ES2264029T3

ES2264029T3 - Alfa-glucanos ramificados para la gestion del peso.

Info

Publication number: ES2264029T3
Application number: ES03794354T
Authority: ES
Inventors: Peter Frank Ekhart; Gerritdina Hendrika Van Geel-Schutten; Marie Madelon Van Binsbergen; Eef Jan Timmerman
Original assignee: Nederlandse Organisatie voor Toegepast Natuurwetenschappelijk Onderzoek TNO
Current assignee: Nederlandse Organisatie voor Toegepast Natuurwetenschappelijk Onderzoek TNO
Priority date: 2002-09-09
Filing date: 2003-09-09
Publication date: 2006-12-16
Anticipated expiration: 2023-09-09
Also published as: PT1545562E; US20060100171A1; WO2004022076A1; EP1545562B1; EP1545562A1; WO2004022076A8; DE60304723T2; AU2003263664B2; DK1545562T3; DE60304723D1; ATE323499T1; AU2003263664A1; JP2006508916A

Abstract

Uso de un a-glucano ramificado con un peso molar promedio de al menos 105 Da y con un grado de ramificación de al menos el 8%, para preparar un líquido nutritivo o composición farmacéutica para inducir o aumentar la saciedad.

Description

\alpha-glucanos ramificados para la gestión del peso.

Campo de la invención

La invención pertenece al campo del control del peso corporal. En particular, la invención se refiere a un método para inducir la sensación de saciedad incorporando un compuesto inductor de la saciedad en un producto líquido adecuado para el consumo humano.

Antecedentes de la invención

La incidencia de las enfermedades relacionadas con la obesidad aumenta cada vez más entre las poblaciones de los países desarrollados, afectando a aproximadamente 250 millones de personas en todo el mundo con un aumento anual de dos dígitos. También la incidencia del sobrepeso está aumentando con una prevalencia de 800 millones de personas por todo el mundo.

En la búsqueda de soluciones eficaces al problema de salud global de la obesidad entre la población occidental, tanto la industria farmacéutica como la alimentaria han desarrollado varios conceptos para inducir o extender la sensación de saciedad para el consumidor.

La industria farmacéutica tiene como objetivo desarrollar los inhibidores dirigidos específicos de las enzimas digestivas, sustitutos o quemadores de materia grasa. Unos ejemplos de los compuestos farmacéuticos activos que afectan a la sensación de la saciedad son la sibutramina (Roche) y enzimas digestivas como Orlistat (Knoll/BASF) o Acarbosa (Bayer, US 4,062,950). Las formas de dosificación comunes para estos compuestos activos son en polvo y comprimidos.

La industria alimentaria se ha centrado en el desarrollo de los sustitutos y de los suplementos de las comidas conteniendo ingredientes inductores de la saciedad, de los componentes de energía reducida y también de los quemadores. Ejemplos de los sustitutos de comidas comercializados por la industria alimentaria son Slimfast (Unilever), Profiel (Numico), Ensure (Abbott) y Modifast (Novartis). Estos productos están presentados en una forma sólida, por ejemplo una barrita alimentaria, una mezcla en polvo, un producto de panadería o en formas líquidas como una bebida nutritiva.

Los quemadores usados en los productos alimentarios y también los suplementos son, por ejemplo, la cafeína combinada con la efedrina, aumentando el metabolismo energético. Ejemplos de los componentes bajos en energía reducida usados en los productos alimentarios son ésteres de sacarosa como Olestra, las fibras dietéticas y los productos bajos en grasa. Las fibras dietéticas pueden inducir también una deceleración del vaciado del estómago y una absorción lenta de los nutrientes.

Al parecer la gama combinada de productos comerciales ha resultado poco eficaz en el control del peso en los estudios en personas voluntarias, con algunas excepciones en el mercado alimentario y farmacéutico. En particular, los sustitutos de comidas han demostrado poca eficacia del principio (Critical reviews in food science and nutrition, (2001), 41 (1), 45-70).

