ES2348741T3 - Derivados de fosforamidato de compuestos nucleosidos para uso en el tratamiento del cancer. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de formula I: **(Ver fórmula)** donde: cada X y Z está independientemente seleccionada de H, OH, F, Cl, Br, I, C1-6alquilo y NR5R6, donde cada R5y R6 es independientemente seleccionado de H y C1-6alquilo; Y es seleccionado de OH, F, Cl, Br, I, C1-6alquilo, C28alquinilo, NR5R6, donde cada R5 y R6 es independientemente seleccionado de H y C1-6alquilo; cada T y T' es independientemente seleccionada de H, F y OH, con la salvedad que sólo uno de T y T' puede ser OH; Q es seleccionado de O S y CR7R8, donde R7 y R8 son independientemente seleccionados de H y C1-6alquilo; Ar es seleccionado de C6-30arilo y C6-30heteroarilo, cada uno de los cuales es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente de hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino, SO3H, SH, SR', donde R' es independientemente seleccionada del mismo grupo que R1; carboxilo, C1-6ésteros, C1-6aldehido, ciano, C16alquilamino, C1-6dialquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor, iodo, C1-6alquilo, C2-6alquenilo, C1-6alcoxi-C1-6alquilo, C1-6alcoxi-C5cada R1 y R2 es independientemente seleccionado de H, y el grupo consistente de C1-20alquilo, C2-20alquenilo, C120alcoxi, C1-20alcoxiC1-20alquilo, C1-20alcoxiC6-30arilo, C220alquinilo, C3-20cicloalquiloC6-30arilo, C6-30ariloxi y C520heterociclilo, cualquiera de los cuales es opcionalmente sustituido; cada R3 y R4 es independientemente seleccionado de H, y el grupo consistente de C1-20alquilo, C2-20alquenilo, C120alcoxi, C1-20alcoxiC1-20alquilo, C1-20alcoxiC6-30arilo, C220alquinilo, C3-20cicoalquiloC6-30arilo, C6-30ariloxi y C520heterociclilo, cualquiera de los cuales es opcionalmente sustituido; cualquier sustituyente adicional en R1, R2, R3 y R4 siendo uno o más sustituyentes independientemente seleccionados del grupo consistente de hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino, amido, SO3, H, SH, SR', donde R' es independientemente seleccionado del mismo grupo que R1, carboxi, C1-6ésteros, C1-6aldehido, ciano, C1-6alquilamino, C1-6dialquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor, iodo, C5-7cicloalquilo, C5-7 cicloalquenilo, C5-7cicloalquinilo, C5-11arilo, C5-11ariloC1-6alquilo y C520heterociclilo; 10arilo C5-7cicoalquilo, C5-11cicloalquilo-C1-6alquilo, C57cicoalquenilo, C5-7cicloalquinilo, C5-11ariloC1-6alquilo, C16alquiloC5-11arilo, C5-11arilo, C1-6fluoroaquilo y C26fluoroalquenilo; y sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

Description

La presente invención se refiere a compuestos químicos, su preparación y su uso en el tratamiento del cáncer. Particularmente, aunque no exclusivamente, la presente invención se refiere a compuestos químicos útiles en el tratamiento de la leucemia en homo sapiens.

Algunos nucleótidos modificados de purina son conocidos por mostrar potentes propiedades biológicas, incluido un potencial quimioterapeútico. Agentes clínicos anti-cáncer conocidos incluyen la cladribina y fludarabina, y también la clofarabina que está en desarrollo clínico.

Las siguientes formulas muestran las estructuras químicas de la cladribina, isodadribina, fludarabina y clofarabina:

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La cladribina es un fármaco útil, pero tóxico. Es dado mediante infusión para el tratamiento de leucemias, y en particular para la leucemia de células pilosas (BNF, 2004). Se usa también para la leucemia crónica linfocítica en pacientes en los que han fallado las terapias normales con agentes alquilantes.

La flodarabina está autorizada para el tratamiento de leucemia crónica linfocítica de células B.

La clofarabina es la tercera línea de tratamiento en la leucemia pediátrica linfoblástica en los Estados Unidos y tiene actividad en la leucemia mieloide aguda.

El isómero estructural de la cladribina, arriba “isocladribina”, es conocido como un medio sintético, pero sus propiedades biológicas no han sido presentadas.

Como con todos los análogos de nucleósidos, estos

5 agentes requieren activación mediada por quinasa intracelular para sus formas de fosfatos bioactivos. Los fosfatos preformados no pueden en general ser usados en terapia teniendo en cuenta su pobre permeabilidad membranosa. De hecho la fludarabina es a menudo administrada como su 5’-monofosfato libre,

10 simplemente para aumentar su solubilidad en agua, pero este simplemente actúa como un profármaco nucleosido. Reid G. et al Farmacología Molecular Vol. 63 Nº 5 (2003) pag. 1094 a 1103 se refiere al uso de la cladribina en el tratamiento de una variedad de leucemias. Reid G. et al también

15 se refiere al uso de 2’, 3’-dideoxinucleosidos en el tratamiento antiviral del VIH y la circunvención del requerimiento de quinasa de 2’, 3’-dideoxinucleosidos por su distribución intracelular en sus formas de monofosfato por el uso de triéster de fosforamidita permeable en las células.

20 Es un objeto de la presente invención proporcionar un compuesto que, en uso, tenga una potencia terapéutica aumentada, particularmente potencia con respecto a un cáncer como puede ser la leucemia. De acuerdo a un primer aspecto de la presente invención se

25 proporciona un compuesto de formula I:

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35 donde: cada X y Z es seleccionada independientemente de H, OH, F, Cl, Br, I, C1-6alquilo y NR5R6, donde cada R5 y R6 es seleccionado independientemente de H y C1-6alquilo; Y es seleccionada de OH, F, Cl, Br, I, C1-6alquilo, C28alquinilo y NR5R6, donde cada R5 y R6 es independientemente seleccionado de H y C1-6alquilo; Cada T y T’ es independientemente seleccionada de H, F y OH, con la salvedad que sólo una de las T y T’ pude ser OH; Q es seleccionada de O, S y CR7R8, donde R7 y R8 son independientemente seleccionadas de H y C1-6alquilo; Ar es seleccionada de C6-30aryland C6-30heteroarilio, cada uno de los cuales puede ser opcionalmente sustituido por uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente de hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino, SO3H, SH, SR’, donde R’ es independientemente seleccionado del mismo grupo como R1; carboxilo, C1-6ésteres, C1-6aldehído, ciano, C16alquilamino, C1-6dialquilamino, tiol, cloro, bromo, fluoro, yodo, C1-6alquilo, C2-6alquenilo, C1-6alcoxi-C1-6alquilo, C16alcoxi-C5-10arilo, C5-7cicloalquilo, C5-11cicloalquilo-C1-6alquilo, C5-7cicloalquenilo, C5-7cicloalquinilo, C5-11ariloC1-6alquilo, C16alquiloC5-11arilo, C5-11arilo, C1-6fluroalquilo y C26fluroalquenilo, Cada R1 y R2 es independientemente seleccionada de H, y el grupo consistente de C1-20alquilo, C2-20alquenilo, C1-20alcoxi, C1-20alcoxiC1-20alquilo, C1-20alcoxiC6-30arilo, C2-20alquinilo, C320cicloalquiloC6-30arilo, C6-30ariloxi, C5-20heterociclilo, cualquiera de los cuales es opcionalmente sustituido; y Cada R3 y R4 es independientemente seleccionada de H, y el grupo consistente de C1-20alquilo, C2-20alquenilo, C120alcoxi, C1-20alcoxiC1-20alquilo, C1-20alcoxiC6-30arilo, C220alquinilo, C3-20cicloalquiloC6-30arilo, C6-30ariloxi, C520heterociclilo, cualquiera de los cuales es opcionalmente sustituido;

Cualquier sustituyente opcional en R1, R2, R3 y R4 siendo

uno o más sustituyentes independientemente seleccionados del grupo consistente de hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino,

amido, SO3H, SH, Sr’, donde R’ independientemente

seleccionada del mismo grupo como R1carboxi, C1-6ésteres,

C1-6aldehido, ciano, C1-6alquilamino, C1-6dialquilamino, tiol,

cloro, bromo, flúor, yodo, C5-7cicloalquilo, C5-7cicloalquenilo,

C5-7cicloalquinilo, C5-11arilo, C5-11ariloC1-6alquilo y C5

20heterociclilo,

y sales aceptables farmacéuticamente y sus solvatos.

Se ha descubierto sorprendentemente que los compuestos que contiene la presente invención tienen una actividad mejorada anti cáncer en homo sapiens. Particularmente se ha descubierto que los compuestos que contiene la presente invención tienen una actividad mejorada anti-leucémica comparada con los compuestos conocidos cladribina, fludarabina e isocladribina.

