ES2285147T3 - Tratamiento de muestras de tejido. - Google Patents
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Abstract
Dispositivo para el tratamiento de muestras de tejido (12) por inmersión en un líquido, dispositivo que comprende una primera estructura (1) que presenta una cámara (3) para el líquido, y una segunda estructura (4) que comprende unos medios de sujeción (7) para sujetar las muestras (12) de forma que se puedan soltar, pudiéndose mover la primera estructura respecto de la segunda en una dirección que tiene un componente vertical entre una primera posición en la que el dispositivo de sujeción (7) se encuentra relativamente cerca de la cámara (3) y en la que la segunda estructura cierra la parte superior de la cámara (3) para permitir la inmersión de las muestras (12) en el líquido, que queda protegido del entorno, y una segunda posición en la que el dispositivo de sujeción (7) se encuentra relativamente lejos de la cámara (3) para permitir depositar las muestras (12) en el dispositivo de sujeción (7) o quitarlas del mismo, caracterizado porque la cámara tiene forma de cuba anular; eldispositivo de sujeción (7) sujeta las muestras (12) de forma que éstas cuelgan del dispositivo de sujeción en posiciones espaciadas angularmente en torno a un círculo; y la segunda estructura comprende una tapa (6) que actúa para cerrar la cámara (3) en la primera posición y cuya parte inferior lleva el dispositivo de sujeción (7).
Description
Tratamiento de muestras de tejido.
La presente invención se refiere al tratamiento
de muestras de tejido, particularmente (aunque no de forma
exclusiva) antes de la representación óptica de las muestras por
tomografía de proyección óptica (OPT) así como a los usos de la
tomografía de proyección óptica y dispositivos.
Las muestras de tejido su suelen tratar por
inmersión en uno o más líquidos, antes de la representación óptica
de las mismas en dispositivos de OPT, y la invención se ha
concebido como una forma de facilitar este tratamiento previo de
muestras.
De acuerdo con la invención, se presenta un
dispositivo para el tratamiento de muestras de tejido por inmersión
en un líquido, dispositivo que comprende una primera estructura que
presenta una cámara para el líquido, y una segunda estructura que
comprende unos medios de sujeción para sujetar las muestras de
forma que se puedan soltar, pudiéndose mover la primera estructura
respecto de la segunda en una dirección que tiene un componente
vertical entre una primera posición en la que el dispositivo de
sujeción se encuentra relativamente cerca de la cámara y en la que
la segunda estructura cierra la parte superior de la cámara para
permitir la inmersión de las muestras en el líquido, que queda
protegido del entorno, y una segunda posición en la que el
dispositivo de sujeción se encuentra relativamente lejos de la
cámara para permitir depositar las muestras en el dispositivo de
sujeción o quitarlas del mismo, caracterizado porque la cámara
tiene forma de cuba anular; el dispositivo de sujeción sujeta las
muestras de forma que éstas cuelgan del dispositivo de sujeción en
posiciones espaciadas angularmente en torno a un círculo; y la
segunda estructura comprende una tapa que actúa para cerrar la
cámara en la primera posición y cuya parte inferior lleva el
dispositivo de sujeción.
Preferentemente, la primera estructura es
estacionaria y la segunda estructura se puede mover verticalmente
respecto de la primera estructura.
El dispositivo de sujeción puede comprender unos
imanes para permitir que las muestras, que van provistas cada una
de ellas de un bastidor metálico, se puedan sujetar en la segunda
estructura, de forma que se puedan quitar, por medio de atracción
magnética.
La tapa de cierre contribuye a evitar la
evaporación de los líquidos volátiles del tratamiento.
La segunda estructura puede moverse, girando en
torno a un eje vertical central, que permite depositar las muestras
y quitarlas de la segunda estructura en una posición dada al lado
del dispositivo, ya sea con un brazo robótico o con la mano del
usuario.
El dispositivo puede tener la posibilidad de
cambiar el líquido cuando se encuentra en la primera posición,
permitiendo tratar las muestras con líquidos diferentes en una
sucesión de etapas, manteniendo la cámara cerrada. Por ejemplo, el
dispositivo puede tener una bomba para llenar y vaciar la cámara
con una sucesión de líquidos dados que, en el caso de muestras de
tejido, pueden actuar para lavar o tratar de alguna otra forma las
muestras antes de proceder a la representación óptica de las
muestras por medio de tomografía de proyección óptica.
Las muestras se pueden tratar con líquidos
diferentes en una pluralidad de etapas, que se realizan
preferentemente vaciando y rellenando sucesivamente la cámara con
los diferentes líquidos, mientras las muestras permanecen en la
cámara y la cámara permanece cerrada y protegida del medio
ambiente.
