ES2214332T3 - Agentes antitromboticos. - Google Patents
Agentes antitromboticos.Info
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- ES2214332T3 ES2214332T3 ES00976590T ES00976590T ES2214332T3 ES 2214332 T3 ES2214332 T3 ES 2214332T3 ES 00976590 T ES00976590 T ES 00976590T ES 00976590 T ES00976590 T ES 00976590T ES 2214332 T3 ES2214332 T3 ES 2214332T3
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Abstract
Un compuesto de la fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) en la que A es carbonilo o metileno; Rd es -[O-(CH2)d]c-Rc en el que c es 0 ó 1; d es 1, 2 ó 3; y Rc es carboxi, (alcoxi C1-4)carbonilo, hidroximetilo o carbamoilo; con la condición de que si c es 0, Rc es carboxi, (alcoxi C1-4)carbonilo o carbamoilo; o Rd es -[O-(CH2)d]c-Rc en el que c es 1; d es 1, 2 ó 3; y Rc es carboxi, (alcoxi C1-4)carbonilo, hidroximetilo o carbamoilo; Re es hidrógeno, metilo, metoxi o halo; R2 es R2a o R2b en el que R2a es -X2-(CH2)n-Rf en el que X2 es un enlace directo, metileno u O; n es 1, 2 ó 3; y Rf es 5- tretazolilo, carboxi, (alcoxi C1-4)carbonilo o hidroximetilo; R2b es -X2-(CH2)m-NRaRb en el que X2 es un enlace directo, metileno u O; m es 1, 2 ó 3; con la condición de que cuando m es 1, entonces X2 es un enlace directo; y Ra y Rb son independientemente hidrógeno o alquilo C1-3 o el grupo NRaRb es pirrolidino, piperidino o morfolino; R3 es R3a o R3b en donde R3a es 2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi; con la condición de que R2 es R2b cuando R3 es R3a; R3b es -X3-(CH2)s-NRsRt en el que X3 es un enlace directo, metileno u O; s es 1 ó 2; con la condición de que cuando s es 1, entonces X3 es un enlace directo; y Rs y Rt son independientemente hidrógeno o alquilo C1-3 o el grupo NRsRt es pirrolidino, piperidino o morfolino; y R6 es hidrógeno, hidroxi o metoxi.
Description
Agentes antitrombóticos.
Esta invención se refiere a inhibidores de
trombina que son anticoagulantes de utilidad en mamíferos. En
particular se refiere a derivados de benzo[b]tiofeno
sustituidos que poseen actividad anticoagulante y actividad
antitrombótica elevadas. Así, esta invención se refiere a
inhibidores novedosos de trombina, composiciones farmacéuticas que
contienen los compuestos como ingredientes activos, y al uso de los
compuestos como anticoagulantes para la profilaxis y tratamiento de
embolia pulmonar, trombosis arterial, en particular isquemia de
miocardio, infarto de miocardio y trombosis cerebral, estados de
hipercoagulación general y estados de hipercoagulación local, tales
como los que suceden a las operaciones de angioplastia y derivación
coronaria y lesión tisular generalizada relacionada con el proceso
inflamatorio. Además, los agentes antitrombóticos son de utilidad
como anticoagulantes en aplicaciones in vitro.
El proceso de la coagulación sanguínea, la
trombosis, se desencadena mediante una compleja cascada
proteolítica que provoca la formación de trombina. La trombina
elimina proteolíticamente los péptidos de activación de las cadenas
A\alpha y las cadenas B\beta de fibrinógeno, que es soluble en
el plasma sanguíneo, iniciando la formación de fibrina
insoluble.
La anticoagulación actualmente se logra mediante
la administración de heparinas y cumarinas. El control
farmacológico parenteral de la coagulación y la trombosis se basa
en la inhibición de trombina mediante el uso de heparinas. Las
heparinas actúan indirectamente sobre la trombina acelerando el
efecto inhibidor de antitrombina III endógena (el inhibidor
fisiológico principal de trombina). Debido a que los niveles de
antitrombina III varían en el plasma y debido a que la trombina
unida en coágulos parece resistente a este mecanismo indirecto, las
heparinas pueden ser un tratamiento ineficaz. Debido a que se cree
que los ensayos de coagulación están asociados a eficacia y
seguridad, los niveles de heparina deben vigilarse con ensayos de
coagulación (en particular el ensayo de tiempo a tromboplastina
parcial activada (APTT)). Las cumarinas impiden la generación de
trombina bloqueando la gamma carboxilación en la síntesis de
protrombina y otras proteínas de este tipo. Debido a su mecanismo
de acción, el efecto de las cumarinas sólo puede desarrollarse
lentamente, 6-24 horas después de la
administración. Además, no son anticoagulantes selectivos. Las
cumarinas también deben vigilarse con ensayos de coagulación (en
particular el ensayo de tiempo a protrombina (PT)).
Las diaminas antitrombóticas se describen en las
publicaciones de solicitudes de patentes internacionales números WO
97/25033, WO 98/48798 y WO 98/49161. Los compuestos de esta
invención tienen volúmenes menores de distribución y, por lo tanto,
propiedades farmacocinéticas mejoradas comparadas con los de los
documentos WO 97/25033, WO 98/48798 y WO 98/49161.
Aunque las heparinas y cumarinas son
anticoagulantes efectivos, no se ha desarrollado todavía ningún
fármaco de uso extenso de esta prometedora clase de compuestos,
todavía existe la necesidad de anticoagulantes que actúen de forma
selectiva sobre la trombina y que, de forma independiente de
antitrombina III, ejerzan la acción de inhibición poco tiempo
después de la administración, preferiblemente por vía oral, y no
interfieran con la lisis de coágulos sanguíneos, como es necesario
para mantener la hemostasia.
De acuerdo con la invención se proporciona un
compuesto de la fórmula I (o una sal farmacéuticamente aceptable
del mismo)
en la
que
A es carbonilo o metileno;
R^{d} es
-[O-(CH_{2})_{d}]_{c}-R^{c} en
donde c es 0 ó 1; d es 1, 2 ó 3; y R^{c} es carboxi, (alcoxi
C_{1-4})carbonilo, hidroximetilo o
carbamoilo; con la condición de que si c es 0, R^{c} es carboxi,
(alcoxi C_{1-4})carbonilo o carbamoilo;
R^{e} es hidrógeno, metilo, metoxi o halo;
R^{2} es R^{2a} o R^{2b} en donde
R^{2a} es
-X^{2}-(CH_{2})_{n}-R^{f} en donde
X^{2} es un enlace directo, metileno u O; n es 1, 2 ó 3; y
R^{f} es 5-tretazolilo, carboxi, (alcoxi
C_{1-4})carbonilo o hidroximetilo;
R^{2b} es
-X^{2}-(CH_{2})_{m}-NR^{a}R^{b} en
donde X^{2} es un enlace directo, metileno u O; m es 1, 2 ó 3;
con la condición de que cuando m es 1, entonces X^{2} es un
enlace directo; y R^{a} y R^{b} son independientemente
hidrógeno o alquilo C_{1-3} o el grupo
NR^{a}R^{b} es pirrolidino, piperidino o morfolino;
R^{3} es R^{3a} o R^{3b} donde
R^{3a} es
2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi;
con la condición de que R^{2} es R^{2b}
cuando R^{3} es R^{3a};
R^{3b} es
-X^{3}-(CH_{2})_{s}-NR^{s}R^{t} en
donde X^{3} es un enlace directo, metileno u O; s es 1 ó 2; con
la condición de que cuando s es 1, entonces X^{3} es un enlace
directo; y R^{s} y R^{t} son independientemente hidrógeno o
alquilo C_{1-3} o el grupo NR^{s}R^{t} es
pirrolidino, piperidino o morfolino; y
R^{6} es hidrógeno, hidroxi o metoxi.
Como aspecto adicional de la invención, se
proporciona un profármaco (o una sal farmacéuticamente aceptable
del mismo) de cualquiera de los compuestos inhibidores de trombina
descritos anteriormente de la fórmula I que formarán un
profármaco.
En esta memoria, se usan las siguientes
definiciones, a no ser que se describa lo contrario: Halo es flúor,
cloro, bromo o yodo. Alquilo, alcoxi, etc. denotan tanto grupos
lineales como ramificados; pero la referencia a un radical
individual tal como "propilo" engloba únicamente el radical de
la cadena lineal ("normal"), denotándose de forma específica
un isómero de cadena ramificada tal como "isopropilo".
Se apreciará que ciertos compuestos de la fórmula
I (o sales o profármacos, etc.) pueden existir, y aislarse en
formas isómeras, incluyendo isómeros cis- o trans-, así como formas
ópticamente activas, racémicas o diastereoisoméricas. Debe
entenderse que la presente invención incluye un compuesto de la
fórmula I como mezcla de diastereoisómeros, así como en forma de un
diastereoisómero individual, y que la presente invención engloba un
compuesto de la fórmula I como mezcla de enantiómeros, así como en
forma de un enantiómero individual, cualquiera de cuyas mezclas o
formas poseen propiedades inhibidoras contra trombina, siendo
notorio en la técnica cómo preparar o aislar formas particulares y
cómo determinar las propiedades de inhibición de trombina mediante
ensayos estándar incluyendo los que se describen a continuación.
Además, un compuesto de la fórmula I (o sal o
profármaco, etc.) puede mostrar polimorfismo o puede formar un
solvato con agua o un disolvente orgánico. La presente invención
engloba también cualquiera de tales formas polimórficas, cualquier
solvato o cualquiera de sus mezclas.
A continuación se listan valores particulares
para radicales, sustituyentes e intervalos, únicamente a modo de
ilustración y no excluyen otros valores definidos u otros valores
dentro de intervalos definidos para los radicales y
sustituyentes.
Un valor particular para un grupo alquilo
C_{1-3} es, por ejemplo metilo, etilo, propilo o
isopropilo y para un grupo alcoxi C_{1-4} es por
ejemplo metoxi, etoxi, isopropoxi o t-butoxi.
Un valor particular, independientemente, para A
es carbonilo o metileno;
para R^{d} es carboxi, metoxicarbonilo,
carbamoilo, 3-(etoxicarbonil)propoxi,
3-carboxipropoxi,
4-amino-4-oxobutoxi,
4-hidroxibutoxi,
(t-butoxicarbonil)metoxi o
carboximetoxi;
para R^{e} es hidrógeno o metoxi;
para R^{2} es
2-(1-pirrolidinil)etoxi,
3-carboxipropoxi o
3-(metoxicarbonil)propoxi;
para R^{3} es
2-(1-pirrolidinil)etoxi,
(1-pirrolidinil)metilo o
2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi;
y
para R^{6} es hidrógeno o hidroxi.
Un valor particular para R^{2} es R^{2a}. Un
valor particular adicional para R^{2} es R^{2b},
Un valor particular para R^{3} es R^{3a}. Un
valor particular adicional para R^{3} es R^{3b} y R^{2} es
R^{2b}.
Un compuesto particular de la fórmula I es uno en
el que R^{d} es metoxicarbonilo, R^{e} es hidrógeno y R^{3}
es
2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi.
Un compuesto particular adicional de la fórmula I
es
2-[3-metoxicarbonil-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]-fenil]-3-[4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]bencil]benzo[b]-tiofeno.
Los compuestos específicos de la fórmula I se
describen en los ejemplos que se acompañan. El compuesto que se
describe como Ejemplo 13,
2-[3-carboximetoxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-3-[4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]bencil]benzo[b]tiofeno,
(o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo) es una especie
preferida.
Una sal farmacéuticamente aceptable de un agente
antitrombótico de la presente invención incluye una que es una sal
de adición de ácido preparada con un ácido que proporciona un anión
farmacéuticamente aceptable. Así, una sal de adición de ácido de un
compuesto novedoso de la fórmula I como se estipula anteriormente
preparada con un ácido que proporciona un anión farmacéuticamente
aceptable o un compuesto que contiene un resto ácido, proporciona un
aspecto particular de la invención. Ejemplos de ácidos de ese tipo
se proporcionan a continuación.
Como un aspecto adicional de la presente
invención se proporciona una formulación farmacéutica que
comprende, en asociación con un vehículo diluyente o excipiente
farmacéuticamente aceptable, un compuesto de la fórmula I (o una
sal farmacéuticamente aceptable del mismo) como se estipula en
cualquiera de las descripciones anteriores.
Un compuesto de la fórmula I puede prepararse
mediante procedimientos que incluyen procedimientos conocidos en la
técnica química para la producción de compuestos estructuralmente
relacionados con un compuesto de la fórmula I o por un
procedimiento novedoso descrito en la presente memoria. Un
procedimiento para un compuesto de la fórmula I (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo), procedimientos novedosos
para un compuesto de la fórmula I e intermedios novedosos para la
fabricación de un compuesto de la fórmula I como se define
anteriormente proporcionan características adicionales de la
invención y se ilustran mediante los siguientes procedimientos en
los que los significados de los radicales genéricos son tal como se
define anteriormente, a no ser que se especifique lo contrario. Se
reconocerá que puede preferirse o ser necesario preparar un
compuesto de la fórmula I en el que un grupo funcional esté
protegido usando un grupo protector convencional y después separar
el grupo protector para proporcionar el compuesto de la fórmula
I.
