ES2730895T3 - Compuestos y métodos para reparación cutánea - Google Patents

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Abstract

Compuesto de fórmula (I):**Fórmula** en la que: las líneas discontinuas representan enlaces opcionales, siempre que sólo esté presente un enlace opcional a E1; E1 y E2 son cada uno independientemente C o N; L1 es alquileno C2, alquenileno C2 o alquinileno C2;**Fórmula** L2 es alquileno C1-C4, o Ar1 se selecciona de fenilo, naftilo o tiofenilo; Ar2 se selecciona de fenilo, naftilo o benzo[d][1,3]dioxolilo; R1 es -CO2H; R2 y R3 son cada uno independientemente -CO2H, halógeno, -CF3, alcoxilo, benciloxilo, alquilo C1-C4, o -OCH2CO2H; n es 1 ó 2; m y p son cada uno independientemente 1 ó 2; y q es de 0 a 3.

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos y métodos para reparación cutánea
Campo de la invención
La invención se refiere en general a composiciones y métodos para cicatrización, y particularmente al uso de agonistas EP4 para el tratamiento en cicatrización, reducción de cicatrices y reparación cutánea.
Antecedentes de la invención
El receptor prostanoide EP4 es un receptor acoplado a la proteína G que media las acciones de la prostaglandina E2 (PGE2) y se caracteriza por el bucle intracelular C terminal más largo en comparación con otros receptores prostanoides. Principalmente, los receptores EP4 se acoplan a G y median elevaciones en la concentración de cAMP, aunque también participan en otras rutas. Existen algunas redundancias en la función entre los receptores EP2 y EP4. Por ejemplo, ambos receptores inducen RANKL mediado por PGE2 a través de cAMP. Sin embargo, la EP2 está implicada en la expansión del cúmulo en la ovulación y la fertilización, mientras que el EP4 regula el cierre del conducto arterioso. La expresión de los receptores EP4 se controla mediante diversos procesos fisiológicos y fisiopatológicos, ya que estos receptores participan en la ovulación y la fertilización, inducen la formación de hueso, protegen contra la enfermedad inflamatoria intestinal, facilitan la migración y maduración de las células de Langerhans y median la inflamación articular en un modelo de artritis inducida por colágeno, entre otros.
Las imperfecciones cutáneas tales como heridas superficiales, cicatrices y arrugas pueden producirse en cualquier zona del cuerpo. La cicatrización puede producirse en todas las partes del cuerpo adulto, después de traumatismos locales o sistémicos tales como lesión mecánica, cirugía, quemadura, radiación y envenenamiento, y representa un fallo de procesos homeostáticos para restablecer la estructura normal en los sitios de herida. Las arrugas se producen debido a una variedad de motivos y son un signo común de envejecimiento. Tanto las cicatrices como los signos de envejecimiento pueden considerarse normalmente indeseables.
Por consiguiente, un agente que trata o previene de manera segura y eficaz tales imperfecciones cutáneas es muy deseable.
Sumario de la invención
La invención proporciona composiciones y métodos para cicatrización y reducción de cicatrices tal como se define en las reivindicaciones. Las composiciones y métodos de la invención incluyen al menos un agonista EP4 expuesto en el presente documento. Las heridas y/o cicatrices que pueden tratarse mediante las composiciones y métodos de la invención pueden aparecer por acontecimientos tales como cirugía, traumatismo, enfermedad, lesión mecánica, quemadura, radiación, envenenamiento, y similares.
En una realización de la invención, se proporcionan compuestos que tienen la estructura:
Figure imgf000002_0001
en la que:
las líneas discontinuas representan enlaces opcionales, siempre que sólo esté presente un enlace opcional a E1; E1 y E2 son cada uno independientemente C o N;
L1 es alquileno C2, alquenileno C2 o alquinileno C2;
V- 2 es alquileno
Figure imgf000003_0001
Ari se selecciona de fenilo, naftilo o tiofenilo;
Ar2 se selecciona de fenilo, naftilo o benzo[d][i,3]dioxolilo;
Ri es -CO2H;
R2 y R3 son cada uno independientemente -CO2H, halógeno, -CF3, alcoxilo, benciloxilo, alquilo C1-C4, o -OCH2CO2H; n es 1 ó 2;
m y p son cada uno independientemente 1 ó 2; y
q es de 0 a 3.
En otra realización de la invención, se proporcionan compuestos que tienen la estructura:
Figure imgf000003_0002
en la que:
la línea discontinua representa un enlace opcional;
Ei y E2 son cada uno independientemente C o N;
Li es alquileno C2, alquenileno o alquinileno;
Figure imgf000003_0003
Ari se selecciona de fenilo, naftilo o tiofenilo;
Ar2 se selecciona de fenilo, naftilo o benzo[d][i,3]dioxolilo;
Ri es -CO2H;
R2 y R3 son cada uno independientemente -CO2H, halógeno, -CF3, alcoxilo, benciloxilo o alquilo Ci-C4;
n es i ó 2;
m y p son cada uno independientemente i ó 2; y
q es de 0 a 3.
En otra realización de la invención, se proporcionan composiciones farmacéuticas que incluyen al menos un compuesto de la invención en un portador farmacéuticamente aceptable del mismo tal como se expone en las reivindicaciones.
En otra realización de la invención, se proporcionan compuestos y composiciones según la invención para su uso en métodos de tratamiento de una imperfección cutánea. Tales métodos pueden realizarse, por ejemplo, administrando a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición de la invención.
Descripción detallada de la invención
Debe entenderse que tanto la descripción general anterior y la siguiente descripción detallada son únicamente a modo de ejemplo y explicación, y no son restrictivas de la invención reivindicada. Tal como se usa en el presente documento, el uso del singular incluye el plural a menos que se indique específicamente lo contrario. Tal como se usa en el presente documento, “o” significa “y/o” a menos que se indique lo contrario. Además, el uso del término “que incluye” así como otras formas, tales como “incluye” e “incluido”, no es limitativo. Los encabezados de sección usados en el presente documento son sólo con fines de organización y no deben interpretarse como que limitan la materia descrita.
A menos que se proporcionen definiciones específicas, las nomenclaturas utilizadas en relación con, y los procedimientos de laboratorio y técnicas de química analítica, química inorgánica y orgánica de síntesis descritos en el presente documento son los conocidos en la técnica. Se usan indistintamente símbolos químicos convencionales con los nombres completos representados por tales símbolos. Por tanto, por ejemplo, los términos “hidrógeno” y “H” se entiende que tienen idéntico significado. Pueden usarse técnicas convencionales para síntesis química, análisis químico y formulación.
Tal como se usa en el presente documento, “alquilo” se refiere a grupos hidrocarbilo de cadena lineal o ramificada que tienen desde 1 hasta aproximadamente 100 átomos de carbono. Siempre que aparece en el presente documento un intervalo numérico, tal como “de 1 a 100” o “C1-C100”, se refiere a cada número entero en el intervalo dado; por ejemplo, “alquilo C1-C100” significa que un grupo alquilo puede comprender sólo 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, etc., hasta e incluyendo 100 átomos de carbono, aunque el término “alquilo” también incluye casos en los que no se designa ningún intervalo numérico de átomos de carbono. Tal como se usa en el presente documento, “alquilo” incluye grupos alquilo sustituidos que portan sustituyentes que incluyen alquilo, alquenilo, alquinilo, hidroxilo, oxo, alcoxilo, mercapto, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, heterocíclico, heterocíclico sustituido, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, ariloxilo, ariloxilo sustituido, halógeno, haloalquilo, ciano, nitro, nitrona, amino, alquilamino inferior, alquildiamino inferior, amido, azido, - C(O)H, -C(O)R7, -CH2OR7, -C(O)-, -C(O)-, -S-, -S(O)2, -OC(O)-O-, en donde R7 es H o alquilo inferior, acilo, oxiacilo, carboxilo, carbamato, sulfonilo, sulfonamida, sulfurilo, y similares. En algunas realizaciones en las que no se proporciona un intervalo numérico de átomos de carbono, “alquilo” se refiere a restos alquilo que tienen desde 1 hasta aproximadamente 12 átomos de carbono. Tal como se usa en el presente documento, “alquilo inferior” se refiere a restos alquilo que tienen desde 1 hasta aproximadamente 6 átomos de carbono.
Tal como se usa en el presente documento, “alquenilo” se refiere a grupos hidrocarbilo de cadena lineal o ramificada que tienen al menos un doble enlace carbono-carbono, y que tienen en el intervalo de aproximadamente 2 hasta aproximadamente 100 átomo de carbono. Tal como se usa en el presente documento, “alquenilo” incluye grupos alquenilo sustituidos que portan uno o más sustituyentes tal como se expone anteriormente. Tal como se usa en el presente documento, “alquenilo inferior” se refiere a restos alquenilo que tienen desde 2 hasta aproximadamente 6 átomos de carbono.
Tal como se usa en el presente documento, “alquinilo” se refiere a grupos hidrocarbilo de cadena lineal o ramificada que tienen al menos un triple enlace carbono-carbono, y que tienen en el intervalo de aproximadamente 2 hasta aproximadamente 100 átomos de carbono. Tal como se usa en el presente documento, “alquinilo” incluye grupos alquinilo sustituidos que portan uno o más sustituyentes tal como se expone anteriormente. Tal como se usa en el presente documento, “alquinilo inferior” se refiere a restos alquinilo que tienen desde 2 hasta aproximadamente 6 átomos de carbono.
Tal como se usa en el presente documento, “cicloalquilo” se refiere a restos alquilo cíclicos (es decir, que contienen anillo) que contienen normalmente en el intervalo de aproximadamente 3 hasta aproximadamente 8 átomos de carbono, e incluye grupos cicloalquilo que portan uno o más sustituyentes tal como se expone anteriormente.
Tal como se usa en el presente documento, “arilo” se refiere a grupos aromáticos que tienen en el intervalo de 5 hasta 14 átomos de carbono e incluye grupos arilo sustituidos que portan uno o más sustituyentes tal como se expone anteriormente.
Tal como se usa en el presente documento, “heteroarilo” se refiere a restos aromáticos que contienen uno o más heteroátomos (por ejemplo, N, O, S, o similares) como parte de la estructura de anillo y que tienen en el intervalo de 5 hasta 14 átomos totales en la estructura de anillo (es decir, átomos de carbono y heteroátomos) incluye grupos heteroarilo sustituidos que portan uno o más sustituyentes tal como se expone anteriormente.
Tal como se usa en el presente documento, “heterocídico” se refiere a grupos cíclicos (es decir, que contienen anillo) no aromáticos que contienen uno o más heteroátomos (por ejemplo, N, O, S, o similares) como parte de la estructura de anillo, y que tienen en el intervalo de 3 hasta 14 átomos de carbono e incluye grupos heterocíclico que portan uno o más sustituyentes tal como se expone anteriormente.
Tal como se usa en el presente documento, “halógeno” o “haluro” se refiere a fluoruro, cloruro, bromuro o yoduro. “Fluoruro, cloruro, bromuro o yoduro” también pueden denominarse “fluoro, cloro, bromo o yodo”.
En el presente documento se divulgan composiciones y métodos para tratar imperfecciones cutáneas, cicatrización y reducción de cicatrices. En una realización de la invención, se proporcionan compuestos de fórmula (I):
Figure imgf000005_0001
en la que:
las líneas discontinuas representan enlaces opcionales, siempre que sólo esté presente un enlace opcional a E1; E1 y E2 son cada uno independientemente C o N;
L1 es alquileno C2, alquenileno C2 o alquinileno C2;
l_2 es alquileno
Figure imgf000005_0002
Ar1 se selecciona de fenilo, naftilo o tiofenilo;
Ar2 se selecciona de fenilo, naftilo o benzo[d][1,3]dioxolilo;
R1 es -CO2H;
R2 y R3 son cada uno independientemente -CO2H, halógeno, -CF3, alcoxilo, benciloxilo, alquilo C1-C4 o -OCH2CO2H; n es 1 ó 2;
m y p son cada uno independientemente 1 ó 2; y
q es de 0 a 3.
En algunas realizaciones, L2 es alquileno C1-C4. En otras realizaciones, L2 es alquileno C1.
En algunas realizaciones, An es fenilo o naftilo.