Se cree que los compuestos que contiene la presente invención tienen una actividad anti-cáncer particular respecto a la leucemia mieloide aguda. Los compuestos que contienen la presente invención pueden ser también útiles respecto a la profilaxis y tratamiento de otros tipos de leucemia y otros cánceres, incluyendo, por ejemplo, tumores sólidos.

La actividad anti-cáncer mejorada de los compuestos de la presente invención se cree que es debida a la solubilidad en la membrana de los nucleosidos de purina fosforamidita de la presente invención.

De acuerdo a un aspecto adicional de la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula I, incluyendo la opción de Y siendo H, para el uso en un método de tratamiento, adecuado en la profilaxis o tratamiento del cáncer, más adecuado en la profilaxis o tratamiento de leucemia.

De acuerdo a un aspecto adicional de la presente invención se proporciona el uso de un compuesto de fórmula I, incluyendo la opción de Y siendo H, en la producción de un medicamento para la profilaxis o tratamiento del cáncer, preferiblemente un medicamento para la profilaxis o tratamiento de leucemia.

Un método de profilaxis o tratamiento del cáncer, adecuadamente la leucemia, puede comprender la administración a un paciente con necesidad de dicho tratamiento de una dosis efectiva de un compuesto de fórmula I, incluyendo la opción de Y

5 siendo H.

De acuerdo a un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de formula I en combinación con un portador, diluyente o excipiente aceptable.

10 De acuerdo a un aspecto adicional de la presente invención se proporciona un método para preparar una composición farmacéutica que comprende el paso de combinar un compuesto de fórmula 1 con un excipiente, portador o diluyente aceptable farmacéuticamente.

15 De acuerdo a un aspecto adicional de la presente invención se proporciona un proceso para la preparación de un compuesto de fórmula I, el proceso comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula III:

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30 con un compuesto de la formula IV:

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Donde Ar, Q, R1, R2, R3, R4, X, Y, X, T y T’ tienen los significado indicados más arriba con respecto a la formula I.

Preferiblemente, cada X y Z es independientemente seleccionada de H, OH, F, Cl y NH2 e Y es seleccionada de OH, F, Cl, NH2, y C2-8alquinilo. Los compuestos preferidos incluyen aquellos donde: X es NH2, Y es Cl y Z es H; X es Cl, Y es NH2 y Z es H; X es NH2, Y es F y Z es H; y X es NH2, Y es C2-8alquinilo, preferiblemente C2-6alquinilo, y Z es H.

Donde Y es C2-6alquinilo, preferiblemente Y es lineal C26alquinilo y preferiblemente Y contiene un enlace triple C≡C en la posición alfa.

Preferiblemente cada una de las T y T’ es H, una o preferiblemente ambas T y T’ es F, o preferiblemente T es H y T’ es OH. Donde una T y T’ es F, la otra T y T’ es adecuadamente

H. Preferiblemente Q es O. Preferiblemente R4 es H. Preferiblemente R1 y R2 son seleccionadas de tal forma

que correspondan a las cadenas laterales de un aminoácido

natural.

Preferiblemente uno de R1 y R2 es Me y uno de R1 y R2 es H, de tal forma que el átomo C conteniendo R1 y R2 tiene la quiralidad como en una alanina natural.

Preferiblemente R3 es alquilo, más preferiblemente R3 es seleccionada del grupo consistente de metilo, etilo, 2-propilo, 2butilo y bencilo, aún más preferiblemente R3 es seleccionado del grupo consistente de metilo (-CH3) y bencilo (-CH2C6H5).

Las entidades Ar preferidas incluyen fenilo, piridilo, naftilo y quinolil, cada uno de los cuales puede ser sustituido o no sustituido. Como Ar se prefiere especialmente el naftilo, particularmente el naftilo no sustituido. El piridilo es –C5NH4. Así por “C6-30heteroarilo” de Ar se entiende un sistema de anillos aromáticos de seis a treinta eslabones que pueden contener uno

o más heteroátomos en el sistema de anillos, como se define más adelante.

Los compuestos preferidos tienen las identidades preferidas para X, Y, Z, T, T’, Q, Ar, R1, R2, R3 y R4 como se recoge arriba.

Los compuestos particularmente preferidos tienen:

X = NH2, Y = Cl, Z= H, Q = O y T = T’ = H por lo que son derivados de la cladribina;

X= Cl, Y = NH2, Z = H, Q = O yT = T’ = H porlo que son derivados de la isocladribina;

X = NH2, Y = Cl, Z = H, Q = O, T = F yT’ = H por lo que son derivados de la clofarabina; y

X = NH2, Y = C2-6alquinilo, más preferido C2-6alquinilo, Z = H, Q = O, T = H yT’ = OH.

Cada uno de los compuestos particularmente preferidos expuestos anteriormente, incluidos aquellos derivados de la cladribina, isocladribina, y clofarabina, respectivamente, son especialmente preferido cuando cada Ar, R1, R2, R3 y R4 tiene una identidad preferida como se ha indicado anteriormente.

Los compuestos particularmente preferidos se indican en los Ejemplos y en la Tabla II abajo.

El centro de fósforo en los compuestos de la formula I puede ser un diastereoisómero Rp o Sp o puede ser una mezcla de diastereoisómeros Rp o Sp. Preferiblemente es un diastereoisómero puro. Apropiadamente se selecciona el diastereoisómero más activo. Apropiadamente las sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula I son ésteres y amidas en el 3’-OH.

Preferiblemente el proceso de preparar el compuesto de la fórmula I incluye el paso de proteger grupos libres de OH, aparte del 5’ en el nucleósido. El fosforocloridato puede ser preparado de un ariloxi fosforocloridato y un derivado amino acido adecuadamente protegido. Alternativamente, se puede usar la química de fosfatos con agentes de condensación adecuados.

Cada Ar, R1, R2, R3 y R4 puede ser sustituido con uno, dos, tres, cuatro, cinco o más sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que comprende los donantes de electrones y medios que retiran electrones.

Los sustituyentes en Ar pueden ser localizados orto, meta-, para-o de otra manera en los grupos aromáticos.

R1 y R2 son adecuadamente seleccionados independientemente del grupo consistente de H, C1-10alquilo, C210alquenilo, C2-10alcoxiC1-10alquilo, C1-10alcoxiC9-10arilo, C210alquinilo, C3-20cicloalquilo, C3-20cicloalquenilo, C4-20cicloalquinilo y C5-10heterociclilo.

R1 y R2 son adecuadamente seleccionados de las cadenas laterales de aminoácidos sintéticos o naturales. R1 y/o R2 son preferiblemente una cadena lateral de un aminoácido natural seleccionado del grupo consiste de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, lisina, arginina, histidina, ácido aspártico, ácido glutámico, asparagina, glutamina, cisteína y metionina. Especificamente, R1 y/o R2 son preferiblemente seleccionados del grupo consistente de H, CH3, -CH(CH3)2, CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)(CH2CH3), -CH2Ph, -CH2Ph-OH, CH2SH, -CH2CH2SCH3, -CH2OH, -CH(CH3)(OH), CH2CH2CH2CH2NH3+, -CH2CH2CH2NHC(=NH2+)NH2, -CH2C(O) O, -CH2CH2C(O)O-, -CH2C(O)NH2, -CH2CH2C(O)NH2,

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y donde R1 y R4 juntos pueden formar un anillo heterocíclico de 5 eslabones teniendo la estructura

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R3 y R4 son adecuadamente seleccionados del grupo consistente de H, C1-10alquilo, C2-10alquenilo, C1-10alcoxi, C1-10alcoxiC1

10alquilo, C1-10alcoxiC6-10arilo, C2-10alquinilo, C3-20cicloalquilo, C320cicloalquenilo, C4-20cycloalquinilo, y C5-20heterociclilo.

R3 es adecuadamente seleccionado del grupo consistente de H, C1-18alquilo, C3-20cicloalquilo y bencilo.

R4 es adecuadamente seleccionado del grupo consistente de H, C1-18alquilo, C3-20cicloalquilo y C5-20heterociclilo. R4 es particularmente seleccionada adecuadamente del grupo consistente de H, metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo y ciclohexilo.

En una realización preferida, R1 y R2 son metilo o están unidos para formar un anillo heterocíclico o carbociclíco cerrado de 5 eslabones, por ejemplo, como la presente en la prolina.

Como se usa en la presente, el término “alquilo” se refiere a un radical de hidrocarburo cíclico o acíclico monovalente saturado recto o ramificado, teniendo un número de átomos de carbono como se indica (o donde no es indicado, un grupo alquilo acíclico tiene 1-20, más preferiblemente tiene 1-6, más preferiblemente 14 átomos de carbono y un grupo alquilo cíclico tiene 3-20, preferiblemente 3-10, más preferiblemente 3-7 átomos de carbono), opcionalmente sustituidos con uno, dos, tres o más sustituyentes independientemente seleccionados del grupo expuesto anteriormente con respecto a los sustituyentes que pueden estar presentes en R1, R2, R3 y R4. A modo de ejemplos no limitativos, los grupos alquilo adecuados incluyen metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, octilo, nonilo y dodecilo.

