PT1516183E - Tratamento de espécime de tecidos. - Google Patents
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Description
DESCRIÇÃO "TRATAMENTO DE ESPÉCIMES DE TECIDOS"
Domínio da Invenção
Esta invenção refere-se ao tratamento de espécimes de tecidos, em particular (mas não exclusivamente) antes de exibição no monitor dos espécimes por tomografia por projecção óptica (OPT) e às utilizações de tomografia por projecção óptica e aparelhos.
Antecedentes da Invenção
Os espécimes de tecidos são normalmente tratados por imersão em um ou mais líquidos, antes dos espécimes serem exibidos no monitor num aparelho de OPT, e a invenção foi planeada como um modo de facilitar este pré-tratamento dos espécimes.
Sumário da Invenção
De acordo com a invenção, é proporcionado um aparelho para tratar espécimes de tecidos por imersão num líquido, compreendendo o aparelho uma primeira estrutura que proporciona uma câmara para conter o líquido, e uma segunda estrutura incluindo meios de suporte para suportar de modo amovível os espécimes, sendo a primeira e a segunda estruturas relativamente 1 móveis num sentido tendo uma componente vertical entre uma primeira posição, na qual os meios de suporte estão relativamente próximos da câmara e na qual a sequnda estrutura fecha o topo da câmara para permitir que os espécimes sejam imersos no liquido ao mesmo tempo que esta última é proteqida do ambiente, e uma sequnda posição na qual os meios de suporte estão relativamente distantes da câmara para permitir que os espécimes sejam carregados sobre os meios de suporte ou descarregados a partir dos mesmos, caracterizado por: a câmara ter a forma de uma calha anular; os meios de suporte suportarem os espécimes para que estes últimos, pendem dos meios de suporte em posições espaçadas de modo angular em torno de um circulo; e a segunda estrutura conter uma tampa que serve para fechar a câmara na primeira posição e cuja parte inferior suporte os meios de suporte.
De um modo preferido, a primeira estrutura é estacionária e a segunda estrutura é susceptivel de ser deslocada verticalmente em relação à primeira estrutura.
Os meios de suporte podem incluir imanes para permitir que os espécimes, cada um dotado com um suporte metálico, sejam mantidos de modo destacável sobre a segunda estrutura por atracção magnética. A tampa de encerramento ajuda a evitar a evaporação dos líquidos voláteis de tratamento. A segunda estrutura pode ser móvel de forma rotativa em torno de um eixo vertical central, permitindo que os espécimes sejam carregados sobre a segunda estrutura e descarregados a partir da mesma numa posição escolhida ao lado do aparelho, quer por um braço robótico quer por uma mão humana. 2 0 aparelho pode ter a facilidade de trocar o liquido quando na primeira posição, permitindo que os espécimes sejam tratados por líquidos diferentes numa sucessão de fases de tratamento, conservando, ao mesmo tempo, a câmara fechada. Por exemplo, o aparelho pode ter uma bomba para encher e esvaziar a câmara com uma sucessão de líquidos escolhidos que, no caso de espécimes de tecidos, podem servir para lavar ou, de outro modo, tratar os espécimes antes dos espécimes serem exibidos no monitor por meio da tomografia por projecção óptica.
Os espécimes podem ser tratados por líquidos diferentes numa multiplicidade de fases de tratamento que são, de um modo preferido, efectuadas por sucessivos esvaziamentos e enchimentos da câmara com líquidos diferentes, enquanto os espécimes permanecem na câmara e enquanto a câmara permanece fechada e protegida do ambiente.
De acordo com outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método para realizar qualquer uma ou mais das análises ou procedimentos abaixo enumerados compreendendo a utilização de um método ou aparelho de qualquer dos aspectos anteriormente estabelecidos.
De acordo com a presente invenção, podem-se preparar amostras para utilização na presente invenção conforme descrito nos primeiros pedidos de patente e/ou empregando técnicas histológicas e patológicas convencionais e procedimentos bem conhecidos por especialistas na técnica.
Por exemplo, hibridização in-situ (especialmente útil para detectar RNAs): Hammond KL, Hanson I M, Brown A G, Lettice L A, Hill R E "Mammaliãn e Drosophila dachsund genes are related to 3 the Ski proto-oncogene and are expressed in eye and limb", Mech Dev. 1998 Junho; 74(1-2):121-31.
