ES2654382T3 - Método para la preparación de glucoesfingolípidos - Google Patents

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Abstract

Un procedimiento para preparar un compuesto quiral que comprende una forma R o una forma S de un glucoesfingolípido de fórmula (1), **(Ver fórmula)** en donde R1 es -OH, X es un grupo alquilo, R3 es -OH o H, R4 es -OH o H y R5 es arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto de fórmula 1 se prepara: (a) poniendo en contacto un compuesto de fórmula (6): **(Ver fórmula)** en donde PG es un grupo protector de hidroxilo y LG es un grupo lábil de fórmula: **(Ver fórmula)** ...

Description

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DESCRIPCIÓN
Método para la preparación de glucoesfingolípidos
REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS
Esta solicitud reivindica la prioridad de la Solicitud de Patente Provisional de EE.UU. Nº de serie 61/430.117, 5 presentada el 5 de enero de 2011 titulada "METHODS FOR PREPARATION OF GLYCOSHINGOLIPIDS AND USES THEREOF” (MÉTODOS PARA LA PREPARACIÓN DE GLUCOSFINGOLÍPIDOS Y SUS USOS).
CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a nuevos procedimientos para la preparación de glucoesfingolípidos. Más particularmente, la invención se refiere a métodos para la síntesis de nuevos compuestos de glucoesfingolípidos
10 enlazados a alfa.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Estudios demuestran que las células NKT, una sub-población de linfocitos única, se caracterizan por la co-expresión de un receptor de antígeno invariable y receptores NK. Las células NKT humanas (Vα24-Jα18) son activadas por un antígeno de glucolípido específico, de una manera dependiente de CD1d. Las moléculas de CD1d son 15 heterodímeros, compuestos por una cadena polipeptídica pesada asociada de forma no covalente con una 2microglobulina, y tienen una similitud estructural sustancial con proteínas de clase I del complejo principal de histocompatibilidad (MHC). Después de la activación, las células NKT exhiben actividad antitumoral independiente del MHC contra células tumorales in vitro e in vivo a través de varios mecanismos. Las células Vα24 NKT activadas producen un alto nivel de citoquinas, tales como IFN-γ, uniendo con ello la inmunidad innata y adaptativa a través de 20 la activación de otras células efectoras, incluidas las células dendríticas (DC), células NK y Células T CD8+ . Las NKTs juegan un papel regulador en el sistema inmunológico, por lo que son dianas atractivas para la inmunoterapia.
En la actualidad, el antígeno presentado a CD1d mejor estudiado es alfa-galactosilceramida (αGalCer, KRN-7000). Inicialmente llamó la atención cuando extractos derivados de la esponja marina, Agelas mauritianus, demostraron nuevas propiedades antitumorales. La compañía farmacéutica Kirin Beer (Patente de EE.UU. Nº 5849716). Esta
25 potente actividad se atribuyó más tarde a una familia de glucoesfingolípidos (GSLs) enlazados en alfa, a partir de los cuales se optimizó estructuralmente αGalCer. Los GSLs consisten en un resto de azúcar enlazado en alfa a una ceramida que está formada por un enlace amida de un ácido graso con una base de cadena larga.
Tras la activación por parte de αGalCer, las células NKT liberan citoquina pro-inflamatoria (Th1) e inmunomoduladora (Th2). Se cree que la producción de citoquinas TH1 se correlaciona con actividades 30 antitumorales, antivirales/antibacterianas y adyuvantes, mientras que se cree que la producción de citoquinas TH2 suprime las enfermedades autoinmunes. αGalCer ha sido el objeto de ensayos clínicos por su potencial anticancerígeno, pero se terminó durante la fase I. La naturaleza no específica del perfil de citoquinas inducido por αGalCer, tanto Th1 como Th2, la hace menos eficaz como un tratamiento terapéutico. Esta interpretación ha alentado a muchos grupos a centrarse en la búsqueda de compuestos que aumenten la selectividad hacia la 35 respuesta de citoquinas TH1 o TH2. Wong et al. han sintetizado una serie de glucolípidos que portan grupos aromáticos en la cadena lateral de acilo y han encontrado que estas moléculas desvían el perfil de liberación de citoquinas hacia una respuesta de TH1 (J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 9022-9023. Documento US 2007/0238871). Un experimento in vivo en ratones con tumores agresivos de cáncer de pulmón (línea celular TC1) y tumores de cáncer de mama (línea celular 4T1) han demostrado que los ratones portadores de cáncer de pulmón tratados con
40 los nuevos glucolípidos tenían un tiempo de supervivencia significativamente prolongado en comparación con los tratados con αGalCer. En ratones portadores de cáncer de mama, el tratamiento con los nuevos glucolípidos inhibió la tasa de crecimiento del tumor en un 75% del grupo no tratado, en comparación con el 50% de inhibición en ratones tratados con α-GalCer (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2007, 104, 10299-10304).
La síntesis de glucoesfingolípidos también se describe en ChemMedChem, 2008, 3, 1061-1070, doi:
45 10.1002/cmdc.20080002; Antimicrobial agents and chemotherapy, 2010, vol. 54, nº 10, págs. 4120-4136, doi: 10.1128/AAC.00368-10; y en la solicitud de patente WO2008/128062 A1.
Por lo tanto, existe una necesidad de medios eficientes para la síntesis de alfa-glucoesfingolípidos tales como compuestos de αGalCer, así como una necesidad de síntesis de nuevos compuestos alfa-glucoesfingolípidos con efectos inmunomoduladores.
imagen2
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
La presente invención proporciona nuevos métodos para sintetizar galactosilesfingolípidos, que incluyen nuevos compuestos relacionados con α-galactosil ceramidas y análogos activos de los mismos, tales como C34.
imagen3
La invención proporciona un procedimiento para preparar un compuesto quiral que comprende una forma R o una forma S de un glucoesfingolípido de fórmula (1),
imagen4
en donde R1 es -OH, X es un grupo alquilo, R3 es -OH o H, R4 es -OH o H y R5 es arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto de fórmula 1 se 10 prepara:
(a) poniendo en contacto un compuesto de fórmula (6):
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en donde PG es un grupo protector de hidroxilo y LG es un grupo lábil de fórmula:
imagen6
15 con un compuesto de fórmula (7):
imagen7
y efectuando la alfa-glicosilación en presencia de un ácido de Lewis para generar un compuesto de fórmula (5): (b) reduciendo el compuesto de fórmula (5) para proporcionar un compuesto de fórmula (3):
imagen8
imagen9
(c) acoplando el compuesto de fórmula (3) con un compuesto de fórmula (4):
imagen10
en que X es alquilo o alquenilo, R3 es H u -OH, R4 es H u OH, R5 es arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para proporcionar un compuesto de fórmula (2):
imagen11
y
10 (d) poniendo en contacto el compuesto de fórmula (2), en donde PG es un grupo protector de hidroxilo, con hidrógeno bajo catálisis de hidrogenación para proporcionar el compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En el procedimiento de la invención, el compuesto de fórmula 1 puede obtenerse mediante un proceso que incluye, entre otros, la etapa de separar el grupo protector de bencilideno e hidrogenar el compuesto representado por la
15 estructura de fórmula (2): en que PG es un grupo protector de hidroxilo.
imagen12
En una realización, el grupo protector de hidroxilo puede ser bencilo.
En una realización de la invención, el compuesto de fórmula 2, en que X = (CH2)8, R3 = H, R4 = H, R5 = 4-F-fenioxifenilo, se puede obtener por un procedimiento que incluye, entre otros, la etapa de formación de enlace amida entre compuestos de fórmula (3) y fórmula (4).
imagen13
en que, en una realización, PG es bencilo
imagen14
10 en que en una realización, X = grupo alquilo, alquenilo, R3 = H, OH, R4 = H, OH, R5 = arilo, arilo sustituido, heteroarilo
o heteroarilo sustituido.
En una realización de la invención, el compuesto de fórmula (3), en donde R es bencilo, se puede obtener mediante un procedimiento que incluye, entre otros, la etapa de: reducir el grupo azida de un compuesto representado por la estructura de fórmula (5):
imagen15
En una realización de la invención, el compuesto de fórmula 5, en donde PG es bencilo, se puede obtener mediante un procedimiento que incluye, entre otros, la etapa de: hacer reaccionar un compuesto representado por la estructura de fórmula (6)
imagen16
en donde PG es un grupo protector de hidroxilo y LG es un grupo lábil, con un compuesto representado por la estructura de fórmula (7)
imagen17
en donde PG es un grupo protector de hidroxilo, para formar un enlace alfa glucosídico, obteniendo de este modo el compuesto de fórmula (5). En otra realización, el grupo lábil de fórmula (6) puede ser uno cualquiera de:
imagen18
Estos y otros aspectos resultarán evidentes a partir de la siguiente descripción de la realización preferida tomada junto con los siguientes dibujos.
10 BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
Los siguientes dibujos forman parte de la presente memoria descriptiva y se incluyen para demostrar adicionalmente determinados aspectos de la presente divulgación, cuyas invenciones pueden entenderse mejor por referencia a uno
o más de estos dibujos en combinación con la descripción detallada de realizaciones específicas presentadas en esta memoria.
15 La Fig 1es una ilustración esquemática que representa la síntesis de C34, A15-21. Esquema 1. Reactivos y condiciones: (a) TfN3, K2CO3, CuSO4, DCM, MeOH, H2O; (b) cloruro de tritilo, trietilamina, tolueno; (c) cloruro de bencilo (BnCl), NaH, DMF, tolueno; (d) HCl, tolueno, MeOH; (e) A5, Me2S2-Tf2O, THF, MS 4 Å; (f) LiAlH4, THF; (g) RCO2H, HBTU, NMM, DCM; (h) Pd(OH)2, H2, MeOH, DCM.
La Fig 2 es una ilustración esquemática que representa la síntesis no de la invención del compuesto A23-A25.
20 Esquema 2. Reactivos y condiciones: (a) Pd(OH)2, H2 (80 psi), MeOH, DCM, AcOH; (b) RCO2H, HBTU, NMM, DCM MeOH.
La Fig 3 es una ilustración esquemática que representa la síntesis de fórmula (4). Esquema 3.
La Fig 4 es una ilustración esquemática que representa la síntesis no de la invención de los compuestos C5-C7. Esquema 4. Reactivos y condiciones: (a) PPh3, THF, H2O; (b) Ph(CH2)nCO2H, HBTU, NMM, DCM; (c) Pd(OH)2, H2,
25 DCM, MeOH.
La Fig 5 es una ilustración esquemática que representa la síntesis no de la invención de los compuestos C20-C31. Esquema 5. Reactivos y condiciones: (a) TsCl, piridina; (b) NaN3, DMF; (c) PPh3, THF, H2O; (d) RCH2CO2H, HBTU, NMM, MeOH, DCM.
La Fig 6 muestra la secreción de IL-2 inducida por glucoesfingolípidos en el sistema de células A20CD1d y mNK1.2. 30 Los datos se dan como media ± DE; "-" indica que no hay compuesto.
La Fig 7 muestra los resultados de la secreción de citoquinas INF-gamma por parte de los esplenocitos de ratón C57BL/6 hembra.
imagen19
La Fig 8 muestra los resultados de la secreción de citoquinas de IL-4 por parte de los esplenocitos de ratón C57BL / 6 hembra.
La Fig 9 muestra las relaciones de secreción de citoquinas obtenidas de la comparación de las Figs. 7 y 8.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
5 Los términos utilizados en esta memoria descriptiva tienen generalmente sus significados ordinarios en la técnica, dentro del contexto de la invención, y en el contexto específico en el que se utiliza cada uno de los términos y expresiones. Determinados términos y expresiones que se utilizan para describir la invención se comentan a continuación, o en otra parte de la memoria descriptiva, para proporcionar una guía adicional al profesional con respecto a la descripción de la invención. Por conveniencia, determinados términos y expresiones pueden
10 resaltarse, por ejemplo, utilizando cursivas y/o comillas. El uso de resaltado no tiene influencia alguna en el alcance y el significado de un término o expresión; el alcance y el significado de un término o expresión es el mismo, en el mismo contexto, esté o no resaltado. Se apreciará que una cosa se puede decir de más de una manera. En consecuencia, el lenguaje alternativo y sinónimos se pueden utilizar para uno o más de los términos y expresiones comentados en esta memoria, ni tiene significado especial alguno sobre si un término o una expresión son
15 elaborados o comentado en esta memoria. Se proporcionan sinónimos para determinados términos o expresiones. Un recital de uno o más sinónimos no excluye el uso de otros sinónimos. El uso de ejemplos en cualquier parte de esta memoria descriptiva que incluyen ejemplos de cualquiera de los términos o expresiones comentados en esta memoria es sólo ilustrativo, y de ninguna manera limita el alcance y el significado de la invención o de cualquier término o expresión ejemplificada. Asimismo, la invención no está limitada a diversas realizaciones dadas en esta
20 memoria descriptiva.
A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados en esta memoria tienen el mismo significado que entiende comúnmente un experto ordinario en la técnica a la que pertenece esta invención. En caso de conflicto, controlará el presente documento, incluidas las definiciones.
Los nuevos métodos de la síntesis de fórmula (1) en general comprenden la unión de ceramida con sacárido, pero
25 también es posible unir primero con la fitoesfingosina y luego derivar el grupo amino en el grupo amida para completar la fórmula 1.
Como un ejemplo de una síntesis de este tipo, también es posible sintetizar el compuesto representado por la fórmula (1), en donde la galactosa C6' es un grupo hidroxilo mediante las siguientes etapas (véanse las FIGs 1-3).
El hidrocloruro de fitoesfingosina ((2S,3S,4R)-2-amino-1,3,4-octadecanotriol) es un material de partida, aunque
30 existen varios métodos como se describe en Curr. Org. Chem. 2002, 6, 365-391 para la síntesis de fitoesfingosina. La fuente comercial -hidrocloruro de fitoesfingosina se prepara a partir del caldo de fermentación de levadura apropiado, el cual se puede obtener a un precio razonable en grandes cantidades (Evonik Degussa Taiwan Ltd.). Las esfingosinas isoméricas que tienen una configuración diferente de la de la esfingosina natural se pueden preparar de acuerdo con los métodos descritos en Helvetica Chimica Acta 1957, 470, 1145; o Chem. Commun.1991,
35 820.
