ES2282196T3 - Inhibidores del virus del papiloma. - Google Patents

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Jeffrey O'meara
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Abstract

Un compuesto tal y como se representa mediante la **fórmula**, o sus enantiómeros o diastereoisómeros de ésta en donde; A, es un anillo homocíclico de 5 ó de 6 miembros, o un anillo heterocíclido de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 ó más heteroátomos seleccionados de entre N, O y S; X, es H y W, es OH; ó X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo o un epóxido.

Description

Inhibidores del virus del papiloma.
La presente invención, se refiere a compuestos, composiciones y utilizaciones para la fabricación de medicamentos para el tratamiento de la infección del virus del papiloma (PV). De una forma particular, el virus del papiloma humano (HPV). De una forma particular, la presente invención, proporciona nuevos derivados de indano, composiciones farmacéuticas que contienen tales tipos de derivados, y los usos de los compuestos para la fabricación de medicamentos para el tratamiento de la invención del virus del papiloma. De una forma más particular, la presente invención, proporciona compuestos, composiciones y usos para la fabricación de medicamentos para inhibir la replicación del virus del papiloma, mediante la interferencia con un complejo E1-E2-DNA, durante la iniciación de la replicación del DNA.
Antecedentes y transfondo de la invención
Los virus del papiloma, son virus de ADN, no provistos de envoltura, los cuales inducen a lesiones interproliferativas del epitelio. Los virus del papiloma, se encuentran extendidos en la naturaleza, y han sido identificados en los vertebrados mayores. Los virus, se han caracterizado, entre otros, en los procedentes de los humanos, ganado vacuno, conejos, caballos y perros. El primer virus del papiloma, se describió en el año 1933, como el virus de papiloma de la liebre de cola blanca (CRPV). Desde entonces, el virus del papiloma de la liebre o conejo de cola blanca, así como del papiloma bovino, del tipo 1 (BPV-1), han servido, como prototipos experimentales para estudios, en el virus del papiloma. La mayoría de los virus de papiloma humano, se encuentran asociados con lesiones proliferativas puramente epiteliales y, la mayoría de las lesiones, en animales, son cutáneas. En los humanos, existen más de 75 tipos de virus del papiloma que han sido identificados, y éstos se han catalogado mediante el sitio de la infección: el epitelio cutáneo y el epitelio mucoso. (mucosa oral y genital). Las enfermedades cutáneo-relacionadas, incluyen a las verrugas planas, plantares, etc. las enfermedades relacionadas con la mucosa, incluyen a los papilomas laríngeos, y las enfermedades anogenitales que comprenden carcinomas cervicales (Fields, 1996, Virology, 3ª edición, Lippincott - Raven Pub., Philadelphia, N.Y.).
Existen más de 25 HPV que se encuentran implicados en enfermedades anogenitales, las cuales se agrupan en tipos de "bajo riesgo" y de "alto riesgo". Los tipos de bajo riesgo, incluyen a los HPV tipo 6, tipo 11 y tipo 13, e inducen, mayormente, a lesiones benignas tales como el condiloma acuminado (acuminata) (verrugas genitales), y lesiones intraepiteliales escamosas (SIL), de bajo grado. En los Estados Unidos de América, existen más de 5 millones de personas con verrugas genitales, de las cuales, un 90%, se atribuyen al HPV-6 y HPV-11. Aproximadamente un 90% de SIL, viene también provocado por los tipos de bajo riesgo, 6 y 11. El otro 10% de SIL, viene provocado por HPVs de alto riesgo.
Los tipos de alto riesgo, se encuentran asociados con SIL de alto grado y cáncer cervical, e incluyen, de la forma más frecuente, a los HPV tipos 16, 18, 31, 33, 35, 45 y 58. La progresión de SIL de bajo grado, a SIL de alto grado, es mucho más frecuente, para las lesiones que contienen HPV-16 y 18 de alto riesgo, si se comparan con aquéllas que contienen los tipos HPV de bajo riesgo. Adicionalmente a ello, únicamente se detectan cuatro tipos de HPV, frecuentemente, en el cáncer cervical (tipos 16, 18, 31 y 45). En el mundo entero, se diagnostican, anualmente, aproximadamente 500.000 nuevos casos de cáncer de cérvix invasivo, (Fields, 1996, citado anteriormente, más arriba).
Los tratamientos para las verrugas genitales, incluyen la eliminación física, tal como la crioterapia, láser CO_{2}, electrocirugía o el corte o supresión por medios quirúrgicos. Pueden también utilizarse agentes citotóxicos, tales como el ácido tricloroacético, podofilino o podofilox. Se encuentra también a disposición la inmunoterapia, tal como el interferón o el imiquimod. Estos tratamientos, no son completamente efectivos en cuanto a lo referente a la eliminación de todas las partículas víricas y existen o bien ya sea unos efectos colaterales que incurren en altos costos, o bien ya sea unos efectos colaterales inconfortables, relacionados con éstos. De hecho, actualmente, no existen tratamientos antivíricos efectivos, para la infección por HPV, puesto, que las verrugas repetitivas, son comunes, con todas las terapias actuales (Beutner & Ferenczy, 1997, Amer. J. Med., 102(%), 28 - 37).
La inefectividad de los procedimientos actuales, para tratar las infecciones por HPV, ha demostrado la necesidad de identificar nuevos medios de control o de eliminar tales tipos de infecciones. En años recientes, se han venido realizando esfuerzos, enfocados hacia el descubrimiento de compuestos antivíricos y, especialmente, compuestos capaces de interferir con la replicación vírica, en el inicio de la infección (Hughes, 1993, Nucleic Acids Res. 21: 5817 - 5823).
La vida del ciclo del PV, se encuentra íntimamente acoplada con la diferenciación de queratinocitos. Se cree que, la infección, acontece en un sitio de disrupción del tejido, en el epitelio basal. De un modo distinto a las células normales, la maquinaria de la replicación celular de DNA, se mantiene, a medida que la célula experimenta una diferenciación vertical. A medida que las células infectadas experimentan una diferenciación progresiva, el número de copias del genoma vírico, y la expresión vírica del gen, se incrementa, a su vez, con la eventual expresión genética tardía y ensamblaje del virión, en queratinocitos terminalmente diferenciados y la liberación de partículas víricas (Fields, véase anteriormente, más arriba).
Las hebras codificantes para cada virus del papiloma, contienen aproximadamente diez fragmentos de lectura abierta (RFs) de traducción, diseñados, los cuales han sido clasificados como, bien ya sea ORFs tempranos o bien ya sea ORFs tardíos, en base a su localización en el genoma. E1 a E8, se expresan de una forma temprana, en el ciclo de replicación vírica y, dos genes tardíos (L1 y L2), codifican a las proteínas cápsidas mayor y menor, respectivamente. Los productos genéticos E1 y E2, funcionan en la replicación vírica, mientras que, E5, E6 y E7, se expresan en conexión con la proliferación de células huésped. Los productos genéticos L1 y L2, se encuentran involucrados en la estructura del virión. La función de los productos genéticos E3, E4 y E5, es incierta, en el momento presente.
Estudios de HPV, han mostrado el hecho de que, las proteínas E1 y E2, son ambas esenciales y suficientes para la replicación del DNA vírico, in vitro (Kuo et al., 1994, J. Biol. Chem. 30: 24058 - 24065). Este requerimiento, es similar al del papiloma bovino, tipo 1 (BPV-1). De hecho, existe un alto grado de similitud entre las proteínas E1 y E2, y las ori-secuencias de todos los virus del papiloma (PV), independientemente de las especies y tipos víricos (Kuo et al., 1994, véase anteriormente, más arriba).
Evidencias que han emanado de estudios sobre el BPV-1, han mostrado que, E1, posee unas actividades ATPasa y helicasa, las cuales se requieren para la iniciación de la replicación de DNA vírico (Seo et al., 1993a, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 702 - 706; Yang et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. 90: 5086 - 5090; y MacPherson et al., 1994, 204: 403 - 408).
La proteína E2, es un activador transcripcional que se enlaza a la proteína E1, y forma un complejo el cual enlaza a la ori-secuencia (Mohr et al., 1990, Science 250: 1694 - 1699). Se cree que, la E2, intensifica el enlace de la E1 al origen de replicación del BPV (Seo et al., 1993b, Proc. Natl. Acad. Sci. 90: 2865 - 2869). En el HPV, Lui et al, sugirieron que, la E2, estabilizaba el enlace de la E1 al ori (1995, J. Biol. Chem. 270 (45): 27283 - 27291).
Con objeto de impedir esta enfermedad, es por lo tanto deseable una entidad química que interfiera con la replicación del DNA vírico. La presente invención, proporciona, por lo tanto, tales tipos de compuestos, composiciones o procedimientos que inhiben la replicación del virus del papiloma. De una forma más particular, los compuestos y composición de la presente invención, interfieren con los complejos de E1-E2-DNA, durante el ciclo de replicación vírica.
Resumen de la invención
En un primer aspecto, la invención, proporciona un compuesto de la fórmula (I), o sus enantiómeros o diastereoisómeros de ésta:
1
en donde;
A, es un anillo homocíclico de 5 ó de 6 miembros, o un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 ó más heteroátomos seleccionados de entre N, O y S;
X, es H y W, es OH; ó X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo o un epóxido;
R^{1}, es H, ó uno o dos sustituyentes, independientemente seleccionados de entre el grupo consistente en: hidroxi, halo, alquilo inferior, alcoxi inferior, tioalquilo inferior, haloalquilo (por ejemplo, trifluorometilo); ó -C(O)R^{2}, en donde, R^{2}, es alquilo inferior, ariloxi ó benciloxi;
Y, es fenilo, opcionalmente mono- ó di-sustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5}, es alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, halo hidroxi, nitrilo ó trifluorometilo, y R^{6}, es alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, hidroxi ó trifluorometilo; encontrándose fusionado, el citado anillo de fenilo, con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S;
ó, Y, es un heterociclo (Het) que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de entre N, O ó S; dicho Het, encontrándose opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-fenilo, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente monosustituida, con un alquilo inferior, en donde, el citado anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho anillo de fenilo, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-Het, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono-sustituida, con un alquilo inferior, en donde, el Het, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en: alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alquileno inferior, arilo o aralquilo inferior, todos ellos, opcionalmente mono- ó di-sustituidos con:
alquilo inferior, cicloalquilo inferior, haloalquilo, halo, CN, azido, alcoxi inferior, (alquilo inferior)acilo, tioalquilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}, NHC(O)-alquilo inferior, NHC(O)-arilo, NHC(O)-O-alquilo inferior, NHC(O)-O-arilo, arilo, ariloxi, hidroxi, nitro, amino, ó Het, encontrándose, el citado Het, opcionalmente sustituido o di-sustituido con alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo, trifluorometilo, C(O)R^{6}, en donde, R^{6}, es tal y como se define anteriormente, arriba;
encontrándose, los citados cicloalquilo inferior, arilo, aralquilo inferior o Het, opcionalmente fusionados con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S;
y
R^{4}, es un ácido carboxílico, una sal o un éster de éste;
y en donde, las líneas onduladas, representan enlaces de estereoquímica inespecífica, con la condición de que, cuando X e Y, conjuntamente, forman un carbonilo e Y, es fenilo, R^{3}, no puede ser fenilo,
con lo cual, los compuestos de la invención, pueden también representarse mediante la fórmula I, en las formas (2) y (3):
\vskip1.000000\baselineskip
2
en donde, A, X, W, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen anteriormente, arriba,
en donde, el término "alquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de cadena lineal, o de cadena ramificada, que contienen hasta seis átomos de carbono, y
en donde, el término "alcoxi inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa radicales alcoxi de cadena lineal, que contienen de uno a más cadenas de carbono, y radicales alcoxi de cadena ramificada, que contienen de tres a cuatro átomos de carbono, y
en donde, el término "haloalquilo", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical alquilo que contiene de uno a seis átomos de carbono, en donde, uno o más átomos de hidrógeno, se encuentran reemplazados por un átomo de halógeno, y
en donde, el término "cicloalquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de hidrocarburo cíclico, saturado, que contienen de tres a siete átomos de carbono.
De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona compuestos que tienen las siguientes fórmulas, seleccionados de entre el grupo consistente en:
\vskip1.000000\baselineskip
3
\vskip1.000000\baselineskip
4
\vskip1.000000\baselineskip
5
\vskip1.000000\baselineskip
6
en donde, A, X, W, R^{1}, Y, R^{3} y R^{4}, son tal y como se define anteriormente, arriba.
