ES2349675T3 - Compuestos de indolona útiles para tratar la alteración cognitiva. - Google Patents

Abstract

El uso de un compuesto que tiene la estructura: en la que cada uno de Y1, Y2, Y3 e Y4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7 o cicloalquenilo C5-C7, -F, -Cl, -Br o -I; -NO2; -N3; -CN; -OR4, ­ SR4, -OCOR4, -COR4, -NCOR4, -N(R4)2, -CON(R4)2 o -COOR4; arilo o heteroarilo; o dos cualesquiera de Y1, Y2, Y3 e Y4 presentes en átomos de carbono adyacentes pueden constituir un grupo metilendioxi; en la que cada R4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, arilo o arilalquilo (C1-C6); en la que A es A', alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, arilo, heteroarilo, arilalquilo (C1­ C6) o heteroarilalquilo (C1-C6); en la que A' es en la que cada uno de R1 y R2 es independientemente -H, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2 o -CN; en la que R3 es -H, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -OR6 arilo o heteroarilo; en la que R5 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -N(R4)2, -OR6 o arilo; en la que R6 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada o arilo; en la que B es arilo o heteroarilo; con la condición, sin embargo, de que si B es arilo o heteroarilo, el átomo de carbono o los átomos de carbono situados orto con respecto al átomo de nitrógeno del enlace imina sólo puedan estar sustituidos con uno o más de los siguientes: ­ H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, metilo, etilo o metoxi; en la que cada n es independientemente un número entero de 1 a 4 inclusive; en la que el compuesto es un isómero de imina Z puro, un isómero de imina E puro o una mezcla de isómeros de imina Z y E; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria en un sujeto, siendo la alteración de la memoria una alteración de la memoria contextual o una alteración de la memoria de reconocimiento de objetos.

Description

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Se estima que de cuatro a cinco millones de norteamericanos (aproximadamente el 2% de todas las edades y el 15% de los mayores de 65) tienen alguna forma y grado de alteración cognitiva. La alteración cognitiva, o reducción de las funciones cognitivas, se produce comúnmente en asociación con trastornos o afecciones del sistema nervioso central (SNC).

Generalmente, la cognición se refiere al proceso por el que se adquieren, se conservan y se usan conocimientos por los sujetos. Tanto la memoria como el pensamiento están implicados en el almacenamiento, recuperación y manipulación de la información. Los trastornos cognitivos son anomalías del pensamiento y de la memoria que se asocian con disfunción cerebral temporal o permanente. Sus síntomas principales incluyen problemas con la memoria, la orientación, el lenguaje, el procesamiento de la información y la capacidad para centrarse y mantener la atención en una tarea. Los ejemplos de trastornos o afecciones del SNC descritos en la presente invención incluyen alteración de la memoria asociada a la edad (AMAE); alteración cognitiva leve (ACL), delirio (también conocido como estado confusional agudo); demencia (a veces clasificada adicionalmente como demencia de tipo Alzheimer o no Alzheimer); enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Parkinson; enfermedad de Huntington (también conocida como corea); retraso metal (por ejemplo, síndrome de Rubinstein-Taybi y síndrome de Down); enfermedad cerebrovascular (por ejemplo, demencia vascular, cirugía postcardiaca); trastornos afectivos; trastornos psicóticos; autismo (también conocido como síndrome de Kanner), trastornos neuróticos; trastorno por déficit de atención (TDA); hematoma subdural; hidrocefalia de presión normal; tumor cerebral; traumatismo craneal (trastorno postcontusional) y traumatismo cerebral (véase, DSM-IV, APA 1994). Se describen trastornos amnésicos y cognitivos con o sin una causa establecida en el DSM-IV. Otros trastornos cognitivos especificados en el DSM-IV incluyen trastornos del aprendizaje, de las habilidades motoras y de las habilidades de comunicación (IPSM-IV 315.00-315.39). Para los fines de la presente invención, los términos alteración cognitiva y trastorno cognitivo se considera que abarcan las mismas indicaciones terapéuticas. Por consiguiente, los términos alteración cognitiva y trastorno cognitivo se usan indistintamente por toda la presente solicitud.

La alteración cognitiva se manifiesta típicamente por uno o más déficits cognitivos. La alteración de la memoria es un déficit cognitivo caracterizado por la incapacidad para aprender nueva información o para recordar información previamente aprendida. La afasia es un déficit cognitivo caracterizado por una alteración del lenguaje y/o del discurso. La apraxia es un déficit cognitivo caracterizado por la capacidad alterada para realizar actividades motoras a pesar de una función motora intacta de acuerdo con el DSM-IV. La agnosia es un déficit cognitivo caracterizado por la falta de reconocimiento o identificación de objetos a pesar de una función sensitiva intacta (como se describe en DSM-IV). La alteración cognitiva también puede manifestarse por una alteración en la función ejecutiva (es decir, planeamiento, organización, secuenciación, resumen). La presente invención se refiere al tratamiento de un sujeto que padece una alteración cognitiva o un trastorno cognitivo, en el que la alteración cognitiva o el trastorno cognitivo se manifiesta por uno o más de los déficit cognitivos descritos en el presente documento, según se especifica en las reivindicaciones.

La alteración cognitiva, o reducción de la función cognitiva, causa una alteración significativa del funcionamiento social y/o ocupacional que puede interferir con la capacidad de un individuo para realizar actividades de la vida diaria y afecta enormemente a la autonomía y la calidad de vida del individuo.

Por consiguiente, existe la necesidad de terapias para tratar trastornos cognitivos y alteraciones cognitivas. Se ha descubierto ahora que los compuestos de indolona de la presente invención muestran efectos potentes en modelos de alteración cognitiva, llenando por lo tanto este vacío en el estado actual de la técnica. Los solicitantes observaron además que los compuestos de indolona descritos en el presente documento se han caracterizado previamente como antagonistas del receptor GALR3 (véase el documento WO 02/060392), confirmando de este modo la teoría más amplia de que los antagonistas del receptor GALR3 pueden ser útiles para tratar trastornos cognitivos.

El documento WO-A-2004/014307 desvela el uso de derivados de pirimidina e indolona que son antagonistas selectivos para el receptor GALR3 para el tratamiento del dolor neuropático y otras anomalías, incluyendo trastornos cognitivos y trastornos de la memoria tales como enfermedad de Alzheimer.

El documento WO-A-2004/014376 desvela derivados de pirimidina e indolona que son antagonistas selectivos para el receptor de GAL3 y que son útiles para el tratamiento de trastornos afectivos, tales como depresión o trastorno de ansiedad generalizada, o para reducir los síntomas de la ansiedad generalizada, tal como la dificultad para concentrarse o que la mente se quede en blanco. SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere al uso de un compuesto que tiene la estructura:

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en la que cada uno de Y1, Y2, Y3 e Y4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7 o cicloalquenilo C5-C7; -F, -Cl, -Br o -I; -NO2; -N3;

5 CN; -OR4, -SR4, -OCOR4, -COR4, -NCOR4, -N(R4)2, -CON(R4)2 o -COOR4; arilo o heteroarilo; o dos cualesquiera de Y1, Y2, Y3 e Y4 presentes en átomos de carbono adyacentes pueden constituir un grupo metilendioxi;

en la que cada R4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o 10 ramificada; cicloalquilo C3-C7; cicloalquenilo C5-C7, arilo o arilalquilo (C1-C6); en la que A es A', alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, arilo; heteroarilo, arilalquilo (C1-C6) o heteroarilalquilo (C1-C6); en la que A' es

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en la que cada uno de R1 y R2 es independientemente -H, alquilo C1-C7 de cadena lineal

o ramificada,

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F, -Cl, -Br, -I, -NO2 o -CN; en la que R3 es -H, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, 20 CN, -OR6, arilo o heteroarilo;

en la que R5 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -N(R4)2, -OR6 o arilo;

en la que R6 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada o arilo;

en la que B es arilo o heteroarilo; con la condición, sin embargo, de que si B es arilo o heteroarilo, el átomo de carbono o los átomos de carbono situados orto con respecto al átomo de nitrógeno del enlace imina sólo puedan estar sustituidos con uno o más de los siguientes: H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, metilo, etilo o metoxi;

en la que cada n es independientemente un número entero de 1 a 4 inclusive;

en la que el compuesto es un isómero de imina Z puro, un isómero de imina E puro o una mezcla de isómeros de imina Z y E;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria en un sujeto, siendo la alteración de la memoria una alteración de la memoria contextual o una alteración de la memoria de reconocimiento de objetos. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS

Figura 1: Efectos del Compuesto 2 sobre la memoria contextual en ratones. 5 mg/kg, 10 mg/kg y 30 mg/kg de Compuesto 2 facilitaron significativamente la congelación frente al contexto 24 horas después del entrenamiento. Todas las dosificaciones de vehículo y Compuesto 2 se administraron por vía intraperitoneal (i.p.).

Figura 2: Efectos del Compuesto 2 sobre la memoria contextual en ratones. Una sola dosis de 1 mg/kg o 30 mg/kg de Compuesto 2 mejoró significativamente la memoria contextual a las 24 h en ratones. Todas las dosificaciones de vehículo y Compuesto 2 se administraron por vía oral.