En la primera etapa, el grupo amino de fitoesfingosina se convirtió en un grupo azido mediante una reacción de transferencia de diazo mediante TfN3 recien preparada para proporcionar A1. La preparación de TfN3 se puede encontrar en Tetrahedron Lett 1996, 37, 6029-6032. La protección con tritilo del alcohol primario A1 dio A2 bruto, el cual se sometió directamente a las condiciones de bencilación de NaH y BnCl para proporcionar compuesto A3. En 40 la presente ruta, aunque el grupo bencilo se emplea como el grupo protector del grupo hidroxilo, también se pueden utilizar otros grupos apropiados tales como benzoato, (p-metoxi)-bencilo, o isopropilideno. Se seleccionó tolueno como disolvente para sintetizar compuestos de A1 a A3. La reacción de bencilación de los segundos alcoholes no se produjo en tolueno como único disolvente. Para superar la baja reactividad de la bencilación en tolueno, se empleó un sistema co-disolvente de 10% de DMF en tolueno para mejorar la solubilidad de NaH y alcóxido
45 intermedio. Después del tratamiento acuoso, se obtuvo A3 bruto en forma de una solución en tolueno y se sometió a desprotección de carácter ácido para dar el aceptor de glicosilo A4. Se pueden utilizar diversos ácidos en la desprotección del grupo tritilo tal como hidrocloruro, ácido sulfúrico, bromuro de hidrógeno, ácido trifluoroacético, BF3.OEt, ácido nítrico, resina de carácter ácido (p. ej., Amberlite IR120®), etc.
Previamente, se han empleado diversos métodos de glicosilación en las síntesis de glucolípidos, incluyendo fluoruro
50 de glicosilo, tricloroacetoimidato de glicosilo, bromuro de glicosilo y yoduro de glucosilo20-23. Tetrahedron 1998, 54, 3141-3150; J Org Chem 2005, 70, 10260-10270; J Org Chem 2002, 67, 4559-4564; Chem Commun 2007, 23362338. El imidato de glicosilo se ha empleado inicialmente en la síntesis de los autores de la invención con un
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excelente rendimiento (89%) y selectividad anomérica (α/β = 9/1). Debido a que el imidato se hidroliza fácilmente y habitualmente es necesario prepararlo en fresco, el uso de este grupo lábil para la glicosilación en la síntesis a gran escala puede topar con problemas de almacenamiento y purificación. Alternativamente, tioglicósido A5 como donante se puede lograr utilizando ácido de Lewis tal como TMSOTf, Tf2O, BF3 OEt2, TfOH, Me2S2-Tf2O como catalizadores y utilizando tamices moleculares para deshidratar. El compuesto A5 contiene un grupo azido que favorece la glicosilación, mientras que el grupo amino de fitoesfingosina está protegido por amida o carbamato (carbamato de t-butilo) como se ve en los documentos US5849716; US 2007/0238871; J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 13602-13603; J. Org. Chem. 2005, 70, 10260-10270; Tetrahedron 1998, 54, 3141-3150; Synthesis 2004, 847850; Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 16, 2195-2199. El 2-NH y el 1-OH pueden formar un enlace hidrógeno intramolecular que lo obstaculiza como un nucleófilo para atacar el glucósido activado y da como resultado bajos rendimientos en la glicosilación. Después de la glicosilación entre A4 y A5, la purificación en columna puede proporcionar A6 tanto en forma α pura como en forma β pura.
El compuesto A6 que contiene un grupo azido se puede reducir utilizando hidruro de litio y aluminio, borohidruro sódico, un complejo de borano, complejo de fosfato, reducción enzimática, hidrogenación o hidrogenación por transferencia. En lugar de utilizar un complejo de fosfina que genera el producto secundario óxido de fosfina que es difícil de separar, la reducción de la azida mediante hidruro de litio y aluminio (LiAlH4) dio una amina A7 de mayor pureza. El compuesto A7 se acopló con diversos ácidos carboxílicos preparados (véase la Fig. 3 para los métodos preparativos) para dar los compuestos de amida correspondientes. La desprotección global de estos compuestos se logró en condiciones de hidrogenolisis en presencia de Pd(OH)2 catalítico y H2 en disolventes mixtos de MeOH y CH2Cl2 para producir análogos de C34, compuestos A15-21.
La deshalogenación reductiva de haluros de arilo en la cadena de acilo se lleva a cabo mediante la reacción de hidrogenación de los compuestos que contienen cloro-y bromo-acilo. Por lo tanto, para evitar la reacción de deshalogenación, A6 se desprotegió y se redujo por hidrogénesis en presencia de Pd(OH)2 catalítico y H2. Después de acoplar la amina A22 resultante con los ácidos apropiados (véase la Fig. 3 para los métodos de preparación) en las condiciones de acoplamiento, se proporcionaron los análogos A23-25 (Fig 2) en un procedimiento no de la invención. Para este procedimiento se conocen muchos métodos de reacción, particularmente para la amidación. También es posible utilizar cloruro de acilo y anhídrido de ácido o un ácido carboxílico. El ácido carboxílico se utiliza en una reacción de condensación en presencia de un agente de condensación apropiado. El agente de condensación apropiado utilizado en la reacción incluye diciclohexilcarbodiimida (DCC), 1-etil-3-(3'dimetilaminopropil)carbodiimina (EDC), así como hexafluoro-fosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3tetrametiluronio (HBTU), hidroxibenzotrazol (HOBt) o similares. Con el fin de que la reacción progrese rápidamente, se añade una base orgánica tal como trietilamina, piridina, N-metilmorfolina, dimetilanilina, 4-dimetilaminopiridina, Nmetilpiperidina, N-metilpirrolidina. El disolvente puede ser uno cualquiera de los disolventes inertes que no estarán implicados en la reacción, tales como tetrahidrofurano, etiléter, tolueno, cloroformo, cloruro de metileno, acetato de etilo, acetona o similares.
Para la preparación de diversos ácidos fenilalcanoicos sustituidos, se emplea la reacción de Wittig como se puede ver en la Fig. 3. En este proceso, los ácidos ω-bromo-alcanoicos se mezclan con trifenilfosfina en presencia del disolvente. La reacción se lleva a cabo generalmente con un disolvente apropiado, pero cuando la reacción es baja, puede aumentarse realizando la reacción en ausencia de un disolvente. El disolvente puede ser cualquiera de los disolventes inertes que no estarán implicados en la reacción, p. ej., tolueno, benceno, diglima, sulfuro de dimetilo o similares.
Como otro ejemplo de la síntesis, también es posible sintetizar el compuesto representado por la fórmula (1) llevando a cabo diversas sustituciones en la posición de galactosa C6' mediante las siguientes etapas (véanse las FIGs. 4-5) en procedimientos que no son de la invención.
La síntesis de análogos modificados con C6 comenzó con el compuesto C1 tal como se describe en Org Lett 2002, 4, 1267-1270. La reducción de la azida, luego la amidación con diferentes ácidos aromáticos comerciales y la desprotección total proporcionaron C5-C6 (Fig 4, Esquema 4). Además, para evitar una interconversión tediosa del grupo protector para la preparación del compuesto C1, se empleó una estrategia diferente en la síntesis de compuestos bi-modificados de C6”·y cadenas de acilo (Fig 5). El grupo hidroxilo C6'' de A15 puede tosilarse o mesilarse mediante cloruro de toluensulfonilo o cloruro de metanosulfonilo en presencia de una base, tal como piridina, dimetilpiridina, trietilamina, dietilpropilamina, DBU o similares, y luego el grupo correspondiente de tosilato o mesilato se puede sustituir con azida por azida sódica para dar C18. La reducción de azida de Staudinger, la amidación con una diversidad de ácidos produjo C20-31
Uso del compuesto de la presente invención Los compuestos representados por la fórmula (1) que exhiben las siguientes actividades fisiológicas pueden utilizarse como agente inmunoterapéutico contra cánceres o como agente inmunoestimulador contra las otras enfermedades.
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Actividad activadora de APC: secreciones de IL-2 pueden medirse en el sistema de células A20CD1d y mNK1.2 5 como APC y células efectoras tal como se muestra en el Ejemplo 2.
Actividad inmunoestimulante: las secreciones de IFN-γ y citoquina Il-4 se pueden medir tal como se muestra en el Ejemplo 2, en el que se sacrificó el ratón C57BL/6 hembra (16w4d) y se recogió el bazo para el ensayo.
Agente antitumoral: El compuesto de la presente invención tiene un perfil de secreción de citoquina desviado de Th1 y se puede utilizar una actividad antitumoral y un efecto inmunoestimulante.
10 Aunque los compuestos en la presente invención se pueden utilizar como el agente inmunoterapéutico contra el tumor, se pueden utilizar solos o combinados con quimioterapia o radioterapia.
Los compuestos de la presente invención como agentes antitumorales o agentes inmunoestimulantes se pueden administrar en cualquier ruta de dosificación apropiada. El compuesto se forma generalmente en una preparación que está en forma de diluido y formado con un soporte farmacéuticamente aceptable (liposoma o micela). Cuando 15 se utiliza el compuesto de la presente invención, éste se puede administrar oral o parenteralmente a seres humanos
o mamíferos. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención, cuando se utilizan como inyección, se pueden administrar por vía intravenosa, intramuscular, subcutánea o por inhalación en una forma tal como solución, suspensión o emulsión con el disolvente apropiado. En este caso, polisorbatesmo o macrogol, colesterol se puede añadir como agente solubilizante, si es necesario. Cuando los compuestos en la presente invención se administran
20 por vía oral, estos pueden estar en forma de comprimido, polvo, gránulo o jarabe seco en un aditivo apropiado.
EJEMPLOS
Sin pretender limitar el alcance de la invención, a continuación se dan instrumentos, aparatos, métodos a modo de ejemplo y sus resultados relacionados de acuerdo con las realizaciones de la presente invención. Téngase en cuenta que los títulos o subtítulos se pueden utilizar en los ejemplos para la conveniencia de un lector, que de
25 ninguna manera debe limitar el alcance de la invención. Además, en esta memoria se proponen y describen diversas teorías; sin embargo, de ninguna manera, ya sean correctas o incorrectas, deberían limitar el alcance de la invención siempre que la invención se ponga en práctica de acuerdo con la invención sin tener en cuenta teoría o esquema de acción particular alguno.
Ejemplo 1
30 El método de síntesis y las propiedades físico-químicas de los compuestos de la presente invención se describen a continuación (en referencia al número de compuestos en el procedimiento de síntesis, véanse los esquemas de reacción tal como se muestra en FIG. 1 -FIG. 5)
En los esquemas que se muestran en esta memoria, se utilizan las siguientes abreviaturas:
THF: tetrahidrofurano
35 DMF: N,N-dimetilformida MS-4A: Tamices moleculares de 4A (agente deshidratante) CH2Cl2: diclorometano NMM: N-metilmorfolina HBTU: hexafluoro-fosfato de O-benzotriazol-N,N,N',N’-tetrametil-uronio
40 TMSOTf: trifluorometanosulfonato de trimetilsililo Tf2O: anhídrido trifluorometansulfónico CDCl3: d1-cloroformo RMN: resonancia magnética nuclear HRMS: masa de alta resolución
45 ESI: ionización por proyección de electrones
Las otras abreviaturas tienen los mismos significados que aquellos en los esquemas mostrados arriba.
Esquema de Síntesis 1 (Fig 1) Las rutas muestran específicamente el procedimiento para preparar el compuesto C34, A13, A14, A15, A16, A18, A19, A20, A21 de acuerdo con la presente invención también pueden sintetizarse de acuerdo con este procedimiento.
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Síntesis de (2S,3S,4R)-2-azido-D-ribo-octadecano-1,3,4-triol (A1)
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A la solución de azida sódica (64,3 g, 989 mmol) en 250 mL de agua se añadió diclorometano (350 mL). La mezcla bifásica se enfrió a 5ºC en un baño de hielo y se añadió anhídrido tríflico (47,5 mL, 283 mmol) a lo largo de un período de 20 min, manteniendo la temperatura por debajo de 10ºC. Después de agitar durante 2,5 h en un baño de hielo, la mezcla de reacción se enfrió bruscamente con 70 mL de solución sat. de K2CO3. La fase orgánica se aisló y
10 la fase acuosa se extrajo con CH2Cl2 (200 mL). Las fases orgánicas se combinaron para proporcionar una solución de triflilazida en diclorometano. [¡Precaución! la triflil-azida es explosiva, necesita ser almacenada con disolvente.]
A una solución de sulfato cúprico (0,35 g, 1,4 mmol) en agua (150 mL) se añadieron hidrocloruro de fitoesfingosina (forma altamente pura de hidrocloruro de fitoesfingosina [(2S,3S,4R)-2-amino-1,3,4-octadecanotriol] del caldo de fermentación de levadura apropiado está comercialmente disponible por un precio razonable en grandes cantidades, 15 50,0 g, 141 mmol), carbonato de potasio (29,28 g, 211,9 mmol) y metanol (1,0 L). La suspensión se enfrió a 0-5°C en un baño de hielo salado y la solución de trifilazida (en 550 mL de CH2Cl2) se añadió a lo largo de un período de 10 min. Después de agitar la mezcla de reacción durante 12 h a t.a., la mezcla se concentró. El residuo se suspendió en agua (1,0 L) y se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. El precipitado se filtró y se lavó con agua (500 mL x 2). El residuo se secó mediante destilación azeotrópica (70-80°C, 200-250 mm de Hg) con tolueno (1,5 L)
20 para proporcionar (2S,3S,4R)-2-azido-D-ribo-octadecano-1,3,4-triol (A1) (47,0 g, 137 mmol, 97%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 87 °C. 1H-RMN (CD3OD, 400 MHz) δ 3,85 (dd, J = 11,6, 3,3 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 11,6, 7,9 Hz, 1H), 3,50-3,55 (m, 1H), 3,43-3,47 (m, 2H), 1,22-1,60 (m, 26H), 0,83 (t, J = 6,4 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD, 100 MHz) δ 74,6, 71,5, 65,3, 61,2, 32,5, 31,7, 29,4, 29,4, 29,1, 25,4, 22,4, 13,1. HRMS (ESI) calculado para C18H37N3O3Na [M+Na]+: 366,2733, encontrado: 366,2729.
