ES2578728T3 - Proceso para la preparación de compuestos análogos de ciclopamina - Google Patents

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Abstract

Proceso para la producción de un alcaloide esteroideo de ciclopropilo de la fórmula 2:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde cada R1 y R8 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, nitro, aciltio, carboxamida, sulfonamida, carboxilo, nitrilo, sulfato, -OP(L)(OR20)2, -XC(L)-R21 o -XC(L)-X-R21; en donde R1 también puede ser un azúcar; cada X es O o NR en donde R es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo o aralquilo; L es O o S; R2 y R9 son independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino , acilamino, aralquilamino, heteroarilo o heteroaralquilo; R5 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, alquilselenio, aralquilselenio, arilselenio, alquiltio, aralquiltio, ariltio, heteroarilo, o heteroaralquilo; cada R3, R4, R6, R7, R13 y R14 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, heteroarilo, o heteroaralquilo; o R1 y R2 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman (C>=O)-, y R4 y R5 tomados conjuntamente forman un doble enlace, o R1 es hidroxilo y R2 es H, y R10 y R11 tomados juntos forman un grupo representado por 1b**Fórmula** en donde Z es C(R23)(R23); R12 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21, -CO2R21, -SO2R21, -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]qR21, -[(W)-N(R21) C(O)]qR21, -[(W)-C(O)]qR21, -[(W)-C(O)O]qR21, -[(W)-OC(O)]qR21, -[(W)-SO2]qR21, -[(W)-N(R21)SO2]qR21, -[(W)- C(o)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)-N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21, en donde cada W es independientemente un dirradical, y q es 1, 2, 3, 4, 5, o 6; cada R15, R16, y R17 son independientemente H, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino; o R15 y R16 tomados conjuntamente, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)- o -C(S)-; R18 y R19 son independientemente H, alquilo, aralquilo, haluro, amido, o éster; cada R20 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; cada R21 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20)2]p-R25 en donde p es 0-6; o cualesquiera dos ocurrencias de R21 en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros que contiene hasta dos heteroátomos seleccionados de N, O, S, y P; y cada R23 es independientemente alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, alcoxi, ariloxi, aciloxi, sililoxi, nitrilo, -C(O)R21, -CO2R21, -SO2R21, y -C(O)N(R21)2; cada R25 es independientemente H, hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20, -N(R20)C(O)OR20, -N(R20)SO2(R20), - COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), -SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20, -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR20, - S(O)2OR20, -OP(L)(OR20)(OR20), -NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20) en donde: R12 es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21, -CO2R21, -SO2R21, -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]pR21, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21, -[(W)-C(O)]qR21, -[(W)- C(O)O]qR21, -[(W)-OC(O)]qR21, -[(W)-SO2]qR21, -[(W)-N(R21)SO2]qR21, -[(W)-C(O)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)- N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21; q es 1, 2, 3, 4, 5, o 6; R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R21 es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20)2]p-R25; o cualesquiera dos ocurrencias de R21 pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R25 es hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20, -N(R20)C(O)OR20, -N(R20)SO2(R20), -COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), - SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20, -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR19, -S(O)2OR20, -OP(L)(OR20)(OR20), - NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR21)(OR20), siempre que exista al menos un grupo representado por la fórmula 1b en dicho compuesto de fórmula 2. en donde un alcaloide esteroideo aislado como un producto natural o un alcaloide esteroideo sintetizado o una forma de los mismos protegida en N es ciclopropanada usando un complejo 1,1-haloalquilmetal.

Description

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DESCRIPCIÓN
Proceso para la preparación de compuestos análogos de ciclopamina
5 Solicitud relacionada
Esta solicitud está relacionada con la solicitud estadounidense No. 2011/0166353. La invención está dirigida a una materia como la definida en las reivindicaciones; cualquier divulgación que vaya más allá de las reivindicaciones como se definieron ha sido incorporada por referencia.
Antecedentes de la invención
La vía de señalización hedgehog es esencial para numerosos procesos durante el desarrollo embrionario. Los miembros de la familia hedgehog de proteínas secretadas controlan el patrón de proliferación, diferenciación y del tejido
15 celular. La vía fue descifrada primero en el mosca de la fruta Drosophila, pero desde entonces se ha demostrado que está altamente conservada en los invertebrados y vertebrados, incluidos los humanos. La actividad en general de la vía de señalización hedgehog disminuye después de la embriogénesis en la mayoría de las células, pero la vía permanece activa en ciertos tipos de células adultas. Recientemente, se ha demostrado que la activación incontrolada de la vía hedgehog se traduce en ciertos tipos de cáncer, como se detalla a continuación.
El polipéptido Hedgehog es una proteína secretada que funciona como un ligando de señalización en la vía hedgehog. Ejemplos de los genes y proteínas hedgehog se describen en las publicaciones PCT WO 95/18856 y WO 96/17924. Tres formas diferentes de la proteína hedgehog se encuentran en los seres humanos; Sonic hedgehog (Shh), Desert hedgehog (Dhh) e Indian hedgehog (Ihh). Sonic hedgehog es el miembro hedgehog más frecuente en los mamíferos, y
25 también es el ligando mejor caracterizado de la familia hedgehog. Antes de la secreción, Shh experimenta una escisión intramolecular y una reacción de modificación lipídica. El péptido lipídico modificado es responsable de todas las actividades de señalización.
Dos proteínas transmembrana están implicadas en la transducción de señales de la vía hedgehog; el receptor transmembrana con doce parches (Ptc) y la proteína transmembrana con siete alisados (Smo).
Los hallazgos en la técnica sugieren que Hedgehog actúa uniéndose a PTC, liberando de este modo un efecto inhibidor de Ptc en Smo. Ya que Ptc y Smo son ambas proteínas transmembrana, un escenario propuesto es que ellas se asocian físicamente para formar un complejo receptor, aunque también son plausibles mecanismos indirectos de 35 acción. La desrepresión de Smo a partir de la inhibición de Ptc implica más probablemente un cambio conformacional en Smo. Ptc, sin embargo, no es esencial para la actividad de Smo, ya que Smo se convierte en constitutivamente activa en la ausencia completa de la proteína Patched (Alcedo y colaboradores, véase más arriba; Quirk y colaboradores (1997) Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 62: 217-226). Una vez se desreprime Smo es rápida y altamente fosforilada y transduce una señal que activa la transcripción a través de los factores de transcripción Gli (homólogo de la proteína Ci de Drosophila) (Alexandre y colaboradores (1996) Genes Dev. 10: 2003-13)). El factor de transcripción Gli sobrerregula muchos genes implicados en el crecimiento y desarrollo (Alexandre y colaboradores, véase más arriba). La señalización Hedgehog es esencial en muchas etapas del desarrollo, especialmente en la formación de simetría izquierda-derecha. La pérdida o reducción de la señalización hedgehog conduce a múltiples deficiencias de desarrollo y malformaciones, siendo una de las más llamativas es ciclopía (Belloni y colaboradores
45 (1996) Nature Genetics 14: 353-6).
Recientemente, se ha informado de que se presenta activación de mutaciones de la vía hedgehog en carcinoma esporádico de células basales (Xie y colaboradores (1998) Nature 391: 90-2) y tumores neuroectodérmicos primitivos del sistema nervioso central (Reifenberger y colaboradores (1998) Cancer Res 58: 1798-803). Se ha demostrado también activación incontrolada de la vía hedgehog en numerosos tipos de cáncer, tales como cánceres del tracto GI, incluyendo cáncer pancreático, de esófago, gástrico (Berman y colaboradores (2003) Nature 425: 846-51, Thayer y colaboradores (2003) Nature 425: 851-56), cáncer de pulmón (Watkins y colaboradores (2003) Nature 422: 313-317, cáncer de próstata (Karhadkar y colaboradores (2004), Nature 431: 707-12, Sheng y colaboradores (2004) Molecular Cancer 3: 29-42, Fan y colaboradores (2004) Endocrinology 145: 3961-70), cáncer de mama (Kubo y colaboradores 55 (2004) Cancer Research 64: 6071-74, Lewis y colaboradores (2004) Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia.
2: 165-181) y cáncer hepatocelular (Sicklick y colaboradores (2005) conferencia de ASCO, Mohini y colaboradores (2005) conferencia de AACR).
Se ha demostrado que la inhibición de moléculas pequeñas de la actividad de la vía hedgehog produce como resultado la muerte celular en una cantidad de diferentes tipos de cáncer que tienen activación incontrolada de la vía hedgehog (Véase, por ejemplo, Berman y colaboradores, 2003 Nature 425: 846-51).
Actualmente se están explorando antagonistas de la vía hedgehog en un gran número de condiciones clínicas en las que se puede obtener un efecto terapéutico para una condición o trastorno mediante la inhibición de uno o más 65 aspectos de la actividad de la vía Hedgehog. Aunque el enfoque principal ha estado en el cáncer, los investigadores han encontrado que la inhibición de moléculas pequeñas de la vía hedgehog ha demostrado que mejora los síntomas de la
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psoriasis (Tas y colaboradores, 2004 Dermatology 209: 126-131, la solicitud estadounidense publicada No. 20040072913 (incorporada aquí por referencia)). La psoriasis es una enfermedad crónica de la piel muy común, típicamente caracterizada por lesiones de la piel que contienen por lo general pápulas eritematosas y placas con una escama plateada, aunque existen variaciones tanto en la piel como en otras partes del cuerpo. Actualmente se cree que
5 la soriasis es una enfermedad autoinmune, pero su etiología aún es poco comprendida.
Un inhibidor de la vía hedgehog que ha suscitado un gran interés es el producto natural ciclopamina. La ciclopamina fue aislada por primera vez del lirio Veratrum californicum en 1966 después de que se comprobó que la descendencia de las ovejas de pastoreo nacieron con graves deformidades de nacimiento. En un esfuerzo por identificar el(los) agente(s) responsable(s) de causar estas deformidades de nacimiento, la FDA investigó las posibles fuentes de tetrágenos e identificó a la familia jervina de alcaloides esteroideos, incluyendo al compuesto ciclopamina, como los tetrágenos responsables de las deformidades de nacimiento.
Mucho más tarde, se encontró que el mecanismo de acción de la ciclopamina era a través de la inhibición de la
15 actividad de la vía hedgehog (Cooper y colaboradores (1998) Science 280: 1603-7, Chen y colaboradores, (2002) Genes and Development 16: 2743-8). La ciclopamina y compuestos relacionados han demostrado tener actividades contra el cáncer a través de la acción sobre la vía hedgehog. A pesar de la promesa inicial, no hay miembros de esta familia de compuestos, o análogos de los mismos, que se hayan desarrollado con éxito como agentes contra el cáncer. La presente invención satisface esta necesidad y tiene otras ventajas relacionadas.
Resumen de la invención
La presente invención proporciona análogos de alcaloides esteroideos de la familia de la ciclopamina que son útiles para inhibir la proliferación de las células y/o la promoción de apoptosis en una célula, tal como en el tratamiento de
25 trastornos proliferativos tales como cánceres. Los antagonistas de la vía hedgehog de la presente invención se pueden usar para inhibir la proliferación (u otras consecuencias biológicas) de células o tejidos, tales como en un paciente, caracterizado por tener un fenotipo de pérdida de función de Ptc, un fenotipo de ganancia de función de Smo o un fenotipo de ganancia de función de Hedgehog.
En ciertas aplicaciones, los presentes métodos se utilizan para contrarrestar los efectos fenotípicos de la activación no deseada de una vía Hedgehog, tal como las mutaciones resultantes de la ganancia de función de hedgehog, pérdida de función de Ptc o ganancia de función de Smo. Por ejemplo, los métodos presentes pueden involucrar poner en contacto una célula (in vitro o in vivo) con un antagonista de vía hedgehog de la presente invención (que se define más adelante) en una cantidad suficiente para antagonizar la activación de la vía que depende de Smo. Tal antagonismo detendrá o
35 hará más lenta la proliferación celular no deseada y puede conducir a la muerte celular.
En ciertas realizaciones, los métodos y compuestos de la presente invención se pueden usar para regular la proliferación de células y/o la muerte celular in vitro y/o in vivo tal como en el tratamiento de trastornos malignos de la cabeza, el cuello, la cavidad nasal, senos paranasales, nasofaringe, cavidad oral, orofaringe, laringe, hipofaringe, glándulas salivales, paragangliomas, páncreas, estómago, piel, esófago, árbol hepático o biliar, hueso, intestino, colon, recto, ovarios, próstata, pulmón, mama, sistema linfático, sangre, sistema nervioso central de la médula ósea, o del cerebro.
En ciertas realizaciones, los métodos y compuestos de la presente invención se pueden usar para tratar los síntomas de
45 la psoriasis en un sujeto. Los compuestos de la presente invención se pueden usar para tratar la psoriasis como agente único o en combinación con uno o más agentes contra la psoriasis. En realizaciones particulares, los compuestos de la presente invención se administran tópicamente a un sujeto que requiera del mismo.
Los compuestos de la presente invención se pueden formular además como una preparación farmacéutica que comprende un excipiente farmacéuticamente aceptable, para administración a un paciente como un medio de tratamiento del cáncer. Los antagonistas de la vía hedgehog de la presente invención y/o las preparaciones que los contienen se pueden administrar a un paciente para el tratamiento de condiciones que implican una proliferación celular no deseada, por ejemplo, cáncer y/o tumores de la cabeza, el cuello, la cavidad nasal, senos paranasales, nasofaringe, cavidad oral, orofaringe, laringe, hipofaringe, glándulas salivales, paragangliomas, páncreas, estómago, piel, esófago,
55 hígado, árbol hepático y biliar, hueso, intestino, colon, recto, ovarios, próstata, pulmón, mama, sistema linfático, sangre, sistema nervioso central de la médula ósea o el cerebro. En ciertas realizaciones, tales compuestos o preparaciones se administran sistémicamente, por ejemplo en forma parenteral y/o localmente, por ejemplo, por vía tópica.
Descripción detallada de la invención
Definiciones
Las definiciones de los términos utilizados en este documento tienen el propósito de incorporar las definiciones actuales del estado de la técnica reconocidas para cada término en los campos químico y farmacéutico. Según sea el caso, se
65 proporcionan ejemplos. Las definiciones se aplican a los términos tal como se usan en toda esta memoria, a menos que se limite en casos específicos, ya sea individualmente o como parte de un grupo más grande.
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El término "heteroátomo" es reconocido en la técnica y se refiere a un átomo de cualquier elemento distinto de carbono
o hidrógeno. Heteroátomos ilustrativos incluyen boro, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre y selenio.
5 El término "alquilo" es reconocido en la técnica, e incluye grupos alifáticos saturados, incluyendo grupos alquilo de cadena lineal, grupos alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo (alicíclicos), grupos cicloalquilo sustituidos con alquilo, y grupos alquilo sustituidos con cicloalquilo. En ciertas realizaciones, un alquilo de cadena lineal o de cadena ramificada tiene aproximadamente 30 o menos átomos de carbono en su cadena principal (por ejemplo, de 1 a 30 átomos de carbono para cadena lineal, de 3 a 30 átomos de carbono para cadena ramificada) y, alternativamente, aproximadamente 20 o menos. Del mismo modo, los cicloalquilos tienen de aproximadamente 3 hasta aproximadamente 10 átomos de carbono en su estructura de anillo, y, alternativamente, aproximadamente 5, 6 o 7 carbonos en la estructura de anillo. Los grupos alquilo, a menos que se especifique lo contrario, pueden estar opcionalmente sustituidos con sustituyentes adecuados. El número de sustituyentes está típicamente limitado por el número de valencias disponibles en el grupo alquilo; por tanto, un grupo alquilo puede estar sustituido por reemplazo de
15 uno o más de los átomos de hidrógeno que estarían presentes en el grupo no sustituido. Los sustituyentes adecuados para los grupos alquilo incluyen halo, =O, =N-CN, =N-OR', =NR', OR', NR'2, SR', SO2R’ SO2NR'2, NR'SO2R', NR'CONR'2, NR'COOR', NR'COR', CN, COOR', CONR'2, OOCR', COR', y NO2, donde cada R' es independientemente H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, heteroalquilo de 2 a 6 átomos de carbono, acilo de 1 a 6 átomos de carbono, heteroacilo de 2 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, heteroarilo de 5 a 10 átomos de carbono, arilalquilo de 7 a 12 átomos de carbono, o heteroarilalquilo de 6 a 12 átomos de carbono, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados de halo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, heteroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, acilo de 1 a 6 átomos de carbono, heteroacilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxi, amino, y =O; y en donde dos R' en el mismo sustituyente o en átomos adyacentes se pueden enlazar para formar un anillo de 3-7 miembros que contiene opcionalmente hasta tres heteroátomos seleccionados de N, O y S;
25 A menos que se especifique de otro modo el número de carbonos, "alquilo inferior" se refiere a un grupo alquilo, como se definió anteriormente, pero que tiene de uno hasta aproximadamente diez átomos de carbono, de forma alternativa de uno hasta aproximadamente seis átomos de carbono en su cadena principal. Del mismo modo, "alquenilo inferior" y "alquinilo inferior" tienen longitudes de cadena similares.
El término "aralquilo" es reconocido en la técnica y se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo arilo (por ejemplo, un grupo aromático o heteroaromático).
Los términos "alquenilo" y "alquinilo" se reconocen en la técnica y se refieren a grupos alifáticos insaturados análogos 35 en longitud y posible sustitución con los alquilos descritos anteriormente, pero que contienen al menos un enlace doble
o triple, respectivamente, y pueden contener una mezcla tanto de enlaces dobles como triples. Los grupos alquenilo y alquinilo también están opcionalmente sustituidos, a menos que se especifique lo contrario, por los mismos sustituyentes descritos anteriormente para los grupos alquilo.
"Heteroalquilo", "heteroalquenilo", y "heteroalquinilo" y similares se definen de manera similar a los correspondientes grupos hidrocarbilo (alquilo, alquenilo y alquinilo), pero los términos ‘hetero’ se refieren a grupos que contienen 1-3 heteroátomos O, S o N o combinaciones de los mismos dentro del residuo de la cadena principal; por lo tanto al menos un átomo de carbono de un grupo alquilo, alquenilo, o alquinilo correspondiente se sustituye por uno de los heteroátomos especificados para formar un grupo heteroalquilo, heteroalquenilo, o heteroalquinilo. Los tamaños típicos
45 y preferidos para heteroformas de grupos alquilo, alquenilo y alquinilo son generalmente los mismos que para los grupos hidrocarbilo correspondientes, y los sustituyentes que pueden estar presentes sobre las heteroformas son los mismos que los descritos anteriormente para los grupos hidrocarbilo. Por razones de estabilidad química, también se entiende que, a menos que se especifique lo contrario, tales grupos no incluyen más de dos heteroátomos contiguos, excepto cuando está presente un grupo oxo en N o S como en un grupo sulfonilo.
