más lipofílicos de la dieta.

Todos los métodos incluyen la etapa de poner en contacto el ingrediente activo, es decir, la sal de la presente divulgación, en asociación o en combinación con los componentes inertes que constituyen uno o más ingredientes accesorios. En general, las composiciones farmacéuticas se preparan poniendo en contacto la sal de la presente divulgación, de manera uniforme e íntima, con un vehículo líquido o un vehículo sólido finamente dividido o ambos, y después, si es necesario, dando forma al producto en la formulación deseada. En la composición farmacéutica, la sal activa de la presente divulgación se incluye en una cantidad suficiente para producir el efecto deseado sobre el proceso o el estado de la enfermedad. Como emplea en la presente memoria, el término "composición" pretende abarcar un producto que comprende los ingredientes especificados opcionalmente en cantidades especificadas, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de una combinación de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas.

En una realización, la composición farmacéutica es una forma de dosificación sólida destinada a uso oral. Por muchas razones, una composición oral, y particularmente una forma de dosificación oral sólida, es ventajosa y conveniente tanto para el paciente como para el médico responsable del desarrollo del régimen terapéutico. Una composición oral evita las complicaciones, el coste y los inconvenientes de la administración mediante inyección o infusión intravenosa que debe realizarse por un profesional médico en un hospital o en un entorno ambulatorio que lo expone a infecciones y enfermedades hospitalarias. En particular, los pacientes que se someten a tratamiento para el cáncer pueden ser individuos inmunodeprimidos y particularmente susceptibles a infecciones y enfermedades hospitalarias. Una formulación oral, tal como una pastilla o comprimido, se puede tomar fuera del entorno hospitalario, lo que aumenta el potencial de facilidad de uso y cumplimiento por parte del sujeto. Esto permite que un sujeto evite los riesgos de infección concomitantes con la administración intravenosa y las visitas al hospital. Además, la administración oral puede evitar el pico de alta concentración y el rápido aclaramiento asociados con una dosis en bolo intravenoso.

Ejemplos de formas de dosificación sólidas orales incluyen píldoras, comprimidos, cápsulas, gránulos y microesferas, cualquiera de las cuales puede incluir un recubrimiento entérico para proteger la composición farmacéutica de la degradación ácida por el ambiente del estómago, o para maximizar el suministro a las secciones intestinales donde se mejora la absorción. La forma de dosificación sólida puede ser masticable o tragable, o tener cualquier forma de ingestión adecuada. En una realización, la forma de dosificación sólida contiene poca o nada de agua, por ejemplo, menos de 0,1% en peso de agua, o menos de 0,2% en peso de agua, o menos de 0,3% en peso de agua, o menos de 0,4% en peso de agua, o menos de 0,5% en peso de agua, o menos de 1% en peso de agua, o menos de 1,5% en peso de agua, o menos de 2% en peso de agua.

Las formas de dosificación sólidas se pueden preparar según cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas. Dichas composiciones pueden contener uno o más componentes inertes, donde se pueden seleccionar componentes inertes ejemplares del grupo de agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservantes para proporcionar preparaciones refinadas y agradables farmacéuticamente. Las formas de dosificación sólidas de la presente divulgación contienen la sal de la presente divulgación en una mezcla opcional con excipientes inertes y no tóxicos aceptables farmacéuticamente que son adecuados para la fabricación de la forma de dosificación sólida.

Los excipientes para formas de dosificación sólidas son bien conocidos en la técnica, y se seleccionan para proporcionar diversos beneficios, que incluyen la fácil administración al sujeto, el mejor cumplimiento de la dosis, la consistencia y el control de la biodisponibilidad del fármaco, la ayuda con una mejor biodisponibilidad, la estabilidad mejorada del API, incluida la protección contra la degradación, y contribuir a la facilidad de producción de un producto físico robusto y reproducible. Los excipientes se subdividen comúnmente en varias clasificaciones funcionales, dependiendo del papel que se pretende que desempeñen en la formulación. Para formas de dosificación sólidas, las funciones de los excipientes comunes y los materiales ejemplares que cumplen esa función son los diluyentes, por ejemplo, lactosa y celulosa microcristalina, disgregantes, por ejemplo, almidón glicolato de sodio y croscarmelosa sódica, aglutinantes, por ejemplo, PVP y HPMC, lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, y deslizantes, por ejemplo, SiO2 coloidal. Los comprimidos y cápsulas a menudo contienen un diluyente, rellenador o agente de carga, por ejemplo, lactosa. Los excipientes empleados para formular fármacos de poliaminas deben evitar los que contienen componentes de azúcar reductor para evitar la formación de productos de adición de bases de Schiff como degradantes.

Los excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, y lactosa; agentes de granulación y disgregación, tales como almidón de maíz, y ácido algínico; agentes aglutinantes, tales como almidón, gelatina o goma arábiga; y agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio, ácido esteárico y talco. Los comprimidos de la presente divulgación, que contienen una sal de PPA:HCA como se describe en la presente memoria, pueden estar recubiertos o no recubiertos, por ejemplo, con un recubrimiento entérico, mediante técnicas conocidas, para retrasar la disgregación y la absorción en el tracto gastrointestinal y, por lo tanto, proporcionar una acción sostenida durante un período más largo. Las composiciones para uso oral también se pueden formar como cápsulas de gelatina dura en donde la sal activa biológicamente de la presente divulgación se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato cálcico, caolín, o como cápsulas de gelatina blanda en donde la sal se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida, o aceite de oliva.

En una realización, las suspensiones acuosas para aplicación farmacéutica contienen la sal activa biológicamente de la presente divulgación mezclada con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Las suspensiones oleosas se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite adecuado. También se pueden emplear emulsiones de aceite en agua. Los polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua proporcionan la sal activa biológicamente de la presente divulgación mezclada con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes.

Las composiciones farmacéuticas de las sales de la presente divulgación pueden estar en forma de suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Las sales de la presente divulgación se pueden administrar mediante inyección subcutánea. Las sales de la presente divulgación también se pueden administrar en forma de supositorios para administración rectal. Para uso tópico, pueden emplearse cremas, ungüentos, geles, disoluciones o suspensiones, etc., que contienen las sales de la presente divulgación. Las sales de la presente divulgación también se pueden formular para su administración por inhalación. Las sales de la presente divulgación también se pueden administrar mediante un parche transdérmico mediante métodos conocidos en la técnica.

Las composiciones farmacéuticas y los métodos de la presente divulgación pueden comprender además compuestos activos terapéuticamente adicionales que se aplican de forma beneficiosa en el tratamiento de una afección patológica experimentada o potencialmente experimentada por el sujeto que recibe la sal activa farmacéuticamente de la presente divulgación.

En el tratamiento, prevención, control, mejora, o reducción del riesgo de cáncer, las sales de la presente divulgación se administrarán a un nivel de dosificación apropiado que generalmente será de aproximadamente 0,01 a 500 mg por kg de peso corporal del paciente por día, que puede administrarse en dosis únicas o múltiples. Los niveles de dosificación en seres humanos, especialmente los empleados para la quimioterapia contra el cáncer, se expresan alternativamente en unidades de mg/m2/día. La dosis puede ser mayor o menor a discreción del profesional de la salud que lo atiende, según la experiencia y el conocimiento de esa persona al tratar con la afección médica específica que se está tratando y según la afección del paciente. Opcionalmente, el nivel de dosificación será de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 250 mg/kg por día; o de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 100 mg/kg por día. Un nivel de dosificación adecuado puede ser de aproximadamente 0,01 a 250 mg/kg por día, de aproximadamente 0,05 a 100 mg/kg por día, o de aproximadamente 0,1 a 50 mg/kg por día. Dentro de este intervalo, la dosis puede ser, por ejemplo, de aproximadamente 0,05 a 0,5, de 0,5 a 5, o de 1 a 50, o de 5 a 50 mg/kg por día.

Para la administración oral, las composiciones se proporcionan preferiblemente en forma sólida, tal como en forma de píldoras, cápsulas, comprimidos, y similares, que contienen de 1,0 a 1000 miligramos de la sal de la presente divulgación, en particular aproximadamente 1, 5,0, 10,0, 15,0, 20,0, 25,0, 50,0, 75,0, 100,0, 150,0, 200,0, 250,0, 300,0, 400,0, 500,0, 600,0, 750,0, 800,0, 900, y 1000,0 miligramos de la sal de la presente divulgación para el ajuste sintomático de la dosis al paciente a tratar. Las sales se pueden administrar en un régimen de 1 a 4 veces al día, preferiblemente una o dos veces al día, a discreción del profesional de la salud responsable.

