ES2562494T3 - Composiciones estabilizadas para administración tópica y métodos para preparar las mismas - Google Patents

Abstract

Una composición para suministro tópico de al menos un agente activo, comprendiendo dicha composición el agente activo en una micela de fosfolípido, colágeno, elastina y un portador aceptable, en la que la elastina es elastina de bajo peso molecular reticulada.

Description

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DESCRIPCION

Composiciones estabilizadas para administracion topica y metodos para preparar las mismas.

Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a metodos para estabilizar principios activos en composiciones farmaceuticas para proporcionar un tiempo de durabilidad prolongado con disponibilidad mejorada de principios activos.

Antecedentes de la invencion

Para estabilidad durante el almacenaje y conveniencia de manipulacion, con frecuencia se formulan composiciones farmaceuticas como un polvo liofilizado o secado al vacfo y almacenado a bajas temperaturas entre -10°C y 4°C. El polvo seco se reconstituye tfpicamente con un fluido adecuado, tal como disolucion salina o agua, previamente a la administracion a un paciente. Alternativamente, la composicion farmaceutica se puede formular como una disolucion o suspension acuosa que incluye un estabilizante para evitar la degradacion. Sin embargo, muchos compuestos son diffciles de estabilizar y puede haber una perdida de compuesto o de actividad durante la formulacion, reconstitucion y/o el periodo de almacenamiento. Pueden tener lugar problemas de estabilidad como resultado de desnaturalizacion de protefnas, degradacion, dimerizacion y/o polimerizacion. Se han usado diversos excipientes con diferentes grados de exito para probar y estabilizar un agente activo en una composicion farmaceutica. Tambien pueden ser eficaces los estabilizantes en la reduccion de la adhesion del agente activo a superficies, tales como las superficies de material de vidrio de laboratorio, recipientes, el vial en el que se reconstituye la composicion farmaceutica o la superficie interior de una jeringa usada para inyectar la composicion farmaceutica. Ademas de poder estabilizar un agente activo en una composicion, un agente estabilizante ideal deberfa presentar una inmunogenicidad insignificante cuando se administra a un paciente humano.

Se ha demostrado particularmente diffcil estabilizar agentes activos para preparacion cosmetica o dermatologica topica. Son utiles varios tipos de agentes activos para la profilaxis y el tratamiento de cambios de la piel cosmeticos y dermatologicos, tales como envejecimiento de la piel y, en particular, envejecimiento inducido por procesos oxidativos o degenerativos. Tambien es deseable preparar preparaciones que puedan ser administradas por via topica para mejorar la curacion de heridas o para tratar neuropatfas dolorosas. Se han encontrado diversos problemas al intentar suministrar principios activos a traves de la piel. El tamano de muchos agentes activos hace diffcil que penetren a traves de la piel y tambien se ha demostrado diffcil estabilizar algunos agentes para almacenamiento a temperatura ambiente.

Un ejemplo de un agente activo que se ha postulado que mejora el aspecto de las lfneas de la piel es la toxina botulfnica Tipo A. Sin embargo, la toxina botulfnica pura es extremadamente susceptible de desnaturalizacion debido a desnaturalizacion de la superficie, calor y condiciones alcalinas. La toxina inactivada forma protefnas de toxoide que pueden ser inmunogenicas y los anticuerpos resultantes pueden hacer a un paciente resistente a los efectos de la toxina. Ademas, la dilucion del complejo de toxina obtenido por procedimientos de cultivo, fermentacion y purificacion a las concentraciones de toxina mucho menores usadas para una composicion farmaceutica da como resultado desintoxicacion rapida de la toxina a menos que este presente un agente estabilizante adecuado. Las formulaciones actuales de toxina botulfnica se deben administrar en cuatro horas despues de reconstitucion puesto que la molecula de toxina es muy labil. Durante este periodo de tiempo, la toxina botulfnica reconstituida es almacenada en un refrigerador (4°C). La descomposicion de la toxina en toxoide puede inducir respuestas inmunitarias al toxoide que pueden interferir con tratamientos posteriores. Los estabilizantes actuales que se han usado en formulaciones de toxina botulfnica son albumina y gelatina de origen animal. Sin embargo, estos estabilizantes no pueden estabilizar suficientemente la toxina botulfnica para almacenamiento a temperatura ambiente. Asf hubo una necesidad especffica de una formulacion que pudiera mejorar la estabilidad de la toxina botulfnica y tambien fomentar su permeacion a traves de la piel.

Se han hecho varios esfuerzos para proporcionar formulaciones de toxina botulfnica que se puedan estabilizar y suministrar en modos alternativos. Por ejemplo, la Patente de Estados Unidos N° 6.585.993 describe un implante biocompatible para liberacion continua de una neurotoxina durante un periodo de tratamiento que se extiende de un mes a cinco anos. Aunque dicho sistema implantable puede ser util para ciertas situaciones, tales como para el tratamiento de la jaqueca, este tipo de sistema de implante no es posible para el tratamiento de arrugas faciales, del cuello o las manos.

La Solicitud de Patente de Estados Unidos N° 2004/0247623 sugiere un metodo para el tratamiento de distorsionadores relacionados con neuronas sensoriales a traves de la aplicacion transdermica de una neurotoxina. Esta aplicacion se refiere en particular a un metodo para tratar la jaqueca. La aplicacion sugiere que la toxina botulfnica se puede administrar en una variedad de maneras.

La Solicitud de Patente Internacional WO 0158472 describe una composicion farmaceutica que comprende toxina botulfnica y un polisacarido. Esta solicitud explica que el polisacarido estabiliza la neurotoxina. Sin embargo, otros

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estudios han demostrado que los sacaridos son deficientes estabilizantes para la toxina botulfnica.

La Solicitud de Patente Internacional WO 04/060384 describe una composicion de toxina botulfnica farmaceutica que incluye un agente secuestrante. El fin del agente secuestrante es evitar la difusion de la toxina botulfnica lejos del sitio de inyeccion. Esto no se refiere a la necesidad de composiciones estables que se puedan aplicar a la superficie de la piel.

Aunque la toxina botulfnica puede alisar lfneas y arrugas finas para la mayorfa de los usuarios, hay varias desventajas asociadas a su uso actual. La toxina botulfnica se debe administrar en un consultorio medico. Las inyecciones pueden ser dolorosas y puede haber hematomas. Tienen lugar efectos secundarios adversos en algunos pacientes tratados por inyeccion. Los efectos secundarios mas comunes para el tratamiento de las lfneas del ceno incluyen parpados cafdos, nauseas, sfntomas de tipo influenza (fiebre, etc.), dolor de cabeza e infecciones respiratorias. Reacciones menos frecuentes pueden incluir dolor facial, enrojecimiento en el sitio de la inyeccion y debilidad muscular en otros sitios. Los tratamientos repetidos pueden conducir a la paralisis permanente de los musculos faciales dejando la cara sin expresion. Asf, hay una necesidad de metodos alternativos para suministrar la toxina botulfnica a la piel.

Otro agente activo que serfa deseable suministrar a traves de la piel es el acido hialuronico (AH). El acido hialuronico es un polisacarido de peso molecular alto que se encuentra en la naturaleza que se encuentra en muchos tejidos del cuerpo. El acido hialuronico ha sido asociado al mantenimiento de la humedad en la piel asf como a fomentar la curacion de heridas y estimular la formacion de vasos. La Patente Alemana DE 19805827A describe el efecto protector del acido hialuronico en las irritaciones de la piel. La Patente de Estados Unidos N° 5.728.391 sugiere tambien el uso de acido hialuronico como un agente para tratar una enfermedad de la piel. Se han sugerido varias formulaciones para el suministro oral de AH. Para potenciar el efecto del AH en la piel, es deseable formular una composicion que se pueda aplicar por via topica a la piel. Una de las dificultades, sin embargo, en intentar aumentar la permeacion de AH en la piel es el tamano de la molecula. La gran estructura polimerica que proporciona al AH sus efectos beneficiosos tambien hace diffcil que se adquiera desde fuera del cuerpo. Asf, hubo una necesidad no satisfecha de formulaciones mejoradas de AH que se pudieran aplicar por via topica.