Así, se proporciona un procedimiento para
preparar un compuesto de la fórmula I (o una sal farmacéuticamente
aceptable del mismo) como se estipula en cualquiera de las
descripciones anteriores que se selecciona de:
(A) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es (alcoxi C_{1-4})carbonilo,
esterificación oxidativa de un compuesto correspondiente de la
fórmula I en el que R^{c} es formilo usando un agente oxidante y
el alcanol C_{1-4} correspondiente. La
esterificación oxidativa puede llevarse a cabo de una forma
convencional consistente con la estructura del compuesto de la
fórmula I, por ejemplo usando óxido de manganeso (IV) y cianuro
sódico en metanol seco como se describe en el Ejemplo
1-C;
(B) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es carbamoilo, amidación oxidativa de un compuesto
correspondiente de la fórmula I en el que R^{c} es formilo usando
un agente de oxidación y amoniaco. La amidación oxidativa puede
llevarse a cabo mediante un procedimiento convencional consistente
con la estructura del compuesto de la fórmula I, por ejemplo, usando
cianuro sódico y óxido de manganeso (IV) en presencia de amoniaco
como se describe en el Ejemplo 4;
(C) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es carboxi, oxidación del grupo formilo de un compuesto
correspondiente de la fórmula I en el que R^{c} es formilo, por
ejemplo usando un procedimiento como el que se describe en el
Ejemplo 5-J;
(D) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es (alcoxi C_{1-4})carbonilo,
esterificación del grupo carboxi de un compuesto correspondiente de
la fórmula I en el que R^{c} es carboxi, por ejemplo usando un
procedimiento tal como el que se describe en el Ejemplo
1-C;
(E) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{d} es -O-(CH_{2})_{d}-R^{c},
alquilando el grupo hidroxi de un compuesto correspondiente de la
fórmula I en el que R^{d} es hidroxi usando un agente de
alquilación de la fórmula
X-(CH_{2})_{d}-R^{c} (o un derivado
protegido del mismo) donde X es un grupo saliente convencional,
usando un procedimiento de alquilación estándar tal como el que se
describe en el Ejemplo 6-G;
(F) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es carbamoilo, amidación del ácido o un derivado activado
del mismo de un compuesto correspondiente de la fórmula I en el que
R^{c} es carboxi. De forma conveniente, la adición se lleva a
cabo usando un éster de alquilo inferior, cloruro amónico y
trimetilaluminio en tolueno, por ejemplo como se describe en el
Ejemplo 8;
(G) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es hidroximetilo, reducción del éster de un compuesto
correspondiente de la fórmula I en el que R^{c} es (alcoxi
C_{1-4})carbonilo, por ejemplo usando un
procedimiento tal como el que se describe en el Ejemplo 9;
después de lo cual, para cualquiera de los
procedimientos anteriores, cuando un grupo funcional se protege
usando un grupo protector, eliminación del grupo protector;
después de lo cual, para cualquiera de los
procedimientos anteriores, cuando se requiere una sal
farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula I, se
obtiene por reacción de la forma básica de un compuesto de ese tipo
de la fórmula I con un ácido proporcionando un ión conjugado
fisiológicamente aceptable o, para un compuesto de la fórmula I que
porta un resto ácido, por reacción de la forma ácida de un
compuesto de ese tipo de la fórmula I con una base que proporciona
un catión farmacéuticamente aceptable o mediante cualquier otro
procedimiento convencional;
y en los que, a no ser que se describa lo
contrario, A, R^{d}, R^{e}, R^{2}, R^{3} y R^{6} tienen
los valores que se describen anteriormente.
Tal como se usa en la presente memoria, un grupo
saliente es un resto que se desplaza en una reacción de sustitución
nucleófila, por ejemplo un grupo halo (tal como cloro, bromo o
yodo), un grupo éster de sulfonato (tal como metilsulfoniloxi,
p-toluilsulfoniloxi o trifluorometilsulfoniloxi) o
la especie reactiva que se deriva de tratar un alcohol con
trifenilfosfina, azodicarboxilato dietílico y trietilamina (en una
reacción de Mitsunobu).
Como se menciona anteriormente, un compuesto que
corresponde a un compuesto de la fórmula I pero en el que está
protegido un grupo funcional, puede servir como intermedio para un
compuesto de la fórmula I. En consecuencia, intermedios protegidos
de ese tipo para un compuesto novedoso de la fórmula I proporcionan
aspectos adicionales de la invención. Así, como aspecto particular
de la invención, se proporciona un compuesto que corresponde a un
compuesto novedoso de la fórmula I como se define anteriormente en
el que R^{6} que es hidroxi, pero en el que el sustituyente
correspondiente es -OR^{p} en lugar de hidroxi, en el que R^{p}
es un grupo protector de fenol distinto de metilo. Los grupos
protectores de fenol son notorios en la técnica, por ejemplo tal
como se describe en T. W. Greene y P.G.M. Wuts, "Protecting
Groups in Organic Synthesis" (1991). Los valores particulares de
R^{p} incluyen, por ejemplo, isopropilo. Además, R^{p} puede
denotar una resina con funciones, por ejemplo como se describe en
H.V. Meyers y cols., Molecular Diversity, (1995), 1,
13-20.
Como se menciona anteriormente, la invención
incluye sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos
inhibidores de trombina que se definen en la fórmula I anterior. Un
compuesto de la fórmula I que porta un resto ácido forma sales con
bases farmacéuticamente aceptables. Una sal farmacéuticamente
aceptable de ese tipo puede prepararse con una base que proporcione
un catión farmacéuticamente aceptable, que incluye sales de metales
alcalinos (especialmente sodio y potasio), sales de metales
alcalinotérreos (especialmente calcio y magnesio), sales de
aluminio y sales de amonio, así como sales preparadas a partir de
bases orgánicas fisiológicamente aceptables tales como
trietilamina, morfolino, piperidina y trietanolamina. Las formas
salinas de potasio y sodio son particularmente preferidas.
Un compuesto particular de la fórmula I que posee
uno o más grupos funcionales suficientemente básicos para
reaccionar con cualquiera de un número de ácidos inorgánicos y
orgánicos proporcionan un ión conjugado fisiológicamente aceptable
que forma una sal de adición de ácidos farmacéuticamente aceptable.
Los ácidos que se emplean comúnmente para formar sales de adición de
ácidos farmacéuticamente aceptables son ácidos inorgánicos tales
como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido
sulfúrico, ácido fosfórico y similares y ácidos orgánicos tales
como ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido
oxálico, ácido p-bromobencenosulfónico, ácido carbónico,
ácido succínico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido acético y
similares. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables de ese
tipo por lo tanto son las sulfato, pirosulfato, bisulfato, sulfito,
bisulfito, fosfato, monohidrogenofosfato, dihidrogenofosfato,
metafosfato, pirofosfato, cloruro, bromuro, yoduro, acetato,
propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formiato, isobutirato,
caproato, heptanoato, propiolato, oxalato, malonato, succinato,
suberato, sebacato, fumarato, maleato,
butin-1,4-dioato,
hexin-1,6-dioato, benzoato,
clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato,
metoxibenzoato, ftalato, sulfonato, xilenosulfonato, fenilacetato,
fenilpropionato, fenilbutirato, citrato, lactato,
gamma-hidroxibutirato, glicolato, tartrato,
metanosulfonato, propanosulfonato,
naftalen-1-sulfonato,
naftalen-2-sulfonato, mandelato y
similares. Las sales de adición de ácidos farmacéuticamente
aceptables preferidas incluyen las que se forman con ácidos
minerales tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico y ácido
sulfúrico.
Si no están disponibles en el mercado, los
materiales de partida necesarios para la preparación de un
compuesto de la fórmula I pueden prepararse mediante procedimientos
que se seleccionan de técnicas estándar de química orgánica,
incluyendo sustitución y transformación aromática y heteroaromática,
a partir de técnicas que son análogas a la síntesis de compuestos
conocidos estructuralmente similares y técnicas que son análogas a
los procedimientos que se describen anteriormente o a los
procedimientos que se describen en los Ejemplos. Para un experto en
la técnica estará claro que hay disponible una variedad de
secuencias para la preparación de los materiales iniciales. Los
materiales de partida que son novedosos proporcionan otro aspecto de
la invención.
Los materiales de partida para los compuestos
fenólicos de la fórmula I donde R^{2} es hidroxi pueden
prepararse y usarse mediante procedimientos similares a los que se
describen en el Ejemplo 1, partes E a I.
Los materiales de partida para compuestos
diestéricos de la fórmula I donde R^{2} y R^{d} son (alcoxi
C_{1-4})carbonilo pueden prepararse
mediante procedimientos similares a los que se describen en el
documento WO 98/48798, Ejemplo 19-B.
Los compuestos ácidos de materiales de partida de
procedimientos similares a los que se describen en el documento WO
97/25033, Ejemplo 1, parte A y Graham, S. C., y cols., J. Med.
Chem., 1989, 32, 2548-2554.
Un material de partida de éter tal como éter
2-(1-pirrolidinil)etílico de
4-bromo-2-metoxifenilo
puede prepararse mediante procedimientos similares a los del
Ejemplo 6, Parte A.
El material de partida para un compuesto de la
fórmula I en el que R^{2} es R^{2b} y R^{3} es R^{3b} puede
prepararse mediante procedimientos similares a los que se describen
en el documento WO 98/48798, Ejemplo 18, Parte A.
Generalmente, los compuestos de la invención se
aíslan mejor en forma de sales de adición de ácidos. Las sales de
los compuestos de la fórmula I que se forman con ácidos tales como
los que se mencionan anteriormente son de utilidad como sales
farmacéuticamente aceptables para la administración de los agentes
antitrombóticos y para la preparación de formulaciones de estos
agentes. Otras sales de adición de ácidos pueden prepararse y
usarse para aislar y purificar los compuestos.
Como se hace notar anteriormente, los isómeros
ópticamente activos y diastereoisómeros de los compuestos de la
fórmula I se consideran también parte de esta invención. Los
isómeros ópticamente activos de ese tipo pueden prepararse a partir
de sus precursores ópticamente activos mediante los procedimientos
que se describen anteriormente, o resolviendo las mezclas
racémicas. Esta resolución puede llevarse a cabo mediante derivación
con un reactivo quiral seguido de cromatografía o de cristalización
repetida. La separación del auxiliar quiral mediante procedimientos
estándar proporciona isómeros sustancialmente puros ópticamente de
los compuestos de la presente invención o sus precursores. Detalles
adicionales sobre las resoluciones pueden obtenerse en Jacques y
cols., Enantiomers, Racemates y Resolutions, John Wiley
& Sons, 1981.
Se cree que los compuestos de la invención
inhiben selectivamente la trombina comparados con otras proteinasas
y proteínas no enzimáticas implicadas en la coagulación sanguínea
sin interferencias apreciables con la capacidad trombolítica
natural del cuerpo (los compuestos tienen un reducido efecto
inhibidor sobre la fibrinolisis). Además, se cree que una
selectividad de ese tipo permite el uso con agentes trombolíticos
sin interferencia sustancial con la trombolisis y fibrinolisis.
Muchos de los compuestos antitrombóticos que se
describen en la técnica anterior son lipófilos y, por lo tanto,
sufren volúmenes elevados de distribución desde el componente
plasmático y a los tejidos. Dado que la trombina reside en el
plasma, no se prefiere esta distribución tisular. Los compuestos de
la presente invención poseen sustituyentes hidrófilos en un
esfuerzo para reducir la capacidad lipófila global de las moléculas,
disminuyendo así la distribución y aumentando sus concentraciones
en plasma. Los datos de la Tabla 1 a continuación confirman que los
compuestos de la presente invención tienen unos volúmenes de
distribución menores y, por lo tanto, mejores propiedades
farmacocinéticas que sus compuestos correspondientes de la fórmula
I en los que R^{d} es hidrógeno.
El volumen de distribución (V_{D}) se calculó
de acuerdo con la ecuación estándar:
V_{D} =
aclaramiento/K
donde Aclaramiento = Dosis (\mug)/AUC
(\mug/ml) donde AUC es la cantidad de fármaco presente en plasma
tras la administración oral y se mide como el área bajo la curva de
la concentración de fármaco en función del tiempo.
K(h^{-1}) es la constante de velocidad de
eliminación.
| Comparador en el que R^{d} = H | ||||
| Nº de ej. | Valor de R^{d} | V_{D}(L/kg) | V_{D}(L/kg) | Referencia |
| 1 | carboxi | 1,27 | 29,0 | (a) |
| 2 | carboxi | 0,46 | 1,3 | (b) |
| 4 | carbamoilo | 3,36 | N/D | (c) |
| 8 | 3-(carbomoil)butoxi | 13,53 | 26,6 | (d) |
| 11 | 2-(carboxi)butoxi | 5,13 | 6,4 | (e) |
| 13 | carboximetoxi | N/D | 26,6 | (f) |
| (a) Documento WO 97/25033, Ejemplo 3 | ||||
| (b) Disponible mediante la saponificación del Ejemplo 13 | ||||
| (c) Documento WO 98/48798, Ejemplo 8 | ||||
| (d) Documento WO 98/49161, Ejemplo 20 | ||||
| (e) Documento WO 98/49161, Ejemplo 19 | ||||
| (f) Documento WO 98/49161, Ejemplo 20 | ||||
| N/D = No determinado |
La invención proporciona un procedimiento para
inhibir trombina en sangre de mamíferos que comprende el uso de una
cantidad eficaz de un compuesto de la fórmula I (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo) como se estipula en
cualquiera de las descripciones en la presente memoria.
La invención en uno de sus aspectos proporciona
un procedimiento para inhibir trombina en un mamífero que comprende
la administración a un mamífero que necesite tratamiento de una
dosis eficaz (inhibidora de trombina) de un compuesto de la fórmula
I.
En otro de sus aspectos, la invención proporciona
un procedimiento para tratar un trastorno tromboembólico que
comprende la administración a un mamífero que necesite tratamiento
una dosis eficaz (cantidad terapéutica y/o profiláctica para un
trastorno tromboembólico) de un compuesto de la fórmula I.
En otro de sus aspectos, la invención proporciona
un procedimiento para inhibir la coagulación en mamíferos que
comprende la administración a un mamífero que necesite tratamiento
una dosis eficaz (inhibidora de coagulación) de un compuesto de la
fórmula I.
La inhibición de trombina, inhibición de la
coagulación y tratamiento de trastorno tromboembólico contemplados
en el presente procedimiento incluyen el tratamiento médico
terapéutico y/o profiláctico según sea apropiado.