Como se usa en la presente el término “alquenilo” se refiere un radical de hidrocarburo acíclico o cíclico monovalente no saturado recto o ramificado que tiene uno o más enlaces dobles C=C y tienen el número de átomos de carbono como se indica ( o donde no se indica, un grupo alquenilo acíclico tiene 2-20, más preferiblemente 2-6, más preferiblemente 2-4 átomos de carbono y un grupo alquenilo cíclico tienen preferiblemente 4-20, más preferiblemente 4-6 átomos de carbono), opcionalmente sustituidos con uno, dos, tres o más sustituuentes independientemente seleccionados del grupo expuesto anteriormente referente a los sustituyentes que pueden estar presentes en R1, R2, R3 y R4. A modo de ejemplos no limitativos, los grupos alquenilos adecuados incluyen vinilo, propenilo, butenilo, pentelino y hexenilo.

Como se usa en la presente, el término “alquinilo” se refiere a un radical de hidrocarburo acíclico o cíclico monovalente no saturado recto o ramificado que tiene uno o más enlaces triples C≡C y tienen un número de átomos de carbono como se indica (

o donde no se indica, un grupo alquinilo acíclico tiene 2-20, más preferiblemente 2-6, más preferiblemente 2-4 átomos de carbono y un grupo alquinilo cíclico preferiblemente tiene 7-20, más preferiblemnte 8-20 átomos de carbono), opcionalmente sustituidos con uno, dos , tres o más sustituyentes independientemnte seleccionados del grupo expuesto anteriormente referente a los sustituyentes que pueden estar presentes en R1, R2, R3 y R4.

Como se usa en la presente, el término “alcoxi” se refiere al grupo alquilo-O-, donde el alquilo está como se define anteriormente y donde la fracción de alquilo puede ser sustituida por uno, dos tres o más sustituyentes como se establece anteriormente para el alquilo. A modo de ejemplos no limitativos, los grupos alcoxi adecuados incluyen, metoxi, etoxi, n-propoxi, iso-propoxi, n-butoxi, tert-butoxi, sec-butoxi, n-pentoxi, n-hexoxi y 1,2-dimetilbutoxi.

Como se usa en la presente, el término “ariloxi” se refiere al grupo arilo-O-, donde el arilo está como se define más abajo y donde la fracción de arilo puede ser opcionalmente sustituida por uno, dos, tres o más sustituyentes como se establece anteriormente con respecto al grupo Ar.

Como se usa en la presente, el término “alcoxialquilo” se refiere a un grupo alquilo teniendo un sustituyente alcoxi. La unión es a través del grupo alquilo. La fracción de alquilo y la fracción de alcoxi están como se define en la presente con respecto a las definiciones de alquilo y alcoxi, respectivamente. Las fracciones de alcoxi y alquilo pueden ser cada una sustituidas por uno, dos o tres sustituyentes como se establece anteriormente con respecto a la definición de alquilo.

Como se usa en la presente, el término “alcoxiarilo” se refiere a un grupo arilo que tiene un sustituyente alcoxi. La unión es a través del grupo arilo. La fracción de alcoxi y la fracción de arilo están como se definen en la presente con respecto a las definiciones de alcoxi y arilo, respectivamente. Las fracciones de alcoxi y arilo pueden cada una ser sustituidas por uno, dos, tres o más sustituyentes, como se define en la presente respecto a las definiciones de alcoxi y arilo, respectivamente.

Como se usa en la presente, el término “cicloalquiloarilo” se refiere a un grupo arilo que tiene un sustituyente alquilo cíclico. La unión es a través del grupo arilo. La fracción de cicloalquilo y la fracción de arilo están definidas en la presente con respecto a las definiciones de cicloalquilo y arilo, respectivamente. La fracción de cicloalquilo y la fracción de arilo pueden cada una ser sustituidas por uno, dos, tres o más sustituyentes como se define en la presente respecto a las definiciones de alquilo y arilo, respectivamente.

Como se usa en la presente, el término “arilo” se refiere a un radical carbocíclico aromático no saturado monovalente que tiene uno, dos, tres cuatro, cinco o seis anillos, preferiblemente uno, dos o tres anillos, que pueden ser fusionados o bicíclicos. Un grupo arilo puede opcionalmente ser sustituido por uno, dos, tres

o más sustituyentes como se establece anteriormente respecto a los sustituyentes opcionales que pueden estar presentes en el grupo Ar. Preferiblemente los grupos arilos son: un anillo monocíclico aromático que contiene 6 átomos de carbono; un sistema de anillos bicíclico o fusionados aromáticos que contiene 7, 8, 9 ó 10 átomos de carbono; o un sistema de anillos tricíclico aromático que contiene 10, 11, 12, 13 o 14 átomos de carbono. Ejemplos no limitativos de arilo incluyen el fenilo y el naftilo. Los grupos sustituyentes preferidos son independientemente seleccionados del hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino, SO3H, SH, SR’, donde R’ es independientemente seleccionada del mismo grupo que R1; carboxil, ciano, C1-6alquilamino, C1-6diaquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor y yodo.

Como se usa en la presente, el término “C6-30heteroarilo” se refiere un radical de 6 a 30 eslabones heterocíclico aromático no saturado monovalente que tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis anillos, preferiblemente uno, dos o tres anillos, que pueden ser fusionados o bicíclicos, y que contienen dentro del anillo al menos un heteroátomo seleccionado del grupo consistente de N, O y S. Los átomos de carbono disponibles y/o los heteroátomos en el sistema de anillos heteroarilo pueden ser sustituidos en el anillo con uno o más sustituyentes como se establece anteriormente con respecto a los sustituyentes que pueden estar presentes en el grupo Ar. Los grupos heteroarilos preferidos son: un sistema de anillos monocíclico aromático que contiene seis eslabones de los cuales al menos un eslabón es un átomo de N, O ó S y que opcionalmente contiene uno, dos o tres átomos adicionales de N; un anillo monocíclico aromático que tiene seis eslabones de los cuales uno, dos o tres eslabones son un átomo de N; un anillo bicíclico o fusionado aromático que tiene nueve eslabones de los cuales al menos un eslabón es un átomo de N, O ó S y que opcionalmente contiene uno, dos o tres átomos adicionales de N; o un anillo bicíclico aromático que tiene diez eslabones de los cuales uno, dos o tres eslabones son un átomo de N. Los ejemplos incluyen, pero no están limitados a, piridilo y quinolilo.

Como se usa en la presente, el término “heterociclilo” se refiere a un sistema de anillos heterocíclico saturado o parcialmente saturado que tiene uno, dos, tres, cuatro, cinco o seis anillos, preferiblemente uno, dos, o tres anillos, que pueden ser fusionados o bicíclicos, y que contienen dentro del anillo o anillos al menos un eslabón seleccionado del grupo consistente de N, O y S. El prefijo “C5-20 ” o “C5-10 ” usados antes del heterociclilo significan, respectivamente, un sistema de anillos de cinco a veinte o de cinco a diez eslabones en el que al menos uno de sus eslabones es seleccionado del grupo consistente de N, O y S. Los sistemas heterociclilos preferidos son: un sistema de anillos monocíclico que tenga cinco eslabones de los cuales al menos un eslabón es un átomo de N, O ó S y que opcionalmente contenga un átomo adicional de O ó uno, dos o tres átomos adicionales de N; un anillo monocíclico que tenga seis eslabones de los cuales uno, dos o tres eslabones son átomos de N; un sistema de anillos bicíclico que tenga diez eslabones de los cuales uno, dos o tres eslabones son átomos de N. Los ejemplos incluyen, pero no están limitados, pirrolinil, pirrolidinil, 1,3dioxolanilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, morfolonilo o piperazinilo.

Los átomos y/o heteroátomos de carbono disponibles de los sistemas de anillos “heterociclilo” descritos anteriormente pueden ser sustituidos en el anillo con uno o más heteroátomos. Donde el anillo(s) es sustituido con uno o más heteroátomos, los heteroátomos sustituyentes son seleccionados del oxigeno, nitrógeno, sulfuro y halógeno (F, Cl, Br y I). Donde el anillo(s) es sustituido con uno o más heteroátomos, preferiblemente son seleccionados 1, 2, 3 o 4 heterátomos sutitutyentes seleccionados del grupo consistente en oxigeno, nitrógeno, y/o halógeno, Los grupos sustituyentes preferidos son independientemente seleccionados del hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino, SO3H, SH, SR’, donde R’ es independientemente seleccionada de los mismos grupos como R1; carboxil, ciano, C16alquilamino, C1-6dialquilamino, tiol, cloro, bromo, flúoryyodo.

El proceso es preferiblemente realizado en presencia de un disolvente adecuado.

