ES2602111T3 - Inhibidores de acetil-CoA carboxilasas de N1-pirazoloespirocetona - Google Patents

Inhibidores de acetil-CoA carboxilasas de N1-pirazoloespirocetona Download PDF

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Abstract

Un compuesto de Fórmula (I)**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en la que R1 es alquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-5 C7), tetrahidrofuranilo o oxetanilo; en el que dicho alquilo (C1-C6) está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi (C1-C3), hidroxi, fluoro, fenilo, tetrahidrofuranilo u oxetanilo; R2 es hidrógeno, halo, alquilo (C1-C3) o ciano; R3 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C3); L es un enlace directo o un alquileno (C1-C6) en el que un carbono del alquileno (C1-C6) está opcionalmente reemplazado por -C(O)-, -C(O)NH-, -NHC(O)-, -O-, -S-, NH o N-alquilo (C1-C3); Z es CH2 u O; A1 y A2 son cada uno independientemente arilo (C6-C10), heteroarilo de 5 a 12 miembros o arilo heterocíclico condensado de 8 a 12 miembros; en el que dicho arilo (C6-C10), heteroarilo de 5 a 12 miembros o arilo heterocíclico condensado de 8 a 12 miembros están cada uno opcionalmente sustituidos con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente de alquilo (C1-C3), alcoxi (C1-C3), halo, amino, alquilamino (C1- C3), di-alquilamino (C1-C3), hidroxi, ciano y amido en el que la porción alquilo del alquilo (C1-C3), alcoxi (C1-C3), alquilamino (C1-C3) y di-alquilamino (C1-C3) está opcionalmente sustituida con uno a cinco fluoro; y en el que uno de A1 o A2 está sustituido con CO2R4, (C1-C6)CO2R4, tetrazolilo o tetrazolilo (C1-C6); y R4 es alquilo (C1-C8), cicloalquilo (C3-C8) o alquil (C1-C6)-cicloalquilo (C3-C8); o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

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DESCRIPCION
Inhibidores de acetil-CoA carboxilasas de Nl-pirazoloespirocetona Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a compuestos de pirazoloespirocetona sustituida que actuan como inhibidores de una o unas acetil-CoA carboxilasas y a su uso en el tratamiento de enfermedades, afecciones o trastornos modulados por la inhibicion de la enzima o enzimas acetil-CoA carboxilasas.
Antecedentes de la invencion
Las acetil-CoA carboxilasas (ACC) son una familia de enzimas que se encuentra en la mayona de las especies y se asocia a la smtesis de acidos grasos y al metabolismo a traves de la catalisis de la produccion de malonil-CoA a partir de acetil-CoA. En los mairnferos, se han identificado dos isoformas de la enzima ACC. La ACC1, que se expresa a altos niveles en los tejidos adipogenos, tales como la grasa y el Imgado, controla la primera etapa comprometida en la biosmtesis de acidos grasos de cadena larga. Si el acetil-CoA no se carboxila para formar malonil-CoA, se metaboliza a traves del ciclo de Krebs. La ACC2, un componente menor de la ACC hepatica pero la isoforma predominante en el corazon y el musculo esqueletico, cataliza la produccion de malonil-CoA en la superficie citosolica de la mitocondria y regula cuanto acido graso se utiliza en la p-oxidacion mediante la inhibicion de la carnitina palmitoil transferasa. Por tanto, mediante el aumento de la utilizacion de acidos grasos y evitando el aumento en la smtesis de novo de acidos grasos, la administracion cronica de un inhibidor de la ACC (ACC-I) tambien puede agotar las reservas de trigliceridos (TG) hepaticas y del tejido adiposo en sujetos obesos que consumen una dieta pobre o rica en grasas, conduciendo a una perdida selectiva de grasa corporal.
Los estudios realizados por Abu-Etheiga, y col., indican que la ACC2 desempena un papel esencial en el control de la oxidacion de acidos grasos y, como tal, proporcionana una diana en la terapia contra la obesidad y las enfermedades relacionadas con la obesidad, tales como la diabetes de tipo 2. Vease, Abu-Etheiga, L., y col., "Acetyl- CoA carboxylase 2 mutant mice are protected against obesity and diabetes induced by high-fat/high-carbohydrate diets" PNAS, 100(18) 10207-10212 (2003). Vease tambien, Choi, C.S., y col., "Continuous fat oxidation in acetyl-CoA carboxylase 2 knockout mice increases total energy expenditure, reduces fat mass, and improves insulin sensitivity PNAS, 104(42) 16480-16485 (2007).
Cada vez esta mas claro que la acumulacion hepatica de lfpidos provoca resistencia a la insulina hepatica y contribuye a la patogenia de la diabetes de tipo 2. Salvage, y col., demostraron que la ACC1 y la ACC2 estan las dos implicadas en la regulacion de la oxidacion de grasas en los hepatocitos mientras que la ACC1, la isoforma predominante en el Imgado de rata, es el unico regulador de la smtesis de acidos grasos. Ademas, en su modelo, se requiere la reduccion combinada de ambas isoformas para reducir significativamente los niveles de malonil-CoA hepatico, aumentar la oxidacion de grasas en el estado alimentado, reducir la acumulacion de lfpidos y mejorar la accion de la insulina in vivo. Por tanto, se demuestra que los inhibidores de la ACC1 y la ACC2 hepaticas pueden ser utiles en el tratamiento de la esteatosis hepatica no alcoholica (EHNA) y la resistencia a la insulina hepatica. Vease, Savage, D.B., y col., "Reversal of diet-induced hepatic steatosis and hepatic insulin resistance by antisense oligonucleotide inhibitors of acetyl-CoA carboxylases 1 and 2" J Clin Invest doi: 10.1172/JCI27300. Vease tambien, Oh, W., y col., "Glucose and fat metabolism in adipose tissue of acetyl-CoA carboxylase 2 knockout mice" PNAS, 102(5) 1384-1389 (2005).
En consecuencia, existe una necesidad de medicamentos que contengan inhibidores de ACC1 y/o ACC2 para tratar la obesidad y las enfermedades relacionadas con la obesidad (tales como, EHNA y la diabetes de tipo 2) mediante la inhibicion de la smtesis de acidos grasos y mediante el aumento de la oxidacion de acidos grasos.
Sumario de la invencion
Una primera realizacion de la presente invencion es un compuesto que tiene la estructura de Formula (I)
imagen1
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; en la que
R1 es alquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C7), tetrahidrofuranilo o oxetanilo; en el que dicho alquilo (C1-C6) esta opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi (C1-C3), hidroxi, fluoro, fenilo, tetrahidrofuranilo u oxetanilo;
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R2 es hidrogeno, halo, alquilo (C1-C3) o ciano;
R3 son cada uno independientemente hidrogeno o alquilo (C1-C3);
L es un enlace directo o un alquileno (C1-C6) en el que un carbono del alquileno (C1-C6) esta opcionalmente reemplazado por -C(O)-, -C(O)NH-, -NHC(O), O, S, NH o N-alquilo (C1-C3);
Z es CH2 u O;
A1 y A2 son cada uno independientemente arilo (C6-C10), heteroarilo de 5 a 12 miembros o arilo heterodclico condensado de 8 a 12 miembros; en el que dicho arilo (C6-C10), heteroarilo de 5 a 12 miembros o arilo heterodclico condensado de 8 a 12 miembros estan cada uno opcionalmente sustituidos con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente de alquilo (C1-C3), alcoxi (C1-C3), halo, amino, alquilamino (C1- C3), di-alquilamino (C1-C3), hidroxi, ciano y amido en el que la porcion alquilo del alquilo (C1-C3), alcoxi (C1-C3), alquilamino (C1-C3) y di-alquilamino (C1-C3) esta opcionalmente sustituida con uno a cinco fluoro; y en el que uno de A1 o A2 esta sustituido con CO2R4, (C-i-C6)CO2R4, tetrazolilo o tetrazolilo (C1-C6); y R4 es alquilo (C1-C8), cicloalquilo (C3-C8) o alquil (C1-C6)-cicloalquilo (C3-C8);
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Otra realizacion de la presente invencion es el compuesto de la realizacion inmediatamente anterior, en el que R1 es alquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C7) o tetrahidrofuranilo; R2 es hidrogeno o metilo; cada R3 es hidrogeno; y L es un enlace directo u O; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Otra realizacion de la presente invencion es el compuesto de la realizacion inmediatamente anterior, en el que R1 es alquilo (C2-C4); A1 y A2 son cada uno independientemente fenilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, piridinilo, pirimidinilo, indolilo, benzopirazinilo, benzoimidazolilo, benzoimidazolonilo, pirrolopiridinilo, pirrolopirimidinilo, pirazolopiridinilo, pirazolopirimidinilo, indazolilo, indolinonilo, naftiridinilo, quinolinilo, quinolinonilo, dihidroquinolinonilo, oxo-dihidroquinolinonilo, isoquinolinilo, isoquinolinonilo, dihidroisoquinonilo u oxo-
dihidroisoquinonilo, cada uno opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, cloro, metilo, metoxi, amino, metilamino, dimetilamino, amido o ciano; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Otra realizacion mas de la presente invencion es el compuesto de la realizacion inmediatamente anterior, en el que R1 es isopropilo o t-butilo; R2 es hidrogeno y R4 es hidrogeno; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Otra realizacion mas de la presente invencion es el compuesto de la realizacion inmediatamente anterior en el que A1 es fenilo, piridinilo, indazolilo, indolilo, benzoimidazolilo, pirrolopiridinilo o pirrolopirimidinilo; cada uno opcionalmente sustituido con un metilo, metoxi, metilamino o dimetilamino; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. Otra realizacion de la presente invencion es el compuesto de cualquiera de las dos realizaciones inmediatamente anteriores en el que A2 es fenilo sustituido con CO2H o tetrazolilo; y L es un enlace directo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Otra realizacion de la presente invencion es el compuesto de la realizacion inmediatamente anterior, en el que A1 es fenilo, indolilo o benzoimidazolilo opcionalmente sustituidos con metilo, o piridinilo opcionalmente sustituido con metilamino o dimetilamino; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Otra realizacion de la presente invencion es un compuesto seleccionado de: acido 4-((4-(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)fenoxi)metil)benzoico; acido 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-6-metoxipiridin-2-il)benzoico; acido 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-
1.4.6.7- tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-il)benzoico; acido 3-{5-[(1-terc- butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-(metilamino)piridin-2-il}benzoico; acido
3- {5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-(metilamino)piridin-2-
il}benzoico; acido 4'-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]bifenil-3- carboxflico; acido 4'-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]bifenil-3- carboxflico; acido 4-{5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6- (metilamino)piridin-2-il}benzoico; acido 4-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'- il)carbonil]-6-metoxipiridin-2-il}benzoico; acido 3-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'- piperidin]-1'-il)carbonil]-6-metoxipiridin-2-il}benzoico; acido 4-{4-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-
espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-metoxipiridin-2-il}benzoico; acido 3-{4-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-
tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-metoxipiridin-2-il}benzoico; acido 4-{5-[(1-terc-butil-7-oxo-
1.4.6.7- tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-(metilamino)piridin-2-il}benzoico; acido 4-{5-[(1- terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]6-(etilamino)piridin-2-il}benzoico; acido 4-{6-(etilamino)-5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]piridin-2- il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-
4- il}benzoico; acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-
indol-4-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]- 1H-indol-4-il}benzoico; acido 4-{2-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-
il)carbonil]-1H-indol-4-il}benzoico; acido 3-{5-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]- 1'-il)carbonil]-6-(etilamino)piridin-2-il}benzoico; acido 3-{6-(etilamino)-5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H- espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]piridin-2-il}benzoico; acido 3-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H- espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-5-(1,3-oxazol-2-il)benzoico; acido 4-({4-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-
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tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]fenoxi}metil)benzoico; acido 3-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4-piperidin]-1-il)carbonilj-5-(1,3-oxazol-2-il)benzoico; acido 3-{6-(isopropilamino)-5- [(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]piridin-2-il}benzoico; acido 4-{5- [(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4-piperidin]-1-il)carbonil]-6-(isopropilamino)piridin-2- il}benzoico; acido 4-{6-(isopropilamino)-5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'- il)carbonil]piridin-2-il}benzoico; acido 4-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1- il)carbonil]-1H-indazol-4-il}benzoico; acido 3-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4-piperidin]- 1'-il)carbonil]-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-il}benzoico; acido 4-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-
espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6oxo-1,6-dihidropiridin-2-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-lH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il}benzoico; acido 4-{2-[(1-isopropil- 7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1 'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1 '-il)carbonil]-lH-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il}benzoico; acido 4- {2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-4- il}benzoico; acido (5-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol- 4-il}-2-metoxifenil)acetico; acido 3-{6-(dimetilamino)-4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'- piperidin]-1'-il)carbonil]piridin-2-il}benzoico; acido 4-{6-(dimetilamino)-4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H- espiro[indazol-5,4-piperidin]-1-il)carbonil]piridin-2-il}benzoico; acido 4-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H- espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-
1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-il}benzoico; acido 3-{6-[(1- isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4- il}benzoico; acido 4-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol- 4-il}benzoico; acido 4-{2-[(l-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H- pirrolo[2,3-c]piridin-4-il}benzoico; acido 3-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1- il)carbonil]-1H-indol-4-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]- 1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-4-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol- 5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-lH-indol-6-il}benzoico; acido 4-{5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-
espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-[(2,2,2-trifluoroetil)amino]piridin-2-il}benzoico; acido 3-{5-[(1-isopropil-7- oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-(metilamino)piridin-3-il}benzoico; acido 4-{5- [(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-(metilamino)piridin-3- il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H- bencimidazol-4-il}benzoico; acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1- il)carbonil]-1H-bencimidazol-5-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'- piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-5-il}benzoico; acido 3-(6-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol- 5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-2-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)benzoico; acido 4-(6-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il-carbonil)-2-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)benzoico; acido 1 -isopropil-1 '- {[3'-(1H-tetrazol-5-il)bifenil-4-il]carbonil}-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(6H)-ona; y 1-ferc-butil-1'-{[3'-(1H- tetrazol-5-il)bifenil-4-il]carbonil}-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(6H)-ona; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Otra realizacion mas de la presente invencion es el compuesto de la realizacion inmediatamente anterior seleccionado de acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H- bencimidazol-4-il}benzoico; acido 4-{6-(dimetilamino)-4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4- piperidin]-1'-il)carbonil]piridin-2-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4- piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-4-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol- 5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il}benzoico; acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H- espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-lH-bencimidazol-5-il}benzoico; acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-5-il}benzoico; acido 3-(6-(1-isopropil-7- oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-2-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)benzoico; y acido 4- (6-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-2-metil-1H-benzo[d]imidazol-4- il)benzoico; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Otro aspecto de la presente invencion es una composicion farmaceutica que comprende una cantidad de un compuesto de formula (I) como se describe en cualquiera de las realizaciones; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un excipiente, diluyente o vehfculo farmaceuticamente aceptables. Preferentemente, la composicion comprende una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo. La composicion tambien puede contener al menos un agente farmaceutico adicional. Los agentes preferidos incluyen agentes antidiabeticos y/o agentes antiobesidad (que se describen a continuacion en el presente documento).
Otro aspecto mas de la presente divulgacion es un procedimiento para tratar una enfermedad, afeccion o trastorno mediados por la inhibicion de la enzima o enzimas acetil-CoA carboxilasas en un mairnfero que incluye la etapa de administrar a un mamffero, preferentemente un ser humano, que necesita dicho tratamiento, una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo o una composicion farmaceutica del mismo.
Las enfermedades, trastornos o afecciones mediados por los inhibidores de las acetil-CoA carboxilasas incluyen la diabetes de tipo II y las enfermedades relacionadas con la diabetes, tales como la esteatosis hepatica no alcoholica (EHNA), la resistencia a la insulina hepatica, la hiperglucemia, el smdrome metabolico, la tolerancia alterada a la
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glucosa, la neuropatfa diabetica, la nefropatfa diabetica, la retinopatfa diabetica, la obesidad, la dislipidemia, la hipertension, la hiperinsulinemia y el smdrome de resistencia a la insulina. Las enfermedades, trastornos o afecciones preferidos incluyen la diabetes de tipo II, la esteatosis hepatica no alcoholica (EHNA), la resistencia a la insulina hepatica, la hiperglucemia, la intolerancia a la glucosa, la obesidad y el smdrome de resistencia a la insulina. Son mas preferidas la diabetes de tipo II, la esteatosis hepatica no alcoholica (EHNA), la resistencia a la insulina hepatica, la hiperglucemia y la obesidad. La mas preferida es la diabetes de tipo II.
Se prefiere un procedimiento para el tratamiento (por ejemplo, el retraso de la progresion o la aparicion) de la diabetes de tipo 2 y de trastornos relacionados con la diabetes en animales que comprende la etapa de administrar a un animal que necesita dicho tratamiento una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo o una composicion del mismo.
Se prefiere adicionalmente un procedimiento para tratar la obesidad y trastornos relacionados con la obesidad en animales que comprende la etapa de administrar a un animal que necesita dicho tratamiento una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo o una composicion del mismo.
Se prefiere adicionalmente aun mas un procedimiento para tratar la esteatosis hepatica no alcoholica (EHNA) o la resistencia a la insulina hepatica en animales que comprende la etapa de administrar a un animal que necesita dicho tratamiento una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo o una composicion del mismo.
Los compuestos de la presente invencion puede administrarse en combinacion con otros agentes farmaceuticos (en particular, agentes antiobesidad y antidiabeticos que se describen en el presente documento a continuacion). La terapia de combinacion puede administrarse en forma de (a) una sola composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, al menos un agente farmaceutico adicional descrito en el presente documento y un excipiente, diluyente o vehmulo farmaceuticamente aceptables; o (b) dos composiciones farmaceuticas separadas que comprenden (i) una primera composicion que comprende un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un excipiente, diluyente o vehmulo farmaceuticamente aceptables y (ii) una segunda composicion que comprende al menos una agente farmaceutico adicional descrito en el presente documento y un excipiente, diluyente o vehmulo farmaceuticamente aceptables. Las composiciones farmaceuticas pueden administrarse simultaneamente o secuencialmente y en cualquier orden.
Breve descripcion de los dibujos
La FIGURA 1 proporciona una secuencia de ACC1 recombinante humana (SEQ. ID NO. 1) que puede emplearse en el ensayo Transcreener in vitro.
La FIGURA 2 proporciona una secuencia de ACC2 recombinante humana (SEQ. ID NO. 2) que puede emplearse en el ensayo Transcreener in vitro.
Descripcion detallada de la invencion
Definiciones
La frase "cantidad terapeuticamente eficaz" significa una cantidad de un compuesto de la presente invencion o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo que: (i) trata o previene la enfermedad, afeccion o trastorno en particular, (ii) atenua, mejora o elimina uno o mas smtomas de la enfermedad, afeccion o trastorno particular o (iii) previene o retrasa la aparicion de uno o mas smtomas de la enfermedad, afeccion o trastorno en particular descritos en el presente documento.
El termino "animal" se refiere a seres humanos (hombres o mujeres), animales de comparMa (por ejemplo, perros, gatos y caballos), animales fuente de alimentos, animales de zoologico, animales marinos, aves y otras especies animales similares. "Animales comestibles" se refiere a animales fuente de alimentos tales como vacas, cerdos, ovejas y aves de corral.
La frase "farmaceuticamente aceptable" indica que la sustancia o composicion debe ser compatible qmmicamente y/o toxicologicamente, con los otros ingredientes que comprenden una formulacion, y/o el mairnfero que se trate con la misma.
Los terminos "tratar", "trata" o "tratamiento" abarcan el tratamiento tanto preventivo, es decir, profilactico, como paliativo.
Los terminos "modulado" o "modular" o "modula" o "modulan", como se usan en el presente documento, a menos que se indique lo contrario, se refieren a la inhibicion de la enzima o enzimas acetil-CoA carboxilasas (ACC) con compuestos de la presente invencion.
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Los terminos "mediado" o "mediar" o "media" o "median", como se usan en el presente documento, a menos que se indique lo contrario, se refieren al (i) tratamiento o la prevencion de la enfermedad, afeccion o trastorno en particular, (ii) la atenuacion, la mejora o la eliminacion de uno o mas smtomas de la enfermedad, afeccion o trastorno particular o (iii) la prevencion o el retraso de la aparicion de uno o mas smtomas de la enfermedad, afeccion o trastorno en particular descritos en la presente memoria, mediante la inhibicion de la enzima o enzimas acetil-CoA carboxilasas (ACC).
La expresion "compuestos de la presente invencion" (a menos que se identifiquen espedficamente de otro modo) se refiere a compuestos de Formula (I) y a cualesquier sales farmaceuticamente aceptables de los compuestos, asf como, a todos los estereoisomeros (incluyendo los diastereomeros y los enantiomeros), tautomeros, isomeros conformacionales y compuestos marcados isotopicamente. Los hidratos y solvatos de los compuestos de la presente invencion se consideran composiciones de la presente invencion, en las que el compuesto esta en asociacion con agua o disolvente, respectivamente.
Las expresiones "alquilo (Ci-C6)" y "alquilo (C1-C3)" son grupos alquilo del numero especificado de carbonos, de uno a seis o de uno a tres carbonos, respectivamente, que pueden ser de cadena lineal o ramificada. Por ejemplo, la expresion "alquilo (C1-C3)" tiene de uno a tres carbonos y consiste en metilo, etilo, n-propilo e isopropilo.
La expresion "cicloalquilo (C3-C7)" significa un grupo cicloalquilo con tres a siete atomos de carbono y consiste en ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo. El termino "halo" significa fluoro, cloro, bromo o yodo. La expresion "arilo (C6-C10)" significa un grupo carbodclico aromatico que consiste en seis a diez atomos de carbono, tales como fenilo o naftilo.
La expresion "heteroarilo de 5 a 12 miembros" significa un grupo aromatico de cinco a doce miembros que contiene al menos un heteroatomo seleccionado de nitrogeno, oxfgeno y azufre. Como se usa en el presente documento el punto de union del grupo "heteroarilo de 5 a 12 miembros" esta en un atomo de carbono de ese grupo. El grupo "heteroarilo de 5 a 12 miembros" puede ser ya sea monodclico o bidclico. Las realizaciones preferidas de heteroarilos monodclicos incluyen, pero no se limitan a, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, piridinilo y pirimidinilo. Las realizaciones preferidas de heteroarilos bidclicos incluyen, pero no se limitan a, radicales de los siguientes sistemas de anillos:
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indolizina
17/-pirrolo[3,2-6]piridina
17/-indazol
17/-pirrolo[2,3-6]piridina
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//-imidazof 1,2-aJpiridma
//-pirrolo[ 1,2-a]pirazina
ff-rmidazo[l ,5-fl]piridina
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I //-bcnzo[t/|imidazol
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17/-pirazolo[4,3-£]piridina pirazolo[l,5-a]pirimidina
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17/-pirazolo[3,4-6]piridina
[/"yN
quinoxalina
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quinoliii-4( l//)-ona isoquinolin-1 (27/)-ona
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La expresion "arilo heterodclico condensado de 8 a 12 miembros" significa un sistema de anillos de 8 a 12 miembros en el que un anillo heterodclico no aromatico esta condensado con un anillo de arilo. Como se usa en el presente documento el punto de union del "arilo heterodclico condensado de 8 a 12 miembros" esta en un atomo de carbono de ese grupo. Una realizacion preferida incluye radicales de sistemas de anillos tales como:
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Los compuestos de la presente invencion pueden sintetizarse mediante vfas sinteticas que incluyen procedimientos analogos a aquellos bien conocidos en las tecnicas qmmicas, en particular a la luz de la descripcion contenida en el presente documento. Los materiales de partida estan en general disponibles de fuentes comerciales tales como Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI) o se preparan facilmente usando procedimientos bien conocidos por los expertos en la materia (por ejemplo, se preparan mediante los procedimientos descritos en general en Louis F. Fieser y Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-19, Wiley, Nueva York (1967-1999 ed.) o Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin, incluyendo suplementos (tambien disponibles a traves de la base de datos en lmea Beilstein)).