Según otro aspecto de la presente invención, se
presenta un método para realizar uno cualquiera o más de los
análisis o procedimientos relacionados a continuación, que
comprende la utilización de un método o dispositivo con cualquiera
de los aspectos indicados anteriormente.
Según la presente invención, se pueden preparar
muestras que se utilizan en la presente invención, en la forma
descrita en las solicitudes de patente anteriores y/o utilizando
técnicas histológicas y patológicas convencionales y procedimientos
bien conocidos para todo experto en la materia.
Por ejemplo, hibridación in situ
(particularmente útil para detectar ARN): Hammond K.L., Hanston
I.M, Brown A.G, Lettice L.A, Hill R.E.: "Mammalian and
Drosophila dachsund genes are related to the Ski
proto-oncogene and are expressed in eye and
limb". Mech Dev. 1998 Jun; 74 (1-2):
121-31.
Inmunohistoquímica (particularmente útil para
detectar proteínas y otras moléculas): Sharpe J, Ahlgreen V, Perry
P, Hill B, Ross A, Hecksher-Sorensen J, Baldock R,
Davidson D. "Optical projection tomography as a tool for 3D
microscopy and gene expression studies" Science 19 April 2002;
296 (5567):
541-5.
541-5.
Se podrá observar que es posible realizar
modificaciones en la invención sin apartarse del ámbito de la
misma.
La invención se describirá ahora con más detalle
a modo de ejemplo, con referencia a los dibujos, donde:
La figura 1 es una vista isométrica de un
dispositivo según la invención, que se encuentra abierto;
La figura 2 es una vista isométrica del
dispositivo que se encuentra cerrado.
La figura 3 es una vista fragmentaria, a escala
ampliada, de parte del dispositivo que se encuentra abierto, donde
se pueden ver las muestras contenidas en el dispositivo.
La figura 4 es una vista en sección transversal
del dispositivo.
La figura 5 muestra el dispositivo en
combinación con un brazo robótico.
La figura 6 es una vista ampliada de parte de la
figura 5 y,
La figura 7 muestra el brazo robótico colocando
una muestra sobre la plataforma giratoria de un escáner OPT.
El dispositivo comprende una estructura fija
(1), que tiene una caja exterior cilíndrica (2) en cuya parte
superior se coloca una cuba angular (3), abierta por arriba.
Montada en la estructura fija se encuentra una estructura móvil (4)
que tiene un husillo o eje central (5), en cuya parte superior se
monta una tapa parecida a un disco (6), cuyo lado inferior lleva
cierto número de imanes cilíndricos (7) espaciados angularmente y
que cuelgan hacia abajo. El eje o husillo (5) está montado de
forma giratoria en la primera estructura para la rotación de la
estructura móvil alrededor de un eje vertical central, designado
con (8) en la figu-
ra 4.
ra 4.
Asimismo, el eje o husillo (5) puede realizar un
movimiento de traslación vertical respecto de la estructura fija
(1) a lo largo del eje vertical (8).
Dentro de la caja (2) se encuentran unos motores
y cajas de engranajes para accionar la estructura (4) y hacerla
realizar un movimiento de rotación y de traslación tal como se
indica con el número (9) en la figura 4. La cuba (3) puede llenarse
de líquidos y la estructura (1) comprende contenedores para guardar
estos líquidos y bombas para llenar y vaciar la cuba, tal como se
indica con el número (10) en la figura 4.
Los imanes (7) se utilizan para sujetar, de
forma que se puedan soltar, muestras de tejido (12), cada una de
las cuales ha sido preparada con un bastidor metálico (13) en un
extremo de la muestra. Esto hace que el bastidor metálico (13)
cuelgue de uno de los imanes (7), con la muestra (12) colgando
hacia abajo del bastidor (13). Si el dispositivo se encuentra en
posición abierta (figura 1), los imanes (7) se elevan por encima de
la parte superior de la cuba (3), de modo que las muestras (12) se
pueden sujetar a los imanes (7) o soltarse de los mismos. Cuando el
dispositivo se encuentra en posición cerrada (figura 2), la tapa
(6) se acopla a la parte superior de la caja (2) y las muestras
(12) se sumergen en un líquido (14) que se encuentra en la cuba
(3).
El brazo robótico (15) mostrado en las figuras 6
y 7 se utiliza para introducir muestras no tratadas dentro del
dispositivo y para transferir muestras tratadas desde el
dispositivo hasta la plataforma giratoria (16) de un escáner OPT,
donde se procede a la representación óptica de las muestras.
