ES2621917T3 - Anticuerpos biespecíficos anti-BAFF-anti-IL-17 - Google Patents

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Abstract

Un anticuerpo biespecífico que comprende dos primeros polipéptidos y dos segundos polipéptidos, en el que la secuencia de aminoácidos del primer polipéptido es SEQ ID NO: 1, y la secuencia de aminoácidos del segundo polipéptido es SEQ ID NO: 2.

Description

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DESCRIPCION
Anticuerpos biespedficos anti-BAFF-anti-IL-17
La presente invencion pertenece al campo de la medicina, en particular al nuevo campo de los anticuerpos biespedficos dirigidos contra el factor activador de celulas B de la familia del TNF (BAFF) y la interleuquina-17A (IL-17). Se espera que los anticuerpos biespedficos de la presente invencion sean utiles para tratar la nefritis lupica (NL), el lupus eritematoso sistemico (LES), la artritis reumatoide (AR), la psoriasis (Ps), la espondilitis anquilosante (EA), la artritis psoriasica (AP), el smdrome de Sjogren primario (SSp), o el mieloma multiple (MM).
Se ha asociado un aumento en los niveles de IL-17 con varias afecciones, enfermedades o trastornos, que incluyen la inflamacion de las vfas respiratorias, la artritis reumatoide, la osteoartritis, la erosion osea, los abscesos y las adhesiones intraperitoneales, el trastorno inflamatorio del intestino, el rechazo de aloinjertos, la psoriasis, ciertos tipos de canceres, la angiogenesis, la aterosclerosis y la esclerosis multiple. La IL-17 y el receptor de IL-17 se encuentran sobrerregulados en el tejido sinovial de los pacientes con artritis reumatoide. El bloqueo de la bioactividad de IL-17 reduce la inflamacion y la erosion osea en diversos modelos animales de artritis. Ademas, la IL-17 posee efectos independientes de IL-1p sobre la degradacion de la matriz de colageno y la inflamacion y los danos en articulaciones, mientras que la IL-17 presenta sinergia con el TNF-a para amplificar la inflamacion. Asf, debido a su distribucion localizada en el sitio de la inflamacion, la IL-17 parece que pueda constituir una diana posible para el tratamiento de la artritis reumatoide y otras enfermedades inflamatorias o autoinmunologicas, con un perfil de seguridad potencialmente mayor que los farmacos que se dirigen a la circulacion sistemica de citoquinas proinflamatorias, tales como el TNF-a.
La implicacion del factor activador de celulas B (BAFF) en la patogenesis de las enfermedades autoinmunologicas se ilustra por la sobreexpresion de BAFF en modelos de raton, que provoca que la enfermedad autoinmunologica imite a la artritis reumatoide, al lupus eritematoso sistemico y al smdrome de Sjogren primario, asf como que se produzca un aumento en dos veces de la aparicion del linfoma de celulas B. En seres humanos, numerosos informes han demostrado unos niveles elevados de BAFF en suero en pacientes con LES, AR, SSp, y esclerosis sistemica. Se ha demostrado que BAFF estimula la expansion de celulas Th17 y que la IL-17 es una citoquina efectora crucial para los efectos proinflamatorios mediados por BAFF durante el desarrollo de la artritis inducida por colageno. Tambien se ha demostrado que la IL-17 actua en sinergia con BAFF para influir en la biologfa de las celulas B y la patofisiologfa del LES. Tambien existen pruebas de que tanto BAFF como IL-17 desempenan un papel en la patologfa asociada con la LN; de hecho, se ha indicado los pacientes con LN presentan niveles elevados de IL-17 y BAFF.
El LES es una enfermedad autoinmunologica multisistemica y muy heterogenea que se caracteriza por el desarrollo de autoanticuerpos y por la formacion de complejos inmunologicos. Se calcula que 30-60% de los pacientes con LES presentan implicaciones renales en algun momento del desarrollo de su enfermedad. La NL es una enfermedad autoinmunologica multifactorial compleja. Si se deja sin tratar, la tasa de supervivencia a los 5 anos de los pacientes con NL es del 0-20%. La introduccion de la terapia inmunosupresora ha mejorado muctusimo esta situacion, y la tasa de supervivencia a los 10 anos actual es del 88%. Sin embargo, esta mejora tiene un coste para el paciente, puesto que muchos de estos tratamientos presentan graves acontecimientos adversos, en especial debido a que deben recibirse de forma cronica. Ademas, la respuesta es lenta y, a menudo, incompleta, y solo 25-50% de los pacientes consiguen la remision.