Las soluciones conocidas en la técnica para inducir la saciedad están, por ejemplo, mencionadas en WO 01/30231 que describe un inhibidor de proteinasa, reivindicado para inducir un mecanismo de realimentación para la producción de CCK. Se sabe que la CCK está relacionada con la saciedad. Los ingredientes alimentarios comunes conocidos que afectan a la saciedad también pueden ser combinados para conseguir un efecto máximo sobre la sensación de saciedad como lo hacen los Pacific Health Laboratories (US 6.207.638) en su gama de productos Satietrol. El producto contiene proteína, ácidos grasos de cadena larga, calcio y fibras solubles e insolubles reivindicadas para afectar a la producción de la colocistocinina (CCK). US 4.833.128 describe una fórmula con un contenido elevado de fenilalanina también reivindicado para estimular la producción de CCK por el cuerpo.

Otros compuestos activos reivindicados para afectar a la sensación de saciedad de forma directa están descritos en WO 97/31943, (péptido GLP-2), WO 98/20895 (péptido GLP-1), WO 00/22937 (leptina), WO 99/55331 (ácido \alpha-lipoico), WO 95/29676 (cotinina), GB 2165452 (seudoefedrina) y WO 01/20991 (fitoquímicos).

Se describen varios sistemas portadores para crear una entrega dirigida de determinados componentes activos en el tracto digestivo como por ejemplo WO 01/17377 y DE 19942417 ambos empleando polisacáridos conteniendo ácido urónico opcionalmente entrecruzados como portador para los componentes activos, WO 93/24113 que emplea las fórmulas que crean una absorción retardada de los nutrientes para suprimir la sensación de hambre, y US 5.753.253 que usa los revestimientos sensibles al pH para suministrar los componentes activos en el íleon.

Se han descrito las estrategias que intentan inhibir las enzimas digestivas en US 5.726.291 (\alpha-amilasa) y los inhibidores de lipasa (Orlistat).

Otro modo para inhibir la adsorción de glucosa por el tracto digestivo humano ha sido descrito en la solicitud de patente US 2002/0037577, la cual reivindica el uso de los microorganismos probióticos como L.reuteri para capturar los azúcares digeribles y para convertirlos en polisacáridos no digeribles. Se prefieren que los microorganismos probióticos sean dosificados en cápsulas revestidas entéricas diseñadas para liberar los microorganismos en el intestino delgado.

Finalmente las estrategias que afectan al vaciado gástrico o la absorción retardada de los nutrientes están descritas en US 4.689.219 (xantano - mezclas de goma garrofin), WO 00/22937 (partículas de proteína gelificada para la absorción retardada de los aminoácidos) y EP 0471217 (capa de gelatina doble para la emisión del agente llenado del estómago).

Se han desarrollado las soluciones descritas en la técnica usando formas de dosificación sólidas para los compuestos activos que son o bien un compuesto que afecta directamente a la sensación de saciedad, o bien un inhibidor, o bien un compuesto de liberación lenta o bien un quemador. En cambio, las fórmulas líquidas están limitadas y están centradas en la entrega de los componentes activos particulares o bien forman parte de los sustitutos de comidas como las bebidas de diseño como Slim Fast o Ensure. En el caso de las fórmulas líquidas, sería deseable tener un compuesto activo que pueda ser formulado en un producto líquido sin afectar a los atributos organolépticos preferidos de la bebida. Preferiblemente, este compuesto activo no debería demostrar ninguna propiedad excesiva de espesamiento o de gelificación en el producto líquido. No obstante si este compuesto pudiera producir también saciedad después de entrar en el estómago, se volvería disponible un nuevo concepto para el desarrollo de las fórmulas líquidas para el control del peso.