Con fines ilustrativos, los esquemas de reaccion que se representan a continuacion proporcionan vfas potenciales para sintetizar los compuestos de la presente invencion, asf como intermedios clave. Para una descripcion mas detallada de las etapas de reaccion individuales, vease la seccion de Ejemplos a continuacion. Los expertos en la materia apreciaran que pueden usarse otras vfas sinteticas para sintetizar los compuestos de la invencion. Aunque se representan materiales y reactivos de partida espedficos en los Esquemas y se analizan a continuacion, pueden ser facilmente sustituidos por otros materiales de partida y reactivos para proporcionar una diversidad de derivados y/o condiciones de reaccion. Ademas, muchos de los compuestos preparados mediante los procedimientos que se describen a continuacion pueden modificarse adicionalmente a la luz de la presente divulgacion usando la qmmica convencional bien conocida por los expertos en la materia.
En la preparacion de compuestos de la presente invencion, puede ser necesaria la proteccion del grupo funcional distante (por ejemplo, una amina primaria o secundaria) de los intermedios. La necesidad de dicha proteccion variara dependiendo de la naturaleza del grupo funcional distante y de las condiciones de los procedimientos de preparacion. Los grupos protectores de amino adecuados (NH-gP) incluyen acetilo, trifluoroacetilo, t-butoxicarbonilo (BOC), benciloxicarbonilo (CBz) y 9-fluorenilmetilenoxicarbonilo (Fmoc). De forma similar, un "grupo protector de hidroxi" se refiere a un sustituyente de un grupo hidroxi que bloquea o protege la funcionalidad hidroxi. Los grupos protectores de hidroxilo adecuados (O-gP) incluyen, por ejemplo, alilo, acetilo, sililo, bencilo, parametoxibencilo, tritilo y similares. La necesidad de dicha proteccion se determina facilmente por un experto en la materia. Para una descripcion general de grupos protectores y su uso, vease T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Nueva York, 1991.
Los siguientes esquemas de reaccion, del Esquema de Reaccion I al Esquema de Reaccion proporcionan procedimientos representativos que se usan para preparar compuestos de formula (I). Ha de entenderse que estos esquemas de reaccion han de interpretarse de una manera no limitante y que pueden usarse variaciones razonables de los procedimientos representados para preparar compuestos de formula (I).
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Esquema de reaccion I
A2-L-A1-C(0)gS
A2'-B(OR)2
B(OR)2
El Esquema de Reaccion I proporciona tres vfas de smtesis a partir de intermedios penultimos a compuestos de formula (I). En la Ecuacion 1, el compuesto de Formula (II) se hace reaccionar con A2-L-A1-C(O)gS, en la que gS es un grupo saliente apropiado tal como hidroxi o haluro, para proporcionar el compuesto de Formula (I). Por ejemplo, el compuesto (I) puede formarse usando una reaccion de acoplamiento de peptidos convencional con el acido carboxHico deseado (A2-L-A1-CO2H, en la que A2 representa ya sea el propio A2 o una version protegida de A2 que puede desprotegerse para proporcionar A2). Por ejemplo, el intermedio de espiropiperidina (II) y acido carboxflico (A2-L-A1-CO2H) pueden acoplarse mediante la formacion de un ester de acido carboxflico activado, tal como poniendo en contacto el acido carboxflico (A2-L-A1-CO2H) con un reactivo de acoplamiento de peptidos, tal como hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU) o clorhidrato de 1 -etil-3-(3- dimetillaminopropil)carbodiimida (EDC-HCl), en presencia o ausencia de un agente de activacion, tal como hidroxibenzotriazol (HOBt) y en presencia de una base adecuada, tal como N,N-diisopropiletilamina (DIEA), trietilamina o N-metilmorfolina (NMM), en un disolvente adecuado tal como THF y/o DMF o diclorometano y despues poniendo en contacto el ester de acido carboxflico activado con el derivado de espiropiperidina (IIa) para formar un compuesto de Formula (I). La reaccion puede realizarse normalmente a 0 °C a 90 °C durante un periodo de 1 a 24 horas.
Como alternativa, los compuestos de Formula (I) pueden formarse convirtiendo primero el acido carboxflico (A2-L-A1- CO2H) en un cloruro de acido (A2-L-A1-COCl), tal como mediante reaccion con cloruro de tionilo y despues haciendo reaccionar el cloruro de acido con el derivado de espiropiperidina (IIa) en presencia de una base apropiada tal como trietilamina en un disolvente apropiado tal como diclorometano, para formar un compuesto de Formula (I). Otro procedimiento alternativo mas implica el tratamiento del acido carboxflico (A2-L-A1-CO2H) con 2-cloro-4,6- dimetoxitriazina en presencia de una base adecuada, tal como N-metilmorfolina en un disolvente adecuado, tal como THF y/o DMF. Al ester activado se le anade una solucion del derivado de espiropiperidina (IIa) y base, tal como N- metilmorfolina, en un disolvente adecuado, tal como THF y/o DMF que proporciona el compuesto de formula (I).
Las reacciones segunda y tercera representadas en el Esquema de reaccion I representan la preparacion del compuesto de Formula (I) usando una reaccion de acoplamiento de tipo Suzuki. Las reacciones de acoplamiento de tipo Suzuki pueden realizarse de acuerdo con procedimientos conocidos por los expertos en la materia tales como
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los descritos en Miyaura, N.; Suzuki, A. Chem. Rev. 1995, 95, 2457-2483. En la Ecuacion 2 del Esquema I, el compuesto de Formula (II') en el que gS representa un grupo saliente apropiado tal como triflato, cloro, bromo o yodo, se hace reaccionar con un boronato apropiadamente sustituido, A2-B(OR)2. La reaction se realiza normalmente en presencia de un catalizador de paladio y una base en un disolvente apropiado. El boronato puede estar ya sea en forma de acido boronico o ester boronico. En la Ecuacion 3 del Esquema I el compuesto de boronato de Formula (II") se hace reaccionar con un compuesto adecuadamente sustituido A2-Lg en el que gS representa un grupo saliente apropiado tal como triflato, cloro, bromo o yodo. Ha de apreciarse que estas reacciones pueden realizarse cuando los restos A1 y A2 en los compuestos de formulas (II') y (II") pueden contener un grupo acido carboxilico protegido, que posteriormente puede desprotegerse para proporcionar un grupo acido en el compuesto de formula (I).
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El Esquema de Reaccion IA esboza los procedimientos generales se podrian usar para proporcionar compuestos de la presente invention que tengan la Formula (Ia), que son compuestos de Formula (I) en la que R2 y cada R3 son cada uno hidrogeno y Z es CH2. El derivado de espiropiperidina protegida (VIIIa) puede formarse mediante el tratamiento del aldehido de piperidina apropiadamente protegido (Xa) con metil vinil cetona (IXa). El grupo gP representa un grupo protector de amina adecuado y es preferentemente N-terc-butoxicarbonilo (BOC) o carbobenciloxi (Cbz). Esta reaccion puede realizarse en presencia de hidroxido de potasio etanolico de acuerdo con un procedimiento analogo al descrito por Roy, S. y col., Chem. Eur. J. 2006, 12, 3777-3788 en 3786. Como alternativa, la reaccion puede realizarse en presencia de acido para-toluenosulfonico (pTSA) en benceno a reflujo para proporcionar el producto deseado (VIIIa). Despues, el derivado de espiropiperidina (VIIIa) puede hacerse reaccionar con tr/s-(N,N-dimetilamino)metano en tolueno a reflujo para proporcionar el derivado de espiropiperidina funcionalizado con enamina (VIIa). Despues, el compuesto (VIIa) se hace reaccionar con un derivado de hidrazina apropiado R1NHNH2 en presencia de acido acetico en etanol a reflujo para proporcionar el compuesto ciclado deseado de formula (VIa) (vease Murali Dhar, T.G. y col. B/oorg. Med. Chem. Lett. 2007, 17, 5019-5024 en 5020. Despues, el compuesto de formula (VIa), puede tratarse con N-bromosuccinimida (NBS) en presencia de agua en THF para proporcionar el correspondiente bromo hidroxi derivado de formula (Va). Despues, el bromo hidroxi derivado (Va) se oxida con reactivo de Jones en un procedimiento analogo al proporcionado en Wolinsky, J. y col., J. Org. Chem. 1978, 43(5), 875-881 en 876, 879 para proporcionar el a-bromo ceto derivado de formula (IVa). Despues, el compuesto de formula (IVa) puede desbromarse usando procedimientos convencionales tales como el tratamiento con cinc y acido acetico o, como alternativa, cinc en presencia de cloruro de amonio acuoso para proporcionar el compuesto de formula (IIIa).
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Despues, el compuesto de formula (Ilia) puede desprotegerse para proporcionar el derivado de espiropiperidina libre de formula (IIa) usando procedimientos convencionales que dependen de que grupo protector gP se ha empleado. Por ejemplo, cuando gP representa terc-butiloxicarbonilo (Boc), pueden usarse condiciones de desproteccion convencionales de acido fuerte tal como acido clorMdrico 4 N en dioxano o acido trifluoroacetico en un disolvente apropiado tal como diclorometano para eliminar el grupo BOC. Cuando gP representa carbobenciloxi (Cbz), puede emplearse hidrogenacion sobre paladio sobre carbono en etanol o tratamiento con formiato de amonio en presencia de paladio sobre carbono en etanol para realizar la desproteccion.
Despues, el derivado de espiropiperidina de Formula (IIa) puede acilarse mediante el empleo de procedimientos convencionales para proporcionar el compuesto de Formula (la). Despues, por ejemplo, el compuesto (la) puede formarse usando una reaccion de acoplamiento de peptidos convencional con el acido carboxflico deseado (A2-L-A1- CO2H, en la que A2 representa o bien el propio A2 o una version protegida de A2 que puede desprotegerse para proporcionar A2). Por ejemplo, el intermedio de espiropiperidina (IIa) y el acido carboxflico (A2-L-A1-CO2H) pueden acoplarse mediante la formacion de un ester de acido carboxflico activado, tal como poniendo en contacto el acido carboxflico (A2-L-A1-CO2H) con un reactivo de acoplamiento de peptidos, tal como hexafluorofosfato de O-(7- azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU) o clorhidrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC-HCl), en presencia o ausencia de un agente de activacion, tal como hidroxibenzotriazol (HOBt) y en presencia de una base adecuada, tal como N,N-diisopropiletilamina (DIEA), trietilamina o la N-metilmorfolina (NMM), en un disolvente adecuado tal como THF y/o DMF o diclorometano y despues poniendo en contacto el ester de acido carboxflico activado con el derivado de espiropiperidina (IIa) para formar un compuesto de Formula (Ia).
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Como alternativa, pueden formarse compuestos de Formula (Ia) convirtiendo primero el acido carboxflico (A -L-A - CO2H) en un cloruro de acido (A2-L-A1-COCl), tal como mediante reaccion con cloruro de tionilo y despues haciendo reaccionar el cloruro de acido con el derivado de espiropiperidina (IIa) en presencia de una base apropiada tal como trietilamina en un disolvente apropiado tal como diclorometano para formar un compuesto de Formula (Ia). Otro procedimiento alternativo mas supone el tratamiento del acido carboxflico (A2-L-A1-CO2H) con 2-cloro-4,6- dimetoxitriazina en presencia de una base adecuada, tal como N-metilmorfolina en un disolvente adecuado, tal como THF y/o DMF. Al ester activado se le anade una solucion del derivado de espiropiperidina (IIa) y base, tal como N- metilmorfolina, en un disolvente adecuado, tal como THF y/o DMF que proporciona el compuesto de formula (Ia).
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El Esquema de Reaccion II proporciona una smtesis alternativa de compuestos de formula (Ia) partiendo del intermedio de formula (VIa). El compuesto de formula (VIa) se trata con N-bromosuccinimida (NBS) en presencia de metanol en THF (Nishimura, T. y col. Org. Lett. 2008, 10(18), 4057-4060 en 4059) para proporcionar el derivado de metoxi bromo espiropiperidina de formula (Vb). La elimination inducida por base del compuesto (Vb) mediante el tratamiento con una base fuerte tal como terc-butoxido de potasio en THF proporciona el compuesto de formula (IVb) que despues se trata con un acido fuerte tal como acido clorhidrico 2 N en THF para proporcionar el compuesto de formula (IIIa). Despues, el compuesto (IIIa) puede desprotegerse y acilarse como se ha descrito previamente en el Esquema de Reaccion I para proporcionar compuestos de formula (Ia).
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aproximadamente dos equivalentes de N-bromosuccinimida en presencia de metanol para proporcionar el derivado 5 de dibromo metoxi espiropiperidina de formula (Vc). Despues, el compuesto (Vc) se somete a condiciones de elimination mediante tratamiento con una base fuerte tal como ferc-butoxido de potasio en un disolvente apropiado para proporcionar el compuesto de formula (IVc). El tratamiento del compuesto de formula (IVc) con un acido fuerte tal como acido clorhidrico 2 N proporciona el compuesto de formula (IIIb). La desproteccion del compuesto (IIIb) para proporcionar el compuesto (IIb), seguida de la acilacion para proporcionar el compuesto de formula (Ib) puede 10 realizarse como se ha descrito previamente para el Esquema de Reaction I.
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Esquema de reaccion IV
catalizador de Pd \ K2C03, H20 1
(MeO)3B, DMF /
desproteger
desproteger r1
catalizador de Pd 1 Zn, ZnCN
acilar
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base fuerte R3gS
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El Esquema de Reaccion IV representa la preparacion de otros compuestos determinados dentro de la formula (I) a partir de algunos de los intermedios representados anteriormente. La primera reaccion del Esquema IV muestra la introduccion de un grupo metilo en la posicion R2 haciendo reaccionar el derivado de bromo espiropiperidina de formula (IIIb) con trimetoxiborato en presencia de un catalizador de paladio apropiado, tal como tetraquis trifenilfosfina paladio en presencia de carbonato de potasio y agua para proporcionar (IIIc). Pueden introducirse otros grupos alquilo en la posicion R2 de una manera analoga. Despues, el compuesto de formula (IIIc) puede desprotegerse y acilarse como se ha descrito previamente. La segunda reaccion del Esquema de Reaccion IV representa la introduccion de un grupo ciano en la posicion R2 El compuesto de bromo espiropiperidina (IIIb) se hace reaccionar con cianuro de cinc en presencia de cinc y un catalizador de paladio apropiado para proporcionar (IIId) que despues puede desprotegerse y acilarse para proporcionar un compuesto de formula (Id). La tercera reaccion del Esquema IV representa la introduccion de un grupo apropiado en la posicion R3 del compuesto (IIIe). El compuesto (IIIe) se desprotona con una base fuerte, tal como hexametildisilazida de litio (LHMDS) en condiciones anhidras apropiadas en un disolvente apropiado, preferentemente a baja temperatura. El enolato formado de este modo despues se hace reaccionar con un electrofilo apropiado R3gS en el que gS representa un grupo saliente apropiado (tal como un haluro cuando R3gS es un haluro de alquilo) para proporcionar (IIIf) en la que R3 es un grupo apropiado tal como un grupo alquilo. Despues, la desprotonacion de (IIIf) y la reaccion con otro R3gS pueden realizarse de nuevo si se desea para preparar un compuesto de di-R3 (IIIf) en el que los grupos R3 pueden ser iguales o diferentes. Despues, el compuesto de formula (IIIf) puede desprotegerse y acilarse como se ha descrito previamente para proporcionar el compuesto de formula (Ie).
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El Esquema de Reaccion VI proporciona la smtesis de compuestos dentro de la Formula (I) en la que R1 es isopropilo, R2 es hidrogeno, cada R3 es hidrogeno y Z es oxfgeno. Se hace reaccionar 1-(1-(bencil4-metoxi)-4- hidroxi-1H-pirazol-3-il)etanona con 1-bencil piperidin-4-ona en metanol a reflujo en presencia de pirrolidina para proporcionar el espiro-compuesto diprotegido (IIIg). Despues, el grupo para-metoxibencilo de (IIIg) se elimina, tras el tratamiento con acido trifluoroacetico en dicloroetano a una temperatura elevada, tal como 90 °C, para proporcionar el derivado de N-1(H)pirazol protegido con bencilo (IIIh). Despues, este compuesto derivado de N-1(H)pirazol protegido con bencilo se somete a condiciones de acoplamiento de Mitsonubo usando isopropanol en presencia de Di-t-butilazodicarboxilato (DBAD) y trifenilfosfina en tetrahidrofurano para proporcionar el compuesto de N-1- isopropilo protegido con bencilo (IIIi) correspondiente. Despues, el compuesto de N-1-isopropilo protegido con bencilo puede desbencilarse tras el tratamiento con cloroformiato de a-cloroetilo (ACE-Cl) y metanol para proporcionar el derivado de espiropiperidina libre (IIc) correspondiente. Despues, el derivado de espiropiperidina libre (IIc) puede acilarse como se ha descrito previamente para proporcionar los compuestos de Formula (If).
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El Esquema de Reaccion VII representa la hidrolisis de un intermedio acido protegido de Formula (Ij) para proporcionar el compuesto de Formula (Ig) que lleva acido. Por ejemplo, el compuesto de Formula (Ij) en el que R representa un grupo protector acido apropiado tal como f-butilo o para-metoxibencilo puede tratarse con un acido 5 fuerte tal como acido trifluoroacetico o acido clorhfdrico en un disolvente apropiado tal como diclorometano para proporcionar el compuesto de Formula (Ig). En este Esquema de Reaccion el grupo acido se muestra anexionado a A2 y el acido tomado junto con A2 representan el grupo A2 en el compuesto de Formula (I). Ha de apreciarse que el grupo acido tambien puede ser parte de A1 de una manera similar.
Esquema de reaccion VIII
(Ec. 1)
,A
Ra02C^Al
\ „ + , _ acoplamiento de Suzuki
X C02R (RO)2B' 'co2Rb ----------------► A2
NC02Rb
X = haluro o sulfonato (Ec. 2)
A1
X' 'C02Ra
X = haluro o sulfonato
m acoplamiento de Suzuki A2
(RO)2B \-N ------------------ \—N
|\L
N H
Ra02C^Al
N>
N
10 El Esquema de Reaccion VIII proporciona procedimientos utiles para la preparacion de ciertos intermedios utiles en la preparacion de compuestos de Formula (I). La Ecuacion 1 del Esquema de Reaccion VIII proporciona un acoplamiento de tipo Suzuki entre un derivado de acido apropiado X-A1-CO2Ra con un boronato apropiado (RO)2BA2-CO2Rb en la que Ra y Rb estan protegidos diferencialmente o uno de Ra y Rb es hidrogeno, X es un haluro o sulfonato tal como triflato y R es hidrogeno o un alquilo tal como metilo. La Ecuacion 2 del Esquema de Reaccion 15 VIII proporciona otro acoplamiento de tipo Suzuki entre X-A1-CO2Ra con un boronato apropiado (RO)2B-A2- tetrazolilo. El acoplamiento de tipo Suzuki puede realizarse como se ha descrito previamente en el Esquema de Reaccion I. Despues, el compuesto intermedio final de la Ecuacion 1 y 2 en el que Ra es hidrogeno puede usarse en reacciones de tipo acilacion con un compuesto de Formula (II) como se ha descrito en la Ecuacion 1 del Esquema de Reaccion I.
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El Esquema de Reaccion IX proporciona otro procedimiento util para la preparacion de ciertos intermedios utiles para preparar compuestos de Formula (I). La Ecuacion 1 del Esquema de Reaccion IX representa la reaccion del acido 2,6-dicloronicotmico con un boronato apropiadamente sustituido (donde R es hidrogeno o alquilo tal como metilo y Rb es normalmente un grupo protector de acido tal como f-butilo) en condiciones de acoplamiento de tipo Suzuki para proporcionar el acido nicotmico 2-cloro-6-sustituido. Despues, el acido nicotmico 2-cloro-6-sustituido puede hacerse reaccionar con un nucleofilo HY-R' apropiado (en el que R' es normalmente alquilo opcionalmente sustituido con halo, R" es normalmente alquilo tal como metilo, etilo, propilo o isopropilo) para proporcionar el derivado de acido nicotmico disustituido. Como alternativa, la reaccion puede realizarse haciendolo reaccionar primero con el nucleofilo HY-R' seguido del acoplamiento de tipo Suzuki con el boronato como se ha descrito anteriormente. Despues, el derivado de acido nicotmico disustituido puede emplearse en reacciones de acilacion con compuestos de Formula (II) seguidas de desproteccion en caso necesario como se ha descrito en el Esquema de Reaccion I para proporcionar compuestos de Formula (I) en la que A1 es el resto de piridina sustituida segun se muestra. La ecuacion 2 del Esquema de Reaccion IX representa la reaccion de acido 5-bromo-6-cloronicotmico con un nucleofilo HY-R' apropiado para proporcionar el derivado de acido nicotmico 5-bromo-6-sustituido que despues se hace reaccionar con un boronato apropiado en condiciones de acoplamiento de tipo Suzuki para proporcionar el derivado de acido nicotmico 5,6-disustituido. Despues, el derivado de acido nicotmico 5,6-disustituido puede emplearse en reacciones de acilacion con compuestos de Formula (II) seguidas de desproteccion en caso necesario como se ha descrito anteriormente en el Esquema de Reaccion I para proporcionar compuestos de Formula (I) en la que A1 es el resto de piridina sustituida segun se muestra.
Los compuestos de la presente invencion pueden aislarse y usarse en sf o en forma de sus sales farmaceuticamente aceptables. De acuerdo con la presente invencion, los compuestos con multiples atomos de nitrogeno basicos pueden formar sales con un numero variable de equivalentes ("eq.") de acido. Se entendera por los profesionales que todas dichas sales estan dentro del ambito de la presente invencion.
Las sales farmaceuticamente aceptables, como se usan en el presente documento en relacion con los compuestos de la presente invencion, incluyen sales inorganicas y organicas farmaceuticamente aceptables de dicho compuesto. Estas sales pueden prepararse in situ durante el aislamiento y la purificacion finales de un compuesto o haciendo reaccionar por separado el compuesto del mismo, con un acido organico o inorganico adecuado y aislando la sal formada de este modo. Las sales representativas incluyen, pero no se limitan a, las sales de hidrobromuro, clorhidrato, hidroyoduro, sulfato, bisulfato, nitrato, acetato, trifluoroacetato, oxalato, besilato, palmitato, pamoato, malonato, estearato, laurato, malato, borato, benzoato, lactato, fosfato, hexafluorofosfato, bencenosulfonato, tosilato, formiato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato y laurilsulfonato y similares. Estas tambien pueden incluir cationes a base de los metales alcalinos y alcalinoterreos, tales como sodio, litio, potasio, calcio, magnesio y similares, asf como cationes de amonio no toxico, amonio
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cuaternario y amina incluyendo, pero no limitados a, amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamonio, dimetilamonio, trimetilamonio, trietilamonio, etilamonio y similares. Para ejemplos adicionales vease, por ejemplo, Berge, y col., J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977).