El término "arilo" es reconocido en la técnica y se refiere a grupos aromáticos de un solo anillo de 5, 6 y 7 miembros que pueden incluir de cero a cuatro heteroátomos, por ejemplo, benceno, naftaleno, antraceno, pireno, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, oxazol, tiazol, triazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina y pirimidina, y similares. Esos grupos arilo que tienen heteroátomos en la estructura del anillo también pueden denominarse como "heterociclos arilo" o "heteroaromáticos". El
55 anillo aromático puede estar sustituido en una o más posiciones del anillo con tales sustituyentes como se describió anteriormente, por ejemplo, halógeno, azida, alquilo, aralquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, amino, nitro, sulfhidrilo, imino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo, carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, sulfonamido, cetona, aldehído, éster, heterociclilo, fracciones aromáticas o heteroaromáticas, -CF3, -CN, o similares. El término "arilo" también incluye sistemas de anillo policíclicos que tienen dos o más anillos cíclicos en los que dos o más carbonos son comunes a dos anillos adyacentes (los anillos son "anillos fusionados") en donde al menos uno de los anillos es aromático, por ejemplo, los otros anillos cíclicos pueden ser cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos y/o heterociclilos.
Los términos orto, meta y para son reconocido en la técnica y se refieren a bencenos disustituidos en posiciones 1,2, 65 1,3 y 1,4, respectivamente. Por ejemplo, los nombres 1,2-dimetilbenceno y orto-dimetilbenceno son sinónimos.
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Los términos "heterociclilo", "heteroarilo", o "grupo heterocíclico" son reconocidos en la técnica y se refieren a estructuras de anillo de 3 hasta aproximadamente 10 miembros, alternativamente anillos de 3 hasta aproximadamente 7 miembros, cuyas estructuras de anillo incluyen de uno a cuatro heteroátomos. Los heterociclos también pueden ser policiclos. Los grupos heterociclilo incluyen, por ejemplo, tiofeno, tiantreno, furano, pirano, isobenzofurano, cromeno, 5 xanteno, fenoxanteno, pirrol, imidazol, pirazol, isotiazol, isoxazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, indolizina, isoindol, indol, indazol, purina, quinolizina, isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftiridina, quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, carbazol, carbolina, fenantridina, acridina, pirimidina, fenantrolina, fenazina, fenarsazina, fenotiazina, furazano, fenoxazina, pirrolidina, oxolano, tiolano, oxazol, piperidina, piperazina, morfolina, lactonas, lactamas tales como azetidinonas y pirrolidinonas, sultamas, sultonas, y similares. El anillo heterocíclico puede estar sustituido en una o más
10 posiciones con tales sustituyentes como se describió anteriormente, como por ejemplo, halógeno, alquilo, aralquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, amino, nitro, sulfhidrilo, imino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo, carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, cetona, aldehído, éster, un heterociclilo, una fracción aromática o heteroaromática, -CF3, -CN, o similares.
15 Los términos "policiclilo" o "grupo policíclico" son reconocidos en la técnica y se refieren a dos o más anillos (por ejemplo, cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos y/o heterociclilos) en donde dos o más carbonos son comunes a dos anillos adyacentes, por ejemplo, los anillos son "anillos fusionados". Los anillos que están unidos a través de átomos no adyacentes se denominan anillos "puenteados". Cada uno de los anillos del policiclo pueden estar sustituidos con tales sustituyentes como se describió anteriormente, como por ejemplo, halógeno, alquilo, aralquilo,
20 alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, amino, nitro, sulfhidrilo, imino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo , carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, cetona, aldehído, éster, un heterociclilo, una fracción aromática o heteroaromática, -CF3, -CN, o similares.
El término "carbociclo" es reconocido en la técnica y se refiere a un anillo aromático o no aromático en donde cada 25 átomo del anillo es carbono.
El término "nitro" es reconocido en la técnica y se refiere a -NO2; el término "halógeno" es reconocido en la técnica y se refiere a -F, -Cl, -Br o -I; el término "sulfhidrilo" es reconocido en la técnica y se refiere a -SH; el término "hidroxilo" significa -OH; y el término "sulfonilo" es reconocido en la técnica y se refiere a -SO2-. "Haluro" designa al anión
30 correspondiente de los halógenos, y "pseudohaluro" tiene la definición expuesta en el 560 de "Advanced Inorganic Chemistry" por Cotton y Wilkinson.
Los términos "amina", "amino" y "amonio" son reconocidos en la técnica y se refieren tanto a aminas sustituidas como no sustituidas, por ejemplo, una fracción que puede ser representada por las fórmulas generales:
35 en donde R50, R51 y R52 representan cada uno independientemente un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, -(CH2)m-R61, o R50 y R51, tomados junto con el átomo de N al que están unidos completan un heterociclo que tiene de 4 a 8
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40 átomos en la estructura del anillo; R61 representa un arilo, un cicloalquilo, un cicloalquenilo, un heterociclo o un policiclo; y m es cero o un número entero en el intervalo de 1 a 8. En otras realizaciones, R50 y R51 (y opcionalmente R52) representan cada uno independientemente un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, o -(CH2)m-R61. Por lo tanto, el término "alquilamina" incluye un grupo amina, como se ha definido anteriormente, que tiene un alquilo sustituido o no sustituido unido a él, es decir, al menos uno de R50 y R51 es un grupo alquilo.
45 El término "acilamino" es reconocido en la técnica y se refiere a una fracción que puede ser representada por la fórmula general:
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50 en donde R50 es como se definió anteriormente, y R54 representa un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo o -(CH2)m-R61, en donde m y R61 son como se definen más arriba.
El término "amido" es reconocido en la técnica como un carbonilo sustituido con amino e incluye una fracción que puede 55 ser representada por la fórmula general: en donde R50 y R51 son como se definen más arriba. Ciertas realizaciones de la amida en la presente invención no incluirán imidas que pueden ser inestables.
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5 El término "alquiltio" se refiere a un grupo alquilo, como se define más arriba, que tiene un radical de azufre unido al mismo. En ciertas realizaciones, la fracción "alquiltio" está representada por uno de -S-alquilo, -S-alquenilo, -S-alquinilo y -S-(CH2)m-R61, en donde m y R61 se han definido anteriormente. Los grupos alquiltio representativos incluyen metiltio, etiltio, y similares.
10 El término "carboxilo" es reconocido en la técnica e incluye fracciones tales como las que puedan ser representadas por las fórmulas generales:
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15 en donde X50 es un enlace o representa un oxígeno o un azufre, y R55 y R56 representan un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, -(CH2)m-R61 o una sal farmacéuticamente aceptable, R56 representa un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo o -(CH2)m-R61, en donde m y R61 se han definido anteriormente. Cuando X50 es un oxígeno y R55 o R56 no son hidrógeno, la fórmula representa un "éster". Cuando X50 es un oxígeno y R55 es como se ha definido anteriormente, la
20 fracción se denomina aquí como un grupo carboxilo, y particularmente cuando R55 es un hidrógeno, la fórmula representa un "ácido carboxílico". Cuando X50 es un oxígeno y R56 es hidrógeno, la fórmula representa un "formiato". En general, cuando el átomo de oxígeno de la fórmula anterior es reemplazado por azufre, la fórmula representa un grupo "tiolcarbonilo". Cuando X50 es un azufre y R55 o R56 no son hidrógeno, la fórmula representa un "tioléster". Cuando X50 es un azufre y R55 es hidrógeno, la fórmula representa un" ácido tiolcarboxílico". Cuando X50 es un azufre
25 y R56 es hidrógeno, la fórmula representa un "tiolformato". Por otra parte, cuando X50 es un enlace, y R55 no es hidrógeno, la fórmula anterior representa un "grupo cetona". Cuando X50 es un enlace, y R55 es hidrógeno, la fórmula anterior representa un grupo "aldehído".
El término "carbamoilo" se refiere a -O(C=O)NRR', donde R y R' son independientemente, H, grupos alifáticos, grupos 30 arilo o grupos heteroarilo.
El término "oxo" se refiere a un oxígeno de carbonilo (=O).
Los términos "alcoxilo" o "alcoxi" son reconocidos en la técnica y se refieren a un grupo alquilo, como se define más
35 arriba, que tiene un radical oxígeno unido al mismo. Los grupos alcoxilo representativos incluyen metoxi, etoxi, propiloxi, terc-butoxi y similares. Un "éter" es dos hidrocarburos unidos covalentemente por un oxígeno. En consecuencia, el sustituyente de un alquilo que hace que alquilo se convierta en un éter es o se asemeja a un alcoxilo, tal como puede ser representado por uno de -O-alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(CH2)m-R61, donde m y R61 se han descrito anteriormente.
40 El término "sulfonato" es reconocido en la técnica y se refiere a una fracción que puede ser representada por la fórmula general: en donde R57 es como se definió anteriormente.
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en donde R57 es un par de electrones, hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, o arilo.
50
El término "sulfato" es reconocido en la técnica e incluye una fracción que puede ser representada por la fórmula general:
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El término "sulfonamido" es reconocido en la técnica e incluye una fracción que puede ser representada por la fórmula general:
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10 en donde R50 y R56 son como se definen más arriba.
El término "sulfamoilo" es reconocido en la técnica y se refiere a una fracción que puede ser representada por la fórmula general:
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en donde R50 y R51 son como se definen más arriba.
El término "sulfonilo" es reconocido en la técnica y se refiere a una fracción que puede ser representada por la fórmula 20 general:
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en donde R58 es uno de los siguientes: hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo o 25 heteroarilo.
El término "sulfóxido" es reconocido en la técnica y se refiere a una fracción que puede ser representada por la fórmula general:
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en donde R58 se define más arriba. El término "fosforilo" es reconocido en la técnica y puede en general ser representado por la fórmula:
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en donde Q50 representa S u O, y R59 representa hidrógeno, un alquilo inferior o un arilo. Cuando se usa para sustituir, por ejemplo, un grupo alquilo, el grupo fosforilo del fosforilalquilo puede estar representado por las fórmulas generales:
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en donde Q50 y R59, cada uno independientemente, se han definido anteriormente, y Q51 representa O, S o N. Cuando Q50 es S, la fracción fosforilo es un "fosforotioato".
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El término "fosforamidita" es reconocido en la técnica y puede ser representado en las fórmulas generales:
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en donde Q51, R50, R51 y R59 son como se definen más arriba. 15 El término "fosfonamidita" es reconocido en la técnica y puede ser representado en las fórmulas generales:
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en donde Q51, R50, R51 y R59 se definen como anteriormente, y R60 representa un grupo alquilo inferior o un arilo.
20 Pueden hacerse sustituciones análogas a grupos alquenilo y alquinilo para producir, por ejemplo, aminoalquenilos, aminoalquinilos, amidoalquenilos, amidoalquinilos, iminoalquenilos, iminoalquinilos, tioalquenilos, tioalquinilos, alquenilos o alquinilos sustituidos en el carbonilo.
25 La definición de cada expresión, por ejemplo, alquilo, m, n, y similares, cuando se produce más de una vez en cualquier estructura, pretende ser independiente de su definición en cualquier otra parte en la misma estructura.
El término "selenoalquilo" es reconocido en la técnica y se refiere a un grupo alquilo que tiene un grupo selenio sustituido unido al mismo. Los ejemplos de "selenoéteres" que pueden estar sustituidos en el alquilo son seleccionados 30 de uno de -Se-alquilo, -Se-alquenilo, -Se-alquinilo, y -Se-(CH2)m-R61, m y R61 se han definido anteriormente.
Los términos triflilo, tosilo, mesilo, y nonaflilo son reconocidos en la técnica y se refieren a trifluorometanosulfonilo, ptoluenosulfonilo, metanosulfonilo, y grupos nonafluorobutanosulfonilo, respectivamente. Los términos triflato, tosilato, mesilato, y nonaflato son reconocidos en la técnica y se refieren a grupos funcionales éster de trifluorometanosulfonato,
35 éster de p-toluenosulfonato, éster de metanosulfonato, y éster de nonafluorobutanosulfonato y las moléculas que contienen dichos grupos, respectivamente.
Las abreviaturas Me, Et, Ph, Tf, Nf, Ts y Ms representan metilo, etilo, fenilo, trifluorometanosulfonilo, nonafluorobutanosulfonilo, p-toluenosulfonilo y metanosulfonilo, respectivamente. Una lista más completa de las 40 abreviaturas utilizadas por los químicos orgánicos expertos en la técnica aparece en el primer número de cada volumen del Journal of Organic Chemistry; esta lista se presenta típicamente en una tabla titulada Standard List of Abbreviations.
Ciertos compuestos contenidos en las composiciones de la presente invención pueden existir en formas geométricas particulares o estereoisoméricas. La presente invención contempla todos estos compuestos, incluyendo isómeros cis y
45 trans, enantiómeros R y S, diastereómeros, isómeros (D), isómeros (L), las mezclas racémicas de los mismos, y otras mezclas de los mismos, que están dentro el alcance de la invención. Pueden estar presentes átomos de carbono asimétricos adicionales en un sustituyente tal como un grupo alquilo. Se pretende que todos estos isómeros, así como mezclas de los mismos, estén incluidos en esta invención.
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Si, por ejemplo, se desea un enantiómero particular de un compuesto de la presente invención, se puede preparar mediante síntesis asimétrica, o por derivación con un auxiliar quiral, donde se separa la mezcla diastereomérica resultante y el grupo auxiliar escindido para proporcionar los enantiómeros puros deseados. Alternativamente, cuando la molécula contiene un grupo funcional básico, tal como amino, o un grupo funcional ácido, tal como carboxilo, se forman
5 las sales diastereoméricas con un ácido o base apropiado ópticamente activo, seguido por la resolución de los diastereómeros así formados por cristalización fraccionada o medios cromatográficos bien conocidos en la técnica, y posterior recuperación de los enantiómeros puros. Del mismo modo, un enantiómero particular en una mezcla racémica se puede separar de su enantiómero mediante métodos cromatográficos quirales conocidos en la técnica.
Se entenderá que "sustitución" o "sustituido con" incluye la condición implícita de que tal sustitución está de acuerdo con la valencia permitida del átomo sustituido y el sustituyente, y que los resultados de la sustitución en un compuesto estable, por ejemplo, que no experimenta de forma espontánea transformación tal como por reordenamiento, ciclación, eliminación, u otra reacción.
15 El término "sustituido" también se contempla para incluir todos los sustituyentes permisibles de compuestos orgánicos. En un aspecto amplio, los sustituyentes permisibles incluyen sustituyentes de compuestos orgánicos acíclicos y cíclicos, ramificados y no ramificados, carbocíclicos y heterocíclicos, aromáticos y no aromáticos. Los sustituyentes ilustrativos incluyen, por ejemplo, los descritos anteriormente en este documento. Los sustituyentes permisibles pueden ser uno o más y los mismos o diferentes para compuestos orgánicos apropiados. Para los fines de esta invención, los heteroátomos tales como nitrógeno pueden tener sustituyentes de hidrógeno y/o cualesquiera sustituyentes permisibles de compuestos orgánicos descritos en el presente documento que satisfagan las valencias de los heteroátomos. Esta invención no pretende estar limitada de ninguna manera por los sustituyentes permisibles de compuestos orgánicos.
La frase "grupo protector", como se usa en este documento significa sustituyentes temporales que protegen un grupo
25 funcional potencialmente reactivo de transformaciones químicas no deseadas. Ejemplos de tales grupos protectores incluyen ésteres de ácidos carboxílicos, éteres de sililo de alcoholes y acetales y cetales de aldehídos y cetonas, respectivamente. El campo de la química del grupo protector ha sido revisado (Greene, T.W.; Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis; 2ª ed.; Wiley: New York, 1991). Las formas protegidas de los compuestos de la invención se incluyen dentro del alcance de esta invención.
Para los fines de esta invención, los elementos químicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 67ª Ed., 1986-1987, dentro de la cubierta.
La frase "modificación aberrante o mutación" de un gen se refiere a lesiones genéticas tales como, por ejemplo,
35 supresiones, sustitución o adición de nucleótidos a un gen, así como reordenamientos cromosómicos brutos del gen y/o metilación anormal del gen. Del mismo modo, la pérdida de expresión de un gen se refiere a los niveles aberrantes de transcripción del gen en relación con los niveles en una célula normal en condiciones similares, así como el empalme de tipo no silvestre del ARNm transcrito a partir del gen.
Existen "carcinomas de células basales" en una variedad de formas clínicas e histológicas tales como nodularesulcerosas, superficiales, pigmentadas, tipo morfea, fibroepitelioma y síndrome nevoide. Los carcinomas de células basales son las neoplasias cutáneas más comunes que se encuentran en los seres humanos. La mayoría de los nuevos casos de cáncer de piel no melanoma entran en esta categoría.
45 El término "carcinoma" se refiere a un nuevo crecimiento maligno compuesto de células epiteliales que tienden a infiltrarse en los tejidos circundantes y dar lugar a metástasis. Los ejemplos de carcinomas incluyen: "carcinoma de células basales", que es un tumor epitelial de la piel que, si bien raramente hace metástasis, tiene potencial de invasión y destrucción local; "carcinoma de células escamosas", que se refiere a carcinomas que surgen de epitelio escamoso y tienen células cuboides; "carcinosarcoma", que incluye tumores malignos compuestos por tejidos carcinomatoso y sarcomatoso; "carcinoma adenoquístico", carcinoma marcado por cilindros o bandas de estroma hialino o mucinoso separados o rodeados por nidos o cordones de pequeñas células epiteliales, que se producen en las glándulas mamarias y salivales y las glándulas mucosas del tracto respiratorio; "carcinoma epidermoide", que se refiere a células cancerosas que tienden a diferenciarse de la misma manera como las de la epidermis; es decir, tienden a formar células espinosas y experimentan cornificación; "carcinoma nasofaríngeo", que se refiere a un tumor maligno que surge en el
55 revestimiento epitelial del espacio detrás de la nariz; y "carcinoma de células renales", que pertenece al carcinoma del parénquima renal compuesto de las células tubulares en los arreglos diversos.
Otros crecimientos epiteliales carcinomatosos son "papilomas", que se refiere a tumores benignos derivados de epitelio y que tienen un virus del papiloma como agente causal; y "epidermoidomas", que se refiere a un tumor cerebral o meníngeo formado por la inclusión de elementos ectodérmicos en el momento del cierre del surco neural.
El término "ED50" significa la dosis de un fármaco que produce el 50% de su máxima respuesta o efecto.
Una "cantidad eficaz" de un compuesto objetivo, con respecto a los métodos actuales de tratamiento, se refiere a una
65 cantidad del antagonista en una preparación que, cuando se aplica como parte de un régimen de dosificación deseado produce, por ejemplo, un cambio en la tasa de proliferación celular y/o la tasa de supervivencia de una célula de
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acuerdo con estándares clínicamente aceptables para el trastorno a tratar.