De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona compuestos tales como los que se representan mediante la fórmula (I), o sus enantiómeros o diasteroisómeros de ésta:
7
en donde,
A, es un anillo homocíclico de 5 ó de 6 miembros, o un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 ó más heteroátomos seleccionados de entre N, O y S;
X, es H y W, es OH; ó X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo o un epóxido;
R^{1}, es H, ó uno o dos sustituyentes, independientemente seleccionados de entre el grupo consistente en: hidroxi, halo, alquilo inferior, alcoxi inferior, tioalquilo inferior, haloalquilo); ó -C(O)R^{2}, en donde, R^{2}, es alquilo inferior, ariloxi ó benciloxi;
Y, es fenilo, opcionalmente mono- ó di-sustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5}, es alquilo inferior, ciclalquilo inferior, alcoxi inferior, halo hidroxi, nitrilo ó trifluorometilo, y R^{6}, es alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, hidroxi ó trifluorometilo; encontrándose fusionado, el citado anillo de fenilo, con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S;
ó, Y, es un heterociclo (Het) que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de entre N, O ó S; dicho Het, encontrándose opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-fenilo, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono-sustituida, con un alquilo inferior, en donde, el citado anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho anillo de fenilo, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-Het, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono-sustituida, con un alquilo inferior, en donde, el Het, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
8
R^{4}, es un ácido carboxílico, una sal o un éster de éste;
en donde, los compuestos de la invención, pueden también representarse mediante la fórmula I, en las formas (2) y (3):
\vskip1.000000\baselineskip
9
en donde, A, X, W, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen anteriormente, arriba,
en donde, el término "alquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de cadena lineal, o de cadena ramificada, que contienen hasta seis átomos de carbono, y
en donde, el término "alcoxi inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa radicales alcoxi de cadena lineal, que contienen de uno a más cadenas de carbono, y radicales alcoxi de cadena ramificada, que contienen de tres a cuatro átomos de carbono, y
en donde, el término "haloalquilo", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical alquilo que contiene de uno a seis átomos de carbono, en donde, uno o más átomos de hidrógeno, se encuentran reemplazados por un átomo de halógeno, y
en donde, el término "cicloalquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de hidrocarburo cíclico, saturado, que contienen de tres a siete átomos de carbono.
Tal y como se reconocerá por parte de aquéllas personas expertas en el arte especializado de la técnica, los compuestos, en las formas (2) y (3), se convierten fácilmente en los compuestos de la fórmula (I), en la forma (1). Sin pretender ligarlo a ninguna teoría, se cree que, los compuestos de la fórmula (I), se encuentran en equilibrio, entre las formas (1), (2) ó (3), en dependencia del disolvente y del pH en los cuales éstos se encuentran disueltos. Se ha demostrado, no obstante, el hecho de que, los compuestos de la fórmula (I), son biológicamente activos, en la forma (1), y que, los compuestos, en las formas (2) y (3), hidrolizarán, en condiciones que reproducen el plasma de los mamíferos (pH 7,4), para proporcionar una forma biológicamente activa (1).
De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en: compuestos que tienen la siguiente fórmula:
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10
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en donde, R^{4A}, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen de la forma que sigue:
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11
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(Continuación)
12
De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en: compuestos que tienen la siguiente fórmula:
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13
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en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen, de la forma que sigue:
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De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en: compuestos que tienen la siguiente fórmula:
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15
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en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen, de la forma que sigue:
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16
De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en: compuestos que tienen la siguiente fórmula:
17
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen, de la forma que sigue:
18
De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en: compuestos que tienen la siguiente fórmula:
19
en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen, de la forma que sigue:
20
De una forma alternativa, el primer aspecto de la invención, proporciona un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en: compuestos que tienen la siguiente fórmula:
21
en donde, Y, y R^{3}, son tal y como se definen, de la forma que sigue:
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22
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En un segundo aspecto, la invención, proporciona una composición farmacéutica, que comprende una cantidad víricamente efectiva de anti-virus del papiloma, de un producto de la fórmula (I), sin condición, o una sal terapéuticamente aceptable, o éster de ésta, en mezcla con un medio portador o vehículo farmacéuticamente aceptable o agente auxiliar.
En un tercer aspecto, la invención, proporciona un uso de una compuesto de la fórmula (I), sin condición, o de una sal terapéuticamente aceptable o éster de ésta, o de una composición, tal y como se ha descrito anteriormente, arriba, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una infección vírica, del virus del papiloma, en un mamífero.
En un cuarto aspecto, la invención, proporciona un uso de una compuesto de la fórmula (I), sin condición, o de una sal terapéuticamente aceptable o éster de ésta, o de una composición, tal y como se ha descrito anteriormente, arriba, para la fabricación de un medicamento para la inhibición de la replicación del virus de papiloma, mediante la exposición de células víricamente infectadas, a una cantidad de los compuestos de la fórmula (I), sin condición, inhibiendo el complejo E1-E2 del virus del papiloma, o una sal terapéuticamente aceptable o un éster de ésta, o una composición, tal y como se describe anteriormente, arriba.
En un quinto aspecto, la invención, proporciona un compuesto de la fórmula (I), según la reivindicación 1, sin condición, para la fabricación de un medicamento para la prevención de la transmisión perinatal del HPV, de la madre al bebé, mediante la administración de un compuesto de la fórmula (I), sin condición, a la madre, previamente a dar a luz.
En un sexto aspecto, la invención, proporciona un compuesto intermediario de la fórmula (xx), teniendo, el citado compuesto, estereoquímica relativa trans / trans:
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24
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en donde, Y, R^{3} y R^{4}, son tal y como se han definido anteriormente, arriba.
En un séptimo aspecto, la invención, proporciona un compuesto intermediario de la fórmula (xxvi):
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25
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en donde, R^{1}, R^{3} e Y, son tal y como se han definido anteriormente, arriba,
o una sal o un éster de éste, o enatiómeros y diasteroisómeros de éste.
En un octavo aspecto, la invención, proporciona un compuesto intermediario de la fórmula (xxxiii):
26
en donde, R^{1}, R^{3} e Y, son tal y como se han definido anteriormente, arriba, o una sal o un éster de éste, o enatiómeros y diasteroisómeros de éste.
En un noveno aspecto, la invención, proporciona un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I’,
27
en donde, X, R^{1}, W, Y, R^{3}, y R^{4}, son tal y como se han definido anteriormente, arriba,
comprendiendo:
a) hidrolizar, en una mezcla de base acuosa y un co-disolvente, bien ya sea un compuesto intermediario vi, ó bien ya sea un compuesto intermediario xx
28
para producir compuesto de la fórmula I’, en donde, R^{3}, R^{4} e Y, son tal y como se han definido anteriormente, arriba.
En un décimo aspecto, la invención, proporciona un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I'',
29
en donde, X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo, R^{4}, es un ácido carboxílico o un éster, y R^{1}, Y, y R^{3}, son tal ^{} como se han definido anteriormente, arriba,
comprendiendo:
a) hidrolizar, en una mezcla de base acuosa y un co-disolvente, un compuesto intermediario xxvi,
30
de tal forma que se produzcan compuestos de la fórmula I'', en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se han definido anteriormente, arriba.
En un décimoprimer aspecto, la invención, proporciona un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I''’,
31
en donde, X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo, R^{4}, es un ácido carboxílico o un éster, y R^{1}, Y y R^{3}, son tal ^{} como se han definido anteriormente, arriba,
comprendiendo:
a) hidrolizar, en una mezcla de base acuosa y un co-disolvente, un compuesto intermediario xxxii,
32
de tal forma que se produzcan compuestos de la fórmula I''’, en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se han definido anteriormente, arriba.
Descripción detallada de las formas preferidas de presentación Definiciones
Tal y como se utiliza aquí, en este documento, las definiciones que se facilitan a continuación, son las que se aplican, a menos que se notifique de otra forma.
El término "halo", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical halo, seleccionado de entre bromo, cloro, fluoro o yodo.
El término "cicloalquilo inferior" (ó alquilo C_{1-6}), tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales alquilo, de cadena lineal o ramificada, que contienen hasta seis átomos de carbono, e incluye a metilo, etilo, propilio, butilo, hexilo, 1-metiletilo, 1-metilpropilo, 2-metilpropilo y 1,1-dimetiletilo. El término "alquilo C_{0-6}", que precede a un radical, significa que, este radical, puede opcionalmente encontrarse enlazado a través de un radical alquilo C_{1-6}, o que, el alquilo, puede encontrarse ausente (C_{0}).
El término "cicloalquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo o bien ya sea en combinación con otro radical, significa hidrocarburos cíclicos, saturados, que contienen de tres a siete átomos de carbono, e incluye a los ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.
El término "alcoxi inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa radicales alcoxi de cadena lineal, que contienen de uno a cuatro átomos de carbono, y radicales alcoxi, de cadena ramificada, que contienen de tres a cuatro átomos de carbono e incluye a metoxi, etoxi, propoxi, 1-metiletoxi, butoxi y 1,1-dimetiletoxi. El último radical, se conoce, usualmente, como tert.-butoxi.
El término "haloalcoxi", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical alquilo que contiene de uno a seis átomos de carbono, en donde, uno o más átomos de hidrógeno, se reemplazan por un átomo de halógeno (por ejemplo, trifluorometilo).
El término "amino", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical amino de la fórmula
-NH_{2}. El término "alquilamino inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa radicales alquilamino, que contienen de uno a seis átomos de carbono, e incluye a metilamino, propilamino, (1-metiletil)amino y (2-metilbutil)amino. El término "di(alquilo inferior)amino", significa un radical amino, que tiene dos sustituyentes alquilo, conteniendo, cada uno de los cuales, de uno a seis átomos de carbono, e incluye a los dimetilamino, dietilamino, etilmetilamino y por el estilo.
El término "acilo", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, se refiere a grupos -C(O)R), en donde, R, es alquilo inferior o alcoxi inferior.
El término "arilo C_{6} ó C_{10}", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa bien ya sea un sistema monocíclico, aromático que contiene 6 átomos de carbono, o un sistema cíclico, aromático, que contiene 10 átomos de carbono. Así, por ejemplo, arilo, incluye fenilo o naftaleno.
El término "C_{7-16}", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa un arilo, tal y como se define anteriormente, arriba, enlazado a través de un grupo alquilo, en donde, alquilo, es tal y como se define anteriormente, arriba, conteniendo de 1 a 6 átomos de carbono. Aralquilo, incluye, por ejemplo, a bencilo, y butilfenilo.
El término "Het", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical monovalente derivado mediante la retirada de un hidrógeno, de un heterociclo saturado o insaturado, de cinco a seis miembros, que contiene de uno a tres átomos de carbono, seleccionados de entre nitrógeno, oxígeno y azufre. Opcionalmente, el heterociclo, puede portar uno o dos sustituyentes; por ejemplo, N-óxido, alquilo inferior, alquil(C_{1-3})-fenilo, alcoxi inferior, halo, amino ó alquilamino inferior. Otra vez, de una forma opcional, el heterociclo de cinco ó de seis miembros, puede encontrarse fusionado a un segundo cicloalquilo, un arilo (por ejemplo, fenilo), u otro heterociclo.
Los ejemplos de heterociclos y, opcionalmente, heterociclos sustituidos, apropiados, incluyen a la morfolina, tiadiazol, quinilina, 3,4-metilen-dioxifenilo, benzotiazol, pirrolidina, tetrahidrofurano, tiazolidina, pirrol, 1H-imidazol, 1-metil-1H-imidazol, pirazol, furano, tiofeno, oxazol, isoxazol, tiazol, 2-metiltiazol, 2-aminotiazol, 2-(metilamino)-tiazol, piperidina, 1-metilpiperidina, 1-metilpiperazina, 1,4-dioxano, piridina, piridina N-óxido, pirimidina, 2,4-dihidroxipirimidina, 2,4-dimetilpirimidina, 2,6-dimetilpiperidina, 1-metil-1H-tetrazol, 2-metil-2H-tetrazol, benzoxazol y triazo[4,5-b]-piridina.
El término "portador o vehículo farmacéuticamente aceptable", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un vehículo no tóxico, generalmente inerte, para el ingrediente activo, el cual no afecta de una forma adversa al ingrediente.
El término "cantidad efectiva", significa una cantidad antivírica predeterminada del agente antivírico, por ejemplo, una cantidad del agente, suficiente como para ser efectiva contra el virus, in vivo.
Los compuestos de la fórmula (I), pueden obtenerse en forma de sales terapéuticamente aceptables. El término "sal farmacéuticamente aceptable", tal y como se utiliza aquí, en este documento, incluye a aquéllas derivadas de bases farmacéuticamente aceptables. Los ejemplos de bases apropiadas, incluyen a la colina, etanolamina y etilendiamina. Las sales de Na^{+}, k^{+}, y Ca^{++}, se contemplan, también, como encontrándose dentro del ámbito de la invención, (véase, también, Pharmaceutical salts, - Sales farmacéuticas -, Birge, S.M. et al., J. Pharm. Sci. (1997), 66, 1 - 19).
El término "éster farmacéuticamente aceptable", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa ésteres del compuesto de la fórmula (I), en la cual, la función carboxilo, se encuentra reemplazada por una función alcoxicarbonilo:
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en la cual, la porción R, del éster, se selecciona entre alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, t-butilo, n-butilo); alcoxialquilo (por ejemplo, metoximetilo); alcoxialquilo (por ejemplo, acetoximetilo); aralquilo (por ejemplo, bencilo), ariloxialquilo (por ejemplo, fenoximetilo); arilo (por ejemplo, fenilo), opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo C_{1-4}, ó alcoxi C_{1-4}. Otros ésteres pro-fármacos, apropiados, pueden encontrarse en Design of prodrugs,
- Diseño de pro-fármacos -, Bundgaard, H. Ed. Elsevier (1985). Tales tipos de ésteres farmacéuticamente aceptables, se hidrolizan usualmente in vivo, cuando se inyectan en un mamífero, y se transforman en la forma de ácido del compuesto de la fórmula (I).
Con respecto a los ésteres descritos anteriormente, arriba, a menos que se especifique de otro modo, cualquier porción alquilo presente, contiene, de una forma ventajosa, de 1 a 16 átomos de carbono, de una forma particular, de 1 a 6 átomos de carbono. Cualquier porción arilo presente en tales tipos de ésteres, comprenden, de una forma ventajosa, un grupo fenilo.