La coadministracion de un anticuerpo de BAFF y un anticuerpo de IL-17 requiere inyecciones de los dos productos distintos o una unica inyeccion de una coformulacion de los dos anticuerpos diferentes. Dos inyecciones permitinan flexibilizar la cantidad de dosis y el programa de administracion, pero suponen una molestia para los pacientes, porque dificultan el cumplimiento y causan dolor. Una coformulacion tambien podna proporcionar cierta flexibilidad en las cantidades de las dosis, pero a menudo resulta problematico o imposible determinar las condiciones de formulacion que permitan la estabilidad qmmica y ffsica de ambos anticuerpos, debido a las diferentes caractensticas moleculares de los dos anticuerpos distintos.
El documento US 7.317.089 B2 desvela anticuerpos monoclonales que se unen espedficamente a polipeptidos de TNFSF13b humanos con alta afinidad. Los anticuerpos neutralizan la actividad TNFSF13b in vitro e in vivo y se indica que son utiles para inhibir la actividad TNFSF13b en un sujeto humano que padece un trastorno en el que la actividad hTNFSF13b es perjudicial. El documento WO19509917 desvela un procedimiento para producir anticuerpos tetravalentes biespedficos (MAb-scFV) empleando la tecnologfa del ADN recombinante por medio de la produccion de un fragmento variable de anticuerpo monocatenario condensado con un anticuerpo completo que tiene una especificidad diferente. Esta fusion genica se expresa por medio de una transfeccion, que resulta en un anticuerpo tetravalente que tiene una especificidad dual. El documento WO2003016468 desvela anticuerpos anti- BAFF que se unen a las formas solubles y unidas a membrana de la BAFF humana y las neutralizan. El documento W02007070750 describe anticuerpos anti-IL-17 que se unen a la IL-17 humana y la neutralizan. Sin
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embargo, cuando siguieron las indicaciones del documento WO199509917 para crear un anticuerpo biespedfico de partida que comprende los anticuerpos anti-BAFF del documento WO2003016468 y los anticuerpos anti-IL-17 del documento WO2007070750, los inventores del presente documento descubrieron problemas importantes asociados con la estabilidad qmmica y ffsica. Fueron necesarios muchos cambios en los aminoacidos del anticuerpo biespedfico de partida para solucionar suficientemente estos problemas. En la tecnica no se sugiere
esta necesidad ni los cambios realizados. Ademas, estos cambios no son habituales ni se derivan del
conocimiento corriente general. De modo similar, los propios anticuerpos individuales no presentan estos problemas, lo cual sugiere que el entorno local alrededor de estas areas es diferente en el contexto de los anticuerpos biespedficos. Asf, es necesaria una intervencion farmacologica con un anticuerpo biespedfico que neutralice a BAFF y a IL-17.
La presente invencion proporciona un anticuerpo biespedfico que comprende dos primeros polipeptidos y dos segundos polipeptidos.
En el presente documento se describe una molecula de ADN que comprende una secuencia polinucleotfdica que codifica el primer polipeptido.
En el presente documento se describe ademas una molecula de ADN que comprende una secuencia
polinucleotfdica que codifica el segundo polipeptido.
En el presente documento se describe ademas una molecula de ADN que comprende una secuencia
polinucleotfdica que codifica el primer polipeptido y el segundo polipeptido.
En el presente documento se describe ademas una celula de mamffero transformada con una o mas moleculas de ADN, siendo capaz dicha celula de expresar un anticuerpo biespedfico que comprende el primer polipeptido y el segundo polipeptido.
En el presente documento se describe ademas un procedimiento para producir un anticuerpo biespedfico que comprende el primer polipeptido y el segundo polipeptido, que comprende cultivar la celula de mamffero bajo determinadas condiciones que permiten que el anticuerpo biespedfico se exprese.
En el presente documento se describe ademas un anticuerpo biespedfico producido por dicho procedimiento.
