ES2378150T3 - Método para la preparación de poly-ICLC y sus usos - Google Patents
Método para la preparación de poly-ICLC y sus usos Download PDFInfo
- Publication number
- ES2378150T3 ES2378150T3 ES03819324T ES03819324T ES2378150T3 ES 2378150 T3 ES2378150 T3 ES 2378150T3 ES 03819324 T ES03819324 T ES 03819324T ES 03819324 T ES03819324 T ES 03819324T ES 2378150 T3 ES2378150 T3 ES 2378150T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- poly
- iclc
- months
- interferon
- dose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 239000012648 POLY-ICLC Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 229940115270 poly iclc Drugs 0.000 title claims abstract description 21
- 108700002563 poly ICLC Proteins 0.000 title claims abstract description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 33
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 13
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 claims abstract description 10
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 claims abstract description 10
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 52
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 52
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 43
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 38
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 37
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 28
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 claims description 24
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 24
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 claims description 24
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 claims description 23
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 claims description 23
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 23
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 claims description 23
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 23
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 16
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 16
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 13
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 13
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 13
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 12
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 10
- 241000288906 Primates Species 0.000 claims description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 claims description 9
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 claims description 8
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 7
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims description 7
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 7
- VKZRWSNIWNFCIQ-WDSKDSINSA-N (2s)-2-[2-[[(1s)-1,2-dicarboxyethyl]amino]ethylamino]butanedioic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NCCN[C@H](C(O)=O)CC(O)=O VKZRWSNIWNFCIQ-WDSKDSINSA-N 0.000 claims description 6
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims description 6
- 206010003571 Astrocytoma Diseases 0.000 claims description 6
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 claims description 5
- 206010002224 anaplastic astrocytoma Diseases 0.000 claims description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 5
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 5
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 claims description 5
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 5
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 claims description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 5
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 claims description 5
- 102000009185 Actin-filament associated proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 108050000056 Actin-filament associated proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 4
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 claims description 4
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 claims description 4
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 claims description 4
- 108091054729 IRF family Proteins 0.000 claims description 4
- 102000016854 Interferon Regulatory Factors Human genes 0.000 claims description 4
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 claims description 4
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 claims description 4
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 claims description 4
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 claims description 4
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 claims description 4
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 claims description 4
- 108010000134 Vascular Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 claims description 4
- 102100023543 Vascular cell adhesion protein 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 4
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 claims description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 claims description 4
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 claims description 4
- 102000008014 Eukaryotic Initiation Factor-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010089791 Eukaryotic Initiation Factor-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 claims description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 claims description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 claims description 3
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 claims description 3
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 claims description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 3
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims description 3
- 229940083538 smallpox vaccine Drugs 0.000 claims description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 3
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001490 Dengue Diseases 0.000 claims description 2
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 claims description 2
- 206010014596 Encephalitis Japanese B Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000832 Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 claims description 2
- 241000711950 Filoviridae Species 0.000 claims description 2
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005807 Japanese encephalitis Diseases 0.000 claims description 2
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 claims description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 2
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 206010053395 Progressive multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 claims description 2
- 241000710886 West Nile virus Species 0.000 claims description 2
- 208000003152 Yellow Fever Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 2
- 208000025729 dengue disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000029824 high grade glioma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011614 malignant glioma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 claims description 2
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 claims 1
- 206010054261 Flavivirus infection Diseases 0.000 claims 1
- 208000029433 Herpesviridae infectious disease Diseases 0.000 claims 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 claims 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 abstract description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 abstract description 4
- 102100034170 Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase Human genes 0.000 description 27
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 12
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 11
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 8
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 6
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 5
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 3
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 3
- 208000019155 Radiation injury Diseases 0.000 description 3
- SIIZPVYVXNXXQG-KGXOGWRBSA-N [(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-[[(3s,4r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-3-hydroxyoxolan-2-yl]methyl [(2r,4r,5r)-2-(6-aminopurin-9-yl)-4-hydroxy-5-(phosphonooxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OC2[C@@H](O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@H]2O)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)[C@@H](O)[C@H]1OP(O)(=O)OCC([C@@H](O)[C@H]1O)OC1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 SIIZPVYVXNXXQG-KGXOGWRBSA-N 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- -1 beta and gamma Proteins 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 3
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 3
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 3
- 230000004223 radioprotective effect Effects 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 241001466804 Carnivora Species 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N Trihydroxypropylpterisin Natural products OCC(O)C(O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 2
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000036523 atherogenesis Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000007933 dermal patch Substances 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000011194 good manufacturing practice Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 2
- BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N neopterin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N 0.000 description 2
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 239000011236 particulate material Substances 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 230000001950 radioprotection Effects 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 2
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 230000005727 virus proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 208000009828 Arbovirus Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 1
- 241001516406 Avian orthoreovirus Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N Cidofovir Chemical compound NC=1C=CN(C[C@@H](CO)OCP(O)(O)=O)C(=O)N=1 VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 201000011001 Ebola Hemorrhagic Fever Diseases 0.000 description 1
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 208000007212 Foot-and-Mouth Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 201000010915 Glioblastoma multiforme Diseases 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 101000635799 Homo sapiens Run domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich domain-containing protein Proteins 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 208000004554 Leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000702263 Reovirus sp. Species 0.000 description 1
- 102100030852 Run domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich domain-containing protein Human genes 0.000 description 1
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- CETPSERCERDGAM-UHFFFAOYSA-N ceric oxide Chemical compound O=[Ce]=O CETPSERCERDGAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 231100000749 chronicity Toxicity 0.000 description 1
- 229960000724 cidofovir Drugs 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000011281 clinical therapy Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000009215 host defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002799 interferon inducing agent Substances 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100001224 moderate toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 208000005871 monkeypox Diseases 0.000 description 1
- 238000003012 network analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 238000010855 neuropsychological testing Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000803 paradoxical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009521 phase II clinical trial Methods 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 208000015347 renal cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0043—Nose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Un método modificado mejorado para la fabricación a escala de producción de grandes lotes estériles de grado clínico de Poly-ICLC, un complejo de RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico de alto peso molecular, poli-L-lisina de peso molecular bajo, y carboximetilcelulosa, que tiene mayor exactitud de suministro de fármaco en aplicaciones clínicas, y potencia biológica y actividad de inducción de interferón incrementadas en primates, que comprende los pasos de: producir un RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico utilizando una solución de componente ácido poliinosínico en un proceso que comprende clarificar la solución de ácido poliinosínico por calentamiento a aproximadamente 35º C antes de esterilización por filtración; añadir una solución de componente poli-L-lisina muy lentamente a una solución de componente carboximetilcelulosa durante un periodo de al menos 4 días, y mezclar durante todo el tiempo de mezcladura con energía suficiente para formar un torbellino y minimizar la formación de precipitado, seguido por adición del RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico, en donde la viscosidad de la carboximetilcelulosa se reduce por calentamiento a aproximadamente 35º C, pero no más de 40º C, a fin de hacer posible un torbellino satisfactorio mientras se realiza la mezcladura.
Description
Método para la preparación de poly-ICLC y sus usos
Campo y antecedentes de la invención.
Campo de la Invención
La presente invención se refiere en general a métodos para producción de compuestos farmacéuticos, y más particularmente a ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico estabilizado con polilisina y carboximetilcelulosa (Poly-ICLC).
La invención descrita y reivindicada en esta memoria comprende un método mejorado para producir grandes lotes de Poly-ICLC final estéril adecuado para uso clínico con toxicidad reducida a niveles de dosis eficaces. El Poly-ICLC resultante puede utilizarse clínicamente para tratar diversas afecciones y para regular genes.
La Patente U.S. 4.349.538 (Hilton B LEVY) describe la preparación y el uso clínico de Poly-ICLC.
Sin embargo, las altas dosis (> 300 Ig/kg) descritas clínicamente por Levy tenían como finalidad inducir interferón y resultaron tóxicas y en gran parte ineficaces para tratamiento de pacientes humanos, hasta el punto que, después de muchos intentos, el uso clínico experimental de Poly-ICLC se interrumpió en gran parte hace más de una década. Así, más de 20 años después que fue descrito por primera vez, el Poly-ICLC no ha sido aprobado todavía por la Administración de Alimentos y Fármacos de los Estados Unidos para ninguna indicación terapéutica. El ácido poliinosínico-policitidílico estabilizado con polilisina y carboximetilcelulosa (Poly-ICLC) es un complejo sintético de ácido poliinosínico y ácido policitidílico (RNA bicatenario (dsRNA)), estabilizado con polilisina y carboximetilcelulosa que fue utilizado como inductor de interferón a dosis altas (hasta 300 Ig/kg IV) en pruebas de cáncer de corta dur ación hace algunos años. Esto dio resultados desiguales con toxicidad moderada, y el uso de Poly-ICLC fue abandonado por regla general cuando llegaron a estar disponibles los interferones recombinantes. Sin embargo, a dosis más baja (10 a 50 Ig/kg) Poly-ICLC da como resultado una estimulación más amplia de las defensas del hospedador, y una actividad clínica mejorada con poca o ninguna toxicidad. (Salazar, Levy et al. 1996)), (Ewel, Urba et al. 1992) (Levy and Bever 1988) (Levy and Salazar 1992) (Talmadge and Hartman 1985). (Maluish, Reid et al. 1985)
Existen al menos cuatro acciones clínicas interrelacionadas de Poly-ICLC, cualquiera de las cuales (sola o en combinación) podría ser responsable de su actividad antitumoral y antiviral. Éstas son 1) su inducción de interferón; 2) su amplio efecto mejorador de la inmunidad; 3) su activación de enzimas específicas, especialmente oligoadenilatosintetasa (OAS) y la proteína-quinasa P68 (PKR); y 4) sus acciones reguladoras de genes multidimensionales.
