ES2264886A1 - Utilizacion de acido docosahexaenoico para el tratamiento de enfermedades tumorales. - Google Patents

Utilizacion de acido docosahexaenoico para el tratamiento de enfermedades tumorales.

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Abstract

Utilización de ácido docosahexaenoico para el tratamiento de enfermedades tumorales. La presente invención se refiere a la utilización de un aceite enriquecido en ácido docosahexaenoico, el cual está conjugado a triglicérido, para la fabricación de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de una enfermedad tumoral, estando dicho aceite enriquecido en una concentración de hasta el 70% en peso respecto al peso total de dicha composición farmacéutica y estando dicho ácido docosahexaenoico en un porcentaje de al menos el 50% respecto al total de ácidos grasos de dicho aceite.

Description

Utilización de ácido docosahexaenoico para el tratamiento de enfermedades tumorales.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a la utilización de un aceite enriquecido en ácido docosahexaenoico para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento de una enfermedad tumoral.
Antecedentes
Diferentes evidencias derivadas de estudios en animales e in vitro indican que los ácidos grasos omega-3, especialmente los poliinsaturados de cadena larga (PUFAs) como el ácido eicosapentaenoico (EPA) y el ácido docosahexaenoico (DHA), presentes en los pescados y en los aceites derivados de los mismos inhiben la carcinogénesis y presentan una potencial actividad antitumoral. Estudios in vitro con líneas tumorales humanas han demostrado de forma convincente que los PUFAs omega-3, principalmente el DHA, reducen el crecimiento de diversos tipos celulares tumorales, incluyendo mama, colon, páncreas, leucemia mieloide crónica y melanoma. Los datos epidemiológicos sobre la asociación entre el consumo de pescado, como marcador para la adquisición de ácidos grasos omega-3, y el riesgo del cáncer son, sin embargo, algo menos consistentes. Solo se ha podido establecer que la ingesta de DHA y EPA reduce el crecimiento de tumores en roedores, incluyendo tumores de la glándula mamaria, de colon, de la próstata, del hígado y del páncreas.
Además, diversos estudios han demostrado que los PUFAs omega-3 inhiben selectivamente la proliferación de las células tumorales, siendo menos tóxicos hacia las células normales. Esta diferente sensibilidad a los PUFAs omega-3, no se puede explicar simplemente por diferencias en la captación de los ácidos grasos. Se han propuesto varios mecanismos por el que los ácidos grasos omega-3 puedan modificar el proceso carcinógenico, entre los que destacan: la supresión de la biosíntesis de eicosanoides derivada del ácido araquidónico (ARA); alteraciones sobre la actividad de factores de transcripción, regulación de la expresión génica y de la señalización intracelular; alteración del metabolismo de los estrógenos; alteración de la generación de radicales libres y de especies reactivas al oxígeno y modificaciones en la fluidez de la membrana.
Los eicosanoides derivados del ARA se han asociado con el desarrollo tumoral. Existen varios mecanismos por los cuales los ácidos grasos omega-3 pueden disminuir la biosíntesis de eicosanoides derivados del ARA. En primer lugar, los ácidos grasos omega-3 se incorporan en los fosfolípidos de la membrana, donde substituyen parcialmente a los omega-6. En segundo lugar, los PUFAs omega-3 compiten con los PUFAs omega-6 como sustratos de las desaturasas y de las elongasas, siendo los PUFAs omega-3 los que tienen mayores afinidades por dichas enzimas. Finalmente, los ácidos grasos omega-3 inhiben la cicloxigenasa-2 a nivel transcripcional y compiten con los ácidos grasos omega-6 como sustratos de las cicloxigenasas en la formación de los eicosanoides.