En una realización, la forma de dosificación sólida contiene 10 mg, o 20 mg, o 30 mg, o 40 mg, o 50 mg, o 60 mg, o 70 mg, o 80 mg, o 90 mg, o 100 mg, o 110 mg, o 120 mg, o 130 mg, o 140 mg, o 150 mg de la forma protonada de la poliamina (PPA), donde ese PPA, sin embargo, estará presente en la dosis sólida como una sal con HCA. La cantidad de PPA presente en la forma de dosificación sólida también se puede caracterizar en términos de un intervalo de cantidades posibles, donde los límites inferior y superior de ese intervalo se seleccionan a partir de las cantidades recién descritas, es decir, de 10 a 150 mg, o números intermedios, por ejemplo, de 50 a 100 mg. Un comprimido o píldora tendrá normalmente un peso total de al menos 50 mg.

En una realización, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático sistémico eficaz terapéuticamente de un agente farmacéutico de poliamina durante un período de al menos 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 30, 36, ó 48 horas. En realizaciones adicionales, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático sistémico terapéuticamente eficaz de un agente farmacéutico de poliamina durante al menos un período de 8 horas. En realizaciones adicionales, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático sistémico eficaz terapéuticamente de un agente farmacéutico de poliamina durante un período de al menos 14 horas. En realizaciones adicionales, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático sistémico eficaz terapéuticamente de un agente farmacéutico de poliamina durante un período de al menos 18 horas. En realizaciones adicionales, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático sistémico eficaz terapéuticamente de un agente farmacéutico de poliamina durante un período de al menos 24 horas.

En una realización, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos 25, 50, 55, 60, 65, 75, 80, 85, 90, ó 95 por ciento de la concentración plasmática máxima durante al menos 4 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 75% de la concentración plasmática máxima durante al menos 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, ó 24 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 75% de la concentración plasmática máxima durante al menos 4 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 75% de la concentración plasmática máxima durante al menos 6 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 75% de la concentración plasmática máxima durante al menos 10 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 50% de la concentración plasmática máxima durante al menos 6 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 50% de la concentración plasmática máxima durante al menos 12 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 50% de la concentración plasmática máxima durante al menos 18 horas. En determinadas realizaciones, la forma de dosificación sólida proporciona un nivel plasmático de un agente farmacéutico de poliamina de al menos el 25% de la concentración plasmática máxima durante al menos 18 horas. En realizaciones adicionales, la concentración plasmática máxima es una concentración eficaz terapéuticamente. En otras realizaciones más, el porcentaje de concentración plasmática máxima es eficaz terapéuticamente durante el período de tiempo proporcionado.

Al tratar, prevenir, controlar, mejorar, o reducir el riesgo de enfermedades proliferativas celulares, tales como el cáncer, para las que se indican las sales de la presente divulgación, se obtienen resultados generalmente satisfactorios cuando las sales de la presente divulgación se administran en una dosis diaria de aproximadamente 0,1 miligramos a aproximadamente 100 miligramos por kilogramo de peso corporal del animal, administrados como una dosis diaria única o en dosis divididas de dos a seis veces al día, o en forma de liberación sostenida. Para la mayoría de los mamíferos grandes, la dosis diaria total es de aproximadamente 1,0 miligramos a aproximadamente 1000 miligramos, o de aproximadamente 1 miligramo a aproximadamente 50 miligramos. Este régimen de dosificación se puede ajustar para proporcionar la respuesta terapéutica óptima.

Sin embargo, se entenderá que el nivel de dosis específico y la frecuencia de dosificación para cualquier paciente en particular pueden variar y dependerán de una variedad de factores que incluyen la actividad de la sal específica empleada, la estabilidad metabólica y la duración de la acción de esa sal, la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo, la dieta, el modo y el momento de la administración, la velocidad de excreción, la combinación farmacológica, la gravedad de la afección particular, y el sujeto que se somete a la terapia. Esta invención facilita las vías de administración oral y de otro tipo utilizadas clínicamente, y mejora el cumplimiento del paciente.

Como se mencionó anteriormente, la composición farmacéutica se puede formular como un comprimido, cápsula, o similar. Por ejemplo, la composición farmacéutica puede comprender 0,1-50% de un PPA-HCA; 0,1-99,9% de un rellenador; 0-10% de un disgregante; 0-5% de un lubricante; y, 0-5% de un deslizante. Como otro ejemplo, la composición farmacéutica comprende 0,1-50% de PPA-HCA; 0,1-99,9% de un rellenador; 0-10% de un disgregante; 0-5% de un lubricante; y, 0-5% de un deslizante. Opcionalmente, la composición farmacéutica comprende 10-300 mg de un agente farmacéutico de poliamina, tal como dicaprato de AMXT 1501, que constituye el 2-50% del contenido del comprimido o del contenido del rellenador de la cápsula, 0-10% de un disgregante, 0-5% de un lubricante, 0-5% de un deslizante; y 30-98% de un rellenador. En otra realización, la composición farmacéutica comprende una cantidad deseada de PPA:HCA, 0,1-10% de un aglutinante, 0-5% de un tensioactivo, 0-10% de un disgregante intergranular, y 0-10% de un disgregante extragranular. En la técnica se conocen ejemplos de aglutinantes, cargas, tensioactivos, disgregantes, lubricantes, disgregantes intergranulares, disgregantes extragranulares y deslizantes, y los ejemplos se describen en la presente memoria e incluyen, un aglutinante seleccionado de copolividona, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, y povidona, una carga seleccionada de un azúcar, un almidón, una celulosa, y un poloxámero; un tensioactivo seleccionado de monooleato de polioxietilen(20)sorbitano, un poloxámero, y lauril sulfato de sodio, un disgregante intergranular seleccionado de croscarmelosa de sodio, gliconato de almidón de sodio, y crospovidona. Por ejemplo, un disgregante seleccionado entre povidona y crospovidona; un lubricante que es estearato de magnesio; y un deslizante que es dióxido de silicio.

Por ejemplo, en una realización la presente divulgación proporciona una composición farmacéutica oral, preferiblemente una forma de dosificación sólida, que comprende la sal de dicaprato de AMXT 1501 junto con al menos un excipiente oral aceptable farmacéuticamente, que produce un nivel plasmático sistémico de AMXT 1501 eficaz terapéuticamente durante al menos un período de tiempo de 12 horas cuando se administra por vía oral a un sujeto. Opcionalmente, la composición se puede caracterizar además por uno o más de lo siguiente: la composición produce un nivel plasmático sistémico de AMXT 1501 eficaz terapéuticamente durante al menos un período de 24 horas cuando se administra por vía oral a un sujeto; el nivel plasmático de AMXT 1501 es al menos el 75% de la concentración plasmática máxima durante 4 horas o más; la composición tiene una biodisponibilidad oral de al menos el 20%, o al menos el 30%, o al menos el 40%; la composición produce un nivel plasmático de AMXT 1501 eficaz terapéuticamente durante al menos un período de 24 horas en el sujeto con una dosis diaria; la composición tiene una vida media de al menos 12 horas o al menos 18 horas; la composición no tiene efectos secundarios sustancialmente limitantes de la dosis, por ejemplo, efectos secundarios gastrointestinales, tales como náuseas, vómitos, diarrea, dolor abdominal, mucositis oral, ulceración oral, faringitis, estomatitis, y ulceración gastrointestinal; la composición comprende de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 350 mg de AMXT 1501 en forma de sal; la composición se formula como un comprimido o cápsula. En esta realización ejemplar, se utiliza AMXT 1501 como agente farmacéutico de poliamina ejemplar y se emplea ácido cáprico como ácido carboxílico hidrófobo ejemplar.

Sales de PPA-HCA en terapia

De los innumerables modos de administración de agentes farmacéuticos, la vía oral es, con mucho, la óptima teniendo en cuenta la conveniencia y el cumplimiento del paciente, y se favorece para las dianas bioquímicas que requieren un control sostenido y duradero. La capacidad natural de los pacientes, ya sean seres humanos o animales, para eliminar los fármacos del torrente sanguíneo se equilibra mediante la absorción continua por vía oral. Se pueden administrar convenientemente múltiples dosis en el transcurso de un día. Los pacientes pueden tomar estos fármacos en sus hogares o lugares de trabajo. Debido a estas razones específicas, la optimización de la administración de fármacos formulados por vía oral es un objetivo continuo del proceso de desarrollo farmacéutico.