25 Síntesis de (2S,3S,4R)-2-azido-3,4-di-O-bencil-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A4)
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A la mezcla de (2S,3S,4R)-2-azido-D-ribo-octadecano-1,3,4-triol (47,0 g, 137 mmol) en tolueno (1,0 L) se añadió trietilamina (46 mL, 332 mmol) y cloruro de tritilo (42,0 g, 151 mmol). Después de agitar a 50-55 °C durante 6 h, se añadieron trietilamina (4,6 mL, 33 mmol) y cloruro de trifenilmetilo (4,20 g, 15,1 mmol) y luego se agitó durante 15 h 30 adicionales. Se añadió agua (1,0 L) y la mezcla se agitó durante 3 min. La fase orgánica se lavó con agua (1,0 L, 500 mL) y se concentró para proporcionar (2S,3S,4R)-2-azido-1-tritil-D-ribo-octadecano-1,3,4-triol (A2) bruto. La muestra analítica para RMN se purificó por cromatografía en columna. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,22-7,47 (m, 15H), 3,62 (dd, J = 3,7, 10,1 Hz, 2H), 3,53 (m, 2H), 3,40 (dd, J = 6, 10,1 Hz, 1H), 2,35 (s ancho, 1H), 1,83 (s ancho, 1H), 1,20-1,52 (m, 26H), 0,87 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 143,35, 128,54, 128,01, 127,27,
35 87,78, 74,19, 72,18, 63,48, 62,31, 31,90, 31,74, 29,67, 29,64, 29,60, 29,55, 29,34, 25,59, 22,67, 14,10.
A la solución de (2S,3S,4R)-2-azido-1-tritil-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A2) bruto en tolueno (750 mL) y DMF (75 mL) se añadió hidruro de sodio (al 60% en aceite mineral, 21,9 g, 548 mmol) en tres porciones a lo largo de un período de 10 min. La mezcla se agitó durante 30 min, después de lo cual se añadió cloruro de bencilo (50,5 mL, 0,438 mmol) a la mezcla de reacción. La mezcla se calentó a 50-60°C y se agitó durante 18 h. La mezcla se enfrió
40 luego a 0ºC y se añadió agua (50 mL) gota a gota. La fase orgánica se lavó con cloruro de amonio sat. (500 mL x 2) y agua (500 mL x 2). La fase orgánica se filtró a través de una almohadilla de Celite y el filtrado se concentró para proporcionar (2S,3S,4R)-2-azido-2,3-di-bencil-1-tritil-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A3) bruto.
A la solución de A3 en tolueno/metanol (600 mL, 1/1) se añadió HCl acuoso (33%, 6,0 mL). La mezcla se calentó a 50-60 °C y se agitó durante 20 h. La mezcla de reacción se enfrió bruscamente con NaOH 1,0 N (55 mL) y se 45 concentró. El residuo se dividió en partes con tolueno (500 mL) y agua (500 mL). La fase orgánica se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (100 g brutos, gel de sílice 500 g, acetato de etilo/n-hexano = 1/10)
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para proporcionar (2S,3S,4R)-2-azido-2,3-di-bencil-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A4) (27,5 g, 52,5 mmol, 38% en 4 etapas) en forma de un aceite amarillo. 1H-RMN (CDCl3, 200 MHz) δ 7,26-7,39 (m, 10H), 4,69 (d, J = 1,4 Hz, 2H), 4,59 (d, J = 4,3 Hz, 2H), 3,59-3,94 (m, 5H), 1,26-1,61 (m, 26H), 0,88 (t, J = 6,4 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 50 MHz) δ 137,9, 137,6, 128,5, 128,4, 128,1, 127,97, 127,81, 127,10, 80,38, 78,96, 73,59, 72,49, 63,03, 62,20, 21,90, 30,16, 29,66, 29,35, 25,43, 22,67, 14,11. HRMS (ESI) calculado para C32H49N3O3Na [M+Na]+: 546,3672, encontrado: 546,3689
Síntesis de 4-metilfenil 2,3-O-dibencil-4,6-O-bencilideno-1-tiol-D-galactopiranósido (A5)
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El compuesto A5 se puede preparar de acuerdo con el método descrito en Plettenburg, O. et al. J. Org. Chem. 2002, 10 67, 4559-4564.
Datos del compuesto A5: 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,23-7,42 (m, 15H), 6,98 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,46 (s, 1H), 4,69 (m, 4H), 3,54 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,35 (dd, J = 12,3, 1,5 Hz, 1H), 4,12 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,03 (dd, J = 9,8, 3,6 Hz, 1H), 3,82 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 9,2, 3,4 Hz, 1H), 3,39 (s, 1H), 2,28 (s, 3H).
15 Síntesis de 2-azido-3,4-di-O-bencil-1-O-(2,3-di-O-bencil-4,6-O-bencilideno-α-D-galactopiranosil)-D-ribo-octadecan1,3,4-triol (A6)
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A la solución de disulfuro de dimetilo (10,0 mL, 113 mmol) en diclorometano (75 mL) se añadió anhídrido tríflico (17 mL, 100 mmol) a 0-5 ºC en un baño de hielo salado. Después de agitar la mezcla de reacción en el baño de hielo
20 salado durante 30 min, se obtuvo Me2S2-Tf2O en forma de una solución 1,0 M en diclorometano y se puede almacenar en un baño de hielo durante 3 horas.
El compuesto A4 (27,3 g, 52,2 mmol), A5 (34,7 g, 62,6 mmol) y el tamiz molecular de 4 Å (33 g) se mezclaron y secaron en vacío durante 1 h y se añadió THF (520 mL) a la mezcla. La mezcla se enfrió a -10°C en un baño de hielo salado antes de la adición de Me2S2-Tf2O (solución 1,0 M en CH2Cl2, 94 mL, 94 mmol). Después de agitar 25 durante 20 min, la mezcla de reacción se enfrió bruscamente con trietilamina (22 mL) y luego se diluyó con diclorometano (200 mL). La mezcla se filtró a través de Celite y se lavó con diclorometano (50 mL). El filtrado reunido se concentró y se repartió con diclorometano (500 mL) y agua (500 mL). La fase orgánica se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (peso bruto = 153 g, 600 g de gel de sílice, acetato de etilo:nhexano = 1:15 a 1:12 a 1:10) para proporcionar 2-azido-3,4-di-O-bencil-1-O-(2,3-di-O-bencil-4,6-O-bencilideno-α-D30 galactopiranosil)-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A6) (32,07 g, 33,60 mmol, 64%) en forma de una cera blanquecina. P.f.: 59 °C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,22-7,50 (m, 25H), 5,44 (s, 1H), 4,96 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,79 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 4,66-4,69 (m, 2H), 4,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,56 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 4,15 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,06-4,12 (m, 1H), 3,98-4,04 (m, 3H), 3,86 (dd, J = 12,5, 1,5 Hz, 1H), 3,68-3,73 (m, 3H), 3,60-3,62 (m, 1H), 3,55 (s, 1H), 1,25-1,55 (m, 26H), 0,87 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
35 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 138,75, 138,36, 138,01, 137,82, 128,85, 128,37, 128,34, 128,26, 128,22, 128,09, 127,90, 127,79, 127,75, 127,70, 127,66, 127,61, 127,50, 127,45, 126,33, 101,05, 99,13, 79,41, 78,95, 76,68, 75,80, 75,44, 74,66, 73,77, 73,49, 72,06, 72,03, 69,31, 68,43, 62,97, 61,80, 31,91, 30,01, 29,75, 29,69, 29,67, 29,65, 29,63, 29,60, 29,35, 25,44, 22,68, 14,10. [α]25D +63,1 (c 1,0, CHCl3). HRMS (ESI) calculado para C59H75N3O8Na [M+Na]+: 976,5452, encontrado: 976.5483.
40 Síntesis de 3,4-di-O-bencil-1-O-(2,3-di-O-bencil-4,6-O-bencilideno-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4-(4fluorofenoxi)fenil)undecanoil)amino-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A8)
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La solución de compuesto A7 (32,07 g, 33,61 mmol) en THF (340 mL) se enfrió en un baño de hielo y se añadió hidruro de litio y aluminio (1,910 g, 50,33 mmol) en dos porciones. La mezcla se devolvió a la temperatura ambiente (t.a.) y se agitó durante 70 min. La mezcla se enfrió a 0 ºC antes de enfriar bruscamente con posterioridad con agua (1,9 mL), NaOH 1,0 N (3,8 mL) y agua (1,9 mL). La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con diclorometano (100 mL). El filtrado se concentró y se repartió con diclorometano (350 mL) y agua (350 mL).
Se añadió ácido 11-(4-(4-fluorofenoxi)fenil))undecanoico (B4) (11,27 g, 30,26 mmol) a la fase orgánica aislada, seguido de NMM (9,2 mL, 84 mmol) y HBTU (19,12 g, 50,41 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 12 h, la mezcla se filtró y se lavó con 50 mL de CH2Cl2. El filtrado reunido se lavó con cloruro de amonio sat. (400 mL) y agua (400 mL). La fase orgánica se concentró y purificó por cromatografía en columna (peso bruto = 46 g, 350 g de gel de sílice, acetato de etilo/n-hexano = 1/6 a 1/5 a 1/4) para proporcionar A8 (36,06 g, 28,11 mmol, 84%) en forma de una cera blanquecina. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 6,86-7,51 (m, 33H), 5,84 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,44 (s, 1H), 4,94 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,69-4,74 (m, 3H), 4,63 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,57 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 4,24-4,31 (m, 1H), 4,16 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 4,034,12 (m, 3H), 3,92 (dd, J = 10,3, 3,6 Hz, 2H), 3,73-3,79 (m, 2H), 3,56 (s, 1H), 3,51-3,53 (m, 1H), 2,55 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,87-1,91 (m, 2H), 1,19-1,69 (m, 42H), 0,87 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 172,89, 159,76, 157,36, 155,36, 153,36, 153,33, 138,63, 138,52, 138,50, 138,38, 137,81, 137,79, 129,53, 128,84, 128,64, 128,42, 128,35, 128,31, 128,29, 128,08, 127,88, 127,80, 127,69, 127,59, 127,57, 127,55, 126,29, 120,08, 120,00, 118,31, 116,24, 116,01, 100,99, 99,59, 79,81, 79,48, 76,68, 76,14, 75,68, 74,33, 73,81, 73,28, 71,88, 71,69, 69,39, 68,13, 62,91, 60,36, 50,32, 36,69, 35,17, 31,90, 31,61, 30,24, 29,78, 29,69, 29,67, 29,65, 29,59, 29,56, 29,51, 29,42, 29,35, 29,29, 25,81, 25,68, 22,66, 14,17, 14,10. HRMS (ESI) calculado para C82H105FNO10 [M+H]+: 1282,7723, encontrado: 1282,7731.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4-(4-fluorofenoxi)fenil)undecanoil)amino-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (C34)
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A la solución de A8 (36,06 g, 28,11 mmol) en diclorometano/metanol (200 mL, diclorometano/metanol = 1/1) se añadió hidróxido de paladio (1,8 g). La mezcla se agitó bajo hidrógeno (5 bares) a temperatura ambiente durante 10
h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con diclorometano/metanol (100 mL, diclorometano/metanol = 1/1). El filtrado reunido se concentró y se purificó por cromatografía en columna (300 g de gel de sílice, diclorometano/metanol = 15/1 a 10/1) para proporcionar C34 bruto (17,46 g, 20,93 mmol, pureza = 95,72% de área por HPLC) en forma de sólidos blanquecinos con un rendimiento del 75%. Se añadió etanol (87,5 mL) al C34 bruto y se calentó a 50 °C y luego se añadió acetona (87,5 mL). La solución se enfrió a t.a. a lo largo de un período de 3 h y luego se enfrió en un baño de hielo. El precipitado se filtró y se lavó con acetona (200 mL) para proporcionar C34 (16,02 g, 19,21 mmol, 68%, pureza = 97,15% de área por HPLC) en forma de sólidos blanquecinos con una recuperación del 92%. P.f.: 163 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,26 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,07-7,17 (m, 4H), 7,00 (dd, J = 6,6, 2,0 Hz, 2H), 5,03 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,33 (q, J = 4,7 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,01 (dd, J = 4,6, 10,8 Hz, 1H), 3,79-3,97 (m, 6H), 3,64-3,72 (m, 2H), 2,71 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,34 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,29-1,43 (m, 42H), 1,01 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,99, 154,82, 152,97, 137,34, 128,95, 119,39, 119,31, 117,71, 115,52, 115,29, 99,21, 73,92, 71,28, 70,41, 69,69, 69,17, 68,37, 66,63, 61,12, 49,92, 35,74, 34,50, 31,66, 31,27, 31,02, 29,10, 29,06, 28,99, 28,95, 28,88, 28,85, 28,77, 28,70, 28,60, 25,28, 25,23, 21,99, 13,10. [α]25D +57,0 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C47H77FNO3 [M+H]+: 834,5532, encontrado: 834,5595.
5
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15
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25
30
Síntesis de 3,4-di-O-bencil-1-O-(2,3-di-O-bencil-4,6-O-bencilideno-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4fenoxifenil)undecanoil)amino-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A9)
imagen29
Mediante el procedimiento similar de síntesis de A8, el compuesto A6 (100 mg, 0,105 mmol) y el compuesto B12 (33 mg, 0,093 mmol) son los materiales de partida para dar el compuesto A9 (45 mg, 0,036 mmol, 38%) en forma de una cera blanca. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,48-7,52 (m, 2H), 7,20-7,41 (m, 25H), 7,12 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,06 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 6,96-7,00 (m, 2H), 6,92 (d, J = 10,4 Hz, 2H), 5,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,45 (s, 1H), 4,94 (d, J = 3,6, 1H), 4,84 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,69-4,75 (m, 3H), 4,63 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,57 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,24-4,31 (m, 1H), 4,17 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,03-4,12 (m, 3H), 3,87-3,96 (m, 3H), 3,74-3,80 (m, 2H), 3,56 (s, 1H), 3,50-3,56 (m, 1H), 2,57 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,82-1,95 (m, 2H), 1,15-1,65 (m, 42H), 0,88 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 172,89, 159,69, 154,86, 138,62, 138,51, 138,50, 138,38, 137,89, 137,79, 129,60, 129,49, 128,83, 128,41, 128,34, 128,31, 128,29, 128,07, 127,87, 127,82, 127,80, 127,68, 127,57, 127,55, 126,29, 122,79, 118,92, 118,41, 100,98, 99,60, 79,82, 79,48, 76,14, 75,68, 74,33, 73,80, 73,27, 71,88, 71,69, 69,38, 68,14, 62,91, 50,32, 36,70, 35,21, 31,90, 31,61, 30,24, 29,78, 29,69, 29,67, 29,65, 29,59, 29,56, 29,51, 29,41, 29,34, 29,29, 25,80, 25,68, 22,66, 14,10. HRMS (ESI) calculado para C82H106NO10 [M+H]+: 1264,7817, encontrado: 1264,7834.