Figura 3: Efectos del Compuesto 2 sobre la memoria contextual en ratones. Inyecciones de 1 mg/kg y 5 mg/kg de Compuesto 2 veinte (20) minutos antes del entrenamiento mejoraron el déficit de memoria a largo plazo en ratones C57BL/6. Todas las dosificaciones de vehículo y Compuesto 2 se administraron por vía intraperitoneal (i.p.). DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere al uso de un compuesto que tiene la estructura:

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en la que cada uno de Y1, Y2, Y3 e Y4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7 o cicloalquenilo C5-C7; -F, -Cl, -Br o -I; NO2; -N3; CN; -OR4, -SR4, -OCOR4, -COR4, -NCOR4, -N(R4)2, -CON(R4)2 o -COOR4; arilo o heteroarilo; o

5 dos cualesquiera de Y1, Y2, Y3 e Y4 presentes en átomos de carbono adyacentes pueden constituir un grupo metilendioxi;

en la que cada R4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, arilo o arilalquilo (C1-C6);

10 en la que A es A', alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, arilo, heteroarilo, arilalquilo (C1-C6) o heteroarilalquilo (C1-C6); en la que A' es

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15 en la que cada uno de R1 y R2 es independientemente H, alquilo C1-C7 de cadena lineal

o ramificada, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2 o -CN; en la que R3 es H, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -OR6, arilo o heteroarilo; en la que R5 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -N(R4)2, -OR6 o arilo; 20 en la que R6 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada o arilo;

en la que B es arilo o heteroarilo; con la condición, sin embargo, de que si B es arilo o heteroarilo, el átomo de carbono o los átomos de carbono situados orto con respecto al átomo de nitrógeno del enlace imina sólo puedan estar sustituidos con uno o más de los siguientes: H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, metilo, etilo o metoxi;

25 en la que cada n es independientemente un número entero de 1 a 4 inclusive; en la que el compuesto es un isómero de imina Z puro, un isómero de imina E puro o una mezcla de isómeros de imina Z y E;

o una sal farmacéuticamente aceptable de mismo, para la fabricación de un

medicamento para el tratamiento de una alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria en un sujeto, siendo dicha alteración de la memoria una alteración de la memoria contextual o una alteración de la memoria de reconocimiento de objetos.

En la presente invención, la expresión "alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada" se refiere a un resto hidrocarburo saturado que tiene de uno a siete átomos de carbono inclusive. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen metilo, etilo, 1-propilo, 2-propilo, 1-butilo, 2butilo, 2-metil-2-propilo y 2-metil-1-propilo. El término "alquenilo C2-C7" se refiere a un resto hidrocarburo mono-insaturado que tiene de dos a siete átomos de carbono inclusive. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen etenilo, prop-1-en-1-ilo, prop-1-en-2-ilo, prop-2-en-1ilo, but-3-en-2-ilo y hept-2-en-1-ilo. El término "alquinilo C3-C7" se refiere a un resto hidrocarburo que tiene de tres a siete átomos de carbono y que contiene un triple enlace carbono-carbono. Los ejemplos de dichos sustituyentes incluyen prop-1-inilo, prop-2-inilo, pent2-inilo, 4,4-dimetilpent-2-inilo, 5-metilhex-3-in-2-ilo y hept-3-inilo.

Como se usa en la presente invención, el término "cicloalquilo" incluye restos cicloalquilo C3-C7 que pueden estar sustituidos con uno o más de los siguientes: -F, -NO2, -CN, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, polifluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, alquenilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada, alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada, cicloalquilo C3-C7, monofluorocicloalquilo C3-C7, polifluorocicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, -N(R4)2, -OR4, COR4, -NCOR4, -CO2R4, -CON(R4)2 o (CH2)n-O-(CH2)m-CH3, siendo cada m independientemente un número entero de 0 a 2 inclusive.

Como se usa en la presente invención, el término "cicloalquenilo" incluye restos cicloalquenilo C5-C7 que pueden estar sustituidos con uno o más de los siguientes: -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, polifluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, alquenilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada, alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada, cicloalquilo C3-C7, monofluorocicloalquilo C3-C7, polifluorocicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, -N(R4)2, -OR4, COR4, -NCOR4, -CO2R4, -CON(R4)2 o (CH2)n-O-(CH2)m-CH3, siendo cada m independientemente un número entero de 0 a 2 inclusive.

En la presente invención, el término "heteroarilo" se usa para incluir anillos insaturados de cinco y seis miembros que pueden contener uno o más átomos de oxígeno, azufre o nitrógeno. Los ejemplos de grupos heteroarilo incluyen furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo y triazinilo.

Además, el término "heteroarilo" se usa para incluir sistemas de anillos bicíclicos

condensados que pueden contener uno o más heteroátomos tales como oxígeno, azufre y nitrógeno. Los ejemplos de dichos grupos heteroarilo incluyen indolizinilo, indolilo, isoindolilo, benzo[b]furanilo, benzo[b]tiofenilo, indazolilo, benzoimidazolilo, purinilo, benzoxazolilo, benzoisoxazolilo, benzo[b]tiazolilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo, cinnolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 1,8-naftiridinilo, pteridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, ftalimidilo y 2,1,3benzotiazolilo.

El término "heteroarilo" también incluye los restos químicos enumerados anteriormente que pueden estar sustituidos con uno o más de los siguientes: -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, polifluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, alquenilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada, alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada, cicloalquilo C3-C7, monofluorocicloalquilo C3-C7, polifluorocicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, -N(R4)2, -OR4, COR4, -NCOR4, -CO2R4, -CON(R4)2 o (CH2)n-O-(CH2)m-CH3, siendo cada m independientemente un número entero de 0 a 2 inclusive.

El término "heteroarilo" incluye adicionalmente los N-óxidos de los restos químicos enumerados anteriormente que incluyen al menos un átomo de nitrógeno.

En la presente invención, el término "arilo" es fenilo o naftilo. El término "arilo" también incluye fenilo y naftilo que pueden estar sustituidos con uno o más de los siguientes: -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, polifluoroalquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, alquenilo C2C7 de cadena lineal o ramificada, alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada, cicloalquilo C3C7, monofluorocicloalquilo C3-C7, polifluorocicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, -N(R4)2, OR4, -SR4, -OCOR4, -COR4, -NCOR4, -CO2R4, -CON(R4)2 o (CH2)n-O-(CH2)m-CH3, siendo cada m independientemente un número entero de 0 a 2 inclusive.

La presente invención también se refiere al uso de un compuesto que tiene la estructura:

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en la que cada R24 es independientemente uno o más de los siguientes: H, F, Cl, Br, I, CF3 u OCH3; en la que R25 es metilo, etilo, alilo o fenilo y el fenilo está opcionalmente sustituido con 5 un F. Cl, Br, CF3 u OR4; y

en la que cada R4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, arilo o arilalquilo (C1-C6), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para el

10 tratamiento de una alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria en un sujeto, siendo la alteración de la memoria una alteración de la memoria contextual o una alteración de la memoria de reconocimiento de objetos. En los usos descritos en el presente documento, el compuesto contiene un enlace imina, que puede tener potencialmente una estereoconfiguración Z o E. En una realización de

15 cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es un isómero de imina Z puro. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es un isómero de imina E puro. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es una mezcla de isómeros de imina Z y E. En los usos descritos en el presente documento, el compuesto puede contener un

20 enlace alqueno, que puede tener potencialmente una estereoconfiguración Z o E. Por ejemplo, el compuesto puede contener un grupo Y2 unido a la posición 5 de un sistema de anillos indolona, en el que Y2 es but-2-en-1-ilo. Dicho grupo butenilo puede tener potencialmente una estereoconfiguración Z o E. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es un isómero de alqueno Z puro. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es un isómero de alqueno E puro. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es una mezcla de isómeros de alqueno Z y E.

5 En los usos descritos en el presente documento, el compuesto puede contener uno o más restos que pueden tener quiralidad. Dichos restos pueden incluir átomos quirales o sistemas de anillos cuadrivalentes con rotación restringida, dando lugar a planos de asimetría perpendicular. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es enantiomérica o diastereoméricamente puro. En una realización

10 de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es enantiomérica

o diastereoméricamente puro. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es una mezcla de enantiómeros. En una realización de cualquiera de los usos descritos en el presente documento, el compuesto es una mezcla de diastereómeros.

15 En una realización, el compuesto es para administrarse por vía oral. En una realización, el compuesto tiene la estructura:

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en la que cada uno de Y1, Y2, Y3 e Y4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de

cadena lineal o ramificada, -CF3, -F, -Cl, -Br, -I, -OR4, -N(R4)2 o -CON(R4)2;

en la que cada R4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o

ramificada, -CF3 o fenilo;

en la que A es A', alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, arilo, heteroarilo,

arilalquilo (C1-C6) o heteroarilalquilo (C1-C6); y

en la que A' es En una realización, B es heteroarilo. En otra realización, B es arilo.

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En una realización, B es fenilo y el fenilo está opcionalmente sustituido con uno o más de los siguientes: -H, -F, -Cl, -Br, -CF3, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -N(R4)2, OR4, -COR4, -NCOR4, -CO2R4 o -CON(R4)2,

En una realización, A es arilo. En otra realización, A es heteroarilo. En una realización, el compuesto se selecciona entre el grupo que consiste en:

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y

En una realización, el compuesto se selecciona entre el grupo que consiste en:

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y

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En una realización, A es A' y A' es

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En una realización, el compuesto es:

o

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En una realización, A es arilo. En otra realización, B es arilo. En una realización, A es heteroarilalquilo (C1-C6). En una realización, el compuesto es:

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También se desvela el tratamiento de un sujeto que padece una alteración cognitiva, que comprende administrar al sujeto una cantidad de cualquiera de los compuestos descritos en el presente documento eficaz para tratar la alteración cognitiva del sujeto.

Como se ha analizado previamente, los trastornos cognitivos son anomalías del pensamiento y de la memoria que se asocian con una disfunción cerebral temporal o permanente. La invención reivindicada se dirige al tratamiento de trastornos cognitivos y alteraciones cognitivas, que comprende administrar cantidades terapéuticamente eficaces de los compuestos de indolona descritos en el presente documento, como se especifica en las reivindicaciones.

