ES2292123T3

ES2292123T3 - Inhibidores de la enzima integrasa de vih.

Info

Publication number: ES2292123T3
Application number: ES05718436T
Authority: ES
Inventors: Klaus Ruprecht Agouron Pharma. Inc. Dress; Qiyue Agouron Pharmaceuticals Inc. Hu; Ted William Agouron Pharma. Inc. Johnson; Michael Bruno Agouron Pharma. Inc. Plewe; Steven Paul Agouron Pharmaceuticals Inc. Tanis; Huichun Agouron Pharmaceuticals Inc. Zhu; Junhu Agouron Pharmaceuticals Inc. Zhang
Original assignee: PFIZER; Pfizer Inc
Current assignee: PFIZER; Pfizer Inc
Priority date: 2004-04-26
Filing date: 2005-04-13
Publication date: 2008-03-01
Anticipated expiration: 2025-04-13
Also published as: CA2563761A1; WO2005103051A1; US7692014B2; DE602005002746T2; MXPA06012342A; US20050277661A1; EP1751157A1; JP2007534738A; ATE374775T1; EP1751157B1; CA2563761C; US20100137283A1; DE602005002746D1; BRPI0510306A

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) en la que: R1 es hidrógeno, alquilo C1-C8, alquenilo C2-C8 o heteroalquilo C1-C8, donde dichos grupos alquilo C1-C8, alquenilo C2-C8 o heteroalquilo C1-C8 pueden estar opcionalmente sustituidos con al menos un sustituyente seleccionado independientemente entre: halo, -OR12a, -N(R12aR12b), -C(O)N(R12aR12b), -NR12aC(O)N(R12aR12b), -NR12aC(O)R12a, -NR12aC(NR12a)N(R12aR12b), -SR12a, -S(O)R12a, -S(O)2R12a, -S(O)2N(R12aR12b), alquilo C1-C8, arilo C6-C14, cicloalquilo C3-C8 y heteroarilo C2-C9, donde dichos grupos alquilo C1-C8, arilo C6-C14, cicloalquilo C3-C8 y heteroarilo C2-C9 están opcionalmente sustituidos con al menos un sustituyente seleccionado independientemente entre halo, -C(R12aR12bR12c), -OH y alcoxi C1-C8; R2 es hidrógeno o alquilo C1-C8; R3 es hidrógeno, alquilo C1-C8, -(CR7R8)tNR9R10, -S(O)zNR9R10, -C(O)NR9R10 o heteroalquilo C1-C8, donde dicho grupo heteroalquilo C1-C8 está opcionalmente sustituido con R11; Z es -(CR4R4)n-, -C(R4)=C(R4)-, -C(R4)=C(R4)-(CR4R4)n-, -(CR4R4)n-C(R4)=C(R4)- o -(CR4R4)n-C(R4)=C(R4)-(CR4R4)n-; una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que R5 no es hidrógeno cuando Z es -(CH2)-, R1 es 2, 4-difluorobencilo, y R2, R3 y R6 son hidrógeno

Description

Inhibidores de la enzima integrasa de VIH.

Campo

La presente invención se refiere a compuestos, y sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, su síntesis, y su uso como moduladores o inhibidores de la enzima integrasa del virus de la inmunodeficiencia humana ("VIH"). Los compuestos de la presente invención son útiles para modular (por ejemplo, inhibir) una actividad enzimática de la enzima integrasa de VIH y para tratar enfermedades o afecciones mediadas por VIH, tales como por ejemplo, el síndrome de inmunodeficiencia adquirida ("SIDA"), y el complejo relacionado con SIDA ("ARC").

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Antecedentes

El retrovirus denominado "virus de la inmunodeficiencia humana" o "VIH" es el agente etiológico de una enfermedad compleja que destruye progresivamente el sistema inmune. La enfermedad se conoce como síndrome de inmunodeficiencia adquirida o SIDA. El SIDA y otras enfermedades causadas por VIH son difíciles de tratar debido a la capacidad de VIH de replicarse rápidamente, mutar y adquirir resistencia a los fármacos. Para ralentizar la proliferación del virus después de la infección, el tratamiento del SIDA y otras enfermedades causadas por VIH se ha centrado en la inhibición de la replicación de VIH.

Como VIH es un retrovirus y, por tanto, codifica una cadena de ARN con sentido positivo, su mecanismo de replicación está basado en la conversión de ARN viral en ADN viral, y la posterior inserción del ADN viral en el genoma de la célula huésped. La replicación de VIH depende de tres enzimas codificadas por VIH constitutivas: transcriptasa inversa (RT), proteasa e integrasa.

Después de la infección con VIH, las partículas del núcleo retroviral se unen a receptores celulares específicos y consiguen entrar en el citoplasma de la célula huésped. Una vez en el interior del citoplasma, RT viral cataliza la transcripción inversa de ARNss viral para formar híbridos ARN-ADN virales. La cadena de ARN del híbrido después se degrada parcialmente y se sintetiza una segunda cadena de ADN produciendo ADNds viral. La integrasa, ayudada por proteínas virales y celulares, transporta después el ADNds viral al núcleo de la célula huésped como componente del complejo de pre-integración (PIC). Además, la integrasa proporciona la inserción permanente, es decir, la integración del ADNds viral en el genoma de la célula huésped que, a su vez, proporciona acceso viral a la maquinaria celular del huésped para la expresión génica. Después de la integración, la transcripción y la traducción producen proteínas precursoras virales.

Una etapa clave en la replicación de VIH, la inserción del ADNds viral en el genoma de la célula huésped, se cree que está mediada por la integrasa en al menos tres, y posiblemente cuatro etapas: (1) ensamblaje del ADN proviral; (2) procesamiento del extremo 3' que provoca el ensamblaje de PIC; (3) la unión del extremo 3' o la transferencia de la cadena de ADN, es decir, integración; y (4) rellenado de huecos, una función reparadora. Véase, por ejemplo, Goldgur, Y. y cols., PNAS 96(23): 13040-13043 (Nov. 1999); Sayasith, K. y cols., Expert Opin. Ther. Targets 5(4): 443-464 (2001); Young, S.D., Curr. Opin. Drug Disc. & Devel. 4(4): 402-410 (2001); Wai, J.S. y cols., J. Med. Chem. 43(26): 4923-4926 (2000); Debyser, Z. y cols, Assays for the Evaluation of HIV-1 Integrase Inhibitors, de Methods in Molecular Biology 160: 139-155, Schein, C.H. (ed.), Humana Press Inc., Totowa, N.J. (2001); y Hazuda, D. y cols., Drug Design and Disc. 13:17-24 (1997).

Actualmente, el SIDA y otras enfermedades causadas por VIH se tratan con un "cóctel de VIH" que contiene múltiples fármacos que incluyen inhibidores de RT y de la proteasa. Sin embargo, los numerosos efectos secundarios y la rápida aparición de resistencia a fármacos limitan la capacidad de los inhibidores de RT y de la proteasa de tratar de forma segura y eficaz el SIDA y otras enfermedades causadas por VIH. En vista de los inconvenientes de los inhibidores de RT y de la proteasa, existe la necesidad de otro mecanismo a través de cual pueda inhibirse la replicación de VIH. La integración, y por tanto la integrasa, una enzima codificada por el virus sin homólogo en mamíferos, es una alternativa lógica. Véase, por ejemplo, Wai, J.S. y cols., J. Med. Chem. 43: 4923-4926 (2000); Grobler, J. y cols., PNAS 99; 6661-6666 (2002); Pais, G.C.G. y cols., J. Med. Chem. 45: 3184-3194 (2002); Young, S.D., Curr. Opin. Drug Disc. & Devel. 4(4): 402-410 (2001); Godwin, C.G. y cols., J. Med. Chem. 45: 3184-3194 (2002); Young, S.D. y cols., "L-870, 810: Discovery of a Potent HIV Integrase Inhibitor with Potential Clinical Utility," Póster presentado en la XIV International AIDS Conference, Barcelona (7-12 de julio de 2002); y el documento WO 02/070491.

Se ha sugerido que para que funcione un inhibidor de la integrasa, debe inhibir la función de transferencia de cadena de la integrasa. Véase, por ejemplo, Young, S.D.; Curr. Opin. Drug Disc. & Devel. 4(4): 402-410 (2001). Por tanto, existe la necesidad de inhibidores de VIH, específicamente, inhibidores de la integrasa, y más específicamente, inhibidores de la transferencia de cadena, para tratar el SIDA y otras enfermedades causadas por VIH. Los agentes de la invención descritos en este documento son inhibidores nuevos, potentes y selectivos de la integrasa de VIH y, más específicamente, inhibidores de la transferencia de cadena, con alta actividad antiviral.

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Resumen

La presente invención proporciona compuestos de fórmula (I),

1

en la que:

R^{1} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8} o heteroalquilo C_{1}-C_{8}, donde dichos grupos alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8} o heteroalquilo C_{1}-C_{8} pueden estar opcionalmente sustituidos con al menos un sustituyente seleccionado independientemente entre:

halo, -OR^{12a}, -N(R^{12a}R^{12b}), -C(O)N(R^{12a}R^{12b}), -NR^{12a}C(O)N(R^{12a}R^{12b}), -NR^{12a}C(O)R^{12a}, -NR^{12a}C(NR^{12a})N(R^{12a}R^{12b}), -SR^{12a}, -S(O)R^{12a}, -S(O)_{2}R^{12a}, -S(O)_{2}N(R^{12a}R^{12b}), alquilo C_{1}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, cicloalquilo C_{3}-C_{8} y heteroarilo C_{2}-C_{9}, donde dichos grupos alquilo C_{1}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, cicloalquilo C_{3}-C_{8} y heteroarilo C_{2}-C_{9} están opcionalmente sustituidos con al menos un sustituyente seleccionado independientemente entre halo, -C(R^{12a}R^{12b}R^{12c}), -OH y alcoxi C_{1}-C_{8};

R^{2} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{8};

R^{3} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{8}, -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10}, -S(O)_{z}NR^{9}R^{10}, -C(O)NR^{9}R^{10} o heteroalquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo heteroalquilo C_{1}-C_{8} está opcionalmente sustituido con R^{11};

Z es -(CR^{4}R^{4})_{n}-, -C(R^{4})=C(R^{4})-, -C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-, -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})- o -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-;

cada R^{4} se selecciona independientemente entre hidrógeno, halo, heteroalquilo C_{1}-C_{8}, alquilo C_{1}-C_{8}, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y heteroarilo C_{2}-C_{9}, donde dichos grupos alquilo C_{1}-C_{8}, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y heteroarilo C_{2}-C_{9} están opcionalmente sustituidos con al menos un R^{13};

R^{5} es hidrógeno, heteroalquilo C_{1}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, alquenilo C_{2}-C_{8} o alquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo alquilo C_{1}-C_{8} está opcionalmente sustituido con al menos un grupo cicloalquilo C_{3}-C_{8} o arilo C_{6}-C_{14};

R^{6} es hidrógeno;

cada R^{7} y R^{8}, que pueden ser iguales o diferentes, se seleccionan independientemente entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{8};

R^{9} y R^{10}, que pueden ser iguales o diferentes, se seleccionan independientemente entre hidrógeno, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y alquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo alquilo C_{1}-C_{8} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, heteroarilo C_{2}-C_{9}, halo o arilo C_{6}-C_{14}, y donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo C_{1}-C_{8} o halo; o

R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un grupo R^{13};

R^{11} es cicloalquilo C_{3}-C_{8}, heteroalquilo C_{1}-C_{8}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, arilo C_{6}-C_{14} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un sustituyente seleccionado independientemente entre alquilo C_{1}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, heteroarilo C_{2}-C_{9}, -CF_{3}, -COR^{12a}, -CO_{2}R^{12a} y -OR^{12a};

cada R^{12a}, R^{12b} y R^{12c}, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{8} y oxo; o

R^{12a} y R^{12b}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, pueden formar un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9};

cada R^{13} se selecciona independientemente entre halo, alquilo C_{1}-C_{8}, -(CR^{7}R^{8})_{t}OR^{7}, -C(O)R^{12a}, -S(O)_{2}R^{7},
-(CR^{7}R^{8})_{z}C(O)NR^{12a}R^{12b}, -NR^{12a}R^{12b} y -CF_{3};

t es un número entero de 1 a 3;

cada n, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente y es un número entero de 1 a 4; y

cada z, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente y es 0, 1 ó 2; o

sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, con la condición de que R^{5} no es hidrógeno cuando Z es -(CH_{2})-, R^{1} es 2,4-difluorobencilo, y R^{2}, R^{3} y R^{6} son hidrógeno.

La presente invención también proporciona compuestos de fórmula (I),

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2

en la que:

R^{2} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{8};

R^{3} es hidrógeno, -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10} o heteroalquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo heteroalquilo C_{1}-C_{8} está opcionalmente sustituido con R^{11};

R^{5} es hidrógeno, heteroalquilo C_{1}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, alquenilo C_{2}-C_{8} o alquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho alquilo C_{1}-C_{8} está opcionalmente sustituido con al menos un grupo cicloalquilo C_{3}-C_{8} o arilo C_{6}-C_{14};

R^{6} es hidrógeno;

R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} opcionalmente sustituido con al menos un alquilo C_{1}-C_{8};

R^{11} es cicloalquilo C_{3}-C_{8}, heteroalquilo C_{1}-C_{8}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, arilo C_{6}-C_{14} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un sustituyente seleccionado independientemente entre alquilo C_{1}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, heteroarilo C_{2}-C_{9}, -CF_{3}, -COR^{12a}, -CO_{2}R^{12a}, y -OR^{12a};

cada R^{12a}, R^{12b} y R^{12c}, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{8};

cada R^{13} se selecciona independientemente entre halo, alquilo C_{1}-C_{8}, -(CR^{7}R^{8})_{t}OR^{7}, -NR^{12a}R^{12b} y -CF_{3};

t es un número entero de 1 a 3; y

cada n, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente y es un número entero de 1 a 4; o

En otro aspecto de la presente invención se proporcionan compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{1} es alquilo C_{1}-C_{8} sustituido con arilo C_{6}-C_{14}, donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} está opcionalmente sustituido con al menos un sustituyente seleccionado independientemente entre halo, -C(R^{12a}R^{12b}R^{12c}), -OH y alcoxi C_{1}-C_{8};

R^{2} es hidrógeno;

R^{3} es hidrógeno, -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10} o heteroalquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho heteroalquilo C_{1}-C_{8} está opcionalmente sustituido con R^{11};

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

En un aspecto más de la presente invención se proporcionan compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{1} es alquilo C_{1}-C_{8} sustituido con arilo C_{6}-C_{14}, donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} está opcionalmente sustituido con al menos un halo;

R^{2} es hidrógeno;

Z es -(CR^{4}R^{4})_{n}- -C(R^{4})=C(R^{4})-, -C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-, -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})- o -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-;

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

La presente invención también proporciona compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{2} es hidrógeno;

R^{3} es hidrógeno;

Z es -(CR^{4}R^{4})_{n}-, -C(R^{4})=C(R^{4})-, -C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-. -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})- o -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-;

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

Otro aspecto más de la presente invención son compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{1} es alquilo C_{1}-C_{8} sustituido con arilo C_{6}-C_{14}, donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} está opcionalmente sustituido con al menos un flúor;

R^{2} es hidrógeno;

R^{3} es hidrógeno;

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R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

Otro aspecto más son compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{2} es hidrógeno;

R^{3} es -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10};

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

También se proporcionan compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{2} es hidrógeno;

R^{3} es -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10};

cada R^{4} se selecciona independientemente entre hidrógeno, halo, heteroalquilo C_{1}-C_{8}, alquilo C_{1}-C_{8}, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y heteroarilo C_{2}-C_{9}, donde dichos grupos alquilo C_{1}-C_{8}, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, arilo C_{6}-C_{14}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, y heteroarilo C_{2}-C_{9} están opcionalmente sustituidos con al menos un
R^{13};

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

También se proporcionan compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{2} es hidrógeno;

R^{3} es heteroalquilo C_{1}-C_{8} opcionalmente sustituido con R^{11};

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

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Además, se proporcionan compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{2} es hidrógeno;

R^{3} es heteroalquilo C_{1}-C_{8} opcionalmente sustituido con R^{11};

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3; y

En otro aspecto adicional de la presente invención se proporcionan compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{3} es -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10}; y

R^{9} y R^{10}, que pueden ser iguales o diferentes, se seleccionan independientemente entre hidrógeno, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y alquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo alquilo C_{1}-C_{8} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, heteroarilo C_{2}-C_{9}, halo o arilo C_{6}-C_{14}, y donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo C_{1}-C_{8} o halo;

También se proporcionan compuestos de fórmula (I), en la que:

R^{3} es -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10};

R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un grupo R^{13}.

En otro aspecto adicional se proporcionan compuestos de fórmula (II),

3

en la que:

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X es -S(O)_{2}-, -CH_{2}- o -C(O)-;

cada z, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente y es 0, 1 ó 2; o sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En otro aspecto más se proporcionan compuestos de fórmula (III),

4

en la que:

X es -S(O)_{2}-, -CH_{2} o -C(O)-;

cada R^{13} se selecciona independientemente entre halo, alquilo C_{1}-C_{8}, -(CR^{7}R^{8})_{t}OR^{7}, -C(O)R^{12a}, -S(O)_{2}R^{7},
-(CR^{7}R^{8})_{z}C(O)NR^{12a}R^{12b}, -NR^{12a}R^{12b} y -CF_{3}; y

También se proporcionan en este documento compuestos de fórmula (IIIa):

5

en la que:

R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un R^{13};

cada R^{12a}, R^{12b} y R^{12c}, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{8}; o

R^{12a} y R^{12b}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, pueden formar un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}; y

cada R^{13} se selecciona independientemente entre halo, alquilo C_{1}-C_{8}, -(CR^{7}R^{8})_{t}OR^{7}, -C(O)R^{12a}, -S(O)_{2}R^{7},
-(CR^{7}R^{8})_{z}C(O)NR^{12a}R^{12b}, -NR^{12a}R^{12b} y -CF_{3}; o

sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

También se proporcionan compuestos de fórmula (IIIa), en la que R^{9} y R^{10}, que pueden ser iguales o diferentes, se seleccionan independientemente entre hidrógeno, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y alquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo alquilo C_{1}-C_{8} pueden estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, heteroarilo C_{2}-C_{9}, halo o arilo C_{6}-C_{14}, y donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo C_{1}-C_{8} o halo.

También se proporcionan compuestos de fórmula (IIIa), en la que R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un grupo R^{13}.

También se proporcionan en este documento compuestos de fórmula (IIIb),

6

en la que:

sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

También se proporcionan compuestos de fórmula (IIIb), en la que R^{9} y R^{10}, que pueden ser iguales o diferentes, se seleccionan independientemente entre hidrógeno, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y alquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo alquilo C_{1}-C_{8} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, heteroarilo C_{2}-C_{9}, halo o arilo C_{6}-C_{14}, y donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo C_{1}-C_{8} o halo.

También se proporcionan compuestos de fórmula (IIIb), en la que R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un grupo R^{13}.

En otro aspecto más se proporcionan compuestos de fórmula (IIIc),

7

en la que:

sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

También se proporcionan compuestos de fórmula (IIIc), en la que R^{9} y R^{10}, que pueden ser iguales o diferentes, se seleccionan independientemente entre hidrógeno, cicloalquilo C_{3}-C_{8}, cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} y alquilo C_{1}-C_{8}, donde dicho grupo alquilo C_{1}-C_{8} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}, heteroarilo C_{2}-C_{9}, halo o arilo C_{6}-C_{14}, y donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} puede estar opcionalmente sustituido con al menos un grupo C_{1}-C_{8} o halo.

También se proporcionan compuestos de fórmula (IIIc), en la que R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} o heteroarilo C_{2}-C_{9}, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido con al menos un grupo R^{13}.

En otro aspecto más se proporciona cualquiera de los compuestos anteriores donde Z es -(CH_{2})-, -(CH_{2})_{2}-,
-(CH_{2})_{3}- o -(CH=CH)-.

También se proporciona cualquiera de los compuestos anteriores donde R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} que comprende 4 átomos de carbono y un átomo de nitrógeno; o donde R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} que comprende 4 átomos de carbono y 2 átomos de nitrógeno; o donde R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} que comprende 4 átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, y un átomo de oxígeno, con la condición de que dicho átomo de nitrógeno y dicho átomo de oxígeno no están unidos entre sí; o donde R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} que comprende 4 átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, y un átomo de azufre; o donde R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} que comprende 4 átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, y un átomo de azufre oxidado; o donde R^{9} y R^{10}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} que comprende tres átomos de carbono y tres átomos de nitrógeno.