La administración de PPAs en sus formas de sal de clorhidrato es un método generalmente utilizado para sus ensayos iniciales en animales y en seres humanos. Se proporcionan ejemplos de éstos en la memoria anterior. Se han aprobado varios PPAs para uso clínico, a pesar de los desafíos asociados con su administración. La presente divulgación proporciona la identificación, preparación y uso de agentes farmacéuticos de poliamina para sus fines terapéuticos previstos o deseados, pero en una composición oral eficaz y de fácil administración para lograr su propósito medicinal pretendido o deseado.

En una realización, la presente divulgación proporciona un método para tratar el cáncer que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz terapéuticamente de una sal de la presente divulgación. El componente PPA de la sal de la presente divulgación se seleccionará para que sea eficaz en el tratamiento del cáncer que necesita tratamiento. El cáncer puede ser, por ejemplo, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon o cáncer de pulmón. Otros cánceres que pueden tratarse mediante la selección adecuada del PPA incluyen neuroblastoma, cáncer de páncreas, cáncer de vejiga, melanoma, cáncer de piel, linfoma no Hodgkin, cáncer de riñón, cánceres de cabeza y cuello, que incluyen glioblastoma, leucemia y otros cánceres de la sangre, cánceres de ovario y tiroides. El cáncer puede ser un tumor sólido. El cáncer puede tratarse con PPAs que son específicos para oncogenes, por ejemplo, tumores derivados de MYCN y RAS. En una realización, el cáncer se trata mediante la administración de sal dicaprato de AMXT 1501, es decir, un compuesto de fórmula P^pA:(HCA)2 donde PPA es AMXT 1501 y HCA es ácido cáprico, donde la administración puede ser mediante una forma de dosificación oral sólida.

En general, además de los tratamientos contra el cáncer, existe una infinidad de usos terapéuticos proporcionados por los agentes terapéuticos basados en poliaminas. Se han descrito agentes a base de poliaminas que tienen actividades antibióticas, acciones antivirales, acciones antiinflamatorias, actividad antiséptica, capacidades analgésicas, acciones antipsicóticas, efectos antienvejecimiento, efectos anti-daño cardíaco, entre muchas otras acciones. La administración oral de estos agentes activos de poliamina beneficiaría enormemente sus acciones farmacológicas deseadas y mejoraría el beneficio terapéutico para los pacientes que se someten a terapia para estos alimentos.

Realizaciones ejemplares

La referencia a lo largo de esta memoria a "una realización" y variaciones de las misma significa que una función, estructura, o característica particular descrita en relación con la realización se incluye en al menos una realización. Por tanto, las aparición de la frase "en una realización" en varios lugares a lo largo de esta memoria no se refiere necesariamente a la misma realización. Además, las funciones, estructuras, o características particulares pueden combinarse de cualquier manera adecuada en una o más realizaciones.

Debe entenderse que la terminología utilizada en la presente memoria tiene el único propósito de describir realizaciones específicas y no pretende ser limitante. Además, debe entenderse que, a menos que se defina específicamente en la presente memoria, la terminología empleada en la presente memoria debe recibir su significado tradicional como se conoce en la técnica relevante.

Como se emplea en esta memoria descriptiva y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "una" y "el", “la” incluyen referentes plurales, es decir, uno o más, a menos que el contenido y el contexto indiquen claramente lo contrario. También debe tenerse en cuenta que los términos conjuntivos "y" y "o" se emplean generalmente en el sentido más amplio para incluir "y/o" a menos que el contenido y el contexto indiquen claramente la inclusión o exclusividad, según sea el caso. Por tanto, debe entenderse que el empleo de la alternativa (por ejemplo, "o") significa una, ambas, o cualquier combinación de las alternativas. Además, la composición de "y" y "o" cuando se menciona en la presente memoria como "y/o" pretende abarcar una realización que incluye todos los elementos o ideas asociados y una o más realizaciones alternativas que incluyen menos del total de los elementos o ideas asociados.

A menos que el contexto requiera lo contrario, a lo largo de la memoria y de las reivindicaciones que siguen, la palabra "comprende" y los sinónimos y variantes de la misma, tales como "tiene" e "incluye", así como variaciones de la misma, tales como "que comprende" debe interpretarse en un sentido abierto, inclusivo, por ejemplo, "que incluye, pero no se limita a". El término "que consiste esencialmente en" limita el alcance de una reivindicación a los materiales o etapas especificados, o a aquellos que no afectan materialmente a las características básicas y novedosas de la invención reivindicada.

Como se describe en la presente memoria, para simplificar, un paciente, médico, u otro ser humano puede describirse en algunos casos en el contexto del género masculino. Se entiende que un médico puede ser de cualquier género, y los términos "él", "su", y similares, tal como se emplean en la presente memoria, deben interpretarse de manera amplia que incluye todas las definiciones de género conocidas.

Todos los títulos empleados en este documento sólo se emplean para acelerar su revisión por parte del lector, y no deben interpretarse de ninguna manera como una limitación de la invención o de las reivindicaciones. Por lo tanto, los títulos y el resumen de la divulgación proporcionados en la presente memoria son sólo por conveniencia y no interpretan el alcance o el significado de las realizaciones.

En la descripción anterior, se establecen ciertos detalles específicos para proporcionar una comprensión completa de varias realizaciones descritas. Sin embargo, un experto en la técnica relevante reconocerá que las realizaciones se pueden practicar sin uno o más de estos detalles específicos, o con otros métodos, componentes, materiales, etc. Los Ejemplos y preparaciones que se proporcionan a continuación ilustran y ejemplifican adicionalmente los temas de la presente invención y los métodos para preparar dichos temas. Debe entenderse que el alcance de la presente invención no está limitado de ninguna manera por el alcance de los siguientes Ejemplos y preparaciones. En los siguientes Ejemplos, las moléculas con un solo centro quiral, a menos que se indique lo contrario, existen como una mezcla racémica. Aquellas moléculas con dos o más centros quirales, a menos que se indique lo contrario, pueden existir como una mezcla racémica de diastereómeros. Pueden obtenerse enantiómeros/diastereómeros individuales mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica. Los materiales de partida y los diversos reactivos utilizados o referenciados en los ejemplos pueden obtenerse de fuentes comerciales o se pueden preparar fácilmente a partir de compuestos orgánicos disponibles comercialmente, empleando métodos bien conocidos por un experto en la técnica.

Ejemplos

Ejemplo 1

Preparación de la forma de base libre de AMXT 1501

Se cargó un matraz de fondo redondo de 2 L con 724,2 g de resina de intercambio aniónico de hidróxido Amberlyst™ A25 (Dow Chemical, Midland, MI, EE.UU.) y 1 litro de metanol. La mezcla se agitó con una barra de agitación magnética a temperatura ambiente durante aproximadamente 10 minutos, y después la resina se filtró utilizando un embudo Büchner. La resina limpia se transfirió a un vaso de precipitados hasta que estuvo lista para su uso. Un matraz limpio de fondo redondo de 2 L se cargó con 57,9 g (81,0 mmoles) de la sal hidrocloruro de AMXT 1501 (Aminex Therapeutics, Inc., Kirkland, WA, EE.UU.) y 2 litros de metanol. La mezcla se agitó con una barra de agitación magnética a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora para producir una disolución turbia. La disolución turbia se transfirió a un recipiente de 5 L y se añadió la resina Amberlyst™ A25 lavada. La mezcla se agitó durante 10 minutos a temperatura ambiente, tiempo durante el cual la disolución se volvió de color blanco lechoso y después se volvió transparente. Después de 10-20 minutos adicionales de agitación, la mezcla se filtra para recoger la resina. La resina se lavó varias veces con un total de aproximadamente 1 litro de metanol. El filtrado y los lavados se combinaron para proporcionar aproximadamente 3,1 litros de disolución. La disolución se colocó en un rotavapor a presión reducida y el disolvente se eliminó a aproximadamente a 30°C para dejar un sólido blanco. El secado adicional a vacío dinámico total proporcionó 42,18 g (rendimiento del 91,5%) de un sólido blanco seco como la forma de base libre de AMXT 1501, que se raspó del recipiente.

Ejemplo 2

Preparación de sal dicaprato de AMXT 1501

Se cargó un matraz de 250 ml con 10 g (17,6 mmoles) de base libre AMXT 1501 como se preparó en el Ejemplo 1, 6,0 g (34,8 mmoles, 2,0 eq.) de ácido cáprico (Aldrich Chemicals) y 100 ml de metanol. La mezcla se agitó con una barra de rotación magnética a temperatura ambiente durante aproximadamente 5 minutos hasta que se formó una disolución homogénea. La disolución se agitó durante 30 minutos más, después se detuvo la agitación y el disolvente se evaporó a presión reducida a 30°C para proporcionar un residuo sólido blanquecino. Este residuo se secó a vacío dinámico total durante 12-15 horas a temperatura ambiente y después se desechó del matraz de reacción para proporcionar la sal del título con un rendimiento de aproximadamente el 97%.