Inducción de interferón. Si bien la inducción de interferón es uno de los mecanismos importantes para la acción de Poly-ICLC, el interferón por sí solo no parece ser tratamiento suficiente para muchas afecciones. Adicionalmente, los niveles de interferón sérico inducidos por las dosis de Poly-ICLC utilizadas por los presentes inventores son relativamente bajos y no han sido asociados en el pasado con acción antiviral o antitumoral cuando se administra exógenamente interferón solo.
Modulación de la inmunidad: El Poly-ICLC a dosis bajas tiene también una acción intensificadora de la inmunidad directa independiente de IFN que incluye la actinación de las células T y las células agresoras naturales, actinación de células dendríticas, liberación de citoquinas (v.g. interferones alfa, beta y gamma, interleuquinas, corticosteroides, y TNF), y un potente efecto adyuvante con respuesta incrementada de anticuerpos al antígeno (Levy y Bever 1988). Los efectos inmunoestimuladores de Poly-ICLC y los interferones son complejos. Sin embargo, resultados preliminares en laboratorio en el estudio piloto realizado por los inventores en pacientes con tumores cerebrales demostraron la ausencia de una relación clara entre la respuesta al tumor y el interferón sérico medible, TNF, IL2, IL6, o neopterina. (Salazar, Levy et al. 1996). El efecto adyuvante de Poly-ICLC se ha demostrado también en varios sistemas. Por ejemplo, la administración en dosis bajas de Poly-ICLC junto con la vacunación contra la gripe de los cerdos en los monos acelera y aumenta espectacularmente los títulos de HAI. (Stephen, Hilmas et al. 1977). Las complejas interacciones de los dsRNAs y los interferones en este contexto no están comprendidas todavía por completo, pero esta función dual aparentemente paradójica de Poly-ICLC como agente antiviral e intensificador de la inmunidad es consistente con su función en el establecimiento de un sistema inmediato de defensa contra el ataque viral al mismo tiempo que permite el establecimiento de inmunidad a largo plazo. Así, en contraste con los agentes antivirales convencionales tales como cidofovir, Poly-ICLC podría representar un adyuvante ideal en vacunas de virus vivos, especialmente aquéllas tales como la vacuna de la viruela que pueden llevar consigo una morbilidad importante relacionada con la proliferación del virus incontrolado de la vacuna. En contraste con la vacunación, se espera también que el efecto protector de dsRNAs tales como Poly-ICLC sea mucho más rápido, dado que el estado antiviral se establece en el transcurso de horas.
La tercera acción de Poly-ICLC es un efecto antiviral y antineoplástico más directo mediado por al menos dos sistemas mee enzimas nucleares inducibles por interferón, la 2'5'-oligoadenilato-sintetasa (OAS) y la P1/elF2a-quinasa, conocida también como la proteína-quinasa P68 dependiente de dsRNA (PKR). (Katze 1992), (Jacobs y Langland 1996) El dsRNA no es un componente normal de las células de mamífero, pero es un subproducto de muchas infecciones virales. El dsRNA induce un estado antiviral en las células por funcionar como un cofactor obligado para OAS, que activa la ribonucleasa-L, así como para la PKR, que inhibe la iniciación de la síntesis de proteínas, y para una aminotransferasa que está más incompletamente estudiada. Esto puede ayudar a la explicación de la disminución preferencial demostrada de la síntesis tumoral de proteínas in vivo por Poly-ICLC.
La OAS y la PKR son muy sensibles a la dosis y estructura del dsRNA (Minks, West et al 1979). Por ejemplo, el dsRNA simple de cadena larga (como en Poly-ICLC) es el estimulador más potente de OAS y PKR, mientras que el dsRNA desapareado o irregular puede ser inhibidor. Análogamente, la PKR tiene a la vez sitios de fijación de afinidad alta y baja y es inhibida por una dosis excesivamente alta de dsRNA. (Galabru, Katze et al. 1989). Clínicamente, la respuesta de OAS es también máxima a una dosis de aproximadamente 30 Ig/kg de Poly-ICLC, y se reduce notablemente porencima de 100 Ig/kg (M. Kende, N. Bernton, et al., no publicado).
La inhibición de las células de glioma EFC2 in vitro por el interferón beta está asociada también significativamente con la activación tanto de OAS como de PKR. Otros investigadores han demostrado que la expresión de un mutante funcionalmente defectivo de la PKR da como resultado transformación maligna in vitro, lo que sugiere un papel importante para esta enzima en la supresión de la tumorigénesis. (Koromilas, Roy et al. 1992). Se sabe ahora que tanto PKR como Poly-IC regulan el gen supresor de tumores p53, lo que está asociado a su vez con el síndrome de malignidad múltiple de Li Fraumeni, que incluye astrocitomas, sarcomas, y cánceres de pulmón y mama.
La semi-vida clínica de la respuesta de OAS a Poly-ICLC IM es aproximadamente 2,5 días, lo que sugiere un programa de dosificación óptimo de dos o tres veces por semana (M. Kende, L. Bernton, et al., no publicado). Pacientes tratados con Poly-ICLC exhibieron un aumento de hasta 40 veces en el producto OAS sérico en respuesta al tratamiento con 10 hasta 20 Ig/kg, y una asociación importante significativa de OAS sérico con la respuesta tumoral (p = 0,03). La mediación de la acción antitumoral por activación de OAS y/o PKR por OAS podría contribuir a explicar por qué razón las dosis altas de Poly-ICLC utilizadas en las pruebas iniciales de cáncer fueron relativamente ineficaces.
Muchos virus, con inclusión pero sin carácter limitante de adenovirus, poxvirus (vaccinia), virus de la fiebre aftosa, gripe, hepatitis, poliovirus, herpes símplex, SV-40, reovirus, y el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) soslayan las defensas del hospedador por regular en sentido decreciente OAS y/o PKR, y este efecto puede invertirse in vitro por dsRNA exógeno. (Jacobs y Langland 1996). Un bloqueo de la acción del interferón mediada por PKR y/o OAS podría explicar también la respuesta variable a los interferones observada en enfermedades tanto microbianas como neoplásticas. Ciertos virus, así como neoplasmas tales como gliomas malignos pueden utilizar éste o un mecanismo similar para soslayar las defensas del hospedador y causar enfermedad. Dichas enfermedades pueden estar por tanto entre las primeras dianas para terapia clínica con Poly-ICLC utilizando el método descrito en esta memoria que maximiza la activación de PKR.
Así, se ha demostrado que Poly-ICLC ejerce una acción antiviral significativa contra una amplia diversidad de familias de virus. Un ejemplo es la inhibición del virus vaccinia en varios modelos (Levy y Lvovsky ((Burgasova 1977), (Worthington and Baron 1973) (Baron, Salazar et al. 2003). Levy & Lvovsky utilizaron Poly-ICLC o ungüento tópico de placebo en conejos e inocularon subsiguientemente los mismos con inyecciones intradérmicas de virus vaccinia en 10 sitios adyacentes de la piel. Los tratamientos locales se repitieron a intervalos de 1, 2, 3, y 4 días. Los animales tratados con ungüento de placebo desarrollaron lesiones graves desde los días 3 a 6, y 3 de los 8 murieron por encefalitis por vaccinia. En contraste, los animales tratados con Poly-ICLC no presentaron signo alguno de enfermedad sistémica y tenían lesiones mucho menores en la piel, que progresaban rara vez más allá de 1-3 mm. En experimentos separados, Poly-ICLC fue también efectivo cuando se aplicó después que se hicieron visibles las lesiones. Los títulos virales en las lesiones de la piel eran notablemente reducidos (por 3 logs) en los animales tratados, y los títulos de interferón aumentaron. Sin embargo, los títulos medios de anticuerpos neutralizantes del virus en el suero al cabo de 10 días habían aumentado aproximadamente 10 veces en los animales tratados comparados con los controles de placebo. Si bien los autores sugerían que los efectos beneficiosos eran debidos a la acción dérmica local del Poly-ICLC, demostraron también una fuerte respuesta sistémica del interferón (sérico) a la administración tópica del fármaco. Esto sugiere que el efecto protector principal puede ser realmente sistémico, lo cual se ve respaldado adicionalmente por la disminución acusada o la posible anulación de la diseminación sistémica de vaccinia por el Poly-ICLC tópico en sus experimentos.
La interacción de los interferones tipo I y Poly-ICLC unos con otros en la protección del hospedador contra los enfrentamientos virales o neoplásticos sigue sin estar aclarada debido en parte a sus funciones solapantes. Sin embargo, la relación de Poly-ICLC y los interferones puede manipularse con ventaja terapéutica. A dosis moderadas a altas, Poly-ICLC es un potente inductor de los interferones, lo cual puede inducir a su vez la síntesis de sistemas enzimáticos tales como OAS, PKR y otros que regulan finalmente por sí mismos la síntesis de proteínas específicas. No obstante, como se ha indicado arriba, OAS, PKR y probablemente otras requieren también dsRNAs a dosis baja como cofactores obligados para su función, en particular si han sido bloqueadas por invasión viral o neoplástica. El Poly-ICLC a dosis baja es particularmente eficaz en clínica a este respecto cuando se administra conforme al régimen descrito en el apartado 6 bajo 'Sumario de la Invención' más adelante.