En una realización adicional, la invención se
refiere al tratamiento, en un ser humano o animal, de afecciones en
las que se requiera la inhibición de trombina. Se espera que los
compuestos de la invención sean de utilidad en animales, incluyendo
el hombre, en el tratamiento o profilaxis de trombosis e
hipercoagulabilidad de la sangre y los tejidos. Los trastornos en
los que los compuestos tienen una utilidad potencial son en el
tratamiento o profilaxis de trombosis e hipercoagulabilidad de la
sangre y los tejidos. Los trastornos en los que los compuestos
tienen una utilidad potencial, en su tratamiento y/o profilaxis,
incluyen trombosis venosa y embolia pulmonar, trombosis arterial,
tal como en isquemia de miocardio, infarto de miocardio, angina
inestable, apoplejía con base trombótica y trombosis arterial
periférica. Además, los compuestos se espera que tengan utilidad en
el tratamiento o profilaxis de trastornos ateroscleróticos
(enfermedades) tales como enfermedad arterial coronaria, enfermedad
arterial cerebral y enfermedad arterial periférica. Además, se
espera que los compuestos sean útiles junto con trombolíticos en el
infarto de miocardio. Además, se espera que los compuestos sean de
utilidad en la profilaxis de la reoclusión después de la
trombolisis, angioplastia transluminal percutánea (PTCA) y
operaciones de derivación coronaria. Además, los compuestos se
espera que sean de utilidad en la prevención de retrombosis después
de microcirugía. Además, se espera que los compuestos sean de
utilidad en el tratamiento con anticoagulantes relacionado con
órganos artificiales y válvulas cardiacas. Además, se espera que
los compuestos sean de utilidad en el tratamiento anticoagulante en
hemodiálisis y coagulación intravascular diseminada. Una utilidad
esperada adicional es en el enjuague de catéteres y dispositivos
mecánicos que se usan en pacientes in vivo, como
anticoagulante para la conservación de sangre, plasma y otros
productos sanguíneos in vitro. Aún más, se espera que los
compuestos tengan utilidad en otras enfermedades en las que la
coagulación sanguínea pudiera ser un proceso contribuyente
fundamental o una fuente de patología secundaria, tal como cáncer,
incluyendo metástasis, enfermedades inflamatorias, incluyendo
artritis y diabetes. El compuesto anticoagulante se administra
oralmente, parenteralmente por ejemplo por infusión intravenosa
(iv), inyección intramuscular (im) o subcutánea
(sc).
(sc).
La dosis específica de un compuesto administrado
de acuerdo con esta invención para obtener efectos terapéuticos y/o
profilacticos será determinado, por supuesto, por las
circunstancias particulares que rodean el caso, incluyendo, por
ejemplo, el compuesto administrado, la velocidad de administración,
la vía de administración y la afección que se esté tratando.
Una dosis diaria típica para cada una de las
utilidades anteriores está entre aproximadamente 0,01 mg/kg y
aproximadamente 1000 mg/kg. La posología variará por ejemplo, para
uso profiláctico, puede administrarse una única dosis diaria o
pueden ser apropiadas dosis múltiples tal como 3 ó 5 veces al día.
En situaciones de cuidados intensivos un compuesto de la invención
se administra mediante infusión iv con una velocidad de 0,01
mg/kg/h y aproximadamente 20 mg/kg/h y preferiblemente entre
aproximadamente 0,1 mg/kg/h y aproximadamente 5 mg/kg/h.
El procedimiento de esta invención se pone en
practica también en conjunción con un agente trombolítico por
ejemplo activador de plasminógeno en tejidos
(t-PA), t-PA modificado,
estreptocinasa o urocinasa.
En los casos en los que ha ocurrido la formación
de coágulos y una arteria o vena está bloqueada, ya sea parcial o
totalmente, habitualmente se emplea un agente trombolítico. Un
compuesto de la invención puede administrarse antes o junto con el
agente trombolítico o después de su uso, y preferiblemente se
administra además junto con aspirina para evitar que se vuelvan a
formar coágulos.
El procedimiento de esta invención se pone en
practica también en conjunción con un receptor de antagonista de
glucoproteína plaquetaria (IIb/IIIa), que inhibe la agregación de
plaquetas. Un compuesto de la invención puede administrarse antes o
junto con el antagonista de IIb/IIIa o después de su uso para
evitar que se vuelvan a formar coágulos.
El procedimiento de esta invención se practica
también junto con aspirina. Un compuesto de la invención puede
administrarse antes o junto con aspirina o después de su uso para
evitar que se formen o vuelvan a formar coágulos. Como se expone
anteriormente, preferiblemente un compuesto de la presente invención
se administra junto con un agente trombolítico y aspirina.
La invención proporciona también formulaciones
farmacéuticas para usar en el procedimiento terapéutico descrito
anteriormente. Las formulaciones farmacéuticas de la invención
comprenden una cantidad eficaz para inhibir trombina de un
compuesto de la fórmula I en asociación con un vehículo, excipiente
o diluyente farmacéuticamente aceptable. Para la administración
oral, el compuesto antitrombótico se formula en cápsulas de
gelatina o comprimidos que pueden contener excipientes tales como
aglutinantes, lubricantes, agentes desintegrantes y similares. Para
la administración parenteral el antitrombótico se formula en un
diluyente farmacéuticamente aceptable por ejemplo solución salina
fisiológica (0,9 por ciento, dextrosa al 5 por ciento, solución de
Ringer y similares.
El compuesto de la presente invención puede
formularse en formulaciones monodosis que comprenden una dosis entre
aproximadamente 0,1 mg y aproximadamente 1000 mg. Preferiblemente
el compuesto está en forma de una sal farmacéuticamente aceptable
tal como por ejemplo la sal sulfato, sal acetato o una sal fosfato.
Un ejemplo de una formulación monodosis comprende 5 mg de un
compuesto de la presente invención en forma de sal farmacéuticamente
aceptable en una ampolla de cristal estéril de 10 ml. Otro ejemplo
de formulación monodosis comprende aproximadamente 10 mg de un
compuesto de la presente invención en forma de sal
farmacéuticamente aceptable en 20 ml de solución salina isotónica
contenida en una ampolla estéril.
Los compuestos pueden administrarse por una
variedad de vías incluyendo oral, rectal, transdérmica, subcutánea,
intravenosa, intramuscular e intranasal. Los compuestos de la
presente invención se formulan preferiblemente antes de su
administración. Otra realización de la presente invención es una
formulación farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un
compuesto novedoso de la fórmula I o una sal o solvato
farmacéuticamente aceptable del mismo junto con un vehículo,
diluyente o excipiente para el mismo farmacéuticamente
aceptable.
El ingrediente activo en formulaciones de ese
tipo comprende de 0,1 por ciento a 99,9 por ciento en peso de la
formulación. Por "farmacéuticamente aceptable" se quiere decir
que el vehículo, diluyente o excipiente debe ser compatible con los
otros ingredientes de la formulación y no ser perjudiciales para el
receptor de los mismos.
Las presentes formulaciones farmacéuticas se
preparan mediante procedimientos conocidos usando ingredientes
notorios y fácilmente disponibles. Las composiciones de esta
invención pueden formularse de forma que proporcionen una
liberación rápida, mantenida o retardada del ingrediente activo
después de la administración al paciente empleando procedimientos
notorios en la técnica. Para preparar las composiciones de la
presente invención, el ingrediente activo normalmente se mezclará
con un vehículo, o se diluirá mediante un vehículo, o se incluirá
en un vehículo que puede tener forma de cápsula, sobrecito,
papelillos u otro envase. Cuando el vehículo sirve como diluyente,
puede ser material sólido, semisólido, o líquido que actúa como
vehículo, excipiente o medio para el ingrediente activo. Así, las
composiciones pueden ser en forma de comprimidos, píldoras, polvos,
pastillas, sobrecitos, obleas, elixires, suspensiones, emulsiones,
soluciones, jarabes, aerosoles, (en forma sólida o en un medio
líquido), cápsulas de gelatina blanda y dura, supositorios,
soluciones inyectables estériles, polvos envasados estériles y
similares.
Los siguientes ejemplos de formulación son
únicamente ilustrativos y no se pretende que limiten el alcance de
la invención en modo alguno. "Ingrediente activo" por supuesto
quiere decir un compuesto de acuerdo con la fórmula I o una sal o
solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.
Formulación
1
Se preparan cápsulas de gelatina dura usando los
siguientes ingredientes:
| Cantidad | |
| (mg/cápsula) | |
| Ingrediente activo | 250 \; \; \; |
| Almidón, desecado | 200 \; \; \; |
| Estearato magnésico | 10 \; \; \; |
| Total | \overline{460} \; mg |
\newpage
Formulación
2
Se prepara un comprimido usando los siguientes
ingredientes:
| Cantidad | |
| (mg/comprimido) | |
| Ingrediente activo | 250 \; \; \; |
| Celulosa microcristalina | 400 \; \; \; |
| Dióxido de silicio, de pirólisis | 10 \; \; \; |
| Ácido esteárico | 5 \; \; \; |
| Total | \overline{665} \; mg |
Los componentes se mezclan y comprimen para
formar comprimidos que pesan 665 mg cada uno.
Formulación
3
Se prepara una solución de aerosol que contiene
los siguientes componentes:
| Peso | |
| Ingrediente activo | 0,25 |
| Etanol | 25,75 |
| Propulsor 22 (Clorodifluorometano) | 70,00 |
| Total | \overline{100,00} |
El compuesto activo se mezcla con etanol y la
mezcla se añade a una parte del propulsor 22, se enfría a -30ºC y
se transfiere a un dispositivo de llenado. Después se introduce la
cantidad necesaria en un envase de acero inoxidable y se diluye con
el resto del propulsor. Después se ajustan las válvulas al
envase.
Formulación
4
Se preparan comprimidos que contienen 60 mg de
ingrediente activo cada uno, de la forma siguiente:
| Ingrediente activo | 60,0 mg |
| Almidón | 45,0 mg |
| Celulosa microcristalina | 35,0 mg |
| Polivinilpirrolidona (como solución al 10% en agua) | 4,0 mg |
| Carboximetilalmidón sódico | 4,5 mg |
| Estearato magnésico | 0,5 mg |
| Talco | 1,0 mg |
| Total | \overline{150,0} mg |
El ingrediente activo, el almidón y la celulosa
se pasan a través de un tamiz de malla US 45 y se mezclan
exhaustivamente. La solución acuosa que contiene
polivinilpirrolidona se mezcla con el polvo resultante y después la
mezcla se pasa por un tamiz de malla US 14. Los gránulos producidos
de este modo se secan a 50ºC y se pasan a través de un tamiz de
malla US 18. El carboximetilalmidón sódico, estearato magnésico y
talco, previamente se pasan por un tamiz de malla US 60, se añaden
después a los gránulos que, después se mezclar, se comprimen en un
aparato de fabricación de comprimidos para proporcionar comprimidos
que pesan 150 mg cada uno.
Formulación
5
Se preparan cápsulas que contienen 80 mg de
ingrediente activo cada uno, de la forma siguiente:
| Ingrediente activo | 80 mg |
| Almidón | 59 mg |
| Celulosa microcristalina | 59 mg |
| Estearato magnésico | 2 mg |
| Total | \overline{200} mg |
\newpage
El ingrediente activo, celulosa, almidón y
estearato magnésico se mezclan, se pasan por un tamiz de malla US
45, y se introducen en cápsulas de gelatina dura en cantidades de
200 mg.
Formulación
6
Se preparan supositorios que contienen 225 mg de
ingrediente activo cada uno, de la forma siguiente:
| Ingrediente activo | 225 mg |
| Glicéridos de ácidos grasos saturados | 2.000 mg |
| Total | \overline{2.225} mg |
El ingrediente activo se pasa por un tamiz de
malla US 60 y se suspende en los glicéridos previamente fundidos
usando la cantidad mínima de calor necesaria. Después se vierte la
mezcla en un molde de supositorios de capacidad nominal 2 g y se
deja enfriar.
Formulación
7
Se preparan suspensiones que contienen 50 mg de
ingrediente activo cada una por cada dosis de 5 ml, de la forma
siguiente
| Ingrediente activo | 50 mg |
| Carboximetilcelulosa sódica | 50 mg |
| Jarabe | 1,25 ml |
| Solución de ácido benzoico | 0,10 ml |
| Aroma | c.s. |
| Color | c.s. |
| Agua purificada para un total de | 5 ml |
El ingrediente activo se pasa por un tamiz de
malla US 45 y se mezcla con la carboximetilcelulosa sódica y el
jarabe para formar una pasta uniforme. La solución de ácido
benzoico, aroma y color se diluyen con una parte del agua y se
añaden agitando. Después se añade suficiente agua para producir el
volumen requerido.
Formulación
8
Una formulación intravenosa puede prepararse de
la forma siguiente
| Ingrediente activo | 100 mg |
| Solución salina isotónica | 1.000 mg |
La solución de los ingredientes anteriores
generalmente se administra por vía intravenosa a un sujeto con un
caudal de 1 ml al minuto.
Se evalúa la capacidad de los compuestos de la
presente invención de ser un inhibidor de trombina eficaz y
oralmente activo en uno o más de los siguientes ensayos.
Los compuestos proporcionados por la invención
(fórmula I) inhiben de forma selectiva la acción de trombina en los
mamíferos. La inhibición de trombina se demuestra mediante
inhibición in vivo de la actividad de amidasa de trombina
medida en un ensayo en el que la trombina hidroliza el sustrato
cromógeno,
N-benzoil-L-fenilalanil-L-valil-L-arginil-p-nitroanilida,
N-benzoil-L-Phe-L-Val-L-Arg-p-nitroanilida.
El ensayo se lleva a cabo mezclando 50 \mul de
tampón (Tris 0,03 M, NaCl 0,15 M, pH 7,4) con 25 \mul de
solución de trombina humana (trombina humana purificada, Enzyme
Research Laboratories, South Bend, Indiana, a 8 unidades de NIH/ml)
y 25 \mul de compuesto de experimentación en un disolvente
(metanol acuoso al 50% (v:v)). Después se añaden 150 \mul de
solución acuosa del sustrato cromógeno (a 0,25 mg/ml) y se miden
las velocidades de hidrólisis del sustrato vigilando las reacciones
a 405 nm para determinar la liberación de
p-nitroanilina. Se construyen curvas patrón
representando la concentración de trombina libre en función de la
velocidad de hidrólisis. Las velocidades de hidrólisis observadas
con los compuestos de experimentación se convierten después a
valores de "trombina libre" en los ensayos respectivos usando
curvas patrón. La trombina unida (unida al compuesto de
experimentación) se calcula restando la cantidad de trombina libre
observada en cada ensayo de la cantidad inicial conocida de
trombina usada en el ensayo. La cantidad de inhibidor libre en cada
ensayo se calcula restando el número de moles de trombina unida del
número de moles de inhibidor añadido (compuesto de
experimentación).
El valor Kass es la constante de equilibrio
hipotética para la reacción entre trombina y el compuesto de
experimentación (I).
Kass =
\frac{[Trombina-I]}{[(Trombina) \ x \
(I)]}
Kass se calcula para un intervalo de
concentraciones de compuestos de experimentación y el valor medio se
expresa en unidades de litro por mol. En general, un compuesto
inhibidor de trombina de la fórmula I de la presente invención
exhibe una Kass de 0,1 x 10^{6} l/mol o mucho mayor.