También se proporcionan compuestos seleccionados entre 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona; 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metil}-L-prolinamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(3-oxopiperazin-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-metoxietoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1 -(3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-ilmetil)-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[metil(pentil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metil}-D-prolinamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(1-oxo-2,8-diazaespiro[4.5]dec-8-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[ciclohexil(etil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[4-(2-oxo-2-pirrolidin-1-iletil)piperazin-1-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[metil(2-piridin-2-iletil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; (3R)-1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metil}-N,N-dimetilpirrolidina-3-carboxamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({4-hidroxi-4-[(2-oxopirrolidin-1-il)metil]piperidin-1-il}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(5-oxo-1,4-diazepan-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]sulfonil}-L-prolinamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-N-[2-(1H-indol-3-il)etil]-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(3-oxopiperazin-1-il)sulfonil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-N,N-dimetil-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(2,2,2-trifluoroetil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; N,3-bis(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-(pirrolidin-1-ilcarbonil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-[(4-acetilpiperazin-1-il)carbonil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(2-pirazin-2-iletil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-carboxamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(piridin-2-ilmetil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-carboxamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(2,2,2-trifluoroetil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-carboxamida; 1-[(4-etilpiperazin-1-il)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-({[(2S)-2,3-dihidroxipropil]oxi}metil)-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 4-({[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metoxi}metil)piperidina-1-carboxilato de terc-butilo; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-piridin-2-iletoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[2-(ciclohexiloxi)etoxi]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-[({[(4R)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metil}amino)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-metoxietoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(1R)-1-feniletoxi]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[1-(hidroximetil)ciclopentil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(propilamino)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(3-metilbencil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[(5-metilpirazin-2-il)metil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[4-(trifluorometil)bencil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(piridin-2-ilmetil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona; 8-butil-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-8-metil-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona, 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(2-hidroxietil)(propil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[2-(hidroximetil)piperidin-1-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[[2-(dietilamino)etil](etil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[etil(4-metilbencil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[4-(etilsulfonil)piperazin-1-il]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(4-hidroxipiperidin-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[bencil(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(7R)-7-hidroxihexahidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(3aR,7aR)-3-oxooctahidro-5H-pirrolo[3,4-c]piridin-5-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-(morfolin-4-ilmetil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[4-(2-morfolin-4-iletil)piperazin-1-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; y 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({metil[(1-fenil-1H-pirazol-4-il)metil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; o

sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En un aspecto más se proporcionan compuestos seleccionados entre 3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-metoxietoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-(3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-ilmetil)-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-[({[(4R)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metil}amino)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-metoxietoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(1R)-1-feniletoxi]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[4-(trifluorometil)bencil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(piridin-2-ilmetil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; o

sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

También se proporcionan compuestos seleccionados entre 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[metil(pentil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metil}-D-prolinamida; 1-{[ciclohexil(etil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[metil(2-piridin-2-iletil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-N,N-dimetil-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-(pirrolidin-1-ilcarbonil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 4-({[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metoxi}metil)piperidina-1-carboxilato de terc-butilo; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-piridin-2-iletoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[2-(ciclohexiloxi)etoxi]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[1-(hidroximetil)ciclopentil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(propilamino)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(3-metilbencil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; y 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[(5-metilpirazin-2-il)metil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; o

sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas, que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno cualquiera de los compuestos de este documento, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos, y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

También se proporcionan usos de al menos uno cualquiera de los compuestos de este documento, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) o complejo relacionado con SIDA en un mamífero infectado por VIH.

Debe apreciarse que los compuestos de la presente invención no incluyen el compuesto de fórmula (I) en la que R^{1} es 2,4-difluorobencilo, R^{2} es hidrógeno, R^{3} es hidrógeno, Z es -(CH_{2})- y R^{6} es hidrógeno, donde dicho compuesto se llama 6-(2,4-difluorobencil)-2-hidroxi-1,6-dihidrodipirrolo[3,2-d:3',4'-b]piridin-3(2H)-ona.

Como se usa en este documento, las expresiones "que comprende" y "que incluye" se usan en su sentido más abierto y no limitante.

Como se usa en este documento, el término "VIH" significa Virus de Inmunodeficiencia Humano. El término "integrasa de VIH", como se usa en este documento, se refiere a la enzima integrasa del Virus de Inmunodeficiencia Humano.

El término "alquilo C_{1}-C_{8}", como se usa en este documento, se refiere a radicales hidrocarburo, monovalentes, saturados, que tienen restos lineales o ramificados y que contienen de 1 a 8 átomos de carbono. Los ejemplos de tales grupos incluyen, pero sin limitación, metilo, etilo, propilo, iso-propilo, n-butilo, iso-butilo y terc-butilo.

El término "heteroalquilo C_{1}-C_{8}" se refiere a un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene un total de 2 a 12 átomos en la cadena, incluyendo de 1 a 8 átomos de carbono, y uno o más átomos de los cuales es un heteroátomo seleccionado entre S, O y N, con la condición de que dicha cadena no puede contener dos átomos de O adyacentes o dos átomos de S adyacentes. Los átomos de S de dichas cadenas pueden estar opcionalmente oxidados con uno o dos átomos de oxígeno, para proporcionar sulfuros y sulfonas, respectivamente. Además, los grupos heteroalquilo C_{1}-C_{8} de los compuestos de la presente invención pueden contener un grupo oxo en cualquier carbono o heteroátomo que dará como resultado un compuesto estable. Los grupos heteroalquilo C_{1}-C_{8} ejemplares incluyen, pero sin limitación, alcoholes, alquiléteres, alquilaminas primarias, secundarias y terciarias, amidas, cetonas, ésteres, sulfuros y sulfonas.

El término "alquenilo C_{2}-C_{8}", como se usa en este documento, se refiere a un resto alquilo que comprende de 2 a 8 carbonos y que tiene al menos un doble enlace carbono-carbono. El doble enlace carbono-carbono de dicho grupo puede estar en cualquier parte de la cadena de 2 a 8 carbonos siempre que dé como resultado un compuesto estable. Dichos grupos incluyen los isómeros E y Z de dicho resto alquenilo. Los ejemplos de tales grupos incluyen, pero sin limitación, etenilo, propenilo, butenilo, alilo y pentenilo. El término "alilo", como se usa en este documento, se refiere a un grupo -CH_{2}CH=CH_{2}. El término "C(R)=C(R)", como se usa en este documento, representa un doble enlace carbono-carbono en el que cada carbono está sustituido con un grupo R.

Como se usa en este documento, el término "alquinilo C_{2}-C_{8}" se refiere a un resto alquilo comprendido por 2 a 8 átomos de carbono y que tiene al menos un triple enlace carbono-carbono. El triple enlace carbono-carbono de dicho grupo puede estar en cualquier sitio de la cadena de 2 a 8 carbonos que dé como resultado un compuesto estable. Los ejemplos de tales grupos incluyen, pero sin limitación, etino, propino, 1-butino, 2-butino, 1-pentino, 2-pentino, 1-hexino, 2-hexino y 3-hexino.

La expresión "grupo cicloalquilo C_{3}-C_{8}" se refiere a una estructura de anillo saturado, monocíclico, condensado, espirocíclico o policíclico que tiene un total de 3 a 8 átomos de carbono en el anillo. Los ejemplos de tales grupos incluyen, pero sin limitación, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, cicloheptilo y adamantilo.

El término "arilo C_{6}-C_{14}", como se usa en este documento, se refiere a un grupo derivado de un hidrocarburo aromático que contiene de 6 a 14 átomos de carbono. Los ejemplos de tales grupos incluyen, pero sin limitación, fenilo o naftilo. Los términos "Ph" y "fenilo", como se usan en este documento, se refieren a un grupo -C_{6}H_{5}. El término "bencilo", como se usa en este documento, se refiere a un grupo -CH_{2}C_{6}H_{5}.

El término "heteroarilo C_{2}-C_{9}", como se usa en este documento, se refiere a un grupo heterocíclico aromático que tiene un total de 5 a 10 átomos en su anillo, y que contiene de 2 a 9 átomos de carbono y de uno a cuatro heteroátomos seleccionados cada uno de ellos independientemente entre O, S y N, y con la condición de que el anillo de dicho grupo no contiene dos átomos de O adyacentes o dos átomos de S adyacentes. Los grupos heterocíclicos incluyen sistemas de anillos benzo-condensados. Son ejemplos de grupos heterocíclicos aromáticos piridinilo, imidazolilo, pirimidinilo, pirazolilo, triazolilo, pirazinilo, tetrazolilo, furilo, tienilo, isoxazolilo, tiazolilo, oxazolilo, isotiazolilo, pirrolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, indolilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, cinnolinilo, indazolilo, indolizinilo, ftalazinilo, piridazinilo, triazinilo, isoindolilo, pteridinilo, purinilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, furazanilo, benzofurazanilo, benzotiofenilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, naftiridinilo y furopiridinilo. Los grupos heteroarilo C_{2}-C_{9} pueden estar C-enlazados o N-enlazados donde sea posible. Por ejemplo, un grupo derivado de pirrol puede ser pirrol-1-ilo (N-enlazado) o pirrol-3-ilo (C-enlazado). Además, un grupo derivado de imidazol puede ser imidazol-1-ilo (N-enlazado) o imidazol-3-ilo (C-enlazado).

El término "cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9}", como se usa en este documento, se refiere a un grupo monocíclico, bicíclico, tricíclico, espirocíclico o tetracíclico, no aromático, que tiene un total de 4 a 10 átomos en su sistema de anillos, y que contiene de 2 a 9 átomos de carbono y de uno a cuatro heteroátomos seleccionados cada uno de ellos independientemente entre O, S y N, y con la condición de que el anillo de dicho grupo no contiene dos átomos de O adyacentes o dos átomos de S adyacentes. Además, dichos grupos cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} pueden contener un sustituyente oxo en cualquier átomo disponible que dé como resultado un compuesto estable. Por ejemplo, dicho grupo puede contener un átomo oxo en cualquier átomo de carbono o nitrógeno disponible. Dicho grupo puede contener más de un sustituyente oxo si es químicamente factible. Además, debe apreciarse que cuando dicho grupo cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} contiene un átomo de azufre, dicho átomo de azufre puede estar oxidado con uno o dos átomos de oxígeno para producir un sulfóxido o sulfona. Un ejemplo de un grupo heterocíclico de 4 miembros es azetidinilo (derivado de azetidina). Un ejemplo de un grupo heterocíclico de 5 miembros es tiazolilo y un ejemplo de un grupo heterocíclico de 10 miembros es quinolinilo. Otros ejemplos de dichos grupos cicloheteroalquilo C_{2}-C_{9} incluyen, pero sin limitación, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, dihidrofuranilo, tetrahidrotienilo, tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanilo, piperazinilo, azetidinilo, oxetanilo, tietanilo, homopiperidinilo, oxepanilo, tiepanilo, oxazepinilo, diazepinilo, tiazepinilo, 1,2,3,6-tetrahidropiridinilo, 2-pirrolinilo, 3-pirrolinilo, indolinilo, 2H-piranilo, 4H-piranilo, dioxanilo, 1,3-dioxolanilo, pirazolinilo, ditianilo, ditiolanilo, dihidropiranilo, dihidrotienilo, dihidrofuranilo, pirazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanilo, 3-azabiciclo[4.1.0]heptanilo, 3H-indolilquinolizinilo, 3-oxopiperazinilo, 4-metilpiperazinilo, 4-etilpiperazinilo y 1-oxo-2,8-diazaespiro[4.5]dec-8-ilo.

El término "alcoxi C_{1}-C_{8}", como se usa en este documento, significa un grupo O-alquilo donde dicho grupo alquilo contiene de 1 a 8 átomos de carbono y es lineal, ramificado o cíclico. Los ejemplos de tales grupos incluyen, pero sin limitación, metoxi, etoxi, n-propiloxi, iso-propiloxi, n-butoxi, iso-butoxi, terc-butoxi, ciclopentiloxi y ciclohexiloxi.

Los términos "halógeno" y "halo", como se usa en este documento, significan flúor, cloro, bromo o yodo.

La expresión "sustituido" significa que el grupo o resto especificado tiene uno o más sustituyentes. La expresión "sin sustituir", significa que el grupo especificado no tiene sustituyentes. La expresión "opcionalmente sustituido" significa que el grupo especificado está sin sustituir o sustituido con uno o más sustituyentes. Debe apreciarse que en los compuestos de la presente invención cuando se dice que un grupo está "sin sustituir" o está "sustituido" con menos grupos que los que rellenarían las valencias de todos los átomos del compuesto, las valencias restantes de dicho grupo se rellenan con hidrógeno. Por ejemplo, si un grupo arilo C_{6}, también denominado "fenilo" en este documento, está sustituido con un sustituyente adicional, un especialista en la técnica apreciará que dicho grupo tiene 4 posiciones abiertas libres en átomos de carbono del anillo arilo C_{6} (6 posiciones iniciales, menos una a la que se une el resto del compuesto de la presente invención, menos un sustituyente adicional, dejando 4). En dichos casos, los 4 átomos de carbono restantes están cada uno unido a un átomo de hidrógeno para rellenar sus valencias. De igual forma, si se dice que un grupo arilo C_{6} en los presentes compuestos está "disustituido", un especialista en la técnica apreciará que se refiere a que el arilo C_{6} tiene 3 átomos de carbono restantes que están sin sustituir. Cada uno de esos tres átomos de carbono sin sustituir está unido a un átomo de hidrógeno para rellenar sus valencias.

El término "solvato", como se usa en este documento, se refiere a una forma de solvato farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la presente invención que mantiene la eficacia biológica de dicho compuesto. Los ejemplos de solvatos incluyen, pero sin limitación, compuestos de la invención junto con agua, isopropanol, etanol, metanol, dimetilsulfóxido (DMSO), acetato de etilo, ácido acético, etanolamina, o mezclas de los mismos. Se contempla específicamente que en la presente invención una molécula disolvente puede estar asociada con una molécula de los compuestos de la presente invención, tal como un hidrato. Además, se contempla específicamente que en la presente invención, más de una molécula disolvente puede estar asociada con una molécula de los compuestos de la presente invención, tal como un dihidrato. Además, se contempla específicamente que en la presente invención menos de una molécula disolvente puede estar asociada con una molécula de los compuestos de la presente invención, tal como un hemihidrato. Además, los solvatos de la presente invención se contemplan en forma de solvatos de compuestos de la presente invención que mantienen la eficacia biológica de la forma no hidrato de los compuestos.

La expresión "sal farmacéuticamente aceptable", como se usa en este documento, se refiere a una sal de un compuesto de la presente invención que mantiene la eficacia biológica de los ácidos y bases libres del derivado especificado y que no es indeseable biológicamente o de otra forma.

La expresión "formulación farmacéuticamente aceptable", como se usa en este documento, se refiere a una combinación de un compuesto de la invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo, diluyente y/o excipiente que sea compatible con un compuesto de la presente invención, y no nocivo para el receptor del mismo. Pueden prepararse formulaciones farmacéuticas mediante procedimientos conocidos por los especialistas en la técnica. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención pueden formularse con excipientes, diluyentes o vehículos comunes, y formarse en comprimidos, cápsulas y similares. Los ejemplos de excipientes, diluyentes y vehículos que son adecuados para tales formulaciones incluyen los siguientes: cargas y diluyentes tales como almidón, azúcares, manitol y derivados silícicos; agentes aglutinantes tales como carboximetilcelulosa y otros derivados de celulosa, alginatos, gelatina y polivinilpirrolidona; agentes humectantes tales como glicerol; agentes disgregantes tales como povidona, almidón glicolato sódico, carboximetilcelulosa sódica, goma de agar, carbonato de calcio y bicarbonato sódico; agentes para retardar la disolución tales como parafina; aceleradores de la resorción tales como compuestos de amonio cuaternario; agentes tensioactivos tales como alcohol de cetilo, monoestearato de glicerol; vehículos adsortivos tales como caolina y bentonita; y lubricantes tales como talco, calcio y estearato de magnesio y polietilenglicoles sólidos. Las formas farmacéuticas finales pueden ser píldoras, comprimidos, polvos, pastillas, sobrecitos, obleas o polvos envasados estériles, y similares, dependiendo del tipo de excipiente usado. Además, se contempla específicamente que las formulaciones farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden contener más de un ingrediente activo. Por ejemplo, dichas formulaciones pueden contener más de un compuesto de acuerdo con la presente invención. Como alternativa, dichas formulaciones pueden contener uno o más compuestos de la presente invención y uno o más agentes anti-VIH adicionales.

La expresión "inhibir la replicación de VIH" significa inhibir la replicación del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) en una célula. Dicha célula puede estar presente in vitro, o puede estar presente in vivo, tal como en un mamífero, tal como en un ser humano. Dicha inhibición puede conseguirse administrando un compuesto de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, a la célula, tal como en un mamífero, en una cantidad inhibidora de VIH. La cuantificación de la inhibición de la replicación de VIH en una célula, tal como en un mamífero, puede medirse usando procedimientos conocidos por los especialistas en la técnica. Por ejemplo, puede administrarse una cantidad de un compuesto de la invención a un mamífero, solo o como parte de una formulación farmacéuticamente aceptable. Después se pueden estraer muestras sanguíneas del mamífero y puede cuantificarse la cantidad de virus VIH en la muestra usando procedimientos conocidos por los especialistas en la técnica. Una reducción en la cantidad de virus VIH en la muestra comparada con la cantidad encontrada en la sangre antes de la administración de un compuesto de la invención representaría inhibición de la replicación del virus VIH en el mamífero. La administración de un compuesto de la invención a la célula, tal como en un mamífero, puede estar en forma de dosis única o una serie de dosis. En el caso de más de una dosis, las dosis pueden administrarse en un día o pueden administrarse en más de un día.

Un "agente inhibidor de VIH" significa un compuesto de la presente invención o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

La expresión "agente anti-VIH", como se usa en este documento, significa un compuesto o combinación de compuestos capaz de inhibir la replicación de VIH en una célula, tal como una célula de un mamífero. Dichos compuestos pueden inhibir la replicación de VIH a través de cualquier mecanismo conocido por los especialistas en la técnica.

Las expresiones "cantidad inhibidora del virus de la inmunodeficiencia humana" y "cantidad inhibidora de VIH", como se usa en este documento, se refiere a la cantidad de un compuesto de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, necesaria para inhibir la replicación del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) in vivo, tal como en un mamífero, o in vitro. La cantidad de dichos compuestos necesaria para causar dicha inhibición puede determinarse sin experimentación innecesaria usando procedimientos descritos en este documento y los conocidos por los especialistas en la técnica.

La expresión "inhibir la actividad de la enzima integrasa de VIH", como se usa en este documento, significa disminuir la actividad o funcionamiento de la enzima integrasa de VIH in vitro o in vivo, tal como en un mamífero, tal como en un ser humano, poniendo en contacto la enzima con un compuesto de la presente invención.

La expresión "cantidad inhibidora de la enzima integrasa de VIH", como se usa en este documento, se refiere a la cantidad de un compuesto de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, necesaria para disminuir la actividad de la enzima integrasa de VIH in vivo, tal como en un mamífero, o in vitro. Dicha inhibición puede tener lugar uniendo directamente el compuesto de la presente invención a la enzima integrasa de VIH. Además, la actividad de la enzima integrasa de VIH puede disminuir en presencia de un compuesto de la presente invención cuando dicha unión directa entre la enzima y el compuesto no tiene lugar. Además, dicha inhibición puede ser competitiva, no competitiva, o acompetitiva. Dicha inhibición puede determinarse usando sistemas in vitro o in vivo, o una combinación de ambos, usando procedimientos conocidos por los especialistas en la técnica.

La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz", como se usa en este documento, significa una cantidad de un compuesto de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo que, cuando se administra a un mamífero en necesidad de dicho tratamiento, es suficiente para realizar el tratamiento, como se ha definido en este documento. Por tanto, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, es una cantidad suficiente para modular o inhibir la actividad de la enzima integrasa de VIH de modo que se reduzca o alivie una patología que esté mediada por la actividad de la enzima integrasa de VIH.

Las expresiones "tratar", "que trata", y "tratamiento" se refieren a cualquier tratamiento de una enfermedad o afección mediada por la integrasa de VIH en un mamífero, particularmente un ser humano, e incluye: (i) evitar que suceda la enfermedad o afección en un sujeto que puede estar predispuesto a la afección, de modo que el tratamiento constituye un tratamiento profiláctico para la afección patológica; (ii) modular o inhibir la enfermedad o afección, es decir, detener su desarrollo; (iii) aliviar la enfermedad o afección, es decir, provocar la regresión de la enfermedad o afección; o (iv) aliviar y/o mejorar la enfermedad o afección o los síntomas provocados por la enfermedad o afección, por ejemplo, aliviar una respuesta inflamatoria sin abordar la enfermedad o afección subyacente.

Las expresiones "resistente", "resistencia", y "VIH resistente", como se usan en este documento, se refieren a un virus de VIH que muestra una reducción en la sensibilidad a un fármaco particular. Un mamífero infectado con VIH que es resistente a un agente o combinación de agentes anti-VIH particulares habitualmente manifiesta un aumento en la carga viral de VIH a pesar de la administración continuada del agente o agentes. La resistencia puede ser genotípica, lo que significa que ha sucedido una mutación en la composición genética de VIH, o fenotípica, que significa que la resistencia se descubre por cultivos de laboratorio de crecimiento exitoso de virus de VIH en presencia de un agente anti-VIH o combinación de dichos agentes.