En algunas realizaciones, Ar2 es fenilo o naftilo.
En determinadas realizaciones, Ar2 es benzo[d][1,3]dioxol.
En algunas realizaciones, R2 es halógeno. En otras realizaciones, R2 es F.
En algunas realizaciones, R2 es alcoxilo. En otras realizaciones, R2 es metoxilo.
En otra realización de la invención, se proporcionan compuestos de fórmula (III):
Figure imgf000006_0001
en la que:
las líneas discontinuas representan enlaces opcionales, siempre que sólo esté presente un enlace opcional;
Li es alquileno C2, alquenileno C2, alquinileno C2 o -OCH2-;
L2 es CH2;
Api y Ar2 son cada uno fenilo;
R1 es -CO2H;
cada R2 es independientemente halógeno, -CF3, alquilo C1-C4 o alcoxilo C1-C4;
R3 es H, halógeno o alcoxilo Ci-C4;y
p y v son cada uno independientemente 1 ó 2.
En una realización de fórmula (III), Li es alquileno C2, Ri es -CO2H, cada R2 es halógeno, metilo o metoxilo, y R3 es H.
En otra realización de fórmula (III), Li es alquileno C2, Ri es -CO2H, cada R2 es halógeno, metilo o metoxilo, R3 es H, y v es 1.
En otra realización de fórmula (III), Li es alquileno C2, Ri es -CO2H, cada R2 es halógeno, metilo o metoxilo, R3 es H, p es 2 , y v es 1.
En otra realización de fórmula (III), Li es alquileno C2, Ri es -CO2H, cada R2 es metoxilo, R3 es H, y v es 1.
Los compuestos a modo de ejemplo de la invención incluyen, pero no se limitan a, compuestos que tienen las siguientes estructuras: (los compuestos que no se encuentran bajo el alcance de las reivindicaciones se consideran a continuación como compuestos de referencia solamente)
Figure imgf000007_0001
Figure imgf000008_0001
Figure imgf000009_0001
Los compuestos de la invención y la divulgación pueden sintetizarse en una variedad de formas conocidas para los expertos en la técnica. El esquema 1 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para determinados compuestos de la invención.
Esquema 1
Figure imgf000009_0002
El esquema 2 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la invención.
Figure imgf000009_0003
El esquema 3 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la invención.
Figure imgf000010_0001
El esquema 4 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la divulgación.
Figure imgf000010_0002
El esquema 5 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la invención.
Figure imgf000011_0001
Esquema 7
Figure imgf000012_0001
El esquema 8 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la invención.
Figure imgf000012_0002
El esquema 9 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la invención.
Esquema 9
Figure imgf000013_0001
El esquema 10 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la invención.
Esquema 10
Figure imgf000013_0002
R = 3-metoxibencilo X = CH
3-(trifluorometil)bencilo LiOH, d ioxano/H20
2-feni eti o
Figure imgf000013_0003
J S L¡ 80 °C
El esquema 11 expuesto a continuación establece una ruta de síntesis para compuestos adicionales de la invención.
Esquema 11
Figure imgf000013_0004
Los esquemas 12 a 18 a continuación exponen rutas de síntesis para compuestos adicionales de la presente invención y la presente divulgación.
Esquema 12
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Esquema 13
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R = CH 2 CH 3
LÍOH 1 M/THF R = H ^ 60 °C
Esquema 18
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Tal como se usa en el presente documento, el término “imperfección cutánea” incluye una herida superficial, cicatriz o arruga en cualquier región de la piel del cuerpo.
Una “herida superficial” puede ser cualquier área en la que se compromete la integridad estructural de la superficie exterior de la piel. Una herida superficial puede deberse a incisión, laceración, abrasión, quemadura térmica, quemadura química, radiación o punción de la piel. La herida puede ser superficial o extenderse a capas más profundas de la dermis, la fascia profunda subcutánea, el músculo, el hueso u otros órganos internos.
Una “cicatriz” es un área de tejido fibroso (fibrosis) que reemplaza la piel normal (u otro tejido) tras lesión o enfermedad. Los tipos de cicatriz incluyen cicatrices hipertróficas, cicatrices hundidas y estrías. Las cicatrices hipertróficas se producen cuando el cuerpo produce en exceso colágeno, lo que provoca que la cicatriz se eleve por encima de la piel circundante. Un ejemplo de una cicatriz hipertrófica es una cicatriz queloide. Las cicatrices hundidas o atróficas tienen un aspecto hundido y aparecen cuando se pierde la estructura de soporte subyacente en la piel. Las estrías se producen cuando la piel se estira rápidamente (es decir, debido a una ganancia de peso significativa o crecimiento repentino), o cuando la piel se somete a tensión durante el proceso de curación, normalmente cerca de una articulación. Tal como se usa en el presente documento, el término “cicatriz” abarca cualquier tipo de cicatriz en la piel debido a cualquier causa.
Tal como se usa en el presente documento, el término “arruga” es un pliegue, cresta, surco, doblez, hoyo, cráter, o área hundida en la piel que puede estar causada por expresiones faciales habituales, pérdida de colágeno y/o elasticidad debido al envejecimiento, daño solar, tabaquismo, mala hidratación y otros diversos factores. Una arruga puede oscilar entre un surco profundo y una línea fina. Las arrugas que se producen en cualquier parte del cuerpo, en particular, en el presente documento, se contemplan arrugas en la cabeza o el cuello de un sujeto. Las arrugas que pueden tratarse según la divulgación incluyen, pero no se limitan a, un surco de la ceja, patas de gallo, pliegue nasogeniano, una o más líneas bajo los ojos o entre las cejas, y combinaciones de los mismos.
Tal como se usa en el presente documento, “tratamiento” significa aliviar (o eliminar) una o más características de una imperfección cutánea o bien temporalmente o bien de manera permanente. Cuando las composiciones se administran para tratar una herida, las composiciones promueven curación normal en comparación con una herida sin la administración. Es decir, el tamaño (longitud, profundidad, altura y/o ancho), carácter, color y/o textura de la herida tratada se parece más a tejido normal, sin heridas. En este aspecto, el tratamiento de una herida con las composiciones divulgadas puede prevenir, minimizar o mejorar el aspecto de una formación de cicatriz que resulta de la curación de la herida. Además, cuando las composiciones divulgadas se administran para tratar una arruga, la arruga se trata si el aspecto o relieve de la arruga se reduce visible o clínicamente. Es decir, la longitud y/o la profundidad se reduce en comparación con la arruga antes del tratamiento. Alternativamente, el tratamiento puede comprender la prevención de una arruga. En este aspecto, las composiciones divulgadas pueden aplicarse a una región de la piel que desarrolla normalmente una arruga, tal como la frente, labios, párpados, pliegue nasogeniano, piel bajo los ojos, o entre las cejas con el fin de prevenir el desarrollo de una arruga.
Las composiciones divulgadas pueden administrarse para prevenir la formación de cicatrices no asociadas con una herida, tales como estrías, o cicatrices que resultan del acné, varicela, sarampión u otros estados patológicos. En determinadas realizaciones, las composiciones divulgadas se administran a la zona de expansión de la piel con el fin de prevenir la formación de tales cicatrices. En estas realizaciones, la composición puede administrarse a cualquier región de la cara, el abdomen, pechos, los brazos, las piernas, los glúteos, la espalda, o cualquier otra zona en la que la piel es susceptible a desarrollar una cicatriz.
Las composiciones pueden administrarse antes de, de manera concomitante con y/o tras el desarrollo de la imperfección cutánea. Por ejemplo, las composiciones divulgadas pueden administrarse antes de una incisión, durante un procedimiento quirúrgico, y/o cualquier tiempo después de la operación, y luego se administra adicionalmente después del procedimiento a medida que se produce el proceso de curación. En otro ejemplo, las composiciones pueden administrarse durante el embarazo para prevenir las estrías. Alternativamente, las composiciones pueden administrarse tras el desarrollo de una imperfección.
Las composiciones pueden administrarse entre 1 y 7 días por semana, durante un periodo de tiempo necesario para lograr los resultados deseados, que puede ser de varios días a varios meses. Las composiciones pueden administrarse una vez o varias veces (2, 3, 4, o más veces) al día según el efecto deseado. En determinadas realizaciones, las composiciones pueden administrarse cada 1, 2, 3, 4, 5, 6 ó 7 días. En otra realización, las composiciones pueden administrarse una o más veces cada 1, 2, 3 ó 4 semanas. La administración puede ser cada mes o dos meses. Además, las composiciones pueden administrarse durante 1, 2, 3, 6, 9 ó 12 meses o más. En determinadas realizaciones, las composiciones pueden administrarse de manera continua para mantener un resultado deseado.
Los compuestos divulgados pueden administrarse como parte de una composición. Tal como se usa en el presente documento, “formulación” y “composición” pueden usarse indistintamente y se refieren a una combinación de elementos que se presentan juntos para un propósito dado. Tales términos los conocen bien los expertos habituales en la técnica.
Tal como se usa en el presente documento, “portador”, “portador inerte” y “portador aceptable” pueden usarse indistintamente y se refieren a un portador que puede combinarse con los compuestos ahora divulgados con el fin de proporcionar una composición deseada. Los expertos habituales en la técnica reconocerán varios portadores que se conocen bien para elaborar composiciones farmacéuticas y/o cosméticas específicas. De manera deseable, el portador es adecuado para la aplicación a superficies queratinosas u otras zonas del cuerpo. Tras la aplicación, los portadores aceptables están sustancialmente libres de reacciones adversas con la piel y otras superficies queratinosas. Por ejemplo, los portadores pueden tomar forma de cremas grasas o no grasas, suspensiones lechosas o tipos de emulsión en aceite o aceite en agua, lociones, geles o gelatinas, disoluciones coloidales o no coloidales acuosas u oleosas, pastas, aerosoles, comprimidos solubles o barras. Según una realización, la composición incluye un portador o vehículo dermatológicamente compatible. El vehículo que puede emplearse para preparar composiciones puede comprender, por ejemplo, disoluciones acuosas tales como por ejemplo, soluciones salinas fisiológicas, disoluciones oleosas o pomadas. El vehículo puede contener además conservantes dermatológicamente compatibles tales como por ejemplo, cloruro de benzalconio, tensioactivos como por ejemplo, polisorbato 80, liposomas o polímeros, por ejemplo, metilcelulosa, poli(alcohol vinílico), poli(vinilpirrolidona) y ácido hialurónico; estos pueden usarse para aumentar la viscosidad.
Los ejemplos de agentes adicionales que pueden incluirse en las presentes composiciones son agentes contra la picazón, anticelulíticos, anticicatrizantes y antiinflamatorios, anestésicos, antiirritantes, vasoconstrictores, vasodilatadores, así como agentes para prevenir/detener la hemorragia, y mejorar/eliminar la pigmentación, hidratantes, agentes descamantes, agentes tensores, agentes antiacné. Los agentes contra la picazón pueden incluir metilsulfonilmetano, bicarbonato de sodio, calamina, alantoína, caolín, menta piperita, aceite de árbol de té y combinaciones de los mismos. Los agentes anticelulíticos pueden incluir forskolina, compuestos de xantina tales como, pero sin limitarse a, cafeína, teofilina, teobromina y aminofilina, y combinaciones de los mismos. Los agentes anestésicos pueden incluir lidocaína, benzocaína, butambén, dibucaína, oxibuprocaína, pramoxina, proparacaína, proximetacaína, tetracaína, y combinaciones de las mismas. Los agentes anticicatrizantes pueden incluir IFN-y, fluorouracilo, poli(ácido láctico-coglicólico), polietilenglicol metilado, poli(ácido láctico), polietilenglicol metilado y combinaciones de los mismos. Los agentes antiinflamatorios pueden incluir dexametasona, prednisolona, corticosterona, budesonida, estrógeno, sulfasalazina, mesalamina y derivados y combinaciones de los mismos. Además, también pueden incluirse agentes activos tales como epinefrina, timidina, citidina, uridina, antipirina, ácido aminocaproico, ácido tranexámico, eucaliptol, alantoína, glicerina y selenita de sodio. Las formulaciones pueden comprender además inhibidores de la degradación. Los inhibidores de la degradación incluyen, pero no se limitan a, glicosaminoglicanos (por ejemplo, heparina, sulfato de heparina, sulfato de dermatán, sulfato de condroitina, HA o­ sulfatado, linamarina y amigdalina), antioxidantes (por ejemplo ácido ascórbico, melatonina, vitamina C, vitamina E), proteínas (por ejemplo, inhibidor de la hialuronidasa sérica), y ácidos grasos (por ejemplo ácidos grasos C10 a C22 saturados). En determinadas realizaciones, el agente activo adicional es un antioxidante. En determinadas realizaciones, el antioxidante comprende una vitamina C y/o una vitamina E tal como succinato de d-alfa-tocoferil polietilenglicol 1000 (TPGS).