Por otra parte, los PUFAs omega-3 y sus metabolitos pueden ejercer algunos de sus efectos antitumorales afectando la expresión de diversos genes o las actividades de las moléculas de transmisión de la señal implicadas en el control del crecimiento, diferenciación y apoptosis celular, angiogenesis y metástasis. Los más importantes son el receptor activado de proliferación peroxisomal, el del factor kB de transcripción nuclear, el oncogen ras, la proteína quinasa C, el coenzima-A-3-hidroxil-3-metilglutaril reductasa, la cicloxigenasa-2 y las lipoxigenasas y la óxido nítrico sintasa. Se ha demostrado que el tratamiento de las células de carcinoma de colon con DHA altera las características de la membrana celular disminuyendo su capacidad metastásica.
La generación de radicales libres y de especies reactivas al oxígeno parece estar implicada en la iniciación de la apoptosis y en la defensa natural contra las células transformadas. Así, los efectos inhibitorios de los PUFAs omega-3 de cadena larga en el crecimiento de la célula tumoral pueden, por lo menos en parte, ser explicados por la formación de productos de la oxidación, que conduce a la detención del crecimiento de la célula y al inicio del proceso de apoptosis. Se ha sugerido que las células del tumor son deficitarias en sistemas de defensa antioxidantes en comparación con las células sanas, y así son más susceptibles al daño oxidativo. Los PUFAs son los substratos intracelulares principales en la peroxidación lipídica; ya sea provocando un daño en las membranas de la célula, modificando la composición celular o el ensamblaje del citoesqueleto, alterando los sistemas de transporte de la membrana o la actividad de sus enzimas, o inhibiendo las reacciones de la polimerasa. Por lo tanto, es razonable contar con que las células enriquecidas en DHA del tumor puedan tener una susceptibilidad mayor al daño oxidativo.
Existe una cierta evidencia que los ácidos grasos omega-3 tienen un efecto en el ciclo celular. El tratamiento in vitro con DHA provoca la parada en fase cuál?? durante el ciclo celular en células tumorales de mama y de melanoma. In vivo, la administración de aceite de pescado, rico en omega-3, a ratas implantadas con una línea tumoral de mama puede prolongar la replicación del DNA de las células tumorales retrasando la progresión a través de la fase de síntesis.
Sin embargo, estudios preclínicos han demostrado que los PUFAs omega-3 pueden incrementar la citotoxicidad de varios agentes antineoplásticos y los efectos anticáncerigenos de la radioterapia. Estos efectos están mediados posiblemente por la incorporación de los ácidos grasos en las membranas de la célula tumoral, alterando así las características físicas y funcionales.
Por otro lado, la eficacia terapéutica alcanzada depende de varios factores como: la biodisponibilidad del ácido graso, que a su vez está relacionado con la estructura química en la cual se encuentra incorporado; el tipo de PUFA omega-3 usado (ALA, EPA o DHA) y la disponibilidad de interacción entre el PUFA y la célula diana.
Datos derivados de un estudio en el que se comparaba la biodisponibilidad de tres concentrados de PUFAs omega-3 en forma de esteres etílicos, ácidos grasos libres y triglicéridos después de una administración oral, demostraron que los triglicéridos reesterificados presentan una biodisponibilidad superior a las otras dos preparaciones.
Por otra parte, en un modelo de carcinogenesis multiorgánico se ha demostrado que en un tratamiento de monoterapia el DHA es el PUFA omega-3 que presenta una protección antitumoral más eficaz, superior al EPA. Este resultado también se ha confirmado en tratamientos antitumorales de combinación EPA + DHA, donde además se ha observado que la presencia de EPA disminuye la eficacia del DHA.
Por último, un aspecto importante es la vía de administración que condiciona la eficacia del sistema. Por ejemplo una administración intratumoral es la preferida para el tratamiento de gliomas. En este sentido es esencial que los PUFAs debieran administrarse a los pacientes de tal manera que fuesen fácilmente captados por las células tumorales. Por ejemplo para una administración parenteral, adecuada para el tratamiento de hepatomas, es necesario disponer de un sistema transportador como una emulsión con el objetivo adicional de limitar la unión de los PUFAs a la albumina sérica que suprime su citotoxicidad tumoral. En el caso de una administración oral, adecuada para el tratamiento de linfomas, después del procesamiento y la absorción intestinal los PUFAs son transportados hasta el tejido diana incorporados en los quilomicrones en forma de triglicéridos.