Los ejemplos de trastornos o afecciones del SNC descritos en la presente invención incluyen alteración de la memoria asociada a la edad (AMAE); alteración cognitiva leve (ACL), delirio (también conocido como estado confusional agudo); demencia (a veces clasificada adicionalmente como demencia de tipo Alzheimer o no Alzheimer); enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Parkinson; enfermedad de Huntington (también conocida como corea); retraso metal (por ejemplo, síndrome de Rubinstein-Taybi y síndrome de Down); enfermedad cerebrovascular (por ejemplo, demencia vascular, cirugía postcardiaca); trastornos afectivos; trastornos psicóticos; autismo (también conocido como síndrome de Kanner), trastornos neuróticos; trastorno por déficit de atención (TDA); hematoma subdural; hidrocefalia de presión normal; tumor cerebral; traumatismo craneal (trastorno postcontusional) y traumatismo cerebral (véase, DSM-IV, APA 1994). Los síntomas principales de los trastornos cognitivos y alteraciones cognitivas incluyen problemas con la memoria, la orientación, el lenguaje, el procesamiento de la información y la capacidad para centrarse y mantener la atención en una tarea. Por consiguiente, cualquier enfermedad, trastorno o afección cuyos síntomas incluyan problemas asociados con la memoria, la orientación, el lenguaje, el procesamiento de la información y/o la capacidad para centrarse y mantener la atención en una tarea puede tratarse administrando una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos de indolona descritos en el presente documento.

En una realización de la presente invención, la alteración cognitiva se asocia con un trastorno psiquiátrico, un trastorno psicótico, un trastorno neurológico o un trastorno neurótico. En una realización específica, el trastorno psicótico es esquizofrenia. En una realización adicional, la alteración cognitiva se asocia con un trastorno del sistema nervioso central. En otra realización más, el trastorno del sistema nervioso central es una alteración de la memoria asociada a la edad, alteración cognitiva leve, enfermedad de Alzheimer o enfermedad de Parkinson. La presente invención también abarca el tratamiento de alteraciones cognitivas como se especifica en las reivindicaciones, en el que la alteración cognitiva se asocia con traumatismo craneal, traumatismo cerebral o enfermedad cerebrovascular. En una realización específica, la enfermedad cerebrovascular es demencia vascular. La presente invención también abarca el tratamiento de alteraciones cognitivas como se específica en las reivindicaciones, en el que la alteración cognitiva se asocia con un trastorno afectivo.

Síntesis de Compuestos Químicos

La descripción siguiente ilustra procedimientos que pueden usarse para sintetizar el compuesto de indolona usado en la presente invención. Procedimientos Generales

Todas las reacciones se realizaron en una atmósfera de argón y los reactivos, puros o en disolventes apropiados, se transfirieron al recipiente de reacción por técnicas de jeringa y cánula. Se adquirieron disolventes anhidros de la Aldrich Chemical Company y se usaron según se recibieron. Los compuestos descritos a continuación se nombraron usando el ACD/Name Program (versión 4.01, Advanced Chemistry Development Inc., Toronto, Ontario, M5H2L3, Canadá). Los espectros de RMN 1H y RMN 13C se registraron a 300 MHz (GEQE Plus) o 400 MHz (Broker Avance) en CDCl3 como disolvente y tetrametilsilano como patrón interno a menos que se indique otra cosa. Los desplazamientos químicos (δ) se expresaron en ppm, las constantes de acoplamiento (J) se expresaron en Hz y los patrones de división se describen de la forma siguiente: s = singlete; d = doblete; t = triplete; c = cuadruplete; quintuplete; sextuplete; septuplete; a = ancho; m = multiplete; dd = doblete de dobletes; dt = doblete de tripletes. Se realizaron análisis elementales por Robertson Microlit Laboratories, Inc. A menos que se indique otra cosa, se obtuvieron los espectros de masas usando ionización por electronebulización (IEN), Micromass Platform In y MH+ se registró. Se realizó una cromatografía en capa fina (CCF) sobre placas de vidrio prerrevestidas con gel de sílice 60 F254 (0,25 mm, EM Separations Tech.). Se realizó una CCF preparativa sobre láminas de vidrio prerrevestidas con gel de sílice GF (2 mm, Analtech). Se realizó una cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice Merck 60 (malla 230-400). Se determinaron los puntos de fusión (pf) en tubos capilares abiertos en un aparato Mel-Temp y no se corrigieron.

Se usaron los abreviaturas adicionales siguientes: HOAc, ácido acético; DIPEA,

diisopropiletilamina; DMF, N,N-dimetilformamida; EtOAc, acetato de etilo; MeOH, metanol; TEA, trietilamina; THF, tetrahidrofurano; todas las proporciones de disolventes son en volumen/volumen a menos que se indique otra cosa.

I. Procedimiento General para Preparar Indolonas

Los procedimientos siguientes demuestran procedimientos útiles para sintetizar compuestos usados en la presente invención (ilustrados en los Esquemas 1-5). Las isatinas sustituidas útiles para sintetizar compuestos usados en la presente invención pueden obtenerse como alternativa usando los procedimientos descritos en las referencias siguientes:

Garden, S. J.; Da Silva, L. E.; Pinto, A. C.; Synthetic Communications, 1998, 28, 1679

1689.

Coppola, G. M.; Journal of Heterocyclic Chemistry, 1987, 24, 1249.

Hess, B. A. Jr; Corbino, S.; Journal of Heterocyclic Chemistry, 1971, 8, 161.

Bryant, W. M. III; Huhn, G. F., Jensen, J. H.; Pierce, M. E.; Stammbach, C.; Synthetics

Communications, 1993, 23, 1617-1625. Procedimiento General para la Síntesis de Iminoisatinas

La isatina apropiadamente sustituida (10 mg-10 g) se puso en un matraz y se añadió la anilina apropiada (1,0-1,1 equivalentes) y la mezcla se agitó hasta su homogeneidad. Después, la mezcla se calentó hasta 110ºC durante 2-7 horas y después se enfrió. Los sólidos se cristalizaron a partir de metanol caliente y se filtraron, dando los productos deseados (habitualmente como una mezcla de interconversión inseparable de isómeros E/Z). Procedimiento A:

1-(3-TIENIL)-1H-INDOLO-2,3-DIONA: Se añadió trietilamina (56,9 ml, 0,408 mol) a una mezcla de 1H-indolo-2,3-diona (15,0 g, 0,102 mol), acetato de cobre (II) (46,0 g, 0,255 mol) y ácido 3-tienilborónico (19,6 g, 0,153 mol) en CH2Cl2 (500 ml). La mezcla de reacción se agitó durante una noche, se filtró a través de Celite®, se aclaró con EtOAc/hexano (1:1, 300 ml) y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre sílice usando Hexano/EtOAc (1:1), dando el producto deseado (1,1 g, 50%). Procedimiento B:

(3E)-3-[(4-METILFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Una solución de 1-(3-tienil)-1H-indolo-2,3-diona (20 mg, 0,087 mmol) en HOAc al 1%/MeOH (8 ml) se añadió a una solución de p-toluidina (19 mg, 0,18 mmol) en HOAc al 1%/MeOH (8 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 12 h a temperatura ambiente; se calentó a 50ºC durante 1 h y se concentró al vacío. El residuo se purificó por TLC preparativa sobre sílice usando EtOAc/hexanos (3:7, TEA al 0,1%) dando el producto deseado (14 mg, 50%).

Procedimiento C:

(3Z)-5-BROMO-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Una mezcla de 5-bromo-1H-indolo-2,3-diona (1,0 g, 0,442 mmol) y 3-trifluorometilanilina (0,993 g, 6,2 mmol) en una solución de ácido acético al 1% en metanol se agitó a 50ºC durante 12 h. El producto en bruto se concentró al vacío, dando el producto en bruto deseado (640 mg, 40%). Procedimiento D:

(3Z)-5-BROMO-1-FENIL-3-{[3-TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Una mezcla de (3Z)-5-bromo-3-{[3-(trifluorometil)fenil]imino}-1,3-dihidro-2Hindol-2-ona (100 mg, 0,272 mmol), acetato de cobre (II) (54 mg, 0,33 mmol), trietilamina (82,8 mg, 0,817 mmol) y ácido bencenoborónico (40 mg, 0,325 mmol) en 5 ml de CH2Cl2 se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla en bruto se concentró al vacío y se purificó por TLC preparativa usando EtOAc:hexano (3:7, trietilamina al 1%), dando el producto deseado (22 mg, 20%). Procedimiento E:

(3Z)-1,5-DIFENIL-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Una mezcla de (3Z)-5-bromo-1-fenil-3-{[3-(trifluorometil)fenil]imino}-1,3-dihidro-2H-indol2-ona (22 mg, 0,05 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) (12,0 mg, 0,01 mmol), ácido bencenoborónico (10 mg; 0,08 mmol) en THF (5 ml) y Na2CO3 acuoso (2 M, 100 ml) se calentó a 67ºC durante 24 h. El producto en bruto se concentró al vacío y el residuo se extrajo con CH2Cl2 (3 x 1 ml), se concentró y se purificó por TLC preparativa usando metanol al 10% en CHCl3, dando el producto deseado (4 mg, 18%). Procedimiento F:

1-[(5-CLORO-1-BENZOTIEN-3-IL)METIL]-2H-INDOLO-2,3-DIONA: Una solución de isatina (125 mg, 0,85 mmol) en dioxano anhidro (10 ml) se añadió gota a gota a una solución de hidruro sódico (dispersión al 60% en aceite mineral, 25 mg, 0,62 mmol) en dioxano anhidro (10 ml) a 0ºC en una atmósfera de argón. La mezcla se dejó en agitación durante 5 minutos y después a la mezcla de reacción se le añadió gota a gota una solución de 3-(bromometil)-5clorobenzo[b]tiofeno (267 mg, 1,02 mmol) en dioxano (10 ml). La mezcla de reacción se calentó a reflujo en una atmósfera de argón durante 16 h y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó por TLC preparativa usando 1:24 de metanol en cloroformo como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (125 mg, 0,38 mmol, 45%). Procedimiento G:

1-[(5-CLORO-1-BENZOTIEN-3-IL)METIL]-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Una mezcla de 1-[(5-cloro-1-benzotien-3-il)metil]-2H-indolo-2,3diona (50 mg, 0,15 mmol) y 3-trifluorometilanilina (0,020 ml, 0,15 mmol) se calentó en forma pura a 140ºC durante 2 h. El material en bruto se purificó por TLC preparativa usando una mezcla de 1:3 de acetato de etilo y hexano como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (13 mg, 0,030 mmol, 18%).