La sal del título se caracterizó por análisis elemental, y coincidió con el teórico con la inclusión de / mol de agua (H²O). Análisis elemental calculado para C⁵²H¹¹⁰N⁶O⁷ + / H ²O = C, 67,49; H, 11,91; N, 9,08; O, 11,52. Encontrado C, 67,65; H, 11,85; N, 8,75; O, 11,58. La valoración de agua de Karl Fischer mostró 1,3% de H²O asociada con la sal valorada. La relación de peso molecular de / H²O para dicaprato de AMXT 1501 = 9,2 / 913,.47 = 0,986%. El análisis termogravimétrico (TGA) mostró una pérdida de 1,073% en peso de 100 a 135°C.

Se realizó calorimetría diferencial de barrido (DSC) en la sal del título, dando como resultado el análisis DSC mostrado en la FIG. 2 y el análisis termogravimétrico (TGA) mostrado en la FIG. 3.

Como otra opción, se puede agregar un no disolvente a una disolución formada al mezclar la forma de base libre de una poliamina (por ejemplo, la forma de base libre de AMXT 1501) y un ácido carboxílico hidrófobo (por ejemplo, dos equivalentes molares de ácido cáprico) en un disolvente que disuelve la sal resultante. La adición del no disolvente provocará una precipitación de la sal resultante, donde el precipitado se puede separar del no disolvente mediante, por ejemplo, decantación o filtración. Este método se ejemplifica mediante el siguiente método. A una disolución transparente formada al disolver 283,2 g de base libre AMXT 1501 en 455 ml de metanol se le añaden 171,5 g de ácido cáprico (2 equivalentes), lo que da como resultado una disolución de composición salina de aproximadamente 1 g/mL. Esta disolución se enfría en un baño de hielo y se agregan lentamente 3,7 L de acetonitrilo a la disolución durante un período de 1 a 2 horas. Cuando se ha añadido aproximadamente el 30% de la carga total de acetonitrilo, la disolución se vuelve turbia, seguido de la precipitación de un producto sólido blanco. La suspensión espesa resultante se filtra y el polvo blanco resultante se lava con acetonitrilo y se seca durante la noche para proporcionar 403,9 g (79%) de dicaprato de AMXT 1501 como un polvo blanco.

Ejemplo 3

Comprimido de sal dicaprato de AMXT 1501

Se cargó un matraz de fondo redondo de 200 ml con 38,4 g de la sal dicáprica de AMXT 1501 del Ejemplo 2, 28,5 g de almidón Starcap™ 1500 (Colorcon, Harleysville, PA, EE.UU.), 8,4 g de croscarmelosa de sodio (FMC, Filadelfia, PA, EE.UU.), 42,3 g de celulosa microcristalina Avicel™ PH-102 (FMC, Filadelfia, PA, EE.UU.) y 1,2 g de sílice pirogénica Aerosil™ R202 (Evonik Corp., Piscataway, NJ, EE.UU.). Esta mezcla se agitó enérgicamente durante unos segundos, después se colocó en un conjunto de rodillos donde la mezcla se laminó a alta velocidad durante 30 minutos. Después de que se completó este laminado, se añadieron 1,2 g de estearato de magnesio (Spectrum Chemicals, Tucson, AZ, EE.UU.) y la mezcla se agitó enérgicamente durante unos segundos seguido de un laminado durante un minuto. A continuación, la mezcla enrollada se cargó en el alimentador de una prensa de comprimidos y se prensó en forma de comprimido aplicando una presión de aproximadamente 1,5 toneladas. El tamaño del comprimido tenía una forma hexagonal de 10 mm y el peso medio por comprimido era de 0,4 g. Los comprimidos tenían una dureza de 18-20 kp, un tiempo de disgregación de menos de 15 minutos.

Ejemplo 4

Comprimido de sal cáprica de AMXT 1501 con recubrimiento entérico

Un vaso de precipitados tarado de 500 ml se equipó con un agitador de hélice y se cargó con 340 g de agua destilada. El agua se agitó hasta que apareció un vórtice. Al agua que se agitaba rápidamente se le añadieron 40 g de hidroxipropilmetilcelulosa Opadry™ (HPMC, Colorcon) durante un período de aproximadamente 2 minutos. Se continuó la agitación durante aproximadamente 1 hora, tiempo durante el cual se formó una disolución opaca semiviscosa homogénea. A continuación, se añadió agua (60 g) con agitación, seguido de 60 minutos más de agitación. No se observaron partículas ni sólidos aglomerados. Se detuvo la agitación y el vaso de precipitados y su contenido se refrigeraron a 5°C durante la noche para proporcionar la disolución de recubrimiento transparente.

Un vaso de precipitados de 2 L tarado equipado con un agitador de hélice se cargó con 600 g de agua destilada. El agua se agitó hasta que se formó un vórtice. A esta agua que se agitó rápidamente se le añadieron 200 g de recubrimiento entérico Acryl-EZE™ (Colorcon) durante un período de aproximadamente 2 minutos, seguido de 60 minutos de agitación adicional para proporcionar una suspensión blanca homogénea. A la suspensión blanca se le añadieron 200 g de agua seguido de 5 minutos de agitación adicional. A continuación, se dejó la suspensión durante la noche a 5°C. Antes de su uso, la suspensión se sacó del frigorífico y se dejó calentar a temperatura ambiente para proporcionar la disolución de recubrimiento entérico Acryl-EZE.

Para preparar los comprimidos con recubrimiento entérico se empleó un recubridor de Freund Hi-Coater Modelo HCT-30 con una boquilla de pulverización Freund. Se colocaron 500 g de comprimidos de placebo en la bandeja del recubridor de Freund, y se encendieron el calentador y el ventilador del recubridor. El recubridor se ajustó a una temperatura de entrada de 882C, una temperatura del lecho de 37,5°C, y una velocidad de rotación de la bandeja de 14 rpm. Después de que se cumplieran estas condiciones, lo que tomó 20-30 minutos, se añadieron a la bandeja 94,7 g de comprimidos (aproximadamente 234 comprimidos de forma diferente a los comprimidos de placebo anteriores) de la sal dicáprica de AMXT 1501 preparada en el Ejemplo 3. Sobre las comprimidos que giraban y caían en cascada en la bandeja, se pulverizó la disolución de recubrimiento transparente (HPMC) a una presión de 1,2 kg/cm3 y una velocidad de 2,0 g/min durante los primeros 20 minutos. Después de estos primeros 20 minutos, la velocidad de pulverización se incrementó a 2,6 g/min. Se continuó la pulverización hasta una ganancia de peso medio del comprimido de 2% de sólidos, momento en el que se interrumpió la pulverización y se mantuvieron el laminado y el calentamiento durante aproximadamente 2 minutos. Se emplearon aproximadamente 111 g de disolución de recubrimiento transparente. La mezcla de comprimidos resultante era blanca con un ligero brillo.

Estos comprimidos blancos ligeramente brillantes se expusieron después a la disolución de recubrimiento entérico (recubrimiento entérico Acryl-EZE). El recubridor se cargó con la disolución de revestimiento entérico, después se ajustó para lograr una temperatura de entrada de 88°C y una temperatura del lecho de 38°C. Cuando se cumplieron estas condiciones, se hizo girar la bandeja a 14 rpm. A los comprimidos que giraban se les pulverizó la disolución de revestimiento entérico a una presión de 1,2 kg/cm3 y una velocidad de 2,6 g/min. Se continuó la pulverización hasta que se logró una ganancia de peso medio de 8-10% de sólidos. Se emplearon aproximadamente 665 g de disolución de recubrimiento entérico para proporcionar 234 comprimidos con recubrimiento entérico de la sal cáprica de AMXT 1501 después de la separación de los comprimidos de placebo.

Ejemplo 5

Análisis de solubilidad de la sal dicaprato de AMXT 1501

Se cargaron veintitrés tubos de centrífuga con tapa de 2 ml cada uno con al menos 10 mg de la sal dicáprica de AMXT 1501 como se preparó en el Ejemplo 2. Cada vial se marcó con un disolvente de ensayo como se identifica en la Tabla. Después del marcaje, a cada vial se le añadieron 2,0 ml del disolvente indicado, con la excepción del vial marcado con alcohol de lanolina, que recibió 1,8 g de alcohol de lanolina sólido.