Los disolventes adecuados incluyen disolventes de hidrocarburo tales como el benceno y el tolueno; disolventes del tipo éter tales como el éter dietílico, el tetrahidrofurano, el éter difenil, el anisol y el dimetoxibenceno; disolventes de hidrocarburos alogenados tales como el cloruro de metileno, el cloroformo y el clorobenceno; disolventes tipo cetónico tales como la acetona, la metil etil cetona y la metil isobutil cetona; disolventes tipo alcohol tales como el metanol, el etanol, el propanol, el isopropanol, alcohol n-butil y tert-butil alcohol; disolventes tipo nitrilo tales como el acetonitrilo, el propionitrilo, y el benzonitrilo; disolventes tipo éster tales como el acetato de etilo y el acetato de butilo; disolventes tipo carbonato tales como el carbonato de etileno y el carbonato de propileno; y similares. Estos pueden ser utilizados por separado o dos o más de ellos pueden ser utilizados mezclados.

Preferiblemente se utiliza un disolvente inerte en el proceso de la presente invención. El término “disolvente inerte” significa un disolvente inerte bajo las condiciones de la reacción que se describe en relación con ello incluyendo, por ejemplo, benzeno, tolueno, acetonitrilo, tetrahidrofurano, dimetilformamida, cloroformo, cloruro de metileno (o diclorometano), éter dietílico, acetato de etilo, acetona, metil-letil cetona, metanol, etanol, propanol, isopropanol, tert-butanol, dioxano, piridina, y similares. Se prefiere particularmente el tetrahidrofurano.

Preferiblemente el proceso de la presente invención es realiza bajo unas condiciones sustancialmente secas.

Como se usa en la presente, el término “ésteroisómero” define todos los compuestos posibles hechos de los mismos átomos unidos por la misma secuencia de eslabones pero teniendo diferente estructuras tridimensionales que no son intercambiables, con los compuestos que la presente invención pueden tener.

Cuando los compuestos de acuerdo a la presente invención tienen la menos un centro quiral, pueden existir como enantiómeros. Cuando los compuestos tienen dos o más centros quirales, pueden existir adicionalmente como diastiómeros. Cuando los procesos para la preparación de los compuestos de acuerdo a la presente invención dan lugar a una mezcla de ésteroisómeros, estos isómeros pueden ser separados por técnicas convencionales como la cromatografía preparativa. Los compuestos pueden ser preparados de forma ésteroquímica mixta o enantiómeros individuales pueden ser preparados con técnicas convencionales conocidas por aquellos expertos en la materia, por ejemplo, por síntesis enancioespecífica o resolución, formación de parejas diastereoméricas por formación de sal con un acido ópticamente activo, seguido de cristalización fraccional y regeneración de la base libre. Los compuestos también pueden ser resueltos por la formación de ésteres o amidos diastereómeros, seguido por separación cromatográfica y remoción del auxiliar quiral. Alternativamente, los compuestos pueden ser resueltos usando una columna quiral HPLC. Se tiene que entender que tales isómeros y mezclas del mismo se engloban en el ámbito de la presente invención.

Además, se debe tener en cuenta que el centro de fosfato es quiral en los compuestos de la presente invención y que los compuestos pueden existir como diasteroisómeros RP y SP. La composición del compuesto puede ser RP y SP mezclados o un diasteroisómero puro. Preferiblemente el compuesto es un único isómero sustancialmente puro.

Puede haber una mezcla de diasterosiómeros RP a SP 1:1. Alternativamente, puede haber ratios de 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:15, 1:20, 1:50 o 1:100 de diasteroisómeros RP a SP o viceversa.

El término “solvato” significa un compuesto de fórmula (I) como se define en la presente, o de una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de estructura (I), donde las moléculas de un disolvente aceptable se incorporan en la red cristalina. Un disolvente adecuado es fisiológicamente tolerable en la dosis administrada. Ejemplos de disolventes aceptables son el etanol, agua y similares. Cuando el disolvente es agua, nos referimos a la molécula como un hidrato.

Los compuestos de la presente invención pueden estar también presentes en forma de sales farmacéuticamente aceptables. Para el uso en medicina, las sales de los compuestos de la presente invención se refieren a “sales farmacéuticamente aceptables” no-tóxicas. Formas de sales farmacéuticamente aceptables aprobadas por la FDA (Referencia Internacional J. Pharm. 1986. 33, 201-217; J. Pharm. Sci., 1977, Enero, 66 (¡1)) incluyen sales acidas/aniónicas o básicas/catiónicas farmacéuticamente aceptables.

Las sales acidas/aniónicas farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no están limitadas a, acetato, benzenesulfonato, benzoato, bicarbonato, bitartrato, bromuro, edetato de calcio, carnsilato, carbonato, cloruro, citrato, dihidrocloruro, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gliceptato, gluconato, glutamato, glicollilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, hidrobromuro, clorhidrato, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, maleato, mandelato, mesilato, bromuro de metilo, metilnitrato, metilsulfato, mucato, napsilato, nitrato, pamoato, pantotenato, fosfato, difosfato, poligalacturonato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato y trietioduro.

Las sales básicas/catiónicas farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no están limitadas a, aluminio, benzatina, calcio, cloroprocaina, colina, dietanolamina, etilenediamina, litio, magnesio, potasio, procaina, sodio y zinc.

La presente invención recoge en su ámbito profármacos de los compuestos de esta invención. En general dichos profármacos serán derivativos funcionales de los compuestos que son fácilmente convertibles en vivo en el compuesto requerido. Así, en los métodos de tratamiento de la presente invención, el término “administración” englobará el tratamiento de varios desordenes descritos con el compuesto específicamente revelado

o con un compuesto que puede no ser específicamente revelado, pero que se convierte al compuesto especifico en vivo tras la administración al sujeto. Se describen procesos convencionales para la selección y preparación de profármacos derivativos aceptables, por ejemplo, en “Diseño de Profármacos”, ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

Derivativos de éster farmacéuticamente aceptable en los que uno o más grupos de hidroxilo libres son esterificados en la forma de éster farmacéuticamente aceptable son ésteres profármacos que pueden ser convertibles por solvólisis bajo condiciones fisiológicas a los compuestos de la presente invención con grupos de hidroxilo libres.

Composiciones farmacéuticas para el uso de acuerdo con la presente invención pueden ser formuladas de una manera convencional usando uno o más portadores aceptables fisiológicamente que comprenden excipientes y auxiliares que facilitan el procesamiento de los componentes activos en preparaciones que pueden ser usadas farmacéuticamente. Estas composiciones farmacéuticas pueden ser fabricadas de una manera conocida por sí misma, por ejemplo, por medio de procesos de mezclas convencionales, disolución, granulación, realización de grageas, levigación, emulsificación, encapsulamiento, atrapamiento o liofilización. La formulación adecuada dependerá de la ruta de administración elegida.

El compuesto que tiene la fórmula I o la composición farmacéutica de acuerdo a la presente invención puede ser administrado a un paciente, que puede ser un homo sapiens o un animal, por cualquier medio aceptable.

Los medicamentos empleados en la presente invención pueden ser administrados por vías orales o parenterales, incluyendo administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, transdérmica, aérea (aerosol), rectal, vaginal y tópica (incluyendo bocal y sublingual).

Para la administración oral, los compuestos de la invención generalmente serán proporcionados en forma de pastillas o cápsulas, como un polvo o gránulos, o como una suspensión o solución acuosa.

La pastillas para uso oral pueden incluir el ingrediente activo mezclado con excipientes farmacéuticamente aceptables como diluyentes inertes, agentes de desintegración, aglutinantes, agentes lubricantes, edulcorantes, aromatizantes, colorantes y conservantes. Los diluyentes inertes aceptables incluyen el sodio y el carbonato de calcio, sodio y fosfato de calcio, y lactosa, mientras que el almidón de maíz y el ácido algínico son agentes de desintegración aceptables. Los aglutinantes pueden incluir el almidón y la gelatina, mientras que el lubricante, si está presente, será generalmente estearato de magnesio, acido esteárico o talco. Si se desea las pastillas pueden ser recubiertas con un material como el monoestearato de glicerilo o el diestearato de glicerilo, para retardar la absorción en el tracto gastrointestinal.

Las cápsulas para el uso oral incluyen cápsulas de gelatina dura en las que el ingrediente activo está mezclado con un diluyente sólido, u capsulas de gelatina blanda en las que el ingrediente activo está mezclado con agua o un aceite como aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.

Las formulaciones para administración rectal pueden estar presentadas como un supositorio con una base aceptable que incluya por ejemplo manteca de cacao o un salicilato.

Las formulaciones aceptables para la administración vaginal pueden estar presentadas como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas espumas o formulaciones de aerosol conteniendo en adición al ingrediente activo portadores que sean conocidos en la técnica como apropiados.