De una forma particular, los ésteres, pueden ser un éster alquilo C_{1-6}, un éster bencílico insustituido, o un éster bencílico sustituido, con por lo menos un halógeno, alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-6}, nitro ó trifluorometilo.
Formas preferidas de presentación
En concordancia con una primera forma de presentación de la presente invención, los compuestos preferibles de la invención, son aquéllos, en los cuales, el anillo A, es un anillo de benceno, tal y como se representa mediante la fórmula I’:
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en donde, X, W, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen anteriormente, arriba. Los compuestos de la fórmula I’, existen en las formas (1), (2) y (3), tal y como se describe para los compuestos de la fórmula I.
Alternativamente, de una forma preferible, los compuestos de la presente invención, son aquéllos, en los cuales, el anillo A, es un anillo de cinco miembros, que contiene un átomo de azufre, tal y como se representa mediante las fórmulas I'' y I''’:
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en donde, X, W, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen anteriormente, arriba. Los compuestos de las fórmula I'' y I''’, existen en las formas (1), (2) y (3), tal y como se ha descrito para los compuestos de la fórmula I.
Alternativamente, de una forma incluso más preferible, los compuestos de la invención, tienen la siguiente fórmula:
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en donde, R^{3} y R^{5}, son tal y como se definen anteriormente, arriba.
Los compuestos de la presente invención, pueden sintetizarse como mezclas racémicas y, a continuación, separarse en sus respectivos diasteroisómeros individuales. La totalidad de tales tipos de diasteroisómeros, se contemplan, en el ámbito de la presente invención.
De una forma preferible, tales tipos de diasteroisómeros, incluyen una mezcla de los compuestos con la siguiente estereoquímica entre [Y & C(O)NH-R^{3}] y [C(O)NH-R^{3} & R^{4}]:
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Las fórmulas (Ia) y (Ib), representan, ambas, mezclas de compuestos con la estereoquímica relativa, a la cual se le hace referencia como "cis / cis".
38
Las fórmulas (Ic) y (Id), representan, ambas, mezclas de compuestos con la estereoquímica relativa, a la cual se le hace referencia como "trans / trans".
39
Las fórmulas (Ie) y (If), representan, ambas, mezclas de compuestos con la estereoquímica relativa, a la cual se le hace referencia como "trans / cis".
40
Las fórmulas (Ig) y (Ih), representan, ambas, mezclas de compuestos con la estereoquímica relativa, a la cual se le hace referencia como "cis / trans".
De una forma más preferible, tales tipos de diasteroisómeros, incluyen una mezcla de los compuestos con la estereoquímica relativa "cis / cis":
41
Se prefieren, también, los diasteroisómeros con la estereoquímica relativa "trans / trans":
42
De una forma mayormente preferible, los compuestos de la fórmula (I), presentes en una estereoquímica relativa "cis / cis", que pueden representarse de la forma que sigue:
43
De una forma todavía mas preferible, la invención, comprende enantiómeros puros de compuestos de la fórmula (Ia) o (Ib), con la estereoquímica relativa "cis / cis":
44
Con respecto a los compuestos de las fórmulas I, I’, I'', I''’, Ia, Ib, Ic, Id, Ie, If, Ig y, Ih, de una forma preferible, X, es H, y W, es OH; ó X y W, forman un grupo carbonilo. De una forma mayormente preferible, X y W, forman un grupo carbonilo.
Con respecto a los compuestos de las fórmulas I’, I'' e I''’, de una forma preferible, A, es fenilo ó tiofeno. De una forma mayormente preferible, A, es tiofeno.
Con respecto a los compuestos de las fórmulas I’, I'' e I''’, de una forma preferible, R^{1}, es H; ó uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados de entre el grupo consistente en: hidroxi; halo; alquilo inferior; alcoxi inferior; tioalquilo inferior; haloalquilo (por ejemplo, trifluorometilo); ó -C(O)R^{2}, en donde, R^{2}, es alquilo inferior, ariloxi ó benciloxi.
De una forma más preferible, R^{1}, es H, halo, ó alquilo C_{1-4}.
De una forma incluso más preferible, R^{1}, es H, fluoro o metilo.
De una forma mayormente preferible, R^{1}, es H ó metilo.
De una forma preferible, Y, es fenilo, opcionalmente, mono- ó di-sustituido, con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5}, es alquilo inferior, cicloalcoxi inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo ó trifluorometilo, y R^{6}, es alquilo inferior, ciclalquilo inferior, alcoxi inferior, hidroxi ó trifluorometilo; encontrándose opcionalmente fusionado, el citado fenilo, con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomos seleccionado de entre N, O y S; ó Y, es etileno-fenilo, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono- ó di-sustituida con alquilo inferior, en donde, el citado anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó di-sustituido con R^{5} ó C(O)R ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se han definido anteriormente, arriba; encontrándose, el citado anillo de fenilo, opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S.
De una forma más preferible, Y, es naftilo o fenilo, en donde, el anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó di-sustituido en la posición 3, 4 ó 5, con R^{5}, en donde, R^{5}, es halo, alquilo C_{1-4}, hidroxi ó CF_{3}.
De una forma todavía más preferible, Y, es fenilo, opcionalmente sustituido con; 3,4-Cl; 3-F,4-Cl; 3-Cl,4-F; 3,4-Br; 3-F,4-CH_{3}; 3,4-CH_{3}; 3-CF_{3}, NHC(O)-(CH_{2})_{3}CH_{3}; ó Y, es
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De una forma mayormente preferible, Y, es fenilo, opcionalmente sustituido con:
3,4-Cl y 3,4-Br.
De una forma preferible, R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
Ciclohexilo; alquilo C_{1-6}; (alquilo C_{1-6})fenilo, en donde, el anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente sustituido con:
alquilo inferior, CF_{3}, halo CN, azido, alcoxi inferior, (alquilo inferior)acilo, tioalquilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}, NHC(O)-alquilo inferior, arilo, ariloxi, hidroxi, nitro, amino, ó Het, encontrándose, el citado Het, opcionalmente sustituido o di-sustituido con alquilo inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo, trifluorometilo.
De una forma incluso más preferible, R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
Alquilo C_{1-6}; tioalquilo C_{1-6};
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De una forma mayormente preferible, R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
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Los compuestos particularmente preferidos de la invención, son compuestos que tienen la fórmula I''. De los compuestos que tienen la fórmula I'', aquéllos que tienen la configuración "cis / cis", son los que se prefieren, de una forma particular.
De una forma preferible, R^{4}, es ácido carboxílico o una sal o un éster de éste.
Diferentes formas de compuestos de la fórmula (I)
Los compuestos de la fórmula (I) en concordancia con la invención, pueden presentarse, éstos mismos, en diferentes formas, según el disolvente y el pH en el cual éstos se encuentran disueltos. Así, por ejemplo, el compuestos 1001 (tabla 1, forma 1), puede existir en equilibrio con el compuesto 2001 (véase la tabla 2, que se facilita posteriormente, a continuación), y el compuesto 3005 (tabla 3), en forma (3), cuando se disuelve en tampón fosfato, a un pH 7,4. Sin pretender ligarlo a ninguna teoría, se cree que, la forma predominante en solución, a un pH 7,4, se representa mediante la forma (1).
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(Esquema pasa a página siguiente)
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Formas de presentación específicas
En el ámbito de la presente invención, se encuentran incluidos todos los compuestos de la fórmula o fórmulas I’, I'', I''’, Ia, Ib, Ic, Id, Ie, If, Ig ó Ih, tal y como se representan en las tablas 1 a 10.
Actividad del virus antipapiloma
La actividad antivírica de los compuestos de la fórmula (I), puede demostrarse mediante procedimientos bioquímicos y biológicos, que muestran el efecto inhibitorio de los compuestos en la replicación del DNA.
De una forma preferible, los compuestos de la fórmula (I), tal y como se describen anteriormente, arriba, son inhibitorios, contra el virus del papiloma humano (HPV). De una forma más preferible, los compuestos, son activos contra los HPV del tipo de reducido riesgo o del tipo de alto riesgo. De una forma incluso más preferible, contra los HPV del tipo de reducido riesgo (por ejemplo, el tipo 6, el tipo 11 y el tipo 13, y especialmente, el HPV del tipo 11). De una forma alternativa, el tipo de alto riesgo, se selecciona de entre el grupo consistente en los tipos 16, 18, 31, 33, 35, 45, 52 ó 58, de una forma preferible, del tipo 16). De una forma mayormente preferible, los compuestos de la invención, se dirigen contra los HPV de los tipos 6 y 11, incluso, de una forma mayormente preferible, contra el HPV-11.
Un procedimiento bioquímico para demostrar la actividad del virus anti-papiloma, para los compuestos de la fórmula (I), es el que se describe en el los ejemplos que se facilitan a posteriormente, a continuación. Este ensayo particular, determina la capacidad de un compuesto de ensayo, para inhibir la actividad (IC_{50}) de la replicación del DNA del HPV11. De una forma más específica, en este ensayo aquí descrito, la actividad inhibitoria del compuesto de ensayo, se evalúa en base a su capacidad para interferir con el origen del E1-D2-DNA de la interacción de replicación, inhibiendo con ello la iniciación de la replicación del DNA vírico.
Los procedimientos para demostrar el efecto inhibitorio de los compuestos de la fórmula (I), en la replicación vírica del papiloma, que involucran ensayos in vitro, se describen en los ejemplos 11 y 15 facilitados aquí, en este documento.
Cuando un compuesto de la fórmula (I), o una de sus sales terapéuticamente aceptables, se emplea en un agente antivírico, éste puede administrarse oralmente, tópicamente o sistemáticamente, a mamíferos, por ejemplo, humanos, conejos o ratones, sólo, o en un vehículo que comprenda uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, cuya proporción, se determina mediante la solubilidad y naturaleza química del compuesto, vía de administración elegida, y práctica biológica standard.
Tanto si se denomina tratamiento como si se denomina profilaxis, un compuesto de la fórmula (I), puede también utilizarse para evitar la transmisión perinatal de HPV desde la madre al bebé, mediante su administración, a la madre, antes de dar a luz. De una forma más específica, un compuesto de la fórmula (I), puede utilizarse para prevenir la papilomatosis, en el bebé.
Para la administración oral, el compuesto, o una sal terapéuticamente aceptable de éste, puede formularse en las formas de unidades de dosificación tales como las cápsulas o la tabletas, conteniendo, cada una de ellas, una cantidad predeterminada del ingrediente activo, que se encuentre comprendida dentro de unos márgenes que van de 25 a 500 mg, en un portador o vehículo farmacéuticamente aceptable.
Para la administración tópica, el compuesto, puede formularse en vehículos farmacéuticamente aceptables, que contengan de un 0,1 a un 5 por ciento, de una forma preferible, de un 0,5 a un 5 por ciento, del ingrediente activo. Tales tipos de formulaciones, pueden ser en forma de una solución, crema o loción.
Para la administración parenteral, el compuesto de la fórmula (I), puede administrarse mediante, bien ya sea inyección intravenosa, bien ya sea inyección subcutánea, o bien ya sea inyección intramuscular, en composiciones con vehículos o portadores farmacéuticamente aceptables. Para la administración mediante inyección, se prefiere el uso de compuestos en solución, en un vehículo acuoso, estéril, el cual puede también contener otros solutos tales como tampones o conservantes, así como también cantidades suficientes de sales farmacéuticamente aceptables o de glucosa, para convertir la solución en isotónica.
Los vehículos o portadores apropiados para la formulaciones anteriormente anotadas, se describen en los textos farmacéuticos standard, tales como, por ejemplo, "Remington’s The Science and Practice of Pharmacy", - La ciencia y la práctica de la farmacia, de Remington -, 19ª edición, Mack Publishing Company, Penn, 1995, ó en "Pharmaceutical Dosage Forms And Drugs Delivary Systems" - Formas farmacéuticas de dosificación y sistemas de suministro de fármacos -, 6ª edición, H.C. Ansel et al., Edc., Villiams & Vilkins, Baltimore, Maryland, 1995.
La dosificación de los compuestos, variará en la forma de administración y el agente activo particular elegido. Adicionalmente, además, éste variará con el huésped particular bajo tratamiento. De una forma general, el tratamiento, se inicia con reducidos incrementos, hasta que se alcance el efecto óptimo, bajo las circunstancias existentes. Generalmente, el compuesto de la fórmula I, se administra, de la forma mayormente deseada, a un nivel de concentración que proporcione, de una forma general, unos resultados efectivos desde el punto de vista vírico, sin provocar ningún tipo de efectos colaterales perjudiciales o nocivos.
Para la administración oral, el compuesto de una sal aceptable desde el punto de vista terapéutico, puede administrarse en una cantidad correspondiente a la comprendida dentro de unos márgenes que van de 10 a 200 mg, por kilogramo de peso, por día, prefiriéndose una cantidad correspondiente a la comprendida dentro de unos márgenes que van de 25 a 150 mg, por kilogramo.
Para la aplicación tópica, el compuesto de la fórmula (I), puede administrarse en una formulación apropiada, al área infectada del cuerpo, por ejemplo, la piel, los genitales, en una cantidad suficiente como para cubrir el área infectada. El tratamiento, puede repetirse, por ejemplo, cada cuatro o seis horas, hasta que se curen las lesiones.
