ES2824801T3 - Sal de compuesto heterocíclico sustituido con halógeno - Google Patents

Abstract

Sal representada por la fórmula general (I): **(Ver fórmula)** en la que R es un átomo de hidrógeno o un grupo metoxilo, X es un átomo de halógeno, A se selecciona del grupo que consiste en: **(Ver fórmula)** M es un metal alcalino o un metal alcalinotérreo, y n es 1 cuando M es un metal alcalino y es 2 cuando M es un metal alcalinotérreo.

Description

DESCRIPCIÓN

Sal de compuesto heterocíclico sustituido con halógeno

Campo técnico

La presente invención se refiere a una nueva sal de compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno útil como medicamento. La sal de compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno de la presente invención tiene una acción antagonista de receptores del ácido lisofosfatídico (LPA) y, por tanto, es útil para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades inducidas por LPA.

Antecedentes de la técnica

El ácido lisofosfatídico (LPA) es un fosfolípido fisiológicamente activo que está presente en un organismo vivo. Al unirse a receptores acoplados a proteínas G específicos (LPA1, LPA2, LPA3, LPA4, LPA5 y LPA6), el LPA transduce señales en células y modula la proliferación, diferenciación, supervivencia, migración, adhesión, infiltración y morfogénesis de las células. Además, se sabe que el LPA está implicado en enfermedades acompañadas de fibrosis en diversos órganos.

Se ha notificado que en el hígado, el LPA estimula la proliferación o contracción de células estrelladas que desempeñan un papel importante en el proceso de la fibrosis hepática, y estimula la migración de miofibroblastos (véanse los documentos no de patentes 1, 2 y 3).

Se ha notificado que en el riñón, la producción de LPA o la expresión de LPA1 se potencia en ratones con ligadura ureteral unilateral como modelos animales de fibrosis renal, y que se suprime la fibrosis renal por deficiencia de LPA1 o con la administración de un antagonista de receptores de LPA (véanse los documentos no de patentes 4 y 5).

Con respecto al pulmón, se ha notificado que los líquidos de lavado broncoalveolar de pacientes con fibrosis pulmonar idiopática tienen un aumento de la concentración de LPA, y que el LPA1 es el receptor que se expresa más en fibroblastos que tienen una función importante en el proceso de la fibrosis pulmonar y el LPA induce la migración de fibroblastos. Además, se ha notificado que la deficiencia de LPA1 o la administración de un antagonista de receptores de LPA suprime la fibrosis en ratones a los que se les ha administrado bleomicina por vía intratraqueal como modelos animales de fibrosis pulmonar (véanse los documentos no de patentes 6 y 7).

Con relación a la piel, se ha notificado que se suprime la fibrosis de la piel por la deficiencia de LPA1 o la administración de un antagonista de receptores de l Pa en ratones a los que se les administra bleomicina por vía subcutánea como modelos de esclerodermia (véase el documento no de patentes 8).

También se sabe que el LPA está implicado en enfermedades inmunológicas o inflamatorias. Se ha notificado que el LPA estimula la migración de monocitos humano, y está implicado en la proliferación o infiltración de células T. Además, se ha notificado que células sinoviales de pacientes con artritis reumatoide expresan receptores de LPA y migran o producen IL-6 e IL-8 mediante la estimulación por LPA; y que estas acciones se inhiben mediante un antagonista de receptores de LPA (véanse los documentos no de patentes 9, 10 y 11).

Además, se ha notificado que el LPA y el LPA1 están implicados en el desarrollo de dolor neuropático (véase el documento de patentes 12); que el LPA provoca la contracción de especímenes de uretra y especímenes de próstata extraída y el aumento de la presión intrauretral y, por tanto, está implicado en enfermedades urológicas (véase el documento de patentes 1); y que el LPA está implicado en enfermedades relacionadas con cáncer mediante la estimulación de la infiltración de las células cancerosas, mediante la estimulación de la proliferación de las células de cáncer de ovario o mediante la estimulación de la proliferación de células de cáncer de próstata (véanse los documentos no de patentes 13, 14 y 15).

Basándose en estos informes, se considera que un medicamento que antagoniza los receptores de LPA (en particular, el receptor LPA1) es útil para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades que acompañan a fibrosis, enfermedades inmunológicas o inflamatorias, enfermedades del sistema nervioso central o periférico, enfermedades urológicas y enfermedades relacionadas con cáncer, etc.

El documento de patentes 24 (documento WO 2014/104372) se refiere a un compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno, o a una sal farmacológicamente aceptable del mismo, que tiene una fuerte actividad antagonista de receptores de LPA y es útil como producto farmacéutico. El compuesto está representado por la fórmula general (A) o una sal del mismo. En la fórmula, A representa un anillo de fenilo, un anillo de tiofeno o un anillo de isotiazol; los restos R1 pueden ser iguales o diferentes y representan, cada uno, un átomo de halógeno o un grupo alquilo C¹-C³; R2 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C¹-C⁶; p representa un número entero de 0 a 5; V representa un grupo CR3 (en el que R3 representa un átomo de hidrógeno, un grupo amino, un grupo nitro o un grupo alcoxilo C¹-C³) o un átomo de nitrógeno: y X representa un átomo de halógeno.

Fórmula (A)

Por otro lado, los documentos de patentes 2 a 23 y los documentos no de patentes 5, 7, 8 y 16 divulgan derivados del ácido ([1,1'-bifenil]-4-il)acético, el documento de patentes 17 divulga derivados del ácido (2'-metoxi-[1,1'-bifenil]-4-il)acético y el documento de patentes 19 divulga derivados de 3-cloroisotiazol como compuesto que tiene una función antagonista sobre receptores de LPA; no existe ninguna divulgación de los compuestos según la presente invención. El documento de patentes 25 divulga un compuesto capaz de inhibir la actividad fisiológica del LPA y que es útil como agente preventivo o terapéutico para enfermedades cuya prevención y tratamiento puede fomentarse de manera eficaz mediante la inhibición de la actividad fisiológica del LPA.

El documento de patentes 26 divulga compuestos de isotiazol y tiazol y sales de los mismos, que pueden usarse como antagonistas de receptores de LAP.

Documentos de la técnica anterior

Documentos de patentes

Documento de patentes 1: documento WO 2002/062389

Documento de patentes 2: documento WO 2010/077882

Documento de patentes 3: documento WO 2010/077883

Documento de patentes 4: documento WO 2010/141761

Documento de patentes 5: documento WO 2010/141768

Documento de patentes 6: documento WO 2011/017350

Documento de patentes 7: documento WO 2011/041461

Documento de patentes 8: documento WO 2011/041462

Documento de patentes 9: documento WO 2011/041694

Documento de patentes 10: documento WO 2011/041729

Documento de patentes 11: documento WO 2011/091167

Documento de patentes 12: documento WO 2011/159632

Documento de patentes 13: documento WO 2011/159633

Documento de patentes 14: documento WO 2011/159635

Documento de patentes 15: documento WO 2012/078593

Documento de patentes 16: documento WO 2012/078805

Documento de patentes 17: documento WO 2012/138648

Documento de patentes 18: documento WO 2012/138797

Documento de patentes 19: documento WO 2013/025733

Documento de patentes 20: documento WO 2013/085824

Documento de patentes 21: documento WO 2013/189862

Documento de patentes 22: documento WO 2013/189864

Documento de patentes 23: documento WO 2013/189865

Documento de patentes 24: documento WO 2014/104372

Documento de patentes 25: documento WO 2005/012269 (documento US 2006/0194850 A1)

Documento de patentes 26: documento WO 01/060819 (documento EP 1258484 A1)

Documentos no de patentes

Documento no de patentes 1: Biochemical and Biophysical Research Communications, 248(1998) 436-440 Documento no de patentes 2: Biochemical and Biophysical Research Communications, 277 (2000) 72-78 Documento no de patentes 3: Journal of Biomedical Science,10 (2003) 352-358

Documento no de patentes 4: Journal of the American Society of Nephrology, 18 (2007) 3110-3118 Documento no de patentes 5: The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 336 (2011) 693-700 Documento no de patentes 6: Nature Medicine, 14 (2008) 45-54

Documento no de patentes 7: British Journal of Pharmacology, 160 (2010) 1699-1713

Documento no de patentes 8: Arthritis & Rheumatism, 63(2011) 1405-1415

Documento no de patentes 9: Journal of Biological Chemistry, 270 (1995) 25549-25556

Documento no de patentes 10: Biochimica et Biophysica Acta, 1582(2002) 168-174

Documento no de patentes 11: Molecular Pharmacology, 73 (2008) 587-600

Documento no de patentes 12: Nature Medicine, 10 (2004) 712-718

Documento no de patentes 13: Biochemical and Biophysical Research Communications, 193 (1993) 497-503 Documento no de patentes 14: Biochemical Journal, 309 (1995) 933-940

Documento no de patentes 15: The Journal of Urology, 163 (2000) 1027-1032

Documento no de patentes 16: Journal of Medicinal Chemistry, 55 (2012) 7920-7939

Divulgación de la invención

Problemas que van a resolverse mediante la invención

Los presentes inventores llevaron a cabo investigaciones sobre diversas sales de compuestos heterocíclicos sustituidos con halógeno con el fin de desarrollar un medicamento excelente para el tratamiento o la prevención de enfermedades que acompañan a fibrosis, enfermedades inmunológicas o inflamatorias, enfermedades del sistema nervioso central o periférico, enfermedades urológicas y enfermedades relacionadas con cáncer. Como resultado, los presentes inventores han encontrado que una nueva sal de compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno que tiene una estructura especifica muestra una excelente acción antagonista de receptores de LPA y es útil como medicamento (en particular, para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades que acompañan a fibrosis, enfermedades inmunológicas o inflamatorias, enfermedades del sistema nervioso central o periférico, enfermedades urológicas y enfermedades relacionadas con cáncer). La presente invención se ha completado basándose en el hallazgo.

La presente invención proporciona una nueva sal de compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno que tiene una potente acción antagonista de receptores de LPA y es útil como medicamento para el tratamiento y/o la prevención (preferiblemente, un medicamento para el tratamiento) de, en particular, enfermedades acompañadas por fibrosis, enfermedades inmunológicas o inflamatorias, enfermedades del sistema nervioso central o periférico, enfermedades urológicas y enfermedades relacionadas con cáncer.

Medios para resolver los problemas

La presente invención proporciona:

(1) Una sal representada por la fórmula general (I):

[Fórm. quím. 1]

R es un átomo de hidrógeno o un grupo metoxilo,

X es un átomo de halógeno,

A se selecciona del grupo que consiste en:

[Fórm. quím. 2]

n es 1 cuando M es un metal alcalino y es 2 cuando M es un metal alcalinotérreo).

(2) La sal según el punto (1), en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

(3) La sal según el punto (1), que es una sal del ácido (R)-1-[4’-(5-cloro-3-{[(1-feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

(4) La sal según el punto (3), en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

(5) La sal según el punto (1), que es una sal del ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

(6) La sal según el punto (5), en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

(7) La sal según el punto (1), que es una sal del ácido (R)-1-{4’-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

(8) La sal según el punto (7), en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

(9) La sal según el punto (1), que es una sal del ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

(10) La sal según el punto (9), en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

(11) La sal según el punto (1), que es una sal del ácido (R)-1-{4’-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

(12) La sal según el punto (11), en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio. (13) Un antagonista de receptores de LPA que comprende la sal según cualquiera de los puntos (1) a (12) como principio activo.

(14) Una composición farmacéutica que comprende la sal según cualquiera de los puntos (1) a (12) como principio activo.

(15) La composición farmacéutica según el punto (14) para el tratamiento o la prevención de una enfermedad que acompaña a fibrosis, una enfermedad inmunológica o inflamatoria, una enfermedad del sistema nervioso periférico o central, una enfermedad urológica o una enfermedad relacionada con cáncer.

Los ejemplos específicos de los compuestos representados por la fórmula general (I) de la presente invención incluyen los compuestos descritos en la tabla 1 a continuación. En la tabla 1, OMe representa un grupo metoxilo, y “racémico” y “(R)-” representan la configuración del átomo de carbono marcado con “*” en la fórmula general (I) a continuación.

[Fórm. quím. 3]

_____ _____

Efectos de la invención

Las sales de compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno de la presente invención que están representadas por la fórmula general (I) tienen una potente acción antagonista de receptores de LPA y, por tanto, son útiles como medicamentos para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades que acompañan a fibrosis, enfermedades inmunológicas o inflamatorias, enfermedades del sistema nervioso central o periférico, enfermedades urológicas y enfermedades relacionadas con cáncer.

Modo para llevar a cabo la invención

A continuación de describirán realizaciones preferidas de cada grupo sustituyente en las sales representadas por la fórmula general (I).

Los ejemplos de los “átomos de halógeno” representados por X incluyen un átomo de flúor, un átomo de cloro, un átomo de bromo y un átomo de yodo.

Preferiblemente, el “átomo de halógeno” representado por X es un átomo de flúor, un átomo de cloro o un átomo de bromo, y más preferiblemente es un átomo de flúor o un átomo de cloro.

Los ejemplos de los “metales alcalinos” representados por M incluyen litio, sodio, potasio, rubidio y cesio, prefiriéndose el sodio y el potasio.

Los ejemplos de los “metales alcalinotérreos” representados por M incluyen magnesio, calcio, estroncio y bario, prefiriéndose el calcio.

En un caso el que las sales de la presente invención representadas por la fórmula general (I) tienen isómeros ópticos, isómeros geométricos e isómeros de rotación, estos isómeros están dentro del alcance de la presente invención. Además, en un caso en el que está presente tautomería prototrópica, estos tautómeros también están dentro del alcance de la presente invención.

En la fórmula general (I), el grupo representado por:

[Fórm. quím. 4]

es preferiblemente el siguiente grupo:

[Fórm. quím. 5]

Las sales de la invención representadas por la fórmula general (I) pueden formar hidratos o solvatos, de los cuales cada uno y sus mezclas también están dentro del alcance de la invención.

Una o más clases de los átomos que constituyen las sales de la presente invención representadas por la fórmula (I) pueden tener isótopos atómicos en una proporción no natural. Los ejemplos de los isótopos atómicos incluyen deuterio (2H), tritio (3H), carbono 14 (14C), flúor 18 (18F), azufre 35 (35S) y yodo 125 (125I). Tales compuestos son útiles como medicamentos de tratamiento o preventivos, reactivos de investigación tales como reactivos de ensayo, y agentes de diagnóstico tales como agentes de obtención de imágenes de diagnóstico in vivo. Todas las variantes isotópicas de las sales de la invención representadas por la fórmula (I) están dentro del alcance de la presente invención independientemente de si son radiactivas o no.

A continuación se muestra un procedimiento general para producir el compuesto de la presente invención. Cada procedimiento específico para producir el compuesto de la presente invención se describirá individualmente con detalle en los ejemplos más adelante.

[Fórm. quím. 6]

(en las fórmulas, R, X, A, M y n son iguales a como se definieron anteriormente en el presente documento, M’ y n’ tienen las mismas definiciones que M y n, respectivamente, Z- es un anión tal como un ion hidróxido, un ion haluro o un ion acetato, y R1 es un grupo protector de ácido carboxílico tal como un grupo alquilo que se desprotege mediante hidrólisis).

Las sales de la presente invención representadas por la fórmula general (I) pueden sintetizarse mediante cualquiera de las etapas 1 a 3 descritas anteriormente.

En la reacción en cada una de las etapas 1 a 18 descritas a continuación, puede usarse cualquier disolvente sin limitación siempre que el disolvente no inhiba la reacción y pueda disolver parte de los materiales de partida en bruto. Los ejemplos de los disolventes incluyen hidrocarburos alifáticos tales como hexano, pentano, heptano, éteres de petróleo y ciclohexano; hidrocarburos aromáticos tales como benceno, tolueno, xileno y etilbenceno; hidrocarburos halogenados tales como diclorometano, cloroformo, tetracloruro de carbono, dicloroetano, clorobenceno y diclorobenceno; éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurano, 1,4-dioxano, dimetoxietano y dimetil éter de dietilenglicol; cetonas tales como acetona, metil etil cetona, metil isobutil cetona y ciclohexanona; ésteres tales como acetato de metilo, acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de isopropilo y acetato de butilo; nitrilos tales como acetonitrilo, propionitrilo, butironitrilo e isobutironitrilo; ácidos carboxílicos tales como ácido acético y ácido propiónico; alcoholes tales como metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, 2-metil-1-propanol, 2-metil-2-propanol y 1,2-propanodiol; amidas tales como formamida, N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, 1-metil-2-pirrolidona, dimetilimidazolona y hexametilfosforotriamida; sulfóxidos tales como dimetilsulfóxido; sulfonas tales como sulfolano; agua; y un disolvente mixto de los mismos. En la reacción en cada una de las etapas 1 a 18 descritas a continuación, la temperatura de reacción es variable dependiendo de condiciones tales como disolventes, materiales de partida en bruto y reactivos, y el tiempo de reacción es variable dependiendo de condiciones tales como disolventes, materiales de partida en bruto, reactivos y temperaturas de reacción.

