ES2249396T3

ES2249396T3 - Uso de acido tiludronico y sus derivados en aves de corral para la preparacion de un medicamento destinado a prevenir y tratar la osteoporosis.

Info

Publication number: ES2249396T3
Application number: ES01400068T
Authority: ES
Inventors: Thierry Bardon; Dominique Thibaud
Original assignee: Ceva Sante Animale SA
Current assignee: Ceva Sante Animale SA
Priority date: 2000-01-12
Filing date: 2001-01-11
Publication date: 2006-04-01
Anticipated expiration: 2021-01-11
Also published as: EP1129714B1; SK286583B6; CZ2001135A3; AU1114101A; AU783667B2; FR2803521A1; JP2001199891A; HU0100122D0; IL140839A0; FR2803521B1; HUP0100122A3; US6482809B1; EP1129714A1; ATE306273T1; SK552001A3; ZA200100289B; HUP0100122A2; DE60113895D1; DK1129714T3; NZ509285A

Abstract

Utilización de una sustancia activa elegida entre ácido tiludrónico, una de sus sales farmacéuticamente aceptables, uno de sus hidratos y sus mezclas, en la preparación de un medicamento destinado a prevenir y a tratar la osteoporosis en la gallina ponedora.

Description

Uso de ácido tiludrónico y sus derivados en aves de corral para la preparación de un medicamento destinado a prevenir y tratar la osteoroposis.

La invención se refiere a la utilización del ácido tiludrónico, de una de sus sales farmacéuticamente aceptables o de uno de sus hidratos en la preparación de un medicamento destinado a prevenir y a tratar la osteoporosis en la gallina ponedora.

Las aves hembra tienen un metabolismo óseo particularmente solicitado con el objetivo de producir el cascarón de los huevos rico en minerales, entre los cuales se encuentra en primera fila el calcio. El hueso en las aves hembra cumple dos funciones esenciales: una función mecánica, común al conjunto de los vertebrados, que confiere las propiedades de sujeción del cuerpo en el espacio y una función fisiológica, propia de las aves hembra, que constituye una reserva cálcica fácilmente movilizable para la producción del cascarón del huevo. La función mecánica está garantizada por dos tipos de huesos: el hueso cortical que constituye la envoltura externa de los huesos y el hueso trabecular, que constituye tramos óseos orientados según las líneas de fuerza en el interior de los huevos. La función fisiológica está esencialmente garantizada por un tercer tipo de hueso, el hueso medular que ocupa las cavidades de algunos huesos largos o de huesos planos. El hueso medular se desarrolla entre los tramos del hueso trabecular. Este hueso muy frágil no garantiza ninguna función mecánica.

En periodo de puesta, el hueso medular experimenta ciclos de resorción - formación, estando cada ciclo acompañado por la formación de un huevo. Al resorberse, el hueso medular libera una cantidad importante de calcio necesaria para la producción del cascarón del huevo. La formación que acompaña esta resorción permite la reconstitución de la reserva cálcica medular que se movilizará en el siguiente ciclo.

Entre las aves hembra, la gallina, en particular la gallina ponedora de huevos destinados al consumo humano, es la especie cuyo metabolismo óseo está fuertemente solicitado. En efecto, los constantes progresos en los campos de la selección genética y de la nutrición han conducido a lo largo de los 30 últimos años a un aumento regular del número de huevos puestos por gallina. Actualmente, es frecuente que una gallina ponga más de 300 huevos por año de puesta. En el momento álgido de la fase productiva, una gallina pone un huevo por día. Paradójicamente, esta evolución va acompañada de una reducción de la dimensión de los animales, y por lo tanto, en particular, del volumen de la reserva cálcica que representa el esqueleto.