Las expresiones "inhibidor de la proteasa" e "inhibidor de la proteasa de VIH", como se usan en este documento, se refieren a compuestos o combinaciones de compuestos que impiden el funcionamiento apropiado de la enzima proteasa de VIH que es responsable de escindir largas cadenas de proteínas virales en proteínas diferentes que componen el núcleo viral.

Las expresiones "inhibidor de la transcriptasa inversa" e "inhibidor de la transcriptasa inversa de VIH", como se usan en este documento, se refieren a compuestos o combinaciones de compuestos que impiden el funcionamiento apropiado de la enzima transcriptasa inversa de VIH que es responsable de convertir el ARN viral de VIH monocatenario en ADN viral de VIH.

Las expresiones "inhibidor de la fusión" e "inhibidor de la fusión de VIH", como se usan en este documento, se refieren a compuestos o combinaciones de compuestos que se unen a la proteína de envuelta gp41 en la superficie de células CD4 y bloquean de este modo los cambios estructurales necesarios para que el virus se fusione con la célula.

Las expresiones "inhibidor de la integrasa" e "inhibidor de la integrasa de VIH", como se usan en este documento, se refieren a un compuesto o combinación de compuestos que impiden el funcionamiento apropiado de la enzima integrasa de VIH que es responsable de insertar los genes de VIH en el ADN de una célula huésped.

La expresión "antagonista de CCR5", como se usa en este documento, se refiere a compuestos o combinaciones de compuestos que bloquean la infección de ciertos tipos celulares por VIH a través de la perturbación de la actividad co-receptora de CCR5.

Las expresiones "carga viral" y "carga viral de VIH", como se usan en este documento, significan la cantidad de VIH en la sangre en circulación de un mamífero, tal como un ser humano. La cantidad de virus VIH en la sangre de un mamífero puede determinarse midiendo la cantidad de ARN de VIH en la sangre usando procedimientos conocidos por los especialistas en la técnica.

La expresión "compuesto de la presente invención" se refiere a cualquiera de los compuestos mencionados anteriormente, así como los de los siguientes Ejemplos, e incluyen los descritos en líneas generales o los descritos como especies. La expresión también se refiere a sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de estos compuestos.

Descripción detallada

Los compuestos de la presente invención son útiles para modular o inhibir la enzima integrasa de VIH. Más particularmente, los compuestos de la presente invención son útiles como moduladores o inhibidores de la actividad de integrasa de VIH, y de esta manera son útiles para la prevención y/o tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por VIH (por ejemplo, SIDA y ARC), solos o junto con otros agentes antivirales conocidos.

De acuerdo con una convención usada en la técnica, el símbolo

8

se usa en las fórmulas estructurales de este documento para representar el enlace que es el punto de unión del resto o sustituyente al núcleo o estructura principal. De acuerdo con otra convención, en algunas fórmulas estructurales de este documento, los átomos de carbono y sus átomos de hidrógeno unidos no se representan explícitamente, por ejemplo

9

representa un grupo metilo,

\vskip1.000000\baselineskip

100

\newpage

representa un grupo etilo,

101

representa un grupo ciclopentilo, etc.

Los compuestos de la presente invención pueden tener átomos de carbono asimétricos. Los enlaces carbono-carbono de los compuestos de la presente invención pueden representarse en este documento usando una línea continua (---------), una cuña sólida (1000), o una cuña discontinua (1001). El uso de una línea continua para representar enlaces a átomos de carbono asimétricos pretende indicar que se incluyen todos los estereoisómeros posibles en el átomo de carbono. El uso de una cuña sólida o discontinua para representar enlaces a átomos de carbono asimétricos pretende indicar que sólo pretende incluirse el estereoisómero mostrado. Es posible que los compuestos de la invención puedan contener más de un átomo de carbono asimétrico. En esos compuestos, el uso de una línea continua para representar enlaces a átomos de carbono asimétricos pretende indicar que pretenden incluirse todos los estereoisómeros posibles. El uso de una línea continua para representar enlaces a uno o más átomos de carbono asimétricos en un compuesto de la invención y el uso de una cuña sólida o discontinua para representar enlaces a otros átomos de carbono asimétricos en el mismo compuesto pretende indicar que está presente una mezcla de diastereómeros. A menos que se indique otra cosa, todos los estereoisómeros posibles de los compuestos de la presente invención pretenden incluirse en este documento.

El término "estereoisómeros" se refiere a compuestos que tienen una constitución química idéntica, pero difieren con respecto a la organización de sus átomos o grupos en el espacio. En particular, el término "enantiómeros" se refiere a dos estereoisómeros de un compuesto que son imágenes especulares no superponibles entre sí. Las expresiones "racémico" o "mezcla racémica", como se usan en este documento, se refieren a una mezcla 1:1 de enantiómeros de un compuesto particular. El término "diastereómeros", por otra parte, se refiere a la relación entre un par de estereoisómeros que comprenden dos o más centros asimétricos y no son imágenes especulares entre sí.

Si un derivado usado en el procedimiento de la invención es una base, puede prepararse una sal deseada mediante cualquier procedimiento adecuado conocido en la técnica, incluyendo tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico; ácido bromhídrico; ácido sulfúrico; ácido nítrico; ácido fosfórico; y similares, o con un ácido orgánico, tal como ácido acético; ácido maleico; ácido succínico; ácido mandélico; ácido fumárico; ácido malónico; ácido pirúvico; ácido oxálico; ácido glicólico; ácido salicílico; ácido piranosidílico, tal como ácido glucurónico o ácido galacturónico; alfa-hidroxi ácido, tal como ácido cítrico o ácido tartárico; aminoácido, tal como ácido aspártico o ácido glutámico; ácido aromático, tal como ácido benzoico o ácido cinnámico; ácido sulfónico, tal como ácido p-toluenosulfónico o ácido etanosulfónico; y similares.

Si un derivado usado en el procedimiento de la invención es un ácido, puede prepararse una sal deseada mediante cualquier procedimiento adecuado conocido en la técnica, incluyendo tratamiento del ácido libre con una base inorgánica u orgánica, tal como una amina (primaria, secundaria o terciaria); un hidróxido de un metal alcalino o alcalinotérreo; o similar. Los ejemplos ilustrativos de sales adecuadas incluyen sales orgánicas derivadas de aminoácidos tales como glicina y arginina; amoniaco; aminas primarias, secundarias y terciarias; y aminas cíclicas, tales como piperidina, morfolina, y piperazina; así como sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio, magnesio, manganeso, hierro, cobre, cinc, aluminio y litio.

Un "solvato" pretende indicar una forma de solvato farmacéuticamente aceptable de un compuesto especificado que mantiene la eficacia biológica de dicho compuesto. Los ejemplos de solvatos incluyen, pero sin limitación, compuestos de la invención junto con agua, isopropanol, etanol, metanol, dimetilsulfóxido (DMSO), acetato de etilo, ácido acético, etanolamina o mezclas de los mismos.

Una "sal farmacéuticamente aceptable" pretende indicar una sal que mantiene la eficacia biológica de los ácidos y bases libres del derivado especificado, que contiene aniones farmacológicamente aceptables, y no es indeseable biológicamente o de otra forma. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero sin limitación, sales acetato, acrilato, bencenosulfonato, benzoato (tal como clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato y metoxibenzoato), bicarbonato, bisulfato, bisulfito, bitartrato, borato, bromuro, butin-1,4-dioato, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, caproato, caprilato, clavulanato, citrato, decanoato, diclorhidrato, dihidrogenofosfato, edetato, edisilato, estolato, esilato, etilsuccinato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolato, glicolilarsanilato, heptanoato, hexin-1,6-dioato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, \gamma-hidroxibutirato, yoduro, isobutirato, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metafosfato, metano-sulfonato, metilsulfato, monohidrogenofosfato, mucato, napsilato, naftaleno-1-sulfonato, naftaleno-2-sulfonato, nitrato, oleato, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantothenato, fenilacetatos, fenilbutirato, fenilpropionato, ftalato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, propanosulfonato, propionato, propiolato, pirofosfato, pirosulfato, salicilato, estearato, subacetato, suberato, succinato, sulfato, sulfonato, sulfito, tannato, tartrato, teoclato, tosilato, trietiodida y valerato.

Los compuestos de la presente invención que son básicos en la naturaleza son capaces de formar una gran diversidad de sales diferentes con diversos ácidos inorgánicos y orgánicos. Aunque dichas sales deben ser farmacéuticamente aceptables para la administración a animales, normalmente es deseable en la práctica aislar inicialmente el compuesto de la presente invención de la mezcla de reacción en forma de una sal farmacéuticamente inaceptable y después simplemente convertir esta última en el compuesto de base libre por tratamiento con un reactivo alcalino y posteriormente convertir la anterior base libre en una sal de adición de ácidos farmacéuticamente aceptable. Las sales de adición de ácidos de los compuestos básicos de esta invención pueden prepararse tratando el compuesto básico con una cantidad sustancialmente equivalente del ácido mineral u orgánico seleccionado en un medio disolvente acuoso o en un disolvente orgánico adecuado, tal como metanol o etanol. Después de la evaporación del disolvente, se obtiene la sal sólida deseada. La sal del ácido deseada también puede precipitar de una solución de la base libre en un disolvente orgánico mediante la adición a la solución de un ácido mineral u orgánico
apropiado.

Aquellos compuestos de la presente invención que son ácidos en la naturaleza son capaces de formar sales básicas con diversos cationes farmacológicamente aceptables. Los ejemplos de dichas sales incluyen las sales de metales alcalinos o de metales alcalinotérreos y particularmente las sales de sodio y potasio. Todas estas sales se preparan por técnicas convencionales. Las bases químicas que se usan como reactivos para preparar las sales básicas farmacéuticamente aceptables de esta invención son aquellas que forman sales de bases no tóxicas con los compuestos ácidos de la presente invención. Dichas sales de bases no tóxicas incluyen las derivadas de cationes farmacológicamente aceptables tales como sodio, potasio, calcio, magnesio, etc. Estas sales pueden prepararse por tratamiento de los compuestos ácidos correspondientes con una solución acuosa que contiene los cationes farmacológicamente aceptables deseados, y después evaporando la solución resultante a sequedad, preferiblemente a presión reducida. Como alternativa, también pueden prepararse mezclando soluciones alcanólicas inferiores de los compuestos ácidos y el alcóxido de metal alcalino deseado, y después evaporando la solución resultante a sequedad de la misma manera que antes. En cualquier caso, preferiblemente se emplean cantidades estequiométricas de reactivos con el fin de garantizar que se completa la reacción y los rendimientos máximos del producto final deseado.

Si el compuesto inventivo es una base, las sales farmacéuticamente aceptables deseadas pueden prepararse mediante cualquier procedimiento adecuado disponible en la técnica, por ejemplo, tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, o con un ácido orgánico, tal como ácido acético, ácido maleico, ácido succínico, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido malónico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, un ácido piranosidílico, tal como ácido glucurónico o ácido galacturónico, un alfa-hidroxi ácido, tal como ácido cítrico o ácido tartárico, un aminoácido, tal como ácido aspártico o ácido glutámico, un ácido aromático, tal como ácido benzoico o ácido cinnámico, un ácido sulfónico, tal como ácido p-toluenosulfónico o ácido etanosulfónico, o similares.

Si el compuesto inventivo es un ácido, la sal farmacéuticamente aceptable deseada puede prepararse mediante cualquier procedimiento adecuado, por ejemplo, tratamiento del ácido libre con una base inorgánica u orgánica, tal como una amina (primaria, secundaria o terciaria), un hidróxido de metal alcalino o un hidróxido de metal alcalinotérreo, o similares. Los ejemplos ilustrativos de sales adecuadas incluyen sales orgánicas derivadas de aminoácidos, tales como glicina y arginina, amoniaco, aminas primarias, secundarias y terciarias, y aminas cíclicas, tales como piperidina, morfolina y piperazina, y sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio, magnesio, manganeso, hierro, cobre, cinc, aluminio y litio.

En caso de que los agentes sean sólidos, se aprecia por los especialistas en la técnica que los compuestos, agentes y sales inventivos pueden existir en diferentes formas cristalinas o polimórficas, pretendiendo incluirse todas ellas dentro del alcance de la presente invención y de las fórmulas especificadas.

Los compuestos de la presente invención pueden formularse en composiciones farmacéuticas como se describe a continuación en cualquier forma farmacéutica apreciable por los especialistas en la técnica como adecuada. Las composiciones farmacéuticas de la invención comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de la presente invención y un vehículo o diluyente inerte y farmacéuticamente aceptable.

Para tratar o prevenir enfermedades o afecciones mediadas por VIH, se administra una composición farmacéutica de la invención en una formulación adecuada preparada combinando una cantidad terapéuticamente eficaz (es decir, una cantidad moduladora, reguladora o inhibidora de integrasa de VIH eficaz para alcanzar la eficacia terapéutica) de al menos un compuesto de la presente invención (como ingrediente activo) con uno o más vehículos farmacéuticamente adecuados, que pueden seleccionarse, por ejemplo, entre diluyentes, excipientes y auxiliares que facilitan el procesamiento de los compuestos activos en las preparaciones farmacéuticas finales.

Los vehículos farmacéuticos empleados pueden ser sólidos o líquidos. Los vehículos sólidos ejemplares son lactosa, sacarosa, talco, gelatina, goma de agar, pectina, goma arábiga, estearato de magnesio, ácido esteárico y similares. Los vehículos líquidos ejemplares son jarabe, aceite de cacahuete, aceite de oliva, agua y similares. De igual forma, las composiciones inventivas pueden incluir un material retardado en el tiempo o de liberación temporizada conocido en la técnica, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con una cera, etilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metilmetacrilato o similares. Pueden añadirse otros aditivos o excipientes para alcanzar las propiedades de formulación deseadas. Por ejemplo, puede añadirse un potenciador de la biodisponibilidad, tal como Labrasol, Gelucire o similares, o un formulador, tal como CMC (carboxi-metilcelulosa), PG (propilenglicol) o PEG (polietilenglicol). Puede añadirse Gelucire®, un vehículo semi-sólido que protege a los ingredientes activos de la luz, humedad y oxidación, por ejemplo, cuando se prepara una formulación en cápsula.

Si se usa un vehículo sólido, la preparación puede comprimirse, ponerse en una cápsula de gelatina dura en polvo o en forma de gránulo, o formarse en un trocisco o pastilla. La cantidad de vehículo sólido puede variar, pero generalmente serán de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 1 g. Si se usa un vehículo líquido, la preparación puede estar en forma de jarabe, emulsión, cápsula de gelatina blanda, solución o suspensión inyectable estéril en una ampolla o vial o suspensión líquida no acuosa. Si se usa un vehículo semi-sólido, la preparación puede estar en forma de formulaciones de cápsula de gelatina dura y blanda. Las composiciones inventivas se preparan en una forma de dosificación unitaria apropiada para la vía de administración, por ejemplo administración parenteral u oral.

Para obtener una forma de dosificación soluble en agua y estable, puede disolverse una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la presente invención en una solución acuosa de un ácido orgánico o inorgánico, tal como una solución 0,3 M de ácido succínico o ácido cítrico. Si no está disponible una forma de sal soluble, el agente puede disolverse en un codisolvente adecuado o combinaciones de codisolventes. Los ejemplos de codisolventes adecuados incluyen alcohol, propilenglicol, polietilenglicol 300, polisorbato 80, glicerina y similares en concentraciones que varían del 0-60% del volumen total. En una realización ejemplar, un compuesto de Fórmula I se disuelve en DMSO y se diluye con agua. La composición también puede estar en forma de una solución de una forma de sal del ingrediente activo en un vehículo acuoso apropiado tal como agua o solución salina isotónica o solución de dextrosa.

La formulación adecuada depende de la vía de administración seleccionada. Para inyección, los agentes de los compuestos de la presente invención pueden formularse en soluciones acuosas, preferiblemente en tampones fisiológicamente compatibles tales como solución de Hanks, solución de Ringer o tampón de solución salina fisiológica. Para la administración transmucosal, se usan en la formulación penetradores apropiados para la barrera que debe atravesarse. En general, dichos penetrantes se conocen en la técnica.

Para la administración oral, los compuestos pueden formularse combinando los compuestos activos con vehículos farmacéuticamente aceptables conocidos en la técnica. Dichos vehículos permiten que los compuestos de la invención se formulen en forma de comprimidos, píldoras, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, suspensiones, y similares, para ingestión oral por un sujeto a tratar. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral pueden obtenerse usando un excipiente sólido mezclado con el ingrediente activo (agente), moliendo opcionalmente la mezcla resultante, y procesando la mezcla de gránulos después de añadir auxiliares adecuados, si se desea, para obtener comprimidos o núcleos de grageas. Los excipientes adecuados incluyen: cargas tales como azúcares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol o sorbitol; y preparaciones de celulosa, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de patata, gelatina, goma, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica o polivinilpirrolidona (PVP). Si se desea, pueden añadirse agentes disgregantes, tales como polivinilpirrolidona reticulada, goma de agar, o ácido algínico o una sal del mismo tal como alginato sódico.

Los núcleos de grageas se proporcionan con recubrimientos adecuados. Para este propósito, pueden usarse soluciones de azúcar concentradas, que pueden contener opcionalmente goma arábiga, polivinilpirrolidona, gel de Carbopol, polietilenglicol y/o dióxido de titanio, soluciones lacadas y disolventes orgánicos adecuados o mezclas de disolventes. Pueden añadirse productos colorantes o pigmentos a los comprimidos o recubrimientos de grageas para la identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de agentes activos.

Las preparaciones farmacéuticas que pueden usarse por vía oral incluyen cápsulas de ajuste por presión preparadas con gelatina, así como cápsulas blandas cerradas herméticamente preparadas con gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de ajuste por presión pueden contener los ingredientes activos mezclados con cargas tales como lactosa, aglutinantes tales como almidones y/o lubricantes tales como talco o estearato de magnesio, y, opcionalmente, estabilizantes. En cápsulas blandas, los agentes activos pueden estar disueltos o suspendidos en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida o polietilenglicoles líquidos. Además, pueden añadirse estabilizantes. Todas las formulaciones para administración oral deben estar en dosificaciones adecuadas para dicha administración. Para administración bucal, las composiciones pueden tomar la forma de comprimidos o pastillas formuladas de manera convencional.

Para la administración por vía intranasal o por inhalación, los compuestos para uso de acuerdo con la presente invención pueden liberarse convenientemente en forma de una presentación de nebulización por aerosol desde envases presurizados o desde un nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas adecuado. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosificación puede determinarse proporcionando una válvula para liberar una cantidad medida. Las cápsulas y cartuchos de gelatina para uso en un inhalador o insuflador y similares pueden formularse conteniendo una mezcla en polvo del compuesto y una base de polvo adecuada tal como lactosa o almidón.

Los compuestos pueden formularse para administración parenteral por inyección, por ejemplo, mediante inyección en embolada o infusión continua. Las formulaciones para inyección pueden presentarse en una forma de dosificación unitaria, por ejemplo, en ampollas o en recipientes multi-dosis, con un conservante añadido. Las composiciones pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes de suspensión, de estabilización y/o de dispersión.

Las formulaciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos activos en forma soluble en agua. Además, pueden prepararse suspensiones de los agentes activos en forma de suspensiones para inyección oleosas apropiadas. Los disolventes o vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos tales como aceite de sésamo, o ésteres de ácidos grasos sintéticos, tales como oleato de etilo o triglicéridos, o liposomas. Las suspensiones acuosas para inyección pueden contener sustancias que aumentan la viscosidad de la suspensión, tales como carboximetilcelulosa sódica, sorbitol o dextrano. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizantes adecuados o agentes que aumenten la solubilidad de los compuestos para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas.

Como alternativa, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo para constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril sin pirógenos, antes del uso.

Además de las formulaciones descritas anteriormente, los compuestos de la presente invención también pueden formularse en forma de una preparación de liberación prolongada. Dichas formulaciones de acción prolongada pueden administrarse por implantación (por ejemplo, por vía subcutánea o intramuscular) o por inyección intramuscular. De esta manera, por ejemplo, los compuestos pueden formularse con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, en forma de una emulsión en un aceite aceptable) o resinas de intercambio iónico, o en forma de derivados escasamente solubles, por ejemplo, en forma de una sal escasamente soluble.

Un vehículo farmacéutico para compuestos hidrófobos es un sistema codisolvente que comprende alcohol bencílico, un tensioactivo no polar, un polímero orgánico miscible en agua y una fase acuosa. El sistema codisolvente puede ser un sistema co-disolvente de VPD. VPD es una solución de 3% p/v de alcohol bencílico, 8% p/v del tensioactivo no polar polisorbato 80 y 65% p/v de polietilenglicol 300, enrasada hasta el volumen con etanol absoluto. El sistema co-disolvente de VPD (VPD: 5W) Contiene VPD diluido 1:1 con una solución al 5% de dextrosa en agua. Este sistema co-disolvente disuelve bien compuestos hidrófobos, y produce por sí mismo baja toxicidad después de la administración sistémica. Las proporciones de un sistema co-disolvente pueden variarse adecuadamente sin destruir sus características de solubilidad y toxicidad. Además, la identidad de los componentes co-disolventes puede variar: por ejemplo, pueden usarse otros tensioactivos no polares de baja toxicidad en lugar de polisorbato 80; puede variarse el tamaño de las fracciones del polietilenglicol; puede reemplazarse polietilenglicol por otros polímeros biocompatibles, por ejemplo polivinilpirrolidona; y puede sustituirse dextrosa por otros azúcares o polisacáridos.