Etapa 1: el compuesto (1) puede hacerse reaccionar en un disolvente de reacción usando un hidróxido de metal alcalino o metal alcalinotérreo para sintetizar una sal de la fórmula general (I).

El disolvente de reacción es preferiblemente agua o una mezcla de agua/disolvente orgánico, y más preferiblemente es agua, una mezcla de acetonitrilo/agua o una mezcla de acetonitrilo/tetrahidrofurano/agua.

Etapa 2: el compuesto

y el compuesto (2) pueden someterse a un intercambio de bases en un disolvente de reacción para sintetizar una sal de la fórmula general (I).

El disolvente de reacción es preferiblemente agua o una mezcla de agua/disolvente orgánico, y más preferiblemente es agua o una mezcla de acetonitrilo/agua.

Etapa 3: el compuesto (3) puede hidrolizarse en un disolvente de reacción usando un hidróxido de metal alcalino o metal alcalinotérreo para sintetizar una sal de la fórmula general (I).

El disolvente de reacción es preferiblemente agua o una mezcla de agua/disolvente orgánico, y más preferiblemente es una mezcla de 2-propanol/agua o una mezcla de 2-propanol/tetrahidrofurano/agua.

A continuación se describe un procedimiento general para producir un producto intermedio de síntesis del compuesto de la presente invención. Cada procedimiento específico para producir el producto intermedio de síntesis del compuesto de la presente invención se describirá individualmente con detalle en los ejemplos más adelante.

En las rutas de síntesis ilustradas a continuación, R, X, A, M, M’, n, n’, Z- y R1 tienen los mismos significados tal como se describieron anteriormente. L, La y Q son sustituyentes necesarios para la reacción de acoplamiento y, por ejemplo, en un caso en el que L o La es un átomo de cloro, un átomo de bromo, un átomo de yodo o un grupo trifluorometanosulfoniloxilo, etc., Q es ácido borónico, un éster de boronato o un trialquilestaño, etc., y en un caso en el que L o La es ácido borónico, un éster de boronato o un trialquilestaño, etc., Q es un átomo de cloro, un átomo de bromo, un átomo de yodo o un grupo trifluorometanosulfoniloxilo, etc.

[Fórm. quím. 9]

Etapa 4: según un método descrito, por ejemplo, en Tetrahedron, 64 (2008), págs. 9733-9737 o Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 21 (2011), págs. 528-530, el compuesto (4) puede halogenarse con un agente de halogenación en un disolvente de reacción para sintetizar el compuesto (5).

Los ejemplos preferidos de disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, nitrilos, ácidos carboxílicos, amidas, sulfóxidos, agua y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más la N,N-dimetilformamida.

Los ejemplos de los agentes de halogenación incluyen yodo, N-yodosuccinimida, bromo, N-bromosuccinimida, 1,2-dibromoetano, 1,2-dibromo-1,1,2,2-tetrafluoroetano, cloro, N-clorosuccinimida, difluoruro de xenón, N-fluorobencenosulfonimida y bis(tetrafluoroborato) de N-fluoro-N’-(clorometil)trietilendiamina.

Como alternativa, el compuesto (4) puede convertirse en un anión en un disolvente de reacción usando una base y posteriormente tratarse con un agente de halogenación para sintetizar el compuesto (5) según un método descrito, por ejemplo, en Tetrahedron Letters, 51 (2010), págs. 4526-4529 o Journal of Medicinal Chemistry, 54 (2011), págs.

2687-2700.

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres y un disolvente mixto de los mismos. Se prefieren más los éteres, los hidrocarburos alifáticos y un disolvente mixto de los mismos.

Los ejemplos de las bases incluyen alquil-litios tales como n-butil-litio, sec-butil-litio y ferc-butil-litio; amiduros de litio tales como diisopropilamiduro de litio y 2,2,6,6-tetrametilpiperiduro de litio; reactivos de Grignard tales como bromuro de etilmagnesio, cloruro de etilmagnesio, cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de fenilmagnesio; amiduros de magnesio tales como diisopropilamiduro de cloruro de magnesio y 2,2,6,6-tetrametilpiperiduro de cloruro de magnesio; y bases de disilazano tales como 1,1,1,3,3,3-hexametildisilazanuro de litio y 1,1,1,3,3,3-hexametildisilazanuro de potasio.

Los ejemplos de los agentes de halogenación incluyen yodo, N-yodosuccinimida, bromo, N-bromosuccinimida, tetrabromuro de carbono, 1,2-dibromoetano, 1,2-dibromo-1,1,2,2-tetrafluoroetano, cloro, N-clorosuccinimida, tetracloruro de carbono, difluoruro de xenón, N-fluorobencenosulfonimida y bis(tetrafluoroborato) de N-fluoro-N’-(clorometil)trietilendiamina.

[Fórm. quím. 10]

Etapa 5: según un método descrito, por ejemplo, en Tetrahedron, 58 (2002), págs. 9633-9695, el compuesto (6) y el compuesto (7) pueden hacerse reaccionar en un disolvente de reacción en presencia de un catalizador de acoplamiento, un ligando y/o una base para sintetizar el compuesto (8).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, éteres, cetonas, ésteres, nitrilos, alcoholes, amidas, sulfóxidos, sulfonas, agua y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más una mezcla de 1,4-dioxano/agua.

Los ejemplos de los catalizadores de acoplamiento incluyen catalizadores de paladio tales como tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II), dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II), tris(dibencilidenacetona)dipaladio (0) y acetato de paladio (II); y catalizadores de níquel tales como dicloruro de bis(trifenilfosfina)níquel (II).

Los ejemplos de los ligandos, presentes algunas veces en los propios catalizadores de acoplamiento, incluyen trifenilfosfina, [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno], dibencilidenacetona, trifenilarsina, tri(o-tolil)fosfina, tri-ferc-butilfosfina y triciclohexilfosfina.

Los ejemplos de las bases incluyen sales de fluoruro tales como fluoruro de potasio y fluoruro de cesio; sales de carbonato tales como hidrogenocarbonato de sodio, carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de cesio y carbonato de talio; hidróxidos de metales tales como hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de bario e hidróxido de talio; sales de fosfato tales como fosfato de potasio; y bases orgánicas tales como trietilamina y diisopropiletilamina. Se prefiere el carbonato de sodio.

[Fórm. quím. 11]

Etapa 6: según un método descrito, por ejemplo, en Journal of the American Chemical Society, 129 (2007), págs.

4595-4605, el compuesto (8) puede hacerse reaccionar en un disolvente de reacción en presencia de un catalizador de paladio, un ligando, un reactivo de ácido borónico y/o una base para sintetizar el compuesto (9). Por ejemplo, L representa un átomo de cloro, un átomo de bromo, un átomo de yodo o un grupo trifluorometanosulfoniloxilo, y Q representa ácido borónico o un éster de boronato.

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, éteres, cetonas, ésteres, nitrilos, alcoholes, amidas, sulfóxidos, sulfonas, agua y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más el 1,4-dioxano.

Los ejemplos de los catalizadores de paladio incluyen tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0), aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II), dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II), tris(dibencilidenacetona)dipaladio (0) y acetato de paladio (II). Se prefieren más el aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) y el acetato de paladio (II).

Los ejemplos de los ligandos, presentes algunas veces en los propios catalizadores de acoplamiento, incluyen trifenilfosfina, [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno], dibencilidenacetona, trifenilarsina, tri(o-tolil)fosfina, tri-íerc-butilfosfina y triciclohexilfosfina. Se prefiere la triciclohexilfosfina.

Los ejemplos de los reactivos de ácido borónico incluyen 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) y 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano.

Los ejemplos de las bases incluyen acetato de potasio y acetato de sodio.

Como alternativa, según un método descrito, por ejemplo, en Angewandte Chemie - International Edition, 45 (2006), págs. 1404-1408, el compuesto (8) en el que L es un átomo de cloro, un átomo de bromo o un átomo de yodo puede tratarse en un disolvente de reacción para someter el grupo de halógeno L a intercambio de halógeno-metal usando una base, y posteriormente el producto puede tratarse con un reactivo de ácido borónico para sintetizar el compuesto (9).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, amidas, sulfóxidos, sulfonas y un disolvente mixto de los mismos. Se prefieren más los éteres, los hidrocarburos alifáticos y un disolvente mixto de los mismos.

Los ejemplos de las bases incluyen alquil-litios tales como n-butil-litio, sec-butil-litio y terc-butil-litio; y reactivos de Grignard tales como bromuro de etilmagnesio, cloruro de etilmagnesio, cloruro de isopropilmagnesio y cloruro de fenilmagnesio.

Los ejemplos de los reactivos de ácido borónico incluyen borato de trimetilo, borato de triisopropilo, borato de trihexadecilo y 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano.

[Fórm. quím. 12]

[Fórm. quim. 13]

Etapa 7 y etapa 8: el compuesto (5) o el compuesto (11) y el compuesto (9) pueden hacerse reaccionar de manera similar a la etapa 5 para sintetizar el compuesto (10) o el compuesto (12), respectivamente.

[Fórm. quím. 14]

Etapa 10: en un disolvente de reacción o sin disolvente, se permite que actúe un ácido sobre el compuesto (13) para desproteger el compuesto, sintetizándose de este modo el compuesto (14).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, cetonas, ésteres, nitrilos, ácidos carboxílicos, alcoholes, amidas, sulfóxidos, sulfonas, agua y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más el cloruro de metileno.

Los ejemplos de los ácidos incluyen ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico y ácido sulfúrico; ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido trifluoroacético y ácido tricloroacético; y ácidos sulfónicos tales como ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico y ácido p-toluenosulfónico, prefiriéndose el ácido trifluoroacético.

[Fórm. quím. 16]

Etapa 11: en un disolvente de reacción, el compuesto (10) se hidroliza en presencia de un ácido o una base para sintetizar el compuesto (15).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, cetonas, nitrilos, ácidos carboxílicos, alcoholes, amidas, sulfóxidos, sulfonas, agua y un disolvente mixto de los mismos. Se prefieren más la mezcla de etanol/tetrahidrofurano/agua y la mezcla de 2-propanol/tetrahidrofurano/agua.

Los ejemplos de los ácidos y las bases incluyen ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico y ácido sulfúrico; ácidos orgánicos tales como ácido acético y ácido trifluoroacético; ácidos sulfónicos tales como ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico y ácido p-toluenosulfónico; hidróxidos de metal alcalino tales como hidróxido de litio, hidróxido de sodio e hidróxido de potasio; y sales de carbonato de metal alcalino tales como carbonato de potasio y carbonato de sodio. Se prefiere el uso de una base, y se prefiere más el uso de hidróxido de litio o hidróxido de sodio.

[Fórm. quím. 17]

Etapa 12: en un disolvente de reacción, el compuesto (15) puede condensarse con trimetilsililetanol usando un agente de condensación en presencia o ausencia de una base y en presencia o ausencia de un aditivo, sintetizándose de este modo el compuesto (16).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, cetonas, ésteres, nitrilos, amidas, sulfóxidos, sulfonas y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más la N,N-dimetilformamida.

Los ejemplos de las bases incluyen sales de carbonato tales como hidrogenocarbonato de sodio, carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de cesio y carbonato de talio; piridinas tales como piridina, 2,6-lutidina y 4-picolina; y bases orgánicas tales como trietilamina y diisopropiletilamina. Se prefiere la diisopropiletilamina.

Los ejemplos de los agentes de condensación incluyen agentes de condensación de carbodiimida tales como N,N’-diciclohexilcarbodiimida, N,N’-diisopropilcarbodiimida, clorhidrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida y sal de meto-p-toluenosulfonato de N-ciclohexil-N’-(2-morfolinoetil)carbodiimida; agentes de condensación de imidazol tales como N,N’-carbonildiimidazol; agentes de condensación de triazina tales como cloruro de 4-(4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolinio y trifluorometanosulfonato de (4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-(2-octoxi-2-oxoetil)dimetilamonio; agentes de condensación de fosfonio tales como sal de hexafluorofosfato de 1H-benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio, sal de hexafluorofosfato de 1H-benzotriazol-1-iloxitripirrolidinofosfonio y sal de hexafluorofosfato de clorotripirrolidinofosfonio; y agentes de condensación de uronio tales como sal de hexafluorofosfato de ({[(1-ciano-2-etoxi-2-oxoetiliden)amino]oxi}-4-morfolinometilen)dimetilamonio, sal de hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio, sal de hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio, sal de tetrafluoroborato de O-(N-succinimidil)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio y sal de tetrafluoroborato de O-(3,4-dihidro-4-oxo-1,2,3-benzotriazin-3-il)-N,N-N’,N’-tetrametiluronio, prefiriéndose la sal de hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio.

Los ejemplos de los aditivos incluyen benzotriazoles tales como 1-hidroxibenzotriazol y 1-hidroxiazabenzotriazol; piridinas tales como N,N-dimetilaminopiridina; y combinaciones de los mismos. Se prefiere la N,N-dimetilaminopiridina.

[Fórm. quím. 18]

Etapa 13

Etapa 13: según un método descrito, por ejemplo, en Tetrahedron Letters, 47 (2006), págs. 5261-5264, el compuesto (17) puede reducirse con un agente reductor en un disolvente de reacción para sintetizar el compuesto (18).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, ésteres, nitrilos, alcoholes, amidas, sulfóxidos, sulfonas, agua y un disolvente mixto de los mismos.

Los ejemplos de los agentes reductores incluyen borohidruros tales como borohidruro de litio, borohidruro de sodio, borohidruro de potasio y trimetoxiborohidruro de sodio; e hidruros de aluminio tales como hidruro de litio y aluminio, hidruro de sodio y aluminio, hidruro de diisobutilaluminio e hidruro de litio y trimetoxialuminio.

El compuesto (18) ópticamente activo puede sintetizarse usando (R) o (S)-5,5-difenil-2-metil-3,4-propan-1,3,2-oxazaborolidina, etc., según un método descrito, por ejemplo, en Journal of Organic Chemistry, 56 (1991), págs. 763­ 769.

La pureza óptica del compuesto (18) obtenido mediante el método anterior puede aumentarse mediante un método conocido, tal como usar una enzima o un agente de resolución o mediante una combinación de tales métodos. [Fórm. quím. 19]

Etapa 14 y etapa 15: en un disolvente de reacción o sin disolvente, el compuesto (10) o el compuesto (16) se someten a una transposición de Hofmann en presencia o ausencia de una base usando el compuesto (18) y un agente oxidante según un método descrito, por ejemplo, en Organic Synthesis, 66 (1988), págs. 132-137, sintetizándose de este modo el compuesto (3) o el compuesto (19), respectivamente.

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, cetonas, ésteres, nitrilos, amidas, sulfóxidos, sulfonas y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más el tolueno.

Los ejemplos de las bases incluyen aminas orgánicas tales como trietilamina y diisopropiletilamina; y piridinas tales como piridina, 2,6-lutidina y 4-picolina. Se prefiere la piridina.

Los ejemplos de los agentes oxidantes incluyen compuestos de yodo de alta valencia tales como [bis(acetoxi)yodo]benceno, [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno y yodosilbenceno, prefiriéndose el [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno.

[Fórm. quím. 21]

Etapa 16: en un disolvente de reacción o sin disolvente, el compuesto (14) puede someterse a una transposición de Curtius usando el compuesto (18), aziduro de difenilfosforilo y una base según un método descrito, por ejemplo, en Journal of the American Chemical Society, 94 (1972), págs. 6203-6205, sintetizándose de este modo el compuesto (3).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, cetonas, ésteres, nitrilos, amidas, sulfóxidos, sulfonas y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más el tolueno.

Los ejemplos de las bases incluyen aminas orgánicas tales como trietilamina y diisopropiletilamina, prefiriéndose la trietilamina.

[Fórm. quím. 22]

[Fórm. quím. 23]

Etapa 18: en un disolvente de reacción, el compuesto (19) puede desprotegerse con un reactivo de desprotección para sintetizar el compuesto (1).

Los ejemplos preferidos de los disolventes de reacción incluyen hidrocarburos alifáticos, hidrocarburos aromáticos, hidrocarburos halogenados, éteres, cetonas, ésteres, nitrilos, ácidos carboxílicos, alcoholes, amidas, sulfóxidos, sulfonas, agua y un disolvente mixto de los mismos. Se prefiere más la N,N-dimetilformamida.