Al seguir sustancialmente los procedimientos que
se describen anteriormente para la trombina humana, y usar otras
serina proteasas del sistema de coagulación sanguíneo humano y usar
serina proteasas del sistema fibrinolítico, con los sustrato
cromógenos apropiados, que se identifican a continuación, se
evalúan la selectividad de los compuestos de la presente invención
con respecto a las serina proteasas del factor de coagulación y a
las serina proteasas fibrinolíticas así como su sustancial falta de
interferencia con la fibrinolisis de coágulos sanguíneos de plasma
sanguíneo.
Se compran los factores humanos X, Xa, IXa, XIa y
XIIa de Enzyme Research Laboratories, South Bend, Indiana; urocinasa
humana de Leo Pharmaceuticals, Dinamarca; y se prepara Proteína C
activada recombinante (aPC) en Eli Lilly y Co. sustancialmente de
acuerdo con la patente de Estados Unidos 4.981.952. Los sustratos
cromógenos:
N-Benzoil-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilida
(para el factor Xa);
N-Cbz-D-Arg-Gly-Arg-p-nitroanilida
(para el ensayo de factor IXa como sustrato del factor Xa);
Piroglutamil-Pro-Arg-p-nitroanilida
(para el Factor XIa y para aPC);
H-D-Pro-Phe-Arg-p-nitroanilida
(para el factor XIIa); y
Piroglutamil-Gly-Arg-p-nitroanilida
(para urocinasa) se compran en Kabi Vitrum, Estocolmo, Suecia o de
Midwest Biotech, Fishers, Indiana. Se compra tripsina bovina de
Worthington Biochemicals, Freehold, Nueva Jersey, y calicreína de
plasma humano de Kabi Vitrum, Estocolmo, Suecia. El sustrato
cromógeno
H-D-Pro-Phe-Arg-p-nitroanilida
para calicreína plasmática se compra de Kabi Vitrum, Estocolmo,
Suecia.
N-Benzoil-Phe-Val-Arg-p-nitroanilida,
el sustrato de trombina humana y de tripsina, se sintetiza de
acuerdo con procedimientos descritos anteriormente para los
compuestos de la presente invención, usando procedimientos conocidos
de acoplamiento peptídico de reactivos disponibles en el mercado o
comprados de Midwest Biotech, Fishers,
Indiana.
Indiana.
Plasmina humana se compra de Boehringer Mannheim,
Indianápolis, Indiana, nt-PA se compra como
referencia de actividad monocatenaria de American Diagnostica,
Greenwich, Connecticut; t-PA6 modificado
(mt-PA6) se prepara en Eli Lilly and Company
mediante un procedimiento conocido en la técnica (Véase, Burck y
cols., J. Biol. Chem., 265, 5120-5177
(1990). El sustrato cromógeno de plasmina
H-D-Val-Ley-Lys-p-nitroanilida
y sustrato del activador de plasminógeno tisular
(t-PA)
H-D-Ile-Pro-Arg-p-nitroanilida
se compran de Kabi Vitrum, Estocolmo, Suecia.
En los sustratos cromógenos que se describen
anteriormente, los símbolos de tres letras Ile, Glu, Gly, Pro, Arg,
Phe, Val, Leu y Lys se usan para indicar el grupo aminoacídico
correspondiente isoleucina, ácido glutámico, glicina, prolina,
arginina, fenilalanina, valina, leucina y lisina
respectivamente.
Los inhibidores de trombina preferiblemente deben
evitar la fibrinolisis inducida por urocinasa, activador de
plasminógeno tisular (t-PA) y estreptocinasa. Esto
debería ser importante para el uso terapéutico de agentes de ese
tipo como adyuvante de la terapia trombolítica con estreptocinasa,
t-PA o urocinasa y al uso de agentes de ese tipo
como agentes antitrombóticos economizadores de la fibrinolisis
endógena (con respecto a t-PA y urocinasa). Además
de la no interferencia con la actividad de amidasa de las proteasas
fibrinolíticas, un sistema fibrinolítico de ese tipo puede
estudiarse mediante el uso de coágulos de plasma humano y sus lisis
mediante los activadores de plasminógeno fibrinolíticos.
Se obtiene plasma de perros de razas mezcladas
conscientes (de cualquier sexo Butler Farms, Clyde, Nueva York,
Estados Unidos) mediante venopunción en citrato al 3,8 por ciento.
Se prepara fibrinógeno de sangre de perro y se prepara fibrinógeno
de sangre humana ACD dentro de la fecha de caducidad en la fracción
I-2 de acuerdo con procedimientos y especificaciones
previos. Smith, Biochem. J., 185,
1-11 (1980); y Smith y cols., Biochemistry,
11, 2958-2967 (1972). El fibrinógeno humano
(puro al 98 por ciento/sin plasmina) es de American Diagnostica,
Greenwich, Connecticut. El radiomarcado de las preparaciones
I-2 de fibrinógeno se realiza como se ha reseñado
anteriormente. Smith y cols., Biochemistry, 11,
2958-2967 (1972). Urocinasa se compra de Leo
Pharmaceuticals, Dinamarca, en forma de 2200 unidades Ploug/vial.
Estreptocinasa se compra de Hoechst-Roussel
Pharmaceuticals, Somerville, Nueva Jersey.
Se forman coágulos de plasma humano en microtubos
de ensayo añadiendo 50 \mul de trombina (73 unidades de NIH/ml) a
100 \mul de plasma humano que contiene 0,0229 \muCi de
fibrinógeno marcado con yodo 125. Se estudia la lisis del coágulo
superponiendo 50 \mul de fibrinógeno marcado con yodo 125. Se
estudia la lisis de los coágulos recubriéndolos con 50 \mul de
urocinasa o estreptocinasa (50, 100 ó 1000 unidades/ml) e incubando
durante 20 horas a temperatura ambiente. Después de incubar los
tubos se centrifugan en una microcentrifugadora Beckman. Se añaden
25 \mul de sobrenadante a 1.0 ml de volumen de tampón tris 0,03
M/NaCl 0,15 M para recuento gamma. Se obtienen controles de
recuento de 100 por cien de lisis omitiendo la trombina (y
sustituyendo el tampón). Se evalúan los inhibidores de trombina para
determinar la posible interferencia con la fibrinolisis incluyendo
los compuestos en las soluciones de recubrimiento a concentraciones
de 1, 5 y 10 \mug/ml. Se realizan estimaciones aproximadas de la
CI_{50} mediante extrapolaciones lineales de los puntos de datos
para obtener un valor que representaría el 50 por ciento de la
lisis para esa concentración particular de agente
fibrinolítico.
Se obtiene plasma de perro y plasma de rata a
partir de perros con mezcla de razas conscientes (de ambos sexos de
Butler Farms, Clyde, New York, EE.UU.) o de ratas
Sprague-Dawley macho anestesiadas (Harlan
Sprague-Dawley, Inc., Indianápolis, Indiana,
U.S.A.) mediante venopunción en citrato al 3,8 por ciento. El
fibrinógeno se prepara de sangre humana ACD dentro de la fecha de
caducidad en la fracción I-2 de acuerdo con los
procedimientos y especificaciones previos. Smith, Biochem.
J., 185, 1-11 (1980); y Smith y cols.,
Biochemistry, 11, 2958-2967, (1972).
El fibrinógeno humano se compra también 98 por ciento puro/sin
plasmina en American Diagnostica, Greenwich, Connecticut. Los
reactivos de coagulación Actina, Tromboplastina, Innovina y Plasma
humano son de Baxter Healthcare Corp., Dade Division, Miami,
Florida. La trombina bovina de Parke-Davis (Detroit,
Michigan) se usa para los ensayos de coagulación en plasma.
Los procedimientos del ensayo de coagulación son
tal como se ha descrito anteriormente. Smith y cols., Trombosis
Research, 50, 163-174 (1988). Se usa un
instrumento de coagulación CoAScreener (American LABor, Inc.) para
todas las mediciones en los ensayos de coagulación. Se mide el
tiempo a protrombina (PT) añadiendo 0,05 ml de solución salina y
0,05 ml de tromboplastina-reactivo C o reactivo de
factor tisular humano recombinante (Innovin) a 0,05 ml de plasma de
experimentación. El tiempo a tromboplastina parcial activado (APTT)
se mide mediante incubación de 0,05 ml de plasma de experimentación
con 0,05 ml de reactivo Actina durante 120 segundos seguido de 0,05
ml de CaCl_{2} (0,02 M). Se mide el tiempo a trombina (TT)
añadiendo 0,05 ml de solución salina y 0,05 ml de trombina (10
unidades de NIH/ml) a 0,05 ml de plasma de experimentación. Los
compuestos de la fórmula I se añaden a plasma humano o animal en un
amplio intervalo de concentraciones para determinar los efectos de
prolongación en los ensayos de APTT, PT y TT. Se realizan
extrapolaciones lineales para estimar las concentraciones
necesarias para doblar el tiempo de coagulación para cada
ensayo.
Se anestesian ratas macho Sprague Dawley
(350-425 g, Harlan Sprague Dawley Inc.,
Indianápolis, IN) con xilazina (20 mg/kg, s.c.) y cetamina (120
mg/kg, s.c.) y se mantienen sobre una manta calefactora de agua
(37ºC). La(s) vena(s) yugular(es) se
canula(n) para permitir realizar infusiones.
Se canulan la vena yugular izquierda y la arteria
carótida derecha con longitudes de 20 cm de tubo de polietileno PE
60. Se ajusta por fricción una sección central de 6 cm de tubo
mayor (PE 190) con un hilo de algodón (5 cm) en el lumen entre las
secciones más largas para completar el circuito de comunicación
arteriovenosa. Se hace circular sangre a través de la comunicación
durante 15 minutos antes de extraer y pesar cuidadosamente el hilo.
El peso de un hilo mojado se resta del pero total de hilo y el
trombo (véase J.R. Smith, Br J Pharmacol, 77: 29,
1982). En este modelo, los compuesto preferidos de la presente
invención reducen el peso neto del coágulo a aproximadamente
25-30% del control, o incluso menos, con una dosis
i.v. de 33,176 control, o incluso menos, con una dosis i.v. de
33,176 \mumol/kg/h.
Las arterias carótidas se aíslan mediante una
incisión en la línea media ventrocervical. Se coloca un termopar
debajo de cada arteria y se registra la temperatura de los vasos de
forma continua en un registro de papel continuo. Un manguito de
tubo (0,058 DI x 0,077 DE x 4 mm, Baxter Med. Grade Silicone),
cortado longitudinalmente, se coloca alrededor de cada carótida
directamente por encima del termopar. Se disuelve hexahidrato de
FeCl_{3} en agua y la concentración (20 por ciento) se expresa en
términos del peso real del FeCl_{3}únicamente. Para lesionar la
arteria e inducir la trombosis, se pipetean 2,85 \mul al manguito
para lavar la arteria por encima de la sonda del termopar. La
oclusión arterial se indica por una rápida caída de la temperatura.
El tiempo hasta la oclusión se registra en minutos y representa el
tiempo que pasa entre la aplicación de FeCl_{3} y la rápida caída
de la temperatura en el vaso (véase K.D. Kurz, Thromb. Res.,
60:269, 1990).
Los datos in vitro sugieren que los
inhibidores de trombina inhiben la trombina y, en concentraciones
mayores, pueden inhibir otras serinoproteasas, como la plasmina y
el activador de plasminógeno tisular. Para evaluar si los
compuestos inhiben la fibrinolisis in vivo, se determina la
velocidad de trombolisis espontánea implantando un coágulo de
sangre entera marcado en la circulación pulmonar. Se mezcla
rápidamente sangre de rata (1 ml) con trombina bovina (4 UI, Parke
Davis) y fibrinógeno humano ^{125}I (5 \muCi, ICN),
inmediatamente se introduce en tubo silástico y se incuba a 37ºC
durante 1 hora. El trombo madurado se expulsa del tubo, se corta en
segmentos de 1 cm, se lava 3 veces con solución salina normal y
cada segmento se cuenta en un contador gamma. Un segmento con un
conteo conocido se aspira en un catéter que subsiguientemente se
implanta en la vena yugular. La punta del catéter se introduce cerca
de la aurícula derecha y el coágulo se expulsa para que flote en la
circulación pulmonar. Una hora después del implante, se extraen el
corazón y los pulmones y se recuentan por separado. La trombolisis
se expresa como porcentaje en el que:
% Trombolisis = \frac{(cpm \
inyectado - cpm \ pulmonar)}{cpm \ inyectado} \ x \
100
La disolución fibrinolítica del coágulo
implantado ocurre de forma dependiente del tiempo (véase J.P.
Clozel, Cardiovas. Pharmacol., 12: 520, 1988).
El tiempo de trombina en plasma (TT) y el tiempo
de tromboplastina parcialmente activada (APTT) se miden con un
fibrómetro. La sangre se muestrea de un catéter yugular y se recoge
mediante jeringuilla que contiene citrato sódico (3,8 por ciento, 1
parte a 9 partes de sangre). Para medir el TT, el plasma de rata
(0,1 ml) se mezcla con suero salino (0,1 ml) y trombina bovina (0,1
ml, 30 U/ml en tampón TRIS; Parke Davis) a 37ºC. Para APTT, se
incuba una solución de plasma (0,1 ml) y solución de APTT (0,1 ml,
Organon Teknika) se incuban durante 5 minutos (37ºC) y se añade
CaCl_{2} (0,1 ml, 0,025 M) para comenzar la coagulación. Se
realizan análisis por duplicado y se promedian.
Para medir la biodisponibilidad, el tiempo de
trombina en plasma (TT) sirve como sustituto para el ensayo de un
compuesto progenitor asumiendo que los incrementos de TT observados
resultaban de la inhibición de trombina únicamente por el
progenitor. El tiempo del efecto del inhibidor de trombina sobre el
TT se determina después de la administración i. v. embolada a ratas
anestesiadas y después del tratamiento oral de ratas conscientes en
ayunas. Debido a las limitaciones del volumen de sangre y el número
de puntos necesario para determinar el tiempo desde el momento del
tratamiento hasta el momento en el que la respuesta vuelve a los
valores anteriores al tratamiento, se usan dos poblaciones de
ratas. Cada población representa momentos secuenciales
alternativos. El TT medio durante el periodo de tiempo se usa para
calcular el área bajo la curva (AUC). El índice de
biodisponibilidad se calcula mediante la fórmula que se muestra más
abajo y se expresa como actividad relativa porcentual.