El procedimiento que conduce al envejecimiento de la piel y a las arrugas es complejo. Una causa principal de arrugamiento es una acumulacion de placa toxica de radicales libres que se une a fibras de colageno y elastina, causando que la estructura de soporte de la piel llegue a hacerse inflexible y enferma. Las lfneas de expresion, lfneas de sonrisa, patas de gallo o pliegues faciales aparecen en areas donde tiene lugar un movimiento muscular repetido. Asf, serfa deseable poder suministrar eliminadores de radicales libres a la piel.

La toxina botulfnica, el acido hialuronico y los antioxidantes son solo unos ejemplos de agentes activos que es deseable suministrar a la piel. Otros agentes activos pueden incluir inhibidores enzimaticos, vasodilatadores, perfluorocarbonos, hormonas, factores de crecimiento, vacunas, farmacos, moleculas pequenas, aminas, peroxidos, analgesicos y otros agentes terapeuticos. Los agentes que fomentan la curacion de heridas o reducen el dolor tambien son agentes activos que serfa deseable administrar a traves de la piel.

Asf, hubo una necesidad de metodos mas nuevos para la estabilizacion de agentes activos para la preparacion de una preparacion topica y cosmetica. Tambien hubo una necesidad de sistemas mejorados para suministrar agentes activos a la piel. La presente invencion se refiere a esas necesidades.

Sumario de la invencion

La presente invencion se refiere a la necesidad de suministro dermatologico mejorado de agentes activos para proporcionar un metodo para estabilizar agentes activos para almacenamiento a temperatura ambiente y para mejorar la permeacion de los ingredientes activos en la piel. La invencion tambien proporciona composiciones preparadas usando el metodo para el suministro topico de al menos un agente activo.

En un aspecto de la invencion, el metodo comprende encapsular un agente activo en un recubrimiento de tipo micela de fosfolfpidos. El agente activo se mezcla despues con una disolucion que contiene colageno y elastina.

En otro aspecto de la invencion, se proporciona una composicion para suministro topico de al menos un agente activo. La composicion comprende el agente activo en una micela de fosfolfpidos, colageno y un portador aceptable. La composicion tambien incluye elastina, preferiblemente elastina reticulada de bajo peso molecular.

En una realizacion preferida, el agente activo se selecciona del grupo que consiste en: un agente paralizante muscular, acido hialuronico, Vitamina A, Vitamina C, Vitamina E, Cinc, Selenio, licopeno, N-Acetil-Cistefna, extractos naturales de plantas de Piel de Uva, Arandano y Te Verde, vasodilatadores, hormonas, factores de crecimiento, inhibidores enzimaticos, agentes de vacuna, farmacos, protefnas terapeuticas, moleculas pequenas, agentes antitranspirantes, aminas, peroxidos, analgesicos y combinaciones de los mismos.

Los fosfolfpidos preferidos incluyen esfingosina y cerebrosido. En una realizacion preferida, la micela comprende

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tanto esfingosina como cerebrosido. En una realizacion particular, la esfingosina y el cerebrosido se combinan en cantidades iguales.

En otra realizacion preferida, la composicion de la presente invencion comprende ademas un potenciador de la absorcion. El potenciador puede ser seleccionado del grupo que consiste en: d-limoneno, alantofna, acido fulvico, mirra, hidroquinona glyquin, quillaja saponaria (QTS) y acanthophyllum squarrusom (ATS).

En una realizacion preferida mas, la composicion se formula en un formato seleccionado del grupo que consiste en: una crema, una locion, un aerosol, una pomada, un gel, una mascarilla en polvo, una pasta, un limpiador y una base.

La composicion puede incluir opcionalmente un aditivo seleccionado del grupo que consiste en: un perfume, colorante, agente espesante, aceite vegetal, emulsionante, disolvente, agente de ajuste del pH, agente antiseptico, conservante, vitamina, protector solar, tensioactivos y combinaciones de los mismos.

En una realizacion preferida, la presente invencion proporciona una composicion que comprende:

aproximadamente 1 a 40% p/p de colageno;

aproximadamente 1 a 40% p/p de elastina;

aproximadamente 0,1 a 15% de fosfolfpido esfingosina y

aproximadamente 0,1 a 15% de fosfolfpido cerebrosido.

En otro aspecto, la presente invencion proporciona un metodo para preparar una composicion de agente activo estabilizada. El metodo comprende las etapas de:

i. preparar una disolucion de fosfolfpido que comprende un fosfolfpido en un disolvente;

ii. mezclar la disolucion de fosfolfpido con un agente activo de manera que se proporcione una disolucion de agente activo encapsulado en micelas de fosfolfpido y

iii. combinar la disolucion de micelas con una disolucion de colageno y elastina solubilizados.

En una realizacion preferida del metodo, el fosfolfpido se selecciona del grupo que consiste en esfingosina, cerebrosido y combinaciones de los mismos. Mas preferiblemente, la esfingosina y el cerebrosido se usan en cantidades iguales.

En una realizacion preferida mas, el disolvente usado es un alcohol. Los alcoholes preferidos incluyen isopropanol, etanol y mezclas de los mismos.

En otra realizacion preferida, la disolucion de colageno y elastina solubilizados comprende cantidades iguales de colageno y elastina.

Los agentes activos que se pueden usar en el metodo de la invencion incluyen: toxina botulfnica, acido hialuronico, Vitamina A, Vitamina C, Vitamina E, Cinc, Selenio, licopeno, N-Acetil-Cistefna, extractos naturales de plantas de Piel de Uva, Arandano y Te Verde, vasodilatadores, hormonas, factores de crecimiento, agentes de vacuna, farmacos, protefnas terapeuticas, moleculas pequenas, agentes antitranspirantes, analgesicos y combinaciones de los mismos. Los agentes activos preferidos para uso en el metodo son acido hialuronico y/o toxina botulfnica.

El metodo de la presente invencion puede incluir la etapa adicional de anadir un compuesto potenciador de la permeacion. El compuesto potenciador se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en: d-limoneno, alantofna, acido fulvico, mirra, hidroquinona glyquin, quillaja saponaria y acanthophyllum squarrusom.

En un metodo preferido de la invencion, se usa aproximadamente 0,1 a 15% p/p de esfingosina y aproximadamente 0,1 a 15% p/p de cerebrosido para formar el recubrimiento micelar.

En un metodo preferido mas, se anaden ingredientes adicionales para formar una crema, locion, gel, pomada o aerosol.

En un aspecto mas de la invencion, se proporciona un metodo para tratar la piel. El metodo comprende aplicar la composicion descrita anteriormente a diario en areas de la piel que estan arrugadas o danadas.

La presente invencion se refiere a muchos de los problemas de la tecnica anterior. Por ejemplo, se puede suministrar toxina botulfnica y otros agentes activos sin inyecciones dolorosas. Las composiciones de la presente invencion se pueden usar con seguridad en areas tales como la garganta y el cuello, alrededor de la boca, cerca de los ojos y en las manos. Las composiciones se pueden formular como una crema o locion y se pueden almacenar a

temperatura ambiente durante periodos de tiempo prolongados sin ninguna perdida de actividad del principio activo. Una ventaja del metodo de la presente invencion es que elimina la necesidad del uso de productos derivados de la sangre como agentes estabilizantes. Ademas, los metodos y las composiciones de la presente invencion son de coste eficaz y simples de usar. En vez de tener que suministrar una sola dosis grande una vez en un unico sitio, los 5 metodos y las composiciones de la presente invencion permiten que se administre el agente activo a dosis bajas, a diario, para proporcionar un tratamiento eficaz con seguridad mejorada y efectos secundarios reducidos.