Una vez completada la adición de los disolventes, los viales se sometieron a sonicación en un baño de sonicación ajustado a 45°C durante aproximadamente 60 minutos. El vial que contiene alcohol de lanolina se colocó en un baño de agua caliente ajustado a 85°C y se calentó en este baño durante aproximadamente 30 minutos antes de colocarlo en el sonicador. Después de calentar durante aproximadamente 60 minutos, todas las muestras se retiraron de las fuentes de calor y se dejaron enfriar a temperatura ambiente durante un período de una hora.

Después de enfriar, las muestras se prepararon para el análisis centrifugando primero las muestras en los viales. Después de la centrifugación, las muestras se diluyeron de 1 a 10 en un vial de HPLC con ácido trifluoroacético (TFA) al 0,1% en acetonitrilo. En algunos casos, se necesitó una dilución adicional de 1 a 10 si la respuesta de HPLC estaba fuera de escala. Los resultados del análisis de solubilidad se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1

La solubilidad a más largo plazo se determinó evaluando las muestras 24 horas después de la preparación. Los resultados del estudio a más largo plazo se proporcionan en la Tabla 2.

Tabla 2

La sal de ácido cáprico preparada en el Ejemplo 2 tenía una solubilidad superior a 10 mg/ml en la mayoría de los disolventes ensayados. La solubilidad más baja se encontró en hexano, donde por análisis de HPLC no se detectó material. La sal de ácido cáprico también tenía baja solubilidad en acetato de etilo y tolueno.

Ejemplo 6

Preparación y caracterización de las formas de sal mono, di, tri y tetra-caprato de AMXT 1501

Una muestra de 50 gramos de sal AMXT 1501 4HCl se convirtió en metanol en la base libre empleando una resina Dow Amberlyst™ A26 OH como se describe en el Ejemplo 1. El disolvente se eliminó en el rotavapor para proporcionar la base libre como un sólido con un rendimiento del 88%. La base libre se analizó mediante HPLC para proporcionar un ensayo del 97% utilizando la sal de HCl como referencia y corrigiendo el peso molecular.

Para preparar las sales 1, 2, 3 y 4x, se combinaron y disolvieron en metanol 5 gramos de la base libre anterior y la cantidad apropiada de ácido cáprico. El metanol de cada sal se eliminó empleando el evaporador rotatorio. Los sólidos resultantes se secaron en la estufa de vacío a temperatura ambiente.

Solubilidad. Durante la sección de preparación anterior, se observó que cuando se eliminó por lavado el residuo en el fondo redondo de cada una de las sales, había una clara progresión de las sales mono y dicaprato siendo mucho más solubles en agua que las sales tri- y tetra-caprato de AMXT 1501. Para ensayar la solubilidad, se añadió una porción conocida de cada sal a 1 ml de agua desionizada. Las disoluciones se agitaron y se sometieron a veces a sonicación varias veces y se observó su solubilidad. Además de las 4 sales que se prepararon de la misma manera y al mismo tiempo, también se evaluó una muestra de la sal de caprato 2x con AMXT 1501 que se precipitó a partir de metanol empleando acetonitrilo para determinar si había diferencias de solubilidad observadas entre esta 2x sal y la aislada mediante una simple eliminación del disolvente metanol. Los resultados se resumen en la Tabla 3. Las sales mono y di-caprato mostraron una solubilidad en agua significativamente mayor que las sales tri- y tetracaprato.

Tabla 3

Solubilidad de diversas proporciones de sales de caprato AMXT 1501 en H2O

Análisis TGA. Se analizaron cinco muestras de proporción de sal cáprica AMXT 1501 mediante TGA y se calentaron a una velocidad de 20°C por minuto hasta una temperatura final de 400°C. Los TGAs se procesaron mostrando primero la disminución porcentual de peso desde el punto de partida a 100°C, lo que podría dar una indicación del contenido de agua, y después la disminución de peso hasta la primera meseta. La Tabla 4 muestra los datos para cada muestra.

Tabla 4

TGA de Sales Cápricas de AMXT 1501

Análisis DSC. Las muestras de proporción de sal que se analizaron anteriormente mediante TGA también se analizaron mediante DSC. Todas las muestras se calentaron a una velocidad de 20°C/minuto hasta una temperatura final de 200°C. El análisis DSC buscó la presencia de transiciones vitreas, puntos de fusión y el intervalo del punto de fusión a media altura para determinar la pureza de la muestra. El intervalo diana de altura media es de aproximadamente 5°C. La Tabla 5 muestra los puntos de fusión de la muestra y el intervalo de fusión a media altura. No se observaron transiciones vitreas para ninguna de las muestras.

Tabla 5

DSC de sales cápricas

Caracterización de las sales por FT-IR. Las mismas muestras anteriores se analizaron por FT-IR utilizando una unidad de muestreo ATR (reflectancia total atenuada) de diamante. La Tabla 6 enumera algunas de las bandas que están presentes en todas las exploraciones IR. Las señales generales parecen debilitarse a medida que aumenta la sustitución cáprica.

Tabla 6

Características del análisis FT-IR de las sales de caprato AMXT 1501

Determinación de agua residual por KF. El contenido de agua de las muestras se determinó mediante titulación KF. La Tabla 7 muestra el contenido de agua medio y el número de muestras utilizadas para la media.

Tabla 7

Contenido de agua de las muestras de sal caprate AMXT 1501

Análisis elemental. Las cuatro muestras preparadas se enviaron para análisis de C, H, N y O. El porcentaje teórico de los elementos se determinó utilizando las siguientes fórmulas que se muestran en la Tabla 8. Los valores calculados y encontrados se muestran a continuación en las Tablas 9 a 12. La variabilidad en los resultados de los calculados y encontrados probablemente se deba a los hidratos o una ligera variación en los equivalentes del ácido cáprico que se añadió a la base libre para producir cada sustitución de sal. A medida que aumenta la proporción del ácido cáprico con respecto a la base libre AMXT 1501, la solubilidad en agua disminuye. Las sales de mono y dicaprato AMXT 1501 mostraron buena solubilidad a una concentración de >150 mg/ml mientras que la solubilidad de las sales de tri- y tetracaprato AMXT 1501 fue muy baja a <10 mg/ml.

Tabla 8

Fórmulas teóricas para sales cápricas de AMXT 1501

Tabla 9

Análisis elemental para la sal monocaprato AMXT 1501

Tabla 10

Análisis elemental para la sal de dicaprato AMXT 1501

Tabla 11

Análisis elemental para la sal de tricaprato de AMXT 1501

Tabla 12

Análisis elemental para sal de tetracaprato de AMXT 1501

Empleando el análisis de TGA, todas las sales mostraron varias cantidades de pérdida de peso hasta 100°C probablemente debido a diferentes cantidades de agua de hidratación. La siguiente meseta de pérdida de peso hasta aproximadamente la misma temperatura final mostró un aumento en la pérdida de peso a medida que aumentaba la sustitución, lo que probablemente se deba a la pérdida de sustitución de la sal cáprica a medida que se calienta la muestra. El análisis DSC no mostró puntos de transición vitrea definitivos, lo que sugiere que los materiales son en su mayoría cristalinos. El punto de fusión de la sal monocaprato AMXT 1501 fue el más alto, y las sales di-, tri- y tetracaprato AMXT 1501 fueron más bajas con aproximadamente el mismo punto de fusión. Todas las muestras proporcionaron las mismas bandas características para los grupos funcionales mediante FT-IR, sin embargo, las bandas parecen ser más débiles a medida que aumenta la proporción de ácido cáprico para AMXT 1501. El análisis de agua por titulación Karl Fischer mostró el mayor contenido de agua con las sales mono y dicaprato AMXT 1501 y un menor contenido de agua con las sales tri- y tetra-AMXT 1501. El análisis elemental muestra un acuerdo razonable con la teoría y sigue las tendencias de la teoría para el análisis C, H, N y O.

Ejemplo 7

Análisis farmacocinético de diversas sales de AMXT 1501 HCA administradas por vía oral en perros Beagle Después de una aclimatación de cinco (5) días, 12 perros beagle se dividieron en cuatro grupos de tres perros por grupo, y se les administraron dos comprimidos con el compuesto o la sal asignados. Después de la administración de la dosis, a todos los animales se les realizó una extracción de sangre en serie. El diseño experimental para el estudio se proporciona en la Tabla 13.

Tabla 13

Diseño de estudios experimentales

La información sobre la formulación del comprimido se proporciona en las Tablas 14, 15, 16 y 17.