Síntesis de 3,4-di-O-bencil-1-O-(2,3-di-O-bencil-4,6-O-bencilideno-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4isopropoxifenil)undecanoil)amino-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A10)
imagen30
Mediante el procedimiento similar de síntesis de A8 , se utilizaron compuesto A6 (100 mg, 0,105 mmol) y B13 (30 mg, 0,094 mmol) como materiales de partida para proporcionar A10 (72,0 mg, 0,059 mmol, 63%) en forma de una cera blanca. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,21-7,55 (m, 25H), 7,06 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,78-7,84 (m, 2H), 5,86 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,46 (s, 1H), 4,95 (d, J = 3,2, 1H), 4,85 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,71-4,80 (m, 3H), 4,63 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,46-4,54 (m, 3H), 4,18 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,05-4,14 (m, 3H), 3,88-3,97 (m, 3H), 3,75-3,82 (m, 2H), 3,58 (s, 1H), 3,51-3,57 (m, 1H), 2,53 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,83-1,96 (m, 2H), 1,15-1,71 (m, 48H), 0,89 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 172,84, 139,68, 138,60, 138,49, 138,46, 138,36, 137,77, 128,81, 128,39, 128,32, 128,28, 128,26, 128,05, 127,86, 127,79, 127,78, 127,66, 127,54, 126,26, 124,00, 116,89, 116,72, 100,96, 99,54, 79,75, 79,46, 76,10, 75,66, 74,29, 73,79, 73,25, 71,84, 71,65, 69,35, 68,08, 62,88, 50,28, 36,66, 35,04, 31,87, 31,20, 30,19, 29,75, 29,67, 29,64, 29,50, 29,48, 29,38, 29,37, 29,31, 29,04, 25,87, 25,64, 22,64, 14,07. HRMS (ESI) calculado para C79H108NO10 [M+H]+: 1230,7973, encontrado: 1230,7968.
Síntesis de 3,4-di-O-bencil-1-O-(2,3-di-O-bencil-4,6-O-bencilideno-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A11)
imagen31
Mediante el procedimiento similar de síntesis de A8, se utilizaron compuesto A7 (100 mg, 0,105 mmol) y B14 (28 mg, 0,093 mmol) como materiales de partida para proporcionar A11 (63 mg, 0,052 mmol, 56%). P.f.: 98 °C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,21-7,54 (m, 25H), 6,92-7,06 (m, 2H), 6,81-6,87 (m, 1H), 5,87 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,45 (s, 1H), 5 4,95 (d, J = 3,2, 1H), 4,84 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,69-4,79 (m, 3H), 4,63 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,25-4,3 (m, 1H), 4,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H) 4,04-4,13 (m, 2H), 3,88-3,97 (m, 3H), 3,74-3,81 (m, 2H), 3,57 (s, 1H), 3,51-3,56 (m, 1H), 2,54 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,82-1,96 (m, 2H), 1,15-1,69 (m, 42H), 0,89 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 172,84, 150,02 (dd, J = 245, 13 Hz), 148,55 (dd, J = 244, 13 Hz), 139,68, 138,60, 138,49, 138,46, 138,36, 137,77, 128,81, 128,39, 128,32, 128,28,
10 128,26, 128,05, 127,86, 127,79, 127,78, 127,66, 127,54, 126,26, 124,00, 116,89, 116,72, 100,96, 99,54, 79,75, 79,46, 76,01, 75,66, 74,29, 73,79, 73,25, 71,84, 71,65, 69,35, 68,08, 62,88, 50,28, 36,66, 35,04, 31,87, 31,20, 30,19, 29,75, 29,67, 29,64, 29,50, 29,48, 29,38, 29,37, 29,31, 29,04, 25,78, 25,64, 22,64, 14,07. HRMS (ESI) calculado para C76H100F2NO9 [M+H]+: 1208,7366, encontrado: 1208.7398.
Síntesis de 3,4-di-O-bencil-1-O-(2,3-di-O-bencil-4,6-O-bencilideno-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(2,415 difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (A12)
imagen32
Mediante el procedimiento similar de síntesis de A8 , se utilizaron compuesto A6 (100 mg, 0,105 mmol) y B15 (28 mg, 0,093 mmol) como materiales de partida para proporcionar A12 (70 mg, 0,058 mmol, 62%) en forma de una cera blanca. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,20-7,55 (m, 25H), 7,04-7,14 (m, 1H), 6,69-6,81 (m, 2H), 5,89 (d, J = 8,3 20 Hz, 1H), 5,45 (s, 1H), 4,95 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,70-4,79 (m, 3H), 4,64 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,25-4,3 (m, 1H), 4,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H) 4,04-4,13 (m, 2H), 3,88-3,97 (m, 3H), 3,74-3,80 (m, 2H), 3,57 (s, 1H), 3,51-3,56 (m, 1H), 2,57 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,82-1,96 (m, 2H), 1,15-1,69 (m, 42H), 0,88 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 172,90, 162,30, 138,59, 138,50, 138,45, 138,36, 137,78, 130,89, 128,82, 128,40, 128,33, 128,30, 128,27, 128,06, 127,87, 127,79,
25 127,68, 127,55, 126,27, 110,07, 103,41, 99,53, 79,75, 79,47, 76,11, 75,67, 74,29, 73,81, 73,27, 71,85, 71,65, 69,36, 68,05, 62,89, 50,29, 36,67, 31,88, 30,19, 30,15, 29,76, 29,67, 29,65, 29,51, 29,37, 29,32, 29,17, 28,38, 25,78, 25,66, 22,65, 14,08. HRMS (ESI) calculado para C76H100F2NO9 [M+H]+: 1208,7366, encontrado: 1208,7377.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4-fenoxifenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A15)
imagen33
30 Mediante el procedimiento similar a C34, se obtuvo A15 (21 mg, 0,026 mmol, 72%) a partir de A9 (45 mg, 0,036 mmol) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 131 °C. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,45 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,20 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 5,04 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,26 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 3,79-4,13 (m, 10H), 2,73 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,36 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,65-1,82
5
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(m, 4H), 1.41 (s ancho, 38H), 0,89 (t, J = 7,5 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 174,09, 157,18, 154,36, 137,40, 128,98, 128,92, 122,22, 118,25, 117,71, 99,18, 73,88, 71,30, 70,41, 69,68, 69,17, 68,37, 66,63, 61,10, 60,01, 35,80, 34,56, 31,61, 31,29, 31,04, 29,08, 29,02, 28,91, 28,80, 28,72, 28,64, 25,30, 22,01, 19,90, 13,15. [α]25D +37.4 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C47H78NO10 [M+H]+: 816,5626, encontrado: 816,5637.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4-isopropoxi)fenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A16)
imagen34
Mediante el procedimiento similar a C34, se obtuvo el compuesto A16 (34 mg, 0,044 mmol, 74%) a partir de A10 (72 mg, 0,059 mmol). Los datos de A16: P.f.: 120 °C. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,16 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,90 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,01 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,58-4,66 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,03 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,99 (dd, J = 10,6, 4,8, 1H), 3,88-3,96 (m, 2H), 3,78-3,88 (m, 4H), 3,62-3,73 (m, 2H), 2,64 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,32 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,61-1,81 (m, 4H), 1,32-1,52 (m, 44H), 0,99 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 174,06, 155,10, 134,52, 128,54, 115,33, 99,16, 73,81, 71,25, 70,40, 69,65, 69,62, 69,12, 68,33, 66,60, 61,04, 35,75, 35,70, 34,35, 31,53, 31,25, 31,08, 29,09, 29,03, 28,97, 28,94, 28,87, 28,85, 28,76, 28,68, 28,59, 25,27, 25,22, 21,96, 21,08, 20,88, 13,08. [α]25D +36.2 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C44H79NO10Na [M+Na]+: 804,5602, encontrado: 804,5641.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A17)
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Mediante el procedimiento similar a C34, se obtuvo el compuesto A17 (37 mg, 0,049 mmol, 94%) a partir de A11 (63 mg, 0,052 mmol). Los datos de A18: P.f.: 140 °C. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,06-7,22 (m, 2H), 6,98-7,04 (m, 1H), 5,03 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,29-4,36 (m, 1H), 4,05 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,00 (dd, J = 10,5, 4,8, 1H), 3,89-3,96 (m, 2H), 3,78-3,89 (m, 4H), 3,64-3,73 (m, 2H), 2,69 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,34 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,63-1,83 (m, 4H), 1,33-1,48 (m, 38H), 1,00 (t, J = 6,5 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 174,07, 149,33 (d, J = 247, 13 Hz), 147,95 (d, J = 244, 13 Hz), 139,47, 123,56, 116,22, 116,06, 99,18, 73,86, 71,82, 70,40, 69,67, 69,15, 68,34, 66,63, 61,08, 45,00, 35,78, 35,73, 34,40, 31,58, 31,28, 30,66, 29,12, 29,06, 29,00, 28,91, 28,85, 28,77, 28,71, 28,44, 25,28, 21,99, 13,12. [α]25D +44.4 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H72F2NO9 [M+H]+: 760,5175, encontrado: 760,5222.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(2,4-difluorofenil)undecanoil) amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A18)
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Mediante el procedimiento similar a C34, se obtuvo el compuesto A18 (39 mg, 0,051 mmol, 88%) a partir del compuesto A12 (70 mg, 0,058 mmol). Los datos de A18: P.f.: 149 °C. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,29 (q, J = 8,1 Hz, 1H), 6,87-6,97 (m, 2H), 5,05 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,30-4,38 (m, 1H), 4,07 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,03 (dd, J = 10,6, 4,4 Hz, 1H), 3,91-3,98 (m, 2H), 3,66-3,75 (m, 4H), 3,64-3,73 (m, 2H), 2,73 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,36 (t, J
5
10
15
20
25
30
35
40
= 7,6 Hz, 2H), 1,65-1,86 (m, 4H), 1,24-1,60 (m, 38H), 1,02 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 174,09, 161,65, 159,20, 130,48, 124,73, 110,06, 102,62, 99,19, 73,90, 71,31, 70,40, 69,69, 69,17, 68,36, 66,66, 61,11, 50,12, 35,81, 35,76, 31,63, 31,30, 29,59, 29,16, 29,14, 29,09, 29,02, 28,92, 28,87, 28,78, 28,76, 28,73, 28,56, 27,72, 25,30, 22,01, 13,16. [α]25D +46.0 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H71F2NO9Na [M+Na]+: 782,4995, encontrado: 782,5034.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-((10R,11S)-11-(3,4-difluorofenil)-10,11-dihidroxundecanoil)amino-D-ribo1,3,4-octadecantriol y 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-((10S,11R)-11-(3,4-difluorofenil)-10,11-dihidroxindecanoil)aminoD-ribo-1,3,4-octadecantriol (A19) en forma de una mezcla de isómeros anti-diol
imagen37
A la solución de A7 (101 mg, 0,109 mmol) en diclorometano (3 mL) se añadió anti-B21 (32 mg, 0,097 mmol), HBTU (62 mg, 0,16 mmol) y NMM (24 μL, 0,23 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 12 h, la mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/4 a 1/2 a 1/1). La cera blanca resultante se disolvió en diclorometano/metanol (1/1, 10 mL) y luego se añadió Pd(OH)2 (10 mg). Después de agitar a temperatura ambiente bajo hidrógeno durante 15 h, la mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con diclorometano/metanol (1/1). El filtrado se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol = 10/1 luego 8/1) para proporcionar A19 (34 mg, 0,043 mmol, 44%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 105 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,17-7,40 (m, 3H), 5,01 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 4,8 Hz, 0,75H), 4,50 (d, J = 6,0 Hz, 0,25H), 4,28-4,36 (m, 1H), 4,03 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,99 (dd, J = 4,8, 10,8 Hz, 1H), 3,87-3,95 (m, 2H), 3,76-3,87 (m, 4H), 3,61-3,71 (m, 2H), 2,31 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,31-1,83 (m, 40H), 0,99 (t, J = 6,9 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,97, 149,42 (dd, J = 245, 13 Hz), 148,86 (dd, J = 245, 13 Hz), 136,65, 122,46, 116,09, 115,77, 115,27, 115,10, 99,16, 75,70, 75,35, 74,74, 74,21, 73,94, 71,25, 70,40, 69,65, 69,10, 68,31, 66,52, 61,03, 49,91, 35,63, 31,94, 31,69, 31,23, 31,18, 29,09, 29,04, 29,00, 28,95, 28,83, 28,76, 28,68, 28,65, 28,53, 25,17, 25,08, 24,96, 21,94, 13,04. [α]25D +58.3 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H71F2NO11Na [M+Na]+: 814,4893, encontrado: 814,4859.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-((10S,11S)-11-(3,4-difluorofenil)-10,11-dihidroxindecanoil)amino-D-ribo1,3,4-octadecantriol y 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-((10R,11R)-11-(3,4-difluorofenil)-10,11dihidroxiundecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol, (A20) en forma de una mezcla de isómeros de sin-diol
imagen38
A la solución de A7 (101 mg, 0,109 mmol) en diclorometano (3 mL) se añadió Syn-A21 (14 mg, 0,042 mmol), HBTU (62 mg, 0,16 mmol) y NMM (24 μL, 0,22 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 12 h, la mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/4 a 1/2 a 1/1). La cera blanca resultante se disolvió en diclorometano/metanol (1/1, 10 mL) y luego se añadió Pd(OH)2 (10 mg). Después de agitar a temperatura ambiente bajo hidrógeno durante 15 h, la mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con diclorometano/metanol (1/1). El filtrado se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol = 10/1 luego 8/1) para proporcionar A20 (20 mg, 0,025 mmol, 60%) en forma de sólidos blancos. P.f.: 80 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,19-7,49 (m, 3H), 5,02 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 6 Hz, 1H), 4,30-4,37 (m, 1H), 4,04 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,01 (dd, J = 4,4, 10,8 Hz, 1H), 3,89-3,96 (m, 2H), 3,78-3,88 (m, 4H), 3,63-3,73 (m, 3H), 2,33 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,26-1,84 (m, 40H), 1,01 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 174,00, 149,58 (dd, J = 245, 12 Hz), 149,07 (dd, J = 245, 12 Hz), 138,90, 122,46, 116,13, 115,14, 99,21, 75,47, 74,79, 74,01, 71,28, 70,41, 69,69, 69,15, 68,34, 66,57, 61,09, 49,90, 35,67, 31,98, 31,77, 31,27, 29,12, 29,03, 28,98, 28,80, 28,68, 28,56, 25,20, 25,00, 21,98, 13,08. [α]25D +50,0 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H71F2NO11Na [M+Na]+: 814,4893, encontrado: 814,4893.