Las composiciones divulgadas son adecuadas para administración tópica, subcutánea, intradérmica, subdérmica, subcutánea y transdérmica. Administración tópica se refiere al uso de una composición aplicada a la superficie de la piel en el sitio de una imperfección cutánea para ejercer una acción local. Por consiguiente, tales composiciones tópicas incluyen las formas farmacéuticas o cosméticas en las que la composición se aplica externamente mediante contacto directo con la superficie de la piel que va a tratarse, tal como la cara, el cuello, los brazos, las piernas y/o el torso. Las formas farmacéuticas o cosméticas convencionales para este propósito incluyen pomadas, linimentos, cremas, champús, lociones, pastas, gelatinas, pulverizadores, aerosoles, y similares, y pueden aplicarse además directamente o en parches o apósitos impregnados según la imperfección y región cutánea que va a tratarse. El término “pomada” abarca formulaciones (incluyendo cremas) que tienen bases oleaginosas, solubles en agua y de tipo emulsión, por ejemplo, petrolato, lanolina, polietilenglicoles, así como mezclas de estos.
Las composiciones son también apropiadas para aplicaciones de mesoterapia. La mesoterapia es una técnica de tratamiento cosmético no quirúrgica que implica inyección intraepidérmica, intradérmica y/o subcutánea de una composición. Las composiciones se administran en forma de múltiples gotitas pequeñas en la epidermis, unión dermo-epidérmica y/o la dermis.
Según la divulgación, una composición farmacéutica o cosmética puede incluir opcionalmente uno o más agentes tales como, sin limitación, agentes emulsionantes, agentes humectantes, agentes edulcorantes o aromatizantes, agentes de ajuste de la tonicidad, conservantes, tampones, antioxidantes y flavonoides. Los agentes de ajuste de la tonicidad útiles en una composición farmacéutica de la presente divulgación incluyen, pero no se limitan a, sales tales como acetato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, manitol o glicerina y otros agentes de ajuste de la tonicidad farmacéuticamente aceptables. Los conservantes útiles en las composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento incluyen, sin limitación, cloruro de benzalconio, clorobutanol, timerosal, acetato de fenilo mercúrico y nitrato de fenilo mercúrico. Pueden usarse diversos tampones y medios para ajustar el pH para preparar una composición farmacéutica, incluyendo pero sin limitarse a, tampones acetato, tampones citrato, tampones fosfato y tampones borato. De manera similar, los antioxidantes útiles en composiciones farmacéuticas se conocen bien en la técnica e incluyen por ejemplo, metabisulfito de sodio, tiosulfato de sodio, acetilcisteína, hidroxianisol butilado e hidroxitolueno butilado. Los flavonoides son compuestos encontrados en plantas que se conoce bien que tienen diversos efectos antioxidantes y bioquímicos beneficiosos. Las subcategorías de flavonoides incluyen: flavonas, flavonoles, flavanonas y flavanonoles. Los ejemplos de flavonoides incluyen: luteolina, apigenina, tangeritina, quercetina, kaempferol, miricetina, fisetina, isorhamnetina, pachipodol, ramnazina, hesperetina, naringenina, eriodictiol, homoeriodictiol, taxifolina, dihidroquercetina, dihidrokaempferol, ácido tánico, tannis, tannis condensado y tannis hidrolizable. Se entiende que estas y otras sustancias conocidas en la técnica pueden incluirse en una composición farmacéutica o cosmética divulgada en el presente documento.
Tal como se usa en el presente documento, el término “cantidad terapéuticamente eficaz” significa la cantidad de la composición farmacéutica o cosmética que provocará la respuesta biológica, médica o cosmética de un sujeto que lo necesita que busca el investigador, veterinario, médico u otro profesional clínico. En algunas realizaciones, el sujeto que lo necesita es un mamífero. En determinadas realizaciones, el mamífero es humano. Un experto habitual en la técnica puede determinar cantidades eficaces del compuesto pero variarán según el compuesto empleado, la frecuencia de aplicación y el resultado deseado, y oscilarán generalmente desde aproximadamente el 0,0000001% hasta aproximadamente el 50%, en peso, de la composición, preferiblemente desde aproximadamente el 0,001% hasta aproximadamente el 50%, en peso, de composición total, más preferiblemente desde aproximadamente el 0,001% hasta aproximadamente el 30%, en peso de la composición. En determinadas realizaciones, el compuesto es aproximadamente el 0,004% en peso de la composición.
Los compuestos descritos y reivindicados en el presente documento pueden administrarse al menos en la dosis mínima necesaria para lograr el efecto terapéutico deseado. Generalmente, tales dosis estarán en el intervalo de aproximadamente 1 mg/día a aproximadamente 1000 mg/día; más preferiblemente en el intervalo de aproximadamente 10 mg/día a aproximadamente 500 mg/día. En otra realización ejemplo, el compuesto o compuestos pueden estar presentes en una composición o formulación en un intervalo de aproximadamente 0,0001 mg/kg/día a aproximadamente 100 mg/kg/día o de aproximadamente 0,01 mg/kg/día a aproximadamente 100 mg/kg/día. Sin embargo, la cantidad real del compuesto que va a administrarse en cualquier caso dado la determinará un médico considerando las circunstancias relevantes, tales como la edad y el peso de un paciente, el estado físico general del paciente, la gravedad de la imperfección cutánea y la vía de administración. En algunos casos, la dosificación se evalúa caso por caso.
Además, las composiciones pueden diseñarse para retrasar la liberación del compuesto a lo largo de un periodo de tiempo dado, o para controlar cuidadosamente la cantidad de compuesto liberado en un momento dado durante el transcurso del tratamiento.
El pH de las composiciones divulgadas puede ser de aproximadamente 3 a aproximadamente 8,0, o de aproximadamente 6,5 a aproximadamente 7,5. En determinadas realizaciones, el pH de la formulación es de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,4 o de aproximadamente 7,1 a aproximadamente 7,3.
Las realizaciones específicas divulgadas en el presente documento pueden limitarse adicionalmente en las reivindicaciones usando el lenguaje que consiste en o que consiste esencialmente en. Cuando se usa en las reivindicaciones, ya sea como presentado o añadido por enmienda, el término de transición “que consiste en” excluye cualquier elemento, etapa o ingrediente no especificado en las reivindicaciones. El término de transición “que consiste esencialmente en” limita el alcance de una reivindicación a las etapas o materiales especificados y las que no afectan materialmente a la(s) características(s) básica(s) y nueva(s). Las realizaciones de la invención así reivindicadas se describen inherente o expresamente y se permiten en el presente documento.
Debe entenderse que las realizaciones de la invención divulgadas en el presente documento son ilustrativas de los principios de la presente invención.
Ejemplos
Esquema 1 (procedimientos representativos para las entradas 1-8, tabla 1)
4-(2-(Indolin-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se agitó una disolución de 4-vinilbenzoato de metilo (536 mg, 3,33 mmol) y dímero 9-BBN (812 mg, 3,33 mmol) en THF (10 ml) a temperatura ambiente durante 19 h y luego se añadieron 0,5 ml de H2O. Después de 30 minutos, se transfirió la disolución por cánula a una mezcla de 7-bromoindolina (527 mg, 2,66 mmol) y PdCh(dppf) (448 mg, 0,55 mmol) en 10 ml de DMF. Se añadió disolución de K3PO4 (1,4 ml, 3 M) después de 5 minutos y se agitó la mezcla oscura a temperatura ambiente durante la noche. Entonces se repartió la mezcla entre 50 ml de acetato de etilo y 50 ml de H2O y se lavó adicionalmente la disolución de acetato de etilo con H2O (3 x 50 ml). Entonces se secó la disolución (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 40%) seguido por otra cromatografía ultrarrápida (0% de acetato de etilo/C^Ch ^ 10%) dio el compuesto del título (320 mg, 33%).
4-(2-(1-(3-Fluorobenc¡l)¡ndol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se agitó una mezcla de 4-(2-(indolin-7-il)etil)benzoato de metilo (22 mg, 0,078 mmol), bromuro de 3-fluorobencilo (12 |il, 0,10 mmol) y K2CO3 (20 mg, 0,14 mmol) en 0,2 ml de DMF a temperatura ambiente. Después de 22 h, se añadieron 20 ml de acetato de etilo y se lavó la mezcla resultante con H2O (4 x 25 ml) y luego se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó para dar el compuesto del título (10 mg) que se usó directamente en la siguiente etapa.
Ácido 4-(2-(1-(3-fluorobenc¡l)¡ndol¡n-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se calentó una mezcla de 4-(2-(1-(3-fluorobencil)indolin-7-il)etil)benzoato de metilo (10 mg, 0,026 mmol), disolución de LiOH (0,2 ml, 0,2 mmol, 1 M) y 1,4-dioxano (1 ml) a 80°C durante 19 h. Se añadió disolución de HCl (10 ml, 0,1 M) y se extrajo la mezcla resultante con CH2O2 (3 x 15 ml). Entonces se secó la disolución orgánica combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó para dar el compuesto del título (10 mg).
Esquema 2 (entrada 9, tabla 1)
3.4-D¡h¡droqu¡nol¡na-1(2H)-carbox¡lato de tere-butilo. Se añadió dicarbonato de di-fere-butilo (1,181 g, 5,4 mmol) a una disolución de 1,2,3,4-tetrahidroquinolina (626 mg, 4,7 mmol), trietilamina (1,3 ml, 9,3 mmol) y DMAP (112 mg, 0,19 mmol) en CH3CN (15 ml). Se agitó la reacción durante 1,5 h a temperatura ambiente y luego se calentó durante la noche a 55°C. Se dejó que la disolución se enfriara hasta temperatura ambiente y luego se evaporó. Se repartió el residuo entre 25 ml de acetato de etilo y 25 ml de HCl 1 M. Se lavó adicionalmente la disolución de acetato de etilo con HCl 1 M (2 x 25 ml) y 25 ml de salmuera y luego se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 40%) dio el compuesto del título (139 mg, 13%).
8-Yodo-3.4-d¡h¡droqu¡nol¡na-1(2H)-carbox¡lato fere-butilo. Se usó un procedimiento similar al descrito en Peter Beak, Won-Koo Lee Tetrahedron Letters 1989, 30, 1197-1200: se añadió see-butil-litio (0,51 ml, 0,71 mmol) a una disolución a -78°C de 3,4-dihidroquinolina-1(2H)-carboxilato de fere-butilo (139 mg, 0,59 mmol) y N,N,N',N'-tetrametiletilenediamina (TMEDA, 0,2 ml, 1,33 mmol) en dietil éter (1,2 ml). Después de 3 h, se añadió por cánula una disolución de 1,2-diyodoetano (201 mg, 0,71 ml) en 1 ml de dietil éter y se dejó que la reacción se calentara hasta temperatura ambiente. Después de 19 h, se repartió la mezcla entre 20 ml de H2O y 20 ml de dietil éter. Se extrajo adicionalmente la fase acuosa con 20 ml de dietil éter y se secó la disolución de éter combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/ hexanos ^ 40%) dio el compuesto del título (154 mg, 73%).
8-Yodo-1.2.3.4-tetrah¡droqu¡nol¡na. Se agitó una disolución de 8-yodo-3,4-dihidroquinolina-1(2H)-carboxilato de ferebutilo (82 mg, 0,23 mmol) en HCl 4 M/dioxano (1 ml, 4 mmol) a temperatura ambiente. Después de 1 h, se añadieron 20 ml de disolución de NaOH 1 M y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (2 x 20 ml). Se secó la disolución de acetato de etilo combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó para dar el compuesto del título como un aceite transparente, incoloro (57 mg, 0,22 mmol, 96%).