Para la administración sistémica, el compuesto de la formula (I), puede administrarse a una dosificación correspondiente a una cantidad comprendida dentro de unos márgenes que van de 10 mg a 150 mg, por kilo de peso corporal, por día, sin bien pueden acontecer las variaciones anteriormente mencionadas, arriba. No obstante, un nivel de dosificación correspondiente a una cantidad comprendida dentro de unos márgenes que van de 10 mg a 100 mg, por kilo de peso corporal, por día, es el que se emplea, de la forma mayormente deseada, con objeto de lograr unos resultados efectivos.
Si bien se indica que, las formulaciones dadas aquí a conocer, en este documento, son medicaciones efectivas y relativamente seguras, para el tratamiento de las infecciones víricas del papiloma, se contempla, también, la posible administración simultánea de estas formulaciones, con otros medicamentos o agentes, con objeto de obtener unos resultados beneficiosos. Estos tipos de otras medicaciones o agentes, incluyen al TCA, podofilina, podofilox, Interferon, o Imiquimod.
Adicionalmente a los agentes víricos anteriormente mencionados, arriba, los compuestos de la presente invención, pueden también utilizarse de modo post-crioterapia o post-cirugía, en combinación con cualquier otro tratamiento, para la eliminación física de verrugas.
Metodología y síntesis
La síntesis de los compuestos de la fórmula I’, se ilustra en el esquema I. Los radicales Y, R^{3} y R^{4}, son tal y como se definen previamente.
Esquema I
50
A): La inda-1,3-diona (i), comercialmente obtenible en el mercado [o preparada en concordancia con el procedimiento conocido en la literatura: D. R. Bukle, N. J. Morgan, J. W. Ross, H. Smith, B. A. Spicer; J. Med. Chem. 1973, 16, 1334 - 1339], se condensa con aldehído (ii), en un disolvente prótico (por ejemplo, etanol ó propanol), en presencia de una cantidad catalítica de una amina orgánica (por ejemplo, piperidina), para formar el benzilideno (iii).
B): El bencilideno (iii), se convierte al epóxido (iv), mediante oxidación catalizada mediante base, con peróxido de hidrógeno, en un disolvente prótico (tal como metanol).
C): El epóxido (iv), experimenta una cicloadición térmica 1,3-dipolar, en presencia de maleimida (v), a unas temperaturas comprendidas dentro de unos márgenes que van de 80 a 100°C, en un disolvente tal como el tolueno o el xileno (referencia: M. Y. Krysin, I. K. Anohina, L. P. Zalukaev; Khimiya Geterotsiklicheskikh Soedinenii, 1987, 11, 1463 - 1466). Así, de este modo, se obtienen el "cis / cis" racémico (vi) y el "cis / trans" racémico (vii), después de la purificación (cristalización, cromatografía flash (de evaporación instantánea), o HPCL preparativa). De una forma general, las maleimidas tales como (v), son comercialmente obtenibles en el mercado o, de una forma alternativa, pueden prepararse fácilmente, utilizando procedimientos de la literatura (por ejemplo, P. Y. Reddy, S. Kondo, T. Toru, Y, Ueno; J. Org. Chem., 1997, 62, 2652 - 2654).
D): El compuesto "cis / cis" racémico (vi), se hidroliza, para proporcionar su forma carboxilato abierta (viii), también, como una mezcla "cis / trans". La hidrólisis, se realiza mediante condiciones acuosas, básicas, tales como el hidróxido sódico acuoso y el acetonitrilo, como co-disolvente.
De una forma alternativa, las etapas A) y B), pueden realizarse como una reacción "one pot" (reacción en una sola etapa), utilizando el disolvente apropiado (por ejemplo, propanol) tal y como se describe en el esquema II:
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Esquema II
51
A): Se procedió a hacer reaccionar la diaozoindan-1,3-diona (ix) [preparada en concordancia con el procedimiento de la literatura: Chem. Soc. Chem. Commun., 1990, 652 - 653], con aldehído (ii) y maleimida (v), en presencia de una cantidad catalítica de rodio (II), para proporcionar el compuesto "cis / cis" racémico (vi).
B): El correspondiente carboxilato (viii), se realiza siguiendo el procedimiento de hidrólisis descrito en el esquema I, etapa D).
C): Esta etapa, presenta un procedimiento adicional para sintetizar compuestos de la fórmula I’, en una forma alternativa cerrada. El compuesto racémico "cis / cis" (vi), se hidroliza, en primer lugar, utilizando el procedimiento descrito en esquema I, etapa D, seguido con el tratamiento con ácido, utilizando HCl acuoso, para producir hidroxilactona (x), como "cis / cis" racémico.
C’): De una forma alternativa, el intermediario de sal de sodio (vii), se hace pasar a través de una columna de fase inversa (HPL), utilizando un ácido trifluoroacético que contenga un eluyente, para producir la hidroxilactona (x).
Los compuestos de la fórmula I’, en donde, X y W, forman un epóxido, se sintetizan según se ilustra en el esquema III.
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Esquema III
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A): El compuesto racémico "cis / cis" (vi), se convierte en los deseados inhibidores, en primer lugar, vía la hidrólisis bajo condiciones básicas, seguido de la acidificación y tratamiento con diazometanona. Los compuestos (xi), (xii) y (xiii), se separan de la mezcla, mediante cromatografía flash (de evaporación instantánea) o mediante HPLC preparativa.
El sistema IV, ilustra un procedimiento general para la síntesis de compuestos de la fórmula I’, en donde, X, es H y W, es hidroxi:
Esquema IV
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53
A): La reducción del compuesto racémico "cis / cis" (vi), se realiza utilizando una fuente de hidruro (por ejemplo, borohidruro sódico), para proporcionar mezclas de los derivados monohidroxi (xiv y xv), adicionalmente a la hidroxi-lactona (xvi), que tienen la estereoquímica relativa tal y como se muestra.
B): Después de la separación, los racémicos (xiv y xv), se hidrolizan, utilizando el mismo procedimiento que en el esquema I, etapa D), para proporcionar los racémicos (xvi y xvii), después de la separación preparativa.
El esquema V, ilustra el procedimiento para sintetizar compuestos de la fórmula I’, con la estereoquímica relativa en trans / trans.
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Esquema V
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54
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A): Se procede a hacer reaccionar la amida (xix) obtenida utilizando el procedimiento de la literatura (por ejemplo: G. B. Vileneuve an T. H. Chan, Tetrahedron Letters, 1997, 38,6484), con epóxido (iv), en tolueno, bajo condiciones de reflujo, para proporcionar el éster cicloaducto (xx), como isómeros racémicos trans / trans.
B): La hidrólisis del éster (xx), se realiza según se describe en el esquema I, etapa D), para proporcionar el carboxilato deseado (xxi), también, como isómeros racémicos trans / trans.
Los compuestos de la fórmula I'' y la fórmula I''’, pueden realizarse de una forma análoga a las de la fórmula I’, excepto en cuanto a lo referente al hecho de que, como compuesto de partida, en lugar de indan-1,3-diona, se utiliza el compuesto xii.
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Esquema VI
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A): Se procede a condensar el compuesto (xii) [preparado mediante la homologación de un 5-metil-2-tiofenocarboxaldehído, comercialmente obtenible en el mercado, con ácido malónico, seguido de la reducción del doble enlace exocíclico, con amalgama de sodio, o hidrógeno sobre paladio, seguido por la ciclación con cloruro oxálico / AlC_{3}, ó ácido polifosfórico, seguido por la oxidación con CrO_{3}/hidroperóxido de tert.-butilo], con aldehído (ii), en un disolvente prótico (por ejemplo, etanol ó propanol), en presencia de una cantidad catalítica de una amina orgánica (por ejemplo, piperidina), para formar el bencilideno (xxiii).
B): El bencilideno (xxiii), se convierte en epóxido (xxiv), mediante oxidación catalizada mediante una base, con peróxido de hidróxido, en un disolvente aprótico (tal como el metanol).
C): El epóxido (xxiv), experimenta una cicloadición térmica 1,3-dipolar, en presencia de maleimida (v), a unas temperaturas comprendidas dentro de unos márgenes que van de 80 a 100°C, en un disolvente tal como el tolueno o el xileno (referencia: M. Y. Krysin, I. K. Anohina, L. P. Zalukaev; Khimiya Geterotsiklicheskikh Soedinenii, 1987, 11, 1463 - 1466). Así, de este modo, se obtienen el "cis / cis" racémico (xxvi) y el "cis / trans" racémico (xxvii), después de la purificación (cristalización, cromatografía flash (de evaporación instantánea), o HPCL preparativa). De una forma general, las maleimidas tales como (v), son comercialmente obtenibles en el mercado o, de una forma alternativa, pueden prepararse fácilmente, utilizando procedimientos de la literatura (por ejemplo, P. Y. Reddy, S. Kondo, T. Toru, Y, Ueno; J. Org. Chem., 1997, 62, 2652 - 2654).
D): El compuesto "cis / cis" racémico (xxvi), se hidroliza, para proporcionar su forma carboxilato abierta (xxviii), también, como una mezcla racémica "cis / trans". La hidrólisis, se realiza mediante condiciones acuosas, básicas, tales como el hidróxido sódico acuoso y el acetonitrilo, como co-disolvente.
Una ruta alternativa a los componentes de la fórmula I'', se muestran en el esquema VII.
Esquema VII
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A): Se procede a condensar el compuesto (xii) [preparado mediante la homologación de un 5-metil-2-tiofenocarboxaldehído, comercialmente obtenible en el mercado, con ácido malónico, seguido de la reducción del doble enlace exocíclico, con amalgama de sodio, o hidrógeno sobre paladio, seguido por la ciclación con cloruro oxálico / AlC_{3}, ó ácido polifosfórico], con aldehído (ii), en presencia de una cantidad catalítica de un catalizador ácido (por ejemplo, ácido p-toluenosulfónico), en benceno o tolueno, para formar el bencilideno (xxx).
B): El bencilideno (xxx), se convierte en epóxido (xxxi), mediante oxidación (por ejemplo, Cr_{3}/ hidroperóxido de tert.-butilo).
C): El epóxido (xxxi), experimenta una cicloadición térmica 1,3-dipolar, en presencia de maleimida (v), a unas temperaturas comprendidas dentro de unos márgenes que van de 80 a 100°C, en un disolvente tal como el tolueno o el xileno (referencia: M. Y. Krysin, I. K. Anohina, L. P. Zalukaev; Khimiya Geterotsiklicheskikh Soedinenii, 1987, 11, 1463 - 1466). Así, de este modo, se obtienen el "cis / cis" racémico (xxxii) y el "cis / trans" racémico (xxxiii), después de la purificación (cristalización, cromatografía flash (de evaporación instantánea), o HPCL preparativa). De una forma general, las maleimidas tales como (v), son comercialmente obtenibles en el mercado o, de una forma alternativa, pueden prepararse fácilmente, utilizando procedimientos de la literatura (por ejemplo, P. Y. Reddy, S. Kondo, T. Toru, Y, Ueno; J. Org. Chem., 1997, 62, 2652 - 2654).
D): El compuesto "cis / cis" racémico (xxxii), se hidroliza, para proporcionar su forma carboxilato abierta (xxxiv), también, como una mezcla racémica "cis / trans". La hidrólisis, se realiza mediante condiciones acuosas, básicas, tales como el hidróxido sódico acuoso y el acetonitrilo, como co-disolvente.
Ejemplos
La presente invención, se ilustra adicionalmente, en detalle, mediante los ejemplos no limitativos que se facilitan a continuación. Todas las reacciones, se realizaron en atmósfera de argón o nitrógeno. Las temperaturas, se indican en grados Celsius. Los porcentajes o factores de relación, expresan una relación referida a volumen con respecto a volumen, a menos que se indique de otro modo.
Las abreviaciones y símbolos utilizados, incluyen:
DEAD: azodicarboxilato de dietilo;
DIEA: diisopropiletilamina;
DMAP: 4-(dimetilamino)piridina;
DMSO: dimetilsulfóxido;
DMF: dimetilformamida;
ES MS: espectrometría de masas de proyección de electrones;
Et: etilo;
EtOAc: acetato de etilo;
Et_{2}O: dietiléter;
HPLC: cromatografía líquida de alto rendimiento;
Ipr: isopropilo;
Me: metilo;
MeOH: metanol
MeCN: acetonitrilo;
Ph: fenilo;
TBE: tris-borato-EDTA;
TBTU: tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N’N’-tetrametiluronio;
TFA: tetrahidrofurano
MS (FAB) ó FAB/MS: espectrometría de masas mediante bombardeo atómico, rápido;
HRMS: espectrometría de masas, de alta resolución;
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(Esquema pasa a página siguiente)
Ejemplo 1 Preparación de los compuestos 2013 (Tabla 2) y 1002 (Tabla 1)
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Etapa a
A una solución de indan-1,3-diona (1a) (960 mg, 6,6 mmol) en EtOH (8,2 ml), se le añadió 3,4-diclobenzaldehído (1b) (1,3 g, 7,2 mmol), seguido de pipiridina (3 gotas). La mezcla de reacción, se calentó a reflujo, durante un transcurso de tiempo de 30 minuto. Después del enfriado, la reacción, se diluyó con EtOH (8 ml) y, el precipitado, se filtró. El sólido resultante, se trituró dos veces con EtOH y se secó, bajo la acción alto vacío, para proporcionar 2-(3,4-dicloro-benciliden)-indan-1,3-diona (1c) (1,7 g, 82% de rendimiento productivo).
