JP4129456B2 - 組織の検体の処理 - Google Patents

Description

発明の分野
この発明は、組織の検体の処理、特に（これに限らないが）光学投影断層撮影（ＯＰＴ）による検体の画像化の前の組織の検体の処理、および光学投影断層撮影の方法および装置の使用に関する。

発明の背景
組織の検体は、通常、検体がＯＰＴ装置で画像化される前に１つまたは複数の液体に浸漬することによって処理される。この発明は、この検体の前処理を容易にする仕方としてなされたものである。

発明の概要
この発明の一局面によると、液体に浸漬することによって組織の検体を処理するための装置が提供され、この装置は、液体を保持するためのチャンバを提供する第１の構成、および検体を解放可能に保持するための保持手段を含む第２の構造を含み、第１および第２の構造は、保持手段が比較的チャンバの近くにあり、かつ第２の構造がチャンバの上部を閉じて検体が液体に浸漬されるようにし、一方で後者が環境から守られる第１の位置と、保持手段が比較的チャンバから遠くにあり、検体を保持手段に載せ降ろしすることができる第２の位置との間で、垂直の成分を有する方向で相対的に動くことができる。

第１の構造は静止していることが好ましく、第２の構造は第１の構造に関して垂直に移動可能であることが好ましい。

保持手段は、各々に金属の台を設けられた検体が磁気引力によって第２の構造に着脱可能に保持されるように磁石を含んでもよい。

チャンバは環状の溝槽の形であることが好ましく、この場合、保持手段は検体を保持することができるため、後者は保持手段から垂れ下がり、第２の構造がその第１の位置に下げられたときに検体が溝槽へと下げられるように都合よく円の周りに角度をもって隔てられた位置にある。この場合、第２の構造は、第１の位置でチャンバを閉じる働きをする蓋を含むことが好ましく、その下側は保持手段を担持する。蓋が閉じることで、揮発性の処理液の蒸発が防止される。

第２の構造は、中央の垂直の軸のまわりで回転可能に可動であってもよく、ロボットのアームまたは人間の手によって、装置に沿った選ばれた位置で第２の構造に検体を載せ降ろしすることができる。

装置は、第１の位置にあるときに液体を交換し易くなっていてもよく、チャンバを閉じたまま、一連の処理ステージで異なる液体によって検体を処理することができる。たとえば、装置は、一連の選ばれた液体でチャンバを満たし、空にするためのポンプを有してもよく、組織の検体の場合、これは光学投影断層撮影の手段によって検体が画像化される前に検体を洗浄するかまたは他の態様で処理する働きをしてもよい。

この発明の別の局面によると、チャンバ内の液体に浸漬することによって組織の検体を処理する方法が提供され、この方法は、検体をホルダに載せて検体がホルダから垂れ下がりかつチャンバ内の液体の上方に配置されるようにするステップと、浸漬中にチャンバを閉じて環境から保護されるように維持しつつ、チャンバと検体との間で一方向で相対的な動きを行なって検体を液体に浸漬するステップと、チャンバと検体との間で反対方向で相対的な動きを行なって検体を液体から取出すステップと、処理された検体をホルダから降ろすステップとを含む。

検体は、複数の処理ステージで異なる液体によって処理されてもよく、これは、検体がチャンバ内にありかつチャンバが閉じられて環境から保護されている一方で、連続的に異なる液体でチャンバを満たし空にすることによって行なわれるのが好ましい。

この発明の別の局面によると、上述の局面のいずれかの方法または装置の使用を含む、分析または手順のいずれか１つまたは複数を行なう方法が提供される。

この発明によると、この発明で使用するためのサンプルは、以前の特許出願に説明されるように準備されてもよいし、および／または当業者に周知の従来の病理学的および組織学的な技術ならびに手順を用いて準備してもよい。

たとえば、そのままの状態でのハイブリッド形成（ＲＮＡを検出するのに特に有用）では、Hammond K L, Hanson I M, Brown A G, Lettice L A, Hill R E 「哺乳類およびショウジョウバエのダックスフンド遺伝子はSkiプロト腫瘍遺伝子に関連し、目および手足に発現される」（“Mammalian and Drosophila dachsund genes are related to the Ski proto-oncongene and are expressed in eye and limb”.） Mech Dev. 1998 Jun;74(1-2):121-31.。

免疫組織化学（タンパク質および他の分子を検出するのに特に有用）では、Sharpe J, Ahlgren U, Perry P, Hill B, Ross A, Hecksher-Sorensen J, Baldock R, Davidson D.「３Ｄ顕微鏡法および遺伝子発現の研究のためのツールとしての光学投影断層撮影」（“
Optical projection tomography as a tool for 3D microscopy and gene expression studies”）Science.2002 Apr 19;296(5567);541-5.。

この発明の範囲を離れることなく、この発明の変形を行ない得ることが理解されるであろう。

この発明を添付の図面を参照して例によってさらに説明する。

詳細な説明
装置は、円筒形の外側のケーシング２を有する固定構造を含み、その上部には環状の溝槽３が位置付けられ、これは上部で開口している。固定構造には、中央のハブまたはスピンドル５を有する可動構造４が取付けられ、その上部にはディスク状の蓋６が取付けられ、その下側は角度をもって隔てられかつ下方に垂れ下がったいくつかの円筒形の磁石７を担持する。ハブまたはスピンドル５は、図４の８に示される中央の垂直の軸の周りでの可動構造の回転のために固定構造に回転可能に取付けられる。さらに、ハブまたはスピンドル５は、垂直な軸８に沿って固定構造１に対して垂直の並進運動が可能である。