Los ejemplos bien conocidos de los compuestos reivindicados por tener efectos que inducen a la saciedad son los hidrocoloides incorporados en las fórmulas sólidas, que crean un efecto notable espesante o gelificación en el estómago. Esto conduce a una sensación de saciedad y proporciona las posibilidades de gestionar la entrega de los nutrientes u otros compuestos activos al íleon. Los hidrocoloides usados en los productos líquidos tienen un nivel inferior de dosificación que oscila entre el 0.01 y el 1% peso y no demostrarán un aumento de la viscosidad después de entrar en el estómago, con respecto a un producto que no contenga ningún hidrocoloide. Una excepción teórica a esta regla está formada por las pectinas metiladas particularmente bajas que pueden aumentar la viscosidad en el caso de que aumente la acidez. En la práctica este concepto no puede ser usado debido a la alta sensibilidad de este tipo de pectina a los cationes de calcio, lo cual destruye el efecto ácido en la viscosidad (Gilsenan, P.M. thermally reversible acid induced gelation of low-methoxy pectin, (1999), 41, 339-349.

Se sabe que las fibras dietéticas insolubles como la fibra de trigo o fibras de manzana también son eficaces en la creación de una sensación de saturación en el caso de ser usadas en un producto líquido. La desventaja de estas fibras insolubles es el nivel limitado de dosificación en los productos líquidos debido a los efectos desestabilizantes en el producto líquido o la apariencia indeseada del producto líquido. Estos aspectos indeseados incluyen la precipitación de la fibra y la opacidad.

Además, el efecto de enlace al agua de las fibras dietéticas está limitado si se dosifica por medio de un producto líquido a diferencia de los productos sólidos. Además, otros compuestos activos pueden enlazarse irreversiblemente a las fibras dietéticas insolubles de ese modo disminuyendo su eficacia nutritiva.

Las limitaciones en la técnica descritas han creado la necesidad de un polisacárido que pueda ser empleado para estabilizar los productos líquidos sin provocar el problema de una apariencia indeseada, cambios indeseados en la textura, problemas de intolerancia para el consumidor, el contenido calórico y con la capacidad de aumentar el periodo de permanencia en el estómago. La presente invención prevé una solución para esta necesidad como se explica en la descripción de la invención.

Descripción de la invención

Se descubrió que la sensación de saciedad puede estar inducida incorporando un producto líquido para el consumo humano un \alpha-glucano altamente ramificado. Cuando es consumido por una persona, la viscosidad del producto líquido aumenta de forma drástica desencadenada por condiciones de bajo pH del estómago. El método resulta eficaz cuando se usa con niveles variables de glucano, p. ej. oscilando entre el 1 y el 10% peso en el producto líquido total que contiene proteína, en particular en presencia de una proteína. De esa forma, la invención pertenece al uso de los \alpha-glucanos ramificados para preparar una composición nutritiva o farmacéutica adecuada para la saciedad o para aumentar la saciedad en un humano.

Se observó que los \alpha-glucanos con un cierto grado elevado de ramificación combinado con un peso molecular particular inducen sorprendentemente un efecto espesante en el caso de un aumento de la acidez del producto, en particular en presencia de la proteína. Este efecto resulta favorable para la formulación de los productos líquidos añadiendo una funcionalidad estabilizante y texturizante de la bebida sin afectar a los atributos sensoriales preferidos y la apariencia. Después de reducir el pH, un efecto espesante notable ocurre conduciendo a una saciedad prolongada y mejorada y una sensación de saciedad a diferencia de las formulaciones existentes de productos líquidos que emplean los polisacáridos como compuesto activo.

Los \alpha-glucanos que se deben utilizar según la invención deberían tener un grado de ramificación de al menos un 8%. Se define el grado de ramificación como el número total de unidades de anhidroglucosa de ramificación (AGU), es decir el AGU estando enlazada a otras tres unidades, con respecto al número total de AGU de una molécula. El grado de ramificación puede ser determinado mediante los métodos conocidos en la técnica, como la hidrólisis selectiva usando isoamilasa seguido por la titulación colorimétrica con yodina, o la metilación del polisacárido seguida por la hidrólisis y el análisis de cromatografía de gases. El grado mínimo preferido de ramificación es el 10%, más preferido al menos el 12%, hasta p. ej. el 24%.