5
10
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Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4-bromofenil)-10,11-dihidroxundecanoil)amino-D-ribo-1,3,4octadecantriol (A21)
imagen39
Mediante el procedimiento similar a A19, el compuesto A21 (18 mg, 0,024 mmol, 28%) se obtuvo a partir de A7 (90 mg, 0,094 mmol) y B19 (32 mg, 0,086 mmol). Los datos de A21: cera blanquecina. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,26-7,51 (m, 5H), 5,02-5,10 (m, 1H), 5,02 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,23-4,29 (m, 1H), 4,06-4,15 (m, 1H), 3,97-4,03 (m, 2H), 3,83-3,96 (m, 6H), 3,68 (t, J = 10,2 Hz, 1H), 2,84-2,89 (m, 1H), 2,52 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,27-1,89 (m, 40H), 1,02 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 150 MHz) δ 174,08, 173,54, 138,50, 128,72, 127,55, 125,39, 99,10, 72,40, 71,92, 70,84, 70,16, 69,92, 69,57, 69,24, 68,23, 63,43, 61,13, 52,30, 43,34, 36,69, 36,39, 35,91, 35,69, 35,26, 33,69, 32,83, 32,03, 31,67, 31,25, 30,90, 30,59, 29,81, 29,30, 29,01, 28,97, 28,86, 28,77, 28,67, 28,54, 28,46, 25,22, 25,00, 24,36, 24,27, 21,97, 13,09. [α]25D +22,7 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H74NO11 [M+H]+: 778,5081, encontrado: 778,5073.
Esquema 2: Síntesis no de acuerdo con la invención del compuesto A23-25
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A22)
imagen40
A la solución de A7 (520 mg, 0,545 mmol) en diclorometano/metanol (1/1, 20 mL) se añadió Pd(OH)2 (220 mg) y tres gotas de ácido acético. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo 80 psi de hidrógeno durante 16
h. La mezcla se filtró a través de Celite y la torta del filtro se lavó con metanol. El filtrado se concentró y se secó en vacío para proporcionar A22 bruto (302 mg, cuantitativo) en forma de sólidos blancos. HRMS (ESI) calculado para C24H49NO8H [M+H]+: 480,3536, encontrado: 480,3515.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-diclorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A23)
imagen41
A la solución de A22 (50 mg, 0,10 mmol) en diclorometano/metanol (1/1, 3 mL) se añadió B16 (34 mg, 0,10 mmol), HBTU (59 mg, 0,16 mmol) y NMM (23 μL, 0,21 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol = 15/1 a 12/1 a 9/1) para proporcionar A23 (16 mg, 0,020 mmol, 20%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 147 °C. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,51 (s, 1H), 7,35 (s, 2H), 5,08 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,33-4,43 (m, 1H), 4,08-4,12 (m, 1H), 4,06 (dd, J = 10,7, 4,0 Hz, 1H), 3,82-4,02 (m, 6H), 3,67-3,77 (m, 2H), 2,86 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,39 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,66-1,88 (m, 4H), 1,34-1,60 (m, 38H), 1,06 (t, J = 6,4 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 174,05, 138,47, 133,89, 131,36, 130,64, 128,41, 126,35, 99,25, 73,99, 71,36, 70,42, 69,74, 69,22, 68,42, 66,71, 61,19, 49,97, 35,82, 32,41, 31,76, 31,34, 29,20, 29,17, 29,12, 29,06, 28,95, 28,91, 28,81, 28,76, 28,69, 25,33, 25,29, 22,06, 13,21. [α]25D +46,8 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H71Cl2NO9Na [M+Na]+: 814,4404, encontrado: 814,4311
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4-clorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A24)
imagen42
Mediante el procedimiento similar a A23, el compuesto A24 (18 mg, 0,024 mmol, 22%) se obtuvo a partir de A22 (52
mg, 0,11 mmol) y B17 (32 mg, 0,11 mmol). Los datos de A24: sólidos blanquecinos. P.f.: 136 °C. 1H-RMN
5 (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,28 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,96 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,21
4,29 (m, 1H), 3,98 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 3,95 (dd, J = 10,6, 4,4, 1H), 3,83-3,90 (m, 2H), 3,72-3,82 (m, 4H), 3,58-3,68
(m, 2H), 2,64 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,28 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 1,57-1,77 (m, 4H), 1,20-1,51 (m, 38H), 0,95 (t, J = 6,7 Hz,
3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 173,99, 140,73, 130,53, 129,08, 127,51, 99,15, 73,79, 71,23, 70,34,
69,62, 69,17, 68,32, 66,58, 61,06, 49,87, 35,67, 34,52, 31,53, 31,23, 30,73, 29,01, 28,95, 28,87, 28,81, 28,75, 28,65, 10 28,46, 25,24, 21,94, 13,03. [α]25D +41,7 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H72ClNO9Na
[M+Na]+: 780,4793, encontrado: 780,4779.
Síntesis de 1-O-(α-D-galactopiranosil)-2-(11-(4-bromofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecantriol (A25)
imagen43
Mediante el procedimiento similar a A23, se obtuvo el compuesto A25 (22 mg, 0,027 mmol, 25%) a partir de A22 (52
15 mg, 0,11 mmol) y B28 (56 mg, 0,16 mmol). Los datos de A25: cera blanquecina. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,28 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,20-7,47 (m, 2H), 5,00 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,28-4,33 (m, 1H), 4,02 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,98 (dd, J = 10,6, 4,6 Hz, 1H), 3,863-3,94 (m, 2H), 3,77-3,87 (m, 4H), 3,62-3,70 (m, 2H), 2,69 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,31 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,29-1,81 (m, 42H), 0,98 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 171,21, 141,18, 130,44, 129,44, 118,39, 99,41, 74,54, 70,41, 70,13, 69,58, 69,50, 69,07, 68,41, 67,22, 60,95, 49,68,
20 35,58, 34,51, 31,36, 31,18, 30,62, 28,95, 28,90, 28,81, 28,76, 28,68, 28,61, 28,40, 27,00, 25,21, 24,88, 21,89, 19,90, 19,74, 19,57, 12,96. [α]25D +40,7 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C41H73BrNO9 [M+H]+: 802,4469, encontrado: 802,4216.
(3) Esquema de Síntesis 3: Síntesis de ácido aril-alcanoico
Síntesis de bromuro de (9-carboxinnonil)trifenilfosfonio (B2)
imagen44
Se mezclaron ácido 10-bromodecanoico (19,65 g, 78,24 mmol) y trifenilfosfina (21,45 g, 81,78 mmol) y se agitó a 150 °C durante 24 h. Se obtuvo el reactivo de Wittig B2 en forma de un jarabe amarillo claro con un rendimiento del 100% y se utilizó sin purificación adicional.
Síntesis de ácido 11-(4-(4-fluorofenoxi)fenil))undecanoico (B4)
imagen45
imagen46
A la mezcla de B2 (19,89 g, 38,81 mmol) y THF (150 mL) se añadió t-butóxido de potasio (10,40 g, 92,68 mmol) a 0 ºC. La mezcla de reacción se convirtió en una solución roja. La mezcla de reacción se calentó a t.a. y se agitó durante 1 h. Se añadió 4-(4-fluorofenoxi)benzaldehído (B1) (7,50 g, 34,7 mmol) a la mezcla de reacción a 0 °C y se agitó durante 30 min adicionales a t.a. La mezcla de reacción se neutralizó con HCl 1,0 N y se concentró. El residuo 5 se repartió con acetato de etilo (200 mL), agua (200 mL) (el valor de pH se ajustó a 5 añadiendo HCl 1,0 N) y salmuera (200 mL). La fase orgánica se aisló y se concentró a presión reducida. El residuo se recristalizó con etanol/agua (1/1, 80 mL) y se lavó con agua para proporcionar B3 (9,99 g, 27,0 mmol, 78%) en forma de sólidos blancos. B3 se disolvió en etanol/acetato de etilo (1/1, 80 mL) y después se añadió Pd/C (al 10%, 1,08 g). La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo hidrógeno durante 12 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una 10 almohadilla de Celite y se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró y se recristalizó con metanol/agua (5/1, 12 mL), se filtró y se lavó con agua para proporcionar ácido 11-(4-(4-fluorofenoxi)fenil))undecanoico (B4) (9,080 g, 24,38 mmol , 90%) en forma de sólidos blancos. P.f.: 73 °C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 6,85-7,13 (m, 8H), 2,56 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,22-1,65 (m, 16H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 179,69, 159,78, 157,38, 155,36, 153,39, 137,88, 129,56, 120,09, 120,01, 118,33, 116,25, 116,02, 35,18, 33,97, 31,59, 29,69, 29,48, 29,44, 15 29,38, 29,24, 29,20, 29,03, 24,65. HRMS (ESI) calculado para C23H29FO3Na [M+Na]+: 395,1998, encontrado:
395,2003.
Síntesis de ácido 11-(4-fenoxi)fenilundecanoico (B12)
imagen47
De forma similar a la ruta para el compuesto B4, el compuesto B12 (1,34 g, 3,78 mmol, 97%) se sintetizó a partir de
20 B2 (3,47 g, 6,76 mmol) y 4-fenoxibenzaldehído (1,03 g, 5,20 mmol). Datos para el compuesto B12: sólidos blanquecinos, P.f.: 55°C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 6,93-7,35 (m, 9H), 2,60 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,37 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,65 (m, 4H), 1,33 (m, 12H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 180,35, 157,71, 154,83, 137,87, 130,13, 129,51, 122,73, 118,97, 118,32, 35,18, 34,10, 31,55, 29,45, 29,42, 29,36, 29,22, 29,18, 29,00, 24,63. HRMS (ESI) calculado para C23H30O3Na [M+Na]+: 377,2093, encontrado: 377.2053.
25 Síntesis de ácido 11-(4-isopropoxi)fenilundecanoico (B13)
imagen48
Mediante el procedimiento similar de síntesis de B4, el compuesto B2 (2,25 g, 4,38 mmol) y 4isopropoxibenzaldehído (479 mg, 2,92 mmol) se utilizaron como materiales de partida para proporcionar el compuesto B13 (562 mg, 1,75 mmol, 60%) en forma de sólidos blancos. P.f.: 46 °C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ
30 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,78 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,48 (m, 1H), 2.50 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,32 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,501,61 (m, 4H), 1,25-1,35 (m, 18H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 179,73, 155,82, 134,93, 129,20, 115,77, 69,91, 35,04, 34,11, 31,69, 29,50, 29,47, 29,40, 29,26, 29,22, 29,12, 29,06, 24,71, 22,11, 21,88. HRMS (ESI) calculado para C20H32O3Na [M+Na]+: 343,2249, encontrado: 343,2227.
Síntesis de ácido (10 E o 10Z))-11-(3,4-difluorofenil)undec-10-enoico ((E)-B7 y (Z)-B7)
imagen49
Mediante el procedimiento similar al compuesto B3, B2 (12,93 g, 25,18 mmol) y THF (80 mL) y 3,4difluorobenzaldehído (2,35 g, 16,5 mmol) fueron materiales de partida para dar el compuesto B7 (3,77 g, 12,7 mmol, 77 %). Los productos de forma Z y forma E productos se separaron por recristalización con n-hexano. (E)-B7 se obtuvo en forma de sólidos blancos. P.f. 66 °C.1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 6,98-7,14 (m, 3H), 6,25 (d, J = 15,8 Hz, 40 1H), 6,12 (m, 1H), 2,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,16 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 1,61 (m, 2H), 1,43 (m, 2H), 1,30 (s, 8H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 180,57, 150,49 (dd, J = 246, 12 Hz), 149,31 (dd, J = 241, 13 Hz), 135,29, 132,35, 127,88, 121,99, 117,13, 114,18, 34,15, 32,91, 29,31, 29,22, 29,18, 29,08, 24,70. HRMS (ESI) calculado para C17H22F2O2Na
5
10
15
20
25
30
[M+Na]+: 319,1486, encontrado: 319,1485. (Z)-B7 se obtuvo en forma de un aceite incoloro con un 25% de (E)-B7 inseparable.
Síntesis de ácido (3,4-difluorofenil)undecanoico (B14)
imagen50
El compuesto B7 (1,61 g, 5,43 mmol) se disolvió en etanol/acetato de etilo (1/1, 30 mL) y se añadió Pd/C (al 10%, 160 mg) a la solución. La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo hidrógeno durante 12 h. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró y se secó en vacío. El compuesto B14 se obtuvo en forma de sólidos blancos (1,61 g, 5,40 mmol, 99%). P.f.: 51 °C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 6,90-7,03 (m, 2H), 6,84 (m, 1H), 2,53 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,52-1,64 (m, 4H), 1,26 (m, 12H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 180,24, 150,13 (dd, J = 13, 247 Hz), 148,49 (dd, J = 13, 246 Hz), 147,40, 139,77, 124,05, 116,85, 35,09, 34,01, 31,23, 29,43, 29,36, 29,35, 29,18, 29,05, 29,01, 24,64. HRMS (ESI) calculado para C17H24F2O2Na [M+Na]+: 321,1642, encontrado: 321,1594.
Síntesis de ácido 11-(2,4-difluorofenil)undecanoico (B15)
imagen51
Mediante el procedimiento similar de síntesis de B4, se utilizaron compuestos de B2 (2,76 g, 5,38 mmol) y 2,4difluorobenzaldehído (588 mg, 4,14 mmol) como materiales de partida para proporcionar el compuesto B15 (431 mg, 1,45 mmol, 35%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 56 °C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,05-7,13 (m, 1H), 6,70-6,79 (m, 2H), 2,66 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,31 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,50-1,62 (m, 4H), 1,26 (m, 12H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 180,00, 162,19, 159,80, 130,90, 125,31, 110,69, 103,44, 34,11, 30,15, 29,44, 29,36, 29,33, 29,19, 29,16, 29,03, 28,41, 24,69. HRMS (ESI) calculado para C17H24F2O2Na [M+Na]+: 321,1642, encontrado: 321.1637.