Se ha demostrado que el Poly-IC normal no estabilizado regula en sentido creciente o en sentido decreciente una gran diversidad de más de 270 genes en cultivo de células (Geiss, Jin, et al. 2001). Sin embargo, el Poly-IC normal no es eficaz in vivo en primates y muchas otras especies, y presenta utilidad clínica limitada. Por otra parte, se espera que Poly-ICLC ejerza acciones reguladoras de genes generalizadas cuando se administra clínicamente en humanos. Estos genes incluyen, pero sin carácter limitante la helicasa, proteína inducida por interferón (p56), el factor de necrosis tumoral, el factor regulador de interferón, la metaloproteinasa de la matriz, el activador del plasminógeno, la proteína tumoral p53, el factor de crecimiento de fibroblastos, el factor 2 de iniciación eucariota, la proteína asociada a filamentos de actina, y VCAM-1. Algunos de estos genes desempeñan papeles clínicos en las defensas naturales del cuerpo contra una diversidad de neoplasmas e infecciones microbianas, y en el control de otras funciones celulares, que incluyen síntesis de proteínas, aterogénesis, muerte celular programada (apoptótica), metabolismo celular, crecimiento celular, el citoesqueleto y la matriz extracelular. La activación de los genes es transitoria, durando 24-48 horas, lo que sugiere que la dosificación repetida a intervalos de 2-3 días será necesaria para conseguir un efecto terapéutico en algunas condiciones. Este es el programa de administración que se utilizó con éxito en el tratamiento de gliomas malignos y se describe con mayor detalle más adelante. (Véase a continuación). Para afecciones degenerativas crónicas o de larga duración puede ser necesaria una administración prolongada durante un periodo de años.
Prevención y Tratamiento de la Lesión por Radiaciones Ionizantes
Otra acción de los dsRNAs y Poly-ICLC en particular es su protección demostrada contra la lesión por radiaciones. (Baze, Lvovsky et al. 1979), (Lvovsky, Levine et al. 1982). En una serie de experimentos, se trataron ratones con Poly-ICLC por vía intramuscular a dosis de 0,1 a 3 mg/kg antes de recibir una DL50 (30d) de radiación ionizante. Los animales recibieron tratamientos simples o múltiples con PICLC a las 8-72 horas antes de la exposición a la radiación. Los animales tratados tuvieron una supervivencia notablemente incrementada, con un factor de reducción de la dosis máxima de 1,25. La supervivencia durante 30 días aumentó tanto como 60% a una dosis de aproximadamente 700 Rads (desde 33 a 93%). El tiempo de radioprotección máxima no coincidía con la inducción de interferón, que ocurría 24-48 horas antes. Esto sugiere que la inducción de enzimas tales como las PKR y OAS puede ser más importante para el efecto radioprotector que la simple inducción de interferón. Como se ha indicado arriba, la respuesta máxima de OAS después de PICLC tiene lugar aproximadamente 48-72 horas después del tratamiento con Poly-ICLC IM y coincide con el tiempo de radioprotección máxima. Así, un protocolo de dosificación que maximice no sólo la inducción de OAS y PKR, sino también su activación subsiguiente podría ser prometedor de un efecto radioprotector mayor aún.
Se presentarán datos que demuestran el efecto radioprotector de Poly-ICLC cuando se administra de acuerdo con el régimen de doble dosificación descrito más adelante que maximiza la activación de OAS y PKR.
Fabricación de Poly-ICLC
La Patente U.S. 4.349.538 (Hilton B LEVY) describe la preparación de lotes de 1 litro de Poly-ICLC de composición específica que proporcionan un producto biológicamente activo.
Sin embargo, en la preparación de lotes de producción grandes (> 30 litros) de Poly-ICLC de acuerdo con la buena práctica de fabricación (GMP), se encontraron dificultades con la formulación de Poly-ICLC que requerían modificaciones clínicas respecto al proceso descrito por Levy a fin de producir grandes lotes de producto final estéril adecuado para uso clínico. Los resultados de los tests indican que dichas modificaciones dieron como resultado un producto significativamente mejorado y más potente biológicamente que el descrito en la patente #4.349.538.
Los problemas anteriores se resuelven, y se proporcionan otras ventajas por un método para producción de grandes lotes de Poly-ICLC final estéril adecuado para uso clínico con toxicidad reducida a niveles de dosis eficaces, y para uso en métodos de utilización de Poly-ICLC a fin de tratar ciertas afecciones neoplásticas, infecciosas y autoinmunes y regular una gran diversidad de genes.
Un método mejorado y modificado para la fabricación a escala de producción de grandes lotes estériles de grado clínico de Poly-ICLC, un complejo de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico de peso molecular alto, poli-L-lisina de peso molecular relativamente bajo, y carboximetilcelulosa proporciona claridad y uniformidad mejoradas de la composición. Se espera que esta mejora en el producto final dé como resultado una mayor exactitud de suministro de fármaco en aplicaciones clínicas, con inducción incrementada de interferón y potencia biológica global en primates.
La presente invención proporciona un método modificado mejorado para la fabricación a escala de producción de grandes lotes estériles de grado clínico de Poly-ICLC, un complejo de RNA bicatenario de ácido polirriboinosínicopolirribocitidílico de peso molecular alto, poli-L-lisina de peso molecular bajo, y carboximetilcelulosa, que tiene mayor exactitud de suministro de fármaco en aplicaciones clínicas, y potencia biológica y actividad de inducción incrementadas de interferón en primates, que comprende los pasos de fabricar un RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico utilizando una solución de componente de ácido poliinosínico en un proceso que comprende clarificar la solución de ácido poliinosínico por calentamiento a aproximadamente 35ºC Una mezcladura proporcionalmente más intensa Una mezcladura proporcionalmente más intensa antes de esterilización por filtración; añadir una solución de componente poli-L-lisina muy lentamente a una solución de componente carboximetilcelulosa durante un periodo de al menos 4 días, y mezclar durante todo el tiempo de mezcladura de modo suficiente enérgico para formar un torbellino y minimizar la formación de precipitado, seguido por adición del RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico, en donde la viscosidad de la carboximetilcelulosa se reduce por calentamiento a aproximadamente 35ºC, pero no más de 40ºC a fin de permitir un torbellino satisfactorio mientras se realiza la mezcladura.
De acuerdo con el método mejorado, se añade la solución de componente poli-L-lisina muy lentamente a la solución del componente carboximetilcelulosa durante un periodo de al menos 4 días. Se requiere también una acción de mezcladura enérgica utilizando un mezclador de paletas anchas suficiente para generar un torbellino durante todo el tiempo de mezcladura a fin de minimizar la formación de precipitado. Será necesaria una mezcladura proporcionalmente más fuerte para mayores cantidades de preparación, superiores a 30 litros. En una realización preferida, la viscosidad de la solución del componente carboximetilcelulosa se reduce por calentamiento a aproximadamente 35ºC, pero no más de 40ºC a fin de permitir un torbellino satisfactorio mientras se realiza la mezcladura. En una realización más preferida, la evaporación debida al calentamiento se contrarresta por la adición de agua estéril para inyección durante el proceso de mezcladura y la solución del componente ácido poliinosínico se clarifica por calentamiento a aproximadamente 35ºC antes de la esterilización por filtración.
Las composiciones así producidas pueden utilizarse en un método mejorado y no tóxico para utilización clínica de Poly-ICLC en humanos por vías intranasal, tópica, oral, sublingual, intravenosa y/o intramuscular a fin de modular la expresión de una amplia gama de genes. Se han demostrado efectos similares para Poly-IC simple no estabilizado en cultivo de células (Geiss, Jin et al. 2001), aunque el Poly-IC simple no es eficaz en primates y muchas otras especies. Estos genes incluyen, pero sin carácter limitante, la helicasa, proteína inducida por interferón (p56), factor de necrosis tumoral, factor regulador de interferón, metaloproteinasa de la matriz, activador del plasminógeno, proteína tumoral p53, factor de crecimiento de fibroblastos, factor 2 de iniciación eucariota, proteína asociada a filamentos de actina, y VCAM-1. Algunos de estos genes desempeñan papeles críticos en las defensas naturales del cuerpo contra una diversidad de neoplasmas e infecciones microbianas, y en el control de otras funciones celulares, que incluyen la síntesis de proteínas, aterogénesis, muerte celular programada (apoptótica), metabolismo celular, crecimiento celular, el citoesqueleto y la matriz extracelular. El Poly-ICLC será por tanto de utilidad clínica en enfermedades en las cuales la expresión de uno o más de estos genes es anormal. Otras aplicaciones incluyen la regulación similar de genes en diversas especies animales, que incluyen primates, carnívoros, ungulados, aves de corral, y otras aves.
Las composiciones pueden utilizarse en un método mejorado de administración (por vías intranasal, oral, sublingual, intramuscular, intravenosa o tópica) que comprende la administración en al menos dos dosis distanciadas 4-72 horas, en donde la primera dosis está dentro de una gama moderada (30 a 100 Ig/kg en human os) suficiente para inducir niveles medibles pero no excesivos de interferón sérico y niveles máximos de PKR y OAS; y la segunda dosis, más baja, está dentro del intervalo eficaz máximo (10 a 40 Ig/kg en humanos) para desbloqueo y estimul ación de ciertos sistemas de enzimas inducibles por interferón y dsRNA, que incluyen la PKR y 2'S'OAS, que alcanzan sus picos máximos en suero aproximadamente 48 horas después de la dosificación inicial de Poly-ICLC. Este enfoque puede extenderse al uso de otros dsRNAs estabilizados para conseguir los mismos resultados. El ciclo de dosificación puede repetirse a intervalos semanales o dos veces por semana para un número variable de ciclos que dependen de la cronicidad de la enfermedad que se esté tratando, y puede continuarse durante un periodo de tiempo prolongado (desde meses hasta varios años). Finalmente, una o más de las dosis pueden suministrarse utilizando un parche dérmico o vehículo transdérmico (véase la sección II bajo Realizaciones Preferidas).