Los ejemplos de reactivos de desprotección incluyen ácido fluorhídrico; sales inorgánicas de fluoruro tales como fluoruro de potasio; sales orgánicas de fluorhidrato tales como sal de fluorhidrato de piridina, sal de fluorhidrato de trietilamina y sal de fluorhidrato de 1-hexadecano; fluoruros de amonio tales como fluoruro de tetraetilamonio y fluoruro de tetrabutilamonio; y sales de difluorotrimetilsilicato tal como difluorotrimetilsilicato de tris(dimetilamino)sulfonio. Se prefiere el fluoruro de tetrabutilamonio.

El compuesto de la fórmula

puede sintetizarse tratando el compuesto de la fórmula (1) según la etapa 1 usando M’n+(OH-)n'.

El compuesto objetivo producido en cada reacción puede recuperarse del líquido de mezcla de reacción mediante un método habitual. En el caso en el que, por ejemplo, el compuesto objetivo se precipita, deposita o cristaliza completa o parcialmente en el líquido de mezcla de reacción, el sólido que contiene el compuesto objetivo puede obtenerse filtrando el líquido de mezcla de reacción. Cuando el compuesto objetivo se disuelve completa o parcialmente en el líquido de mezcla de reacción, el compuesto objetivo puede obtenerse eliminando el disolvente (por ejemplo, mediante liofilización) directamente o después de que se retiren por filtración las materias insolubles. Como alternativa, el compuesto objetivo puede obtenerse neutralizando de manera apropiada el líquido de mezcla de reacción, retirando por filtración cualquier materia insoluble, añadiendo un disolvente orgánico inmiscible en agua tal como acetato de etilo, lavando el líquido de mezcla con agua, separando la fase orgánica que contiene el compuesto objetivo, secando la fase orgánica con un desecante tal como sulfato de magnesio anhidro o sulfato de sodio anhidro y evaporando el disolvente por destilación.

Cuando sea necesario, el compuesto objetivo obtenido puede separarse y purificarse mediante una combinación apropiada de métodos habituales tales como lavado con agua, un disolvente orgánico o una mezcla de tales disolventes; recristalización; reprecipitación; y métodos usados habitualmente para la separación y purificación de compuestos orgánicos (por ejemplo, métodos de cromatografía en columna de adsorción que usan un portador tal como gel de sílice o alúmina; métodos de cromatografía de intercambio iónico; métodos de cromatografía en columna de fase normal o de fase inversa (preferiblemente, cromatografía de líquidos de alta resolución) que usan gel de sílice o gel de sílice alquilada; y métodos de cromatografía en columna de fase normal o de fase inversa (preferiblemente, cromatografía de líquidos de alta resolución) que usan un relleno en el que se fijan moléculas ópticamente activas o en el que el gel de sílice se recubre con moléculas ópticamente activas).

Cuando las sales de la presente invención representadas por la fórmula general (I) se usan como medicamentos, las propias sales (como componente) pueden administrarse tal cual o pueden administrarse por vía oral o por vía parenteral (tal como mediante administración intravenosa, administración intramuscular, administración intraperitoneal, administración percutánea, administración intratraqueal, administración intracutánea o administración subcutánea) en formas tales como comprimidos, cápsulas, polvos, jarabes, gránulos, gránulos finos, pastillas, suspensiones, emulsiones, preparaciones de absorción percutánea, supositorios, pomadas, lociones, productos inhalados y productos de inyección, que se fabrican mezclando las sales con excipientes, diluyentes, etc., farmacológicamente aceptables apropiados.

Estas preparaciones se fabrican mediante métodos conocidos que usan aditivos tales como excipientes, lubricantes, aglutinantes, disgregantes, emulsionantes, estabilizantes, agentes aromatizantes y diluyentes.

Los ejemplos de los excipientes incluyen excipientes orgánicos y excipientes inorgánicos. Los ejemplos de los excipientes orgánicos incluyen derivados de azúcar tales como lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y sorbitol; derivados de almidón tales como almidón de maíz, almidón de patata, a-almidón y dextrina; derivados de celulosa tales como celulosa cristalina; goma arábiga; dextrano y pululano. Los ejemplos de los excipientes inorgánicos incluyen ácido silícico anhidro ligero; y sales de sulfato tales como sulfato de calcio.

Los ejemplos de los lubricantes incluyen ácido esteárico; una sal de metal del ácido esteárico tal como estearato de calcio y estearato de magnesio; talco; sílice coloidal; ceras tales como cera de abejas o cera de esperma de ballena; ácido bórico; ácido adípico; sales de sulfato tales como sulfato de sodio; glicol; ácido fumárico; benzoato de sodio; D,L-leucina; laurilsulfato de sodio; ácidos silícicos tales como anhídrido silícico o ácido silícico hidratado; y los derivados de almidón enumerados en los excipientes anteriores.

Los ejemplos de los aglutinantes incluyen hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, polivinilpirrolidona, macrogol y los compuestos enumerados en los excipientes anteriores.

Los ejemplos de los disgregantes incluyen derivados de celulosa tales como hidroxipropilcelulosa de baja sustitución, carboximetilcelulosa, carboximetilcelulosa de calcio y carboximetilcelulosa cálcica reticulada internamente; polivinilpirrolidona reticulada; y almidón modificado químicamente o derivados de celulosa tales como carboximetilalmidón y carboximetilalmidón sódico.

Los ejemplos de los emulsionantes incluyen arcillas coloidales tales como bentonita y goma de abejas; tensioactivos aniónicos tales como laurilsulfato de sodio; tensioactivos catiónicos tales como cloruro de benzalconio; y tensioactivos no iónicos tales como alquil éter de polioxietileno, éster de ácido graso de polioxietileno-sorbitano y éster de ácido graso de sacarosa.

Los ejemplos de los estabilizantes incluyen ésteres de p-hidroxibenzoato tales como metilparabeno y propilparabeno; alcoholes tales como clorobutanol, alcohol bencílico y alcohol feniletílico; cloruro de benzalconio; fenoles tales como fenol y cresol; timerosal; anhídrido acético; y ácido sórbico.

Los ejemplos de los agentes aromatizantes incluyen edulcorantes tales como sacarina sódica y aspartamo; acidulantes tales como ácido cítrico, ácido málico y ácido tartárico; y aromas tales como mentol, extracto de limón y extracto de naranja.

Los diluyentes son compuestos usados normalmente para dilución. Los ejemplos de los mismos incluyen lactosa, manitol, glucosa, sacarosa, sulfato de calcio, hidroxipropilcelulosa, celulosa microcristalina, agua, etanol, polietilenglicol, propilenglicol, glicerol, almidón, polivinilpirrolidona y mezclas de los mismos.

La dosis de las sales de la presente invención representadas por la fórmula general (I) puede variar dependiendo de condiciones tales como síntomas, edades y pesos corporales de los pacientes. En el caso de administración oral, las dosis de límite inferior y superior por administración pueden ser de 0,001 mg/kg (preferiblemente 0,01 mg/kg) y 20 mg/kg (preferiblemente 10 mg/kg), respectivamente. En el caso de administración parenteral, las dosis de límite inferior y superior por administración pueden ser de 0,0001 mg/kg (preferiblemente 0,0005 mg/kg) y 10 mg/kg (preferiblemente 5 mg/kg), respectivamente. En ambos casos, el número de administraciones para los adultos puede ser de 1 a 6 al día dependiendo de los síntomas.

Ejemplos

La presente invención se describirá con mayor detalle a continuación al presentar los ejemplos (ejemplos 1 a 15), ejemplos de referencia (ejemplos de referencia 1 a 32), ejemplos de prueba (ejemplos de prueba 1 a 8) y ejemplos de preparación (1 a 3). Estos ejemplos sirven únicamente para ayudar a comprender la presente invención y no pretenden limitar el alcance de la presente invención.

De las propiedades en los ejemplos y ejemplos de referencia, los valores de Rf son valores medidos con un cromatógrafo de capa fina (Merck Co., gel de sílice para placa de CCF ^{6 0} F²⁵⁴ (nombre comercial)). Los disolventes para el desarrollo (y su razón en volumen) se describen entre paréntesis.

El término columna de COOH en cromatografía en columna de gel de sílice indica una columna rellena previamente con de gel de sílice Chromatorex Q-PACK COOH (marca registrada) de Fuji Silysia Chemical Ltd.

Se usó agua ultrapura de Wako Pure Chemical Industries, Ltd. (214-01301).

En el caso en el que se obtuvo una pluralidad de valores en el espectro de masas debido a la presencia de isótopos, únicamente se describe el valor de m/z más pequeño. DUIS en la espectroscopía de masas es un modo de ionización mixto de ESI y APCI.

En las estructuras químicas, Me indica un grupo metilo a menos que se especifique de otro modo.

(Ejemplo 1)

(R)-1 -[4’-(5-Cloro-3-{[(1 -feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]cidopropanocarboxilato de sodio (compuesto n.° I-2)

[Fórm. quím. 24]

En un baño de hielo y mientras se realizaba agitación, se añadieron 2,00 ml (2,00 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 1 N a una suspensión en acetonitrilo (80 ml) de 1,10 g (2,00 mmol) de ácido (R)-1-[4’-(5-cloro-3-{[(1-feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 29. Después de eso, se añadió agua ultrapura (6 ml) y se sometió la mezcla a ultrasonicación para dar una disolución uniforme, que luego se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Se añadió adicionalmente una pequeña cantidad de agua ultrapura al líquido de mezcla de reacción. Se eliminó el disolvente por liofilización y se secó el residuo mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 1,08 g (1,89 mmol, rendimiento del 95%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 570 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,44 (1H, s a), 7,43-7,22 (10H, m), 7,21-7,14 (2H, m), 7,08 (1H, dd, J = 7,8, 1,4 Hz), 5,75 (1H, q, J = 6,1 Hz), 3,73 (3H, s), 1,56-1,38 (3H, m), 1,16 (2H, dd, J = 5,6, 2,6 Hz), 0,66 (2H, dd, J = 5,7, 2,7 Hz).

(Ejemplo 2)

(R)-1 -[4’-(5-Cloro-3-{[(1 -feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxilato de potasio (compuesto n.° I-4)

[Fórm. quím. 25]

Mientras se realizaba agitación, se añadieron 0,500 ml (0,500 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de potasio 1 N a una suspensión en acetonitrilo (20 ml)-agua ultrapura (1,5 ml) de 275 mg (0,501 mmol) de ácido (R)-1-[4’-(5-cloro-3-{[(1 -feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 29, preparando de este modo una disolución uniforme. Después de eso, se añadió agua ultrapura (6 ml) y se sometió la mezcla a ultrasonicación. Se permitió que estuviese en reposo el líquido de mezcla de reacción resultante a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se añadió adicionalmente una pequeña cantidad de agua ultrapura. Se eliminó el disolvente por liofilización y se secó el residuo mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 235 mg (0,401 mmol, rendimiento del 80%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 586 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,44 (1H, s a), 7,43-7,14 (12H, m), 7,08 (1H, dd, J = 7,8, 1,4 Hz), 5,75 (1H, q, J = 6,2 Hz), 3,73 (3H, s), 1,54-1,39 (3H, m), 1,11 (2H, dd, J = 5,8, 2,7 Hz), 0,60 (2H, dd, J = 5,8, 2,6 Hz). (Ejemplo 3)

(R)-1 -[4’-(5-Cloro-3-{[(1 -feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxilato de semicalcio (1/2 calcio) (compuesto n.° I-6)

[Fórm. quím. 26]

Se añadieron 0,180 ml (0,090 mmol) de una disolución acuosa de acetato de calcio 0,5 M a una disolución en agua ultrapura (25 ml) de 101 mg (0,177 mmol) de (R)-1-[4’-(5-cloro-3-{[(1-feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxilato de sodio obtenido en el ejemplo 1. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 días. Se filtró la suspensión resultante a través de un filtro de membrana (Millipore). Se lavó el residuo con agua ultrapura y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 40,4 mg (0,071 mmol, rendimiento del 40%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 1133 [2M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,42 (1H, s a), 7,41-7,25 (10H, m), 7,19-7,15 (2H, m), 7,07 (1H, dd, J = 7,9, 1,3 Hz), 5,75 (1H, q, J = 6,2 Hz), 3,72 (3H, s), 1,54-1,38 (3H, m), 1,38-1,22 (2H, m), 0,90-0,80 (2H, m).

(Ejemplo 4)

(R)-1-{4’-[5-Cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de sodio (compuesto n.° I-8)

[Fórm. quím. 27]

En un baño de hielo y mientras se realizaba agitación, se añadió 1,00 ml (1,00 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 1 N a una suspensión en acetonitrilo (40 ml)-agua ultrapura (3 ml) de 584 mg (1,00 mmol) de ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 32, preparando de este modo una disolución uniforme. Se agitó la disolución a esa temperatura durante 30 minutos. Se añadió adicionalmente una pequeña cantidad de agua ultrapura al líquido de mezcla de reacción. Se eliminó el disolvente por liofilización y se secó el residuo mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 534 mg (0,882 mmol, rendimiento del 88%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 606 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,56 (1H, s a), 7,36-7,14 (10H, m), 7,08 (1H, dd, J = 7,8, 1,4 Hz), 5,91 (1H, q, J = 6,6 Hz), 3,75 (3H, s), 1,61-1,36 (3H, m), 1,16 (2H, dd, J = 5,6, 2,8 Hz), 0,66 (2H, dd, J = 5,6, 2,6 Hz). (Ejemplo 5)

(R)-1-{4’-[5-Cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de potasio (compuesto n.° I-10)

[Fórm. quím. 28]

En un baño de hielo y mientras se realizaba agitación, se añadieron 0,500 ml (0,500 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de potasio 1 N a una disolución uniforme en acetonitrilo (20 ml)-agua ultrapura (1,5 ml) de 292 mg (0,500 mmol) de ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 32. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 1 hora. Se añadió adicionalmente una pequeña cantidad de agua ultrapura al líquido de mezcla de reacción. Se eliminó el disolvente por liofilización y se secó el residuo mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 276 mg (0,444 mmol, rendimiento del 89%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 622 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,56 (1H, s a), 7,33-7,14 (10H, m), 7,08 (1H, dd, J = 7,8, 1,1 Hz), 5,91 (1H, q, J = 6,1 Hz), 3,75 (3H, s), 1,58-1,40 (3H, m), 1,12 (2H, dd, J = 5,7, 2,7 Hz), 0,61 (2H, dd, J = 5,6, 2,5 Hz). (Ejemplo 6)

(R)-1-{4’-[5-Cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de semicalcio (compuesto n.° I-12)

[Fórm. quím. 29]

Se añadieron 0,170 ml (0,085 mmol) de una disolución acuosa de acetato de calcio 0,5 M a una disolución uniforme en agua ultrapura (25 ml) de 100 mg (0,165 mmol) de (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de sodio obtenido en el ejemplo 4. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 días. Se filtró la suspensión resultante a través de un filtro de membrana (Millipore). Se lavó el residuo con agua ultrapura y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 47,8 mg (0,079 mmol, rendimiento del 48%) como un sólido de color amarillo claro.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 1205 [2M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,55 (1H, s a), 7,38-7,14 (10H, m), 7,07 (1H, dd, J = 7,8, 1,6 Hz), 5,90 (1H, q, J = 6,4 Hz), 3,75 (3H, s), 1,60-1,40 (3H, m), 1,40-1,20 (2H, m), 0,91-0,78 (2H, m).