Síntesis de ácido 11-(2,4-diclorofenil)undecanoico (B16)
imagen52
Mediante el procedimiento similar del compuesto B7, se utilizaron B2 (2,25 g, 4,38 mmol) y 2,4-diclorobenzaldehído (500 mg, 2,86 mmol) como materiales de partida para proporcionar ácido (10E o 10Z)-11-(2,4-diclorofenil)undec-10enoico (B9) (576 mg, 1,75 mmol, 61%). Entonces se disolvió este compuesto (210 mg, 0,638 mmol) en acetato de etilo (10 mL) y luego se añadió Pd/BaSO4 (21 mg). La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo hidrógeno durante 12 h. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con acetato de etilo. El filtrado combinado se concentró y se secó en vacío para proporcionar el compuesto B16 (210 mg, 0,634 mmol, 99%) en forma de sólidos blancos. P.f.: 78 °C. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,32 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,09-7,15 (m, 2H), 2,65 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,53-1,63 (m, 4H), 1,26 (m, 12H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 180,00, 162,19, 159,80, 130,90, 125,31, 110,69, 103,44, 34,11, 30,15, 29,44, 29,36, 29,33, 29,19, 29,16, 29,03, 28,41, 24,69. HRMS (ESI) calculado para C17H24Cl2O2Na [M+Na]+: 353,1051, encontrado: 353,1046.
Síntesis de ácido 11-(4-clorofenil)undecanoico (B17) Mediante el procedimiento similar de síntesis de B10, se utilizaron compuesto B2 (2,20 g, 4,28 mmol) y 4clorobenzaldehído (401 mg, 2,85 mmol) como materiales de partida para proporcionar B17 (526 mg, 1,77 mmol, 62%). P.f.: 93ºC. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 2,54 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,53-1,63 (m, 4H), 1,26 (m, 12H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 179,90, 141,28, 131,21, 129,71, 128,27, 35,26, 34,00, 31,35, 29,69, 29,44, 29,39, 29,36, 29,19, 29,13, 29,01, 24,64. HRMS (ESI) calculado para C17H25ClO2Na [M+Na]+: 319,1441, encontrado: 319,1435.
imagen53
imagen54
Síntesis de ácido 11-(4-bromofenil)undecanoico (B18)
imagen55
Mediante el procedimiento similar de síntesis de B10, se utilizaron compuesto B2 (330 mg, 0, 643 mmol) y 4
10 bromobenzaldehído (91,5 mg, 0,495 mmol) como materiales de partida para proporcionar B18 (98,0 mg, 0,287 mmol, 58%) en forma de sólidos blancos. P.f.: 91 °C.1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,37 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 2,53 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,34 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,52-1,63 (m, 4H), 1,20-1,37 (m, 12H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 179,94, 141,79, 141,79, 131,22, 130,14, 119,22, 35,31, 34,11, 31,27, 29,44, 29,38, 29,36, 29,19, 29,12, 29,03, 24,68. HRMS (ESI) calculado C17H26BrO2 [M+H]+: 341,1116, encontrado: 341,1111.
15 Ácido 11-(4-bromofenil)-10,11-dihidroxundecanoico (B20)
imagen56
A la solución de B11 (389 mg, 1,15 mmol) en t-butanol/agua (4/3, 35 mL) se añadió NMO (462 mg, 3,94 mmol) y
tetróxido de osmio (2,5% en peso en t-BuOH, 170 μL), 0,167 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente
durante 15 h, la reacción se enfrió bruscamente con Na2S2O3 sat. y se concentró. El residuo se repartió con 20 diclorometano (50 mL) y solución Na2S2O3 sat. (50 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (50 mL), se
concentró y se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/2, luego 1/1) para proporcionar
B20 (256 mg, 0,668 mmol, 60%). 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,49-7,56 (m, 2H), 7,28-7,37 (m, 2H),
4,59 (d, J = 5,1 Hz, 0,7H), 4,44 (d, J = 6,6 Hz, 0,3H), 3,71-3,77 (m, 0,7H), 3,62-3,66 (m, 0,3H), 2,45 (t, J = 7,2 Hz,
2H), 1,27-1,78 (m, 14H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ 169,05, 140,40, 140,16, 130,60, 130,30, 25 128,18, 120,64, 120,27, 76,44, 75,80, 74,81, 74,27, 31,88, 30,94, 28,92, 28,78, 28,67, 28,63, 28,56, 28,48, 28,45,
28,38, 25,10, 24,88, 24,28. HRMS (ESI) calculado para C17H25BrO4Na [M+Na]+: 395,0834, encontrado: 395,0813.
Síntesis de (10E)-11-(3,4-difluorofenil)-undec-10-enoato de L-(-)-mentilo (Mentilo (E)-B7)
imagen57
A la solución de (E)-B7 (298 mg, 1,01 mmol) en diclorometano (3 mL) se añadió L-(-)-mentol (314 mg, 2,01 mmol),
30 EDC • HCl (347 mg, 1,81 mmol) y DMAP (1,2 mg, 0,010 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla se diluyó con diclorometano (20 mL), se lavó con agua (20 mL) y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/50) para proporcionar Mentilo (E)-B7 (112 mg, 0,258 mmol, 26%) en forma de un aceite incoloro. 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 6,95-7,13 (m, 3H), 6,24 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 6,15-6,24 (m, 1H), 4,11-4,20 (m, 1H), 2,27 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,15 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,92-1,99
35 (m, 1H), 1,80-1,89 (m, 1H), 1,55-1,68 (m, 4H), 1,38-1,50 (m, 3H), 1,22-1,35 (m, 10H), 0,77-1,09 (m, 9H), 0,73 (d, J= 7,0 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3, 100 MHz) δ 173,34, 150,39 (dd, J = 245, 13 Hz), 149,23 (dd, J = 246, 13Hz), 135,15, 132,24, 127,77, 121,87, 117,00, 114,08, 73,82, 47,00, 40,93, 34,67, 34,25, 32,82, 31,33, 29,67, 29,26, 29,14, 29,08, 29,06, 26,22, 25,06, 23,39, 21,97, 20,70, 16,25. HRMS (ESI) calculado para C27H40F2O2Na [M+Na]+: 457,2894, encontrado: 457,2863.
imagen58
Síntesis de ácido (10S,11S)-11-(3,4-difluorofenil)-10,11-dihidroxiundecanoico y ácido (10R,11R)-11-(3,4difluorofenil)-10,11-dihidroxiundecanoico, syn-(B21) en forma de una mezcla de isómeros de sin-diol
imagen59
A la solución de mentilo (E)-B7 (110 mg, 0,253 mmol) en t-butanol/agua (2/1,6 mL) se añadió NMO (103 mg, 0,879
5 mmol) y tetróxido de osmio (2,5% en peso en t-BuOH, 38 μL, 0,0037 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 h, la mezcla de reacción se enfrió bruscamente con Na2S2O3 sat. (10 mL). La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en acetato de etilo (20 mL), se lavó con Na2S2O3 sat. (20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/4 luego 1/3). El aceite incoloro resultante se disolvió en metanol (5 mL) y luego se añadió NaOH
10 1,0 N (5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 12 h, la mezcla de reacción se neutralizó con HCl 1,0 N (5 mL) y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/2, luego 1/1) para proporcionar syn-B21 (35 mg, 0,11 mmol, 43%) en forma de sólidos blancos. P.f.: 104°C. 1H-RMN (CD3OD, 400 MHz) δ 6,99-7,25 (m, 3H), 4,36 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,45-3,52 (m, 1H), 2,18 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,111,54 (m, 14H). 13C-RMN (CD3OD, 100 MHz) δ 177,70, 151,29 (dd, J = 244, 12 Hz), 150,76 (dd, J = 244, 13 Hz),
15 141,48, 124,36, 117,64, 116,87, 77,23, 76,39, 34,39, 33,72, 30,51, 30,41, 30,27, 30,15, 26,80, 26,03. HRMS (ESI) calculado para C17H24F2O4Na [M+Na]+: 353,1540, encontrado: 353,1550.
Síntesis de ácido (10R,11S)-y (10S,11R)-11-(3,4-difluorofenil)-(10,11)-dihidroxundecanoico, Anti-(B21) en forma de una mezcla de isómeros anti-diol
imagen60
20 A la solución de (Z)-B7 (361 mg, 1,22 mmol) en t-butanol/agua (2/1, 6 mL) se añadió NMO (494 mg, 4,22 mmol) y tetróxido de osmio (2,5% en peso en t-BuOH, 186 µL, 0,0183 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 h, la mezcla de reacción se inactivó con Na2S2O3 sat. (15 mL). La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en acetato de etilo (50 mL), se lavó con Na2S2O3 sat. (50 mL), y salmuera (50 mL), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/2 y luego
25 1/1) para proporcionar ant-B21 (246 mg, 0,745 mmol, 61%, una mezcla de isómeros anti-diol) en forma de un aceite incoloro. 1H-RMN (CD3OD, 400 MHz) δ 7,03-7,25 (m, 3H), 4,36 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 3,47-3,57 (m, 1H), 2,16-2,22 (m, 2H), 1,18-1,56 (m, 14H). 13C-RMN (CD3OD, 100 MHz) δ 177,73, 151,19 (dd, J = 245, 13 Hz), 150,72 (dd, J = 245, 13 Hz), 141,46, 124,57, 117,49, 117,08, 77,34, 77,25, 76,42, 76,06, 34,95, 33,75, 33,50, 30,63, 30,51, 30,44, 30,34, 30,20, 26,83, 26,07. HRMS (ESI) calculado para C17H24F2O4Na [M+Na]+: 353,1540, encontrado: 353,1566.
30 (4) Esquema de Síntesis 4: Síntesis no de acuerdo con la invención de Compuesto C5-C7
Síntesis de 3,4-di-O-bencil-1-O-(6-azido-2,3,4-tri-O-bencil-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-hexacosanoilamino-Dribo-octadecan-1,3,4-triol (C1)
imagen61
El compuesto C1 puede sintetizarse de acuerdo con Zhou, X.T. et al. Org Lett 2002, 4, 1267-1270. Datos para C1:
35 1H-RMN (CDCl3, 400Hz) δ 7,35-7,21 (m, 25H), 5,94 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,79-4,91 (m, 4H), 4,63-4,55 (m, 3H), 4,37-4,48 (m, 2H), 4,18-4,30 (m, 2H), 4,00 (dd, J = 3,6, 10,1 Hz, 1H), 3,87-3.81(m, 7H), 3,52-3,50 (m, 1H), 1,78-1,79 (m, 74H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 6H).
Síntesis de 1-O-(6-fenilacetamido-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-hexacosanoilamino-D-ribo-octadecan-1,3,4-triol (C5)
imagen62
A la solución de C1 (24 mg, 0,018 mmol) en THF/agua (10/1, 5 mL) se añadió trifenilfosfina (10 mg, 0,038 mmol).
5 Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 días, la mezcla se concentró y se secó en vacío. El residuo se disolvió en cloroformo (3 mL). A esta solución se añadieron ácido fenilacético (3 mg, 0,02 mmol), NMM (5 μL, 0,05 mmol) y HBTU (10 mg, 0,026 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 12 h, la mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo/n-hexano = 1/8 a 1/6 a 1/4) para dar el compuesto C2. El compuesto intermedio resultante de C2 se disolvió en diclorometano/metanol (1/1, 5 mL) y luego
10 se añadió Pd(OH)2 (5.0 mg). Después de agitar a temperatura ambiente bajo hidrógeno durante 15 h, la mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con diclorometano/metanol (1/1). El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol = 1/1) para proporcionar C5 (4,0 mg, 0,004 mmol, 22%) en forma de una cera blanca. 1H-RMN (piridina-d5, 400Hz) δ 7,24-7,43 (m, 5H), 5,51 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,504,67 (m, 2H), 4,09-4,51 (m, 8H), 3,89 (s, 2H), 3,82-4,01 (m, 1H), 2,21-2,57 (m, 4H), 1,08-1,96 (m, 74H), 0,88 (t, J =
15 6,1 Hz, 6H). 13C-RMN (piridina-d5, 150 Hz) δ 173,75, 173,46, 142,53, 129,24, 129,20, 126,75, 101,71, 77,08, 72,95, 71,64, 71,34, 70,91, 70,50, 68,82, 51,89, 41,50, 38,77, 37,20, 34,81, 32,67, 32,51, 30,78, 30,55, 30,42, 30,39, 30,32, 30,20, 29,99, 26,90, 26,79, 23,32, 14,66. [α]25D +39.3 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). LRMS (ESI) calculado para C58H107N2O9 [M+H]+: 975,80, encontrado: 975,67.
Síntesis de 1-O-(6-(3-fenilpropilamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-hexacosanoilamino-D-ribo-octadecan-1,3,420 triol (C6)
imagen63
Mediante el procedimiento similar de síntesis de C5, se utilizaron compuesto C1 (24 mg, 0,018 mmol) y ácido 3fenilpropanoico (2,2 mg, 0,018 mmol) como materiales de partida para proporcionar C6 (10 mg, 0,010 mmol, 55%).1H-RMN (piridina-d5, 400Hz) δ 7,29-7,30 (m, 5H), 5,50 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 5,20-5,30 (m, 1H), 4,56-4,65 (m,
25 2H), 4,48 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 4,25-4,38 (m, 5H), 4,15-4,23 (m, 1H), 3,86-3,95 (m, 1H), 3,17-3,26 (m, 2H), 2,74-2,89 (m, 2H), 2,41-2,55 (m, 2H), 1,08-2,04 (m, 74H), 0,89 (t, J = 6,7 Hz, 3H). 13C-RMN (piridina-d5, 400Hz) δ 173,81, 173,52, 149,78, 142,60, 129,32, 129,27, 126,83, 101,78, 77,15, 73,00, 71,70, 71,41, 70,98, 70,56, 68,88, 51,94, 38,84, 37,26, 34,88, 32,74, 32,58, 30,86, 30,63, 20,50, 30,47, 30,39, 26,97, 26,87, 23,40, 14,74. [α]25D +36.0 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). LRMS (ESI) calculado para C59H109N2O9 [M+H]+: 989,81, encontrado: 989,60.
30 Síntesis de 1-O-(6-(4-fenilbutilamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-hexacosanoilamino-D-ribo-octadecan-1,3,4triol (C7)
imagen64
Mediante el procedimiento similar de síntesis de C5 se utilizaron compuesto C1 (24 mg, 0,018 mmol) y ácido 4fenilbutanoico (2,0 mg, 0,018 mmol) como materiales de partida para proporcionar C7 (9,0 mg, 0,090 mmol, 50%).1H-RMN (piridina-d5, 400Hz) δ 7,27-7,40 (m, 5H), 5,50 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 5,21-5,27 (m, 1H), 4,55-4,66 (m, 5 2H), 4,48 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 4,25-4,37 (m, 6H), 4,15-4,23 (m, 1H), 3,87-3,95 (m, 1H), 3,16-3,25 (m, 2H), 2,74-2,89 (m, 2H), 2,41-2,55 (m, 2H), 1,02-1,98 (m, 74H), 0,88 (t, J = 7,2 Hz, 6H). 13C-RMN (piridina-d5, 400 Hz) δ 173,30, 173,02, 142,07, 128,82, 128,70, 126,33, 101,28, 76,66, 72,50, 71,19, 70,90, 70,48, 70,05, 68,39, 51,44, 41,06, 38,34, 36,77, 34,38, 32,25, 32,10, 30,37, 30,13, 30,01, 29,98, 29,91, 29,79, 29,76, 29,59, 29,58, 26,47, 26,37, 22,91, 14,25. [α]25D +36,9 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). LRMS (ESI) calculado para C60H111N2O9 [M+H]+: 1003,83,
10 encontrado: 1003,47.