Descripción de la invención
La presente invención concierne al hallazgo inesperado de que aceites con un contenido elevado en DHA incorporado en un glicérido, en particular con un contenido superior al 50% en peso, presentan una eficacia antitumoral superior a la misma concentración de DHA en cualquier otra forma química.
Por tanto, es objeto de la presente invención la utilización de un aceite enriquecido en ácido docosahexaenoico (de aquí en adelante también referido como "DHA") que está incorporado en un glicérido, para la fabricación de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de una enfermedad tumoral, estando dicho aceite enriquecido en una concentración de hasta el 70% en peso respecto al peso total de dicha composición farmacéutica y estando dicho ácido docosahexaenoico incorporado a glicérido en un porcentaje de al menos el 50% en peso respecto al total de ácidos grasos de dicho aceite.
En la presente invención, la expresión "aceite enriquecido en ácido docosahexaenoico" significa derivados del glicerol naturales o sintéticos conteniendo el grupo docasohexaenoil entre 50-100% en peso basado en el contenido total de ácidos grasos.
En la presente invención por "ácido docosahexaenoico incorporado en un glicérido" se entiende un glicerol con las tres posiciones esterificadas con ácido docosahexaenoico.
En la presente invención, la expresión "hasta el 70% en peso de dicho aceite enriquecido" significa el 70% del peso total de la composición farmacéutica corresponde al aceite enriquecido en DHA.
En la presente invención, la expresión "como mínimo del 50% respecto al total de ácidos grasos" significa que el DHA representa al menos el 50% en peso del total de ácidos grasos de dicho aceite enriquecido.
Sorprendentemente, los inventores de la presente invención han encontrado que utilizando una cantidad de DHA de al menos el 50% se duplica y hasta quintuplica, el efecto antitumoral de dicho DHA, consiguiendo, de esta manera, una elevada actividad citotóxica tumoral específica, sin la existencia de efectos secundarios.
En una realización preferida, dicha composición farmacéutica se encuentra en forma de emulsión.
De hecho, se ha comprobado que cuando se administra a un paciente una composición farmacéutica que comprende un aceite enriquecido en ácido docosahexaenoico incorporado en un glicérido, tal y como se ha descrito más arriba, en forma de emulsión, se consigue aumentar la actividad citotóxica tumoral del orden de diez veces (tal y como se deriva de los ejemplos incluidos posteriormente).
Las emulsiones se pueden preparar en condiciones apirogénicas y estériles con la suficiente estabilidad física y química para su administración, incluida la administración parenteral, mediante procedimientos bien conocidos para el experto en la materia.
En aún otra realización preferida, el diámetro medio de la microemulsión es inferior a 200 nm.
Ventajosamente, dicho diámetro medio permite la aplicación parenteral, administrándose, de esta manera, una dosis efectiva de DHA superior a la obtenida mediante una administración oral y, en consecuencia, aumentando la biodisponibilidad de dicho ácido. Esto se debe a que se evita la pérdida inherente de la absorción intestinal. Además, por vía parenteral se pueden administrar concentraciones elevadas de DHA.
Por todo lo anterior, en una realización preferida de la presente invención dicha composición farmacéutica en forma de emulsión se administra por vía parenteral. Las dosis a administrar dependen del tipo y de la gravedad de la patología a tratar, sin presentar restricciones dietéticas (interacciones con los alimentos).
Las emulsiones de la invención se pueden administrar, además, por vía oral, sublingual, intravenosa, intramuscular, tópica, subcutánea, rectal o incluso por simple puesta en contacto con los órganos olfativos situados en la entrada de las vías respiratorias del principio activo de la emulsión de la invención en forma liquida o de vapor. Así la administración puede realizarse por pulverización, nebulización o atomización de las emulsiones o también la administración puede ser realizada por inhalación.
En otra realización preferida, dicha composición farmacéutica se administra mediante inyección intramuscular.