El área bajo la curva (AUC) del tiempo TT del
plasma se determina y se ajusta para la dosis. Este índice de
biodisponibilidad se denomina "Actividad Relativa %" y se
calcula como
Actividad Relativa % =
\frac{AUC \ po}{AUC \ iv} x \frac{Dosis \ iv}{Dosis \ po} x
100
Se preparan soluciones del compuesto recientes
diariamente en solución salina normal y se inyectan emboladas o por
infusión comenzando 15 minutos antes y continuando durante toda la
perturbación experimental que son 15 minutos en el modelo de
derivación arteriovenosa y 60 minutos en el modelo FeCl_{3} de
lesión arterial y en el modelo de trombolisis espontánea. El volumen
de inyección embolada es 1 ml/kg para i.v., y 5 ml/kg para p.o., y
el volumen de infusión es 3 ml/hora.
Los resultados se expresan como medias +/- ETM.
Se usa el análisis monodireccional de la varianza para detectar las
diferencias estadísticamente significativas y después se aplica el
test de Dunnett para determinar qué medias son diferentes. El nivel
de significación para rechazar la hipótesis nula de medias iguales
es P<0,05.
Se hace ayunar a perros macho (Pachones; 18 meses
- 2 años; 12-13 kg, Marshall Farms, North Rose,
Nueva York 14516) durante la noche y se les alimenta con
Prescription Diet certificada de Purina (Purina Mills, St. Louis,
Missouri) 240 minutos después de la dosificación. El agua está
disponible a voluntad. La temperatura ambiente se mantiene entre
18,8-23,3ºC; humedad relativa de
45-50 por ciento; y con luz desde las 06:00 a las
18:00 h.
El compuesto de experimentación se formula
inmediatamente antes de la administración disolviendo solución
salina al 0,9 por ciento para dar una preparación de 5 mg/ml. Se
administra a los perros una única dosis de 2 mg/kg de compuesto de
experimentación mediante cebado oral. Se extraen muestras de sangre
(4,5 ml) de la vena cefálica 0,25, 0,5, 0,75, 1, 2, 3, 4, y 6 horas
después de la administración. Las muestras se recogen en tubos
Vacutainer con citrato y se mantienen en hielo antes de reducir a
plasma por centrifugación. Las muestras de plasma se analizan por
EM por HPLC. La concentración en plasma del compuesto de
experimentación se registra y se usa para calcular los parámetros
farmacocinéticos: constante de velocidad de eliminación, Ke;
aclaramiento total Clt; volumen de distribución, V_{D}; tiempo de
concentración máxima del compuesto de experimentación en plasma,
Tmax; concentración máxima del compuesto de experimentación de Tmax,
Cmax; vida media en plasma, t0,5; y área bajo la curva, A.U.C.;
fracción del compuesto de experimentación absorbido, F.
La preparación quirúrgica y la instrumentación de
los perros se realiza como se describe en Jackson, y cols.,
Circulation, 82, 930-940 (1990). Se
anestesiaron los perros de raza mezclada (de 6 a 7 meses de edad, de
ambos sexos, Butler Farms, Clyde, Nueva York) con pentobarbital
sódico (30 mg/kg intravenoso, i. v.), se entubaron, y se les hizo
respirar aire ambiental. El volumen tidal y las velocidades de
respiración se ajustan para mantener el PO_{2}, PCO_{2} y pH
sanguíneos en los límites normales. Se insertan electrodos de aguja
subdérmicos para registrar un ECG en la derivación II.
La vena yugular izquierda y la arteria carótida
común se aíslan a través de una incisión mediolateral en el cuello.
Se mide la presión arterial (ABP) de forma continua con un
transductor precalibrado Millar (modelo (MPC-500,
Millar Instruments, Houston, TX, EE.UU.) insertado en la arteria
carótida. La vena yugular se canula para el muestreo de sangre
durante el experimento. Además, se canulan las venas femorales de
ambas patas traseras para la administración del compuesto de
experimentación.
Se realiza una toracotomía izquierda en el
espacio quinto intercostal, y el corazón se suspende en un cuna
pericárdica. Se aísla un segmento de 1 a 2 cm de la arteria
coronaria circunfleja izquierda (LCX) proximal a la primera rama
ventricular diagonal principal. Se inserta un electrodo ánodo de
calibre 26 con punta afilada (cable de cobre chapado en plata de
calibre 30 recubierto de Teflón) de 3 a 4 mm de longitud en la LCX
y se coloca en contacto con la superficie de la túnica íntima de la
arteria (confirmado al final del experimento). El circuito de
estimulación se completa colocando el cátodo en un lugar subcutáneo
(s.c.). Se coloca un obturador de plástico alrededor de la LCX,
sobre la región del electrodo. Se coloca una sonda de flujo
electromagnética precalibrada (Carolina Medical Electronics, King,
NC, EE.UU.) alrededor de la LCX proximal al ánodo para medición del
flujo sanguíneo coronario (CBF). El obturador se ajusta para
producir una inhibición del 40-50 por ciento de la
respuesta de flujo sanguíneo hiperémico observada después de 10 s de
oclusión mecánica de la LCX. Todas las mediciones hemodinámicas y
de ECG se registran y analizan mediante sistemas de adquisición de
datos (modelo M3000, Modular Instruments, Malvern, PA,
EE.UU.).
EE.UU.).
Se provocan lesiones electrolíticas en la túnica
intima de la LCX aplicando una corriente directa de 100 \muA (CD)
al ánodo. La corriente se mantiene durante 60 min. y después se
interrumpe independientemente de que se haya obturado el vaso o no.
La formación de trombos continúa espontáneamente hasta que la LCX
está completamente ocluida (determinada como CBF cero y un
incremento en el segmento S-T). La administración
del compuesto se inicia después de dejar madurar el trombo durante
1 hora. Se comienza una infusión de 2 horas de los compuestos de la
presente invención con dosis de 0,5 y 1 mg/kg/hora simultáneamente
con una infusión de agente trombolítico (por ejemplo, activador de
plasminógeno tisular, estreptoquinasa, APSAC). La reperfusión se
continúa durante 3 horas después de la administración del compuesto
de experimentación. La reoclusión de las arterias coronarias después
de trombolisis con éxito se define como CBF cero que persistió
durante al menos 30 minutos.
Se determinan el hematograma, los valores de
hemoglobina, y hematocrito en una muestra de 40 \mul de sangre
citrada (3,8 por ciento) (1 parte citrato: 9 partes sangre) con un
analizador de hematología (Cell-Dyn 900,
Sequoia-Turner. Mount View, CA, EE.UU.). Se
determinan los tiempos de sangrado modelo con un dispositivo de
tiempo de sangrado Simplate II (Organon Teknika Durham, N.C.,
EE.UU.). El dispositivo se usa para hacer dos incisiones
horizontales en las encías de la mandíbula superior o inferior
izquierda del perro. Cada incisión es de 3 mm de ancha x 2 mm de
profunda. Se practican las incisiones, y se usa un cronómetro para
determinar durante cuanto tiempo ocurre el sangrado. Se usa una
torunda de algodón para absorber la sangre que fluye de la
incisión.
El tiempo de sangrado modelo es el tiempo que
transcurre entre la incisión y la terminación del sangrado. Los
tiempos de sangrado se obtienen justo antes de la administración
del compuesto de experimentación (0 min.), 60 min. después de la
infusión, cuando concluye la administración del compuesto de
experimentación (120 min.), y al final del experimento.
Todos los datos se analizaron por el test
unidireccional de la varianza (ANOVA) seguido del test post hoc t
de Student-Neuman-Kuels para
determinar el nivel de significación. Las mediciones de ANOVA
repetidas se usan para determinar las diferencias significativas
entre los tiempos durante los experimentos. Se determina que los
valores son estadísticamente diferentes al menos al nivel de
p<0,05. Todos los valores son la media \pm ETM. Todos los
estudios se realizan de acuerdo con los principios de orientación de
la American Physiological Society. En Jackson, y cols., J.
Cardiovasc. Pharmacol., (1993), 21,
587-599 se proporcionan más detalles de los
procedimientos descritos.
Los siguientes Ejemplos se proporcionan para
describir adicionalmente la invención y no debe interpretarse como
limitaciones de la misma.
Las abreviaturas, símbolos y términos usados en
los ejemplos tienen los siguientes significados.
Ac = acetilo
Bn o Bzl = bencilo
Bu = butilo
Calcd = calculado
DMF = dimetilformamida
Et = etilo
EtOH = etanol
FAB = bombardeo con átomos rápidos
(espectroscopia de masas)
FDMS = espectro de masas de desorción de
campo
Hex = hexanos
HPLC = cromatografía líquida de alta
resolución
HRMS = espectro de masas de alta resolución
i-Pr = isopropilo
i-PrOH = isopropanol
IR = espectro infrarrojo
LAH = hidruro de litio y aluminio
Me = metilo
MeOH = metanol
MPLC = cromatografía líquida de presión media
NMR = resonancia magnética nuclear
Ph = fenilo
RPHPLC = cromatografía líquida de alta resolución
de fase inversa
Sal de Rochelle = tartrato de potasio y sodio
SiO_{2} = gel de sílice
TBS = terc-butildimetilsililo
TFA = ácido trifluoroacético
THF = tetrahidrofurano
TIPS = triisopropilsililo
TLC = cromatografía en capa fina
A no ser que se indique lo contrario, los ajustes
de pH y el desarrollo se realizan con soluciones acuosas ácidas o
básicas. PrepLC indica cromatografía líquida preparatoria usando
cartuchos de sílice "Prep Pak ™"; cromatografía radial indica
cromatografía preparatoria usando un instrumento "Cromatotron
™".
A una solución de 500 mg (0,966 mmol) de
2-[3-(1,3-dioxolan-2-il)-4-hidroxifenil]-\alpha-[4-[2-(1-pirrolidinil)-etoxi]fenil]benzo[b]tiofen-3-metanol
en 5,0 ml de DMF seco se añadieron (1,25 g, 3,86 mmol) de carbonato
de cesio seguido de la adición de clorhidrato de
1-(2-cloroetil)pirrolidina (181 mg, 1,06
mmol). La solución espesa se agitó a 80ºC durante 2 horas. La
mezcla de reacción se enfrió entonces a temperatura ambiente y se
diluyó con 10 ml de agua. La mezcla se extrajo con EtOAc. Las fases
orgánicas combinadas se lavaron con salmuera y se secaron sobre
MgSO_{4}. El filtrado se concentró a vacío y se usaron xilenos
como azeotropo para separar el DMF residual. La purificación por
cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, [conc. Al 10% de
NH_{4}OH en MeOH] al 9% en CH_{2}Cl_{2} proporcionó 500 mg
(0,813 mmol, 84%) del producto del título en forma de una espuma
blanca.
Pf 8-184ºC; EMDF 615
(M^{+});
Anal. para C_{36}H_{42}N_{2}O_{5}S:
Calculada: C, 70,33; H, 6,89; N, 4,56;
Hallada: C, 70,33; H, 6,77; N, 4,50.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 68% a partir del carbinol anterior (Parte A)
tratando una solución del carbinol en cloruro de metileno, enfriado
en un baño de agua helada y en atmósfera de argón, con exceso de
trietilsilano (aproximadamente 7 equivalentes), seguido de la
adición gota a gota de TFA (aproximadamente 10 equivalentes).
Después de 1 minuto, la reacción se inactivó con bicarbonato sódico
acuoso saturado; y la mezcla se extrajo con EtOAc. Los extractos se
lavaron con salmuera, se secaron con sulfato sódico y se evaporaron
para proporcionar un residuo que se purificó por cromatografía
ultrarrápida en gel de sílice, eluyendo con un gradiente de
EtOAc/Et_{3}N.
EMDF 555 (M^{+});
Anal. para C_{34}H_{38}N_{2}O_{3}S
\cdot 0,75 CH_{2}Cl_{2}:
Calculada: C, 67,49; H, 6,44; N, 4,53;
Hallada: C, 67,53; H, 6,67; N, 4,46.
A una solución de 270 mg (0,487 mmol) de
2-[2-(1-Pirrolidinil)etoxi]-5-[3-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]benzaldehído
(Parte B) en 5,0 ml de MeOH seco se añadió 5,40 mg (0,111 mmol) de
cianuro sódico y 580 mg (4,87 mmol) de óxido de manganeso (IV). La
mezcla se calentó después a reflujo durante 2 horas. La mezcla de
reacción se calentó después a reflujo durante 2 horas. La mezcla de
reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de
una capa de tierra de diatomáceas y se lavó con una mezcla de
EtOAc:CH_{2}Cl_{2}. El producto bruto se purificó mediante
cromatografía (gel de sílice, [NH_{3} 2 M en MeOH] al 7% en
CH_{2}Cl_{2} para proporcionar 135 mg (0,231 mmol, 47%) de un
semisólido amarillo pálido.
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,92 (d,
J = 2,4 Hz, 1H), 7,83 (m, 1H), 7,55 (d, J = 8,6 Hz,
1H), 7,54 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,30 (m, 2H), 7,03 (d,
J = 8,6 Hz, 2H), 6,99 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,80 d,
J = 8,7 Hz, 2H), 4,23 (t, J = 6,1 H, 2H), 4,18 (s,
2h), 4,06 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,00 (t,
J = 6,1 Hz, 2H), 2,89 (t, J = 6,0 Hz, 2H),
2,62-2,69 (m, 8H), 1,81 (m, 8H); EMDF 585
(M^{+}).
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 81% a partir de
2-[2-(1-Pirrolidinil)etoxi]-5-[3-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]benzoato
metílico (Parte C) mediante saponificación de una solución en
agitación (aproximadamente 10% p/v) en THF:MeOH 1:1 con NaOH 1 N (1
equivalente) a temperatura ambiente (aproximadamente 22 horas). La
mezcla de reacción se evaporó a presión reducida y se secó en un
horno de vacío sobre P_{2}O_{5} para proporcionar la sal del
ácido.
Pf 253-255ºC (dec.); IR (KBR)
3400 (br), 1603, 1586 cm^{-1};
EM por nebulización de iones 571
(M+1)^{+}, 569 (M-1)^{-};
Anal. para C_{34}H_{37}N_{2}O_{4}S
\cdot 1,0 Na \cdot 0,8 H_{2}O:
Calculada: C, 67,26; H, 6,41; N, 4,61;
Hallada: C, 66,92; H, 6,29; N, 4,52.
El material fenólico inicial para la Parte A,
anterior, se preparó de la forma siguiente:
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 69% mediante acoplamiento de ácido
benzo[b]tiofen-2-borónico
y
2-(5-bromo-2-tritiloxifenil)-1,3-dioxolano
usando benceno, tetrakis(trifenilfosfina)paladio (0)
y solución de carbonato sódico 2,0 N, agitada vigorosamente a 85ºC.