Una composición de Poly-ICLC de la invención puede administrarse clínicamente como se ha indicado arriba paratratar ciertas enfermedades neoplásticas en humanos. Éstas incluyen, pero sin carácter limitante, tumores cerebrales malignos, melanoma, cáncer de mama y de pulmón, cáncer de colon, sarcomas, cáncer de células renales, y ciertas leucemias y linfomas (véase más adelante).
El producto puede utilizarse en un método mejorado y no tóxico por utilización de Poly-ICLC clínicamente como seha indicado arriba a fin de prevenir y tratar infecciones microbianas en humanos por cierto número de virus. Éstos incluyen, pero sin carácter limitante, arbovirus y flavivirus tales como la fiebre amarilla, el virus del Nilo Occidental, la encefalitis japonesa y el dengue (Stephen, Samos et al. 1977) (Harrington, Hlmas et al. 1977), filovirus tales comoÉbola, gripe, poxvirus tales como el de la viruela y Monkeypox, adenovirus, hepatitis, coronavirus tales como el virus SARS, herpesvirus tales como citomegalovirus y herpes símplex, y el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV). Algunos de estos virus sobreviven en el cuerpo por regulación decreciente de alguno de los sistemas arriba citados. Otras aplicaciones incluyen tratamiento similar de diversas especies animales, que incluyen primates, carnívoros, ungulados, aves de corral, y otras aves, e incluyen (pero sin carácter limitante) infecciones de arbovirus tales como la encefalitis equina, el virus de la fiebre aftosa, la gripe, arterivirus tales como el virus PRRS de los porcinos, y el complejo respiratorio de los bovinos.
El producto puede utilizarse también en un método mejorado y no tóxico para utilización de Poly-ICLC clínicamente como se ha indicado arriba a fin de prevenir y tratar ciertas infecciones microbianas bacterianas y parasitarias, que incluyen malaria y leishmaniasis.
Con este método pueden tratarse también diversos trastornos inmunes que incluyen, pero sin carácter limitante, esclerosis múltiple, síndrome de Guillain Barre, neuropatías inmunes, y ciertas vasculitis disinmunes; así como lesión por radiación ionizante.
Las composiciones pueden utilizarse en un método mejorado y no tóxico para utilización de Poly-ICLC clínicamente en humanos como se ha indicado arriba para mejorar la acción y reducir la toxicidad de diversas vacunas, con inclusión de vacunas de virus vivos.
Así pues, la invención ha proporcionado un método mejorado de producción de grandes lotes de Poly-ICLC, adecuados para uso clínico.
La administración de dicho Poly-ICLC da como resultado una toxicidad notablemente reducida, y una mejora acusada de sus usos clínicos y veterinarios y sus efectos biológicos multidimensionales, y proporciona un método de utilización de Poly-ICLC a fin de proporcionar acciones reguladoras de genes en humanos.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
La Figura 1 es una tabla que muestra la Respuesta Sistémica a una dosis Intranasal Simple de Poly-ICLC en Monos Rhesus. La Figura 2 es una tabla que muestra la inducción de Interferón en Monos Rhesus por 2 mg/kg IV de Poly-ICLC fabricado como se describe en la presente solicitud (lote #RBP 10036) (compárese con la Tabla I en Levy'82, Patente #4.349.538. A pesar de una dosis mayor de 3 mg/kg, la preparación de Levy inducía niveles inferiores de interferón en los Monos Rhesus.) La Figura 3 es una tabla que muestra el test de Material Particulado (aclaramiento) de los componentes de Poly-ICLC y el producto final como se describe en la presente solicitud. La Figura 4 es una tabla de datos de supervivencia no publicados en pacientes de glioma maligno tratados a largo plazo con Poly-ICLC a dosis baja.
La Figura 5 es una tabla que muestra la disminución o estabilización de la carga viral de HIV después de tratamiento de pacientes de SIDA avanzado a largo plazo con Poly-ICLC a dosis baja.
La Figura 6 es una tabla no publicada que muestra el tratamiento a largo plazo con dosis baja de Poly-ICLC de la Esclerosis Múltiple Progresiva, que muestra la estabilización relativa, y/o la mejora del estatus neurológico.
En la medida en que ello puede ayudar a la comprensión del método, se hace referencia a la Patente U.S. 4.349.538 (Levy).
La invención es un nuevo método para producir grandes lotes de Poly-ICLC final estéril adecuado para uso clínico con toxicidad reducida a niveles de dosis eficaces. Las composiciones que comprenden dicho Poly-ICLC pueden utilizarse para regular genes y tratar ciertas condiciones de enfermedad.
I. Descripción de un Método Mejorado para Preparación de Lotes de Volumen Grande de Poly-ICLC con Potencia Biológica Incrementada.
Esta sección está basada en observaciones de Oncovir en la producción del lote #RBP 100-36; JN:042401 RBP.
La Patente US #4.349.578 (Levy) proporciona una descripción básica del proceso de fabricación. Se describen las modificaciones siguientes. La sección más sensible de la formulación es la mezcladura de la solución de poli-L-lisina con la solución de carboximetilcelulosa (CMC). Cuando la poli-L-lisina entra en contacto con CMC, se genera un precipitado que es muy difícil de poner de nuevo en solución. Con objeto de prevenir este precipitado, la poli-L-lisina tiene que añadirse muy lentamente a la solución de CMC durante un periodo de al menos 4 días. Se requiere también una acción enérgica de mezcladura utilizando un mezclador de paletas grandes durante todo el tiempo de mezcladura a fin de minimizar la formación de precipitado.
La CMC es viscosa y precisa calentarse a aproximadamente 35ºC, pero no más de 40ºC a fin de permitir una torbellino satisfactoria mientras se realiza la mezcladura. El impacto negativo del aporte de calor a las soluciones de poliL-lisina y CMC es que se produce evaporación durante el proceso de calentamiento/mezcladura/mixtura. A medida que se evapora la solución, la misma se vuelve más espesa y más difícil de mezclar. Se prefiere contrarrestar en parte la evaporación hacia la mitad del tiempo de mezcladura para maximizar la acción de torbellino.
La solución evaporada se reemplaza con Agua Estéril para Inyección (SWFI) varias veces dependiendo de la duración del tiempo de mezcladura. Por ejemplo, se añadieron un total de 15153 ml de agua estéril a un lote de 18 l de suspensión de Poly-ICLC en tres ocasiones. Un tiempo más intenso pero más breve de mezcladura/calentamiento/mixtura podría contribuir a minimizar la cantidad de agua necesaria para el reemplazamiento de la evaporación. No se genera precipitado adicional alguno por la adición de SWFI.
Es difícil determinar la densidad relativa de la solución de CMC y la solución final de Poly-ICLC. No puede realizarse utilizando un micro-pipeteador debido a la viscosidad. La densidad relativa de la CMC se determinó por pesada del lote total en un envase; se traza luego una línea en el envase para marcar el borde superior de la solución y se retira la CMC. Se limpia el envase, se llena con agua y se pesa a fin de determinar el peso de la solución de CMC frente al peso de agua. La densidad relativa final del Poly-ICLC se determinó por ponderación de la densidad relativa de cada una de las soluciones Poly I, Poly L, Poly C y CMC. Poly C y Poly L se disuelven todos de modo relativamente satisfactorio como se describe en Levy, '82, #4349538.
La densidad relativa de cada uno puede medirse utilizando una micropipeta. Sin embargo, después de la mezcladura de Poly I, la solución queda opalina y obstruye los filtros. Una modificación importante requerida fue un calentamiento inicial de Poly I para clarificar la solución y permitir que la misma pasara a través de un filtro de 0,2 micrómetros con pérdida mínima del componente funcional. Después de calentamiento de la solución a aproximadamente 35ºC, la misma se vuelve clara y puede en dicho momento filtrarse para esterilización. La filtración estéril de una solución clara se supone también que reduce cualquier pérdida de componente activo por el proceso de filtración. Una vez que el Poly I se ha aclarado, el mismo mantiene su transparencia y puede filtrarse de nuevo a la temperatura ambiente. La esterilización para uso clínico se realiza por tanto con modificaciones mínimas respecto a Levy '82 como sigue: se filtra la solución de Poly I utilizando un filtro de 0,2 micrómetros después de calentamiento a 35ºC y clarificación. La solución de Poly C se filtra utilizando un filtro de 0,2 micrómetros; la solución de Poly L se filtra utilizando un filtro de 0,2 micrómetros. La solución de CMC se trata en autoclave.
Las cuatro soluciones se combinan luego en condiciones estériles como se describe arriba y en la patente #4349538.
El producto final producido por este método exhibía la mayoría de las características de Poly-ICLC descritas en la patente #4349538 excepto que es un inductor de interferón aún más potente en los primates. El Poly-ICLC producido con las modificaciones arriba descritas tiene una Tm de aproximadamente 90ºC y es resistente a la hidrólisis por la RNasa pancreática. Cuando se administra por vía intravenosa a monos Rhesus a una dosis de 2 mg/kg, el mismo da como resultado la inducción de 2000 a 7000 UI de interferón, con un valor medio de 5750 UI de interferón 8 horas después de la inyección, como se muestra en la Tabla 2. Este valor es tres veces mayor que los valores consignados previamente por Levy en la patente #4349538. El nuevo método descrito da también como resultado un producto final que tiene una transparencia y uniformidad de composición significativamente mejoradas como se demuestra en parte por el test de material particulado, como representado en la Figura 3.