En el presente documento se describe ademas un procedimiento para tratar el lupus eritematoso sistemico, la nefritis lupica, la artritis reumatoide, la psoriasis, la espondilitis anquilosante, la artritis psoriasica, el smdrome de Sjogren primario, o el mieloma multiple, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de un anticuerpo biespedfico.
La presente invencion tambien proporciona un anticuerpo biespedfico para su uso en terapia.
La presente invencion tambien proporciona un anticuerpo biespedfico para su uso en el tratamiento del lupus eritematoso sistemico, la nefritis lupica, la artritis reumatoide, la psoriasis, la espondilitis anquilosante, la artritis psoriasica, el smdrome de Sjogren primario, o el mieloma multiple.
La presente invencion tambien proporciona una composicion farmaceutica que comprende el anticuerpo biespedfico, y uno o mas vedculos, diluyentes o excipientes farmaceuticamente aceptables.
La IL-17 humana significa una protema homodimerica que comprende dos protemas de IL-17A humanas. Un heterodfmero de IL-17A/F humano es una protema de IL-17A humana y una protema de IL-17F humana.
Un anticuerpo biespedfico significa una molecula de inmunoglobulina que comprende cuatro sitios de union al antfgeno, que se une a dos antfgenos diferentes con especificidad para cada antfgeno en el formato de MAb-scFV. El anticuerpo biespedfico es capaz de unirse a cada antfgeno por sf solo o a cada antfgeno simultaneamente.
El anticuerpo biespedfico de la presente invencion comprende dos primeros polipeptidos y dos segundos polipeptidos. Cada uno de los primeros polipeptidos forma un enlace disulfuro intercatenario con cada uno de los segundos polipeptidos, y el primer polipeptido forma dos enlaces disulfuro intercatenarios con el otro primer polipeptido, y cada uno de los primeros polipeptidos forma varios enlaces disulfuro intracatenarios. La relacion de los polipeptidos y los enlaces disulfuro se muestra en el siguiente esquema:
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imagen1
La secuencia de aminoacidos del primer polipeptido es:
QVQLQQWGAG LLKPSETLSL TCAVYGGSFS GYYWSWIRQP INHSGSTNYN PSLKSRVTIS VDTSKNQFSL KLSSVTAADT DILTGYYYYF DYWGQGTLVT VSSASTKGPS VFPLAPCSRS LVKDYFPEPV TVSWNSGALT SGVHTFPAVL QSSGLYSLSS TKTYTCNVDH KPSNTKVDKR VESKYGPPCP PCPAPEFLGG KDTLMISRTP EVTCVVVDVS QEDPEVQFNW YVDGVEVHNA STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKG LPSSIEKTIS VYTLPPSQEE MTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP LDSDGSFFLY SRLTVDKSRW QEGNVFSCSV MHEALHNHYT GGSGGGGTGG GGSQVQLVQS GAEVKKPGSS VKVSCKASGY RQAPGQCLEW MGVINPTYGT TDYNQRFKGR VTITADESTS SEDTAVYYCA RYDYFTGTGV YWGQGTLVTV SSGGGGSGGG GSDIVMTQTP LSLSVTPGQP ASISCRSSRS LVHSRGETYL PQLLIYKVSN RFIGVPDRFS GSGSGTDFTL KISRVEAEDV LPFTFGCGTK LEIK 714 (SEQIDNO:l).
La secuencia de aminoacidos del segundo polipeptido es:
EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVS RYLAWYQQKP ASNRATGIPA RFSGSGSGTD STLTISSLEP EDFAVYYCQQ GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSNTLT LSKADYEKHK LSSPVTKSFN RGEC 214 (SEQIDNO:2).
PGKGLEWIGE
AVYYCARGYY
TSESTAALGC
VVTVPSSSLG
PSVFLFPPKP
KTKPREEQFN
KAKGQPREPQ
ENNYKTTPPV
QKSLSLSPGG
KFTDYHIHWV
TAYMELSSLR
GSGGGGSGGG
HWYLQKPGQS
GVYYCSQSTH
GQAPRLLIYD RSNWPRTFGQ PREAKVQWKV VYACEVTHQG
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El enlace disulfuro intercatenario de cada uno de los primeros polipeptidos y cada uno de los segundos polipeptidos se forma entre el resto cistema 137 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 214 de SEQ ID NO: 2. El primer polipeptido forma dos enlaces disulfuro intercatenarios con el otro primer polipeptido. El primer enlace
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disulfuro intercatenario se forma entre el resto cistema 229 del primer polipeptido de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 229 del otro primer polipeptido de SEQ ID NO: 1. El segundo enlace disulfuro intercatenario se forma entre el resto cistema 232 del primer polipeptido de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 232 del otro primer polipeptido de SEQ ID NO: 1.