Ciertos compuestos de la presente invencion pueden existir en mas de una forma cristalina. Los polimorfos de los compuestos de Formula (I) y las sales de los mismos (incluidos los solvatos e hidratos) forman parte de la presente invencion y pueden prepararse mediante la cristalizacion de un compuesto de la presente invencion en diferentes condiciones. Por ejemplo, usando diferentes disolventes o diferentes mezclas de disolventes para la recristalizacion; cristalizacion a diferentes temperaturas; diversos modos de enfriamiento, que van desde el enfriamiento muy rapido al muy lento durante la cristalizacion. Tambien pueden obtenerse polimorfos calentando o fundiendo un compuesto de la presente invencion seguido de un enfriamiento gradual o rapido. La presencia de polimorfos puede determinarse mediante espectroscopfa de resonancia magnetica nuclear (RMN) de sonda solida, espectroscopfa de infrarrojos (IR), calorimetna diferencial de barrido, difraccion de rayos X de polvo u otras tecnicas de este tipo.
La presente invencion tambien incluye compuestos marcados isotopicamente, que son identicos a los descritos por la Formula (1), salvo por el hecho de que uno o mas atomos estan reemplazados por un atomo que tiene una masa atomica o un numero masico diferentes de la masa atomica o el numero masico que se encuentran habitualmente en la naturaleza. Los ejemplos de isotopos que pueden incorporarse en los compuestos de la invencion incluyen isotopos de hidrogeno, carbono, nitrogeno, oxfgeno, azufre y fluor, tales como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 35S, Cl, I, I y F respectivamente. Ciertos compuestos marcados isotopicamente de la presente invencion, por ejemplo aquellos en los que se incorporan isotopos radiactivos tales como 3H y 14C, son utiles en ensayos de distribucion tisular de farmaco y/o sustrato. Se prefieren en particular los isotopos de tritio (es decir, 3H) y de carbono-14 (es decir, 14C), por su facilidad de preparacion y detectabilidad. Adicionalmente, la sustitucion con isotopos mas pesados tales como deuterio (es decir, 2H), puede proporcionar ciertas ventajas terapeuticas que son resultado de una mayor estabilidad metabolica, por ejemplo un aumento de la semivida in vivo o menores requisitos de dosificacion y, por tanto, puede preferirse en algunas circunstancias. Los compuestos marcados isotopicamente de la presente invencion pueden prepararse en general realizando los procedimientos que se describen en los Esquemas y/o en los Ejemplos a continuacion, sustituyendo un reactivo no marcado isotopicamente por un reactivo marcado isotopicamente facilmente disponible.
Los compuestos de la presente invencion pueden contener centros estereogenicos. Estos compuestos pueden existir como mezclas de enantiomeros o como enantiomeros puros. Cuando un compuesto incluye un centro estereogenico, los compuestos pueden resolverse en los enantiomeros puros mediante procedimientos conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo mediante formacion de sales diastereoisomericas que pueden separarse, por ejemplo, mediante cristalizacion; formacion de derivados estereoisomericos o complejos que pueden separarse, por ejemplo, mediante cristalizacion, cromatograffa de gas-lfquido o lfquida; reaccion selectiva de un enantiomero con un reactivo espedfico para el enantiomero, por ejemplo esterificacion enzimatica; o cromatograffa de gas-lfquido o lfquida en un entorno quiral, por ejemplo sobre un soporte quiral, por ejemplo sflice, con un ligando quiral unido o en presencia de un disolvente quiral. Se apreciara que cuando el estereoisomero deseado se convierte en otra entidad qmmica mediante uno de los procedimientos de separacion descritos anteriormente, se requiere una etapa adicional para liberar la forma enantiomerica deseada. Como alternativa, los estereoisomeros espedficos pueden sintetizarse mediante el uso de un material de partida opticamente activo, mediante smtesis asimetrica usando reactivos, sustratos, catalizadores o disolventes opticamente activos o convirtiendo un estereoisomero en el otro mediante transformacion asimetrica.
Ciertos compuestos de la presente invencion pueden existir en diferentes formas conformacionales estables que pueden ser separables. La asimetna torsional debida a la rotacion restringida alrededor de un enlace sencillo asimetrico, por ejemplo debida al impedimento esterico o la tension anular, puede permitir la separacion de diferentes conformeros. Los compuestos de la presente invencion incluyen adicionalmente cada isomero conformacional de los compuestos de Formula (1) y mezclas de los mismos.
Los compuestos de la presente invencion son utiles para tratar enfermedades, afecciones y/o trastornos modulados por la inhibicion de la enzima o enzimas acetil-CoA carboxilasas (en particular, ACC1 y ACC2); por tanto, otra realizacion de la presente invencion es una composicion farmaceutica que comprende una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion y un excipiente, diluyente o vefuculo farmaceuticamente aceptables. Los compuestos de la presente invencion (incluyendo las composiciones y procedimientos utilizados en los mismos) tambien pueden usarse en la fabricacion de un medicamento para las aplicaciones terapeuticas que se describen en el presente documento.
Una formulacion tfpica se prepara mezclando un compuesto de la presente invencion y un vefuculo, diluyente o excipiente. Los vefuculos, diluyentes y excipientes adecuados son bien conocidos por los expertos en la materia e incluyen materiales tales como carbohidratos, ceras, polfmeros hidrosoluble y/o hinchables, materiales hidrofilos o hidrofobos, gelatina, aceites, disolventes, agua y similares. El vefuculo, diluyente o excipiente en particular utilizado dependera de los medios y el fin para el que se aplica el compuesto de la presente invencion. Los disolventes se seleccionan generalmente basandose en disolventes reconocidos por los expertos en la materia como seguros (GRAS, del ingles generally recognized as safe) para administrarse a un mamffero. En general, los disolventes seguros son disolventes acuosos atoxicos tales como el agua y otros disolventes atoxicos que son solubles o
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miscibles en agua. Los disolventes acuosos adecuados incluyen agua, etanol, propilenglicol, polietilenglicoles (por ejemplo, PEG400, PEG300), etc. y mezclas de los mismos. Las formulaciones tambien pueden incluir uno o mas tampones, agentes estabilizantes, tensioactivos, agentes humectantes, agentes lubricantes, emulsionantes, agentes suspensores, conservantes, antioxidantes, agentes opacificantes, sustancias deslizantes, adyuvantes de procesamiento, colorantes, edulcorantes, agentes perfumantes, agentes aromatizantes y otros aditivos conocidos para proporcionar una presentacion elegante del farmaco (es decir, un compuesto de la presente invencion o una composicion farmaceutica del mismo) o ayuda en la fabricacion del producto farmaceutico (es decir, el medicamento).
Las formulaciones pueden prepararse usando procedimientos de disolucion y mezcla convencionales. Por ejemplo, la sustancia farmacologica a granel (es decir, el compuesto de la presente invencion o la forma estabilizada del compuesto (por ejemplo, un complejo con un derivado de ciclodextrina u otro agente de complejacion conocido)) se disuelve en un disolvente adecuado en presencia de uno o mas de los excipientes descritos anteriormente. La velocidad de disolucion de los compuestos poco hidrosolubles puede potenciarse mediante el uso de una dispersion secada por pulverizacion, tal como las descritas por Takeuchi, H., y col. en "Enhancement of the dissolution rate of a poorly water-soluble drug (tolbutamide) by a spray-drying solvent depostion method and disintegrants" J. Pharm. Pharmacol., 39, 769-773 (1987); y el documento EP0901786 B1 (US2002/009494). El compuesto de la presente invencion se formula normalmente en formas de dosificacion farmaceuticas para proporcionar una dosificacion facilmente controlable del farmaco y para proporcionar al paciente un producto elegante y facilmente manipulable.
Las composiciones farmaceuticas tambien incluyen solvatos e hidratos de los compuestos de la presente invencion. El termino "solvato" se refiere a un complejo molecular de un compuesto representado por la Formula (I) (incluyendo las sales farmaceuticamente aceptables del mismo) con una o mas moleculas de disolvente. Dichas moleculas de disolvente son las utilizadas habitualmente en la tecnica farmaceutica, que se sabe que son inocuas para el receptor, por ejemplo, agua, etanol, etilenglicol y similares. El termino "hidrato" se refiere al complejo en el que la molecula de disolvente es agua. Los solvatos y/o hidratos existen preferentemente en forma cristalina. Pueden usarse otros disolventes en forma de solvatos intermedios en la preparacion de solvatos mas deseables, tales como metanol, metil t-butil eter, acetato de etilo, acetato de metilo, (S)-propilenglicol, (R)-propilenglicol, 1,4-butino-diol y similares.
La composicion farmaceutica (o formulacion) para la aplicacion pueden empaquetarse en una diversidad de formas, dependiendo del procedimiento utilizado para la administracion del farmaco. Generalmente, un artfculo para la distribucion incluye un recipiente que tiene depositada en el mismo la formulacion farmaceutica en una forma apropiada. Los recipientes adecuados son bien conocidos por los expertos en la materia e incluyen materiales tales como frascos (de plastico y vidrio), sobres, ampollas, bolsas de plastico, cilindros metalicos y similares. El recipiente tambien puede incluir un ensamblaje con cierre inviolable para evitar el acceso indiscreto al contenido del paquete. Ademas, sobre el recipiente se ha depositado una etiqueta que describe el contenido del recipiente. La etiqueta puede incluir tambien advertencias apropiadas.
La presente divulgacion proporciona adicionalmente un procedimiento de tratamiento de enfermedades, afecciones y/o trastornos modulados por la inhibicion de la enzima o enzimas acetil-CoA carboxilasas en un animal que incluye administrar a un animal que necesita dicho tratamiento una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de la presente invencion o una composicion farmaceutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invencion y un excipiente, diluyente o vehfculo farmaceuticamente aceptables. El procedimiento es particularmente util para el tratamiento de enfermedades, afecciones y/o trastornos que se benefician de la inhibicion de la enzima o enzimas acetil-CoA carboxilasas.
Un aspecto de la presente divulgacion es el tratamiento de la obesidad y los trastornos relacionados con la obesidad (por ejemplo, el sobrepeso, el aumento de peso o el mantenimiento del peso).
La obesidad y el sobrepeso se definen generalmente mediante el mdice de masa corporal (IMC), que se relaciona con la grasa corporal total y estima el riesgo relativo de enfermedad. El IMC se calcula mediante el peso en kilogramos dividido por la altura en metros cuadrados (kg/m2). El sobrepeso se define normalmente como un IMC de 25-29,9 kg/m2 y la obesidad se define normalmente como un IMC de 30 kg/m2. Vease, por ejemplo, National Heart, Lung, and Blood Institute, Clinical Guidelines on the Identification, Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults, The Evidence Report, Washington, DC: Departamento de Salud y Servicios Sociales de los EE.UU., publicacion de los NIH de los EE.UU. n.° 98-4083 (1998).
Otro aspecto de la presente divulgacion es el tratamiento o el retraso de la progresion o aparicion de la diabetes o de trastornos relacionados con la diabetes, incluyendo la diabetes de tipo 1 (diabetes mellitus insulinodependiente, tambien denominada "DMID") y de tipo 2 (diabetes mellitus no insulinodependiente, tambien denominada "DMNID"), la intolerancia a la glucosa, la resistencia a la insulina, la hiperglucemia y las complicaciones de la diabetes (tales como la aterosclerosis, la cardiopatfa coronaria, el ictus, la enfermedad vascular periferica, la nefropatfa, la hipertension, la neuropatfa y la retinopatfa).
Otro aspecto mas de la presente divulgacion es el tratamiento de las comorbilidades de la obesidad, tales como el smdrome metabolico. El smdrome metabolico incluye enfermedades, afecciones o trastornos, tales como la
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dislipidemia, la hipertension, la resistencia a la insulina, la diabetes (por ejemplo, la diabetes de tipo 2), la arteriopatfa coronaria y la insuficiencia cardfaca. Para obtener informacion mas detallada acerca del Smdrome Metabolico, vease, por ejemplo, Zimmet, P.Z., y col., "The Metabolic Syndrome: Perhaps an Etiologic Mystery but Far From a Myth-Where Does the International Diabetes Federation Stand?', Diabetes & Endocrinology, 7(2), (2005); y Alberti, K.G. y col., "The Metabolic Syndrome - A New Worldwide Definition", The Lancet, 366, 1059-l062 (2005). Preferentemente, la administracion de los compuestos de la presente invencion proporciona una reduccion estadfsticamente significativa (p <0,05) en al menos un factor de riesgo de la enfermedad cardiovascular, tal como la reduccion de la leptina, la protema C-reactiva (CRP) y/o el colesterol en plasma, en comparacion con un vehmulo control que no contiene ningun farmaco. La administracion de compuestos de la presente invencion tambien puede proporcionar una reduccion estadfsticamente significativa (p <0,05) de los niveles de glucosa en suero.
Otro aspecto mas de la divulgacion es el tratamiento de la esteatosis hepatica no alcoholica (EHNA) y la resistencia a la insulina hepatica.
Para un ser humano adulto normal que tiene un peso corporal de aproximadamente 100 kg, normalmente es suficiente una dosificacion en el intervalo de aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 10 mg por kilogramo de peso corporal, preferentemente de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 5,0 mg/kg, mas preferentemente de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 1 mg/kg. Sin embargo, puede ser necesaria cierta variabilidad en el intervalo de dosificacion general dependiendo de la edad y el peso del sujeto que se trate, de la via de administracion, del compuesto en particular que se administra y similares. La determinacion de intervalos de dosificacion y de dosificaciones optimas para un paciente en particular esta bien dentro de la capacidad de un experto habitual en la materia que tenga el beneficio de la presente divulgacion. Tambien se observa que los compuestos de la presente invencion pueden usarse en formulaciones de liberacion sostenida, liberacion controlada y liberacion retardada, formas que tambien son bien conocidas para un experto habitual en la materia.
Los compuestos de la presente invencion pueden tambien usarse junto con otros agentes farmaceuticos para el tratamiento de las enfermedades, afecciones y/o trastornos descritos en el presente documento. Por tanto, tambien se proporcionan procedimientos de tratamiento que incluyen la administracion de compuestos de la presente invencion en combinacion con otros agentes farmaceuticos. Los agentes farmaceuticos adecuados que pueden usarse en combinacion con los compuestos de la presente invencion incluyen agentes antiobesidad (incluyendo supresores del apetito), agentes antidiabeticos, agentes hipoglucemiantes, agentes reductores de lfpidos y agentes antihipertensivos.
Los agentes antiobesidad adecuados incluyen los inhibidores de la 11p-hidroxiesteroide deshidrogenasa-1 (11p- HSD de tipo 1), un inhibidor de estearoil-CoA desaturasa-1 (SCD-1), agonistas de MCR-4, agonistas de colecistocinina-A (CCK-A), inhibidores de la recaptacion de monoaminas (tales como sibutramina), agentes simpaticomimeticos, agonistas p3 adrenergicos, agonistas de dopamina (tales como bromocriptina), analogos de la hormona estimulante de melanocitos, agonistas de 5HT2c, antagonistas de la hormona concentradora de melanina, leptina (la protema OB), analogos de leptina, agonistas de leptina, antagonistas de galanina, inhibidores de lipasas (tales como tetrahidrolipstatina, es decir, orlistat), agentes anorexfgenos (tales como un agonista de bombesina), antagonistas del neuropeptido-Y (por ejemplo, antagonistas de NPY Y5), PYY3-36 (incluyendo analogos del mismo), agentes tiromimeticos, deshidroepiandrosterona o uno de sus analogos, agonistas o antagonistas de glucocorticoides, antagonistas de orexina, agonistas del peptido 1 similar al glucagon, factores neurotroficos ciliares (tales como Axokine™ disponible de Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY y Procter & Gamble Company, Cincinnati, OH), inhibidores de la protema humana relacionada con el agutf (AGRP), antagonistas de grelina, antagonistas o agonistas inversos de la histamina 3, agonistas de la neuromedina U, inhibidores de MTP/ApoB (por ejemplo, inhibidores de MTP selectivos del intestino, tales como dirlotapida), antagonista de opioides, antagonistas de orexina y similares.
Los agentes antiobesidad preferidos para su uso en los aspectos de combinacion de la presente invencion incluyen inhibidores de MTP selectivos del intestino (por ejemplo, dirlotapida, mitratapida y implitapida, R56918 (CAS N.° 403987) y CAS N.° 913541-47-6), agonistas de CCKa (por ejemplo, N-bencil-2-[4-(1H-indol-3-ilmetil)-5-oxo-1-fenil- 4,5-dihidro-2,3,6,10b-tetraaza-benzo[e]azulen-6-il]-N-isopropil-acetamida descrita en la publicacion PCT N.° WO 2005/116034 o en la publicacion de los EE.UU. N.° 2005-0267100 A1), agonistas de 5HT2C (por ejemplo, lorcaserina), agonistas de MCR4 (por ejemplo, los compuestos descritos en el documento US 6.818.658), inhibidor de lipasas (por ejemplo, Cetilistat), PYY3.36 (como se usa en el presente documento "PYY3-36 incluye analogos, tales como PYY3-36 pegilados, por ejemplo, los descritos en la publicacion de los EE.UU. 2006/0178501), antagonistas de opioides (por ejemplo, naltrexona), oleoil-estrona (CAS N° 180003-17-2), obinepitida (TM30338), pramlintida (Symlin®), tesofensina (NS2330), leptina, liraglutida, bromocriptina, orlistat, exenatida (Byetta®), AOD-9604 (CAS N° 221231-10-3) y sibutramina. Preferentemente, los compuestos de la presente invencion y las terapias de combinacion se administran junto con ejercicio y una dieta sensata.
Los agentes antidiabeticos adecuados incluyen un inhibidor del cotransportador de sodio-glucosa (SGLT), un inhibidor de la fosfodiesterasa (PDE)-10, un inhibidor de la diacilglicerol aciltransferasa (DGAT) 1 o 2, una sulfonilurea (por ejemplo, acetohexamida, clorpropamida, diabinese, glibenclamida, glipizida, gliburida, glimepirida, gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida y tolbutamida), meglitinida, un inhibidor de la a-amilasa (por ejemplo, tendamistat, trestatina y AL-3688), un inhibidor de la a-glucosido hidrolasa (por ejemplo, acarbosa), un
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inhibidor de la a-glucosidasa (por ejemplo, adiposina, camiglibosa, emiglitato, miglitol, voglibosa, pradimicina-Q y salbostatina), un agonista de PPARy (por ejemplo, balaglitazona, ciglitazona, darglitazona, englitazona, isaglitazona, pioglitazona, rosiglitazona y troglitazona), un agonista de PPAR a/Y (por ejemplo, CLX-0940, GW-1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767 y SB-219994), una biguanida (por ejemplo, metformina), un agonista del peptido 1 similar al glucagon (GLP-1) (por ejemplo, Byetta™, la exendina-3 y la exendina-4), un inhibidor de la protema tirosina fosfatasa-IB (PTP-1 B) (por ejemplo, trodusquemina, extracto de hirtiosal y compuestos desvelados por Zhang, S., y col., Drug Discovery Today, 12(9/10), 373-381 (2007)), inhibidor de SIRT-1 (por ejemplo, resveratrol), un inhibidor de la dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV) (por ejemplo, sitagliptina, vildagliptina, alogliptina y saxagliptina), un secretagogo de insulina, un inhibidor de la oxidacion de acidos grasos, un antagonista de A2, un inhibidor de la cinasa aminoterminal c-jun (JNK), insulina, un insulinomimetico, un inhibidor de la glucogeno fosforilasa, un agonista del receptor VPAC2 y un activador de la glucocinasa. Son agentes antidiabeticos preferidos la metformina, un agonista del peptido 1 similar al glucagon (GLP-1) (por ejemplo, Byetta™) e inhibidores de la DPP-IV (por ejemplo, sitagliptina, vildagliptina, alogliptina y saxagliptina).
Los ejemplos que se exponen en el presente documento a continuacion son solo con fines ilustrativos. Las composiciones, procedimientos y diversos parametros reflejados en el presente documento solo tienen por objeto ejemplificar diversos aspectos y realizaciones de la invencion y no tienen por objeto limitar el ambito de la invencion reivindicada de ninguna manera.
Ejemplos
Los compuestos e intermedios que se describen a continuacion se nombraron en general de acuerdo con las recomendaciones de la IUPAC (Union Internacional para la Qmmica Pura y Aplicada) sobre Nomenclatura de Qmmica Organica y las normas de indices CAS. A menos que se indique lo contrario, todos los reactivos se obtuvieron en el mercado.
La cromatograffa ultrarrapida se realizo de acuerdo con el procedimiento descrito por Still y col., J. Org. Chem., 1978, 43, 2923.
Todas las purificaciones Biotage®, que se analizan en el presente documento, se realizaron usando una columna Biotage® ya sea 40M o 40S que contema sflice KP-SIL (40-63°|jm, 60 Angstroms) (Bioatge AB; Uppsala, Suecia).
Todas las purificaciones Combiflash®, que se analizan en el presente documento, se realizaron usando un sistema CombiFlash® Companion (Teledyne Isco, Lincoln, Nebraska) usando columnas de sflice RediSep® rellenadas.
Los espectros de masas se registraron en un espectrometro Micromass Platform II de Waters (Waters Corp.; Milford, MA). A menos que se especifique lo contrario, los espectros de masas se registraron en un espectrometro Micromass Platform II de Waters (Milford, MA).
Los desplazamientos qrnmicos de RMN de proton se proporcionan en partes por millon campo abajo de tetrametilsilano y se registraron en un espectrometro Varian Unity de 400 o 500 MHz (megahercios) (Varian Inc.; Palo Alto, CA). Los desplazamientos qrnmicos de RMN se proporcionan en partes por millon campo abajo de tetrametilsilano (para protones) o fluorotriclorometano (para el fluor).
Las preparaciones que se describen a continuacion se usaron en la smtesis de los compuestos ejemplificados en los siguientes ejemplos.
Preparacion de intermedios y materiales de partida Intermedio 1
Se preparo acido 5-(4-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-6-etoxinicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo acido 5-bromo-6-etoxinicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Una suspension de acido 5-bromo-6-cloronicotmico (240 mg, 1,0°mmol) y etoxido de sodio (138 mg, 2,0°mmol) en etanol anhidro (2 ml) se calento en condiciones de microondas a 100 °C durante 15 min; se anadio una porcion
adicional de etoxido de sodio (79 mg, 1,0°mmol) y el calentamiento se continuo durante 1 h. Despues de enfriarse la mezcla de reaccion se ajusto a un pH de 4 con acido clorhndrico acuoso 1 N, los solidos resultantes recogieron y se secaron al vado para proporcionar acido 5-bromo-6-etoxinicotmico (140 mg). RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1,33 (t, J = 7,02 Hz, 3 H) 4,43 (c, J = 7,09 Hz, 2 H) 8,32 (d, J = 2,15 Hz, 1 H) 8,64 (d, J = 1,95 Hz, 1 H) 13,28 (s a, 1 5 H); m/z = 248,2 (M+1).
Etapa 2. El compuesto del tftulo, mostrado anteriormente, se preparo de la siguiente manera: Una suspension de acido 5-bromo-6-etoxinicotrnico (60 mg, 0,24°mmol), acido 4-terc-butoxicarbonilfenilboronico (70 mg, 0,32°mmol), carbonato de sodio acuoso 2 N (0,37 ml, 0,73°mmol) y dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno paladio (9 mg, 0,05°mmol) en p-dioxano (2 ml) se calento a 100 °C durante 2 h. Se anadio una porcion adicional de acido 4-terc- 10 butilcarboxilfenilboronico (70 mg, 0,32°mmol) y de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno paladio (9 mg, 0,05°mmol) y el calentamiento se continuo durante 1,5 h. La mezcla de reaccion se enfrio, se diluyo en agua, se ajusto el pH a ~ 5 usando acido clorlddrico acuoso 1 N. Esta mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 veces), las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron al vado para proporcionar el compuesto del tftulo (100 mg), que se utilizo sin purificacion adicional; m/z = 344,2 (M+1).