4-í2-í1.2.3.4-Tetrah¡droqu¡nol¡n-8-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(indolin-7-il)etil)benzoato de metilo, a partir de 8-yodo-1,2,3,4-tetrahidroquinolina (57 mg, 0,22 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (46 mg, 0,29 mmol) lo que dio el compuesto del título (31 mg, 0,10 mmol, 48%).
4-(2-(1-(3.5-D¡metox¡benc¡l)-1.2.3.4-tetrah¡droqu¡nol¡n-8-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se agitó una mezcla de 4-(2-(1,2,3,4-tetrahidroqu¡nol¡n-8-il)et¡l)benzoato de metilo (18 mg, 0,061 mmol), K2CO3 (18 mg, 0,13 mmol), y bromuro de 3,5-dimetoxibencilo (14 mg, 0,061 mmol) en DMF (0,2 ml) a temperatura ambiente. Después de 20 h, se añadieron 20 ml de acetato de etilo y se lavó la mezcla resultante con H2O (4 x 25 ml) y luego se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó lo que dio el compuesto del título contaminado con los demás materiales de partida. Se llevó el residuo a 0,2 ml de DMF y se añadieron K2CO3 (21 mg) y bromuro de 3,5-dimetoxibencilo (6 mg) y se agitó la mezcla resultante a 50°C durante 2 h ya 70°C durante 2,5 h. Se dejó que la mezcla resultante se enfriara hasta temperatura ambiente y luego se trabajó como antes. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 2%) seguido por purificación adicional mediante cromatografía en capa fina preparativa (gel de sílice, CH2Cl2) dio el compuesto del título (7 mg, 26%).
Ácido 4-(2-(1-(3.5-D¡metox¡benc¡l)-1.2.3.4-tetrah¡droqu¡nol¡n-8-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)¡ndol¡n-7-il)et¡l)benzo¡co con 4-(2-(1-(3,5-dimetoxibenc¡l)-1,2,3,4-tetrahidroquinol¡n-8-¡l)et¡l)benzoato de metilo (7 mg, 0,016 mmol) y LiOH 1 M (0,2 ml) en 1 ml de dioxano. Se purificó el residuo bruto mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (50% de acetato de etilo/hexanos) lo que dio el compuesto del título (2 mg, 29%).
Esquema 3 (entradas 10-11, tabla 1)
4-Bromo-2-(3-metoxibenc¡l)¡so¡ndol¡na. Se agitó una mezcla de 4-bromoisoindolina (98 mg, 0,49 mmol), bromuro de 3- metoxibencilo (69 |il, 0,49 mmol) y K2CO3 (66 mg, 0,48 mmol) en 2 ml de acetona a temperatura ambiente. Después de agitar durante la noche, se repartió la mezcla entre 25 ml de H2O/ 25 ml de CH2Cl2. Se extrajo adicionalmente la fase acuosa con CH2Cl2 (25 ml) y se secó la disolución orgánica combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/ hexanos ^ 40%) dio el compuesto del título (32 mg, 20%). 4- (2-(2-(3-Metox¡benc¡l)¡soindol¡n-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(¡ndolin-7-il)et¡l)benzoato de metilo, a partir de 4-bromo-2-(3-metoxibencil)¡so¡ndol¡na (32 mg, 0,10 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (19 mg, 0,12 mmol) lo que dio el compuesto del título (23 mg, 0,057 mmol, 57%).
Ácido 4-(2-(2-(3-Metox¡benc¡l)¡soindol¡n-4-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)¡ndol¡n-7-il)et¡l)benzo¡co con 4-(2-(2-(3-metoxibenc¡l)¡so¡ndol¡n-4-il)et¡l)benzoato de metilo (11 mg, 0,027 mmol) y LiOH 1 M (0,1 ml) en 1 ml de dioxano, calentando durante la noche a 60°C. Esto dio el compuesto del título (11 mg, 100%).
4-Bromo-2-(3-metoxifenet¡l)¡so¡ndol¡na. Se agitó una mezcla de 4-bromoisoindolina (107 mg, 0,54 mmol), 1-(2-bromoetil)-3-metoxibenceno (89 |il, 0,57 mmol) y K2CO3 (75 mg, 0,54 mmol) en 1 ml de DMF a temperatura ambiente. Después de agitar durante la noche, se repartió la mezcla entre 25 ml de H2O/ 25 ml de acetato de etilo. Se lavó la fase de acetato de etilo con agua (3 x 25 ml) y se secó la disolución orgánica combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 50%) dio el compuesto del título (26 mg, 14%).
4-(2-(2-(3-Metox¡fenet¡l)¡soindol¡n-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(¡ndolin-7-il)et¡l)benzoato de metilo, a partir de 4-bromo-2-(3-metoxifenetil)¡so¡ndol¡na (26 mg, 0,078 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (17 mg, 0,11 mmol) lo que dio el compuesto del título (19 mg, 0,046 mmol, 59%).
Ácido 4-(2-(2-(3-Metox¡fenet¡l)¡soindol¡n-4-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)¡ndol¡n-7-il)et¡l)benzo¡co con 4-(2-(2-(3-metoxifenet¡l)¡so¡ndol¡n-4-il)et¡l)benzoato de metilo (10 mg, 0,024 mmol) y LiOH 1 M (0,1 ml) en 1 ml de dioxano, calentando durante la noche a 60°C. La purificación del producto bruto mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (5% de metanol/CH2Cl2) dio el compuesto del título (6 mg, 62%).
Esquema 4 (entrada 12, tabla 1) (ejemplo de referencia)
4-(2-(Isoindol¡n-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(¡ndolin-7-il)etil)benzoato de metilo, a partir de 4-bromoisoindolina (252 mg, 0,1.27 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (246 mg, 1,53 mmol). La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (2% de metanol/cH2Cl2 (0,5% de trietilamina) ^ 4%) dio el compuesto del título (155 mg, 43%).
4- (2-(2-(3.5-D¡metox¡fen¡l)¡so¡ndol¡n-4-il)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito en Wolfe, J.P.; Buchwald, S.L. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1999, 38, 2413. Se agitó una mezcla de 4-(2-(¡soindolin-4-il)etil)benzoato de metilo (64 mg. 0.23 mmol). Pd(OAc)2 (1 mg. 0.0045 mmol). 1-bromo-3.5-dimetoxibenceno (62 mg.
0.29 mmol). Johnphos (3 mg. 0.01 mmol). y terc-BuONa (32 mg. 0.33 mmol) en tolueno a temperatura ambiente. Después de 20 h. se repartió la mezcla entre 10 ml de H2O/20 ml de acetato de etilo. Se extrajo adicionalmente la fase acuosa con 20 ml de acetato de etilo y se secó la disolución de acetato de etilo combinada (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 30%) dio el compuesto del título (17 mg. 18%). Ácido 4-(2-(2-(3.5-d¡metox¡fen¡l)¡soindol¡n-4-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)¡ndol¡n-7-il)et¡l)benzo¡co con 4-(2-(2-(3.5-dimetox¡fen¡l)¡so¡ndol¡n-4-¡l)etil)benzoato de metilo (9 mg. 0.021 mmol) y LiOH 1 M (0.2 ml) en 1 ml de dioxano. calentando durante la noche a 80°C. La purificación del producto bruto mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (5% de metanol/CH2Cl2) dio el compuesto del título (6 mg. 69%).
Esquema 5 (entradas 13-14. tabla 1)
5- Bromotiofeno-2-carbox¡lato de metilo. Se calentó una disolución de ácido 5-bromotiofeno-2-carboxílico (4.995 g.
24.1 mmol) en 30 ml de CH3OH/8 ml de cloruro de acetilo a 65°C. Después de 22 h. se dejó que la reacción se enfriara hasta temperatura ambiente y luego se evaporó. Se repartió el residuo entre 100 ml de disolución de NaHCO3 saturada/75 ml de acetato de etilo. Se lavó adicionalmente la fase de acetato de etilo con disolución de NaHCO3 saturada (75 ml) y luego se secó (Na2SO4). se filtró y se evaporó para dar el compuesto del título (4.921 g.
22.3 mmol. 93%).
5-V¡nilt¡ofeno-2-carbox¡lato de metilo. Se usó un procedimiento descrito en Molander. G.A.; Brown. A.R. J.Org. Chem. 2006. 71. 9681: se agitó una mezcla de 5-bromotiofeno-2-carboxilato de metilo (104 mg. 0.47 mmol). viniltrifluoroborato de potasio (67 mg. 0.50 mmol). PdCl2 (9 mg. 0.05 mmol). PPh3 (42 mg. 0.16 mmol) y Cs2CO3 (380 mg. 1.2 mmol) en THF/H2O 9:1 (1 ml) a 85°C. Después de 20 h. se dejó que la reacción se enfriara hasta temperatura ambiente y luego se repartió entre 10 ml de H2O/25 ml de CH2Cl2. Se extrajo adicionalmente la fase acuosa con CH2O2 (2 x 15 ml) y se secó la disolución de CH2Cl2 combinada (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 40%) dio el compuesto del título (52 mg. 66%).
Se llevó este producto intermedio a los compuestos finales usando procedimientos análogos a los mostrados en el esquema 1 y descritos anteriormente.
Esquema 6 (entrada 15. tabla 1)
7-Yodo-1-(3-metoxibenc¡l)-1H-¡ndol. Se añadió NaH (54 mg. 1.3 mmol. 60% en aceite mineral) a una disolución de 7-yodo-1H-indol (273 mg. 1.1 mmol). Después de 15 minutos. se añadió bromuro de 3-metoxibencilo (169 |il.
1.2 mmol) y se agitó la mezcla a temperatura ambiente. Después de 20 h. se repartió la reacción entre 30 ml de acetato de etilo/25 ml de H2O. Se lavó adicionalmente la fase orgánica con H2O (3 x 25 ml) y luego se secó (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 40%) dio el compuesto del título (314 mg. 79%).
4-(2-(1-(3-Metoxibenc¡l)-1H-¡ndol-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(¡ndolin-7-il)et¡l)benzoato de metilo. a partir de 7-yodo-1-(3-metoxibencil)-1H-indol (94 mg. 0.26 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (46 mg. 0.29 mmol) lo que dio el compuesto del título (18 mg. 17%).
Ácido 4-(2-(1-(3-metoxibenc¡l)-1H-¡ndol-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)¡ndol¡n-7-il)et¡l)benzo¡co con 4-(2-(1-(3-metoxibencil)-1H-¡ndol-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo (9 mg. 0.023 mmol) y LiOH 1 M (0.1 ml) en 1 ml de dioxano. calentando durante la noche a 60°C. Esto dio el compuesto del título (7 mg. 78%).
Esquema 7 (entradas 16-17. tabla 1)
1-(7-Bromoindol¡n-1-¡l)-2-(3-metox¡fen¡l)etanona. Se añadió ácido 2-(3-Metoxifenil)acét¡co (124 mg. 0.75 mmol) a una mezcla de 7-bromoindolina (137 mg. 0.69 mmol) y N-(3-dimet¡lam¡noprop¡l)-N'-et¡lcarbod¡¡m¡da (EDCI. 191 mg.
1.0 mmol) en 2 ml de CH2Cl2. Después de 23 h. se añadieron 10 ml de disolución de NaHCO3 saturada y se extrajo la mezcla resultante con CH2Cl2 (2 x 20 ml). Se secó la fase orgánica (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 60%) dio el compuesto del título (177 mg. 51%).
7-Bromo-1-(3-metoxifenet¡l)¡ndol¡na. Se añadió BH3 THF (0.5 ml. 0.5 mmol) a una disolución de 1-(7- bromoindolin-1-il)-2-(3-metoxifenil)etanona (55 mg. 0.16 mmol) en 1 ml de THF. Después de 20 h. se añadieron 5 ml de HCl 2.5 M lentamente y se agitó la mezcla durante 45 minutos. Se añadió NaOH (5 ml, 3 M), se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (2 x 20 ml) y se secó la disolución orgánica combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 40%) dio el compuesto del título (33 mg, 63%).
4-(2-(1-(3-Metox¡fenet¡l)indol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(indolin-7-il)etil)benzoato de metilo, a partir de 7-bromo-1-(3-metoxifenetil)indolina (33 mg, 0,10 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (20 mg, 0,12 mmol). Se obtuvo el compuesto del título (14 mg, 34%) tras una purificación final mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (CH2Cl2).