Los términos "epitelio", "epitelial" y "epitelio" se refieren a la cubierta celular de superficies corporales internas y externas (cutánea, mucosas y serosas), incluyendo las glándulas y otras estructuras derivadas de las mismas, por ejemplo células epiteliales de la córnea, del esófago, de la epidermis y el folículo piloso. Otro ejemplo de tejido epitelial incluye: epitelio olfativo, que es el epitelio pseudoestratificado que reviste la región olfatoria de la cavidad nasal, y que contiene los receptores del sentido del olfato; el epitelio glandular, que se refiere al epitelio compuesto de células secretoras; el epitelio escamoso, que se refiere al epitelio compuesto de células aplanadas en forma de placas. El término epitelio también puede referirse a epitelio transicional, como el que se encuentra característicamente como revestimiento de órganos huecos que están sometidos a grandes cambios mecánicos debido a contracción y distensión, por ejemplo, el tejido que representa una transición entre epitelio escamoso estratificado y columnar.
El "estado de crecimiento" de una célula se refiere a la tasa de proliferación de la célula y/o el estado de diferenciación de la célula. Un "estado alterado de crecimiento" es un estado de crecimiento caracterizado por una tasa anormal de proliferación, por ejemplo, una célula que presenta un aumento o disminución de la tasa de proliferación con respecto a una célula normal.
El término "antagonista de la vía hedgehog" se refiere a un agente que inhibe la función de la vía hedgehog, por ejemplo, reprime la transcripción de genes objetivo (genes Glil y Ptc), que en las células normales son inducidos por el contacto de la célula con hedgehog. Además de alterar una ruta que depende del alisamiento, en ciertas realizaciones los antagonistas de la vía hedgehog de la presente invención se pueden utilizar para superar una pérdida de función de Ptc, ganancia de función alisada, y/o una ganancia de función hedgehog. Los términos "pérdida de función" y "ganancia de función", según el caso, se refieren a una modificación o mutación aberrante, por ejemplo, de un gen Ptc, de un gen hedgehog, o un gen alisado, o una disminución o aumento en el nivel de expresión de tal gen, que resulta en un fenotipo, por ejemplo, que se asemeja al contacto una célula con una proteína hedgehog, tal como la activación aberrante de una vía hedgehog o se parece a la pérdida de función de Smo. La mutación puede incluir una pérdida de la capacidad del producto(s) del gen Ptc o Smo para regular el nivel de actividad de las proteínas Gli/Ci, por ejemplo, Glil, Gli2 y Gli3.
Como se utiliza en la presente memoria, "células inmortalizadas" se refiere a células que han sido alteradas por medios químicos y/o recombinantes de tal forma que las células tienen la capacidad de crecer a través de un número indefinido de divisiones en cultivo.
El término "LD50" significa la dosis de un fármaco que es letal en el 50% de los sujetos de prueba.
Un "paciente" o "sujeto" que va a ser tratado mediante el presente método puede significar tanto un animal no humano como humano.
La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea aquí para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que están, dentro del alcance del buen juicio médico, adecuados para uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación, acorde con una relación razonable riesgo/beneficio.
La frase "vehículo farmacéuticamente aceptable" como se usa en la presente memoria significa un material farmacéuticamente aceptable, composición o vehículo, tal como un relleno líquido o sólido, diluyente, excipiente, auxiliares de fabricación (por ejemplo, lubricante, talco, magnesio, calcio o estearato de zinc, o ácido esteárico), o material de encapsulación disolvente, involucrados en llevar o transportar el compuesto objetivo desde un órgano, o porción del cuerpo, a otro órgano, o porción del cuerpo. Cada vehículo debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial para el paciente. Algunos ejemplos de materiales que pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; (2) almidones, tales como almidón de maíz y almidón de patata; (3) celulosa, y sus derivados, tales como carboximetilcelulosa sódica, etilcelulosa y acetato de celulosa; (4) tragacanto en polvo; (5) malta; (6) gelatina; (7) talco;
(8)
excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorios; (9) aceites, tales como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de cártamo, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soja; (10) glicoles, tales como propilenglicol; (11) polioles, tales como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; (12) ésteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; (13) agar; (14) agentes amortiguadores, tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; (15) ácido algínico; (16) agua exenta de pirógenos; (17) solución salina isotónica; (18) solución de Ringer; (19) alcohol etílico; (20) soluciones amortiguadas de pH; (21) poliésteres, policarbonatos y/o polianhídridos; y
(22)
otras sustancias compatibles no tóxicas empleadas en formulaciones farmacéuticas.
El término "profármaco" pretende abarcar compuestos que, bajo condiciones fisiológicas, se convierten en los agentes terapéuticamente activos de la presente invención. Un método común para elaborar un profármaco es incluir fracciones seleccionadas que se hidrolizan en condiciones fisiológicas para revelar la molécula deseada. En otras realizaciones, el profármaco se convierte por una actividad enzimática (u otra actividad fisiológica) del animal huésped.
Como se usa en este documento, "que prolifera" y "proliferación" se refieren a células que experimentan mitosis.
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A través de toda esta solicitud, el término "trastorno proliferativo de la piel" se refiere a cualquier enfermedad/trastorno de la piel caracterizado por la proliferación no deseada o aberrante de tejido cutáneo. Estas condiciones se caracterizan típicamente por la proliferación de células epidérmicas o diferenciación celular incompleta, e incluyen, por ejemplo, ictiosis relacionada con el cromosoma X, psoriasis, dermatitis atópica, dermatitis alérgica de contacto, hiperqueratosis
5 epidermolítica y dermatitis seborreica. Por ejemplo, la epidermodisplasia es una forma de desarrollo defectuoso de la epidermis. Otro ejemplo es "epidermólisis", que se refiere a un estado flojo de la epidermis con formación de vesículas y ampollas ya sea espontáneamente o en el sitio del trauma.
El término "índice terapéutico" se refiere al índice terapéutico de un fármaco definido como LD50/ED50.
10 El término "células transformadas" se refiere a células que han convertido espontáneamente a un estado de crecimiento no limitado, es decir, que han adquirido la capacidad de crecer a través de un número indefinido de divisiones en cultivo. Las células transformadas se pueden caracterizar por términos tales como neoplásicas, anaplásicas y/o hiperplásicas, con respecto a su pérdida del control del crecimiento.
15 El término "sujeto" como se usa aquí, se refiere a un animal, típicamente un mamífero o un humano, que ha sido el objeto de tratamiento, observación, y/o experimentación. Cuando el término se utiliza junto con la administración de un compuesto o fármaco, entonces el sujeto ha sido objeto de tratamiento, observación y/o administración del compuesto o fármaco. La frase "cantidad terapéuticamente eficaz" como se usa en el presente documento significa la cantidad de un
20 compuesto, material o composición que comprende un compuesto de la presente invención que es eficaz para producir algún efecto terapéutico deseado en al menos una subpoblación de células en un animal en una relación razonable riesgo/beneficio aplicable a cualquier tratamiento médico.
Las frases "administración parenteral" y "administrado(a) parenteralmente" como se usan en este documento significan
25 modos de administración distintos de la administración enteral y tópica, normalmente por inyección, e incluyen, sin limitación, inyección e infusión intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal e intraesternal.
30 Las frases "administración sistémica", "administrado sistémicamente", "administración periférica" y "administrado periféricamente" como se utilizan aquí significan la administración de un compuesto, fármaco u otro material que no sea de forma directa al sitio del trastorno mediado por vía hedgehog, de tal que entra en el sistema del paciente y, por tanto, está sujeto al metabolismo y otros de tales procesos como, por ejemplo, administración subcutánea.
35 El término "azúcar" tal como se utiliza aquí se refiere a un monosacárido, disacárido u oligosacárido natural o no natural que comprende uno o más anillos de piranosa o furanosa. El azúcar puede estar unido covalentemente al alcaloide esteroideo de la presente invención a través ya sea de un enlace éter o a través de un enlace alquilo. En ciertas realizaciones, la fracción de sacárido puede estar unida covalentemente a un alcaloide esteroideo de la presente invención en un centro anomérico de un anillo de sacárido.
40 El término "dirradical" tal como se utiliza aquí se refiere a cualquiera de una serie de grupos divalentes a partir de grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, y heteroaralquilo. Por ejemplo,
es un dirradical alquilo;
50 también es un dirradical alquilo;
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es un dirradical aralquilo; y
imagen22
es un dirradical (alquil)heteroaralquilo. Los ejemplos típicos incluyen alquilenos de estructura general (CH2)x en donde X es 1-6, y los enlazadores correspondientes alquenileno y alquinileno que tienen 2-6 átomos de carbono y uno o más dobles o triples enlaces; los grupos cicloalquileno que tienen 3-8 miembros en el anillo; y grupos aralquilo en donde una valencia abierta está en el anillo arilo y uno está en la porción alquilo, tal como
imagen23
y sus isómeros.
10 Compuestos de la invención
La presente invención proporciona análogos de la ciclopamina, así como las formas aisladas y purificadas de los mismos, incluyendo análogos sintéticos y semisintéticos, así como composiciones farmacéuticas que contienen dichos análogos. En una realización, la presente invención proporciona compuestos representados por un compuesto de
15 Fórmula 1:
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o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;
20 en donde cada R1 y R8 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, nitro, aciltio, carboxamida, sulfonamida, carboxilo, nitrilo, sulfato, -OP(L)(OR20)2, -XC(L)-R21 o -XC(L)XR21;
25 en donde R1 también puede ser un azúcar; X es O o NR en donde R es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo o aralquilo; L es O oS; R2 y R9 son independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino,
30 aralquilamino, heteroarilo o heteroaralquilo; cada R5 y R11 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, alquilselenio, aralquilselenio, arilselenio, alquiltio, aralquiltio, ariltio, heteroarilo, o heteroaralquilo; cada R3, R4, R6, R7, R13 y R14 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo,
35 aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, heteroarilo o heteroaralquilo;
o R1 y R2 y/o R8 y R9 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman -(C=O)-, -(C=S)-, (C=N(OR20))-, -(C=N(R2))-, -(C=N(N(R20)(R20))), o forman un anillo de 3-8 miembros opcionalmente sustituido; o R4 y R5 tomados conjuntamente y/o R5 y R6 tomados conjuntamente y/o R10 y R11 tomados conjuntamente forman un
40 doble enlace o forman un grupo representado por 1b
imagen25
en donde Z es NR21, O, o C(R23)(R23);
R12
45 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]qR21 , -[(W)N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)C(O)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)-N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21; donde W es un dirradical, y q es 1, 2, 3, 4, 5, o 6;
50 R15, R16, y R17 son independientemente H, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino; o R15 y R16 tomados conjuntamente, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-o
-C(S)-; R18 y R19 son independientemente H, alquilo, aralquilo, haluro, amido, o éster; R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o
R20
cualesquiera dos ocurrencias de en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo 5 opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
R21
es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o [C(R20 )2]p-R25 en donde p es 0-6; o cualesquiera dos ocurrencias de R21 en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R23 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro,
10 alcoxi, ariloxi, aciloxi, sililoxi, nitrilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21, y -C(O)N(R21)2; R25 es hidroxilo, acilamino, -N(R20) COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), -COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), -SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20, -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR20, -S(O)2OR20, -OP(L)(OR20)(OR20), -NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20).
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones 15 acompañantes, en las que R13, R14, R15, R16, y R17 son hidrógeno.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo, azúcar, -OP(L)(OR20)2, -XC(L)-R21, o -XC(L)XR21; o R1 y R2 en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-.
20 En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en el que R4 y R5 tomados juntos forman un doble enlace.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones 25 acompañantes, en el que R1 y R2 tomados juntos, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo y R2 es H.
30 En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo, R2 es H; y R5 y R6 tomados juntos forman un doble enlace; o R5 y R6 tomados juntos forman un grupo representado por 1b;
imagen26
35
en donde:
Z es C(R23)(R23).
40 En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace; o R10 y R11 tomados juntos forman un grupo representado por 1b;
imagen26
45 en donde:
Z es C(R23)(R23).
50 En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R5 y R6 tomados juntos forman un doble enlace y R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones
55 acompañantes, en las que R1 y R2 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-; R4 y R5 tomados juntos forman un doble enlace; y R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace; o R10 y R11 tomados juntos forman un grupo representado por 1b; en donde:
imagen26
imagen27
Z es C(R23)(R23).
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo y R2 es H; R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace; o R10 y R11 tomados juntos forman un grupo representado por 1b;
imagen26
10 en donde:
Z es C(R23)(R23).
15 En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R8 y R9 son hidrógeno; o R8 y R9 tomados conjuntamente, junto con el carbono al que están unidos, es -C(O)-.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones
20 acompañantes, en las que R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , -[(W)-O]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 o -[(W)C(O)O]qR21 .
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones
25 acompañantes, en las que R13, R14, R15, R16, y R17 son hidrógeno; y R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , [(W)-O]qR21, -[(W)-C(O)]qR21, o -[(W)-C(O)O]qR21 .
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones
30 acompañantes, en las que R4 y R5 tomados juntos forman un doble enlace; R1 y R2 en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-; y R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21, -[(W)-N(R21)SO2]qR21, -[(W)-C(O)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)-C(O)]qR21, o [(W)-C(O)O]qR21 .
35 En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo y R2 es H; y R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , [(W)-O]qR21, -[(W)-C(O)]qR21, o -[(W)-C(O)O]qR21 .
40 En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención están representados por un compuesto de la fórmula:
imagen28
en donde: 45
R12
es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]p-R21 , -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , -[(W)-O]qR21 , -[(W)N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21;
50 qes1,2,3,4,5,o6; R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 pueden tomarse juntas para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
R21
es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20]pR25; o dos
apariciones de R21 pueden tomarse juntas para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
R25
es hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), -COR2N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20),
SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR19 , -S(O)2OR20 , -OP(L)(OR20)(OR20), -NP
(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20).
La presente invención proporciona específicamente los compuestos representados por el grupo que consiste en:
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imagen30
imagen31
imagen32
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención están representados por cualquiera de los compuestos mencionados anteriormente y las definiciones acompañantes, en donde el compuesto está representado por la fórmula:
imagen33
imagen34
En una realización, la presente invención proporciona compuestos representados por un compuesto de Fórmula 2:
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5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;
en donde cada R1 y R8 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, nitro, aciltio, carboxamida, sulfonamida, carboxilo, nitrilo, sulfato,
10 -OP(L)(OR20)2, -XC(L)-R21 o -XC(L)-X-R21; en donde R1 también puede ser un azúcar; X es O o NR en donde R es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo o aralquilo; L es O oS; R2 y R9 son independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo,
15 ariloxi, aciloxi, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino , acilamino, aralquilamino, heteroarilo o heteroaralquilo; cada R5 y R11 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, alquilselenio, aralquilselenio, arilselenio, alquiltio, aralquiltio, ariltio, heteroarilo, o heteroaralquilo;
20 cada R3, R4, R6, R7, R13 y R14 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, heteroarilo, o heteroaralquilo; en donde R1 y R2 y/o R8 y R9 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman (C=O)-, -(C=S)-, (C=N(OR20))-, -(C=N(R20))-, -(C=N(N(R20)(R20))), o forman un anillo de 3-8 miembros opcionalmente sustituido; o R4 y R5
25 tomados conjuntamente y/o R5 y R6 tomados conjuntamente y/o R10 y R11 tomados conjuntamente forman un doble enlace o forman un grupo representado por 1b
imagen36
30 en donde Z es NR21, O, o C(R23)(R23);
R12
es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]qR21 , -[(W)-N(R21) C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)C(o)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)-N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21 ,
35 en donde W es un dirradical, y q es 1, 2, 3, 4, 5, o 6; R15, R16, y R17 son independientemente H, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino; o R15 y R16 tomados conjuntamente, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-o -C(S)-; R18 y R19 son independientemente H, alquilo, aralquilo, haluro, amido, o éster;
40 R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o
R20
cualesquiera dos ocurrencias de en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
R21
es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o [C(R20)2]p-R25 en donde p es 0-6; o cualesquiera dos ocurrencias de R21 en el mismo sustituyente pueden tomarse
45 juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R23 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, alcoxi, ariloxi, aciloxi, sililoxi, nitrilo, C(O)R21, -CO2R21, -SO2R21, y -C(O)N(R21)2; y R25 es hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), -COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR20 , -S(O)2OR20 , -OP(L)(OR20)(OR20),
50 NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20);
siempre que exista al menos un grupo representado por la fórmula 1b en dicho compuesto de fórmula 2.
imagen37
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que en el presente documento R13, R14, R15, R16, y R17 son hidrógeno.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones 5 acompañantes, en las que R1 es hidroxilo, azúcar, -OP(L)(OR20)2, -XC(L)-R21, o -XC(L)XR21; o R1 y R2 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R4 y R5 tomados en conjunto forman un doble enlace.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 y R2 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones 15 acompañantes, en las que R1 es hidroxilo y R2 es H.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo, R2 es H; y R5 y R6 tomados en conjunto forman un doble enlace; o R5 y R6 tomados en conjunto forman un grupo representado por 1b;
imagen38
en donde:
25 Z es C(R23)(R23).
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R10 y R11 tomados en conjunto forman un doble enlace; o R10 y R11 tomados en conjunto forman un grupo representado por 1b;
imagen38
en donde: Z es C(R23)(R23).
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R5 y R6 tomados juntos forman un doble enlace y R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 y R2 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-; R4 y R5 tomados juntos forman un doble enlace; y R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace; o R10 y R11 tomados juntos forman un grupo representado por 1b;
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en donde: Z es C(R23)(R23).
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo y R2 es H; R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace; o R10 y R11 tomados juntos forman un grupo representado por 1b;
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55 en donde: Z es C(R23)(R23).
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En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R8 y R9 son hidrógeno; o R8 y R9 tomados conjuntamente, junto con el carbono al que están unidos, es -C(O)-.
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , -[(W)-O]qR21 , -[(W)-C(o)]qR21 o -[(W)C(O)O]qR21 .
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R13, R14, R15, R16, y R17 son hidrógeno; y R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , [(W)-O]qR21, -[(W)-C(o)]qR21, o -[(W)-C(O)O]qR21 .
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R4 y R5 tomados juntos forman un doble enlace; R1 y R2 tomados juntos, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-; y R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21, -[( W)-N(R21)SO2]qR21, -[(W)-C(O)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)-C(O)]qR21, o [(W)-C(O)O]qR21 .
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención se representan por 1 y las definiciones acompañantes, en las que R1 es hidroxilo y R2 es H; y R12 es H, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , [(W)-O]qR21, -[(W)-C(O)]qR21, o -[(W)-C(O)O]qR21 .
En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención están representados por un compuesto de la fórmula:
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en donde:
R12
es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]pR21 , -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , -[(W)-O]qR21 , -[(W)N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21; q es 1, 2,3, 4, 5,o 6; R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
R21
es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20)2]p-R25; o cualesquiera dos ocurrencias de R21 pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R25 es hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), -COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR19 , -S(O)2OR20 , -OP(L)(OR20)(OR20), NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR21)(OR20).