En general, un polisacárido ramificado consiste en tres tipos de unidades, (a) unidades terminales, estando enlazadas a otra unidad, (b) unidades de cadena, estando ligadas a otras dos unidades, y (c) unidades de ramificación, estando ligadas a otras tres unidades. El número total de unidades de ramificación es igual al número total de unidades terminales menos dos. Por lo tanto, los polisacáridos de una longitud determinada (p. ej. aproximadamente 1.000 unidades, es decir con un peso molar superior a 160.000) el porcentaje de unidades de ramificación se vuelve aproximadamente igual al porcentaje de unidades terminales.

En vista de que los métodos para determinar la proporción exacta de las unidades de ramificación y terminales pueden dar como resultado unos valores ligeramente diferentes entre un método y otro, también se puede definir el grado de ramificación como el porcentaje de unidades de ramificación más el porcentaje de unidades terminales, dividido por dos.

Los glucanos que se deben utilizar según la invención contienen, como resultado de su naturaleza ramificada, al menos dos tipos para enlazar una AGU a otra. El tipo puede ser enlace 1,2, enlace 1,3, enlace 1,4 o enlace 1,6. Los glucanos de la invención contienen al menos enlace 1,6. Es preferible que los \alpha-glucanos ramificados contengan tanto el enlace 1,4 como el enlace 1,6, las unidades de ramificación con enlaces 1,4,6 y equivaliendo al menos al 8% de la AGU. Los glucanos pueden también contener enlaces 1,3 y 1,6 como los glucanos de tipo mutante descritos en WO 03/008618. Los glucanos pueden tener un peso molecular promedio de al menos 10^{5} Da, preferiblemente al menos 5\cdot10^{5} Da, más preferiblemente al menos 2.5\cdot10^{6} Da, hasta p. ej. 10^{9}, en particular hasta 10^{8} Da. Preferiblemente, los glucanos son no iónicos, y más preferiblemente no derivatizados, aunque será aceptable un grado de sustitución con p. ej. grupos acilo, grupos carboxilo, grupos hidroxialquilo hasta aproximadamente un 5%.

Preferiblemente se pueden obtener los glucanos que se deben utilizar a partir de la sacarosa mediante la actividad glucosil transferasa (síntesis de novo), por ejemplo expresada por los microorganismos aprobados para el consumo como L. reuteri (WO 01/90372). Alternativamente, los \alpha-glucanos altamente ramificados pueden ser derivados mediante la modificación de los glucanos disponibles de forma común - como el almidón, la amilopectina o el glicógeno - que tienen un grado de ramificación insuficiente, empleando los microorganismos adecuados o sus enzimas ramificantes (EC 2.4.1.18) que son capaces de producir el grado deseado de ramificación. Ejemplos de las enzimas ramificantes adecuadas son \alpha-(1,4)-D-glucano: \alpha(1,4)glucano 6-glicosiltransferasas y \alpha-(1,4)-D-glucano: ortofosfato \alpha-glicosiltransferasas (EC 2.4.1.1). También se pueden utilizar las mezclas de diferentes \alpha-glucanos altamente ramificados.

También es posible producir los glucanos altamente ramificados por la síntesis de novo a partir de la glucosa o los derivados de glucosa (fosforilados) empleando una combinación de una enzima sintetizante de glucano y una enzima ramificante, o mediante la síntesis a partir de sacarosa utilizando una combinación de una amilosucrasa y una enzima ramificante. Como ejemplo, se pueden obtener los \alpha(1,4)(1,6) glucanos altamente ramificados a partir de sacarosa mediante la acción combinada de una amilosucrasa y un \alpha-(1,4)-D-glucano: \alpha(1,4)glucano 6-glicosiltransferasa opcionalmente expresada en los cultivos modificados. Se puede obtener un grado de ramificación hasta el 35% como se describe en EP-A-1117802 (WO 00/22140, PlantTec).

El glicógeno es una molécula de almacenamiento de energía endogénica abundante en las formas de vida superiores y determinadas bacterias y tiene un grado de ramificación de aproximadamente un 8-12% (Voet and Voet, Biochemistry, John Wiley & Sons, 1990). El glicógeno está sintetizado por las glucosil transferasas empleando la glucosa activada como sustrato, siendo un proceso poco rentable desde el punto de vista económico para los fines industriales. Otro medio para obtener los \alpha(1,4)(1,6)-glucanos altamente ramificados está proporcionado por varios procesos enzimáticos (in planta o in situ con microorganismos o sus enzimas como se ilustra en EP-A-1117802.