Ácido 4-(2-(1-(3-Metox¡fenet¡l)indol¡n-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)indolin-7-il)etil)benzoico con 4-(2-(1-(3-metoxifenetil)indolin-7-il)etil)benzoato de metilo (14 mg, 0,034 mmol) y LiOH 1 M (0,2 ml) en 1 ml de dioxano, calentando durante la noche a 80°C. Esto dio el compuesto del título (15 mg, 100%).
4-(2-(1-(2-(3-Metox¡fen¡l)acetil)¡ndol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(indolin-7-il)etil)benzoato de metilo, a partir de 1-(7-bromoindolin-1-il)-2-(3-metoxifenil)etanona (52 mg, 0,15 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (33 mg, 0,20 mmol). Se obtuvo el compuesto del título (8 mg, 12%) tras una purificación final mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (40% de acetato de etilo/hexanos).
Ácido 4-(2-(1-(2-(3-metox¡fen¡l)acet¡l)¡ndolin-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)indolin-7-il)etil)benzoico con 4-(2-(1-(2-(3-metoxifenil)acetil)indolin-7-il)etil)benzoato de metilo (8 mg, 0,019 mmol) y LiOH 1 M (0,2 ml) en 1 ml de dioxano, calentando durante la noche a 80°C. Esto dio el compuesto del título (5 mg, 63%) tras purificación mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (50% de acetato de etilo/hexanos).
Esquema 8 (entrada 18, tabla 1)
4-(2-(1-(3.5-D¡metox¡benzo¡l)indol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se añadió trietilamina (18 |il, 0,13 mmol) a una disolución de 4-(2-(indolin-7-il)etil)benzoato de metilo (19 mg, 0,066 mmol) y cloruro de 3,5-dimetoxibenzoilo (13 mg, 0,065 mmol) en CH2Cl2 (0,75 ml). Después de 3 h, se añadieron 10 ml de disolución de HCl 1 M y se extrajo la mezcla resultante con CH2O2 (2 x 20 ml). Se secó la disolución orgánica combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/ hexanos ^ 20%) dio el compuesto del título (26 mg, 90%).
Ácido 4-(2-(1-(3.5-d¡metox¡benzo¡l)¡ndol¡n-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)indolin-7-il)etil)benzoico con 4-(2-(1-(3,5-dimetoxibenzoil)indolin-7-il)etil)benzoato de metilo (11 mg, 0,025 mmol) y LiOH 1 M (0,2 ml) en 1 ml de dioxano, calentando durante la noche a 60°C. Esto dio el compuesto del título (11 mg, 100%).
Esquema 9 (entradas 19-20, tabla 1)
4-(2-(1-((3-Metox¡fen¡l)sulfon¡l)indol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se añadió piridina (26 |il, 0,32 mmol) a una disolución de 4-(2-(indolin-7-il)etil)benzoato de metilo (23 mg, 0,080 mmol) y cloruro de 3-metoxibenceno-1-sulfonilo (12 |il, 0,085 mmol) en THF (0,5 ml). Después de 22 h, se añadieron 15 ml de disolución de HCl 1 M y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (20 ml). Entonces se secó la disolución orgánica (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 40%) dio el compuesto del título (32 mg, 89%). Ácido 4-(2-(1-((3-metox¡fen¡l)sulfon¡l)indol¡n-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)indolin-7-il)etil)benzoico con calentamiento a 60°C en lugar de 80°C.
4-(2-(1-((3.5-D¡metox¡fen¡l)sulfon¡l)¡ndol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito para 4-(2-(1-((3-metoxifenil)sulfonil)indolin-7-il)etil)benzoato de metilo.
Ácido 4-(2-(1-((3.5-d¡metox¡fen¡l)sulfon¡l)¡ndol¡n-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)indolin-7-il)etil)benzoico con calentamiento a 60°C en lugar de 80°C.
Esquema 10 (entradas 21-23, tabla 1)
7-Bromo-1-(3-metoxibenc¡l)¡ndol¡na. Se agitó una mezcla de 7-bromoindolina (152 mg, 0,77 mmol), bromuro de 3-metoxibencilo (107 |il, 0,76 mmol) y K2CO3 (170 mg, 1,2 mmol) en 1,2 ml de DMF a temperatura ambiente durante 3 h y durante 20 h a 50°C. Entonces se dejó que la mezcla se enfriara hasta temperatura ambiente y se repartió entre 25 ml de acetato de etilo y 25 ml de H2O. Se lavó adicionalmente la fase orgánica con H2O (3 x 25 ml) y luego se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó para dar el compuesto del título que se usó directamente en la siguiente etapa.
7-Bromo-1-(3-(trifluoromet¡l)benc¡l)¡ndol¡na. Se siguió el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(1-(3-fluorobencil) ¡ndolin-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo usando 7-bromoindolina (126 mg, 0,63 mmol), bromuro de 3-(trifluorometil)benc¡lo (97 |il, 0,63 mmol) y K2CO3 (148 mg, 1,1 mmol) en 1 ml de DMF. La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 50%) dio el compuesto del título (194 mg, 87%).
7-Bromo-1-fenetil¡ndol¡na. Se agitó una mezcla de 7-bromoindolina (70 mg, 0,35 mmol), 2-feniletilbromuro (48 |il, 0,35 mmol) y K2CO3 (100 mg, 0,72 mmol) durante 3 h a 50°C y durante 19 h a 80°C. En este momento, se repartió la mezcla entre H2O/acetato de etilo y se lavó la disolución de acetato de etilo con H2O (3x). Entonces se secó la disolución (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante CCF preparativa (10% de acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (22 mg, 21%).
Estos compuestos de bromoindolina sustituidos se procesaron a los compuestos finales tal como se muestra en el esquema 10 usando procedimientos descritos para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)¡ndol¡n-7-il)et¡l)benzo¡co (esquema 1).
Esquema 11 (entrada 24, tabla 1)
5-Fluoroindol¡na-1-carbox¡lato de tere-butilo. Se usó un procedimiento similar al descrito en Iwao, M.; Kuraishi, T. Heterocycles 1992, 34, 1031. Se agitó una disolución de 5-fluoroindolina (100 mg, 0,73 mmol) y dicarbonato di-terebutilo (188 mg, 0,86 mmol) en 2 ml de THF a temperatura ambiente durante la noche. En este momento, se añadieron 20 ml de disolución de NaHCO3 saturada y se extrajo la mezcla con acetato de etilo (20 ml). Entonces se secó la disolución de acetato de etilo (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% de acetato de etilo/hexanos ^ 20%) dio el compuesto del título (140 mg, 81%).
5-Fluoro-7-vodoindol¡na-1-carbox¡lato de tere-butilo. Se usó un procedimiento similar al descrito para 8-yodo-3,4-dihidroqu¡nol¡na-1(2H)-carbox¡lato de tere-butilo.
5-Fluoro-7-yodo¡ndol¡na. Se agitó una disolución de 5-fluoro-7-yodoindolina-1-carbox¡lato de tere-butilo (70 mg, 0,19 mmol) en HCl 4 M/dioxano (1 ml) a 60°C. Después de 1 h, se añadió NaOH 1 M (20 ml) y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (3 x 20 ml). Se lavó la disolución orgánica combinada con salmuera y se secó entonces (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (30 mg, 60%).
4-(2-(5-Fluoroindol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se usó el procedimiento descrito anteriormente para 4-(2-(¡ndolin-7-il)etil)benzoato de metilo, a partir de 5-fluoro-7-yodoindolina (30 mg, 0,11 mmol) y 4-vinilbenzoato de metilo (27 mg, 0,17 mmol). La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (28 mg, 85%).
4-(2-(1-(3.5-D¡metox¡benc¡l)-5-fluoroindol¡n-7-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se agitó una mezcla de 4-(2-(5-fluoroindolin-7-¡l)etil)benzoato de metilo (28 mg, 0,096 mmol), bromuro de 3,5-dimetoxibencilo (25 mg, 0,11 mmol) y K2CO3 (35 mg, 0,25 mmol) en 1,3 ml de DMF a temperatura ambiente durante la noche. Entonces se repartió la mezcla entre 25 ml de H2O/ 20 ml de acetato de etilo. Se extrajo adicionalmente la fase acuosa con acetato de etilo (3 x 20 ml) y se lavó la disolución de acetato de etilo combinada con agua (3 x 20 ml) y salmuera. Entonces se secó la disolución (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (28 mg, 65%).
Ácido 4-(2-(1-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-5-fluoro¡ndol¡n-7-¡l)et¡l)benzo¡co. Se siguió el procedimiento descrito anteriormente para ácido 4-(2-(1-(3-fluorobencil)¡ndol¡n-7-il)et¡l)benzo¡co usando 4-(2-(1-(3,5-dimetox¡benc¡l)-5-fluoro¡ndolin-7-il)etil)benzoato de metilo (28 mg, 0,063 mmol), LiOH 1 M (0,34 ml, 0,34 mmol) y 3,4 ml de THF como disolvente con calentamiento durante la noche a 60°C. La purificación del producto bruto mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (metanol/CH2Cl2) dio el compuesto del título como un sólido blanco (21 mg, 77%). Procedimientos representativos para las entradas 1-3, tabla 2:
7-Bromo-1-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-1-ol. Se añadió una disolución de 7-bromo-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (102 mg, 0,48 mmol) en 0,5 ml de THF gota a gota por cánula a una disolución a 0°C de bromuro de 3,5-dimetoxibencilmagnesio (3,8 ml, 0,95 mmol, 0,25 M/2-metiltetrahidrofurano, de Novel Chemical solutions), aclarando con 0,5 ml de THF. Se agitó la reacción durante 30 minutos a 0°C y luego se dejó que se calentara hasta temperatura ambiente. Después de 2 h, se añadieron 30 ml de disolución de NH4Cl saturada y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (3 x 20 ml). Se secó la disolución de acetato de etilo combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (145 mg, 83%).
Mezcla de 4-bromo-3-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-1H-¡ndeno/(E)-7-bromo-1-(3.5-d¡metoxibenc¡l¡deno)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡ndeno. Se calentó una mezcla de 7-bromo-1-(3.5-dimetoxibencil)-2.3-dihidro-1H-inden-1-ol (145 mg. 0.40 mmol) y ácido ptoluenosulfónico (12 mg. 0.063 mmol) en 1.8 ml de tolueno hasta reflujo durante 1.5 h. Entonces se dejó que la reacción se enfriara hasta temperatura ambiente y se evaporó. Se purificó el residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) lo que dio el compuesto del título (110 mg. 80%) como una mezcla de los dos isómeros de alqueno en una razón 2:1 (interno/externo).
Mezcla de 4-(2-(3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo / 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de (E)-metilo. Se agitó una disolución de 4-vinilbenzoato de metilo (75 mg.
0.46 mmol) y dímero de 9-BBN (108 mg. 0.44 mmol) en THF (1.3 ml) a temperatura ambiente durante 4 h y luego se añadieron 110 |il de H2O a 0°C. Después de 45 minutos a temperatura ambiente. se transfirió la disolución por cánula a una mezcla de 4-bromo-3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-indeno (110 mg. 0.32 mmol) y PdCh(dppf)CH2Cl2 (30 mg. 0.041 mmol) en 1.2 ml de DMF. Después de 5 minutos. se añadió disolución de K3PO4 (170 |il. 3 M) y se agitó la mezcla oscura a 60°C durante la noche. En este momento. se dejó que la mezcla se enfriara hasta temperatura ambiente y luego se repartió entre acetato de etilo/ H2O. Se lavó adicionalmente la fase de acetato de etilo con H2O (3 x) y salmuera y luego se secó (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/ hexanos) dio el compuesto del título ligeramente contaminado (165 mg) como una mezcla de isómeros de alqueno 2:1 (interno/externo).
Se logró la separación de los isómeros de alqueno en esta fase (esto lo logró Lotus Separations. Princeton. N.J.) usando una columna Chiralpak AS-H (2 x 25 cm. 15% de MeOH/Co2100 bar. 70 ml/min. 5 mg/ml MeOH. 1 ml de volumen de inyección) dando 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo (2.8 min.) y 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoato de (E)-metilo (3.5 min). Los cristales de calidad para rayos X de (4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoato de E)-metilo se hicieron crecer de hexanos y se confirmó la estructura mediante cristalografía de rayos X.