15 Intermedio 2
Se preparo acido 2-(4-(terc-butoxicarbonil)fenil)-6-(dimetilamino)isonicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo acido 2-cloro-6-(dimetilamino)isonicotmico, sal de clorhidrato, que se muestra a continuacion, 20 de la siguiente manera.
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Se coloco acido 2,6-dicloroisonicotmico (2,00 g, 10,42°mmol) en un tubo a presion y se anadio una solucion de dimetilamina en tetrahidrofurano (26 ml, 2 M, 52°mmol). El vaso se sello y se calento durante 22 horas a 80 °C. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente, se transfirio a un matraz de fondo redondo y se concentro a sequedad. El 25 semisolido de color blanco resultante se recogio en 30 ml de solucion de hidroxido de sodio 0,1 N. Se anadio HCl
1 N gota a gota con agitacion para ajustar el pH de la solucion a aprox. 3,5, punto en el que se formo un solido de
color amarillo palido. Este se recogio mediante filtracion y se seco al vado a 45 °C durante la noche para proporcionar sal interna de acido 2-cloro-6-(dimetilamino)isonicotmico (916 mg, 44%). La acidificacion adicional de la solucion acuosa a pH 1 dio como resultado la formacion de un solido de color amarillo brillante, que tambien se 30 recogio y se seco al vado para proporcionar clorhidrato del acido 2-cloro-6-(dimetilamino)isonicotmico (1,15 g, 46 %). m/z: 201 + [M+H]; 199- [M-H]. Para la sal de HCl: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 13,64 (s a, 1 H), 6,96 (d, J = 1,0 Hz, 1 H), 6,89 (d, J = 0,8 Hz, 1 H), 3,06 (s, 6 H), 2,53 (t, J = 5,1 Hz, 1 H).
Para la sal interna: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 6,95 (s, 1 H), 6,88 (s, 1 H), 3,04 (s, 6H).
Etapa 2. Se preparo acido 2-(4-(terc-butoxicarbonil)fenil)-6-(dimetilamino)isonicotmico, que se muestra a 35 continuacion, de la siguiente manera.
Se colocaron en un matraz acido 2-cloro-6-(dimetilamino)isonicotmico (450 mg, 2,24°mmol), acido 4-(terc- butoxicarbonil)benceno boronico (648 mg, 2,92°mmol), 1,4-dioxano (7,5 ml) y carbonato de sodio (713 mg, 6,73°mmol) disuelto en agua (3,36 ml) y la mezcla se burbujeo con nitrogeno mientras se agitaba durante 10 min. Despues, se anadieron juntos acetato de paladio(II) (20 mg, 0,09°mmol) y 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo 40 (75 mg, 0,18°mmol) y el vaso se lavo abundantemente con nitrogeno, se sello y se calento a 90 °C durante 5h.
Despues, la mezcla se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo (50 ml), se acidifico a pH 2 con HCl 1,5 N y se filtro a traves de un lecho de celite. Las fases se separaron y la porcion acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 ml, 2 veces). Las porciones organicas combinadas se trataron con sulfato de sodio anhidro y carbon vegetal decolorante y se agitaron durante 30 min antes de filtrarlas. La solucion se concentro a sequedad y el 45 residuo se purifico mediante trituracion con una mezcla de metil terc-butil eter (5 ml) y heptano (100 ml). Los solidos
se recogieron mediante filtracion y se secaron para proporcionar acido 2-(4-(terc-butoxicarbonil)fenil)-6- (dimetilamino)isonicotmico (502 mg, 65 %) en forma de un polvo de color amarillo palido. m/z: 343+ [M+H]; 341- [M- H]; RMN 1H (400 MHz, CDCls) 6 ppm 8,12-8,21 (m, 2 H), 8,04-8,11 (m, 2 H), 7,67 (s, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 3,23 (s, 6 H), 1,64 (s, 9 H).
5 Intermedio 3
Se preparo acido 2-(4-(terc-butoxicarbonil)fenil)-6-etoxiisonicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio sodio (65 mg, 3°mmol) a etanol absoluto (3 ml) en atmosfera de argon a TA. Despues de que la disolucion 10 del sodio se completara, se anadio la solucion de etoxido recien preparada de acido 2,6-dicloronicotmico 1 (0,5 g, 2,6°mmol). Esta mezcla se calento en un microondas a 150 °C durante 3 horas. La mezcla se concentro a sequedad para proporcionar acido 2-cloro-6-etoxiisonicotmico (0,5 g) en bruto, que se uso sin purificacion. m/z: 202+ [M+H].
El acido 2-cloro-6-etoxiisonicotmico en bruto (0,5 g, aprox. 2,6°mmol), acido 4-(terc-butoxicarbonil)benceno boronico (0,5 g, 2,2 mmol), carbonato de potasio (0,5 g, 3,6°mmol) y agua (0,1 ml) en 1,2-dimetoxietano (10 ml) se agitaron y 15 se desgasificaron durante 10 min. Despues, se anadio tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0,1 g, 0,08°mmol). Despues, el tubo sellado se calento durante la noche a 90 °C. Despues de enfriarse, la reaccion se paso a traves de un lecho corto de celite y se repartio entre diclorometano y agua. La solucion organica se concentro y el residuo en bruto se purifico mediante cromatograffa (gel de sflice, metanol al 10 % en diclorometano) para proporcionar el compuesto del tttulo (97 mg, 20 %). RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 8,11 (2H, d), 8,08 (2H, d), 7,96 (1 H, s), 7,34 (1 H, s), 4,54 20 (2H, cd), 1,61 (9H, s), 1,46 (3H, t); m/z: 344+ [M+H].
Intermedio 4
Se preparo acido 2-((2-terc-butoxi-2-oxoetil)(metil)amino)-6-metoxiisonicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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25 Una suspension de acido 2-cloro-6-metoxiisonicotmico (100 mg, 0,53°mmol), terc-butil ester de sarcosina (116 mg, (0,64°mmol), cloro(di-2-norborilfosfino)(2-dimetilaminometilferrocen-1-il)paladio (II) (9,8 mg, 0,02°mmol) y terc- butoxido de sodio (128 mg, 1,3°mmol) en p-dioxano (3 ml) se agitaron a 110 °C durante 18 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y el disolvente se retiro al vacfo. El residuo se diluyo con agua, el pH se ajusto a 4 con acido clorhndrico acuoso 1 N y se extrajo con acetato de etilo (10 ml, 3 veces). La fase organica combinada se seco sobre 30 sulfato de magnesio, se filtro, se concentro al vacfo y el residuo se sometio a cromatograffa (metanol al 010 %/diclorometano) para proporcionar el compuesto del tttulo (60 mg) en forma de un solido de color amarillo. m/z = 297,5 (M+1).
Intermedio 5
Se preparo acido 2-(4-(terc-butoxicarbonil)fenil)-6-metoxiisonicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente 35 manera.
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Se combinaron acido 2-cloro-6-metoxiisonicotmico (15,0 g, 80,0°mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)benzoato de ferc-butilo (29,2 g, 96,0°mmol), 1,4-dioxano (500 ml) y carbonato de sodio (25,4 g, 240°mmol) disuelto en agua (160 ml) en un matraz de 3 bocas de 1 l equipado con un termometro interno, un condensador y una entrada de nitrogeno. La solucion se desgasifico por burbujeo con nitrogeno durante 15 min mientras se agitaba. Despues, se anadio tetraquis(trifenilfosfina)paladio (3,70 g, 3,20°mmol) y la mezcla se calento a reflujo durante 17 h. La mezcla se enfrio despues a temperatura ambiente y se concentro al vado para proporcionar una suspension espesa de color marron, que se repartio entre acetato de etilo (400 ml) y agua (150 ml). La fase acuosa se separo y se extrajo con acetato de etilo adicional (100 ml, 2 veces). Las porciones organicas se combinaron y se lavaron con HCl 1 N y agua y los solidos de color negro se retiraron mediante filtracion a traves de un lecho de celite. La fase acuosa se desecho y la solucion organica se seco sobre sulfato de magnesio anhidro y se filtro. Despues, la solucion se trato con carbon vegetal decolorante y se calento a 70 °C durante 20 min. Despues, la solucion se filtro a traves de celite mientras estaba caliente y el disolvente se retiro al vado para proporcionar un polvo de color amarillo. Este material se purifico por adicion de metil ferc-butil eter (55 ml) seguido de la adicion lenta de 1,85 l de heptano con agitacion. La mezcla se agito durante 2 dfas y despues se filtro para proporcionar acido 2-(4-(ferc- butoxicarbonil)fenil)-6-metoxiisonicotmico (22,01 g, 84%) en forma de un polvo de color amarillo palido. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,61 (s, 9 H) 4,08 (s, 3 H) 7,34 (d, J = 0,98 Hz, 1 H) 7,97 (d, J = 1,17 Hz, 1 H) 8,09 (s, 2 H) 8,13 (s, 2 H); m/z: 330,2+ [M+H].
Intermedio 6
Se preparo acido 6-(4-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-2-(metilamino)nicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo acido 6-cloro-2-(metilamino)nicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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A un autoclave de acero se le anadio acido 2,6-dicloronicotmico (tec.) (30 g, 156,2°mmoles), tetrahidrofurano (30 ml) y monometilamina (68,2 ml, 33 % en peso en etanol, 500°mmol). El vaso de reaccion se calento a 100 °C durante 4 h. La mezcla de reaccion se enfrio y la solucion se transfirio desde el autoclave a un matraz de 500 ml y se concentro al vado para proporcionar un solido de color verde. El solido se disolvio en 300 ml de MeOH y 1,2 l de EtOAc, se vertio en un embudo de separacion y se lavo con HCl 1 N (300 ml, 2 veces) y salmuera. La solucion organica se concentro despues a sequedad para proporcionar acido 6-cloro-2-(metilamino)nicotmico (29 g, 96 %) en forma de un solido de color blanquecino.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 13,14 (s a, 1 H), 8,17 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,57 (s a, 1H), 6,58 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 2,89 (d, J = 4,1 Hz, 3 H). m/z: 187+ [M+H]; 185-[M-H]
Etapa 2. A un matraz de 3 bocas de 2 l se le anadio acido 6-cloro-2-(metilamino)nicotmico (22,9 g, 122,6 mmol), 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de ferc-butilo (31,2 g, 102,6 mmol), 1,4-dioxano (1,021) y carbonato de sodio (32,6 g, 307,7 mmol) disuelto en agua (300 ml). La mezcla se burbujeo con nitrogeno seco mientras se agitaba durante 20 min. Despues, se anadio tetraquis(trifenilfosfina)paladio (5,93 g, 5,13°mmol) y la mezcla se calento a reflujo (89 °C) durante 2 h. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente, se anadio agua (250 ml) y la mezcla se agito durante 10 min. La mezcla se extrajo con 1,5 l de acetato de etilo y la fase organica se separo y se lavo con carbonato de sodio acuoso al 10 % (250 ml), HCl 1 N (250 ml, 2 veces) y salmuera. Despues, la solucion se concentro a un volumen mmimo de agitacion, se anadio metanol (650 ml) y la mezcla se calento a reflujo para disolver los solidos. Se retiraron 300 ml de MeOH por destilacion y se anadieron 100 ml de agua. Despues, la mezcla se enfrio a temperatura ambiente y el producto se recogio mediante filtracion, se lavo con 150 ml de metanol/agua 2:1 y se seco en la estufa de vado para proporcionar el compuesto del tttulo (24 g, 71 %) en forma de un solido de color amarillo. RMN 1 H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 8,27 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 8,13 - 8,21 (m, 2 H), 8,03 - 8,13 (m, 2 H), 7,82 (s a, 1 H), 7,11 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 3,21 (s, 3 H), 1,63 (s, 9 H); m/z: 329+ [M+H]; 327- [M-H].
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Intermedio 7
Se preparo acido 6-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-2-(etilamino)nicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo acido 6-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-2-cloronicotmico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se combinaron acido 2,6-dicloronicotmico (1,20 g, 6,25°mmol), acido 3-(ferc-butoxicarbonil)benceno boronico (2,08 g, 9,10°mmol), carbonato de potasio (2,60 g, 18,8°mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0,72 g, 0,62°mmol), 1,2-dimetoxietano desgasificado (30 ml) y agua (0,5 ml) en atmosfera de argon y la mezcla se calento a 90 °C durante la noche. La mezcla de reaccion se enfrio despues a temperatura ambiente, se diluyo con agua (100 ml) y se extrajo con acetato de etilo (150 ml, 2 veces). La fase acuosa se acidifico a pH 3-4 usando una solucion de HCl 2 N y se extrajo con acetato de etilo (200 ml, 2 veces). Las porciones organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron. El residuo se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, metanol al 20 %/diclorometano) y el producto que contema las fracciones se concentro para proporcionar un solido, que se trituro con heptano/acetato de etilo 2:1 para proporcionar acido 6-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-2- cloronicotmico puro (1,4 g, 67 %) en forma de una espuma de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 8,64 (s, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 8,04 (d, 1 H), 7,95 (d, 1 H), 7,59 (t, 1 H), 1,60 (s, 9H); m/z 334 [M+H].
Etapa 2. Se disolvio acido 6-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-2-cloronicotmico (500 mg, 1,50°mmol) en una solucion de etilamina 2M en tetrahidrofurano (7,0 ml, 14,0°mmol) y la mezcla se calento usando un microondas a 140 °C durante 4 h. Despues, la solucion se concentro a sequedad y la mezcla en bruto se purifico mediante cromatograffa en columna (gel de sflice, metanol al 10 %/diclorometano). El solido obtenido se trituro con acetato de etilo/heptano (1:4) y se filtro para proporcionar el compuesto del tftulo (330 mg, rendimiento del 64 %) en forma de un solido de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 8,70 (s, 1 H), 8,27 (dd, 2H), 8,06 (d, 1 H), 7,85 (s a, 1 H), 7,52 (t, 1 H), 7,09 (d, 1 H), 3,71 (c, 1 H), 1,62 (s, 9H), 1,27 (t, 3H); m/z 343 [M+H].
Intermedio 8
Se preparo acido 4-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina-2-carboxflico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera:
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Etapa 1. Se preparo 4-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina-2-carboxilato de metilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera:
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Una suspension agitada de 4-cloro-7-azaindol-2-carboxilato de metilo (100 mg, 0,48°mmol), 3-
(hidroxi(metil)boril)benzoato de ferc-butilo (137 mg, 0,62°mmol), fosfato de potasio (309 mg, 1,42°mmol), tetraquis (trifenilfosfina)paladio (28 mg, 0,02°mmol) en p-dioxano (3 ml)/agua (1 ml) se calentaron a 100 °C durante 15 horas. La mezcla de reaccion se enfrio, se concentro al vacfo y se sometio a cromatograffa ultrarrapida (acetato de etilo al 0-100 %:heptanos) para proporcionar 4-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina-2-carboxilato de metilo
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en forma de un polvo de color blanco (148 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORM-d) d ppm 1,62 (s, 9 H) 3,99 (s, 3 H) 7,28 (d, J = 5,23 Hz, 1 H) 7,36 (d, J = 2,62 Hz, 1 H) 7,59 (t, 1 H) 7,90 (d, 1 H) 8,09 (d, 1 H) 8,35 (t, 1 H) 8,64 (d, J = 4,70 Hz, 1 H); m/z (M+1) = 353,2.
Etapa 2 A una solucion agitada de 4-(3-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina-2-carboxilato de metilo (145 mg, 0,41°mmol) en metanol (2 ml)/tetrahidrofurano (2 ml) se le anadio hidroxido de litio acuoso 1 N (0,82 ml, 0,82°mmol). Despues de 18 h, la mezcla de reaccion se concentro al vado, se diluyo en agua, se ajusto el pH a ~ 5 con acido clorlddrico acuoso 1 N, los solidos de color amarillo se recogieron mediante filtracion y se secaron al vado para proporcionar el compuesto del tftulo (122 mg). m/z = 339,5 (M+1); RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 12,56 (s, 1 H) 8,47 (d, J = 4,88 Hz, 1 H) 8,24 (t, J = 1,66 Hz, 1 H) 8,01 (tt, J = 8,36, 1,29 Hz, 2 H) 7,69 (t, J = 7,80 Hz, 1 H) 7,31 (d, J = 4,88 Hz, 1 H) 7,15 (d, J = 2,15 Hz, 1 H) 1,52 - 1,59 (m, 9 H).
Intermedio 9
Se preparo 1-isopropil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 9-oxo-3-aza-espiro[5.5]undec-7-eno-3-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio metil vinil cetona (146 ml) a una solucion de 4-formilpiperidina-1-carboxilato de ferc-butilo (375 g) en tetrahidrofurano (18 l). La mezcla de reaccion se enfrio a-5 °C y se anadio una solucion de hidroxido de potasio en etanol (3 N, 0,243 l) gota a gota durante 10 minutos. La mezcla de reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente y se agito durante 16 horas. Se anadio ciclohexano (10 l) y la solucion se lavo con cloruro de sodio saturado (10 l, 3 veces). La fase organica se concentro a un aceite. Este aceite se disolvio en 2 l de ciclohexano/acetato de etilo 80:20 y se filtro a traves de Celite® para retirar el material insoluble. El filtrado se purifico mediante cromatograffa en columna ultrarrapida (hexano/acetato de etilo 70:30) para proporcionar el producto en forma de un aceite. El aceite se trituro en hexanos para proporcionar el producto deseado en forma de un solido de color blanco (131 g, 28 %).
Etapa 2. Se preparo 10-((dimetilamino)metilen)-9-oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-eno-3-carboxilato de (E)-ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvieron 9-oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-eno-3-carboxilato de ferc-butilo (101 g) y tris(dimetilaminometano) (133 ml) en tolueno (800 ml) y se calentaron a reflujo durante 17 horas. La mezcla de reaccion se concentro a un volumen de agitacion mmimo y se anadio acetato de etilo (600 ml). Esta mezcla se calento a reflujo y se anadio heptano (1,2 l) durante 20 minutos. La solucion caliente se enfrio a temperatura ambiente durante 3 horas. Los solidos se filtraron a traves de una frita de vidrio y se lavaron con heptano (300 ml). El solido resultante se seco en un horno de vado a 40 °C durante 3 horas para proporcionar el producto deseado en forma de un solido de color amarillo (107 g). RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,48 (s, 1 H), 6,57 (d, J = 9,97 Hz, 1 H), 5,99 (d, J = 10,16 Hz, 1 H), 3,32-3,51 (m, 4 H), 3,06 (s, 6 H), 2,72 (s, 2 H), 1,57-1,66 (m, 2 H), 1,41 -1,53 (m, 11 H).
Etapa 3. Se preparo 1-isopropil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se recogio 10-((dimetilamino)metilen)-9-oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-eno-3-carboxilato de (E)-ferc-butilo (107 g) en 5 tolueno (700 ml) y se anadio hidrazina de isopropilo (44,4 g). La reaccion se agito a reflujo durante 4 horas. La reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se anadio acetato de etilo (500 ml). La solucion de reaccion se lavo con acido cftrico (300 ml, 2 veces, 10% acuoso) y agua (400 ml). La fase organica se concentro al vado para proporcionar 1-isopropil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]1'-carboxilato de ferc-butilo en forma de un solido de color amarillo (109 g). RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,25 (s, 1 H) 6,42 (dd, J = 10,05, 0,49 Hz, 1 H) 5,84 (d, J = 10 9,95 Hz, 1 H) 4,42-4,52 (m, 1 H) 3,36-3,53 (m, 4 H) 2,62 (s, 2 H) 1,56-1,68 (m, 2 H) 1,45-1,55 (m, 17 H).
Etapa 4. Se preparo 1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]1'-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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A una solucion de 1-isopropil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo (109 g) en metanol 15 (1 l) se le anadio W-bromosuccinimida (61,4 g). La reaccion se agito durante 1 hora. La reaccion se inactivo con
tiosulfato de sodio (10 g en 300 ml de agua) y despues se destilo a un volumen final de 500 ml. La solucion se enfrio a temperatura ambiente y se anadieron 2-metil tetrahidrofurano (1 l) y agua (100 ml). La fase organica se separo y la fase acuosa se extrajo con 2-metil tetrahidrofurano. Las fases organicas se combinaron, se lavaron con hidroxido de sodio acuoso (1 N, 250 ml), agua y cloruro de sodio saturado, acuoso. La fase organica se seco sobre sulfato de 20 sodio, se filtro y se concentro para proporcionar un aceite de color naranja. El aceite se disolvio en tetrahidrofurano (500 ml) y se anadio ferc-butoxido de potasio (76,8 g) en tetrahidrofurano (500 ml). La solucion se calento a 60 °C y se agito durante 1 hora. Se anadio acido clorhidrico acuoso (1 N, 1 l) y la solucion se agito durante 30 minutos. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (700 ml). Las fases organicas se combinaron, se lavaron con agua (400 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (100 ml). La fase organica se seco sobre sulfato de 25 sodio, se filtro y se concentro al vado para proporcionar un residuo. El residuo se seco en un horno de vado a 40 °C durante 16 horas para proporcionar el compuesto del tttulo en forma de una cera de color naranja (117 g).
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,35 (s, 1 H), 5,32-5,42 (m, 1 H), 3,29-3,51 (m, 4 H), 2,73 (s, 2 H), 2,51 (s, 2 H), 1,47-1,57 (m, 4 H), 1,42-1,46 (m, 15 H); EM IEN+ (M+H) = 348,5.
Etapa 5. Se preparo 1-isopropil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, 30 de la siguiente manera.
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Se disolvieron 9-oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-en-3-carboxilato de ferc-butilo (250 g) y tris(dimetilaminometano) (325 ml) en tolueno (1,9 l) y se calentaron a reflujo durante 4 horas . La mezcla se destilo y se concentro a un volumen mmimo de agitacion (110 °C) y despues se anadio tolueno (1,9 l). La reaccion se volvio a destilar a un 35 volumen mmimo de agitacion y se enfrio a temperatura ambiente. Se anadieron tolueno (1,8 l) y clorhidrato de isopropil hidrazina (135 g) y la solucion se calento a reflujo durante 5 horas. La reaccion se enfrio a temperatura
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Intermedio 10
Se preparo 1-terc-butil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 10-((dimetilamino)metilen)-9-oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-en-3-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio ester bendlico del acido 9-oxo-3-aza-espiro[5.5]undec-7-en-3-carboxflico (15,2 g, 51°mmol) en 180 ml de tolueno y se anadio tris(dimetilamino)metano (22,2 g, 27°mmol). La reaccion se calento a reflujo durante 5 horas y despues se dejo enfriar a temperatura ambiente durante la noche. La solucion de reaccion se concentro al vado para proporcionar el compuesto del tftulo (18,0 g, 100 %): EM +IQPA (M+H) 354,6; RMN1H (400 MHz, CDCh) 6 ppm 7,49 (s, 1 H), 7,28-7,40 (m, 5 H), 6,59 (d, J = 10,16 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 9,97 Hz, 1 H), 5,13 (s, 2 H), 3,52-3,66 (m, 2 H), 3,39-3,52 (m, 2 H), 3,07 (s, 6 H), 2,74 (s, 2 H), 1,58-1,73 (m, 2 H), 1,41-1,58 (m, 2 H).
Etapa 2. Se preparo 1-terc-butil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 10-((dimetilamino)metilen)-9-oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-en-3-carboxilato de bencilo (59,2 g, 167°mmol) en 835 ml de etanol. A la solucion de reaccion se le anadio acido acetico (20 ml, 345°mmol) y clorhidrato de terc butilhidrazina (29,1 g, 234°mmol). La reaccion se calento a reflujo durante 1 hora. La solucion de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y despues se concentro al vado para proporcionar un aceite de color naranja que se purifico
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mediante cromatograffa ultrarrapida usando acetato de etilo al 20-40 % en heptano como eluyente para proporcionar el compuesto del tttulo en forma de un solido de color amarillo palido (50 g, 79 %): EM IEN+ (M+H) 380,5; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,26-7,40 (m, 5 H) 7,17 (s, 1 H) 6,66 (d, J = 9,95 Hz, 1 H) 5,77 (d, J = 10,15 Hz, 1 H) 5,12 (s, 2 H) 3,38 -3,64 (m, 4 H) 2,58 (s, 2 H) 1,60 (s, 12 H) 1,50 (s a, 1 H).