El producto final mejorado permite una mayor exactitud de suministro de fármaco en aplicaciones clínicas y mayor potencia biológica, que puede estar relacionada en parte con su solubilización mejorada.
II. Tratamiento por Fases con Dosis Múltiples
La interacción compleja de los interferones y los sistemas activados por dsRNA puede manipularse con ventaja terapéutica, particularmente en el caso de aquellas enfermedades microbianas y neoplásticas que se desarrollan por soslayar los mecanismos de defensa del hospedador que implican OAS y PKR. Un enfoque descrito por Marcus y colaboradores en cultivo de células aviares utiliza la combinación de interferón exógeno seguido por dsRNA en dicho orden para conseguir un nivel de protección incrementado hasta 100 veces contra el reovirus aviar y el virus de la enfermedad de Newcastle con respecto a la proporcionada por cualquier agente aislado o cuando se administran en orden inverso (Marcus y Sekellick 2001). Puede utilizarse una lógica similar para tratar ciertas enfermedades infecciosas y neoplásticas humanas y veterinarias utilizando Poly-ICLC solo. En este contexto, Poly-ICLC cumple dos funciones; en primer lugar la inducción de interferón, OAS, PKR, y algunas otras enzimas, y en segundo lugar la activación de las OAS, PKR, y otras enzimas previamente inducidas.
El método descrito en esta memoria consiste en estimular primeramente la inducción de interferón con una dosis moderada a alta de Poly-ICLC, dejar que transcurran 4-72 horas para la inducción por interferón de OAS, PKR y otros sistemas enzimáticos, y activar luego los mismos con una segunda dosis menor de Poly-ICLC. Dada la semivida de 2-3 días de la OAS, este ciclo puede precisar ser repetido al menos una o dos veces por semana durante un periodo de tiempo variable que depende de la enfermedad en cuestión. En algunas infecciones, tales como la gripe del ratón, se ha demostrado que un solo ciclo de dos dosis de Poly-ICLC intranasal (1 mg/kg) protege contra el enfrentamiento al virus letal durante tanto como dos semanas, aunque los autores no continuaron específicamente la secuencia de dosis alta-dosis baja descrita en esta memoria. (Wong, Saravolac et al. 1995). Un ciclo de una sola dosis era menos eficaz. Análogamente, en el tratamiento de gliomas malignos, se encontró que menos de dos veces por semana de dosificación de Poly-ICLC resultaba ineficaz. (Salazar, Levy et al. 1996). En dicha prueba clínica satisfactoria (descrita ulteriormente en el ejemplo más adelante), la dosificación se espació a 48 horas. Así, la segunda dosis de Poly-ICLC se administró en un momento en que la OAS (y presumiblemente PKR) había alcanzado los niveles pico en sangre respecto a la primera dosis y pudo ser activada más eficazmente por el Poly-ICLC.
Pruebas clínicas de Poly-ICLC hasta la fecha han utilizado las rutas de administración intravenosa (IV) o intramuscular (IM). Wong y otros han demostrado que Poly-ICLC intranasal puede proteger contra el enfrentamiento al virus nasal en los ratones. Los autores de la presente invención han demostrado ahora que el tratamiento intranasal de primates no humanos (monos Rhesus) con Poly-ICLC dará también como resultado una respuesta sistémica fuerte tal como se mide por interferón en plasma a las 24 horas, pero no 8 horas después de la administración, y como se muestra en la Figura 1. Este resultado inesperado abre la posibilidad de la aplicación intranasal, sublingual, o tópica de Poly-ICLC para tratamiento de enfermedades sistémicas. Esto puede ser especialmente ventajoso en el tratamiento a largo plazo del cáncer o enfermedades autoinmunes, el tratamiento de gran número de individuos expuestos a una amenaza bioterrorista tal como la viruela; o para uso veterinario, como en la contención de un brote de enfermedad de fiebre aftosa en el ganado vacuno, el tratamiento del complejo respiratorio de los bovinos, la gripe aviar, o el síndrome reproductivo-respiratorio de los porcinos (PRRS).
Análogamente, sobre la base de la experiencia con el uso oral de interferón, se plantea también la hipótesis de que el Poly-ICLC administrado por vía oral o sublingual puede ser suficiente para producir una respuesta terapéutica clínica. La administración oral podría ser también especialmente ventajosa en usos humanos o veterinarios en gran escala. Finalmente, estudios anteriores en conejos demostraron protección contra vaccinia por Poly-ICLC administrado tópicamente. Esto sugiere que la administración tópica de Poly-ICLC en una preparación dermatológica o parche dérmico puede ser también eficaz para ciertas aplicaciones en humanos. (Levy y Lvovsky 1978). Se presentarán datos adicionales para abordar estas reivindicaciones.
III. Ejemplos: Un Método Mejorado para el Uso Clínico y Veterinario de Poly-ICLC
Es de esperar que Poly-ICLC, especialmente mejorado como se ha descrito arriba, podría tener aplicación para el tratamiento de una diversidad de enfermedades que incluyen ciertos trastornos neoplásticos, infecciosos, y autoinmunes.
Los ejemplos que siguen son ilustraciones, pero no limitaciones, del método. Dados estos ejemplos, una persona con experiencia ordinaria en la técnica podría aplicar el mismo método a otras enfermedades.
A) Ejemplo de Modulación Clínica de Genes por Poly-ICLC en Primates, con Inclusión del Hombre
Se trataron 8 monos Rhesus por vía intranasal con 4 ml de Poly-ICLC intranasal de concentración 2 mg/ml, seguido en 24 horas con una segunda dosis de 2 ml. Se recogieron secreciones nasales y células así como sangre en diversos intervalos y los especímenes, con inclusión de secreciones, células epiteliales nasales, plasma y glóbulos blancos se preservaron para análisis. Se presentarán los resultados, con inclusión del análisis de microrredes de RNA y ensayos de interferón.
En experimentos paralelos, se recogerá sangre de pacientes que participen en una gran prueba clínica multicentro de Poly-ICLC para pacientes con gliomas malignos. Se extraerá el RNA de los glóbulos blancos y se someterá a análisis de microrredes a fin de demostrar la activación de los genes por Poly-ICLC, incluyendo pero sin carácter limitante los genes siguientes: helicasa, proteína inducida por interferón (p56), factor de necrosis tumoral, factor regulador de interferón, metaloproteinasa de la matriz, activador del plasminógeno, proteína tumoral p53, factor de crecimiento de fibroblastos, factor 2 de iniciación eucariota, proteína asociada con filamentos de actina, y VCAM-1.
Estos estudios demostrarán no sólo el espectro de activación de genes en humanos por Poly-ICLC a dosis baja, sino que revelarán también posibles correlaciones con la respuesta tumoral. No obstante, los posibles usos terapéuticos clínicos de la capacidad para regular una diversidad de genes tan amplia se extienden más allá de los tratamientos de infecciones y neoplasmas descritos más adelante.
B) Ejemplo de Tratamiento Clínico del Cáncer: Tratamiento de Gliomas Malignos
Se administró Poly-ICLC (10 a 50 Ig/kg por vía intramuscular 1 a 3 veces por semana) durante hasta 56 meses a 38 pacientes con glioblastoma multiforme o astrocitoma anaplástico. (Salazar, Levy et al. 1996). Se encontró una toxicidad relativamente baja o nula. Veinte de 30 pacientes (66%) que recibieron al menos 2 veces por semana Poly-ICLC (con inclusión de todos los pacientes de astrocitoma anaplástico) exhibieron regresión o estabilización del tumor en aumento en MRI (mediana = disminución de volumen 65%). Sólo 2 de los 11 pacientes de astrocitoma anaplástico exhibieron subsiguientemente recurrencia del tumor mientras se trataban con Poly-ICLC, y la mayoría del grupo siguen vivos, con un seguimiento mediano libre de progresión de más de 6,5 años desde el diagnóstico (intervalo 22-134+ meses). La supervivencia mediana global es ahora 111+ meses (intervalo 34-134+). La supervivencia mediana de Kaplan-Meir para los pacientes de glioblastoma en los tratamientos de al menos dos veces por semana de Poly-ICLC era 19 meses; sólo uno se mantiene vivo (98 meses desde el diagnóstico). La respuesta tumoral estaba asociada con la activación de 2'5'-oligoadenilato-sintetasa (p = 0,03), pero no con interferón sérico, interleuquinas, o neopterina.
La respuesta tumoral sostenida de 100% o tasa estable, y la supervivencia prolongada continuada y de calidad en los pacientes de astrocitoma anaplástico en el tratamiento con Poly-ICLC contrasta favorablemente con la supervivencia mediana esperada de aproximadamente 26 meses para los pacientes de AA de diagnóstico reciente en quimioterapia tradicional. Como se ha sugerido arriba, se espera que puedan alcanzarse supervivencias mejores aún que las observadas hasta la fecha utilizando una nueva técnica de doble dosificación, como sigue:
Se administra Poly-ICLC por vía intranasal, oral, sublingual, intramuscular, intravenosa o tópica en al menos dos dosis espaciadas 4-72 horas. Preferiblemente, la primera dosis está comprendida dentro de un intervalo moderado suficiente para inducir niveles medibles pero no excesivos de interferón sérico (30 a 100 Ig/kg en humanos); y la segunda dosis, más baja, se encuentra dentro del intervalo máximo eficaz para desbloqueo y estimulación de ciertos sistemas de interferón y enzimáticos inducibles por dsRNA, con inclusión de PKR y 2'5'OAS, que alcanzan sus picos en suero aproximadamente 48 horas después de la dosificación inicial de Poly-ICLC. Para humanos, la primera dosis estaría comprendida preferiblemente en el intervalo de 30 a 100 Ig/kg y la segunda dosis estaría compre ndida preferiblemente en el intervalo de 10 a 40 Ig/kg. Con preferencia, las dosis se espaciar
ían aproximadamente 48 horas.
