ES2248380T3 - Agentes antitromboticos. - Google Patents
Agentes antitromboticos.Info
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- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
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- C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
Abstract
Un compuesto de fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en la que uno de R1 y R2 es Q1; el otro de R1 y R2 es Q2; en la que Q1 es 2-piridinilo (que puede llevar un sustituyente metilo, metoxi, metiltio, fluoro o cloro en la posición 5) o 3-piridinilo (que puede llevar un sustituyente metilo, fluoro o cloro en la posición 6); o Q1 es fenilo que puede llevar uno, dos o tres sustituyentes en las posiciones 3, 4 o 5 seleccionados independientemente entre halo, ciano, carbamoilo, aminometilo, metilo, metoxi, difluorometoxi, hidroximetilo, formilo, vinilo, dimetilamino, amino, hidroxi y 3, 4- metilendioxi, y además, el fenilo puede llevar un sustituyente 2-cloro o 2-fluoro; o Q1 es en la que -E-G-NH- es -CH2-CH2-NH-, -C(Ra)=CH-NH-, -C(Ra)=N-NH-, -N=CH-NH- o -N=N-NH- en las que Ra es hidrógeno, fluoro, cloro, bromo o metilo; Q2 es en las que Rm es alquilo (C1-C4), ciclohexilo, 4- tetrahidropiranilo, fenilo, 4-piridilo o 2-pirimidinilo; cuando R2 es Q1, entonces R3 es H, COOH,N- (metil)bencenosulfonilamino o fenilo (que puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo, cloro o fluoro) y R4 es H; y cuando R2 es Q2, entonces R3 es H y R4 es H, COOH, metilo, N-(metil)bencenosulfonilamino, fenilo no sustituido o fenilo (que puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo, cloro o fluoro; o una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de fórmula I.
Description
Agentes antitrombóticos.
Esta solicitud reivindica al beneficio de la
Solicitud Provisional de Estados Unidos Nº 60/225.926, presentada el
17 de agosto de 2000.
Esta invención se refiere a compuestos aromáticos
antitrombóticos que muestran actividad como inhibidores del factor
Xa y, por consiguiente, que son anticoagulantes útiles en mamíferos.
En particular, se refiere a compuestos aromáticos que tienen una
elevada actividad anticoagulante y actividad antitrombótica. De esta
manera, esta invención se refiere a nuevos inhibidores del factor
Xa, a composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos como
ingredientes activos y al uso de los compuestos como anticoagulantes
para la profilaxis y tratamiento de trastornos tromboembólicos tales
como trombosis venosa, embolia pulmonar, trombosis arterial, en
particular isquemia miocárdica, infarto de miocardio y trombosis
cerebral, estados hipercoagulables generales y estados
hipercoagulables locales, tales como después de operaciones de
angioplastia y de derivación coronaria y lesión generalizada de
tejido cuando se relaciona con el proceso inflamartorio. Además, los
derivados antitrombóticos son útiles como anticoagulantes en
aplicaciones in vitro.
El procedimiento de coagulación sanguínea, la
trombosis, se activa mediante una cascada proteolítica compleja que
conduce a la formación de trombina. La trombina retira
proteolíticamente los péptidos de activación de las cadenas
A\alpha y de las cadenas B\beta del fibrinógeno, que es soluble
en el plasma sanguíneo, iniciando la formación de fibrina
insoluble. La formación de trombina a partir de protrombina se
cataliza por el factor Xa.
En la actualidad, la anticoagulación se consigue
mediante administración de heparinas y coumarinas. El control
farmacológico parenteral de la coagulación y la trombosis se basa en
la inhibición de trombina mediante el uso de heparinas. Las
heparinas actúan indirectamente en la trombina acelerando el efecto
inhibidor de la antitrombina III (el principal inhibidor fisiológico
de la trombina). Como los niveles de antitrombina III varían en
plasma y como la trombina unida a coagulación parece resistente a
este mecanismo indirecto, las heparinas pueden ser un tratamiento
ineficaz. Como se cree que los ensayos de coagulación están
asociados con eficacia y seguridad, los niveles de heparina deben
controlarse con ensayos de coagulación (particularmente, el ensayo
del tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT)). Las
coumarinas impiden la generación de trombina bloqueando la
gamma-carboxilación
post-traduccional en la síntesis de protrombina y
otras proteínas de este tipo. Debido a su mecanismo de acción, el
efecto de las coumarinas sólo se puede desarrollar lentamente,
6-24 horas después de la administración. Además, no
son anticoagulantes selectivos. Las coumarianas también necesitan un
control con ensayos de coagulación (particularmente el ensayo del
tiempo de protrombina (PT)).
El documento WO 00/39118 describe amidas
aromáticas antitrombóticas que muestran actividad como inhibidores
del factor Xa.
Recientemente, ha aumentado el interés por
pequeñas moléculas sintéticas que muestran gran inhibición directa
de trombina y factor Xa. Véase, Joseph P. Vacca (Annette M. Doherty,
Section Editior), Annual Reports in Medicinal Chemistry,
(1998), 33, 81-90.
Aunque las heparinas y coumarinas son
anticoagulantes eficaces, todavía no se ha sacado ningún fármaco
comercial de las pequeñas moléculas sintéticas; y a pesar de la
continua promesa de esta clase de compuestos, sigue existiendo la
necesidad de anticoagulantes que actúen selectivamente en el factor
Xa o en la trombina, y que, independientemente de la antitrombina
III, ejerzan una acción inhibidora poco tiempo después de la
administración, preferiblemente por vía oral, y no interfiera con la
lisis de coágulos de sangre, requerida para mantener la
hemostasis.
La presente invención se refiere al
descubrimiento de que los compuestos de la presente invención, como
se define más adelante, son potentes inhibidores del factor Xa que
pueden tener una gran biodisponibilidad después de la administración
oral.
De acuerdo con la invención, se proporciona un
compuesto de fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo)
en la
que
uno de R^{1} y R^{2} es Q^{1}; el otro de
R^{1} y R^{2} es Q^{2};
en la
que
Q^{1} es 2-piridinilo (que
puede llevar un sustituyente metilo, metoxi, metiltio, fluoro o
cloro en la posición 5) o 3-piridinilo (que puede
llevar un sustituyente metilo, fluoro o cloro en la posición 6);
o
Q^{1} es fenilo que puede llevar uno, dos o
tres sustituyentes en las posiciones 3, 4 ó 5 seleccionados
independientemente entre halo, ciano, carbamoilo, aminometilo,
metilo, metoxi, difluorometoxi, hidroximetilo, formilo, vinilo,
dimetilamino, amino, hidroxi y 3,4-metilendioxi, y
además, el fenilo puede llevar un sustituyente
2-cloro o 2-fluoro; o
Q^{1} es
en la
que
-E-G-NH- es
-CH_{2}-CH_{2}-NH-,
-C(R^{a})=CH-NH-,
-C(R^{a})=N-NH-, -N=CH-NH-
o -N=N-NH- en las que R^{a} es hidrógeno, fluoro,
cloro, bromo o metilo;
Q^{2} es
en las que R^{m} es alquilo
(C_{1}-C_{4}), ciclohexilo,
4-tetrahidropiranilo, fenilo,
4-piridilo o
2-pirimidinilo;
cuando R^{2} es Q^{1}, entonces R^{3} es H,
COOH, N-(metil)bencenosulfonilamino o fenilo (que
puede estar sustituido en la posición 3 ó 4 con metilo, cloro o
fluoro) y R^{4} es H; y
cuando R^{2} es Q^{2}, entonces R^{3} es H
y R^{4} es H, COOH, metilo,
N-(metil)bencenosulfonilamino, fenilo no sustituido o
fenilo (que puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo,
cloro o fluoro;
o una sal farmacéuticamente aceptable del
compuesto de fórmula I.
Un compuesto particular de fórmula I es un
compuesto de fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo)
en la
que
uno de R^{1} y R^{2} es Q^{1}; el otro de
R^{1} y R^{2} es Q^{2};
en la
que
Q^{1} es 2-piridinilo (que
puede llevar un sustituyente metilo, metoxi, metiltio, fluoro o
cloro en la posición 5) o 3-piridinilo (que puede
llevar un sustituyente metilo, fluoro o cloro en la posición 6);
o
Q^{1} es fenilo que puede llevar uno, dos o
tres sustituyentes en las posiciones 3, 4 o 5 seleccionados
independientemente entre halo, ciano, carbamoilo, aminometilo,
metilo, metoxi, difluorometoxi, hidroximetilo, formilo, vinilo,
amino, hidroxi y 3,4-metilendioxi, y además, el
fenilo puede llevar un sustituyente 2-cloro o
2-fluoro; o
Q^{1} es
en la
que
-E-G-NH- es
-CH_{2}-CH_{2}-NH-,
-C(R^{a})=CH-NH-,
-C(R^{a})=N-NH-, -N=CH-NH-
o -N=N-NH- en las que R^{a} es hidrógeno, fluoro,
cloro, bromo o metilo;
Q^{2} es
\vskip1.000000\baselineskip
en las que R^{m} es alquilo
(C_{1}-C_{4}), ciclohexilo,
4-tetrahidropiranilo, fenilo,
4-piridilo o
2-pirimidinilo;
cuando R^{2} es Q^{1}, entonces R^{3} es H,
COOH, N-(metil)bencenosulfonilamino o fenilo (que
puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo, cloro o
fluoro) y R^{4} es H; y
cuando R^{2} es Q^{2}, entonces R^{3} es H
y R^{4} es H, COOH, metilo,
N-(metil)bencenosulfonilamino, fenilo no sustituido o
fenilo que puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo,
cloro o fluoro;
o una sal farmacéuticamente aceptable del
compuesto de fórmula I.
Como se usa en este documento, la expresión de un
compuesto de fórmula I o la expresión un compuesto de la invención
incluye el compuesto y cualquier profármaco convencional del mismo,
así como sales farmacéuticamente aceptables de dicho compuesto o
profármaco.
Una sal farmacéuticamente aceptable de un agente
antitrombótico de la presente invención incluye uno que es una sal
de adición de ácidos preparada a partir de un compuesto básico de
fórmula I y un ácido que proporciona un anión farmacéuticamente
aceptable, así como una sal que se prepara a partir de un compuesto
ácido de fórmula I y una base que proporciona un catión
farmacéuticamente aceptable. Por lo tanto, una sal de un compuesto
nuevo de fórmula I como se proporciona en este documento preparado
con un ácido o una base que da un contraión farmacéuticamente
aceptable proporciona un aspecto particular de la invención. Los
ejemplos de dichos ácidos y bases se proporcionan en este documento
a continuación.
Como aspecto adicional de la invención se
proporciona una formulación farmacéutica que comprende junto con un
vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable, un
nuevo compuesto de fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable
del mismo) como se proporciona en cualquiera de las descripciones en
este documento.
Además, se proporciona el uso de un compuesto de
fórmula I (o sal) inhibidor del factor Xa como se describe en este
documento como ingrediente activo en la fabricación de un
medicamento para usar en la producción de un efecto anticoagulante o
antitrombótico.
Además, se proporciona el uso de un compuesto de
fórmula I inhibidor del factor Xa que tiene cualquiera de las
definiciones en este documento para la fabricación de un medicamento
para el tratamiento de un trastorno tromboembólico.
En esta memoria descriptiva, se usan las
siguientes definiciones, a menos que se describa otra cosa: Halo es
bromo, cloro o fluoro. Alquilo, alcoxi, etc. denotan grupos tanto
lineales como ramificados; aunque la referencia a un radical
individual tal como "propilo" abarca solo el radical de cadena
lineal ("normal"), denotándose específicamente un isómero de
cadena ramificada tal como "isopropilo".
Los valores particulares se muestran a
continuación para los radicales, sustituyentes, e intervalos, sólo
para ilustración, y no excluyen otros valores definidos u otros
valores dentro de intervalos definidos para los radicales y
sustituyentes.
Para un grupo alquilo o la porción alquilo de un
grupo que contiene alquilo tal como, por ejemplo alcoxi, un valor
particular para alquilo (C_{1}-C_{4}) es
metilo, etilo, isopropilo, o 2-butilo; y más
particularmente es etilo, isopropilo, o 2- butilo. Un valor
particular para halo es fluoro o cloro, y más particularmente es
fluoro.
Un valor particular para Q^{1} es 5- o
6-indolilo. Un valor más particular para Q^{1} es
6-indolilo. Un valor particular para Q^{2} es
1-(4-
piridinil)piperin-4-ilo.