Para uso intramuscular, intraperitoneal, subcutáneo e intravenoso, los compuestos de la invención serán generalmente proporcionados en soluciones o suspensiones acuosas estériles tamponadas a un Ph e isotonicidad apropiados. Los vehículos acuosos adecuados incluyen La solución de Ringer y el cloruro de sodio isotónico, Las suspensiones acuosas de acuerdo a la invención pueden incluir agentes suspensores como derivados de celulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona y goma tragacanto, y un agente humectante como la lecitina. Conservantes aceptables para suspensiones acuosas incluyen etilo y n-propilo p-hidroxibenzoato.

Los compuestos de la invención pueden estar presentes también como formulaciones de liposomas.

En general una dosis adecuada estará en el rango de 0,1 a 300 mg por kilogramos de peso corporal del receptor por día, Una dosis más baja preferida es de 0,5 mg por kilogramos de peso corporal del receptor por día, una dosis baja más preferida es 1 mg por kilogramo de peso corporal del receptor por día. Una dosis aceptable está preferiblemente en el rango de 1 a 50 mg por kilogramo de peso corporal por día, y más preferiblemente en el rango de 1 a 10 mg por kilogramos de peso corporal por día. La dosis deseada es preferiblemente presentada como dos, tres, cuatro, cinco o seis o más sub-dosis administradas en intervalos apropiados a lo largo del día. Estas sub-dosis pueden ser administradas en unidades de vías de administración, por ejemplo, conteniendo de 10 a 1500 mg, preferiblemente 20 a 100 mg, y más preferiblemente 50 a 700 mg de ingrediente activo por unidad de vía de administración.

Ejemplos

Los compuestos objetivo fueron preparados por la reacción del nucleosido apropiado con el fosforocloridato requerido. Los últimos reactivos fueron preparados por métodos publicados de aril fosforodicloridatos con clorhidratos ésteres aminoácidos. Se dan varios ejemplos.

Sintesis de 2-cloro-2’deoxiadenosina-5’-[fenilo-(metoxi-Lalaninilo)]-fosfato (CPF203). N-Metilmidazol (NMI) (0.29 g, 3.50mmol, 0.29 mL) se añadió a una suspensión en agitación de 2-cloro-2’-deoxiadenosina (0.200 g, 0.70 mmol) en THF (10 mL) seco. Fenil-(metoxi-L-alaninil)fosforocloridato (0.58 g, 2.10 mmol) en THF seco se añadió gota a gota a -78°C. Después de 15 minutos se dejó que la reacción alcanzase la temperatura ambiente. La reacción fue seguida por TLC (DCM/MeOH 95/5), tras 4 horas fue añadido más Fenil(metoxil-alaninil)-fosforocloridato (0.28 g, 1.0 mmol) y la reacción fue dejada en agitación durante la noche. Se añadió MeOH para detener la reacción, se evaporaron los volátiles y el residuo fue purificado por cromatografía en columna rápida (DCM/MeOH 100/0 to 95/5) y preparativo TLC (DCM/MeOH 96/4) para dar al producto como espuma blanca (0.008 g, 2% de rendimiento; Cladribina recuperada 0.15 g). 31P-NMR (CDCl3, 121 MHz): δ 4.56,4.21. 1H-NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 8.14,8.07 (1H, 2s, H-8), 7.52-7.29 (5H, m, Ph), 6.56-6.50 (1H, m, H-1’), 6.18-6.01 (1H, bs, NH2), 4.90-4.77 (1H, m, H-3’), 4.46-4.56 (2H, m, H-5’), 4.32-4.26 (1H, m, H-4’), 4.22-4.02 (1H, m, CHNH), 3.85,3.83 (3H, 2s, CH3O), 2.92-2.61 (2H, m, H-2’), 1.56-1.44 (3H, m, CH3CH).

Síntesis de 2-cloro-2’deoxiadenosina-5’-[fenil-(benzoxi-Lalninilo)]-fosfato (CPF204).

NMI (0.29 g, 3.50 mmol, 0.29 mL) fue añadido a una suspensión en agitación de 2-cloro-2’-deoxiadenosina (0.200 g,

0.70 mmol) en THF (10 mL) seco. Fenil-(benzoxi-L-alaninilo) fosforocloridato (0.74 g, 2.10 mmol) en THF seco fue añadido gota a gota a -78°C. Después de 15 minutos se dejó que la reacción alcanzase la temperatura ambiente y la reacción se dejó en agitación durante la noche. Se añadió MeOH para detener la reacción, se evaporaron los volátiles. El residuo fue purificado por cromatografía en columna rápida (DCM/MeOH 100/0 to 95/5) y preparativo TLC (DCM/MeOH 96/4) para dar al producto como espuma blanca (0.015 g, 4% de rendimiento). 31P-NMR (MeOH, 121 MHz): δ 5.11,4.81. 1H-NMR (MeOH, 300 MHz): δ 8.12,8.10 (1H, 2s, H-8),7.23-7.04 (10H, m, PhO, PhCH2), 6.30-6.24 (1H, m, H-1’), 5.04-5.00 (2H, m, PhCH2), 4.52-4.48 (1H, m, H-3’), 4.29

4.15 (2H, m, H-5’), 4.08-4.04 (1H, m, H-4’), 3.91-3.81 (1H, m, CHNH), 2.63-2.54 (1H, m, uno de H-2’), 2.41-2.33 (1H, m, uno de H-2’), 1.24-1.17 (3H, m, CHCH3). 13C-NMR (MeOD; 75 MHz): δ 20.6,20.8 (CH3), 41.2 (C-2’), 52.0,52.1 (CHCH3), 67.7,68.1,68.2,68.3 (C-5’,CH2Ph), 72.6 (C-3’), 86.2,86.4 (C-1’), 87.2,87.3 (C-4’), 121.7, 121.8, 126.5, 129.6, 129.7, 129.9, 131.1, 137.6, 141.5 (C-5,C-8,PhCH2,PhO,"ipso" PhCH2), 151.8, 151.9 (C-6), 152.4, 152.5 ("ipso" PhO), 155.7, 155.8 (C-2), 158.4 (C-4), 175.0, 175.2 (COOCH2Ph).

Síntesis de 2-cloro-2’-deoxiadenisina-5’-[1-naftilo-(benzoxiL-alaninilo)]-fosfato. NMI (0.29 g, 3.50 mmol, 0.29 mL) fue añadido a una suspensión en agitación de 2-cloro-2’-deoxiadenosina (0.200 g,

0.70 mmol) en THF (6 mL) seco. I-Naftilo-(benzoxi-L-alaninilo)fosforocloridato (0.85 g, 2.10 mmol) en THF (4 mL) seco fue añadido gota a gota a -78 °C. Después de 15 minutos se dejó que la reacción alcanzase la temperatura ambiente y la reacción se dejó en agitación durante la noche.

Se añadió MeOH para detener la reacción, se evaporaron los volátiles. El residuo fue purificado por cromatografía en columna rápida (DCM/MeOH 100/0 a 95/5) y un preparativo HPLC (H2O/CH3CN 60/40) para dar al producto como espuma blanca (mezclado. 26 mg, elución rápida. 11 mg, elución lenta. 8 mg). MEZCLADAS (CPF210)

31P-NMR (CDCl3, 202 MHz): δ 3.64,3.23 (int.: 1.00,0.97). HPLC: Rt 8.92, 9.59 min. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 8.00-7.98 (1H, m, H-8 Naph), 7.86 (0.5 H, s, uno de H-8 o un diastereoisómero), 7.77 (1H, d, H-5 Naph, 3J=7.4 Hz), 7.75 (0.5 H, s, uno de H-8 o un diastereoisómero), 7.56 (1H, d, H-4 Naph, 3J=8.3 Hz), 7.44-7.40 (3H, m, H-2 Naph, H-6 Naph, H-7 Naph), 7.31-7.15 (6H, m, H-3 Naph, Ph), 6.25-6.21 (1H, m, H-1’), 5.73 (2H, bs, NH2), 5.04 (1H, s, CH2Ph de un diastereoisómero), 4.97 (0.5H, d, 2J=12.2 Hz, un CH2Ph de un diastereoisómero), 4.94 (0.5H, d, 2J=12.2 Hz, un CH2Ph de un diastereoisómero), 4.57

4.54 (0.5H, m, H-3’ de un diastereoisómero), 4.49-4.46 (0.5H, m, H-3’ de un diastereoisómero), 4.34-4.23 (2H, m, H-5’), 4.11-4.00 (2H, m, H-4’, CHNH), 3.91 (0.5H, CHNH de un diastereoisómero),

3.90 (0.5H, CHNH de un diastereoisómero), 3.13 (0.5H, OH de un diastereoisómero), 3.01 (0.5H, OH de un diastereoisómero), 2.56

2.51 (0.5H, m, un H-2’ de un diastereoisómero), 2.43-2.29 (1.5H, m, tres H-2’), 1.27-1.24 (3H, 2d, CHCH3).13C-NMR (CDCl3; 125 MHz): δ 19.7,19.8 (CH3), 38.8 (C-2’), 49.4,49.5 (CHCH3), 64.8,66.2,66.3 (C-5’,CH2Ph), 69.8 (C-3’), 83.0 (C-1’), 83.9,84.0 (C-4’), 113.9,114.0 (C-2 Naph), 117.6,120.2,120.3,123.9,124.5,125.2,125.4,125.5,125.7,126.8,12 7.1,127.4,127.5, 127.6 (C-5, C-8, PhCH2, C-5a Naph, C-3 Naph, C-4 Naph, C-5 Naph, C-6 Naph, C-7 Naph, C-8 Naph, C-8a Naph), 133.6,133.7,134.1 ("ipso" PhCH2, C-4a Naph), 145.3 (C-1 Naph), 149.3 (C-6), 153.0 (C-2), 155.13 (C-4), 172.4 (COOCH2Ph).