Procedimiento H:

6-METOXI-1-FENIL-1H-INDOLO-2,3-DIONA: Se añadió una solución de N-(3metoxifenil)-N-fenilamina (1,14 g, 5,72 en éter (3 ml) a una solución de cloruro de oxalilo (728 g, 5,75 mmol) y se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente, se concentró a sequedad y se disolvió de nuevo en nitrobenceno (35 ml). La solución se añadió a una solución de AlCl3 en nitrobenceno (0,762 g, 5,72 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 70ºC durante 16 h. El producto en bruto se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en columna usando EtOAc/hexano (1:1), dando el producto deseado 60, mg, 50%).

Los compuestos 2-17, inclusive, se adquirieron en Bionet Research Ltd., 3 Highfield Industrial Estate, Camelford, Cornwall PL32 9QZ, UK. Estos compuestos también pueden sintetizarse usando el Procedimiento General descrito anteriormente.

Compuesto 1:

3-[(2-METOXIFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 2:

1-FENIL-3-[[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO]-1,3-DIHIDRO-2H

INDOL-2-ONA

Compuesto 3:

3-[(3-METILFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 4:

3-[(3-CLOROFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 5:

1-FENIL-3-[[4-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO]-1,3-DIHIDRO-2H

INDOL-2-ONA

Compuesto 6:

3-[(4-METILFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 7:

3-[(4-CLOROFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 8:

3-[(4-BROMOFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 9:

3-[(4-FLUOROFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 10:

3-[(4-FENOXIFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 11:

3-[(4-ETOXIFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 12:

3-[(4-METOXIFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H INDOL-2-ONA

Compuesto 13:

3-[(3,5-DICLOROFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2

ONA

Compuesto 14:

3-[(3,5-DIMETILFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 15:

1-ALIL-3-[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO]-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 16:

1-ALIL-3-[(3,5-DICLOROFENIL)IMINO]-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA

Compuesto 17:

3-[(4-BROMOFENIL)IMINO]-1-ISOPROPIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2

ONA

Compuesto

18: 1-[(5-CLORO-2-TIENIL)METIL]-3-{[3

(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Una mezcla de 1-[(5cloro-2-tienil)metil]-2H-indolo-2,3-diona (25 mg, 0,09 mmol) (preparada como se describe a continuación) y 3-trifluorometilanilina (11,3 ml, 0,09 mmol) se calentó en forma pura a 140ºC durante 2 h. El material en bruto se purificó por TLC preparativa usando una mezcla 3:7 de acetato de etilo en hexano como eluyente, dando el producto deseado (23 mg, 0,05 mmol, 61%). RMN 1H (400 MHz): δ (isómero principal) 7,57 (t, J = 7,7, 1H), 7,53 (t, J = 7,8, 1H), 7,33 (t, J = 7,8, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,19 (d, J = 7,6, 2H), 6,94 -6,72 (m, 4H), 6,56 (d, J = 7,7, 1H), 5,02 (s, 2H); IEN-EM m/z encontrado 421 (MH+).

1-[(5-CLORO-2-TIENIL)METIL]-2H-INDOLO-2,3-DIONA: Una solución de isatina (125 mg, 0,85 mmol) en dioxano anhidro (10 ml) se le añadió gota a gota a una solución de hidruro sódico (dispersión al 60% en aceite mineral, 24 mg, 0,62 mmol) en dioxano anhidro (10 ml) a 0ºC en una atmósfera de argón. La mezcla se dejó en agitación durante 5 minutos y después a la mezcla resultante se le añadió gota a gota 2-cloro-5-(clorometil)tiofeno (0,12 ml, 1,02 mmol) en dioxano (10 ml). La mezcla de reacción se calentó a reflujo en una atmósfera de argón durante 16 h y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó por TLC preparativa usando 1:24 de metanol en cloroformo como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (53 mg, 0,19 mmol, 22%). RMN 1H (400 MHz): δ 7,62 (d, J = 7,4, 1H), 7,56 (t, J = 7,8, 1H), 7,14 (t, J = 7,7, 1H), 6,94 (d, J = 8,0, 1H), 6,90 (d, J = 3,2, 1H), 6,78 (d, J = 3,7,1H), 4,90 (s, 2H).

Compuesto 19: 1-(3-TIENIL)-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3-DIHIDRO2H-INDOL-2-ONA: Una mezcla de 1-(3-tienil)-2H-indolo-2,3-diona (25 mg, 0,11 mmol) (preparada como se describe a continuación) y 3-trifluorometilanilina (14 µl, 0,11 mmol) se calentó en forma pura a 140ºC durante 2 h. El material en bruto se purificó por TLC preparativa usando una mezcla 3:7 de acetato de etilo y hexano como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (7,3 mg, 0,02 mmol, 22%). RMN 1H (400 MHz) δ 7,62 -7,19 (m, 9H), 6,94 (d, J = 8,0, 1H), 6,76 (t, J = 7,6, 1H); IEN-EM m/z encontrado 373 (MH+).

1-(3-TIENIL)-2H-INDOLO-2,3-DIONA: Se calentó a reflujo acetato de cobre (II) monohidrato (4,25 g, 23,4 mmol) en anhídrido acético (30 ml) durante 2 h. La mezcla se filtró y se lavó con éter anhidro (500 ml). El sólido se secó al vacío a 55ºC durante 16 h. Se añadió diclorometano (1 ml) a una mezcla de acetato de cobre (II) (62 mg, 0,34 mmol), isatina (50 mg, 0,34 mmol) y ácido tiofeno-3-borónico (87 mg, 0,68 mmol), seguido de trietilamina (0,10 ml, 0,68 mmol) en una atmósfera de argón. La solución resultante se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. Después, la mezcla de reacción se recargó con 0,10 mmol de acetato de cobre (II), 0,10 mmol de ácido 3-tiofenoborónico y 1 gota de trietilamina y la mezcla se calentó a 50ºC durante 6 h. El material en bruto se purificó por TLC preparativa usando 3:97 de metanol en cloroformo como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (25 mg, 0,11 mmol, 33%). RMN 1H (400 MHz): δ 7,70 (d, J = 7,5; 1H), 7,58 (t, J = 7,8, 1H), 7,50 (d, J = 5,1, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,24 (d, J = 5,1, 1H), 7,18 (t, J = 7,51, 1H), 7,05 (d, J = 8,0, 1H).

Compuesto 20: 2-METIL-5-[(2-OXO-1-FENIL-1,2-DIHIDRO-3H-INDOL-3ILIDENO)AMINO]-2H-ISOINDOLO-1,3(2H)-DIONA: Una mezcla de 1-fenilisatina (50 mg, 0,22 mmol) y 4-amino-N-metilftalimida (40 mg, 0,22 mmol) se calentó en forma pura a 215ºC durante 2 h. El material en bruto se purificó por TLC preparativa usando una mezcla 3:7 de acetato de etilo y hexano como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (8 mg; 0,02 mmol, 10%). RMN 1H (400 MHz): δ 7,88 (d, J = 7,8, 1H), 7,83 -7,80 (m, 1H), 7,51 (t, J = 7,5, 1H), 7,47 -7,18 (m, 6H), 7,02 (t, J = 8,0, 1H), 6,91 -6,79 (m, 2H), 6,58 (d, J = 7,5, 1H), 3,22 (s, 3H); IEN-EM m/z encontrado 382 (MH+).

Compuesto 21: 1-[(5-CLORO-1-BENZOTIEN-3-IL)METIL]-3-{[3(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó 1-[(5CLORO-1-BENZOTIEN-3-IL)METIL]-2H-INDOLO-2,3-DIONA por el Procedimiento F. RMN 1H (400 MHz): δ 7,89 (s, 1H), 7,79 (d, J = 8,5, 1H), 7,65 (d, J = 7,5, 1H), 7,54 (t, J = 8,0, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,38 (d, J = 8,5, 1H), 7,14 (t, J = 7,5, 1H), 6,88 (d, J = 7,8, 1H), 5,13 (s, 2H). A partir de este intermedio, se preparó 1-[(5-CLORO-1-BENZOTIEN-3-IL)METIL]-3-{[3(TRIFLUOROMETIL)FENIL]-IMINO}-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA por el Procedimiento G. RMN 1H (400 MHz): δ 7,98 (d, J = 2,0, 1H), 7,80 (d, J = 8,6, 1H), 7,58 (t, J = 7,7, 1H), 7,52 (d, J = 8,1, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,38 (dd, J = 8,6, 1,9, 1H), 7,31 (solapamiento de singlete y dt, J = 1,2, 7,8, 2H), 7,24 (d, J = 7,8, 1H), 6,87 (d, J = 7,9, 1H), 6,77 (t, J = 7,7, 1H), 6,59 (d, J = 7,7, 1H), 5,20 (s, 2H). IEN-EM m/z encontrado 471 (MH+ con 35Cl), 473 (MH+ con 37Cl).

Compuesto 22: 3-(1H-INDOL-5-ILIMINO)-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se mezclaron 1-fenilisatina (51,8 mg, 0,23 mmol) y 5-aminoindol (31 mg, 0,23 mmol) y se calentaron a 140ºC durante 2 h. El producto en bruto resultante se purificó por TLC preparativa usando acetato de etilo/hexano (6:4) como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (10,8 mg, 14%). RMN 1H (400 MHz): δ 8,28 (s, 1H), 7,57 (t, J = 7,7, 2H), 7,49 -7,40 (m, 6H), 7,29 -7,23 (m, 1H), 7,03 (dd, J = 8,5, 1,7, 1H), 6,98 (d, J = 7,6, 1H), 6,83 (d, J = 8,0, 1H), 6,74, J = 7,6, 1H), 6,59 (s, 1H), IEN-EM m/z encontrado 338 (MH+).

Compuesto 23: 3-[(6-CLORO-3-PIRIDINIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Se mezclaron 1-fenilisatina (23,0 mg, 0,10 mmol) y 5-amino-2-cloropiridina (12,8 mg, 0,10 mmol) y se calentaron a 140ºC durante 7 h. El producto en bruto resultante se purificó por TLC preparativa usando hexano/acetato de etilo (8:2) como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (19,7 mg, 59%). RMN 1H (400 MHz) δ 8,15 (d, J = 8, 1H), 7,6 -7,2 (m, 9H), 6,85 -6,75 (m, 2H); IEN-EM m/z encontrado 334 (MH+).