Cuando R^{2} es Q^{1}, los valores particulares para R^{3} son
H o COOH, y más particularmente H, y para R^{4} es H. Cuando
R^{2} es Q^{2}, un valor particular para R^{4} es H y para
R^{3} es H.
Un compuesto de fórmula I más particular es uno
en el que uno de R^{1} y R^{2} es Q^{1} y el otro de R^{1}
y R^{2} es Q^{2};
Q^{1} es
en la
que
-E-G-NH- es
-CH_{2}=CH_{2}-NH-;
Q^{2} es
en la que R^{m} es
4-piridilo;
cuando R^{2} es Q^{1}, entonces R^{3} es H
o COOH y R^{4} es H; y
cuando R^{2} es Q^{2}, entonces R^{3} es H
y R^{4} es H.
Otro compuesto de fórmula I más particular es uno
en el que
R^{1} es Q^{2};
R^{2} es Q^{1};
Q^{1} es 6-indolilo;
Q^{2} es
1-(4-piridinil)piperin-4-ilo;
R^{3} es H; y
R^{4} es H.
Un compuesto de fórmula I aún más particular es
uno en el que
R^{1} es Q^{1};
R^{2} es Q^{2};
Q^{1} es 6-indolilo;
Q^{2} es
1-(4-piridinil)piperin-4-ilo;
R^{3} es H; y
R^{4} es H.
Se apreciará que ciertos compuestos de fórmula I
(o sales o profármacos, etc.) pueden existir en, y aislarse en,
formas isoméricas, incluyendo formas tautoméricas, isómeros
cis y trans, así como formas ópticamente activas,
racémicas o diastereoméricas. Se entenderá que la presente invención
abarca un compuesto de fórmula I en cualquiera de las formas
tautoméricas o en forma de una mezcla de las mismas; o en forma de
una mezcla de diastereómeros, así como en forma de un diastereómero
individual, y que la presente invención abarca un compuesto de
fórmula I en forma de una mezcla de enantiómeros, así como en forma
de un enantiómero individual, cualquiera de dichas mezclas o formas
posee propiedades inhibidoras contra el factor Xa, conociéndose bien
en la técnica cómo preparar o aislar las formas particulares y cómo
determinar las propiedades inhibidoras contra el factor Xa mediante
ensayos convencionales que incluyen los descritos más adelante.
Además, un compuesto de fórmula I (o sal o
profármaco, etc.) puede mostrar polimorfismo o puede formar un
solvato con agua u un disolvente orgánico. La presente invención
también abarca cualquier forma polimórfica, cualquier solvato o
cualquier mezcla de los mismos.
Un compuesto de fórmula I puede prepararse
mediante procedimientos que incluyen procedimientos conocidos en la
técnica química para la producción de cualquier compuesto conocido
de fórmula I o de compuestos estructuralmente análogos o mediante un
nuevo procedimiento descrito en este documento. Un procedimiento
para la preparación de un nuevo compuesto de fórmula I (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo), nuevos procedimientos para
la preparación de un compuesto de fórmula I y nuevos intermedios
para la fabricación de un compuesto de fórmula I definido
anteriormente proporcionan más características de la invención y se
ilustran mediante los siguientes procedimientos en los que los
significados de los radicales genéricos son como se han definido
anteriormente, a menos que se especifique otra cosa. Se reconocerá
que puede preferirse o ser necesario preparar un compuesto de
fórmula I en la que un grupo funcional se protege usando un grupo
protector convencional, y después retirar el grupo protector para
proporcionar el compuesto de fórmula I.
De esta manera, se proporciona un procedimiento
para preparar un nuevo compuesto de fórmula I (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo) que se proporciona en
cualquiera de las descripciones anteriores que se selecciona entre
cualquiera de los descritos en los ejemplos, incluyendo los
siguientes.
(A) Para un compuesto de fórmula I en el que
R^{1} es Q^{1}, acilar el grupo amino de un compuesto
correspondiente de fórmula II
usando un ácido correspondiente de
fórmula Q^{2}-COOH (III) o un derivado activado
del
mismo.
Para un ácido carboxílico, un derivado activado
típico incluye un éster (particularmente un éster de alquilo
inferior tal como un éster de metilo o etilo), un haluro ácido
(particularmente el cloruro ácido), y un éster o anhídrido activado
(incluyendo el éster de 4-nitrofenilo y un éster o
anhídrido activado derivado de un reactivo de acoplamiento).
La acilación puede completarse, por ejemplo,
usando un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 1, Parte
D.
(B) Para un compuesto de fórmula I en el que
R^{2} es Q^{1}, acilar el grupo amino de un compuesto
correspondiente de fórmula IV
usando un ácido correspondiente de
fórmula Q^{2}-COOH (III) o un derivado activado
del mismo, por ejemplo, usando un procedimiento similar al descrito
en el Ejemplo 1, Parte
D.
En lo sucesivo, para cualquiera de los
procedimientos anteriores, cuando un grupo funcional se protege
usando un grupo protector, se retira el grupo protector.
En lo sucesivo, para cualquiera de los
procedimientos anteriores, cuando se requiere una sal
farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula I, ésta se
obtiene haciendo reaccionar la forma básica de un compuesto básico
de fórmula I con un ácido que proporciona un contraión
fisiológicamente aceptable o la forma ácida de un compuesto ácido de
fórmula I con una base que proporciona un contraión fisiológicamente
aceptable o la forma ácida de un compuestos ácido de fórmula I con
una base que proporcionad un contraión fisiológicamente
aceptable.
Como se ha mencionado anteriormente, la invención
incluye una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto inhibidor
del factor Xa definido por la fórmula I anterior. Un compuesto
básico de esta invención posee uno o más grupos funcionales
suficientemente básicos para reaccionar con cualquiera de un número
de ácidos inorgánicos y orgánicos que proporcionan un contraión
fisiológicamente aceptable para formar una sal farmacéuticamente
aceptable. Son ácidos comúnmente empleados para formar sales de
adición de ácidos farmacéuticamente aceptables ácidos inorgánicos
tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico,
ácido sulfúrico, ácido fosfórico y similares, y ácidos orgánicos
tales como ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico,
ácido oxálico, ácido p-bromobencenosulfónico, ácido
carbónico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido
acético y similares. De esta manera, son ejemplos de tales sales
farmacéuticamente aceptables sulfato, pirosulfato, bisulfato,
sulfito, bisulfito, fosfato monohidrogenofosfato, dihidrogenfosfato,
metafosfato, pirofosfato, cloruro, bromuro, yoduro, acetato,
propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formiato, isobutirato,
caproato, heptanoato, propiolato, oxalato, malonato, succinato,
suberato, sebacato, fumarato, maleato,
butin-1,4-dioato,
hexin-1,6-dioato, benzoato,
clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato,
metoxibenzoato, ftalato, sulfonato, xilenosulfonato, fenilacetato,
fenilpropionato, fenilbutirato, citrato, lactato,
gamma-hidroxibutirato, glicolato, tartrato,
metanosulfonato, propanosulfonato,
naftalen-1-sulfonato,
naftalen-2-sulfonato, mandelato y
similares. Las sales de adición de ácidos farmacéuticamente
aceptables preferidas incluyen las formadas con ácidos minerales
tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico y ácido
sulfúrico.
Para un compuesto de fórmula I que tiene un resto
ácido, tal como un grupo carboxi, una sal farmacéuticamente
aceptable puede fabricarse con una base que proporcione un catión
farmacéuticamente aceptable, que incluye sales de metales alcalinos
(especialmente sodio y potasio), sales de metales alcalinotérreos
(especialmente calcio y magnesio), sale de aluminio y sales
amónicas, así como sales fabricadas a partir de bases orgánicas
fisiológicamente aceptables tales como trietilamina, morfolina,
piperidina y trietanolamina.
Si no está disponible en el mercado, un material
de partida necesario para la preparación de un compuesto de fórmula
I puede prepararse mediante un procedimiento que se selecciona entre
las técnicas convencionales de la química orgánica, incluyendo
sustitución y transformación aromática y heteroaromática, a partir
de técnicas que son análogas a las síntesis de compuestos conocidos
estructuralmente similares, y técnicas que son análogas a los
procedimientos descritos anteriormente o a procedimientos descritos
en los Ejemplos. Será obvio para un especialista en la técnica que
están disponibles diversas secuencias para la preparación de los
materiales de partida.
Los materiales de partida que son nuevos
proporcionan otro aspecto de la invención.
Un ejemplo es un compuesto de fórmula II
en la que Q^{1} y R^{4} tienen
los valores que se han definido
anteriormente.
Otro ejemplo es un compuesto de fórmula IV
en la que Q^{1}, R^{3} y
R^{4} tienen los valores que se han definido
anteriormente.
Los procedimientos selectivos de sustitución,
protección y desprotección se conocen bien en la técnica para la
preparación de un compuesto tal como uno de fórmula II y IV
analizado anteriormente.
Generalmente, un compuesto básico de la invención
se aísla mejor en forma de una sal de adición de ácidos. Una sal de
un compuesto de fórmula I formada con un ácido tal como uno de los
mencionados anteriormente es útil como sal farmacéuticamente
aceptable para la administración del agente antitrombótico y para la
preparación de una formulación del agente. En el aislamiento y
purificación de los compuestos pueden prepararse y usarse otras
sales de adición de ácidos.
Como se ha indicado anteriormente, los isómeros y
diastereómeros ópticamente activos de los compuestos de fórmula I
también se consideran como parte de esta invención. Tales isómeros
ópticamente activos pueden prepararse a partir de sus respectivos
precursores ópticamente activos mediante los procedimientos
descritos anteriormente, o resolviendo las mezclas racémicas. Esta
resolución puede realizarse por derivatización con un reactivo
quiral seguido de cromatografía o cristalización repetida. La
retirada del auxiliar quiral mediante procedimientos convencionales
proporciona isómeros sustancial y ópticamente puros de los
compuestos de la presente invención o de sus precursores. Otros
detalles con respecto a las resoluciones pueden obtenerse en Jacques
y col., Enantiomers, Racemates and Resolutions, John Wiley
and Sons, 1981.
Se cree que los compuestos de la invención
inhiben selectivamente el factor Xa sobre otras proteinasas y
proteínas no enzimáticas implicadas en la coagulación sanguínea sin
interferencia apreciable con la capacidad de lisis de coágulos
naturales del cuerpo (los compuestos tienen un bajo efecto inhibidor
sobre la fibrinolisis). Además, se cree que tal selectividad permite
el uso con agentes trombolíticos sin interferencia sustancial con la
trombolisis y fibrinolisis.
La invención en otro de sus aspectos proporciona
un uso de una dosis eficaz (inhibidora de la coagulación) de un
compuesto de fórmula I para la fabricación de un medicamento para
inhibir la coagulación en un mamífero.
La inhibición del factor Xa, la inhibición de la
coagulación y el tratamiento de un trastorno tromboembólico
contemplado por el presente procedimiento incluye tratamiento médico
terapéutico y/o profiláctico según sea apropiado.
También, se proporciona un compuesto de fórmula I
(o sal) que tiene cualquiera de las definiciones en este documento
para usarlo como agente antitrombótico.
Además, se proporciona el uso de un compuesto de
fórmula I que tiene cualquiera de las definiciones en este documento
para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un
trastorno tromboembólico.
La invención se refiere al tratamiento, en un ser
humano o animal, de una afección en la que se requiere la inhibición
del factor Xa. Se espera que los compuestos de la invención sean
útiles en mamíferos, incluyendo seres humanos, en el tratamiento o
profilaxis de la trombosis e hipercoagulabilidad en la sangre y en
los tejidos. Los trastornos en los que los compuestos tienen una
gran utilidad son en el tratamiento o profilaxis de trombosis e
hipercoagulabilidad en sangre y tejidos. Los trastornos en los que
los compuestos tienen una gran utilidad, en el tratamiento y/o
profilaxis, incluyen trombosis venosa y embolia pulmonar, trombosis
arterial, tal como isquemia miocárdica, infarto de miocardio, angina
inestable, apoplejía basada en trombolisis y trombosis arterial
periférica. Además, se espera que los compuestos tengan utilidad en
el tratamiento o profilaxis de trastornos (enfermedades)
ateroescleróticos, tales como enfermedad arterial coronaria,
enfermedad arterial cerebral y enfermedad arterial periférica.