(Ejemplo 7)

(R)-1 -{4’-[3-({[1 -(2-Clorofenil)etoxi]carbonN}amino)-5-fluorotiofen-2-N]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-N}ddopropanocarboxNato de sodio (compuesto n.° I-14)

[Fórm. quím. 30]

En un baño de hielo y mientras se realizaba agitación, se añadieron 2,00 ml (2,00 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 1 N a una suspensión en acetonitrilo (80 ml)-agua ultrapura (6 ml) de 1,13 g (2,00 mmol) de ácido (R)-1-{4’-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 31. Se sometió la mezcla a ultrasonicación para dar una disolución uniforme, que luego se permitió que estuviese en reposo a esa temperatura durante 3 horas. Se añadió adicionalmente una pequeña cantidad de agua ultrapura al líquido de mezcla de reacción. Se eliminó el disolvente por liofilización y se secó el residuo mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 1,15 g (1,96 mmol, rendimiento del 98%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 588 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,55 (1H, s a), 7,62-7,22 (9H, m), 7,14-7,20 (1H, m), 7,07 (1H, dd, J = 7,8, 1,2 Hz), 6,84 (1H, d, J = 2,5 Hz), 6,00 (1H, q, J = 5,6 Hz), 3,76 (3H, s), 1,59-1,35 (3H, m), 1,16 (2H, dd, J = 5,7, 2,7 Hz), 0,66 (2H, dd, J = 5,6, 2,6 Hz)

(Ejemplo 8)

(R)-1 -{4’-[3-({[1 -(2-Clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de potasio (compuesto n.° I-16)

[Fórm. quím. 31]

A temperatura ambiente, se añadieron 0,500 ml (0,500 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de potasio 1 N a una suspensión en acetonitrilo (20 ml)-agua ultrapura (1,5 ml) de 284 mg (0,501 mmol) de ácido (R)-1-{4’-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 31. Se sometió la mezcla a ultrasonicación para dar una disolución uniforme, que luego se permitió que estuviese en reposo a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió adicionalmente una pequeña cantidad de agua ultrapura al líquido de mezcla de reacción. Se eliminó el disolvente por liofilización y se secó el residuo mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 270 mg (0,447 mmol, rendimiento del 89%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 604 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DIVISOR) 5: 9,56 (1H, s a), 7,60-7,21 (9H, m), 7,19-7,14 (1H, m), 7,07 (1H, dd, J = 7,9, 1,4 Hz), 6,84 (1H, d, J = 2,4 Hz), 6,00 (1H, q, J = 6,4 Hz), 3,76 (3H, s), 1,55-1,37 (3H, m), 1,12 (2H, dd, J = 5,8, 2,7 Hz), 0,61 (2H, dd, J = 5,8, 2,6 Hz).

(Ejemplo 9)

(R)-1 -{4’-[3-({[1 -(2-Clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxilato de semicalcio (compuesto n.° I-18)

[Fórm. quím. 32]

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 0,500 ml (0,500 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 1 N a una suspensión en acetonitrilo (20ml)-agua ultrapura (1,5 ml) de 282 mg (0,498 mmol) de ácido (R)-1-{4’-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 31. Se sometió la mezcla a ultrasonicación para dar una disolución uniforme. A continuación, se añadieron 0,500 ml (0,085 mmol) de una disolución acuosa de acetato de calcio 0,5 M al líquido de mezcla de reacción y se realizó agitación a temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó por destilación el acetonitrilo del líquido de mezcla de reacción y se añadió agua ultrapura. Se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 18 horas. Se filtró la suspensión resultante, y se lavó el residuo con agua ultrapura y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 213 mg (0,365 mmol, rendimiento del 73%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 1169 [2M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,54 (1H, s a), 7,58-7,25 (9H, m), 7,17 (1H, d, J = 1,3 Hz), 7,07 (1H, dd, J = 7,8, 1,1 Hz), 6,84 (1H, d, J = 2,5 Hz), 6,00 (1H, q, J = 6,5 Hz), 3,75 (3H, s), 1,57-1,38 (3H, m), 1,38-1,18 (2H, m), 0,90-0,79 (2H, m).

(Ejemplo 10)

(R)-1-{4’-[5-Cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de sodio (compuesto n.° I-20)

[Fórm. quím. 33]

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 2,00 ml (2,00 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 1 N a una disolución uniforme en acetonitrilo (80 ml) de 1,05 g (2,00 mmol) de ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1 -(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 28. Se sometió la mezcla a ultrasonicación y se agitó a esa temperatura durante 4 horas. Se filtró la suspensión resultante, y se lavó el residuo con las aguas madres y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 1,06 g (1,94 mmol, rendimiento del 97%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 546 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,34 (1H, s a), 7,70-7,65 (2H, m), 7,57-7,40 (6H, m), 7,35-7,30 (2H, m), 7,23-7,16 (1H, m), 7,16-7,08 (1H, m), 5,82 (1H, q, J = 6,4 Hz), 1,61-1,40 (3H, m), 1,18 (2H, dd, J = 5,8, 2,8 Hz), 0,68 (2H, dd, J = 5,7, 2,7 Hz).

(Ejemplo 11)

(R)-1-{4’-[5-Cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxilato de potasio (compuesto n.° I-22)

[Fórm. quím. 34]

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 0,500 ml (0,500 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de potasio 1 N a una disolución uniforme en acetonitrilo (20 ml) de 262 mg (0,500 mmol) de ácido (R)-1 -{4’-[5-cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 28. Se sometió la mezcla a ultrasonicación y se agitó a temperatura ambiente durante 3,5 horas. Se filtró la suspensión resultante a través de un filtro de membrana (Millipore). Se lavó el residuo con las aguas madres y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 220 mg (0,392 mmol, rendimiento del 78%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 562 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,34 (1H, s a), 7,71-7,64 (2H, m), 7,58-7,39 (6H, m), 7,33-7,27 (2H, m), 7,24-7,16 (1H, m), 7,16-7,07 (1H, m), 5,82 (1H, q, J = 6,5 Hz), 1,61-1,41 (3H, m), 1,13 (2H, dd, J = 5,8, 2,7 Hz), 0,62 (2H, dd, J = 5,8, 2,7 Hz).

(Ejemplo 12)

(R)-1-{4’-[5-Cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de semicalcio (compuesto n.° I-24)

[Fórm. quím. 35]

Se añadieron 0,190 ml (0,095 mmol) de una disolución acuosa de acetato de calcio 0,5 M a una disolución uniforme en agua ultrapura (20 ml)-acetonitrilo (5 ml) de 104 mg (0,190 mmol) de (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de sodio obtenido en el ejemplo 10. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 días. Se filtró la suspensión resultante a través de un filtro de membrana (Millipore). Se lavó el residuo con pequeñas cantidades de acetonitrilo y agua ultrapura y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 47,8 mg (0,079 mmol, rendimiento del 48%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 1085 [2M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,32 (1H, s a), 7,74-7,64 (2H, m), 7,59-7,49 (5H, m), 7,47-7,40 (1H, m), 7,40-7,34 (2H, m), 7,22-7,16 (1H, m), 7,16-7,08 (1H, m), 5,82 (1H, q, J = 6,4 Hz), 1,62-1,40 (3H, m), 1,40-1,20 (2H, m), 0,90-0,78 (2H, m).

(Ejemplo 13)

(R)-1 -{4’-[5-Fluoro-3-({[1 -(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxilato de sodio (compuesto n.° I-26)

[Fórm. quím. 36]

En un baño de hielo y mientras se realizaba agitación, se añadieron 2,00 ml (2,00 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 1 N a una suspensión en acetonitrilo (80 ml)-agua ultrapura (6 ml) de 1,04 g (2,00 mmol) de ácido (R)-1 -{4’-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 30. Se añadieron adicionalmente acetonitrilo (80 ml) y tetrahidrofurano (50 ml) al líquido de mezcla de reacción, y se sometió la mezcla resultante a ultrasonicación a temperatura ambiente durante 30 minutos y se agitó a esa temperatura durante 25 horas. Se filtró la suspensión resultante y se secó el residuo mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 760 mg (1,40 mmol, rendimiento del 70%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 544 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,33 (1H, s a), 7,69-7,63 (2H, m), 7,54-7,39 (5H, m), 7,35-7,29 (2H, m), 7,16 (1H, d, J = 1,9 Hz), 6,83 (1H, s a), 5,74 (1H, q, J = 6,5 Hz), 2,17 (3H, s), 1,59-1,43 (3H, m), 1,18 (2H, dd, J = 5,8, 2,8 Hz), 0,68 (2H, dd, J = 5,8, 2,8 Hz).

(Ejemplo 14)

(R)-1 -{4’-[5-Fluoro-3-({[1 -(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de potasio (compuesto n.° I-28)

[Fórm. quím. 37]

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 0,500 ml (0,500 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de potasio 1 N a una disolución uniforme en acetonitrilo (20 ml)-tetrahidrofurano (5 ml) de 260 mg (0,499 mmol) de ácido (R)-1-{4’-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4il}cidopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 30. Se sometió la mezcla a ultrasonicación y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se filtró la suspensión resultante a través de un filtro de membrana (Millipore). Se lavó el residuo con una pequeña cantidad de acetonitrilo y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 126 mg (0,226 mmol, rendimiento del 45%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (ESI+, m/z): 560 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,34 (1H, s a), 7,69-7,63 (2H, m), 7,56-7,41 (5H, m), 7,34-7,27 (2H, m), 7,16 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,83 (1H, s a), 5,74 (1H, q, J = 6,5 Hz), 2,17 (3H, s a), 1,57-1,45 (3H, m), 1,14 (2H, dd, J = 5,9, 2,8 Hz), 0,63 (2H, dd, J = 5,8, 2,6 Hz).

(Ejemplo 15)

(R)-1 -{4’-[5-Fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de semicalcio (compuesto n.° I-30)

[Fórm. quím. 38]

Se añadieron 0,190 ml (0,095 mmol) de una disolución acuosa de acetato de calcio 0,5 M a una disolución uniforme en agua ultrapura (25 ml) de 103 mg (0,190 mmol) de (R)-1-{4’-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxilato de sodio sintetizado de manera análoga al ejemplo 13. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 días. Se filtró la suspensión resultante a través de un filtro de membrana (Millipore). Se lavó el residuo con agua ultrapura y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 27,7 mg (0,051 mmol, rendimiento del 27%) como un sólido de color blanco. Espectro de masas (ESI+, m/z): 1081 [2M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,32 (1H, s a), 7,70-7,63 (2H, m), 7,57-7,31 (8H, m), 7,14 (1H, d, J = 1,9 Hz), 6,82 (1H, s a), 5,74 (1H, q, J = 6,5 Hz), 2,17 (3H, s), 1,61-1,41 (3H, m), 1,41-1,20 (2H, m), 0,91-0,78 (2H, m). Ejemplos de referencia

(Ejemplo de referencia 1)

Éster terc-butílico del ácido 2-bromotiofeno-3-carboxílico

[Fórm. quím. 39]

En una atmósfera de nitrógeno, se añadieron gota a gota 7,6 ml (87 mmol) de cloruro de oxalilo a una disolución en cloruro de metileno (70 ml) de 15 g (72 mmol) de ácido 2-bromotiofeno-3-carboxílico (Aldrich) y 0,60 ml (7,8 mmol) de N, N-dimetilformamida a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 15 horas. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida. Se añadieron secuencialmente 2-metil-2-propanol (70 ml), 65 ml (372 mmol) de N,N-diisopropiletilamina y O, 90 g (7,4 mmol) de N,N-dimetilaminopiridina al residuo. En una atmósfera de nitrógeno, se agitó la mezcla resultante durante 2 horas mientras se realizaba calentamiento a 80°C. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida. Se añadió agua al residuo y se extrajo la mezcla con tolueno. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 100:0 a 90:10 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 12 g (32 mmol (pureza del 71% en peso), rendimiento del 45%) como un aceite de color amarillo claro.

Espectro de masas (EI, m/z): 262 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,32 (1H, d, J = 5,8 Hz), 7,18 (1H, d, J = 5,8 Hz), 1,59 (9H, s).

También se sintetizó el compuesto del título de la siguiente manera.

En una atmósfera de argón, se añadieron 1,80 g (9,70 mmol) de cloruro de p-toluenosulfonilo en pequeñas porciones a una disolución en piridina (9,6 ml) de 1,005 g (4,85 mmol) de ácido 2-bromotiofeno-3-carboxílico (Aldrich) en un baño de hielo mientras se realizaba agitación. A continuación, se añadieron 0,46 ml (4,8 mmol) de 2-metil-2-propanol. En un baño de hielo, se agitó la mezcla durante 2 horas. Se realizó agitación adicionalmente a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de eso, se añadieron 0,47 ml (5,0 mmol) de 2-metil-2-propanol y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 27 horas. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida. Se añadieron acetato de etilo y una disolución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio para realizar la separación del líquido. Se lavó la fase orgánica con una disolución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y posteriormente con salmuera saturada. Además, se lavó la fase orgánica con una disolución acuosa de hidrogenosulfato de potasio al 5% en peso y se lavó con salmuera saturada de nuevo. Se secó la fase orgánica con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 99:1 a 94:6 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 1,22 g (4,64 mmol, rendimiento del 96%) como un aceite de color amarillo claro.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 7,63 (1H, d, J = 5,8 Hz), 7,28 (1H, d, J = 5,8 Hz), 1,53 (9H, s).

(Ejemplo de referencia 2)

2-Bromo-5-clorotiofeno-3-carboxamida

[Fórm. quím. 40]

En una atmósfera de argón y mientras se realizaba agitación, se añadieron 8,70 g (65,2 mmol) de N-clorosuccinimida a una disolución en N,N-dimetilformamida (50 ml) de 4,48 g (21,7 mmol) de 2-bromotiofeno-3-carboxamida (sintetizada según el documento WO 10/036497). Se agitó la mezcla durante 3 horas mientras se realizaba calentamiento a 60°C. Después de completarse la reacción, se añadieron 50 ml de agua y 100 ml de acetato de etilo a la misma en un baño de hielo. Mientras se realizaba agitación, se añadieron 6,80 g (65,3 mmol) de hidrogenosulfito de sodio. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 15 minutos. Después de eso, se añadió agua para realizar la separación del líquido. Se lavó la fase orgánica dos veces con 50 ml de una disolución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. Después se lavó la fase orgánica con salmuera saturada y se secó con sulfato de magnesio anhidro. Se concentró el disolvente a presión reducida hasta aproximadamente la mitad del volumen. Se añadió hexano a la suspensión resultante y se sometió la mezcla a ultrasonicación. Posteriormente, se recogió por filtración el sólido, se lavó con hexano y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 3,64 g (15,1 mmol, rendimiento del 70%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (DUIS+, m/z): 240 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 7,75 (1H, s a), 7,58 (1H, s a), 7,33 (1H, s).

También se sintetizó el compuesto del título de la siguiente manera.

En una atmósfera de nitrógeno, se añadieron 0,90 g (6,7 mmol) de N-clorosuccinimida a una disolución en N,N-dimetilformamida (16 ml) de 1,0 g (4,8 mmol) de ácido 2-bromotiofeno-3-carboxílico (Aldrich) a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla durante 1 hora mientras se realizaba calentamiento a 80°C. Después de completarse la reacción, se permitió que se enfriase el líquido de mezcla de reacción. Se añadió agua y se acidificó el líquido mediante la adición de ácido clorhídrico 2 N. Se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica secuencialmente con una disolución acuosa de hidrogenosulfito de sodio y salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se disolvió el residuo en cloruro de metileno (15 ml) y se añadieron gota a gota 0,80 ml (9,1 mmol) de cloruro de oxalilo a la disolución en una atmósfera de nitrógeno a 0°C mientras se realizaba agitación. Se elevó la temperatura hasta temperatura ambiente y se agitó la mezcla durante 30 minutos. A continuación, se añadieron gota a gota 3,7 ml (48 mmol) de amoniaco acuoso al 28% en peso a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de completarse la reacción, se añadió agua al líquido de mezcla de reacción y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 69:31 a 48:52 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 0,62 g (2,6 mmol, rendimiento del 53%) como un sólido de color blanco.

(Ejemplo de referencia 3)

4-Bromo-1-yodo-2-metoxibenceno

[Fórm. quím. 41]

En un baño de hielo y mientras se realizaba agitación, se añadieron 0,75 g (11 mmol) de nitrito de sodio a una disolución en ácido acético (15ml)-ácido clorhídrico concentrado (1 ml) de 2,0 g (9,0 mmol) de 4-bromo-2-metoxianilina (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.), de tal manera que la temperatura interior no superase los 10°C. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos. A continuación, se añadió gota a gota el líquido de mezcla de reacción a una disolución acuosa de 1,0 g (30 mmol) de yoduro de potasio en una disolución acuosa de ácido bromhídrico al 48% en peso (30 ml) a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla resultante a esa temperatura durante 1 hora. Después de completarse la reacción, se añadió el líquido de mezcla de reacción en pequeñas porciones a una mezcla de una disolución acuosa de carbonato de sodio y cloruro de metileno. Después de confirmarse la basicidad de la fase acuosa, se separó el líquido. Se lavó la fase orgánica secuencialmente con una disolución acuosa de hidrogenosulfito de sodio al 10% en peso, una disolución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 100:0 a 91:9 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 2,2 g (7,2 mmol, rendimiento del 73%) como un sólido de color naranja.

Espectro de masas (EI, m/z): 312 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,61 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,94 (1H, d, J = 2,1 Hz), 6,87 (1H, dd, J = 8,2, 2,1 Hz), 3,88 (3H, s).