Etapa 3. Se preparo 6-bromo-1-terc-butil-7-hidroxi-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 1-terc-butil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (50 g, 132°mmol) en 1 l de tetrahidrofurano. A la reaccion se anadio W-bromosuccinimida (24,6 g, 138°mmol) y 250 ml de agua. La reaccion se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. La reaccion se repartio entre acetato de etilo y agua. Las fases se separaron y la fase organica se lavo 2 veces mas con agua y una vez con cloruro de sodio saturado, acuoso. La fase organica se seco sobre sulfato de magnesio, se concentro al vado y se cristalizo en eter para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de un solido de color crema (60,7 g, 97 %): EM IEN+ (M+H) 476,5; RmN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,28-7,36 (m, 5 H), 7,27 (s, 1 H), 5,23 (t, J = 4,68 Hz, 1 H), 5,12 (s, 2 H), 4,24 (d, J = 4,49 Hz, 1 H), 3,87 (s a, 2 H), 3,12 (s a, 2 H), 2,79 (d, J = 16,00 Hz, 2 H), 2,59 (d, J = 15,80 Hz, 2 H), 1,95 (s a, 1 H), 1,66 (s, 11 H), 1,58 (s a, 1 H).
Etapa 4. Se preparo 6-bromo-1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 6-bromo-1-terc-butil-7-hidroxi-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (57,9 g, 122°mmol) en 1 l de acetona y despues se enfrio a 0 °C en un bano de hielo. A la solucion se le anadieron 122 ml de reactivo de Jones (Fillion, E. Tetrahedron Letters 2004, 46, 1091-1094). El bano de hielo se retiro y la reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente donde se agito durante 45 minutos. Se anadio bicarbonato de sodio acuoso saturado hasta que no se observo mas desprendimiento de gas y se alcanzo pH 7. La mezcla resultante se filtro a traves de un lecho de celite® aclarando con acetato de etilo. Las fases del filtrado se separaron y la fase acuosa se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Los extractos organicos se combinaron, se lavaron dos veces con agua, una vez con cloruro de sodio acuoso saturado, se seco sobre sulfato de magnesio y se concentro al vado. El residuo se cristalizo en acetato de etilo/heptano para proporcionar el compuesto del tftulo (50,4 g, 87 %): EM IEN+ (M+H) 474,5; RMN 1H (400 MHz, CDCls) 6 ppm 7,32 (d, J = 9,38 Hz, 6 H), 5,11 (s, 2 H), 4,24 (s, 1 H), 3,583,84 (m, 2 H), 3,16-3,41 (m, 2 H), 2,67-2,91 (m, 2 H), 1,80 (s a, 1 H), 1,61-1,76 (m, 11 H), 1,52-1,61 (m, 1 H).
Etapa 5. Se preparo 1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 6-bromo-1-terc-butil-7-hidroxi-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (50,4 g, 106°mmol) en 600 ml de tetrahidrofurano, a esto se le anadio cloruro de amonio acuoso saturado (600 ml) y cinc en polvo (20,8 g, 319°mmol). La reaccion se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. La reaccion se
filtro a traves de Celite®, las fases se separaron y la fase organica se lavo con agua y cloruro sodico acuoso saturado, se seco sobre sulfato de magnesio y se concentro al vado para proporcionar una espuma. La espuma se trituro una vez en acetato de etilo/heptano y una vez en eter y se filtro para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de un solido de color blanco (40,4 g, 96 %): EM IEN+ (M+H) 396,5; RMN 1H (400 MHz, CDCls) 6 ppm 7,245 7,38 (m, 6 H), 5,11 (s, 2 H), 3,36-3,61 (m, 4 H), 2,74 (s, 2 H), 2,54 (s, 2 H), 1,64 (s, 9H), 1,51 (s a, 4 H).
Etapa 6. Se preparo 1-terc-butil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 1-terc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetraHidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (46,6 g, 10 118°mmol) en 730 ml de etanol y la solucion se anadio a paladio sobre carbono al 10 % (9,4 g). A esto se le anadio
1-metil-1,4-ciclohexadieno (90 ml, 769°mmol). La reaccion se agito a reflujo durante 2 Horas. La reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se filtro a traves de Celite®. El filtrado se concentro al vacro para proporcionar un solido de color gris. El solido se disolvio en 150 ml de acetato de etilo, a esto se le anadio 35 ml de acido clorlddrico 4 M en dioxano. Se formo un precipitado y se recogio mediante filtracion para proporcionar el compuesto del tftulo en forma 15 de un solido de color blanco (34 g, 97 %): EM IEN+ (M+H) 262,5; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 7,34 (s, 1 H), 3,12-3,25 (m, 4 H) 2,90 (s, 2 H) 2,66 (s, 2 H) 1,67-1,85 (m, 4 H) 1,62 (s, 9 H).
Intermedio 11
Se preparo 1-(oxetan-3-il)-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 1-(2-etoxi-2-oxoetil)-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio clorhidrato de etilhidrazinoacetato (0,92 g, 5,95°mmol) a una solucion de 10-((dimetilamino)metilen)-9- 25 oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-en-3-carboxilato de bencilo (1,25 g, 3,90°mmol), descrito en la preparacion del Intermedio 10, en etanol (30 ml). La mezcla se agito a reflujo durante 1 hora. Una aftcuota indico que la reaccion se habfa completado mediante RMN 1H. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro a alto vacro a un aceite de color marron. El aceite se trituro con eter dietflico (50 ml). El precipitado se filtro y el filtrado se concentro y se seco a alto vacro para proporcionar el compuesto del tftulo (1,50 g, 100 %) en forma de un aceite de 30 color marron. EM +IQPA (M+H) 376,2; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 1,21-1,26 (m, 3 H), 1,43 (s, 9 H), 1,45-1,52 (m, 2 H), 1,54-1,64 (m, 2 H), 2,62 (s, 2 H), 3,33-3,49 (m, 4 H), 4,15-4,22 (m, 2 H), 4,82 (s, 2 H), 5,87 (d, J = 9,97 Hz, 1 H), 6,26 (d, J = 9,97 Hz, 1 H), 7,24 (s, 1 H).
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Se anadio 1-(2-etoxi-2-oxoetil)-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo (1,45 g 3,86°mmol) en tolueno (5 ml) a una suspension de hidruro de sodio (0,148 g, dispersion al 60 % en aceite mineral) en carbonato de dietilo (30 ml), gota a gota a 80 °C durante 30 minutos. La reaccion se agito a reflujo durante 1,5 horas. La RMN 1H indico que el material de partida se habfa consumido y que se habfa formado el producto deseado. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente. Se anadio metanol (1 ml) y la solucion se agito a temperature ambiente durante 5 minutos. Se anadio agua (5 ml). La solucion se acidifico a pH ~ 3 con acido clorhndrico 2 N acuoso (3 ml) y despues se extrajo con diclorometano (15 ml, 3 veces). Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, se concentraron y se secaron a alto vado para proporcionar una goma de color marron (1,59 g, 92 %). El material en bruto se trituro con eter dietflico:heptanos 1:1 (50 ml). El precipitado se filtro. El filtrado se concentro y se seco a alto vado para proporcionar el compuesto del tftulo (1,25 g, 72 %). EM +IQPA(M+H) 348,1; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 1,13-1,32 (m, 6 H), 1,40-1,46 (m, 9 H), 1,46-1,54 (m, 2 H ), 1,59 (d, J = 13,68 Hz, 3 H), 2,62 (s, 2 H), 3,31-3,51 (m, 4 H), 4,27 (c, J = 7,23 Hz, 4 H), 5,85 (d, J = 9,97 Hz, 1 H), 6,34 (d, J = 9,97 Hz, 1 H), 7,24 (s, 1 H).
Etapa 3. Se preparo 1-(1,3-dihidroxipropan-2-il)-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio tetrahidrofurano (40 ml) a hidruro de litio y aluminio (900 mg) en un matraz de fondo redondo de 3 bocas de 125 ml equipado con una entrada de nitrogeno y un termometro. La solucion se enfrio a -2 °C. Se anadio 2-(1'- (ferc-butoxicarbonil)espiro[indazol-5,4'-piperidina]-1(4H)il)malonato de dietilo (1 g) en tetrahidrofurano (5 ml) gota a gota durante 5 minutos. La temperatura nunca fue mayor que -0,2 °C durante la adicion. La reaccion se agito a 0 °C durante 3 horas despues la reaccion se inactivo a traves de la adicion secuencial de agua (1,0 ml), hidroxido de sodio acuoso al 15 % (1,0 ml) y agua (3 ml). La temperatura interna nunca fue mayor que 3,2 °C durante la adicion. Despues se dejo que la reaccion se calentara a temperatura ambiente durante 15 minutos. La mezcla de reaccion se filtro a traves de Celite® y se lavo con eter dietflico (20 ml, 3 veces). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera (5 ml), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, se concentraron y se secaron en alto vado para proporcionar un vidrio de color amarillo palido (548 mg, 67 %). Este material se cromatografio sobre 25 g de sflice eluyendo con metanol del 2 % al 8 % en diclorometano con hidroxido de amonio al 0,1 % durante 30 minutos para proporcionar el compuesto del tftulo (133 mg, 16 %). EM +IQPA(M+H) 364,2; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 1,45 (s, 9 H), 1,51 (s a, 4 H), 1,60 (s a, 2 H), 2,62 (s, 2 H), 3,32-3,53 (m, 4 H), 4,05 (s a, 4 H), 4,26 (t, J = 4,89 Hz, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 6,40 (d, J = 9,77 Hz, 1 H), 7,23 - 7,25 (m, 1 H).
Etapa 4. Se preparo 1-(oxetan-3-il)-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio n-butil litio 2,5 M en hexanos (0,33 ml 165 ul), a una solucion de 1-(1,3-dihidroxipropan-2-il)-1,4- dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo (150 mg, 0,41°mmol) en tetrahidrofurano (8 ml) a - 6,2 °C. La temperatura nunca fue mayor que -3,7 °C durante la adicion. La solucion se agito a -8 °C durante 30 minutos. Se anadio una solucion de cloruro de p-toluenosulfonilo (79 mg) en tetrahidrofurano (2 ml) a la mezcla de reaccion a -5 °C. La temperatura nunca fue mayor que -2 °C durante la adicion. La reaccion se agito a -5 °C durante 1 hora y despues la mezcla de reaccion se enfrio a -6 °C y se anadio n-butil litio 2,5 M en hexanos (0,33 ml 165 ul) durante 2 minutos. La temperatura nunca fue mayor que -3,5 °C durante la adicion. El bano de enfriamiento se retiro y la reaccion se agito a una temperatura interna de 60 °C durante 16 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se anadio acetato de etilo (20 ml). La solucion de reaccion se lavo con agua (35 ml) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (15 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera (5 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, se concentraron y se secaron en alto vacfo para producir un solido de color amarillo. El solido se purifico mediante cromatograffa eluyendo sobre sflice de 8 g con acetato de etilo del 25 % al 75 % en heptanos durante de 36 minutos para proporcionar el compuesto del tftulo (58 mg, 40 %). EM IEN+ (M+H); RMN 1H (400 MHz, CDCls) 6 ppm 1,45 (s, 9 H), 1,49 (d, J = 3,71 Hz, 1 H), 1,55 (s, 4 H), 1,59 (s a, 1 H), 2,61 (s, 2 H), 3,32-3,50 (m, 4 H), 5,00 (m, J = 7,22, 7,22 Hz, 2 H), 5,13 (t, J = 6,44 Hz, 2 H), 5,36-5,46 (m, 1 H), 5,88 (d, J = 9,95 Hz, 1 H), 6,43 (d, J = 9,95 Hz, 1 H), 7,33 (s, 1 H).
Etapa 5. Se preparo 6-bromo-7-metoxi-1-(oxetan-3-il)-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio W-bromosuccinimida (30 mg, 0,17°mmol) a 1-(oxetan-3-il)-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'- carboxilato de ferc-butilo (56 mg, 0,17°mmol) en metanol (1,0 ml) a temperatura ambiente. La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y despues se anadio W-bromosuccinimida (4,5 mg) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reaccion se concentro en una corriente de nitrogeno para proporcionar un residuo. Se anadio acetato de etilo (15 ml) y la solucion de reaccion se lavo con acido cttrico al 10 % (3 ml), hidroxido de sodio 1 N (3 ml) y salmuera (3 ml). La fase organica se concentro y se seco a alto vacfo para proporcionar el compuesto del tftulo (74 mg, 100 %) en forma de un solido incoloro. EM +IQPA (M+H) 458,2; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 1,44 (s, 9 H), 1,69 (s a, 4 H), 2,51 (d, J = 15,83 Hz, 1 H), 2,67 (d, J = 15,83 Hz, 1 H), 3,06-3,31 (m, 3 H), 3,54 (s, 3 H), 3,62-3,72 (m, 1 H), 4,39 (s, 1 H), 4,66 (s, 1 H), 4,87-4,93 (m, 1 H), 4,97 (t, J = 6,84 Hz, 1 H), 4,99-5,04 (m, 1 H), 5,30 (s, 1 H), 5,34-5,40 (m, 1 H), 7,43 (s, 1 H).
Etapa 6. Se preparo 1-(oxetan-3-il)-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio ferc-butoxido de potasio 1 M en tetrahidrofurano (0,320 ml) a una solucion de 6-bromo-7-metoxi-1- (oxetan-3-il)-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo 72 mg, 0,16°mmol) en
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tetrahidrofurano (1,0 ml) a temperatura ambiente. La solucion incolora se volvio amarilla despues de la adicion. La solucion se agito a temperatura ambiente durante 16 horas. Se anadio cloruro de hidrogeno 1 N acuoso (0,475 ml, 3 eq.) y la solucion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. El tetrahidrofurano se concentro en una corriente de nitrogeno. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 ml, 3 veces). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera (3 ml), despues la fase organica se concentro y se seco a alto vado para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de un solido de color amarillo palido (54 mg, 96 %). EM -IQPA (M-H) 360,2; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 1,38-1,45 (m, 9 H), 1,46-1,56 (m, 4 H), 2,57 (s, 2 H), 2,82 (s, 2 H), 3,333,53 (m, 4 H), 4,94-5,06 (m, 4 H), 6,08-6,21 (m, 1 H), 7,53 (s, 1 H).
Etapa 7. Se preparo 1-(oxetan-3-il)-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se anadio acido trifluoroacetico (0,2 ml) a una solucion de 1-(oxetan-3-il)-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidrospiro[indazol-5,4'- piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo (50 mg, 0,14°mmol) en diclorometano (2 ml) a 0 °C. El bano de enfriamiento se retiro y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1,5 horas. La mezcla de reaccion se concentro a un residuo en una corriente de nitrogeno y se seco a alto vado durante 20 minutos. El residuo se trituro con eter dietflico (5 ml). El disolvente se decanto y el precipitado resultante se seco a alto vado para proporcionar el compuesto del tftulo (52 mg, 100) en forma de un solido de color amarillo palido. EM +IQPA (M+H) 262,2; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 1,65-1,86 (m, 4 H), 2,63 (s, 2 H), 2,89 (s, 2 H), 3,14-3,27 (m, 4 H), 5,02 (s, 4 H), 6,07-6,21 (m, 1 H), 7,53-7,60 (m, 1 H).
Intermedio 12
Se preparo 1-isopropil-3-metil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 1-isopropil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 10-((dimetilamino)metilen)-9-oxo-3-azaespiro[5.5]undec-7-en-3-carboxilato de bencilo (6,38 g, 18°mmol), preparado como se ha descrito en la preparacion del Intermedio 10, en 90 ml de etanol. A la solucion de reaccion se le anadio acido acetico (2,16 g, 36°mmol) y clorhidrato de 1 -isopropilhidrazina (2,79 g, 25°mmol). La reaccion se calento a reflujo durante 2 horas y despues la solucion de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro al vado para proporcionar un aceite de color naranja que se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida usando acetato de etilo del 12 al 100% en heptano como eluyente para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de una goma de color amarillo (6,58 g, 69 %): EM IEN+ (M+H) 366,5; RMN 1H (400 MHz, CDCh) 6 ppm 7,28-7,39 (m, 5 H), 7,25 (s, 1 H), 6,42 (d, J = 9,95 Hz, 1 H), 5,84 (d, J = 9,95 Hz, 1 H), 5,14 (s, 2 H), 4,41-4,54 (m, 1 H), 3,42-3,65 (m, 4 H), 2,62 (s, 2 H), 1,58-1,70 (m, 2 H), 1,50-1,58 (m, 2 H), 1,49 (d, J = 6,83 Hz, 6 H).
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Se disolvio 1-isopropil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (679 mg, 1,86°mmol) en 15 ml de metanol y se trataron con W-bromosuccinimida (728 mg, 4,09°mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 18 horas. El metanol se retiro a presion reducida. La espuma de color castano resultante se recogio en 50 ml de acetato de etilo y se lavo con hidroxido de sodio 0,5 M (50 ml, 2 veces) y 20 ml de tiosulfato de sodio acuoso saturado. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio, se filtro y se concentro. El aceite resultante se sometio a cromatograffa ultrarrapida (25 g de sflice, gradiente de acetato de etilo 10-80 %/heptano) para proporcionar 784 mg (76 %) del compuesto del tftulo en forma de una espuma de color blanco: +IQPA-EM (M+H) = 554,1, 556,2, 558,2: RMN 1H (400 MHz, CDCls) 6 ppm 7,26-7,42 (m, 5 H), 5,12 (s, 2 H), 4,67 (d, J = 1,76 Hz, 1 H), 4,36 (s, 1 H), 4,27 (m, 1 H), 3,79 (d, J = 11,90 Hz, 1 H), 3,59-3,73 (m, 1 H), 3,53 (s, 3H), 3,24-3,40 (m, 1 H), 3,19 (ddd, J = 13,61, 10,00, 3,12 Hz, 1 H), 2,56 (d, J = 16,19 Hz, 1 H), 2,34 (d, J = 16,19 Hz, 1 H), 1,56-1,85 (m, 4 H), 1,38-1,55 (m, 6 H).
Etapa 3. Se preparo 3-bromo-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 3,6-dibromo-1-isopropil-7-metoxi-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (784 mg, 1,4°mmol) se disolvio en 15 ml de tetrahidrofurano. Se anadio t-butoxido de potasio (2,82 ml, 2 eq, tetrahidrofurano 1 M) y la reaccion se agito durante 18 horas a temperatura ambiente. A la reaccion se le anadieron 25 ml de acido clorhffdrico 2 N. La mezcla se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se diluyo con 25 ml de agua y se extrajo con acetato de etilo (50 ml, 2 veces). Los extractos organicos se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El aceite resultante se sometio a cromatograffa ultrarrapida (50 g de sflice, gradiente de acetato de etilo al 8-66 %/Heptano) para proporcionar 612 mg del compuesto del fftulo en forma de una espuma de color blanco: EM IEN+ (M+H) = 462,5 RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,25-7,38 (m, 5 H), 5,24-5,42 (m, 1 H), 5,12 (s, 2 H), 3,49-3,66 (m, 2 H), 3,46 (dd, J = 7,41, 4,88 Hz, 2 H), 2,63 (s, 2 H), 2,52 (s, 2 H), 1,48-1,65 (m, 4 H), 1,44 (d, J = 6,63 Hz, 6 H).
Etapa 4. Se preparo 3-bromo-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc- butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 3-bromo-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (612 mg, 1,33°mmol) en 10 ml de acido bromhffdrico al 33 %/acido acetico y la mezcla se agito durante 60 minutos a temperatura ambiente. El disolvente se evaporo y el residuo de color rojo-naranja se recogio en 50 ml de agua y se hizo basico con carbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo (50 ml, 2 veces). La fase organica se concnetro a 20 ml y se trato con 20 ml de bicarbonato de sodio acuoso y dicarbonato de di-terc-butilo (348 mg) saturados. La mezcla bifasica se agito durante una hora a temperatura ambiente. Las fases se separaron y la fase organica se seco sobre sulfato de sodio, se filtro y se concentro a presion reducida. El aceite resultante se sometio a cromatograffa ultrarrapida (acetato de etilo al 10-70 %/heptano, 10 g de sflice) para proporcionar 364 mg del compuesto del tftulo. EM IEN+ (M+H) = 413,5; RMN 1H (400 MHz, CDCls) 6 ppm 5,24-5,43 (m, 1 H), 3,41-3,56 (m, 2 H), 3,28-3,41 (m, 2 H), 2,63 (s, 2 H), 2,51 (s, 2 H), 1,47-1,56 (m, 4 H), 1,40-1,49 (m, 15 H).
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Etapa 5. Se preparo 1-isopropil-3-metil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc- butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se combinaron 3-bromo-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc-butilo (440 mg, 1,03mmol), tetraquis trifenilfosfina paladio (119 mg, 0,103°mmol), carbonato de potasio (146 mg, 1,03°mmol) y agua (94 mg, 5,16°mmol), en dimetilformamida (2 ml) y se desgasificaron con nitrogeno durante 2 minutos. El vial de reaccion se sello y se calento en un reactor de microondas durante 30 minutos a 100 °C. El vial se retiro del reactor de microondas y despues se calento a 100 °C en un bloque de calentamiento convencional durante 4 dfas. La reaccion se concentro al vacfo y despues se repartio entre agua (5 ml) y acetato de etilo (5 ml). Las fases se separaron y la fase organica se concentro y despues se sometio a cromatograffa en una columna de 40 g eluyendo con acetato de etilo al 20-40 % en gradiente de heptano para proporcionar 268 mg (72 %) del compuesto del tftulo. EM IEN+ (M+H) = 362,5; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 5,20-5,53 (m, 1 H), 3,32-3,54 (m, 4 H), 2,62 (s, 2 H), 2,50 (s, 2 H), 2,23 (s, 3 H), 1,53 (t, J = 5,76 Hz, 4 H), 1,46 (s, 9 H), 1,44 (d, J = 6,64 Hz, 6 H).
Etapa 6. Se preparo 1-isopropil-3-metil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 1-isopropil-3-metil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc-butilo (375 mg, 1,04 mmol) en 3 ml de eter dietflico y se trato con cloruro de hidrogeno 4 M en dioxano (1 ml). La solucion se agito durante una hora y despues se concentro al vacfo para proporcionar 300 mg del compuesto del tftulo en forma de una espuma de color blanco: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 5,10-5,35 (m, 1 H), 4,34 (s a, 4 H), 2,70 (s, 2 H), 2,56 (s, 2 H), 2,17 (s, 3 H), 1,66 (s a, 4 H), 1,34 (d, J = 6,64 Hz, 6 H).
Intermedio 13
Se preparo 1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-3-carbonitrilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa1. Se preparo 3-ciano-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc- butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera .
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En un tubo de Schlenk lavado abundantemente con nitrogeno se anadio 3-bromo-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc-butilo (250 mg, 0,59°mmol), preparado como se ha
descrito en la preparacion del intermedio 12, aducto de tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0)-cloroformo (23,8 mg, 0,02°mmol), polvo de cinc (9,6 mg, 0,15°mmol), cianuro de cinc (75,7 mg, 0,65°mmol) y 1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno (26,1 mg, 0,05°mmol). Se anadio dimetilacetamida anhidra (3,5 ml) y el matraz se lavo abundantemente con nitrogeno, despues se tapo con una tapa a rosca de Teflon®. La reaccion se agito a 120 °C 5 durante 16 horas. La reaccion se enfrio y despues se filtro a traves de un lecho de celite® lavando con acetato de etilo. El filtrado se lavo con agua y la fase acuosa se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron al vado. El residuo se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida usando acetato de etilo al 5-30 % en gradiente de Heptano para proporcionar 204 mg del compuesto del tftulo en forma de un solido (93 %): EM IEN+ 10 (M-Boc+H) 273,5; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 5,44 (m, 1 H), 3,44 (m, 4H), 2,89 (s, 2H), 2,64 (s, 2H), 1,53 (m, 4H), 1,46-1,43 (m, 15H).
Etapa 2. 1-Isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-3-carbonitrilo
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Se disolvio 3-ciano-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo 15 (70 mg, 0,19°mmol) en diclorometano (3 ml) y acido trifluoroacetico (0,2 ml) y se agitaron a temperatura ambiente
durante 90 minutos. El disolvente se concentro al vado y el residuo se codestilo con tolueno seguido de acetato de etilo para proporcionar 149 mg (100%) del compuesto del tftulo en forma de un solido de color amarillo: EM IEN+ (M+H) 273,5.
Intermedio 14
20 Se preparo 1-isopropil-6-metil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 6-bromo-7-hidroxi-1-isopropil-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
25
Se disolvio 1-isopropil-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (4,20 g, 11°mmol), preparado como se ha descrito en la preparacion del Intermedio 12, en 130 ml de tetrahidrofurano. A la reaccion se le anadio W-bromosuccinimida (2,49 g, 14°mmol) y 30 ml de agua. La reaccion se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. La reaccion se repartio entre acetato de etilo y cloruro de sodio saturado, acuoso. La fase organica se 30 separo, despues, se lavo un tiempo adicional con cloruro de sodio acuoso saturado. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro al vado para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de una espuma de color blanco (5,31 g, 100 %): EM +IEN (M+H) 463,8.
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Se disolvio 6-bromo-7-hidroxi-1-isopropil-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (5,30 g, 11°mmol) en 53 ml de acetona y despues se enfriaron a 0 °C en un bano de hielo. A la solucion se le anadieron 83 ml de reactivo de Jones (Fillion, E. TetraHedron Letters 2004, 46, 1091-1094). El bano de hielo se 5 retiro y la reaccion se dejo calentar a temperature ambiente donde se agito durante 45 minutos. La reaccion se enfrio a 0°C en un bano de hielo y despues se saturo, se anadio bicarbonato de sodio acuoso hasta que no se observo mas desprendimiento de gas. La mezcla resultante se filtro a traves de un lecho de celite® aclarando con acetato de etilo. Las fases del filtrado se separaron y la fase acuosa se extrajo de nuevo con acetato de etilo. Los extractos organicos se combinaron, se lavaron dos veces con agua, una vez con cloruro de sodio saturado acuoso, se 10 secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron al vado para proporcionar el compuesto del tftulo (5,27 g, 100 %): EM IEN+ (M+H) 460,4.
Etapa 3. Se preparo 1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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15 Se disolvio 6-bromo-1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (5,63 g, 12°mmol) en 55 ml de acido acetico, a esto se le anadio polvo de cinc (2,40 g, 37°mmol). La reaccion se agito durante 35 minutos a temperatura ambiente. La reaccion se concentro al vado y despues se repartio entre bicarbonato de sodio acuoso saturado y acetato de etilo. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos organicos se combinaron, se lavaron con agua, cloruro de sodio acuoso saturado, se 20 secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron al vado para proporcionar un aceite. El aceite se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida usando acetato de etilo al 12-100% en Heptano como eluyente para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de un aceite (2,25 g, 48 %): EM IEN+ (M+H) 382,4; RMN 1H (400 MHz , CDCla) 6 ppm 7,28-7,40 (m, 6 H), 5,32-5,45 (m, 1 H), 5,13 (s, 2 H), 3,41-3,61 (m, 4 H), 2,76 (s, 2 H), 2,54 (s, 2 H), 1,50-1,62 (m, 4 H), 1,47 (d, J = 6,63 Hz, 6 H).
25 Etapa 4. Se preparo 1-isopropil-6-metil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se enfrio 1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (397 mg, 1,04°mmol) en tetrahidrofurano (8 ml) a -70 °C. A esto se le anadio bis(trimetilsilil)amida de litio (1,56 ml, 1,56°mmol) 30 en forma de una solucion 1,0 M en tetrahidrofurano durante un periodo de diez minutos. La solucion de color amarillo resultante se agito durante treinta minutos a -70 °C. Se anadio 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)pirimidona (1,6 ml) a la reaccion, se continuo agitando a -70 °C durante diez minutos. A la reaccion se le anadio yodometano (746 mg, 5,2°mmol). La reaccion se dejo calentar a temperatura ambiente donde se agito durante 18 horas. A la reaccion se le anadio bicarbonato de sodio acuoso saturado (2 ml), la mezcla despues se repartio entre agua (20 ml) y acetato de 35 etilo (150 ml). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (150 ml). Las fases organicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y despues se concentraron para proporcionar un aceite transparente. El aceite se purifico mediante cromatograffa en gel de sflice usando acetato de etilo al 10-40 % en heptano como eluyente para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de un solido de color blanco (351 mg,
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85 %): EM IEN+ (M+H) 396,2; RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 6 ppm 7,44 (s, 1 H), 7,35 (s, 5 H), 5,17-5,34 (m, 1 H), 5,06 (s, 2 H), 3,52-3,72 (m, 4 H), 2,79 (s, 2 H), 2,42-2,48 (m, 1 H), 1,38-1,49 (m, 4 H), 1,35 (t, J = 6,74 Hz, 6 H), 1,04 (d, J = 7,04 Hz, 3 H).
Etapa 5. Se preparo 1-isopropil-6-metil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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El compuesto del tttulo se preparo a partir de 1-isopropil-6-metil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'- piperidina]-1'-carboxilato de bencilo de una manera analoga al Intermedio 10, Etapa 6.
Intermedio 15
Se preparo 1-isopropil-6,6-dimetil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 1-isopropil-6,6-dimetil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera .
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Una solucion de 1-isopropil-6-metil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de bencilo (84 mg, 0,21°mmol), descrito en la preparacion del Intermedio 14, en 1 ml de tetrahidrofurano se enfrio a -70 °C y despues se trato con bis(trimetilsilil)amida de litio (0,318 ml, 0,318°mmol) en forma de una solucion 1,0 M en tetrahidrofurano durante diez minutos. Despues, se anadio 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)pirimidona (0,2 ml) a la reaccion. Se continuo la agitacion durante diez minutos a -70 °C, despues se anadio yodometano (152 mg, 1,06°mmol) a la reaccion. La mezcla se dejo calentar a temperatura ambiente donde se mantuvo durante cuatro horas. A la reaccion se la anadio cloruro de amonio acuoso saturado (1 ml), la mezcla despues se repartio entre agua (2 ml) y acetato de etilo (10 ml). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 ml). Las fases organicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y despues se concentraron para proporcionar un aceite transparente de color amarillo. El aceite se purifico mediante cromatograffa en gel de sflice usando acetato de etilo al 10-40 % en heptano como eluyente para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de un aceite transparente (58 mg, 67 %): EM IEN+ (M+H) 410,3; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,28-7,44 (m, 5 H), 7,27 (s, 1 H), 5,40 (m, 1 H), 5,13 (s, 2 H), 3,85-4,24 (m, 2 H), 2,86-3,11 (m, 2 H), 1,58-1,79 (m, 2 H), 1,56 (s, 2 H), 1,46 (d, J = 6,64 Hz, 6 H), 1,19-1,40 (m, 2H), 1,15 (s, 6H).
Etapa 2. Se preparo 1-isopropil-6,6-dimetil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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El compuesto del tttulo se preparo a partir de 1-isopropil-6,6-dimetil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'- piperidina]-1'-carboxilato de bencilo de una manera analoga al Intermedio 10, Etapa 6.
Intermedio 16
Se preparo 3-bromo-1-ferc-butil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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La sal de clorhidrato del Intermedio 10 (1,040 mg, 3,492°mmol), dicarbonato de di-ferc-butilo (800 mg, 3,67°mmol) y trietilamina (730 mg, 7,2°mmol) se combinaron en diclorometano (30 ml). La solucion de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16 horas. A la reaccion se le anadio diclorometano (20 ml). La solucion de reaccion se lavo con acido clorhfdrico 1 N acuoso (5 ml), agua (5 ml) y cloruro de sodio acuoso saturado (5 ml). La fase organica se seco sobre sulfato de magnesio y se concentro para proporcionar el 1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7- tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo (1262 mg, 100 %): EM -IQPA (M-H) 360,3; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,30 (s, 1 H), 3,29-3,56 (m, 4 H), 2,77 (s, 2 H), 2,56 (s, 2 H), 1,67 (s, 9 H), 1,48-1,56 (m, 4 H), 1,46 (s, 9 H).
Etapa 2. Se preparo 3-bromo-1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc- butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se combinaron 1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo
(1,090 mg, 3,015°mmol) y acetato de sodio (1050 mg, 12,80°mmol) en etanol (40 ml) y agua (10 ml). A esta solucion se le anadio bromo (1870 mg, 11,7°mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 4 horas. A la reaccion se le anadio etanol (40 ml). La reaccion se agito durante 16 horas mas. La solucion de reaccion se vertio en agua (20 ml) y se extrajo dos veces con acetato de etilo (75 ml cada una). Los extractos organicos combinados se lavaron dos veces con tiosulfato de sodio acuoso saturado (25 ml cada una) y cloruro de sodio acuoso saturado (25 ml). La fase organica se seco sobre sulfato de magnesio y se concentro a un volumen final de 20 ml para proporcionar un precipitado. La mezcla se filtro y los solidos se recogieron para proporcionar el compuesto del tttulo en forma de un solido (679 mg, 51 %): EM +IQPA (M+H-Boc) 342,1; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 3,28-3,60 (m, 4 H), 2,66 (s, 2 H), 2,56 (s, 2 H), 1,65 (s, 9 H), 1,48-1,55 (m, 4 H), 1,46 (s, 9 H).
Etapa 3. Se preparo 3-bromo-1-ferc-butil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se combinaron 3-bromo-1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4-piperidina]-1'-carboxilato de ferc-butilo (670 mg, 1,52°mmol) y cloruro de hidrogeno 4 M en dioxano (8 ml) y se agitaron durante 2,5 horas. A la reaccion se le anadio eter dietilico (20 ml). Se formo un precipitado que se filtro y los solidos se recogieron para proporcionar el 5 compuesto del tftulo (573 mg, 97 %): EM +IQPA (M+H) 342,1; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 3,24 (t, J = 5,96 Hz, 4 H), 2,80 (s, 2 H), 2,74 (s, 2 H), 1,71-1,92 (m, 4 H), 1,65 (s, 9 H).
Intermedio 17
Se preparo 1'-isopropil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa 1. Se preparo 1-(4-hidroxi-1-(4-metoxibencil)-1H-pirazol-3-il)etanona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera:
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A una solucion agitada de clorhidrato de (4-metoxibencil)hidrazina (13,5 g, 71,5°mmol) en agua (400 ml) se le anadio 15 una solucion de piruvaldelddo (5,2 g, 71,5°mmol) en agua (200 ml) durante un periodo de 10 min. Despues de 50 minutos adicionales, la mezcla de reaccion se extrajo con diclorometano (300 ml, 3 veces), los extractos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se concentraron al vado y el residuo se uso en la siguiente transformacion sin purificacion adicional.
Una solucion agitada del producto de la reaccion anterior (12,3 g, 59,8°mmol) y glioxal (43 g, 299°mmol) en metanol 20 (34 ml)/agua (300 ml) se calento a 100 °C durante 5 h. La mezcla de reaccion se enfrio, se diluyo con acetato de
etilo, la fase organica se seco sobre sulfato de sodio y se concentro al vado. La purificacion del residuo se realizo en una unidad Combiflash® (columna de 300 g, gradiente de acetato de etilo al 10-35 %:Heptanos) y proporciono el compuesto del tftulo (6,04 g). RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 8,05 (s, 1 H) 7,18 (m, J = 8,79 Hz, 2 H), 6,93 (s, 1 H), 6,87 (m, J = 8,60 Hz, 2 H), 5,15 (s, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 2,55 (s, 3 H); m/z (M+1) = 247,0.
25 Etapa 2. Se preparo 1-bencil-2'-(4-metoxibencil)-2'H-espiro[piperidin-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se suspendio 1-(4-hidroxi-1-(4-metoxibencil)-1-H-pirazol-3-il)etanona (350 mg, 1,42°mmol) en 10 ml de metanol y se anadieron N-bencil-4-piperidona (0,25 ml, 1,42°mmol) y pirrolidina (0,036 ml, 0,3 eq). Despues, la mezcla se calento 30 a reflujo durante 18 h. La reaccion se enfrio despues a la temperatura ambiente y el metanol se retiro a presion
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reducida. El aceite de color naranja resultante se repartio entre 50 ml de acetato de etilo y 50 ml de agua. La fase acuosa se extrajo con 50 ml de acetato de etilo adicionales. Las fases organicas se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El aceite resultante se sometio a cromatograffa ultrarrapida (gradiente de acetato de etilo al 50-100 %/Heptano, 25 g de sflice) para proporcionar 428 mg (72 %) de 1 -bencil-2'- 5 (4-metoxibencil)-2'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona en forma de un solido de color amarillo palido. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm 7,25-7,37 (m, 6 H), 6,95 (s, 1 H), 6,81-6,92 (m, 2 H), 5,20 (s, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,49 (s, 2 H), 2,63 (s, 2 H), 2,57 (d, J = 11,3 Hz, 2 H), 2,25-2,44 (m, 2 H), 2,02 (d, J = 12,5 Hz, 2 H), 1,62-1,77 (m, 2 H); m/z (M+1) = 418.5.
Etapa 3. Se preparo 1-bencil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona, que se muestra a 10 continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 1-bencil-2'-(4-metoxibencil)-2'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona (428 mg, 1,28 mmol) en 20 ml de 1,2-dicloroetano y se trataron con 10 ml de acido trifluoroacetico. La mezcla resultante se calento durante 18 horas a 90 °C. La reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro a sequedad a 15 presion reducida. El residuo resultante se recogio en 50 ml de bicarbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo con 50 ml de acetato de etilo, 2 veces. Los extractos organicos se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presion reducida. El aceite resultante se sometio a cromatograffa ultrarrapida (25 g de sflice, gradiente en etapas de 5 volumenes de columna de acetato de etilo al 50 %/Heptano, 10 VC de acetato de etilo al 100%) para proporcionar 278 mg (91 %) de 1-bencil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)- 20 ona en forma de un solido de color amarillo palido. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 7,27 (m, 6 H), 3,55 (s, 2 H), 2,64 (m, 4 H), 2,45 (td, J = 11,7, 2,5 Hz, 2 H), 2,06 (d, J = 12,1 Hz, 2 H), 1,74 (m, 2 H); m/z (M+1) = 298,5.
Etapa 4. Se preparo 1-bencil-1'-isopropil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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25 Se disolvio 1-bencil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona (204 mg, 0,67°mmol) en 10 ml de tetrahidrofurano. Se anadieron 2-propanol (0,11ml, 1,37°mmol) y trifenilfosfina soportada en poffmero (0,5 g, 3°mmol/g de carga) seguido de la adicion de DBAD (322 mg, 1,37°mmol) y se agitaron a temperatura ambiente durante 5 dfas. Se separo mediante filtracion la trifenilfosfina soportada en poffmero y la torta del filtro se lavo con 100 ml de acetato de etilo. El filtrado se concentro y el aceite de color amarillo resultante se trato con 10 ml de HCl 30 4 N/dioxano. La mezcla se agito durante 1 h a temperatura ambiente. Los compuestos volatiles se retiraron a presion
reducida. El lodo resultante se repartio entre 50 ml de bicarbonato de sodio sat. ac. y 50 ml de acetato de etilo. La fase organica se seco sobre sulfato de sodio, se filtro y se concentro a presion reducida. El aceite resultante se sometio a cromatograffa ultrarrapida (acetato de etilo al 30-100 %/gradiente de Heptano, 10 g de sflice) para proporcionar 90 mg (35%) de 1-bencil-1'-isopropil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona en 35 forma de un solido de color amarillo palido. RMn1h (400 MHz, cDcla) 6 ppm 7,30 (m, 3 H), 7,24 (m, 2 H), 7,18 (s, 1 H), 5,14 (spt, 1 H), 3,52 (s, 2 H), 2,60 (m, 4 H), 2,41 (td, J = 11,6, 2,5 Hz, 2 H), 2,06 (d, J = 12,5 Hz, 2 H), 1,71 (m, 2 H), 1,44 (m, 6 H): m/z (M+1) = 340,5.
Etapa 5. Se preparo 1'-isopropil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Se disolvio 1-bencil-1'-isopropil-1'H-espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona (81 mg, 0,22°mmol) en 10 ml de 1, 2-dicloroetano. Se anadio cloroformiato de 1 -cloroetilo (60 ml, 0,54°mmol) y la mezcla se agito durante 1 h a reflujo y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los compuestos volatiles se retiraron a presion reducida y
el residuo se recogio en 10 ml de metanol y se calento a reflujo durante 1 h. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente y los volatiles se retiraron a presion reducida. El residuo se recogio en 50 ml de bicarbonato de sodio acuoso y se extrajo con 30 ml de acetato de etilo saturado, 2 veces. Los extractos organicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para proporcionar 46 mg (86%) de 1 '-isopropil-1 'H- 5 espiro[piperidina-4,5'-pirano[3,2-c]pirazol]-7'(6'H)-ona en forma de un solido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 7,20 (s, 1 H), 5,13 (spt, 1 H), 2,93 (m, 2 H), 2,80 (dt, J = 12,8, 4,0 Hz, 2 H), 2,64 (s, 2 H), 2,02 (m, 2 H), 1,63 (m, 2 H), 1,40 (m, 6 H); m/z (M+1) = 250,2.
Ejemplo 1
Se preparo acido 4-((4-(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1-
10 ilcarbonil)fenoxi)metil)benzoico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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Etapa_____1. Se preparo 4-((4-(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1-
ilcarbonil)fenoxi)metil)benzoato de metilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
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15 Una solucion de acido 4-(4-(metoxicarbonil)benciloxi)benzoico (25 mg, 0,087°mmol), 1-terc-butil-4,6-
dihidrospiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(1H)-ona (26 mg, 0,087°mmol), diisopropiletilamina (53 pl, 0,30°mmol), 1,2,3- benzotriazol-1-ol, monohidrato (14 mg, 0,087°mmol), 4-dimetilaminopiridina (1,1 mg, 0,01°mmol) y 1-etil-3-(3- demietilaminopropil)carbodiimida (19 mg, 0,96°mmol) en diclorometano (0,2 ml) se calento a 30 °C durante 18 h. La mezcla de reaccion se repartio entre acetato de etilo/acido clorhndrico acuoso 0,3 N, la fase organica se seco sobre 20 sulfato de sodio, se concentro al vado y se purifico mediante HPLC preparativa para proporcionar 4-((4-(1-ferc-butil- 7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-ilcarbonil)fenoxi)metil)benzoato de metilo. Columna de HPLC: Waters Atlantis C18 4,6 x 50 mm, 5 um, disolvente: acetonitrilo:agua (TFA al 0,05%); caudal 2 ml/min; gradiente (% organico) inicial = 5 %, final = 95 %, tiempo de gradiente = 4 min, tiempo de retencion = 3,68 min; m/z = 530 (M+1).
25 Etapa 2. A una solucion agitada de 4-((4-(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1- ilcarbonil)fenoxi)metil)benzoato de metilo (39 mg, 0,07°mmol) en tetrahidrofurano (0,75 ml) se le anadio hidroxido de litio acuoso (0,22 ml, 0,22°mmol). Despues de 18 h, se anadieron 0,3 ml de acido clorlddrico acuoso 1 N y 0,2 ml de cloruro de sodio acuoso saturado. La mezcla resultante se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano (4 ml, 3 veces), las fases organicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron al vado para proporcionar una 30 goma (46 mg). La purificacion por HPLC preparativa proporciono el compuesto del tftulo (26 mg). Columna de HPLC: Waters Atlantis C18 4,6 x 50 mm, 5 um, disolvente: acetonitrilo:agua (TFA al 0,05 %); caudal 2 ml/min; gradiente (% organico) inicial = 5 %, final = 95 %, tiempo de gradiente = 4 min, tiempo de retencion = 3,19 min; m/z = 516 (M+1).
Ejemplo 2
Se preparo acido 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1-ilcarbonil)-6-metoxipiridin- 35 2-il)benzoico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
imagen83
5
10
15
20
25
30
35
40
Etapa 1. Se preparo 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-ilcarbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoato de ferc-butilo, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
imagen84
Una solucion de acido 2-(4-(ferc-butoxicarbonil)fenil)-6-metoxiisonicotmico (500 mg, 1,52°mmol) y 1,1- carbonildiimidazol (271 mg, 1,67°mmol) en tetrahidrofurano (30 ml) se agito a reflujo durante 1 h. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, se anadieron secuencialmente 1-isopropil-4,6-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]- 7(1H)-ona (539 mg, 1,68°mmol) y trietilamina (0,32 ml, 2,28°mmol) y la suspension resultante se calento a temperatura de reflujo durante 1 h. Despues de enfriarse, la mezcla de reaccion se diluyo en acetato de etilo, se lavo con acido clorhndrico acuoso 1 N, cloruro de sodio acuoso saturado, se seco sobre sulfato de sodio para proporcionar 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-ilcarbonil)-6-metoxipiridin-2- il)benzoato de ferc-butilo (850 mg) en forma de una espuma de color blanco. Este material se recogio en la siguiente etapa sin purificacion adicional. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 6 ppm 8,60 (t, J = 1,66 Hz, 1 H), 8,20 (dt, J = 8,05, 1,44 Hz, 1 H), 8,01 (dt, J = 7,80, 1,37 Hz, 1 H), 7,50 (t, J = 7,80 Hz, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,33 (d, J = 0,98 Hz, 1 H), 6,64 (d, 1 H), 5,35 (spt, J = 6,44 Hz, 1 H), 4,04 (s, 3 H), 3,71-3,84 (m, 2 H), 3,36-3,42 (m, 2 H), 2,79 (d, J = 2,34 Hz, 2 H), 2,58 (s, 2 H), 1,66-1,72 (m, 2 H), 1,61 (s, 9 H), 1,56 (s, 2 H), 1,40-1,48 ( m, 6 H); m/z (M+1) = 559,2.