ケーシング２内には、図４の９に示されるように、回転運動および並進運動の両方で構造４を駆動するためのモータおよび伝達装置がある。溝槽３は、液体で満たすことができ、構造１は、これら液体を保持するための容器、および図４の１０に示されるように、溝槽を満たし空にするためのポンプを含む。

磁石７は、組織の検体１２を着脱可能に保持するために使用され、その各々は、検体の一端にある金属の台１３で準備されている。これにより各金属１３台は磁石７の１つから垂れ下がり、検体１２は台１３から下方に垂れ下がっている。この装置が開いた状態であるとき（図１）、磁石７は溝槽３の上部から十分に持上げられ、検体１２を磁石７に装着するかまたはそこから取外すことができる。この装置が閉じられた位置にあるとき（図２）、蓋６がケーシング２の上部と係合し、検体１２は溝槽３内の液体１４に浸漬される。

図６および図７に示されるロボットアーム１５は、処理されていない検体を装置に載せるために使用され、処理された検体を装置から検体が画像化されるＯＰＴスキャナの回転ステージ１６へと移動させるのにも使用される。

使用中、ロボットアーム１５は検体を装置に載せるのに使用され、各検体は、磁石７と検体１２の一端にある金属の台１３との間の磁気引力によって対応する磁石７の下方端部に装着され、検体が載せられるとき可動構造４は開いた位置にあり、回転の向きに索引をつけられる。検体が載せられると、可動構造はその下方の位置または閉じられた位置に動かされ、これにより検体１２は溝槽３にポンプで入れられた液体１４に浸漬される。この閉じられた位置では、蓋６は外側のケーシング２の上方の縁に係合して液体１４は空気に対して閉じられ、これにより、液体を通って検体を移動するためにコンベアベルトを使用する既知の装置とは異なり、揮発性の液体の使用が可能である。

一連の液体によって検体を処理する必要がある場合、第１の液体は溝槽３から排出され、第２の液体がポンプでそこに入れられ、溝槽３を空気に対して開放する必要はない。さらに、金属の台１３を磁石７に装着することによって、検体１２は垂れ下がり位置に保持されるため、検体は、それらを損傷し得る溝槽３の底部に係合しない。

このようにして任意の数の処理ステージを実行することができ、液体は、検体を動かす必要なく、かつ少量の各処理液で交換される。

検体１２の処理の後、可動構造４はその上方の位置に持上げられ、処理された検体１２はロボットアーム１５によって回転ステージ１６に移動され、構造４は回転の向きに索引をつけられるため、ロボットアーム１５は各検体１２を降ろし、処理された検体５を回転ステージ１６へと移動することができる。

検体を処理するための液体の例は、定着液（ポラフォルムアルデヒドまたはホルマリンなど）、アルコール（特にメタノールおよびエタノール）および検体を洗浄するための有機溶剤（特にベンジルアルコールおよびベンジルベンゾエート）である。

この発明の範囲を離れることなく、この発明に変形を行ない得ることが理解されるであろう。

この発明による開いた状態の装置の等角図である。 閉じられた状態の装置の等角図である。 この装置によって保持される検体を示す、開いた状態の装置の一部の拡大断片図である。 装置の断面図である。 ロボットアームと組合せた装置の図である。 図５の部分の拡大図である。 検体をＯＰＴスキャナの回転ステージへと位置付けているロボットアームの図である。

Claims (5)

1. 液体に浸漬することによって組織の検体を処理するための装置であって、
   前記液体を保持するための環状の溝槽を有する第１の構造、および
   前記検体を解放可能に保持するための保持手段を含む第２の構造を含み、
   前記第１の構造および第２の構造は、前記検体が前記液体に浸漬され、かつ前記第２の構造が前記溝槽の上部を閉じて前記液体の蒸発が防止される第１の位置と、前記保持手段が前記溝槽から比較的遠くにあって前記検体を前記保持手段に載せ降ろしすることができる第２の位置との間で、垂直の成分を有する方向で相対的に可動であり、
   前記第２の構造が前記第１の位置へと下げられたときに前記検体が前記溝槽へと下げられるように、前記検体は円の周りで角度をもって隔てられた位置で前記保持手段から垂れ下がり、
   前記第２の構造は、前記第１の位置で前記溝槽を閉じる働きをし、かつその下側に前記保持手段を担持する蓋を含む、装置。
2. 前記第１の構造は静止しており、前記第２の構造は前記第１の構造に関して垂直に移動可能である、請求項１に記載の装置。
3. 前記保持手段は、各々に金属の台が設けられた検体を磁気引力によって前記第２の構造に着脱可能に保持できるようにするために磁石を含む、請求項１または２に記載の装置。
4. 前記第２の構造は、中央の垂直の軸のまわりで回転可能に可動であり、前記検体は、ロボットアームまたは人間の手によって、前記装置に沿って選ばれた位置で前記第２の構造に載せ降ろしすることができる、請求項１から３のいずれかに記載の装置。
5. 前記装置は前記第１の位置にあるときに前記液体を交換しやすく、前記検体は、前記溝槽を閉じたまま、一連の処理ステージで異なる液体によって処理することができる、請求項１から４のいずれかに記載の装置。

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