Dentro del scFV, se forma un enlace disulfuro intracatenario modificado entre el resto cistema 507 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 707 de SEQ ID NO: 1. Ademas, se forma un enlace disulfuro intracatenario entre el resto cistema 625 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 695 de SEQ ID NO: 1. Dentro del MAb, los enlaces disulfuro intracatenarios que normalmente aparecen en un anticuerpo IgG4 se forman entre el resto cistema 22 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 95 de SEQ ID NO: 1, entre el resto cistema 150 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 206 de SEQ ID NO: 1, entre el resto cistema 264 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 324 de SEQ ID NO: 1, entre el resto cistema 370 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 428 de SEQ ID NO: 1, entre el resto cistema 485 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 559 de SEQ ID NO: 1, entre el resto cistema 23 de SEQ ID NO: 2 y el resto cistema 88 de SEQ ID NO: 2, y entre el resto cistema 134 de SEQ ID NO: 2 y el resto cistema 194 de SEQ ID NO: 2.
El primer polipeptido comprende una primera region variable de cadena pesada (HCVR1), una region constante de cadena pesada (CH), una segunda region variable de cadena pesada (HCVR2) y una segunda region variable de cadena ligera (LCVR2). Los segundos polipeptidos comprenden una primera region variable de cadena ligera (LCVR1) y una region constante de cadena ligera (CL). Las regiones HCVR y LCVR pueden subdividirse en regiones de hipervariabilidad, denominadas “regiones determinantes de la complementariedad” (CDR), intercaladas entre las regiones de marco (FR). Cada HCVR y LCVR esta compuesta por tres CDR y cuatro FR, dispuestas desde el amino-terminal hasta el carboxilo-terminal en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
Las 3 CDR de HCVR1 se denominan CDRH1-1, CDRH1-2, y CDRH1-3, las 3 CDR de HCVR2 se denominan CDRH2-1, CDRH2-2, y CDRH2-3, las 3 CDR de LCVR1 se denominan CDRL1-1, CDRL1-2 y CDRL1-3, y las 3 CDR de LCVR2 se denominan CDRL2-1, CDRL2-2 y CDRL2-3.
La CH esta unida a HCVR2 a traves de un conector de aminoacidos (L1). HCVR2 esta unida a LCVR2 a traves de un conector de aminoacidos (L2).
La relacion entre las diversas regiones y conectores es la siguiente:
Polipeptido 1 - SEQ ID NO: 1
Polipeptido 1 - SEQ ID NO: 2
Region Posiciones Region Posiciones
FRH1-1 1-26 FRL1-1 1-23
CDRH1-1 27-35 CDRL1-1 24-34
HCVR1 BAFF
FRH1-2 36-49 LCVR1 BAFF FRL1-2 35-49
CDRH1-2 50-65 CDRL1-2 50-56
FRH1-3 66-97 FRL1-3 57-88
CDRH1-3 98-112 CDRL1-3 89-97
FRH1-4 113-123 FRL1-4 98-107
Constante
CH 124-447 Constante CL 108-214
Conector
L1 448-463
FRH2-1 464-487-
CDRH2-1 488-498
HCVR2 IL-17
FRH2-2 499-512
CDRH2-2 513-528
FRH2-3 529-561
5
10
15
20
25
30
35
(continuacion)
Polipeptido 1 - SEQ ID NO: 1
Polipeptido 1 - SEQ ID NO: 2
CDRH2-3 562-571
FRH2-4 572-582
Conector
L2 583-602
FRL2-1 603-625
CDRL2-1 626-641
FRL2-2 642-656
LCVR2 IL-17
CDRL2-2 657-663
FRL2-3 664-695
CDRL2-3 696-704
FRL2-4 705-714
Modificacion del anticuerpo biespecifico
Cuando se construyo un anticuerpo biespecifico en el formato MAb-scFv con la porcion de union del anti-IL-17 en la configuracion scFv, se encontraron problemas significativos asociados con la estabilidad qmmica y ffsica. Se realizaron modificaciones qmmicas en las porciones CDRL2-1 y CDRH2-2 del anticuerpo biespecifico que mejoraron la estabilidad ffsica y redujeron la agregacion dependiente de la concentracion. Estudios profundos sobre la solubilidad y la estabilidad de la protema identificaron restos qmmicamente inestable en CDRL2-1 y CDRH2-2. Estos restos labiles fueron reemplazados por aminoacidos de carga neutra empleando bancos de transporte dirigido construidos por medio de la eliminacion de codones. Ademas, se calculo la superficie