ELUCION RAPIDA (cpf211)

31P-NMR (CDCl3, 202 MHz): δ 3.60, 3.22 (int.: 4.87,1.00). HPLC: Rt 7.59, 8.92 min. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 8.03 (1H, d, 3J=7.5 Hz, H-8 Naph), 7.92 (0.2H, s, uno de H-8 de diastereoisómero menor), 7.80 (0.8H, s, H-8), 7.79 (1H, d, 3J=7.4 Hz, H-5 Naph), 7.61 (1H, d, H-4 Naph, 3J=8.3 Hz), 7.47-7.44 (3H, m, H-2 Naph, H-6 Naph, H-7 Naph), 7.35-7.12 (6H, m, H-3 Naph, Ph), 6.29-6.26 (1H, m, H-1’), 5.88 (2H, bs, NH2), 5.08 (0.4H, s, CH2Ph de diastereoisómero menor), 5.05,4.97 (1.6H, 2d, 2J=12.2 Hz, CH2Ph), 4.61-4.58 (0.2H, m, H-3’ de diastereoisómero menor), 4.54-4.51 (0.8H, m, H-3’), 4.36-4.32 (2H, m, H-5’), 4.12

4.06 (2.2H, m, H-4’, CHNH, CHNH de diastereoisómero menor),

3.82 (0.8H, CHNH),3.32 (0.2H, OH de diastereoisómero menor),

3.25 (0.8H, OH), 2.58-2.53 (0.2H, m, un H-2’ de diastereoisómero menor), 2.46-2.42 (0.2H, m, un H-de diastereoisómero menor), 2.41-2.33 (1.6H, m, H-2’), 1.31-1.29 (3H, 2d, CHCH3). ELUCION LENTA (cpf212) 31P-NMR (CDCl3, 202 MHz): δ 3.64,3.25 (int.: 1.00,28.15). HPLC: Rt 9.59, 10.92 min. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 7.99

7.97 (1H, dd, H-8 Naph), 7.87 (1H, s, H-8), 7.77-7.74 (1H, m, H-5 Naph), 7.57 (1H, d, H-4 Naph, 3J=8.3 Hz), 7.44-7.40 (3H, m, H-2 Naph, H-6 Naph, H-7 Naph), 7.29-7.20 (6H, m, H-3 Naph, Ph),

6.23 (1H, m, H-1’), 5.81 (2H, bs, NH2), 5.03 (2H, s, CH2Ph), 5.00,4.92 (d, 2J=12.3 Hz, CH2Ph de diastereoisómero menor), 4.58-4.55 (1H, m, H-3’), 4.49,4.48 (m, H-3’ de diastereoisómero menor), 4.34-4.23 (2H, m, H-5’), 4.08-3.99 (3H, m, H-4’, CHNH, CHNH), 3.78 (CHNH de diastereoisómero menor), 3.31 (1H, bs, OH), 2.56-2.50 (1H,m, un H-2’), 2.42-2.38 (1H, m, un H-2’), 2.37-2.31 (m, H-2’ de diastereoisómero menor),

1.26 (3H, 2d, CHCH3). Síntesis de 2-cloro-2’-deoxiadenosina-5’-[4-cloro-1-naftilo(benzoxi-L-alaninilo)]-fosfato (CPF218).

Se añadió NMI (0.26 g, 3.20 mmol, 0.25 mL) a una suspensión en agitación de 2-cloro-2’-deoxiadenosina (0.183g,

0.64 mmol) en THF (6 mL) seco.

Se añadió gota a gota 4-Cloro-1-naftilo-(benzoxi-Lalaninilo)-fofocloridato (0.87 g, 1.92 mmol) en THF (4 mL) seco a 78 °C. Tras 15 minutos se dejó que la reacción alcanzase la temperatura ambiente y se dejó en agitación durante la noche.

Se añadió MeOH para detener la reacción, se evaporaron los volátiles. El residuo fue purificado por cromatografía en columna rápida (DCM/MeOH 100/0 a 95/5) y HPLC preparativo (H2O/CH3CN 60/40) para dar al producto como espuma blanca (15 mg, 3%). 31P-NMR (CDCl3, 202 MHz): δ 3.45,3.26. HPLC: Rt 7.92, 10.20 min. 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz): δ 8.14-8.10 (1H, m, H-5 Naph), 7.99

7.96 (1H, m, H-8 Naph), 7.88 (0.5 H, s, uno de H-8 de un diastereoisómero), 7.82 (0.5 H, s, uno de H-8 de un diastereoisómero), 7.54-7.49 (1H, m, H-6 Naph), 7.47-7.40 (1H, m, H-7 Naph), 7.32-7.14 (7H, m, H-2 Naph, H-3 Naph, Ph), 6.25

6.22 (1H, m, H-1’), 6.04 (2H, bs, NH2), 5.00 (1H, s, CH2Ph de un diastereoisómero), 4.97 (0.5H, d, 2J=12.2 Hz, un CH2Ph de un diastereoisómero), 4.90 (0.5H, d, 2J=12.2 Hz, un CH2Ph de un diastereoisómero), 4.59-4.54 (1H, m, H-3’), 4.33-4.19 (2.5H, m, H5’, CHNH de un diastereoisómero), 4.08-3.96 (2.5H, m, H-4’, CHNH, CHNH de un diastereoisómero), 3.61,3.57 (1H, 2 bs, OH3’), 3.01 (0.5H, OH de un diastereoisómero), 2.59-2.34 (2H, m, H2’), 1.25-1.23 (3H, m, CHCH3). 13C-NMR (CDCl3; 125 MHz): δ

20.8 (CH3), 39.7 (C-2’), 50.5 (CHCH3), 66.2,66.3 (C-5’), 67.4 (CH2Ph), 71.0 (C-3’), 84.1 (C-1’), 84.9,85.0,85.1 (C-4’), 114.8,114.9,115.1, 118.8, 121.8, 124.7, 125.5, 127.2, 127.8, 128.1,128.3,128.5,128.6,128.7 (C-2 Naph, C-3 Naph, C-4 Naph, C-5 Naph, C-6 Naph, C-7 Naph, C-8 Naph, C-8a Naph, Ph), 131.6 (C-4a), 135.0 ("ipso" PhCH2), 139.3,139.4 (C-8), 145.3,145.4 (C-1 Naph), 150.4 (C-6), 154.1 (C-2), 156.1 (C-4), 173.3 (COOCH2Ph). Síntesis de 2-amino-6-cloropurina-2’-deoxiribosido-5’[fenil(benzoxi-L-alaninilo)]-fosfato (CPF194).

Se añadió NMI (0.36 g, 4.40mmol, 0.35mL) a una suspensión en agitación de 6-cloro-2’-deoxiguanosina (0.25 g,

0.88 mmol) y Fenil-(benzoxi-L-alaninilo)-fosforocloridato (0.93 g, 2.64 mmol) en THF (10 mL) seco a -78° C. Tras 15 minutos se dejó que la reacción alcanzase temperatura ambiente y se dejo la reacción en agitación durante la noche. Se añadió MeOH para detener la reacción, se evaporaron los volátiles. El residuo fue purificado por cromatografía en columna rápida (DCM/MeOH 100/0 a 96/4) t TLC preparativa (DCM/MeOH 97/3) para dar al producto como espuma blanca (0.145 g, 27.0 % de rendimiento).31P-NMR (MeOH, 121 MHz): δ 5.33,5.00. 1H-NMR (MeOH, 300 MHz): δ 8.17,8.16 (1H, 2s, H-8), 7.32-7.13 (10H, m, PhO, PhCH2), 6.37,6.32 (1H, 2d, H-1’), 5.11-5.06 (2H, m, PhCH2), 4.61-4.56 (1H, m, H-3’), 4.41-4.20 (1H, m, H-5’), 4.18-4.08 (1H, m, H-4’), 4.00-3.89 (1H, m, CHNH), 2.84-2.68 (1H, m, uno de H-2’), 2.41