Compuesto 24: 3-[(2-METIL-1,3-BENZOTIAZOL-5-IL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO2H-INDOL-2-ONA: Se mezcló 5-amino-2-metilbenzotiazol (52,2 mg, 0,31 mmol) con 1fenilisatina (69,7 mg, 0,31 mmol) y se calentó a 140ºC durante 3 h. El producto en bruto resultante se purificó por TLC preparativa usando acetato de etilo/hexano (6:4) como eluyente, dando el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (36,9 mg, 32,3%). RMN 1H: δ 7,9-6,7 (m, 12H), 2,9 (s, 3H). IEN-EM m/z encontrado 370 (MH+).

Compuesto 25: (3Z)-3-[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO]-1-(2-PIRIDINILMETIL)-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos F (para la sustitución de cloruro de 2-picolilo) y G. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,51 -8,46 (m, 1H), 7,87 -7,78 (m, 1H), 7,64 (d, 1H, J = 7,1), 7,53 -7,31 (m, 5H), 7,28 (d, 1H, J = 4,1), 7,12 (d, 1H, J = 8,1), 6,58-6,53 (m, 1H), 5,51 (s, 2H); IEN-EM m/z 381 (MH+).

Compuesto 26: (3Z)-3-[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO-1-[(3,5-DIMETIL-4ISOXAZOLIL)METIL]-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos F (para la sustitución de 4-clorometil-3,5-dimetilisoxazol) y B (calentamiento con microondas). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,63 (d, 1H, J = 9,1), 7,46 (dt, 1H, J = 8,1, 2,0), 7,28 (d, 1H, J = 2,1), 7,02 (d, 1H, J = 2,0), 6,88 (dt, 1H, J 8,0, 2,1), 6,74 -6,72 (m, 1H), 6,72 -6,70 (m, 1H), 5,53 (s, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,24 (s, 3H); IEN-EM m/z 399 (MH+).

Compuesto 27: (3Z)-3-[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO]-1-[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,90 -7,87 (m, 1H), 7,83 -7,79 (m, 1H), 7,67 (d, 1H, J = 8), 7,46 -7,40 (m, 1H), 7,33 (d, 1H, J = 2), 7,08 -7,05 (m, 1H), 6,96 -6,80 (m, 5H); IEN-EM m/z 435 (MH+).

Compuesto 28: (3Z)-1-(3,5-DICLOROFENIL)-3-[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO]-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,93 (d, 1H, J = 8,1), 7,79 (d, 1H, J = 6,0), 7,72 -7,68 (m, 1H), 7,59 -7,45 (m, 1H), 7,46 (d, 1H, J = 8,1), 7,32 (dt, 1H, J = 8,0, 2,1), 7,23 (d, 1H, J = 2,5), 6,97 (dd, 1H, J = 8,0, 2,1), 6,92 -6,87 (m, 1H), 6,85 -6,81 (m, 1H); IEN-EM m/z 435 (MH+).

Compuesto 29: (3Z)-3-[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO]-6-METOXI-1-FENIL-1,3-DIHIDRO2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos H y B. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,69 -7,54 (m, 1H), 7,53 -7,38 (m, 3H), 7,29 (d, 1H, J = 2,0), 7,17 (d, 1H, J = 8,1), 7,12 (d, 1H, J = 8,0), 6,84 (d, 1H, J = 2,5), 6,78 (d, 1H, J = 8), 6,6 (dd, 2H, J = 8,0, 2,0), 6,55 (dd, 2H, J = 8,1, 2,5); IEN-EM m/z (398 MH+).

Compuesto 30: (3Z)-3[(4-CLORO-3-METILFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,69 -7,62 (m, 2H), 7,49 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,41 (dt, 1H, J = 7,1, 1,6), 7,3 (dd, 1H, J = 5,0, 1,6), 7,05 -6,97 (m, 1H), 6,93 -6,86 (m, 1H), 6,77 (m, 1H), 6,56 (m, 1H), 2,53 (s, 3H); IEN-EM m/z 353 (MH+).

Compuesto 31: (3Z)-3-(2-NAFTILIMINO)-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,15 (d, 1H, J = 9:1), 8,06 -7,99 (m, 1H), 7,89 -7,80 (m, 1H), 7,78 -7,71 (m, 1H), 7,71 -7,47 (m, 4H), 7,41 7,35 (m, 1H), 7,33 (d, 1H, J = 5,2), 7,28 (d, 1H, J = 6,8,1), 7,00 (d, 1H, J = 8,0), 6,76 (t, 1H, J = 7,8), 6,67 (d, 1H, J = 7,9); IEN-EM m/z 355 (MH+).

Compuesto 32: (3Z)-3-[(4-CLOROFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,69 7,56 (m, 2H), 7,54 -7,48 (m, 1H), 7,41 (dt, 1H, J = 8, 2), 7,32 -7,28 (m, 1H), 7,11 -6,99 (m, 3H), 6,89 (dt, 1H, J = 8), 6,77 -6,73 (m. 1H), 6,66 -6,33 (m, 1H); IEN-EM m/z 339 (MH+).

Compuesto 33: (3Z)-3-[(4-YODOFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,79 -7,74 (m, 2H), 7,53 -7,48 (m, 2H), 7,35 (dt, 1H, J = 8,0, 1,2), 7,29 -7,24 (m, 1H), 6,98 (d, 1H, J = 8,0), 6,89 -6,75 (m, 4H); IEN-EM m/z 431 (MH+).

Compuesto 34: (3Z)-3-[(4-METILFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,52 -7,44 (m, 2H), 7,35 -7,22 (m, 4H), 6,99 -6,93 (m, 3H), 6,87 -6,78 (m, 2H), 2,42 (s, 3H); IEN-EM m/z 319 (MH+).

Compuesto 35: (3Z)-3-[(3,5-DIFLUOROFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,54 -7,16, (m, 4H), 6,99 (dt, 1H, J = 8,2, 0,8), 6,89 (dt, 1H, J = 7,7, 1,1), 6,76 (d, 1H, J = 7,5), 6,71 (tt, 1H, J = 9,3, 2,3), 6,64 -6,57 (m, 2H); IEN-EM m/z 341 (MH+).

Compuesto 36: 3-{[(3Z)-2-OXO-1-(3-TIENIL)-1,2-DIHIDRO-3H-INDOL-3ILIDENO]AMINO}BENZOATO DE ETILO: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,96 (d, 1H, J = 7,4), 7,75 -7,17 (m, 6H), 6,98 (d, 1H, J = 8,0), 6,87 -6,78 (m, 2H), 6,63 (d, 1H, J = 7,8), 4,45 -4,32 (m, 2H), 1,43 -1,33 (m, 3H); IEN-EM m/z 377 (MH+).

Compuesto 37: (3Z)-3-[(6-CLORO-3-PIRIDINIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,21 -6,81 (m, 10H); IEN-EM m/z 340 (MH+).

Compuesto 38: (3Z)-3-[(4-FENOXIFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,85 -6,70 (m, 16H); IEN-EM m/z 397 (MH+).

Compuesto 39: (3Z)-3-[(4-BROMOFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y G. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,82 6,55 (m, 11H); IEN-EM m/z 383 (MH+).

Compuesto 40: (3Z)-3-[(3-CLOROFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y G. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,55 -6,50 (m, 11H); IEN-EM m/z 339 (MH+).

Compuesto 41: (3Z)-3-[(3-METILFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,67 -6,78 (m, 11H), 2,39 (s, 3H); IEN-EM m/z 319 (MH+).

Compuesto 42: (3Z)-3-[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (HOAc al 1% en MeOH). RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,82 -6,80 (m, 10H); IEN-EM m/z 373 (MH+).

Compuesto 43: (3Z)-1-(2-PIRIDINILMETIL)-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 382 (MH+).

Compuesto 44: (3Z)-3-[(3,5-DICLOROFENIL)IMINO]-1-(2-PIRIDINILMETIL)-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 382 (MH+).

Compuesto 45: (3Z)-1-[(3,5-DIMETIL-4-ISOXAZOLIL)METIL]-3-{[3(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 400 (MH+).

Compuesto 46: (3Z)-3-[(3,4-DIFLUOROFENIL)IMINO]-1-(3-PIRIDINILMETIL)-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos F (para la sustitución de cloruro de 3-picolilo) y B. IEN-EM m/z 350 (MH+).

Compuesto 47: (3Z)-1-(3-PIRIDINILMETIL)-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 382 (MH+).

Compuesto 48: (3Z)-3-[(3,4-DIFLUOROFENIL)IMINO]-1-(2-PIRIDINILMETIL)-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 350 (MH+).

Compuesto 49: (3Z)-3-[(3,5-DICLOROFENIL)IMINO]-1-(3-PIRIDINILMETIL)-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 384 (MH+).

Compuesto 50: (3Z)-3-[(3,5-DICLOROFENIL)IMINO]-1-[(3,5-DIMETIL-4ISOXAZOLIL)METIL]-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 402 (MH+).

Compuesto 51: (3Z)-1-FENIL-3-(5-QUINOLINILIMINO)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Se preparó por el Procedimiento G. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 9,38 -9,32 (m, 1H), 8,55 -8,50 (m, 1H), 8,01 -6,62 (m, 12H), 6,43 -6,35 (m, 1H); IEN-EM m/z 350 (MH+).

Compuesto 52: (3Z)-3-[(4-YODOFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Se preparó por el Procedimiento B (HOAc al 0,1%, 80ºC, 92 h, 4 equiv. de RNH2, tamices moleculares de 3 Å). IEN-EM m/z 425 (MH+).

Compuesto 53: (3Z)-3-[(3,4-DIFLUOROFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B (HOAc al 0,1%, 80ºC, 92 h, 4 equiv. de RNH2, tamices moleculares de 3 Å). IEN-EM m/z 335 (MH+).