Además, se espera que los compuestos sean útiles junto con
trombolíticos en el infarto de miocardio. Además, se espera que los
compuestos tengan utilidad en la profilaxis para la reoclusión
después de la trombolisis, angioplastia transluminal percutánea
(PTCA) y operaciones de derivación coronaria. Además, se espera que
los compuestos tengan utilidad en la prevención de retrombosis
después de la microcirugía. Además, se espera que los compuestos
sean útiles en el tratamiento anticoagulante con respecto a órganos
artificiales y válvulas cardíacas. Además, se espera que los
compuestos tengan utilidad en el tratamiento anticoagulante en
hemodiálisis y coagulación intravascular diseminada. Otra utilidad
esperada es en el aclarado de catéteres y dispositivos mecánicos
usados en pacientes in vivo y como anticoagulante para la
conservación de la sangre, el plasma y otros productos sanguíneos
in vitro. Además, se espera que los compuestos tengan
utilidad prevista en otras enfermedades en las que la coagulación de
la sangre puede ser un procedimiento de contribución fundamental o
una fuente de patología secundaria, tal como cáncer, incluyendo
metástasis, enfermedades inflamatorias, incluyendo artritis, y
diabetes. El compuesto anticoagulante se administra por vía oral o
parenteral, por ejemplo, por infusión intravenosa (iv), inyección
intramuscular (im) o por vía subcutánea (sc).
La dosis específica de un compuesto administrado
de acuerdo con esta invención para obtener efectos terapéuticos y/o
profilácticos se determinará, por supuesto, por las circunstancias
particulares que rodean al caso, incluyendo, por ejemplo, el
compuesto administrado, la velocidad de administración, la vía de
administración y la afección a tratar.
Una dosis diaria típica para cada una de las
utilidades anteriores está entre aproximadamente 0,01 mg/kg y
aproximadamente 1000 mg/kg. El régimen de dosificación puede variar,
por ejemplo para uso profiláctico puede administrarse una única
dosis diaria o pueden ser apropiadas múltiples dosis tales como 3 ó
5 veces al día. En situaciones de cuidados intensivos un compuesto
de la invención se administra por infusión iv a una velocidad entre
aproximadamente 0,01 mg/kg/h y aproximadamente 20 mg/kg/h y
preferiblemente entre aproximadamente 0,1 mg/kg/h y aproximadamente
5 mg/kg/h.
El uso de esta invención también se realiza junto
con un agente de lisis de coágulos, por ejemplo, activador de
plasminógeno de tejido (t-PA), t-PA
modificado, estreptoquinasa o uroquinasa. En los casos en los que se
produce la formación de coágulos y se bloquea una arteria o una
vena, parcial o totalmente, se emplea normalmente un agente de lisis
de coágulos. Un compuesto de la invención puede administrarse antes
de o junto con el agente de lisis o después de su uso, y
preferiblemente se administra junto con aspirina para prevenir la
reaparición de la formación de coágulos.
El uso de esta invención también se practica
junto con un antagonista del receptor de glicoproteína plaquetaria
(IIb/IIIa), que inhibe la agregación de plaquetas. Un compuesto de
la invención puede administrarse antes de o junto con el antagonista
de IIb/IIIa o después de su uso para prevenir la aparición o
reaparición de la formación de coágulos.
El uso de esta invención también se practica
junto con aspirina. Un compuesto de la invención puede administrarse
antes de o junto con aspirina o después de su uso para prevenir la
aparición o reaparición de la formación de coágulos. Como se ha
indicado anteriormente, se administra preferiblemente un compuesto
de la presente junto con un agente de lisis de coágulos y
aspirina.
Esta invención también proporciona una
composición farmacéutica para uso en el procedimiento terapéutico
descrito anteriormente. Una composición farmacéutica de la invención
comprende una cantidad inhibidora eficaz del factor Xa de un
compuesto de fórmula I conjuntamente con un vehículo, excipiente o
diluyente farmacéuticamente aceptable.
El ingrediente activo en tales formulaciones
comprende del 0,1 por ciento al 99,9 por ciento en peso de la
formulación. Por "farmacéuticamente aceptable" se entiende que
el vehículo, diluyente o excipiente debe ser compatible con los
demás ingredientes de la formulación y no nocivo para el receptor
del mismo.
Para la administración oral, el compuesto
antitrombótico se formula en cápsulas o comprimidos de gelatina que
pueden contener excipientes tales como aglutinantes, lubricantes,
agentes disgregantes y similares. Para la administración
parenteral, el agente antitrombótico se fórmula en un diluyente
farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, solución salina
fisiológica (al 0,9 por ciento), dextrosa al 5 por ciento, solución
de Ringer y similares.
El compuesto de la presente invención puede
formularse en formulaciones de dosificación unitaria que comprenden
una dosis entre aproximadamente 0,1 mg y aproximadamente 1000 mg.
Preferiblemente, el compuesto está en forma de una sal
farmacéuticamente aceptable tal como por ejemplo la sal sulfato, sal
acetato o una sal fosfato. Un ejemplo de una formulación de
dosificación unitaria comprende 5 mg de un compuesto de la presente
invención en forma de una sal farmacéuticamente aceptable en una
ampolla de vidrio estéril de 10 ml. Otro ejemplo de una formulación
de dosificación unitaria comprende aproximadamente 10 mg de un
compuesto de la presente invención en forma de una sal
farmacéuticamente aceptable en 20 ml de solución salina isotónica
contenida en una ampolla estéril.
Los compuestos pueden administrarse mediante
diversas vías incluyendo oral, rectal, transdérmica, subcutánea,
intravenosa, intramuscular e intranasal. Los compuestos de la
presente invención se formulan preferiblemente antes de la
administración.
Las presentes composiciones farmacéuticas se
preparan mediante procedimientos conocidos usando ingredientes bien
conocidos y fácilmente disponibles. Las composiciones de esta
invención pueden formularse de forma que proporcionen una liberación
rápida, sostenida o retardada del ingrediente activo después de la
administración al paciente empleando procedimientos bien conocidos
en la técnica. En la fabricación de las composiciones de la presente
invención, el ingrediente activo normalmente se mezclará con un
vehículo, o se diluirá con un vehículo, o se incluirá en un vehículo
que puede estar en forma de una cápsula, sello, papel u otro
recipiente. Cuando el vehículo sirve como diluyente, éste puede ser
un material sólido, semi-sólido o líquido que actúe
como vehículo, excipiente o medio para el ingrediente activo. De
estas manera, las composiciones pueden estar en forma de
comprimidos, píldoras, polvos, grageas, sellos, obleas, elixires,
suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosoles, (en forma
de un sólido o en un medio líquido), cápsulas de gelatina duras y
blandas, supositorios, soluciones inyectables estériles, polvos
envasados estériles y similares.
Los siguientes ejemplos de formulación son
únicamente ilustrativos y no pretenden limitar de forma alguna el
alcance de la invención. "Ingrediente activo", por supuesto,
significa un compuesto de acuerdo con la fórmula I o una sal o
solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.
Formulación
1
Se preparan cápsulas de gelatina duras usando los
siguientes ingredientes:
| Cantidad | ||
| (mg/cápsula) | ||
| Ingrediente activo | 250 \; \; | |
| Almidón, secado | 200 \; \; | |
| Estearato de magnesio | 10 \; \; | |
| Total | \overline{460 \ mg} |
Formulación
2
Se prepara un comprimido usando los siguientes
ingredientes:
| Cantidad | |
| (mg/comprimido) | |
| Ingrediente activo | 250 \; \; |
| Celulosa, microcristalina | 400 \; \; |
| Dióxido de silicio, de pirólisis | 10 \; \; |
| Ácido esteárico | 5 \; \; |
| Total | \overline{665 \ mg} |
Los componentes se mezclan y se comprimen para
formar comprimidos que pesan cada uno 665 mg.
Formulación
3
Se prepara una solución en aerosol que contiene
los siguientes componentes:
| Peso | |
| Ingrediente activo | 0,25 |
| Etanol | 29,75 |
| Propulsor 22 (Clorodifluorometano) | 70,00 |
| Total | \overline{100,00} |
El compuesto activo se mezcla con etanol y la
mezcla se añade a una porción del propulsor 22, enfriado a -30ºC y
se transfiere a un dispositivo de carga. Después, se introduce la
cantidad requerida en un recipiente de acero inoxidable y se diluye
con el resto del propulsor. Después, se ajustan las unidades de
válvula al recipiente.
Formulación
4
Se fabrican comprimidos, conteniendo cada uno 60
mg de ingrediente activo, como se indica a continuación:
| Ingrediente activo | 60 mg |
| Almidón | 45 mg |
| Celulosa microcristalina | 35 mg |
| Polivinilpirrolidona (en forma de solución al 10% en agua) | 4 mg |
| Carboximetil almidón sódico | 4,5 mg |
| Estearato de magnesio | 0,5 mg |
| Talco | 1 mg |
| Total | \overline{150 mg} |
El ingrediente activo, el almidón y la celulosa
se pasan a través de un tamiz de malla U.S. Nº 45 y se mezcla
meticulosamente. La solución acuosa que contiene
polivinilpirrolidona se mezcla con el polvo resultante y después la
mezcla se pasa a través de un tamiz de malla U.S. Nº 14. Los
gránulos producidos de esta forma se secan a 50ºC y se pasan a
través de un tamiz de malla U.S. Nº 18. Después, el carboximetil
almidón sódico, estearato de magnesio y talco pasados previamente a
través de un tamiz de malla U.S. Nº 60 se añaden a los gránulos que,
después de mezclar, se comprimen en una máquina de comprimidos para
producir comprimidos que pesan cada uno 150 mg.
Formulación
5
Se fabrican cápsulas, conteniendo cada una 80 mg
de ingrediente activo, como se indica a continuación:
| Ingrediente activo | 80 mg |
| Almidón | 59 mg |
| Celulosa microcristalina | 59 mg |
| Estearato de magnesio | 2 mg |
| Total | \overline{200 mg} |
El ingrediente activo, celulosa, almidón y
estearato de magnesio se mezclan, se pasan a través de un tamiz de
malla U.S. Nº 45 y se introducen en cápsulas de gelatina duras en
cantidades de 200 mg.
Formulación
6
Se fabrican supositorios, conteniendo cada uno
225 mg de ingrediente activo, como se indica a continuación:
| Ingrediente activo | 225 mg |
| Glicéridos de ácidos grasos saturados | 2.000 mg |
| Total | \overline{2\mbox{.}225 \ mg} |
El ingrediente activo se pasa a través de un
tamiz de malla U.S. Nº 60 y se suspende en los glicéridos de ácidos
grasos saturados fundidos previamente usando el calor mínimo
necesario. Después, la mezcla se vierte en un molde de supositorio
de 2 g de capacidad nominal y se deja enfriar.
Formulación
7
Se fabrican suspensiones, conteniendo cada una 50
mg de ingrediente activo por 5 ml de dosis, como se indica a
continuación:
| Ingrediente activo | 50 mg |
| Carboximetilcelulosa sódica | 50 mg |
| Jarabe | 1,25 ml |
| Solución de ácido benzoico | 0,10 ml |
| Aroma | q.v. |
| Color | q.v. |
| Agua purificada hasta total | 5 ml |
El ingrediente activo se pasa a través de un
tamiz de malla U.S. Nº 45 y se mezcla con carboximetil celulosa
sódica y jarabe para formar una pasta lisa. La solución de ácido
benzoico, el aroma y el color se diluyen con una porción del agua y
se añade con agitación. Después se añade suficiente agua para
producir el volumen requerido.
Formulación
8
Puede prepararse una formulación intravenosa como
se indica a continuación:
| Ingrediente activo | 100 mg |
| Solución salina isotónica | 1.000 ml |
La solución de los ingredientes anteriores se
administra por vía intravenosa a un sujeto a una velocidad de 1 ml
por minuto.
La capacidad de un compuesto de la presente
invención para ser un inhibidor eficaz y oralmente activo del factor
Xa puede evaluarse en uno o más de los siguientes ensayos o en otros
ensayos convencionales conocidos para los especialistas en la
técnica.