La presente invención proporciona específicamente los compuestos representados por el grupo que consiste en:
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En ciertas realizaciones, los compuestos de la presente invención están representados por cualquiera de los compuestos mencionados anteriormente y las definiciones acompañantes, en donde el compuesto está representado por la fórmula:
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En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende uno cualquiera o más de los compuestos anteriormente mencionados; y un excipiente farmacéuticamente aceptable. 15 Síntesis de compuestos alcaloides esteroideos
Los derivados de alcaloides esteroideos de ciclopropilo de la presente invención se pueden preparar directamente a partir de un alcaloide esteroideo aislado como un producto natural (o sintetizado) o formas de estos compuestos 20 protegidos en N. Los grupos protectores de nitrógeno adecuados incluyen, pero no se limitan a Fmoc, Alloc, Boc, Troc, trifluoroacetato, tosilo, Cbz, cianuro de etilo, y Bn.
Se pueden usar una variedad de agentes ciclopropanación para ciclopropanar el alcaloide esteroideo. Se utilizan comúnmente complejos 1,1-haloalquilmetálicos, incluyendo especies reactivas denominadas como carbenoides, para 25 ciclopropanar olefinas. Estos reactivos se elaboran típicamente usando un diyodoalcano o diazoalcano y un metal o especie organometálica tal como Et2Zn, iBu3Al, samario, cobre, rodio, o paladio. En ciertas realizaciones, se usan Et Zn
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y diyodometano para afectar la ciclopropanación. También se pueden utilizar otros métodos de ciclopropanación conocidos, tales como aquellos que utilizan iluros de azufre para reaccionar con una olefina conjugada con un carbonilo para añadir un grupo CH2 o CH-alquilo o CH-arilo, y la descomposición catalizada por metales de compuestos diazoalquilo y α-diazo-carbonilo, tal como diazometano y diazoacetato de etilo: estos métodos proporcionan fácilmente
5 ciclopropanos que tienen sustituyentes alquilo, arilo, alcoxicarbonilo (-COOR), o acilo. Por ejemplo, la adición de diazopropionato de etilo (EtO2C-C(N2)-Me a un compuesto olefínico en un disolvente orgánico que contiene un catalizador metálico tal como cobre o paladio de como resultado la formación de un ciclopropano que contiene un grupo representado por la fórmula 1b, en donde Z representa C(R23)2, en donde un R23 es Me y el otro R23 es COOEt.
Al seleccionar cuidadosamente el agente de ciclopropanación, se puede lograr la selectividad del sitio en la ciclopropanación de alcaloides esteroideos con más de una olefina. Por ejemplo, si se usan diyodometano y Et2Zn para ciclopropanar jervina en determinadas condiciones, sólo reaccionará la olefina más rica en electrones.
La diastereoselectividad de la ciclopropanación se puede controlar de varias maneras. Por ejemplo, la reducción de la
15 temperatura de la reacción de ciclopropanación puede conducir a una mayor diastereoselectividad. Alternativamente, se puede usar un agente ciclopropanación quiral que puede distinguir entre cada superficie del diasteroisómero del alcaloide esteroideo. La selectividad de cada superficie en la ciclopropanación también se puede lograr mediante el uso de reacciones dirigidas al sustrato (es decir, ciclopropanación de alcoholes alílicos utilizando los reactivos Et2Zn/ CH2I2).
Las reacciones de ciclopropanación pueden llevarse a cabo en un disolvente aprótico, preferiblemente uno en el que los ingredientes de la reacción son sustancialmente solubles. Los disolventes adecuados incluyen éteres, tales como éter dietílico, 1,2-dimetoxietano, diglima, éter metil-t-butilo, tetrahidrofurano y similares; disolventes halogenados, tales como cloroformo, diclorometano, dicloroetano, y similares; disolventes hidrocarbonados alifáticos o aromáticos tales como benceno, xileno, tolueno, hexano, pentano y similares; ésteres y cetonas, tales como acetato de etilo, acetona y 2
25 butanona; disolventes apróticos polares, tales como acetonitrilo, dimetilsulfóxido, dimetilformamida, y similares; o combinaciones de dos o más disolventes. En una realización preferida, el diclorometano es el disolvente utilizado para la ciclopropanación cuando se utiliza un dialquil zinc y diyodometano.
Después de la síntesis del núcleo de alcaloide esteroideo ciclopropanado, se puede obtener el derivado del compuesto usando una variedad de reacciones de funcionalización conocidas en la técnica. Los ejemplos representativos incluyen reacciones de acoplamiento de paladio a haluros de alquenilo o haluros de arilo, oxidaciones, reducciones, reacciones con nucleófilos, reacciones con electrófilos, reacciones pericíclicas, instalación de grupos protectores, remoción de grupos protectores, y similares.
35 En presencia de ácidos de Lewis o de Bronsted, los análogos de ciclopropil ciclopamina de la presente invención experimentan un reordenamiento no observado para este fin y la expansión del anillo para proporcionar nuevos análogos de ciclopamina en donde el anillo D se ha expandido en un carbono. El anillo de ciclopropilo puede estar sustituido o no sustituido. En los casos en que el anillo de ciclopropilo está sustituido, los grupos unidos al metileno del ciclopropano se instalarán en el anillo D después del reordenamiento y expansión del anillo. Los ácidos adecuados incluyen, pero no se limitan a ZnI2, BF3, ácido metanosulfónico, ácidos diariloxifosfóricos, y HCl. En una realización preferida de la invención, el ácido de Lewis utilizado es BF3. Estos análogos homologados pueden contar con otros grupos funcionales adicionales usando una variedad de reacciones de formación de grupos funcionales conocidas en la técnica. Los ejemplos representativos incluyen reacciones de acoplamiento de paladio a haluros de alquenilo o haluros de arilo, oxidaciones, reducciones, reacciones con nucleófilos, reacciones con electrófilos, reacciones pericíclicas,
45 instalación de grupos protectores, remoción de grupos protectores, y similares.
Métodos de la invención
La presente invención proporciona además métodos para tratar, mejorar uno o más de los síntomas, y la reducción de la gravedad de los trastornos hiperproliferativos, es decir cáncer, así como otros trastornos o condiciones mediados por la vía hedgehog.
Actualmente se están explorando antagonistas de la vía hedgehog en un gran número de condiciones clínicas en donde se puede obtener un efecto terapéutico para una condición o trastorno mediante la inhibición de uno o más aspectos de
55 la actividad de la vía Hedgehog. Aunque el foco principal ha estado en el cáncer, los investigadores han encontrado que la inhibición de las moléculas pequeñas de la vía hedgehog mejora los síntomas de la psoriasis (Tas, y colaboradores, 2004 Dermatology 209: 126-131, la solicitud de patente estadounidense publicada No. 20040072913 (incorporada aquí por referencia)). La psoriasis es una enfermedad crónica de la piel muy común caracterizada típicamente por lesiones de la piel que usualmente contienen pápulas eritematosas y placas con escamas plateadas, aunque existen variaciones tanto en la piel como en otras partes del cuerpo. Se piensa actualmente que la psoriasis es una enfermedad autoinmune, pero su etiología aún es poco entendida. En un estudio, la aplicación tópica de ciclopamina a las lesiones de psoriasis condujo a la regresión completa o parcial de la lesión con una disminución en las células inflamatorias (Tas y colaboradores, véase más arriba).
65 Los antagonistas de la vía hedgehog de la presente invención se pueden usar para tratar o prevenir la psoriasis cuando se administran como un agente único o cuando se administran en combinación con uno o más de otros agentes contra la psoriasis, incluyendo, pero no limitado a, corticosteroides, alquitrán, calcipotrieno, tazaroteno, inhibidores de calcineurina, irradiación ultravioleta, metotrexato, retinoides, ciclosporina, fármacos inmunomoduladores, etanercept, alefacept, efalizumab, e infliximab.
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5 Se ha demostrado que muchos tumores y condiciones proliferativas dependen de la vía hedgehog. El crecimiento de tales células y la supervivencia pueden verse afectados por el tratamiento con los compuestos de la presente invención. Por ejemplo, se ha demostrado que la inhibición de moléculas pequeñas de la vía hedgehog inhibe el crecimiento de carcinoma de células basales (Williams y colaboradores, 2003 PNAS 100: 4616-21), meduloblastoma (Berman y colaboradores, 2002 Science 297: 1559-61), cáncer de páncreas (Berman y colaboradores, 2003 Nature 425: 846-51), cánceres gastrointestinales (Berman y colaboradores, 2003 Nature 425: 846-51, solicitud PCT publicada WO 05/013800), cáncer de esófago (Berman y colaboradores, 2003 Nature 425: 846-51), cáncer de pulmón (Watkins y colaboradores, 2003. Nature 422: 313-7), y cáncer de próstata (Karhadkar y colaboradores, 2004. Nature 431: 707-12).
Además, se ha demostrado que muchos tipos de cáncer tienen una activación incontrolada de la vía hedgehog, por
15 ejemplo, cáncer de mama (Kubo y colaboradores, 2004. Cancer Research 64: 6071-4), cáncer hepatocelular (Patil y colaboradores, 2005. 96ª Conferencia Anual de la AACR, resumen # 2942 Sicklick y colaboradores, 2005. Reunión anual de ASCO, resumen # 9610), neoplasias hematológicas (Watkins y Matsui, resultados no publicados), carcinoma basal (Bale y Yu, 2001. Human Molec. Genet. 10: 757-762 Xie y colaboradores, 1998 Nature 391: 90-92), meduloblastoma (Pietsch y colaboradores, 1997. Cancer Res. 57: 2085-88), y cáncer gástrico (Ma y colaboradores, 2005 Carcinogenesis 19 de mayo 2005 (Epub)).
Los cánceres o enfermedades neoplásicas y trastornos relacionados que se pueden tratar mediante la administración de los compuestos y composiciones de la presente invención, incluyen, pero no limitado a cáncer adrenocortical, cáncer anal, anemia aplásica, cáncer del conducto biliar, cáncer de vejiga, cáncer de hueso, tumores de cerebro/del SNC, 25 cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, linfoma no Hodgkin, cáncer de colon, cáncer de recto, cáncer de endometrio, cáncer de esófago, familia del tumor de Ewing, cáncer ocular, cáncer de vesícula biliar, tumores carcinoides gastrointestinales, tumores del estroma gastrointestinal, enfermedad trofoblástica gestacional, enfermedad de Hodgkin, cáncer del riñón del sarcoma de Kaposi, cáncer laríngeo e hipofaríngeo, leucemia linfocítica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia infantil, leucemia linfocítica crónica, leucemia mieloide crónica, cáncer de hígado, cáncer de pulmón, tumor carcinoide pulmonar, linfoma tipo no Hodgkin, cáncer de mama masculino, mesotelioma maligno, mieloma múltiple, síndrome mielodisplásico, cáncer de la cavidad nasal y paranasal, cáncer de la nasofaringe, neuroblastoma, cáncer de la cavidad oral, cáncer de la orofaringe, osteosarcoma, cáncer de ovario, cáncer de páncreas, cáncer de pene, tumor pituitario, cáncer de próstata, retinoblastoma, rabdomiosarcoma, cáncer de glándula salival, sarcoma, cáncer de piel tipo melanoma, cáncer de piel no melanoma, cáncer de estómago, cáncer testicular, cáncer de timo,
35 cáncer de tiroides, sarcoma uterino, cáncer vaginal, cáncer de vulva, macroglobulinemia de Waldenstrom, y tumor de Wilms.
Los métodos y composiciones de la presente invención se pueden usar en el tratamiento de cánceres humanos, por ejemplo, carcinomas de células basales y otros tumores de tejidos epiteliales tales como de piel. Adicionalmente, los compuestos de la presente invención se pueden emplear como parte de un tratamiento de carcinoma de células basales, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, sarcoma, linfoma, leucemia, cáncer gastrointestinal, mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células pequeñas, glioma, cáncer de mama, hepatocelular, o meduloblastoma mediante la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de la presente invención como agente único o en combinación con otro agente contra el cáncer.
45 Los métodos y composiciones de la presente invención se pueden usar en el tratamiento de transformaciones neoplásicas o hiperplásicas tal como puede ocurrir en el sistema nervioso central. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para causar que tales células transformadas se vuelvan ya sea postmitóticas o apoptóticas. El presente método puede, por lo tanto, ser usado como parte de un tratamiento, por ejemplo, para gliomas malignos, meningiomas, meduloblastomas, tumores neuroectodérmicos y ependimomas.
En una realización, el presente método puede usarse como parte de un régimen de tratamiento para meduloblastoma maligno y otros tumores neuroectodérmicos malignos primarios del SNC.
55 En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método de tratamiento de cáncer, que comprende administrar a un sujeto que requiera del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de cualquiera de los compuestos anteriormente mencionados.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método de tratamiento de cáncer, que comprende administrar a un sujeto que requiera del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de uno cualquiera o más de los compuestos mencionados anteriormente, en donde el cáncer se encuentra en la cabeza, cuello, cavidad nasal, senos paranasales, nasofaringe, cavidad oral, orofaringe, laringe, hipofaringe, glándulas salivales, paragangliomas, páncreas, estómago, piel, esófago, hígado y árbol biliar, hueso, intestino, colon, recto, ovarios, próstata, pulmón, mama, sistema linfático, sangre, sistema nervioso central de la médula ósea, o cerebro en los sujetos.
65 En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método de tratamiento de cáncer, que comprende administrar a un sujeto que requiera del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de uno o más de cualquiera de los compuestos mencionados anteriormente, en donde el cáncer es carcinoma de células basales, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, sarcoma, linfoma, leucemia, cáncer gástrico, cáncer de esófago, cáncer biliar, cáncer de colon, mieloma múltiple, cáncer de pulmón de células pequeñas, glioma, cáncer de mama, hepatocelular, o
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5 meduloblastoma.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere al método antes mencionado en donde el compuesto se utiliza en combinación con terapia de radiación o de otro agente quimioterapéutico contra el cáncer.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a cualquier método antes mencionado en el que el compuesto se administra localmente a un tumor o sistémicamente a un paciente.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a cualquier método antes mencionado en el que el modo de administración de dicho compuesto es inhalación, oral, intravenoso, sublingual, ocular, transdérmico, rectal, vaginal,
15 tópico, intramuscular, intraarterial, intratecal, subcutáneo, bucal o nasal.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a cualquier método antes mencionado en el que el modo de administración es oral, intravenoso o tópico.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método para antagonizar la vía hedgehog en una célula, que comprende poner en contacto una célula que se expresa en forma alisada con una cantidad eficaz de uno o más de los compuestos anteriormente mencionados.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método para antagonizar la vía hedgehog en una célula,
25 que comprende poner en contacto una célula que se expresa en forma alisada con una cantidad eficaz de uno o más de los compuestos mencionados anteriormente, en el que dicha célula que se expresa en forma alisada se pone en contacto con dicho compuesto in vitro.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método para antagonizar la vía hedgehog en una célula, que comprende poner en contacto una célula que se expresa en forma alisada con una cantidad eficaz de uno o más de los compuestos mencionados anteriormente, en el que dicha célula que se expresa en forma alisada se pone en contacto con dicho compuesto in vivo.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método para antagonizar la vía hedgehog en una célula,
35 que comprende poner en contacto una célula que se expresa en forma alisada con una cantidad eficaz de uno o más de los compuestos mencionados anteriormente, en el que dicha célula que expresa Smo está dentro del cuerpo de un paciente.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere a un método para tratar o prevenir la psoriasis en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto que requiera del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de los compuestos anteriormente mencionados.
En ciertas realizaciones, la presente invención se refiere al método de tratamiento o prevención de psoriasis anteriormente mencionado en el que el modo de administración de dicho compuesto es tópico.
45 En ciertas realizaciones, se usan uno o más compuestos de la presente invención para tratar o prevenir la psoriasis en combinación con uno o más agentes contra la psoriasis incluyendo, pero no limitado a, corticosteroides, alquitrán, calcipotrieno, tazaroteno, inhibidores de calcineurina, irradiación ultravioleta, metotrexato, retinoides, ciclosporina, fármacos inmunomoduladores, etanercept, alefacept, efalizumab, e infliximab.
Tratamiento del cáncer en combinación con quimioterapia o radioterapia
En ciertas realizaciones, se usan uno o más compuestos de la presente invención para tratar o prevenir el cáncer o una enfermedad neoplásica en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos contra el cáncer incluyendo, pero no 55 limitado a, gemcitabina, metotrexato, taxol, mercaptopurina, tioguanina, hidroxiurea, citarabina, ciclofosfamida, ifosfamida, nitrosoureas, cisplatino, carboplatino, mitomicina, dacarbazina, procarbazina, etopósidos, prednisolona, dexametasona, citarabina, camptotecinas, bleomicina, doxorrubicina, idarrubicina, daunorrubicina, dactinomicina, plicamicina, mitoxantrona, asparaginasa, vinblastina, vincristina, vinorelbina, paclitaxel, y docetaxel. En una realización preferida, se usan uno o más compuestos de la presente invención para tratar o prevenir el cáncer o una enfermedad neoplásica en combinación con uno o más agentes quimioterapéuticos u otros agentes contra el cáncer, incluyendo, pero no limitado a radiación (por ejemplo, radiación γ), mostazas de nitrógeno (por ejemplo, ciclofosfamida, ifosfamida, trofosfamida, clorambucilo, estramustina, y melfalán), nitrosoureas (por ejemplo, carmustina (BCNU) y lomustina (CCNU)), sulfonatos de alquilo (por ejemplo, busulfán y treosulfano), triazenos (por ejemplo, dacarbazina y temozolomida), compuestos que contienen platino (por ejemplo, cisplatino, carboplatino y oxaliplatino), alcaloides de la 65 vinca (por ejemplo, vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina), taxoides (por ejemplo, paclitaxel y docetaxol), Epipodofilinas (por ejemplo, etopósido, tenipósido, topotecano, 9-aminocamptotecina, camptoirinotecano, crisnatol, mitomicina C), antimetabolitos, inhibidores de DHFR (por ejemplo, metotrexato y trimetrexato), inhibidores de IMP deshidrogenasa (por ejemplo, ácido micofenólico, tiazofurina, ribavirina y EICAR), inhibidores de la ribonucleótido reductasa (por ejemplo, hidroxiurea y deferoxamina), análogos de uracilo (por ejemplo, fluorouracilo, floxuridina, doxifluridina, ratitrexed, y capecitabina), análogos de citosina (por ejemplo, citarabina (ara C), citosina arabinósido, y 5 fludarabina), análogos de purina (por ejemplo, mercaptopurina y tioguanina), antiestrógenos (por ejemplo, tamoxifeno, raloxifeno, y megestrol), agonistas de LHRH (por ejemplo goscrclin y acetato de leuprolida), antiandrógenos (por ejemplo flutamida y bicalutamida), análogos de la vitamina D3 (por ejemplo, EB 1089, CB 1093, y KH 1060), terapias fotodinámicas (por ejemplo verteporfina (BPD-MA), ftalocianina, fotosensibilizador PC4 y desmetoxihipocrelina A (2BA-2-DMHA)), citoquinas (por ejemplo, Interferón α, interferón γ y factor de necrosis tumoral), inhibidores de isoprenilación (por ejemplo, lovastatina), neurotoxinas dopaminérgicas (por ejemplo, el ión 1-metil-4-fenilpiridinio), inhibidores del ciclo celular (por ejemplo estaurosporina), actinomicinas (por ejemplo, actinomicina D y dactinomicina), bleomicinas (por ejemplo, bleomicina A2, bleomicina B2, y peplomicina), antraciclinas (por ejemplo, daunorubicina, doxorubicina (adriamicina), idarrubicina, epirrubicina, pirarrubicina, zorubicina, y mitoxantrona), inhibidores de MDR (por ejemplo, verapamilo), inhibidores de ATPasa Ca2+ (por ejemplo, tapsigargina), anticuerpos (por ejemplo, avastina, erbitux,
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15 rituxan, y bexxar), corticosteroides (por ejemplo prednilona, prednisona, etc.), imatinib, talidomida, lenalidomida, bortezomib, gemcitabina, erlotinib, gefitinib, sorafenib, y sutinib.