El metabolismo óseo en la gallina no se ha estudiado todavía exhaustivamente. Sin embargo, las modificaciones experimentadas por el hueso medular y el hueso estructural respecto de la puesta empiezan a entenderse mejor (véase por ejemplo los artículos de Wilson S. et al., 1992, Res. Vet. Sci., 53, 52-58, de Miller S.C., p.103-116 y de Whitehead C.C. et al., p. 265-280 publicados en el libro "Bone biology and skeletal disorders in poultry", 1992, Ed. C.C. Whitehead, Carfax Publishing Company). A medida que avanza la puesta, el volumen del hueso medular aumenta para, de este modo, garantizar la producción del cascarón de los huevos y el mantenimiento de esta producción a lo largo del tiempo. El calcio almacenado en el hueso medular tiene como principal origen el calcio alimentario. Pero el hueso estructural participa también en la constitución de la reserva cálcica medular. De este modo, progresivamente a lo largo de la puesta, mientras que el hueso medular experimenta un remodelado permanente a cada ciclo de puesta, el hueso estructural (hueso cortical y hueso trabecular) experimenta una resorción que libera el calcio que se va a almacenar a continuación en el hueso medular. Esta resorción no está compensada por la formación de un nuevo hueso estructural. La resultante de este fenómeno es una pérdida de hueso estructural a lo largo de la puesta sin que esto afecte a la mineralización ósea. Esto caracteriza la osteoporosis de la gallina. Este proceso progresivo de pérdida ósea está precedido por otra pérdida de hueso estructural que acompaña esta vez la formación del hueso medular, formación que empieza con el desarrollo de los folículos ováricos, aproximadamente dos semanas antes del inicio de puesta (Wilson S. et al., Res. Vet. Sci., 1998. 64, 37-40). De este modo, la osteoporosis empieza precozmente en la gallina ponedora, en el momento de la adquisición de la madurez sexual: la pérdida de hueso estructural en este estadio acompaña la formación del hueso medular. Esta sigue a lo largo de toda la puesta: acompaña entonces el remodelado del hueso medular indispensable para la producción del cascarón del huevo.

Las consecuencias de la osteoporosis en la gallina son de diversos órdenes: médico, bienestar y económico. En efecto, la pérdida de sustancia ósea cortical y trabecular está en el origen de una fragilización del esqueleto que conduce a la aparición de fracturas espontáneas a lo largo de la puesta o fracturas provocadas por la manipulación de los animales al final de la puesta en el camino del matadero. Unos trastornos locomotores están asociados a la fragilización del esqueleto, hasta el punto de reducir, incluso suprimir los desplazamientos del animal que termina por no alimentarse y morir. De este modo, se replantea el bienestar del animal (dolor de las fracturas, desplazamientos limitados, mala alimentación). Finalmente desde el punto de vista económico, la osteoporosis genera pérdidas ligadas a la mortalidad, a la bajada de la producción de huevos y al nulo valor económico de los caparazones de las gallinas que tienen fracturas.

Por las consecuencias que conlleva, la osteoporosis es una de las mayores preocupaciones de la industria de la cría de la gallina ponedora de huevos destinados al consumo humano (Knowles T.G. et al., 1998, Poultry Science, 77, 1798-1802). La búsqueda de soluciones que permiten reducir la importancia del proceso osteoporótico en la gallina ponedora responde a una fuerte necesidad de esta industria.

Los derivados del ácido bifosfónico, o bisfosfonatos, de interés médico son hoy en día bien conocidos. Sus propiedades farmacológicas y sus aplicaciones terapéuticas están bien descritas en el estado de la técnica en los mamíferos, en el hombre en particular. Los derivados del ácido bifosfónico ejercen propiedades antiresortivas en el hueso y una acción reguladora del remodelado óseo La principal diana celular de estos compuestos es el osteoclasto, célula responsable de la resorción ósea. El mecanismo de acción celular está en vía de elucidación. Parece que actualmente en el seno de la familia de los bisfosfonatos, es posible distinguir dos grupos de compuestos que actúan de manera distinta sobre el metabolismo del osteoclasto: los compuestos desprovistos de una función nitrogenada, función amina en particular, y los compuestos que poseen tal función. En el primer grupo, se encuentran compuestos tales como ácido etidrónico, ácido clodrónico o ácido tiludrónico. Estos compuestos ejercen en parte su acción citotóxica sobre los osteoclastos a través de metabolitos formados en el seno de la célula; estos metabolitos son nucleótidos no hidrolizables análogos del ATP (Autiola S et al., 1997, J. Chromat. B. 704, 187-195, Rogers M.J. et al., 1999, Bone, 24, 73S-79S). En el segundo grupo (bisfosfonatos con función nitrogenada), se encuentran compuestos tales como ácido pamidrónico, ácido alendrónico, ácido risedrónico, ácido ibandrónico. Estos compuestos ejercen una acción citotóxica a través de la inhibición de la vía metabólica del mevalonato que conduce a la ausencia de activación de proteínas necesarias para la acción osteolítica de los osteoclastos (Luckman S.P., 1998, J. Bone Miner. Res., 13, 581-589).