(Ejemplo de referencia 4)

Éster etílico del ácido 1-(4’-bromo-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il)ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 42]

Se desgasificó una disolución en 1,4-dioxano (15ml)-agua (10 ml) de 1,2 g (3,8 mmol) de 4-bromo-1-yodo-2-metoxibenceno sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 3, 1,1 g (3,5 mmol) de éster etílico del ácido 1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclopropanocarboxílico (sintetizado según el procedimiento descrito en el documento WO 12/078593) y 1,1 g (10 mmol) de carbonato de sodio y se purgó con nitrógeno. A continuación, se añadieron 0,10 g (0,12 mmol) de aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1’bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II). Se agitó la mezcla en una atmósfera de nitrógeno durante 1,5 horas mientras se realizaba calentamiento a 80°C. Después de completarse la reacción, se añadió agua al líquido de mezcla de reacción y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 94:6 a 75:25 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 0,72 g (1,9 mmol, rendimiento del 55%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (EI, m/z): 374 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,45-7,41 (2H, m), 7,39-7,35 (2H, m), 7,19 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,15 (1H, dd, J = 8,0, 1,8 Hz), 7,10 (1H, d, J = 1,8 Hz), 4,12 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,81 (3H, s), 1,61 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,22 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,19 (3H, t, J = 7,1 Hz).

(Ejemplo de referencia 5)

Éster etílico del ácido 1-(4’-cloro-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il)ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 43]

Se desgasificó una disolución en 1,4-dioxano (20 ml)-agua (20 ml) de 2,0 g (9,0 mmol) de 1-bromo-4-cloro-2-metoxibenceno (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.), 2,6 g (8,2 mmol) de éster etílico del ácido 1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil]ciclopropanocarboxílico (sintetizado según el procedimiento descrito en el documento WO 12/078593) y 2,7 g (25 mmol) de carbonato de sodio y se purgó con nitrógeno. A continuación, se añadieron 0,21 g (0,25 mmol) de aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II). Se agitó la mezcla en una atmósfera de nitrógeno durante 2 horas mientras se realizaba calentamiento a 80°C. Después de completarse la reacción, se añadió agua al líquido de mezcla de reacción y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice, y se concentró a presión reducida la fracción con Rf = 0,5 (disolvente de desarrollo: hexano:acetato de etilo = 90:10 (v/v)) y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 2,46 g (7,4 mmol, rendimiento del 90%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (EI, m/z): 330 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,45-7,41 (2H, m), 7,39-7,35 (2H, m), 7,25 (1H, d, J = 8,2 Hz), 7,00 (1H, dd, J = 8,2, 2,0 Hz), 6,96 (1H, d, J = 2,0 Hz), 4,12 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,81 (3H, s), 1,61 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,22 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,19 (3H, t, J = 7,1 Hz).

(Ejemplo de referencia 6)

Éster etílico del ácido 1-[2’-metoxi-4’-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 44]

Se desgasificó una disolución en 1,4-dioxano (10 ml) de 0,72 g (1,9 mmol) de éster etílico del ácido 1-(4’-bromo-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il)ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 4, 0,60 g (2,4 mmol) de 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) y 0,30 g (3,1 mmol) de acetato de potasio y se purgó con nitrógeno. A continuación, se añadieron 0,10 g (0,12 mmol) de aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II). En una atmósfera de nitrógeno, se agitó la mezcla durante 3 horas mientras se realizaba calentamiento en condiciones de reflujo. Después de completarse la reacción, se añadió agua al líquido de mezcla de reacción y se extrajo la mezcla con tolueno. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 92:8 a 79:21 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 0,81 g (1,9 mmol, rendimiento cuantitativo) como un sólido de color amarillo claro.

Espectro de masas (EI, m/z): 422 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,52-7,46 (3H, m), 7,40-7,33 (4H, m), 4,12 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,86 (3H, s), 1,60 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,36 (12H, s), 1,22 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,19 (3H, t, J = 7,1 Hz).

También se sintetizó el compuesto del título de la siguiente manera.

Se desgasificó una disolución en 1,4-dioxano (30 ml) de 2,46 g (7,43 mmol) de éster etílico del ácido 1-(4’-cloro-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il)ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 5, 2,43 g (9,57 mmol) de 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) y 1,1 g (11 mmol) de acetato de potasio y se purgó con nitrógeno. A continuación, se añadieron 0,30 g (0,37 mmol) de aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) y 0,30 g (1,1 mmol) de triciclohexilfosfina. Se agitó la mezcla en una atmósfera de nitrógeno durante 24 horas mientras se realizaba calentamiento en condiciones de reflujo. Además, se añadieron 0,15 g (0,18 mmol) de aducto de cloruro de metileno de dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) y 0,15 g (0,54 mmol) de triciclohexilfosfina al líquido de mezcla de reacción y se agitó la mezcla en una atmósfera de nitrógeno durante 5 horas mientras se realizaba calentamiento en condiciones de reflujo. Después de completarse la reacción, se enfrió el líquido de mezcla de reacción hasta temperatura ambiente. Se añadió tolueno y se retiró por filtración la materia insoluble. Se lavó el filtrado secuencialmente con una disolución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 92:8 a 79:21 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo. Se añadió hexano al residuo. Se recogió por filtración el sólido, se lavó con hexano y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 1,89 g (4,5 mmol, rendimiento del 60%) como un sólido de color blanco.

(Ejemplo de referencia 7)

Éster etílico del ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-clorotiofen-2-il)-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 45]

Se desgasificó una disolución en 1,4-dioxano (15 ml)-agua (5 ml) de 486 mg (2,02 mmol) de 2-bromo-5-clorotiofeno-3-carboxamida sintetizada de manera análoga al ejemplo de referencia 2, 877 mg (2,23 mmol) de éster etílico del ácido 1-[4’-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico (sintetizado según el procedimiento descrito en el documento WO 12/078593) y 658 mg (6,21 mmol) de carbonato de sodio por congelación en un baño de hielo seco-acetona y se purgó con argón. Además, se añadieron 230 mg (0,199 mmol) de tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0) y se agitó la mezcla durante 3 horas mientras se realizaba calentamiento a 90°C. Después de completarse la reacción, se enfrió el líquido de mezcla de reacción. Se añadieron acetato de etilo y agua para realizar la separación del líquido. Se secó la fase orgánica con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 64:36 a 43:57 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo. Se añadió una disolución de hexano-acetato de etilo (2:1 (v/v)) al residuo, y se recogió por filtración el sólido precipitado y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 705 mg (1,66 mmol, rendimiento del 82%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (EI, m/z): 425 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,69-7,65 (2H, m), 7,58-7,53 (4H, m), 7,46-7,42 (2H, m), 7,33 (1H, s), 5,44 (2H, s a), 4,12 (2H, q, J = 7,1 Hz), 1,65 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,23 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,19 (3H, t, J = 7,1 Hz). (Ejemplo de referencia 8)

Éster etílico del ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-dorotiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]cidopropanocarboxílico [Fórm. quím. 46]

Se desgasificó una disolución en 1,4-dioxano (30 ml)-agua (10 ml) de 2,0 g (4,7 mmol) de éster etílico del ácido 1-[2’-metoxi-4’-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-[1,1’-bifenil]-4-il]-cidopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 6, 1,25 g (5,2 mmol) de 2-bromo-5-clorotiofeno-3-carboxamida sintetizada de manera análoga al ejemplo de referencia 2 y 1,5 g (14 mmol) de carbonato de sodio. A continuación, se añadieron 0,30 g (0,26 mmol) de tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0). Se agitó la mezcla en una atmósfera de nitrógeno durante 4,5 horas mientras se realizaba calentamiento a 90°C. Después de completarse la reacción, se permitió que se enfriase el líquido de mezcla de reacción. Se añadió agua y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se añadió acetato de etilo al residuo. Se recogió por filtración el sólido, se lavó con una pequeña cantidad de acetato de etilo y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 1,53 g (3,4 mmol, rendimiento del 71%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (EI, m/z): 455 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 7,73 (1H, s a), 7,50 (1H, s a), 7,48-7,43 (2H, m), 7,39-7,33 (3H, m), 7,32 (1H, s), 7,25 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,13 (1H, dd, J = 7,8, 1,6 Hz), 4,05 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,79 (3H, s), 1,51 (2H, dd, J = 6,8, 4,0 Hz), 1,23 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,12 (3H, t, J = 7,1 Hz).

(Ejemplo de referencia 9)

Éster ferc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-[1,1’-bifenil]-4-il}tiofeno-3-carboxílico

[Fórm. quím. 47]

Se desgasificó una disolución en 1,4-dioxano (15 ml)-agua (5 ml) de 0,80 g (2,0 mmol) de éster etílico del ácido 1-[4’-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico (sintetizado según el procedimiento descrito en el documento WO 12/078593), 0,50 g (1,9 mmol) de éster ferc-butílico del ácido 2-bromotiofeno-3-carboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 1 y 0,61 g (5,8 mmol) de carbonato de sodio. A continuación, se añadieron 0,10 g (0,089 mmol) de tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0). Se agitó la mezcla en una atmósfera de nitrógeno durante 14,5 horas mientras se realizaba calentamiento a 90°C. Después de completarse la reacción, se permitió que se enfriase el líquido de mezcla de reacción. Se añadió agua y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice, y se concentró a presión reducida la fracción con Rf = 0,41 (disolvente de desarrollo: hexano:acetato de etilo = 90:10 (v/v)) y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 0,58 g (1,3 mmol, rendimiento del 68%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (EI, m/z): 448 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,64-7,60 (2H, m), 7,59-7,55 (2H, m), 7,55-7,51 (2H, m), 7,48 (1H, d, J = 5,4 Hz), 7,45-7,41 (2H, m), 7,23 (1H, d, J = 5,3 Hz), 4,13 (2H, q, J = 7,1 Hz), 1,64 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,38 (9H, s), 1,23 (2H, dd, J = 7,2, 4,1 Hz), 1,20 (3H, t, J = 7,2 Hz).

(Ejemplo de referencia 10)

Éster terc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-2-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}tiofeno-3-carboxílico [Fórm. quím. 48]

Se añadieron 2,96 g (27,9 mmol) de carbonato de sodio a una disolución en 1,4-dioxano (23 ml)-agua (23 ml) de 3,81 g (9,02 mmol) de éster etílico del ácido 1-[2’-metoxi-4’-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-ilH1,1’-bifenil]-4-il]-ciciopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 6 y 2,7 g (7,3 mmol (pureza del 71% en peso)) de éster terc-butílico del ácido 2-bromotiofeno-3-carboxílico sintetizado en el ejemplo de referencia 1. Se desgasificó la mezcla. A continuación, se añadieron 540 mg (0,467 mmol) de tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0). Se agitó la mezcla resultante en una atmósfera de nitrógeno durante 7 horas mientras se realizaba calentamiento a 90°C. Después de completarse la reacción, se permitió que se enfriase el líquido de mezcla de reacción. Se añadió agua y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se añadió acetato de etilo al residuo. Se retiró por filtración la materia insoluble resultante y se lavó con una disolución mixta de hexano-acetato de etilo (1:2 (v/v)). Posteriormente, se combinaron las aguas madres y los lavados y se concentraron a presión reducida. Se disolvió el concentrado en acetato de etilo y se añadió hexano hasta que la disolución se volvió turbia. Se retiró por filtración el sólido precipitado, se lavó con hexano y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 3,09 g (5,55 mmol (pureza del 86% en peso), rendimiento del 61%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (EI, m/z): 478 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,53-7,48 (2H, m), 7,47 (1H, d, J = 5,4 Hz), 7,41-7,36 (2H, m), 7,34 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,23 (1H, d, J = 5,4 Hz), 7,12 (1H, dd, J = 7,7, 1,6 Hz), 7,07 (1H, d, J = 1,6 Hz), 4,13 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,83 (3H, s), 1,62 (2H, dd, J = 6,8, 4,0 Hz), 1,40 (9H, s), 1,23 (2H, dd, J = 6,8, 3,8 Hz), 1,20 (3H, t, J = 7,1 Hz). (Ejemplo de referencia 11)

Éster terc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-[1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico [Fórm. quím. 49]

En una atmósfera de argón, se añadieron gota a gota 11 ml (12,0 mmol) de una disolución en tetrahidrofurano-hexano de diisopropilamiduro de litio 1,09 M (Kanto Chemical Co., Inc.) a lo largo de un periodo de 5 minutos a una disolución en tetrahidrofurano deshidratado (60 ml) de 4,50 g (10,0 mmol) de éster terc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)cidopropil]-[1,1’-bifenil]-4-il}tiofeno-3-carboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 9 mientras se enfriaba el sistema hasta -70°C o inferior en un baño de hielo seco-acetona. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 30 minutos. A continuación, mientras se enfriaba el sistema hasta -65°C o inferior, se añadió gota a gota una disolución en tetrahidrofurano (15 ml) de 4,75 g (15,1 mmol) de N-fluorobencenosulfonimida a lo largo de un periodo de 5 minutos y se agitó la mezcla a esa temperatura durante 30 minutos. A continuación, se elevó la temperatura gradualmente, y se terminó la reacción a -45°C mediante la adición de 40 ml de una disolución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se elevó la temperatura hasta temperatura ambiente y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se secó la fase orgánica con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se añadió cloruro de metileno al residuo. Se retiró por filtración la materia insoluble y se concentró el filtrado a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 100:0 a 79:21 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 2,23 g (4,78 mmol, rendimiento del 48%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (CI, m/z): 467 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 7,78-7,72 (2H, m), 7,68-7,63 (2H, m), 7,56-7,50 (2H, m), 7,46-7,41 (2H, m), 7,03 (1H, d, J = 2,4 Hz), 4,05 (2H, q, J = 7,1 Hz), 1,52 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,31 (9H, s), 1,24 (2H, dd, J = 7,1, 4,1 Hz), 1,12 (3H, t, J = 7,1 Hz).

(Ejemplo de referencia 12)

Éster terc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-2-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico [Fórm. quím. 50]

En una atmósfera de argón, se añadieron gota a gota 6,56 ml (7,22 mmol) de una disolución 1,1 M de diisopropilamiduro de litio/tetrahidrofurano a una disolución en tetrahidrofurano (37 ml) de 2,88 g (5,17 mmol (pureza del 86% en peso)) de éster terc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-2-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}tiofeno-3-carboxílico sintetizado en el ejemplo de referencia 10, a -78°C mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 30 minutos. A continuación, se añadió gota a gota una disolución en tetrahidrofurano (9,5 ml) de 2,85 g (9,04 mmol) de N-fluorobencenosulfonimida y se agitó la mezcla a esa temperatura durante 30 minutos. Después de completarse la reacción, se añadieron una disolución acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo al líquido de mezcla de reacción. Se separó la fase orgánica. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:dicloroetano = de 100:0 a 30:70 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo. Se añadió hexano al residuo, y se calentó la mezcla para dar una disolución que se sometió a ultrasonicación. Se recogió por filtración el sólido precipitado, se lavó con hexano y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 496 mg (1,00 mmol, rendimiento del 20%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (DUIS+, m/z): 497 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,52-7,46 (2H, m), 7,41-7,36 (2H, m), 7,33 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,08 (1H, dd, J = 7,8, 1,6 Hz), 7,03 (1H, d, J = 1,5 Hz), 6,84 (1H, d, J = 2,3 Hz), 4,13 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,82 (3H, s), 1,62 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,37 (9H, s), 1,23 (2H, dd, J = 6,5, 3,5 Hz), 1,20 (3H, t, J = 7,2 Hz).

(Ejemplo de referencia 13)

Ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-[1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico

[Fórm. quím. 51]

En una atmósfera de argón, se añadieron 5,0 ml (65 mmol) de ácido trifluoroacético a una disolución en cloruro de metileno (20 ml) de 2,18 g (4,67 mmol) de éster terc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropilH1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 11, en un baño de hielo mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 1 hora y, adicionalmente, a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de completarse la reacción, se concentró la mezcla a presión reducida. Se lavó el residuo secuencialmente con dietil éter y hexano y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 1,87 g (4,56 mmol, rendimiento del 98%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (CI, m/z): 411 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 12,92 (1H, s), 7,74-7,70 (2H, m), 7,68-7,64 (2H, m), 7,60-7,55 (2H, m), 7,46-7,41 (2H, m), 7,05 (1H, d, J = 2,4 Hz), 4,05 (2H, q, J = 7,1 Hz), 1,52 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,24 (2H, dd, J = 7,0, 4,1 Hz), 1,11 (3H, t, J = 7,1 Hz).

(Ejemplo de referencia 14)

Ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-2-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico

[Fórm. quím. 52]

En una atmósfera de argón a temperatura ambiente, se añadieron 1,1 ml (14 mmol) de ácido trifluoroacético a una disolución en cloruro de metileno (4,4 ml) de 491 mg (0,989 mmol) de éster terc-butílico del ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-2-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 12. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida. Se añadió cloruro de metileno y se concentró la mezcla a presión reducida. Se añadió hexano al residuo, y se concentró la mezcla a presión reducida y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 436 mg (0,99 mmol, rendimiento cuantitativo) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (EI, m/z): 440 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,53-7,48 (2H, m), 7,40-7,37 (2H, m), 7,34 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,14 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,13-7,10 (1H, m), 6,94 (1H, d, J = 2,3 Hz), 4,12 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,82 (3H, s) , 1,62 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,23 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,20 (3H, t, J = 7,1 Hz).