Los \alpha-glucanos altamente ramificados obtenidos por la acción de la glucosiltransferasa en sacarosa como se describe en WO 01/90372 tienen un peso molecular de al menos 10^{7} según está determinado por SEC-MALLS-RI (Van Geel, I. et al. Appl. Environ. Microbiol. (1999) 65, 3008-3014) y una configuración muy compacta. A estos se les denomina "reuterán". Esta compacidad está demonstrada por el radio de giro, que muestra un nivel de sólo 35 nm. El grado de ramificación puede superar el 15% para estos glucanos particulares. El efecto espesante demostrado para el reuterán como función de la disminción del pH mediante el uso del ácido clorhídrico puede ser explicado por el efecto Hofineister según ha sido examinado por Collins (Collins, K.D. Washabaugh, M.W., (1985), Quart. Rev. Biophys. 18;323). El aumento en la estructura del agua que interrumpe la concentración de iones cloruro conduce a un enlace mejor al agua por el polisacárido reuterán. Se espera que el enlace al agua mejorado de como resultado el aumento de viscosidad observado, lo cual es pertinente para las condiciones del estómago. Por el contrario, si se emplean los electrolitos que mejoran la estructura del agua como el citrato, el reuterán será privado de su capacidad de enlace al agua como se muestra en los ejemplos más abajo.

Los glucanos que se debe utilizar según la invención deberían tener una digestibilidad reducida, es decir resistencia aumentada a la degradación por las enzimas intestinales, comparado con p. ej. el almidón. Preferiblemente, la digestibilidad (expresada como el porcentaje de liberación de glucosa en el yeyuno y el íleon p. ej. en el modelo gastro-intestinal de TNO para el intestino delgado: Minekus et al, Alternatives to Laboratory Animals (ATLA) 23: 197-209) debería ser inferior al 30% comparado con el almidón natural. Por lo tanto, los glucanos tienen características de las fibras nutritivas.

Se pueden utilizar los glucanos altamente ramificados como ingrediente en los productos usados para las aplicaciones médicas nutracéuticas y alimentarias, en particular los productos líquidos que preferiblemente también contienen un compuesto proteínico. Se puede dosificar el glucano a un nivel que oscila entre el 0.5 y el 10% peso, preferiblemente entre el 1 y el 8% peso (p/p), preferiblemente en combinación con una proteína de grado alimentario o farmacéutico presente en unos niveles que oscilan desde 0 hasta el 15% (p/p) en el producto total.

En una forma de realización preferida de la invención, se utilizan los \alpha(1,4)(1,6) glucanos altamente ramificados en los productos líquidos por ejemplo una bebida, que preferiblemente también contienen proteínas. Más preferiblemente, esta bebida es una bebida aromatizada o bebida de leche fermentada tal como una bebida de yogur. Ventajosamente, se puede inocular la bebida con una bacteria de ácido láctico, tal como el Lactobacillus reuteri, que expresa dicha actividad glucosiltransferasa combinada con un sustrato de sacarosa. La bebida es estabilizada y texturizada por el
\alpha(1,4)(1,6)-glucano soluble mientras que la vez se obtiene un efecto espesante notable después de entrar en contacto con las condiciones acídicas del estómago. Otras formas adecuadas de la composición líquida de la invención incluyen las bebidas de fruta, otros productos lácteos, las sopas, las salsas, o las soluciones o dispersiones diseñadas de forma especial. Cuando se hace referencia en la presente a una composición líquida o un producto líquido, se extiende naturalmente a un producto no líquido o semilíquido teniendo las mismas proporciones en peso que sus ingredientes, pero con un contenido de solvente diferente (es decir inferior). De ese modo, un producto líquido también cubre un concentrado o una forma en seco que, después de una dilución adecuada o de la adición de agua de otros solventes acuosos y posiblemente más ingredientes, produce una composición líquida que está lista para usar.