A este modo de acción diferente en el ámbito celular corresponde una diferencia de intensidad del efecto farmacológico sobre la resorción ósea. Los bisfosfonatos no nitrogenados aparecen menos potentes que los compuestos nitrogenados. A título de ejemplo, se indica que por vía subcutánea, la dosis más baja que ha conllevado un efecto inhibidor sobre un modelo de resorción ósea en la rata es 300 a 400 veces más baja con el ácido alendrónico que con el ácido tiludrónico (Geddes A., 1994, en "Bone and Mineral Research" Ed. Elsevier Science BV, p. 265-306).

Esta diferencia de efecto farmacológico se vuelve a encontrar en el plano clínico en las indicaciones para las cuales estos compuestos se benefician de autorizaciones de comercialización como medicamentos. Entre éstas, la osteoporosis de la mujer menopáusica es una indicación privilegiada de los derivados del ácido bisfosfónico. Algunos derivados tienen una autorización de comercialización en esta indicación; es el caso del ácido alendrónico, a la dosis diaria de 10 mg por persona por vía oral (Lourwood D.L., 1998, Pharmacotherapy, 18, 779-789). Otros compuestos no han demostrado su eficacia en esta indicación. Es el caso del ácido tiludrónico a la dosis de 50 o 200 mg por persona por vía oral (Reginster J.Y., 1998, Bone, 23(5) Supl., S594). Hay que subrayar que la relación de las dosis diarias entre los dos compuestos en esta indicación (osteoporosis) es de 5 a 20, es decir, muy inferior a la relación de las dosis anteriormente mencionadas entre estos dos mismos compuestos sobre un modelo de inhibición de resorción.

El documento WO0064516 citado a tenor del artículo 54(3) CBE divulga la administración parenteral controlada de bisfosfonatos, como por ejemplo el tiludronato, para el tratamiento de la osteoporosis en los animales, por ejemplo el pavo, y en el hombre.

El documento WO09414455 describe la utilización de una combinación de un estrógeno y un bisfosfonato, por ejemplo el tiludronato, para la inhibición de la resorción ósea, la prevención de la pérdida ósea y la promoción de la formación ósea en los animales, como por ejemplo las aves, y en el hombre, que padece osteoporosis.

El documento EP0950417 presenta la utilización de una combinación de leptina con un bisfosfonato, como el ácido tiludrónico o su forma iónica, para el tratamiento de la osteoporosis en los animales, por ejemplo las aves de corral y en el hombre.