El agente quimioterapéutico y/o terapia de radiación se pueden administrar de acuerdo con protocolos terapéuticos bien conocidos en la técnica. Será evidente para los expertos en la técnica que la administración del agente quimioterapéutico y/o radioterapia se puede variar dependiendo de la enfermedad que se está tratando y los efectos conocidos del agente quimioterapéutico y/o la radioterapia sobre esa enfermedad. Asimismo, de acuerdo con el conocimiento del médico experto, se pueden variar los protocolos terapéuticos (por ejemplo, cantidades de dosificación y tiempos de administración) en vista de los efectos observados de los agentes terapéuticos administrados (es decir, agente antineoplásico o radiación) sobre el paciente, y en vista de las respuestas observadas de la enfermedad a los
25 agentes terapéuticos administrados, y los efectos adversos observados.
También, en general, los compuestos de la presente invención y el agente quimioterapéutico no tienen que administrarse en la misma composición farmacéutica, y pueden, debido a las diferentes características físicas y químicas, tener que ser administrados por diferentes vías. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden administrar por vía intravenosa para generar y mantener buenos niveles en sangre, mientras que el agente quimioterapéutico puede administrarse por vía oral. La determinación del modo de administración y la conveniencia de administración, cuando sea posible, en la misma composición farmacéutica, están también dentro del conocimiento del médico experto. La administración inicial se puede hacer de acuerdo con los protocolos establecidos conocidos en la técnica y, a continuación, con base en los efectos observados, se pueden modificar la dosificación, modos de
35 administración y tiempos de administración por parte del médico experto.
La elección particular del agente quimioterapéutico o la radiación dependerá del diagnóstico de los médicos y su juicio del estado del paciente y el protocolo de tratamiento apropiado.
Un compuesto de la presente invención, y el agente y/o radiación quimioterapéuticos se pueden administrar concurrentemente (por ejemplo, simultáneamente, esencialmente simultáneamente o dentro del mismo protocolo de tratamiento) o secuencialmente, dependiendo de la naturaleza de la enfermedad proliferativa, la condición del paciente, y la elección real del agente quimioterapéutico y/o la radiación a administrar conjuntamente (es decir, dentro de un único protocolo de tratamiento) con un compuesto de la presente invención.
45 Si un compuesto de la presente invención y el agente quimioterapéutico y/o la radiación no se administran simultáneamente o esencialmente simultáneamente, entonces el orden óptimo de la administración del compuesto de la presente invención, y el agente quimioterapéutico y/o la radiación, puede ser diferente para diferentes tumores. Así, en ciertas situaciones, el compuesto de la presente invención puede administrarse primero seguido de la administración del agente quimioterapéutico y/o la radiación; y en otras situaciones, el agente quimioterapéutico y/o la radiación pueden administrarse en primer lugar seguido por la administración de un compuesto de la presente invención. Esta administración alternativa se puede repetir durante un único protocolo de tratamiento. La determinación del orden de administración, y el número de repeticiones de la administración de cada agente terapéutico durante un protocolo de tratamiento, están también dentro del conocimiento del médico experto después de la evaluación de la enfermedad que
55 se está tratando y la condición del paciente. Por ejemplo, el agente quimioterapéutico y/o la radiación se pueden administrar primero, especialmente si es un agente citotóxico, y después se continua el tratamiento con la administración de un compuesto de la presente invención seguido, cuando se determina que es conveniente, mediante la administración del agente quimioterapéutico y/o la radiación, y así sucesivamente hasta que el protocolo de tratamiento se ha completado.
Por lo tanto, de acuerdo con la experiencia y el conocimiento, el médico practicante puede modificar cada protocolo para la administración de un componente (agente terapéutico, es decir, el compuesto de la presente invención, el agente quimioterapéutico o la radiación) del tratamiento de acuerdo con las necesidades del paciente individual, a medida que continúa el tratamiento.
65 Composiciones farmacéuticas
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En otra realización, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de los compuestos descritos anteriormente (fórmula 1 y 2), formulados junto con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables (aditivos) y/o diluyentes. Las composiciones 5 farmacéuticas de la presente invención pueden ser formuladas especialmente para administración en forma sólida o líquida, incluyendo aquellas adaptadas para lo siguiente: (1) administración oral, por ejemplo, pociones (soluciones acuosas o no acuosas o suspensiones), comprimidos, por ejemplo, aquellos destinados para administración bucal, sublingual, y absorción sistémica, bolos, polvos, gránulos, pastas para aplicación a la lengua; (2) administración parenteral, por ejemplo, por inyección subcutánea, intramuscular, intravenosa o epidural como, por ejemplo, una solución o suspensión estéril, o una formulación de liberación sostenida; (3) aplicación tópica, por ejemplo, como una crema, ungüento, o un parche de liberación controlada o rociador aplicado a la piel; (4) intravaginal o intrarrectal, por ejemplo, como un pesario, crema o espuma; (5) sublingual; (6) en forma ocular; (7) en forma transdérmica; (8) por vía pulmonar, o (9) por vía nasal. Como se ha indicado anteriormente, ciertas realizaciones de los presentes compuestos pueden contener un grupo funcional básico, tal como amino o alquilamino, y son, por lo tanto, capaces de formar sales
15 farmacéuticamente aceptables con ácidos farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables" en este sentido, se refiere a las sales de adición de ácido relativamente no tóxicas, inorgánicas y orgánicas de compuestos de la presente invención. Estas sales se pueden preparar in situ en el vehículo de administración o el proceso de fabricación de la forma de dosificación, o haciendo reaccionar por separado un compuesto purificado de la invención en su forma de base libre con un ácido orgánico o inorgánico adecuado, y aislando la sal así formada durante la purificación posterior. Las sales representativas incluyen el bromhidrato, clorhidrato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptanoato, lactobionato, y laurilsulfonato y similares. (Véase, por ejemplo, Berge y colaboradores (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66: 1-19)
25 Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la presente invención incluyen las sales convencionales no tóxicas o sales de amonio cuaternario de los compuestos, por ejemplo, de ácidos orgánicos o inorgánicos no tóxicos. Por ejemplo, tales sales no tóxicas convencionales incluyen las derivadas de ácidos inorgánicos tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico, nítrico, y similares; y las sales preparadas a partir de ácidos orgánicos tales como acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, palmítico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluenosulfónico, metanosulfónico, etano disulfónico, oxálico, isotiónico, y similares.
En otros casos, los compuestos de la presente invención pueden contener uno o más grupos funcionales ácidos y, por tanto, son capaces de formar sales farmacéuticamente aceptables con bases farmacéuticamente aceptables. El término
35 "sales farmacéuticamente aceptables" en estos casos se refiere a las sales de adición de base relativamente no tóxicas, inorgánicas y orgánicas de compuestos de la presente invención. Estas sales pueden asimismo ser preparadas in situ en el vehículo de administración o en el proceso de fabricación de la forma de dosificación, o haciendo reaccionar por separado el compuesto purificado en su forma de ácido libre con una base adecuada, tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión metálico farmacéuticamente aceptable, con amoníaco, o con una amina orgánica primaria, secundaria o terciaria farmacéuticamente aceptable. Las sales alcalinas o alcalinotérreas representativas incluyen las sales de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio, y de aluminio y similares. Las aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de bases incluyen etilamina, dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares. (Véase, por ejemplo, Berge y colaboradores, más arriba)
45 Agentes humectantes, emulsionantes y lubricantes, tales como lauril sulfato de sodio y estearato de magnesio, así como agentes colorantes, agentes de liberación, agentes de recubrimiento, edulcorantes, saborizantes y perfumes, conservantes y antioxidantes, también pueden estar presentes en las composiciones.
Los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) antioxidantes solubles en agua, tales como ácido ascórbico, clorhidrato de cisteína, bisulfato de sodio, metabisulfito de sodio, sulfito de sodio y similares; (2) antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado (BHA), hidroxitolueno butilado (BHT), lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol, y similares; y (3) agentes quelantes metálicos, tales como ácido cítrico, ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico, y similares.
55 Los métodos para preparar estas formulaciones o composiciones incluyen la etapa de poner en contacto un compuesto de la presente invención con el portador y, opcionalmente, uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan poniendo en contacto en forma uniforme e íntima un compuesto de la presente invención con vehículos líquidos o vehículos sólidos finamente divididos, o ambos, y después, si es necesario, dando forma al producto.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención adecuadas para administración parenteral comprenden uno
o más compuestos de la invención en combinación con una o más soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas isotónicas estériles farmacéuticamente aceptables, o polvos estériles que pueden reconstituirse en soluciones o dispersiones estériles inyectables justo antes de usar, que pueden contener azúcares, alcoholes,
65 antioxidantes, amortiguadores, bacteriostáticos, solutos que vuelven isotónica la formulación con la sangre del receptor deseado o agentes de suspensión o espesantes.
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Ejemplos de vehículos acuosos y no acuosos adecuados que pueden ser empleados en las composiciones farmacéuticas de la invención incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol, y similares), y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva, y ésteres orgánicos
5 inyectables, tales como oleato de etilo. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento, tales como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones y mediante el uso de surfactantes.
Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tales como conservantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes y agentes dispersantes. La prevención de la acción de microorganismos sobre los compuestos de la presente invención se puede asegurar mediante la inclusión de diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabeno, clorobutanol, fenol, ácido sórbico y similares. También puede ser deseable incluir agentes isotónicos, tales como azúcares, cloruro de sodio, y similares en las composiciones. Además, la absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable puede ser lograda por la inclusión de agentes que retrasan la absorción tales como
15 monoestearato de aluminio y gelatina.
En algunos casos, con el fin de prolongar el efecto de un fármaco, es deseable hacer más lenta la absorción del fármaco a partir de una inyección subcutánea o intramuscular. Esto se puede lograr mediante el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo que tiene poca solubilidad en agua. La velocidad de absorción del fármaco depende entonces de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y la forma cristalina. Alternativamente, la absorción retardada de una forma de fármaco administrada parenteralmente se logra disolviendo o suspendiendo el fármaco en un vehículo oleoso.
Las formas de depósito inyectables se preparan formando matrices microencapsuladas de los compuestos de la
25 presente invención en polímeros biodegradables tales como polilactida-poliglicólido. Dependiendo de la relación de fármaco con respecto al polímero y la naturaleza del polímero particular empleado, se puede controlar la tasa de liberación del fármaco. Ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli(orto-ésteres) y poli(anhídridos). Las formulaciones inyectables de depósito también se preparan atrapando el fármaco en liposomas o microemulsiones que son compatibles con el tejido corporal.
Las formulaciones de la invención adecuadas para administración oral pueden estar en forma de cápsulas, tabletas, píldoras, comprimidos, pastillas (usando una base saborizada, normalmente sacarosa y acacia o tragacanto), polvos, gránulos, o como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso, o como una emulsión de aceite en agua o agua en aceite, o como un elixir o jarabe, o como pastillas (usando una base inerte, tal como gelatina y glicerina,
35 o sacarosa y acacia ) y/o como enjuagues bucales y similares, conteniendo cada uno una cantidad predeterminada de un compuesto de la presente invención como ingrediente activo. Un compuesto de la presente invención también se puede administrar como un bolo, electuario o pasta.
Cuando los compuestos de la presente invención se administran como productos farmacéuticos, a humanos y animales, se pueden administrar como tales o como una composición farmacéutica que contiene, por ejemplo, 0,1 a 99% (más preferiblemente, de 10 a 30%) de ingrediente activo en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
Estos compuestos se pueden administrar a humanos y otros animales para terapia por cualquier vía de administración adecuada, incluyendo la vía oral, nasal, como por ejemplo, un aerosol, por vía rectal, intravaginal, parenteral,
45 intracisternal y tópica, tal como mediante polvos, ungüentos o gotas , incluyendo por vía bucal y sublingual.
Independientemente de la vía de administración seleccionada, los compuestos de la presente invención, que pueden usarse en una forma hidratada adecuada, y/o las composiciones farmacéuticas de la presente invención, se formulan en formas de dosificación farmacéuticamente aceptables por métodos convencionales conocidos por los expertos en la técnica.
Los niveles de dosificación reales de los ingredientes activos en las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden variarse a fin de obtener una cantidad del ingrediente activo que es eficaz para lograr la respuesta terapéutica deseada para un paciente particular, composición y modo de administración, sin ser tóxico para el paciente.
55 El nivel de dosificación seleccionado dependerá de una variedad de factores incluyendo la actividad del compuesto particular empleado de la presente invención, o el éster, sal o amida del mismo, la vía de administración, el tiempo de administración, la velocidad de excreción o metabolismo del compuesto particular que se emplea, la tasa y grado de absorción, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos y/o materiales usados en combinación con el compuesto particular empleado, la edad, sexo, peso, condición, salud general e historia médica previa del paciente que está siendo tratado, y factores similares bien conocidos en las técnicas médicas.
Un médico o veterinario que tenga experiencia ordinaria en la técnica puede determinar y prescribir fácilmente la cantidad eficaz de la composición farmacéutica requerida. Por ejemplo, el médico o veterinario podría comenzar con 65 dosis de los compuestos de la invención empleados en la composición farmacéutica en niveles más bajos que los requeridos con el fin de lograr el efecto terapéutico deseado e incrementar gradualmente la dosificación hasta que se
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consiga el efecto deseado.
En general, una dosis diaria adecuada de un compuesto de la invención será aquella cantidad del compuesto que es la dosis eficaz más baja para producir un efecto terapéutico. Tal dosis eficaz dependerá generalmente de los factores
5 descritos anteriormente. En general, las dosis oral, intravenosa, intracerebroventricular y subcutánea de los compuestos de la presente invención para un paciente, cuando se usan para los efectos analgésicos indicados, variarán desde aproximadamente 0,0001 hasta aproximadamente 100 mg por kilogramo de peso corporal por día.
Si se desea, la dosis diaria eficaz del compuesto activo puede administrarse como dos, tres, cuatro, cinco, seis o más
10 subdosis administradas separadamente a intervalos apropiados durante todo el día, opcionalmente, en formas de dosificación unitarias. La dosificación preferida es una administración por día.
Aunque es posible administrar un compuesto solo de la presente invención, es preferible administrar el compuesto como una formulación farmacéutica (composición).
15 El sujeto que recibe este tratamiento es cualquier animal que lo necesite, incluyendo primates, en particular seres humanos, y otros mamíferos tales como equinos, ganado, cerdos y ovejas; y aves de corral y animales domésticos en general.
20 El compuesto de la invención puede administrarse como tal o en mezclas con portadores farmacéuticamente aceptables y también se puede administrar junto con agentes antimicrobianos tales como penicilinas, cefalosporinas, aminoglicósidos y glicopéptidos. La terapia conjunta incluye por lo tanto la administración secuencial, simultánea y separada del compuesto activo de una manera que los efectos terapéuticos del primero administrado no desaparecen del todo cuando se administra el siguiente.
25 Ejemplificación
La invención que está siendo ahora descrita en general, se entenderá más fácilmente por referencia a los siguientes ejemplos, que se incluyen meramente para fines de ilustración de ciertos aspectos y realizaciones de la presente
30 invención, y no pretenden limitar la invención.
Ejemplo 1
Preparación de un derivado de la ciclopamina 35
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A una solución de ciclopamina 2 (250 mg, 0,6 mmol, 1 eq) en DCM (10 mL) a ta se le añadió Fmoc-OSu (205 mg, 0,6 mmol, 1 eq) y se agitó la mezcla resultante a ta durante la noche. Se enfrió luego la solución resultante de Fmocciclopamina cruda a 0° C y se la trató con dietilzinc al 15% en tolueno (0,5 mL, 0,6 mmol, 1 eq) y se agitó durante 30
45 min (matraz A).
Se trató diyodometano (0,4 mL, 6 mmol, 10 eq) en DCM (20 mL) a 0° C con dietilzinc al 15% en tolueno (3 mL, 3 mmol, 5 eq) y se agitó la solución resultante durante 5 min (matraz B).
50 Se transfirieron los contenidos del matraz B al matraz A a través de una cánula y se agitó la suspensión resultante
durante 5 h a ta. Se detuvo la reacción con HCl (1 M), se agitó durante 10 min (hasta que se redisolvió todo el sólido de color blanco) y se extrajo con DCM (5x). Se secaron los extractos orgánicos (MgSO4), se filtró sobre Celite y se concentró al vacío. Se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexano/AcOEt). Se obtuvo el 11,12monociclopropano objetivo como una mezcla 9:1 de diasteroisómeros, junto con 20% de los productos diastereoméricos bis-ciclopropanados (80% de recuperación total). Esta mezcla se separó usando cromatografía SFC preparativa.
Parte B
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10 Se trató Fmoc-monociclopropil ciclopamina 3 (100 mg, 0,15 mmol, 1 eq) en DCM (2 mL) a ta con dietilamina (0,5 mL, 4,8 mmol, 32 eq) durante la noche, se concentró al vacío la solución resultante y se absorbió el residuo sobre gel de sílice y se purificó por cromatografía ultrarrápida (2:1 → 1:1 de Hex/AcOEt, y después 95:5 → 90:10 → 20:80 de DCM / MeOH). Se obtuvo el producto deseado como un sólido blanco (rendimiento 95%). MS (ESI (+)) m/e 426,31 (M+H)+.