(5) Esquema de Síntesis 5: Síntesis no de acuerdo con la invención de compuesto C20-C31
Síntesis de 1-O-(6-O-toluenosulfonil-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4octadecanotriol (C17)
imagen65
15 A la solución de A15 (2,58 g, 3,40 mmol) en piridina (30 mL) se añadió la solución de cloruro de p-toluenosulfonilo (712 mg, 3,74 mmol) en piridina (20 mL) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se devolvió a t.a. Después de agitar durante 16 h, el disolvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol = 100/1 a 50/1 a 20/1 a 15/1) para proporcionar C17 en forma de una cera amarilla (782 mg, 0,855 mmol, 25%, 100% de BRSM con 2,01 g de recuperación del material de partida). 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 =
20 1/1, 400 MHz) δ 7,96 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,10-7,27 (m, 2H), 7,02-7,09 (m, 1H), 5,01 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,29-4,42 (m, 3H), 4,21 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 3,96-4,04 (m, 2H), 3,85-3,95 (m, 2H), 3,81 (dd, J = 4,0, 10,6 Hz, 1H), 3,70-3,76 (m, 2H), 2,74 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62 (s, 3H), 2,35-2,43 (m, 2H), 1,67-1,88 (m, 4H), 1,36-1,60 (m, 38H), 1,05 (t, J = 6,7 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 100 MHz) δ173,84, 149,47 (dd, J = 246, 13Hz), 148,00 (dd, J = 244, 13 Hz), 144,74, 139,43, 132,04, 129,32, 127,44, 123,60, 116,22, 114,55, 99,09, 73,87, 71,39, 69,27,
25 68,98, 68,51, 68,15, 68,07, 66,95, 35,85, 34,46, 31,71, 31,34, 30,72, 29,21, 29,17, 29,12, 29,06, 28,96, 28,91, 28,82, 28,77, 28,50, 25,30, 22,06, 20,67, 13,22. HRMS (ESI) calculado para C48H78F2NO11S [M+H]+: 914,5264, encontrado: 914,5228.
Síntesis de 1-O-(6-azido-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4octadecanotriol (C18)
imagen66
imagen67
columna (diclorometano/metanol = 20/1 a 15/1) para proporcionar C18 bruto (1,15 g, 1,47 mmol, 82%) en forma de sólidos amarillos. P.f.: 101 °C. 1H-RMN (CD3OD/CDCl3 = 1/1, 400 MHz) δ 7,25-7,51 (m, 3H), 5,36 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,57-4,67 (m, 1H), 4,12-4,42 (m, 6H), 3,94-4,06 (m, 3H), 3,74 (dd, J = 12,8, 4,8 Hz, 1H), 3,00 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,60-2,67 (m, 2H), 1,62-2,15 (m, 42H), 1,32 (t, J = 6,8 Hz, 3H). HRMS (ESI) calculado para C41H71F2N4O8 [M+H]+ : 785,5240, encontrado: 785,5267.
Síntesis de 1-O-(6-amino-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4octadecanotriol (C19)
imagen67
A la solución de C18 (1,11 g, 1,41 mmol) en THF/agua (10/1, 33 mL) se añadió trifenilfosfina (0,74 g, 2,8 mmol). La
10 mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. La mezcla se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna (1% de trietilamina, diclorometano/metanol = 6/1 a 4/1 a 2/1) para proporcionar C19 (566 mg, 0,746 mmol, 53%) en forma de sólidos blancos. P.f.: 161 °C. 1H-RMN (CD3OD, 400 MHz) δ 6,95-7,09 (m, 2H), 6,86-6,88 (m, 1H), 4,82 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,13-4,19 (m, 1H), 3,83 (dd, J = 10,4, 4,4 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 2,0, 1H), 3,63-3,73 (m, 3H), 3,59 (dd, J = 10,8, 5,6 Hz, 1H), 3,44-3,54 (m, 2H), 2,87 (dd, J = 13,2, 7,6 Hz, 1H), 2,72 (dd, J
15 = 13,2, 4,4 Hz, 1H), 2,51 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,14 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,50-1,63 (m, 4H), 1,16-1,32 (m, 38H), 0,82 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CD3OD, 100 MHz) δ 176,07, 151,5 (d, J = 246, 13 Hz), 150,8 (d, J = 243, 12 Hz), 141,74, 125,79, 118,16, 118,02, 101,43, 75,90, 73,12, 72,46, 72,02, 71,63, 70,33, 68,35, 52,18, 43,44, 37,46, 36,20, 33,37, 33,26, 32,68, 31,06, 31,02, 30,96, 30,89, 30,81, 30,73, 30,67, 30,62, 30,39, 27,30, 27,21, 23,29. HRMS (ESI) calculado para C41H73F2N2O8 [M+H]+: 759,5335, encontrado: 759,5319.
20 Síntesis de 1-O-(6-(4-nitrofenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino-Dribo-1,3,4-octadecanotriol (C20)
imagen68
A la solución de C19 (34 mg, 0,045 mmol) en diclorometano/metanol (1/1, 3 mL) se añadió ácido 4-nitrofenilacético (8,1 mg, 0,045 mmol), HBTU (34 mg, 0,090 mmol) y NMM (20 μL, 0,18 mmol). Después de agitar a temperatura 25 ambiente durante 16 h, la mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna (diclorometano/metanol = 30/1 a 20/1). El producto bruto se disolvió en diclorometano/metanol (1/1, 3 mL) y se añadió a la solución gel de sílice carbonato de Si (depurador de HOBT, 100 mg). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 h, la mezcla se filtró y se lavó con diclorometano/metanol (1/1). El filtrado se concentró y se secó en vacío para proporcionar C20 (13 mg, 0,014 mmol, 31%) en forma de una cera amarilla clara. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 200 30 MHz) δ 8,25 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,68 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,90-7,21 (m, 3H), 4,94 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,20-4,26 (m, 1H), 3,77-3,92 (m, 5H), 3,58-3,74 (m, 6H), 2,63 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,28 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,30-1,81 (m, 42H), 0,98 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 50 MHz) δ 173,93, 170,81, 149,17 (dd, J = 246, 13 Hz), 148,05 (dd, J = 244, 13 Hz), 146,43, 142,53, 139,35, 129,58, 123,59, 122,95, 116,28, 116,11, 98,99, 73,65, 71,21, 69,35, 69,18, 68,41, 68,14, 66,16, 49,81, 41,69, 39,69, 36,34, 35,69, 34,36, 31,61, 31,25, 30,66, 29,04, 28,74, 28,41, 25,27,
35 21,97, 13,07. [α]25D +39,3 (c 1.0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C49H78F2N3O11 [M+H]+: 922,5604, encontrado: 922,5629.
Síntesis de 1-O-(6-(2,4-dinitrofenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C21)
imagen69
Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 2,4dinitrofenilacético (10 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C21 (4,0 mg con impurezas inseparables, 0,0041 mmol, 9%).1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 600 MHz) δ 7,39-7,48 (m, 3H), 6,97-7,17 (m, 3H), 5 4,98 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,24-4,31 (m, 1H), 3,59-3,93 (m, 10H), 2,65 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,26-2,31 (m, 2H), 1,14-1,87 (m, 42H), 0,90-1,02 (m, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 150 MHz) δ 173,95, 169,65, 148,64, 147,80, 139,33, 134,76, 132,72, 129,90, 129,13, 123,53, 123,15, 116,92, 116,57, 116,13, 110,69, 99,01, 73,64, 73,42, 71,16, 69,32, 69,08, 68,12, 66,07, 49,80, 39,45, 39,60, 38,18, 38,13, 36,30, 35,66, 34,33, 34,30, 33,63, 32,01, 31,60, 31,43, 30,67, 30,58, 29,73, 29,23, 28,39, 28,35, 28,23, 26,30, 25,23, 25,17, 23,06, 22,25, 22,20, 21,78, 12,98. [α]25D +47,1 (c 1,0,
10 CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C49H76F2N3O13H [M+H]+: 967,5455, encontrado: 967,5485.
1-O-(6-(4-terc.-butilfenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo
1,3,4-octadecanotriol (C22)
imagen70
Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 4
15 terc-butilfenilacético (8,6 mg, 0,044 mmol) en forma de materiales de partida para proporcionar C22 (12 mg, 0,013 mmol, 29%) P.f.: 170 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,47 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,98-7,22 (m, 3H), 4,97 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 4,29-4,34 (m, 1H), 3,80-3,95 (m, 5H), 3,76 (dd, J = 10,8, 4,4 Hz, 1H), 3,61-3,71 (m, 5H), 3,36 (dd, J = 7,8, 13,8 Hz, 1H), 2,68 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,63-1,82 (m, 4H), 1,31-1,53 (m, 47 H), 1,00 (t, J = 6,5 Hz, 3H). 13C-RMN(CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,91, 172,88, 149,40 (dd,
20 J = 246, 12 Hz), 148,02 (dd, J = 243, 13 Hz), 139,36, 131,28, 124,96, 123,57, 116,21, 116,05, 99,06, 73,79, 71,30, 69,35, 68,97, 68,40, 68,20, 66,42, 49,84, 41,82, 39,39, 35,72, 34,37, 33,66, 31,66, 31,25, 30,65, 30,38, 29,14, 29,09, 29,05, 29,03, 28,97, 28,89, 28,83, 28,75, 28,71, 28,68, 28,42, 25,28, 25,24, 21,96, 13,06. [α]25D +36.4 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C53H88F2N2O9 [M+H]+: 933,6380, encontrado: 933,6435.
Síntesis de 1-O-(6-(4-bromofenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino25 D-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C23)
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Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron como materiales de partida compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 4-bromofenilacético (9,7 mg, 0,044 mmol) para proporcionar C23 (15 mg, 0,016 mmol, 35%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f. = 177 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,54 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,97-7,20 (m, 3H), 4,97 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,28-4,33 (m, 1H), 3,78-3,92 (m, 5H), 5 3,59-3,74 (m, 6H), 3,37 (dd, J = 7,6, 13,6 Hz, 1H), 2,66 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,31 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,30-1,81 (m, 42H), 0,98 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100MHz) δ 173,90, 171,91, 149,53 (dd, J = 247, 13 Hz), 147,86 (dd, J = 245, 12 Hz), 139,35, 133,70, 130,98, 130,29, 123,58, 120,22, 120,22, 116,18, 116,02, 99,03, 73,77, 71,26, 69,34, 69,08, 68,38, 68,15, 66,32, 49,81, 41,48, 39,51, 35,68, 34,35, 31,63, 31,23, 30,62, 29,11, 29,08, 29,01, 28,95, 28,87, 28,81, 28,73, 28,68, 28,66, 28,40, 25,25, 25,22, 21,94, 13,03. [α]25D +42,3 (c 1,0,
10 CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C49H78BrF2N2O9 [M+H]+: 955,4859, encontrado: 955,4920.
Síntesis de 1-O-(6-(4-metoxifenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)aminoD-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C24)
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Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20 se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 4
15 metoxifenilacético (7,5 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C24 (15 mg, 0,017 mmol, 38%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 172 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,36 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,12-7,26 (m, 2H), 7,01-7,09 (m, 3H), 5,02 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,32-4,38 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,72-3,96 (m, 5H), 3,69-3,78 (m, 4H), 3,65 (s, 2H), 3,40 (dd, J = 7,8, 14,0 Hz, 1H), 2,74 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,38 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,38-1,89 (m, 42H), 1,05 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,91, 173,06, 149,59 (dd,
20 J = 247, 13 Hz), 148,08 (dd, J = 244, 13 Hz), 158,27, 129,40, 129,66, 126,43, 123,61, 116,29, 116,12, 114,55, 113,62, 99,08, 73,92, 71,39, 61,41, 69,03, 68,41, 68,24, 66,43, 54,47, 49,78, 41,57, 39,46, 35,82, 34,46, 31,80, 31,33, 30,71, 29,22, 29,17, 29,12, 29,11, 29,05, 28,96, 28,90, 28,82, 28,78, 28,75, 28,49, 25,34, 25,31, 22,04, 13,19. [α]25D +44,3 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C50H81F2N2O10 [M+H]+: 907,5859, encontrado: 907,5890.
25 Síntesis de 1-O-(6-(3,4-di(trifluorometil)fenil-acetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C25)
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Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20 se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 3,4di(trifluorometanil)fenilacético (12 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C25 (11 mg, 0,011 30 mmol, 24%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 180 °C 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,98 (s, 2H), 7,91 (s, 1H), 7,69-7,22 (m, 3H), 5,01 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,28-4,33 (m, 1H), 3,84-3,99 (m, 5H), 3,83 (s, 2H), 3,78 (dd, J = 4,2, 10,8 Hz, 1H), 3,22-3,32 (m, 3H), 3,42-3,51 (m, 1H), 2,69 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,33 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,391,82 (m, 42H), 1,00 (t, J = 6,8 Hz, 3H). (13C-RMN CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 174,04, 170,56, 143,17, 139,37, 137,65, 131,13, 130,80, 129,10, 124,18, 123,56, 121,47, 120,09, 116,22, 116,06, 114,50, 99,07, 73,77, 71,32, 69,40, 35 69,27, 68,42, 68,20, 66,30, 49,99, 41,14, 39,78, 35,75, 34,39, 31,73, 31,27, 30,66, 29,14, 29,09, 29,04, 28,99, 28,88,
imagen75
28,75, 28,71, 28,69, 28,42, 25,29, 25,24, 21,98, 13,08. [α]25D +40,1 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C51H77F8N2O9 [M+H]+: 1013,5501, encontrado: 1013,5567.