Tabla 14

Formulación para la base libre de AMXT 1501

Tabla 15

Formulación para la sal dicolato de AMXT 1501

Tabla 16

Formulación para la sal fosfato de AMXT 1501

Tabla 17

Formulación para la sal dicaprato de AMXT

La Tabla 18 proporciona datos farmacocinéticos obtenidos empleando las diversas formas de sal de AMXT 1501 después de una dosis única por vía oral en perros. En la Tabla 18, el Grupo 1 recibió la forma de la base libre de AMXT 1501, el Grupo 2 recibió la sal de dicolato de AMXT 1501, el Grupo 3 recibió la forma de sal de fosfato de AMXT 1501 y el Grupo 4 recibió la forma de sal de dicaprato de AMXT 1501. En la Tabla 18 se indica también, T^max en unidades de hora, donde T^max se define como el tiempo después de la dosificación en el que se alcanza la concentración plasmática máxima de AMXT 1501, C^max se indica en unidades de ng/mL, donde C^max se define como la concentración máxima de AMXT 1501 observada en el plasma, AUC^ü-t se indica en unidades de hora*ng/mL, y se define como el área bajo la curva en un gráfico de concentración plasmática en función del tiempo hasta el tiempo de 24 horas (es decir, t = 24 horas), y t^1/2 se indica en unidades de hora, donde t^1/2 se define como el tiempo después de la dosificación en el que la concentración plasmática de AMXT 1501 alcanza la mitad de su concentración máxima. En la Tabla 18, DE se refiere a la desviación estándar y CV% se refiere al coeficiente de variabilidad.

Tabla 18

Datos farmacocinéticos

Los resultados de este estudio se muestran en las Figuras, donde las FIGS. 4A, 4B, 4C y 4D muestran los niveles plasmáticos obtenidos después de una dosis oral única de bien la base libre de AMXT 1501 o bien de varias formas de sal de AMXT 1501 formuladas en comprimidos con recubrimiento entérico administrados a perros. Los datos del Grupo 1 se muestran en la Figura 4A, que muestra los niveles plasmáticos obtenidos después de la dosificación de la forma de base libre de AMXT 1501 y dieron como resultado cantidades muy variables de AMXT 1501 obtenidas en plasma. Los puntos de datos circulares y cuadrados son de perras y los puntos de datos triangulares son de un perros. Se obtuvieron niveles plasmáticos más altos usando la sal de dicolato de AMXT 1501 después de la dosificación oral única que se muestra en la Figura 4B, que muestra los datos del Grupo 2 donde los puntos de datos del círculo son de perra y los puntos de datos del cuadrado y del triángulo son de perro. Estos resultados eran consistentes con los niveles obtenidos usando la forma de sal de dicaprato de AMXT 1501 como se determinó a partir de los animales del Grupo 4 y se trazó en la Figura 4D, donde los puntos de datos del círculo son de una perra y los puntos de datos del cuadrado y el rectángulo son de perros. Los niveles plasmáticos observados después de la dosificación oral de la sal de fosfato de AMXT 1501, es decir, de los animales del Grupo 3, se representan en la Figura 4C, donde los puntos de datos de círculo y cuadrado son de hembras y los puntos de datos de triángulo son de un perro macho, y nuevamente eran altamente variables y comparables a los resultados obtenidos utilizando la base libre de AMXT 1501 (Figura 4A). Estos resultados destacan la importancia del contraión de la sal y apoyan el uso de ácidos lipofílicos como contraión para lograr, por ejemplo, niveles plasmáticos sostenidos consistentes de productos farmacéuticos de poliamina después de la dosificación oral.

FIGS. 5A, 5B, 5C y 5D muestran niveles medios de AMXT 1501 en plasma obtenidos empleando los diversos compuestos descritos en la Tabla 13 después de la administración oral única a los Grupos 1,2, 3 y 4 de perros. Los niveles medios de AMXT 1501 se representan en las Figuras 5A, 5B, 5C y 5D que muestran la desviación estándar en los datos, y destacan los niveles variables de fármaco observados empleando las formas de la base libre y la sal de fosfato de AMXT 1501 (Grupo 1, Figura 5A y Grupo 3, Figura 5C, respectivamente) y los niveles de AMXT 1501 en sangre mucho más consistentes entre animales obtenidos empleando las formas dicolato y dicaprato de AMXT 1501 (Grupo 2, Figura 5B y Grupo 4, Figura 5D, respectivamente). Las sales de dicolato y dicaprato, que se forman a partir de ácidos carboxílicos hidrófobos representativos, ácido cólico y ácido cáprico, como se describe en la presente memoria, proporcionan así una mejor biodisponibilidad en comparación con la base libre o la sal de fosfato, ya que las sales de colato y caprato no muestran tanta variabilidad de un sujeto a otro sujeto cuando se administra a animales de ensayo.

Ejemplo 8

Dosificación oral con dicaprato de AMXT 1501 repetida durante 5 días en perros

Los objetivos de esta parte del estudio eran evaluar la farmacocinética (PK) de la forma de sal dicaprato de AMXT 1501 cuando se administra por vía oral (PO) en comprimidos con recubrimiento entérico a perros beagle machos y hembras en un intervalo de niveles de dosis y para comparar la PK de la sal de dicaprato de AMXT 1501 cuando se administra con difluorometilornitina (DFMO) en comparación con la sal de dicaprato de AMXT 1501 en solitario, y comparar la exposición después de una dosis única y repetida de dicaprato de AMXT 1501. A perros beagle machos y hembras (N = 1 ó 2 machos y 1 ó 2 hembras, para un total de N = 3 por grupo) se les administraron cinco dosis diarias en comprimidos orales (PO) de la forma de sal de dicaprato de AMXT 1501. La sal dicaprato de AMXT 1501 se administró como monoterapia a 8, 16, ó 32 mg/kg, o a 16 mg/kg en combinación con 200 mg/kg de difluorometilornitina PO (DFMO). Los perfiles farmacocinéticos (PK) después de la dosificación los días 1 y 5 se evaluaron utilizando métodos estándar no compartimentales.

Después de la administración oral única o repetida una vez al día de 8, 16, ó 32 mg/kg de la forma de sal de dicaprato de AMXT 1501 a perros beagle macho y hembra, las concentraciones se midieron a las 24 h después de la dosis (el último punto de tiempo medible). Se observó que el T^max de AMXT 1501 de 4 a 12 horas después de la dosis y la exposición basada en C^max y AUC^0-t aumenta de una forma dependiente a la dosis. En los animales en los que se pudo estimar, la media de los valores de t^1/2 en el Día 1 oscilaron entre 7,99 a 23,2 horas y la media de los valores de t^1/2 en el Día 5 oscilaron de 8,69 a 20,8 horas.

Se utilizó el siguiente diseño experimental. Los perros Beagle, 1 o 2 machos y 1 o 2 hembras para un total de 3 perros por grupo, se asignaron al azar a los cuatro grupos de tratamiento como se describe en la Tabla 19.

Tabla 19

Diseño del estudio

Grupo Dosis de AMXT 1501 Tratamiento Puntos de tiempo de muestreo PK N2 (mg/kg/día)a nominal

1 8 Dicaprato de AMXT 1501

2 16 Dicaprato de AMXT 1501 0,5, 1,2, 4, 8,

3 32 Dicaprato de AMXT 1501 12, y 24

Dicaprato de AMXT 1501

4 16 DFMOb horas

a Las dosis de dicaprato de AMXT 1501 se administraron como comprimidos de 80 mg (cantidades de base libre) (1, 2, 4, y 2 comprimidos por día en los Grupos 1, 2, 3, y 4, respectivamente).

b Se administró DFMO después de la dosis de dicaprato de AMXT 1501 como una sonda oral de 40 mg/mL con 200 mg/kg administrados.

La sal de dicaprato de AMXT 1501 se administró en forma de comprimido una vez al día durante cinco días. Después de la dosificación en los Días 1 y 5, se recogieron muestras de sangre seriadas de cada animal (3 por grupo) y se procesaron en plasma para análisis de concentración de AMXT 1501. Las muestras plasmáticas se analizaron para determinar la concentración de AMXT 1501 mediante un procedimiento de cromatografía líquida/espectrometría de masas (LC/MS-MS) y se emplearon los datos resultantes de la concentración frente al tiempo para estimar los parámetros de PK en animales individuales mediante un análisis no compartimental (NCA).

La Tabla 20 proporciona un resumen de los parámetros farmacocinéticos plasmáticos de AMXT 1501 después de una dosis única de sal de dicaprato de AMXT 1501 (Día 1) o repetida una vez al día (Día 5) a perros beagle machos y hembras.