(Ejemplo de referencia 15)

Ácido 1 -[4’-(3-carbamoil-5-clorotiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 53]

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 6,6 ml (6,6 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 1 N a una suspensión en etanol (10 ml)-tetrahidrofurano (10 ml) de 1,00 g (2,19 mmol) de éster etílico del ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-dorotiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]cidopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 8. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 4 días. Después de completarse la reacción, se neutralizó el líquido de mezcla de reacción mediante la adición de 6,6 ml (6,6 mmol) de ácido clorhídrico 1 N. Se añadió agua, y se retiró por filtración el sólido precipitado a través de un filtro de membrana (Millipore), se lavó con agua y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 884 mg (2,07 mmol, rendimiento del 94%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (DUIS+, m/z): 428 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 12,35 (1H, s a), 7,75 (1H, s a), 7,52 (1H, s a), 7,45-7,41 (2H, m), 7,38­ 7,35 (2H, m), 7,33 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,32 (1H, s), 7,24 (1H, d, J = 1,8 Hz), 7,13 (1H, dd, J = 7,8, 1,6 Hz), 3,79 (3H, s), 1,47 (2H, dd, J = 6,7, 3,8 Hz), 1,18 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz).

(Ejemplo de referencia 16)

Éster 2-(trimetilsilil)etílico del ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-clorotiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 54]

Se añadió tolueno a 0,80 g (1,9 mmol) de ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-clorotiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico sintetizado en el ejemplo de referencia 15. Después de realizar una deshidratación azeotrópica, se reemplazó la atmósfera por argón. Posteriormente, se añadieron N,N-dimetilformamida (10 ml), 23,0 mg (0,188 mmol) de N,N-dimetilaminopiridina, 0,42 ml (2,8 mmol) de trimetilsililetanol y 0,98 ml (5,6 mmol) de N,N-diisopropiletilamina. A continuación, en un baño de hielo, se añadieron 1,06 g (2,81 mmol) de sal de hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronio. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 18 horas. Además, se añadieron 64,6 mg (0,529 mmol) de N,N-dimetilaminopiridina al líquido de mezcla de reacción y se agitó la mezcla a esa temperatura durante 1 día. Después de completarse la reacción, se añadieron agua y acetato de etilo al líquido de mezcla de reacción. Se realizó extracción dos veces con acetato de etilo. Se secó la fase orgánica con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 71:29 a 50:50 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 889 mg (1,68 mmol, rendimiento del 90%) como un sólido de color amarillo claro.

Espectro de masas (DUIS+, m/z): 528 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 7,75 (1H, s a), 7,52 (1H, s a), 7,46-7,42 (2H, m), 7,38-7,34 (2H, m), 7,33 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,32 (1H, s), 7,24 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,13 (1H, dd, J = 7,8, 1,7 Hz), 4,14-4,07 (2H, m), 3,78 (3H, s), 1,49 (2H, dd, J = 6,8, 3,8 Hz), 1,22 (2H, dd, J = 7,0, 4,1 Hz), 0,91-0,84 (2H, m), -0,05 (9H, s).

(Ejemplo de referencia 17)

1 -(4-Metiltiofen-3-il)etanona

[Fórm. quím. 55]

En una atmósfera de argón a -78°C, se añadieron gota a gota 4,0 ml (6,4 mmol) de una disolución en hexano de nbutil-litio 1,6 M a una disolución en dietil éter (23 ml) de 1,0 g (5,3 mmol) de 3-bromo-4-metiltiofeno (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.). Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 15 minutos. A continuación, se añadió gota a gota una disolución en dietil éter (1 ml) de 0,70 ml (6,9 mmol) de N-metoxi-N-metilacetamida a -78°C y se agitó la mezcla a esa temperatura durante 15 minutos y a temperatura ambiente durante 23 horas. Después de completarse la reacción, se añadió una disolución acuosa saturada de cloruro de amonio al líquido de mezcla de reacción y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = 80:20 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 552 mg (3,94 mmol, rendimiento del 75%) como un aceite de color amarillo claro.

Espectro de masas (CI, m/z): 141 [M+1]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,99 (1H, d, J = 3,1 Hz), 6,91 (1H, dq, J = 3,1, 1,0 Hz), 2,53 (3H, s), 2,46 (3H, d, J = 1,0 Hz).

(Ejemplo de referencia 18)

(RS)-1-(2,5-Difluorofenil)etanol

[Fórm. quím. 56]

Mientras se realizaba agitación, se añadieron 10 g (260 mmol) de borohidruro de sodio a una disolución en etanol (200 ml) de 39,0 g (250 mmol) de 1-(4-fluoro-2-metilfenil)etanona (una combinación de productos de Wako Pure Chemical Industries, Ltd. y Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida. Se añadió agua y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 90:10 a 69:31 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 41,5 g (243 mmol, rendimiento del 97%) como un aceite incoloro.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,25-7,19 (1H, m), 7,01-6,87 (2H, m), 5,22-5,14 (1H, m), 1,88 (1H, d, J = 4,3 Hz), 1,50 (3H, d, J = 6,4 Hz).

(Ejemplo de referencia 19)

(R)-1 -(Tiofen-3-il)etanol

[Fórm. quím. 57]

Según el procedimiento descrito en Journal of Organic Chemistry, 72 (2007) págs. 1639-1644, se añadieron 0,446 g (1,61 mmol) de (S)-5,5-difenil-2-metil-3,4-propan-1,3,2-oxazaborolidina (Aldrich) a una disolución en tetrahidrofurano (100 ml) de 2,023 g (16,03 mmol) de 1-(tiofen-3-il)etanona (Aldrich) secada con tamices moleculares 4A 1/16 (nombre comercial, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) en una atmósfera de argón a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación. A continuación, mientras se controlaba la temperatura a aproximadamente -30°C en un baño de hielo seco-etanol y mientras se realizaba agitación, se añadieron gota a gota 19,0 ml (17,1 mmol) de complejo de borano-tetrahidrofurano 0,9 M (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.) a lo largo de un periodo de 1 hora. Se agitó la mezcla a aproximadamente -30°C durante 1 hora. Después de completarse la reacción, se añadieron 50 ml de agua, y posteriormente se añadieron 100 ml de acetato de etilo y 5 ml de ácido clorhídrico 1 N para realizar la separación del líquido. Se lavó la fase orgánica con 50 ml de salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 95:5 a 74:26 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 1,81 g (14,1 mmol, rendimiento del 88%, pureza óptica del 82,9% de e.e.) como un aceite incoloro.

Condiciones del análisis de pureza óptica

Columna: CHIRALCEL OJ-RH (nombre comercial, Daicel Corporation)

Tamaño: 0,46 cm de D.I. x 25 cm de L.

Fase móvil: disolución acuosa de ácido trifluoroacético al 0,03% en volumen/acetonitrilo = 75/25 (v/v) Velocidad de flujo: 1,0 ml/min.

Temperatura: 40°C

Longitud de onda: 254 nm

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8: 7,44 (1H, dd, J = 5,0, 3,0 Hz), 7,25 (1H, ddd, J = 3,0, 1,2, 0,9 Hz), 7,07 (1H, dd, J = 5,0, 1,2 Hz), 5,11 (1H, d, J = 4,8 Hz), 4,80-4,71 (1H, m), 1,34 (3H, d, J = 6,4 Hz).

Puede obtenerse el compuesto del título con una pureza óptica mejorada de la siguiente manera.

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 13 g de Lipase PS Amano SD (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) a una disolución en diisopropil éter (200 ml) de 13,1 g (102 mmol, pureza óptica del 69% de e.e.) de (R)-1-(tiofen-3-il)etanol sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 19 y 15,0 ml (163 mmol) de acetato de vinilo. Se agitó el líquido de mezcla de reacción a 45°C durante 6,5 horas y se filtró. Se concentró el filtrado a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = 80:20 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar éster (R)-1-(tiofen-3-il)etílico del ácido acético que pesaba 11,8 g (67 mmol, rendimiento del 65%, pureza óptica >99% de e.e.) como un aceite de color amarillo claro.

Condiciones del análisis de pureza óptica

Columna: CHIRALPAK IA (nombre comercial, Daicel Corporation)

Tamaño: 0,46 cm de D.I. x 25 cm de L.

Fase móvil: hexano:2-propanol = 99,5:0,5 (v/v)

Velocidad de flujo: 1,0 ml/min.

Temperatura: 40°C

Longitud de onda: 254 nm

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8: 7,30 (1H, dd, J = 5,0, 2,9 Hz), 7,25-7,22 (1H, m), 7,09 (1H, dd, J = 5,0, 1,3 Hz), 6,00 (1H, q, J = 6,6 Hz), 2,07 (3H, s), 1,56 (3H, d, J = 6,5 Hz).

Bajo una corriente de nitrógeno, se añadieron 2,50 g (104 mmol) de hidróxido de litio a una disolución en etanol (100 ml)-agua (10 ml) de 11,8 g de éster (R)-1-(tiofen-3-il)etílico del ácido acético obtenido anteriormente (67,1 mmol, pureza óptica >99% de e.e.) a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 1,5 horas. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida para eliminar el etanol. Se añadió agua al residuo y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 95:5 a 74:26 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 8,1 g (63 mmol, rendimiento del 95%, pureza óptica >99,0% de e.e.) como un aceite de color amarillo claro.

(Ejemplo de referencia 20)

(R)-1-(4-Metiltiofen-3-il)etanol

[Fórm. quím. 58]

En una atmósfera de argón a de -30°C a -27°C, se añadieron gota a gota 3,4 ml (3,1 mmol) de complejo de boranotetrahidrofurano 0,9 M a una disolución en tetrahidrofurano (1,0 ml) de 78 mg (0,28 mmol) de (S)-5,5-difenil-2-metil-3,4-propan-1,3,2-oxazaborolidina (Aldrich). Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 30 minutos. A continuación, se añadió gota a gota una disolución en tetrahidrofurano (20 ml) de 406 mg (2,90 mmol) de 1-(4-metiltiofen-3-il)etanona sintetizada de manera análoga al ejemplo de referencia 17 a de -30°C a -27°C y se agitó la mezcla a esa temperatura durante 1 hora. Después de completarse la reacción, se añadieron agua y ácido clorhídrico 1 N al líquido de mezcla de reacción y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 95:5 a 70:30 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 387 mg (2,72 mmol, rendimiento del 94%) como un aceite incoloro.

Espectro de masas (EI, m/z): 142 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,23-7,21 (1H, m), 6,92 (1H, dq, J = 3,1, 0,9 Hz), 4,92 (1H, qdd, J = 6,4, 4,8, 0,8 Hz), 2,27 (3H, d, J = 0,9 Hz), 1,63 (1H, d, J = 4,6 Hz), 1,53 (3H, d, J = 6,4 Hz).

Puede obtenerse el compuesto del título con una pureza óptica mejorada de la siguiente manera.

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 6,7 g de Lipase PS Amano SD (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) a una disolución en diisopropil éter (67 ml) de 13,3 g (94 mmol, pureza óptica del 90% de e.e.) de (R)-1-(4-metiltiofen-3-il)etanol sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 20 y 16,3 ml (163 mmol) de acetato de vinilo. Se agitó la mezcla a 45°C durante 25 horas. Se filtró el líquido de mezcla de reacción obtenido y se concentró el filtrado a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = 90:10 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar éster (R)-1-(4-metiltiofen-3-il)etílico del ácido acético que pesaba 10,3 g (56,0 mmol, rendimiento del 60%, pureza óptica >99% de e.e.) como un aceite de color amarillo claro.

Condiciones del análisis de pureza óptica

Columna: CHIRALPAK IA (nombre comercial, Daicel Corporation)

Tamaño: 0,46 cm de D.I. x 25 cm de L.

Fase móvil: hexano:2-propanol = 99,5:0,5 (v/v)

Velocidad de flujo: 1,0 ml/min.

Temperatura: 40°C

Longitud de onda: 254 nm

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,23 (1H, d, J = 3,3 Hz), 6,94-6,90 (1H, m), 5,94 (1H, qd, J = 6,5, 0,9 Hz), 2,23 (3H, d, J = 1,0 Hz), 2,07 (3H, s), 1,55 (3H, d, J = 6,5 Hz).

Bajo una corriente de nitrógeno, se añadieron 2,0 g (84 mmol) de hidróxido de litio a una disolución en etanol (50 ml)-agua (5 ml) de 10,3 g (56,0 mmol) de éster (R)-1-(4-metiltiofen-3-il)etílico del ácido acético obtenido anteriormente a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 1,5 horas. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida para eliminar el etanol. Se añadió agua al residuo y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 95:5 a 70:30 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 7,8 g (55 mmol, rendimiento del 98%, pureza óptica del 99,5% de e.e.) como un aceite incoloro.

Condiciones del análisis de pureza óptica

Columna: CHIRALPAK IA (nombre comercial, Daicel Corporation)

Tamaño: 0,46 cm de D.I. x 25 cm de L.

Fase móvil: líquido A:líquido B = 95:1 (v/v)

Líquido A: hexano:2-propanol = 99,5:0,5 (v/v)

Líquido B: 2-propanol

Velocidad de flujo: 1,0 ml/min.

Temperatura: 40°C

Longitud de onda: 254 nm

(Ejemplo de referencia 21)

Éster (R)-1-(2,5-difluorofenil)etílico del ácido acético

[Fórm. quím. 59]

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 33 g de Lipase PS Amano SD (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) a una disolución en diisopropil éter (200 ml) de 39,3 g (249 mmol) de (RS)-1-(2,5-difluorofenil)etanol sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 18 y 45,0 ml (450 mmol) de acetato de vinilo. Se agitó la mezcla a 45°C durante 46,5 horas. Se filtró el líquido de mezcla de reacción obtenido y se concentró el filtrado a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = 90:10 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 20,1 g (100 mmol, rendimiento del 40%, pureza óptica del 97% de e.e.) como un aceite de color amarillo claro.

Condiciones del análisis de pureza óptica

Columna: CHIRALPAK IA (nombre comercial, Daicel Corporation)

Tamaño: 0,46 cm de D.I. x 25 cm de L.

Fase móvil: hexano:2-propanol = 99,5:0,5 (v/v)

Velocidad de flujo: 1,0 ml/min.

Temperatura: 40°C

Longitud de onda: 254 nm

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,11-7,05 (1H, m), 7,03-6,90 (2H, m), 6,09 (1H, q, J = 6,6 Hz), 2,11 (3H, s), 1,52 (3H, d, J = 6,5 Hz).

(Se hidrolizó el compuesto obtenido en esta reacción (pureza óptica del 97% de e.e.) de la misma manera que en el ejemplo de referencia 22 (pureza óptica del 92,2% de e.e.) y se trató el producto en las mismas condiciones que en la reacción anterior, mejorando de ese modo la pureza óptica).

A temperatura ambiente y mientras se realizaba agitación, se añadieron 16 g de Lipase PS Amano SD (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) a una disolución en diisopropil éter (70 ml) de 15,8 g (100mmol) de (R)-1-(2,5-difluorofenil)etanol (pureza óptica del 92,2% de e.e.) y 20,0 ml (200 mmol) de acetato de vinilo. Se agitó la mezcla a 45°C durante 64,5 horas. Se filtró el líquido de mezcla de reacción obtenido y se concentró el filtrado a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = 90:10 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 19,2 g (96 mmol, rendimiento del 96%, pureza óptica del 99,7% de e.e.) como un aceite de color amarillo claro.

(Ejemplo de referencia 22)

(R)-1-(2,5-Difluorofenil)etanol

[Fórm. quím. 60]

Bajo una corriente de nitrógeno, se añadieron 3,5 g (150 mmol) de hidróxido de litio a una disolución en etanol (100 ml)-agua (10 ml) de 19,2 g (96 mmol, pureza óptica del 99,7% de e.e.) de éster (R)-1-(2,5-difluorofenil)etílico del ácido acético sintetizado en el ejemplo de referencia 21 a temperatura ambiente mientras se realizaba agitación. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 1,5 horas. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida para eliminar etanol. Se añadió agua al residuo y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 90:10 a 69:31 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 13,5 g (85,6 mmol, rendimiento del 89%, pureza óptica del 99,0% de e.e.) como un aceite de color amarillo claro.