(Véanse datos de supervivencia actualizados no publicados en la tabla de la Figura 4)
Se espera que esto podría ser confirmado o modificado convenientemente por los expertos en la técnica, basándose en el resultado de las pruebas clínicas de fase II en curso de Poly-ICLC para pacientes con tumores cerebrales malignos.
Cierto número de cánceres comparten diversas características con los gliomas malignos, y probablemente utilizan mecanismos similares para soslayar las defensas del hospedador. Tales cánceres pueden ser también por tanto susceptibles de tratamiento con Poly-ICLC utilizando el régimen descrito en esta memoria. Los mismos incluyen melanoma, y ciertas leucemias y linfomas que comparten anormalidades en el cromosoma 9p; carcinoma de células renales; y sarcomas, cánceres de pulmón, mama y colon que aparecen junto con los gliomas en el síndrome familiar de Li-Fraumeni.
C) Ejemplo de Tratamiento Clínico de una Enfermedad Retroviral: Tratamiento del SIDA con Poly-ICLC. En una prueba piloto abierta, se administró una dosis baja (0,2-2 mg) de PICLC por vía intramuscular (IM) 1-3 veces por semana con o sin Zidovudina durante hasta 30 meses a 22 pacientes con infección de HIV o SIDA. (Salazar, Morales et al. 1990). El PICLC era bien tolerado, sin toxicidad alguna significativa clínica o de laboratorio. Los efectos secundarios consistieron en un síndrome semejante a una gripe moderada durante 12-24 horas con fiebre baja y malestar a las dosis más altas, pero desaparecían usualmente después de los 6 primeros tratamientos. 12-20 pacientes exhibían a veces aumentos iníciales espectaculares en los recuentos de células T-4 junto con mejora sintomática, aunque esto no se mantuvo uniformemente. Los títulos de P-24 en plasma (una medida de la carga viral) que eran positivos en 8/16 pacientes antes del tratamiento bisemanal, o bien se hicieron indetectables o se mantuvieron de este modo en todos menos un paciente, cuyos títulos eran notablemente elevados al comienzo y descendieron en un 75% con el tratamiento.
En un estudio separado de dosificación de PICLC en 8 pacientes de SIDA, los tests neuropsicológicos han demostrado una mejora acusada en el tiempo de reacción de elección y el test de tablero de clavijas de Purdue a las 16 semanas de tratamiento, con regreso por deterioro a la línea base cuando se interrumpió PICLC. (Salazar, Martin, Levy, et al.; no publicado). Esto contrasta con un deterioro gradual estadísticamente significativo en el tiempo de reacción de elección observado en un grupo HIV+ sin tratar (N = 41) durante 6 meses. Como se ha sugerido arriba, es de esperar que puedan alcanzarse respuestas mejores aún que las observadas hasta la fecha utilizando la nueva técnica de doble dosificación descrita en la Sección B, anterior, y representada en la Figura 5.
D) Ejemplo del Tratamiento con Poly-ICLC de un Trastorno Autoinmune: Tratamiento de la Esclerosis Múltiple. Una prueba abierta de PICLC intravenoso a dosis alta (100 Ig/kg) demostró una toxicidad aguda moderada en 15 pacientes con MS crónica; varios pacientes mejoraron o se estabilizaron, pero se deterioraron cuando se interrumpió el fármaco, como ha sido consignado por Bever, Salazar, et al., 1986. (Bever, Salazar et al. 1986) Subsiguientemente, Salazar continuó tratando algunos de estos y otros pacientes de MS con un régimen prolongado completamente nuevo utilizando dosis mucho menores de PICLC por vía intramuscular durante un periodo de tiempo más largo. Los resultados de este estudio de seguimiento no han sido publicados, y se exponen a continuación.
Métodos: Treinta y un pacientes con esclerosis múltiple crónica progresiva (CP) o exacerbante progresiva (EP) recibieron 5-100 Ig/kg de PICLC IM cada 3-14 días durante hasta 15 años; la mayoría recibieron una dosis mediana de 10 Ig/kg semanalmente.
La toxicidad se redujo notablemente hasta un malestar inconstante, moderado y transitorio. Se utilizó el Registro de Estado de Discapacidad Prolongada de Kurtzke (EDSS, que varía entre 0 (normal) y 9 (totalmente postrado en cama y dependiente) para evaluar el resultado. Como se muestra en la Figura 6, el EDSS se mantuvo estable o mejoró en 15/31 pacientes (espectacularmente en 5). Seis pacientes se deterioraron cuando se interrumpió el PICLC. Los 19 pacientes de CP exhibían un cambio mediano en el EDSS de 0,09 puntos por año durante una mediana de 60 meses; mientras que los 12 pacientes de EP exhibían una ligera mejoría (-0,1 EDSS por año) durante una mediana de 28 meses. Estas tasas se comparan muy favorablemente con las tasas de progresión esperadas en los pacientes de esclerosis múltiple sin tratar. (Téngase en cuenta que es mejor un registro Kurtzke más bajo).
Por consiguiente, PICLC IM a dosis bajas puede ser una alternativa valiosa a los beta-interferones más costosos y tóxicos para tratamiento de larga duración de la MS. Como se ha sugerido anteriormente, se espera que puedan alcanzarse tasas de respuesta mejores aún que las observadas hasta la fecha utilizando la nueva técnica de doble dosificación arriba descrita.
IV. Un método clínico para aumento de la velocidad y eficacia y reducción de la toxicidad de las vacunas, con inclusión de vacunas de virus vivos (por ejemplo, la vacuna de la viruela).
La estrategia aquí presentada está diseñada para controlar simultáneamente los efectos secundarios de las vacunas por reducción de la proliferación viral, direccionándose al mismo tiempo los antígenos relevantes para una respuesta inmune a la vacunación. Dicha estrategia lo consigue por estimulación de los mecanismos de respuesta inmediata naturales del hospedador a la infección viral, que incluyen la activación local de las células dendríticas en el momento de la vacunación por administración IM o tópica de Poly-ICLC en el momento de la vacunación.
Baron, S., A. Salazar, et al. (2003). Smallpox model: Protection by IFN and Poly-ICLC despite easive mecha
nisms. International Conference on Antiviral Research, Savannah, Georgia.
Baze, W., E. Lvovsky, et al. (1979). "Evaluation of a nuclease resistant derivative of polyI polyC (Poly-ICLC) as a radioprotective agent." Radiation Research 77: 276-284.
Bever, C., A. Salazar, et al. (1986). "Preliminary trial of poly-ICLC in chronic progressive multiple sclerosis." Neurology 36(4): 489-493.
Burgasova, M. (1977). "Study of the antiviral activity of a poly I: Poly-C complex with poly-1-lysine in monkeys."
Antibiotiki 22(5): 458-60.
Ewel, C., W. Urba, et al. (1992). "Polyinosinic-Polycytidylic acid complexed with poly-L lysine and corboxymethylcellulose in combination with interleukin 2 in patients with cancer: clinical and immunological effects." Cancer Research 52: 3005-3010.
Galabru, J., M. Katze, et al. (1989). "The binding of dsRNA and adenovirus VA1 RNA to the interferon-induced
protein kinase." European Journal of Biochemistry 178: 581-89.
Geiss, G., G. Jin, et al. (2001). "A comprehensive view of regulatio of gene expression by double-stranded RNA
mediated cell signaling." J Biol Chem 276(32): 30178-30182.
Harrington, D., D. Hlmas, et al. (1977). "Intranasal infection of monkeys with Japanese encephalitis virus: clinical response and treatment with a nuclease-resistant derivative of poly(I) poly(C)." Am. J Tropical Med Hygiene 26(6): 1191-97.
Jacobs, B. and J. Langland (1996). "When two strands are better than one: the mediators and modulators of the
cellular responses to double stranded RNA." Virology 219: 339-349.
Katze, M. G. (1992). "The war against the interferon-induced dsRNA-activated protein kinase, can viruses win?"
Journal of Interferon Research 12: 241-248.
Koromilas, A., S. Roy, et al. (1992). "Malignant transformation by a mutant of the IFN-inducible dsRNA depend
ent protein kinase." Science 257: 1685-1689.
Levy, H. and C. Bever (1988). Immune modulating effects of PICLC in mice, monkeys, and man. Applied Bioac
tive Polymers. C. Carraher and V. Foster. New York, Plenum.
Levy, H. and E. Lvovsky (1978). "Topical treatment of vaccinia virus infecton with an interferon inducer in rab
bits." J Infect Dis 137(1): 78-81.
Levy, H. and A. Salazar (1992). Interferon inducers. Interferon: Principles and Medical Applications. S. Baron, D.
Copenhaver, F. Dianzaniet al. Galveston, U. Texas Medical Branch, Galveston: 65-76.
Lvovsky, E., P. Levine, et al. (1982). "Stimulation of hematopoietic stem cells by interferon inducer in non-human primates receiving fractionated total body irradiation." Int J Radiat Oncol Biol Phys 8(10): 1721-1726.
Maluish, A., J. Reid, et al. (1985). "Immunomodulatory effect of Poly-ICLC in cancer patients." J Biol Resp Modif
4: 656-663.
Marcus, P. and M. Sekellick (2001). "Combined sequential treatment with interferon and dsRNA abrogates virus
resistance to interferon action." J. Interferon Cytokine Res 21: 423-429.
Salazar, A., H. Levy, et al. (1996). "Long-term IM Poly-ICLC treatment of malignant glioma: an open pilot study."