Los resultados seleccionados a partir de este estudio se muestran en las figuras, donde las FIGS. 6A, 6B, 6C y 6 D muestran concentraciones plasmáticas de AMXT 1501 (ng/ml) en animales individuales después de una única dosis oral (PO) de los comprimidos de dicaprato de AMXT 1501 con recubrimiento entérico a perros beagle machos y hembras el día 1. La FIG. 6A tiene un nivel de dosis de 8 mg/kg/día (Grupo 1; los puntos de datos circulares y cuadrados son de perras mientras que los puntos de datos triangulares son de perro), la FIG. 6B tiene un nivel de dosis de 16 mg/kg/día (Grupo 2; los puntos de datos de los círculos son de perra mientras que los puntos de datos de los cuadrados y los triángulos son de perro), la FIG. 6C tiene un nivel de dosis de 32 mg/kg/día (Grupo 3; los puntos de datos de los círculos y de los cuadrados son de perra mientras que los puntos de datos de los triángulos son de perro), y la FIG. 6 D tiene un nivel de dosis de 16 mg/kg/día pero incluye DFMO en la dosis (Grupo 4; los puntos de datos de los círculos son de perra mientras que los puntos de datos de los cuadrados y de los triángulos son de perro).

Las FIGS. 7A, 7B, 7C y 7D muestran la concentración plasmática de AMXT 1501 (ng/ml) en animales individuales después de repetir la dosificación PO una vez al día a perros beagle machos y hembras el día 5. La FIG. 7A tiene un nivel de dosis de 8 mg/kg/día (Grupo 1), la FIG. 7B tiene un nivel de dosis de 16 mg/kg/día (Grupo 2), la FIG. 7C tiene un nivel de dosis de 32 mg/kg/día (Grupo 3), y la FIG. 7D tiene un nivel de dosis de 16 mg/kg/día pero incluye DFMO en la dosis (Grupo 4).

Las FIGS. 8A y 8B muestran concentraciones plasmáticas medias (±DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis única (Día 1; FIG. 8A) o repetida una vez al día (Día 5; FIG. 8B) por vía oral de la monoterapia con dicaprato de AMXT 1501 en perros beagle machos y hembras. Los puntos de datos circulares son de animales que recibieron 8 mg/kg/día; los puntos de datos cuadrados son de animales que recibieron 16 mg/kg/día; y los puntos de datos triangulares son de animales que recibieron 32 mg/kg/día.

Las FIGS. 9A y 9B muestran concentraciones plasmáticas medias (±DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis única (Día 1; FIG 9A) o repetida una vez al día (Día 5; FIG. 9B) por vía oral de 16 mg/kg de AMXT 1501 en monoterapia con dicaprato frente a 16 mg/kg de dicaprato de AMXT 1501 en combinación con DFMO en perros beagle machos y hembras. En la Fig. 9A, los puntos de datos cuadrados son de animales del Grupo 2 que recibieron 16 mg/kg/día de AMXT 1501 sin DFMO, mientras que los puntos de datos triangulares son de animales del Grupo 4 que recibieron 16 mg/kg/día de AMXT 1501 en combinación con DFMO. La FIG. 9B muestra datos equivalentes del mismo grupo de animales después de 5 días de dosificación diaria.

Las FIGS. 10A, 10B, 10C y 10D muestran concentraciones plasmáticas medias (±DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis única (Día 1) o repetida una vez al día (Día 5) por vía oral a perros beagle machos y hembras, Día 1 frente al Día 5. En la Fig. 10A, los puntos de datos de los cuadrados son de animales del Grupo 1 que recibieron 8 mg/kg/día de dicaprato de AMXT 1501 medidos en el Día 1, mientras que los puntos de datos triangulares son de los mismos animales que recibieron la misma dosis diaria pero medidos el Día 5 . En la Fig. 10B, los puntos de datos cuadrados son de animales del Grupo 2 que recibieron 16 mg/kg/día de dicaprato de AMXT 1501 medidos en el Día 1, mientras que los puntos de datos triangulares son de los mismos animales que recibieron la misma dosis diaria pero medidos en el Día 5. En la Fig. 10C, los puntos de datos cuadrados son de animales del Grupo 3 que recibieron 32 mg/kg/día de dicaprato de AMXT 1501 medidos en el Día 1, mientras que los puntos de datos triangulares son de los mismos animales que recibieron la misma dosis diaria pero medidos el Día 5. En la Fig. 10D, los puntos de datos cuadrados son de animales del Grupo 4 que recibieron 16 mg/kg/día de dicaprato de AMXT 1501 y DFMO medidos en el Día 1, mientras que los puntos de datos triangulares son de los mismos animales que recibieron la misma dosis diaria pero medidos en el Día 5.

Estos datos demuestran que la formulación ensayada y los métodos de administración proporcionan concentraciones sostenidas y consistentes de AMXT 1501 en el plasma, después de una dosis única y después de una dosis repetida.

Ejemplo 9

Evaluación PK de Dicaprato de AMXT 1501 en perros Beagle durante un estudio de toxicidad de dosis repetidas de 28 días

Los animales recibieron un comprimido diario, administración oral de niveles de dosificación de 8 , 16, ó 32 mg/kg/día de comprimidos de dicaprato de AMXT 1501 sin DFMO, o sal de dicaprato de AMXT 1501 de 8 ó 16 mg/kg/día con DFMO. Los parámetros farmacocinéticos de AMXT 1501 se calcularon para todos los animales tratados con dicaprato de AMXT 1501 para la primera dosis (Día 1) y la última dosis (Día 28).

La exposición a AMXT 1501 se mantuvo durante el período de dosificación de 24 horas en todos los niveles de dosificación ensayados. No hubo un efecto obvio del sexo sobre el Tmax de AMXT 1501. con la excepción de la exposición del Día 1 en el grupo de dosificación de 8 mg/kg/día de AMXT 1501 sin DFMO, donde la C mediamax y AUC0-24hr eran constantes entre los géneros, la exposición fue mayor en las hembras que en los machos después de una dosis única o repetida. Después de una dosis única (Día 1) de dicaprato de AMXT 1501 con o sin DFMO, la exposición basada en la media de Cmax y AUC0-24 horas aumenta de una manera ligeramente inferior que de una forma proporcional a la dosis. No hubo un efecto consistente de género, nivel de dosis, o DFMO sobre la acumulación de AMXT 1501. Los valores de la media de AR^{cm ax} oscilaron de 1,62 a 3,63 y los valores de la media de AR^{a u c} oscilaron de 1,68 a 3,80. Los valores de t^1/2 de AMXT 1501 en el animal individual del Día 28 oscilaron de 8,85 a 69,4 horas y tendían a aumentar al aumentar la dosis. No hubo un efecto sustancial de DFMO en los niveles de dosis únicas o repetidas de AMXT 1501.

Los datos de estos experimentos se proporcionan en las Figs. 11A y 11B que muestran concentraciones plasmáticas medias (DE) de AMXT 1501 (ng/ml) después de una dosis oral única (Día 1, FIG. 11A) o repetida (Día 28 , FIG. 11B) a perros beagle macho y hembra y niveles de dosis de dicaprato de AMXT 1501 en comparación con la situación en la que no se administró DFMO (machos y hembras combinados). Los datos también se proporcionan en las FIGS.

12 A, 12 B, 12 C, 12 D, 12 E y 12 F que muestran concentraciones plasmáticas medias (DE) de AMXT 1501 (ng/mL) después de una dosis oral única (Día 1) o repetida (Día 28) a perros beagle macho y hembra; machos frente a hembras. La FIG. 12A muestra datos para el Grupo 2 (dosis baja, 8 mg/kg/día), Día 1. La FIG. 12B muestra datos para el Grupo 3 (dosis media, 16 mg/kg/día), Día 1. La FIG. 12C muestra datos para el Grupo 4 (dosis alta, 32 mg/kg/día), Día 1. La FIG. 12D muestra datos para el Grupo 2 (dosis baja, 8 mg/kg/día), Día 28. La FIG. 12E muestra datos para el Grupo 3 (dosis media, 16 mg/kg/día), Día 28. La FIG. 12F muestra datos para el Grupo 4 (dosis alta, 32 mg/kg/día), Día 28, según un estudio como se describe en la presente memoria.