La composición líquida de la invención contiene también preferiblemente una proteína, que puede ser cualquier proteína de grado alimentario o farmaceútico que muestre buena estabilidad y solubilidad a pH 3-6; se alude a tal proteína en la presente como "proteína alimentaria". Las proteínas alimentarias adecuadas incluyen las proteínas de la leche tales como la caseína y las proteínas de lactosuero, las proteinas de la soja, del guisante, fúngicas, del huevo y la gelatina, o sus hidrolizados. Se puede incorporar la proteína en la composición líquida a un nivel de p. ej. 0.5 - 15 g por 100 g, preferiblemente del 2-10%peso. La proporción de peso preferida entre el \alpha-glucano y la proteína es entre 0.02 y 10, preferiblemente entre 0.2 y 5.

La composición ventajosamente también puede contener más fibras nutritivas, p. ej. fibras solubles fermentables o no fermentables tales como la pectina, la goma arábiga, la inulina, los arabinanos, los galactomananos o los oligosacáridos, y/o fibras insolubles tales como la celulosa, otros \beta-glucanos y la hemicelulosa, p. ej. a un nivel de 0.5-5 g por 100 g. La proporción en peso entre los glucanos conteniendo enlaces 1,6 ramificados poco digeribles que se deben utilizar según la invención y otras fibras nutritivas es preferiblemente entre 19 y 0.2, más preferiblemente entre 9 y 0.5. La composición puede además contener grasas, sustitutos de grasas, otros componentes de control del peso, emulsionantes, espesantes, estabilizadores, sabores, colorantes, sales, vitaminas, y otros componentes alimentarios, tales como frutas, nueces, cereales, etc.

La invención también pertenece a un método para inducir la saciedad de una persona que lo necesita, en particular para el control del peso o para prevenir o remediar la obesidad, mediante la administración del \alpha-glucano ramificado anteriormente descrito, preferiblemente en presencia de proteínas, normalmente en la forma de una bebida conteniendo el \alpha-glucano a un nivel de p. ej. un 1-10% en peso. Se puede adaptar la dosificación a la saciedad requerida y a las necesidades y condiciones individuales del sujeto. Por ejemplo, se puede administrar una cantidad de 1 g al día hasta p. ej. 250 g al día, en una única dosificación, o preferiblemente dividida en 2-4 dosificaciones diarias. Las cantidades preferidas oscilan entre 5 y 50 g de \alpha-glucano al día. Ventajosamente, el glucano está administrado en una base regular y repetida, p. ej. durante al menos 7 días o más.

Las ventajas de la presente invención están creadas por la sensación mejorada de saciedad para sus consumidores, mejor apariencia del producto, contenido calórico inferior, costes de formulación inferiores también debidos a pocas barreras legislativas y un marcado claro de los productos alimentarios destinados usando el ingrediente.

Las ventajas adicionales de usar estos compuestos para la aplicación destinada se encuentran en el hecho de que no se requiere ningún tratamiento térmico para activar el ingrediente como en el caso del almidón de amilopectina granular y no se observa ningún fenómeno de retrogradación en el tiempo, lo cual conduce a una estabilidad mejorada. También, los efectos perjudiciales de la actividad amilasa endógena humana en el efecto espesante no han sido observados para el reuterán, lo cual también conduce a un índice glucémico bajo.

Los experimentos in vitro han demostrado que este efecto espesante desencadenado por el pH ocasiona un aumento instantáneo de la viscosidad. Este efecto de la viscosidad crea oportunidades para que los reveladores del producto incorporen otros componentes activos en la bebida, los cuales necesitan una liberación retenida desde el estómago en el íleon.

Otras ventajas proporcionadas por el \alpha-glucano altamente ramificado es la degradación limitada durante el paso a través del intestino delgado reduciendo el índice glucémico del producto. Esto también lo convierte en un ingrediente muy adecuado para las formulaciones usadas por diabéticos.

Otras formas de realización de la invención son el uso del \alpha-glucano altamente ramificado en la formulación de productos sólidos o semisólidos produciendo también un efecto viscosificante en el estómago. Asimismo, las aplicaciones para piensos o para alimentos para animales son parte de la invención.