electrostatica del anticuerpo biespecifico y se identificaron las zonas cargadas. Las alteraciones de estas zonas cargadas en el scFv condujeron a una disminucion en la autoasociacion de las protemas. Sin embargo, se identifico una mutacion en la porcion CDRH2-1 del anticuerpo biespecifico que reequilibra la distribucion electrostatica de la superficie y mejora la solubilidad y la estabilidad ffsica a concentraciones elevadas. En los anticuerpos individuales de origen no aparecieron ninguna de estas cuestiones. Estos problemas solo aparecieron en el contexto de la construccion de un anticuerpo biespecifico en el formato de MAb-scFv, lo cual sugiere que el entorno local alrededor de las areas mutadas del anticuerpo individual es diferente en el contexto de un anticuerpo biespecifico.
Se realizaron otras modificaciones qmmicas para estabilizar la interfase HCVR2/LCVR2 en la porcion de IL-17 del anticuerpo biespecifico y para reducir la agregacion del anticuerpo biespecifico. Estudios realizados para determinar la agregacion demostraron que la autoasociacion de las protemas observada no estaba provocada por la inestabilidad conformacional de los dominios HCVR2 o LCVR2 individuales, sino por la apertura o respiracion de la interfase HCVR2/LCVR2, que conduce a interacciones intermoleculares de las protemas. Asf, se introdujeron diversos enlaces disulfuro intracatenarios en la interfase HCVR2/LCVR2 de la porcion de IL-17 del anticuerpo biespecifico. Uno de estos enlaces disulfuro intracatenarios aparece en cada uno de los primeros polipeptidos entre el resto cistema 507 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 707 de SEQ ID NO: 1. Este enlace disulfuro conecta covalentemente la interfase HCVR2/LCVR2 en la porcion de IL-17 del anticuerpo biespecifico, que estabiliza la interfase HCVR2/LCVR2 y reduce las interacciones intermoleculares de las protemas que pueden conducir a una inestabilidad ffsica y a limitaciones de formulacion desfavorables. De los nueve enlaces disulfuro distintos ensayados, de los cuales 8 expresaban la protema funcional, la magnitud de perdida de afinidad variaba de aproximadamente 2 a aproximadamente 35 veces. El enlace disulfuro intracatenario en cada uno de los primeros polipeptidos entre el resto cistema 507 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 707 de SEQ ID NO: 1 es el que mejor estabiliza la interfase HCVR2/LCVR2, manteniendo, al mismo tiempo, una optima afinidad de union por IL-17.
Ademas, los estudios han indicado que la longitud del conector para L1 afecta a la cinetica de union. El analisis cinetico (mediante resonancia de plasmon de superficie) demostro que un conector de 10 aminoacidos es responsable de una reduccion en dos veces de la velocidad de Kon, comparado con conectores de 15 aminoacidos y de 20 aminoacidos. Por tanto, se introdujo una longitud de conector de 15 en el anticuerpo biespecifico de la presente invencion.
5
10
15
20
25
30
35
Union del anticuerpo biespecifico
Los anticuerpos biespedficos de la presente invencion se unen al BAFF humano y a la IL-17 humana y neutralizan al menos una bioactividad del BAFF humano y al menos una bioactividad de la IL-17 humana in vitro o in vivo. Los anticuerpos biespedficos de la presente invencion son potentes inhibidores de la IL-17 en presencia y en ausencia de BAFF in vitro. Los anticuerpos biespedficos de la presente invencion son potentes inhibidores del BAFF soluble y unido a membranas en presencia y en ausencia de IL-17 in vitro. Los anticuerpos biespedficos de la invencion se caracterizan ademas por tener una afinidad de union (Kd) por el BAFF humano en el intervalo de 150 pM a 1 pM, y por la IL-17 humana en el intervalo de 50 pM a 1 pM. Los anticuerpos biespedficos presentan una afinidad de union por el heterodfmero IL-17A/F humano de aproximadamente 90 pM.