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Las FIGS. 13A, 13B, 13C y 13D muestran la administración de varios niveles de dosis de dicaprato de AMXT 1501 en comprimidos con recubrimiento entérico por vía oral a perros beagle. Estas figuras muestran aumentos aproximadamente proporcionales a la dosis en los niveles plasmáticos de AMXT 1501 a niveles de dosis de 8 , 16 y 32 mg/kg/día después del Día 1 y del Día 28. Estos niveles de dosis eran equivalentes a 1, 2 y 4 comprimidos de dicaprato de AMXT 1501 (80 mg de base libre de AMXT 1501 contenido por comprimido) a estos animales, que tenían un peso corporal medio de 10 kg. Los parámetros PK Cmax y AUCü-24h mostraron ambos proporcionalidad a la dosis. Estos datos demuestran que la dosificación farmacológica con dicaprato de AMXT 1501 en comprimidos con recubrimiento entérico proporciona un método de administración predecible y fiable para este fármaco activo de poliamina.

Ejemplo 10

Formulación farmacéutica de dicaprato de AMXT 1501

La Tabla 22 de a continuación muestra la composición del comprimido farmacéutico con recubrimiento entérico que contiene dicaprato de AMXT 1501. Los productos farmacéuticos modernos contienen normalmente ingredientes de formulación de comprimidos, tales como los que aumentan la funcionalidad y la administración oral del fármaco o de los fármacos activos resultantes. A continuación se proporcionan descripciones y funciones de estos ingredientes de formulación habituales, conocidos comúnmente como excipientes.

Tabla 22

Composición de la dosificación oral sólida

Después de mezclar los ingredientes secos enumerados anteriormente, esta formulación en polvo se carga en una prensa de comprimidos adecuada para producir los comprimidos sin recubrimiento. Se realizan ensayos de control de calidad y se evalúa el contenido de fármaco activo (% de ensayo) junto con la uniformidad del contenido (CU) en una muestra de comprimidos sin recubrimiento. El recubrimiento de los comprimidos con el recubrimiento entérico se realiza empleando un aparato de recubrimiento de bandeja giratoria (véase el Ejemplo 4). Los comprimidos de dicaprato de AMXT 1501 para el uso como productos farmacéuticos se recubren con hidroxil propilmetilcelulosa Opadry™ (HPMC, Colorcon) como se describe en el Ejemplo 4 anterior.

En general, la compresión de los comprimidos se puede preparar comprimiendo con una máquina adecuada, conocida como prensa para comprimidos, después de mezclar previamente los ingredientes de la formulación en una forma fluida, tal como un polvo o gránulos, y mezclarlos con rellenos, aglutinantes, diluyentes inertes, excipientes lubricantes junto con disgregantes para ayudar a la disolución de los comprimidos en el sistema gastrointestinal del sujeto a tratar. Los comprimidos resultantes se pueden someter a una etapa de recubrimiento entérico adicional para proporcionar una barrera sensible al pH y permitir que el comprimido recubierto permanezca intacto hasta alcanzar el entorno de pH más alto del tracto gastrointestinal inferior.

Los rellenos en los productos farmacéuticos en comprimidos se emplean para diluir el agente activo y permitir un control preciso de la dosis de fármaco activo que se administra. Los rellenos o diluyentes habituales de uso común incluyen lactosa, manitol, xilitol, dextrosa, sacarosa, sorbitol, azúcar comprimible, celulosa microcristalina (MCC), celulosa en polvo, almidón de maíz, almidón, almidón pregelatinizado, dextrano, carbonato de calcio, polietilenglicol e hidroxipropilmetilcelulosa.

Los disgregantes en los productos farmacéuticos en comprimidos se emplean en las formulaciones farmacéuticas modernas para ayudar en la disociación de los excipientes del fármaco activo en el tracto gastrointestinal de los sujetos tratados. Ejemplos de disgregantes que se emplean habitualmente incluyen carboximetilcelulosa cálcica, providona, crospovidona (polivinilpolipirrolidona), metilcelulosa, celulosa microcristalina, croscarmelosa sódica, hidroxipropilcelulosa, almidón, almidón pregelatinizado y alginato sódico.

Los lubricantes en los productos farmacéuticos en comprimidos se emplean para ayudar en el procesamiento del polvo premezclado para equipos de molienda, incluidas las prensas para comprimidos. Ejemplos de lubricantes incluyen estearato de calcio, monoestearato de glicerilo, palmitoestearato de glicerilo, aceite vegetal hidrogenado, aceite mineral ligero, estearato de magnesio, polietilenglicol, ácido esteárico lauril sulfato de sodio, y talco.

Los deslizantes en las preparaciones farmacéuticas en comprimidos se emplean para mejorar el flujo de los polvos y ayudar en la fabricación utilizando diversos equipos de procesamiento, incluidas las prensas para comprimidos. Deslizantes de uso común incluyen dióxido de silicio, talco, almidón de maíz, y sílice coloidal hidrófoba.

Aunque en la práctica o en el ensayo de la presente invención se puede emplear también cualquier método y material similar o equivalente a los descritos en la presente memoria, en la presente memoria se describe un número limitado de métodos y materiales ejemplarizantes.

Cuando en la presente memoria se proporciona un intervalo de valores, se entiende que cada valor intermedio, hasta la décima parte de la unidad del límite inferior, a menos que el contexto indique claramente lo contrario, entre el límite superior e inferior de ese intervalo y cualquier otro valor establecido o intermedio en ese intervalo indicado, está comprendido dentro de la invención. Los límites superior e inferior de estos intervalos más pequeños se pueden incluir independientemente en los intervalos más pequeños que también están comprendidos dentro de la invención, sujeto a cualquier límite excluido específicamente en el intervalo indicado. Cuando el intervalo indicado incluye uno o ambos límites, también se incluyen en la invención los intervalos que excluyen uno o ambos de los límites incluidos. Por ejemplo, se debe entender que cualquier intervalo de concentración, intervalo de porcentaje, intervalo de relación o intervalo de números enteros proporcionado en la presente memoria incluye el valor de cualquier número entero dentro del intervalo mencionado y, cuando sea apropiado, fracciones del mismo (tales como una décima y una centésima de un número entero), a menos que se indique lo contrario. Además, debe entenderse que cualquier intervalo de números enumerado en la presente memoria relacionado con cualquier característica física, tal como subunidades de polímero, tamaño o espesor, incluye cualquier número entero dentro del intervalo enumerado, a menos que se indique lo contrario. Como se emplea en la presente memoria, el término "aproximadamente" significa ± 20% del intervalo, valor o estructura indicados, a menos que se indique lo contrario.

Se divulgan los siguientes documentos de patente: Patentes US Nos 7662999, 7432302, 7411002, 7388112, 7208528, 7199267, 7160923, 6963010, 6914079, 6872852, 6646149, 6172261 y RE43327, y Publ. Patentes US Nos 2011/256161 y 2006/122279.

Las publicaciones discutidas anteriormente y a lo largo del texto se proporcionan únicamente para su divulgación antes de la fecha de presentación de la presente solicitud.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES

   1. Una sal de una forma di-protonada de una poliamina de fórmula AMXT 1501 y un ácido cáprico desprotonado, en donde la sal tiene dos moles de ácido cáprico desprotonado por cada mol de AMXT 1501 protonado.

   

   3. La sal de la reivindicación 1 en mezcla con no más del 5% en peso de cualquier otro químico sólido o líquido. 4. Una composición farmacéutica que comprende la sal de la reivindicación 1.

   5. La composición farmacéutica de la reivindicación 4 caracterizada en que la composición tiene una forma de dosificación oral sólida.

   6. Un método que comprende:

   combinar un agente farmacéutico de poliamina, un ácido carboxílico hidrófobo y un disolvente para proporcionar una disolución; y

   aislar un residuo sólido de la disolución,

   en donde el residuo sólido comprende una sal de la reivindicación 1.

   7. El método de la reivindicación 6 en donde el disolvente comprende agua, metanol o una combinación de los mismos.

   8. El método de la reivindicación 6 en donde se combinan 1,8-2,2 moles de ácido carboxílico hidrófobo por cada 1,0 mol de agente farmacéutico de poliamina.

   9. El método de la reivindicación 6 en donde el residuo sólido se forma por precipitación de la disolución.

   10. El método de la reivindicación 6 que comprende además formular el residuo sólido o una porción del mismo en una forma farmacéutica de dosificación sólida.

   11. La sal de la reivindicación 1 para su uso en un método para tratar el cáncer, dicho método comprende administrar a un sujeto que necesite del mismo, una cantidad de la sal eficaz terapéuticamente.

   12. La sal para el uso según la reivindicación 11 en donde se administra al sujeto la cantidad eficaz terapéuticamente de una sal como una forma de dosificación sólida.