Mezcla de ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡metox¡bencil)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co. Se agitó una mezcla de 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo (48 mg. 0.11 mmol) y LiOH 1 M (0.60 ml. 0.60 mmol) en THF (6 ml) a 60°C durante la noche. Entonces se dejó que la mezcla se enfriara hasta temperatura ambiente y se añadieron 10 ml de HCl 1 M. Se extrajo la mezcla resultante con CH2Cl2 (3 x 20 ml) y se lavó la disolución orgánica combinada con salmuera y luego se secó (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio los compuestos del título (33 mg. 89% de 4-bromo-3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-indeno).
Ácido (E)-4-(2-(3-(3.5-d¡metox¡benc¡l¡deno)-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co. Se siguió el procedimiento anterior usando 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoato de (E)-metilo puro. 1H RMN (300 MHz. CDCL3) 8 = 8.04 (s. a.. 2H). 7.38 - 7.30 (m. 2H). 7.26 (s. 1H). 7.21 - 7.12 (m. 2H). 7.01 (d. J=7.0 Hz. 1H).
6.91 (s. a.. 1H). 6.55 (s. 2H). 6.38 (s. 1H). 3.82 (s. 6H). 3.32 -3.22 (m. 2H). 3.15 -2.98 (m. 6H).
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-2.3-d¡hidro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co. Se evaluó una mezcla de ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico / ácido (E)-4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico (27 mg. 0.065 mmol) y el 5% de Pd/C (15 mg) en 1.4 ml de acetato de etilo y se llenó con H2 (5x) y luego se agitó a temperatura ambiente con un balón de H2 durante la noche. Entonces se filtró la mezcla a través de Celite y se evaporó para dar el compuesto del título (16 mg. 59%). 1H RMN (300 MHz. CDCL3) 8 = 8.0 (d. J=7.6 Hz.
2H). 7.27 (d. J=7.6 Hz. 2H). 7.21 - 6.94 (m. 3H). 6.40 - 6.21 (m. 3H). 3.73 (s. 6H). 3.37 (s. a.. 1H). 3.05 - 2.70 (m.
7H). 2.51 (dd. J=10.0. 13.5 Hz. 1H). 2.0- 1.9 (m. 2H).
Procedimientos representativos para las entradas 4-12. tabla 2:
4-(2-(3-Oxo-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se siguió un procedimiento similar tal como se describió anteriormente para 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo usando 4-vinilbenzoato de metilo (500 mg. 3.08 mmol) y dímero de 9-BBN (755 mg. 3.09 mmol) en THF (12 ml) seguido por 7-bromo-2.3-dihidro-1H-inden-1-ona (503 mg. 2.38 mmol). PdCl2(dppf) CH2Cl2 (177 mg. 0.24 mmol) y disolución de K3PO43 M (1.1 ml. 3.3 mmol) en 7.6 ml de DMF. Esto dio el compuesto del título (803 mg. >100%) que se usó en la siguiente etapa.
4-(2-(3-(2.5-D¡metox¡benc¡l)-3-h¡droxi-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se añadió una disolución de 4-(2-(3-oxo-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo (50 mg. 0.17 mmol) en 0.5 ml de THF gota a gota por cánula a una disolución helada de cloruro de 2.5-dimetoxibencilmagnesio (1.4 ml. 0.35 mmol. 0.25 M/THF. Rieke). aclarando con 0.5 ml de THF. Se agitó la reacción durante 30 minutos a 0°C y durante 2.5 h a temperatura ambiente.
Entonces se añadió disolución de NH4CI saturada y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (3 x 20 ml). Se secó entonces la disolución de acetato de etilo combinada (Na2SO4), se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (0% ^ 40% de acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (45 mg, 59 %).
4-(2-(3-(2.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo/4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-¡nden-4-il)et¡l)benzoato de (E)-metilo. Se siguió un procedimiento similar al descrito para la síntesis de 4-bromo-3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-indeno usando 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-3-hidroxi-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo (45 mg. 0.10 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (3 mg. 0.016 mmol) en 1 ml de tolueno. Esto dio el compuesto del título (35 mg. 82%).
Ácido 4-(2-(3-(2.5-d¡metox¡bencil)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 5. tabla 1). Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico usando 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo (35 mg. 0.082 mmol) y LiOH 1 M (0.44 ml. 0.44 mmol) en 4.4 ml de THF. Esto dio el compuesto del título (16 mg.
47%). EM [m/e 413.18 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(3-metox¡benc¡l)-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(3-metoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 6. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 383.17 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(2.3-d¡metox¡bencil)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(2.3-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 7. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-Dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 413.18 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(3.4-d¡metox¡bencil)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(3.4-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 8. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 413.17 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(2-Metox¡benc¡l)-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(2-metoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 9. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 383.16 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(4-metox¡benc¡l)-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(4-metoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 10. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 383.16 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡clorobenc¡l)-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(3.5-diclorobencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 11. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 421.07 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡met¡lbenc¡l)-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(3.5-dimetilbencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzoico (entrada 12. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 381.18 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-7-fluoro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzo¡co/ác¡do (E)-4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencilideno)-7-fluoro-2.3-d¡hidro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co (entrada 13. tabla 1). Se sintetizaron los compuestos del título tal como se describió anteriormente para ácido 4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico/ácido (E)-4-(2-(3-(2.5-dimetoxibencilideno)-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 431.17 (M-1)].
Procedimientos representativos para las entradas 13-14. tabla 2:
7-((terc-Butildimetilsilil)oxi)-2.3-dihidro-1H-inden-1-ona. Se agitó una disolución de 7-hidroxi-2.3-dihidro-1H-inden-1-ona (0.501 g. 3.38 mmol). cloruro de ferc-butildimetilsililo (1.033 g. 6.85 mmol). trietilamina (0.62 ml. 4.45 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (DMAP. 232 mg. 1.90 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) a temperatura ambiente durante la noche. Se trató entonces la reacción con 40 ml de disolución de NH4Cl saturada y se extrajo la mezcla resultante con CH2Cl2 (3 x 20 ml). Se secó la disolución de CH2Cl2 combinada (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (1.014 g. >100 %).
7-((terc-But¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-1-(3.5-d¡metox¡bencil)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-1-ol. Se siguió un procedimiento similar al descrito para 7-bromo-1-(3.5-dimetox¡benc¡l)-2.3-d¡hidro-1H-¡nden-1-ol usando 7-((ferc-butild¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-2.3-dihidro-1H-inden-1-ona (260 mg. 0.99 mmol) y bromuro de 3.5-dimetoxibencilmagnesio (7.6 ml. 1.90 mmol.
0.25 M/2-metiltetrahidrofurano. de Rieke) en 2 ml de THF. Esto dio el compuesto del título (266 mg. 65%).
(E)-terc-But¡l((3-(3.5-d¡metox¡benc¡l¡deno)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-4-¡l)ox¡)d¡met¡ls¡lano/terc-but¡l((3-(3.5-d¡metoxibenc¡l)-1H-inden-4-¡l)ox¡)d¡met¡ls¡lano. Se siguió un procedimiento similar al descrito para 4-bromo-3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-indeno usando 7-((ferc-butild¡met¡lsil¡l)ox¡)-1 -(3.5-dimetox¡benc¡l)-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-1-ol (266 mg. 0.64 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (26 mg. 0.14 mmol) en 3 ml de tolueno. Esto dio los compuestos del título (136 mg. 53%) como una mezcla 4:1 que favorece (E)-ferc-butil((3-(3.5-d¡metox¡benc¡l¡deno)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-4-¡l)ox¡)d¡met¡ls¡lano.
(E)-3-(3.5-D¡metox¡benc¡l¡deno)-2.3-d¡h¡dro-1H-inden-4-ol/3-(3.5-D¡metox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-ol. Se agitó una disolución de ferc-but¡l((3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)ox¡)d¡met¡ls¡lano (136 mg. 0.34 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF. 1.3 ml. 1.3 mmol. 1 M/THF) en THF (13 ml) a temperatura ambiente. Después de 1.5 h. se añadieron 40 ml de disolución de NH4Cl saturada y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (3 x 60 ml). Se secó entonces la disolución de acetato de etilo combinada (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de et¡lo/hexanos) d¡o los compuestos del título (73 mg. 76%) s¡endo la mezcla predom¡nantemente (E)-3-(3.5-dimetox¡benc¡l¡deno)-2.3-d¡hidro-1H-¡nden-4-ol. con sólo una traza del isómero de alqueno interno.
4-(((3-(3.5-D¡metox¡benc¡l¡deno)-2.3-d¡hidro-1H-¡nden-4-¡l)ox¡)met¡l)benzoato de (E)-metilo. Se agitó una mezcla de 3-(3.5-dimetoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-ol (73 mg. 0.26 mmol). 4-(bromometil)benzoato de metilo (75 mg. 0.33 mmol) y K2CO3 (55 mg. 0.40 mmol) en DMF (1 ml) a temperatura ambiente durante la noche. Entonces se repartió la mezcla entre acetato de etilo/H2O y se lavó adicionalmente la fase orgánica con H2O (2 x) y salmuera. Entonces se secó la disolución de acetato de etilo (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título como un isómero de alqueno individual (79 mg. 71%).
Ácido (E)-4-(((3-(3.5-d¡metox¡benc¡l¡deno)-2.3-d¡h¡dro-1H-inden-4-¡l)ox¡)met¡l)benzo¡co. Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)etil)benzo¡co usando 4-(((3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-¡nden-4-il)oxi)met¡l)benzoato de metilo (41 mg. 0.096 mmol) y LiOH 1 M (0.52 ml. 0.52 mmol) en 5.2 ml de THF. Esto dio el compuesto del título (39 mg. 97%). 1H RMN (300 MHz. d6-DMSO) 8 = 8.01 - 7.98 (d. 2H). 7.67 - 7.64 (m. 2H).
7.49 (s. 1H). 7.29 - 7.09 (m. 1H). 6.95-6.93 (m. 2H). 6.45 (s. 2H). 6.35 (s. 1H). 5.32(s. 2H). 3.72 (s. 6H). 3.02 (s. 4H).
4-(((3-(3.5-D¡metox¡benc¡l)-2.3-d¡hidro-1H-¡nden-4-¡l)ox¡)met¡l)benzoato de metilo. Se siguió un procedimiento similar al descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co usando 4-(((3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)oxi)met¡l)benzoato de metilo (38 mg. 0.088 mmol) y el 5% de Pd/C (22 mg) en 4 ml de acetato de etilo. La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (19 mg. 50%).
Ácido 4-(((3-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-2.3-d¡h¡dro-1H-inden-4-¡l)ox¡)met¡l)benzo¡co. Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)etil)benzo¡co usando 4-(((3-(3.5-dimetoxibenc¡l)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-4-il)oxi)met¡l)benzoato de metilo (19 mg. 0.044 mmol) y LiOH 1 M (0.24 ml. 0.24 mmol) en 2.4 ml de THF. Esto dio el compuesto del título (13 mg. 71%). 1H RMN (300 MHz. CDCL3) 8 = 8.14 - 8.12 (m. 2H). 7.59-7.56 (d. J=6.7 Hz.
2H). 7.13-7.10 (t. J=7.6 Hz. 1H). 6.86-6.84 (d. J=7.3 Hz. 1H). 6.73-6.70 (d. J=8.2 Hz. 1H). 6.30 (s. a.. 3H). 5.18(s.
2H). 3.71 (s. 6H). 3.7-3.6 (s a. 1 H). 3.24-3.18 (dd. J=3.5. 13.5 Hz. 1H). 2.93 - 2.72 (m. 2H). 2.54 (dd. J=10.3. 12.9 Hz. 1H). 2.13 -1.88 (m. 2H)
Procedimientos representativos para las entradas 15-19. tabla 2:
4-(2-(3-(((Tr¡fluoromet¡l)sulfonil)ox¡)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se añadió anhídrido trífilico (170 pl.