Algunas composiciones de la invencion son utiles para reducir las lfneas y arrugas finas, aumentar el nivel de humedad de la piel, aumentar la elasticidad y la resiliencia de la piel, aumentar la firmeza de la piel, mejorar el tono de la piel, la textura y la luminosidad total, disminuir las bolsas bajo los ojos, rejuvenecer la piel, evitar el dano de 10 tension qufmica, proteger la piel de los rayos UV y el dano de los radicales libres, fomentar la curacion de heridas y retirar la pigmentacion irregular. Las composiciones especfficas de la invencion pueden ser utiles para tratar el dolor.

Breve descripcion de los dibujos

Estas y otras caracterfsticas de la invencion llegaran a ser mas evidentes a partir de la siguiente descripcion en la que se hace referencia a los dibujos adjuntos en los que:

15 La Figura 1 ilustra un analisis de gel de poliacrilamida SDS de toxina botulfnica estabilizada;

Las Figuras 2A y 2B ilustran analisis por metodos Western representativos de la composicion de toxina botulfnica de la invencion;

Las Figuras 3A a 3D son fotograffas de pacientes tratados con la composicion de toxina botulfnica de la presente invencion;

20 La Figura 4 es una serie de fotograffas de pacientes tratados con la composicion de AH de la presente

invencion.

Descripcion detallada

La presente invencion proporciona metodos para preparar una composicion farmaceutica o cosmetica para suministro topico mejorado de al menos un agente activo y composiciones preparadas por los metodos.

25 El metodo de la invencion comprende encapsular un agente activo en una micela de fosfolfpidos. La disolucion de micelas se combina preferiblemente despues con una composicion de base que incluye colageno. En pocas palabras, el fosfolfpido se disuelve en un disolvente adecuado, tal como un alcohol. Por ejemplo, el fosfolfpido se puede disolver en etanol o una mezcla de etanol e isopropanol. El alcohol se retira por, por ejemplo, evaporacion rotatoria a vacfo. Se anade despues una disolucion acuosa que contiene el agente activo. El agente activo llega a 30 ser encapsulado asf por una estructura de micelas de fosfolfpidos. Esta disolucion se puede combinar despues con una disolucion de base que comprende colageno. Tambien se ha encontrado que es ventajoso incluir elastina, especialmente elastina de bajo peso molecular reticulada, en la composicion de base.

El colageno puede actuar como estabilizante. Ademas, el colageno ayuda a mejorar la base subyacente del tejido y contribuye a la hidratacion. El colageno puede penetrar en la piel sin la ayuda de ningun potenciador de la 35 penetracion.

En un metodo preferido de la invencion, tambien se incluye elastina. La elastina de bajo peso molecular puede penetrar en la piel sin la ayuda de ningun potenciador de la penetracion. El colageno y complejo de elastina soluble de bajo peso molecular junto con un agente activo potenciador cutaneo, tal como toxina botulfnica o acido hialuronico, ayudan a disminuir el aspecto de las arrugas.

40 Aunque se pueden usar varios tipos de fosfolfpidos para formar las micelas, una esfingosina es un fosfolfpido preferido. Se ha reconocido el esfingolfpido o esfingosina-1-fosfato como una molecula bioactiva implicada en la regulacion de crecimiento celular, diferenciacion, supervivencia y quimiotaxis asf como angiogenesis y embriogenesis. Tambien son utiles en la presente invencion otras especies de ceramidas o esfingolfpidos tales como (N-acil-esfingosina) y dihidroceramida (N-acilesfinganina). La galactosilceramida (cerebrosido), un metabolito de los 45 esfingolfpidos es tambien un fosfolfpido preferido. El cerebrosido es una protefna relacionada con mielina que desempena una funcion importante en la regulacion del crecimiento celular, diferenciacion, supervivencia y quimiotaxis. Los sulfatos de cerebrosido son constituyentes de membrana importantes. Se ha encontrado que tanto esfingosina como cerebrosido son excelentes fosfolfpidos para uso en el metodo de la presente invencion. Aunque cualquiera de estos fosfolfpidos se puede usar solo, son particularmente eficaces las combinaciones de esfingosina 50 y cerebrosido. Cuando se usan en cantidades iguales, la esfingosina y el cerebrosido forman una estructura micelar que proporciona un vehfculo muy eficaz para suministro de agentes activos. Otros fosfolfpidos, tales como fosfatidilcolina o fosfatidilserina tambien son muy eficaces, solos o en asociacion. Tambien son utiles en la invencion otros fosfolfpidos que pueden formar una estructura micelar.

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Segun un metodo preferido de la invencion, se prepara una composicion estabilizada combinando cantidades iguales de colageno y elastina de bajo peso molecular en un disolvente, tal como disolucion salina. En un matraz separado, se disuelven cantidades iguales de esfingosina y cerebrosido en un alcohol, preferiblemente etanol. Se retira el alcohol despues por evaporacion rotatoria a vacfo. Esto da como resultado un recubrimiento de esfingosina y cerebrosido sobre el matraz. Se anade al matraz una disolucion que contiene el agente activo. Esto da como resultado la formacion de micelas de esfingosina, cerebrosido y agente activo. Esta composicion micelar se anade a la mezcla de colageno y elastina y se agita. Esta composicion se puede almacenar despues a temperatura ambiente.

En otra realizacion preferida, la composicion comprende aproximadamente 1 a 40% p/p de colageno, 1 a 40% p/p de elastina, 0,1 a 15% p/p de esfingosina y 0,1 a 15% p/p de cerebrosido y el agente activo.

Tambien se pueden incluir componentes adicionales que aumenten la estabilidad o faciliten la absorcion/penetracion. Se pueden incluir mas componentes adicionales para formular la composicion en un formato, tal como una crema, locion, aerosol, mascarilla, gel, etc., que sea adecuado para administracion topica. Se incluyen opcionalmente ingredientes que mejoran la conveniencia de la composicion tales como tintes, fragancias, emolientes, etc. La composicion tambien puede estar incluida en formulaciones de maquillaje tales como maquillajes de base o protector labial.

Se pueden incluir estabilizantes que ayuden a conservar o mantener la estructura biologica (es decir, la conformacion tridimensional) y/o la actividad biologica de un agente activo. Los estabilizantes pueden ser protefnas o polisacaridos. Los ejemplos de estabilizantes protefnicos incluyen hidroxietilalmidon (hetastarch), gelatina, colageno o colageno. El estabilizante primario puede ser un agente sintetico que no induzca una respuesta inmunitaria o induzca una respuesta inmunitaria atenuada en un individuo. Tambien se pueden incluir estabilizantes adicionales en una composicion. Estos estabilizantes adicionales o secundarios se pueden usar solos o en asociacion con estabilizantes primarios. Los estabilizantes secundarios ejemplares incluyen, pero no se limitan a, derivados de aminoacidos no oxidantes (tales como un derivado de triptofano, tal como N-acetil- triptofano ("NAT")), caprilato (es decir, caprilato de sodio), un polisorbato (es decir, P80), aminoacidos y cationes de metales divalentes tales como cinc. Una composicion tambien puede incluir agentes conservantes tales como: alcohol bencflico, acido benzoico, fenol, parabenos y acido sorbico o un cresol, tal como un M-cresol.