Etapa 2. Una solucion de 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-ilcarbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoato de ferc-butilo (850 mg, 1,52°mmol) en diclorometano (40 ml) y acido trifluoroacetico (13 ml) se agito durante 18 h. Los disolventes se retiraron al vacfo y el residuo se purifico mediante cromatograffa ultrarrapida (columna de gel de sflice de 40 g, eluyendo con un gradiente de acetato de etilo al 20-100 %:heptanos (acido acetico al 0,5 %) para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de un solido de color blanco (568 mg). RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 8,72 (t, J = 1,66 Hz, 1 H), 8,31 (dt, J = 8,15, 1,39 Hz, 1 H), 8,06 (dt, J = 7,80, 1,27 Hz, 1 H), 7,57 (t, J = 7,80 Hz, 1 H), 7,48 (d, J = 0,98 Hz, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 6,74 (d, 1 H), 5,36 (spt, J = 6,76 Hz, 1 H), 4,05 (s, 3 H), 3,82-3,91 (m, 1 H), 3,65-3,74 (m, 1 H), 3,44 (t, J = 5,76 Hz, 2 H), 3,24 (s, 0 H), 2,87 (d, J = 1,37 Hz, 2 H), 2,63 (d, J = 2,93 Hz, 2 H), 1,63-1,71 (m, 2 H), 1,52-1,60 (m, 2 H), 1,41 (d, J = 6,24 Hz, 3 H), 1,38 (d, J = 6,24 Hz, 3 H); m/z (M+1) = 503,2
Ejemplo 3
Se preparo acido 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-ilcarbonil)-6-oxo-1,6- dihidropiridin-2-il)benzoico, que se muestra a continuacion, de la siguiente manera.
imagen85
Una mezcla de acido 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidina]-1'-ilcarbonil)-6- metoxipiridin-2-il)benzoico (30 mg, 0,06°mmol), yoduro de potasio (30 mg, 0,18°mmol) en acido acetico (1 ml) se agito a 120 °C durante 7 horas. La mezcla de reaccion se filtro, se concentro al vacfo y se purifico mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del tftulo (12 mg). Columna de HPLC: Waters Atlantis C18 4,6 x 50 mm, 5 um, disolvente: acetonitrilo:agua (TFA al 0,05%); caudal 2 ml/min; gradiente (% organico) inicial = 5 %, final = 95 %, tiempo de gradiente = 4 min, tiempo de retencion = 2,32 min; m/z = 489,1451 (M+1).
Los compuestos que se enumeran en la Tabla 1 a continuacion se prepararon usando procedimientos analogos a los descritos anteriormente para la smtesis de los compuestos de los Ejemplos 1-3 usando los materiales de partida apropiados que estan disponibles en el mercado, se prepararon usando preparaciones bien conocidas por los expertos en la materia o se prepararon de una manera analoga a las vfas descritas anteriormente para otros intermedios. Los compuestos que se enumeran a continuacion se aislaron inicialmente en forma de la base libre y pueden convertirse en una sal farmaceuticamente aceptable para el ensayo.
Tabla 1
R 0 ^NyAl^A2 0
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
4
f-butilo ;tJLn o O HNV EM (MH+1) 516,3; RMN 1H (CD3OD, 400 MHz): 8,70 (s, 1H), 8,27 (d, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,46 (t, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,16 (d, 1H), 3,403,75 (s a, 4H), 3,05 (s, 3H), 2,86 (s, 2H), 2,60 (s, 2H), 1,61 (s, 13H).
5
isopropilo O O HN^ EM (MH+1) 558,3; RMN 1H (CDCl3, 400 MHz): 8,36 (s, 1H), 8,27 (d, 1H), 7,49 (t, 1H), 7,37 (s, 2H), 7,05 (d, 1H), 3,56 (H, 1H), 3,61 (m, 4H), 3,07 (s, 3H), 2,58 (s, 2H), 1,48 (m, 4H), 1,44 (d, 6H).
6
f-butilo -<JL^ O O EM (MH+1) 486,24; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8,30 (s, 1H), 8,21 (d, 1H), 7,79 (d, 1H), 7,65 (d, 2H), 7,55 (t, 1H), 7,50 (d, 2H), 7,31 (s, 1H), 3,62 (a, 1H), 3,48 (a, 2H), 2,82 (s, 2H), 2,62 (s, 2H), 1,801,48 (m, 13H), 0,86 (a, 1H).
7
isopropilo O O EM (MH+1) 472,26; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8,31 (5, 1H), 8,09 (d, 1H), 7,79 (d, 1H), 7,65 (d, 2H), 7,53 (t, 1H), 7,50 (d, 2H), 7,38 (s, 1H), 5,375,35 (m, 1H), 3,82 (a, 1H), 3,47 (a, 2H), 2,81 (s, 2H), 2,60 (s, 2H), 1,70-1,55 (m, 5H), 1,45 (d, 6H).
8
isopropilo OH O HN^ EM (MH+1) 502,27; RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) 5 ppm 8,15 (d, 2H), 8,07 (d, 2H), 7,47 (d, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,19 (d, 1H), 5,35 (H, 1H), 3,50 (s a, 4H), 3,05 (s, 3H), 2,86 (s, 2H), 2,62 (s, 2H), 1,60 (s a, 4H), 1,40 (d, 6H).
9
isopropilo O EM (MH+1) 503,5; RMN 1H (400 MHz, CDCH) 5 ppm 1,39-1,48 (m, 6 H), 1,53 (s a, 2H), 1,70 (s a, 2H), 2,59 (s, 2H), 2,80 (s, 2H), 3,40 (s a, 2 H), 3,713,88 (m, 2H), 4,06 (s, 3H) 5,31-5,42 (m, 1 H) 6,68 (s, 1 H), 7,38 (s, 2 H), 8,15 (m, 4 H).
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
10
t-butilo O EM (MH+1) 517,6; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 ppm 1,50-1,57 (m, 2H), 1,66 (s, 9 H), 1,67-1,74 (m, 2H), 2,64 (s, 2 H) 2,83 (s, 2 H), 3,39-3,38 (m, 2H), 3,723,91 (m, 4H), 4,07 (s, 3 H) 6,71 (d, J = 0,98 Hz, 1 H) 7,32 (s, 1 H) 7,39 (d, J = 0,98 Hz, 1 H) 8,05 - 8,26 (m, 4 H).
11
t-butilo rj"^N OH O EM (M+H) 517,6; RMN 1H (400 MHz, CDCla) 8 ppm 1,49-1,57 (m, 2H), 1,66 (s, 9 H), 1,68-1,75 (m, 2H), 2,64 (s, 2 H), 2,84 (s, 2 H), 3,43 (s a, 2H), 3,72-3,92 (m, 2H), 4,08 (s, 3 H), 6,68 (d, J = 0,98 Hz, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,45 (d, J = 0,98 Hz, 1 H), 7,59 (t, 1 H), 8,16 (d, J = 7,82 Hz, 1 H), 8,34 (d, J = 7,82 Hz, 1 H), 8,76 (s, 1 H).
12
t-butilo OH O HN^ EM (MH+1) 406,5; RMN 1H (400 MHz, CDCH) 8 ppm 8,00 (s, 1 H) 7,79 (s, 1 H) 7,32 - 7,47 (m, 3 H) 5,30 - 5,41 (m, 1 H) 4,07 (s, 3 H) 3,61 (s a, 4 H) 2,79 (s, 2 H) 2,58 (s, 2 H) 1,61 (s a, 2 H) 1,53 (s a, 2 H) 1,43 (d, J = 6,84 Hz, 6 H).
13
t-butilo OH vYLn O HN^/ EM (MH+1) 516,28; RMN 1H (CDCH, 400 MHz): 8,16 (m, 4H), 7,38 (s a, 2H), 7,05 (d, 1H), 5,37 (H, 1H), 3,48 (m 6H), 2,60 (s, 2H), 2,16 (s a, 4H), 1,45 (d, 6H), 1,23 (s a ap., 3H).
14
isopropilo OH o HN\^ EM (MH+1) 511; RMN 1H (CDCH, 400 MHz) 8 ppm 8,16 (m, 4H), 7,38 (s a, 2H), 7,05 (d, 1H), 5,37 (H, 1H), 3,48 (m 6H), 2,60 (s, 2H), 2,16 (s a, 4H), 1,45 (d, 6H), 1,23 (s a ap., 3H).
15
isopropilo 'Y^V Y JL/oh o EM (MH+1) 511; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 13,04 (s a, 1H), 11,77 (s, 1H), 8,16 (s, 1 H), 7,93 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,89 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,60 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,40 - 7,48 (m, 2 H), 7,27 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,74 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,24 (spt, J = 6,6 Hz, 1 H), 3,75 (s a, 2 H), 3,65 (s a, 2 H), 2,79 (s, 2 H), 2,58 (s, 2 H), 1,50 (s a, 4 H), 1,33 (d, J = 6,6 Hz, 6 H).
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
16
isopropilo HN"YY 0^H EM (MH+1) 511; RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 12,75 - 13,11 (m, 1 H), 11,78 (s, 1 H), 8,03 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,76 (d, J = 8,2 Hz, 2 H), 7,40 - 7,50 (m, 2 H), 7,27 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 7,0 Hz, 1 H), 6,79 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,25 (5pt, J = 6.5 Hz, 1 H), 3,76 (s a, 2 H), 3,66 (s a, 2 H), 2,79 (s, 2 H), 2,59 (s, 2 H), 1,44 - 1,58 (m, 4 H), 1,33 (d, J = 6.6 Hz, 6 H).
17
f-butilo ^ j\.OH O EM (MH+1) 525; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,76 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,93 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,59 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,43 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,27 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,74 (s, 1 H), 3,78 (d, J = 12,9 Hz, 2 H), 3,63 (s a, 2 H), 2,81 (s, 2 H), 2,60 (s, 2 H), 1,55 (s, 9 H), 1,49 (s a, 4 H).
18
f-butilo o-^oh EM (MH+1); RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,77 (s, 1 H), 8,03 (d, J = 8,2 Hz, 2 H), 7,76 (d, J = 8,2 Hz, 2 H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,27 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,79 (d, J = 1,0 Hz, 1 H), 3,78 (s a, 2 H), 3,64 (s a, 2 H), 2,82 (s, 2 H), 2,61 (s, 2 H), 1,55 (s, 9 H), 1,49 (s a, 4 H).
19
f-butilo ;,/JL^.N O O EM (MH+1) 530,31; RMN 1H (CD3OD, 400 MHz) 5 ppm 8,64 (s, 1H), 8,25 (d, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,80 (s a, NH), 7,50 (m, 2H), 7,30 (s, 1H), 7,10 (d, 1H).
20
isopropilo 'V^V5'n ° O HN^/ EM (MH+1) 516,28; RMN 1H (DMSO-d6, 400 MHz) 5 ppm 8,15 (d, 2H), 7,97 (d, 2H), 7,41 (d, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,20 (d, 1H), 6,23 (s a, NH), 3,87 (s a, 4H), 2,92 (s, 3H), 2,78 (s, 2H), 2,58 (s, 2H), 1,54 (s, 9H), 1,46 (s a, 4H).
21
f-butilo /=\ NyO A” o o EM (MH+1) 477; Tiempo de retencion de CL/EM 2,83 minutos en un Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, elucion en gradiente 5 pm (del 5 % al 95 %) con agua:acetonitrilo (TFA al 0,05 %), gradiente de 4 minutos y 5 minutos de tiempo de espera
22
isopropilo /=\ NyO WH O O EM (MH+1) 463; Tiempo de retencion de CL/EM 2,57 minutos en un Waters Atlantis dC18 4,6x50mm, elucion en gradiente 5 pm (5 % to 95 %) con agua:acetonitrilo (TFA al 0,05 %), gradiente de 4 minutos y 5 minutos de tiempo de espera
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
23
isopropilo O EM (MH+1) 530,29; RMN 1H (CDCla, 400 MHz) 6 ppm 8,72 (s, 1H), 8,33 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,52 (t, 1H), 7,36 (d, 2H), 7,05 (d, 1H), 5,67 (s a, 1H), 5,36 (H, 1H), 4,43 (m, 1H), 3,62 (m, 4H), 3,09 (s, 1H), 2,81 (s, 2H), 2,59 (s, 2H), 1,61 (m, 4H), 1,45 (d, 6H), 1,30 (d, 6H)
24
f-butilo O EM (MH+1) 544,3; RMN 1H (CDCla, 400 MHz) 6 ppm 8,57 (s, 1H), 8,36 (d, 1H), 7,36-7,54 (m, 2H), 7,31 (s, 1H), 7,04 (d, 1H), 4,22 (s a, 1H), 3,65 (s a, 4H), 2,83 (s, 2H), 2,62 (s, 2H), 1,65 (s, 13 H), 1,32 (d, 6H)
25
isopropilo O EM (MH+1) 530,29; RMN 1H (CDCH, 400 MHz) 6 ppm 8,10-8,18 (dd, 4H), 7,38 (m, 2H), 7,04 (d, 1H), 5,39 (H, 1H), 4,36 (s a, 1H), 3,61 (s a, 4H), 2,81 (s, 2H), 2,59 (s, 2H), 1,70 (m, 4H), 1,45 (d, 6H), 1,29 (d, 6H)
26
isopropilo HN"N ° OH EM (MH+1) 512,3; RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 8,24 (s, 1 H), 8,07 (m, 2 H), 7,86 (m, 2 H), 7,57 (s, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,25 (d, J = 0,98 Hz, 1 H), 5,24 (t, J = 6,63 Hz, 1 H), 3,71 (s a, 2 H), 3,59 (s a, 2H), 2,78 (s a, 2 H), 2,60 (s, 2 H), 1,46 (s a, 4 H), 1,32 (d).
27
isopropilo O o EM (MH+1) 489,15; Tiempo de retencion de CL/EM 2,29 minutos en un Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, elucion en gradiente 5 pm (5 % to 95 %) con agua:acetonitrilo (TFA al 0,05 %), gradiente de 4 minutos y 5 minutos de tiempo de espera
28
isopropilo HN^O vSr^ \ T Q EM (MH+1) 512,2; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 8,54 (d, J = 6,06 Hz, 1 H), 8,48 (t, J = 1,66 Hz, 1 H), 8,25 (dt, J = 7,77, 1,39 Hz, 1 H), 8,10 (dt, J = 8,11, 1,42 Hz, 1H), 7,70 -7,80 (m, 2 H), 7,41 (s, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 5,32 - 5,42 (m, 1 H), 3,85 (s a, 4 H), 2,89 (s, 2 H), 2,64 (s, 2 H), 1,66 (s a, 4 H) 1,41 (d).
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
29
isopropilo HN^1 XS\ T Q o EM (MH+1) 512,3; RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 8,37 (d, J = 4,88 Hz, 1 H) 8,07 (m, 2 H) 7,87 (m, 2 H) 7,43 (s, 1 H) 7,26 (d, J = 4,88 Hz, 1 H) 6,79 (d, J = 2,15 Hz, 1 H) 5,23 (d, J = 6,44 Hz, 1 H) 3,69 (s, 4 H) 2,78 (s, 2 H) 2,59 (s, 2 H) 1,50 (s a, 4 H) 1,32 (d).
30
isopropilo o HO—^ \) .IV 'V^N A H EM (MH+1) 512; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 8,46 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 8,33 - 8,37 (m, 2 H), 8,058,10 (m, 2 H), 7,99 (dd, J = 6,7, 0,7 Hz, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,34 (d, J = 0,8 Hz, 1 H), 5,38 (spt, J = 6,5 Hz, 1 H), 3,75 - 3,94 (m, 4 H), 2,91 (s, 2 H), 2,66 (s, 2 H), 1,68 (s a, 4 H), 1,43 (s, 6 H).
31
isopropilo .tQ ov ~° EM (MH+1) 555,3; Tiempo de retencion de CL/EM 3,09 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5 um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
32
isopropilo OH 0^ o 1 EM (MH+1) 516,3; Tiempo de retencion de CL/EM 2,77 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5 um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
33
isopropilo Q^OH fl N o 1 EM (MH+1) 516; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 5 ppm 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,97 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,42 (s, 1 H), 7,15 (d, J = 0,8 Hz, 1 H), 7,07 (s, 1 H), 5,38 (spt, J = 6,7 Hz, 1 H), 3,83 - 3,91 (m, 1 H), 3,69 - 3,76 (m, 1 H), 3,45 - 3,52 (m, 2 H), 3,33 - 3,36 (m, 6 H), 2,90 (s, 2 H), 2,66 (d, J = 2,7 Hz, 2 H), 1,68 - 1,74 (m, 2 H), 1,58 - 1,64 (m, 2 H), 1,42 (t, J = 6,3 Hz, 6 H).
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
34
isopropilo 0 HO-^ \ ) )=N jf\/) 5 H EM (MH+1) 513,3; Tiempo de retencion de CL/EM 2,4 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
35
isopropilo 0 Voh \) \=n ,di ''v^n 5 H EM (MH+1) 512,2; Tiempo de retencion de CL/EM 2,2 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
36
isopropilo 0 Voh \) )=N / /I >-N "Sr 5 H EM (MH+1) 513,3; Tiempo de retencion de CL/EM 2,41 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
37
isopropilo 0^,0H [1 H O EM (MH+1) 511,2; Tiempo de retencion de CL/EM 2,82 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
38
isopropilo htO \ T Q ^OH O EM (MH+1) 512,24; Tiempo de retencion de CL/EM 2,21 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
39
isopropilo O O EM (MH+1) 511,3; Tiempo de retencion de CL/EM 2,87 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
40
isopropilo EM (MH+1) 512,28; Tiempo de retencion de CL/EM 2,27 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
41
isopropilo 'Sf^N OH S H or EM (MH+1) 511,2; Tiempo de retencion de CL/EM 3,19 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
42
isopropilo OH O HN^ cf3 EM (MH+1) 570,27; Tiempo de retencion de CL/EM 3,11 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
43
isopropilo O fV^OH '"VV O ^NH EM (MH+1) 502; Tiempo de retencion de CL/EM 2,06 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
Ej.
R1 -C(O)-A1-L-A2 Datos analiticos
44
isopropilo O^OH o O ^NH EM (MH+1) 502; Tiempo de retencion de CL/EM 2,09 minutos. Columna: Waters Atlantis dC18 4,6 x 50 mm, 5um Modificador: TFA al 0,05% Gradiente: H2O al 95 %/MeCN al 5% lineal a H2O al 5 %/MeCN al 95% durante 4,0 min, ESPERA a H2O al 5 %/MeCN al 95% a 5,0 min, Flujo: 2,0 ml/min.
45
isopropilo N"4 ) VST o EM (MH+1) 516; RMN 1H (CD3OD + 1 gota de DCM, 400 MHz): 8,70 (s, 1H), 8,14 (d, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,59 (m, 2H), 7,50 (m, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 5,41 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,89 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 2,89 (dd, 2H), 2,63 (s, 2H), 1,79 a 1,62 (m, 4H), 1,42 (d, 6H).
46
isopropilo 7'Q_0_^ o EM (M+H) 512; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 8,09 (d, J = 8,2 Hz, 2 H), 7,77 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,66 (m, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 5,39 (spt, J = 6,6 Hz, 1 H), 4,30 - 4,39 (m, 1 H), 4,14 - 4,22 (m, 1 H), 3,86 - 3,95 (m, 1 H), 3,70 - 3,79 (m, 1 H), 2,91 (s, 2 H), 2,66 (s, 2 H), 1,66 - 1,74 (m, 4 H), 1,42 (d, J = 6,8 Hz, 6 H)
47
isopropilo 'V^N \-OH o O EM (M+H) 512; RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 6 ppm 8,30 (t, J = 1,7 Hz, 1 H), 7,99 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,59 - 7,66 (m, 1 H), 7,54 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 5,38 (spt, J = 6,6 Hz, 1 H), 4,30 - 4,40 (m, 1 H), 4,13 - 4,23 (m, 1 H), 3,85 - 3,95 (m, 1 H), 3,69 -3,79 (m, 1 H), 2,90 (s, 2 H), 2,65 (s, 2 H), 1,63 - 1,77 (m, 4 H), 1,42 (dd, J = 6,6, 1,8 Hz, 6H)
48
isopropilo rr^TN;N HN~n' O EM (MH + 1) 496; RMN 1H (CDCla, 400 MHz): 8,31 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,78 (m, 3H), 7,65 (m, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,41 (s, 1H), 5,37 (m, 1H), 3,86 (s a, 1H), 3,72 (s a, 1H), 2,88 (s, 2H), 2,50 (s, 2H), 1,60 (m, 4H), 1,40 (d, 6H)
49
f-butilo rT^TN;N HN^N' O EM (MH + 1) 510,25; RMN 1H (CDCla, 400 MHz): 8,32 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,80 (m, 3H), 7,60 (t, 1H), 7,54 (d, 2H), 7,32 (s, 1H), 3,90 (s a, 1H), 3,70 (s a, 1H), 3,50 (s a, 2H), 2,85 (s, 2H), 2,65 (s, 2H), 1,56 (m, 13 H).
DATOS FARMACOLOGICOS Protocolos Biologicos
La utilidad de los compuestos de presente invencion, en el tratamiento de enfermedades (tales como las que se 5 detallan en el presente documento) en animales, particularmente mairnferos (por ejemplo, seres humanos) puede demostrarse por la actividad de los mismos en ensayos convencionales conocidos por el experto habitual en la
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materia, incluyendo los ensayos in vitro e in vivo que se describen a continuacion. Dichos ensayos tambien proporcionan un medio por el cual las actividades del compuesto de la presente invencion pueden compararse con las actividades de otros compuestos conocidos.
Inhibicion directa de las actividades de ACC1 y ACC2
La ACC actividad inhibidora del compuesto de la presente invencion se demostro mediante procedimientos basados en procedimientos convencionales. Por ejemplo la inhibicion directa de la actividad de ACC, para el compuesto de Formula (1) se determino usando preparaciones de ACC1 recombinante Humana (ACCIrh) y ACC2 recombinante humana (ACC2rh). Se proporcionan secuencias representativas de la ACC1 y la ACC2 humanas recombinantes que pueden usarse en el ensayo en la Figura 1 (SEQ ID NO. 1) y la Figura 2 (SEQ. ID NO. 2), respectivamente.
[1] Preparacion de ACCIrh. Dos litros de celulas SF9, infectadas con baculovirus recombinante que contema ADNc de ACC1 humana de longitud completa, se suspendieron en tampon de lisis enfriado con hielo (Tris 25°mM, pH 7,5; NaCl 150°mM; glicerol al 10 %; imidazol 5°mM (EMD Bioscience; Gibbstown, NJ); TCEP 2°mM (BioVectra; Charlottetown, Canada); Benzonasa nucleasa (10000U/100g de pasta celular; Novagen; Madison, WI); coctel inhibidor de la proteasa libre de EDTA (1 comprimido/50 ml; Roche Diagnostics, Mannheim, Alemania). Las celulas se lisaron en 3 ciclos de congelacion-descongelacion y se centrifugaron a 40.000 X g durante 40 minutos (4 °C). El sobrenadante se cargo directamente en una columna en bruto HisTrap FF (GE Healthcare; Piscataway, NJ) y se eluyo con un gradiente de imidazol de hasta 0,5 M sobre 20 volumenes de columna (VC). Las fracciones que conteman ACC1 se reunieron y se diluyeron 1:5 con Tris 25°mM, pH 7,5, TCEP 2°mM, glicerol al 10 % y se cargaron directamente en una CaptoQ (GE Healthcare) y se eluyeron con un gradiente de NaCl de hasta 1 M sobre 20 VC. Los grupos fosfato se retiraron de la ACC1 purificada mediante incubacion con fosfatasa lambda (100 U/10°|jM de protema diana; New England Biolabs; Beverly, MA) durante 14 horas a 4 °C; se anadio acido okadaico (concentracion final de 1jM; Roche Diagnostics) para inhibir la fosfatasa. La ACC1 purificada se cambio a Tris 25°mM, pH 7,5, TcEp 2°mM, glicerol al 10%, NaCl 0,5 M mediante dialisis de 6 horas a 4 °C. Las almuotas se prepararon y se congelaron a -80 °C.
[2] Medicion de la inhibicion de ACC1rh. La ACC1h se ensayo en una placa de 384 pocillos Costar n.° 3676 (Costar, Cambridge, MA) usando el kit de ensayo de FP de deteccion de ADP Transcreener (Bellbrook Labs, Madison, Wisconsin) usando las condiciones recomendadas por el fabricante para una reaccion de ATP 50°jM. Las condiciones finales para el ensayo fueron HEPES 50°mM, pH 7,2, MgCh 10°mM, citrato tripotasico 7,5°mM, DTT 2°mM, BSA 0,1 mg/ml, acetil-CoA 30°jM, ATP 50 jM y KHCO3 10°mM. Normalmente, una reaccion de 10 jl se realizo durante 120 min a 25 °C y se anadieron 10 jl de tampon de detencion y deteccion Transcreener y la combinacion se incubo a temperatura ambiente durante 1 hora adicional. Los datos se adquirieron en un lector de fluorescencia Envision (PerkinElmer) usando una espejo general dual Cy5 FP de 620 de excitacion, un filtro Cy5 FP de 620 de excitacion y un filtro de emision 688 (S) y emision 688 (P).