En otra realización preferida, dicho aceite enriquecido en DHA comprende, además, ácido ecosapentaenoico (también referido como EPA) en un porcentaje en peso respecto al total de ácidos grasos de dicho aceite de hasta el 30%.
En una realización preferida, la concentración de aceite enriquecido en DHA se encuentra en el rango del 10-70%, preferiblemente en el rango del 10-30% respecto al peso total de la composición farmacéutica.
En otra realización preferida, el porcentaje en peso de DHA respecto al peso total de ácidos grasos de dicho aceite enriquecido oscila entre el 50-100%, preferiblemente oscila entre 70 y 90% y, más preferiblemente, dicho porcentaje en peso de DHA es del 70%.
Los inventores de la presente invención han encontrado, además, que cuando se administra una composición farmacéutica, de acuerdo con la presente invención, no existen interacciones con los componentes del régimen antineoplásico que estén siendo administrados al paciente, ya que dicha composición no se metaboliza en vías comunes a las de metabolización de los fármacos antineoplásicos.
Por tanto, en otra realización preferida de la invención, dicha composición se administra de manera concomitante con al menos un fármaco antineoplásico.
En la presente invención por "fármaco antineoplásico" se entiende un principio activo o medicamento diseñado para el tratamiento de una patología de origen tumoral o canceroso.
Ventajosamente, se ha observado que la administración conjunta de un aceite enriquecido en DHA según la invención junto con un fármaco antineoplásico, potencia la actividad antitumoral de dicho tratamiento y, a su vez, inhibe los efectos secundarios del tratamiento antitumoral.
A continuación, se exponen los siguientes ejemplos a modo ilustrativo y no limitativo de la presente invención.
Ejemplos
Ejemplo 1
Formulación de una composición farmacéutica de acuerdo con la invención
La invención se refiere a una composición no detergente, estable, en forma de microemulsión, para la administración a seres humanos que comprende:
\blacklozenge
entre el 1 y el 70% en peso de un glicérido que contiene DHA como mínimo en un 50% de sus ácidos grasos como principio activo (Proyecto Empresarial Brudy);
\blacklozenge
entre el 1 y el 1,5% en peso de fosfolípidos de soja (Lipoid E80, Lipoid);
\blacklozenge
el 2,25% en peso de glicerol (Sigma & Aldrich); y
\blacklozenge
hasta el 100% de agua USP (ADESCO).
La emulsión inicial se homogeneiza repetidamente a alta presión hasta el tamaño adecuado y el pH se ajusta a un valor fisiológico (entre 6,5-7) con hidróxido sódico (Sigma & Aldrich). Una vez ajustado al volumen final, la microemulsión se esteriliza por filtración (0,22 mm, Millipore) en su recipiente definitivo de vidrio.
\newpage
Ejemplo 2
Evaluación de una preparación de DHA en diferentes modelos tumorales
En el presente estudio se han utilizado como modelo tumoral experimental células KG-1a (derivadas de una leucemia mieliode aguda que son además MDR+, ATCC CCL-246.1), células Jurkat (derivadas de un linfoma tipo T agudo, TIB-152), células HeLa y KB3.1 (derivadas de un carcinoma epitelial humano, CCL-2), células HT-29 (derivadas de un tumor de colón humano, HTB-38), células 435 (derivadas de un tumor de mama humano, MDA-MB-435), células SH-SY5Y (derivadas de un neuroblastoma humano, CRL-2266) y NP-18 (derivadas de un tumor de páncreas humano). Como modelo no tumoral se han utilizado células Foreskin (fibroblastos de epidermis no diferenciados, CRL-1635) y células REPTC (células renales del túbulo proximal, DPK-KTEC-H). Todas las líneas celulares se han obtenido de la American Type Culture Collection, excepto las NP-18 que han sido cedidas por el Laboratorio de Bioinvestigación de Merck Farma y Química y las REPTC que se han adquirido a Dominion Pharmakine. Los cultivos celulares se han mantenido en las condiciones adecuadas de crecimiento: temperatura (37ºC), concentración de CO_{2} (5%) y humedad (95%) en un incubador especial para esta finalidad. Las células se mantienen en crecimiento en frascos de cultivo, pero son traspasadas a placas de 96 pocillos para poder realizar el experimento. Se ha trabajado en todo momento con un DHA procedente de aceite de pescado con un porcentaje variable de DHA en la composición en ácidos grasos (20, 50 o 70%) e incorporado en glicéridos (TG), ésteres etílicos (EE) o como ácido graso libre (FA).