Compuesto 54: (3Z)-3-[(2-CLORO-4-METILFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B (HOAc al 0,1%, 80ºC, 92 h, 4 equiv. de RNH2; tamices moleculares de 3 Å). IEN-EM m/z 347 (MH+ con 35Cl), 349 (MH+ con 37Cl).

Compuesto 55: (3Z)-3-[(2,4-DIMETOXIFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B (HOAc al 0,1%, 80ºC, 92 h, 4 equiv. de RNH2, tamices moleculares de 3 Å). IEN-EM m/z 359 (MH+).

Compuesto 56: 3-{[(3Z)-2-OXO-1-FENIL-1,2-DIHIDRO-3H-INDOL-3ILIDENO]AMINO}BENZONITRILO: Se preparó por el Procedimiento B (HOAc al 0,1%, 80ºC, 92 h, 4 equiv. de RNH2, tamices moleculares de 3 Å). IEN-EM m/z 324 (MH+).

Compuesto 57: (3Z)-3-{[2-METIL-5-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1-FENIL-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento B (HOAc al 0,1%, 80ºC, 92 h, 4 equiv. de RNH2, tamices moleculares de 3 Å). IEN-EM m/z 381 (MH+).

Compuesto 58: (3Z)-3-[(4-CLORO-3-METILFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). IEN-EM m/z 353 (MH+).

Compuesto 59: (3Z)-3-(6-QUINOLINILIMINO)-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). IEN-EM m/z 356 (MH+).

Compuesto 60: (3Z)-3-[(4-CLOROFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). IEN-EM m/z 339 (MH+).

Compuesto 61: (3Z)-3-[(3-ISOPROPILFENIL)IMINO]-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). IEN-EM m/z 347 (MH+).

Compuesto 62: (3Z)-3-[(4-CICLOHEXILFENIL)IMINO]-1-(3-TIENIL)-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos A y B (80ºC). IEN-EM m/z 387 (MH+).

Compuesto 63: (3Z)-3-(1,3-BENZOTIAZOL-6-ILIMINO)-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento G. IEN-EM m/z 356 (MH+).

Compuesto 64: (3Z)-3-(1H-INDAZOL-6-ILIMINO)-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Se preparó por el Procedimiento G. IEN-EM m/z 339 (MH+).

Compuesto 65: (3Z)-3-[(3-CLOROFENIL)IMINO]-6-METOXI-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2HINDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos H y G. IEN-EM m/z 363 (MH+).

Compuesto 66: (3Z)-6-METOXI-1-FENIL-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos H y G. IEN-EM m/z 397 (MH+).

5 Compuesto 67: (3Z)-3-[(3-BROMOFENIL)IMINO]-1-FENIL-1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2ONA: Se preparó por el Procedimiento B. IEN-EM m/z 378 (MH+).

Compuesto 68: (3Z)-1,5-DIFENIL-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}-1,3DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos C, D y E. IEN-EM m/z 443 (MH+).

10 Compuesto 69: (3Z)-1-(4-HIDROXIFENIL)-3-{[3-(TRIFLUOROMETIL)FENIL]IMINO}1,3-DIHIDRO-2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por los Procedimientos G (6 equiv. de anilina) y

D. IEN-EM m/z 383 (MH+). Compuesto 70: (3Z)-3[(3,4-DICLOROFENIL)IMINO]-(3-PIRIDINILMETIL)-1,3-DIHIDRO2H-INDOL-2-ONA: Se preparó por el Procedimiento G (75ºC, 2 h). IEN-EM m/z 383 (MH+).

15 Los compuestos 1-70 que se han descrito anteriormente son meramente ilustrativos de los compuestos de indolona que pueden utilizarse en la presente invención. Pueden obtenerse otros compuestos de indolona utilizando los procedimientos mostrados en los Esquemas 1-5 y procedimientos conocidos generalmente en la técnica. Puede ser necesario incorporar estrategias de protección y desprotección para

20 sustituyentes tales como grupos amino, amido, ácido carboxílico e hidroxilo en los procedimientos sintéticos descritos anteriormente para formar derivados de indolona. Los procedimientos para la protección y desprotección de dichos grupos son bien conocidos en la técnica y pueden encontrarse, por ejemplo, en Green, T. W. y Wuts, P. G. M. (1991) Protection Groups in Organic Synthesis, 2ª Edición, John Wiley y Sons, Nueva York.

25 Las estructuras de los Compuestos 1-70 se ilustran en las Tablas 1 y Ia.

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Sustitución

Compuesto

R1 R2 R3 R4 R5

1

Ph OMe H H H

2

Ph H CF3 H H

3

Ph H Me H H

4

Ph H Cl H H

5

Ph H H CF3 H

6

Ph H H Me H

7

Ph H H Cl H

8

Ph H H Br H

9

Ph H H F H

10

Ph H H OPh H

11

Ph H H OEt H

12

Ph H H OMe H

13

Ph H Cl H Cl

14

Ph H Me H Me

15

Alilo H Cl Cl H

16

Alilo H Cl H Cl

17

Isopropilo H H Br H

Leyenda: Ph = Fenilo OMe = Metoxi OEt = Etoxi Me = Metilo OPh = Fenoxi

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Esquema 1ª

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Esquema 2ª

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aY1, Y2, Y3, Y4, A y B se definen como se han descrito en la memoria descriptiva. X1 es un grupo saliente tal como Cl, Br, I u OTs. R es un ácido bórico o grupo dialquilborato.

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Esquema 3a. Síntesis de Isatinas

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Esquema 4ª. Síntesis de Iminoindolonas Sustituidas

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ªY1, Y2, Y3, Y4, A y B se definen como se han descrito en la memoria descriptiva. X es un 15 grupo saliente tal como Cl, Br, I u OTs. R es un ácido bórico o grupo dialquilborato

Esquema 5ª. Síntesis de Iminoindolonas Sustituidas con Arilo o Heteroarilo

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ªA y B se definen como se han descrito en la memoria descriptiva.

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5 Composiciones Farmacéuticas

Como una realización específica de una composición oral de un compuesto usado en la presente invención, 100 mg de uno de los compuestos descritos en el presente documento se formulan con la lactosa finamente dividida suficiente para proporcionar una cantidad total de 580 a 590 mg para rellenar una cápsula de gelatina dura de tamaño 0. Los compuestos de

10 indolona pueden administrarse por cualquier medio conocido. Por ejemplo, los compuestos pueden formularse como una cápsula, supositorio, crema, inhalador o parche transdérmico. Las composiciones adecuadas para administración oral incluyen formas sólidas, tales como píldoras, cápsulas, gránulos, comprimidos y polvos, y formas líquidas tales como soluciones, jarabes, elixires y suspensiones. Las formas útiles para administración parenteral incluyen

15 soluciones, emulsiones y suspensiones estériles. Las dosificaciones óptimas a administrar pueden determinarse por los expertos en la materia, y variarán con el compuesto particular en uso, la concentración de la preparación, el modo de administración y el progreso de la afección patológica. Factores adicionales que dependen del sujeto particular a tratar darán como resultado la necesidad de ajustar dosificaciones, incluyendo la edad, el peso, el género, la

20 dieta del sujeto y el momento de administración. En la presente solicitud, una "cantidad terapéuticamente eficaz" es cualquier cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un sujeto que padece una enfermedad contra la que son eficaces los compuestos, causa una reducción, remisión o regresión de la enfermedad. En la presente solicitud, un "sujeto" es un vertebrado, un mamífero o un ser humano.

25 Detalles experimentales

II.

Modelo In Vivo

A.

Materiales y procedimientos Efecto del Compuesto 2 sobre la Cognición

Este estudio se emprendió para demostrar que las tareas cognitivas, tales como la 30 memoria contextual y la memoria de reconocimiento de objetos, en ratones se aumenta por tratamiento con Compuesto 2.

Memoria Contextual. La memoria contextual es una forma de condicionamiento por miedo pavloviano en la que un ratón sin tratamiento previo se coloca en una nueva cámara (contexto) que contiene señales visuales, olfatorias y táctiles diferentes. Después de unos pocos segundos de aclimatación, el ratón recibe una descarga eléctrica suave breve en sus patas. A partir de esta experiencia negativa, el ratón recordará durante meses que esa cámara es peligrosa. Cuando se pone de nuevo en el mismo contexto en algún momento posterior después del entrenamiento, la respuesta natural del ratón al peligro es "congelarse" quedándose inmóvil durante muchos segundos. Esto es similar a lo que les pasa a los seres humanos cuando experimentan miedo. El porcentaje de tiempo durante un periodo de observación que el ratón permanece congelado representa una medida cuantitativa (puntuación de memoria) de su memoria del contexto.

El condicionamiento contextual se ha usado ampliamente para investigar los sustratos neurales que median el aprendizaje motivado por miedo (Phillips, R. G. y LeDoux, J. E. 1992; Kim y col. 1993; Bourtchouladze y col. 1994; 1998). El condicionamiento contextual se ha usado también para estudiar el impacto de diversas mutaciones sobre la memoria dependiente del hipocampo (Bourtchouladze y col. 1994; 1998; Silva A. J. y col. 1996; Kogan J. L. y col. 1996; Abel, T. y col. 1997; Giese K. P., y col. 1998) y las diferencias de fondo genético y cepa en ratones (Logue y col. 1996; Chen y col 1996; Nguyen, P. V. 2000). Debido a que puede desencadenarse una memoria robusta con una sesión de entrenamiento de unos pocos minutos, el condicionamiento contextual ha sido especialmente útil para estudiar la biología de procesos de memoria a corto y largo plazo temporalmente diferentes (Kim y col. 1993; Bourtchouladze y col. 1994; 1998; Abel, T. y col. 1997). Como tal, el condicionamiento contextual es un modelo excelente para evaluar el papel de diversos compuestos farmacológicos nuevos en la memoria dependiente del hipocampo.