1.0 mmol) a una disolución de 4-(2-(3-oxo-2.3-dihidro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo (281 mg. 0.96 mmol) en 1.2-dicloroetano (2.2 ml). Después de 5 min. se añadió 2.6-di-ferc-but¡l-4-met¡lpir¡d¡na (140 pl. 1.0 mmol). Se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 1 h y luego se extinguió mediante la adición de 10 ml de HCl 1 M. Se extrajo la mezcla con diclorometano y se lavó la fase orgánica con 30 ml de HCl 1 M y salmuera. Entonces se secó la disolución orgánica (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (251 mg. 61%).
4-(2-(3-(3.5-D¡fluorobencil)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo. Se añadió cloruro de 3.5-difluorozinc (0.9 ml.
0.45 mmol. 0.5 M/THF. Rieke) a una mezcla de 4-(2-(3-(((trifluoromet¡l)sulfon¡l)ox¡)-1H-¡nden-4-il)et¡l)benzoato de metilo (55 mg. 0.13 mmol) y (Ph3P)4Pd (24 mg. 0.02 mmol) en 0.65 ml de THF. Se calentó la mezcla a 70°C durante la noche. Se dejó que la reacción se enfriara hasta temperatura ambiente y se añadió disolución de NH4Cl saturada. Se extrajo la mezcla con acetato de etilo y se secó la disolución orgánica (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (10 mg, 19%).
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡fluorobencil)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co (entrada 18, tabla 1). Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico usando 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo (10 mg. 0.025 mmol) y LiOH 1 M (0.1 ml, 0.1 mmol) en 1 ml de THF. Esto dio el compuesto del título (5 mg. 51%. MS m/e=389.13. M-1).
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡metoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co (entrada 15. tabla 1). Se siguió la secuencia descrita para ácido 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico. 1H RMN (300 MHz. CDCL3) 8 = 7.93 (d. J=7.6 Hz.
2H). 7.34 (d. J=7.3 Hz. 1H). 7.15 (d. J=8.8 Hz. 3H). 7.06 - 7.01 (m. 1H). 6.31 (s. 3H). 6.15 (s. 1H). 3.99 (s. 2H). 3.91 (s. 3H). 3.70 (s. 6H). 3.34 (s. 2H). 3.11 - 3.04 (m. 2H). 2.93 - 2.85 (m. 2H).
Ácido 4-(2-(3-(3.5-b¡s(tr¡fluorometil)benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co (entrada 17. tabla 1). Se siguió la secuencia descrita para ácido 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 489.1209 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-5-metoxi-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzo¡co (entrada 16. tabla 1). Se siguió la secuencia descrita para ácido 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 443.1899 (M-1)].
Ácido 4-(2-(3-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-6-fluoro-1H-inden-4-¡l)et¡l)benzo¡co (entrada 19. tabla 1). Se siguió la secuencia descrita para ácido 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 431.1686 (M-1)].
Procedimiento representativo para la entrada 20. tabla 2 (ejemplo de referencia):
3-(3-(3-Oxo-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-¡l)fen¡l)acr¡lato de (E)-etilo. Se purgó una mezcla de 7-bromo-2.3-dihidro-1H-inden-1-ona (100 mg. 0.48 mmol). ácido (£)-(3-(3-etoxi-3-oxoprop-1-en-1-il)fenil)borónico (210 mg. 0.95 mmol). y K2CO3 (133 mg. 0.96 mmol) en tolueno (66 ml)/EtOH (22 ml) con N2. Se añadió (Ph3P)4Pd (55 mg. 0.048 mmol) y se calentó la mezcla en un tubo sellado a 80°C durante la noche. Se dejó que la mezcla se enfriara hasta temperatura ambiente y se redujo el volumen a la mitad. Se añadió H2O (100 ml) y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (3 x 40 ml). Se lavó la disolución orgánica combinada con salmuera y luego se secó (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (133 mg. 90%).
3-(3-(3-(((Tr¡fluoromet¡l)sulfonil)ox¡)-1H-¡nden-4-¡l)fen¡l)acr¡lato de (E)-etilo. Se siguió un procedimiento similar al descrito para 4-(2-(3-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo.
3- (3-(3-(3.5-D¡metoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)fen¡l)acr¡lato de (E)-etilo. Se siguió un procedimiento análogo al descrito para 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo.
Ácido (E)-3-(3-(3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)fen¡l)acríl¡co. Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 411.15 (M-1)].
Procedimiento representativo para la entrada 21. tabla 2:
4- ((3-Oxo-2.3-d¡hidro-1H-¡nden-4-¡l)et¡n¡l)benzoato de metilo. Se calentó una mezcla de 7-bromo-2.3-dihidro-1H-inden-1-ona (411 mg. 1.95 mmol). 4-etinilbenzoato de metilo (361 mg. 2.25 mmol). Pd(CH3CN)2Cl2 (50 mg.
0.19 mmol). Cs2CO3 (1.220 g. 3.75 mmol) y X-phos (180 mg. 0.38 mmol) en 5 ml de CH3CN hasta 80°C durante la noche en un tubo sellado. Entonces se dejó que la mezcla se enfriara hasta temperatura ambiente. se añadió H2O y se extrajo la mezcla resultante con acetato de etilo (3x). Se lavó la disolución de acetato de etilo combinada con salmuera y luego se secó (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (147 mg. 26%).
4-(2-(3-Oxo-2.3-d¡h¡dro-1H-inden-4-¡l)v¡n¡l)benzoato de (E)-metilo. Se añadió ácido fórmico (180 pl. 0.98 mmol. 25% disolución acuosa) aun tubo Schlenk que contenía Pd2(dba)3 (7 mg. 0.008 mmol).1.4-bis(difenilfosfino)butano (7 mg.
0.015 mmol). 4-((3-oxo-2.3-dihidro-1H-inden-4-il)etinil)benzoato de metilo (98 mg. 0.34 mmol). t Hf (1.5 ml) y diclorometano (1 ml). Se selló el tubo bajo N2 y se calentó a 80°C durante la noche. Se dejó que la mezcla se enfriara hasta temperatura ambiente y se diluyó con diclorometano. Se secó la mezcla resultante (Na2SO4). se filtró y se evaporó. La purificación del producto bruto mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice usando una unidad Combiflash de Teledyne Isco (acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto del título (58 mg. 58%).
4-(2-(3-(((Tr¡fluoromet¡l)sulfon¡l)oxi)-1H-¡nden-4-¡l)v¡n¡l)benzoato de (E)-metilo. Se siguió un procedimiento similar al descrito para 4-(2-(3-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo.
4-(2-(3-(3.5-D¡metox¡bencil)-1H-¡nden-4-¡l)v¡n¡l)benzoato de (E)-metilo. Se siguió un procedimiento análogo al descrito para 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoato de metilo.
Ácido (E)-4-(2-(3-(3.5-d¡metox¡bencil)-1H-¡nden-4-¡l)v¡n¡l)benzo¡co. Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3,5-dimetoxibencil)-1H-inden-4-il)etil)benzoico. EM [m/e 411.1595 (M-1)].
Procedimientos representativos para las entradas 22 y 23. tabla 2 (ejemplo de referencias):
2-(4-(3-Oxo-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-¡l)fenox¡)acetato de etilo. Se siguió el procedimiento descrito para 3-(3-(3-oxo-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-il)fen¡l)acr¡lato de (E)-etilo.
2-(4-(3-(((Tr¡fluoromet¡l)sulfonil)ox¡)-1H-¡nden-4-¡l)fenox¡)acetato de etilo. Se siguió un procedimiento similar al descrito para 4-(2-(3-(((trifluoromet¡l)sulfon¡l)ox¡)-1H-¡nden-4-il)et¡l)benzoato de metilo.
2-(4-(3-(3.5-D¡metoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)fenox¡)acetato de etilo. Se siguió un procedimiento análogo al descrito para 4-(2-(3-(3.5-difluorobencil)-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo.
Ácido 2-(4-(3-(3.5-d¡metoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)fenox¡)acét¡co. Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)etil)benzo¡co a temperatura ambiente. EM [m/e 415.1551 (M-1)].
Ácido 2-(3-(3-(3.5-d¡metoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)fenox¡)acét¡co. Se usó una secuencia similar a la descrita para ácido 2-(4-(3-(3.5-dimetox¡benc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)fenoxi)acét¡co (esquema 7). EM [m/e 415.15 (M-1)].
Procedimiento representativo para la entrada 24. tabla 2:
4-((3-(3.5-D¡metox¡benc¡l)-3-h¡drox¡-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡n¡l)benzoato de metilo. Se siguió un procedimiento similar al descrito para 4-(2-(3-(2.5-d¡metoxibenc¡l)-3-h¡drox¡-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡l)benzoato de metilo usando 4-((3-oxo-2.3-dih¡dro-1H-¡nden-4-il)et¡n¡l)benzoato de metilo (preparación descrita anteriormente) y bromuro de 3.5-dimetoxibencilmagnesio.
4-((3-(3.5-D¡metoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)et¡n¡l)benzoato de met¡lo/4-((3-(3.5-dimetox¡benc¡l¡deno)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-4-¡l)et¡nil)benzoato de (E)-metilo. Se siguió un procedimiento similar al descrito para la síntesis de 4-bromo-3-(3.5-dimetoxibenc¡l)-1H-¡ndeno.
Ácido 4-((3-(3.5-d¡metox¡benc¡l)-1H-inden-4-¡l)et¡n¡l)benzo¡co/Ác¡do (E)-4-((3-(3.5-d¡metoxibenc¡l¡deno)-2.3-d¡h¡dro-1H-inden-4-¡l)et¡n¡l)benzo¡co. Se siguió el procedimiento descrito para ácido 4-(2-(3-(3.5-dimetoxibenc¡l)-1H-¡nden-4-¡l)etil)benzoico. EM [m/e 409.1499 (M-1)].
Datos de unión (K¡)
Se realizaron experimentos de unión de competición en un medio que contenía disolución salina equilibrada de Hank. Hepes 20 mM. pH 7.3. membranas (~60 |ig de proteína) o 2x105 células de células HEK 293 que expresan de manera estable receptores de EP2 humanos. [3H]pGe2 (10 nM) y diversas concentraciones de compuestos de prueba en un volumen total de 300 |il. Se incubaron las mezclas de reacción a 23°C durante 60 min. y se filtraron sobre filtros Whatman GF/B a vacío. Se lavaron los filtros tres veces con 5 ml de tampón helado que contenía HCl/Tris 50 mM (pH 7.3). Se estimó la unión inespecífica en presencia de PGE2 sin marcar en exceso (10 |iM). Los datos de unión se ajustaron al modelo de unión para una clase individual de sitios de unión. usando análisis de regresión no lineal. Se convirtieron los valores de CI50 así obtenidos en K¡ usando la ecuación de K¡=(CI50/(1+[L]/Kd) donde [L] representa la concentración de PGE2 (10 nM) y Kd la constante de disociación para [3H]PGE2 en los receptores de EP2 humanos (40 nM).
Unión de radioligandos
Células que expresan de manera estable los receptores de EP1. EP?. EP4 y FP
Se lavaron células HEK-293 que expresan de manera estable el receptor de FP humano o felino. o los receptores de EP1. EP2 o EP4 con el tampón TME. se rasparon del fondo de los matraces. y se homogeneizaron durante 30 s usando un politrón Brinkman PT 10/35. Se añadió tampón TME para lograr un volumen final de 40 ml en los tubos de centrífuga (la composición de TME es base TRIS 100 mM. MgCh 20 mM. EDTA 2M; se añade HCl 10 N para lograr un pH de 7.4).
Se centrifugó el homogeneizado celular a 19000 r.p.m. durante 20 min a 4°C usando un rotor Beckman T¡-60. Se resuspendió el sedimento resultante en tampón TME para dar una concentración de proteína final de 1 mg/ml. tal como se determina mediante ensayo Biorad. Se realizaron ensayos de competición de unión a radioligandos frente a [3H-] 17-fenil PGF2a (5 nM) en un volumen de 100 |il durante 60 min. Se iniciaron reacciones de unión añadiendo fracción de membrana plasmática. Se terminó la reacción mediante la adición de 4 ml de tampón TRIS-HCl helado y filtración rápida a través de filtros de fibra de vidrio GF/B usando un recolector celular de Brandel. Se lavaron los filtros 3 veces con tampón helado y se secaron en horno durante una hora.