Ejemplo 1

Producción del reuterán

La cepa LB 35-5 fue producida según se describe en WO 01/90372 y posteriormente concentrada y lavada por centrifugado usando un tampón 0.1 M de ácido acético. Las células fueron suspendidas anaeróbicamente en un tampón 0.1 M de ácido acético con 150 g/l de sacarosa y pH 5.5 durante toda la noche bajo agitación. Al día siguiente, las células fueron extraídas por centrifugado y el reuterán fue lavado usando la diafiltración en una unidad de ultrafiltración de 150 kDa, hasta que la sacarosa ya no pudiera ser detectada. El reintento fue liofilizado y el reuterán resultante fue usado para experimentos posteriores.

Ejemplo 2

Propiedades físicas en agua y bebida de leche

El reuterán obtenido según se describe de acuerdo con el Ejemplo 1 fue añadido a un nivel del 5% a una bebida de leche comercial con un pH de 4 (Friesland Coberco Dairy Foods: Fristy sin azúcar añadido, sabor multifruta). La bebida de leche original y la bebida de leche con reuterán fueron evaluados por su viscosidad como función de tiempo y concentración de HCl. Para este propósito la viscosidad de las bebidas fue medida usando un reómetro dinámico Rheometrics RFSII con una geometría Couette DIN a una temperatura de 37º. Como referencia también una solución de reuterán del 7.5% peso en agua con un nivel de calcio de 0.2621 g/l de CaCl_{2}\cdot2H_{2}O fue realizada con un pH de 6.8. Cada muestra fue compensada para el volumen de 4 M de HCl añadido a las muestras acidificadas. Al principio un barrido de cepas fue ejecutado entre 0.1-100% a 10 rad/s para la bebida de leche para seleccionar una deformación en la región lineal para el barrido de tiempo a 10 rad/s (para las muestras acidificadas) o el barrido de frecuencia entre 0.1-100 rad/s (para las soluciones originales). Las medidas fueron realizadas directamente después de la preparación de la muestra. La Tabla 1 muestra el efecto espesante para la bebida de leche original al igual que para la bebida de leche que contiene el 5%peso de reuterán como función de cambio en la concentración de HCl y tiempo. El efecto espesante desencadenado por la caída del pH es drásticamente amplificado por el reuterán. La bebida de leche que contiene reuterán demuestra un efecto espesante muy útil debido a la concentración aumentada de HCl a un nivel fisiológicamente relevante. También la solución de reuterán puro en agua muestra un efecto espesante claro debido a un aumento en la concentración de HCl como puede derivarse de los barridos de frecuencia recogidos en la figura 1 (Barrido de frecuencia para una solución de reuterán del 7.5% peso en agua (10º DH) a dos valores de pH diferentes). Las viscosidades resultantes a 10 rad/s son 0.24 a pH 6.8 y 0.86 después de la caída del pH (pH 2).

TABLA 1 Viscosidad (Pa. s) de bebida de leche a 10 rad/s

	pH4	pH2,0h	pH2, 1 h	pH2,2h	pH2,3h
bebida de leche	0.01	0.01	0.02	0.025	0.03
bebida de leche con el 5% de reuterán	0.25	0.37	0.75	0.84	0.88