Etapa b
A una suspensión de 2-(3,4-dicloro-bencilideno)-indano-1,3-diona (1c) (1,6 g, 5,3 mmol) en MeOH (13 ml), se le añadió peróxido de hidrógeno (solución al 30%, 3 ml). La mezcla, se enfrió a una temperatura de 0°C y se añadió hidróxido de sodio (1N, 300 \mul), mediante goteo. Después de haberse completado la adición, se continuó con el régimen de agitación, a la temperatura ambiente, durante un transcurso de tiempo de 1 hora. A continuación, la mezcla, se vertió por colada, en agua (5 ml) y, el sólido resultante, se colectó mediante filtración y se lavó con agua y MeOH. Después de un secado bajo la acción de un alto vacío, se obtuvo la 3-(3,4-diclorofenil)-espiro (oxiran-2,2’-indan)-1’3’-diona (1d) (1,6 g, 95% de rendimiento productivo).
Etapa c
Compuesto 2013
Se procedió a calentar a reflujo, durante un tiempo de 16 horas, una mezcla de 3-(3,4-diclorofenil)-espiro (oxiran-2,2’-indan)-1’3’-diona (1d) (11 g, 33,4 mmol) y benzo(1,3)dioxol-5-il-pirrol-2,5-diona (1e) (7,3 g, 33,4 mmol) en tolueno (167 ml). Después del enfriado y concentración, el residuo, se purificó mediante cromatografía flash (de evaporación instantánea) (SiO_{2}, gradiente 50% EtOAc / hexano, a 30% hexano / EtOAc), para proporcionar el compuesto 2013 (tabla 2) (isómero cis / cis, 17,9 g, 50% de rendimiento productivo y (1f) (isómero trans / cis, 4,1 g, 23% de rendimiento productivo).
Etapa d
Compuesto 1002
A una solución de (2013) (143 mg, 0,27 mmol) en CH_{3}CN (27 ml), se le añadió NaOH (0,02 N, 135 ml, 0,27 mmol), utilizando una bomba de jeringa, durante un tiempo de 1 hora. Después de que se hubiera completado la adición, la mezcla de reacción, se agito durante un tiempo adicional de 2 horas y, la solución resultante, se concentró y se liofilizó, para proporcionar el compuesto 1002 (tabla 1) (161 mg, 100% de rendimiento productivo), como un sólido de color blanco.
Ejemplo 2 Preparación del compuesto 4003 (Tabla 4)
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Preparación el compuesto (2a)
A una suspensión de azida sódica (2,4 g, 36,3 mmol) en CH_{3}CN (73 ml), se le añadió cloruro de metanosulfonilo (2,8 ml, 36,3 mmol). Después de agitar durante un transcurso de tiempo de 16 horas, la mezcla de reacción, se vertió por colada, sobre una suspensión de indan-1,3-diona (5,3 g, 36,3 mmol) y carbonato de cesio (11,8 g, 36,3 mmol), en CH_{3}CN). La mezcla de reacción, se agitó, hasta que se completó la reacción (2 horas) y, a continuación, se filtró a través de celite. La torta de filtración, se lavó con EtOAc y, los disolventes orgánicos, se eliminaron al vacío. La goma resultante, se diluyó con EtOAc y se lavó sucesivamente con NaOH (1N), H_{2}O y salmuera. La capa orgánica, se secó (MgSO_{4}), se evaporó y, el aceite crudo, se purificó mediante cromatografía flash (de evaporación instantánea) (SiO_{2}, 50% hexano / EtOAc), para proporcionar 2-diazoindan-1,3-diona (2a) (2,6 g, 42% de rendimiento productivo).
Etapa a
Se procedió a añadir, a una mezcla de diazoindoindan-1,3-diona (2a) (317 mg, 1,8 mmol), piperonal (2b) (553 mg, 3,7 mmol) y 1-benzo(1,3)-dioxol-5-il-pirrol-2,5-diona (1e), (400 mg, 1,8 mmol) en benceno (6 ml) y Rh_{2}(OAc)_{4}(4,5 mg), y el conjunto, se calentó a reflujo, durante un tiempo de 1 hora. Después de proceder a enfriar y concentrar, la mezcla de reacción, se purificó mediante cromatografía de flash (de evaporación instantánea) (SiO_{2}, gradiente 50% hexano / EtOAc a un 30% hexano / EtOAc), para proporcionar el compuesto deseado (2c), como un sólido de color beige (76,5 mg, 8% de rendimiento productivo).
Etapa b
Compuesto 4003
Siguiendo el mismo procedimiento que el del ejemplo 1, etapa d, se obtuvo el compuesto 4003, como un sólido de color blanco.
Ejemplo 3 Preparación del compuesto 3009 (Tabla 3)
59
El compuesto 2016, se preparó según se describe en el ejemplo 1, etapas a, a c, utilizando N-(4-acetilfenil)maleimida en la cicloadición (etapa c), para proporcionar un sólido blanco, con un rendimiento productivo del 40%.
Etapa d
A una solución de 2016 (100 mg, 0,19 mmol) en CH_{3}CN, se le añadió NaOH (0,02 N, 9,4 ml), 0,19 mmol), durante un tiempo de 1 hora, utilizando una bomba de jeringa. Después de haberse terminado la adición, la solución, se concentró y se liofilizó, para proporcionar un sólido de color blanco, el cual, se purificó mediante HPLC de fase inversa, utilizando un gradiente de CH_{3}CN/H_{2}O, que contenía TFA (0,06%). Después de recolectar las fracciones y liofilización, se obtuvo el compuesto 3009 (43 mg, 42% de rendimiento productivo) como un sólido de color blanco.
Ejemplo 4 Preparación del compuesto 1022 (Tabla 1) y del compuesto 7001 (Tabla 7)
60
A una solución de 2013 (racémico) (143 mg, 0,27 mmol) en CH_{3}CN (27 ml), se le añadió NaOH (0,02 N, 135 ml, 0,027 mmol), utilizando una bomba de jeringa, durante un tiempo de 1 hora. Después de haberse completado la adición, la mezcla de reacción, se concentró. A la capa acuosa, se le añadió HCl (1N, 1 ml) y, la capa ácida resultante, se extrajo dos veces con EtOAc. La capa orgánica combinada, se lavó con H_{2}O y salmuera, se secó (MgSO_{4}), y se filtró. Al filtrado, se le añadió una solución de CH_{2}N_{2} en Et_{2}O (exceso) y, la mezcla, se evaporó hasta secado. El compuesto crudo resultante, se purificó mediante HPLC preparativa, utilizando un gradiente de CH_{3}CN/H_{2}O, que contenía TFA (0,06%). Después de recolectar y liofilizar las fracciones deseadas, se obtuvieron los compuestos 1022 (11 mg, 12% de rendimiento productivo) (4a) (9 mg, 10% de rendimiento productivo), y 7001 (47 mg 26% de rendimiento productivo) como mezclas racémicas, como sólidos de color blanco.
Ejemplo 5 Preparación del compuesto 8001
61
Etapa a
A una solución de 2013 (racémico) (500 mg, 0,93 mmol) en una mezcla de THF / MeOH (20 / 5 ml), enfriada a una temperatura de 0°C, se le añadió NaBH_{4}(35 mg, 0,93 mmol). Después de agitar durante un tiempo de 30 minutos, la reacción, se extinguió con solución de ácido cítrico (10%) y se diluyó con EtOAc. La capa acuosa, se extrajo dos veces con EtOAc y, las capas orgánicas combinadas, se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}), se filtraron, y se concentraron. La HPLC preparativa, proporcionó alcoholes racémicos (5a) + 9001 (360 mg, 72% de rendimiento productivo, tiempos de retención: 14,1 y 12,4 minutos), así como también hidroxilactona (5b) (95 mg, 18% de rendimiento productivo, tiempo de retención: 13,8 minutos).
La mezcla de alcoholes, se separó mediante HPLC preparativa, para generar dos compuestos isoméricos, como sólidos de color blanco:
Etapa b
A la mezcla de alcoholes (5a) + 9001 (factor de relación 2 : 1, 36 mg, 0,07 mmol) en CH_{3}CN (10 ml), se le añadió NaOH (0,02 N, 3,4 ml, 0,07 mmol), en un transcurso de tiempo de 2 horas, utilizando una bomba de jeringa. El CH_{3}CN, se evaporó y, el residuo, se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones deseadas, se liofilizaron y, los sólidos resultantes, se retiraron con NaOH (1 equivalente), y se liofilizaron, para proporcionar el compuesto 8001 (21,3 mg, 59% de rendimiento productivo, tiempo de retención: 13,7 minutos) y (5c) (6,0 mg, 17% de rendimiento productivo, 10,9 minutos, como sólidos de color blanco.
Ejemplo 6 Preparación del compuesto 5001 (Tabla 5)
62
Preparación de la amida (6a)
Se procedió a agitar una mezcla de fumarato de monoetilo (1 g, 6,9 mmol) y hexacloroacetona (0,5 ml, 3,5 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (13 ml), bajo atmósfera de nitrógeno, y se enfrió a una temperatura 78°C. Se añadió trifenilfosfina (1,8 g, 6,9 mmol) en CH_{2}Cl_{2}, por procedimiento de goteo y, la mezcla, se agitó durante un tiempo de 20 minutos. La solución de cloruro de acilo, se trató, a continuación, con una solución de 3,4-metilendioxianilina (946 mg, 6,9 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (6,9 ml), seguido de Et_{3}N (0,96 ml, 6,9 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (6,9 ml). La mezcla de reacción, se dejó calentar, a la temperatura ambiente, después de lo cual, el disolvente, se eliminó, bajo la acción de alto vacío. El residuo resultante, se purificó mediante cromatografía flash (de evaporación instantánea) (SiO_{2}, 20% EtOAc / hexano, para proporcionar la deseada amida (6a) (961 mg, 53% de rendimiento productivo) como un sólido de color naranja.
Etapa a
La amida (6a), se hizo reaccionar con epóxido (1d), utilizando el mismo procedimiento que en el ejemplo 1, etapa c, para proporcionar éster (6b) (77 mg, 14% de rendimiento productivo), como un sólido de color naranja.
Etapa b
Utilizando el mismo procedimiento que en el ejemplo 1, etapa d, se obtuvo el compuesto 5001, como un sólido de color blanco (8 mg, 25% de rendimiento productivo).
Ejemplo 7 Preparación del compuesto 4005 (Tabla 4)
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Etapa a
Se siguió el mismo procedimiento que en el ejemplo 1, etapa a, pero utilizando indan-1,3-ona y trans-cinamaldehído (7a), como material de partida, para proporcionar el compuesto (7b), después de la purificación (11% de rendimiento productivo), como un sólido de color naranja.
Etapas b y c
Se utilizó el mismo procedimiento que en el ejemplo 1, etapas b y c, pero utilizando N-(n-acetilfenil)maleimida (7d), en la cicloadición (etapa c), para proporcionar el compuesto (7e) (38% de rendimiento productivo), como un sólido de color blanco.
Etapa d
La hidrólisis, se realizó de la misma forma que la que se ha descrito en el ejemplo 1, etapa d, para proporcionar el compuesto 4005 (racémico) (50% de rendimiento productivo), como un sólido de color blanco.
Ejemplo 8 Preparación del compuesto # D1002 (Tabla 1D)
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A: Se procedió a someter a reflujo, durante el transcurso de toda la noche, una solución de 8a (9,5 g, 75,4 mmol), ácido malónico (15,7 g, 151 mmol) y piperidina (1,3 ml) en piridina (40 ml). La mezcla resultante, se dejó que se calentara a la temperatura ambiente, después de lo cual, se procedió a añadir agua (200 ml). La mezcla, se acidificó mediante la adición de HCl concentrado, y se dejo en régimen de agitación, durante un transcurso de tiempo de 1 hora. La mezcla, se filtró y, el sólido, se lavó con agua. El lavado con agua, proporcionó 8b, como una materia en polvo de color amarillo (12,8 g, 100%).
B: A una solución vigorosamente agitada de 8b (5,9 g, 35 mmol) y NaOH 1N (46 ml, 46 mmol) en agua (40 ml), se le añadió un 2% de amalgama de sodio (82 g, 105 mmol), en reducidas porciones, durante un tiempo de 1 hora. Después completar la adición, se procedió a agitar la mezcla, durante un transcurso de tiempo adicional de 1 hora. Se eliminó el mercurio, procediendo a decantar y, la solución acuosa, se acidificó con HCl concentrado. Se procedió a añadir NaCl sólido, a saturación y, la mezcla resultante, se extrajo con éter. Los extractos etéricos combinados, se lavaron con salmuera y se secaron sobre MgSO_{4}. La eliminación del disolvente, bajo la acción de presión reducida, proporcionó 8c, como sólido de color marrón (2,72 g, 62%).
B: De una forma alternativa, se procedió a agitar una suspensión 8b (7,5 g, 44,6 mmol) y Pd(OH)_{2}(500 mg), en etanol, bajo una atmósfera de nitrógeno, durante un tiempo de 18 horas. El filtrado a través de microfibra de vidrio y la eliminación del disolvente, proporcionó 3, como un sólido de color blanco (7,0 g, 93%).