Respecto de las aves, se han llevado a cabo pocos trabajos hasta ahora para estudiar los efectos de los derivados del ácido bisfosfónico en el tratamiento y la prevención de la osteoporosis. Un primer estudio demuestra el efecto inhibidor del ácido alendrónico sobre la resorción del hueso trabecular que acompaña la adquisición de la madurez sexual en la gallina ponedora cuando el producto es administrado por vía subcutánea a la dosis de 0,01 mg/kg dos veces por semana a partir de las 16 semanas de edad y hasta la puesta del primer huevo, fecha en la que las gallinas han sido sacrificadas con el fin de realizar un examen histomorfométrico en la región proximal del hueso tarsometatarso (Thorp B.H. et al., 1993, AvianPathol., 22, 671-682). Un segundo estudio utiliza un protocolo de administración ligeramente diferente: el ácido alendroico se administra a lo largo de dos semanas a partir de la edad de 14 semanas, es decir, una dosis total de 0,06 mg/kg administrada a cada gallina (Wilson S. et al., Res. Vet. Sci, 1998, 64, 37-40). En este estudio una mitad del efectivo de gallinas testigo y tratadas se sacrifica al inicio de puesta, siendo la otra mitad sacrificada 18 semanas después del inicio de puesta. Como el anterior, este estudio demuestra el efecto inhibidor del alendronato sobre la resorción ósea que precede a la puesta del primer huevo. En los dos casos, el volumen óseo trabecular es del 25 al 30% más elevado de media en las gallinas tratadas que en las gallinas testigo. Después de 18 semanas de puesta, las gallinas tratadas siguen teniendo un volumen óseo trabecular más elevado de aproximadamente el 35% que las gallinas testigo pero, en los dos grupos de animales, la pérdida ósea trabecular que indica la evolución del proceso osteoporótico es comparable y representa aproximadamente entre el 25 y el 30% del volumen óseo trabecular al inicio de puesta. Estos dos estudios permiten por lo tanto concluir que el ácido alendrónico reduce la pérdida ósea que acompaña la formación del hueco medular antes del inicio de puesta pero no permite reducir considerablemente la pérdida ósea que acompaña el remodelado del hueso medular durante la puesta.

Estos trabajos sugieren por lo tanto que un derivado bifosfónico permite prevenir parcialmente la osteoporosis de la gallina ponedora sin que por ello se inhiba la resorción ósea que acompaña el remodelado del hueso medular durante la puesta.

Estos trabajos revelan por otra parte, que el ácido alendrónico conlleva una reducción del volumen del hueso medular no significativa al inicio de puesta, pero que se vuelve significativa a lo largo de la puesta: 18 semanas después del inicio de puesta, las gallinas tratadas con ácido alendrónico tienen un volumen óseo medular aproximadamente un 20% más bajo que el de los animales testigo. Este resultado es desfavorable ya que parece indicar que la administración de derivados de ácido bisfosfónico puede tener un impacto sobre la formación del cascarón de los huevos, y, por consiguiente, sobre la producción de huevos. Los trabajos publicados no presentan resultados sobre la producción de huevos durante el tratamiento antes del inicio de puesta. Por el contrario, el estudio de Thorp et al., demuestra claramente un efecto nefasto sobre la producción de huevos cuando se administra bisfosfonato durante la puesta, con una disminución e incluso una parada de la puesta en función de la dosis utilizada.

De este modo, el estado de la técnica lleva a pensar que, si los derivados de ácido bisfosfónico, administrados antes del inicio de puesta, son potencialmente activos para tratar o prevenir la osteoporosis de la gallina, actúan principalmente sobre la inhibición parcial de la pérdida ósea que acompaña la formación del hueso medular antes del inicio de puesta sin tener ningún efecto sobre la pérdida ósea que acompaña el remodelado del hueso medular durante la puesta. Por otra parte, este efecto inhibidor de la pérdida ósea está asociado a un efecto desfavorable sobre el hueso medular susceptible de comprometer la producción de cascarones de huevos de calidad, incluso la producción de huevos. Esto replantea el interés potencial de los bisfosfonatos en el tratamiento o la prevención de la osteoporosis de la gallina; es esencial, en efecto, que el tratamiento preserve el potencial de producción de huevos para ser económicamente aceptable por un criador.

Por extrapolación, se podría haber esperado la obtención de efectos análogos, y por lo tanto insatisfactorios, con el ácido tiludrónico a dosis más elevadas (de 300 a 400 veces más elevadas) que las utilizadas en los estudios realizados con el ácido alendrónico, es decir, aproximadamente 20 - 25 mg/kg en total por vía subcutánea. Una comparación de los estudios realizados en el hombre con ácido tiludrónico de una parte y con ácido alendrónico por otra parte incita a pensar, en efecto, que dosis inferiores de ácido tiludrónico (dosis subóptimas) son insuficientes para obtener efectos significativos en el tratamiento de la osteoporosis posmenopáusica.