El brazo robótico (15) se utiliza en la práctica
para depositar muestras en el dispositivo, y cada muestra se
sujeta al extremo inferior de un imán correspondiente (7) debido a
la atracción magnética existente entre el imán (7) y el bastidor
metálico (13) en un extremo de la muestra (12), encontrándose la
estructura móvil (4) en posición abierta e indexada en sentido
rotacional al introducirse las muestras. Una vez depositadas las
muestras, la estructura móvil se lleva a su posición inferior o
cerrada, sumergiendo de este modo las muestras (12) en el líquido
(14) que ha sido bombeado al interior de la cuba (3). En esta
posición cerrada, la tapa (6) se acopla al borde superior de la
caja exterior (2) de forma que el líquido (14) está cerrado al
aire, permitiendo de éste modo la utilización de un líquido
volátil, a diferencia de los dispositivos conocidos, que utilizan
cintas transportadoras para transferir muestras a través de un
líquido.
Si hace falta tratar las muestras con una
sucesión de líquidos, el primer líquido se saca de la cuba (3) y se
bombea en su interior un segundo líquido, sin necesidad de abrir la
cuba (3) al exterior. Además, la sujeción de los bastidores
metálicos (13) a los imanes (7) mantiene las muestras (12) en su
posición colgada de modo que las muestras no están en contacto con
la parte inferior de la cuba (3), circunstancia que podría
dañarlas.
Se puede realizar de este modo cualquier número
de etapas de tratamiento, cambiándose el líquido sin necesidad de
mover las muestras y utilizando únicamente un pequeño volumen de
cada líquido de tratamiento.
Después del tratamiento de las muestras (12), la
estructura móvil (4) se lleva hasta su posición superior y las
muestras tratadas (12) se llevan entonces a la plataforma giratoria
(16) utilizando para ello el brazo robótico (15), estando la
estructura (4) indexada en rotación para permitir que el brazo
robótico (15) descargue cada muestra (12) sucesivamente y traslade
la muestra tratada (5) a la plataforma giratoria (16).
Como ejemplos de líquidos para el tratamiento de
las muestras se pueden mencionar los fijadores (como
paraformaldehído o formalina), alcoholes (en particular metanol y
etanol) y disolventes orgánicos para aclarar las muestras (en
particular bencil alcohol y bencil benzoato).
Se podrá observar que es posible aportar
modificaciones a la invención sin apartarse del ámbito de la
misma.
Claims (5)
1. Dispositivo para el tratamiento de muestras
de tejido (12) por inmersión en un líquido, dispositivo que
comprende una primera estructura (1) que presenta una cámara (3)
para el liquido, y una segunda estructura (4) que comprende unos
medios de sujeción (7) para sujetar las muestras (12) de forma que
se puedan soltar, pudiéndose mover la primera estructura respecto
de la segunda en una dirección que tiene un componente vertical
entre una primera posición en la que el dispositivo de sujeción (7)
se encuentra relativamente cerca de la cámara (3) y en la que la
segunda estructura cierra la parte superior de la cámara (3) para
permitir la inmersión de las muestras (12) en el líquido, que
queda protegido del entorno, y una segunda posición en la que el
dispositivo de sujeción (7) se encuentra relativamente lejos de la
cámara (3) para permitir depositar las muestras (12) en el
dispositivo de sujeción (7) o quitarlas del mismo,
caracterizado porque la cámara tiene forma de cuba anular;
el dispositivo de sujeción (7) sujeta las muestras (12) de forma
que éstas cuelgan del dispositivo de sujeción en posiciones
espaciadas angularmente en torno a un círculo; y la segunda
estructura comprende una tapa (6) que actúa para cerrar la cámara
(3) en la primera posición y cuya parte inferior lleva el
dispositivo de sujeción (7).
2. Dispositivo según la reivindicación 1, donde
la primera estructura (1) es estacionaria y la segunda estructura
(4) se puede mover verticalmente respecto de la primera
estructura.
3. Dispositivo según las reivindicaciones 1 ó 2,
donde el medio de sujeción comprende unos imanes (7) que permiten
sujetar, de forma separable, las muestras provistas cada una de
ellas de un bastidor metálico, sobre la segunda estructura por
medio de atracción magnética.
4. Dispositivo según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, donde la segunda estructura (4) se
puede mover de forma giratoria en torno a un eje vertical central,
permitiendo que las muestras (12) sean depositadas en la segunda
estructura o descargadas de la misma en una posición dada al lado
del dispositivo, ya sea mediante un brazo robótico o
manualmente.
5. Dispositivo según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, donde dicho dispositivo tiene la
posibilidad de cambiar de líquido cuando está en la primera
posición, lo cual permite tratar las muestras con líquidos
diferentes en una sucesión de etapas de tratamiento, manteniendo la
cámara cerrada.
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