C: A una solución de 8c (1,75 g, 10,3 mmol) y cloruro oxálico (1,35 ml, 15,4 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (50 ml), se le añadió una gota de DMF. La solución resultante, se agitó a la temperatura ambiente, durante un transcurso de tiempo de 2 horas. El disolvente, se eliminó, a continuación, bajo la acción de presión reducida y, el residuo resultante, se disolvió en CS_{2} (50 ml). Se procedió, a continuación, a introducir AlCl_{3} (2,05 g, 15,4 mmol) y, la mezcla resultante, se sometió a reflujo, durante el transcurso de toda la noche. A continuación, se añadió hielo (80 g), seguido de una concentración de HCl (30 ml) y, la mezcla resultante, se agitó durante un tiempo de 30 minutos. La extracción con CH_{2}Cl_{2}, se siguió mediante el lavado con NaOH 1N, salmuera y secado (MgSO_{4}). La cromatografía flash (de evaporación instantánea) (20% EtOAc en hexanos), proporcionó 8d (272 mg, 17%), como un sólido de color amarillo.
C’: de una forma alternativa, se procedió a añadir 8c sólido (1,0 g, 5,88 mmol), en pequeñas porciones, a ácido polifosfórico (8,5 g), caliente (75°C). Se continuó con el calentamiento, a una temperatura de 75°C, durante un transcurso de tiempo de una hora, después de que la adición se hubiera completado. El enfriamiento a la temperatura ambiente, vino seguido de la dilución con agua y extracción con CH_{2}Cl_{2} (3 x). Los orgánicos combinados, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron. La cromatografía flash (de evaporación instantánea) (50% EtOAc en hexanos), proporcionó 8d, como un sólido de color blanco (0,31 g, 35%).
D: una solución de 8d (1,06 g, 6,97 mmol), 3,4-dibromobenzaldehído (1,84 g, 6,97 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (100 mg) en benceno (25 ml), se sometió a reflujo, durante un tiempo de 24 horas, con eliminación azeotrópica del agua. Después del enfriado y adición de éter (25 ml), precipitó un sólido, el cual se filtró, para proporcionar 8e, como un sólido tostado (1,35 g, 49%).
E: A una solución de CrO_{3} (50 mg, 0,50 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (15 ml), se le añadió hidroperóxido de tert.-butilo (2,6 ml de una solución al 70%, en agua). Después de agitar durante un transcurso de tiempo de 2 minutos, se procedió a añadir 8e (1,0 g, 2,51 mmol). Después de agitar durante un tiempo de 18 horas, a la temperatura ambiente, la solución, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y agua, y se extrajo, tres veces, con pequeñas porciones de CH_{2}Cl_{2}. Los orgánicos combinados, se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron in vacuo. La trituración del sólido resultante con éter, proporcionó 0,61 g (60%) de una dicetona sólida.
El material de esta forma obtenido (0,45 g), se disolvió en EtOH (15 ml), al cual se le añadió H_{2}O_{2} al 30% (0,38 ml) y una gota de NaOH 1N. Después de agitar durante un tiempo de 3 horas, la solución, se filtró, para proporcionar 8f, como un sólido de color amarillo (421 g, 90%).
F: Se procedió a calentar, a reflujo, una solución de 8f (0,30 g, 0,70 mmol) y N-[4-(N’-morfolino)fenil]maleimida (0,18 g, 0,70 mmol) en tolueno (8 ml), durante un transcurso de tiempo de 48 horas. Después de enfriarse a la temperatura ambiente, se filtró un sólido formado y, a continuación, se trituró con THF, para proporcionar 8 g (75 mg, 16%).
G: A una solución de 8 g (69 mg, 0,10 mmol) en 40% THF : CH_{3}NO, se añadió NaOH (5,3 ml de una solución 0,02 M en agua), en un tiempo de 10 horas, vía bomba de jeringa. La mezcla de reacción, se purificó directamente mediante HPLC preparativa (Columna de Chiralcel OD, 50% CH_{3}CN isocrático /H_{2}O, 0,06% TFA), la cual proporcionó 8h enantioméricamente puro (2,5 mg, 4%).
Ejemplo 9 Preparación de 5-metil-6-fluoro-1,3-indanediona
Este material, es de utilidad como un material de partida para la preparación de compuesto de la fórmula I’, en la cual R^{1}, es c-F y b-Me.
66
A, B: Se procedió a emplazar anhídrido 4-metilftlálico 9a (67,5 mmol, 10,94 g) y ácido sulfúrico concentrado (10 ml), en un matraz de fondo redondeado, de tres bocas y, la mezcla, se agitó mecánicamente, a una temperatura de 80°C, se añadió una mezcla de ácido nítrico humeante (d = 15,42 ml) y ácido sulfúrico concentrado (3,0 ml), lentamente, desde un embudo de goteo, a una tasa apropiada como para mantener la temperatura de la mezcla, a un nivel de 100 - 110°C. El ácido nítrico concentrado (d = 1,42, 18 ml), se añadió de la forma más rápida posible, sin provocar que, la temperatura, subiera por encima de un nivel de 110°C. La mezcla de reacción, se calentó a una temperatura de 100°C, durante un tiempo de dos horas, después, se permitió que ésta se mantuviera a la temperatura ambiente, y se vertió, mediante colada, en 300 ml de agua. El precipitado blanco, se separó mediante filtración y, el filtrado, se extrajo con éter etílico. La fase orgánica, se secó sobre sulfato magnésico, se filtró, y se concentró, bajo la acción del vacío. El sólido residual (13 g), se disolvió en N,N-dimetilformamida (50 ml) que contenía carbonato potásico (0,12 mol, 16,9 g). Se procedió a añadir sulfato de dimetilo (0,12 mol, 15,4 g, 11,5 ml) y, la mezcla, se agitó magnéticamente, a la temperatura ambiente, durante un tiempo de dos horas. Se evaporó la N,N-dimetilformamida, bajo la acción de presión reducida. El residuo, se disolvió en acetato de etilo y, la fase orgánica, se lavó con agua, salmuera, y se secó con sulfato magnésico. Las sales, se filtraron y, el filtrado, se concentró, bajo la acción del vacío. El residuo, se purificó mediante cromatografía de flash (de evaporación instantánea), en sílice el tipo H, utilizando hexano / acetato de etilo (4 / 1), como eluyente, para proporcionar 5,26 g (31%), de 4-metil-5-nitroftalato de dimetilo, 9c, como un sólido de color blanco.
C: Se procedió a disolver el 4-metil-5-nitroftalato de dimetilo 9c (3,41 g, 13,5 mmol) en una mezcla de metanol (120 ml) y tetrahidrofurano (20 ml). Se añadió hidróxido de paladio sobre carbono (20%, 300 mg) y, la suspensión, se agitó magnéticamente a la temperatura ambiente, bajo atmósfera de nitrógeno (1 atm.) durante un tiempo de 16 horas. La mezcla de reacción, se filtró sobre Celite y, el filtrado, se concentró, bajo la acción del vacío. El aceite residual, se purificó mediante cromatografía flash (de evaporación instantánea), sobre gel de sílice del tipo H, utilizando hexano / acetato de etilo (2 / 1) como eluyente, seguido de hexano / acetato de etilo (1 / 1), para proporcionar 2,88 g (96%) de un aceite incoloro, el cual correspondía a 4-metil-5-aminoftalato de dimetilo 9d.
D: Se procedió a cargar un reactor de teflón, con 4-metil-5-aminoftalato de dimetilo 9d (4,53 g, 20,3 mmol). Después, se añadió HF-piridina (50 ml, aproximadamente 1,7 mol HF). La mezcla de reacción, se agitó durante un tiempo de 5 minutos, a una temperatura de 0°C, y se añadió nitrito sódico (1,55 g, 22,5 mmol), para producir una solución de color púrpura. La mezcla, se agitó durante un tiempo de 15 minutos, a la temperatura ambiente, y durante un tiempo de 30 minutos, a una temperatura de 120°C. La mezcla de reacción, se vertió, mediante colada, sobre hielo e hidróxido sódico 4N. Se añadió acetato de etilo y, la mezcla, se filtró. Se lavó con HCl acuoso 1 M, se secó otra vez con sulfato magnésico, se filtró, y se concentró bajo la acción del vacío. El líquido residual, de color rojo, se purificó mediante cromatografía de flash (de evaporación instantánea), sobre gel de sílice del tipo H, utilizando hexano / acetato de etilo (4 / 1), como eluyente, para proporcionar 1,54 g (33%) de 4-metil-5-fluoroftalato de dimetilo, 9e, como un sólido blanco.
E: Se procedió a disolver 4-metil-5-fluoroftalato de dimetilo 9e (1,65 g, 7,29 mmol) en acetato de etilo anhidro (4 ml). Se añadió hidruro sódico (348 mg, 14,5) y, la mezcla, se calentó a una temperatura de 100°C, durante un tiempo de 4 horas. La mezcla de reacción, se vertió, mediante colada, a la temperatura ambiente, y se procedió a añadir una mezcla que contenía 10 ml de hexano y 6 ml de éter etílico / etanol (1 / 1). El precipitado de color amarillo, se trituró durante un transcurso de tiempo de 5 minutos, se filtró, y se secó bajo la acción del vacío. El sólido de color amarillo (1,07 g), se suspendió, a continuación, en una solución que contenía agua (22 ml), y ácido clorhídrico concentrado (2,2 ml) y, la suspensión, se calentó durante un tiempo de 17 minutos, a una temperatura de 80°C. la mezcla, se liofilizó, entonces, para proporcionar 810 mg (62%) de 5-metil-6-fluoro-1,3-indandiona 9f, como un sólido de color beige.
Los ejemplos de compuestos en los que se utiliza 5-metil-6-fluoro-1,3-indandiona, son los compuestos #A1015 y A1016 (tabla 1A).
Ejemplo 10 Separación de la mezcla, para proporcionar los enantiómeros puros A1007 y A1008 (Tabla 1A)
Utilizando el mismo procedimiento que en el ejemplo 1, etapa a, a d; pero empezando con 5-metil-indan-1,3-diona, en la etapa a, y utilizando 1-(4-morfolin-4-il-fenil)-pirrol-2,5-diona, en la etapa c, se obtuvo una mezcla de compuestos, la cual se separó sobre HPLC preparativa, utilizando una columna quiral (Chiracel OD, eluyente isocrático 65% CN_{3}CN /H_{2}O, que contenía un 0,06% de TFA; lámpara UV a 205 nm; flujo de 7 ml / minuto). Las tres fracciones resultantes, se liofilizaron y se trataron con NaOH (0,02 N, 1 equivalente), para proporcionar las correspondientes sales de sodio, como sólidos de color blanco.
El compuesto A 1006, se aisló como una mezcla de isómeros, en un valor de relación de 1 : 1.
Los compuestos A1007 y A1008, se aislaron, cada uno de ellos, como enantiómeros puros.
Ejemplo 11 Ensayo de enlace de E1-DNA, E2-dependiente
Este ensayo, se modeló en un ensayo similar para el Antígeno SV40, descrito por parte de McKay (J. Mol. Biol., 1981, 145: 471). Se produjo una sonda de DNA radio-marcada, de 400 pb, que contenía un origen de replicación del HPV-11 (Chiang et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 5799), mediante PCR, utilizando el plásmido pBluescript® SK, que codificaba para el origen (nucleótidos 7886 - 61 del genoma del HPV 11, en sitio único BAMH) como molde y cebadores que lindaban con el origen. Se incorporó un radiomarcador, como [^{33}P]dCTP. El tampón de enlace, de ensayo, consistía en: 20 mM Tris pH 7,6, 100 mM, 1 mM DDT, 1 mM EDTA.
Otros reactivos utilizados, eran las perlas de proteína A-SPA (tipo II, Amersham) y antisuero policlonal del conejo, k72, que se habían hecho crecer, contra un péptido correspondiente a los 14 aminoácidos del terminal C del HPV-11 E1. Siguiendo el protocolo de Amersham, se procedió a mezclar una botella de perlas, con 25 ml del tampón de enlace, de ensayo. Para el ensayo, se procedió a añadir una cantidad saturante de antisuero K72, a las perlas y, la mezcla, se incubó durante un transcurso de tiempo de 1 hora, se lavó con un volumen de tampón de enlace, de ensayo y, a continuación, se resuspendió en el mismo volumen de tampón de enlace, de ensayo. Las reacciones de enlace, contenían 8 ng de E2, aproximadamente 100 - 200 ng de E1 purificado, y 0,4 ng de sonda radiomarcada, en un total de 80 \mul de tampón de enlace de ensayo. Después de un transcurso de tiempo de 1 hora, a la temperatura ambiente, se procedió a añadir 25 \mul de suspensión de anticuerpo K72 - perlas SPA, a la reacción de enlace y se procedió a mezclar. Después de un transcurso de tiempo adicional de incubación, de 1 hora, a la temperatura ambiente, las reacciones, se centrifugaron brevemente, para granular las perlas, y la extensión de la formación del complejo, de determinó mediante un recuento por centelleado, en Packard TopCount®. De una forma típica, las señales para la reacción que contenían E1 y E2, eran de un valor de 20 - 30 veces mayor, que el marco de referencia observado, cuando, o bien ya sea E1, o bien ya sea E2, o bien ya sea ambos, se omitían.
Ejemplo 12 Ensayo de enlace de DNA del antígeno SV40T
Se procedió a valorar la selectividad de los inhibidores en concordancia con la presente invención, mediante la actividad en los ensayos de enlace ori E1 ó E1-E2, y la ausencia de actividad (o potencia inferior) en el ensayo extenso del antígeno T SV40.
Este ensayo, mide la formulación de un complejo de Antígeno SV40 (TAg)-origen. El ensayo, se desarrolló mediante R.D.G. McKaay (J. Mol. Biol. (1981), 1945, 471 - 488). En principio, éste es muy similar al ensayo de E1-DNA E2-dependiente (Ejemplo 12), con TAg reemplazando a E1 y E2, y una sonda radiomarcada SV40 ori, reemplazando a la sonda HPV ori. El ensayo, se utiliza como una pantalla de contraste para el ejemplo 13, debido al hecho de que, TAg, comparte homología funcional a E1 y E2, pero tiene una muy baja similitud de secuencia.