Neurosurgery 38(6): 1096-1104.
Salazar, A., J. Morales, et al. (1990). "Intramuscular Poly-ICLC in HIV Infection: Preliminary findings." Neurology
40(Suppl I): 238.
Stephen, E., D. Hilmas, et al. (1977). "Swine influenza virus vaccine: potentiation of antibody responses in
rhesus monkeys." Science 197: 1289-1290.
Stephen, E., M. Samos, et al. (1977). "Effect of a nuclease resistant derivative of polyriboinosinic
polyribocytidylic acid complex on yellow fever in rhesus monkeys." J Infect Dis 136(1): 122-6.
5 Talmadge, J. and D. Hartman (1985). "Optimization of an immunotherapeutic protocol with Poly-ICLC." Journal of Biological Response Modifiers 4: 484-489.
Wong, J., E. Saravolac, et al. (1995). "Prophylactic and therapeutic efficacies of poly(ICLC) against respiratory
influenza A virus infection in mice." Antimicrob Agents Chemother 39(11): 2574-2576.
Worthington, M. and S. Baron (1973). "Effect of poly IC and antibody on infection of immunosuppressed mice 10 with vaccinia virus." J Infect Dis 128(3): 308-11.
Si bien se ilustra con respecto a un método para producir grandes lotes de Poly-ICLC final estéril adecuados para uso clínico con toxicidad reducida a niveles de dosis eficaces, y un método de utilización de Poly-ICLC para regulación de genes y tratamiento de ciertas condiciones de enfermedad, la invención puede aplicarse a cualquier método para producir grandes lotes de Poly-ICLC final estéril adecuados para uso clínico con toxicidad reducida a niveles de
15 dosis eficaces, y un método de utilización de Poly-ICLC para regulación de genes que utiliza las mismas técnicas, modificado para adaptación a un método de producción de grandes lotes de Poly-ICLC final estéril adecuados para uso clínico con toxicidad reducida a niveles de dosis eficaces, y un método para utilización de Poly-ICLC a fin de regular ciertos genes de una manera que sería conocida para un experto en la técnica.
Claims (7)
- REIVINDICACIONES1.-Un método modificado mejorado para la fabricación a escala de producción de grandes lotes estériles de grado clínico de Poly-ICLC, un complejo de RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico de alto peso molecular, poli-L-lisina de peso molecular bajo, y carboximetilcelulosa, que tiene mayor exactitud de suministro de fármaco en aplicaciones clínicas, y potencia biológica y actividad de inducción de interferón incrementadas en primates, que comprende los pasos de:producir un RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico utilizando una solución de componente ácido poliinosínico en un proceso que comprende clarificar la solución de ácido poliinosínico por calentamiento a aproximadamente 35ºC antes de esterilización por filtración;añadir una solución de componente poli-L-lisina muy lentamente a una solución de componente carboximetilcelulosa durante un periodo de al menos 4 días, y mezclar durante todo el tiempo de mezcladura con energía suficiente para formar un torbellino y minimizar la formación de precipitado, seguido por adición del RNA bicatenario de ácido polirriboinosínico-polirribocitidílico,en donde la viscosidad de la carboximetilcelulosa se reduce por calentamiento a aproximadamente 35ºC, pero no más de 40ºC, a fin de hacer posible un torbellino satisfactorio mientras se realiza la mezcladura.
- 2.-El método de la reivindicación 1 en donde la evaporación debida al calentamiento se contrarresta por adición de agua estéril para inyección durante el proceso de mezcladura.
- 3.-Poly-ICLC producido por un método de acuerdo con la reivindicación 1, para uso en el tratamiento de una enfermedad seleccionada del grupo constituido por tumores cerebrales malignos, melanoma, cáncer de mama y de pulmón, cáncer de colon, sarcomas, cáncer de células renales, leucemias, infecciones microbianas que incluyen gripe, infecciones de flavivirus, virus del Nilo Occidental, encefalitis japonesa, dengue, fiebre amarilla, coronavirustales como SARS, filovirus tales como el virus Ébola, gripe, poxvirus tales como vaccinia y viruela, adenovirus, hepatitis, infecciones de herpesvirus, HIV, SIDA, encefalitis de los equinos, virus de la fiebre aftosa, complejo respiratorio de los bovinos, virus del síndrome reproductivo-respiratorio de los porcinos, esclerosis múltiple, síndrome Guillain Barre, neuropatías inmunes, vasculitis y radiación ionizante, por administración del mismo por vía intranasal, oral, sublingual, intramuscular, intravenosa, transdérmica o tópica en al menos dos dosis espaciadas 4-72 horas en donde la primera dosis está comprendida en un intervalo moderado de 20 a 100 Ig/kg en humanos suficiente para inducir niveles medibles pero no excesivos de interferón sérico; y la segunda dosis, más baja, está comprendida en el intervalo de eficacia máxima de 10 a 50Ig/kg en humanos para desbloqueo y estimulación de cierto s sistemas enzimáticos inducibles por interferón y dsRNA, con inclusión de PKR y 2'5'OAS.
- 4.-Poly-ICLC producido por un método de acuerdo con la reivindicación 1, para uso en el tratamiento de una enfermedad de acuerdo con la reivindicación 3 en donde los ciclos de dosis deben repetirse semanalmente o dos veces por semana durante meses a años.
- 5.-Poly-ICLC producido por un método de acuerdo con la reivindicación 1, para uso en el mejoramiento de la acción y reducción de la toxicidad de una vacuna por administración del Poly-ICLC a un individuo, y administración de la vacuna deseada a dicho individuo.
- 6.-Poly-ICLC producido por un método de acuerdo con la reivindicación 1, para uso en el mejoramiento de la acción de una vacuna contra la viruela de acuerdo con la reivindicación 5.
- 7.-Poly-ICLC producido por un método de acuerdo con la reivindicación 1, para uso en la regulación correctora de la expresión anormal de un gen codificante de helicasa, proteína inducida por interferón (p56), factor de necrosis tumoral factor regulador del interferón, metaloproteinasa de la matriz, activador del plasminógeno, proteína tumoral p53, factor de crecimiento de fibroblastos, factor 2 de iniciación eucariota, proteína asociada con filamentos de actina, o VCAM-1 por administración de una dosis eficaz en el intervalo de 10-40 microgramos por kg de peso corporal a un paciente que se encuentra en necesidad de tratamiento, a fin de estimular la respuesta temprana innata del hospedador de dicho paciente, repitiéndose dicha dosis a intervalos de 24-72 horas.Figura 1. Respuesta Sistémica a una Dosis Intranasal Simple de Poly-ICLC en Monos Rhesus Línea Base de Título de Interferón Título de interferón en Plasma a lasMono # en plasma (U. Intl.) 24 Horas (U. Intl.)Figura 2. Inducción de Interferón en Monos Rhesus por 2 mg/kg IV de Poly-ICLC Como se Describe en la Presente Solicitud (Lote #RBP 1005) (Compárese con la Tabla II en Levy '82, Patente #4349538, Tratamiento con 3 mg/kg PICLC)Figura 3. Test de Partículas (Claridad) de los Componentes de Poly-ICLC y Producto Final Como se Describe en la Presente Solicitud 10-25micrómetros > 25 micrómetros Componentes: Solución Poly I: 29,4/ml 0,9 Solución Poly C: 16/ml 1,7 Solución de poli-lisina: 94,8/ml 3,4 Solución de carboximetilcelulosa: 199,6/ml 40,4 Poli-ICLC (método mejorado) 731/envase 110Poli-ICLC (método antiguo) > 5.500 > 500Tabla 4: Porcentaje de Supervivencia de los Pacientes de Glioma Maligno Tratados con Poly-ICLCSupervivencia GBM AA AA (pf) 12 pacientes 11 pacientes 11 pacientesGBM = glioblastoma, AA = astrocitoma anaplástico, pf = supervivencia exenta de progresión,† = Supervivencia esperada durante el tratamiento estándar con radiación y quimioterapia.Figura 5. Tratamiento con Poly-ICLC del SIDA, Carga Viral
- Grupo I: Poly-ICLC Más Azt
- PACIENTE
- Antigenemia P24 (pcg/ml)
- Número
- Base 4 meses 8 meses 12 meses 16 meses 20 meses 24 meses 30 meses
- PR-O1
- 89 15 21 305 D D D D
- PR-O2
- 45 20 140 - D D D D
- PR-O3
- 0 80 34 - D D D D
- PR-O4
- 0 - 78 0 0 0 0 -
- PR-05
- 0 - - - - - - -
- PR-06
- 200 - 310 D D D D D
- PR-O7
- - 346 35 - D D D D
- PR-O8
- - 78 42 0 0 0 0 -
- 04-056
- 12 0 57 - D D D D
- PR-10
- 72 - - 0 0 0 - -
- PR-11
- 80 37 - 0 0 0 - -
- PR-12
- 76 37 - 0 0 0 - -
- PR-13
- 85 - 16 11 0 D D D
- PR-16
- 0 0 0 0 - - - -
- PR-24
- 0 0 0 0 - - - -
- PACIENTE
- Antigenemia P24 (pcg/ml)
- Número
- Base 4 meses 8 meses 12 meses 16 meses 20 meses 24 meses 30 meses
- PR-15
- 0 0 0 D D
- PR-17
- 0 0 0 0 -
- PR-18
- 0 - 0 0 -
- PR-19
- 117 31 D D D
- PR-20
- 0 0 0 0 -
- PR-21
- 0 0 0 0 -
- PR-22
- 0 0 0 0 -
- PR-23
- 808 704 440 200 -