Como alternativa, pueden emplearse otros sistemas de liberación para compuestos farmacéuticos hidrófobos. Los liposomas y emulsiones son ejemplos conocidos de vehículos o excipientes de liberación para fármacos hidrófobos. También pueden emplearse ciertos disolventes orgánicos tales como dimetilsulfóxido, aunque normalmente a costa de una mayor toxicidad debida a la naturaleza tóxica del DMSO. Además, los compuestos pueden liberarse usando un sistema de liberación sostenida, tales como matrices semipermeables de polímeros hidrófobos sólidos que contienen el agente terapéutico. Se han postulado diversos materiales de liberación sostenida y se conocen por los especialistas en la técnica. Las cápsulas de liberación sostenida, dependiendo de su naturaleza química, pueden liberar los compuestos durante unas semanas hasta 100 días. Dependiendo de la naturaleza química y de la estabilidad biológica del reactivo terapéutico, pueden emplearse estrategias adicionales para la estabilización de proteínas.

Las composiciones farmacéuticas también pueden comprender vehículos o excipientes adecuados en fase sólida o en gel. Estos vehículos y excipientes pueden proporcionar mejoras notables en la biodisponibilidad de fármacos poco solubles. Los ejemplos de dichos vehículos o excipientes incluyen carbonato de calcio, fosfato de calcio, azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina y polímeros tales como polietilenglicoles. Además, pueden usarse aditivos o excipientes tales como Gelucire®, Capryol®, Labrafil®, Labrasol®, Lauroglycol®, Plurol®, Peceol®, Transcutol® y similares. Además, la composición farmacéutica puede incorporarse en un parche cutáneo para liberar el fármaco directamente sobre la piel.

Se apreciará que las dosificaciones reales de los agentes de esta invención variarán de acuerdo con el agente particular usado, la composición particular formulada, la vía de administración y el sitio particular, paciente y enfermedad que se trate. Los especialistas en la técnica, usando ensayos de determinación de dosificaciones convencionales en vista de los datos experimentales para un compuesto dado, pueden determinar las dosificaciones óptimas para un conjunto de condiciones dadas. Para la administración oral, una dosis diaria ejemplar empleada en general será de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 1000 mg/kg de peso corporal, repitiéndose los cursos de tratamiento a intervalos apropiados.

Además, las formulaciones farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden contener un compuesto de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en una cantidad de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 2000 mg, o de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 1500 mg, o de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 1000 mg, o de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 750 mg, o de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 500 mg, o de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 500 mg, o de aproximadamente 50 a aproximadamente 500 mg, o de aproximadamente 100 mg a aproximadamente 500 mg.

Además, las formulaciones farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden contener un compuesto de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en una cantidad de aproximadamente 0,5% p/p a aproximadamente 95% p/p, o de aproximadamente 1% p/p a aproximadamente 95% p/p, o de aproximadamente 1% p/p a aproximadamente 75% p/p, o de aproximadamente 5% p/p a aproximadamente 75% p/p, o de aproximadamente 10% p/p a aproximadamente 75% p/p, o de aproximadamente 10% p/p a aproximadamente 50% p/p.

Los compuestos de la presente invención, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable de los mismos, pueden administrarse a un mamífero que padece de infección con VIH, tal como un ser humano, solos o como parte de una formulación farmacéuticamente aceptable, una vez al día, dos veces al día o tres veces a día.

Los especialistas en la técnica apreciarán que con respecto a los compuestos de la presente invención, la formulación farmacéutica particular, la dosis y el número de dosis dadas al día a un mamífero que requiere dicho tratamiento, son elecciones que están dentro del conocimiento de un especialista en la técnica y pueden determinarse sin necesidad de experimentación. Por ejemplo, véase "Guidelines for the Use of Antiretroviral Agents in HIV-1 Infected Adults and Adolescents", United States Department of Health and Human Services, disponible en http://www.aidsinfo.nih.gov/guidelines/as del 29 de octubre de 2004.

Los compuestos de la presente invención pueden administrarse en combinación con un agente o agentes adicionales para el tratamiento de un mamífero, tal como un ser humano, que está padeciendo una infección con el virus VIH, SIDA, complejo relacionado con el SIDA (ARC), o cualquier otra enfermedad o afección que esté relacionada con infección con el virus VIH. Los agentes que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, los útiles como inhibidores de la proteasa de VIH, inhibidores de la transcriptasa inversa de VIH, inhibidores no nucleosídicos de la transcriptasa inversa de VIH, inhibidores de la integrasa de VIH, inhibidores de CCR5, inhibidores de la fusión de VIH, compuestos útiles como inmunomoduladores, compuestos que inhiben el virus de VIH por un mecanismo desconocido, compuestos útiles para el tratamiento de herpes virus, compuestos útiles como agentes anti-infecciosos, y otros descritos a continuación.

Los compuestos útiles como inhibidores de la proteasa de VIH que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, 141 W94 (amprenavir), CGP-73547, CGP-61755, DMP-450, nelfinavir, ritonavir, saquinavir (invirasa), lopinavir, TMC-126, atazanavir, palinavir, GS-3333, KN I-413, KNI-272, LG-71350, CGP-61755, PD 173606, PD 177298, PD 178390, PD 178392, U-140690, ABT-378, DMP-450, AG-1776, MK-944, VX-478, indinavir, tipranavir, TMC-114, DPC-681, DPC-684, fosamprenavir cálcico (Lexiva), derivados de bencenosulfonamida descritos en el documento WO 03053435, R-944, Ro-03-34649, VX-385, GS-224338, OPT-TL3, PL-100, SM-309515, AG-148, DG-35-VIII, DMP-850, GW-5950X, KNI-1039, L-756423, LB-71262, LP-130, RS-344, SE-063, UIC-94-003, Vb-19038, A-77003, BMS-182193, BMS-186318, SM-309515, JE-2147, GS-9005.

Los compuestos útiles como inhibidores de la enzima transcriptasa inversa de VIH que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, abacavir, FTC, GS-840, lamivudina, adefovir dipivoxil, beta-fluoro-ddA, zalcitabina, didanosina, estavudina, zidovudina, tenofovir, andoxovir SPD-754, SPD-756, racivir, reverset (DPC-817), MIV-210 (FLG), beta-L-Fd4C (ACH-126443), MIV-310 (alovudina, FLT), dOTC, DAPD, entecavir, GS-7340, emtricitabina, alovudina.

Los compuestos útiles como inhibidores no nucleosídicos de la enzima transcriptasa inversa de VIH que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, efavirenz, HBY-097, nevirapina, TMC-120 (dapivirina), TMC-125, etravirina, delavirdina, DPC-083, DPC-961, TMC-120, capravirina, GW-678248, GW-695634, calanolida, y derivados tricíclicos de pirimidinona como se describe en el documento WO 03062238.

Los compuestos útiles como inhibidores de CCR5 que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, TAK-779, SC-351125, SCH-D, UK-427857, PRO-140 y GW-873140 (Ono-4128, AK-602).

Los compuestos útiles como inhibidores de la enzima integrasa de VIH que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, GW-810781, derivados de 1,5-naftiridina-3-carboxamida descritos en el documento WO 03062204, compuestos descritos en el documento WO 03047564, compuestos descritos en el documento WO 03049690, derivados de 5-hidroxipirimidina-4-carboxamida descritos en el documento WO 03035076 y L-000810810.

Los inhibidores de la fusión para el tratamiento de VIH que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, enfuvirtida (T-20), T-1249, AMD-3100, y compuestos tricíclicos condensados descritos en el documento JP 2003171381.

Otros compuestos que son inhibidores útiles de VIH que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, CD4 soluble, TNX-355, PRO-542, BMS-806, disoproxil fumarato de tenofovir y compuestos descritos en el documento JP 2003119137.

Los compuestos útiles en el tratamiento o control de la infección por virus diferentes a VIH que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, aciclovir, fomivirsen, penciclovir, HPMPC, oxetanocina G, AL-721, cidofovir, inmunoglobina de citomegalovirus, citoveno, fomivganciclovir, famciclovir, foscarnet sódico, Isis 2922, KNI-272, valaciclovir, virazol ribavirina, valganciclovir, ME-609, PCL-016.

Los compuestos que funcionan como inmunomoduladores y pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, AD-439, AD-519, Interferón Alfa, AS-101, bropirimina, acemanano, CL246,738, EL10, FP-21399, interferón gamma, factor estimulador de colonias de granulocitos y macrófagos, IL-2, inmunoglobulina intravenosa, IMREG-1, IMREG-2, imutiol dietil ditio carbamato, interferón alfa-2, metionina-encefalina, MTP-PE, factor estimulador de colonias de granulocitos, remune, rCD4, CD4 humano soluble recombinante, interferón alfa-2, SK&F106528, timopentina T4 soluble, factor de necrosis tumoral (TNF), tucaresol, interferón beta humano recombinante, e interferón alfa n-3.

Los agentes anti-infecciosos que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, atovaquona, azitromicina, claritromicina, trimetoprim, trovafloxacina, pirimetamina, daunorrubicina, clindamicina con primaquina, fluconazol, pastill, ornidil, eflornitina pentamidina, rifabutina, espiramicina, intraconazol-R51211, trimetrexato, daunorrubicina, eritropoyetina humana recombinante, hormona del crecimiento humana recombinante, acetato de megestrol, testerona, y nutrición entérica total.

Los agentes antifúngicos que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, anidulafungin, C31G, caspofungin, DB-289, fluconazol, itraconazol, cetoconazol, micafungin, posaconazol, y voriconazol.

Otros compuestos que pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen, pero sin limitación, acmanano, ansamicina, LM 427, AR177, BMS-232623, BMS-234475, CI-1012, sulfato de curdlan, sulfato de dextrano, STOCRINE EL10, hipericina, lobucavir, novapreno, secuencia octapeptídica del péptido T, fosfonoformiato trisódico, probucol, y RBC-CD4.

Además, los compuestos de la presente invención pueden usarse en combinación con agentes anti-proliferativos para el tratamiento de afecciones tales como sarcoma de Kaposi. Dichos agentes incluyen, pero sin limitación, inhibidores de las metaloproteasas de matriz, A-007, bevacizumab, BMS 275291, halofuginona, interleuquina-12, rituximab, paclitaxel, porfimer sódico, rebimastat, y COL-3.

La elección particular de un agente o agentes adicionales dependerá de varios factores que incluyen, pero sin limitación, el estado del mamífero que se está tratando, la afección o afecciones particulares que se están tratando, la identidad del compuesto o compuestos de la presente invención y el agente o agentes adicionales, y la identidad de cualquier compuesto adicional que se esté usando para tratar el mamífero. La elección particular del compuesto o compuestos de la invención y el agente o agentes adicionales pertenece al conocimiento de los especialistas en la técnica y puede realizarse sin experimentación innecesaria.

Los compuestos de la presente invención pueden administrarse en combinación con cualquiera de los agentes adicionales anteriores para el tratamiento de un mamífero, tal como un ser humano, que está padeciendo una infección con el virus VIH, SIDA, complejo relacionado con el SIDA (ARC), o cualquier otra enfermedad o afección que esté relacionada con infección con el virus VIH. Dicha combinación puede administrarse a un mamífero de modo que esté presente un compuesto o compuestos de la presente invención en la misma formulación que los agentes adicionales descritos anteriormente. Como alternativa, dicha combinación puede administrarse a un mamífero que padece infección con el virus VIH de modo que el compuesto o compuestos de la presente invención estén presentes en una formulación que es diferente de la formulación en la que se encuentra el agente adicional. Si el compuesto o compuestos de la presente invención se administran de forma separada del agente adicional, dicha administración puede tener lugar de forma concomitante o secuencial con un período de tiempo apropiado entremedias. La elección de si incluir el compuesto o compuestos de la presente invención en la misma formulación que el agente o agentes adicionales pertenece al conocimiento de los especialistas en la técnica.

Adicionalmente, los compuestos de la presente invención pueden administrarse a un mamífero, tal como un ser humano, en combinación con un agente adicional que tiene el efecto de aumentar la exposición del mamífero a un compuesto de la invención. El término "exposición", como se usa en este documento, se refiere a la concentración de un compuesto de la invención en el plasma de un mamífero medido en un período de tiempo. La exposición de un mamífero a un compuesto particular puede medirse administrando un compuesto de la invención a un mamífero en una forma apropiada, retirando muestras de plasma en momentos predeterminados, y midiendo la cantidad de un compuesto de la invención en el plasma usando una técnica analítica apropiada, tal como cromatografía líquida o cromatografía líquida/espectroscopía de masas. Se determina la cantidad de un compuesto de la invención presente en el plasma en un cierto momento y se representan los datos de concentración y tiempo de todas las muestras para proporcionar una curva. El área bajo esta curva se calcula y proporciona la exposición del mamífero al compuesto. Las expresiones "exposición", "área bajo la curva", y "área bajo la curva de concentración/tiempo" pretenden tener el mismo significado y pueden usarse indistintamente en todo el documento.

Entre los agentes que pueden usarse para aumentar la exposición de un mamífero a un compuesto de la presente invención están aquellos que pueden funcionar como inhibidores de al menos una isoforma de las enzimas citocromo P450 (CYP450). Las isoformas de CYP450 que pueden inhibirse de forma beneficiosa incluyen, pero sin limitación, CYP1A2, CYP2D6, CYP2C9, CYP2C19 y CYP3A4. Los agentes adecuados que pueden usarse para inhibir CYP 3A4 incluyen, pero sin limitación, ritonavir y delavirdina.

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Dicha combinación puede administrarse a un mamífero de modo que esté presente un compuesto o compuestos de la presente invención en la misma formulación como los agentes adicionales descritos anteriormente. Como alternativa, dicha combinación puede administrarse de modo que el compuesto o compuestos de la presente invención estén presentes en una formulación que es diferente de la formulación en la que se encuentra el agente adicional. Si el compuesto o compuestos de la presente invención se administran de forma separada del agente adicional, dicha administración puede tener lugar de forma concomitante o secuencial con un período de tiempo apropiado entremedias. La elección de si incluir el compuesto o compuestos de la presente invención en la misma formulación que el agente o agentes adicionales pertenece al conocimiento de los especialistas en la técnica.

Están disponibles varios formatos de ensayo diferentes para medir la integración mediada por la integrasa del ADN viral en un ADN diana (o huésped) y por tanto, identificar compuestos que modulen (por ejemplo, inhiban) la actividad integrasa. En general, por ejemplo, pueden usarse ensayos de unión a ligando para determinar la interacción con una enzima de interés. Cuando la unión es de interés, puede usarse una enzima marcada, donde el marcador es un agente fluorescente, radioisótopo, o similares, que registra un cambio cuantificable después de la unión a la enzima. Como alternativa, los especialistas en la técnica pueden emplear un anticuerpo para unirse a la enzima, donde el anticuerpo está marcado permitiendo la amplificación de la señal. Por tanto, la unión puede determinarse a través de la medida directa de la unión de ligando a una enzima. Además, la unión puede determinarse por desplazamiento competitivo de un ligando unido a una enzima, donde el ligando está marcado con un marcador detectable. Cuando la actividad inhibidora es de interés, puede estudiarse un organismo intacto o célula, y puede medirse el cambio en una función orgánica o celular en respuesta a la unión del compuesto inhibidor. Como alternativa, puede determinarse la respuesta celular de forma microscópica controlando la formación de sincitio inducida por virus (ensayos de formación de sincitio por VIH-1), por ejemplo. Por tanto, hay diversos ensayos in vitro e in vivo útiles para medir la actividad inhibidora de la integrasa de VIH. Véase, por ejemplo, Lewin S.R. y cols., Journal of Virology 73(7): 6099-6103 (julio 1999); Hansen, M.S. y cols., Nature Biotechnology 17(6): 578-582 (junio 1999); y Butler, S.L. y cols., Nature Medicine 7(5): 631-634 (mayo 2001).

Los formatos de ensayo específicos ejemplares usados para medir la integración mediada por la integrasa incluyen, pero sin limitación, tecnologías ELISA, DELFIA® (PerkinElmer Life Sciences Inc. (Boston, MA)) y ORIGEN® (IGEN International, Inc. (Gaithersburg, MD)). Además, pueden usarse ensayos de integración basados en gel (detección de la integración midiendo la formación de producto con SDS-PAGE) y ensayos de desintegración por ensayo de proximidad por escintilación (SPA) que usan una única unidad de ADN bicatenario (ADNds) para controlar la actividad integrasa.

En una realización de la invención, el ensayo preferido es un SPA de transferencia de cadena por la integrasa (stINTSPA) que usa SPA para medir específicamente el mecanismo de transferencia de cadena de la integrasa en un ensayo homogéneo que se puede hacer a escala para hacerlo en miniatura que permita una exploración de alto rendimiento. El ensayo se centra en la transferencia de cadenas y no en la unión del ADN y/o procesamiento 3'. Este ensayo sensible y reproducible es capaz de distinguir interacciones no específicas de la función enzimática verdadera formando complejos de ADN viral/integrasa procesados en el extremo 3' antes de la adición de ADN diana. Dicha formación crea una predisposición hacia los compuestos moduladores (por ejemplo, inhibidores) de la transferencia de cadena y no hacia los compuestos que inhiben el procesamiento 3' de la integrasa o evitan la asociación de la integrasa con ADN viral. La predisposición hace al ensayo más específico que los ensayos conocidos. Además, la naturaleza homogénea del ensayo reduce la cantidad de etapas necesarias para realizar el ensayo ya que las etapas de lavado de un ensayo heterogéneo no son necesarias.

El formato de SPA de transferencia de cadena por la integrasa está constituido por 2 componentes de ADN que representan el ADN viral y el ADN diana. El ADN viral modelo (también conocido como ADN donante) es ADNds biotinilado preprocesado en el extremo 3' para proporcionar un saliente de bases de nucleótidos CA en el extremo 5' del dúplex. El ADN diana (también conocido como ADN huésped) es una secuencia de nucleótidos aleatoria de ADNds que contiene generalmente nucleótidos [^{3}H]-timidina en ambas cadenas, preferiblemente, en los extremos 3', para posibilitar la detección de la reacción de transferencia de cadena por la integrasa que sucede en ambas cadenas del ADNds diana.

La integrasa (creada de forma recombinante o sintéticamente y preferiblemente, purificada) forma pre-complejos con el ADN viral unido a una superficie, tal como, por ejemplo, perlas SPA revestidas con estreptavidina. Generalmente, la integrasa forma pre-complejos en un proceso discontinuo combinando e incubando ADN viral diluido con la integrasa y después retirando la integrasa no unida. La proporción molar preferida de ADN viral:integrasa es aproximadamente 1:aproximadamente 5. La incubación de la integrasa/ADN viral es opcional, sin embargo, la incubación proporciona un índice de especificidad aumentado con un tiempo de incubación de la integrasa/ADN viral de aproximadamente 15 a aproximadamente 30 minutos a temperatura ambiente o aproximadamente 37ºC. La incubación preferida es a aproximadamente temperatura ambiente durante aproximadamente 15 minutos.

La reacción se inicia añadiendo ADN diana, en ausencia o presencia de un compuesto modulador de la integrasa potencial, a las perlas de integrasa/ADN viral (por ejemplo) y se dejan procesar durante aproximadamente 20 a aproximadamente 50 minutos (dependiendo del tipo de recipiente de ensayo empleado), a aproximadamente temperatura ambiente o aproximadamente 37ºC, preferiblemente, a aproximadamente 37ºC. El ensayo se termina añadiendo tampón de detención a la mezcla de reacción de la integrasa. Los componentes del tampón de detención, añadidos secuencialmente o en una vez, funcionan terminando la actividad enzimática, disociando los complejos integrasa/ADN, separando las cadenas de ADN no integradas (agente de desnaturalización) y, opcionalmente, haciendo flotar las perlas SPA a la superficie de la mezcla de reacción para que estén más cercanos al alcance de los detectores de, por ejemplo, un contador de escintilación basado en placa, para medir el nivel de ADN viral integrado que se cuantifica como luz emitida (señal radiomarcada) a partir de las perlas SPA. La inclusión de un componente adicional en el tampón de detención, tal como por ejemplo CsCl o un compuesto funcionalmente equivalente, se usa opcionalmente, y preferiblemente, con un contador de escintilación basado en placa, por ejemplo, con detectores colocados por encima de los pocillos de ensayo, tal como por ejemplo, un contador TopCount® (PerkinElmer Life Sciences Inc. (Boston, MA)). No se emplearía CsCl cuando se toman lecturas PMT de la parte inferior de la placa, tal como por ejemplo cuando se usa un contador MicroBeta® (PerkinElmer Life Sciences Inc. (Boston, MA)).