Tambien se pueden incluir agentes potenciadores que fomenten la absorcion de un agente activo por la piel en las composiciones de la invencion. Ejemplos de agentes potenciadores incluyen, pero no se limitan a, alcoholes, tales como alcoholes de cadena corta, alcoholes de cadena larga o polialcoholes, aminas y amidas, tales como urea, aminoacidos o sus esteres, amidas, AZONE(R)), derivados de AZONE(R), pirrolidonas o derivados de pirrolidonas; terpenos y derivados de terpenos; acidos grasos y sus esteres; compuestos macrocfclicos; agentes tensioactivos o sulfoxidos tales como, decilmetilsulfoxido. Liposomas, transfersomas, vesfculas de lecitina, etosomas, tensioactivos acuosos, tales como tensioactivos anionicos, cationicos y no ionicos, polioles y aceites esenciales tambien pueden funcionar como agentes potenciadores.

En una realizacion de la invencion, se incluye d-limoneno en la composicion para potenciar la penetracion de un agente activo a traves de la capa dermica. Se encontro que el limoneno era un eficaz potenciador a 0,30%, potenciando la permeacion de la piel de toxina botulfnica Tipo A aproximadamente cuatro veces.

En otra realizacion preferida de la invencion, se incluye alantofna en la preparacion. La alantofna actua como un protector de la piel y un potenciador de la permeacion neutra leve.

En otra realizacion preferida, se incluye en acido fulvico en la preparacion. El acido fulvico es un antioxidante de bajo peso molecular que potencia la absorcion corporal de farmacos a traves de la ruta transdermica sin ningun efecto secundario.

La mirra es un ingrediente opcional mas en la preparacion de crema para la piel de la invencion. La mirra es una resina gomosa extrafda de arbustos de Arabia y Somalia que ayudan a aliviar los tejidos inflamados y rejuvenecer la piel, el cabello y las unas.

Tambien se pueden incluir eldopaque o hidroquinona glyquin. Se usa para aclarar las manchas coloreadas oscuras de la piel causadas por pfldoras contraceptivas, medicinas de hormonas, lesion de la piel o simplemente envejecimiento. Se puede incluir junto con protector solar para ayudar a evitar que estos puntos vuelvan a aparecer debido a la luz solar o a exposicion a luz UV.

Las saponinas totales Quillaja saponaria (QTS) y Acanthophyllum squarrusom (ATS) son dos potenciadores naturales que pueden tambien estar incluidos en una composicion de la invencion. Demuestran moderada actividad como potenciadores de la penetracion de la piel.

Los agentes potenciadores se pueden incluir en diversas fases del procedimiento. Por ejemplo, se pueden anadir a

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la composicion estabilizada al mismo tiempo que se anade la composicion micelar a la mezcla de colageno y elastina. Preferiblemente, los compuestos potenciadores se introducen durante la formulacion de la composicion estabilizada en una formulacion farmaceutica o cosmetica. La preparacion de una formulacion ejemplar para aplicacion topica se describe en el Ejemplo 3 a continuacion.

Las composiciones topicas preparadas de acuerdo con los metodos de la invencion proporcionan sistemas eficaces para suministro dermatologico de agentes activos. En un aspecto, la presente invencion proporciona una composicion para suministro preferido de toxina botulfnica. Se puede formular toxina botulfnica Tipo A, Tipo B, Tipo C, Tipo D, Tipo E, Tipo F y/o Tipo G segun el metodo de la invencion en una composicion para suministro topico. El metodo de la presente invencion basado en el uso de colageno en asociacion con protefna de union de elastina (EBP, por sus siglas en ingles) y mezcla de esfingosina y cerebrosido, mantiene la integridad del complejo sin desnaturalizacion o fragmentacion o desintoxicacion. Asf, la toxina botulfnica se puede estabilizar usando los metodos de la presente invencion y la toxina estabilizada puede ser suministrada con exito por via transdermica para conseguir resultados similares a los obtenidos por inyeccion intramuscular de toxina botulfnica. La formulacion se puede aplicar por toda la cara y el cuello y las manos en vez de en una inyeccion de toxina botulfnica que es fijada como objetivo principalmente en areas alrededor de los ojos y la frente para reducir las arrugas. Una ventaja mas es que las protefnas como el colageno, la elastina y las esfingomielinas son no inmunogenicas.

Un metodo preferido para preparar una composicion de toxina botulfnica estabilizada para aplicacion topica se describe en el Ejemplo 1 a continuacion. El metodo de la presente invencion se uso para estabilizar toxina botulfnica A en un formato de crema adecuado para aplicacion a la piel. En pocas palabras, se solubilizan cantidades iguales de colageno y elastina en disolucion salina. En un matraz separado, se disuelven cantidades iguales de esfingosina y cerebrosido en alcohol. Se retira despues el alcohol. Se disuelve toxina botulfnica A en disolucion salina y se anade despues al matraz y se agita el matraz para recubrir la protefna de toxina botulfnica con un recubrimiento de micelas de fosfolfpidos. Esta disolucion se anade despues a la disolucion de colageno y elastina. Las Figuras 1 y 2 ilustran SDS-PAGE y metodos de Western de composiciones de toxina botulfnica estabilizada. Es claramente evidente que este metodo se puede usar para preparar composiciones con otros tipos de toxina botulfnica.

La presente invencion proporciona una composicion que es capaz de suministrar una toxina botulfnica a traves de la piel de una persona. La composicion contiene un agente potenciador que facilita la permeacion de la toxina botulfnica a traves de la piel del paciente. La composicion es adecuada para administracion topica en un formato segun el cual la composicion penetra en la piel y se denerva por via transdermica un musculo subyacente. Tambien se puede proporcionar la composicion en un parche que se asegure de manera adhesiva a la piel a fin de que la toxina pueda pasar del parche a traves de la piel para denervar un musculo subyacente. Las composiciones que contienen toxina botulfnica y un agente potenciador se pueden usar para tratar con exito diversos tipos de trastornos asociados a liberacion de neurotransmisores cuando se aplica a la piel de una persona. Ejemplos de trastornos susceptibles de tratamiento por la administracion topica de las composiciones explicadas en la presente memoria incluyen, y no se limitan a, arrugas, tales como arrugas del entrecejo, dolores de cabeza, tales como jaqueca, cefalea, distoma cervical, distoma focal de la mano, inflamacion neurogenica, hiperhidrosis, blefaroespasmo, estrabismo, espasmo hemifacial, trastorno de los parpados, paralisis cerebral, espasticidad focal, espasticidad de las extremidades, tics, temblores, bruxismo, fisura anal, fibromialgia, disfagia, lagrimeo y dolor de espasmos musculares. Las composiciones descritas en la presente memoria proporcionan alivio localizado por suministro de toxina botulfnica.

Las composiciones y formulaciones de la invencion son utiles para reducir los signos del envejecimiento. Se realizaron ensayos clfnicos usando una formulacion de crema topica conteniendo toxina botulfnica. Los detalles de la prueba se pueden encontrar en el Ejemplo 4 a continuacion. Como se puede observar claramente de las fotograffas antes y despues en la Figura 3, la administracion topica de crema de toxina botulfnica estabilizada reduce significativamente los signos del envejecimiento. Los efectos de una composicion que comprende acido hialuronico sobre los signos del envejecimiento tambien fueron evaluados. Como se muestra en la Figura 4, la composicion de acido hialuronico fue muy eficaz.