15 Ejemplo 2
Preparación de un derivado de la ciclopamina:
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Parte A
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25 A una solución de ácido hidrocinámico 5 (3,01 g, 20 mmol, 1 eq) en cloroformo anhidro (30 mL) a 75° C se le añadió cloruro de tionilo (1,75 mL, 24,1 mmol, 1,2 eq) gota a gota durante un período de 3 min. La mezcla se calentó a reflujo durante 3,5 h. Se separó el disolvente por destilación para producir el cloruro de ácido crudo como un líquido viscoso de color amarillo claro. Se usó el producto crudo sin purificación adicional.
30 Parte B
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35 A una mezcla bifásica de 7 (3,16 g, 24,1 mmol, 1,2 eq) en DCM (30 mL) y una solución acuosa de NaOH (2,0 M, 30 mL, 3 eq) a 25°C se le añadió una solución del cloruro de ácido 6 (3,38 g, 20 mmol, 1 eq) en DCM (10 mL) y se agitó la mezcla resultante a 25° C durante 3 h. Después, se neutralizó la mezcla con HCl acuoso (2 M, 30 mL). Luego, se separó la capa orgánica y se extrajo la capa acuosa con DCM (3 x 50 mL). Se lavaron las capas orgánicas combinadas con HCl (2,0 M, 25 mL), agua (3 x 50 mL), salmuera saturada (50 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se sometió el producto bruto a cromatografía sobre gel de sílice usando MeOH:DCM al 5% como eluyente y después se eluyó la columna con MeOH:DCM al 10% para obtener 1,141 g del compuesto 8.
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Parte C
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10 A una mezcla del ácido 8 (264 mg, 1 mmol, 1 eq), EDCI (231 mg, 1,2 mmol, 1,2 eq), y trietilamina (168 µL, 1,2 mmol, 1,2 eq) en DCM (2 mL) a 0°C se le añadió alilamina (90,3 µL, 1,2 mmol, 1,2 eq), y se agitó la mezcla resultante a 0°C durante 1 h y se dejó calentar a 25°C durante un período de 2 h. Se añadió la mezcla de reacción al agua (50 mL), se extrajo con DCM (4 x 25 mL), se lavaron las capas orgánicas combinadas con HCl 1 M (2 x 25 mL), agua (3 x 25 mL), salmuera saturada (25 mL), se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó el disolvente a presión reducida para
15 obtener 287,5 mg del producto deseado. Este material se utilizó sin purificación adicional.
Parte D
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20 A una solución de la alil amida 9 (70 mg, 0,23 mmol, 1 eq) en acetona (1 mL) y agua (0,3 mL) se le añadió una solución de tetróxido de osmio (0,35 mL, 0,035 mmol, 0,15 eq, 2,5 p/p en t-butanol). Se enfrió inmediatamente la mezcla de reacción sobre hielo justo después de la adición de la solución de OsO4 y se agitó la solución de color marrón oscuro resultante a 0°C durante 15 min. Se añadió peryodato de sodio (110 mg, 0,51 mmol, 2,2 eq) en 5 porciones a la mezcla
25 anterior y se continuó agitando durante 1 hora a 0°C y se dejó calentar a 25°C durante un período de 2 h. Se diluyó la mezcla de reacción con DCM (3 mL), se filtró a través de un tapón pequeño de sulfato de magnesio y se lavó la torta del filtro con DCM (4 x 3 mL). Se concentró el filtrado y se filtró el residuo (67,9 mg) a través de un tapón pequeño de gel de sílice RP usando MeOH:DCM al 5% para obtener 38,9 mg del producto deseado.
30 Parte E
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A una suspensión de la 1 (10 mg, 0,023 mmol, 1 eq) en acetonitrilo (2 mL) se le añadió una solución del aldehído 10 (17
35 mg, 0,056 mmol, 2,4 eq) en acetonitrilo (0,3 mL) seguido de triacetoxiborohidruro de sodio (6,5 mg, 0,031 mmol, 1,3 eq) y se agitó la mezcla de reacción a 25°C durante 16 h. Después, se evaporó el disolvente a presión reducida y se sometió el residuo a cromatografía sobre gel de sílice (7 cm x 10 mm) usando metanol:DCM al 3% para obtener 24,6 mg de material crudo. Este material se sometió nuevamente a cromatografía en columna sobre gel de sílice usando MeOH:DCM al 2% y se recuperaron 18,2 mg de un producto impuro que se purificó adicionalmente mediante TLC
40 preparativa utilizando MeOH:DCM al 3% como disolvente de desarrollo (2 corridas) para producir 6,3 mg del producto deseado. MS(ESI (+)) m/e 714,4 (M+H)+.
Ejemplo 3
45 Preparación de un derivado de la ciclopamina: Se suspendió la ciclopamina 2 (20 mg, 0,049 mmol, 1 eq) en tolueno seco (0,6 mL) y se añadió ciclohexanona (150 µL, 1,47 mmol, 30 eq) seguido de isopropóxido de aluminio (79 mg, 0,392 mmol, 8 eq). Se calentó la mezcla resultante a reflujo durante 2 h, se enfrió a ta, se diluyó con AcOEt y se detuvo la reacción con solución de sal de Rochelle. Se agitó
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10 la mezcla bifásica durante la noche, se separaron las capas, se extrajo la capa acuosa con AcOEt y se secaron los extractos orgánicos combinados (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (DCM, DCM/MeOH en proporción 98:2 y 95:5). Se obtuvo el compuesto objetivo como un sólido cristalino blanco (70% de rendimiento).
15 Parte B
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Se trató diyodometano (40 µL, 0,5 mmol, 25 eq) en DCM (0,52 mL) a 0°C con dietilzinc al 15% en tolueno (0,2 mL, 0,2
20 mmol, 10 eq) y se agitó la solución resultante durante 5 min. Se añadió el compuesto 12 (10 mg, 0,02 mmol, 1 eq) en DCM (0,35 mL) y se agitó la mezcla resultante a ta (baño de hielo removido) durante 3 h, se detuvo la reacción con NaOH 2 N y se agitó durante 10 min, se separaron las capas y se extrajo la capa acuosa con DCM (2 x). Se secaron los extractos orgánicos (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (DCM/MeOH 92:8). Se obtuvo el material ciclopropanado como un sólido blanco. MS(ESI (+)) m/e 424,5
25 (M+H)+.
Ejemplo 4
Preparación de un derivado de ciclopamina 30
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Parte A
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A una solución de ciclopamina 2 (250 mg, 0,6 mmol, 1 eq) en DCM (10 mL) a ta se le añadió Fmoc-OSu (205 mg, 0,6 mmol, 1 eq), se agitó la mezcla resultante a ta durante una noche y se concentró al vacío. Se obtuvo el producto Fmocciclopamina crudo como una espuma de color blancuzco.
Parte B
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Se enfrió una solución de Fmoc-ciclopamina 3 (15 mg, 0,024 mmol, 1 eq) en DCM (0,5 mL) a -78°C y se la trató con hidrogenocarbonato de sodio (4 mg, 0,047 mmol, 1,96 eq), seguido de mCPBA (4 mg, 0,024 mmol, 1 eq). Se agitó la mezcla de reacción a -78°C durante 1 h, se diluyó con H O y se extrajo con DCM (x 3). Se lavaron los extractos
15 orgánicos con NaHCO3 al 10% y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el material crudo por TLC preparativa (Hex/AcOEt 1:2) para producir el epóxido como una espuma blanca (70% de rendimiento).
Parte C
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Se trató una solución del compuesto 14 (11 mg, 0,017 mmol, 1 eq) en DCM (0,5 mL) a temperatura ambiente con Et2NH (0,5 mL, 4,8 mmol, 282 eq), se agitó la solución resultante a ta durante una noche y se concentró al vacío. Se purificó el residuo por TLC preparativa (DCM/MeOH 9:1). Se obtuvo el compuesto 13 como un sólido blanco (rendimiento 90%).
25 MS(ESI (+)) m/e 428,5 (M+H)+.
Ejemplo 5
Preparación de un derivado de ciclopamina: 30
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Parte A Se pesó el compuesto 2 (1,30 g, 3,2 mmol, 1 eq) y se lo cargó en el recipiente de reacción. Se pesó carbonato de potasio (0,91 g, 6,6 mmol, 2,1 eq) y se lo cargó en el recipiente de reacción seguido de dicloroetano (6,0 mL, 76 mmol,
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5 23,8 eq.) y DMSO anhidro (5 mL). Se calentó la reacción a 70°C durante 36 h bajo una atmósfera de nitrógeno. Se enfrió la reacción a ta, se diluyó con DCM (15 mL) y se lavó dos veces con agua (2 x 15 mL). Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró (enjuague con DCM según sea necesario), y se concentró a sequedad para producir un sólido de color amarillo pálido. La cromatografía ultrarrápida (DCM/EtOAc) produce el material objetivo como un sólido cristalino blanco.
10 Parte B
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15 Se transfirió el compuesto 16 (0,111 g, 0,233 mmol, 1 eq) al matraz de reacción, se lo colocó bajo una atmósfera de nitrógeno, y se disolvió en DCM anhidro (2 mL). Se añadió cloroyodometano (0,238 mL, 3,27 mmol, 14 eq. ) Se enfrió la solución a -15°C. Se añadió gota a gota dietil zinc (1 M en heptano, 1,63 mL, 1,63 mmol, 6,5 equivalentes) durante 30 minutos controlando cuidadosamente la evolución de calor. Se mantuvo la reacción entre -10°C y -14°C durante varias horas, hasta que la TLC indicó que se había consumido el material de partida. Después, se detuvo la reacción mediante
20 la adición cuidadosa de THF (6 mL) y luego amortiguador acuoso de citrato (pH 4,5, 10 mL). Se dejó que se calentaran las capas a ta. Se añadió sulfato de sodio saturado (10 mL). Se mezclaron bien las capas, se transfirió a un embudo de separación con exceso de DCM y se recogió la capa orgánica. Se lavó la capa orgánica con hidróxido de sodio acuoso (1 N, 10 mL), y sulfato de sodio saturado (10 mL), se secó sobre sulfato de sodio antes de concentrar a sequedad. Se purificó el material crudo por cromatografía ultrarrápida para obtener el producto deseado con un rendimiento del 55%.
25 Ejemplo 6
Preparación de un derivado de ciclopamina: A una solución del compuesto 11 (5 mg, 0,01 mmol, 1 eq) y el compuesto 10 (10 mg, 0,04 mmol, 3 eq) en DCM anhidro (5 mL) se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio sólido (8 mg, 0,04 mmol, 3 eq) y se agitó la suspensión resultante a
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5 25°C durante 2 h. Se detuvo la mezcla de reacción con bicarbonato de sodio, se extrajo con DCM (4 x 10 mL), se recogió la capa orgánica y se la lavó con salmuera saturada (1 x 20 mL), se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a presión reducida. Se purificó el producto crudo por PTLC (DCM/MeOH 95:5) para obtener 8 mg del producto deseado.
10 Ejemplo 7
Preparación de un derivado de ciclopamina:
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20 Se suspendió ciclopamina 2 (20 mg, 0,049 mmol) en tolueno seco (0,6 mL) y se añadió ciclohexanona (150 µL, 1,47 mmol, 30 eq), seguido de isopropóxido de aluminio (79 mg, 0,392 mmol, 8 eq). Se calentó la mezcla resultante a reflujo durante 2 h, se enfrió a ta, se diluyó con acetato de etilo y se detuvo la reacción con solución de sal de Rochelle. Se agitó la mezcla bifásica durante la noche, se separaron las capas, se extrajo la capa acuosa con acetato de etilo y se secaron los extractos orgánicos combinados (sobre MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el residuo por
25 cromatografía ultrarrápida (DCM, DCM/metanol 98:2 y 95:5). Se obtuvo el compuesto objetivo 12 como un sólido cristalino blanco (70% de rendimiento).
Parte B
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Se trató diyodometano (40 µL, 0,5 mmol, 2,5 eq) en DCM (0,52 mL) a 0°C con dietilzinc al 15% en tolueno (0,2 mL, 0,2
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mmol 1 eq) y se agitó la solución resultante durante 5 min (en donde se observó un precipitado blanco). Se añadió la enona 12 (10 mg, 0,02 mmol, 1 eq) en DCM (0,35 mL) y se agitó la mezcla resultante a ta (baño de hielo removido) durante 3 h, se detuvo la reacción con NaOH (2 N) y se agitó durante 10 min, se separaron las capas y se extrajo la capa acuosa con DCM (dos veces). Se secaron los extractos orgánicos sobre MgSO , se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (DCM/metanol 92:8). Se obtuvo el material ciclopropanado 11 como un sólido blanco.
Parte C
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A una solución de ciclopropilenona 11 (10 mg, 24 mmol. 1 eq) en DCM (0,5 mL) a 0°C en atmósfera de argón se le añadió BF3.Et2O (30 µL, 0,24 mmol, 10 eq) y se agitó la solución resultante a 0°C durante 1,5 h, se diluyó con DCM y se detuvo la reacción con bicarbonato de sodio saturado. Se lavó la fase orgánica con solución saturada de bicarbonato de
15 sodio y se extrajeron las capas acuosas combinadas con DCM. Se lavaron las capas orgánicas combinadas con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo por TLC preparativa (DCM/metanol 9:1). Se obtuvo el compuesto objetivo 18 como un sólido blanco (rendimiento 90%). MS(ESI (+)) m/e 424,62 (M+H)+.
20 Ejemplo 8
Preparación de un derivado de ciclopamina:
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30 A una solución de ciclopamina 2 (250 mg, 0,6 mmol, 1 eq) en DCM (10 mL) a ta se le añadió Fmoc-OSu (205 mg, 0,6 mmol, 1 eq) y se agitó la mezcla resultante a ta durante la noche. Se enfrió luego la solución resultante de Fmocciclopamina cruda a 0°C y se la trató con dietilzinc al 15% en tolueno (0,5 mL, 0,6 mmol, 1 eq) y se agitó durante 30 min (matraz A, solución amarillenta).
35 Se trató diyodometano (0,4 mL, 6 mmol, 10 eq) en DCM (20 mL) a 0°C con dietilzinc al 15% en tolueno (3 mL, 3 mmol, 5 eq) y se agitó la solución resultante durante 5 min (matraz B, precipitado blanco).
Se transfirieron los contenidos del matraz B al matraz A a través de una cánula y se agitó la suspensión resultante durante 5 h a ta. Se detuvo la reacción con ácido clorhídrico 1 N, se agitó durante 10 min (hasta que todo el sólido
40 blanco se volvió a disolver) y se extrajo con DCM (5x). Se secaron los extractos orgánicos sobre MgSO4, se filtró sobre Celite y se concentró al vacío. Se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (hexanos/acetato de etilo 1:1). Se obtuvo el compuesto objetivo 11,12-monociclopropano 5 como una mezcla 9:1 de diasteroisómeros, junto con 20% de los productos diastereoméricos bis-ciclopropanados (80% de recuperación total). Esta mezcla se separó usando cromatografía SFC preparativa.
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Parte B
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 2O (27 µL, 0,22 mmol, 10 equiv) durante 1 h, se detuvo la reacción con solución saturada de bicarbonato de sodio, se separaron las capas y se extrajo la capa acuosa con DCM. Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. Se purificó el residuo por cromatografía en capa fina preparativa (hexano
10 / acetato de etilo 2:1). Se obtuvo el compuesto objetivo, ciclopamina expandida con Fmoc, como un aceite claro.
Se trató una solución de ciclopamina expandida con Fmoc (20 mg, 31 mmol, 1 eq) en DCM (0,5 mL) con Et2NH (0,5 mL, 4,8 mmol, 154 eq) durante la noche, se concentró al vacío y se purificó el residuo por cromatografía ultrarrápida (DCM, DCM / metanol 98:2 y 95:5). Se obtuvo el compuesto deseado como un aceite, que cristalizó al reposar. MS(ESI (+))
15 m/e 426,29 (M+H)+.
Ejemplo 9
Preparación de un derivado de ciclopamina: 20
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Parte A
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Se disolvió el compuesto 6 (23 mg, 54 µmol, 1 eq) en DCM (1 mL) y se añadió yoduro de metilo (0,17 mL, 0,54 mmol, 10 eq). Se dejó en agitación la reacción a ta en una atmósfera de nitrógeno durante la noche. A la mañana siguiente la TLC / LC-MS indicó que aún quedaba un poco de SM. Se añadió una espátula de Na2CO3 y se agitó la mezcla durante
30 otra h. Se cargó el material crudo sobre Biotage 25 Si+M y se eluyó con DCM/EtOAc/MeOH (82,5/10/7,5). El material amorfo obtenido: 16 mg. MS(ESI (+)) m/e 440,32 (M+H)+.
Ejemplo 10
35 Preparación de un derivado de ciclopamina: Parte A
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5 Se solubilizaron cloruro de hidrocinamoílo 22 (1,13 g, 6,7 mmol, 1 eq) y alilamina (0,77 mL, 10 mmol, 1,5 eq) en THF (20 mL) y se agitó la reacción a ta durante 24 h. Se formó un precipitado blanco. Se filtró la mezcla de reacción. Se secó el filtrado sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. Se aisló el aceite incoloro que se convirtió en un sólido ceroso (1,1 g).
 4 (0,55 mL, 2,5 p/p en t-BuOH) y se agitó la mezcla marrón resultante durante 10 min. Se añadió peryodato de sodio sólido (0,13 g, 0,59 mmol, 2,2 eq) en tres porciones y se agitó la mezcla a 0°C y se dejó calentar a 25°C durante un período de 2 h. Se diluyó la mezcla cremosa de color blanquecino claro con DCM (25 mL),
15 se secó con sulfato de magnesio, se separaron los sólidos por filtración a través de una almohadilla de Celite, se concentró el filtrado a presión reducida. El producto crudo desarrolló lentamente un color negro amarillento. Se cargó el material crudo sobre Biotage 25+S y se purificó eluyendo con hexano/EtOAc (1:1 a 1:2) para obtener un aceite incoloro, que solidificó una vez se secó (250 mg).
20 Parte B
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A una solución de 18 (108 mg, 0,25 mmol, 1 eq) y el aldehído 21 (100 mg, 0,52 mmol, 2,1 eq) en DCM (5 mL) se le
25 añadió triacetoxiborohidruro de sodio (100 mg, 0,47 mmol, 1,9 eq) en una porción y se agitó la suspensión a ta durante 7 h. Se detuvo la reacción mediante la adición de MeOH y se filtró a través de Celite. La evaporación a sequedad produjo 230 mg de aceite. Se purificó el material por cromatografía (SiO2, columna de 3 cm X 4 cm), eluyendo con hexano / EtOAc (4:6 a 2:8) para obtener 38 mg del producto deseado. MS(ESI (+)) m/e 599,74 (M+H)+.
30 Ejemplo 11
Preparación de un derivado de ciclopamina:
Parte A
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40 Se solubilizaron cloruro de 2-feniletanosulfonil 25 (1,13 g, 5,5 mmol, 1 eq) y alilamina (0,56 mL, 7,3 mmol, 1,3 eq) en THF (20 mL) y se dejó reaccionar durante la noche a ta durante 24 h. Se formó un precipitado blanco. Se filtró la mezcla de reacción. Se secó el filtrado sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. Se aisló un aceite ligeramente amarillo (1,1 g). Se usó el material crudo directamente en la siguiente etapa.