Después de enfriar y añadir salmuera, las fases se separaron y la
fase acuosa se extrae con EtOAc. Después de secar y evaporación de
la fase orgánica, el producto se purificó por cromatografía.
EMDF 540 (M^{+}); pico base 243
(M-297);
Anal. para C_{36}H_{28}O_{3}S:
Calculada: C, 79,97; H, 5,22;
Hallada: C, 79,76; H, 5,44.
El compuesto del título se preparó a partir del
benzotiofeno anterior en rendimiento cualitativo mediante
tratamiento de una solución en CCl_{4} con un ligero exceso de
NBS (aproximadamente 1,1 equivalente) y AIBM (0,1 equivalente). La
mezcla se calentó a reflujo, se enfrió, se filtró y se concentró a
presión reducida, seguido de trituración con hexanos y
filtración.
EMDF 620 (M^{+});
Anal. para C_{36}H_{27}BrO_{3}S \cdot
0,11 CCl_{4}:
Calculada: C, 68,14; H, 4,28;
Hallada: C, 68,14; H, 4,31.
Se disolvió
3-Bromo-2-[4-tritiloxi-3-(1,3-dioxolan-2-il)fenil]benzo[b]tiofeno
(Parte F; 28,7 g, 46,2 mmol) en 300 ml de THF recién destilado y
enfriado a -78ºC. A la solución se añadió n-BuLi
1,6 M en hexanos (34,7 ml, 55,5 mmol) gota a gota durante un
periodo de 1 h. La solución marrón oscuro se agitó a -78ºC durante
1,5 h. Después se añadió DMF seco (14,3 ml, 185 mmol) gota a gota
durante 20 minutos y la mezcla de reacción se calentó lentamente a
temperatura ambiente y se agitó durante 19 horas. La reacción se
inactivó con 300 ml de solución saturada de NH_{4}Cl. La mezcla
se extrajo (3 x 1 l) con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron a presión
reducida. La purificación por cromatografía en columna en gel
PrepLC (gel de sílice, EtOAc 0% a 6% a 10%-Hexanos) proporcionó 6,70
g (11,8 mmol, 25%) de una espuma blanca.
EMDF 243 (M-325); 325
(M-243);
Anal. para C_{37}H_{28}O_{4}S \cdot 0,15
CH_{2}Cl_{2}:
Calculada: C, 76,74; H, 4,91;
Hallada: C, 76,69; H, 5,15.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 71% tratando
2-[4-tritiloxi-3-(1,3-dioxolan-2-il)fenil]-benzo[b]tiofen-3-carboxaldehido
(Parte G) con bromuro magnésico de
4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenilo en
THF a 0ºC. La reacción se inactivó a 0ºC con solución saturada
acuosa de NH_{4}Cl y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas
combinadas se secaron (MgSO_{4}), se evaporaron y se purificaron
por cromatografía ultrarrápida.
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,75 (d,
J = 7,8 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,58 (d,
J = 2,3 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 7,1 Hz, 6H),
7,14-7,31 (m, 12H), 6,89-6,99 (m,
2H), 6,81 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,45 (d, J = 8,6 Hz,
1H), 6,27 (s, 1H), 6,05 (s, 1H), 4,24 (t, J = 5,3 Hz, 2H),
3,99 (m, 4H), 3,12 (dis t, 2H), 2,96 (m, 4H), 1,94 (m, 4H); EMDF 760
(M^{+}) pico de la base 243 (M-517) .
A una solución de (1,74 g, 2,29 mmol) de
2-[4-tritiloxi-3-(1,3-dioxolan-2-il)fenil]-\alpha-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]benzo[b]tiofen-3-metanol
(Parte H) en 23 ml de mezcla de THF-EtOH (relación
1:1) se añadió (0,50 ml de Pd al 10% sobre carbono). La solución
espesa negra se agitó a temperatura ambiente en atmósfera de
hidrógeno (globo de presión) durante 24 horas. La solución espesa
se filtró con una capa de tierra de diatomáceas y se enjuagó con
EtOH tibio. El filtrado se concentró. La purificación por
cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, [NH_{4}OH conc al 10%
en MeOH] del 7% al 9%/CH_{2}Cl_{2}) proporcionó 954 mg (1,84
mmol, 81%) de una espuma amarilla.
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,79 (d,
J = 8,0 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,40 (d,
J = 2,2 Hz, 1H), 7,17-7,36 (m, 5H), 6,91 (d,
J = 8,4 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,16 (s,
1H), 5,93 (s, 1H), 5,29 (s, 1H), 4,03-4,16 (m, 6H),
2,96/dist t, 2H), 2,74 (m, 4H), 1,83 (m, 4H); EMDF 517
(M^{+}).
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 85% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte C, a partir de
4-[2-formil-4-[3-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]fenoxi]butirato.
IR (CHCl_{3}) 1729 cm^{-1}; RMN de ^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 7,93 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,84 (m,
1H), 7,53 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,4 Hz,
1H), 7,31 (m, 2H), 7,03 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,98 (d,
J = 8,7 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 4,21 (dis
t, 2H), 4,18 (s, 2H), 4,12 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,85 (s, 3H),
3,68 (s, 3H), 3,08 (dist t, 2H), 2,89 (br m, 4H), 2,62 (t, J
= 7,2 Hz, 2H), 2,16 (m, 2H), 1,92 (br m, 4H); EMDF 587
(M^{+}).
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 98% a partir de
2-(3-carbometoxipropoxi)-5-[3-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]benzoato
metílico (Parte A) siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte D (pero usando 2,0
equivalentes de solución de NaOH 1N).
Pf > 250ºC; IR (KBr) 3425 (br), 1610, 1576
cm^{-1}; EM de nebulización de iones 560 (M+)^{+}, 558
(M^{-});
Anal. para C_{32}H_{31}NO_{6}S \cdot 2 Na
\cdot 0,6 H_{2}O:
Calculada: C, 62,46; H, 5,29; N, 2,28;
Hallada: C, 62,16; H, 5,15; N, 1,97.
El material inicial
4-[2-formil-4-[3-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]fenoxi]butirato
de la Parte A, anterior, se preparó de la forma siguiente:
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 54% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte A anterior, a partir del
fenol del Ejemplo 1, Parte I, anterior, y
4-clorobutirato metílico.
EMDF 618 (M^{+});
Anal. para C_{35}H_{39}NO_{7}S:
Calculada: C, 68,05; H, 6,36; N, 2,27;
Hallada: C, 68,28; H, 6,58; N, 2,43.
Se agitó una solución de
4-[2-(1,3-Dioxolan-2-il)-4-[3-[\alpha-hidroxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]fenoxi]butirato
metílico (160 mg, 0,259 mmol) en 2,6 ml de una mezcla de
AcOH/H_{2}O (relación 4:1) a temperatura ambiente durante 1 hora
40 minutos. La mezcla de reacción se concentró después a presión
reducida y se formó un azeotropo con benceno para proporcionar 149
mg (0,259 mmol, rendimiento cuantitativo) de una espuma
blanquecina.
blanquecina.
EMDF 573 (M^{+});
Anal. para C_{33}H_{35}NO_{6}S:
Calculada: C, 69,09; H, 6,15; N, 2,44;
Hallada: C, 68,84; H, 5,91; N, 2,57.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 79% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte B, a partir del carbinol
anterior.
EMDF 558 (M^{+});
Anal. para C_{33}H_{35}NO_{5}S:
Calculada: C, 71,07; H, 6,33; N, 2,51;
Hallada: C, 70,79; H, 6,32; N, 2,22.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento cuantitativo a partir de
2-(3-carbometoxipropoxi)-5-[3-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]benzoato
metílico (Ejemplo 2, Parte A) tratando la solución del diéster en
EtOAc:CH_{2}Cl_{2} 3:1 con una cantidad equimolar de ácido
oxálico 0,5M en EtOAc. La solución espesa resultante se agitó a
temperatura ambiente aproximadamente 2 horas antes de concentrarla a
vacío para proporcionar el compuesto del título en forma de un
sólido.
EM por nebulización de iones 588 (M^{+});
Anal. para C_{34}H_{37}NO_{6}S \cdot 0,84
C_{2}H_{2}O_{4}:
Calculada: C, 64,60; H, 5,88; N, 2,11;
Hallada: C, 64,58; H, 6,25; N, 2,11.
A una solución de 133 mg (0,238 mmol) de
4-[2-formil-4-[3-[4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]bencil]benzo[b]tiofen-2-il]fenoxi]butirato
metílico (Ejemplo 2, Parte E) en 5,0 ml de amoniaco 0,5 M en dioxano
se añadió 58,2 mg (1,19 mmol) de cianuro sódico y dos
porciones(286 mg cada una, 2,37 mmol cada una) de óxido de
manganeso (IV) con 10 minutos de diferencia. La solución espesa
negra se agitó durante 22 horas a temperatura ambiente, se filtró
con una capa de tierra de diatomáceas y se lavó con THF. El
filtrado se concentró a sequedad a vacío. El residuo se purificó
después por cromatografía (gel de sílice, [amoniaco 2M en MeOH] al
5%/CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar 78,1 mg (0,136 mmol, 57%) de
una espuma blanca. La sal oxalato se preparó en rendimiento
cuantitativo esencialmente siguiendo el procedimiento que se
detalla en el Ejemplo 3.
IR (base libre) (KBr) 3485. 3385, 1734, 1670
cm^{-1}; EM por nebulización de iones 573 (M^{+});
Anal. para C_{33}H_{36}N_{2}O_{5}S
\cdot 0,68 C_{2}H_{2}O_{4}:
Calculada: C, 65,10; H, 5,94; N, 4,42;
Hallada: C, 65,05; H, 6,27; N, 4,61.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento global del 36% a partir de
6-isopropoxibenzotiofeno siguiendo esencialmente el
mismo procedimiento que se detalla en el documento WO 97/25033,
Ejemplo 1, Parte A.
EMDF 236 (M^{+}); Pico de la base 192
(M-44)^{+}; RMN de ^{1}H (CDCl_{3})
\delta 8,19 (s, 1H), 7,83 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,39 (d,
J = 2,1 Hz, 1H), 7,02 (dd, J =8,8 Hz, 1H), 7,39 (d,
J = 2,1 Hz, 1H), 7,02 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1H), 4,66
(m, J = 6,1 Hz, 1H), 1,41 (d, J = 6,0 Hz, 6H).
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 67% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte B a partir de ácido
6-isopropoxibenzo[b]tiofen-2-borónico
(Parte A) y
2-(5-bromo-2-tritiloxifenil)-1,3-dioxolano.
EMDF 598 (M^{+});
Anal. para C_{39}H_{34}O_{4}S:
Calculada: C, 78,23; H, 5,72;
Hallada: C, 78,18; H, 5,67.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento cuantitativo siguiendo esencialmente el mismo
procedimiento que se detalla en el Ejemplo 1, Parte F anterior a
partir de
6-isopropoxi-2-[4-tritiloxi-3-(1,3-dioxolan-2-il)fenil]benzo[b]tiofeno.
EMDF 678 (M^{+}); Pico de la base 243
(M-435)^{+}; RMN de ^{1}H (CDCl_{3})
\delta 7,85 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,8
Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,1 Hz, 6H), 7,33-7,21
(m, 11H), 7,01 (dd, J = 8,9, 2,3 Hz, 1H), 6,49 (d, J
= 8,7 Hz, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,59 (m, J = 6,1 Hz, 1H),
4,21-4,04 (m, 4H), 1,37 (d, J = 6,0 Hz,
6H).
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 18% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte G anterior, a partir de
3-Bromo-6-isopropoxi-2-[4-tritiloxi-3-(1,3-dioxolan-2-il)fenil]benzo[b]tiofeno
(Parte C).
EMDF 626 (M^{+}); Pico de la base 243
(M-384)^{+}; RMN de ^{1}H (CDCl_{3})
\delta 9,81 (s, 1H), 8,57 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,68 (d,
J = 2,4 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 6,9 Hz, 6H),
7,33-7,23 (m, 10H), 7,05 (dd, J = 9,0, 2,5
Hz, 1H), 7,02 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1H), 6,52 (d, J =
8,6 Hz, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,61 (m, 1H), 4,18-4,06
(m, 4H), 1,37 (d, J = 6,0 Hz, 6H).
Una solución de 5,00 g (30,1 mmol) de ácido
3-metoxi-4-metilbenzoico
disuelto den 40 ml de cloruro de tionilo se agitó a temperatura
ambiente durante 3,5 días. La solución resultante se evaporó a
sequedad a vacío. El cloruro de tionilo residual se separó usando
benceno como azeotropo. El cloruro de ácido bruto resultante se
sometió después a vacío elevado durante 4 horas. A una solución
espesa de 4,80 g (33,1 mmol) de sal sódica de
1-hidroxipiridin-2-tiona
en 180 ml de bromotriclorometano se añadió 5,56 g (33,1 mmol) del
cloruro de
3-metoxi-4-metilbenzoilo
y aproximadamente 500 mg de AIBN disuelto en 120 ml de
bromotriclorometano. La mezcla se agitó a reflujo durante 2 horas.
La mezcla se filtró después y se lavó con CH_{2}Cl_{2}. El
filtrado se concentró a vacío. El producto bruto se purificó por
cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, EtOAc al 6% en hexanos)
para proporcionar 2,86 g (14,2 mmol, 47%) de un aceite
amarillo.
EMDF 200 (M^{+});
Anal. para C_{8}H_{9}BrO:
Calculada: C, 47,79; H, 4,51;
Hallada: C, 47,50; H, 4,36.
\newpage
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 53% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el documento WO 97/25033, Ejemplo 37, Parte A, a
partir de
3-bromo-6-metilanisol
(Parte E).
EM por nebulización de iones 270 (M^{+});
Anal. para C_{12}H_{16}BrNO \cdot 0,6
H_{2}O \cdot 0,3 CH_{2}Cl_{2}:
Calculada: C, 48,20; H, 5,85; N, 4,57;
Hallada: C, 48,87; H, 5,47; N, 4,96.