La inhibición por un compuesto de la invención de
una serina proteasa del sistema de coagulación sanguínea humano o
del sistema fibrinolítico, así como de tripsina, se determina in
vitro para la enzima particular midiendo su afinidad de unión
del inhibidor en un en sayo en el que la enzima hidroliza un
sustrato cromogénico particular, por ejemplo como se describe en
Smith, G. F.; Gifford-Moore, D.; Craft, T. J.;
Chirgadze, N.; Ruterbories, K. J.; Lindstrom, T. D.; Satterwhite,
J. H. Efegatran: A New Cardiovascular Anticoagulant. New
Anticoagulants for the Cardiovascular Patient; Pifarre, R., Ed.;
Hanley y Belfus, Inc.: Filadelfia, 1997; págs.
265-300. La afinidad de unión del inhibidor se mide
como la constante de asociación aparente Kass que es la constante de
equilibrio hipotética para la reacción entre la enzima y el
compuesto inhibidor de ensayo (I).
Enzima + I
Kass =
\frac{[Enzima - I]}{[(Enzima) \ x \
(I)]}
Convenientemente, la cinética de inhibición
enzimática se realiza en placas de poliestireno de 96 pocillos y las
velocidades de reacción se determinan a partir de la velocidad de
hidrólisis de los sustratos de p-nitroanilina apropiados a
405 nm usando un lector de placas Thermomax de Molecular Devices
(San Francisco, CA). Se sigue el mismo protocolo para todas las
enzimas estudiadas: 50 \mul de tampón (Tris 0,03 M, NaCl 0,15 M pH
7) en cada pocillo, seguido de 25 \mul de solución inhibidora (en
metanol al 100%, o en metanol acuoso al 50% v:v) y 25 \mul de
solución enzimática; en un período de dos minutos, se añaden 150
\mul de solución acuosa de sustrato cromogénico (0,25 mg/ml) para
empezar la reacción enzimática. Las velocidades de las reacciones de
hidrólisis de sustrato cromogénico proporcionan una relación lineal
con las enzimas estudiadas de forma que la enzima libre puede
cuantificarse en las mezclas de reacción. Los datos se analizan
directamente según las velocidades por el programa Softmax para
producir cálculos [sin enzima] para las determinaciones de Kass de
unión fuerte. Para las determinaciones de Kass aparentes, se usa
factor Xa humano 1,34 nM para hidrolizar
BzIle-Glu-Gly-Arg-pNa
0,18 mM; se usa trombina humana 5,9 nM o tripsina bovina 1,4 nM para
hidrolizar
BzPhe-Val-Arg-pNA
0,2 nM; se usa plasmina humana 3,4 nM con
HD-Val-Leu-Lys-pNA
0,5 mM; se usa nt-PA humana 1,2 nM con
HD-Ile-Pro-Arg-pNA
0,81 mM; y se usa uroquinasa 0,37 nM con
piro-gfsGlu-Gly-Arg-pNA
0,30 mM.
Kass se calcula para un intervalo de
concentraciones de compuestos de ensayo y el valor medio se indica
en unidades de litro por mol. En general, un compuesto inhibidor del
factor Xa de fórmula I de la presente invención muestra una Kass de
0,1 a 0,5 x 10^{6} l/mol o mucho mayor. Por ejemplo, se midió un
valor de Kass de 2,12 x 10^{6} l/mol para el compuesto del Ejemplo
1.
El inhibidor del factor Xa debe ahorrar
preferiblemente la fibrinolisis inducida por uroquinasa, el
activador del plasminógeno de tejidos (t-PA) y la
estreptoquinasa. Esto será importante para el uso terapéutico de tal
agente como un auxiliar para la terapia trombolítica con
estreptoquinasa, tp-PA o uroquinasa y para el uso de
un agente tal como agente antitrombótico de ahorro de la
fibrinólisis endógena (con respecto a t-PA y
uroquinasa). Además de la falta de interferencia con la actividad
amidasa de las proteasas fibrinolíticas, tal ahorro del sistema
fibrinolítico puede estudiarse mediante el uso de coágulos en plasma
humano y sus lisis mediante los respectivos activadores del
plasminógeno fibrinolíticos.
El plasma de perro se obtiene de perros de caza
de raza mixta conscientes (cualquier sexo, Butler Farms, Clyde,
Nueva York, Estados Unidos) mediante venopunción en citrato al 3,8%.
El fibrinógeno se prepara a partir de plasma de perro reciente y el
fibrinógeno humano se prepara a partir de sangre humana ACD del día
en la fracción I-2 de acuerdo con procedimientos y
especificaciones previos. Smith, Biochem. J., 185,
1-11 (1980); y Smith, y col., Biochemistry,
11, 2958-2967, (1972). El fibrinógeno humano
(98% puro/sin plasmina) es de American Diagnostica, Greenwich,
Connecticut. El radiomarcaje de las preparaciones de fibrinógeno
I-2 se realiza como se ha indicado previamente.
Smith, y col., Biochemistry, 11,
2958-2967, (1972). La uroquinasa se adquiere en Leo
Pharmaceuticals, Dinamarca, en forma de 2200 unidades Ploug/vial. La
estreptoquinasa se adquiere en Hoechst-Roussel
Pharmaceuticals, Somerville, New Jersey.
Se forman coágulos en plasma humano en microtubos
de ensayo añadiendo 50 \mul de trombina (73 unidades NIH/ml) a 100
\mul de plasma humano que contiene 0,0229 \muCi de fibrinógeno
marcado con yodo 125. La lisis del coágulo se estudia solapando los
coágulos con 50 \mul de uroquinasa o estreptoquinasa (50, 100, o
1000 unidades/ml) e incubando durante 20 horas a temperatura
ambiente. Después de la incubación, los tubos se centrifugan en un
Beckman Microfuge. Se añaden 25 \mul de sobrenadante a un volumen
de 1,0 ml de tampón Tris 0,03 M/NaCl 0,15 M para el recuento gamma.
Los controles de recuento en 100% de lisis se obtienen omitiendo la
trombina (y tampón de sustitución). Los inhibidores del factor Xa se
evalúan por una posible interferencia con la fibrinolisis
incluyendo los compuestos en las soluciones revestidas en
concentraciones de 1, 5, y 10 \mug/ml. Las aproximaciones
aproximadas de los valores de CI_{50} se estiman por
extrapolaciones lineales desde los datos a un valor que
representará el 50% de la lisis para esa concentración particular de
agente fibrinolítico.
El plasma de perro y el plasma de rata se
obtienen de perros de caza de raza mixta conscientes (cualquier
sexo, Butler Farms, Clyde, Nueva York, Estados Unidos) o de ratas
Sprague-Dawley macho anestesiadas (Harlan
Sprague-Dawley, Inc., Indianapolis, Indiana, Estados
Unidos) por venopunción en citrato al 3,8%. El fibrinógeno se
prepara a partir de sangre humana ACD del día como la fracción
I-2 de acuerdo con procedimientos y especificaciones
previos. Smith, Biochem. J., 185, 1-11
(1980); y Smith, y col., Biochemistry, 11,
2958-2967, (1972). El fibrinógeno humano también se
adquiere con una pureza del 98%/sin plasmina en American
Diagnostica, Greenwich, Connecticut. Los reactivos de coagulación
actina, tromboplastina, innovina y plasma humano son de Baxter
Healthcare Corp., Dade Division, Miami, Florida. La trombina bovina
de Parke-Davis (Detroit, Michigan) se usa para
ensayos de coagulación en plasma.
Los procedimientos de ensayos de cogulación son
como se han descrito previametne. Smith, y col., Trombosis
Research, 50, 163-174 (1988). Se usa un
instrumento de coagulación CoAScreener (American LABor, Inc.) para
todas las mediciones de ensayos de coagulación. El tiempo de
protrombina (PT) se mide añadiendo 0,05 ml de solución salina y 0,05
ml de reactivo Tromboplastina-C o reactivo del
factor de tejido humano recombinante (Innovina) a 0,05 ml de plasma
de ensayo. El tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT) se
mide por incubación de 0,05 ml de plasma de ensayo con 0,05 ml de
reactivo de actina durante 120 segundos seguido de 0,05 ml de
CaCl_{2} (0,02 M). El tiempo de trombina (TT) se mide añadiendo
0.05 ml de solución salina y 0.05 ml de trombina (10 unidades
NIH/ml) a 0.05 ml de plasma de ensayo. Los compuestos de fórmula I
se añaden a plasma humano o animal en un amplio intervalo de
concentraciones para determinar los efectos de prolongación en los
ensayos APTT, PT y TT. Se realizan extrapo-
laciones lineales para estimar las concentraciones requeridas para doblar el tiempo de coagulación para cada ensayo.
laciones lineales para estimar las concentraciones requeridas para doblar el tiempo de coagulación para cada ensayo.
A las ratas Sprague Dawley macho
(350-425 g, Harlan Sprague Dawley Inc.,
Indianapolis, IN) se les anestesia con xilazina (20 mg/kg, s.c.) y
quetamina (120 mg/kg, s.c.) y se mantienen en una manta de agua
caliente (37ºC). Se cánula la(s) vena(s)
yugular(es) para permitir las infusiones.
La vena yugular izquierda y la arteria carótida
derecha se canulan con 20 cm de longitud de un tubo de polietileno
PE 60. Una sección de centro de 6 cm de un tubo más grande (PE 190)
con un hilo de algodón (5 cm) en el lumen, se ajusta por fricción
entre las secciones más largas para completar el circuito de
derivación arterio-venosa. La sangre se hace
circular a través de la derivación durante 15 minutos antes de
retirar cuidadosamente y pesar el hilo. El peso de un hilo húmedo se
resta del peso total del hilo y del trombo (véase J.R. Smith, Br
J Pharmacol, 77:29, 1982).
Las arterias carótidas se aíslan mediante una
incisión cervical ventral en la línea media. Se coloca un termopar
debajo de cada arteria y se registra continuamente la temperatura
del vaso en un registrador de gráficos de tiras. Un manguito de tubo
(0,058 ID x 0,077 OD x 4 mm, Baxter Med. Grade Silicone), cortado
longitudinalmente, se coloca alrededor de cada carótida directamente
encima del termopar. Se disuelve hexahidrato de FeCl_{3} en agua y
la concentración (20 por ciento) se expresa en términos del peso
real de sólo FeCl_{3}. Para lesionar la arteria e inducir
trombosis, se pipetean 2,85 \mul en el manguito para lavar la
arteria encima de la sonda del termopar. La oclusión arterial se
indica por una rápida bajada de la temperatura. El tiempo para la
oclusión se proporciona en minutos y representa el tiempo
transcurrido entre la aplicación de FeCl_{3} y la rápida bajada
de la temperatura del vaso (véase K.D. Kurz, Thromb. Res.,
60:269, 1990).
El tiempo de trombina en plasma (TT) y el tiempo
de tromboplastina parcial activada (APTT) se miden con un
fibrómetro. Se toman muestras de sangre de un catéter yugular y se
recoge en una jeringa que contiene citrato sódico (3,8%, 1 parte por
9 partes de sangre ). Para medir TT, el plasma de rata (0,1 ml) se
mezcla con solución salina (0,1 ml) y trombina bovina (0,1 ml, 30
U/ml en tampón TRIS; Parke Davis) a 37ºC. Para APTT, el plasma (0,1
ml) y la solución APTT (0,1 ml, Organon Teknika) se incuban durante
5 minutos (37ºC) y se añade CaCl_{2} (0,1 ml, 0.025 M) para
iniciar la coagulación. Los ensayos se hacen por duplicado y se
calcula la media.
Los estudios de biodisponibilidad pueden
realizarse como se indica a continuación. Los compuestos se
administran como soluciones acuosas a ratas Fisher macho, por vía
intravenosa (iv) a 5 mg/kg mediante inyección en la vena de la cola
y por vía oral (po) a animales en ayunas a 20 mg/kg mediante sonda.
Las muestras de sangre en serie se obtienen 5, 30, 120 y 240 minutos
después de la dosis siguiendo administración intravenosa y 1, 2, 4 y
6 horas después de la dosificación oral. El plasma se analiza con
respecto a la concentración de fármaco usando un procedimiento de
HPLC que implica cartuchos C8 Bond Elute (Varion) para la
preparación de la muestra y un gradiente de tampón de
metanol/acetato amónico 30 nM (pH 4) optimizado para cada compuesto.
El % de biodisponibilidad se calcula mediante la siguiente
ecuación:
% \
Biodisponibilidad \ oral = \frac{AUC \ po}{AUC \ iv} \ X \
\frac{Dosis \ iv}{Dosis \ po} \ X \
100
donde AUC es el área bajo la curva
calculado a partir del nivel de plasma del compuesto durante el
tiempo que transcurre el experimento después de administración oral
(AUC po) e intravenosa (AUC
iv).