Para evaluar el efecto citotóxico de las diferentes muestras se han realizado estudios de viabilidad celular. Este método consiste en la adición del reactivo MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil-tetrazolio), Sigma & Aldrich) soluble en medio acuoso, al medio de incubación. Las células viables metabolizan este compuesto y es convertido en sal de formazan. Esta sal es un compuesto colorimétrico insoluble en medio acuoso, soluble en DMSO y que se puede usar como una medida de la viabilidad celular. El método consiste en la adición de 20 \mul por pocillo de una disolución de MTT de 7,5 mg/ml (en exceso). Se incuba durante una hora a 37ºC de forma que las células viables metabolizan el compuesto y produzcan la sal formazan mientras que las no viables no lo metabolizarán. Tras una hora de incubación se precipitan las células y se añaden 100 \mul de DMSO (Sigma & Aldrich), el cual disolverá la sal de formazan. Por último se mide la absorbencia a 550 nm en un lector de placas. Los resultados de viabilidad se expresan como porcentaje de densidad óptica con respecto a los controles considerando que estos últimos poseen un 100% de viabilidad. Se han realizado curvas de viabilidad celular en placas de 96 pocillos sembrando unas 20.000 células por pocillo (tras un análisis del número de células idóneo en función de su ratio de crecimiento) con un volumen aproximado de 200 \mul de medio por pocillo. El estudio de la eficiencia del producto se realiza después de la exposición de las células al producto durante 72 h en un intervalo de concentraciones lo suficientemente amplio para determinar el valor de la IC_{50}, definido como la concentración necesaria de principio activo necesaria para reducir el crecimiento/viabilidad celular al 50% respecto al control.
Los resultados experimentales se han ajustado a la ecuación de Hill mediante el software SigmaPlot 8.0 para determinar la IC_{50}, definida como la concentración de DHA necesaria para disminuir la viabilidad del cultivo al 50% respecto al control.
Resultados
El primer aspecto a estudiar para determinar la acción del DHA como agente antitumoral es la especificidad de su actividad citotóxica. En este sentido hemos estudiado el efecto del DHA sobre la proliferación/viabilidad celular de células no inmortalizadas con un metabolismo similar a una célula normal. Como modelo se han utilizado células Foreskin poco diferenciadas y células renales humanas del túbulo proximal (RPTEC) y los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 1.
Como se puede observar de las diferentes variantes estructurales del DHA estudiadas (triglicérido (TG), ácido graso libre (FA) y éster etílico (EE)), el triglicérido es el que presenta una citotoxicidad menor en ambos modelos de célula normal. En estas mismas condiciones, pero en un modelo tumoral (células HeLa), las diferentes variantes del DHA muestran una toxicidad muy significativa con una IC_{50} inferior en todos los casos a 100 \muM. En cuanto a la potencia citotóxica sigue el orden de: TG > FA = EE con la misma riqueza en DHA (70%).
También se pone de manifiesto que la citotoxicidad del producto radica en la presencia de DHA, ya que una disminución de la proporción de dicho ácido disminuye la potencia citotóxica (comparar los resultados de TG-70, TG-50 y TG-20), estimándose un umbral de concentración necesario para obtener un desarrollo terapéutico de como mínimo el 50% de riqueza en DHA, si bien con una concentración de DHA del 70% se consigue un efecto terapéutico óptimo.