A una solución de 539 mg (1,99 mmol) de
1-(4-bromo-2-metoxi)bencilpirrolidina
(Parte F) en 20 ml de THF seco enfriada a -78ºC se añadieron 1,37 ml
(2,19 mmol) de n-BuLi 1,6 M en hexanos. La solución
se agitó a -78ºC durante 50 minutos. A la solución se añadió
mediante una cánula, 1,27 g (2,03 mmol) de
2-[3-(1,3-dioxolan-2-il)-4-tritiloxifenil]-3-formil-6-isopropoxibenzo[b]tiofeno
(Parte D) disuelto en 15 ml de THF. Se extrajo del baño de
acetona/hielo seco y la mezcla se agitó durante 2 horas, después se
añadieron 20 ml de solución saturada de NH_{4}Cl para inactivar
la reacción. La mezcla se extrajo (2 x 250 ml) con EtOAc. Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y
concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía
ultrarrápida (gel de sílice, [NH_{4}OH conc. Al 10% en MeOH] al
7%/CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar 1,4076 g (1,72 mmol, 86%) de
una espuma blanquecina.
IR 3437 (br) cm^{-1}; EMDF 819 (M^{+}), 576
(M-243)^{+};
Anal. para C_{52}H_{51}NO_{6}S \cdot 0,2
NH_{5}O \cdot 0,1 H_{2}O:
Calculada: C, 75,53; H, 6,36; N, 2,03;
Hallada: C, 75,21; H, 6,37; N, 2,06.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 65% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte I anterior a partir de
2-[3-(1,3-Dioxolan-2-il)-4-tritiloxifenil]-6-isopropoxi-\alpha-[3-metoxi-4-(1-pirrolidinilmetil)fenil]benzo[b]tiofen-3-metanol
(Parte G).
IR 3403 (br) cm^{-1}; EM por nebulización de
iones 576 (M^{+}), 575 (M-1)^{-};
Anal. para C_{33}H_{37}NO_{6}S\cdot0,1
NH_{4}OH:
Calculada: C, 68,43; H, 6,53; N, 2,66;
Hallada: C, 68,31; H, 6,57; N, 3,06.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 90% siguiendo esencialmente el mismo procedimiento
que se detalla en el Ejemplo 1, Parte A, a partir de
2-[3-(1,3-dioxolan-2-il)-4-hidroxifenil]-6-isopropoxi-\alpha-[3-metoxi-4-(1-pirrolidinilmetil)fenil]benzo[b]tiofen-3-metanol
(Parte H).
EMDF 672 (M^{+});
Anal. para C_{39}H_{48}N_{2}O_{6}S:
Calculada: C, 69,62; H, 7,19; N, 4,16;
Hallada: C, 69,82; H, 7,40; N, 4,32.
A una solución que contenía 622 mg (0,924 mmol)
de
2-[3-(1,3-dioxolan-2-il)-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-6-isopropoxi-\alpha-[3-metoxi-4-(1-pirrolidinilmetil)fenil]benzo[b]tiofen-3-metanol
(parte I) en 9,2 ml de una mezcla de HOAC:H_{2}O 4:1 se agitó a
temperatura ambiente durante 4 horas. La solución se concentró
después a sequedad a vacío y se separó el HOAC residual usando
benceno como azeotropo. La espuma resultante se sometió a presión
reducida durante 2 horas para proporcionar 581 mg (0,924 mmol,
rendimiento cuantitativo) del benzaldehído bruto. A una solución de
581 mg (0,9237 mmol) del benzaldehído anterior en 14 ml de
CH_{2}Cl_{2} seco enfriado c 0ºC se añadieron 1,03 ml (6,47
mmol) de trietilsilano seguido de la adición gota a gota de 0,64 ml
(8,31 mmol) de ácido trifluoroacético. La solución se agitó a 0ºC
durante 2 horas. Se retiró del baño helado y la solución se agitó a
temperatura ambiente durante otras 2 horas más. La reacción se
inactivó añadiendo 14 ml de solución saturada de NaHCO_{3}. La
mezcla se extrajo (2 x 75 ml) con CH_{2}Cl_{2}. Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y
concentraron a vacío. El producto bruto se purificó por
cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, 75:22:3
THF:hexanos:Et_{3}N) para proporcionar 168 mg (0,268 mmol, 29%)
del ácido benzoico (obtenido mediante oxidación al aire del
benzaldehído desoxigenado). A una solución que contiene 168 mg
(0,268 mmol) del ácido benzoico en 5 ml de MeOH se añadieron 25
gotas de H_{2}SO_{4} 3 M. La solución se agitó a reflujo
durante 4 días. La solución se enfrió y concentró a un volumen de
aproximadamente 2 ml a vacío. El residuo se diluyó en EtOAc y se
basificó con 20 ml de NaHCO_{3} saturado. Se separaron las fases y
la fase acuosa se extrajo con EtOAc (1 x 30 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y
concentraron a vacío. El producto bruto se purificó por
cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, [NH_{3} 2 M en MeOH]
al 6%/CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar 125,3 mg (0,210 mg, 79%,
23% global del acetal) de una espuma amarillo pálido.
IR 1725 cm^{-1}; EM por nebulización de iones
643 (M^{+}), 674 (M+1)^{-}; RMN de ^{1}H (CDCl_{3})
\delta 7,83 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 8,6,
2,5 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,23 (d, J =
2,2 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 7,3 Hz, 1H),
6,92-6,79 (m, 2H), 6,61 (d, J = 7,7 Hz, 1H),
6,57 (s, 1H), 4,54-4,45 (m, 1H),
4,18-4,10 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,57
(s, 2H), 2,90 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,60-2,40
(m, 8H), 175-1,60 (m, 8H), 1,29 (d, J = 6,2
Hz, 6H).
A una solución que contenía 86,1 mg (0,120 mmol)
de diclorhidrato de
5-[-6-isopropoxi-3-[3-metoxi-4-(1-pirrolidinilmetil)bencil]benzo[b]tiofen-2-il]-2-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]benzoato
metílico (preparado a partir de la base libre de la Parte J) en 2,5
ml de CH_{2}Cl_{2} seco se añadieron 0,60 ml de triclorhidrato
de boro 1 M en CH_{2}Cl_{2} a 0ºC. La mezcla heterogénea se
agitó a 0ºC durante 45 minutos. A la mezcla se añadieron 0,75 ml de
MeOH y la solución se agitó durante otros 45 minutos más a 0ºC. La
reacción se inactivó con 3 ml de solución saturado de NaHCO_{3} y
se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con
CH_{2}Cl_{2} (1 x 20 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y concentraron a vacío. El
producto bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida (gel de
sílice, [NH_{4}OH conc. al 10% en MeOH] al 8%/CH_{2}Cl_{2})
para proporcionar 6,5 mg (0,011 mmol, 9%) de un sólido amarillo.
EM por nebulización de iones 601 (M^{+}), 599
(M-1)^{-}; RMN de ^{1}H (CDCl_{3})
\delta 7,86 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,6
Hz, 1H), 7,27 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 7,7
Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,77 (d, J = 8,7 H, 1H), 6,68 (d,
J = 8,7 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,60 (s,
1H), 4,19 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 4,10 (s, 2H), 3,84 (s, 2H),
3,81 (s, 3H), 3,60 (s, 3H), 3,04 (dist t, 2H), 2,82 (m, 8H), 1,87
(m, 8H).
El compuesto del título se preparó en rendimiento
cuantitativo siguiendo esencialmente el mismo procedimiento que se
detalla en el Ejemplo 1, Parte D anterior, a partir de
5-[-6-Hidroxi-3-[3-metoxi-4-(1-pirrolidinilmetil)bencil]-2-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]benzo[b]tiofen-2-il]benzoato
metílico (Parte K).
EM por nebulización de iones 587 (M^{+}), 586
(M^{-}); RMN de ^{1}H (CD_{3}OD) \delta 7,57 (s, 1H), 7,38
(d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,18
(s, 1H), 7,11 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,9
Hz, 1H), 6,76 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,63 (d,
J = 8,0 Hz, 1H), 4,28-4,17 (m, 4H), 3,68 (s,
3H), 3,63 (s, 2H), 3,03 (m, 2H), 2,82 (m, 4H), 2,58 (m, 4H),
1,85-1,65 (m, 8H).
Se calentaron 4-bromoguaiacol,
(4-bromo-2-metoxifenol:
30 g, 147,8 mmol) y HCl de
1-(2-cloroetil)pirrolidina (37,7 g, 221,6
mmol) a 80ºC en 500 ml de DMF en presencia de K_{2}CO_{3} (61,3
g, 44,3 mmol) durante 20 horas. Después de enfriar, el producto
bruto se filtró y concentró a vacío. El residuo bruto se purificó
por cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}; gradiente de
0-2% de TEA en EtOAc) para proporcionar 27,7 g
(92,3 mmol; 62%) del compuesto del título en forma de un aceite
transparente incoloro.
EMDF 299 (M^{+}), 301 (M+1);
Anal. para C_{13}H_{18}BrNO_{2}:
Calculada: C, 52,01; H, 6,04; N, 4,67;
Hallada: C, 52,24; H, 5,97; N, 4,62.
Una solución de ácido
benzo[b]tiofen-2-borónico
(18 g, 101,1 mmol) y éter
2-(1-pirrolidinil)etílico de
4-bromo-2-metoxifenilo
(27,6 g, 91,9 mmol) en 500 ml de THF se trató con
Pd(PPh_{3})_{4} (5 g, 4,3 mmol) y 96 ml de
Na_{2}CO_{3} acuoso 2N. La mezcla resultante se calentó hasta la
mañana siguiente a 60ºC a oscuras. Después de enfriar a temperatura
ambiente, la fase orgánica se decantó para separar los sólidos, que
se enjuagaron con THF (3 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas
se concentraron a vacío. La purificación del residuo bruto por
cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}; gradiente de TEA
0-2% en EtOAc) proporcionó un rendimiento
cualitativo del compuesto del título en forma de un sólido tostado
pálido.
EMDF 353 (M+1);
Anal. para C_{21}H_{23}NO_{2}S \cdot 0,2
H_{2}O:
Calculada: C, 70,63; H, 6,61; N, 3,92;
Hallada: C, 70,69; H, 6,52; N, 4,12.
Una solución a 0ºC de
2-[3-metoxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]benzo[b]tiofeno
(32 g, 91,9 mmol) en 500 ml de dicloroetano se trató con BBr_{3}
(92, g, 269,6 mmol) gota a gota mediante un embudo de adición.
Después de 1,5 horas, la mezcla de reacción se vertió lentamente en
1 l de NaHCO_{3} acuoso saturado/hielo. Las fases se separaron y
la fase acuosa se extrajo con MeOH al 5%/CHCl_{3} (5 x 200 ml). El
complejo de boro sólido marrón se agitó en 200 ml de HCl 1 N. La
solución ácida se neutralizó con NaOH y se extrajo con EtOAc (4 x
150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
K_{2}CO_{3}, se filtraron y concentraron a vacío. El residuo
bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}; MeOH
al 1% en CHCl_{3}, saturado con NH_{4}OH) para proporcionar 8,01
g (23,7 mmol, 26%) del fenol del título en forma de un sólido
blanquecino.
EMSI 338 (M-1), 340 (M+1);
Anal. para C_{20}H_{21}NO_{2}S \cdot 0,5
H_{2}O:
Calculada: C, 68,94; H, 6,36; N, 4,02;
Hallada: C, 68,88; H, 6,23; N, 4,20.
Una solución a 0ºC de
2-[3-Hidroxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]benzo[b]tiofeno
(6,7 g, 19,8 mmol) en 200 ml de dicloroetano se trató con cloruro de
4-fluorobenzoilo (2,6 ml, 21,8 mmol) gota a gota. Se
formó un precipitado blanco. La mezcla de reacción se calentó a
temperatura ambiente y se agitó durante 6,5 horas. El éster
intermedio se enfrió a 0ºC y se trató con cloruro de
4-fluorobenzoilo (2,6 ml, 21, 8 mmol) y TiCl_{4}
(8,7 ml, 79,2 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a
temperatura ambiente. Después de 5 horas, la mezcla de reacción se
vertió lentamente en 200 ml de NaHCO_{3} acuoso saturado. Se
separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con CHCl_{3} (4
x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
K_{2}CO_{3}, se filtraron y se concentraron a vacío. La
purificación del residuo bruto por PrepLC (SiO_{2}; gradiente de
CHCl_{3} al 100% a MeOH al 0,5% en CHCl_{3}, saturado con
NH_{4}OH) proporcionó 7,5 g (12,9 mmol, 65%) del compuesto del
título en forma de una espuma amarilla.
EMSI 584 (M+1);
Anal. para C_{34}H_{27}F_{2}NO_{4}S
\cdot H_{2}O:
Calculada: C, 67,87; H, 4,86; N, 2,33;
Hallada: C, 67,87; H, 4,82; N, 2,41.
Una solución a 0ºC de Cetona de
2-[3-(4-fluorobenciloxi)-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]benzo[b]tiofen-3-ilo
de 4-fluorofenilo (7,0 g, 12,0 mmol) y NaH (1,1 g,
26,4 mmol) en 600ml de DMF se trató con
1-(2-hidroxietil)pirrolidin-2-ona
(2,85 ml, 25,2 mmol) gota a gota. Después de 30 minutos la mezcla de
reacción se calentó a temperatura ambiente y se dejó agitar hasta la
mañana siguiente. La mezcla de reacción se vertió en 150 ml de
salmuera y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (4 x 100 ml). Las
fases orgánicas combinadas se lavaron con H_{2}O (2 x 300 ml),
secaron sobre K_{2}CO_{3}, se filtraron y se concentraron a
vacío. La purificación del residuo bruto por PrepLC (SiO_{2};
gradiente de 0-2% de MeOH/CHCl_{3}, saturado con
NH_{4}OH) proporcionó 5,35 g (9,37 mmol, 78%) del compuesto del
título. Una pequeña muestra de la cetona del título se convirtió en
su sal oxalato.
EMDF 571 (M+1);
Anal. para C_{33}H_{34}N_{2}O_{5}S
\cdot C_{2}H_{2}O_{4} \cdot 0,1 H_{2}O:
Calculada: C, 63,45; H, 5,51; N, 4,23;
Hallada: C, 63,18; H, 5,87; N, 4,62.