Las soluciones de compuesto se preparan
diariamente en solución salina normal y se inyectan en embolada o
administran por infusión empezando 15 minutos antes y continuando
durante la perturbación experimental que es de 15 minutos en el
modelo de derivación arteriovenosa y de 60 minutos en el modelo de
FeCl_{3} de lesión arterial y en el modelo de trombolisis
espontánea. El volumen de inyección en embolada es de 1 ml/kg para
i.v. y de 5 ml/kg para p.o., y el volumen de infusión es de 3
ml/hr.
Los resultados se expresan como medias +/- SEM.
Se usa un análisis de varianza de una vía para detectar diferencias
estadísticamente significativas y después se aplica el ensayo de
Dunnett para determinar qué medias son diferentes. El nivel de
importancia para el rechazo de hipótesis nula de medias iguales es
P<0,05.
Se deja en ayunas a perros macho (Beagles; 18
meses - 2 años; 12-13 kg, Marshall Farms, North
Rose, Nueva York 14516) durante una noche y se les proporciona una
dieta de prescripción certificada de purina (Purina Mills, St.
Louis, Missouri) 240 minutes después de la dosificación. El agua
está disponible ad libitum. La temperatura ambiente se
mantiene entre 66-74ºF; 45-50 por
ciento de humedad relativa; y un ciclo de luz de
0600-1800 horas.
El compuesto de ensayo se formula inmediatamente
antes de la dosificación por disolución en solución salina estéril
al 0,9% para una preparación de 5 mg/ml. A los perros se les
administra una única dosis de 2 mg/kg de compuesto de ensayo por
sonda oral. Se toman muestras de sangre (4,5 ml) de la vena cefálica
0,25, 0,5, 0,75, 1, 2, 3, 4 y 6 horas después de la dosificación.
Las muestras se recogen en tubos Vacutainer citados y se mantienen
en hielo antes de la reducción a plasma por centrifugación. Las
muestras de plasma se analizan por EM HPLC. La concentración en
plasma del compuesto de ensayo se registra y se usa para calcular
los parámetros farmacocinéticos: constante de velocidad de
eliminación, Ke; aclaramiento total, Clt; volumen de distribución,
V_{D}; tiempo de concentración máxima del compuesto de ensayo en
plasma, Tmax; concentracion máxima del compuesto de ensayo de Tmax,
Cmax; semivida en plasma, t0,5; y área bajo la curva, A.U.C.;
fracción del compuesto de ensayo absorbido, F.
La preparación e instrumentación quirúrgica de
los perros es como se describe en Jackson, y col.,
Circulation, 82, 930-940 (1990). A
perros de caza de raza mixta (de 6-7 meses,
cualquier sexo, Butler Farms, Clyde, Nueva York, Estados Unidos) se
les anestesia con pentobarbital sódico (30 mg/kg por vía
intravenosa, i.v.), se intuban y ventilan con aire. El volumen tidal
y las velocidades de respiración se ajustan para mantener el PO2,
PCO_{2} y pH sanguíneo en límites normales. Se insertan electrodos
de aguja subdérmica para registrar una derivación II ECG.
La vena yugular izquierda y la artería carótida
común se aíslan mediante una incisión mediolateral en el lado
izquierdo en el cuello. La presión de la sangre arterial (ABP) se
mide continuamente con un transductor Millar precalibrado (modelo
MPC-500, Millar Instruments, Houston, TX, Estados
Unidos) insertado en la arteria carótida. La vena yugular se canula
para tomar muestras de sangre durante el experimento. Además, las
venas femorales de ambas patas traseras se canulan para la
administración del compuesto de ensayo.
Se realiza una toracotomía en el lado izquierdo
en el quinto espacio intercostal, y el corazón se suspende en un
soporte pericárdico. Un segmento de 1 a 2 cm de la arteria coronaria
circunfleja izquierda (LCX) se aísla cerca de la primera
ramificación ventricular diagonal principal. Un electrodo anódico de
cable con punta de aguja del calibre 26 (recubierto con Teflón,
cable de cobre plateado del calibre 30) de 3-4 mm
de longitud se inserta en la LCX y se pone en contacto con la
superficie de la capa íntima de la arteria (confirmado al final del
experimento). El circuito de estimulación se completa colocando el
cátodo en un sitio subcutáneo (s.c.). Se coloca un oclusor de
plástico ajustable alrededor de la LCX, sobre la región del
electrodo. Se coloca una sonda de flujo electromagnética
precalibrada (Carolina Medical Electronics, King, NC, Estados
Unidos) alrededor de la LCX que está próxima al ánodo para medir el
flujo sanguíneo coronario (CBF). El oclusor se ajusta para producir
una inhibición del 40-50 por ciento de la respuesta
del flujo sanguíneo hiperémico observada después de 10 segundos de
oclusión mecánica de la LCX. Todas las medidas hemodinámicas y ECG
se registran y se analizan con un sistema de adquisición de datos
(modelo M3000, Modular Instruments, Malvern, PA. Estados
Unidos).
Se produce lesión electrolítica de la capa íntima
de la LCX aplicando 100 \muA de corriente continua (CC) al ánodo.
La corriente se mantiene durante 60 minutos y después se interrumpe
independientemente de si el vaso se ha ocluido o no. La formación de
trombos se desarrolla de forma espontánea hasta que la LCX está
totalmente ocluida (determinado como CBF cero y un aumento en el
segmento S-T). La administración de compuestos se
inicia después de dejar envejecer el trombo oclusor durante 1 hora.
Una infusión de 2 horas de los compuestos de la presente invención
en dosis de 0,5 y 1 mg/kg/hora se inicia simultáneamente con una
infusión de agente trombolítico (por ejemplo, activador de
plasminógeno de tejido, estreptoquinasa, APSAC). Se prosigue con
reperfusión durante 3 horas después de la administración del
compuesto de ensayo. La reoclusión de las arterias coronarias
después de trombolisis satisfactoria se definen como CBF cero que
persiste durante al menos 30 minutos.
Los recuentos de células de sangre entera,
hemoglobina y los valores de hematocritos se determinan en una
muestra de 40 \mul de sangre citada (3,8%) (1 parte citrato:9
partes sangre) con un analizador hematológico
(Cell-Dyn 900, Sequoia-Turner. Mount
View, CA, Estados Unidos). Los tiempos de sangrado mediante
plantilla en la encía se determinan con un dispositivo de tiempo de
sangrado Simplate II (Organon Teknika Durham, N.C., Estados Unidos).
El dispositivo se usa para hacer 2 incisiones horizontales en la
encía de la mandíbula superior o inferior izquierda del perro. Cada
incisión es de 3 mm de ancho x 2 mm de profundidad. Se hacen las
incisiones y se usa un cronómetro para determinar durante cuánto
tiempo se produce el sangrado. Se usa una gasa de algodón para
absorber la sangre que sale de la incisión. El tiempo de sangrado
mediante plantilla es el tiempo desde la incisión hasta la
interrupción del sangrado. Los tiempos de sangrado se toman justo
antes de la administración del compuesto de ensayo (0 minutos), a
los 60 minutos en la infusión, al final de la administración del
compuesto de ensayo (120 minutos) y al final del experimento.
Todos los datos se analiza por análisis de
varianza de una vía (ANOVA) seguido de un ensayo post Hoc t
Student-Neuman-Kuels para determinar
el nivel de significancia. Se usan medidas ANOVA repetidas para
determinar diferencias significativas entre puntos temporales
durante los experimentos. Se determina que los valores son
estadísticamente diferentes al menos al nivel de p<0.05. Todos
los valores son media \pm SEM. Todos los estudios se realizan de
acuerdo con los principios directores de la American Physiological
Society. Otros detalles con respecto a los procedimientos se
describen en Jackson, y col., J. Cardiovasc. Pharmacol.,
(1993), 21, 587-599.
Las abreviaturas, símbolos y términos usados en
los ejemplos tienen los siguientes significados.
Boc = t-butiloxicarbonilo
Calc. = calculado
Cbz = benciloxicarbonilo
DCC = diciclohexilcarbodiimida
DMF = dimetilformamida
DMSO = dimetilsulfóxido
EtOAc = acetato de etilo
Et_{2}O = éter dietílico
EtOH = etanol
Fmoc =
9-fluorenilmetoxi-carbonilo
Fmoc-OSu = N-succinimidil
carbonato de 9-fluorenilmetilo
HOAC = ácido acético
HOAt =
1-hidroxi-7-azabenzotriazol
HOBT = 1-hidroxibenzotriazol
HPLC = Cromatografía líquida de alta
resolución
EM = Espectro de masas
RP-HPLC = Cromatografía Líquida
de Alta Resolución en Fase Inversa
TFA = ácido trifluoroacético
THF = tetrahidrofurano
TLC = cromatografía en capa fina
Se proporcionan los siguientes Ejemplos para
describir adicionalmente la invención y no se pretende considerarlos
como limitaciones de la misma.
Los valores R_{f} en los ejemplos se determinan
mediante cromatografía en capa fina con gel de sílice (Kieselgel 60
F-254) en los siguientes sistemas:
(A) Cloroformo-Metanol-Ácido
Acético (135:15:1);
(B) Cloroformo-Alcohol Metílico
(9:1);
(C) Cloroformo-Acetato de Etilo
(8:2);
(D) Cloroformo-Acetato de Etilo
(1:1).
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución de
3-(t-butiloxicarbonil)aminopirrolidina (5,0
g, 26,8 mmol) en THF (40 ml) se le añadió trietilamina (3,7 ml, 26,8
mmol), seguido de la adición de cloroformiato de bencilo (3,8 ml,
26,8 mmol) lentamente. Después la mezcla de reacción se agitó
durante 24 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró
y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc
y se lavó secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N (100 ml), ácido
cítrico 1,5 N (100 ml), y agua. La fase orgánica se secó
(MgSO_{4}) y se concentró a sequedad al vacío dando el compuesto
del título (7,13 g, 83%).
TLC R_{f} (C) 0,41;
EM 321 (M+H)^{+};
Análisis para C_{17}H_{24}N_{2}O_{4}:
Calculado: C, 63,73; H, 7,55; N, 8,74;
Encontrado: C, 64,01, H, 7,39, N, 8,71.
El compuesto anterior de la Parte A (3,15 g, 9,8
mmol) se puso en un matraz que contenía ácido trifluoroacético (30
ml) y anisol (3,0 ml), y se agitó a 0ºC durante 20 min. La reacción
se concentró al vacío sin calentamiento, y se le añadió éter
dietílico (100 ml). El sólido resultante se filtró, se lavó con
éter dietílico, y se secó al vacío dando 3,07 g de la sal de amina
en TFA.
La sal de amina (3,07 g) se disolvió en EtOAc
(200 ml) y se lavó secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N y agua. La
fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío hasta dar
un sólido amorfo. El sólido (0,6 g, 2,72 mmol) se disolvió en DMF
(20 ml) y se agitó a temperatura ambiente. A la solución se le
añadió ácido indol-6-carboxílico
(0,71 g, 2,72 mmol), HOBt (0,37 g, 2,72 mmol), y DCC (0,56 g, 2,72
mmol). La reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente.
El precipitado resultante se retiró por filtración, y las aguas
madre se concentraron al vacío hasta dar un aceite. El aceite se
disolvió en EtOAc (250 ml) y se lavó secuencialmente con
NaHCO_{3} 1 N, agua, ácido cítrico 1,5 N, y agua. La fase
orgánica se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío hasta dar un
sólido amorfo del compuesto del título bruto (0,53 g, 53%).
TLC R_{f} (D) 0,21;
EM 364 (M+H)^{+};
Análisis para C_{21}H_{21}N_{3}O_{3}:
Calculado: C, 69,41; H, 5,82; N, 11,56;
Encontrado: C, 69,37, H, 6,08, N, 11,50.
El compuesto sólido bruto amorfo de la Parte B
(0,99 g, 2,72 mmol) se disolvió en CH_{3}CN (20 ml) y
CH_{2}Cl_{2} (5 ml). A la solución se le añadió
4-dimetilaminopiridina (0,33 g, 2,72 mmol),
diisopropiletilamina (0,47 ml, 2,72 mmol), y dicarbonato de
di-terc-butilo (0,66 ml, 2,86 mmol). Después la mezcla de
reacción se agitó durante 24 horas, la mezcla de reacción se
concentró al vacío hasta dar un aceite. El aceite se disolvió en
EtOAc (250 ml) y se lavó secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N, agua,
ácido cítrico 1,5 N, y agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y
se evaporó al vacío hasta dar un sólido amorfo del compuesto del
título bruto (1,25 g, 99%).