Imuno-histoquímica (especialmente útil para detectar proteínas e outras moléculas): Sharpe J. Ahlgren U, Perry P, Hill B, Ross A, Hecksher- Sorensen J, Baldock R, Davidson D. "Optical projection tomography as a tool for 3D mícroscopy and gene expression studies” Science. 2002 Abr 19; 296(5567):541-5.
Deve compreender-se que podem ser feitas modificações à invenção sem afastamento do âmbito da invenção.
Breve Descrição dos Desenhos A invenção continuará, agora, a ser descrita, a título de exemplo, com referência aos desenhos anexos, nos quais: A Figura 1 é uma vista isométrica de um aparelho, de acordo com a invenção, numa condição de aberto, A Figura 2 é uma vista isométrica do aparelho numa condição de fechado, A Figura 3 é uma vista incompleta, numa escala ampliada, de parte do aparelho numa condição de aberto, que mostra os espécimes contidos no aparelho, A Figura 4 é uma vista transversal do aparelho, A Figura 5 mostra o aparelho em conjunto com um braço robótico, 4 A Figura 6 é uma vista ampliada de parte da Figura 5, e A Figura 7 mostra o braço robótico, a colocar um espécime na fase de rotação de um aparelho de digitalização de imagem por OPT.
Descrição Detalhada 0 aparelho compreende uma estrutura 1 fixa tendo um invólucro 2 exterior cilíndrico no topo do qual está colocada uma calha 3 anular que é aberta no topo. Montada na estrutura fixa está uma estrutura 4 móvel tendo um eixo central ou veio 5 no topo do qual está montada uma tampa 6 em forma de disco, cujo lado inferior suporta vários imanes 7 cilíndricos espaçados de forma angular e pendurados de modo descendente. 0 eixo ou veio 5 é montado de modo rotativo na estrutura fixa para rotação da estrutura móvel em torno de um eixo vertical central indicado em 8 na Figura 4. Além disso, o eixo ou veio 5 está apto a efectuar um movimento de translação vertical em relação à estrutura 1 fixa ao longo do eixo 8 vertical.
Dentro do invólucro 2 estão colocados motores e a engrenagem para accionar a estrutura 4, tanto em movimento de rotação como de translação, conforme indicado em 9 na Figura 4. A calha 3 pode ser cheia com líquidos, e a estrutura 1 inclui recipientes para conter estes líquidos e bombas para encher e esvaziar a calha, conforme indicado em 10 na Figura 4.
Os imanes 7 são utilizados para suportar, de uma forma destacável, espécimes 12 de tecidos, cada um dos quais foi preparado com um suporte 13 metálico numa extremidade do 5 espécime. Isto permite que cada suporte 13 metálico seja suspenso de um dos imanes 7 com o espécime 12 suspenso de modo descendente desde o suporte 13. Quando o aparelho está na condição de aberto (Figura 1), os imanes 7 são totalmente erguidos desde o topo da calha 3 para que os espécimes 12 possam ser fixados aos imanes 7 ou removidos dos mesmos. Quando o aparelho está na posição fechada (Figura 2), a tampa 6 engata-se no topo do invólucro 2 e os espécimes 12 são imersos num liquido 14 na calha 3. 0 braço 15 robótico mostrado nas Figuras 6 e 7 é utilizado para carregar espécimes não tratados para o interior do aparelho e, também, para transferir espécimes tratados a partir do aparelho para a fase 16 rotativa de um aparelho de digitalização de imagem por OPT onde os espécimes são exibidos no monitor.