Ahora bien, de manera inesperada, los inventores han demostrado que dosis subóptimas de ácido tiludrónico podrían prevenir la osteoporosis en la gallina ponedora, no solamente inhibiendo la pérdida ósea que acompaña la formación de hueso medular antes del inicio de puesta, sino también inhibiendo la pérdida ósea que acompaña el remodelado del hueso medular durante la puesta. Este resultado es muy significativo, puesto que el ácido tiludrónico ha sido administrado varias semanas antes del inicio de puesta; los efectos del producto se pueden todavía medir varios meses después del final de su administración. Este efecto positivo sobre el tratamiento de la osteoporosis no va acompañado de un efecto negativo sobre el hueso medular. El ácido tiludrónico no conlleva ninguna reducción del desarrollo del hueso medular durante la puesta. No hay, por lo tanto que temer los efectos desfavorables sobre la producción de cascarones de calidad o sobre la producción de huevos observados por la administración de ácido alendrónico.

Más concretamente, la invención se refiere a la utilización de una sustancia activa elegida entre el ácido tiludrónico, una de sus sales farmacéuticamente aceptable, uno de sus hidratos y sus mezclas, en la preparación de un medicamento destinado a prevenir y a tratar la osteoporosis en la gallina ponedora.

Por ácido tiludrónico, se entiende el compuesto que responde a la siguiente fórmula

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Las sales de este compuesto con ácidos o bases minerales u orgánicas farmacéuticamente aceptables que se pueden también utilizar en el marco de la invención. Ejemplos de sales con ácidos son el clorhidrato, bromhidrato, sulfato, acetato, hidrogenosulfato, dihidrogenofosfato, metanosulfonato, metilsulfato, maleato, fumarato, sulfonato, naftalenosulfonato, glicolato, gluconato, citrato, isetionato, benzoato, salicilato, ascorbato, tartrato, succinato, lactato, glutarato, toluenosulfonato y ascorbato. Como ejemplo de sales con bases minerales u orgánicas, se pueden citar las sales de amonio o las sales de metales alcalinos, tales como por ejemplo las sales sódicas.

Se prefieren más particularmente a título de sustancia activa, las sales sódicas del ácido tiludrónico y particularmente la sal disódica de éste.

Los hidratos de estos compuestos se pueden igualmente utilizar según la invención.

La vía de administración puede ser la vía oral, la vía parenteral o la vía nasal. Por vía oral, el tratamiento se puede administrar en agua de bebida. Por vía parenteral, se puede utilizar la vía subcutánea, intradérmica, intramuscular, intravenosa o intraarticular. Por vía nasal, el tratamiento se puede administrar mediante dispositivos que garantizan la dispersión en el aire de finas gotitas de líquido, preferiblemente de agua, en el cual se habrá incorporado previamente el medicamento. Tales dispositivos son por ejemplo nebulizadores, atomizadores, vaporizadores, aerosoles.

La forma galénica de administración del medicamento está en función de la vía de administración. Por la vía oral, se prefieren formas solubilizables en agua. Entre éstas, se pueden mencionar polvos orales, comprimidos de disolución rápida, comprimidos efervescentes, soluciones bebibles. Para la vía parenteral, el tratamiento se puede administrar en forma de solución, preferiblemente acuosa, de suspensión, de implantes o de preparaciones liofilizadas.

Las preparaciones destinadas a la vía oral pueden contener, además del ácido tiludrónico, un agente de disgregación, un agente de flujo, un lubricante y cualquier excipiente base apropiado.

Como excipiente de masa, se puede utilizar lactosa, celulosa o almidones. Como lubricante, se puede utilizar ácido esteárico, estearato de magnesio, L-leucina o, por ejemplo tribehenato de glicerol. Como agente de disgregación, se puede utilizar carboximetilalmidón sódico, carboximetilcelulosa sódica reticulada o, por ejemplo polivinilpirrolidona reticulada. Como agente de flujo, se puede utilizar sílice pura o dióxido de silicio coloidal.