TABLA 1 Efecto de la estructura química y la riqueza sobre la toxicidad del DHA en líneas celulares normales y tumorales
Composición Línea Celular \hskip1.5cm IC_{50} (\muM)
Estructura % DHA Foreskin RPTEC HeLa
FA 70 123,1 \pm 9,0 n.d. 72,2 \pm 5,8
EE 70 566,3 \pm 53,9 72,6 \pm 8,3 71,0 \pm 9,7
TG 70 716,7 \pm 41,9 392,7 \pm 37,5 58,6 \pm 8,8
TG 50 1956,0 \pm 27,8 413,6 \pm 25,6 564,0 \pm 69,6
TG 20 2267,6 \pm 27,9 3116,0 \pm 158,2 1379,4 \pm 286,4
El segundo aspecto estudiado ha sido el espectro de aplicabilidad del DHA como fármaco antitumoral, considerando como variables su estructura química y la naturaleza del proceso patológico al cual va dirigido, manteniendo la riqueza de DHA en el 70%. Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 2.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 2 Efecto de la estructura química en la toxicidad celular del DHA sobre líneas celulares de diferente origen patológico
Línea Celular IC_{50} (\muM)
FA TG EE
KG-1a 88,4 \pm 8,0 27,1 \pm 3,2 120,8 \pm 15,1
Jurkat 61,8 \pm 4,5 22,1 \pm 1,2 104,6 \pm 12,6
HT-29 158,2 \pm 19,6 115,8 \pm 17,3 n.d.
435P 193,1 \pm 20,9 129,7 \pm 14,9 n.d.
NP18 n.d. 18,8 \pm 3,0 n.d.
KB3.1 n.d. 116,2 \pm 15,7 n.d.
HeLa 72,2 \pm 5,8 58,6 \pm 8,8 71,0 \pm 9,7
SH-SY5Y n.d. 86.8 \pm 6,8 n.d.
Lo más destacable es el mantenimiento del orden de potencia citotóxica que sigue el orden: TG > FA > EE, en todos los modelos utilizados independientemente de su origen. De los resultados obtenidos cabe destacar en primer lugar la mayor sensibilidad al DHA (entre 5-8 veces) hacia procesos tumorales de carácter hematológico (Jurkat y KG-1a) respecto a los tumores sólidos (resto). Como excepción que confirma la regla se observa una gran sensibilidad en las células derivadas de un tumor pancreático (NP18).
En base a estos resultados se ha decidido utilizar como principio activo un triglicérido con una proporción de DHA igual o superior al 70% del total de ácidos grasos, ya que es el que mantiene una relación óptima entre citotoxicidad tumoral e inocuidad frente a la célula normal.
Teniendo en cuenta estas consideraciones se ha preparado una emulsión como se ha descrito en el apartado anterior con una proporción en peso de aceite del 10% que contiene diferentes proporciones de DHA y se ha realizado un estudio comparativo de su especificidad citotóxica respecto al triglicérido de DHA libre. Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 3 usando como control una microemulsión de ácido oleico preparada en las mismas condiciones que la de DHA.
Se observa un comportamiento análogo al descrito para el triglicérido libre. La citotoxicidad de las microemulsiones es muy superior en una línea tumoral (células HeLa) respecto a una normal (células Foreskin) y depende de manera directa de la concentración de DHA en el glicérido. Además, la toxicidad observada es atribuible exclusivamente al DHA y no al sistema transportador (emulsión), ya que una emulsión de las mismas características preparada con un triglicérido de ácido oleico es totalmente inocua.
También se ha analizado la eficacia citotóxica de las microemulsiones de DHA frente a diferentes líneas tumorales y los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 4 usando otra vez como control una microemulsión de ácido oleico preparada en las mismas condiciones que la de DHA.
Los resultados obtenidos confirman que las emulsiones de DHA son como mínimo tan efectivas en su actividad antitumoral como el DHA incorporado en un glicérido libre. Para células derivadas de tumores sólidos o de origen epitelial la eficacia es entre 1,5-3 veces superior. Igualmente se confirma la no toxicidad de sistema transportador (emulsión), ya que una emulsión de las mismas características preparada con un triglicérido de ácido oleico es totalmente inocua.