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A una solución de alil sulfonamida (0,15 g, 0,66 mmol, 1 eq) en acetona:agua (4 mL, 3:1) a 0°C se le añadió una solución de OsO4 (0,13 mL, 2,5 p/p en t-BuOH) y se agitó la mezcla marrón resultante durante 10 min. Se añadió peryodato de sodio sólido (0,31 g, 1,46 mmol, 2,2 eq) en tres porciones y se agitó la mezcla a 0°C y se dejó calentar a 25°C durante un período de 2 h. Se diluyó la mezcla cremosa de color blanquecino claro con DCM (25 mL), se secó con
5 sulfato de magnesio, se separaron por filtración los sólidos a través de una almohadilla de Celite, se concentró el filtrado a presión reducida. Se purificó el material crudo sobre SiO2 (columna 2 cm X 12 cm) eluyendo con hexano / EtOAc (7:3) para obtener el material deseado (16 mg).
Parte B 10
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A una solución de 18 (15 mg 35,4 µmol, 1 eq) y el aldehído 26 (16 mg, 70 µmol, 2 eq) en DMC (3 mL) se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (20 mg, 94 µmol, 2,6 eq) en una porción a ta. Después de 24 h se detuvo la reacción mediante la adición de unas pocas gotas de MeOH y se filtró sobre Celita. Se purificó el compuesto crudo por TLC
15 preparativa 1 mm (Primera elución: tolueno / acetona (9:1), segunda elución: tolueno / acetona (4:1)) para obtener 4 mg de un aceite incoloro. MS(ESI (+)) m/e 635,43 (M+H)+.
Ejemplo 12
20 Preparación de un derivado de ciclopamina:
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Se pesó el compuesto 2 (1,30 g, 3,2 mmol, 1 eq) y se cargó en el recipiente de reacción. Se pesó carbonato de potasio (0,91 g, 6,6 mmol, 2,1 eq) y se cargó en el recipiente de reacción seguido de dicloroetano (6,0 mL, 76 mmol, 23,8 eq.) y
30 DMSO anhidro (5 mL). Se calentó la reacción a 70°C durante 36 horas bajo una atmósfera de nitrógeno. Se enfrió la reacción a ta, se diluyó con DCM (15 mL) y se lavó dos veces con agua (2 x 15 mL). Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró (enjuague con DCM según sea necesario), y se concentró a sequedad para obtener un sólido de color amarillo pálido. La cromatografía ultrarrápida (DCM / EtOAc) produjo el material objetivo como un sólido cristalino blanco.
35 Parte B
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Se transfirió el compuesto 16 (0,111 g, 0,233 mmol, 1 eq) al matraz de reacción, se colocó bajo una atmósfera de nitrógeno, y se disolvió en DCM anhidro (2 mL). Se añadió cloroyodometano (0,238 mL, 3,27 mmol, 14 eq. ) Se enfrió la 5 solución a -15°C. Se añadió dietil zinc (1 M en heptano, 1,63 mL, 1,63 mmol, 6,5 equivalentes) gota a gota durante 30 minutos controlando cuidadosamente la evolución de calor. Se mantuvo la reacción entre -10°C y -14°C durante varias horas, hasta que la TLC indicó que s había consumido el material de partida. Después, se detuvo la reacción mediante la adición cuidadosa de THF (6 mL) y luego amortiguador de citrato acuoso (pH 4,5, 10 mL). Se dejó que las capas se calentaran a ta. Se añadió sulfato de sodio saturado (10 mL). Se mezclaron bien las capas, se transfirieron a un embudo
10 de separación con exceso de DCM y se recogió la capa orgánica. Se lavó la capa orgánica con hidróxido de sodio acuoso (1 M, 10 mL), y sulfato de sodio saturado (10 mL), se secó sobre sulfato de sodio antes de concentrarse a sequedad. Se purificó el material crudo por cromatografía ultrarrápida para obtener el producto deseado con un rendimiento de 55%.
15 Parte C
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Se disolvió el compuesto 15 (1,25 g, 2,56 mmol, 1 eq) en DCM (22 mL) bajo una atmósfera de nitrógeno y se enfrió la
20 solución a 0,9°C de temperatura interna. Se añadió BF3-OEt2 puro (1,6 mL, 12,8 mmol, 5 eq) en porciones durante varias horas, mientras se hacía seguimiento a la reacción por LCMS. Se dejó calentar la reacción lentamente a 10°C hasta que se completó. Se detuvo la reacción con MeOH (5 mL) a 0°C, se diluyó con KOH (2 M, 30 mL) y se agitó a ta durante 2 horas. Se separaron las capas y se lavó la capa orgánica con agua, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. La cromatografía con DCM / EtOAc proporcionó el producto deseado.
25 Ejemplo 13
Preparación de un derivado de ciclopamina
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Parte A Se colocó el compuesto 27 (29 mg, 60 µmol, 1 equiv) en un matraz de fondo redondo de 5 mL. Se añadieron butanona (2 mL) y Al(OiPr)3 (12,3 mg, 60 µmol, 1 eq). Se calentaron a reflujo los contenidos del matraz de fondo redondo bajo
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5 atmósfera de argón durante 7 h. Se agitó luego la mezcla de reacción a ta durante 10 h. Se detuvo luego la mezcla de reacción con una solución (2 mL) formada mediante la mezcla de ácido cítrico (500 g), NaOH (15,7 g) y agua (500 mL). Se agitó la mezcla resultante rápidamente hasta que se disipó la emulsión. Después, se extrajo la mezcla con EtOAc (3X10 mL). Se recogieron las capas orgánicas, se secaron sobre Na2SO4 y se concentró. Se purificó el material crudo por cromatografía en columna. MS(ESI (+)) m/e 486,26 (M+H)+.
10
Ejemplo 14
Preparación de un derivado de ciclopamina: 15
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Parte A
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Se disolvió el compuesto 28 (25 mg, 0,051 mmol, 1 eq) en 2-metoxietanol anhidro (1 mL, 12,7 mmol, 234 eq). Se añadió carbonato de potasio (7,1 mg, 0,051 mmol, 1 eq) y se calentó la reacción a 120°C. La reacción se controló por TLC. Cuando la TLC indicó que la reacción se había detenido, se enfrió la reacción a ta. Después, se diluyó la reacción con
25 acetato de etilo y se lavó con agua. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio y se concentró a sequedad. La cromatografía con DCM / EtOAc proporcionó el producto deseado. MS(ESI (+)) m/e 526,66 (M+H)+.
Ejemplo 15
30 Preparación de un derivado de ciclopamina: A una solución de ácido hidrocinámico 5 (3,01 g, 20 mmol, 1 eq) en 30 mL de cloroformo anhidro a 75°C se le añadió cloruro de tionilo (1,75 mL, 24,1 mmol, 1,2 eq) gota a gota durante un período de 3 min. La mezcla se calentó a reflujo durante 3,5 h. Se separó por destilación el disolvente para obtener el cloruro de ácido crudo como un líquido viscoso de
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10 color amarillo claro. Se usó el producto crudo sin purificación adicional.
Parte B
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15 A una mezcla bifásica de 7 (3,16 g, 24,1 mmol, 1,2 eq) en DCM (30 mL) y una solución acuosa de NaOH (2,0 M, 30 mL, 3 eq) a 25°C se le añadió una solución del cloruro de ácido 6 (3,38 g, 20 mmol, 1 eq) en DCM (10 mL) y se agitó la mezcla resultante a 25°C durante 3 h. Después, se neutralizó la mezcla con HCl acuoso (2 M, 30 mL). Luego, se separó la capa orgánica y se extrajo la capa acuosa con DCM (3 x 50 mL). Se lavaron las capas orgánicas combinadas con HCl (2,0 M, 25 mL), agua (3 x 50 mL), salmuera saturada (50 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporó el
20 disolvente a presión reducida. Se sometió el producto crudo a cromatografía sobre gel de sílice usando MeOH:DCM al 5% como eluyente y después se eluyó la columna con MeOH:DCM al 10% para obtener 1,141 g del compuesto 8.
Parte C
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A una mezcla del ácido 8 (264 mg, 1 mmol, 1 eq), EDCI (231 mg, 1,2 mmol, 1,2 eq), y trietilamina (168 µL, 1,2 mmol, 1,2 eq) en DCM (2 mL) a 0°C se le añadió alilamina (90,3 µL, 1,2 mmol, 1,2 eq), y se agitó la mezcla resultante a 0°C durante 1 h y se dejó calentar a 25°C durante un período de 2 h. Se añadió la mezcla de reacción a agua (50 mL), se
30 extrajo con DCM (4 x 25 mL), se lavaron las capas orgánicas combinadas con HCl 1 M (2 x 25 mL), agua (3 x 25 mL), salmuera saturada (25 mL), se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó el disolvente a presión reducida para obtener 287,5 mg del producto deseado. Este material se utilizó sin purificación adicional.
Parte D 35
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A una solución de la alil amida 9 (70 mg, 0,23 mmol, 1 eq) en 1 acetona (mL) y agua (0,3 mL) se le añadió una solución de tetróxido de osmio (0,35 mL, 0,035 mmol, 2,5 p/p en t-butanol) y se enfrió inmediatamente la mezcla de reacción en 40 un baño de hielo después de añadir la solución de OsO4. Se agitó la solución marrón oscura resultante a 0°C durante 15 min. Se añadió peryodato de sodio (110 mg, 0,51 mmol, 2,2 eq) en 5 porciones a la mezcla anterior y se continuó la
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agitación durante 1 hora a 0°C y se dejó calentar a 25°C durante un período de 2 h. Se diluyó la mezcla de reacción con DCM (3 mL), se filtró a través de un tapón pequeño de sulfato de magnesio y se lavó la torta del filtro con DCM (varias veces). Se concentró el filtrado y se filtró el residuo (67,9 mg) a través de un tapón pequeño de gel de sílice RP usando MeOH:DCM al 5% como eluyente para obtener 38,9 mg del producto deseado.
Parte E
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10 A una solución de 19 (0.0242 g, 0,0569 mmol, 1 eq), y el aldehído 10 (0,0346 g, 0,114 mmol) en 3,0 mL de DCM a 23°C se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (24,1 mg, 0,114 mmol, 2 eq) en una porción y se agitó la mezcla resultante durante 16 h. Después de la conversión completa del material de partida en el producto deseado como se desprende de LCMS y TLC, se recogió la mezcla en 2,5 mL de metanol y se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (amortiguador carbonatador de amonio 20 mM -acetonitrilo, método básico). Se concentraron las fracciones y se
15 recogieron en un volumen mínimo de acetonitrilo, se congeló la solución y se liofilizó para obtener 0,007 g (0,0098 mmol, 17%) como un sólido blanco. MS(ESI (+)) m/e 714,6 (M+H)+.
Ejemplo 16
20 Preparación de un derivado de ciclopamina:
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Parte A
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A una solución de 18 (35 mg, 0,08 mmol, 1 eq) y aldehído 32 (34 mg, 0,17 mmol, 2,0 equiv) en THF (2,0 mL) se le
añadió triacetoxiborohidruro de sodio (35 mg, 0,17 mmol, 2,0 eq) en una porción. Se dejó la solución en agitación a 30 23°C durante 12 h. Después, se concentró la mezcla y se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un
gradiente de 1:1 de hexanos:acetato de etilo seguido de 1:2, 1:4 y acetato de etilo directamente. Parte del material aún
estaba eluyendo por lo que se lavó la columna a continuación con 9:1 acetato de etilo:metanol. El producto deseado
eluyó conjuntamente con un poco de aldehído por lo que se purificó luego el material por HPLC preparativa. (Método
básico 50_100). Se congelaron las fracciones deseadas y se liofilizaron para obtener un residuo aceitoso (12 mg, 0,02 35 mmol, 24% de rendimiento). MS(ESI (+)) m/e 614,44 (M+H)+.
Ejemplo 17
Preparación de un derivado de ciclopamina: 40
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Parte A
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A una solución de 18 (8,0 mg, 0,02 mmol, 1 eq) y el aldehído 34 (6,0 mg, 0,04 mmol, 2,0 eq) en CH2Cl2 (1,0 mL) se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (8,0 mg, 0,17 mmol, 2,0 eq) en una porción. Se dejó en agitación la solución a 23°C durante 12 h. Después, se concentró la mezcla y se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un
10 gradiente de 1:1 hexanos: acetato de etilo seguido de 1:2, y 1:4 para aislar el producto deseado que eluye junto con algo de aldehído. Se purificó luego el material por HPLC preparativa. Se congelaron y liofilizaron las fracciones deseadas para obtener un polvo blanco (4,9 mg, 0,009 mmol, 46% de rendimiento). MS(ESI (+)) m/e 570,41 (M+H)+.
Ejemplo 18
15 Preparación de un derivado de ciclopamina.
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Parte A
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25 A una solución de 18 (6,0 mg, 0,01 mmol, 1 eq) y benzaldehído 36 (3,0 mg, 0,02 mmol, 2,0 eq) en CH2Cl2 (0,5 mL) se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (6,0 mg, 0,02 mmol, 2,0 eq) en una porción. Se dejó en agitación la solución a 23°C durante 12 h. Después, se concentró y se purificó la mezcla por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de 4:1 hexanos:acetato de etilo seguido de 1:1 para aislar el producto deseado que eluye junto con algo de aldehído. Se purificó luego el material por HPLC preparativa. Se congelaron y liofilizaron las fracciones deseadas para
30 obtener un polvo blanco (0,6 mg, 0,001 mmol, 8% de rendimiento).
Ejemplo 19
Preparación de un derivado de ciclopamina: 35
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Parte A
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A una solución de 18 (6,0 mg, 0,01 mmol, 1 eq) y 4-fenoxibenzaldehído 38 (6,0 mg, 0,02 mmol, 2,0 eq) en CH2Cl2 (0,5 mL) se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (6,0 mg, 0,02 mmol, 2,0 eq) en una porción. La solución se dejó en agitación a 23°C durante 12 h. Después, se concentró y se purificó la mezcla por cromatografía en gel de sílice usando
10 un gradiente de 4:1 hexanos:acetato de etilo seguido de 1:1 para aislar el producto deseado que eluye junto con algo de aldehído. El material se purificó luego por HPLC preparativa. Se congelaron y liofilizaron las fracciones deseadas para obtener un polvo blanco (1,8 mg, 0,003 mmol, 21% de rendimiento). MS(ESI (+)) m/e 606,4 (M+H)+.
Ejemplo 20
15 Preparación de un derivado de ciclopamina:
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Parte A
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25 A una mezcla de 18 (40 mg, 0,09 mmol, 1 eq) y bicarbonato de sodio (15 mg, 0,18 mmol, 2,0 eq) en CH2Cl2 (0,5 mL) se le añadió bromoetanol 40 (33 µL, 0,47 mmol, 5,0 eq). Se calentó la solución a reflujo durante 4 h. Después, se concentró la mezcla y se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de DCM seguido por 38:1:1 diclorometano:acetato de etilo:metanol, a continuación, 36:3:1, a continuación, 17:2:1 para aislar el producto deseado como un aceite (12 mg, 0,026 mmol, 27% de rendimiento). MS(ESI (+)) m/e 468,24 (M+H)+.
30 Ejemplo 21
Preparación de un derivado de ciclopamina A una solución de 18 (100 mg, 0,24 mmol, 1 eq) y aldehído 42 (42 mg, 0,35 mmol, 1,5 eq) en CH2Cl2 (2,5 mL) se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (100 mg, 0,47 mmol, 2,0 eq) en una porción. La solución se dejó en agitación a 23°C durante 12 h y muestra solamente un 50% de conversión por LCMS. A la mezcla se le añadió un equivalente
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10 adicional de aldehído 36 (26 mg, 0,24 mmol, 1,0 eq) y triacetoxiborohidruro de sodio (48 mg, 0,24 mmol, 1,0 eq) y se dejó en agitación durante 2 h. Después, se concentró y se purificó la mezcla por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de 1:1 hexanos:acetato de etilo seguido de 1:2, y 1:4 para aislar el producto deseado que eluye con algo de aldehído. Se purificó luego el material por HPLC preparativa. Se congelaron y liofilizaron las fracciones deseadas para obtener un polvo blanco (53 mg, 0,10 mmol, 43% de rendimiento). MS(ESI (+)) regla 526,66 (M+H)+.
15 Ejemplo 22
Preparación de un derivado de ciclopamina:
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Parte A
imagen114
25 A una solución de 18 (15 mg, 0,04 mmol, 1 eq) y aldehído 44 (6,9 mg, 0,04 mmol, 1,0 eq) en CH2Cl2 (0,6 mL) se le añadió triacetoxiborohidruro de sodio (15 mg, 0,07 mmol, 2,0 eq) en una porción. La solución se dejó en agitación a 23°C durante 12 h y solo muestra la conversión del 50% por LCMS. A la mezcla se le añadió un equivalente adicional de aldehído 44 (6,9 mg, 0,04 mmol, 1,0 eq) y triacetoxiborohidruro de sodio (7,5 mg, 0,04 mmol, 1,0 eq) y se dejó en
30 agitación durante 12 h. Después, se concentró y purificó la mezcla por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de 1:1 hexanos:acetato de etilo seguido por 1:2, y 1:4 para aislar el producto deseado como un aceite (12 mg, 0,19 mmol, rendimiento del 54% ). MS(ESI (+)) m/e 635,43 (M+H)+.
Ejemplo 23 35 Preparación de un derivado de ciclopamina
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5 Parte A
A una mezcla de 18 (12 mg, 0,03 mmol, 1 eq) y carbonato de potasio (40 mg, 0,28 mmol, 10 eq) en DMF (0,5 mL) se le añadió clorhidrato de cloruro de 2-(dimetilamino)etilo 46 (20 mg, 0,14 mmol, 5,0 eq). La solución se agitó durante 2
10 horas a 23°C y no se llevó a cabo ninguna reacción. Se calentó luego la solución a 65°C durante 12 h, se detuvo la reacción agua (2 mL) y después se extrajo con éter dietílico (2 x 10 mL). Se lavaron las soluciones orgánicas combinadas con salmuera y se secaron con MgSO4. Luego, se concentró y se purificó la mezcla por HPLC preparativa. Se congelaron y liofilizaron las fracciones deseadas para obtener un polvo blanco (17, 1,8 mg, 0,004 mmol, 13% de rendimiento). MS(ESI (+)) m/e 495,71 (M+H)+.