En otro aspecto de la invencion, se proporciona una formulacion farmaceutica o cosmetica que contiene una cantidad eficaz de un agente activo y una cantidad eficaz de la composicion potenciadora de estabilizacion y un portador farmaceuticamente aceptable adecuado para administracion topica o transdermica. La formulacion puede estar en cualquier forma adecuada para aplicacion a la piel. Por ejemplo, puede tomar la forma de una crema, una locion, un gel, una pomada, una pasta o una disolucion. La formulacion puede incluir lipozone, micelas o microesferas. La formulacion puede ser una composicion cosmetica que incluya ademas de los estabilizantes y los principios activos agua y otros aditivos que se usan normalmente en los productos cosmeticos. Por ejemplo, puede incluir agentes espesantes, conservantes, emulsionantes, perfumes, tintes o colorantes, aceite vegetal o mineral, agentes antisepticos, agentes acidificantes o alcalinizantes, vitaminas, agentes anti-UV, tensioactivo, disolventes, agentes estabilizadores del pH y otros principios activos conocidos como eficaces en la piel. La composicion cosmetica tambien se puede proporcionar como maquillaje de base para la piel, protector labial, etc.

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Los metodos de la presente invencion tambien se pueden usar para preparar composiciones para el suministro topico de acido hialuronico. Los detalles de un metodo preferido de preparacion de una composicion que comprende acido hialuronico se pueden encontrar en el Ejemplo 6 a continuacion. En pocas palabras, se solubilizan cantidades iguales de colageno y elastina en disolucion salina. En un matraz separado, se disuelven cantidades iguales de esfingosina o fosfatidilcolina y cerebrosido o fosfatidilserina en alcohol. Despues se retira el alcohol. Se anade despues disolucion de acido hialuronico o hialuronato sodico al matraz y se agita el matraz para recubrir el agente activo. Se anade despues esta disolucion a la disolucion de colageno y elastina. Las fotograffas que ilustran los efectos del tratamiento con esta composicion se muestran en la Figura 4. En esta composicion, se incluyen colageno y elastina como componentes opcionales para potenciar la curacion de la piel.

Otros agentes activos potenciadores cutaneos que pueden suministrarse via los metodos y las composiciones de la presente invencion incluyen varios tipos de antioxidantes. Algunos ejemplos de eliminadores de radicales libres que se pueden incluir en las composiciones de la invencion incluyen, pero no se limitan a, Vitaminas A, C y E, los minerales Cinc y Selenio, licopeno, el aminoacido N-Acetil-Cistefna y extractos naturales de plantas de Piel de la Uva, Arandano y Te verde.

En otro aspecto de la invencion, el sistema de suministro de la presente invencion se puede usar para suministrar agentes que and fomenten la curacion. Por ejemplo, vasodilatadores, tales como nitroglicerina y mononitrato de glicerina pueden estar encapsulados en una micela de fosfolfpido y combinarse despues con colageno y/o elastina en una formulacion de locion o de crema y aplicarse a la piel. Sin estar limitado por la explicacion, se piensa que la formulacion de vasodilatadores en una composicion topica segun la invencion potencia la velocidad de penetracion cuando se compara con la administracion via, por ejemplo, un parche cutaneo. La inclusion de peroxido de hidrogeno y/o un perfluorocarbono puede potenciar mas la oxigenacion y la curacion.

Se ha demostrado que los metodos de la invencion son utiles para la formulacion de agentes muy diferentes, por ejemplo, toxina botulfnica y AH. Es razonable concluir que los metodos y las composiciones de la presente invencion tambien se pueden usar para suministrar con eficacia otros agentes activos a la piel. Ejemplos de otros agentes activos incluyen otros agentes de paralizacion muscular, hormonas, factores de crecimiento, agentes de vacuna, farmacos, protefnas terapeuticas, pequenas moleculas y agentes antitranspirantes. Los metodos de la presente invencion tambien se pueden usar para formular composiciones para el tratamiento del dolor, que comprenden como el agente activo, analgesicos.

Ejemplos de mas agentes activos que se pueden suministrar en composiciones de la invencion incluyen, pero no se limitan a, androgenos, androstenediol y androisoxazol (para trastornos anabolicos), testosterona (hipogonadismo, perdida muscular, impotencia masculina, sfntomas postmenopausia en la mujer), deshidrotestosterona (hipogonadismo, perdida muscular), deshidroepiandrostenona (perdida muscular, reduccion de grasa, aptitud ffsica); estrogenos (sfntomas postmenopausia, control de la natalidad), 17 betaestradiol, estradiol-3, 17-diacetato, estradiol- 3 -acetato, estradiol-17-acetato, estradiol-3, 17-valerato, estradiol-3 -valerato, estradiol-17-valerato, etinilestradiol, estrona; progesteronas (prevenir la endometriosis, prevenir el cancer de endometrio, control de aborto habitual, supresion o sincronizacion del estro, fomento del crecimiento del pelo), progesterona (preg-4-eno-3,20-diona), noretindrona, norgestrieona, norgestadienona, norgestrel, norgestimato, acido progestogenico, dihidroprogesterol, nomagesterol. La hormona testosterona se puede usar en cualquiera de sus formas habituales, tales como, acetato, propionato, 17-beta-ciclopentanopropionato, enantanato, isobutirato, undeconato y similares. Similarmente, los estradioles se pueden usar adicionalmente en cualquiera de las formas conocidas o recien desarrolladas, tales como, por ejemplo, pivalato, propionato, cipionato, benzoato y otros esteres. Otros farmacos tales como insulina, factores de crecimiento tipo insulina, vacunas, peptidos como GLP, IGF, heparina, hirugen, hirulos, huridina, vacuna de paperas, sarampion y rubeola, vacuna contra la tifoidea, vacuna contra la hepatitis A, vacuna contra la hepatitis B, virus del herpes simple, toxoides bacterianos, subunidad de toxina del colera B, virus de la vacuna de la influenza, bordetala pertussis, virus vaccinia, adenovirus, canary pox, virus vaccinia de polio, plasmodium falciparum, bacilo de calmette geurin (BCG), klebsiella pneumoniae, glicoprotefnas de la envoltura de VIH, somatropina bovina, estrogenos, androgenos, factores de crecimiento de insulina, interleucina-I, interleucina-II y citocinas, farmacos de moleculas pequenas tales como NSAJD, narcoticos, etc., pueden ser suministrados usando las composiciones de la presente invencion.

Las composiciones de la presente invencion pueden contener un agente activo unico o multiples agentes activos en la misma composicion. Por ejemplo, una composicion para suministro topico puede comprender toxina botulfnica o acido hialuronico o ambos encapsulados en micelas. Se consideran diversas combinaciones de agentes activos para su inclusion en las composiciones de la invencion.

La presente invencion se ha descrito con respecto a una o mas realizaciones. Sin embargo, sera evidente para los expertos en la materia que se puede realizar una serie de variaciones y modificaciones sin apartarse del alcance de la invencion como se define en las reivindicaciones.

La descripcion anterior describe en general la presente invencion. Un entendimiento mas completo se puede obtener por referencia a los siguientes Ejemplos especfficos. Estos Ejemplos se describen solamente para fines de

8

5

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15

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ilustracion y no se desea que limiten el alcance de la invencion. Se consideran cambios en la forma y sustitucion de los equivalentes ya que se pueden sugerir circunstancias o hacer expediente. Aunque se han empleado terminos especfficos en la presente memoria, tales terminos estan previstos en un sentido descriptivo y no para fines de limitacion.

Ejemplos

Los ejemplos se describen para los fines de ilustracion y no estan destinados a limitar el alcance de la invencion. Ejemplo 1. Preparaciones de composiciones de toxina botulfnica.

Se reconstituyeron viales de toxina botulfnica (BOTOX™) de disolucion salina esteril (0,9%). Se agitaron los viales vigorosamente para disolver la toxina botulfnica. Los viales reconstituidos se mantuvieron refrigerados y se utilizaron en 1 hora de reconstitucion.