La especificidad de la reacción puede determinarse a partir de la proporción de la señal generada de la reacción de ADN diana con el ADN viral/integrasa comparado con la señal generada por el ADN viral didesoxi/integrasa. Altas concentraciones (por ejemplo, \geq 50 nM) de ADN diana pueden aumentar la proporción de ADN d/dd junto con una concentración aumentada de integrasa en la muestra de integrasa/ADN viral.

Los resultados pueden usarse para evaluar la capacidad de modulación de la integrasa, tal como por ejemplo la actividad inhibidora de compuestos de ensayo. Por ejemplo, los especialistas en la técnica pueden emplear un procedimiento de exploración de alto rendimiento para ensayar las bibliotecas de compuestos combinatorios o compuestos sintéticos. El porcentaje de inhibición del compuesto puede calcularse usando una ecuación tal como por ejemplo (1-((CPM muestra - CPM min)/(CPM max - CPM min)))^{*}100. El valor min es la señal de ensayo en presencia de un modulador conocido, tal como por ejemplo un inhibidor, a una concentración aproximadamente 100 veces superior a la CI_{50} de ese compuesto. La señal min se aproxima a la medida de fondo verdadera para el ensayo. El valor max es la señal de ensayo obtenida para la actividad mediada por la integrasa en ausencia de compuesto. Además, pueden determinarse los valores de CI_{50} de compuestos combinatorios sintéticos y purificados por lo que los compuestos se preparan a concentraciones aproximadamente 10 o 100 veces superiores que las deseadas para ensayar en ensayos, seguido por dilución de los compuestos para generar una curva de titulación de 8 puntos con intervalos de dilución semilogarítmicos, por ejemplo. La muestra de compuesto después se transfiere a un pocillo de ensayo, por ejemplo. Son opcionales diluciones adicionales, tales como por ejemplo, una dilución de 10 veces. El porcentaje de inhibición para un compuesto inhibidor, por ejemplo, puede determinarse después como anteriormente aplicando los valores a una ecuación de respuesta a la dosis sigmoidea (pendiente variable) de regresión no lineal usando el software de ajuste de curva GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA) o software funcionalmente equivalente.

Las condiciones del ensayo stINTSPA se optimizan preferiblemente para proporciones de integrasa, ADN viral y ADN diana para generar una señal de ensayo grande y específica. Una señal de ensayo específica se define como una señal que distingue los acontecimientos catalíticos de transferencia de cadena verdaderos de la formación de complejos de integrasa y ADN que no produce producto. En otros ensayos de la integrasa, a menudo un componente no específico grande (fondo) contribuye a la señal de ensayo total salvo que se optimicen de forma rigurosa las condiciones de tampón y se contra-ensayen usando un oligonucleótido de ADN viral modificado. La medida de fondo no específica se debe a la formación de complejos de integrasa/ADN viral/ADN diana que son altamente estables independientes de un mecanismo de transferencia de cadena productivo.

El stINTSPA preferido distingue la formación de complejos de las reacciones de transferencia de cadena productivas usando un oligonucleótido de ADN viral modificado que contiene un nucleósido didesoxi en el extremo 3' como control. Este ADN de control modificado puede incorporarse en complejos de integrasa/ADN viral/ADN diana, pero no puede servir como sustrato para la transferencia de cadena. Por tanto, puede observarse una ventana diferente entre las reacciones de transferencia de cadena productivas y no productivas. Además, las reacciones con perlas de ADN viral didesoxi dan una señal de ensayo que coincide muy estrechamente con la medida de fondo verdadera del ensayo usando las condiciones de optimización preferidas del ensayo. La medida de fondo verdadera del ensayo se define como una reacción con todos los componentes de ensayo (ADN viral y ADN diana [^{3}H]) en ausencia de la integrasa.

Los tampones de ensayo usados en el ensayo de la integrasa generalmente contienen al menos un agente reductor, tal como por ejemplo 2-mercaptoetanol o DTT, donde se prefiere DTT en forma de polvo reciente; al menos un catión divalente, tal como por ejemplo Mg^{++}, Mn^{++}, o Zn^{++}, preferiblemente Mg^{++}; al menos un agente de emulsión/dispersión, tal como por ejemplo octoxinol (también conocido como IGEPAL-CA o NP-40) o CHAPS; NaCl o un compuesto funcionalmente equivalente; DMSO o un compuesto funcionalmente equivalente; y al menos un tampón, tal como por ejemplo MOPS. Las características del tampón clave son la ausencia de PEG; la inclusión de una alta concentración de un detergente, tal como por ejemplo CHAPS a aproximadamente 1 a aproximadamente 5 mM y/o IGEPAL-CA de aproximadamente el 0,02 a aproximadamente el 0,15% o compuesto o compuestos funcionalmente equivalentes al menos capaces de reducir la adhesión no específica a las perlas SPA y los pocillos de ensayo y, posiblemente, de potenciar el índice de especificidad; la inclusión de una alta concentración de DMSO (de aproximadamente el 1 a aproximadamente el 12%); y la inclusión de niveles moderados de NaCl (\leq50 mM) y MgCl_{2} (de aproximadamente 3 a aproximadamente 10 mM) o compuestos funcionalmente equivalentes capaces de reducir el valor de fondo de ADNdd. Los tampones de ensayo pueden contener opcionalmente un conservante, tal como por ejemplo NaN_{3}, para reducir los contaminantes fúngicos y bacterianos durante el almacenamiento.

El tampón de detención contiene preferiblemente EDTA o un compuesto funcionalmente equivalente capaz de terminar la actividad enzimática, un agente de desnaturalización que comprende, por ejemplo, NaOH o clorhidrato de guanidina, y, opcionalmente, CsCl o un compuesto funcionalmente equivalente capaz de ayudar a que floten las perlas SPA en la parte superior del recipiente de ensayo para la detección por escintilación en la parte superior del depósito, y posiblemente, de minimizar la interferencia de compuestos. Un ejemplo de un SPA de transferencia de cadena por la integrasa es como se expone en el Ejemplo 13.

Como alternativa, el nivel de actividad de los compuestos moduladores puede determinarse en un ensayo antiviral, tal como por ejemplo un ensayo que mida cuantitativamente la producción de antígenos virales (por ejemplo, p24 de VIH-1) o las actividades de enzimas virales (por ejemplo, transcriptasa inversa de VIH-1) como indicadores de la replicación del virus, o que mida la replicación viral controlando la expresión de un gen informador exógeno introducido en el genoma viral (análisis de virus informadores de VIH-1) (Chen, B.K. y cols., J. Virol. 68(2): 654-660 (1994); Terwilliger, E.F. y cols., PNAS 86: 3857-3861 (1989)). Un procedimiento preferido para medir la actividad antiviral de un compuesto modulador potencial emplea un ensayo de protección de células de VIH-1, donde la replicación del virus se mide indirectamente controlando los efectos citopáticos de la célula huésped inducidos por el virus usando, por ejemplo, procedimientos de reducción de colorante como se expone en el Ejemplo 14.

En una realización, los compuestos de la presente invención incluyen aquellos que tienen un valor de CE_{50} contra la integrasa de VIH de al menos 10^{-5} M (o al menos 10 \muM) cuando se miden con un ensayo de protección de células de VIH. En otra realización, son compuestos de la presente invención con un valor de CE_{50} contra la integrasa de VIH de al menos 1 \muM cuando se miden con un ensayo de protección de células de VIH. En otra realización más, los compuestos de la presente invención tienen una CE_{50} contra la integrasa de VIH de al menos 0,1 \muM cuando se mide con un ensayo de protección de células de VIH.

Los agentes de la invención pueden prepararse usando las rutas de reacción y esquemas de síntesis que se describen a continuación, empleando las técnicas disponibles en la técnica usando materiales de partida que están fácilmente disponibles. La preparación de ciertas realizaciones de la presente invención se describe con detalle en los siguientes ejemplos, pero los especialistas en la técnica apreciarán que las preparaciones descritas pueden adaptarse fácilmente para preparar otras realizaciones de la presente invención. Por ejemplo, la síntesis de compuestos no ejemplificados de acuerdo con la invención puede realizarse mediante modificaciones evidentes para los especialistas en la técnica, por ejemplo, mediante la protección apropiada de grupos interfirientes, cambiando a otros reactivos adecuados conocidos en la técnica, o realizando modificaciones habituales de las condiciones de reacción. Como alternativa, se apreciará que pueden adaptarse otras reacciones descritas en este documento o conocidas en la técnica para preparar otros compuestos de la invención.

Procedimientos de preparación

El Esquema 1 representa un procedimiento para la formación de N-hidroxi lactama 6-5. La bromación radicálica de un indol sustituido con metilo 6-1 puede realizarse mediante diversos reactivos (Jerry March, Advanced Organic Chemistry, 5ª edición, John Whiley y Sons, 2001, pág. 911-914), siendo el más común N-bromosuccinimida (NBS). Será obvio para los especialistas en la técnica que la ejecución satisfactoria de esta reacción puede depender en gran medida del patrón de sustitución del precursor 6-1. La reacción de un haluro de alquilo 6-2 (X. Doisy y cols., Bioorg. Med. Chem)1999, 7, 921-932) con bencilhidroxilamina en presencia de una base tal como trietilamina puede proporcionar el compuesto 6-3. El tratamiento con etóxido sódico en etanol puede dar como resultado la formación de la lactama y la escisión del grupo protector fenilsulfonilo. La alquilación de 6-4 con un haluro de alquilo en presencia de una base tal como hidruro sódico en DMF de manera similar a los procedimientos descritos en el esquema 2 puede proporcionar la N-benciloxi lactama 6-5. El grupo protector bencilo puede retirarse usando diversos procedimientos (T. W. Greene, Protective groups in Organic Chemistry. 3ª edición, John Wiley y Sons, 1999, pág. 76-86) tales como hidrogenación catalizada con paladio. Como es evidente para los especialistas en la técnica, pueden usarse grupos protectores diferentes en lugar del grupo bencilo para formar el producto final 6-6.

Esquema 1

10

El Esquema 2 representa la síntesis de un azaindol 4-sustituido 12-12. Puede tratarse 2-metil-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo 12-1 (Wee, A.G.H.; Shu, A.Y.L.; Djerassi, C. J. Org. Chem. 1984, 49, 3327-3336) con un organohaluro en presencia de una base tal como NaH para proporcionar el pirrol 12-3. La bromación usando una fuente de bromo tal como NBS seguido de bromación radicálica después de la adición de un iniciador de radicales tal como peróxido de benzoílo puede dar el compuesto 12-4 que puede hacerse reaccionar con un tosilglicina éster 12-5 (Ginzel K. D., Brungs, P.; Steckan, E. Tetrahedron, 1989, 45, 1691-1701) proporcionando 12-6. La ciclación de 12-6 en 12-7 puede realizarse después del tratamiento con una base tal como hexametildisilazida de litio. La hidrogenólisis catalítica (por ejemplo con Pd/C) puede proporcionar el éster 12-8. El tratamiento de 12-8 con un organohaluro y una base tal como NaH puede dar 12-9. El grupo hidroxi de 12-8 puede convertirse en el triflato 12-10 usando anhídrido trifluorometanosulfónico y una base tal como trietilamina. El triflato 12-10 puede someterse a acoplamientos catalizados con paladio tales como acoplamiento de Stille con tributilestanileteno 12-11 en presencia de LiCl (J. K. Stille, Angew. Chem. 1986, 98, 504; Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1986, 25, 508; W. J. Scott, J. K. Stille, J. Am. Chem. Soc. 1986, 108, 3033; C. Amatore, A. Jutand, y A. Suarez J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, 9531-9541) usando un catalizador tal como Pd(PPh_{3})_{2}Cl_{2} (T. Sakamoto, C. Satoh, Y. Kondo, H. Yamanaka, Chem. Pharm. Bull. 1993, 41, 81-86), proporcionando 12-12 que puede tratarse con hidroxilamina formando 12-13.

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Esquema 2

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11

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Como alternativa, el compuesto 12-10 puede dejarse reaccionar con n-butil vinil éter en presencia de un catalizador de paladio, una base, una fosfina y cloruro de litio, en un disolvente a una temperatura de aproximadamente 70ºC, proporcionando el compuesto 12-14. El compuesto 12-14 puede dejarse reaccionar después con una base, tal como hidróxido de litio, y en presencia de un disolvente, tal como metanol, a aproximadamente 60ºC, seguido de reacción con ácido acético a una temperatura de aproximadamente 120ºC proporcionando el compuesto
12-15.

12

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Como se muestra a continuación en el Esquema 2a, el compuesto 12-15 puede funcionalizarse adicionalmente en la posición 3 proporcionando, por ejemplo, derivados de gramina (12-16), derivados de aldehído (12-17), derivados de ácido carboxílico (12-18) y derivados de cloruro de sulfonilo (12-19). Después, cada uno de los compuestos 12-16, 12-17, 12-18, y 12-19 puede funcionalizarse adicionalmente proporcionando otros compuestos intermedios que pueden convertirse adicionalmente en compuestos de fórmula (I).

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Esquema 2a

13

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Como se muestra en el Esquema 2b, el compuesto 12-15, o derivados de 12-15 como se muestra en el Esquema 2a, pueden dejarse reaccionar después con hidroxilamina proporcionando compuestos de fórmula (I).

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Esquema 2b

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14

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El Esquema 3 representa una ruta para la preparación de un compuesto cíclico 13-7. El éster 13-1 puede someterse a ciclación formando la piranona 13-4 como se describe por T. Sakamoto, Y. Kondo, A. Yasuhara, H. Yamanaka, Tetrahedron1991, 47,1877-1886. La hidrogenación catalítica usando un catalizador tal como Pd/C puede dar la lactona 13-3. La apertura del anillo de la lactona con una base tal como hidróxido sódico puede dar el ácido 13-5 que puede acoplarse con una hidroxilamina protegida adecuada (por ejemplo O-tetrahidropiranilhidroxilamina 13-5) usando un reactivo de acoplamiento tal como HATU formando 13-6. Las condiciones de reacción de Mitsunobu (por ejemplo trifenilfosfina y diisopropilazodicarboxilato) pueden efectuar la ciclación de 13-6 formando 13-7 (para una revisión, véase D. L. Hughes, Org. Prep. Proced. Int. 1996, 28, 127-164). Se espera que la retirada del grupo tetrahidropiranilo proporcionando 13-8 se realice en condiciones ácidas.

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Esquema 3

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15

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El compuesto 14-8 puede obtenerse de acuerdo con el Esquema 4. La reacción catalizada con paladio del triflato 14-1 con un alquino tal como 14-2 puede dar 14-3. La hidrogenación catalítica usando un catalizador tal como Pd/C puede dar el propanol 14-4. La saponificación del éster 14-4 con una base tal como hidróxido sódico puede dar el ácido 14-5 que puede acoplarse con una hidroxilamina protegida adecuada (por ejemplo O-tetrahidropiranilhidroxilamina 14-6) usando un reactivo de acoplamiento tal como HATU formando 13-7. Las condiciones de reacción de Mitsunobu (por ejemplo trifenilfosfina y diisopropilazodicarboxilato) pueden realizar la ciclación de 14-7 formando 14-8 (para una revisión, véase D. L. Hughes, Org. Prep. Proced. Int. 1996, 28, 127-164). Se espera que la retirada del grupo tetrahidropiranilo proporcionando 14-9 se realice en condiciones ácidas.

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Esquema 4

16

En el Esquema 5 se muestra un procedimiento general para la formación de los compuestos 15-5 y 15-6. La reacción catalizada con paladio del triflato 15-1 con un alquino 15-2 puede dar el éster 15-3. Después del tratamiento del éster con hidroxilamina y una base tal como hidróxido sódico usando las condiciones descritas por D. W. Knight, Tetrahedron Lett. 2002, 43, 9187-9189, se espera la formación de 15-5 y/o 15-6.

Esquema 5

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Ejemplos

Los ejemplos que se muestran a continuación sólo pretenden ilustrar realizaciones particulares de la presente invención y no pretenden limitar el alcance de la invención de manera alguna.

En los ejemplos que se describen a continuación, a menos que se indique otra cosa, todas las temperaturas de la siguiente descripción están en grados Celsius (ºC) y todas las partes y porcentajes están en peso, a menos que se indique otra cosa.

Diversos materiales de partida y otros reactivos se adquirieron de proveedores comerciales, tales como Aldrich Chemical Company o Lancaster Synthesis Ltd., y se usaron sin purificación adicional, a menos que se indique otra cosa.

Las reacciones que se indican a continuación se realizaron a presión positiva de nitrógeno, argón o con un tubo de secado, a temperatura ambiente (a menos que se indique otra cosa), en disolventes anhidros. Se realizó cromatografía analítica de capa fina en placas 254 60ºF de gel de sílice reforzadas con vidrio (Analtech (0,25 mm)) y se eluyeron con las relaciones de disolventes apropiados (v/v). Las reacciones se ensayaron por cromatografía líquida a alta presión (HPLC) o cromatografía de capa fina (TLC) y finalizaron según se determinó por el consumo del material de partida. Las placas de TLC se visualizaron por UV, tinción con ácido fosfomolíbdico o tinción con yodo.

Los espectros de ^{1}H RMN se registraron en un instrumento Bruker que funcionaba a 300 MHz y los espectros de ^{13}C RMN se registraron a 75 MHz. Los espectros de RMN se obtienen en forma de soluciones en DMSO-d_{6} o CDCl_{3} (proporcionados en ppm), usando cloroformo como patrón de referencia (7,25 ppm y 77,00 ppm) o DMSO-d_{6} ((2,50 ppm y 39,52 ppm)). Se usaron otros disolventes de RMN según fue necesario. Cuando se presentan las multiplicidades de picos, se usan las siguientes abreviaturas: s = singlete, d = doblete, t = triplete, m = multiplete, a = ancho, dd = doblete de dobletes, dt = doblete de tripletes. Las constantes de acoplamiento, cuando se dan, se presentan en Hertzios.

Los espectros de infrarrojos se registraron en un Perkin-Elmer FT-IR Spectrometer como aceites puros, como gránulos de KBr o como soluciones en CDCl_{3}, y cuando se presentan están en números de onda (cm^{-1}). Los espectros de masas se obtuvieron usando CL/EM o IQPA. Todos los puntos de fusión están sin corregir.

Todos los productos finales tenían una pureza superior al 95% (por HPLC a longitudes de onda de 220 nm y 254 nm).

Todos los análisis elementales para los compuestos de este documento, a menos que se indique otra cosa, proporcionaron valores para análisis de C, H y N que estaban dentro de un 0,4% del valor teórico, y se presentan como "C, H, N".

En los siguientes ejemplos y preparaciones, "LDA" significa diisopropilamiduro de litio, "Et" significa etilo, "Ac" significa acetilo, "Me" significa metilo, "Ph" significa fenilo, (PhO)_{2}POCl significa clorodifenilfosfato, "HCl" significa ácido clorhídrico, "EtOAc" significa acetato de etilo, "Na_{2}CO_{3}" significa carbonato sódico, "NaOH" significa hidróxido sódico, "NaCl" significa cloruro sódico, "NEt_{3}" significa trietilamina, "THF" significa tetrahidrofurano, "DIC" significa diisopropilcarbodiimida, "HOBt" significa hidroxibenzotriazol, "H_{2}O" significa agua, "NaHCO_{3}" significa carbonato ácido sódico, "K_{2}CO_{3}" significa carbonato potásico, "MeOH" significa metanol, "i-PrOAc" significa acetato de isopropilo, "MgSO_{4}" significa sulfato de magnesio, "DMSO" significa dimetilsulfóxido, "AcCl" significa cloruro de acetilo, "CH_{2}Cl_{2}" significa cloruro de metileno, "MTBE" significa metil t-butil éter, "DMF" significa dimetilformamida, "SOCl_{2}" significa cloruro de tionilo, "H_{3}PO_{4}" significa ácido fosfórico, "CH_{3}SO_{3}H" significa ácido metanosulfónico, " Ac_{2}O" significa anhídrido acético, "CH_{3}CN" significa acetonitrilo y "KOH" significa hidróxido potásico.