2.30 (1H, m, uno de H-2’), 1.30-1.24 (3H, m, CHCH3). 13C-NMR (MeOD; 75 MHz): δ 20.6,20.7,20.8 (CH3), 40.4,40.7 (C-2’), 51.9,52.1 (CHCH3), 67.8,68.1,68.4 (C-5’,CH2Ph), 72.8 (C-3’), 86.4 (C-1’), 87.1,87.3,87.4 (C-4’), 121.7, 121.8, 125.8, 126.5, 129.7, 129.9, 131.1 (PhCH2,PhO), 137.5,137.6 ("ipso" PhCH2 ), 143.2,

143.3 (C-8), 152.0 (C-6), 152.4,152.5 ("ipso" PhO), 155.0, 155.1 (C-2), 161.9 (C-4), 175.0, 175.2 (COOCH2Ph). Síntesis de 9-β-D-arabinofuranosila-2-fluoradenina-5’-[fenil(metoxi-L-alaninilo)]fosfato. CPF109)

Se co-evaporó 9-β-D-arabinofuranosila-2-fluoradenina (50.0 mg, 0175 mmol) dos veces con tolueno, disuelto en 6mL de THF/Piridina (mezla 2:1 respectivamente) y se añadió NMI (71.8 mg, 0.875 mmol, 70 µL). La mezcla fue enfriada a -17°C en un baño de hielo/sal y bajo una atmósfera inerte se añadió gota a gota una solución 1M en THF de fenil-(metoxi-L-alaninilo) fosforocloridato (145.8 mg, 0.525 mmol, 525µL) durante una hora. Tras una hora se dejo que la reacción alcanzase la temperatura ambiente, se agitó durante 16 horas y se detuvo con metanol. El disolvente fue removido para reducir la presión y el crudo purificado mediante cromatografía en columna rápida usando diclorometano/metanol (elución gradiente de 95:5 a 85:5). El compuesto aislado fue aún más purificado mediante cromatografía en capa fina preparativa usando como disolvente Cloroformo/metanol (94:6) para obtener el producto como un aceite transparente, incoloro, que solidificó en espuma blanca tras la trituración y co-evaporación con dietil éter (9.5 mg, 10.33%). 19F-NMR (MeOD; 282 MHz): δ -54.04. 31P-NMR (MeOD; 121 MHz): δ 4.99. 1H-NMR (MeOD; 300 MHz): δ 8.22, 8.20 (1H, 2xs, H-8), 7.38-7.19 (5H, m, PhO), 6.33, 6.32 (1H, 2xd, 3J=3.4 Hz, H1’), 4.89-4.27 (4H, m, H-2’ +H-5’ +H-4’), 4.17-4.03 (1H, m, H-3’), 4.00-3.85 (1H, m, CHCH3), 3.66-3.65 (3H, 2xs, CH3O), 1.34, 1.29 (3H, 2xd, 3J=7.1 Hz, CH3CH). 13C-NMR (MeOD; 75 MHz): δ 20.7, 20.8, 20.9 (CH3CH), 51.9 (CH3CH), 53.1, 53.2 (CH3O), 67.4, 67.5, 67.8, 67.9 (C-5’), 77.3, 77.4, 77.6 (C-4’ +C-2’), 84.0, 84.1, 84.2, 84.3 (C-3’), 86.5, 86.7 (C-1’), 118.2 (adenosina-C), 121.8,

121.9 (’m’,PhO), 126.5 (’p’, PhO), 131.1 (’ipso’, PhO), 142.9,

143.0 ( 5J=2.9 Hz, C-8), 142.8, 142.9 (C-8), 152.4, 152.5, 152.6 (adenosine-C +’ipso’ PhO), 159.2, 159.4, 159.6, 162.4 (adenosine-C), 175.7, 175.8, 175.9 (COOMe). Síntesis de 2-cloro-2’-beta-fluor-2’deoxiadenisina-5’-[fenil(benzoxi-L-alaninilo)]-fosfato (CPT2001) Clofarabina-5’-[fenil-(benzoxi-L-alaninilo)]fosfato

imagen1

CPT2001 se preparó a partir de una solución en agitación de Clofarabina (0.23 g, 0.75 mmol) y fenil-benzoxi-L-alaninilo)fosforocloridato (0.80 g, 2.25 mmol) en 12.5 mL de anhídrido THF/PyR (4/1) a 80°C. Se añadió gota a gota NMI (0.31g, 300µL,

3.75 mmol) durante 1 minuto. Tras 15 minutos se dejó que la reacción alcanzase temperatura ambiente y se agitó durante 12 horas. El disolvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo resultante fue purificado mediante cromatografía en columna rápida, eluyendo con diclorometano/metanol 98/2 para dar el producto puro como un sólido espumoso blanco (.31, 66.0% de rendimiento). 31P-NMR (MeOD, 202 MHz): δ 3.77, 3.64; 19F-NMR (MeOD, 470 MHz): δ -198.98, -199.01; 1H-NMR (MeOD, 500 MHz): δ 8.17,8.16 (1H, 2s, H-8), 7.34-7.15 (10H, m, PhO, PhCH2), 6.46

6.40 (1H, m, H-1’), 5.21-5.07 (3H, m, H-2’, PhCH2), 4.56,4.52 (1H, 2s, H-3’), 4.40-4.39 (2H, m, H-5’), 4.19-4.16 (1H, m, H-4’), 4.04

4.01 (1H, m, CHCH3), 1.35,1.33 (3H, 2d, 3J=8.5 Hz, CHCH3); 13CNMR (MeOD, 75 MHz): δ 20.3,20.4,20.5 (CH3), 51.6,51.8 (CHCH3), 66.8,67.1 (C-5’), 68.0 (CH2Ph), 75.0,75.1,75.3 (C-3’), 83.6,83.7,83.8 (C-4’), 84.3,84.4,84.5 (C-1’), 95.6,97.2 (C-2’),

118.6 (C-5), 121.4, 121.5, 126.2, 129.2, 129.3, 129.6, 130.8 (PhO, CH2Ph), 137.2 (’ipso’ CH2Ph), 141.7,141.8 (C-8), 151.7,152.2 (’ipso’ PhO, C-6), 155.6 (C-4), 158.1 (C-2), 174.8,174.9 (CO2CH2Ph). HPLC (H2O/CH3CN de 100/0ao 0/100 en 20 minutos): tR 11.76 min. ESI MS (positivo): 621 [M].

Datos biológicos

Los compuestos CPF203, CPF204, CPF194, CPF210, CPF211, CPF 212, CPF218 Y CPT2001 fueron cada uno probados en líneas celulares leucémicas para asegurar su eficacia anti-cáncer. Los compuestos fueron probados utilizando los reactivos de ensayo de Promega (solución de ensayo de proliferación CellTiter96 Aqueous One). Los compuestos fueron probados entre 10µM y 0.002µM en cuatro disoluciones.

Las líneas celulares empleadas están recogidas en las Tablas IA y IB a continuación y son líneas celulares de leucemia NB4, HL60, NB4R2, K562, KG1 y U937.

La Tabla IA proporciona el valor de desviación estándar IC50± para cada línea celular y compuesto probado y para todas

las líneas celulares juntas, en µM. Incluidos en la Tabla IA a

continuación, como un ejemplo comparativo, están los datos de la

línea celular correspondiente a la cladribina. LA Tabla IB

proporciona el valor IC50

para cada línea celular y compuesto

5

probado. Incluidos en la Tabla IB a continuación, como un

ejemplo

comparativo, están los datos de la línea celular

correspondiente a la clofarabina.

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Tabla IA

Cladribina

CPF203 CPF204 CPF194 CPF210 CPF211 CPF212 CPF218

NB4

9.39±4.25 1.16±0.04 0.23±0.10 - 0.24±0.11 0.43±0.04 0.23±0.04 0.27±0.03

HL60

10.28±3.46 6.23±1.75 1.75±0.89- - 0.65±0.19 1.66±0.24 1.78±0.50 1.75±0.76

NB4R2

7.81±1.64 2.28±0.59 0.63±0.04 - 1.03±0.15 1.18±0.21 1.01±0.39 1.09±0.04

K562

- - - - 2.36±1.57 2.28±1.32 5.80±3.60 4.41±0.95

KG1

5.48±1.86 2.23±0.69 0.67±0.20 2.64±0.18 1.80±0.72 2.63±1.19 1.54±0.44 1.56±0.25

U937

2.08±2.75 1.29±0.91 0.08±0.01 - 0.19±0.09 0.28±0.03 0.14±0.15 0.55±0.44

Todas laslíneas

7.21±3.69 2.64±2.09 0.67±0.70 2.64±0.18 1.04±1.02 1.41±1.09 1,75±2.34 1.60±1.47

Tabla IB

Clofarabina

CPT2001

NB4

0.20 0.12

U937

0.26 0.08

La tabla II a continuación establece las estructuras de los compuestos actualmente ejemplificados que contiene la presente invención en términos de la fórmula I anterior, en cada caso Z = H yQ = O.