En un matraz de fondo redondo de 50 ml de capacidad, se combinaron 10 mg de colageno soluble y 10 mg de elastina. Se solubilizo la mezcla en 10 ml de disolucion salina esteril (0,9%) con agitacion continua. En un matraz de fondo redondo de 50 ml separado, se combinaron 5 mg de esfingosina y 5 mg de cerebrosido. Se disolvio esta mezcla en etanol puro. Se retiro completamente el alcohol por evaporacion rotatoria a vacfo para obtener un recubrimiento uniforme de la esfingosina y cerebrosido en la pared del matraz. A este matraz se anadieron 800 unidades de disolucion de toxina botulfnica en 6 ml de disolucion salina (0,9%). El matraz se agito y se continuo con agitacion de manera continua despues durante 5 minutos a temperatura ambiente para recubrir de manera uniforme la toxina botulfnica con el recubrimiento de micelas de esfingosina y cerebrosido. Esta disolucion de toxina botulfnica micelar recubierta y conservaba se anadio despues al matraz que contenfa la mezcla de colageno y elastina de bajo peso molecular, reticulada. Se agito la disolucion durante aproximadamente 5 minutos y despues se mantuvo a temperatura ambiente en un vial de vidrio pardo.

Ejemplo 2. Analisis SDS-PAGE y metodos Western.

Se analizo la estabilidad de la disolucion de toxina botulfnica conservada por tecnicas analfticas habituales usando analisis SDS-PAGE y metodos Western y analisis HPLC en el momento cero (unos minutos despues de la preparacion de la disolucion estabilizada recubierta) y despues cada mes. Se comparo la preparacion con disolucion de toxina botulfnica no recubierta.

Se realizo SDS-PAGE en todos los casos en condiciones reductoras con un aparato BioRad Mini-cell (BioRad, Calif.) con geles de tricina prefundidos al 10%. Se cargo toxina botulfnica recien diluida (muestra pura diluida con disolucion salina) en una via y se cargo la toxina botulfnica estabilizada en una segunda via. Se cargaron las dos vfas con aproximadamente 100 unidades de la toxina. Se obtuvieron el tampon de carga, tampon de tanque y los marcadores de peso molecular en BioRad Laboratories. Se visualizaron las bandas de protefna por la tecnica de tincion de azul de Coomassie. La concentracion de protefna (densidad) de geles de poliacrilamida SDS se midio como un sistema de densitometrfa BioRad y se analizo con el analizador de software de formacion de imagen clasico. La comparacion de las bandas de toxina botulfnica A, es decir, la toxina botulfnica neta, sin estabilizacion y la toxina botulfnica estabilizada no revelo ninguna degradacion en la toxina botulfnica estabilizada que se mantuvo a temperatura ambiente durante 6 meses. Los resultados se muestran en la Figura 1.

Analisis por metodos Western

Para analisis por metodos Western, se transfirieron protefnas separadas en geles de poliacrilamida SDS a membranas de nitrocelulosa a 25 V durante 60 mm usando un modulo de manchas de protefnas de BioRad. Despues de que termino la transferencia de la protefna del gel, los sitios de union de la protefna sobre las membranas se bloquearon por incubacion a temperatura ambiente en disolucion salina tampona con leche desnatada al 5% - Tris (TBS, por sus siglas en ingles) durante 60 mm. Se incubaron despues las membranas a temperatura ambiente con MAb purificado por afinidad producido contra la toxina botulfnica a 5 pg/ml en leche desnatada - TBS al 5% durante 4 h. Despues de varios lavados con tampon TBS, se incubaron las membranas a temperatura ambiente con IgG anti-raton de cabra purificado por afinidad (Sigma) a 4 pg/ml en leche desnatada al 5% - tampon de TBS durante 3 h. Despues de otros cuatro o cinco lavados con el tampon TBS, se incubaron las membranas con sustrato de membrana TMB [3,3',5,5'-tetrametilbenzidina] (BioRad Laboratories) hasta que se desarrollo color. Este analisis revelo que despues de 6 meses la toxina botulfnica a temperatura ambiente era estable y no se degrado o desnaturalizo. Los resultados de dos metodos Western ejemplares se muestran en las Figuras 2a y 2B.

Ejemplo 3. Formulacion de crema de toxina botulfnica.

Se formulo la composicion de toxina botulfnica estabilizada en una crema para administracion topica como se indica en lfneas generales a continuacion.

Volumen total de la crema (400 ml) Fase A:

Agua desionizada

74,7%

AEDT tetrasodico

0,5-0,7%

Metilparabeno

0,2%

Propilenglicol

3,0%-4,0%

Glicerina

3,0%-4,0%

Fase B:

Alcohol cetflico (Ado 1 52 NE)

2,0%

Alcohol cetearflico

2,0%

Estearato de glicerilo

2,0%

Estearato de PEG-100

1-2%

Acido estearico (Emersol 132)

4,5%

Palmitato de sorbitan

0,5-0,7%

Polisorbato-85

1,0%

Polisorbato 60

0,5-1%

Alcohol Lanolina (Ritachol)

1,0%

Aceite de HoHoba

0,5-1%

Lanolina

1-2%

Acetato de tocoferilo

0,5-1%

Dimeticona 200

0,7-1,0%

BHA

0,1%

Propilparabeno

0,1%

Diazolidinil UREA

0,2%

Fase C:

Fragancia (lila, jazmfn)

como sea necesario

Aloe Vera (polvo)

1,5%-2,0%

CoQ-10

0,5%

Retinil A

0,03-0,05%

Acido hialuronico (puro)

1,0-1,5%

Polvo de talco (TiO2)

1,0-1,5%

Fase D:

d-limoneno

0,7%

Alantofna

0,5%

Acido fulvico

0,5%

Quillaja saponaria (QTS)

0,3%

Acanthophyllum squaimsom (ATS)

0,3%

Extracto de Mirra

0,2%

Hidroquinona Glyquin

4,0%

5 Fase E:

Toxina botulfnica estabilizada en matriz de colageno

800 unidades

Procedimiento:

Calentar Fase A y Fase B por separado con agitacion a 75°C. Anadir Fase A a Fase B y mezclar 30 minutos a 75°C. Dejar enfriar a 20-22°C y anadir despues Fase C, D y E y continuar agitando hasta que fue homogeneo y una fase.

10 Ejemplo 4. Estudios clfnicos en individuos humanos.

La eficacia de la toxina botulfnica estabilizada (Botox) se ensayo usando una formulacion de crema. Se aplico la crema a individuos humanos con arrugas durante un periodo de mes o mas. Se fotografiaron los individuos antes y despues de un mes de la aplicacion de la crema en su cara.

No estuvo presente toxina botulfnica Tipo A en la sangre periferica a niveles medibles despues de la aplicacion 15 dermica de la crema a las dosis bajas de 1,7 unidades por ml de la crema. Cada vial de crema contenfa 50 unidades de toxina botulfnica en 30 ml de crema. Las cantidades recomendadas de neurotoxina administradas en cada tratamiento (por la manana y a la hora de acostarse) no dieron como resultado efectos clfnicos adversos, sistemicos, es decir, debilidad muscular, en pacientes sin otra disfuncion neuromuscular.

Ejemplo 5. Estudios clfnicos: Valoracion de las lfneas glabelares.