La presente invención se refiere también a las formas orales de disolución instantánea y a las formas orales efervescentes obtenidas añadiendo un par efervescente a la composición según la invención. Como par efervescente, se puede utilizar ácido tártrico y bicarbonato sódico o ácido cítrico y bicarbonato sódico.

La invención se refiere igualmente a los comprimidos de disolución instantánea, a los comprimidos efervescentes así como a los comprimidos recubiertos por un revestimiento. Una composición que contiene laurilsulfato de sodio según la patente europea EP 336851 es particularmente apropiada.

Las preparaciones inyectables se preparan mezclando uno o diversos derivados de ácido bisfosfónico con un regulador de pH, un agente tampón, un agente de puesta en suspensión, un agente de solubilización, un estabilizante, un agente de tonicidad y/o un conservante, y por transformación de la mezcla en una inyección intravenosa subcutánea, intramuscular, intradérmica o intraarticular según un procedimiento clásico. En su caso, las preparaciones inyectables se pueden liofilizar según un procedimiento clásico.

Ejemplos de agentes de puesta en suspensión engloban metilcelulosa, polisorbato 80, hidroxietilcelulosa, acacia, goma de adraganto en polvo, carboximetilcelulosa sódica o monolaurato de sorbitano polietoxilado.

Ejemplos de agentes de solubilización engloban aceite de ricino solidificado por polioxietileno, polisorbato 80, nicotinamida, monolaurato de sorbitano polietoxilado, macrogol y éster etílico de ácido graso de aceite de ricino.

Además, el estabilizante engloba sulfito sódico, metasulfito sódico y éter, mientras que el conservante engloba el p-hidroxibenzoato de metilo, p-hidroxibenzoato de etilo, ácido sórbico, fenol, cresol y clorocresol.

Un ejemplo de agente de tonicidad es el manitol.

Durante la preparación de las soluciones o suspensiones inyectables, es deseable procurar que éstas sean isotónicas con la sangre.

La importancia de los efectos obtenidos es máxima cuando el ácido tiludrónico se administra antes del inicio de puesta.

Ventajosamente, la administración de ácido tiludrónico se inicia antes de la edad de inicio de puesta, en los dos meses que preceden al inicio de puesta, preferiblemente las seis semanas que preceden al inicio de puesta.

La duración del tratamiento está en función de la vía de administración. El ácido tiludrónico se puede administrar en una sola vez o a intervalos (preferiblemente a intervalos regulares) en el espacio de algunos días o de algunas semanas.

Preferiblemente, la administración de ácido tiludrónico se detiene al inicio de puesta.

El ritmo de administración se debe elegir también en función de la vía de administración y de la dosis.

La administración se puede efectuar por vía nasal, oral o parenteral.

Por vía oral o por vía nasal, se prefiere administrar el tratamiento de manera repetida según un ritmo diario, cada dos días, semanal o a intervalos regulares cada 2 a 6 días. La dosis por administración se puede dar en una sola vez o de manera fragmentada en varias horas o también de manera continua durante un periodo de tiempo de algunas horas.

Por vía parenteral, el tratamiento se puede administrar bien en inyección única, bien en inyecciones repetidas según un ritmo diario, cada dos días, semanal o a intervalos regulares cada 2 a 6 días. Un ritmo preferido de tratamiento por vía parenteral es el tratamiento en inyección única.

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Las dosis recomendadas varían en función de la vía de administración. Por vía oral o nasal, las dosis por administración están comprendidas entre 0,5 y 50 mg/kg, preferiblemente entre 1 y 20 mg/kg. Por vía parenteral, las dosis por administración están comprendidas entre 0,1 y 50 mg/kg, preferiblemente entre 0,25 y 25 mg/kg.

Ejemplo

Un efectivo de 216 gallinas de cepa ISA Brown de 15 a 17 semanas de edad se ha repartido en tres grupos con el objetivo de evaluar los efectos sobre el hueso de una administración única por vía subcutánea de ácido tiludrónico, en forma de su sal sódica (tiludronato disódico).