Tabla II

X

Y T’ T Ar R1 R2 R3 R4

CPF203

NH2 Cl H H C6H5 CH3 H CH3 H

CPF204

NH2 Cl H H C6H5 CH3 H C6H5CH2 H

CPF210

NH2 Cl H H C10H7 CH3 H C6H5CH2 H

CPF211

NH2 Cl H H C10H7 CH3 H C6H5CH2 H

CPF212

NH2 Cl H H C10H7 CH3 H C6H5CH2 H

CPF218

NH2 Cl H H 4-ClC10H6 CH3 H C6H5CH2 H

CPF194

Cl NH2 H H C6H5 CH3 H C6H5CH2 H

CPF109

NH2 F H OH C6H5 CH3 H CH3 H

CPT2001

NH2 Cl H F C6H5 CH3 H C6H5CH2 H

Con respecto a los datos contenidos en la Tabla IA, cada uno de los compuestos que contiene la presente invención está visto para demostrar la actividad mejorada anti-cáncer comparado con la cladribina.

En particular, el compuesto CPF210, en donde Ar es naftilo no sustituido, nuestra una potencia anti-leucémica mayor que la correspondiente al compuesto CPF203, en donde Ar es fenilo no sustituido.

Cabe

destacar también la actividad anti-leucémica

demostrada por el compuesto CPF194, que es la fosforamidata

del compuesto inactivo conocido isocladribina.

Respecto

a los datos contenidos en la tabla IB, el

5

compuesto CPT2001 que contiene la presente invención se ve

que demuestra

una actividad mejorada anti-cáncer comparada

con la clofarabina.

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Claims (28)

1. R E I V I N D I C A C I O N E S

   1. Un compuesto de formula I:

   imagen1

   donde: cada X y Z está independientemente seleccionada de H, OH, F, Cl, Br, I, C1-6alquilo y NR5R6, donde cada R5y R6 es independientemente seleccionado de H y C1-6alquilo; Y es seleccionado de OH, F, Cl, Br, I, C1-6alquilo, C28alquinilo, NR5R6, donde cada R5 y R6 es independientemente seleccionado de H y C1-6alquilo; cada T y T’ es independientemente seleccionada de H, F y OH, con la salvedad que sólo uno de T y T’ puede ser OH; Q es seleccionado de O S y CR7R8, donde R7 y R8 son independientemente seleccionados de H y C1-6alquilo; Ar es seleccionado de C6-30arilo y C6-30heteroarilo, cada uno de los cuales es opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo consistente de hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino, SO3H, SH, SR’, donde R’ es independientemente seleccionada del mismo grupo que R1; carboxilo, C1-6ésteros, C1-6aldehido, ciano, C16alquilamino, C1-6dialquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor, iodo, C1-6alquilo, C2-6alquenilo, C1-6alcoxi-C1-6alquilo, C1-6alcoxi-C5cada R1 y R2 es independientemente seleccionado de H, y el grupo consistente de C1-20alquilo, C2-20alquenilo, C120alcoxi, C1-20alcoxiC1-20alquilo, C1-20alcoxiC6-30arilo, C220alquinilo, C3-20cicloalquiloC6-30arilo, C6-30ariloxi y C520heterociclilo, cualquiera de los cuales es opcionalmente sustituido; cada R3 y R4 es independientemente seleccionado de H, y el grupo consistente de C1-20alquilo, C2-20alquenilo, C120alcoxi, C1-20alcoxiC1-20alquilo, C1-20alcoxiC6-30arilo, C220alquinilo, C3-20cicoalquiloC6-30arilo, C6-30ariloxi y C520heterociclilo, cualquiera de los cuales es opcionalmente sustituido; cualquier sustituyente adicional en R1, R2, R3 y R4 siendo uno o más sustituyentes independientemente seleccionados del grupo consistente de hidroxi, acilo, aciloxi, nitro, amino, amido, SO3, H, SH, SR’, donde R’ es independientemente seleccionado del mismo grupo que R1, carboxi, C1-6ésteros, C1-6aldehido, ciano, C1-6alquilamino, C1-6dialquilamino, tiol, cloro, bromo, flúor, iodo, C5-7cicloalquilo, C5-7 cicloalquenilo, C5-7cicloalquinilo, C5-11arilo, C5-11ariloC1-6alquilo y C520heterociclilo;

   10arilo

   C5-7cicoalquilo, C5-11cicloalquilo-C1-6alquilo, C5

   7cicoalquenilo,

   C5-7cicloalquinilo, C5-11ariloC1-6alquilo, C1

   6alquiloC5-11arilo,

   C5-11arilo, C1-6fluoroaquilo y C2

   6fluoroalquenilo;

   y sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

2. 2.

   Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1 donde cada X y Z es independientemente seleccionado de H, OH, F, Cl, y NH2 e Y es seleccionado de OH, F, Cl, NH2 y C2-8alquinilo.

3. 3.

   Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 2 donde X es NH2, Yes Cl yZes H.

4. 4.

   Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 2 donde X es Cl, Y es NH2 yZes H.

5. 5.

   Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 2 donde X es NH2, Yes FyZes H.

6. 6.

   Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 donde T y T’ son cada una H.

7. 7.

   Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 donde uno o ambos de T y T’ es F.

8. 8.

   Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 2 donde X es NH2, Y es C2-8alquinilo, Z es H, T es H y T’ es OH.

9. 9.

   Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde Q es O.

10. 10.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones precedentes donde R4 es H.

11. 11.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones precedentes donde R1 y R2 son seleccionadas de manera que la fracción –N-CR1R2-COO-corresponde a la de un aminoácido natural.

12. 12.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones anteriores donde cada R1 y R2 es independientemente seleccionado de Me y H.

13. 13.

    Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 12 donde uno de R1 y R2 es Me y uno de R1 y R2 es H tal que el átomo C conteniendo R1 y R2 tiene quiralidad L como en alanina natural.

14. 14.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones precedentes donde Ar es no sustituido.

15. 15.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a13 donde Ar es sustituido con uno, dos, tres, cuatro, cinco o más sustituyentes del grupo que comprende las fracciones donantes de electrones y las fracciones atrayentes de electrones.

16. 16.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones precedentes donde Ar es seleccionada del grupo formado por fenilo, piridilo, naftilo y quinolil, cada uno de los cuales puede ser sustituido o no sustituido.

17. 17.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones anteriores que comprende el diastereoisómero RP, el diastereoisómero SP o una mezcla de los diastereoisómeros RP y SP.

18. 18. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1

    seleccionado del grupo que comprende: 2-cloro-2’-deoxiadenosina-5’-[fenil-(metoxi-L-alaninilo)]fosfato; 2-cloro-2’-deoxiadenosina-5’-[fenil-(benzoxi-L-alaninilo)]fosfato; 2-cloro-2’-deoxiadenosina-5’-[1-naftilo-(benzoxi-L-alaninilo)]fosfato; 2-cloro-2’-deoxiadenosina-5’-[4-cloro-1-naftilo-(benzoxi-Lalaninilo)]-fosfato; 2-amino-6-cloropurina-2’-deoxiribosido-5’-[fenil-(benzoxi-Lalaninilo)]-fosfato; y 9-β-D-an’binofuranosil-2-fluoradenina-5’-[fenil-(metoxi-Lalaninilo)] fosfato.
19. 19. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1 siendo: 2-cloro-2’-beta-fluor-2’-deoxiadenosina-5’-[fenil-(benzoxi-Lalaninilo)]-fosfato.

20. 20.

    Un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, incluyendo la opción de Y siendo H, en la producción de un medicamento, para su uso en un método de tratamiento, adecuado en la profilaxis o tratamiento del cáncer, más adecuado en la profilaxis o tratamiento de la leucemia.

21. 21.

    El uso de un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, incluyendo la opción de Y siendo H, en la producción de un medicamento para la profilaxis o tratamiento del cáncer, preferiblemente un medicamento para la profilaxis i tratamiento de la leucemia.

22. 22.

    Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 en combinación con un portador, diluyente o excipiente aceptable farmacéuticamente.

23. 23.

    Un método para preparar una composición farmacéutica que comprende la etapa de combinar un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 con un excipiente, portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

24. 24.

    Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 19 para el uso en un método de tratamiento, adecuado en la profilaxis o tratamiento del cáncer, más adecuado en la profilaxis o tratamiento de la leucemia.

25. 25.

    El uso de un compuesto de acuerdo a la reivindicación 19 en la producción de un medicamento para la profilaxis o tratamiento del cáncer, preferiblemente un medicamento para la profilaxis o tratamiento de la leucemia.

26. 26.

    Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo a la reivindicación 19 en combinación con un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

27. 27.

    Un método de preparar una composición farmacéutica que comprende la etapa de combinar un compuesto de acuerdo a la reivindicación 19 con un excipiente, portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

28. 28.

    Un proceso de preparación de un compuesto de fórmula I, que comprende el proceso que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula III:

    imagen1

    con un compuesto de fórmula IV:

    imagen1

    donde Ar, Q, R1, R2, R3, R4, X, Y, Z, T y T’ tienen el significado indicado en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17.