20 Se llevo a cabo un estudio de grupo paralelo, controlado con placebo (la crema de placebo contenfa todos los ingredientes excepto la toxina botulfnica), de doble ciego, de un solo centro, aleatorizado, para evaluar la eficacia de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

la crema de toxina botulfnica estabilizada de la invencion para uso en la mejora temporal del aspecto de lineas faciales Glabelares de moderadas a intensas. El estudio inscribio 40 pacientes adultos sanos (edades 40 a 75 anos, mujeres u hombres) con lineas Glabelares de al menos intensidad moderada a ceno maximo. Se excluyeron los pacientes si tenian una infeccion o problemas de piel, historia de paralisis del nervio facial, marcada asimetria facial, ptosis, dermatocalasis excesiva, cicatrizacion cutanea profunda, piel grasa gruesa, incapacidad para atenuar sustancialmente las lineas glabelares incluso por difusion ffsicamente aparte o tenian una historia conocida de trastorno neuromuscular u otro trastorno que pudiera interferir con la funcion neuromuscular. Se pidio a los individuos que se aplicaran la crema dos veces al dfa, una vez por la manana y a la hora de acostarse, durante un mes. Se instruyo a los individuos un primer lavado de su cara con agua templada y jabon cuidadosamente para retirar cualquier sudor, suciedad y aceites de sus rostros. Se les instruyo que se aplicaran la crema de toxina botulfnica estabilizada o crema de placebo alrededor de los ojos, frente y cuello o en las areas cutaneas con arrugas con el aplicador suministrado de manera que se evitara cualquier contaminacion del producto por la mano. Se examinaron todos los individuos previamente al comienzo del estudio por un dermatologo cualificado y se declararon sanos y aptos para entrar en el estudio. Fueron fotografiados previamente al comienzo del estudio. Se pidio a todos los individuos que siguieran su rutina diaria normal sin ninguna restriccion y se les pidio vivir su estilo de vida normal.

Las mediciones de eficacia primarias fueron la calificacion del investigador de la intensidad de las lineas glabelares a ceno maximo el Dfa 30 postratamiento y la valoracion global del individuo de cambio en aspecto de las lineas glabelares el Dfa 30 postratamiento. Para la calificacion del investigador, se proporciono una fotogufa para cada centro de estudio para ayudar a la calificacion de la intensidad de las lineas glabelares usando una escala de calificacion de 4 puntos (0 = ninguna 1 = leve 2 = moderada 3 = intensa). Se definio que un interviniente tenia un grado de intensidad de 0 o 1. Para la valoracion global de cambio de aspecto de las lineas glabelares, el individuo respondio a la pregunta “Como calificarfa el cambio en el aspecto de sus lineas glabelares comparado con inmediatamente antes de su tratamiento con la crema de toxina botulfnica no invasiva?" Las calificaciones de las respuestas por los individuos fueron desde +4 (mejora completa, aproximadamente 100%) a -4 (empeoramiento muy acusado, aproximadamente 100% peor o mayor). Se definio que un interviniente tenia un grado de al menos +2 (mejora moderada, aproximadamente 50%).

Un criterio de valoracion de eficacia secundaria fue la calificacion del investigador de la intensidad de las lineas glabelares en reposo el Dfa 30 postratamiento en aquellos individuos que demostraron en la lfnea de referencia una puntuacion de intensidad de las lineas glabelares en reposo de moderada o intensa. Para la calificacion de los investigadores, el criterio para eficacia fue una diferencia de puntos en porcentaje de 30 entre la crema de toxina botulfnica estabilizada y los grupos de tratamiento con placebo en la incidencia de los individuos con una calificacion del investigador de la intensidad de las lineas glabelares de ninguna o leve a ceno maximo. Para la calificacion de los individuos, el criterio de eficacia fue una diferencia de puntos en porcentaje de 25 entre los grupos de tratamiento con la crema de toxina botulfnica estabilizada y placebo en la incidencia de los individuos con una puntuacion de al menos +2 (mejora moderada) en la valoracion global del individuo de cambio en el aspecto de las lineas glabelares.

Los resultados combinados se muestran en la Tabla 1 a continuacion. Hubo 40 individuos (20 individuos en el grupo tratado con crema de toxina botulfnica y 20 individuos en el grupo tratado con crema de placebo) que presentaron puntuaciones de intensidad de las lineas glabelares en reposo de moderada o intensa.

La edad media fue 54 anos, con un intervalo de 40 a 74 anos. De esto, la mayorfa tenia < 50 anos y 6,0% tenia > 65 anos. La mayorfa de los individuos eran hembras, 80% (32/40) y Caucasicos, 83,8%.

En estos estudios, se redujo la intensidad de las lineas glabelares en menos de 7 dfas en el grupo de crema de toxina botulfnica comparado con el grupo de crema de placebo cuando se midio tanto por calificacion del investigador de la intensidad de las lineas glabelares a ceno maximo como en reposo y por valoracion global del individuo de cambio de aspecto de las lineas glabelares. El Dfa 10, 80% (16/20) de los individuos habfa conseguido una puntuacion de intensidad de leve a ceno maximo por la valoracion del investigador. Esto aumento a 92% por el dfa del criterio de valoracion de eficacia primaria del Dfa 30, comparado con los pacientes tratados con placebo (Tabla 1). El Dfa 10, el 84% de los individuos en el grupo activo valoro mejora moderada o mejor en su propio aspecto (+2 o mejor). Esto aumento a 93% por el dfa de criterio de valoracion de eficacia principal del Dfa 30, comparado con el 3% de los pacientes tratados con placebo. Basandose en el aspecto en reposo cuando se juzgo por el investigador, el 62% de los individuos consiguio una puntuacion de intensidad de ninguna o leve el Dfa 11 y el 94% por el dfa de criterio de valoracion de eficacia del Dfa 30.

Tabla-I

Dfa

Crema de Botox Placebo Diferencia Valor p

7

76% (15/20) 3% (1/20) 73% <0,0001

10

80% (16/20) 3% (1/20) 77% <0,0001

20

88% (18/20) 5% (1/20) 83% <0,0001

30

94% (19/20) 5% (1/20) 89% <0,0001

Se pueden observar resultados ejemplares en las fotograffas de antes y despues de las Figuras 3A a 3D.

Ejemplo 6. Sistema de suministro de acido hialuronico.

5 En un matraz de fondo redondo de 50 ml de capacidad, se pesaron 10 mg de colageno soluble, 10 mg de elastina. Se solubilizo la mezcla en 10 ml de disolucion salina esteril (0,9%). Se agito continuamente la mezcla. En un matraz de fondo redondo de 50 ml separado, se combinaron 25 mg de esfingosina y 25 mg de cerebrosido (o 20 mg de fosfatidilcolina + 25 mg de fosfatidilserina) y se disolvio la mezcla en etanol puro o en una mezcla de isoproanol:etanol 70:30. Se elimino completamente el alcohol por evaporacion rotatoria a vacfo para obtener un 10 recubrimiento uniforme de la mezcla de fosfolfpidos en la pared del matraz. Se anadieron 500 mg de acido hialuronico o disolucion de hialuronato sodico en 50 ml de disolucion salina (0,9%). Se agito el matraz y despues se agito de manera continua durante varios minutos a temperatura ambiente. Se recubrio asf uniformemente el acido hialuronico con el recubrimiento de micelas de fosfolfpidos. Esta disolucion de acido hialuronico micelar recubierta y conservaba se anadio despues al matraz que contenfa la mezcla de colageno y elastina de peso molecular bajo 15 reticulada. Se agito la disolucion durante aproximadamente 5 minutos lentamente y despues se mantuvo a temperatura ambiente en un vial de vidrio pardo.

Ejemplo 7. Preparacion de una crema que contiene AH encapsulado.