15 Ejemplo 24
Preparación de un derivado de ciclopamina: imagen116
20 Parte A
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25 A una solución de 18 (100 mg, 0,24 mmol, 1 eq) y cloroacetamida 48 (250 mg, 1,2 mmol, 5,0 eq) en CH2Cl2 (1,0 mL) se le añadió trietilamina (160 µL, 1,2 mmol, 5,0 eq). Se calentó la solución a reflujo y se agitó durante 72 h. Después, se concentró y se purificó la mezcla por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de 4:1 hexanos:acetato de etilo seguido de 2:1, 1:1 y 1:2 para aislar el producto deseado como una mezcla de dos manchas. Se repitieron las mismas condiciones de la columna y se aisló el producto deseado como un aceite (17 mg, 0,14 mmol, 12% de rendimiento).
30 Ejemplo 25
Preparación de un derivado de ciclopamina:
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5 Se disolvió el compuesto 18 (103 mg, 0,24 mmol, 1 eq) en DCM (3,0 mL) y se enfrió a -78°C. A esta solución se le añadió mCPBA (77% en peso, 54 mg, 0,24 mmol, 1,0 eq) y después se dejó calentar la solución a 22°C durante 12 h. La reacción llegó hasta un 50% de conversión (LCMS). Se detuvo la solución con bicarbonato de sodio y se extrajo con DCM. Se secaron los compuestos orgánicos combinados con sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron. Se purificó luego el material por cromatografía de gel de sílice usando un gradiente de DCM:EtOAc:MeOH de 95:2,5:2,5 a
10 continuación, 92,5:5,0:2,5 y luego 85:10:5 para aislar el producto deseado que eluye con una pequeña cantidad de otra cosa. Se concentraron y purificaron las fracciones combinadas por HPLC preparativa para obtener 3,4 mg del producto deseado. MS(ESI (+)) m/e 440,63 (M+H)+.
Ejemplo 26
15 La inhibición de la vía Hedgehog en cultivo celular usando análogos de ciclopamina
Los efectos de la muerte de células de cáncer específicas de la vía  pueden determinarse usando el siguiente ensayo. Las células C3H10T1/2 se diferencian en osteoblastos cuando entran en contacto con el péptido hedgehog 20 sónico (Shh-N). Tras la diferenciación, estos osteoblastos producen altos niveles de fosfatasa alcalina (AP), que se pueden medir en un ensayo enzimático (Nakamura y colaboradores, 1997 BBRC 237: 465). Por lo tanto, los compuestos que bloquean la diferenciación de las células C3H10T1/2 en osteoblastos (un evento dependiente de Shh) pueden ser identificados por una reducción en la producción de AP (van der Horst y colaboradores, 2003 Bone 33: 899). Los detalles del ensayo se describen a continuación. Los resultados aproximados (EC50 para la inhibición) del ensayo
25 de diferenciación se muestran a continuación en la Tabla 1.
Protocolo de ensayo
Cultivo de células
30 Se cultivaron células C3H10T1/2 de fibroblastos de mesodermo embrionario de ratón (obtenidas a través de ATCC) en medio MEM basal (Gibco / Invitrogen) complementado con 10% de FBS inactivado con calor (Hyclone), 50 unidades/ mL de penicilina y 50 µg/mL de estreptomicina (Gibco/Invitrogen) a 37ºC con CO2 al 5% en atmósfera de aire.
35 Ensayo de fosfatasa alcalina
Se sembraron en placa células C3H10T1/2 en 96 pozos con una densidad de 8x103 células/pozo. Las células se cultivaron hasta confluencia (72 horas). Después de Sonic Hedgehog (250 ng/mL), (R & D Systems) y/o tratamiento con compuesto, se lisaron las células en 110 µl de amortiguador de lisis (Tris 50 mM pH 7,4, Triton X100 al 0,1%), se 40 sonicaron las placas y se centrifugaron los lisados a través de placas de PVDF 0.2 µm (Corning). Se ensayaron 40 µl de lisados para determinar la actividad de AP en solución amortiguadora alcalina (Sigma) que contenía 1 mg/mL de pnitrofenil fosfato. Después de incubar durante 30 min a 37ºC, se leyeron las placas en un lector de placas Envision a 405 nm. Se cuantificó la proteína total con un kit de ensayo de proteínas BCA de Pierce de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se normalizó la actividad de AP contra de proteína total. Obsérvese que "A" indica que la
45 IC50 es menor que 200 nM, "B" indica que la IC50 es 200-500 nM, "C" indica que la IC50 es > 500 nM.
Tabla 1 -EC50 aproximada para inhibición Compuesto
Ensayo de diferenciación de EC50
1C
4A
11 C 17 18 19 20 21 24 27 28 29 30 31 33 35 37 39 41 43 45 47 A A B C A B C C A A A A A C C A B B B
imagen119
Ejemplo 27
Método de purificación cromatográfico preparativo de fluido supercrítico (SFC)
5 Se describe un método de cromatografía preparativa de fluido supercrítico para la purificación de compuestos de la presente invención.
Hardware utilizado:
10 SFC: Berger PrepSFC System Detector ultravioleta: Knauer Modelo K-2501 Columna: Berger 5 micras de sílice, 20 mm por 250 mm
15 Condicione de SFC:
Fases móviles: CO2 -95%; El metanol -5% Velocidad de flujo: 50,00 mL/minuto Temperatura de la columna: 35º C
20 Isocrática durante 40 minutos con metanol al 5% en CO2 supercrítico Volumen de inyección: 1000 µL Las concentraciones de la muestra se corren normalmente a razón de 5,0 mg/mL Preparación de la muestra: Las muestras se disuelven en 20% de DCM / 80% de metanol Los productos eluyen entre 25 y 40 minutos
25 Parámetros del detector ultravioleta
Longitud de onda = 210 nm; y la Resolución = 1,0 nm
30 Ejemplo 28
Método de espectrometría de masas -cromatografía líquida (LCMS)
Se describe un método de espectrometría de masas -cromatografía líquida para los compuestos de la presente 35 invención.
[A] Reporte del método de entrada
Waters Alliance 2795 LC fase móvil 40
Solventes % de A 0,0 % de B 10,0 Acetonitrilo % de C 90,0 Agua NH HCO3 20 mM % de D 0,0 Agua
Rampa de flujo 1,00
imagen120
Flujo (ml/min) Tiempo de detención (min) Presión mínima (Bar) Presión máxima (Bar) Desgasificador Volumen de carrera
1,500 4,00 0 300 Encendido 100,0 µl
Columna Waters Alliance 2795 LC
Posición de la columna Tiempo de equilibrio (min) Temperatura de la columna (ºC) Límite de temperatura de la columna (ºC)
Columna 3 0,00 35 5
5
Waters Alliance 2795 LC Equilibrio rápido
Trayectoria del sistema Flujo del sistema (ml/min) Tiempo del sistema (min) Tiempo para nuevo equilibrio (min) Volumen de columna previa (µl)
Apagado 0,00 0,00 0,00 0,00
Waters Alliance 2795 I/O
10
Interruptor 1 Interruptor 2 Interruptor 3 Interruptor 4 Ajuste de la salida analógica Waters Alliance 2795 LC programa de gradiente Sin cambio Sin cambio Sin cambio Sin cambio Velocidad de flujo
Tiempo
% de A % de B % de C % de D Flujo Curva
0,00
0,0 10,0 90,0 0,0 1,500 1
3,00
0,0 85,0 15,0 0,0 1,500 6
3,10
0,0 100,0 0,0 0,0 1,500 6
3,50
0,0 100,0 0,0 0,0 1,500 6
3,60
0,0 10,0 90,0 0,0 1,500 6
Waters Alliance 2795 LC Programa del evento externo
15 No hay entradas en el programa de eventos externos de la bomba
Waters Alliance 2795 Parámetros de inyección
Tipo de inyección Secuencial Modo de llenado Bucle parcial Límite de aire de la muestra previa (µl) 4,0 Límite de aire de la muestra posterior (µl) 4,0 Tiempo de carga previa (min) 0,00
20 Waters Alliance 2795 Parámetros del automuestreador
Temperatura de la muestra (ºC) 20 Límite de temperatura de la muestra (ºC) 20 Profundidad de extracción (mm) 0 Velocidad de extracción Normal Búsqueda del fondo del pozo Falsa Revisión de la altura de la placa Falsa
Waters Alliance 2795 Parámetros de lavado
25 Frecuencia de lavado Inyección Tiempo de enjuague (s) 3 Tiempo de lavado (s) 10 Ciclos de lavado 2 Volumen de lavado secundario (µl) 600,0 Secuencia de lavado
imagen121
Waters 996 PDA
Longitud de onda de partida (nm) 220,00 Longitud de onda de finalización (nm) 400,00 Resolución (nm) 1,2 Velocidad de muestreo (espectros/s) 1,000 Respuesta del filtro 1 Tiempo de exposición (ms) Automática Interpolación 656 Sí Tiempo de detención de la adquisición (min) 4,00 Guardar en disco Sí
5
Waters 996 PDA Canal 1
Modo de salida Apagado
10 Waters 996 PDA Canal 2
Modo de salida Apagado Fin del reporte
[B] Reporte del experimento
Nombre Experimento predeterminado Creación Hora Viernes 04 Jun 2004 10:25:33 instrumento Identificador Número de version 1.0 Duración (min) 4.0 Nombre del archivo de calibración C:\MassLynx\Infinity_2002.PRO\ACQUDB\NAICS 040408.cal válvula de solvente de retardo de 0 desvío activado Número de funciones 1
15 Función 1: MS Barrido, Tiempo 0,00 a 3,50, Masa 200,00 a 1000,00 ES+
Tipo MS de barrido Modo del ión ES+ Formato de datos Centroid Archivo de parámetros C:\Masslynx\Infinity_2002_PRO\ACQUDB\default.ipr Masa de partida 200,0 Masa final 1000,0 Tiempo de barrido (s) 1,0 Tiempo entre barridos (s) 0,2 Tiempo de partida (min) 0,0 Tiempo final (min) 3,5
[C] Parámetros de afinación ZO
20 Fuente (ES+) Ajustes Cotejos Capilaridad (kV) 3,20 3,27 Cono (V) 35,00 37,24 Extractor (V) 3,00 2,81 Lente RF (V) 0,0 0,0 Temperatura de la fuente (ºC) 130 129 Temperatura de desolvatación (ºC) 350 350 Flujo de gas del cono (L/h) 20 33 Flujo de gas de desolvatación (L/h) 450 466 Analizador Ajustes Cotejos Resolución LM 1 15,0 Resolución HM 1 15,0 Energía 1 del ión 0,5 Multiplicador (V) 550 -547 Manómetros de presión Presión Pirani (mBar) < 1e-4 mBar Configuración MUX Sonda Estándar
imagen122
Equivalentes
Los expertos en la técnica reconocerán, o serán capaces de determinar usando no más que experimentación de rutina, muchos equivalentes para las realizaciones específicas de la invención aquí descrita. Se entiende que tales equivalentes están abarcados por las siguientes reivindicaciones.

Claims (7)

  1. imagen1
    Reivindicaciones
    1. Proceso para la producción de un alcaloide esteroideo de ciclopropilo de la fórmula 2:
    imagen2
    5
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;
    en donde cada R1 y R8 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo,
    10 arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, nitro, aciltio, carboxamida, sulfonamida, carboxilo, nitrilo, sulfato, -OP(L)(OR20)2, -XC(L)-R21 o -XC(L)-X-R21; en donde R1 también puede ser un azúcar; cada X es O o NR en donde R es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo o aralquilo;
    15 LesOoS; R2 y R9 son independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino , acilamino, aralquilamino, heteroarilo o heteroaralquilo; R5 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro,
    20 hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, alquilselenio, aralquilselenio, arilselenio, alquiltio, aralquiltio, ariltio, heteroarilo, o heteroaralquilo; cada R3, R4, R6, R7, R13 y R14 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, heteroarilo, o heteroaralquilo;
    25 o R1 y R2 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman (C=O)-, y R4 y R5 tomados conjuntamente forman un doble enlace,
    o R1 es hidroxilo y R2 es H, y R10 y R11 tomados juntos forman un grupo representado por 1b
    30
    imagen3
    en donde Z es C(R23)(R23);
    R12
    es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]qR21 , -[(W)-N(R21)
    35 C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)C(o)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)-N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21 , en donde cada W es independientemente un dirradical, y q es 1, 2, 3, 4, 5, o 6; cada R15, R16, y R17 son independientemente H, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino; o R15 y R16 tomados conjuntamente, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-o
    40 -C(S)-; R18 y R19 son independientemente H, alquilo, aralquilo, haluro, amido, o éster;
    R20
    cada es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
    R21
    45 cada es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20)2]p-R25 en donde p es 0-6; o cualesquiera dos ocurrencias de R21 en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros que contiene hasta dos heteroátomos seleccionados de N, O, S, y P; y cada R23 es independientemente alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo,
    50 heteroaralquilo, haluro, alcoxi, ariloxi, aciloxi, sililoxi, nitrilo, -C(O)R21, -CO2R21, -SO2R21, y -C(O)N(R21)2;
    R25
    cada es independientemente H, hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), -SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR20 , S(O)2OR20, -OP(L)(OR20)(OR20), -NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20) en donde:
    imagen4
    R12
    es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]pR21 , -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , -[(W)-O]qR21 , -[(W)N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21;
    5 qes1,2,3,4,5,o6; R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
    R21
    es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20)2]p-R25; o
    10 cualesquiera dos ocurrencias de R21 pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R25 es hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), -COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR19 , -S(O)2OR20 , -OP(L)(OR20)(OR20), NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR21)(OR20), siempre que exista al menos un grupo representado por la fórmula 1b en
    15 dicho compuesto de fórmula 2.
    en donde un alcaloide esteroideo aislado como un producto natural o un alcaloide esteroideo sintetizado o una forma de los mismos protegida en N es ciclopropanada usando un complejo 1,1-haloalquilmetal.
    20
  2. 2. El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el complejo de 1,1-haloalquilometal se forma usando un diazoalcano y un metal o especie organometálica.
  3. 3. El proceso de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la especie metálica u organometálica se selecciona de Et2Zn, 25 iBu3Al, samario, cobre, rodio y paladio.
  4. 4. El proceso de acuerdo con la reivindicación 2, en el que el agente de ciclopropanación comprende diyodometano y Et2Zn.
    30 5. El proceso de la reivindicación 2, en el que el agente de ciclopropanación comprende un dialquil zinc y diyodometano y la reacción se lleva a cabo en diclorometano.
  5. 6. El proceso de la reivindicación 1 llevado a cabo en un disolvente aprótico.
    35 7. El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que el compuesto de fórmula 2 se representa por:
    imagen5
    40 en donde R12 es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]p-R21 , -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , -[(W)O]qR21, -[(W)-N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21; q es 1, 2,3, 4, 5,o 6;
    45 R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 pueden tomarse juntas para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R21 es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20]pR25; o dos apariciones de R21 pueden tomarse juntas para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R25 es hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), -COR2N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20),
    50 SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR19 , -S(O)2OR20 , -OP(L)(OR20)(OR20), -NP (O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20).
  6. 8. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, que comprende además hacer reaccionar el alcaloide esteroideo ciclopropanado de fórmula 2 con un ácido de Lewis o Bronsted para promover de esta manera el
    55 reordenamiento y la expansión del anillo D del alcaloide esteroideo por un átomo de carbono para proporcionar un compuesto de fórmula 1:
    imagen6
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde cada R1 y R8 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, nitro, aciltio, carboxamida, sulfonamida, carboxilo, nitrilo, sulfato, -OP(L)(OR20)2, -XC(L)-R21 o -XC(L)XR21; en donde R1 también puede ser un azúcar; cada X es independientemente O o NR en donde R es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo o aralquilo; L es O oS; R2 y R9 son independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, heteroarilo o heteroaralquilo; cada R5 y R11 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, alquilselenio, aralquilselenio, arilselenio, alquiltio, aralquiltio, ariltio, heteroarilo, o heteroaralquilo; cada R3, R4, R6, R7, R13 y R14 es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, aralquilo, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino, heteroarilo o heteroaralquilo;
    o R1 y R2 tomados en conjunto, junto con el carbono al que están unidos, forman (C=O)-, y R4 y R5 tomados conjuntamente forman un doble enlace,
    o R1 es hidroxilo y R2 es H, y R10 y R11 tomados juntos forman un doble enlace,
    R12
    es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]qR21 , -[(W)N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)C(O)N(R21)]qR21, -[(W)-O]qR21, -[(W)-N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21; donde W es un dirradical, y q es 1, 2, 3, 4, 5, o 6; R15, R16, y R17 son independientemente H, alcoxilo, ariloxi, aciloxi, haluro, hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, acilamino, aralquilamino;
    o R15 y R16 tomados conjuntamente, junto con el carbono al que están unidos, forman -C(O)-o -C(S)-; R18 y R19 son independientemente H, alquilo, aralquilo, haluro, amido, o éster;
    R20
    cada es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros; R21 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20 )2]p-R25 en donde p es 0-6; o cualesquiera dos ocurrencias de R21 en el mismo sustituyente pueden tomarse juntos para formar un anillo opcionalmente sustituido de 48 miembros que contiene 0-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S y P;
    R23
    cada es independientemente H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haluro, alcoxi, ariloxi, aciloxi, sililoxi, nitrilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21, y -C(O)N(R21)2;
    R25
    cada es independientemente H, hidroxilo, acilamino, -N(R20) COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), COR20N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), -SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR20 , S(O)2OR20, -OP(L)(OR20)(OR20), -NP(O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20).
  7. 9. El proceso de la reivindicación 8, en donde el compuesto de fórmula 1 se representa por en donde
    imagen7
    R12
    5 es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, hidroxilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, haloalquilo, alcoxilo, -C(O)R21 , -CO2R21 , -SO2R21 , -C(O)N(R21)(R21), -[C(R21)2]p-R21 , -[(W)-N(R21)C(O)]qR21 , -[(W)-C(O)]qR21 , -[(W)C(O)O]qR21 , -[(W)-OC(O)]qR21 , -[(W)-SO2]qR21 , -[(W)-N(R21)SO2]qR21 , -[(W)-C(O)N(R21)]qR21 , -[(W)-O]qR21 , -[(W)N(R21)]qR21, o -[(W)-S]qR21; q es 1, 2,3, 4, 5,o 6;
    10 R20 es H, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; o cualesquiera dos ocurrencias de R20 pueden tomarse juntas para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
    R21
    es H, alquilo, arilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo o -[C(R20]pR25; o dos apariciones de R21 pueden tomarse juntas para formar un anillo opcionalmente sustituido de 4-8 miembros;
    R25
    15 es hidroxilo, acilamino, -N(R20)COR20 , -N(R20)C(O)OR20 , -N(R20)SO2(R20), -COR2N(R20)2, -OC(O)R20N(R20)(R20), SO2N(R20)(R20), -N(R20)(R20), -COOR20 , -C(O)N(OH)(R21), -OS(O)2OR19 , -S(O)2OR20 , -OP(L)(OR20)(OR20), -NP (O)(OR20)(OR20), o -P(O)(OR20)(OR20).
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