[3] Preparacion de ACC2rh. La inhibicion de la ACC2 humana se midio usando ACC2 recombinante humana purificada (ACC2rh). Brevemente, se adquirio un clon de ACC2 de longitud completa Cytomax de Cambridge Bioscience Limited y se secuencio y se subclono en PCDNA5 FRT TO-TOPO (Invitrogen, Carlsbad, CA). La ACC2 se expreso en celulas CHO mediante la induccion de tetraciclina y se recolecto en 5 litros de DMEM/F12 con glutamina, biotina, higromicina y blasticidina con tetraciclina 1 jg/ml (Invitrogen, Carlsbad, CA). Despues, el medio acondicionado que contema ACC2 se aplico a una columna de Softlink Soft Release Avidin (Promega, Madison, Wisconsin) y se eluyo con biotina 5°mM. Se eluyeron 4 mg de ACC2 a una concentracion de 0,05 mg/ml (determinada mediante A280) con una pureza estimada del 95 % (determinada mediante A280). La ACC2 purificada se dializo en Tris 50°mM, NaCl 200°mM, DTT 4°mM, EDTA 2°mM y glicerol al 5 %. La protema reunida se congelo y se almaceno a -80 °C, sin perdida de actividad tras la descongelacion. Para la medicion de la actividad de ACC2 y la evaluacion de la inhibicion de ACC2, los compuestos de ensayo se disolvieron en DMSO y se anadieron a la enzima ACC2rh como una solucion madre 5x con una concentracion final de DMSO del 1 %.
[4] Medicion de la inhibicion de ACC2. La ACC2h se ensayo en una placa de 384 pocillos Costar n.° 3676 (Costar, Cambridge, MA) usando el kit de ensayo de FP de deteccion de ADP Transcreener (Bellbrook Labs, Madison, Wisconsin) usando las condiciones recomendadas por el fabricante para una reaccion de ATP 50°uM. Las condiciones finales para el ensayo fueron HEPES 50°mM, pH 7,2, MgCh 10°mM, citrato tripotasico 7,5°mM, DTT 2°mM, BSA 0,1 mg/ml, acetil-CoA 30°jM, ATP 50 jM y KHCO3 8°mM. Normalmente, una reaccion de 10 jl se realizo durante 50 min a 25 °C y se anadieron 10 jl de tampon de detencion y deteccion Transcreener y la combinacion se incubo a temperatura ambiente durante 1 hora adicional. Los datos se adquirieron en un lector de fluorescencia Envision (PerkinElmer) usando una espejo general dual Cy5 FP de 620 de excitacion, un filtro Cy5 FP de 620 de excitacion y un filtro de emision 688 (S) y emision 688 (P).
Los resultados de uso de los ensayos Transcreener de ACC1h recombinante y ACC2h recombinante descritos anteriormente se resumen en la siguiente tabla para los compuestos de Formula (I) ejemplificados en los Ejemplos anteriores. Todos los ejemplos en ambos ensayos se realizaron con un mmimo de n = 3.
Ejemplo
ACC1h (nM) ACC2h (n
1
176 184
2
59,6 84,1
3
5400 2260
4
116 53
5
163 114
6
260 115
7
113 74,2
8
156 175
9
30,9 29,7
10
30,1 35,5
11
180 268
12
152 94,5
13
221 143
14
139 76,1
15
6,11 7,88
16
9,75 11,6
17
15,6 21,6
18
4,5 14,6
19
837 487
20
355 300
21
627 507
22
1010 685
23
1370 420
24
3140 557
25
600 202
26
20,4 7,49
27
2910 1140
28
6,70 5,35
29
13,7 6,16
30
16,1 18,8
31
23,1 54,8
32
31,8 12,5
33
16,3 8,7
34
55,8 42,6
35
32,6 12,5
36
44,4 29,3
37
6,6 3,2
38
33,5 19,9
39
29,1 29,8
40
10,2 6,1
41
8,6 15,2
42
39,9 30,4
43
98,4 133
44
34,4 35,9
45
4,9 10,0
46
11,6 15,7
47
32,5 25,7
48
59,5 28,0
49
54,7 24,7
5
10
15
20
25
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Evaluacion in vivo de corta duracion de la inhibicion de ACC en animales de experimentacion
La actividad inhibidora de ACC de los compuestos de la presente invencion puede confirmarse in vivo mediante la evaluacion de su capacidad para reducir los niveles de malonil-CoA reductasa en el hngado y el tejido muscular de animales tratados.
Medicion de la inhibicion de la produccion de malonil-CoA en animales experimentales. En este procedimiento, se aleatorizaron antes del estudio ratas macho Sprague-Dawley, mantenidos con dieta convencional y agua a discrecion (225-275 g). Los animales o bien fueron alimentados o bien se mantuvieron en ayunas durante 18 horas antes del comienzo del experimento. A las dos horas en el ciclo de luz los animales se dosificaron por via oral con un volumen de 5 ml/kg, (metilcelulosa al 0,5 %; vehnculo) o con el compuesto apropiado (preparado en el vehnculo). Se incluyeron controles de vetnculo alimentados para determinar los niveles basales de malonil-CoA tisular mientras que se incluyeron animales en ayunas para determinar el efecto que tema el ayuno en los niveles de malonil-CoA. Una hora despues de la administracion del compuesto los animales fueron asfixiados con CO2 y se retiraron los tejidos. Espedficamente, la sangre se recogio mediante puncion cardfaca y se coloco en tubos bD Microtainer que conteman EDTA (BD Biosciences, NJ), se mezclo y se coloco en hielo. El plasma se uso para determinar la exposicion al farmaco. Se retiraron el hngado y el cuadriceps, se fijaron por congelacion inmediatamente, se envolvieron en papel de aluminio y se almacenaron en nitrogeno lfquido.
Los tejidos se pulverizaron en N2 lfquido para asegurar la uniformidad en la toma de muestras. La malonil-CoA se extrajo del tejido (150-200 mg) con 5 volumenes de acido tricarboxflico al 10% en Matriz de Lisis A (MP Biomedicals, PN 6910) en un FastPrep FP120 (Thermo Scientific, velocidad = 5,5; durante 45 segundos). El sobrenadante que contema la malonil-CoA se retiro de los restos celulares tras la centrifugacion a 15000 x g durante 30 minutos (centnfuga Eppendorf 5402). Las muestras se congelaron de manera estable a -80°C hasta que se complete el analisis.
El analisis de niveles de malonil CoA en el hngado y el tejido muscular puede evaluarse utilizando la siguiente metodologfa.
El procedimiento utiliza los siguientes materiales: sal de tetralitio de malonil-CoA y sal de trilitio de malonil-13C3-CoA que se adquirieron de Isotec (Miamisburg, OH, EE.UU.), perclorato de sodio (Sigma, n.° del cat. 410241), acido tricloroacetico (ACROS, n.° del cat. 42145), acido fosforico (J.T. Baker, n.° del cat. 0260-01), formiato de amonio (Fluka, n.° del cat.17843), metanol (calidad HPLC, J.T. Baker, n.° del cat. 9093-33) y agua (calidad HPLC, J.T. Baker, 4218-03) se usaron para hacer las fases moviles necesarias. Las columnas de extraccion en fase solida en lmea Strata-X, 25°pm, 20°mm x 2,0°mm DI (n.° del cat. 00M-S033-B0-CB) se obtuvieron de Phenomenex (Torrance, CA, EE.UU.). Las columnas de fase inversa SunFire C18, 3,5°pm, 100°mm x 3,0°mm ID (n.° del cat. 186002543) se adquirieron de Waters Corporation (Milford, MA, EE.UU.).
Este procedimiento puede realizarse utilizando el siguiente equipo. Cromatograffa bidimensional utilizando una bomba binaria Agilent 1100, una bomba cuaternaria Agilent 1100 y dos valvulas de dos posiciones de 6 puertos Valco Cheminert. Las muestras se introdujeron a traves de un automuestreador LEAP HTC PAL con pila refrigerada Peltier mantenido a 10 °C y un bucle de muestreo de 20 pl. Las soluciones de lavado de agujas para el automuestreador eran acido tricloroacetico al 10% en agua (p/v) para el Lavado 1 y metanol:agua 90:10 para el Lavado 2. La columna analttica (Sunfire) se mantuvo a 35 °C utilizando un horno de columna MicroTech Scientific Micro-LC. El eluyente se analizo en un espectrometro de masas de cuadrupolo triple ABI Sciex API3000 con Turbo Ion Spray.
Se realizo una cromatograffa bidimensional en paralelo usando distintas condiciones de gradiente de elucion para la extraccion en fase solida en lmea y la cromatograffa de fase inversa. El diseno general del procedimiento fue de manera que la primera dimension se utilizo para la muestra de limpieza y la captura del analito de interes seguido de un breve acoplamiento de ambas dimensiones de elucion desde la primera dimension a la segunda dimension. Las dimensiones se desacoplaron posteriormente permitiendo la elucion por gradiente del analito de la segunda dimension para la cuantificacion mientras se preparaba simultaneamente la primera dimension de la muestra siguiente en la secuencia. Cuando ambas dimensiones se acoplaron brevemente, el flujo de la fase movil en la primera dimension se invirtio para la elucion del analito en la segunda dimension, permitiendo el ancho del pico, la forma de pico y el tiempo de elucion optimos.
La primera dimension del sistema HPLC utilizo la columna de extraccion en fase solida en lmea Phenomenex strata- X y la fase movil consistfa en perclorato de sodio 100°mM/acido fosforico 0,1 % (v/v) para el disolvente A y metanol para el disolvente B.
La segunda dimension del sistema de HPLC utilizo la columna de fase inversa Waters SunFire C18 y la fase movil consistfa en formiato de amonio 100°mM para el disolvente A y metanol para el disolvente B. La condicion inicial del gradiente se mantuvo durante 2 minutos y durante este tiempo el analito se transfirio a la columna analttica. Era importante que la condicion inicial estuviera en una concentracion suficiente para eluir el analito de la columna SPE en lmea mientras la mantema en la analftica. Despues, el gradiente se elevo linealmente al 74,5 % de A en 4,5 minutos antes de una etapa de lavado y reequilibrado.
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La espectrometna de masas, cuando se combina con la HPLC, puede ser un procedimiento altamente selectivo y sensible para la medicion cuantitativa de analitos en matrices complejas, pero todavfa esta sujeta a interferencias y a la supresion. Mediante el acoplamiento de un HPLC bidimensional al espectrometro de masas, estas interferencias se redujeron significativamente. Ademas, mediante la utilizacion de la funcion de monitorizacion de reacciones multiples (MRM) del espectrometro de masas de triple cuadrupolo, la relacion de senal a ruido mejoro significativamente.
Para este ensayo, el espectrometro de masas se opero en el modo de ion positivo con una tension del TurbolonSpray de 2250 V. El gas de nebulizacion se calento a 450 °C. El potencial de desagrupacion (PD), el potencial de centralizacion (PC) y la energfa de colision (EC) se ajustaron a 60, 340 y 42 V, respectivamente. La resolucion del Cuadrupolo 1 (Q1) se ajusto a la resolucion unitaria con el Cuadrupolo 3 (Q3) ajustado a baja resolucion. El gas CAD se ajusto a 8. Las transiciones MRM controladas fueron para el malonil CoA: 854,1 ^ 347,0 m/z (L. Gao y col. (2007) J. Chromatogr B 853,303-313); y para malonil-13C3-CoA: 857,1 ^ 350,0 m/z con tiempos de permanencia de 200 ms. El eluyente se desvio al espectrometro de masas cerca del tiempo de elucion esperado para el analito, de lo contrario, se desvio a los residuos para ayudar a preservar la fuente y mejorar la robustez de la instrumentacion. Los cromatogramas resultantes se integraron usando el software Analyst (Applied Biosystems). Las concentraciones tisulares de malonil CoA se calcularon a partir de una curva patron preparada en una solucion de acido tricloroacetico al 10 % en agua.
Las muestras que comprenden la curva patron para la cuantificacion de malonil-CoA en los extractos de tejido se prepararon en acido tricloroacetico (TCA) al 10% (p/v) y oscilo de 0,01 a 1 pmol/pl. Se anadio malonil-13C3-CoA (concentracion final de 0,4 pmol/pl) a cada componente y muestra de la curva patron como patron interno.
Se prepararon seis controles de calidad intra-ensayo; tres partir de un extracto agrupado preparado a partir de animales en ayunas y tres a partir de un conjunto hecho de animales alimentados. Estos se realizaron como muestras independientes con adiciones de 0, 0,1 o 0,3 pmol/pl de 12C-malonil-CoA, asf como con malonil-13C3-CoA (0,4 pmol/pl). Cada control de calidad intra-ensayo contema un 85 % de extracto de tejido acuoso con la porcion restante constituida por patron interno (0,4 pmol/pl) y 12C-malonil-CoA. Se incluyeron controles inter ensayo en cada ejecucion; que consistfan en una muestra de cuadriceps agrupada de animales en ayuno y una de animales alimentados y/o una muestra de fngado agrupada de animales en ayuno y una de animales alimentados. Todos estos controles teman adiciones de malonil-C3CoA (0,4 pmol/pl).

Claims (15)

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    REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de Formula (I)
    imagen1
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo; en la que
    R1 es alquilo (CrCa), cicloalquilo (C3-C7), tetrahidrofuranilo o oxetanilo; en el que dicho alquilo (Ci-Ca) esta opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi (C1-C3), hidroxi, fluoro, fenilo, tetrahidrofuranilo u oxetanilo;
    R2 es hidrogeno, halo, alquilo (C1-C3) o ciano;
    R3 son cada uno independientemente hidrogeno o alquilo (C1-C3);
    L es un enlace directo o un alquileno (CrCa) en el que un carbono del alquileno (CrCa) esta opcionalmente reemplazado por -C(O)-, -C(O)NH-, -NHC(O)-, -O-, -S-, NH o N-alquilo (C1-C3);
    Z es CH2 u O;
    A1 y A2 son cada uno independientemente arilo (Ca-C1o), heteroarilo de 5 a 12 miembros o arilo heterodclico condensado de 8 a 12 miembros; en el que dicho arilo (Ca-C1o), heteroarilo de 5 a 12 miembros o arilo heterodclico condensado de 8 a 12 miembros estan cada uno opcionalmente sustituidos con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente de alquilo (C1-C3), alcoxi (C1-C3), halo, amino, alquilamino (C1- C3), di-alquilamino (C1-C3), hidroxi, ciano y amido en el que la porcion alquilo del alquilo (C1-C3), alcoxi (C1-C3), alquilamino (C1-C3) y di-alquilamino (C1-C3) esta opcionalmente sustituida con uno a cinco fluoro; y en el que uno de A1 o A2 esta sustituido con CO2R4, (C1-Ca)CO2R4, tetrazolilo o tetrazolilo (C1-Ca); y R4 es alquilo (C1-C8), cicloalquilo (C3-C8) o alquil (C1-Ca)-cicloalquilo (C3-C8);
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  2. 2. El compuesto de la reivindicacion 1 en el que R1 es alquilo (C1-Ca), cicloalquilo (C3-C7) o tetrahidrofuranilo; R2 es hidrogeno o metilo; cada R3 es hidrogeno; y L es un enlace directo u O; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  3. 3. El compuesto de la reivindicacion 2 en el que R1 es alquilo (C2-C4); A1 y A2 son cada uno independientemente fenilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, piridinilo, pirimidinilo, indolilo, benzopirazinilo, benzoimidazolilo, benzoimidazolonilo, pirrolopiridinilo, pirrolopirimidinilo, pirazolopiridinilo, pirazolopirimidinilo, indazolilo, indolinonilo, naftiridinilo, quinolinilo, quinolinonilo, dihidroquinolinonilo, oxo-dihidroquinolinonilo, isoquinolinilo, isoquinolinonilo, dihidroisoquinonilo u oxo-dihidroisoquinonilo, en el que cada A1 y A2 estan opcionalmente sustituidos con uno a tres sustituyentes seleccionados independientemente de fluoro, cloro, metilo, metoxi, amino, metilamino, dimetilamino, amido o ciano; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  4. 4. El compuesto de la reivindicacion 3 en el que R1 es isopropilo o t-butilo; y R2 es hidrogeno; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  5. 5. El compuesto de la reivindicacion 4 en el que A1 es fenilo, piridinilo, indazolilo, indolilo, benzoimidazolilo, pirrolopiridinilo o pirrolopirimidinilo; cada uno opcionalmente sustituido con un metilo, metoxi, metilamino o dimetilamino; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
    a. El compuesto de la reivindicacion 4 o 5 en el que A2 es fenilo sustituido con CO2H o tetrazolilo; y L es un enlace directo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  6. 7. El compuesto de la reivindicacion a en el que A1 es fenilo, indolilo o benzoimidazolilo opcionalmente sustituidos con metilo, o piridinilo opcionalmente sustituido con metilamino o dimetilamino; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  7. 8. Un compuesto seleccionado de:
    acido 4-((4-(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,a,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1-ilcarbonil)fenoxi)metil)benzoico; acido 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,a,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-a-metoxipiridin-2-
    il)benzoico;
    acido 3-(4-(1-isopropil-7-oxo-1,4,a,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-a-oxo-1,a-dihidropiridin- 2-il)benzoico;
    acido 3-{5-[(1-terc-butil-7-oxo-1,4,a,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1-il)carbonil]-a-
    (metilamino)piridin-2-il}benzoico;
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    acido 3-{5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[mdazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carboml]-6-
    (metilamino)piridin-2-il}benzoico;
    acido 4'-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carboml]bifeml-3-carboxflico; acido 4'-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetral^idro-1'H-espiro[indazol-5,4'-pipe^din]-1'-il)carboml]bifeml-3-carbox^lico; acido 4-{5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-
    (metilamino)piridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-metoxipiridin-2- il}benzoico;
    acido 3-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-metoxipiridin-2- il}benzoico;
    acido 4-{4-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-iTietoxipiridin-2- il}benzoico;
    acido 3-{4-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carboml]-6-iTietoxipiridin-2- il}benzoico;
    acido 4-{5-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[mdazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carboml]-6-
    (metilamino)piridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{5-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carboml]6-(etilaiTiino)pindin- 2-il}benzoico;
    acido 4-{6-(etilamino)-5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]piridin- 2-il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-4-
    il}benzoico;
    acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-4-
    il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[mdazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carboml]-1H-indol-4-
    il}benzoico;
    acido 4-{2-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carboml]-1H-indol-4-
    il}benzoico;
    acido 3-{5-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-(etilamino)piridin- 2-il}benzoico;
    acido 3-{6-(etilamino)-5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]piridin- 2-il}benzoico;
    acido 3-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-pipendin]-1'-il)carboml]-5-(1,3-oxazol-2-
    il)benzoico;
    acido 4-({4-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-
    il)carbonil]fenoxi}metil)benzoico;
    acido 3-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-5-(1,3-oxazol-2-
    il)benzoico;
    acido 3-{6-(isopropilamino)-5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-
    il)carbonil]piridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{5-[(1-ferc-butil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-
    (isopropilamino)piridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{6-(isopropilamino)-5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-
    il)carbonil]piridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indazol-4-
    il}benzoico;
    acido 3-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-oxo-1,6-
    dihidropiridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6oxo-1,6-
    dihidropiridin-2-il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[2,3-
    b]piridin-4-il}benzoico;
    acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[2,3-
    b] piridin-4-il}benzoico;
    acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[3,2-
    c] piridin-4-il}benzoico;
    acido (5-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-4-il}-2-
    metoxifenil)acetico;
    acido 3-{6-(dimetilamino)-4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-
    il)carbonil]piridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{6-(dimetilamino)-4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-
    il)carbonil]piridin-2-il}benzoico;
    acido 4-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-7H-pirrolo[2,3-
    d] pirimidin-4-il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[3,2-
    c]piridin-4-il}benzoico;
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    acido 3-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-7H-pirrolo[2,3-
    d]pirimidin-4-il}benzoico;
    acido 4-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-4-
    il}benzoico;
    acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[2,3-
    c]piridin-4-il}benzoico;
    acido 3-{6-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-4-
    il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[2,3-
    c]piridin-4-il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-6-
    il}benzoico;
    acido 4-{5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-[(2,2,2-
    trifluoroetil)amino]piridin-2-il}benzoico;
    acido 3-{5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-
    (metilamino)piridin-3-il}benzoico;
    acido 4-{5-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-
    (metilamino)piridin-3-il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-4- il}benzoico;
    acido 4-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-5- il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-5- il}benzoico;
    acido 3-(6-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-ilcarbonil)-2-metil-1H-
    benzo[d]imidazol-4-il)benzoico;
    acido 4-(6-(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il-carbonil)-2-metil-1H-
    benzo[d]imidazol-4-il)benzoico;
    acido 1-isopropil-1'-{[3'-(1H-tetrazol-5-il)bifenil-4-il]carbonil}-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4'-piperidin]-7(6H)-ona; y 1-terc-butil-1-{[3-(1H-tetrazol-5-il)bifenil-4-il]carbonil}-1,4-dihidroespiro[indazol-5,4-piperidin]-7(6H)-ona;
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  8. 9. El compuesto de la reivindicacion 8 seleccionado de
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-4- il}benzoico;
    acido 4-{6-(dimetilamino)-4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-
    il)carbonil]piridin-2-il}benzoico;
    acido 3-{2-[(l-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-indol-4-
    il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-pirrolo[2,3- b]piridin-4-il}benzoico;
    acido 4-{2-[(l-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-5- il}benzoico;
    acido 3-{2-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-1H-bencimidazol-5- il}benzoico;
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  9. 10. El compuesto de la reivindicacion 8, que es
    acido 4-{4-[(1-isopropil-7-oxo-1,4,6,7-tetrahidro-1'H-espiro[indazol-5,4'-piperidin]-1'-il)carbonil]-6-metoxipiridin-2- il}benzoico;
    o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
  10. 11. Una composicion farmaceutica que comprende una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y un excipiente, diluyente o vehfculo farmaceuticamente aceptables.
  11. 12. La composicion de la reivindicacion 11 que comprende ademas al menos un agente antidiabetico adicional.
  12. 13. La composicion de la reivindicacion 12 en la que dicho agente antidiabetico se selecciona entre el grupo que consiste en metformina, acetohexamida, clorpropamida, diabinese, glibenclamida, glipizida, gliburida, glimepirida, gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida, tolbutamida, tendamistat, trestatina, acarbosa, adiposina, camiglibosa, emiglitato, miglitol, voglibosa, pradimicina-Q, salbostatina, balaglitazona, ciglitazona, darglitazona,
    englitazona, isaglitazona, pioglitazona, rosiglitazona, troglitazona, exendina-3, exendina-4, trodusquemina, resveratrol, extracto de hirtiosal, sitagliptina, vildagliptina, alogliptina y saxagliptina.
  13. 14. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo o composicion farmaceutica de una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13 para su uso como
    5 medicamento.
  14. 15. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo para su uso en un procedimiento para tratar o retrasar la progresion o la aparicion de la diabetes de tipo 2 y los trastornos relacionados con la diabetes en animales.
  15. 16. Una composicion farmaceutica de una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13 para su uso en un 10 procedimiento para tratar o retrasar la progresion o la aparicion de la diabetes de tipo 2 y los trastornos relacionados
    con la diabetes en animales.
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