TLC R_{f} (D) 0,62;
EM 464 (M+H)^{+};
Análisis para C_{26}H_{29}N_{3}O_{5}:
Calculado: C, 67,37; H, 6,31; N, 9,07;
Encontrado: C, 67,66; H, 6,26; N, 9,22.
El compuesto sólido bruto amorfo de la Parte C
(1,25 g, 2,69 mmol), disuelto en etanol (100 ml) y HCl 1 N (2,7 ml,
2,69 mmol), se hidrogenó en presencia de catalizador de Pd al 5%/C
(0,30 g) a temperatura y presión ambiente. Una vez completada la
reacción, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se
concentró al vacío y se secó durante una noche. El sólido se
trituró con Et_{2}O, se filtró y se secó dando
3-[[1-(t-butiloxicarbonil)indol-6-il]carbonilamino]pirrolidina
sal clorhidrato (0,93 g).
En un matraz diferente se suspendió ácido
[1-(4-piridinil)piperidin-4-il]carboxílico
(0,76 g, 3,69 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (30 ml), y se añadió
cloruro de tionilo (0,4 ml, 5,53 mmol). La reacción se calentó a
reflujo durante 2 h, y el disolvente se retiró al vacío. El residuo
se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (25 ml) y se añadió a una solución
que contenía la sal clorhidrato anterior (0,93 g),
diisopropiletilamina (0,43 ml, 2,46 mmol), y piridina (3 ml). La
mezcla de reacción se agitó durante 24 h a temperatura ambiente. La
solución resultante se concentró al vacío y se secó durante una
noche dando un aceite (2,53 g). El aceite (2,53 g) se puso en un
matraz que contenía ácido trifluoroacético (20 ml), anisol (2,0 ml)
y se agitó a 0ºC (30 min). La reacción se concentró al vacío sin
calentamiento, y se le añadió éter dietílico (100 ml). El sólido
resultante se filtró, se lavó con éter dietílico, y se secó al vacío
dando 1,65 g del compuesto del título. Los 1,65 g de producto bruto
se purificaron usando una columna cromatográfica de 5 x 25 cm con
resina C18, y se usó un gradiente de concentraciones en aumento de
HCl al 0,01%/CH_{3}CN (del 5% al 40%) para eluir el producto de la
columna. Las fracciones se recogieron y se combinaron en base al
perfil analítico por RP-HPLC y se liofilizaron dando
el compuesto del título puro en forma de un sólido blanco (0,747 g,
56%).
EM 418 (M+H)^{+}.
A una suspensión de ácido
indol-6-carboxílico (2,5 g, 15,5
mmol) en CH_{3}CN (5 ml) y DMF (20 ml) se le añadió
4-dimetilaminopiridina (1,9 g, 15,5 mmol),
diisopropiletilamina (2,7 ml, 15,5 mmol), y dicarbonato de
di-terc-butilo (3,7 ml, 16,3 mmol). Después la mezcla de
reacción se agitó durante 24 h a temperatura ambiente, el disolvente
de reacción se retiró al vacío; y el residuo se suspendió en
NaHCO_{3} 1 N (100 ml) y Et_{2}O (100 ml). La fase acuosa se
separó y se extrajo con Et_{2}O (2 X 200 ml). La fase acuosa se
acidificó hasta pH 2,5 con HCl 5 N y se extrajo con EtOAc (500 ml).
La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró a sequedad al
vacío dando el compuesto del título (2,35 g, 58%).
TLC R_{f} (B) 0,49;
EM 262 (M+H)^{+};
Análisis para C_{14}H_{15}NO_{4}:
Calculado: C, 64,36; H, 5,79; N, 5,36;
Encontrado: C, 66,69, H, 5,43, N, 6,23.
A una solución de
3S-(t-butiloxicarbonil)aminopirrolidina
(5,0 g, 26,8 mmol) en THF (40 ml) se le añadió trietilamina (3,7 ml,
26,8 mmol), seguido de la adición de cloroformiato de bencilo (3,8
ml, 26,8 mmol) lentamente. Después la mezcla de reacción se agitó
durante 24 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró
y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc
y se lavó con NaHCO_{3} 1 N (100 ml), ácido cítrico 1,5 N (100
ml), y agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró a
sequedad al vacío dando el compuesto del título (7,13 g, 83%).
TLC R_{f} (C) 0,41;
EM 321 (M+H)^{+};
Análisis para C_{17}H_{24}N_{2}O_{4}:
Calculado: C, 63,73; H, 7,55; N, 8,74;
Encontrado: C, 64,01, H, 7,39, N, 8,71.
A una solución del compuesto de la Parte B (6,95
g, 21,7 mmol) en HOAc glacial (40 ml) se le añadió anisol (4 ml), y
se burbujeó HCl gaseoso en la reacción durante 20 min. El disolvente
de reacción se retiró al vacío y el residuo se trituró con
Et_{2}O (200 ml). El sólido se filtró y se secó dando 5,7 g de
sal clorhidrato de
1-Cbz-3S-aminopirrolidina.
A una solución de la sal clorhidrato (0,49 g,
1,91 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió ácido
1-t-butiloxicarbonilindol-6-carboxílico
(0,5 g, 1,91 mmol), diisopropiletilamina (0,33 ml, 1,91 mmol), HOBt
(0,26 g, 1,91 mmol), y DCC (0,4 g, 1,91 mmol). La reacción se agitó
durante 24 h a temperatura ambiente. El precipitado resultante se
retiró por filtración, y las aguas madre se concentraron al vacío
hasta dar un aceite. El aceite resultante se disolvió en EtOAc (250
ml) y se lavó secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N, agua, ácido
cítrico 1,5 N, y agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se
evaporó al vacío hasta dar un sólido amorfo del compuesto del
título bruto (0,87 g, 98%).
TLC R_{f} (D) 0,64;
EM 464 (M+H)^{+}.
El compuesto sólido bruto amorfo de la Parte C
(0,69 g, 1,49 mmol), disuelto en etanol (80 ml) y HCl 1 N (1,5 ml,
1,53 mmol), se hidrogenaron en presencia de catalizador Pd al 10%/C
(0,35 g) a temperatura y presión ambiente. Una vez completada la
reacción, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se
concentró al vacío y se secó durante una noche. El sólido se trituró
con Et_{2}O, se filtró y se secó dando la sal clorhidrato (0,44
g).
En un matraz diferente se suspendió el compuesto
ácido
[1-(4-piridinil)piperidin-4-il]carboxílico
(0,18 g, 0,86 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (25 ml), y se le añadió
cloruro de tionilo (0,94 ml, 1,29 mmol). La reacción se calentó a
reflujo durante 2 h y el disolvente se retiró al vacío. El residuo
se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (25 ml) y se añadió a una solución
que contenía la sal clorhidrato (0,21 g, 0,57 mmol),
diisopropiletilamina (0,1 ml, 0,57 mmol), y piridina (2 ml). La
reacción se agitó durante 48 h a temperatura ambiente. La solución
resultante se concentró al vacío y se secó durante una noche dando
un aceite (0,63 g). El aceite (0,63 g) se puso en un matraz que
contenía ácido trifluoroacético (10 ml), anisol (1,0 ml) y se agitó
a 0ºC (30 min). La reacción se concentró al vacío sin calentamiento
y se le añadió éter dietílico (100 ml). El sólido resultante se
filtró, se lavó con éter dietílico y se secó al vacío dando 0,34 g
del compuesto del título. Los 0,34 g de producto bruto se
purificaron usando una columna cromatográfica de 5 x 25 cm con
resina C18, y se usó un gradiente de concentraciones en aumento de
HCl al 0,01%/CH_{3}CN (del 5% al 35%) para eluir el producto de la
columna. Las fracciones se recogieron y se combinaron en base al
perfil analítico por RP-HPLC y se liofilizaron dando
el compuesto del título puro en forma de un sólido blanco (0,095 g,
37%).
EM 418 (M+H)^{+};
Análisis para
C_{24}H_{27}N_{5}O_{2}-2 HCl:
Calculado: C, 58,78; H, 5,96; N,14, 28;
Encontrado: C, 60,95, H, 6,31, N, 14,71.
El compuesto del título se preparó de acuerdo con
el procedimiento descrito en el Ejemplo 2A.
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución de
1-Cbz-3R-(t-butiloxicarbonil)aminopirrolidina
(5,0 g, 26,8 mmol) en THF (40 ml) se le añadió trietilamina (3,7 ml,
26,8 mmol), seguido de la adición de cloroformiato de bencilo (3,8
ml, 26,8 mmol) lentamente. Después la mezcla de reacción se agitó
durante 24 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró
y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc
y se lavó con NaHCO_{3} 1 N (100 ml), ácido cítrico 1,5 N (100
ml), y agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró a
sequedad al vacío dando el compuesto del título (7,39 g, 86%).
TLC R_{f} (C) 0,41;
EM 321 (M+H)^{+};
Análisis para C_{17}H_{24}N_{2}O_{4}:
Calculado: C, 63,73; H, 7,55; N, 8,74;
Encontrado: C, 63,51, H, 7,43, N, 8,65.
A una solución del compuesto de la Parte B (7,21
g, 22,5 mmol) en HOAc glacial (40 ml) se le añadió anisol (4 ml), y
se burbujeó HCl gaseoso en la reacción durante 20 min. El disolvente
de reacción se retiró al vacío, y el residuo se trituró con
Et_{2}O (200 ml). El sólido se filtró y se secó dando 5,9 g de
sal clorhidrato de
1-Cbz-3R-aminopirrolidina.
A una solución de la sal clorhidrato (0,49 g, 1,91 mmol) en DMF (20
ml) se le añadió el compuesto de la Parte A (0,5 g, 1,91 mmol),
diisopropiletilamina (0,33 ml, 1,91 mmol), HOBt (0,26 g, 1,91 mmol),
y DCC (0,4 g, 1,91 mmol). La reacción se agitó durante 24 h a
temperatura ambiente. El precipitado resultante se retiró por
filtración, y las aguas madre se concentraron al vacío hasta dar un
aceite. El aceite resultante se disolvió en EtOAc (250 ml) y se lavó
secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N, agua, ácido cítrico 1,5 N, y
agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío
hasta dar un sólido amorfo del compuesto del título bruto (0,88 g,
99%).
TLC R_{f} (D) 0,64;
EM 464 (M+H)^{+}.
El compuesto sólido bruto amorfo de la Parte C
(0,71 g, 1,53 mmol), disuelto en etanol (80 ml) y HCl 1 N (1,5 ml,
1,53 mmol), se hidrogenó en presencia de catalizador de Pd al 10%/C
(0,28 g) a temperatura y presión ambiente. Una vez completada la
reacción, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se
concentró al vacío y se secó durante una noche. El sólido triturado
con Et_{2}O, se filtró y se secó dando la sal clorhidrato de
3R-[(1-t-butiloxicarbonil)indol-6-ilcarbonil]aminopirrolidina
(0,43 g).
En un matraz diferente se suspendió el compuesto
ácido
[1-(4-piridinil)piperidin-4-il]carboxílico
(0,18 g, 0,86 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (25 ml), y se le añadió
cloruro de tionilo (0,94 ml, 1,29 mmol). La reacción se calentó a
reflujo durante 2 h, y el disolvente se retiró al vacío. El residuo
se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (25 ml) y se añadió a una solución
que contenía la sal clorhidrato anterior (0,21 g, 0,57 mmol),
diisopropiletilamina (0,1 ml, 0,57 mmol), y piridina (2 ml). La
reacción se agitó durante 24 h a temperatura ambiente. La solución
resultante se concentró al vacío y se secó durante una noche dando
un aceite (0,58 g). El aceite (0,58 g) se puso en un matraz que
contenía ácido trifluoroacético (15 ml) y anisol (1,5 ml), y se
agitó a 0ºC (30 min). La reacción se concentró al vacío sin
calentamiento y se le añadió éter dietílico (100 ml). El sólido
resultante se filtró, se lavó con éter dietílico y se secó al vacío
dando 0,31 g del compuesto del título. Los 0,31 g de producto bruto
se purificaron usando una columna cromatográfica de 5 x 25 cm con
resina C18, y se usó un gradiente de concentraciones en aumento de
HCl al 0,01%/CH_{3}CN (del 5% al 35%) para eluir el producto de la
columna. Las fracciones se recogieron y se combinaron en base al
perfil analítico por RP-HPLC y se liofilizaron dando
el compuesto del título puro en forma de un sólido blanco (0,078 g,
3%).