Se usaron los siguientes componentes para preparar una crema para aplicacion topica:

Fase A:

Agua desionizada

74,7%

AEDT tetrasodico

0,3-0,5%

Metilparabeno

0,2%

Propilenglicol

2,0-3,0%

Alfa Hidroxiacido (acido de fruta)

1,0-2,0%

(Total 78,2%)

20

Fase B:

Alcohol cetflico (Ado1 52 NF)

1,0-2,0%

Alcohol cetearflico

1,0-2,0%

Estearato de glicerilo

1,0-2,0%

Estearato de PEG-100

1-2%

Acido estearico (Emersol 132)

4,5%

Palmitato de sorbitan

0,5-0,7%

Polisorbato-85

0,5-1,0%

Aceite de HoHoba

2-5 %

Lanolina

1-2%

Acetato de Tocoferilo

0,3-0,5%

Dimeticona 200

0,5-0,7%

BHA

0,1%

Propilparabeno

0,1%

Diazolidinil UREA

0,2%

(Total 13,7%)

Fase C:

Fragancia (lila, jazmfn)

como sea necesario

Aloe Vera (polvo)

0,5-1,0%

Retinil A (puro)

0,03-0,05%

Acido hialuronico (micela)

1,0-1,5%

Colageno+Elastina

1,0-1,5%

Polvo de Talco (TiO2)

0,1-0,3%

(Total 2,63%)

Fase D (potenciadores de la absorcion):

d-limoneno

0,7%

Alantofna

0,5%

Acido fulvico

0,5%

Quillaja saponaria (QTS)

0,3%

Extracto de Mirra

0,2%

Glyquin (agente de blanqueamiento)

3,5-4,0%

(Total 5,5%)

Ejemplo 8. Estudios clfnicos con la crema de AH.

Este estudio se realizo bajo la supervision de un dermatologo/cirujano plastico. Los individuos fueron pre- examinados y fueron declarados sanos. Se les proporciono un vial de la crema de acido hialuronico y se les instruyo 5 para aplicarla una vez por la noche durante 30 dfas. Se instruyo a los individuos a eliminar su maquillaje y se les pidio que se lavaran el rostro con agua caliente y jabon o limpiador. Se pidio a los individuos que se aplicaran la crema con el aplicador proporcionado en el area arrugada de su rostro y cuello. Se fotografiaron todos los individuos antes y despues para evaluar el efecto al final del periodo de 30 dfas. Se pueden observar resultados ejemplares en las fotograffas mostradas en la Figura 4.

10

Claims (26)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   1. Una composicion para suministro topico de al menos un agente activo, comprendiendo dicha composicion el agente activo en una micela de fosfolfpido, colageno, elastina y un portador aceptable, en la que la elastina es elastina de bajo peso molecular reticulada.
2. 2. Una composicion segun la reivindicacion 1, en la que el agente activo se selecciona del grupo que consiste en: un

   agente paralizante, acido hialuronico, anti-oxidantes, hormonas, factores de crecimiento, agentes de vacuna, farmacos, vasodilatadores, protemas terapeuticas, moleculas pequenas, aminas, peroxidos, agentes

   antitranspirantes, analgesicos y combinaciones de los mismos.
3. 3. Una composicion segun la reivindicacion 1, en la que la micela comprende esfingosina.
4. 4. Una composicion segun la reivindicacion 1, en la que la micela comprende cerebrosido.
5. 5. Una composicion segun la reivindicacion 1, en la que la micela comprende tanto esfingosina como cerebrosido.
6. 6. Una composicion segun la reivindicacion 5, en la que la esfingosina y el cerebrosido se combinan en cantidades iguales.
7. 7. Una composicion segun la reivindicacion 1, que comprende cantidades iguales de colageno y elastina.
8. 8. Una composicion segun la reivindicacion 1, que comprende ademas un potenciador de la absorcion.
9. 9. Una composicion segun la reivindicacion 8, en la que el potenciador se selecciona del grupo que consiste en: d- limoneno, alantoma, acido fulvico, mirra, hidroquinona glyquin, quillaja saponaria (QTS) y acanthophyllum squarrusom (ATS).
10. 10. Una composicion segun la reivindicacion 2, en la que el agente paralizante es toxina botulmica.
11. 11. Una composicion segun la reivindicacion 2, en la que el agente activo es acido hialuronico.
12. 12. Una composicion segun la reivindicacion 10, que comprende tanto toxina botulmica como acido hialuronico.
13. 13. Una composicion segun la reivindicacion 1, formulada en un formato seleccionado del grupo que consiste en:

    una crema, una locion, aerosol, una pomada, un gel, una mascarilla en polvo, una pasta, limpiador y un maquillaje de base.
14. 14. Una composicion segun la reivindicacion 13, que comprende un aditivo seleccionado del grupo que consiste en: un perfume, colorante, agente espesante, aceite vegetal, emulsionante, disolvente, agente para ajustar el pH, agente antiseptico, conservante, vitamina, protector solar, tensioactivos y combinaciones de los mismos.
15. 15. Una composicion segun la reivindicacion 1, que comprende:

    i. aproximadamente 1 a 40% p/p de colageno;

    ii. aproximadamente 1 a 40% p/p de elastina;

    iii. aproximadamente 0,1 a 15% de fosfolfpido esfingosido y

    iv. aproximadamente 0,1 a 15% de fosfolfpido cerebrosido.
16. 16. Un metodo para preparar una composicion de agente activo estabilizada, comprendiendo dicho metodo las etapas de:

    i. disolver un fosfolfpido en un disolvente para preparar una disolucion de fosfolfpido;

    ii. mezclar la disolucion de fosfolfpido con un agente activo a fin de proporcionar una disolucion de agente activo encapsulado en micela de fosfolfpido y

    iii. combinar la disolucion de micelas con una disolucion de colageno solubilizado y elastina de bajo peso molecular reticulado.
17. 17. El metodo segun la reivindicacion 16, en el que el fosfolfpido se selecciona del grupo que consiste en esfingosina, cerebrosido y combinaciones de los mismos.
18. 18. El metodo segun la reivindicacion 17, en el que se usan esfingosina y cerebrosido en cantidades iguales.
19. 19. El metodo segun la reivindicacion 16, en el que el disolvente es un alcohol.
20. 20. El metodo segun la reivindicacion 19, en el que el alcohol se selecciona del grupo que consiste en isopropanol, etanol y mezclas de los mismos.
21. 21. El metodo segun la reivindicacion 16, en el que la disolucion de colageno y elastina solubilizados comprende 5 cantidades iguales de colageno y elastina.
22. 22. El metodo segun la reivindicacion 16, en el que el agente activo se selecciona del grupo que consiste en: toxina botulfnica, acido hialuronico, Vitamina A, Vitamina C, Vitamina E, Cinc, Selenio, licopeno, N-Acetil-Cistefna, extractos naturales de plantas de Piel de la Uva, Arandano y Te Verde, vasodilatadores, hormonas, factores de crecimiento, agentes de vacuna, farmacos, protefnas terapeuticas, moleculas pequenas, agentes antitranspirantes,

    10 analgesicos y combinaciones de los mismos.
23. 23. El metodo segun la reivindicacion 22, en el que el agente activo es acido hialuronico y/o toxina botulfnica.
24. 24. El metodo segun la reivindicacion 16, que comprende ademas la etapa de anadir un compuesto potenciador de la permeacion seleccionado del grupo que consiste en: d-limoneno, alantofna, acido fulvico, mirra, hidroquinona glyquin, quillaja saponaria y acanthophyllum squarrusom.

    15 25. El metodo segun la reivindicacion 17, en el que la concentracion de esfingosina es aproximadamente 0,1 a 15%

    p/p y la concentracion de cerebrosido es aproximadamente 0,1 a 15 % p/p.
25. 26. Un metodo para preparar una formulacion farmaceutica o cosmetica para suministro de un agente activo, comprendiendo dicho metodo las etapas segun la reivindicacion 16, para preparar una composicion como se define en la reivindicacion 1 y combinar la composicion con ingredientes adicionales para formar una crema, locion, gel,

    20 pomada o aerosol.
26. 27. La composicion como se define en la reivindicacion 1, para uso en un metodo para el tratamiento de piel danada.