Reconocimiento de Objetos. El reconocimiento de objetos es una tarea etológicamente relevante para roedores, que no se obtiene como resultado de un refuerzo negativo (descarga en las patas). Esta tarea depende de la curiosidad natural de los roedores para explorar nuevos objetos en sus entornos más que los objetos familiares. Obviamente, para que un objeto sea "familiar" el animal debe haberle prestado atención antes y recordar esa experiencia. Por lo tanto, los animales con mejor memoria prestarán atención y explorarán un nuevo objeto más que uno familiar.

Durante el entrenamiento, se le presentan a un ratón dos objetos nuevos idénticos. El ratón los explora por igual aproximándose, oliéndolos y arrastrándose sobre ellos. Durante el ensayo, al animal se le presenta el objeto de entrenamiento y un segundo objeto nuevo. La memoria del objeto de entrenamiento lo hace familiar para el animal y éste dedica más tiempo a explorar el nuevo objeto novedoso más que el familiar (Bourtchouladze y col., 2003). Estudios de formación de imágenes neurales recientes en seres humanos demostraron que la memoria en el reconocimiento de objetos depende de la corteza prefrontal (CPF) (Smith, 1999; Deibert, 1999). De acuerdo con estos descubrimientos, las ratas con lesiones en la CPF muestran una memoria que no funciona bien cuando se les pide que discriminen entre objetos familiares y nuevos (Mitchell, 1998). Otros estudios en monos y roedores sugieren que el hipocampo es importante para el reconocimiento de objetos nuevos (Teng, 2000; Mumby, 2001). Por lo tanto, el reconocimiento de objetos proporciona un modelo conductual excelente para evaluar efectos de compuestos farmacológicos sobre tareas cognitivas asociados con la función del hipocampo y de la corteza.

Procedimientos

Sujetos. Se usaron ratones macho C57B1/6 adultos jóvenes (de 10-12 semanas de edad) (Taconic, NY). Los ratones se alojaron (5 ratones) en jaulas de laboratorio convencionales y se mantuvieron en un ciclo de luz-oscuridad de 12:12. Los experimentos se realizaron siempre durante la fase de luz del ciclo. El día antes del inicio del experimento, los ratones se alojaron individualmente en jaulas individuales y se mantuvieron así hasta el final del experimento. Con la excepción de los momentos de ensayo, los ratones tenían libre acceso a agua y alimento. Los experimentos se realizaron de acuerdo con la Animal Welfare Assurance Nº A3280-01. Los animales se mantuvieron de acuerdo con el Animal Welfare Act and Department of Health and Human Services Guide.

Entrenamiento de Condicionamiento Contextual y Ensayo. Para evaluar la memoria contextual, se usó una tarea de condicionamiento por miedo contextual normalizada desarrollada originariamente para la evaluación de la memoria en ratones knock out para la proteína de unión al elemento de respuesta a AMP cíclico ("CREB") (Bourtchouladze y col., 1994). El día del entrenamiento, el ratón se puso en la cámara de condicionamiento (Med Associates, Inc., VA) durante 2 minutos antes del inicio del estímulo no condicionado (ENC), 0,5 mA, de descarga en las patas de 2 segundos. El ENC se repitió dos veces con un intervalo interensayo de 1 min entre descargas. El entrenamiento se realizó mediante un paquete informático automático (Med Associates, Inc., VA). Después del último ensayo de entrenamiento, los ratones se dejaron en la cámara de condicionamiento durante otros 30 segundos y después se pusieron de nuevo en sus propias jaulas. 24 horas después del entrenamiento, los ratones se pusieron en la misma cámara de entrenamiento y se evaluó la memoria contextual puntuando el comportamiento de congelación (la "congelación" sirve como puntuación de memoria). La congelación se definió como la ausencia completa de movimiento en intervalos de 5 segundos (Kim y col., 1993; Phillips y LeDoux, 1992; Bourtchouladze y col.,

1994; 1998; Abel y col., 1997). El tiempo de ensayo total duró 3 minutos. Después de cada sujeto experimental, el aparato de experimentación se limpió minuciosamente con etanol al 75%, agua, se secó y se ventiló durante unos pocos minutos.

Análisis de Datos de Condicionamiento Contextual. Todos los experimentos se diseñaron y se realizaron de una forma equilibrada, lo que significa que (i) para cada condición experimental (por ejemplo, una dosis-efecto específica) se usó el mismo número de ratones de experimentación y de control; (ii) cada condición experimental se reprodujo 2-3 veces independientes y los días de reproducción se sumaron para generar el número final de sujetos. El transcurso de cada experimento se grabó. En cada experimento, el investigador (a ciegas) desconocía el tratamiento de los sujetos durante el entrenamiento y el ensayo. Los datos se analizaron mediante un ensayo t de Student para datos independientes usando un paquete informático (Statwiew 5.0.1; SAS Institute, Inc). Todos los valores en el texto y las figuras se expresan como media ± ETM.

Entrenamiento de Reconocimiento de Objetos y Ensayo. Los animales se manipularon durante 3-5 minutos durante 5 días. El día antes del entrenamiento, se puso un animal individual en un aparato de entrenamiento (una caja de Plexiglas de L = 48 cm; An = 38 cm y Al = 20 cm) localizada en una sala débilmente iluminada y se dejó que se habituara al entorno durante 15 minutos (Bourtchouladze y col., 2003). El entrenamiento se inició 24 horas después de la habituación. Se puso de nuevo un ratón en la caja de entrenamiento, que contenía dos objetos idénticos (por ejemplo, un objeto pequeño en forma de cono), y se dejó que explorara estos objetos. Los objetos se pusieron en el área central de la caja y las posiciones espaciales de los objetos (lados izquierdo-derecho) se compensaron entre sujetos. Los animales se entrenaron durante 15 minutos.

Para ensayar la retención de memoria, los ratones se observaron durante 10 minutos, 24 horas después del entrenamiento. A un ratón se le presentaron dos objetos, uno de los cuales se usó durante el entrenamiento y por lo tanto era "familiar" y siendo el otro nuevo (por ejemplo, un objeto pequeño en forma de pirámide). Para asegurarse de que las dianas de discriminación no diferían en olor, después de cada sujeto experimental el aparato y los objetos se limpiaron minuciosamente con etanol al 90%, se secaron y se ventilaron durante unos pocos minutos.

Análisis de Datos del Reconocimiento de Objetos. Los experimentos se grabaron en vídeo por medio de un sistema de cámara de vídeo suspendida. Las cintas se revisaron por un observador a ciegas y se determinaron los parámetros conductuales siguientes: tiempo de exploración de cada objeto; tiempo total de exploración de los objetos; número de aproximaciones a los objetos; y tiempo (latencia) hasta la primera aproximación a un objeto. El índice de discriminación —puntuación de memoria— se determinó como se ha descrito previamente (Ennaceur y col., 1997, Bourtchouladze y col., 2003). Estos datos se analizaron mediante un ensayo t de Student para datos independientes usando un paquete informático (Statwiew 5.0.1; SAS Institute, Inc). Todos los valores en el texto y las figuras se expresaron como media ± ETM.

Administración de Compuesto Farmacológico. Se preparó Compuesto 2 fresco a partir de una solución madre (DMSO 10 mg/ml) que se mantuvo a 4ºC. El Compuesto 2 se disolvió en una suspensión de DMSO al 5% y CMC al 95% al 2% en agua y se administró por vía intraperitoneal (I.P.) a las dosis de 5 mg/kg; 10 mg/kg y 30 mg/kg 20 minutos antes del entrenamiento o a 1 mg/kg y 30 mg/kg por vía oral 60 minutos antes del entrenamiento. Los animales de control recibieron vehículo solamente (DMSO al 5% y CMC al 95% al 2% en agua). Para cada entrenamiento y procedimiento de inyección de fármaco, se usó un grupo de animales experimentalmente sin tratamiento previo. Resultados

Memoria Contextual. Para evaluar los efectos del Compuesto 2 sobre la memoria contextual, a los ratones se les inyectó Compuesto 2 o vehículo 20 minutos antes del entrenamiento y se entrenaron con 2 ensayos de entrenamiento (ENC). Después, los ratones se ensayaron en el mismo contexto 24 horas después del entrenamiento (véase la Figura 1). La administración I.P. de 5 mg/kg, 10 mg/kg y 30 mg/kg de Compuesto 2 facilitaba significativamente la congelación frente al contexto 24 h después del entrenamiento (el 40,3 ± 4,7% frente al 24,5 ± 3,2% para Compuesto 2 5 mg/kg (n = 6) frente a controles (n = 6), p < 0,05; el 51,4 ± 9,1% frente al 24,5 ± 3,2% para Compuesto 2 10 mg/kg (n = 6) frente a controles (n = 6), p < 0,01; y el 49,1 ± 3,7% frente al 24,5 ± 3,2% para Compuesto 2 30 mg/kg (n = 6) frente a controles (n = 6), p < 0,001; ensayo t de Student para datos independientes).

De forma similar, la administración oral de 1 mg/kg y 30 mg/kg de Compuesto 2 sesenta (60) min antes del entrenamiento facilitaba significativamente la memoria contextual a las 24 h (el 36,4 ± 3,9% frente al 22,3 ± 3,2%, para Compuesto 2 1 mg/kg (n = 20) frente a controles (n = 20), p < 0,01; y el 34,1 ± 4,3% frente al 22,3 ± 3,2% para Compuesto 2 30 mg/kg (n =19) frente a controles (n = 20), p < 0,05; ensayo t de Student para datos independientes; (véase la Figura 2).

Reconocimiento de Objetos. Para evaluar los efectos del Compuesto 2 sobre el reconocimiento de objetos, se administró compuesto o vehículo solamente i.p. a ratones C57BL/6 20 minutos antes de una sesión de entrenamiento de 15 minutos. Los ratones C57BL/6 a los que se les inyectó vehículo mostraban un escaso de reconocimiento de objetos a las 24 horas. Sin embargo, una sola de administración de Compuesto 2 1 mg/kg (n = 14) o Compuesto 2 5 mg/kg (n = 12) aumentaba significativamente la memoria de reconocimiento [Índice de discriminación (ID) = -10,2 ± 4 frente a 5,1 ± 6 ratones a los que se les inyectó vehículo frente a Compuesto 2 1 mg/kg; p < 0,05; e ID= -10,2 ± 4 frente a 18,8 ± 6,6 para ratones a los que se les inyectó vehículo frente a Compuesto 2 5 mg/kg; p < 0,0005] (Véase la Figura 3).