TABLA 3 Efecto de la riqueza en DHA sobre la citotoxicidad comparativa de un glicérido en forma libre o incorporado en una microemulsión sobre líneas celulares normales y tumorales
Composición IC_{50} (\muM)
Línea Celular
%DHA Estructura Foreskin HeLa
70 TG 716,7 \pm 41,9 58,6 \pm 8,8
\muEmulsión 639,3 \pm 27,2 19,5 \pm 2,0
50 TG 1956,0 \pm 27,8 564,0 \pm 69,6
\muEmulsión >5000 545,8 \pm 68,5
20 TG 2267,6 \pm 27,9 1379,4 \pm 286,4
\muEmulsión >5000 2135,6 \pm 189,3
0 (Ác.Oleico) \muEmulsión >5000 >5000 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 4 Estudio de la citoxicidad celular comparativa del DHA incorporado en un glicérido en forma libre o en microemulsiones sobre líneas celulares de diferente origen patológico
IC_{50} (\muM)
Línea Celular TG libre Microemulsión 10%
DHA Ácido Oleico
KG-1a 27,1 \pm 3,2 49,5 \pm 2,7 >5000
Jurkat 22,1 \pm 1,2 37,2 \pm 1,3 >5000
HT29 115,8 \pm 17,3 86,9 \pm 3,5 >5000
435P 129,7 \pm 14,9 61,2 \pm 2,5 >5000
HeLa 58,6 \pm 8,8 19,5 \pm 2,0 >5000
NP18 18,8 \pm 3,0 10,8 \pm 1,9 >5000

Claims (13)

1. Utilización de un aceite enriquecido en ácido docosahexaenoico, el cual está incorporado en un glicérido, para la fabricación de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de una enfermedad tumoral, estando dicho aceite enriquecido en una concentración de hasta el 70% en peso respecto al peso total de dicha composición farmacéutica y estando dicho ácido docosahexaenoico en un porcentaje de al menos el 50% respecto al total de ácidos grasos de dicho aceite.
2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada porque dicha composición farmacéutica se encuentra en forma de emulsión.
3. Utilización según la reivindicación 1 caracterizada porque dicho aceite enriquecido comprende ácido ecosapentaenoico en un porcentaje de hasta el 30% en peso respecto al total de ácidos grasos de dicho aceite.
4. Utilización según la reivindicación 1 caracterizada porque dicho aceite enriquecido se encuentra en el rango de 1-70% en peso.
5. Utilización según la reivindicación 4 caracterizada porque dicho aceite enriquecido se encuentra en el rango de 10-30% en peso.
6. Utilización según la reivindicación 1 caracterizada porque dicho ácido docosahexaenoico se encuentra en un porcentaje del 50-100%.
7. Utilización según la reivindicación 6 caracterizada por el hecho de que la concentración de ácido docosahexaenoico se encuentra en un porcentaje del 70%-90% en peso respecto el total de ácidos grasos de dicho aceite.
8. Utilización según la reivindicación 7 caracterizada por el hecho de que dicho ácido docosahexaenoico se encuentra en un porcentaje del 70% en peso respecto al total de ácidos grasos de dicho aceite.
9. Utilización según la reivindicación 1, en donde caracterizada por el hecho de que el diámetro medio de la emulsión es inferior a 200 nm.
10. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada por el hecho de que dicha composición farmacéutica se administra por vía parenteral.
11. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada por el hecho de que dicha composición farmacéutica se administra mediante inyección intratumoral.
12. Utilización según la reivindicación 1 caracterizada por el hecho de que dicha composición farmacéutica se administra a un paciente que está recibiendo de manera concomitante al menos un fármaco antineoplásico.
13. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 caracterizada por el hecho de que la enfermedad tumoral a ser tratada es una del grupo que comprende: cáncer de pulmón, de próstata, de colón, de mama, de páncreas, cerebral, de sistema nervioso central y periférico, melanoma.
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