Síntesis de 1-O-(6-(3,4-difluorofenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C26)
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Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 3,4difluorofenilacético (7,7 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C26 (17 mg, 0,019 mmol, 42%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 182 °C 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 6,97-7,43 (m, 6H), 4,97 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,28 (q, J = 4,4, 9,6 Hz, 1H), 3,83-4,01 (m, 4H), 3,80 (dd, J = 3,2, 10,0 Hz, 1H), 3,71 (dd, J = 10 4,4, 10,6 Hz, 1H), 3,60-3,68 (m, 3H), 3,59 (s, 2H), 3,38 (dd, J = 8,0, 13,6 Hz, 1H), 2,66 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,30 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,32-1,81 (m, 42H), 0,97 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,92, 171,63, 150,67, 150,03, 149,13, 148,25, 147,65, 146,72, 139,34, 131,81, 124,72, 123,54, 117,52, 117,34, 116,97, 116,59, 116,42, 116,25, 116,08, 115,93, 99,02, 73,75, 71,23, 69,34, 69,15, 68,38, 68,14, 66,24, 49,82, 41,06, 39,57, 35,66, 34,33, 31,63, 31,23, 30,61, 29,10, 29,07, 29,00, 28,94, 28,85, 28,79, 28,71, 28,65, 28,38, 25,24, 25,20, 21,93, 13,01.
15 [α]25D +53,8 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C49H77F4N2O9 [M+H]+: 913,5565, encontrado: 913,5606.
Síntesis de 1-O-(6-(3-trifluorometilfenil-acetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4difluorofenil)undecanoil)amino-D-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C27)
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20 Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 3trifluorometilfenilacético (9,2 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C27 (12 mg, 0,013 mmol, 29%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 157 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 6,96-7,82 (m, 7H), 4,96 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,25-4,30 (m, 1H), 4,03-4,10 (m, 1H), 3,77-3,91 (m, 5H), 3,53-3,74 (m, 5H), 3,36-3,44 (m, 1H), 2,65 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,29 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,27-1,76 (m, 42H), 0,97 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN
25 (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 174,52, 172,19, 150,04 (dd, J = 247, 13Hz), 148,52 (dd, J = 244, 13Hz), 139,90, 136,43, 132,64, 129,02, 127,67, 125,80, 124,17, 116,76, 116,60, 111,27, 99,64, 74,33, 71,87, 69,93, 69,73, 68,98, 68,76, 66,90, 60,57, 50,44, 42,27, 40,16, 36,25, 34,92, 32,20, 31,82, 31,21, 29,68, 29,65, 29,59, 29,53, 29,44, 29,38, 29,30, 29,24, 28,97, 25,83, 25,80, 22,52, 13,60. [α]25D +47,4 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C50H78F5N2O9 [M+H]+: 945,5627, encontrado: 945,5611.
30 Síntesis de 1-O-(6-(4-metilfenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)aminoD-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C28 )
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Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 4metilfenilacético (6,8 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C28 (11 mg, 0,012 mmol, 27%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 171 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,28-44 (m, 4H), 7,125 7,26 (m, 2H), 7,03-7,08 (m, 1H), 5,01 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,32-4,41 (m, 1H), 3,83-3,95 (m, 5H), 3,67-3,79 (m, 3H), 3,66 (s, 2H), 3,40 (dd, J = 7,6, 13,6 Hz, 1H), 2,73 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,37 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,32-1,87 (m, 42H), 1,05 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,94, 172,96, 149,83 (dd, J = 247, 13 Hz), 148,02 (dd, J = 244, 13 Hz), 139,42, 136,24, 131,26, 128,86, 128,47, 123,42, 116,31, 116,15, 99,10, 73,89, 71,43, 69,40, 68,98, 68,41, 68,25, 66,49, 49,82, 42,07, 39,42, 35,83, 34,47, 31,78, 31,34, 30,73, 29,23, 29,19, 29,12, 29,06, 28,97,
10 28,92, 28,84, 28,80, 28,77, 28,51, 25,35, 25,32, 22,06, 20,10, 13,22. [α]25D +31,8 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C50H81F2N2O9 [M+H]+: 891,5910, encontrado: 891,5988.
Síntesis de 1-O-(6-(3-metilfenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)aminoD-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C29)
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15 Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 3metilfenilacético (6,8 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C29 (14 mg, 0,016 mmol, 35%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 167 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,18-7,51 (m, 7H), 5,08 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,36-4,43 (m, 1H), 3,91-4,02 (m, 5H), 3,23-3,35 (m, 4H), 3,73 (s, 2H), 3,47 (dd, J = 7,8, 13,8 Hz, 1H), 2,79 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,57 (s, 3H), 2,43 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1,46-1,94 (m, 42H), 1,11 (t, J = 6.8 Hz, 3H). 13C
20 RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,96, 172,85, 149,52 (dd, J = 245, 13 Hz), 148,13 (dd, J = 243, 13 Hz), 139,43, 137,90, 134,27, 129,41, 128,13, 127,37, 125,61, 123,67, 116,35, 116,19, 99,15, 73,99, 71,49, 69,44, 69,00, 68,41, 68,30, 66,53, 49,88, 42,50, 39,46, 35,89, 34,52, 31,91, 31,39, 30,76, 29,28, 29,23, 29,11, 29,01, 28,96, 28,88, 28,84, 28,81, 28,55, 25,38, 25,36, 22,11, 13,29. [α]25D +36,8 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS (ESI) calculado para C50H81F2N2O9 [M+H]+: 891,5910, encontrado: 891,5950.
25 Síntesis de 1-O-(6-(2-metilfenilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)aminoD-ribo-1,3,4-octadecanotriol (C30)
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Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 2metilfenilacético (6,8 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C30 (16 mg, 0,018 mmol, 40%) en forma de sólidos blanquecinos. P.f.: 182 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,31-7,37 (m, 4H), 7,017,26 (m, 3H), 4,99 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,30-4,35 (m, 1H), 3,83-3,94 (m, 5H), 3,68-3,75 (m, 6H), 3,40 (dd, J = 8,0, 5 13,8 Hz, 1H), 2,72 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,36 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,32-1,87 (m, 42H), 1,04 (t, J = 6,8 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 100 MHz) δ 173,86, 172,42, 149,48 (dd, J = 246, 13 Hz), 147,94 (dd, J = 243, 13Hz),139,41, 136,38, 132,67, 129,91, 129,65, 126,99, 125,79, 123,63, 116,28, 116,11, 99,15, 73,91, 71,38, 69,38, 69,11, 68,35, 68,20, 66,56, 49,74, 40,27, 39,49, 35,80, 34,45, 31,78, 31,32, 30,70, 29,21, 29,16, 29,10, 29,04, 28,95, 28,90, 28,81, 28,77, 28,74, 28,48, 25,33, 25,29, 22,03, 18,65, 13,17. [α]25D +38,3 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1). HRMS
10 (ESI) calculado para C50H81F2N2O9 [M+H]+: 891,5910, encontrado: 891,5987.
Síntesis de 1-O-(6-(2-naftilacetamido)-6-desoxi-α-D-galactopiranosil)-2-(11-(3,4-difluorofenil)undecanoil)amino-Dribo-1,3,4-octadecanotriol (C31)
imagen82
Mediante el procedimiento similar de síntesis de C20, se utilizaron compuesto C19 (34 mg, 0,045 mmol) y ácido 2
15 naftilacético (8,4 mg, 0,045 mmol) como materiales de partida para proporcionar C31 (12 mg, 0,013 mmol, 29%) en forma de un sólido blanco. P.f.: 178 °C. 1H-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 400 MHz) δ 7,85-8,04 (m, 3H), 7,40-7,69 (m, 4H), 7,05-7,29 (m, 3H), 5,03 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,31-4,40 (m, 1H), 3,87-4,01 (m, 6H), 3,72-3,81 (m, 4H), 3,46 (dd, J = 7,8, 14,0 Hz, 1H), 2,76 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,38 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 1,32-1,90 (m, 42H), 1,08 (t, J = 6,6 Hz, 3H). 13C-RMN (CDCl3/CD3OD = 1/1, 150 MHz) δ 173,92, 172,58, 149,54 (dd, J = 244, 12 Hz), 147,93 (dd, J = 240, 13 Hz),
20 142,73, 139,39, 133,06, 131,96, 127,78, 127,34, 127,01, 126,97, 126,48, 125,61, 125,20, 123,60, 123,30, 123,14, 117,04, 116,24, 116,09, 110,83, 99,07, 73,85, 71,38, 69,38, 69,05, 68,42, 68,21, 66,45, 49,81, 42,35, 39,52, 35,75, 34,41, 31,74, 31,29, 30,67, 29,72, 29,18, 29,13, 29,07, 29,01, 28,92, 28,68, 28,78, 28,72, 28,45, 25,30, 25,28, 22,00, 13,12. [α]25D +8,3 (c 1,0, CH2Cl2/CH3OH: 1/1).
Síntesis de compuestos de fórmula (1)
25 Se sintetizó un cierto número de glucoesfingolípidos y se ensayaron en cuanto a la activación de células NKT. Las estructuras de los compuestos están de acuerdo con la fórmula 1.
imagen83
en donde el compuesto nº (R) se selecciona de la Tabla 1 para proporcionar los compuestos correspondientes.
TABLA 1
imagen84
Estructura de compuesto.
Compuesto nº, R=
imagen85
A15: X= OPh, Y= H, Z= H A16: X= O-i-Pr, Y= H, Z= H A17: X= F, Y= F, Z= H A18: X= F, Y= H, Z= F A23: X= Cl, Y= H, Z= Cl A24: X= Cl, Y= H, Z= H A25: X= Br, Y= H, Z= H
A26: X=F, Y=F, Z=H
A27: X=NO2, Y=H, Z=H A28: X=N(CH3)2, Y=H, Z=H A29: X=F, Y=CF3, Z=H A30: X=i-Pr, Y=H, Z=H A31: X=2-(5-F)-piridina, Y=H, Z=H
C34: X=OPh(4-F), Y=H, Z=H
imagen86
C4: n=1
C5: n=2 C6: n=3
imagen87
C20: X= NO2, Y= H, Z= H C21: X= NO2, Y= H, Z= NO2 C22: X= t-Bu, Y= H, Z= H C23: X= Br, Y= H, Z= H C24: X= OMe, Y= H, Z= H C25: X= CF3, Y= CF3, Z= H C26: X= F, Y= F, Z= H C27: X= H, Y= CF3, Z= H C28: X= H, Y= H, Z= Me C29: X= H, Y= Me, Z= H
C30: X= Me, Y= H, Z= H
imagen88
imagen89
Estructura de compuesto.
Compuesto nº, R=
imagen90
Ejemplo 2
5 Activación de célula presentadora de antígeno (APC)
Células A20CD1d y mNK1.2 se utilizaron como células APC y efectoras, respectivamente. El reactivo Guava ViaCount se utilizó para determinar la viabilidad y el número viable de células con Guava EasyCyte Plus. Se utilizó el Sistema de Desarrollo ELISA de DuoSet Mouse IL-2 para detectar la producción de IL-2. Las células y los glucolípidos se co-cultivaron a 37 °C y el sobrenadante se recogió a las 24 h después del cultivo. Y, dos días 10 después del cultivo, las células se cosecharon para determinar la viabilidad y los resultados muestran que estos
imagen91
glucoesfingolípidos no son tóxicos. Como se muestra en la Fig 6 a este respecto, todos los compuestos de ensayo exhiben actividades de activación de APC.
Secreciones de IFN-γ y Citoquinas Il-4
Se sacrificó el ratón C57BL/6 hembra (16w4d) y se recogió el bazo para el ensayo. Las células y los glucolípidos se
5 co-cultivaron a 37 °C durante 3 días y el sobrenadante se recogió al 3er día (~ 60 h) después del cultivo. Luego, se añadió el Azul alarma (5%/200 ul) y las células se cultivaron durante 7 h para determinar la proliferación celular. Se utilizó el Sistema de Desarrollo ELISA de DuoSet Mouse IL-4 para detectar la producción de citoquinas. En este ensayo, DMSO era el control negativo y KRN-7000 era el control positivo. Como se muestra en las Fig. 7-9, los compuestos han mostrado un perfil de secreción de citoquinas desviado hacia Th1, lo que indica su aplicabilidad
10 para actividades antitumorales, antivirales/antibacterianas y adyuvantes.

Claims (6)

  1. imagen1
    REIVINDICACIONES
    1. Un procedimiento para preparar un compuesto quiral que comprende una forma R o una forma S de un glucoesfingolípido de fórmula (1),
    imagen2
    en donde R1 es -OH, X es un grupo alquilo, R3 es -OH o H, R4 es -OH o H y R5 es arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto de fórmula 1 se prepara:
    (a) poniendo en contacto un compuesto de fórmula (6):
    imagen3
    10 en donde PG es un grupo protector de hidroxilo y LG es un grupo lábil de fórmula:
    imagen4
    con un compuesto de fórmula (7):
    imagen5
    y efectuando la alfa-glicosilación en presencia de un ácido de Lewis para generar un compuesto de fórmula (5):
    imagen6
    (b) reduciendo el compuesto de fórmula (5) para proporcionar un compuesto de fórmula (3):
    34 (c) acoplando el compuesto de fórmula (3) con un compuesto de fórmula (4):
    imagen7
    imagen8
    en que X es alquilo o alquenilo, R3 es H u -OH, R4 es H u OH, R5 es arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para proporcionar un compuesto de fórmula (2):
    imagen9
    y
    (d) poniendo en contacto el compuesto de fórmula (2), en donde PG es un grupo protector de hidroxilo, con
    hidrógeno bajo catálisis de hidrogenación para proporcionar el compuesto de fórmula (1), o una sal 10 farmacéuticamente aceptable del mismo.
  2. 2. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el catalizador de hidrogenación se selecciona de Pd/C, Pd(OH2)
    o Ni Raney, en donde R1 es OH.
  3. 3. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la reducción se consigue utilizando hidruro de litio y aluminio,
    borohidruro sódico, un complejo de borano, un complejo de fosfato, reducción enzimática, hidrogenación o 15 hidrogenación por transferencia.
  4. 4.
    El procedimiento de la reivindicación 1, en el que la alfa-glicosilación se consigue utilizando TMSOTf, Tf2O, BF3 · OEt2, TfOH o Me2S2-Tf2O y, opcionalmente, utilizando tamices moleculares para deshidratar.
  5. 5.
    El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el compuesto de fórmula 1 es 1-O-(a-D-galactopiranosil)-2-(11(4-(4-fluorofenoxi)fenil)undecanoil)amino-D-ribo-octadecano-1,3,4-triol (C34) que tiene la fórmula:
  6. 6.
    El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el compuesto de fórmula (1) es:
    imagen10
    35
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