EM 418 (M+H)^{+};
Análisis para
C_{24}H_{27}N_{5}O_{2}-2 HCl:
Calculado: C, 59,96; H, 5,96; N, 14,28;
Encontrado: C, 59,96, H, 6,29, N, 14,57.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
A una suspensión de ácido
bencimidazol-5-carboxílico (5,0 g,
30,8 mmol) en DMF (50 ml) se le añadió
4-dimetilaminopiridina (3,77 g, 30,8 mmol),
diisopropiletilamina (5,37 ml, 30,8 mmol), y dicarbonato de
di-terc-butilo (7,5 ml, 32,4 mmol). La mezcla de reacción se
calentó inicialmente a 60ºC durante 30 min y entonces se enfrió a
temperatura ambiente y se agitó durante 24 h. El disolvente de
reacción se retiró al vacío y el residuo se suspendió en
NaHCO_{3} 1 N (100 ml) y Et_{2}O (100 ml). La fase acuosa se
separó y se extrajo con Et_{2}O (2 X 200 ml). La fase acuosa se
acidificó hasta pH 2,8 con HCl 5 N y se extrajo con EtOAc (500 ml).
La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró a sequedad al
vacío dando el compuesto del título (5,6 g, 70%).
TLC R_{f} (B) 0,52;
EM 263 (M+H)^{+}.
El compuesto del título puede prepararse de
acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 1A.
A una solución del compuesto de la Parte B (6,95
g, 21,7 mmol) en HOAc glacial (40 ml) se le añadió anisol (4 ml), y
se burbujeó HCl gas en la reacción durante 20 min. El disolvente de
reacción se retiró al vacío, y el residuo se trituró con Et_{2}O
(200 ml). El sólido se filtró y se secó dando 5,7 g de la sal
clorhidrato de
1-Cbz-3-aminopirrolidina.
A una solución de la sal clorhidrato (0,49 g,
1,91 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió ácido
1-t-butiloxicarbonilbencimidazol-5-carboxílico
(0,5 g, 1,91 mmol), diisopropiletilamina (0,33 ml, 1,91 mmol), HOBt
(0,26 g, 1,91 mmol), y DCC (0,4 g, 1,91 mmol). La reacción se agitó
durante 24 h a temperatura ambiente. El precipitado resultante se
retiró por filtración, y las aguas madre se concentraron al vacío
hasta dar un aceite. El aceite resultante se disolvió en EtOAc (250
ml) y se lavó secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N, agua, ácido
cítrico 1,5 N, y agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se
evaporó al vacío hasta dar un sólido amorfo del compuesto del
título bruto (0,78 g, 88%).
TLC R_{f} (B) 0,64;
El sólido bruto amorfo del compuesto de la Parte
C (0,75 g, 1,61 mmol), disuelto en etanol (80 ml) y HCl 1 N (1,6 ml,
1,61 mmol), se hidrogenó en presencia de catalizador de Pd al 5%/C
(0,53 g) a temperatura y presión ambiente. Una vez completada la
reacción, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se
concentró al vacío y se secó durante una noche. El sólido se
trituró con Et_{2}O, se filtró y se secó dando la sal clorhidrato
de
3-[[1-(t-butiloxi-carbonil)bencimidazol-5-il]carbonil]aminopirrolidina
(0,44 g).
En un matraz diferente se añadieron
CH_{2}Cl_{2} (25 ml) y cloruro de tionilo (0,94 ml, 1,29 mmol)
a ácido
1-(4-piridinil)piperidin-4-ilcarboxílico
(0,18 g, 0,86 mmol) suspendido en CH_{2}Cl_{2} (10 ml). La
mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 h y el disolvente
se retiró al vacío. El aceite resultante se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} (20 ml); y se le añadió la sal clorhidrato (0,21 g,
0,57 mmol) anterior, seguido de diisopropil etil amina (0,1 ml,
0,57 mmol) y piridina (3 ml). La reacción se agitó durante 24 h a
temperatura ambiente, y el disolvente se retiró al vacío dando un
sólido pardo (0,49 g).
El sólido (0,49 g) se puso en un matraz que
contenía ácido trifluoroacético (15 ml), anisol (1,5 ml) y se agitó
a 0ºC durante 20 min. La reacción se concentró al vacío sin
calentamiento y se le añadió éter dietílico (100 ml). El sólido
resultante se filtró, se lavó con éter dietílico, y se secó al vacío
dando 0,49 g del compuesto del título bruto. Los 0,49 g de producto
bruto se purificaron usando una columna cromatográfica de 5 x 25 cm
con resina C18, y se usó un gradiente de concentraciones en aumento
de HCl al 0,01%/CH_{3}CN (del 2% al 25%) para eluir el producto de
la columna. Las fracciones se recogieron y se combinaron en base al
perfil analítico por RP-HPLC y se liofilizaron dando
el compuesto del título puro en forma de un sólido blanco (0,073 g,
9%).
EM 419 (M+H)^{+};
Análisis para
C_{23}H_{26}N_{6}O_{2}\cdot2 HCl\cdot1,5 H_{2}O:
Calculado: C, 53,29; H, 6,03; N, 16,21;
Encontrado: C, 53,30, H, 6,15, N, 16,00.
El compuesto del título se preparó de acuerdo con
el procedimiento descrito en el Ejemplo 2A.
El compuesto del título se preparó de acuerdo con
el procedimiento descrito en el Ejemplo 1A.
A una solución del compuesto de la Parte B (6,95
g, 21,7 mmol) en HOAc glacial (40 ml) se le añadió anisol (4 ml) y
se burbujeó HCl gas en la reacción durante 20 min. El disolvente de
reacción se retiró al vacío, y el residuo se trituró con Et_{2}O
(200 ml). El sólido se filtró y se secó dando 5,7 g de la sal
clorhidrato de
1-Cbz-3-aminopirrolidina.
A una solución de la sal clorhidrato (1,5 g, 5,8 mmol) en dioxano
(20 ml) se le añadió agua (20 ml), Fmoc-OSu (1,97 g,
5,84 mmol) y carbonato sódico (0,61 g, 5,84 mmol). La mezcla de
reacción se agitó durante 24 h a temperatura ambiente. La mezcla de
reacción se concentró al vacío y se diluyó con EtOAc (200 ml). La
solución resultante se lavó secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N,
agua, ácido cítrico 1,5 N, y agua. La fase orgánica se secó
(MgSO_{4}) y se evaporó al vacío hasta dar un sólido amorfo del
compuesto del título bruto (2,6 g, 99%).
TLC R_{f} (C) 0,44;
EM 443 (M+H)^{+};
Análisis para C_{27}H_{26}N_{2}O_{4}:
Calculado: C, 73,29; H, 5,92; N, 6,33;
Encontrado: C, 73,27, H, 6,01, N, 6,50.
El sólido compuesto de la Parte C (2,58 g, 5,8
mmol), disuelto en etanol (125 ml) y HCl 1 N (5,8 ml, 5,8 mmol), se
hidrogenó en presencia de catalizador de Pd al 5%/C (0,7 g) a
temperatura y presión ambiente. Una vez completada la reacción, el
catalizador se retiró por filtración. El filtrado se concentró al
vacío y se secó durante una noche. El sólido triturado con
Et_{2}O, se filtró y se secó dando la sal clorhidrato de
3-[(fluorenil)metoxicarbonil]amino-pirrolidina
(1,65 g).
A una solución de la sal clorhidrato (0,66 g,
1,91 mmol) en DMF (20 ml) se le añadió el compuesto de la Parte A
(0,5 g, 1,91 mmol), diisopropiletilamina (0,33 ml, 1,91 mmol), HOBt
(0,26 g, 1,91 mmol), y DCC (0,4 g, 1,91 mmol). La reacción se agitó
durante 24 h a temperatura ambiente. El precipitado resultante se
retiró por filtración, y las aguas madre se concentraron al vacío
hasta dar un aceite. El aceite resultante se disolvió en EtOAc (250
ml) y se lavó secuencialmente con NaHCO_{3} 1 N, agua, ácido
cítrico 1,5 N, y agua. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se
evaporó al vacío hasta dar un sólido amorfo del compuesto del título
bruto (0,73 g, 69%).
TLC R_{f} (D) 0,40.
El compuesto sólido bruto amorfo de la Parte D
(0,7 g, 1,27 mmol) se disolvió en piperidina al 20% en DMF (20 ml) y
se agitó a temperatura ambiente durante 25 min. Una vez completada
la reacción la solución se concentró al vacío. El sólido se trituró
con hexano, se filtró y se secó dando
1-[1-(t-butiloxicarbonil)indol-6-ilcarbonil]-3-aminopirrolidina
libre (0,39 g).
En un matraz diferente se suspendió el compuesto
ácido
[1-(4-piridinil)piperidin-4-il]carboxílico
(0,21 g, 1,0 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (25 ml), y se le añadió
cloruro de tionilo (0,11 ml, 1,5 mmol). La mezcla de reacción se
calentó a reflujo (2 h) y el disolvente se retiró al vacío. El
residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (25 ml) y se añadió a una
solución que contenía la base libre (0,22 g, 0,67 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} (15 ml) y piridina (3 ml). La mezcla de reacción se
agitó durante 48 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se
concentró al vacío y se secó durante una noche dando un aceite (0,49
g).
El aceite (0,49 g) se puso en un matraz que
contenía ácido trifluoroacético (20 ml), anisol (2,0 ml) y se agitó
a 0ºC durante 25 min. La reacción se concentró al vacío sin
calentamiento y se le añadió éter dietílico (100 ml). El sólido
resultante se filtró, se lavó con éter dietílico, y se secó al vacío
dando 0,49 g del compuesto del título. Los 0,49 g de producto bruto
se purificaron usando una columna cromatográfica de 5 x 25 cm con
resina C18, y se usó un gradiente de concentraciones en aumento de
HCl al 0,01%/CH_{3}CN (del 5% al 40%) para eluir el producto de la
columna. Las fracciones se recogieron y se combinaron en base al
perfil analítico por RP-HPLC y se liofilizaron dando
el compuesto del título puro en forma de un sólido blanco (0,050 g,
2%).
EM 418 (M+H)^{+};
Análisis para
C_{24}H_{27}N_{5}O_{2}\cdot2 HCl\cdot0,5 H_{2}O:
Calculado: C, 57,72; H, 6,05; N, 14,02;
Encontrado: C, 57,14, H, 5,76, N, 13,76.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó mediante los
procedimientos descritos en el Ejemplo 2A.
El compuesto del título se preparó de acuerdo con
el procedimiento descrito en el Ejemplo 2B.
El compuesto del título se preparó de acuerdo con
el procedimiento descrito en el Ejemplo 2C.
El compuesto sólido bruto amorfo de la Parte C
(0,69 g, 1,5 mmol), disuelto en etanol (80 ml) y HCl 1 N (1,5 ml,
1,5 mmol) se hidrogenó en presencia de catalizador de Pd al 10%/C
(0,3 g) a temperatura y presión ambiente. Una vez completada la
reacción, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se
concentró al vacío y se secó durante una noche. El sólido se trituró
con Et_{2}O, se filtró y se secó dando la sal clorhidrato de
3S-[[1-(t-butiloxicarbonil)-
indol-6-il]carbonil]aminopirrolidina
(0,44 g).
En un matraz diferente a CH_{2}Cl_{2} (20 ml)
se le añadió fosgeno (20% en tolueno, 0,28 ml, 0,55 mmol), y la
solución se agitó a temperatura ambiente. Se añadió
1-(4-piridinil)-piperidina-4-metanol
(0,11 g, 0,55 mmol) suspendido en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) a la
mezcla de reacción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura
ambiente durante 5 min; después se le añadió la sal clorhidrato (0,2
g, 0,55 mmol) anterior, seguida de trietilamina (0,08 ml, 0,55
mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1,5 h, y el
disolvente se retiró al vacío dando un sólido pardo (0,47 g).