- "-" = No realizado
16Figura 6. Tratamiento con Poly-ICLC de la Esclerosis Múltiple ProgresivaEDSS-E = Registro del estado de discapacidad de Kurtzke a la entrada; EDSS-L = EDSS en el último examen; rango de EDSS desde 1 (MS moderada) a 9 (totalmente discapacitado) AI-E = índice de ambulación a la entrada en el estudio; AI-L = AI en el último examen AI varía desde 1 (discapacidad mínima) a 9 (postrado en cama)
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US39371302P | 2002-07-03 | 2002-07-03 | |
US393713P | 2002-07-03 | ||
PCT/US2003/020828 WO2005102278A1 (en) | 2002-07-03 | 2003-07-01 | Method for preparation of poly-iclc and uses thereof |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2378150T3 true ES2378150T3 (es) | 2012-04-09 |
Family
ID=35196710
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES03819324T Expired - Lifetime ES2378150T3 (es) | 2002-07-03 | 2003-07-01 | Método para la preparación de poly-ICLC y sus usos |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7439349B2 (es) |
EP (1) | EP1778186B1 (es) |
AT (1) | ATE535231T1 (es) |
AU (1) | AU2003248791A1 (es) |
ES (1) | ES2378150T3 (es) |
WO (1) | WO2005102278A1 (es) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2351576A1 (en) * | 2004-12-29 | 2011-08-03 | Mannkind Corporation | Methods to trigger, maintain and manipulate immune responses by targeted administration of biological response modifiers into lymphoid organs |
EP1723971A1 (en) * | 2005-05-20 | 2006-11-22 | Immunoclin Limited | Methods and compositions for the treatment of viral diseases |
CN101605548B (zh) * | 2006-11-03 | 2012-10-17 | 由国防部长代表的加拿大女王陛下 | 预防性治疗禽流感病毒感染的脂质体包裹的聚-iclc方法 |
MX2009009530A (es) * | 2007-03-07 | 2010-05-19 | Nventa Biopharmaceuticals Corp | Composiciones de acidos nucleicos cerrados bicatenarios. |
US20090088401A1 (en) * | 2007-09-27 | 2009-04-02 | Andres Salazar | In-situ cancer autovaccination with intratumoral stabilized dsRNA viral mimic |
EP2275085A1 (en) | 2009-07-07 | 2011-01-19 | University of Rostock | Biodegradable copolymer suitable for delivering nucleic acid materials into cells |
US8569255B2 (en) | 2011-02-02 | 2013-10-29 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence | Post-exposure therapy of influenza A infections |
EP2744502B1 (en) * | 2011-08-17 | 2016-03-30 | Oregon Health & Science University | Methods useful in the prevention of hypoxic injury |
AU2014302082B2 (en) | 2013-06-28 | 2019-08-08 | Baylor Research Institute | Dendritic cell ASGPR targeting immunotherapeutics for multiple sclerosis |
WO2015035128A1 (en) * | 2013-09-06 | 2015-03-12 | Vaxin Inc. | Methods and compositions for viral vectored vaccines |
CH713097B1 (de) | 2015-11-17 | 2019-07-15 | Bioncotech Therapeutics S L | Neue pharmazeutische Zusammensetzung umfassend Partikel umfassend einen Komplex eines doppelsträngigen Polyribonukleotids und eines Polyalkylenimins. |
AU2017414660A1 (en) | 2017-05-17 | 2020-01-02 | Highlight Therapeutics, S.L. | Novel pharmaceutical composition comprising particles comprising a complex of a double-stranded polyribonucleotide and a polyalkyleneimine |
WO2021003365A1 (en) | 2019-07-03 | 2021-01-07 | Aim Immunotech Inc. | Compositions and methods useful for ebola virus infection |
NL2027383B1 (en) | 2020-01-24 | 2022-04-06 | Aim Immunotech Inc | Methods, compositions, and vaccines for treating a virus infection |
US20220387472A1 (en) | 2020-09-21 | 2022-12-08 | Aim Immunotech Inc. | Compositions and methods for treating cancer |
WO2022235984A1 (en) | 2021-05-05 | 2022-11-10 | Aim Immunotech Inc. | Methods and compositions for treating neuroinflammation |
WO2022271199A1 (en) * | 2021-06-21 | 2022-12-29 | Oncovir, Inc. | Method for prophylaxis and attenuation of covid-19 and other inflammatory microbial acute respiratory disease syndromes through modulation of innate and adaptive immunity with poly- iclc |
AR126610A1 (es) * | 2021-07-30 | 2023-10-25 | Andres Salazar | Actividad biológica multidimensional optimizada de poli-iclc con tamaño y formulación de componentes controlados |
NL2032813A (en) | 2021-08-20 | 2023-02-27 | Aim Immunotech Inc | Compositions and methods for treating post-covid conditions of fatigue |
NL2033127A (en) | 2021-09-24 | 2023-03-29 | Aim Immunotech Inc | Compositions and methods for enhancing and expanding infection induced immunity |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1364987A (en) * | 1971-06-19 | 1974-08-29 | Merck Patent Gmbh | Biologically active two component complexes |
US4024241A (en) * | 1974-09-27 | 1977-05-17 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health, Education And Welfare | Nuclease-resistant hydrophilic complex of polyriboinosinic-polyribocytidylic acid |
US4349538A (en) * | 1979-12-07 | 1982-09-14 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Nuclease-resistant hydrophilic complex of polyriboinosinic-polyribocytidylic acid |
US4388306A (en) * | 1980-06-04 | 1983-06-14 | Merck & Co., Inc. | Pharmaceutical composition comprising modified polyriboinosinic-polyribocytidylic acid, for induction of interferon in primates |
US4389395A (en) * | 1981-01-09 | 1983-06-21 | Lerner A Martin | Low molecular weight complex of polyriboinosinic-polyribocytidylic acid and method of inducing interferon |
JPS5993097A (ja) * | 1982-11-16 | 1984-05-29 | Yamasa Shoyu Co Ltd | ポリヌクレオチド複合体 |
CA2203843C (en) * | 1997-04-28 | 2013-07-23 | Her Majesty The Queen, In Right Of Canada, As Represented By The Ministe R Of National Defence | Liposome-encapsulated poly iclc |
AT410173B (de) * | 2000-06-08 | 2003-02-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Antigene zusammensetzung |
-
2003
- 2003-07-01 ES ES03819324T patent/ES2378150T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-07-01 EP EP03819324A patent/EP1778186B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-07-01 AT AT03819324T patent/ATE535231T1/de active
- 2003-07-01 AU AU2003248791A patent/AU2003248791A1/en not_active Abandoned
- 2003-07-01 US US10/611,614 patent/US7439349B2/en active Active
- 2003-07-01 WO PCT/US2003/020828 patent/WO2005102278A1/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1778186B1 (en) | 2011-11-30 |
US7439349B2 (en) | 2008-10-21 |
EP1778186A1 (en) | 2007-05-02 |
ATE535231T1 (de) | 2011-12-15 |
AU2003248791A1 (en) | 2005-11-09 |
WO2005102278A1 (en) | 2005-11-03 |
US20040005998A1 (en) | 2004-01-08 |
EP1778186A4 (en) | 2007-05-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2378150T3 (es) | Método para la preparación de poly-ICLC y sus usos | |
ES2240745T3 (es) | Composicion farmaceutica que contiene un arnm estabilizado y optimizado para la traduccion, adecuada como vacuna y como regenerante de tejidos. | |
ES2699965T3 (es) | Una combinación de rosa de bengala y anticuerpo anti-CTLA4 para su uso en el tratamiento del cáncer | |
ES2380107T3 (es) | Combinación de inmunogenoterapia y quimioterapia para el tratamiento del cáncer y enfermedades hiperproliferativas | |
ES2260916T3 (es) | Preparacion en polvo para administracion a traves de la mucosa que contiene una medicina polimerica. | |
EP0906119B1 (en) | Stimulation of host defense mechanisms against cancer | |
US8592391B2 (en) | Method for therapeutic, clinical and veterinary use poly-ICLC | |
US20130315952A1 (en) | Administration of interferon for prophylaxis against or treatment of pathogenic infection | |
JP5209180B2 (ja) | トリインフルエンザ感染の治療 | |
KR20150102995A (ko) | 경비 인플루엔자 백신 조성물 | |
US20220370447A1 (en) | Method of treating hbv infection using a core protein allosteric modulator | |
EP2345415B1 (en) | Therapeutic/prophylactic agent for prostate cancer | |
ES2440951T3 (es) | Vectores adenovirales que expresan la interleucina-12 de cadena sencilla y el ligando 4-1BB | |
EP3484500A1 (en) | Uses of il-12 as a replacement immunotherapeutic | |
JP2011500011A (ja) | 癌治療用の組合せ製品 | |
CN118055775A (zh) | 包括hsp90抗原肽的抗癌用疫苗组合物及其用途 | |
ES2260794T3 (es) | Estimulacion de los mecanismos de defensa del huesped contra los tumores. | |
CN111344005A (zh) | 经鼻乙型肝炎疫苗组合物及其制备方法 | |
CN101347616B (zh) | 一种新型安全的jy免疫佐剂系统的组方及其应用 | |
RU2773357C2 (ru) | Назальная вакцинная композиция против гепатита b и способ ее получения | |
KR102673991B1 (ko) | 경비 b형 간염 백신 조성물 및 그 제조방법 | |
WO2023009171A2 (en) | Optimized multidimensional biological activity of poly-iclc with controlled component size and formulation | |
Steinmann et al. | Clinical experiences with interferon‐U and interferon‐Y | |
Eron | Interferons | |
CN112368018A (zh) | 乙肝疫苗的经鼻给药系统 |