Ejemplo 1 3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona

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Etapa 1

1-(4-Fluorobencil)-2-metil-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo

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A una solución de 2-metil-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (106,26 g, 0,694 mol) (preparada mediante el procedimiento de: Wee, A.G.H.; Shu, A.Y.L.; Djerassi, C. J. Org. Chem. 1984, 49, 3327-3336) en DMF anhidra (1,0 l), en atmósfera de nitrógeno, se le añadió en 5 porciones hidruro sódico (al 60% en aceite, 30,5 g, 0,763 mol, 1,1 equiv.) durante 1 hora. Cuando cesó el desprendimiento de gas, se añadió bromuro de 4-fluorobencilo (131,13 g, 0,694 mol) en DMF anhidra (0,2 l) mediante un embudo de adición ecualizado a presión durante 45 minutos. La mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 16 horas después de que se completara la adición y después se vertió en agua (1,4 l) en un embudo de decantación de 4 l. La mezcla se extrajo con éter dietílico (5 x 1,0 l) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3,0 l) y se secaron (Na_{2}SO_{4}). La filtración, aclarando la torta de filtro con éter dietílico (0,5 l) y la concentración al vacío (aprox. 20 Torr (2,67 kPa)) dieron el producto bruto y DMF. La DMF residual se retiró en un rotavapor con trampa de dedo frío a un vacío total de la bomba en un baño de agua a 40ºC dando el bencilato pirrol bruto en forma de un aceite naranja. El producto bruto se purificó por cromatografía sobre una columna de gel de sílice (125 mm DE, 1 kg de malla 230-400, cargada con 95:5 de hexanos-EtOAc) eluida con hexanos:EtOAc (95:5, 2,0 l) y hexanos:EtOAc (90:10, 8,0 l) mientras se recogían fracciones de 500 ml, usando la técnica ultrarrápida. Las fracciones 4-18 se combinaron, proporcionando 1-(4-fluorobencil)-2-metil-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (172,3 g, 95%) en forma de un líquido viscoso, amarillo pálido y transparente. TLC (Merck, 85:15 de hexanos:EtOAc, UV-+, molibdato de cerio-+): R_{f} = 0,26; CLEM (Eclipse XDB-C8, 0,8 ml/min, gradiente de 80:20 a 5:95 de H_{2}O (+HOAc al 0,1%):CH_{3}CN - 5 minutos, IQPA, modo +): TR - 3,711 min, m/e = 262,1 (base), 263,2 (30); ^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,33 (t, J = 7,06 Hz, 3H), 2,43 (s, 3H), 4,26 (c, J = 7,06 Hz, 2H), 5,00 (s, 2H), 6,52 (d, J = 3,20 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 3,20 Hz, 1H), 6,92-7,04 (m, 4H).

Etapa 2

4,5-Dibromo-2-(bromometil)-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo

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A NBS (267,5 g, 1,503 mol, 3 equiv.) en CCl_{4} anhidro (0,5 l) en un matraz de fondo redondo de 3 bocas y de 3 l, equipado con una sonda de control de la temperatura interna, embudo de adición y condensador de reflujo, se le añadió 1-(4-fluorobencil)-2-metil-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (130,9 g, 0,501 mol) en CCl_{4} anhidro (0,5 l) durante 15 minutos. La temperatura interna aumentó a 43ºC durante la adición y se desarrolló un color rojo transitorio, que se decoloró después de que se completara la adición. La mezcla se dejó en agitación durante 15 minutos, después se añadió peróxido de benzoílo (1,21 g, 5 mmol, 0,01 equiv.) y la mezcla se calentó a una temperatura interna de 77ºC (reflujo) y se mantuvo a esa temperatura durante 1,5 horas. En este momento la CLEM (IQPA) indicó que la reacción se había completado. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, el sólido precipitado se retiró por filtración, la torta de filtro se aclaró con CCl_{4} (0,3 l) y los filtrados combinados se concentraron al vacío dando el tribromuro bruto en forma de un semi-sólido rojo-pardo. El material bruto se trató con diclorometano (50 ml) y hexanos (250 ml), produciendo un sólido castaño y un líquido rojo-pardo. El sólido se aisló por filtración, se aclaró con diclorometano:hexanos (10:90, 0,5 l) y se secó al vacío a temperatura ambiente, formando 170,03 g (69%) de 4,5-dibromo-2-(bromometil)-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo en forma de un sólido castaño pálido. Los filtrados se concentraron al vacío dando unas aguas madre que se purificaron por cromatografía sobre una columna de gel de sílice (70 mm DE, 400 g, malla 230-400, 90:10 de hexanos:EtOAc, fracciones de 250 ml) usando la técnica ultrarrápida. Las fracciones 3-6 proporcionaron 29,57 g más de 4,5-dibromo-2-(bromometil)-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo en forma de un sólido castaño pálido. Total: 199,6 g (81%). TLC (Merck, 90:10 de hexanos:EtOAc, UV-+, molibdato de cerio-+): R_{f} = 0,33; CLEM (Eclipse XDB-C8, 0,8 ml/min, gradiente de 80:20 a 5:95 de H_{2}O (+HOAc al 0,1%):CH_{3}CN - 5 minutos, IQPA, modo +): TR - 4,109 min, m/e = 416,0 (50), 417,9 (base), 419 (50), M-Br; ^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,39 (t, J = 7,16 Hz, 3H), 4,35 (c, J = 7,16 Hz, 2H), 4,77 (s, 2H), 5,36 (s, 2H), 6,96-7,07 (m, 4H).

Etapa 3

4,5-Dibromo-1-(4-fluorobencil)-2-({(2-metoxi-2-oxoetil)[(4-metilfenil)sulfonil]amino}metil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo

21

A una solución en agitación de N-[(4-metilfenil)sulfonil]glicinato de metilo (51,75 g, 0,213 mol, preparada mediante el procedimiento de: Ginzel, K.D.; Brungs, P.; Steckhan, E. Tetrahedron 1989, 45, 1691-1701) en DMF anhidra (0,5 l) se le añadió en una porción NaH (al 60% en aceite, 8,59 g, 0,215 mol). La mezcla se dejó en agitación durante 30 minutos (se calentó y se volvió a la temperatura ambiente), momento en el que se añadió una solución de 4,5-dibromo-2-(bromometil)-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (105,92 g, 0,213 mol) en DMF anhidra (0,5 l) durante 1 hora. La mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 16 horas, después la DMF se retiró al vacío (aprox. 2 Torr (0,27 kPa), baño de agua a 40ºC), el residuo oleoso se disolvió en diclorometano (0,75 l) y la solución se lavó con NH_{4}Cl ac. saturado (0,5 l) y salmuera (0,5 l) y se secó (Na_{2}SO_{4}). La filtración y la concentración al vacío proporcionaron el material alquilado bruto en forma de un aceite rojizo viscoso. El material bruto se calentó en presencia de MeOH (0,75 l) hasta que el MeOH llegó a ebullición y entonces se añadió lentamente diclorometano hasta que se alcanzó la solución. La solución roja se enfrió a temperatura ambiente (se observaron cristales blanquecinos) y la cristalización se completó por refrigeración en un frigorífico (4ºC) durante 16 horas. El sólido de color marfil se aisló por filtración, el sólido se aclaró con éter dietílico:hexanos (0,5 l, 10:90 v/v) y el sólido se secó en un horno de vacío (aprox. 20 Torr (2,67 kPa), 50ºC) durante una noche, formando 4,5-dibromo-1-(4-fluorobencil)-2-({(2-metoxi-2-oxoetil)[(4-metilfenil)sulfonil]amino}metil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (108,2 g, 77%) en forma de un sólido de color marfil, fino y fluido. TLC (Merck, hexanos:EtOAc 75:25, UV-+, molibdato de cerio-+ - púrpura): R_{f} = 0,38; CLEM (Eclipse XDB-C8, 0,8 ml/min, gradiente de 80:20 a 5:95 de H_{2}O (+HOAc al 0,1%):CH_{3}CN - 5 minutos, IEN, modo +): TR - 4,436 min, m/e = 680,8 (55), 681,8 (18), 682,9 (base), 683,9 (30), 684,8 (62), 686,8 (10) - M+Na; ^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 1,24 (t, J = 7,16 Hz, 3H), 2,14 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 3,89 (s, 2H), 4,19 (c, J = 7,16 Hz, 2H), 4,55 (s, 2H), 7,02 (d, J = 2,45 Hz, 2H), 7,04 (s, 2H), 7,28 (d, J = 8,19 Hz, 2H), 7,59 (d, J = 8,19 Hz, 2H)

Etapa 4

2,3-Dibromo-1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo

22

A LiHMDS sólido (61,27 g, 0,366 mol) en un matraz de fondo redondo, de 3 bocas y de 3 l equipado con un embudo de adición ecualizado a presión de 0,5 l y una sonda de temperatura interna, se le añadió THF anhidro (0,5 l). La mezcla se puso en atmósfera de nitrógeno y se sumergió en un baño de hielo seco-i-PrOH. La solución se dejó en agitación hasta que la temperatura interna alcanzó -78ºC (1,25 h). A esta solución fría en agitación se le añadió una solución de 4,5-dibromo-1-(4-fluorobencil)-2-({(2-metoxi-2-oxoetil)[(4-metilfenil) sulfonil]amino}metil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (107,43 g, 0,163 mol) en THF anhidro (0,5 l) a tal velocidad que la temperatura interna no superó -70ºC (2 horas). Durante el transcurso de la adición, primero se observó un color amarillo que dio lugar a una solución naranja/amarilla, que después produjo un precipitado y una solución naranja/amarilla. La reacción se dejó en agitación durante 30 minutos después de que se completara la adición, momento en el que la CLEM (muestra tomada 15 minutos después de la adición) indicó que la reacción se había completado. La mezcla se vertió rápidamente en un embudo de decantación de 6 l, que se había cargado con NH_{4}Cl ac. saturado (1,5 l) y diclorometano-metanol (95:5, 2 l). La mezcla se agitó rápidamente para distribuir la mezcla de reacción y la reacción se interrumpió. La fase orgánica se separó; y la fase acuosa se extrajo con diclorometano-metanol (95:5 v/v, 1 l). Las fases orgánicas combinadas se filtraron retirando un precipitado blanco fino y después se secaron (Na_{2}SO_{4}). La concentración al vacío proporcionó el material ciclado bruto en forma de un sólido amarillo, que se trituró con EtOH (0,6 l) y el sólido blanco resultante se aisló por filtración, se lavó con éter etílico anhidro (50 ml) y se secó en un horno de vacío (aprox. 20 Torr (2,67 kPa), 50ºC, 16 horas) dando 40,51 g (54,4%) de 2,3-dibromo-1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo en forma de un sólido blanco en polvo después del secado en un horno de vacío. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se trituró con éter dietílico/hexanos (50:50 v/v, 0,25 l), dando 10,69 g (14,3%) de 2,3-dibromo-1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo en forma de un sólido blanco en polvo después del secado en un horno de vacío (aprox. 20 Torr (2,67 kPa), 50ºC, 16 horas). El filtrado se trató de nuevo en las mismas condiciones (0,1 l, 50:50 v/v de éter dietílico-hexanos) dando 2,39 g más (3,2%) para un rendimiento total del 53,59 g (72%). TLC (Merck, CH_{2}Cl_{2}: EtOAc 50:50, UV-+, molibdato de cerio-+): R_{f} = 0,57; CLEM (Eclipse XDB-C8, 0,8 ml/min, gradiente de 80:20 a 5:95 de H_{2}O (+HOAc al 0,1%):CH_{3}CN - 5 minutos, IEN, modo +): TR - 3,790 min, m/e = 456,9 (55), 458,8 (base), 459,9 (15) - M+, 480,9 - M+Na.; ^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 4,03 (s, 3H), 5,48 (s, 2H), 6,96-7,04 (m, 2H), 7,05-7,12 (m, 2H), 8,28 (s, 1H), 11,60 (s, 1H).

Etapa 5

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1-(4-Fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo

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23

A un matraz Parr de 2,5 l se le añadieron 2,3-dibromo-1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo (67,28 g, 0,147 mol), metanol (1,5 l) y trietilamina (32,70 g, 0,323 mol, 2,2 equiv.). En esta mezcla se burbujeó nitrógeno durante 10 minutos y después se añadió cuidadosamente Pd al 10%/C (15,6 g). La botella se puso en un aparato Parr; se evacuó/purgó con nitrógeno (3 x) y se añadió hidrógeno a 275,790 kPa (40 psi). Se inició la agitación y después de 5 minutos la presión había llegado a cero y la botella se presurizó de nuevo a 275,790 kPa (40 psi). Esto se repitió 2 x, momento en el que la presión disminuyó a 241,316 kPa (35 psi) y se mantuvo. Después, la TLC y la CLEM indicaron que la reacción se había completado (tiempo total de aprox. 1 hora). El paladio se retiró por filtración a través de una capa de Celite, la torta de filtro se aclaró con diclorometano (1,0 l) y los filtrados combinados se concentraron al vacío dando el producto bruto más sales de amina. La mezcla se recogió en EtOAc (2 l) y agua (1,0 l), la fase orgánica se separó, la fase acuosa se extrajo con EtOAc (0,6 l) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1,0 l) y se secaron (Na_{2}SO_{4}). La filtración y la concentración al vacío dieron un sólido blanco en polvo que se secó en un horno de vacío (aprox. 20 Torr (2,67 kPa), 50ºC, 16 horas), proporcionando 43,13 g (98%) de 1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo en forma de un sólido blanco en polvo fluido. TLC (Merck, 50:50 de CH_{2}Cl_{2}:EtOAc, UV-+, molibdato de cerio-+): R_{f} = 0,45 (azul fluorescente); CLEM (Eclipse XDB-C8, 0,8 ml/min, gradiente de 80:20 a 5:95 v/v de H_{2}O (+HOAc al 0,1%):CH_{3}CN - 5 minutos, IQPA, modo +): TR - 3,217 min, m/e = 301,1 (base, M+H); ^{1}H RMN (300 MHz, CDCl_{3}): \delta = 4,02 (s, 3H), 5,36 (s, 2H), 6,83 (d, J = 3,10 Hz, 1H), 6,96-7,04 (m, 2H), 7,07-7,13 (m, 2H), 7,17 (d, J = 3,10 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 11,40 (s, 1H).

Etapa 6

1-(4-Fluorobencil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo

A una solución agitada del 1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo (20,0 g, 66,7 mmol) y trietilamina (46,5 ml, 333 mmol) en diclorometano (200 ml) a 0ºC se le añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosulfónico (33,6 ml, 200 mmol) y la reacción se agitó a 0ºC durante 10 minutos. Se interrumpió con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró, se concentró y se purificó por cromatografía con acetato de etilo/hexanos (1/1), proporcionando el compuesto del título en forma de un sólido pardo (25,28 g, rendimiento del 88%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}): \delta 8,73 (s, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,18 (t, 2H), 7,05 (t, 2H), 6,80 (d, 1H), 5,43 (s, 2H), 4,02 (s, 3H). CLEM (IPA-ES, M+H^{+}): 433,0. HPLC: pureza del 96%.

Etapa 7

Procedimiento 1 4-[(E)-2-Etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo

A una solución agitada de 1-(4-fluorobencil)-4-[(trifluoroacetil)oxi]-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo (1,4 g, 3,24 mmol) y (E)-2-etoxiviniltributilestaño (E [preparado de acuerdo con A. Leusik, H. A. Budding, J. W. Marsman, J. Organomet. Chem., 1967, 9, 285-294] (2,2 g, 6,48 mmol) en DMF (10 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron trietilamina (0,48 ml, 3,24 mmol) y diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,24 g, 0,32 mmol). La mezcla resultante se calentó a 140ºC durante 2 horas. Se inactivó con agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2 x 30 ml), se secaron sobre sulfato sódico, se concentraron al vacío y se purificaron por cromatografía ultrarrápida Biotage. La elución con hexano:acetato de etilo (1:1) proporcionó el compuesto del título en forma de un pegamento pardo (0,40 g, rendimiento del 35%). ^{1}H RMN (MeOD) \delta: 8,50 (s, 1H), 7,64 (d, 1H, J = 3,3 Hz), 7,22 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 7,05 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 6,89 (d, 1H, J = 3,3 Hz), 5,53 (s, 2H), 4,02 (c, 2H, J = 7,1 Hz), 1,37 (t, 3H, J= 7,1 Hz). CLEM (IQPA, M+H^{+}): 355,2.

Procedimiento 2

4-(2-Etoxivinil)-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo

A una solución de 1-(4-fluorobencil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo (2 g, 4,62 mmol) en DMF (27 ml) se le añadió cloruro de litio (0,59 mg, 13,88 mmol). Se burbujeó nitrógeno seco a través de la mezcla durante 10 min y después se añadió diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,16 g, 0,23 mmol). La mezcla se calentó a 79ºC y se añadió una solución de etoxiviniltributilestaño (mezcla de isómeros: 1,2-E:1,2-Z:1,1 = 1:0:0,97:0,18) [preparada de acuerdo con A. Leusik, H. A. Budding, J. W. Marsman, J. Organomet. Chem., 1967, 9, 285-294] (1,82 g, 5,08 mmol) en DMF (23 ml). La mezcla resultante se agitó durante 9 h a 70ºC en atmósfera de nitrógeno. Se inactivó con cloruro sódico saturado, se filtró para retirar el precipitado sólido y después se concentró. La purificación por cromatografía ultrarrápida (Biotage) sobre gel de sílice (de 1:1 a 1:3, hexano/acetato de etilo) proporcionó el producto del título en forma de un pegamento pardo (1,46 g, rendimiento del 89,2%). CLEM (IQPA, M+H^{+}): 355,2.

Etapa 8

4-[(E)-2-Etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-N-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxamida

A 4-[(E)-2-etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo (0,1 g, 0,28 mmol) en metanol (10 ml) se le añadieron hidroxilamina (1 ml, al 50% en agua, 15,2 mmol) e hidróxido sódico (63,8 mg, 1,59 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y se añadió ácido clorhídrico 4 N (0,5 ml, 1,9 mmol). La mezcla se concentró proporcionando 100 mg del compuesto del título que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta ppm 11,76 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 8,88 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 8,60 (s, 1H), 7,83 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 7,31 (t, 2H, J = 8,9 Hz), 7,22 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 7,05 (t, 2H, J = 8,9 Hz), 6,82 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 6,66 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 5,54 (s, 2H), 3,96 (c, 2H, J = 7,0 Hz), 1,28 (t, 3H, J = 7,0 Hz). CLEM (IQPA, M+H^{+}): 356.

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Etapa 9

3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona

Una solución de 4-[(E)-2-etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-N-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxamida (100 mg, 0,28 mmol) en metanol (10 ml) y ácido clorhídrico (al 37% en peso, 1 ml) se calentó a reflujo durante 16 horas. Se inactivó con una solución saturada de bicarbonato sódico y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se concentró y se purificó por HPLC prep., proporcionando el compuesto del título en forma de polvo blanco. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta; 11,50 (s, 1H), 9,04 (s, 1H), 7,88 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 7,84 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 7,13-7,19 (m, 3H), 6,93 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 5,65 (s, 2H). EM (IQPA, M+H^{+}): 310,1, EMAR calc. para C_{17}H_{13}N_{3}O_{2}F_{1} (M+H^{+}) 310,0992, encontrado 310,0991. HPLC: pureza del 94,3%.

Procedimiento alternativo para la preparación de 4-[(E)-2-Etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-N-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxamida

Etapa 1

4,5-Dibromo-1-(4-fluorobencil)-2-({(2-etoxi-2-oxoetil)[(4-metilfenil)sulfonil]amino}metil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo

24

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A una solución en agitación de 4,5-dibromo-2-(bromometil)-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (104,0 g, 0,209 mol) y N-[(4-metilfenil)sulfonil]glicinato de etilo (53,7 g, 0,209 mol, preparada mediante el procedimiento de: Ginzel, K. D.; Brungs, P.; Steckhan, E. Tetrahedron 1989, 45, 1691-1701) en THF anhidro (1,5 l) se le añadió en varias porciones pequeñas NaH (al 60% en aceite mineral, 8,40 g, 0,210 mol). La mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 16 horas. Se inactivó con una solución ac. de NH_{4}Cl y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna con acetato de etilo/hexano (1:4, v:v), proporcionando el compuesto del título en forma de un material de tipo pegamento (124 g, rendimiento del 88%). ^{1}H RMN (CDCl_{3}) \delta ppm 7,61 (d, J = 4,7 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 5,7 Hz, 2 H), 7,04 (d, J = 5,6 Hz, 4 H), 5,60 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 4,20 (c, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,94 (c, J = 7,2 Hz, 2 H), 3,89 (s, 2H), 2,42 (s, 2H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 1,14 (t, J = 7,1 Hz, 3 H).

Etapa 2

2,3-Dibromo-1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo

25

A una solución en agitación de 4,5-dibromo-1-(4-fluorobencil)-2-({(2-etoxi-2-oxoetil)[(4-metilfenil)sulfonil]amino}metil)-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (124,2 g, 184,3 mol) en THF anhidro (1,0 l) se le añadió LiHMDS (405 ml, 1,0 M en THF, 0,405 mol) a -78ºC durante 1 h. La mezcla se inactivó con NH_{4}Cl ac. y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna con acetato de etilo/hexano (1/1, v:v) a acetato de etilo/diclorometano (9/1), dando el producto del título (52,0 g rendimiento del 60%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta ppm 11,50 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 4H), 5,60 (s, 2H), 5,67 (s, 2H), 4,39 (c, J = 7,1 Hz, 2H,), 1,33 (t, J = 7,2 Hz, 3H). CL/EM (IPA-ES, M+H*): 473,0.