El sólido (0,47 g) se puso en un matraz que
contenía ácido trifluoroacético (15 ml) y anisol (1,5 ml), y se
agitó a 0ºC durante 25 min. La mezcla de reacción se concentró al
vacío sin calentamiento, y se le añadió éter dietílico (100 ml). El
sólido resultante se filtró, se lavó con éter dietílico, y se secó
al vacío dando 0,38 g del compuesto del título. Los 0,38 g de
producto bruto se purificaron usando una columna cromatográfica de
5 x 25 cm con resina C18, y se usó un gradiente de concentraciones
en aumento de HCl al 0,01%/CH_{3}CN (del 2% al 30%) para eluir el
producto de la columna. Las fracciones se recogieron y se combinaron
en base al perfil analítico por RP-HPLC y se
liofilizaron dando el compuesto del título puro en forma de un
sólido blanco (0,044 g, 2%).
EM 448 (M+H)^{+};
Análisis para
C_{25}H_{29}N_{5}O_{3}\cdot2 HCl:
Calculado: C, 57,69; H, 6,00; N,13,46;
Encontrado: C, 57,50, H, 6,05, N, 13,16.
El compuesto del título se preparó de acuerdo con
el procedimiento descrito en el Ejemplo 2A.
Se puso ácido
(2S,4S)-4-(Fmoc-amino)-1-Boc-pirrolidina-2-carboxílico
(0,5 g, 1,1 mmol) en un matraz que contenía ácido trifluoroacético
(20 ml) y anisol (2,0 ml), y se agitó a 0ºC durante 20 min. La
reacción se concentró al vacío sin calentamiento, y se le añadió
éter dietílico (100 ml). El sólido resultante se filtró, se lavó
con éter dietílico, y se secó al vacío dando (0,5 g,97%) de la sal
bruta en TFA del ácido
(2S,4S)-4-(Fmoc-amino)pirrolidina-2-carboxílico.
En un matraz diferente se suspendió el compuesto
del Ejemplo 7, Parte A (0,14 g, 0,54 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10
ml), y se le añadió piridina (0, 044 ml, 0,54 mmol). A la mezcla de
reacción se le añadió cloruro de oxalilo (0,47 ml, 0,54 mmol), y la
mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 min. El
disolvente de reacción se retiró al vacío. El aceite resultante se
disolvió en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) y DMSO (10 ml) y se añadió a
una solución de la sal TFA anterior (0,25 g, 0,55 mmol),
CH_{2}Cl_{2} (5 ml), y piridina (0,13 ml, 1,6 mmol). Después la
mezcla de reacción se agitó durante 4 h, el disolvente de reacción
se retiró al vacío. El aceite resultante se disolvió en EtOAc (250
ml) y se lavó secuencialmente con ácido cítrico 1,5 N, y agua. La
fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se evaporó al vacío hasta dar
un sólido amorfo del compuesto del título bruto (0,13 g, 39%).
El sólido bruto amorfo del compuesto de la Parte
B (0,13 g, 0,22 mmol) se disolvió en piperidina al 20% en DMF (10
ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 25 min. La mezcla de
reacción se concentró al vacío, y se le añadió éter dietílico (100
ml). El sólido resultante se filtró, se lavó con éter dietílico, y
se secó al vacío dando 0,08 g de ácido
(2S,4S)-4-amino-1-[1-(t-butiloxicarbonil)indol-il]carbonilpirrolidina-2-carboxílico
bruto.
En un matraz diferente se suspendió el compuesto
ácido
[1-(4-piridinil)piperidin-4-il]carboxílico
(0,07 g, 0,32 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (25 ml), y se le añadió
cloruro de tionilo (0,04 ml, 0,48 mmol). La mezcla de reacción se
calentó a reflujo durante 2 h y el disolvente se retiró al vacío. El
residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (25 ml) y se añadió a una
solución que contenía la amina anterior (0,08 g, 0,21 mmol) y
piridina (3 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 24 h a
temperatura ambiente. La solución resultante se concentró al vacío y
se secó durante una noche dando un aceite (0,08 g). El aceite (0,08
g) se puso en un matraz que contenía ácido trifluoroacético (15 ml),
anisol (1,5 ml) y se agitó a 0ºC durante 30 min. La mezcla de
reacción se concentró al vacío sin calentamiento y se le añadió éter
dietílico (100 ml). El sólido resultante se filtró, se lavó con
éter dietílico, y se secó al vacío dando 0,2 g del compuesto del
título. Los 0,2 g de producto bruto se purificaron usando una
columna cromatográfica de 5 x 25 cm con resina C18, y se usó un
gradiente de concentraciones en aumento de HCl al 0,01%/CH_{3}CN
(del 2% al 40%) para eluir el producto de la columna. Las fracciones
se recogieron y se combinaron en base al perfil analítico por
RP-HPLC y se liofilizaron para dar el compuesto del
título en forma de un sólido blanco (0,006 g, 6%).
Claims (13)
1. Un compuesto de fórmula I (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo)
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que
uno de R^{1} y R^{2} es Q^{1}; el otro de
R^{1} y R^{2} es Q^{2};
en la
que
Q^{1} es 2-piridinilo (que
puede llevar un sustituyente metilo, metoxi, metiltio, fluoro o
cloro en la posición 5) o 3-piridinilo (que puede
llevar un sustituyente metilo, fluoro o cloro en la posición 6);
o
Q^{1} es fenilo que puede llevar uno, dos o
tres sustituyentes en las posiciones 3, 4 o 5 seleccionados
independientemente entre halo, ciano, carbamoilo, aminometilo,
metilo, metoxi, difluorometoxi, hidroximetilo, formilo, vinilo,
dimetilamino, amino, hidroxi y 3,4-metilendioxi, y
además, el fenilo puede llevar un sustituyente
2-cloro o 2-fluoro; o
Q^{1} es
en la
que
-E-G-NH- es
-CH_{2}-CH_{2}-NH-,
-C(R^{a})=CH-NH-,
-C(R^{a})=N-NH-, -N=CH-NH-
o -N=N-NH- en las que R^{a} es hidrógeno, fluoro,
cloro, bromo o metilo;
Q^{2} es
en las que R^{m} es alquilo
(C_{1}-C_{4}), ciclohexilo,
4-tetrahidropiranilo, fenilo,
4-piridilo o
2-pirimidinilo;
cuando R^{2} es Q^{1}, entonces R^{3} es H,
COOH, N-(metil)bencenosulfonilamino o fenilo (que
puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo, cloro o
fluoro) y R^{4} es H; y
cuando R^{2} es Q^{2}, entonces R^{3} es H
y R^{4} es H, COOH, metilo,
N-(metil)bencenosulfonilamino, fenilo no sustituido o
fenilo (que puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo,
cloro o fluoro;
o una sal farmacéuticamente aceptable del
compuesto de fórmula I.
2. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la
reivindicación 1 (o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo)
en la
que
uno de R^{1} y R^{2} es Q^{1}; el otro de
R^{1} y R^{2} es Q^{2};
en la
que
Q^{1} es 2-piridinilo (que
puede llevar un sustituyente metilo, metoxi, metiltio, fluoro o
cloro en la posición 5) o 3-piridinilo (que puede
llevar un sustituyente metilo, fluoro o cloro en la posición 6);
o
Q^{1} es fenilo que puede llevar uno, dos o
tres sustituyentes en las posiciones 3, 4 o 5 seleccionados
independientemente entre halo, ciano, carbamoilo, aminometilo,
metilo, metoxi, difluorometoxi, hidroximetilo, formilo, vinilo,
dimetilamino, hidroxi y 3,4-metilendioxi, y además,
el fenilo puede llevar un sustituyente 2-cloro o
2-fluoro; o
Q^{1} es
en la
que
-E-G-NH- es
-CH_{2}-CH_{2}-NH-,
-C(R^{a})=CH-NH-,
-C(R^{a})=N-NH-, -N=CH-NH-
o -N=N-NH- en las que R^{a} es hidrógeno, fluoro,
cloro, bromo o metilo;
Q^{2} es
en las que R^{m} es alquilo
(C_{1}-C_{4}), ciclohexilo,
4-tetrahidropiranilo, fenilo,
4-piridilo o
2-pirimidinilo;
cuando R^{2} es Q^{1}, entonces R^{3} es H,
COOH, N-(metil)bencenosulfonilamino o fenilo (que
puede estar sustituido en la posición 3 o 4 con metilo, cloro o
fluoro) y R^{4} es H; y
cuando R^{2} es Q^{2}, entonces R^{3} es H
y R^{4} es H, COOH, metilo,
N-(metil)bencenosulfonilamino, fenilo no sustituido o
fenilo que puede estar sustituido en la posición 3 ó 4 con metilo,
cloro o fluoro;
o una sal farmacéuticamente aceptable del
compuesto de fórmula I.
3. El compuesto de la reivindicación 1 ó 2 en el
que para un grupo alquilo o la porción alquilo de un grupo que
contiene alquilo, alquilo (C_{1}-C_{4}) es
metilo, etilo, isopropilo o 2-butilo; y halo es
bromo, cloro o fluoro.
4. El compuesto de la reivindicación 3 en el que
para un grupo alquilo o la porción alquilo de un grupo que contiene
alquilo (C_{1}-C_{4}) es etilo, isopropilo o
2-butilo; y halo es fluoro o cloro.
5. El compuesto de una cualquiera de las
reivindicaciones 2-4 en la que uno de R^{1} y
R^{2} es Q^{1} y el otro de R^{1} y R^{2} es Q^{2};
Q^{1} es
en la
que
-E-G-NH- es
-CH_{2}=CH_{2}-NH-;
Q^{2} es
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{m} es
4-piridilo;
cuando R^{2} es Q^{1}, entonces R^{3} es H
o COOH y R^{4} es H; y
cuando R^{2} es Q^{2}, entonces R^{3} es H
y R^{4} es H.
6. El compuesto de la reivindicación 2 en el
que
R^{1} es Q^{2};
R^{2} es Q^{1};
Q^{1} es 6-indolilo;
Q^{2} es
1-(4-piridinil)piperin-4-ilo;
R^{3} es H; y
R^{4} es H.
7. El compuesto de la reivindicación 2 en el
que
R^{1} es Q^{1};
R^{2} es Q^{2};
Q^{1} es 6-indolilo;
Q^{2} es
1-(4-piridinil)piperin-4-ilo;
R^{3} es H; y
R^{4} es H.
8. La sal farmacéuticamente aceptable de un
compuesto de fórmula I de acuerdo con una cualquiera de las
reivindicaciones 1-7 que es una sal de adición de
ácidos preparada a partir de un compuesto básico de fórmula I y un
ácido que proporciona un anión farmacéuticamente aceptable o una sal
que se prepara a partir de un compuesto ácido de fórmula I y una
base que proporciona un catión farmacéuticamente aceptable.
9. Una composición farmacéutica que comprende un
compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo, de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2 junto con un vehículo,
excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.
10. Un procedimiento para preparar un nuevo
compuesto de fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
de acuerdo con la reivindicación 1
ó 2 que se selecciona
entre
(A) para un compuesto de fórmula I en el que
R^{1} es Q^{1}, acilar el grupo amino de un compuesto
correspondiente de fórmula II
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
usando un ácido correspondiente de
fórmula Q^{2}-COOH (III) o un derivado activado
del
mismo.
(B) para un compuesto de fórmula I en el que
R^{2} es Q^{1}, acilar el grupo amino de un compuesto
correspondiente de fórmula IV
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
usando un ácido correspondiente de
fórmula Q^{2}-COOH (III) o un derivado activado
del
mismo;
donde, para cualquiera de los procedimientos
anteriores, cuando un grupo funcional se protege usando un grupo
protector, retirar el grupo protector;
donde, para cualquiera de los procedimientos
anteriores, cuando se necesita una sal farmacéuticamente aceptable
de un compuesto de fórmula I, se obtiene haciendo reaccionar la
forma básica de un compuesto básico de fórmula I con un ácido dando
un contraión fisiológicamente aceptable o la forma ácida de un
compuesto ácido de fórmula I con una base dando un contraión
fisiológicamente aceptable ;
y donde, a menos que se especifique otra cosa,
Q^{1}, Q^{2}, R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} tienen los
valores definidos en la reivindicación 1 ó 2.
11. Un compuesto de fórmula II
en la que Q^{1} y R^{4} tienen
los valores descritos en la reivindicación
2.
12. Un compuesto de fórmula IV
en la que R^{2}, R^{3} y
R^{4} tienen los valores descritos en la reivindicación
2.
13. Un compuesto de fórmula I (o sal) de acuerdo
con una cualquiera de las reivindicaciones 1-8 para
usar como agente antitrombótico.
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