Se han comparado tres dosis: 0, 1 y 10 mg/kg (cantidad correspondiente de ácido tiludrónico/kg). El ácido tiludrónico se administró en forma de soluciones acuosas inyectables de tal manera que el volumen inyectado por ave sea de 1 ml por kilo de peso vivo. Las soluciones de ácido tiludrónico estaban por lo tanto concentradas a 0,1% y 1% para las dosis de 1 y 10 mg/kg respectivamente. El grupo testigo recibió un placebo correspondiente a agua para preparación inyectable. Las inyecciones se han practicado en región subcutánea por encima del músculo pectoral superficial.

Las gallinas se alojaron en jaulas individuales en un mismo edificio a temperatura e higrometría controladas. Cada animal era identificado por un número llevado en una anilla fijada a un ala. Recibieron el mismo alimento estándar para gallina ponedora a voluntad durante toda la duración del estudio. El agua de bebida también se distribuyó a voluntad.

La edad media del inicio de puesta para las gallinas de esta cepa es de 20 semanas. En consecuencia, el plazo medio entre el tratamiento y la edad de inicio de puesta debía ser de 3 a 5 semanas. La duración del estudio ha sido de 40 semanas. Al final del estudio, las gallinas tenían una edad de 55 semanas.

La mitad del efectivo ha sido sacrificado al poner el primer huevo para realizar un examen histomorfométrico practicado en una sección descalcificada de la región proximal de uno de los huesos tarsometatarsos para la medición de los volúmenes óseos trabecular y medular.

La otra mitad del efectivo siguió hasta las 55 semanas de edad (es decir, después de 34 semanas de puesta), fecha a la cual todos los animales restantes fueron sacrificados. El mismo examen óseo ha sido realizado en estos animales y en las gallinas sacrificadas después de la puesta del primer huevo.

Los parámetros óseos se han comparado mediante un análisis de dispersión de 1 factor (factor dosis).

El examen histomorfométrico aplicado permite apreciar los cambios de estructura del hueso.

1.- Volumen del hueso trabecular del tarsometatarso

Al inicio de puesta los volúmenes óseos trabeculares aparecen significativamente diferentes (p = 0,01) entre los grupos (Cf. tabla 1). Una comparación de los grupos de dos en dos revela más particularmente una diferencia significativa entre los dos grupos tratados por ácido tiludrónico, el desvío entre los dos grupos tratados que evidencia una relación de efecto-dosis-De este modo, a la dosis de 10 mg/kg, la pérdida ósea trabecular que precede el inicio de puesta parece ser de menor importancia. Comparativamente con los testigos, la ganancia de volumen óseo trabecular es del 12% a la dosis de 10 mg/kg.

A las 55 semanas de edad, existe también una diferencia muy significativa (p<0,01) entre los grupos. Existe también una relación neta de efecto-dosis, produciendo la dosis de 10 mg/kg un volumen trabecular significativamente más elevado que el de los testigos. El desvío entre la dosis de 1 mg/kg y los testigos es igualmente importante. Por otra parte, es notable la constatación de que a la dosis de 1 mg/kg, no se ha producido ninguna pérdida ósea durante la puesta.

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TABLA 1

\begin{minipage}[t]{145mm} Volumen de hueso trabecular (expresado en %) del hueso tarsometarso en gallinas al inicio de puesta y a la edad de 55 semanas, en función de la dosis de ácido tiludrónico (expresada en mg/kg)\end{minipage}
Dosis de ácido tiludrónico (mg/kg)	0	1	10
Inicio de puesta	12,2 \pm 3,3	10,9 \pm 2,9	13,7 \pm 3,3
A 55 semanas de edad	9,8 \pm 2,0	11,3 \pm 2,5	12,0 \pm 2,0
Variación entre los dos periodos	-20%	+4%	-12%

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El hueso trabecular contribuye al mantenimiento de la integridad estructural del hueso. Los resultados obtenidos en este estudio indican por lo tanto que el ácido tiludrónico tiene un efecto significativo en la prevención de la pérdida ósea trabecular que acompaña el remodelado óseo durante la puesta. El efecto es menos marcado en la prevención de la pérdida ósea trabecular que acompaña la formación del hueso medular antes del inicio de puesta, incluso si el resultado obtenido a la dosis de 10 mg/kg tiende a indicar que tal efecto preventivo se puede alcanzar en función de la dosis administrada.