Se usó [3H-]PGE2 (actividad específica 180 Ci mmol) como radioligando para receptores de EP. Se empleó [3H] 17-fenil PGF2a para estudios de unión al receptor de FP. Se realizaron estudios de unión que emplean receptores de EPi, EP2, EP4 y FP por duplicado en al menos tres experimentos diferenciados. Se usó un volumen de ensayo de 200 |l. Se realizaron las incubaciones durante 60 min a 25°C y se terminaron mediante la adición de 4 ml de HCl-TRIS 50 mM helado, seguido por filtración rápida a través de filtros Whatman GF/B y tres lavados adicionales de 4 ml en un recolector celular (Brandel). Se realizaron estudios de competición usando una concentración final de [3H]-PGE25nM, o [3H] 17-fenil PGF2a 5 nM y se determinó la unión inespecífica con 10"5 M de PGE2 sin marcar, o 17-fenil PGF2a, según el subtipo de receptor estudiado.
Métodos para estudios FLIPR™
(a) Cultivo celular
Se cultivaron células HEK-293(EBNA), que expresan de manera estable un tipo o subtipo de receptores de prostaglandina humanos recombinantes (receptores de prostaglandina expresados: hDP/Gqs5; hEP1; hEP2/Gqs5; hEP3A/Gqi5; hEP4/Gqs5; hFP; hIP; hTP), en placas de cultivo de 100 mm en medio DMEM con alto contenido en glucosa que contiene suero bovino fetal al 10%, 1-glutamina 2 mM, geneticina 250 □g/ml (G418) e higromicina B 200 mg/ml como marcadores de selección, y 100 unidades/ml de penicilina G, estreptomicina 100 □g/ml y anfotericina B 0,25 mg/ml.
(b) Estudios de señales de calcio en FLIPR™
Se sembraron células a una densidad de 5x104 células por pocillo en placas de 96 pocillos de fondo transparente, de pared negra recubiertas con poli-D-lisina Biocoat® (Becton-Dickinson) y se dejó que se unieran durante la noche en un incubador a 37°C. Se lavaron entonces las células dos veces con tampón HBSS-HEPES (disolución salina equilibrada de Hanks sin bicarbonato y rojo fenol, HEPES 20 mM, pH 7,4) usando un limpiador de placas Denley Cellwash (Labsystems). Después de 45 minutos de carga de colorante en la oscuridad, usando el colorante sensible a calcio Fluo-4 Am a una concentración final de 2 mM, se lavaron las placas cuatro veces con tampón HBSS-HEPES para eliminar el colorante en exceso dejando 100 ml en cada pocillo. Se reequilibraron las placas hasta 37°C durante unos pocos minutos.
Se excitaron las células con un láser de argón a 488 nm, y se midió la emisión a través de un filtro de emisión con ancho de banda de 510-570 nm (FLIPR™, Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Se añadió disolución de fármaco en un volumen de 50 | l a cada pocillo para dar la concentración final deseada. Se registró el aumento de pico en la intensidad de fluorescencia para cada pocillo. En cada placa, cuatro pocillos sirvieron cada uno como controles negativos (tampón HBSS-HEPES) y positivos (agonistas convencionales: BW245C (hDP); PGE2 (hEP1; hEP2/Gqs5; hEP3A/Gqi5 ; hEP4/Gqs5); PGF2a (hFP); carbaciclina (hIP); U-46619 (hTP), según el receptor). Entonces se expresó el cambio de fluorescencia pico en cada pocillo que contenía fármaco en relación con los controles.
Se sometieron a prueba los compuestos en un formato de alto rendimiento (HTS) de concentración-respuesta (CoRe). En el formato HTS, se examinaron cuarenta y cuatro compuestos por placa por duplicado a una concentración de 10-5 M. Para generar curvas de concentración-respuesta, se sometieron a prueba cuatro compuestos por placa por duplicado en un intervalo de concentración entre 10-5 y 10-11 M. Se promediaron los valores duplicados. En cualquiera de los formatos, HTS o CoRe, se sometió a prueba cada compuesto en al menos 3 placas diferenciadas usando células de diferentes pases para dar un n > 3.
Tabla 1
EP2 EP4 OTROS RECEPTORES
cAMP cAMP Ki
Entrada ESTRUCTURA CE50 Ki (nM) CE50 CE50 FLIPR
(nM) (nM) (nM) CE50 (nM)
NA:
1 35 38 123 897 DP, EP1, EP3,
Figure imgf000030_0001
FP, IP, TP
Figure imgf000033_0001
Tabla 2
cAMP cAMP Ki
Entrada ESTRUCTURA CE50 Ki (nM) CE50 CE50 FLIPR (nM) (nM) (nM) CE50 (nM)
Figure imgf000034_0001
Figure imgf000035_0001
(ejemplo de referencia)
4772 > 10K 1203
Figure imgf000036_0001
> 10K 1173
(ejemplo de referencia)

Claims (17)

REIVINDICACIONES
1. Compuesto de fórmula (I):
Figure imgf000037_0001
en la que:
las líneas discontinuas representan enlaces opcionales, siempre que sólo esté presente un enlace opcional a E1;
E1 y E2 son cada uno independientemente C o N;
L1 es alquileno C2, alquenileno C2 o alquinileno C2;
L i 2 es al Iquil Ieno
Figure imgf000037_0002
Ar1 se selecciona de fenilo, naftilo o tiofenilo;
Ar2 se selecciona de fenilo, naftilo o benzo[d][1,3]dioxolilo;
R1 es -CO2H;
R2 y R3 son cada uno independientemente -CO2H, halógeno, -CF3, alcoxilo, benciloxilo, alquilo C1-C4, o -OCH2CO2H;
n es 1 ó 2;
m y p son cada uno independientemente 1 ó 2; y
q es de 0 a 3.
2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que L1 es alquileno C2.
3. Compuesto según la reivindicación 1, en el que L2 es alquileno C1-C4.
4. Compuesto según la reivindicación 3, en el que L2 es alquileno C1 o alquileno C2.
5. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R2 es halógeno; en el que R2 es preferiblemente F.
6. Compuesto según la reivindicación 1, en el que R2 es alcoxilo; en el que R2 es preferiblemente metoxilo.
7. Compuesto de fórmula (III):
Figure imgf000038_0001
en la que:
las líneas discontinuas representan enlaces opcionales, siempre que sólo esté presente un enlace opcional; Li es alquileno C2, alquenileno C2, alquinileno C2, o -OCH2-;
L2 es CH2;
Ar1 y Ar2 son cada uno fenilo;
R1 es -CO2H;
cada R2 es independientemente halógeno, -CF3, alquilo C1-C4 o alcoxilo C1-C4;
R3 es H, halógeno o alcoxilo C1-C4; y
p y v son cada uno independientemente 1 ó 2.
8. Compuesto según la reivindicación 7, en el que:
(i) L1 es alquileno C2, R1 es -CO2H, cada R2 es halógeno, metilo o metoxilo, y R3 es H; o
(ii) L1 es alquileno C2, R1 es -CO2H, cada R2 es halógeno, metilo o metoxilo, R3 es H, y v es 1.
9. Compuesto según la reivindicación 7, en el que L1 es alquileno C2, R1 es -CO2H, cada R2 es halógeno, metilo o metoxilo, R3 es H, p es 2, y v es 1.
10. Compuesto según la reivindicación 7, en el que L1 es alquileno C2, R1 es -CO2H, cada R2 es metoxilo, R3 es H, y v es 1.
11. Compuesto según las reivindicaciones 1 ó 7, que tiene una cualquiera de las siguientes estructuras:
Figure imgf000039_0001
Figure imgf000040_0001
12. Composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-11 y un portador farmacéuticamente aceptable del mismo.
13. Uso no terapéutico de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en un método de tratamiento de una imperfección cutánea que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de dicho compuesto, en el que la imperfección cutánea es preferiblemente una arruga.
14. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, para su uso en un método de reducción de la formación de un tipo de cicatriz seleccionada del grupo que consiste en cicatriz hipertrófica, cicatriz hundida, estrías, y una combinación de las mismas.
15. Compuesto para su uso según la reivindicación 14, o método según la reivindicación 13, en el que la composición se administra a una región seleccionada del grupo que consiste en cara, cuello, brazos, torso, espalda, piernas, y una combinación de los mismos.
16. Compuesto para su uso según la reivindicación 14, o método según la reivindicación 13, en el que la composición se administra en un momento seleccionado del grupo que consiste en antes de una incisión quirúrgica, durante la cirugía, después de la operación, y una combinación de los mismos.
17. Compuesto para su uso según la reivindicación 14, o método según la reivindicación 13, en el que dicha administración minimiza la formación de cicatrices, previene la formación de cicatrices, previene la formación de arrugas y/o reduce el aspecto de una arruga existente.
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2954717T3 (es) * 2017-05-22 2023-11-23 Ono Pharmaceutical Co Antagonista de EP4
US20240109865A1 (en) 2020-12-30 2024-04-04 Tyra Biosciences, Inc. Indazole compounds as kinase inhibitors

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4171880B2 (ja) * 2001-08-06 2008-10-29 チッソ株式会社 メタロセン化合物、それを含む触媒を用いたオレフィン重合体の製造方法、および、該製造方法により製造されたオレフィン重合体
JP4529119B2 (ja) * 2001-08-09 2010-08-25 小野薬品工業株式会社 カルボン酸誘導体化合物およびその化合物を有効成分として含有する薬剤
KR100747401B1 (ko) * 2003-09-03 2007-08-08 화이자 인코포레이티드 프로스타글란딘 ｅ2 길항제로서의 페닐 또는 피리딜 아미드 화합물
AU2005295902A1 (en) * 2004-10-12 2006-04-27 Decode Genetics Ehf Aryl sulfonamide peri-substituted bicyclics for occlusive artery disease
CA2587210A1 (en) * 2004-11-22 2006-06-01 Threshold Pharmaceuticals, Inc. Tubulin binding anti cancer agents and prodrugs thereof
CA2648729A1 (en) 2006-04-24 2007-11-01 Merck Frosst Canada Ltd. Indole amide derivatives as ep4 receptor antagonists
CA2654811A1 (en) * 2006-06-12 2007-12-21 Merck Frosst Canada Ltd. Indoline amide derivatives as ep4 receptor ligands
WO2008026704A1 (fr) * 2006-08-31 2008-03-06 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Dérivé d'isoquinoline
JP5271464B2 (ja) * 2006-10-17 2013-08-21 日本ポリプロ株式会社 メタロセン化合物及びそれを使用するオレフィン重合用触媒
EP2460787A1 (en) * 2007-07-03 2012-06-06 Astellas Pharma Inc. Amide compounds and their use as PGE2 antagonists.
JP5256115B2 (ja) * 2008-05-13 2013-08-07 日本ポリプロ株式会社 メタロセン化合物を用いたプロピレン系重合体の製造方法
EP2323978A1 (en) * 2008-08-12 2011-05-25 Takeda Pharmaceutical Company Limited Amide compound
JP5536773B2 (ja) * 2008-08-14 2014-07-02 ベータ・ファーマ・カナダ・インコーポレイテッド Ｅｐ４受容体アンタゴニストとしてのヘテロ環式アミド誘導体
JP5409294B2 (ja) * 2008-12-17 2014-02-05 日本ポリプロ株式会社 メタロセン錯体およびオレフィンの重合方法
WO2010121382A1 (en) 2009-04-21 2010-10-28 Merck Frosst Canada Ltd. Process for making indole cyclopropyl amide derivatives
US8119683B2 (en) * 2009-08-10 2012-02-21 Taipei Medical University Aryl substituted sulfonamide compounds and their use as anticancer agents
BR112013002319A2 (pt) * 2010-07-30 2016-05-24 Allergan Inc compostos e métodos para reparo da pele
US20120142684A1 (en) * 2010-12-02 2012-06-07 Allergan, Inc. Compounds and methods for skin repair
US8552028B2 (en) * 2011-09-05 2013-10-08 National Taiwan University 8-phenylisoquinolines and pharmaceutical composition used in treatment for sepsis
EP2969078B1 (en) * 2013-03-15 2021-06-23 Sony Interactive Entertainment Inc. User-generated recordings of skeletal animations

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