Condiciones del análisis de pureza óptica

Columna: CHIRALPAK IA (nombre comercial, Daicel Corporation)

Tamaño: 0,46 cm de D.I. x 25 cm de L.

Fase móvil: líquido A:líquido B = 99:1 (v/v)

Líquido A: hexano:2-propanol = 99,5:0,5 (v/v)

Líquido B: 2-propanol

Velocidad de flujo: 1,0 ml/min.

Temperatura: 40°C

Longitud de onda: 254 nm

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,25-7,19 (1H, m), 7,01-6,87 (2H, m), 5,22-5,14 (1H, m), 1,88 (1H, d, J = 4,3 Hz), 1,50 (3H, d, J = 6,4 Hz).

(Ejemplo de referencia 23)

Éster etílico del ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 61]

En una atmósfera de argón, se añadieron 340 mg (0,791 mmol) de [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno a una disolución en tolueno (6 ml) de 300 mg (0,704 mmol) de éster etílico del ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-clorotiofen-2-ilH1,1’-bifenil]-4-il]cidopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 7 y 0,53 ml (6,6 mmol) de piridina. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos. A continuación, se añadieron 105 mg (0,819 mmol) de (R)-1-(tiofen-3-il)etanol sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 19 en una atmósfera de argón a temperatura ambiente y se agitó la mezcla durante 2 horas mientras se realizaba calentamiento a 70°C. Después de completarse la reacción, se añadieron acetato de etilo y agua al líquido de mezcla de reacción y se separó la fase orgánica. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 80:20 a 30:70 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 306 mg (0,55 mmol, rendimiento del 79%) como un aceite de color marrón.

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 550 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,69-7,63 (2H, m), 7,63-7,51 (3H, m), 7,48-7,40 (4H, m), 7,31 (1H, dd, J = 5,0, 2,9 Hz), 7,28-7,26 (1H, m), 7,11 (1H, dd, J = 5,0, 1,3 Hz), 6,72 (1H, s), 5,99 (1H, q, J = 6,6 Hz), 4,13 (2H, q, J = 7,1 Hz), 1,64 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,62 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,23 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,19 (3H, t, J = 7,1 Hz). (Ejemplo de referencia 24)

Éster etílico del ácido (R)-1-[4’-(5-cloro-3-{[(1-feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 62]

En una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente, se añadieron 2,4 g (5,6 mmol) de [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno a una disolución en tolueno (20 ml) de 2,0 g (4,4 mmol) de éster etílico del ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-clorotiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 8, 0,80 g (6,6 mmol) de (R)-1-feniletanol (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.) y 1,2 ml (15 mmol) de piridina. Se agitó la mezcla durante 1,5 horas mientras se realizaba calentamiento a 60°C. Después de completarse la reacción, se concentró el líquido de mezcla de reacción a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 99:1 a 80:20 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 1,46 g (4,0 mmol (pureza del 72% en peso), rendimiento del 42%) como un aceite de color naranja.

Espectro de masas (CI, m/z): 575 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,39 (1H, s a), 7,40-7,26 (10H, m), 7,23-7,16 (2H, m), 7,10 (1H, dd, J = 7,8, 1,6 Hz), 5,75 (1H, q, J = 6,4 Hz), 4,06 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,73 (3H, s), 1,56-1,41 (5H, m), 1,23 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,13 (3H, t, J = 7,0 Hz).

(Ejemplo de referencia 25)

Éster 2-(trimetilsilil)etílico del ácido (R)-1-{4’-[5-clorc>-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 63]

En una atmósfera de argón a temperatura ambiente, se añadieron 874 mg (2,03 mmol) de [bis(trifluoroacetoxi)yodo]benceno a una disolución en tolueno (10 ml) de 886 mg (1,68 mmol) de éster 2-(trimetilsilil)etílico del ácido 1-[4’-(3-carbamoil-5-dorotiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]cidopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 16 y 0,65 ml (8,0 mmol) de piridina. Se agitó la mezcla durante 5 minutos. Después de eso, se añadieron 413 mg (2,61 mmol) de (R)-1-(2,5-difluorofenil)etanol (enamina). Se agitó la mezcla durante 1 hora mientras se realizaba calentamiento a una temperatura de baño de 70°C. Después de completarse la reacción, se añadieron agua y acetato de etilo al líquido de mezcla de reacción y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Se secó la fase orgánica con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 99:1 a 94:6 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 1,16 g (1,46 mmol (pureza del 86% en peso), rendimiento del 87%) como un aceite de color marrón (semisólido).

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 682 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 9,55 (1H, s a), 7,45-7,40 (2H, m), 7,39-7,17 (8H, m), 7,10 (1H, dd, J = 7,9, 1,5 Hz), 5,91 (1H, q, J = 6,3 Hz), 4,14-4,07 (2H, m), 3,76 (3H, s), 1,55-1,42 (3H, m), 1,49 (2H, dd, J = 6,8, 3,9 Hz), 1,23 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 0,91-0,84 (2H, m), -0,05 (9H, s).

(Ejemplo de referencia 26)

Éster etílico del ácido (R)-1-{4’-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 64]

En una atmósfera de argón, se añadieron 0,24 ml (1,7 mmol) de trietilamina y 0,29 ml (1,4 mmol) de aziduro de difenilfosforilo a una disolución en tolueno (10 ml) de 456 mg (1,11 mmol) de ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-[1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 13. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos. A continuación, se añadió una disolución en tolueno (1 ml) de 190 mg (1,34 mmol) de (R)-1-(4-metiltiofen-3-il)etanol que se sintetizó de manera análoga al ejemplo de referencia 20 y que se secó con tamices moleculares 4A (polvo) (nombre comercial, NACALAI TESQUE, INC.) (0,3 g). Se agitó la mezcla resultante durante 2 horas mientras se realizaba calentamiento a 70°C. Después de completarse la reacción, se añadieron acetato de etilo y una disolución acuosa saturada de cloruro de amonio al líquido de mezcla de reacción y se separó la fase orgánica. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = 80:20 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 570 mg (1,04 mmol, rendimiento del 93%) como un aceite incoloro.

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 548 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5: 9,31 (1H, s a), 7,74-7,68 (2H, m), 7,66-7,61 (2H, m), 7,57-7,40 (5H, m), 7,17-7,13 (1H, m), 6,83 (1H, s a), 5,74 (1H, q, J = 6,5 Hz), 4,05 (2H, q, J = 7,2 Hz), 2,17 (3H, s a), 1,60-1,43 (3H, m), 1,51 (2H, dd, J = 6,8, 4,0 Hz), 1,23 (2H, dd, J = 7,1, 4,1 Hz), 1,11 (3H, t, J = 7,1 Hz).

(Ejemplo de referencia 27)

Éster etílico del ácido (R)-1-{4’-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 65]

En una atmósfera de argón, se añadieron 0,040 ml (0,29 mmol) de trietilamina y 0,045 ml (0,21 mmol) de aziduro de difenilfosforilo a una disolución en tolueno (4,0 ml) de 72 mg (0,16 mmol) de ácido 2-{4’-[1-(etoxicarbonil)ciclopropil]-2-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}-5-fluorotiofeno-3-carboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 14. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos. A continuación, se añadieron 35 mg (0,22 mmol) de (R)-1-(2-clorofenil)etanol (Shanghai AoBo Bio-pharm). Se agitó la mezcla durante 2 horas mientras se realizaba calentamiento a 70°C. Después de completarse la reacción, se añadieron acetato de etilo y agua al líquido de mezcla de reacción y se separó la fase orgánica. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 93:7 a 72:28 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 84 mg (0,061 mmol (pureza del 43% en peso), rendimiento del 37%) como un aceite incoloro.

Espectro de masas (EI, m/z): 593 [M]+.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, CDCls) 5: 7,52-7,48 (2H, m), 7,43-7,17 (9H, m), 7,06 (1H, dd, J = 7,8, 1,6 Hz), 6,97 (1H, d, J = 1,6 Hz), 6,23 (1H, q, J = 6,7 Hz), 4,13 (2H, q, J = 7,1 Hz), 3,82 (3H, s), 1,63 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz), 1,57 (3H, d, J = 6,7 Hz), 1,24 (2H, dd, J = 7,0, 4,0 Hz), 1,20 (3H, t, J = 7,2 Hz).

(Ejemplo de referencia 28)

Ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 66]

Se añadieron 2,0 ml (4,0 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 2 N a una disolución en 2-propanol (4 ml) de 304 mg (0,551 mmol) de éster etílico del ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 23. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 42,5 horas. Después de completarse la reacción, se acidificó el líquido de mezcla de reacción mediante la adición de ácido clorhídrico 2 N y se extrajo con acetato de etilo. Se lavó la fase orgánica secuencialmente con agua y salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (columna de COOH, disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 70:30 a 10:90 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo. Se añadieron hexano (10 ml) y acetato de etilo (3 ml) al residuo. Se retiró por filtración el sólido de color blanco precipitado y se lavó con una disolución mixta de hexano-acetato de etilo (3:1 (v/v)). Se concentraron las aguas madres y los lavados a presión reducida para dar el compuesto del título que pesaba 65 mg (0,55 mmol, rendimiento del 23%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 522 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 12,37 (1H, s a), 9,33 (1H, s a), 7,74-7,68 (2H, m), 7,65-7,60 (2H, m), 7,58-7,50 (3H, m), 7,48-7,37 (3H, m), 7,25-7,07 (2H, m), 5,82 (1H, q, J = 6,4 Hz), 1,56-1,44 (3H, m), 1,48 (2H, dd, J = 6,7, 3,8 Hz), 1,19-1,16 (2H, m).

(Ejemplo de referencia 29)

Ácido (R)-1-[4’-(5-cloro-3-{[(1-feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 67]

Se añadieron 8,0 ml (16,0 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 2 N a una disolución en 2-propanol (30 ml) de 1,46 g (4,0 mmol (pureza del 72% en peso)) de éster etílico del ácido (R)-1-[4’-(5-cloro-3-{[(1-feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico sintetizado en el ejemplo de referencia 24. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 110 horas. Después de completarse la reacción, se acidificó el líquido de mezcla de reacción mediante la adición de ácido clorhídrico 2 N y se extrajo con cloruro de metileno. Se lavó la fase orgánica con salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 80:20 a 0:100 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo. Se disolvió el residuo en una pequeña cantidad de etanol. Se añadió agua a la disolución para precipitar un sólido. Se recogió por filtración el sólido, se lavó con agua y se secó mediante calentamiento a vacío para dar el compuesto del título que pesaba 588 mg (1,07 mmol, rendimiento del 58%) como un sólido de color rojo claro.

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 546 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 12,34 (1H, s a), 9,40 (1H, s a), 7,45-7,25 (10H, m), 7,21-7,16 (2H, m), 7,09 (1H, dd, J = 7,9, 1,6 Hz), 5,75 (1H, q, J = 6,4 Hz), 3,73 (3H, s), 1,54-1,41 (5H, m), 1,18-1,12 (2H, m).

(Ejemplo de referencia 30)

Ácido (R)-1-{4’-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1’-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 68]

Se añadieron 4,0 ml (8,0 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 2 N a una disolución en 2-propanol (12 ml) de 565 mg (1,03 mmol) de éster etílico del ácido (R)-1-{4’-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-ilH1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 26. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 91 horas. Después de completarse la reacción, se acidificó el líquido de mezcla de reacción mediante la adición de ácido clorhídrico 1 N y se extrajo con cloruro de metileno. Se lavó la fase orgánica secuencialmente con agua y salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = 50:50 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo. A continuación, se añadieron 6 ml de hexano y 12 ml de acetato de etilo y se calentó la mezcla a 50°C y se enfrió. Se retiró por filtración el sólido precipitado y se lavó con una disolución mixta de hexanoacetato de etilo (50:50 (v/v)). Se concentraron las aguas madres y los lavados a presión reducida. Al residuo se le añadieron 8 ml de acetonitrilo, 4 ml de agua y 3 ml de tetrahidrofurano. La liofilización de la mezcla dio como resultado el compuesto del título que pesaba 193 mg (0,37 mmol, rendimiento del 36%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 520 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 12,38 (1H, s a), 9,33 (1H, s a), 7,73-7,67 (2H, m), 7,65-7,59 (2H, m), 7,57-7,50 (2H, m), 7,49-7,38 (3H, m), 7,19-7,12 (1H, m), 6,83 (1H, s a), 5,74 (1H, q, J = 6,4 Hz), 2,17 (3H, s a), 1,59­ 1,44 (3H, m), 1,48 (2H, dd, J = 6,7, 3,8 Hz), 1,18 (2H, dd, J = 6,9, 3,9 Hz).

(Ejemplo de referencia 31)

Ácido (R)-1-{4’-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 69]

Se añadieron 1,5 ml (3,0 mmol) de una disolución acuosa de hidróxido de sodio 2 N a una disolución en 2-propanol (3,0 ml) de 80 mg (0,058 mmol (pureza del 43% en peso)) de éster etílico del ácido (R)-1-{4’-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado en el ejemplo de referencia 27. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 23 horas. Después de completarse la reacción, se acidificó el líquido de mezcla de reacción mediante la adición de ácido clorhídrico 2 N y se extrajo con cloruro de metileno. Se lavó la fase orgánica secuencialmente con agua y salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se sometió el residuo a cromatografía en columna de gel de sílice (columna de COOH, disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 80:20 a 20:80 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo para dar el compuesto del título que pesaba 13 mg (0,023 mmol, rendimiento del 40%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 564 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 12,35 (1H, s a), 9,55 (1H, s a), 7,60-7,28 (9H, m), 7,18 (1H, d, J = 1,5 Hz), 7,09 (1H, dd, J = 7,8, 1,4 Hz), 6,84 (1H, d, J = 2,5 Hz), 6,00 (1H, q, J = 6,1 Hz), 3,77 (3H, s), 1,55-1,39 (5H, m), 1,21-1,10 (2H, m).

(Ejemplo de referencia 32)

Ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico

[Fórm. quím. 70]

En una atmósfera de argón a temperatura ambiente, se añadieron 9,0 ml (9,0 mmol) de una disolución 1 M en tetrahidrofurano de fluoruro de tetrabutilamonio a una disolución en dimetilformamida (90 ml) de 3,00 g (4,38 mmol) de éster 2-(trimetilsilil)etílico del ácido (R)-1-{4’-[5-cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2’-metoxi-[1,1’-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico sintetizado de manera análoga al ejemplo de referencia 25. Se agitó la mezcla a esa temperatura durante 2 horas. Después de completarse la reacción, se añadieron acetato de etilo y agua al líquido de mezcla de reacción y se ajustó el pH a aproximadamente 3 con ácido clorhídrico 0,5 N. Se separó en fases el líquido de mezcla de reacción. Se lavó la fase orgánica secuencialmente con agua y salmuera saturada, se secó con sulfato de magnesio anhidro y se concentró a presión reducida. Se añadieron 2-propanol (40 ml) y agua (40 ml) al residuo y se sometió la mezcla a ultrasonicación. Se retiró por filtración el sólido precipitado y se lavó con agua. Así, se obtuvo un compuesto del título en bruto que pesaba 2,86 g. Se sometió el compuesto en bruto a cromatografía en columna de gel de sílice (disolvente de elución: hexano:acetato de etilo = de 70:30 a 10:90 (v/v)), y se concentró a presión reducida la fracción que contenía el compuesto objetivo. Se añadió heptano al residuo y se retiró por filtración el sólido precipitado. De ese modo, se obtuvo el compuesto del título que pesaba 1,62 g (2,77 mmol, rendimiento del 63%) como un sólido de color blanco.

Espectro de masas (DUIS-, m/z): 582 [M-1]-.

Espectro de 1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 5: 12,35 (1H, s a), 9,54 (1H, s a), 7,44-7,39 (2H, m), 7,39-7,19 (7H, m), 7,18 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,10 (1H, dd, J = 7,9, 1,6 Hz), 5,91 (1H, q, J = 6,5 Hz), 3,76 (3H, s), 1,56-1,43 (3H, m), 1,47 (2H, dd, J = 6,7, 3,7 Hz), 1,18 (2H, dd, J = 6,8, 4,0 Hz).