Los resultados de los experimentos mencionado anteriormente demuestran que una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto o compuestos de indolona descritos en el presente documento es útil para tratar a un sujeto que padece una alteración cognitiva o un trastorno cognitivo.

Referencias:

Abel, T., y col., (1997). Genetic demonstration of a role for PKA in the late phase of LTP and in hippocampus-based tong-tenn memory. Cell 88: 615-626. American Psychiatric Association. Diagnostic and statistical manual of mental disorders (DSM-IV), APA, Washington, D.C., 1994. Asymmetric Synthesis (1983) Vol: 2-5, Academic Press, Editor Morrison, J. Bourtchouladze, R., y col., (1998). Different training procedures recruit either one or two critical periods for contextual memory consolidation, each of which requires protein synthesis and PKA. Learn Mem 5: 365-374. Bourtchouladze, R., y col., (2003). A mouse model of Rubinstein-Taybi syndrome: defective long-term memory is ameliorated by inhibitors of fosfodiesterase 4. Proc Natl Acad Sci USA 100: 10518-10522. Bourtchouladze, R., y col., (1994). Deficient long-term memory in mice with a targeted mutation of the cAMP-responsive element-binding protein. Cell 79: 59-68. Bryant, W.M.III, y col., (1993) Synthetic Communications, 23: 1617-1625. Coppola, G.M. (1987) Journal of Heterocyclic Chemistry, 24: 1249. Deibert, E., y col., (1999). Neural pathways in tactile object recognition. Neurology 52: 1413-1417. Ennaceur, A. y Aggleton, J. P. (1997). The effects of neurotoxic lesions of the perirhinal cortex combined to fomix transection on object recognition memory in the rat. Behav Brain Res 88: 181-193. Garden, S.J., y col., (1998). Synthetic Communications, 28: 1679-1689. Giese, K. P., y col., (1998). Autophosphorylation at Thr286 of the alpha calcium-calmodulin kinase II in LTP and learning. Science 279: 870-873. Green, T.W. y Wuts, P.G.M. (1991) Protection Groups in Organic Synthesis, segunda

Edición John Wiley & Sons, Nueva York. Hess, B.A. Jr. y Corbino, S. (1971) Journal of Heterociclic Chemistry, 8: 161. Jaques, J., y col., (1981) Enantiomers. Racemates y Resolutions. John Wiley & Sons. Kim, J.J., y col.,. (1995). Hippocampectomy impairs the memory of recently, but not remotely, acquired trace eyeblink conditioned responses. Behav Neurosci 109: 195-203. Kim, J. J., y col., (1993). Effects of amygdala, hippocampus, and periaqueductal gray lesions on short-and long-term contextual fear. Behav Neurosci 107: 1093-1098. Kogan, J.H., y col., (1997). Spaced training induces normallong-term memory in CREB mutant mice. Curr Biol 7: 1-11. Logue, S. F., Paylor, R., y Wehner, J. M. (1997). Hippocampal lesions cause learning deficits in inbred mice in the Morris water maze and conditioned-fear task. Behav Neurosci

111: 104-113. Mitchell, J. B., y Laiacona, J. (1998). The medial frontal cortex and temporal memory: tests using spontaneous exploratory behaviour in the rat. Behav Brain Res 97: 107-113. Mumby, D. G. (2001). Perspectives on object-recognition memory following hippocampal damage: lessons from studies in rats. Behav Brain Res 127: 159-181. Nguyen, P. V., y col., (2000). Strain-dependent differences in LTP and hippocampusdependent memory in inbred mice. Learn Mem 7: 170-179. Nográdi, M. (1987) Stereoselective Synthesis, VCH, Editor Ebel, H. Otsuka, S. y Kobayashi, Y. (1964) Aradioisotopic assay for monoamina oxidase determinations in human plasma. Biochem. Pharmacol., 13: 995-1006. Phillips, R. G., y LeDoux, J. E. (1992). Differential contribution of amygdala and hippocampus to cued and contextual fear conditioning. Behav Neurosci 106: 274-285. Pittenger, C., Huang, y col., (2002). Reversible inhibition of CREB/ATF transcription factors in region CA1 of the dorsal hippocampus disrupts hippocampus-dependent spatial memory. Neuron 34: 447-462. Silva, A. J., y col., (1996). Impaired learning in mice with abnormal short-lived plasticity: Curr Biol 6: 1509-1518. Teng, E., y col., (2000). Contrasting effects on discrimination learning after hippocampal lesions and conjoint hippocampal-caudate lesions in monkeys. J Neurosci 20: 3853-3863. Weiss, J.M., y col., (1998) Annals of the N.Y. Acad. Sci., (Ed. T. Hökfelt, Tamas Bartfai y J. Crawley) págs. 364-382.

Claims (12)

1. REIVINDICACIONES

   1. El uso de un compuesto que tiene la estructura:

   imagen1

   5 en la que cada uno de Y1, Y2, Y3 e Y4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal

   o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal

   o ramificada; cicloalquilo C3-C7 o cicloalquenilo C5-C7, -F, -Cl, -Br o -I; -NO2; -N3; -CN; -OR4, SR4, -OCOR4, -COR4, -NCOR4, -N(R4)2, -CON(R4)2 o -COOR4; arilo o heteroarilo; o dos cualesquiera de Y1, Y2, Y3 e Y4 presentes en átomos de carbono adyacentes pueden constituir

   10 un grupo metilendioxi; en la que cada R4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, arilo o arilalquilo (C1-C6); en la que A es A', alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, arilo, heteroarilo, arilalquilo (C1

   15 C6) o heteroarilalquilo (C1-C6); en la que A' es

   imagen1

   en la que cada uno de R1 y R2 es independientemente -H, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2 o -CN;

   20 en la que R3 es -H, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -OR6 arilo o heteroarilo; en la que R5 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -N(R4)2, -OR6 o arilo; en la que R6 es alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada o arilo; en la que B es arilo o heteroarilo; con la condición, sin embargo, de que si B es arilo o

   25 heteroarilo, el átomo de carbono o los átomos de carbono situados orto con respecto al átomo

   de nitrógeno del enlace imina sólo puedan estar sustituidos con uno o más de los siguientes: H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, metilo, etilo o metoxi; en la que cada n es independientemente un número entero de 1 a 4 inclusive; en la que el compuesto es un isómero de imina Z puro, un isómero de imina E puro o una

   5 mezcla de isómeros de imina Z y E;

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria en un sujeto, siendo la alteración de la memoria una alteración de la memoria contextual o una alteración de la memoria de reconocimiento de objetos.

   10

2. 2.

   El uso de la reivindicación 1, en el que el compuesto es enantiomérica y/o diastereoméricamente puro.

3. 3.

   El uso de la reivindicación 1, en la que el compuesto es un isómero de imina Z puro.

4. 4.

   El uso de la reivindicación 1, en la que el compuesto es un isómero de imina E puro.

5. 5.

   El uso de la reivindicación 1, en el que el compuesto es una mezcla de isómeros de imina Z yE.

   15

   20
6. 6. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el compuesto tiene la estructura:

   imagen1

   en la que cada uno de Y1, Y2, Y3 e Y4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena 25 lineal o ramificada, -CF3, -F, -Cl, -Br, -I, -OR4, -N(R4)2 o -CON(R4)2;

   en la que cada R4 es independientemente H, alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, -CF3,

   o fenilo; en la que A es A', alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, arilo, heteroarilo, arilalquilo (C1C6) o heteroarilalquilo (C1-C6);

   30 y en la que A' es

   imagen1
7. 7. El uso de la reivindicación 6, en el que B es arilo.

   5 8. El uso de la reivindicación 7, en el que B es fenilo y el fenilo está opcionalmente sustituido con uno o más de los siguientes: -H; -F, -Cl, -Br, -CF3, alquilo C1-C7 de cadena lineal

   o ramificada, -N(R4)2, -OR4, -COR4, -NCOR4, -CO2R4 o -CON (R4)2.

8. 9.

   El uso de la reivindicación 6, en el que A es arilo o heteroarilo.

9. 10.

   El uso de un compuesto que tiene la estructura:

   10

   imagen1

   en la que cada R24 es independientemente uno o más de los siguientes: H, F, Cl, Br, I, CF3 u OCH3;

   15 en la que R25 es metilo, etilo, alilo o fenilo, y el fenilo está opcionalmente sustituido con F, Cl, Br, CF3, u OR4; y en la que cada R4 es independientemente -H; alquilo C1-C7 de cadena lineal o ramificada, monofluoroalquilo o polifluoroalquilo; alquenilo o alquinilo C2-C7 de cadena lineal o ramificada; cicloalquilo C3-C7, cicloalquenilo C5-C7, arilo o arilalquilo (C1-C6), o una sal farmacéuticamente

   20 aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria en un sujeto, siendo la alteración de la memoria una alteración de la memoria contextual o una alteración de la memoria de reconocimiento de objetos.

   25 11. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria está asociada con un trastorno psiquiátrico, un trastorno psicótico, un trastorno neurológico o un trastorno neurótico.
10. 12. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que la alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria está asociada con un trastorno del sistema

    5 nervioso central, preferentemente alteración de la memoria asociada a la edad, alteración cognitiva leve, enfermedad de Alzheimer o enfermedad de Parkinson.
11. 13. El uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que la alteración cognitiva manifestada por una alteración de la memoria está asociada con traumatismo craneal,

    10 traumatismo cerebral, enfermedad cerebrovascular, trastorno por déficit de atención o un trastorno afectivo.
12. 14. El uso de la reivindicación 11, en el que el trastorno psicótico es esquizofrenia.

    15 15. El uso de la reivindicación 13, en el que el trastorno cerebrovascular es demencia vascular.