\newpage

Etapa 3

1-(4-Fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo

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26

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Una suspensión de 2,3-dibromo-1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (52,0 g, 0,110 mol) y Pd al 10%/C (0,5 g) en etanol (2,0 l) se agitó en un agitador Parr en atmósfera de hidrógeno (268,895 kPa (39 psi)) durante 23 h. El catalizador se retiró por filtración. Durante la concentración del filtrado, el producto precipitó. Se recogió por filtración y se secó al vacío, proporcionando el compuesto del título. (34 g, rendimiento del 98%) ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta ppm 11,66 (s, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,14 (d, J = 3,0 Hz, 1H) 7,37 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 7,19 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 7,11 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 5,71 (s, 2H), 4,45 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 1,37 (t, J = 7,2 Hz, 3H). CL/EM (IPA-ES, M+H^{+}): 315,1.

Etapa 4

1-(4-Fluorobencil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo

A una solución agitada del 1-(4-fluorobencil)-4-hidroxi-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (20,0 g, 63,7 mmol) y trietilamina (44,4 ml, 318,5 mmol) en diclorometano (150 ml) a 0ºC se le añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosulfónico (32,0 ml, 190,1 mmol) y la reacción se agitó durante 1 h. Se inactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró, se concentró y se purificó por cromatografía con acetato de etilo/hexano (1/1), proporcionando el compuesto del título en forma de un sólido pardo (17,6 gramos, rendimiento del 78%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): \delta; 8,10 (s, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,41 (t, 2H), 7,18 (t, 2H), 6,74 (d, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,34 (c, 2H), 1,31 (t, 3H). CL/EM (IPA-ES, M+H^{+}): 447,0.

Etapa 5

4-[(E)-2-Etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo

A una solución agitada de 1-(4-fluorobencil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (10,0 g, 22,4 mmol) y etoxivinil tributilestaño [preparada de acuerdo con A. Leusik, H. A. Budding, J. W. Marsman, J. Organomet. Chem., 1967, 9, 285-294] (9,7 g, 26,9 mmol, mezcla de E-1,2: Z-1,2:1-1, relación = 1:0,3:0,1) en DMF (30 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron trietilamina (3,2 ml, 22,4 mmol) y diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (1,0 g, 1,4 mmol). La mezcla resultante se calentó a 140ºC durante 10 minutos. Se inactivó con una solución ac. de NaHCO_{3} y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con salmuera (2 x), se secó sobre sulfato sódico, se concentró al vacío y se purificó por cromatografía ultrarrápida Biotage. La elución con hexano:acetato de etilo (3:2) proporcionó el compuesto del título en forma de un pegamento pardo (2,1 g) Isómero E puro junto con 5,6 g de una mezcla de isómeros E-1,2 y Z-1,2 y 1,1). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta; 8,69 (s, 1H), 7,85 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 7,33 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 7,13-7,20 (m, 3H), 6,86 (d, J = 3,3 Hz, 1 H), 6,43 (d, J = 13 Hz, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,27 (c, J = 7,2 Hz, 2 H), 3,98 (c, J = 7,0 Hz, 2 H), 1,29 (t, J = 7,1 Hz, 6 H). CLEM (IQPA, M+H^{+}):
369,1.

Etapa 6

A 4-[(E)-2-etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (0,2 g, 0,54 mmol) en metanol (5 ml) se le añadieron hidroxilamina (1 ml, al 50% en agua, 15,2 mmol) e hidróxido sódico (0,0763 g, 1,9 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 h, se neutralizó con una solución ac. 4 N de HCl (0,48 ml, 1,9 mmol) y se extrajo con acetato de etilo. El extracto orgánico se concentró y se recristalizó en acetato de etilo/éter etílico/hexano, dando el compuesto del título (0,12 g, rendimiento del 62%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta; 11,76 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 8,88(d, 1H, J = 1,9 Hz), 8,60 (s, 1H), 7,83 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 7,31 (t, 2H, J = 8,9 Hz), 7,22 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 7,05 (t, 2H, J = 8,9 Hz), 6,82 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 6,66 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 5,54 (s, 2H), 3,96 (c, 2H, J = 7,0 Hz), 1,28 (t, 3H, J = 7,0 Hz). CLEM (IQPA, M+H^{+}): 356,1, Anal. (C_{19}H_{18}FN_{3}O_{3}) C, H, N. HPLC: pureza
del 95%.

Ejemplo 2 3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona

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27

Etapa 1

7-(4-Fluorobencil)piran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(7H)-ona

Procedimiento 1: Una solución de 4-[2-etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de metilo (puede usarse E puro, Z puro o mezcla E/Z) (0,17 g, 0,48 mmol) en metanol (5 ml) y ácido clorhídrico (al 37% en peso, 10 ml) se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla se inactivó con bicarbonato sódico ac. saturado y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró, se concentró y se purificó por HPLC prep., proporcionando el compuesto del título en forma de polvo blanco (20 mg, rendimiento del 14%). Procedimiento 2: Una solución de 4-[2-etoxivinil]-1-(4-fluorobencil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (puede usarse E puro, Z puro o mezcla E/Z) (1,1 g, 2,98 mmol) en metanol (5 ml), agua (5 ml) y ácido clorhídrico (al 37% en peso, 5 ml) se calentó a reflujo durante 16 horas. La mezcla se inactivó con bicarbonato sódico ac. saturado y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró, se concentró y se purificó por cromatografía Biotage, proporcionando el compuesto del título en forma de polvo blanco (0,3 g, rendimiento del 34%). ^{1}H RMN (MeOD) \delta; 8,93 (s, 1H), 7,80 (d, J = 3,2 Hz, 1 H), 7,84 (d, J = 5,5 Hz, 1 H), 7,28 (d, 1H, J = 5,5 Hz, 1 H), 7,03-7,10 (m, 5H), 5,64 (s, 2H). EM (IQPA, M+H^{+}): 295,1.

Etapa 2

7-(4-Fluorobencil)-1,7-dihidropiran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(2H)-ona

Una solución de 7-(4-fluorobencil)piran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(7H)-ona (0,30 g, 0,102 mmol) y Pd/C (Pd al 5%, 50 mg) en metanol (100 ml) se agitó en un agitador Parr en atmósfera de hidrógeno (137,895 kPa (20 psi)) durante 16 horas. El catalizador se retiró por filtración y el filtrado se concentró y se secó al vacío, proporcionando el compuesto del título en forma de un sólido (0,28 g, rendimiento del 4%), que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa. ^{1}H RMN (MeOD) \delta; 8,77 (s, 1H), 7,76 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 7,28 (d, 2H, J = 5,1 Hz), 7,07 (d, 2H, J = 5,1 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 4,66 (d, 2H, J = 6 Hz), 3,41 (d, 2H, J = 6 Hz). EM (IQPA, M+H^{+}): 297,1.

Etapa 3

Ácido 1-(4-fluorobencil)-4-(2-hidroxietil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxílico

A 7-(4-fluorobencil)-1,7-dihidropiran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(2H)-ona (0,11 g, 0,37 mmol) en metanol (10 ml) se le añadió hidróxido sódico (0,066 g, 1,65 mmol) en agua (2,0 ml). La reacción se calentó a 60ºC durante 3 horas. Después de la refrigeración, la mezcla de reacción se neutralizó con ácido clorhídrico 4 N (0,42 ml, 1,65 mmol). Se concentró y se secó al vacío, proporcionando el compuesto del título bruto en forma de un polvo blanco (0,11 g, 94%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta; 8,93 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 8,06 (s, 1H), 7,36 (m, 2H), 7,16 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 6,96 (s, 1H), 5,63 (s, 2H), 3,66 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 3,44 (t, 2H, J = 6,8 Hz). CLEM (IQPA, M+H^{+}): 315,1.

Etapa 4

1-(4-Fluorobencil)-4-(2-hidroxietil)-N-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxamida

A ácido 1-(4-fluorobencil)-4-(2-hidroxietil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxílico (0,11 g, 0,35 mmol) en DMF (10 ml) se le añadieron trietilamina (0,15 ml, 1,05 mmol), O-(tetrahidro-2H-piran-2-il)hidroxilamina 2-(aminoxi)tetrahidro-2H-pirano (0,05 g, 0,43 mmol) y hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (HATU; 0,16 g, 0,42 mmol). La mezcla se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Se inactivó con agua (30 ml), se extrajo con acetato de etilo (50 ml) y se lavó con salmuera (2 x 50 ml). Los extractos orgánicos se secaron sobre sulfato sódico, se concentraron al vacío y se purificaron por cromatografía Biotage usando metanol al 5% en diclorometano como eluyente, proporcionando el compuesto del título en forma de un polvo bruto (0,16 g) que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa. CLEM (IQPA, M+H^{+}): 414,2.

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Etapa 5

7-(4-Fluorobencil)-1,7-dihidropiran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(2H)-ona

A una solución agitada de 1-(4-fluorobencil)-4-(2-hidroxietil)-N-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxamida (0,16 g, 0,39 mmol) y trifenilfosfina (0,12 g, 0,46 mmol) en THF (10 ml) se le añadió gota a gota diisopropilazodicarboxilato (0,09 ml, 94 mg, 0,46 mmol) en THF (1 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y el disolvente se evaporó. La purificación por cromatografía Biotage proporcionó 0,12 g de un material bruto que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa. CLEM (IQPA, M+H^{+}):
396,2.

Etapa 6

3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona

Una solución agitada de la 7-(4-fluorobencil)-1,7-dihidropiran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(2H)-ona (0,12 g, 0,30 mmol) en ácido acético (4 ml), THF (2 ml) y agua (1 ml) se calentó a 45ºC durante 16 h y a 100ºC durante 1 h más. La concentración y la purificación por HPLC prep. proporcionaron el compuesto del título en forma de polvo blanco (0,023 g, rendimiento del 24%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta; 9,87 (s, 1H), 8,84 (s, 1H), 7,85 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 7,32-7,34 (m, 2H), 7,15 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,72 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 5,57 (s, 2H), 3,80 (d, 2H, J = 7,0 Hz), 3,30 (d, 2H, J = 7,0 Hz). CLEM (IQPA, M+H^{+}): 312,1, EMAR calc. para C_{17}H_{15}N_{3}O_{2}F_{1} (M+H^{+}) 312,1148, encontrado 312,1158. HPLC: pureza del 98,3%.

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Ejemplo 3 3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona

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28

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Etapa 1

1-(4-Fluorobencil)-4-(3-hidroxiprop-1-in-1-il)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo

A una solución de 1-(4-fluorobencil)-4-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (1,50 g, 3,36 mmol) en DMF (4 ml) se le añadieron propargiloxitrimetilsilano (0,73 g, 5,72 mmol), cloruro de litio (0,214 g, 5,1 mmol), yoduro de cobre (0,028 g ml, 0,15 mmol), trietilamina (7 ml, 50,4 mmol) y diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (0,052 g, 0,074 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 20 min a 140ºC en un reactor de microondas (Personal Chemistry). El disolvente se evaporó y se añadieron 10 ml de acetato de etilo. Después de agitar durante 10 min, la mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró. La purificación por cromatografía ultrarrápida (Biotage) sobre gel de sílice (1:3, hexano/acetato de etilo) proporcionó el producto del título en forma de un aceite amarillo (0,46 g, rendimiento del 46%). ^{1}H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-D) \delta ppm 8,69 (s, 1 H) 7,36 (d, J = 3,28 Hz, 1 H) 7,06 -7,14 (m, 2 H) 6,98-7,06 (m, 2 H) 6,84 (d, J = 2,53 Hz, 1 H) 5,40 (s, 2 H) 4,67 (s, 2 H) 4,48 (c, J = 7,07 Hz, 2 H) 1,46 (t, J = 7,20 Hz, 3 H). CL-EM (IQPA, M+H^{+}): 353,1. HPLC: pureza del 96%.

Etapa 2

1-(4-Fluorobencil)-4-(3-hidroxipropil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo

A una solución de 1-(4-fluorobencil)-4-(3-hidroxiprop-1-in-1-il)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (0,46 g, 1,31 mmol) en MeOH (6 ml) se le añadió paladio, (al 10% en peso sobre carbono activado, 15 mg, 0,014 mmol). La mezcla resultante se agitó en un aparato Parr durante 4 h a temperatura ambiente en atmósfera de H_{2} a 413,685 kPa (60 psi). La mezcla se filtró y se concentró, proporcionando el producto del título en forma de un aceite amarillo (0,41 g, rendimiento del 88%). CL-EM (IQPA, M+H^{+}): 357,2. HPLC: pureza del 96%.

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Etapa 3

Ácido 1-(4-fluorobencil)-4-(3-hidroxipropil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxílico

A una solución de 1-(4-fluorobencil)-4-(3-hidroxipropil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxilato de etilo (0,41 g, 1,15 mmol) en MeOH (6 ml) se le añadió una solución de hidróxido sódico (92 mg, 2,30 mmol) en 1 ml de agua. La mezcla resultante se agitó durante 5 h a 60ºC. La mezcla se acidificó a pH = 6,5 con HCl 1 N y se concentró, proporcionando el producto del título en forma de un sólido pardo (358 mg, rendimiento del 95%). CL-EM (IQPA, M+H^{+}): 329,1. HPLC: pureza del 96%.

Etapa 4

1-(4-Fluorobencil)-4-(3-hidroxipropil)-N-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxamida

A una solución de ácido 1-(4-fluorobencil)-4-(3-hidroxipropil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxílico (358 mg, 1,1 mmol) en DMF (8 ml) se le añadieron trietilamina (333 mg, 3,3 mmol), HATU (627 mg, 1,65 mmol) y O-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-hidroxilamina. La mezcla resultante se agitó durante 2,5 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró. La purificación por cromatografía ultrarrápida (Biotage) sobre gel de sílice (acetato de etilo al 100%) proporcionó el producto del título en forma de un aceite pardo (149 mg, rendimiento del 32%). CL-EM (IQPA, M+H^{+}): 428,2. HPLC: pureza del 96%.

Etapa 5

3-(4-Fluorobencil)-7-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona

A una solución de 1-(4-fluorobencil)-4-(3-hidroxipropil)-N-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-1H-pirrolo[2,3-c]piridina-5-carboxamida (149 mg, 0,35 mmol) en THF (4 ml) se le añadieron PPh_{3} (110 mg, 0,42 mmol) y DIAD (85 mg, 0,42 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró. La purificación por cromatografía ultrarrápida (Biotage) sobre gel de sílice (acetato de etilo al 100%), proporcionó el producto del título en forma de un aceite pardo (18,5 mg, rendimiento del 13%). CL-EM (IQPA, M+H^{+}): 410,1. HPLC: pureza del 96%.

Etapa 6

3-(4-Fluorobencil)-7-hidroxi-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona

Se disolvió 3-(4-fluorobencil)-7-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona (18,53 mg, 0,045 mmol) en ácido acético, THF y agua (3,5 ml, 5:1:1). La mezcla resultante se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y se purificó por HPLC preparativa, proporcionando el compuesto del título en forma de un polvo blanco (9,0 mg, rendimiento del 61%). ^{1}H RMN (300 MHz, MeOH) \delta ppm 8,57 (s, 1 H) 7,60 (d, J = 3,20 Hz, 1 H) 7,11-7,20 (m, 2 H) 6,90-6,99 (m, 2 H) 6,72 (d, J = 3,01 Hz, 1 H) 5,44 (s, 2 H) 3,51 (t, J = 6,50 Hz, 2 H) 3,03 (t, J = 7,16 Hz, 2 H) 2,14-2,25 (m, 2 H). CL-EM (IQPA, M+H^{+}): 329,1. HPLC: pureza del 98%.

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Ejemplos 4-30

Etapa 1

9-[(Dimetilamino)metil]-7-(4-fluorobencil)piran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(7H)-ona

A una solución de enol lactona (1,00 g, 3,401 mmol) agitada con un agitador colocado en la parte superior en acetonitrilo (25 ml) se le añadió sal de Eschenmoser (0,64 g, 6,803 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 2 h. La solución se enfrió a temperatura ambiente y el producto sólido se filtró. Al filtrado se le añadió bicarbonato sódico saturado y la mezcla se extrajo con diclorometano (3 x 1000 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a presión reducida, dando el producto en forma de un sólido blanco puro (1,0 g, 84%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta, ppm: 9,10 (1H, s), 7,87 (1H, s), 7,68 (1H, d), 7,36 (1H, d), 7,34 (2H, m), 7,16 (2H, m), 5,62 (2H, s), 2,20 (6H, s). CLEM (IEN, M+1) 352.

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Procedimiento General A1

A una solución del N,N-dimetilaminometil triciclo apropiado (1,0 equiv., 0,197 M en diclorometano) se le añadió cloroformiato de etilo (1,0 equiv.). La mezcla se agitó durante 1 h y después se añadió el alcohol apropiado (4,0 equiv., 1 mM en DMF anhidra) seguido de diisopropiletilamina (5,0 equiv.). La mezcla se puso en atmósfera de nitrógeno y se calentó a 40ºC en un baño de aceite. Después de agitar durante 48 h, los volátiles se retiraron al vacío (aprox. 2 torr (0,27 kPa)), dando un aceite. El material bruto se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera. La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío. El residuo se agitó en éter, se filtró y se secó al vacío, proporcionando el producto deseado.

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Procedimiento General A2

A una solución del N,N-dimetilaminometil enol lactona aromática apropiada (1,0 equiv.) en diclorometano (6 ml/mmol de enol lactona) se le añadieron diisopropiletilamina (0,0 equiv. para la base libre, 1,0 equiv. para la sal HI o HCl de N,N-dimetilaminometil enol lactona aromática) y cloroformiato de etilo (1,0 equiv.) a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante diez minutos, a la solución de reacción se le añadieron DMF (4 ml/mmol de enol lactona), diisopropiletilamina (1,0 equiv.) y la amina (1,0 equiv.) a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante una hora más, a la mezcla de reacción se le añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y se extrajo con diclorometano (2 x). Los extractos se secaron sobre sulfato sódico, la fase orgánica se concentró al vacío y el producto se purificó opcionalmente por HPLC de fase inversa (acetonitrilo:agua, ácido acético al 0,1%), proporcionando el compuesto deseado.

Etapa 2

7-(4-Fluorobencil)-4-oxo-4,7-dihidropiran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridina-9-carbaldehído

A una solución de la enol lactona (2,0 g, 6,803 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió sal de Eschenmoser (2,5 g, 13,605 mmol) y la mezcla se calentó en un microondas a 130ºC durante 2 h. Se añadió más sal de Eschenmoser (2,5 g, 13,605 mmol) y la mezcla se calentó de nuevo en el microondas a 130ºC durante 2 h. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo resultante se suspendió en acetona:agua (1:1) y se filtró, dando el aldehído en forma de un sólido pardo pálido puro (1,41 g, 64%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta 9,98 (1H, s), 9,26 (1H, s), 8,93 (1H, s), 8,12 (1H, d), 7,75 (1H, d), 7,47 (2H, m), 7,21 (1H, m), 5,77 (2H, s). CL/EM (IEN, M+1) 323.

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Procedimiento General A3

A una solución del aldehído apropiado (1,0 equiv.) en diclorometano (0,2 M) se le añadió la amina apropiada (1,0 equiv.). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió triacetoxiborohidruro sódico (3,0 equiv.). La mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 18-24 h más, tiempo después del cual el disolvente se retiró al vacío. El residuo restante se disolvió en DMSO y se purificó por HPLC prep. de fase inversa (acetonitrilo:agua, ácido acético al 0,1%), proporcionando los compuestos deseados.

Etapa 3

Cloruro de 7-(4-fluorobencil)-4-oxo-4,7-dihidropiran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridina-9-sulfonilo

A una solución de la 7-(4-fluorobencil)piran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridin-4(7H)-ona (1,0 equiv.) en ácido clorosulfónico (60 equiv., 0,55 M) se le añadió cloruro de tionilo (30 equiv.). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y se determinó que la reacción se había completado por análisis HPLC-EM. La mezcla se añadió gota a gota a agua enfriada con hielo y la suspensión se filtró, proporcionando el cloruro de sulfonilo en forma de un sólido blanco puro con un rendimiento del 86%. ^{1}H RMN (MeOH-d_{4}) \delta 9,31 (1H, s), 8,95 (1H, s), 7,79 (1H, d), 7,74 (1H, d), 7,47 (2H, m), 7,15 (2H, m), 5,80 (2H, s). CL/EM (IEN, M+1) 393.

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Procedimiento General A5

A una solución del cloruro de sulfonilo apropiado (1,0 equiv., 0,13 M en THF) y diisopropiletilamina (DIEA, 1,1 equiv.) se le añadió la amina (1,0 equiv.). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente o hasta que se determinó que la reacción se había completado por análisis HPLC-EM. Los volátiles se retiraron al vacío y el material bruto se diluyó con diclorometano y se lavó con bicarbonato sódico saturado. La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío. El material bruto se purificó por HPLC de fase inversa (acetonitrilo:agua, AcOH al 0,1%), proporcionando el compuesto deseado.