Em utilização, o braço 15 robótico é utilizado para carregar espécimes para o interior do aparelho, sendo cada espécime fixado à extremidade inferior de um íman 7 correspondente devido à atracção magnética entre o iman 7 e o suporte 13 metálico numa extremidade do espécime 12, estando a estrutura 4 móvel na posição aberta e sendo indexada num sentido rotacional à medida que os espécimes são carregados. Quando carregada com espécimes, a estrutura móvel é movida para a sua posição fechada ou rebaixada, imergindo, por esse meio, os espécimes 12 no liquido 14 que foi bombeado para o interior da calha 3. Nesta posição fechada, a tampa 6 engata-se no rebordo superior do invólucro 2 exterior para que o liquido 14 seja fechado relativamente ao ar, permitindo, por esse meio, a utilização de um liquido volátil, ao contrário de aparelhos conhecidos que utilizam correias de transporte para transferir os espécimes através de um liquido. 6
Se for necessário tratar os espécimes por uma sucessão de líquidos, o primeiro líquido é drenado a partir da calha 3 e um segundo líquido é bombeado para aquela calha, sem a necessidade da calha 3 ser aberta ao ar. Além disso, a fixação dos suportes 13 metálicos aos imanes 7 retém os espécimes 12 nas suas posições de suspensão para que os espécimes não se engatem na base da calha 3, o que podia danificá-los.
Qualquer número de fases de tratamento pode ser efectuado deste modo, sendo o líquido trocado sem a necessidade de mover os espécimes e empregando apenas um pequeno volume de cada líquido de tratamento.
Depois do tratamento dos espécimes 12, a estrutura 4 móvel é levantada para a sua posição superior e os espécimes 12 tratados são, em seguida, transferidos para a fase 16 rotativa por meio do braço 15 robótico, sendo a estrutura 4 indexada de modo rotativo para permitir que o braço 15 robótico descarregue cada espécime 12, sucessivamente, e transfira o espécime 5 tratado para a fase 16 rotativa.
Exemplos de líquidos para tratar os espécimes são fixadores (tais como, paraformaldeído ou formalina) álcoois (em especial, metanol e etanol) e solventes orgânicos para limpar os espécimes (em especial, álcool benzílico e benzoato de benzilo).
Deve compreender-se que podem ser feitas modificações à invenção sem afastamento do âmbito da invenção.
Lisboa, 17 de Abril de 2007 7
Claims (5)
- REIVINDICAÇÕES 1. Aparelho para tratar espécimes (12) de tecidos por imersão num liquido, compreendendo o aparelho uma primeira estrutura (1) que proporciona uma câmara (3) para conter o liquido, e uma segunda estrutura (4) incluindo meios (7) de suporte para suportar de modo amovível os espécimes (12), sendo a primeira e segunda estruturas relativamente móveis num sentido tendo uma componente vertical entre uma primeira posição, na qual meios (7)de suporte estão relativamente próximos da câmara (3) e na qual a segunda estrutura fecha o topo da câmara (3) para permitir que os espécimes (12) sejam imersos no líquido ao mesmo tempo que esta última é protegida do ambiente, e uma segunda posição na qual os meios (7) de suporte ficam relativamente distantes da câmara (3) para permitir que os espécimes (12) sejam carregados nos meios (7) de suporte ou descarregados a partir dos mesmos, caracterizado por: a câmara ter a forma de uma calha anular; os meios (7) de suporte suportam os espécimes (12) para que estes últimos pendam dos meios de suporte em posições espaçadas de forma angular em torno de um círculo; e a segunda estrutura incluir uma tampa (6) que serve para fechar a câmara (3) na primeira posição e cujo lado inferior suporte os meios (7) de suporte.
- 2. Aparelho de acordo com a reivindicação 1, em que a primeira estrutura (1) é estacionária e a segunda estrutura (4) é verticalmente susceptível de ser deslocada em relação à primeira estrutura. 1
- 3. Aparelho de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que os meios de suporte incluem imanes (7) para permitir que os espécimes, cada um dotado com um suporte metálico, sejam retidos de forma destacável na segunda estrutura por atracção magnética.
- 4. Aparelho de acordo com qualquer das reivindicações precedentes, em que a segunda estrutura (4) é móvel de modo rotativo em torno de um eixo vertical central, permitindo que os espécimes (12) sejam carregados sobre a segunda estrutura e descarregados a partir da mesma numa posição escolhida ao lado do aparelho, quer por um braço robótico quer por uma mão humana.
- 5. Aparelho de acordo com qualquer das reivindicações precedentes, em que o aparelho tem a facilidade de trocar o líquido quando na primeira posição, permitindo que os espécimes sejam tratados por líquidos diferentes numa sucessão de fases de tratamento, conservando, ao mesmo tempo, a câmara fechada. Lisboa, 17 de Abril de 2007 2
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