Estos efectos son notables al haber sido administrado el ácido tiludrónico en inyección única algunas semanas antes del inicio de puesta, es decir, varias semanas incluso varios meses antes de que se hayan observado estos efectos.

La resultante de estos efectos es la participación en el mantenimiento de la integridad estructural del hueso en la gallina ponedora a medida que la puesta avanza; esto es determinante para prevenir la osteoporosis de la gallina.

2. Volumen del hueso medular del tarsometatarso

Al inicio de puesta, los volúmenes óseos medulares son todavía débiles. Esto indica la reciente formación del hueso medular que empieza aproximadamente 2 semanas antes del inicio de puesta; la variabilidad individual es particularmente importante. El análisis estadístico no revela ninguna diferencia significativa entre los grupos. Se observan valores medios más bajos en los animales tratados con ácido tiludrónico que en los testigos.

A las 55 semanas de edad, los volúmenes óseos medulares medios no son significativamente diferentes entre los grupos durante la puesta. Este resultado difiere del obtenido con el ácido alendrónico que había conllevado una disminución significativa del volumen óseo medular en animales tratados antes del inicio de puesta y examinados aproximadamente 18 semanas después del inicio de puesta. La variabilidad individual es todavía importante en esta fecha. Sin embargo, la intensidad del remodelado óseo medular durante la puesta es diferente entre los animales testigo y los animales tratados con ácido tiludrónico. Mientras que en los testigos, el volumen óseo medular se ha multiplicado de media por un factor 6 después de 34 semanas de puesta, el factor multiplicativo es de 9 a la dosis de mg/kg y de 13 a la dosis de 10 mg/kg. A esta dosis, el volumen óseo medular es de media el 20% más elevado que el de los animales testigos.

TABLA 2

\begin{minipage}[t]{140mm} Volumen de hueso medular (expresado en %) del hueso tarsometarso al inicio de puesta y a la edad de 55 semanas, en función de la dosis de ácido tiludrónico (expresada en mg/kg)\end{minipage}
Dosis de ácido tiludrónico (mg/kg)	0	1	10
A 55 semanas de edad	2,93 \pm 2,03	2,75 \pm 2,72	3,53 \pm 3,04
Variación (coeficiente multiplicador) entre el	x 6	x 9	x 13
inicio de puesta y las 55 semanas de edad

Claims

1. Utilización de una sustancia activa elegida entre ácido tiludrónico, una de sus sales farmacéuticamente aceptables, uno de sus hidratos y sus mezclas, en la preparación de un medicamento destinado a prevenir y a tratar la osteoporosis en la gallina ponedora.

2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada porque la prevención y el tratamiento de la osteoporosis se llevan a cabo sin alteración del rendimiento de producción de huevos.

3. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizada porque la prevención y el tratamiento de la osteoporosis se llevan a cabo sin inhibición del desarrollo del hueso medular durante la puesta.

4. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque la prevención y el tratamiento de la osteoporosis garantizan la inhibición de la pérdida ósea antes y después del inicio de puesta.

5. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque la sustancia activa es una sal sódica del ácido tiludrónico, preferiblemente la sal disódica.

6. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el medicamento es apropiado para una administración oral, parenteral o nasal.

7. Utilización según la reivindicación 6, caracterizada porque la administración se inicia en las seis semanas que preceden la edad media del inicio de puesta.

8. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones 6 ó 7, caracterizada porque la administración se realiza en una sola vez o a intervalos regulares antes del inicio de puesta.

9. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, caracterizada porque cada dosis administrada comprende entre 0,5 y 50 mg por kg de peso corporal de sustancia activa.