Etapa 4

Ácido 7-(4-fluorobencil)-4-oxo-4,7-dihidropiran[3,4-b]pirrolo[3,2-d]piridina-9-carboxílico

A una solución en agitación del aldehído (1,30 g, 4,034 mmol) en dioxano:agua (3:1, 40 ml) se le añadió clorito sódico (0,547 g, 6,050 mmol) seguido de ácido sulfámico (2,23 g, 22,99 mmol). La solución se agitó durante varias horas hasta que la CL/EM mostró que la reacción se había completado. La mayor parte del dioxano se retiró a presión reducida y la suspensión resultante en agua se filtró y el filtrado se lavó con acetona, proporcionando el ácido en forma de un sólido blanquecino (1,20 g, 88%). ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}) \delta 9,20 (1H, s), 8,69 (1H, s), 8,38 (1H, d), 7,71 (1H, d), 7,44 (1H, m), 7,18 (2H, m), 5,72 (2H, s). CL/EM (M+1) 339.

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Procedimiento General A6

A una solución del ácido carboxílico apropiado (1,0 equiv., 0,07 M en DMF) y 4-metilmorfolina (NMM, 3,2 equiv.) se le añadió 2-cloro-4,6-dimetoxi-1,3,5-triazina (CDMT, 1,2 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y se añadió la amina apropiada (2,0 equiv.). La mezcla resultante se dejó en agitación a temperatura ambiente durante varias horas hasta que se determinó que la reacción se había completado por análisis HPLC-EM. Los volátiles se retiraron al vacío y el material bruto se diluyó con acetato de etilo y se lavó con bicarbonato sódico saturado. La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío. El material bruto se purificó por HPLC de fase inversa (acetonitrilo:agua, AcOH al 0,1%), proporcionando los compuestos deseados.

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Procedimiento General B1

Una solución de la enol lactona (1,0 equiv.) en etanol (27 ml/mmol de enol lactona) e hidroxilamina (al 50% en peso en agua, 0,68 ml/mmol de enol lactona) se calentó a reflujo durante 3 h o hasta que la CL/EM mostró la conversión completa en la N-hidroxipiridona deseada. La solución resultante se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (acetonitrilo: agua, AcOH al 0,1%), proporcionando el compuesto deseado.

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Ejemplo 60 Ensayo de Proximidad por Escintilación de la Transferencia de Cadena por la Integrasa

Oligonucleótidos: Se sintetizaron el oligonucleótido Nº 1 -5'-(biotina)CCCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATC
TCTAGCA-3' (SEC ID Nº 1) y oligonucleótido Nº 2 -5'-ACTGCTAGAGATTTTCCACACTGACTAAAAG-3' (SEC ID Nº 2), en TriLink Bio Technologies, Inc. (San Diego, CA). El producto hibridado representa ADNds viral preprocesado obtenido de la secuencia LTR U5 del genoma viral. Se preparó un control de ADNds para ensayar las interacciones no específicas usando un derivado 3' didesoxi del oligonucleótido Nº 1 hibridado con el oligonucleótido Nº 2. El saliente CA en el extremo 5' de la cadena no biotinilada del ADNds se creó artificialmente usando un oligonucleótido de ADN complementario acortado en 2 pares de bases. Esta configuración elimina la etapa de procesado en 3' necesaria de la enzima integrasa antes del mecanismo de transferencia de cadena.

Se preparó el ADNds huésped como un producto no marcado y marcado con [^{3}H]-timidina a partir del oligonucleótido Nº 3 hibridado - 5-AAAAAATGACCAAGGGCTAATTCACT-3' (SEC ID Nº 3) y el oligonucleótido Nº 4 - 5'-AAAAAAAGTGAATTAGCCCTTGGTCA-3' (SEC ID Nº 4), ambos sintetizados por TriLink BioTechnologies, Inc. (San Diego, CA). El producto hibridado tenía extremos 3' salientes de poli(dA). El ADN huésped se radiomarcó a petición del cliente por PerkinElmer Life Sciences Inc. (Boston, MA) usando un procedimiento enzimático con una proporción 12/1 de [metil-^{3}H]dTTP/ADNds frío para producir un ADNds con un extremo 5' romo con una actividad específica de > 900 Ci/mmol. El producto radiomarcado se purificó usando un cartucho NENSORB y se almacenó en una solución acuosa estabilizada (PerkinElmer). El producto radiomarcado final tenía seis nucleótidos [^{3}H]-timidina en ambos extremos 5' del ADNds huésped.

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Reactivos: Se adquirieron perlas SPA de poliviniltolueno (PVT) revestidas con estreptavidina de Amersham Biosciences (Piscataway, NJ). Se adquirió cloruro de cesio de Shelton Scientific, Inc. (Shelton, CT). Se adquirieron placas de 96 pocillos, de superficie de no unión, de fondo plano, de poliestireno, blancas de Corning. Todos los demás componentes de tampón se adquirieron de Sigma (St. Louis, MO) salvo que se indique otra cosa.

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Construcción de la Enzima: Se construyó la secuencia de la integrasa de VIH-1 (SF1) de tipo silvestre de longitud completa (aminoácidos 1-288) en un vector pET24a (Novagen, Madison, WI). La construcción se confirmó a través de secuenciación de ADN.

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Purificación de la Enzima: Se expresó la integrasa de VIH de tipo silvestre de longitud completa en células de E. coli BL21 (DE3) y se indujeron con isopropil-1 tio-\beta-D-galactopiranósido (IPTG) 1 mM cuando las células alcanzaron una densidad óptica entre 0,8-1,0 a 600 nm. Las células se lisaron por microfluidización en HEPES 50 mM pH 7,0, NaCl 75 mM, DTT 5 mM, 4-(2-Aminoetil)bencenosulfonilfluoruro HCl (AEBSF) 1 mM. Después se centrifugó el lisado 20 minutos a 11k rpm en un rotor GSA en Sorvall RC-5B a 4ºC. El sobrenadante se desechó y el sedimento se resuspendió en HEPES 50 mM pH 7,0, NaCl 750 mM, DTT 5 mM, AEBSF 1 mM y se homogeneizó en un homogeneizador Dounce de 40 ml durante 20 minutos en hielo. Después se centrifugó el homogeneizado 20 minutos a 11k rpm en un rotor SS34 en Sorvall RC-5B a 4ºC. El sobrenadante se desechó y el sedimento se resuspendió en HEPES 50 mM, pH 7,0, NaCl 750 mM, CHAPS 25 mM, DTT 5 mM, AEBSF 1 mM. Después se centrifugó la preparación 20 minutos a 11k rpm en un rotor SS34 en Sorvall RC-5B a 4ºC.

Después se diluyó el sobrenadante 1:1 con HEPES 50 mM pH 7,0, CHAPS 25 mM, DTT 1 mM, AEBSF 1 mM y se cargó en una columna de Q-Sepharose pre-equilibrada con HEPES 50 mM, pH 7,0, NaCl 375 mM, CHAPS 25 mM, DTT 1 mM, AEBSF 1 mM. Se recogió el pico que fluyó a través de la columna y se diluyó NaCl a 0,1 M con HEPES 50 mM, pH 7,0, CHAPS 25 mM, DTT 1 mM, AEBSF 0,5 mM y se cargó en una columna de SP-Sepharose pre-equilibrada con HEPES 50 mM, pH 7,0, NaCl 100 mM, CHAPS 25 mM, DTT 1 mM, AEBSF 0,5 mM. Después de lavar la columna con el tampón de equilibrado, se procesó un gradiente de NaCl de 100 a 400 mM. La integrasa eluida se concentró y se procesó en una columna de difusión de gel S-300 usando HEPES 50 mM, pH 7,0, NaCl 500 mM, CHAPS 25 mM, DTT 1 mM, AEBSF 0,5 mM. El pico de esta columna se concentró a 0,76 mg/ml y se almacenó a -70ºC y después se usó para el análisis de transferencia de cadena. Todas las columnas se procesaron en una habitación fría a 4ºC.

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Preparación de Perlas de ADN Viral: Se suspendieron perlas SPA revestidas con estreptavidina a 20 mg/ml en ácido 3-morfolinopropanosulfónico (MOPS) 25 mM (pH 7,2) y NaN_{3} al 1,0%. Se unió ADN viral biotinilado a las perlas SPA hidratadas en un proceso discontinuo combinando 25 pmoles de ADNds a 1 mg de perlas SPA suspendidas (10 \mul de ADN viral 50 \muM a 1 ml de perlas SPA de 20 mg/ml). La mezcla se incubó a 22ºC durante un mínimo de 20 minutos con mezcla ocasional seguida por centrifugación a 2500 rpm durante 10 minutos. Sin embargo, la velocidad de centrifugación y el tiempo pueden variar dependiendo de la centrífuga particular y las condiciones. El sobrenadante se retiró y las perlas se suspendieron a 20 mg/ml en MOPS 25 mM (pH 7,2) y NaN_{3} al 1,0%. Las perlas de ADN viral fueron estables durante varias semanas cuando se almacenaron a 4ºC. Se preparó ADN viral didesoxi de un modo idéntico para producir perlas de ADN viral didesoxi de control.

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Preparación del Complejo Integrasa-ADN: Se preparó tampón de ensayo como una solución madre 10x de MOPS 250 mM (pH 7,2), NaCl 500 mM, 3-[(3-colamidopropil)dimetilamonio]-1-propanosulfonato (CHAPS) 50 mM, (octilfenoxi)polietoxietanol (NP40) al 0,5% (IGEPAL-CA) y NaN_{3} al 0,05%. Las perlas de ADN viral se diluyeron a 2,67 mg/ml en tampón de ensayo 1x más MgCl_{2} 3 mM, DMSO al 1%, y DTT reciente 10 mM. La integrasa (IN) formó pre-complejos con las perlas de ADN viral en un proceso discontinuo (complejo IN/ADN viral/perla) combinando perlas de ADN viral diluidas con la integrasa a una concentración de 385 nM seguido por un tiempo de incubación mínimo de 20 minutos a 22ºC con agitación suave. La muestra se mantuvo a 22ºC hasta que se transfirió a los pocillos de ensayo.

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Preparación del ADN Huésped: Se preparó ADN huésped a 200 nM como una mezcla de ADN huésped no marcado y marcado con [^{3}H]T diluido en tampón de ensayo 1x más MgCl_{2} 8,5 mM y DTT 15 mM. Las concentraciones usadas fueron ADN huésped marcado con [^{3}H]T 4 nM y ADN huésped no marcado 196 nM. Esta proporción genera una señal de SPA de 2000-3000 CPM en ausencia de moduladores tales como inhibidores.

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Ensayo de Proximidad por Escintilación de la Transferencia de Cadena: La reacción de transferencia de cadena se realizó en placas de microtitulación de 96 pocillos con un volumen de reacción enzimática final de 100 \mul. Se añadieron diez microlitros de compuestos o reactivos de ensayo diluidos en DMSO al 10% a los pocillos de ensayo seguido por la adición de 65 \mul del complejo IN/ADN viral/perla y se mezclaron en un agitador de placa. Después se añadieron 25 \mul de ADN huésped a los pocillos de ensayo y se mezclaron en un agitador de placa. La reacción de transferencia de cadena se inició transfiriendo las placas de ensayo a calentadores de bloque seco de 37ºC. Se usó un tiempo de incubación de 50 minutos, que demostró estar en el intervalo lineal de la reacción enzimática. Las concentraciones finales de integrasa y ADN huésped en los pocillos de ensayo fueron 246 nM y 50 nM, respectivamente.

La reacción de transferencia de cadena de la integrasa se terminó añadiendo 70 \mul de tampón de detención (EDTA 150 mM, NaOH 90 mM y CsCl 6 M) a los pocillos. Los componentes del tampón de detención funcionan terminando la actividad enzimática (EDTA), disociando los complejos integrasa/ADN además de separando las cadenas de ADN no integradas (NaOH), y haciendo flotar las perlas SPA en la superficie de los pocillos para que estén en un intervalo cercano a los detectores de PMT del contador de escintilación basado en placa TopCount® (PerkinElmer Life Sciences Inc. (Boston, MA)). Después de la adición de tampón de detención, las placas se mezclaron en un agitador de placa, se precintaron con cinta transparente, y se dejaron incubar un mínimo de 60 minutos a 22ºC. La señal de ensayo se midió usando un contador de escintilación basado en placa TopCount® con ajustes óptimos para perlas SPA de [^{3}H]-PVT. El programa TopCount® incorporaba una curva de normalización de inactivación para normalizar los datos para la absorción de color de los compuestos. Los valores de los datos para los recuentos corregidos por inactivación por minuto (QCPM) se usaron para cuantificar la actividad integrasa. El tiempo de recuento fue
2 min/pocillo.

Las perlas de ADN viral didesoxi se usaron para optimizar la reacción de transferencia de cadena de la integrasa. La terminación didesoxi de la secuencia de ADNds viral evitó la integración productiva de ADN viral en el ADN huésped por la integrasa. Por tanto, la señal de ensayo en presencia de ADN viral didesoxi fue una medida de interacciones no específicas. Los parámetros de ensayo se optimizaron para que las reacciones con perlas de ADN viral didesoxi dieran una señal de ensayo que coincidiera cercanamente con la medida de fondo verdadera del ensayo. La medida de fondo verdadera del ensayo se definió como una reacción con todos los componentes de ensayo (ADN viral y ADN-[^{3}H] huésped) en ausencia de integrasa.

Determinación de la Actividad del Compuesto: El porcentaje de inhibición del compuesto se calculó usando la ecuación (1-((QCPM muestra - QCPM min)/(QCPM max - QCPM min)))^{*}100. El valor min es la señal de ensayo en presencia de un inhibidor conocido a una concentración 100 veces superior que la CI_{50} para ese compuesto. La señal min se aproxima a la medida de fondo verdadera para el ensayo. El valor max es la señal de ensayo obtenida para la actividad mediada por la integrasa en ausencia de compuesto (es decir, con DMSO en lugar de compuesto en
DMSO).

Los compuestos se prepararon en DMSO al 100% a concentraciones 100 veces superiores que las deseadas para ensayarlos en ensayos (generalmente 5 mM), seguido por dilución de los compuestos en DMSO al 100% para generar una curva de titulación de 11 puntos con intervalos de dilución semilogarítmicos. La muestra de compuesto se diluyó adicionalmente 10 veces con agua y se transfirió a los pocillos de ensayo. El porcentaje de inhibición para un compuesto inhibidor se determinó como anteriormente aplicando los valores a una ecuación de respuesta a dosis sigmoidea (pendiente variable) de regresión no lineal usando un software de ajuste de curva GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA). Las curvas de concentración se ensayaron por duplicado y después se repitieron en un experimento independiente.

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Ejemplo 61 Ensayo de Protección de Células de VIH-1

Las actividades antivirales de compuestos moduladores potenciales (compuestos de ensayo) se determinaron en ensayos de protección de células de VIH-1 usando la cepa RF de VIH-1, células CEM-SS, y el procedimiento de reducción de colorante XTT (Weislow, O.S. y cols., J. Natl. Cancer Inst. 81: 577-586 (1989)). Las células objeto se infectaron con virus RF VIH-1 a una moi de 0,025 a 0,819 o se infectaron de forma simulada sólo con medio y se añadieron a 2 x 10^{4} células por pocillo en placas de 96 pocillos que contenían diluciones semi-log de compuestos de ensayo. Seis días después, se añadieron 50 \mul de solución XTT (1 mg/ml de XTT tetrazolio y metosulfato de fenazina 0,02 nM) a los pocillos y se reincubaron las placas durante 4 horas. La viabilidad, determinada por la cantidad de XTT formazán producido, se cuantificó espectrofotométricamente por absorbancia a 450 nm.

Los datos de los ensayos CPE se expresaron como el porcentaje de formazán producido en células tratadas con compuesto en comparación con el formazán producido en pocillos de células no infectadas, libres de compuesto. La concentración eficaz al cincuenta por ciento (CE_{50}) se calculó como la concentración de compuesto que producía un aumento en el porcentaje de la producción de formazán en células infectadas, tratadas con compuesto al 50% del producido por células no infectadas, libres de compuesto. La concentración de citotoxicidad al 50% (CC_{50}) se calculó como la concentración de compuesto que disminuía el porcentaje de formazán producido en células no infectadas, tratadas con compuesto al 50% del que se producía en células no infectadas, libres de compuesto. El índice terapéutico se calculó dividiendo la citotoxicidad (CC_{50}) por la actividad antiviral (CE_{50}).

Ejemplo 62 Datos antivirales

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52

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I)

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en la que:

R^{2} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{8};

R^{6} es hidrógeno;

t es un número entero de 1 a 3;

una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que R^{5} no es hidrógeno cuando Z es -(CH_{2})-, R^{1} es 2,4-difluorobencilo, y R^{2}, R^{3} y R^{6} son hidrógeno

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que:

R^{2} es hidrógeno;

cada R^{12a}, R^{12b} y R^{12c}, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente entre hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{8}; y

cada R^{13} se selecciona independientemente entre halo, alquilo C_{1}-C_{8}, -(CR^{7}R^{8})_{t}OR^{7}, -NR^{12a}R^{12b} y -CF_{3}.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R^{1} es alquilo C_{1}-C_{8} sustituido con arilo C_{6}-C_{14}, donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} está opcionalmente sustituido con al menos un halo.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que R^{3} es hidrógeno.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que R^{3} es -(CR^{7}R^{8})_{t}NR^{9}R^{10}.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que R^{3} es heteroalquilo C_{1}-C_{8} opcionalmente sustituido con R^{11}.

7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 6, en el que R^{1} es alquilo C_{1}-C_{8} sustituido con arilo C_{6}-C_{14}, donde dicho grupo arilo C_{6}-C_{14} está opcionalmente sustituido con al menos un flúor.

8. Un compuesto de fórmula (II),

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en la que:

X es -S(O)_{2}-, -CH_{2}- o -C(O)-;

Z es -(CR^{4}R^{4})_{n}-. -C(R^{4})=C(R^{4})-, -C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-, -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})- o -(CR^{4}R^{4})_{n}-C(R^{4})=C(R^{4})-(CR^{4}R^{4})_{n}-;

cada R^{12a}, R^{12b} y R^{12c}, que pueden ser iguales o diferentes, se selecciona independientemente entre hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{8}, y oxo; o

una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

9. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que Z es -(CH=CH)- y R^{5} es hidrógeno.

10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado entre 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7,8,9-tetrahidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona; 1-[(dimetilamino)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metil}-L-prolinamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(3-oxopiperazin-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-metoxietoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-(3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-ilmetil)-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[metil(pentil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metil}-D-prolinamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(1-oxo-2,8-diazaespiro[4.5]dec-8-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[ciclohexil(etil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[4-(2-oxo-2-pirrolidin-1-iletil)piperazin-1-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[metil(2-piridin-2-iletil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; (3R)-1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metil}-N,N-dimetilpirrolidina-3-carboxamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({4-hidroxi-4-[(2-oxopirrolidin-1-il)metil]piperidin-1-il}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(5-oxo-1,4-diazepan-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]sulfonil}-L-prolinamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-N-[2-(1H-indol-3-il)etil]-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(3-oxopiperazin-1-il)sulfonil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-N,N-dimetil-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(2,2,2-trifluoroetil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; N,3-bis(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-sulfonamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-(pirrolidin-1-ilcarbonil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-[(4-acetilpiperazin-1-il)carbonil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(2-pirazin-2-iletil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-carboxamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(piridin-2-ilmetil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-carboxamida; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-N-(2,2,2-trifluoroetil)-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-carboxamida; 1-[(4-etilpiperazin-1-il)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-({[(2S)-2,3-dihidroxipropil]oxi}metil)-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 4-({[3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-6-oxo-6,7-dihidro-3H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-1-il]metoxi}metil)piperidina-1-carboxilato de terc-butilo; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-piridin-2-iletoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[2-(ciclohexiloxi)etoxi]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-[({[(4R)-2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il]metil}amino)metil]-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(2-metoxietoxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(1R)-1-feniletoxi]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[1-(hidroximetil)ciclopentil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(propilamino)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(3-metilbencil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[(5-metilpirazin-2-il)metil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({[4-(trifluorometil)bencil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(piridin-2-ilmetil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-7,8,9,10-tetrahidropirrolo[3',2':4,5]pirido[2,3-c]azepin-6(3H)-ona; 8-butil-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-8-metil-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona, 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(2-hidroxietil)(propil)amino]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[2-(hidroximetil)piperidin-1-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[[2-(dietilamino)etil](etil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[etil(4-metilbencil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[4-(etilsulfonil)piperazin-1-il]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-[(4-hidroxipiperidin-1-il)metil]-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 1-{[bencil(metil)amino]metil}-3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(7R)-7-hidroxihexahidropirrolo[1,2-a]pirazin-2(1 H)-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[(3aR,7aR)-3-oxooctahidro-5H-pirrolo[3,4-c]piridin-5-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-(morfolin-4-ilmetil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-{[4-(2-morfolin-4-iletil)piperazin-1-il]metil}-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; y 3-(4-fluorobencil)-7-hidroxi-1-({metil[(1-fenil-1H-pirazol-4-il)metil]amino}metil)-3,7-dihidro-6H-pirrolo[2,3-c]-1,7-naftiridin-6-ona; o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo

11. Una composición farmacéutica, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

12. Uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) o complejo relacionado con SIDA en un mamífero infectado con VIH.