[Ejemplo de prueba 1]

Prueba de unión de GTPyS al receptor LPA1

Se suspenden 5 ^g de una fracción de membrana de células RH 7777 que expresan el receptor LPA1 humano (A324, ChanTest) en un tampón de reacción (HEPES 20 mM, NaCl 100 mM, MgCh 10 mM, GDP 10 ^M, 5 ^g de saponina, BSA al 0,2%, [35S]GTPyS 0,1 nM (NEG030X, Perkin Elmer), pH 7,4). Se añaden a la suspensión cada uno de los compuestos de prueba disueltos en DMSO a diversas concentraciones. Después de preincubación a 30°C durante 15 minutos, se añade LPA (L7260, Sigma, concentración final de 100 nM) y se incuban las suspensiones a 30°C durante 30 minutos. Se recogen las fracciones de membrana en un filtro de fibra de vidrio (GF/B, Whatman) usando un colector de células (M30, Brandel) y se lavan con tampón fosfato 10 mM (pH 7,4). Se mide la radiactividad de las fracciones de membrana con un analizador de centelleo líquido (2900TR, Packard) y se determina la concentración (CI⁵⁰) del compuesto de prueba requerida para una inhibición del 50% de la unión del receptor LPA1 y [35S]GTPyS mediante análisis de regresión no lineal usando EXSAS (versión 7.6.0, Arm Systex).

[Ejemplo de prueba 2]

Prueba de migración celular

Se llevó a cabo la prueba de migración celular usando Chemo-Tx (marca registrada) (116-8, Neuro Probe). Se cultivaron células de melanoma humano A2058 (obtenidas de la Colección Europea de Cultivos Celulares) en un medio EMEM libre de suero durante 24 horas y se resuspendieron en un medio DMEM que contenía BSA al 0,1% para dar una suspensión celular. Se añadieron a la suspensión celular cada uno de los compuestos de prueba disueltos en DMSO a diversas concentraciones y se cultivaron las suspensiones a 37°C durante 15 minutos (concentración final de DMSO del 0,5%). Se añadió el LPA disuelto en un medio DMEM que contenía BSA al 0,1% (concentración final de 100 nM) a una placa de 96 pocillos Chemo-Tx, y se colocó sobre la placa un filtro Chemo-Tx recubierto con fibronectina al 0,001% en ambos lados. Se añadieron las suspensiones celulares cultivadas (25.000 células) sobre la superficie superior del filtro y se cultivaron adicionalmente a 37°C durante 3 horas. Después de eso, se retiraron las células de la superficie superior del filtro. Después de retirar el filtro y secarse, se tiñeron las células que habían migrado hasta la superficie inferior del filtro, con tinción Diff-Quik (16920, Sysmex). Se midió la absorbancia del filtro (a 570 nm) y se determinó la concentración (CI⁵⁰) del compuesto de prueba requerida para una inhibición del 50% de la actividad de migración celular del LPA mediante análisis de regresión no lineal usando EXSAS (versión 7.6.0, Arm Systex).

En esta prueba, los compuestos de la presente invención mostraron una excelente actividad. Por ejemplo, los valores de CI 50 de los compuestos de los ejemplos 1 a 15 no fueron mayores de 200 nM.

[Ejemplo de prueba 3]

Prueba de liberación de histamina inducida por LPA en ratones

Se llevó a cabo la prueba de liberación de histamina inducida por LPA en ratones según el método de Swaney et al.

(The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 336 (2011), págs. 693-700). Se suspendió el compuesto de prueba en una disolución de metilcelulosa al 0,5% (133-14255, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), y se administró por vía oral a ratones CD1 macho (peso corporal de 30 a 40 g, suministrados por Charles River Laboratories, Japón) a una dosis de 10 ml/kg. 4 horas después de la administración, se administró LPA (857130P, Avanti) disuelto en PBS que contenía BSA al 0,1% a través de la vena de la cola (300 |ig/ratón). Inmediatamente después de eso, se anestesió a cada uno de los ratones con isoflurano y se extrajo sangre de una vena 2 minutos después de la administración de LPA. Se puso la sangre en un tubo de ensayo que contenía EDTA y se centrifugó a 4°C, 2.000 x g durante 10 minutos para obtener el plasma.

Se midió la concentración de histamina en el plasma con un kit de EIA (62HTMPEB, Cisbio Bioassays).

Se calculó la tasa de inhibición (%) en el grupo de administración de disolución de metilcelulosa al 0,5% en cada individuo basándose en la concentración de histamina en plasma en el ratón al que se le había administrado el compuesto de prueba, y se expresó la tasa de individuos que mostraron una tasa de inhibición del 80% o más como la tasa de eficacia (%).

En esta prueba, los compuestos de la presente invención mostraron una excelente actividad. Por ejemplo, los compuestos de los ejemplos 1 a 15 lograron una tasa de eficacia del 50% o más a una dosis de 10 mg/kg.

[Ejemplo de prueba 4]

Modelos de fibrosis pulmonar inducida por bleomicina

Se administró clorhidrato de bleomicina (Nippon Kayaku Co., Ltd.) a ratones para preparar los modelos de fibrosis pulmonar. Se administró el compuesto de prueba por vía oral cada día desde el día en que se inició la administración de bleomicina. Del día 3 al día 42 después del tratamiento con bleomicina, se extrajeron líquidos de lavado broncoalveolar (LLBA) o los pulmones con anestesia con isoflurano. Se centrifugaron los LLBA a 800 x g durante 10 minutos para proporcionar sobrenadantes. Se analizaron los sobrenadantes con el kit de ensayo de proteínas DC (500-0114, Biorad) para determinar las cantidades de proteínas, y se analizaron con el kit de ensayo de colágeno soluble Sircol (S111, Biocolor) para determinar las cantidades de colágeno. Además, se midieron biomarcadores para determinar inflamación y fibrosis en los sobrenadantes mediante el método de ELISA. Con respecto a los pulmones, después de medir sus pesos en húmedo, se midieron las cantidades de hidroxiprolina en los tejidos mediante una modificación del método de Woessner (Archives of Biochemistry and Biophysics, 93 (1961), págs. 440-447). Se fijaron porciones de los pulmones en disolución tamponada neutra de formalina al 10% y se observaron para detectar cambios histopatológicos. Se analizaron los resultados estadísticamente usando EXSAS (versión 7.6.0, Arm Systex).

[Ejemplo de prueba 5]

Modelos de fibrosis renal de obstrucción ureteral unilateral (OUU)

Se realiza una incisión en el abdomen de ratones anestesiados con isoflurano. Se liga el uréter izquierdo con un hilo de seda para preparar modelos de OUU. Se administra el compuesto de prueba por vía oral cada día desde el día en que se preparan los modelos de OUU. En el día 8, el día 14 o el día 21 después de la preparación de modelos de OUU, se extraen los riñones y se miden sus pesos en húmedo. Se extrae ARN de porciones de los riñones y se miden los niveles de expresión de los genes marcadores de fibrosis mediante el método de PCR cuantitativa. Además, se miden las cantidades de hidroxiprolina o colágeno en los tejidos renales. Se analizan los resultados estadísticamente usando EXSAS.

[Ejemplo de prueba 6]

Modelos de fibrosis hepática inducida con tetracloruro de carbono (CCU)

Se administró CCU diluido (035-01273, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) a ratones dos veces a la semana para preparar modelos de fibrosis hepática. Se administró el compuesto de prueba por vía oral cada día desde el día en que se inició la administración de CCU. Del día 3 al día 28 después del inicio de la administración de CCU, se extraen los hígados con anestesia con isoflurano y se miden sus pesos. Se extrae ARN de porciones de los hígados y se miden los niveles de expresión de los genes marcadores de fibrosis mediante el método de PCR cuantitativa. Además, se miden las cantidades de hidroxiprolina o colágeno en los tejidos hepáticos. Se fijan porciones de los hígados en disolución tamponada neutra de formalina al 10% y se observan para detectar cambios histopatológicos. Se analizan los resultados estadísticamente usando EXSAS.

[Ejemplo de prueba 7]

Modelos de rata con esteatohepatitis no alcohólica (EHNA)

Se preparan modelos de EHNA alimentando a ratas con una dieta deficiente en metionina/colina (DMC). Se permite que las ratas ingieran libremente una dieta normal o la dieta DMC durante 20 semanas. Se administra el compuesto de prueba por vía oral cada día desde el día en que se inicia la alimentación con la dieta DMC. Después de la cría durante 20 semanas, se extraen los hígados con anestesia con isoflurano y se miden sus pesos en húmedo. Se extrae ARN de porciones de los hígados y se miden los niveles de expresión de los genes marcadores de fibrosis mediante el método de PCR cuantitativa. Además, se miden las cantidades de hidroxiprolina o colágeno en los tejidos hepáticos. Se fijan porciones de los hígados en disolución tamponada neutra de formalina al 10% y se observan para detectar cambios histopatológicos. Se analizan los resultados estadísticamente usando EXSAS.

[Ejemplo de prueba 8]

Modelos de ratón con esteatohepatitis no alcohólica (EHNA)

Se usaron ratones STAM (marca registrada) (disponibles de Stelic Institute & Co., Inc.) como modelos de EHNA. Se preparan los ratones STAM (marca registrada) mediante la administración por vía subcutánea de 200 |ig de estreptozotocina (Sigma Aldrich) una vez en el lomo de ratones macho de 2 días de edad y alimentando a los ratones con una dieta con alto contenido en grasas (dieta con alto contenido en grasas 32, CLEA Japan, Inc.) después de 4 semanas desde el nacimiento (Medical Molecular Morphology, 46 (2013) págs. 141-152).

Se administra el compuesto de prueba por vía oral cada día después de 5 ó 6 semanas desde el nacimiento. A la edad de 9 ó 10 semanas, se extraen sangre y los hígados con anestesia. Se sometió la sangre a pruebas bioquímicas. Después de medir los pesos en húmedo de los hígados, se extrae ARN de porciones de los hígados y se miden los niveles de expresión de los genes marcadores de inflamación y fibrosis mediante el método de PCR cuantitativa. Además, se miden las cantidades de hidroxiprolina o colágeno en los tejidos hepáticos. Se preparan secciones de parafina o secciones congeladas a partir de las porciones de los hígados y se someten a pruebas histopatológicas para determinar las puntuaciones de actividad para EHGNA, las áreas de fibrosis o las áreas de inflamación. Se analizan los resultados estadísticamente usando EXSUS (versión 8.0, CAC EXICARE CORPORATION) o Prism 4 (GraphPad Software, Inc.).

[Ejemplo de prueba 9]

Modelos de ratón con esteatohepatitis no alcohólica (EHNA)

Se preparan modelos de EHNA criando ratones con una dieta con alto contenido en grasas deficiente en colina que contiene metionina al 0,1% (A06071302, Research Diets, Inc.) (International Journal of Experimental Pathology, 94 (2013) págs. 93-103).

Se administra el compuesto de prueba por vía oral cada día desde el día en que se inició la alimentación con la dieta CDAHFD (por sus siglas en inglés) . Después de 8 a 12 semanas, se extraen los hígados con anestesia con isoflurano y se miden sus pesos en húmedo. Se extrae ARN de porciones de los hígados y se miden los niveles de expresión de los genes marcadores de inflamación y fibrosis mediante el método de PCR cuantitativa. Además, se miden las cantidades de hidroxiprolina o colágeno en los tejidos hepáticos. Se fijan porciones de los hígados en disolución tamponada neutra de formalina al 10% y se observan para detectar cambios histopatológicos. Se analizan los resultados estadísticamente usando EXSUS (versión 8.0, Ca C EXICARE CORPORATION).

[Ejemplo de prueba 10]

Estudios farmacocinéticos en monos

Se insertó un catéter desechable desde la cavidad nasal en el estómago de un macaco cangrejero privado de alimento desde la noche del día antes de la prueba. A través de un tubo de jeringa, se administró por vía oral una suspensión de metilcelulosa al 0,5% o una disolución que contenía el compuesto de prueba a 10 mg/2 ml una vez a una dosis de 2 ml/kg. A través de un tubo de jeringa, se extrajeron muestras de sangre de la vena femoral antes de la administración y 15 minutos, 30 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 8 horas, 12 horas y 24 horas después de la administración. Se añadió EDTA-2K a las muestras de sangre y se centrifugaron las muestras (4°C, 1710 x g, 3000 rpm, 15 minutos) para obtener los plasmas. Se sometieron los plasmas a desproteinización mediante la adición de acetonitrilo (mezcla de 50 |il de plasma 200 |il de acetonitrilo) y se filtraron las mezclas (PTFE, 0,2 |im). Se analizaron los filtrados mediante CL-e M/EM (3200 QTrap, AB SCIeX; y la serie LC-20A o lC-30A, Shimadzu Corporation) para determinar las concentraciones del compuesto de prueba en los plasmas. Se calculó el AUC (el área bajo la curva de concentración en plasma) con Phoenix WinNonlin (CERTARA) basándose en los cambios en la concentración en el plasma.

A partir de los resultados de los ejemplos de prueba 2 y 3, las sales de compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno de la presente invención tienen una acción antagonista de receptores de LPA y son particularmente útiles como medicamentos para el tratamiento y/o la prevención (preferiblemente, medicamentos para el tratamiento) de enfermedades que acompañan a fibrosis, enfermedades inmunológicas o inflamatorias, enfermedades del sistema nervioso central o periférico, enfermedades urológicas y enfermedades relacionadas con cáncer.

[Ejemplo de preparación 1] - Cápsulas duras

Se cargan cápsulas de gelatina dura de dos partes convencionales con un polvo (100 mg) de la sal del compuesto del ejemplo, lactosa (150 mg), celulosa (50 mg) y estearato de magnesio (6 mg) para dar cápsulas duras, que se lavan y luego se secan.

[Ejemplo de preparación 2] - Cápsulas blandas

Se inyecta en gelatina una mezcla de un aceite comestible tal como aceite de soja o aceite de oliva y la sal del compuesto del ejemplo para dar cápsulas blandas que contienen 100 mg del principio activo, y se lavan las cápsulas blandas y luego se secan.

[Ejemplo de preparación 3] - Comprimidos

Según un método conocido en el campo farmacéutico, se producen comprimidos usando la sal del compuesto (100 mg) de los ejemplos, dióxido de silicio coloidal (0,2 mg), estearato de magnesio (0,2 mg), celulosa microcristalina (0,2 mg), almidón (0,2 mg) y lactosa (98,8 mg). Pueden recubrirse los comprimidos según se requiera.

Aplicabilidad industrial

Las sales de compuesto de tiofeno a-sustituido con halógeno de la invención representadas por la fórmula general (I) tienen una potente acción antagonista de receptores de LPA y excelentes propiedades tales como efectos farmacológicos de larga duración y solubilidad, y son útiles como medicamentos (medicamentos para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades que acompañan a fibrosis, enfermedades inmunológicas o inflamatorias, enfermedades del sistema nervioso central o periférico, enfermedades urológicas y enfermedades relacionadas con cáncer).

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES

   i. Sal representada por la fórmula general (I):

   [Fórm. quím. 71]

   

   R es un átomo de hidrógeno o un grupo metoxilo,

   X es un átomo de halógeno,

   A se selecciona del grupo que consiste en:

   [Fórm. quím. 72]

   

   n es 1 cuando M es un metal alcalino y es 2 cuando M es un metal alcalinotérreo.

   2. Sal según la reivindicación 1, en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

   3. Sal según la reivindicación 1, que es una sal del ácido (R)-1-[4'-(5-cloro-3-{[(1-feniletoxi)carbonil]amino}tiofen-2-il)-2'-metoxi-[1,1'-bifenil]-4-il]ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo. 4. Sal según la reivindicación 3, en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

   5. Sal según la reivindicación 1, que es una sal del ácido (R)-1-{4'-[5-cloro-3-({[1-(2,5-difluorofenil)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-2'-metoxi-[1,1'-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

   6. Sal según la reivindicación 5, en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

   7. Sal según la reivindicación 1, que es una sal del ácido (R)-1-{4'-[3-({[1-(2-clorofenil)etoxi]carbonil}amino)-5-fluorotiofen-2-il]-2'-metoxi-[1,1'-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

   8. Sal según la reivindicación 7, en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

   9. Sal según la reivindicación 1, que es una sal del ácido (R)-1-{4'-[5-cloro-3-({[1-(tiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1'-bifenil]-4-il}ciclopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

   10. Sal según la reivindicación 9, en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

   11. Sal según la reivindicación 1, que es una sal del ácido (R)-1-{4-[5-fluoro-3-({[1-(4-metiltiofen-3-il)etoxi]carbonil}amino)tiofen-2-il]-[1,1'-bifenil]-4-il}cidopropanocarboxílico con un metal alcalino o un metal alcalinotérreo.

   12. Sal según la reivindicación 11, en la que el metal alcalino o el metal alcalinotérreo es sodio, potasio o calcio.

   13. Antagonista de receptores de LPA que comprende la sal según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 como principio activo.

   14. Composición farmacéutica que comprende la sal según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 como principio activo.

   15. Composición farmacéutica según la reivindicación 14, para su uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad que acompaña a fibrosis, una enfermedad inmunológica o inflamatoria, una enfermedad del sistema nervioso central o periférico, una enfermedad urológica o una enfermedad relacionada con cáncer.