Los anticuerpos biespedficos neutralizan, de modo eficaz, el BAFF soluble y tambien unido a membranas, y esta neutralizacion no se ve afectada por la presencia de cantidades saturantes de IL-17 humana. Los anticuerpos biespedficos neutralizan, de modo eficaz, la IL-17 humana, y esta neutralizacion no se ve afectada por la presencia de cantidades saturantes de BAFF humano.
Expresion del anticuerpo biespecifico
Los vectores de expresion capaces de dirigir la expresion de genes a los que estan unidos operablemente son muy conocidos en la tecnica. Los vectores de expresion pueden codificar un peptido senal que facilita la secrecion del polipeptido o polipeptidos desde la celula hospedante. El peptido senal puede ser un peptido senal de inmunoglobulina o un peptido senal heterologo. El primer polipeptido y el segundo polipeptido pueden expresarse independientemente de los diferentes promotores a los que estan unidos operablemente en un vector o, como alternativa, el primer polipeptido y el segundo polipeptido pueden expresarse independientemente de los diferentes promotores a los que estan unidos operablemente en dos vectores (uno expresa el primer polipeptido y el otro expresa el segundo polipeptido).
Una celula hospedante incluye celulas transfectadas, transformadas, transducidas o infectadas de modo estable o transitorio con uno o mas vectores de expresion que expresan un primer polipeptido, un segundo polipeptido o ambos un primer polipeptido y un segundo polipeptido de la invencion. La creacion y el aislamiento de lmeas de celulas hospedantes que producen un anticuerpo biespecifico de la invencion puede lograrse empleando tecnicas convencionales conocidas en la tecnica. Las celulas de mamffero son las celulas hospedantes preferidas para la expresion de los anticuerpos biespedficos. En particular, las celulas de mamffero son HEK 293, NS0, DG-44, y CHO. Preferentemente, los anticuerpos biespedficos se segregan hacia el medio en el que se cultivan las celulas hospedantes, del cual pueden recuperarse o purificarse los anticuerpos biespedficos.
En la tecnica se sabe que la expresion de anticuerpos en mamfferos produce glicosilaciones. Generalmente, la glicosilacion aparece en la region Fc del anticuerpo en un sitio de N-glicosilacion altamente conservado. Generalmente, los N-glicanos se unen a la asparagina. Cada uno de los primeros polipeptidos esta glicosilado en el resto asparagina 300 de SEQ ID NO: 1.
Una secuencia polinucleotfdica de ADN concreta que codifica el primer polipeptido que tiene una secuencia de aminoacidos de SEQ ID NO: 1 es:

Claims (4)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un anticuerpo biespedfico que comprende dos primeros polipeptidos y dos segundos polipeptidos, en el que la secuencia de aminoacidos del primer polipeptido es SEQ ID NO: 1, y la secuencia de aminoacidos del segundo polipeptido es SEQ ID NO: 2.
    5 2. El anticuerpo biespedfico de la reivindicacion 1, en el que esta presente un enlace disulfuro intracatenario entre
    el resto cistema 507 de SEQ ID NO: 1 y el resto cistema 707 de SEQ ID NO: 1.
  2. 3. Un anticuerpo biespedfico de la reivindicacion 1 o 2 para su uso en terapia.
  3. 4. Un anticuerpo biespedfico de la reivindicacion 1 o 2 para su uso en el tratamiento del lupus eritematoso sistemico, nefritis lupica, artritis reumatoide, psoriasis, espondilitis anquilosante, artritis psoriasica, smdrome
    10 de Sjogren primario o mieloma multiple.
  4. 5. Una composicion farmaceutica que comprende un anticuerpo biespecffico de la reivindicacion 1 o 2, y uno o mas vehfculos, diluyentes o excipientes farmaceuticamente aceptables.
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