Ejemplo 3

Efecto espesante como función del grado de ramificación

Para demostrar la importancia del grado de la ramificación el siguiente experimento fue diseñado. Dos \alpha-glucanos ramificados fueron seleccionados siendo reuterán con un nivel de AGU con enlaces \alpha(1,4,6) del 16% (PM 3.5\cdot10^{6}) (van Geel I. et.al., Appl. Environ. Microbiol.(1999), 65, 3008-3014) y glicógeno obtenido por Merck (orden nº. 4202) con un nivel de AGU con enlaces \alpha(1,4,6) del 8% (PM 0.27-3.5\cdot10^{6}). Como control, se evaluó también un pululano (no ramificado) conteniendo el 31% de AGU con enlaces \alpha(1,6) (PM 3.5\cdot10^{6}). Los tres polisacáridos fueron dosificados en la bebida de leche según se usó en el ejemplo 2 a un nivel del 5%. Para las tres bebidas de leche y como referencia un barrido de frecuencia fue realizado como se describe en el ejemplo 2. La viscosidad a 10 rad/s para las bebidas no acidificadas fue derivada de un barrido de frecuencia separado como se ha descrito antes. Los resultados para estas medidas están recogidos en la tabla 2 mostrando la viscosidad a 10 rad/s dado que éstas fueron derivadas de los barridos de frecuencia realizadas para las bebidas acidificadas y no acidificadas, respectivamente. Los \alpha-glucanos que contienen AGU con enlaces \alpha(1,4,6) muestran un claro efecto espesante desencadenado por el pH. Por el contrario, el pululano que no tiene AGU con enlaces \alpha(1,4,6) no demuestra un efecto espesante en la bebida de leche tras la reducción del pH.

TABLA 2 Viscosidad (Pa. s) de bebida de leche con glucanos diferentes

	Viscosidad (Pa\cdots)	Aumento de viscosidad
	pH4	pH2
5% peso de reuterán en bebida de leche	0.2553	0.3695	45%
5% peso de glicógeno en bebida de leche	0.0064	0.0411	540%
5% peso de pululano en bebida de leche	0.8051	0.3661	-55%

Ejemplo 4

Cantidades diferentes de reuterán (0, 1, 2 y 5% p/p) fueron añadidas a Slim-Fast (comercialmente disponible) y termostatizadas al baño maría a 37ºC. El pH de las muestras fue ajustado a pH 2 añadiendo 4M de HCl. Para los controles (sin reducción del pH), se añadió una cantidad igual de agua (10 DH). La reología de las muestras fue medida usando un Rheometrics RFS II con geometría Couette DIN a 37ºC. Después de la termostatización, un barrido de cepas fue realizado a 37ºC. Los efectos espesantes pH-dependientes están resumidos en la tabla 3 mostrando los valres de G* fundamentales.

TABLA 3 Valores de G (Pa) Slim-Fast con cantidades diferentes de reuterán

G* fundamental (Pa)	G* (Pa)
5% reuterán en Slim-Fast	8.0
control de Slim-Fast pH2	15.5
1% reuterán en Slim-Fast pH2	20.0
2% reuterán en Slim-Fast pH2	29.5
5% reuterán en Slim-Fast pH2	47.0

Claims

1. Uso de un \alpha-glucano ramificado con un peso molar promedio de al menos 10^{5} Da y con un grado de ramificación de al menos el 8%, para preparar un líquido nutritivo o composición farmacéutica para inducir o aumentar la saciedad.

2. Uso según la reivindicación 1, donde el \alpha-glucano tiene un grado de ramificación de al menos el 10%, preferiblemente al menos del 12%.

3. Uso según la reivindicación 1 o 2, donde el \alpha-glucano tiene un peso molar promedio de entre 5.10^{5} y 10^{8} Da.

4. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde el \alpha-glucano contiene enlaces \alpha(1,4) y \alpha(1,6).

5. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, donde el \alpha-glucano es no iónico.

6. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5, donde el \alpha-glucano es producido por transferencia enzimática de glucosilo a partir de sacarosa.

7. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde el \alpha-glucano se usa en una concentración del 1-10% (en peso).

8. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-7, donde el \alpha-glucano está combinado con una proteína, especialmente una proteína de leche o de soja procesada.

9. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-8, donde una solución acuosa del 7.5% peso de \alpha-glucano a pH 2 muestra un aumento de la viscosidad de al menos 1.5 veces en comparación con la viscosidad a pH 6.8, medido a 10 rad/s.

10. Composición de alimentos líquidos, que contiene 1-10% peso de un \alpha-glucano con un peso molar promedio de al menos 10^{5} Da y con un grado de ramificación de al menos el 8%, y al menos el 1% en peso de una proteína alimentaria.

11. Método para inducir la saciedad en una persona que lo necesite, comprendiendo la administración reiterada a esta persona de una cantidad eficaz de un \alpha-glucano ramificado con un peso molar promedio de al menos 10^{5} Da.