La sonda radiomarcada de DNA que contiene un origen, se realizó mediante PCR, utilizando un plásmido pCH110 (Pharmacia), como molde. Este molde, codifica el origen mínimo de SV40 de replicación, en los nucleótidos 7098 - 7023. Los cebadores, eran "sv40-6958sens" = 5’-GCC CTT AAC TCC GCC CAT CCC GC (SEC ID NO. 1), y "sv40-206anti" = 5’-ACC AGA CCG CCA CGG CTT ACG GS (SEC ID NO. 2). El producto de PCR, era de una longitud de aproximadamente 370 pares de bases, y se realizó su radiomarcaje, utilizando 50 \muCi/100 \mul reacción de PCR de dCTP (\alpha-^{33}P). Subsiguientemente a la reacción por PCR, el producto, se purificó utilizando o bien ya sea el equipo a modo de kit de purificación de PCR "Qiagen® PCR purification kit", o bien el procedimiento de extracción de fenol /
precipitación de etanol. EL producto purificado, se diluyó a un valor de 1,5 ng/\mul (estimado mediante electroforesis en gel), en TE. Las preparaciones frescas, tenían aproximadamente 150.000 cpm /\mul.
Se realizaron reacciones de enlace, procediendo a mezclar 30 \mul de solución TAg (100 ng / hoyo, 200 ng de una sonda de DNA ^{33}P-radiamarcada, y 7,5 \mul de 10 x tampón de enlace de DNA (200 mM Tris-HCl pH 7,6, 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT) en un volumen final de 75 \mul. Se dejó que las reacciones de enlace procedieran, a la temperatura ambiente, durante un transcurso de tiempo de 60 minutos. El antígeno T extenso, adquirido en el mercado, de procedencia de la firma Chimerx, se utilizó a 2,0 mg/ml.
Los complejos de DNA de proteínas, se inmunocapturaron, utilizando un anticuerpo monoclonal \alpha-TAg (PAb 101, subtipo IgG2a, hibridoma, obtenido de la ATCC, y anticuerpo purificado en casa), enlazado a las perlas de proteína A-SPA. La inmunoprecipitación de los complejos de DNA de las proteínas, se llevó a cabo durante un transcurso de tiempo de 1 hora, a la temperatura ambiente. Las placas, se hicieron girar brevemente y, los fragmentos radiomarcados de DNA, precipitados, se contaron en un contador del tipo "TopCount® counter".
Ejemplo 13 Ensayo de replicación de DNA basado en células
Se procedió a transfectar células CHO-K1, siguiendo procedimientos standard. Las células, cultivadas a una confluencia del 40 - 60% de confluencia, en placas de cultivo de tejido de 100 mm, se transfectaron simultáneamente, con 0,5 \mug de pN9-ORI (origen mínimo de HPV-11 de replicación de DNA), p,5 \mug de pCR3-E1 y 0,05 \mug de oCR3-E2 (que contenían respectivamente, la longitud total de HPV-11 E1 y la longitud total de HPV-11 E2, clonados con el sistema TA de clonación). Después de un transcurso de tiempo de incubación de 4 horas, con la mezcla de DNA, las células, se tripsinizaron, se mancomunaron, y se recolocaron en placa, a 20.000 células / hoyo, en una placa de 96 hoyos. Después de un tiempo de 2 horas de acoplamiento, a una temperatura de 37°C, se añadieron compuestos inhibidores diluidos en serie, durante un período de incubación de 2 días.
Las células, se lavaron, con objeto de eliminar el compuesto y, el DNA total, se extrajo utilizando un protocolo modificado del equipo, a modo de kit, "QIAamp Blood kit" (QIAGEN). El DNA, se digirió con Hind II (10 U/hoyo)) y Dpn1 20 U/hoyo), durante un transcurso de tiempo de 4 horas, a una temperatura de 37°C. El DNA digerido (10 \mul), se sometió a 23 rondas o pasadas de PCR, utilizando el equipo, a modo de kit, de la Pwo DNA-polimerasa denominado "Pwo DNA polymerasa kit" (Boehriger Mannheim), modificado, para contener 2 U de la Pwo DNA-polimerasa, 10 \muCi[\alpha-^{33}P]dCTP, y dos cebadores (cada uno de ellos, a una concentración final de 0,2 \muM) por 50 \mul de reacción.
La ciclación, consistió en una etapa inicial de desnaturalización, a una temperatura de 95°C, durante un transcurso de tiempo de 5 minutos, seguido de 23 pasadas o rondas de: desnaturalización, a una temperatura de 94°C, durante un transcurso de tiempo de 30 minutos, reasociación y extensión, a una temperatura de 72°C, durante un transcurso de tiempo de 1 minutos y 30 segundos, terminando con una extensión final, a una temperatura de 72°C, durante un transcurso de tiempo de 10 minutos. Después de que se hubiera completado la amplificación, se procedió a analizar 10 \mul sobre 1% gel de agarosa, subsiguientemente, se procedió a secar, a una temperatura de 60°C, durante un transcurso de tiempo de 1 hora, y se procedió a analizar, mediante "Phosforimager" (dispositivo de obtención de imágenes por fosforocescencia).
Con objeto de evaluar el efecto del compuesto en la síntesis celular de DNA (y / o la toxicidad celular), se procedió a realizar una proliferación ELISA (Boehringer Mannheim), con la incorporación de un monitor BRd.
Ejemplo 14 Tablas de compuestos
Todos lo compuestos listados en las tablas 1 a 10, fueron encontrados como siendo activos en ensayo de E1-E2 DNA, presentado en el ejemplo 11, con un IC_{50} por debajo de 50 \muM, para HPV-11.
Leyenda de la tabla: Para C_{50} A = 50 \muM - 5 \muM; B = 5 \muM - 0,5 \muM; C = < 0,5 \muM.
Se procedió, también, a someter ciertos compuestos a test de ensayo, en ensayo SV40 TAg del ejemplo 12, y se encontró que eran inactivos o menos activos, en el ensayo de E1 - E2 DNA, proporcionando una buena evidencia del hecho de que, estos compuestos, son selectivos contra el virus del papiloma.
Adicionalmente, se procedió a someter a test de ensayo ciertos compuestos, en el ensayo de celular de replicación de DNA del ejemplo 13. Los resultados obtenidos, indican que, éstos, pueden inhibir la replicación vírica.
TABLA 1
67
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(Continuación)
68
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(Continuación)
69
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(Continuación)
70
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(Continuación)
71
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(Continuación)
72
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(Continuación)
73
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(Continuación)
74
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(Continuación)
75
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(Continuación)
76
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(Continuación)
77
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(Continuación)
78
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TABLA 1A
79
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(Continuación)
80
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(Continuación)
81
TABLA 1B
82
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(Continuación)
83
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TABLA 1C
84
TABLA 1D
85
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TABLA 2
86
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(Continuación)
87
(Continuación)
88
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TABLA 3
89
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(Continuación)
90
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(Continuación)
91
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TABLA 4
92
\newpage
(Continuación)
93
TABLA 5
94
TABLA 6
95
TABLA 7
96
TABLA 8
97
(Continuación)
98
TABLA 9
99
TABLA 10
100
<110> Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd.
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Inhibidores del virus del papiloma
\vskip0.400000\baselineskip
<130> 13/073 pct
\vskip0.400000\baselineskip
<150> 60/256.706
\vskip0.400000\baselineskip
<151> 2000-12-18
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<170> FastSEQ para Windows, Versión 4.0
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 23
\vskip0.400000\baselineskip
<212> DNA
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Secuencia de cebadores
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
gcccctaact ccgcccatcc cgc
\hfill
23
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
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<211> 23
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<212> DNA
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<213> Secuencia artificial
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
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<223> Secuencia de cebadores
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskip
accagaccgc cacggcttac ggc
\hfill
23
\vskip1.000000\baselineskip

Claims (64)

1. Un compuesto tal y como se representa mediante la fórmula (I), o sus enantiómeros o diastereoisómeros de ésta:
\vskip1.000000\baselineskip
101
en donde;
A, es un anillo homocíclico de 5 ó de 6 miembros, o un anillo heterocíclido de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 ó más heteroátomos seleccionados de entre N, O y S;
X, es H y W, es OH; ó X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo o un epóxido;
R^{1}, es H, ó uno o dos sustituyentes, independientemente seleccionados de entre el grupo consistente en: hidroxi, halo, alquilo inferior, alcoxi inferior, tioalquilo inferior, haloalquilo; ó -C(O)R^{2}, en donde, R^{2}, es alquilo inferior, ariloxi ó benciloxi;
Y, es fenilo, opcionalmente mono- ó di-sustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5}, es alquilo inferior, ciclalquilo inferior, alcoxi inferior, halo hidroxi, nitrilo ó trifluorometilo, y R^{6}, es alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, hidroxi ó trifluorometilo; encontrándose fusionado, el citado anillo de fenilo, con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S;
ó, Y, es un heterociclo (Het) que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de entre N, O ó S; dicho Het, encontrándose opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-fenilo, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente monosustituida, con un alquilo inferior, en donde, el citado anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho anillo de fenilo, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-Het, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono-sustituida, con un alquilo inferior, en donde, el Het, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en: alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alquileno inferior, arilo o aralquilo inferior, todos ellos, opcionalmente mono- ó di-sustituidos con:
alquilo inferior, cicloalquilo inferior, haloalquilo, halo CN, azido, alcoxi inferior, (alquilo inferior)acilo, tioalquilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}, NHC(O)-alquilo inferior, NHC(O)-arilo, NHC(O)-O-alquilo inferior, NHC(O)-O-arilo, arilo, ariloxi, hidroxi, nitro, amino, ó Het, encontrándose, el citado Het, opcionalmente sustituido o di-sustituido con alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo, trifluorometilo, C(O)R^{6}, en donde, R^{6}, es tal y como se define anteriormente, arriba;
encontrándose, los citados cicloalquilo inferior, arilo, aralquilo inferior o Het, opcionalmente fusionados con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S;
y
R^{4}, es un ácido carboxílico, una sal o un éster de éste, con la condición de que, cando X y W, conjuntamente, forman una carbonilo, e I, es fenilo, R^{3}, no puede ser fenilo.
en donde, los compuestos de la invención, pueden también representarse mediante la fórmula I, en las formas (2) y (3):
102
en donde, A, X, W, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen anteriormente, arriba,
en donde, el término "alquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de cadena lineal, o de cadena ramificada, que contienen hasta seis átomos de carbono, y
en donde, el término "alcoxi inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa radicales alcoxi de cadena lineal, que contienen de uno a más cadenas de carbono, y radicales alcoxi de cadena ramificada, que contienen de tres a cuatro átomos de carbono, y
en donde, el término "haloalquilo", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical alquilo que contiene de uno a seis átomos de carbono, en donde, uno o más átomos de hidrógeno, se encuentran reemplazados por un átomo de halógeno, y
en donde, el término "cicloalquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de hidrocarburo cíclico, saturado, que contienen de tres a siete átomos de carbono.
2. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
103
en donde, A X, W, R^{1}, Y, R^{3} y R^{4}, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
3. Una mezcla del compuesto I(a) y el compuesto I(b), según la reivindicación 2.
4. Una mezcla del compuesto I(c) y I(d), según la reivindicación 2.
5. Un mezcla de compuestos, según la reivindicación 3, en donde, la citada mezcla, es racémica.
6. Un mezcla de compuestos, según la reivindicación 4, en donde, la citada mezcla, es racémica.
7. El compuesto I(a) y el compuesto I(b), según la reivindicación 3, caracterizados por el hecho de que, éstos, son, cada uno de ellos, enantiómeros puros.
8. El compuesto I(c) y el compuesto I(c), según la reivindicación 4, caracterizados por el hecho de que, éstos, son, cada uno de ellos, enantiómeros puros.
9. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, X, es H, y W, es OH; ó X y W, forman un grupo carbonilo.
10. Un compuesto, según la reivindicación 9, en donde, X y W, forman un grupo carbonilo.
11. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, A, es un anillo de benceno, tal y como se representa mediante la fórmula I’,
104
en donde, en donde, R^{1}, X, W, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
12. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, en anillo A, es un anillo de cinco miembros que contiene un átomo de azufre, al y como se representa mediante las fórmulas I'' y I''’:
105
en donde, R^{1}, X, W, Y, R^{3}, y R^{4}, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
13. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, R^{1}, es H; ó uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados de entre el grupo consistente en: hidroxi, halo; alquilo inferior; alcoxi inferior; tioalquilo inferior; haloalquilo; ó -C(O)R^{2}, en donde, R^{2}, es alquilo, ariloxi ó benciloxi.
14. Un compuesto, según la reivindicación 13, en donde, R^{1}, es H, halo ó alquilo C_{1-4}.
15. Un compuesto, según la reivindicación 14, en donde, R^{1}, es H, fluoro ó metilo.
16. Un compuesto, según la reivindicación 15, en donde, R^{1}, H ó metilo.
17. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, Y, es fenilo, opcionalmente mono- ó di-sustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5}, es alquilo inferior, ciclalquilo inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo ó trifluorometilo, y R^{6}, es alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, hidroxi ó trifluorometilo; encontrándose fusionado, el citado anillo de fenilo, con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-fenilo, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono-sustituida, con un alquilo inferior, en donde, el citado anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho anillo de fenilo, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
18. Un compuesto, según la reivindicación 17, en donde, Y, es naftilo ó fenilo, en donde, el anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó di-sustituido en la posición 3, 4 ó 5, con R^{5}, en donde, R^{5}, es halo, alquilo C_{1-4}, hidroxi ó CF^{3}.
19. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, Y, es fenilo opcionalmente sustituido con:
3,4-Cl; 3-F,4-Cl; 3-Cl,4-F; 3,4-Br; 3-F,4-CH_{3}; 3,4-CH_{3}; 3-CF_{3}, NHC(O)-(CH_{2})_{3}CH_{3}; ó Y, es
106
20. Un compuesto, según la reivindicación 19, en donde, Y, es fenilo, opcionalmente sustituido con: 3,4-Cl y 3,4-Br.
21. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
Ciclohexilo; alquilo C_{1-6}; (alquilo C_{1-6})fenilo, en donde, el anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente sustituido con:
alquilo inferior, CF_{3}, halo CN, azido, alcoxi inferior, (alquilo inferior)acilo, tioalquilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}, NHC(O)-alquilo inferior, arilo, ariloxi, hidroxi, nitro, amino, ó Het, encontrándose, el citado Het, opcionalmente sustituido o di-sustituido con alquilo inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo, trifluorometilo.
22. Un compuesto, según la reivindicación 1, en donde, R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
Alquilo C_{1-6}; tioalquilo C_{1-6};
\vskip1.000000\baselineskip
107
\newpage
23. De una forma mayormente preferible, R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
108
24. Un compuesto, según la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula
109
en donde, R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en: alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alquileno inferior, arilo o aralquilo inferior, todos ellos, opcionalmente mono- ó di-sustituidos con:
alquilo inferior, cicloalquilo inferior, haloalquilo, halo, CN, azido, alcoxi inferior, (alquilo inferior)acilo, tioalquilo C_{1-6}, alquilsulfonilo C_{1-6}, NHC(O)-alquilo inferior, NHC(O)-arilo, NHC(O)-O-alquilo inferior, NHC(O)-O-arilo, arilo, ariloxi, hidroxi, nitro, amino, ó Het, encontrándose, el citado Het, opcionalmente sustituido o di-sustituido con alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo, trifluorometilo, C(O)R^{6}, en donde, R^{6}, es tal y como se define anteriormente, arriba;
encontrándose, los citados cicloalquilo inferior, arilo, aralquilo inferior o Het, opcionalmente fusionados con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S; y
R^{5}, es alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, halo, hidroxi, nitrilo ó trifluorometilo.
25. Un compuesto, tal y como se representa mediante la fórmula (I), o sus enantiómeros o diasteroisómeros de ésta:
110
en donde,
A, es un anillo homocíclico de 5 ó de 6 miembros, o un anillo heterocíclido de 5 ó 6 miembros, que contiene 1 ó más heteroátomos seleccionados de entre N, O y S;
X, es H y W, es OH; ó X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo o un epóxido;
R^{1}, es H, ó uno o dos sustituyentes, independientemente seleccionados de entre el grupo consistente en: hidroxi, halo, alquilo inferior, alcoxi inferior, tioalquilo inferior, haloalquilo); ó -C(O)R^{2}, en donde, R^{2}, es alquilo inferior, ariloxi ó benciloxi;
Y, es fenilo, opcionalmente mono- ó di-sustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5}, es alquilo inferior, ciclalquilo inferior, alcoxi inferior, halo hidroxi, nitrilo ó trifluorometilo, y R^{6}, es alquilo inferior, cicloalquilo inferior, alcoxi inferior, hidroxi ó trifluorometilo; encontrándose fusionado, el citado anillo de fenilo, con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado de entre N, O y S;
ó, Y, es un heterociclo (Het) que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de entre N, O ó S; dicho Het, encontrándose opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-fenilo, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono-sustituida, con un alquilo inferior, en donde, el citado anillo de fenilo, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho anillo de fenilo, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
ó, Y, es etileno-Het, encontrándose, la citada porción de etileno, opcionalmente mono-sustituida, con un alquilo inferior, en donde, el Het, se encuentra opcionalmente mono- ó disustituido con R^{5} ó C(O)R^{6}, en donde, R^{5} y R^{6}, son tal y como se define anteriormente, arriba; dicho Het, encontrándose opcionalmente fusionado con un anillo de 4 a 6 miembros, saturado o insaturado, que contiene opcionalmente un heteroátomo seleccionado entre N, O y S;
R^{3}, se selecciona de entre el grupo consistente en:
111
R^{4}, es un ácido carboxílico, una sal o un éster de éste;
en donde, los compuestos de la invención, pueden también representarse mediante la fórmula I, en las formas (2) y (3):
112
en donde, A, X, W, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen anteriormente, arriba,
en donde, el término "alquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de cadena lineal, o de cadena ramificada, que contienen hasta seis átomos de carbono, y
en donde, el término "alcoxi inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa radicales alcoxi de cadena lineal, que contienen de uno a más cadenas de carbono, y radicales alcoxi de cadena ramificada, que contienen de tres a cuatro átomos de carbono, y
en donde, el término "haloalquilo", tal y como se utiliza aquí, en este documento, significa un radical alquilo que contiene de uno a seis átomos de carbono, en donde, uno o más átomos de hidrógeno, se encuentran reemplazados por un átomo de halógeno, y
en donde, el término "cicloalquilo inferior", tal y como se utiliza aquí, en este documento, bien ya sea solo, o bien ya sea en combinación con otro radical, significa radicales de hidrocarburo cíclico, saturado, que contienen de tres a siete átomos de carbono.
26. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
113
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{4A}, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
\vskip1.000000\baselineskip
114
\newpage
(Continuación)
115
(Continuación)
116
\newpage
(Continuación)
117
\newpage
(Continuación)
118
\newpage
(Continuación)
119
\newpage
(Continuación)
120
\newpage
27. Un compuesto, según la reivindicación 25, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
121
en donde, R^{4A}, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
122
\newpage
(Continuación)
123
(Continuación)
124
28. Un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en: compuestos que tienen la siguiente fórmula:
125
en donde, R^{4A}, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
126
\newpage
(Continuación)
127
29. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
128
en donde, R^{4A}, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
129
30. Un compuesto, según la reivindicación 25, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
130
en donde, R^{4A}, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
131
31. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
132
en donde, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
133
32. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
134
en donde, R^{4A}, R^{1}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
135
33. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
136
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
\vskip1.000000\baselineskip
137
\vskip1.000000\baselineskip
34. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
138
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
\vskip1.000000\baselineskip
139
\newpage
35. Un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
140
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
\vskip1.000000\baselineskip
141
\vskip1.000000\baselineskip
36. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
142
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
143
\newpage
37. Un compuesto, según la reivindicación 25, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
144
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
145
38. Un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
146
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
147
39. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
148
en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
149
\newpage
(Continuación)
150
40. Un compuesto, según la reivindicación 25, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
151
en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
152
41. Un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
153
en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
154
42. Un compuesto, según la reivindicación 1, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
155
en donde, Y, y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
156
43. Un compuesto, según la reivindicación 25, seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
157
en donde, Y, y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
158
44. Un compuesto seleccionado de entre el grupo consistente en:
compuestos que tienen la siguiente fórmula:
159
en donde, Y, y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
160
\vskip1.000000\baselineskip
45. Un compuesto, según la reivindicación 25, que tiene la siguiente fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
161
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
\vskip1.000000\baselineskip
162
46. Un compuesto, según la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:
163
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
164
47. Un compuesto, según la reivindicación 25, que tiene la siguiente fórmula:
165
en donde, X, R^{4A}, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
166
48. Un compuesto, según la reivindicación 25, que tiene la siguiente fórmula:
167
en donde, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
168
49. Un compuesto, según la reivindicación 25, que tiene la siguiente fórmula:
169
en donde, W, R^{5} y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
170
50. Un compuesto, según la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:
171
en donde, Y, y R^{3}, son tal y como se definen a continuación:
172
51. Una composición farmacéutica, que comprende una cantidad víricamente efectiva como anti-virus del papiloma, de un compuesto de la fórmula (I), según la reivindicación 1, sin la condición o reivindicaciones 25, 28, 33, 35, 38, 41 ó 44, ó una sal o éster de ésta, terapéuticamente aceptable, en mezcla con un medio portador farmacéuticamente aceptable, o agente auxiliar.
52. Uso de una composición de la fórmula (I), según la reivindicación 1, sin la condición o reivindicaciones 25, 28, 33, 35, 38, 41 ó 44, ó de una sal o éster de ésta, terapéuticamente aceptable, o de una composición tal y como se describe anteriormente, arriba, para la fabricación de un medicamento para tratar una infección vírica del virus del papiloma, en un mamífero.
53. Uso de una composición de la fórmula (I), según la reivindicación 1, sin la condición o reivindicaciones 25, 28, 33, 35, 38, 41 ó 44, ó de una sal o éster de ésta, terapéuticamente aceptable, o de una composición tal y como se describe anteriormente, arriba, para la fabricación de un medicamento para inhibir la replicación de virus del papiloma, mediante la exposición del virus al citado compuesto, sal ó éster de éste, o composición.
54. Uso de una composición de la fórmula (I), según la reivindicación 1, sin la condición o reivindicaciones 25, 28, 33, 35, 38, 41 ó 44, para la fabricación de un medicamento para prevenir la trasmisión de HPV, de la madre al bebé, mediante la administración del citado compuesto, a la madre, previamente a dar a luz.
55. Un compuesto intermediario de la fórmula xx:
\vskip1.000000\baselineskip
173
en donde, R^{3}, R^{4}, e Y, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
56. Un compuesto intermediario de la fórmula xxvi:
\vskip1.000000\baselineskip
174
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
57. Un compuesto intermediario de la fórmula xxxii:
\vskip1.000000\baselineskip
175
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, R^{1}, R^{3}, e Y, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
\newpage
58. Un procedimiento para producir un compuesto de la fórmula I’:
\vskip1.000000\baselineskip
176
\vskip1.000000\baselineskip
en donde, X, R^{1}, W, Y, R^{3}, y R^{4}, son tal y como se definen en la reivindicación 1,
el cual comprende:
a) hidrolizar, en una mezcla de base acuosa y co-disolvente, bien ya sea un compuesto intermediario de la fórmula vi, o bien ya sea un compuesto intermediario de la fórmula xx
\vskip1.000000\baselineskip
177
\vskip1.000000\baselineskip
para producir compuestos de la fórmula I’, en donde, R^{3}, R^{4}, e Y, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
59. Un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I’, según la reivindicación 58, el cual comprende:
b) acidificar la citada mezcla, con ácido acuoso, de tal forma que se produzcan compuestos de la fórmula I’.
60. Un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I’, el cual comprende:
c) tratar el producto b), con diazometano.
61. Un procedimiento, según la reivindicación 58, para producir compuestos de la fórmula I’, el cual comprende:
a) reducir, en una mezcla de una fuente de hidruro y un disolvente aprótico, el intermediario vi:
\vskip1.000000\baselineskip
178
\newpage
para producir una mezcla de los intermediarios monohidroxi xiv y xv:
179
en donde, Y, y R^{3}, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
62. Un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I’, según la reivindicación 61, el cual comprende:
a) hidrolizar, en una mezcla de base acuosa y un co-disolvente, los intermediarios xiv y xv, para producir los compuestos de la fórmula I’,
63. Un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I'',
180
en donde, X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo, R^{4}, es un ácido carboxílico o un éster y, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen en la reivindicación 1,
el cual comprende:
a) hidrolizar, en una mezcla de una base acuosa y un co-disolvente, el compuesto intermediario xxvi,
181
de tal forma que produzcan compuestos de la fórmula I'', en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
64. Un procedimiento para producir compuestos de la fórmula I''’, el cual comprende:
182
en donde, X y W, conjuntamente, forman un grupo carbonilo, R^{4}, es un ácido carboxílico o un éster y, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen en la reivindicación 1,
el cual comprende:
a) hidrolizar, en una mezcla de una base acuosa y un co-disolvente, el compuesto intermediario xxxii,
183
de tal forma que produzcan compuestos de la fórmula I''’, en donde, R^{1}, Y, y R^{3}, son tal y como se definen en la reivindicación 1.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7167801B2 (en) 2001-07-12 2007-01-23 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Method of identifying potential inhibitors of human papillomavirus protein E2 using x-ray atomic coordinates
NZ535051A (en) * 2002-02-07 2006-04-28 Boehringer Ingelheim Ca Ltd E2 displacement assay for identifying inhibitors of HPV
DE602004025708D1 (de) * 2003-07-11 2010-04-08 Proteologics Inc Ubiquitin-ligase-hemmer und verwandte verfahren
WO2011133929A2 (en) * 2010-04-23 2011-10-27 University Of Rochester Reducing transmission of sexually transmitted infections
CN111606914B (zh) * 2019-02-22 2023-01-17 中国科学院昆明植物研究所 [吡咯并呋喃]-螺环茚酮类化合物及药物组合物和应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4106283A1 (de) * 1991-02-28 1992-09-03 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von tricyclischen isoindolinonen als antivirale arzneimittel, sowie neue optisch aktive isoindolinone
WO2000017206A1 (en) * 1998-09-18 2000-03-30 Cubist Pharmaceuticals, Inc. Tetracyclic heterocycles as antimicrobial agents

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