Una solución a -35ºC de
4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]fenilcetona
de
2-[3-hidroxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]benzo[b]tiofen-3-ilo
(5,0 g, 876 mmol) en 50 ml de THF se trató con LAH (1 M en THF, 8,8
ml, 8,76 mmol) gota a gota. Después de 3 horas, la mezcla de
reacción se inactivó con 10 ml de H_{2}O. Se añadieron EtOAc y
sal de Rochelle acuosa saturada (50 ml cada uno). Se separaron las
fases y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (4 x 50 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre K_{2}CO_{3}, se filtraron
y se concentraron a vacío. La purificación del residuo bruto por
PrepLC (SiO_{2}; gradiente de 0,5-1% de
MeOH/CHCl_{3}, saturado con NH_{4}OH) proporcionó 4,0 g del
alcohol intermedio que se disolvió inmediatamente en 50 ml de
dicloroetano. La solución resultante se trató con Et_{3}SiH (9,8
ml, 61,3 mmol). Al enfriara a 0ºC, se añadió TFA 86,7 ml, 87,6
mmol) gota a gota. Después de 1 hora, la mezcla de reacción se
vertió en 150 ml de NaHCO_{3} acuoso saturado. Se separaron las
fases y la fase acuosa se extrajo con CHCl_{3} (3 x 50 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre K_{2}CO_{3}, se
filtraron y se concentraron a vacío. La purificación del residuo
bruto por cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}; gradiente de
1-2% de MeOH/CHCl_{3}, saturado con NH_{4}OH)
proporcionó 3,3 g (5,93 mmol, 68 %) del compuesto del título, del
que una pequeña parte se convirtió en la sal oxalato.
EMDF 557 (M+1);
Anal. para C_{33}H_{36}N_{2}O_{4}S
\cdot C_{2}H_{2}O_{4}:
Calculada: C, 65,00; H, 5,92; N, 4,33;
Hallada: C, 64,73; H, 6,13; N, 4,54.
Una solución espesa de
2-[3-Hidroxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-3-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]bencil]benzo[b]tiofeno
(1,0 g, 1,8 mmol) 4-bromobutirato de etilo (0,285
ml, 2,0 mmol) y Cs_{2}CO_{3} (1,8 g, 5,5 mmol) en 10 ml de DMF
se calentó a 80ºC durante 3 horas. Se añadieron EtOAc y H_{2}O (30
ml de cada). Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con
EtOAc (2 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con
H_{2}O (3 x 50 ml), secaron sobre K_{2}CO_{3}, se filtraron y
se concentraron a vacío. La purificación del residuo bruto por
cromatografía radial (SiO_{2}; gradiente de 1-2%
de MeOH/CHCl_{3}, saturado con NH_{4}OH) proporcionó 1,0 g (1,49
mmol, 83%) del compuesto del título, del que una pequeña parte se
convirtió en la sal oxalato.
EMDF 671 (M+1);
Anal. para C_{39}H_{46}N_{2}O_{6}S
\cdot 0,6 C_{2}H_{2}O_{4} \cdot 1,7 H_{2}O:
Calculada: C, 63,91; H, 6,75; N, 3,71;
Hallada: C, 63,51; H, 6,42; N, 4,10.
Una solución de oxalato de
2-[[3-(3-etoxicarbonil)propoxi]-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-3-[4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)-etoxi]bencil]benzo[b]tiofeno
(Ejemplo 6, Parte G; 300 mg, 0,447 mmol) en 5 ml de THF/MeOH/h
(3:1:1) se trató con LiOH (11 mg, 0,459 mmol). Después de 6 horas la
mezcla de reacción se concentró a vacío para proporcionar una espuma
blanca. El residuo se disolvió en 2 ml de H_{2}O y se liofilizó
hasta la mañana siguiente para proporcionar 281 mg (0,433 mmol, 97%)
de la sal de litio del título.
EMDF 694 (M+1+Li), 655 (M+1+2Li);
Anal. para C_{37}H_{41}LiN_{2}O_{6}S:
Calculada: C, 68,50; H, 6,37; N, 4,32;
Hallada: C, 68,22; H, 6,21; N, 4,17.
Una solución espesa de NH_{4}Cl (0,785 ml, 1,57
mmol) a 0ºC en 5 ml de tolueno se trató con Me_{3}Al (2 M en THF,
0,785 ml, 1,57 mmol) gota a gota mediante una jeringuilla. La
mezcla resultante se dejó calentar a temperatura ambiente y agitar
durante 45 minutos. Se añadió una solución de oxalato de
2-[[3-(3-etoxicarbonil)propoxi]-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-3-[4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)-etoxi]bencil]benzo[b]tiofeno
(Ejemplo 6, Parte G; 300 mg, 0,447 mmol) en 5 ml de tolueno, y la
temperatura de reacción se elevó a 50ºC. Después de 4 horas, la
mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se inactivó con
5 ml de HCl 0,1 H y se basificó con NaOH 0,1 N. Se separaron las
fases y la fase acuosa se extrajo con CHCl_{3} (3 x 25 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre K_{2}CO_{3}, se
filtraron y concentraron a vacío. La purificación del residuo bruto
por cromatografía radial (SiO_{2}; gradiente de
1-2% de MeOH/CHCl_{3}, saturado con NH_{4}OH)
proporcionó 119 mg (0,185 mmol, 41%) del compuesto del título, del
que una pequeña parte se convirtió en la sal oxalato.
EMSI 642 (M+1);
Anal. para C_{37}H_{43}N_{3}O_{5}S
\cdot C_{2}H_{2}O_{4} \cdot 0,1 H_{2}O:
Calculada: C, 62,47; H, 6,32; N, 5,60;
Hallada: C, 62,54; H, 6,35; N, 5,46.
Una solución a -10ºC de oxalato de
2-[[3-(3-etoxicarbonil)propoxi]-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-3-[4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)-etoxi]bencil]benzo[b]tiofeno
(Ejemplo 6, Parte G; 180 mg, 0,268 mmol) en 5 ml de THF se trató con
LAH (1 M en THF, 0,27 ml, 0,268 mmol) gota a gota. Después de 2
horas, la mezcla de reacción se inactivó con 1 ml de H_{2}O. Se
añadieron EtOAc y sal de Rochelle acuosa saturada (20 ml cada uno).
Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20
ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
K_{2}CO_{3}, se filtraron y se concentraron a vacío. La
purificación del residuo bruto por cromatografía radial (SiO_{2};
gradiente de 1-3% de MeOH/CHCl_{3}, saturado con
NH_{4}OH) proporcionó 38 mg (0,060 mmol, 23%) del compuesto del
título, que se convirtió en su sal oxalato.
EMDF 629 (M+1);
Anal. para C_{37}H_{44}N_{2}O_{5}S
\cdot 1,5 C_{2}H_{2}O_{4} \cdot 1,5 H_{2}O:
Calculada: C, 60,74; H, 6,37; N, 3,54;
Hallada: C, 60,59; H, 6,23; N, 3,75.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 91% a partir de
4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]fenilcetona
de
2-[3-hidroxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]
fenil]benzo[b]tiofen-3-ilo
(Ejemplo 6, Parte E) de acuerdo con el procedimiento que se detalla
en el Ejemplo 6, Parte G.
EMDF 685 (M+1);
EMRH por BAR calculada para
C_{39}H_{45}N_{2}O_{7}S: 685,2948. Hallada: 685,2952 (M+1);
IR (KBr) 3446 (br), 1730, 1656, 1600.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 90% a partir de oxalato de
4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]fenilcetona
de
2-[[3-(3-etoxicarbonil)propoxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]benzo[b]tiofen-3-ilo
(Ejemplo 10) de acuerdo con el procedimiento que se describe en el
Ejemplo 7.
EMDF 663 (M+Li);
Anal. para C_{37}H_{39}LiN_{2}O_{7}S
\cdot 2H_{2}O:
Calculada: C, 63,60; H, 6,20; N, 4,01;
Hallada: C, 63,82; H, 6,03; N, 4,11.
El compuesto del título se preparó con un
rendimiento del 86% a partir de
2-[3-hidroxi-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-3-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]bencil]benzo[b]tiofeno
(Ejemplo 6, Parte F) y bromoacetato de t-butilo
mediante un procedimiento similar al que se describe en el Ejemplo
6, Parte G.
EMDF 671 (M+1);
Anal. para C_{39}H_{46}N_{2}O_{6}S
\cdot 0,5 C_{2}H_{2}O_{4}:
Calculada: C, 67,11; H, 6,62; N, 3,91;
Hallada: C, 66,77; H, 6,94; N, 3,80.
Una solución de oxalato de
2-[3-t-butoxicarbonilmetoxi-4-[2-(1-pirrolinidinil)etoxi]fenil]-3-[4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)
etoxi]bencil]benzo[b]tiofeno (Ejemplo
12; 250 mg, 0,374 mmol) en 2 ml de anisol se trató con 5 ml de TFA
gota a gota. Después de agitar durante 2,5 días, la mezcla de
reacción se vertió en 15 ml de H_{2}O. La fase acuosa se extrajo
con EtOAc (2 x 25 ml) y se concentró a vacío. El residuo se disolvió
en 2 ml de H_{2}O y se liofilizó para proporcionar 205 mg (0,281
mmol; 75%) de la sal del título en forma de un sólido blanco
higroscópico.
EMDF 615 (M+1);
Anal. para C_{35}H_{38}N_{2}O_{6}S
\cdot CF_{3}CO_{2}H \cdot 2,5 H_{2}O:
Calculada: C, 57,43; H, 5,73; N, 3,62;
Hallada: C, 57,03; H, 5,36; N, 3,84.
Claims (14)
1. Un compuesto de la fórmula I (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo)
en la
que
A es carbonilo o metileno;
R^{d} es
-[O-(CH_{2})_{d}]_{c}-R^{c} en
el que c es 0 ó 1; d es 1, 2 ó 3; y R^{c} es carboxi, (alcoxi
C_{1-4})carbonilo, hidroximetilo o
carbamoilo; con la condición de que si c es 0, R^{c} es carboxi,
(alcoxi C_{1-4})carbonilo o carbamoilo;
o
R^{d} es
-[O-(CH_{2})_{d}]_{c}-R^{c} en
el que c es 1; d es 1, 2 ó 3; y R^{c} es carboxi, (alcoxi
C_{1-4})carbonilo, hidroximetilo o
carbamoilo;
R^{e} es hidrógeno, metilo, metoxi o halo;
R^{2} es R^{2a} o R^{2b} en el que
R^{2a} es
-X^{2}-(CH_{2})_{n}-R^{f} en el que
X^{2} es un enlace directo, metileno u O; n es 1, 2 ó 3; y
R^{f} es 5-tretazolilo, carboxi, (alcoxi
C_{1-4})carbonilo o hidroximetilo;
R^{2b} es
-X^{2}-(CH_{2})_{m}-NR^{a}R^{b} en
el que X^{2} es un enlace directo, metileno u O; m es 1, 2 ó 3;
con la condición de que cuando m es 1, entonces X^{2} es un
enlace directo; y R^{a} y R^{b} son independientemente
hidrógeno o alquilo C_{1-3} o el grupo
NR^{a}R^{b} es pirrolidino, piperidino o morfolino;
R^{3} es R^{3a} o R^{3b} en donde
R^{3a} es
2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi;
con la condición de que R^{2} es R^{2b}
cuando R^{3} es R^{3a};
R^{3b} es
-X^{3}-(CH_{2})_{s}-NR^{s}R^{t} en
el que X^{3} es un enlace directo, metileno u O; s es 1 ó 2; con
la condición de que cuando s es 1, entonces X^{3} es un enlace
directo; y R^{s} y R^{t} son independientemente hidrógeno o
alquilo C_{1-3} o el grupo NR^{s}R^{t} es
pirrolidino, piperidino o morfolino; y
R^{6} es hidrógeno, hidroxi o metoxi.
2. El compuesto (o sal del mismo) de la
reivindicación 1 en el que alquilo C_{1-3} es
metilo, etilo, propilo o isopropilo; alcoxi
C_{1-4} es metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi,
butoxi o terc-butoxi; y halo es fluoro, cloro, bromo
o yodo.
3. El compuesto (o sal del mismo) de la
reivindicación 1 ó 2 en el que A es carbonilo o metileno;
R^{d} es carboxi, metoxicarbonilo, carbamoilo,
3-(etoxicarbonil)propoxi, 3-carboxipropoxi,
4-amino-4-oxobutoxi,
4-hidroxibutoxi,
(t-butoxicarbonil)metoxi o
carboximetoxi;
R^{e} es hidrógeno o metoxi;
R^{2} es
2-(1-pirrolidinil)etoxi,
3-carboxipropoxi o
3-(metoxicarbonil)propoxi;
R^{3} es
2-(1-pirrolidinil)etoxi,
1-pirrolidinilmetilo o
2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi;
y
R^{6} es hidrógeno o hidroxi.
4. El compuesto (o sal del mismo) de una
cualquiera de las reivindicaciones 1-3 en el que
R^{2} es R^{2a}.
5. El compuesto (o sal del mismo) de una
cualquiera de las reivindicaciones 1-3 en el que
R^{2} es R^{2b}.
6. El compuesto (o sal del mismo) de una
cualquiera de las reivindicaciones 1, 3 ó 5 en el que R^{3} es
R^{3a}.
7. El compuesto (o sal del mismo) de una
cualquiera de las reivindicaciones 1, 3 ó 5 en el que R^{2} es
R^{2b} y R^{3} es R^{3b}.
8. El compuesto (o sal del mismo) como se
reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones
1-3 y 5 en el R^{d} es metoxicarbonilo, R^{e} es
hidrógeno y R^{3} es
2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi.
9. El compuesto de la reivindicación 1 que es
2-[3-metoxicarbonil-4-[2-(1-pirrolidinil)etoxi]fenil]-3-[4-[2-(2-oxopirrolidin-1-il)etoxi]
bencil]benzo[b]tiofeno (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo).
10. Una sal farmacéuticamente aceptable de un
compuesto de la fórmula I como se reivindica en una cualquiera de
las reivindicaciones 1-10 que es una sal de adición
de ácido formada con un ácido que proporciona un anión
farmacéuticamente aceptable o, para un compuesto que contiene un
resto ácido, que es una sal formada con una base que proporciona un
anión farmacéuticamente aceptable.
11. Una formulación farmacéutica que comprende en
asociación con un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente
aceptable, un compuesto de la fórmula I (o una sal
farmacéuticamente aceptable del mismo) como se estipula en una
cualquiera de las reivindicaciones 1-11
anteriores.
12. Un procedimiento para preparar un compuesto
de la fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,
como se reivindica en la reivindicación 1 que se selecciona
de:
(A) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es (alcoxi C_{1-4})carbonilo,
esterificación oxidativa de un compuesto correspondiente de la
fórmula I en el que R^{c} es formilo usando un agente oxidante y
el alcanol C_{1-4} correspondiente;
(B) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es carbamoilo, amidación oxidativa de un compuesto
correspondiente de la fórmula I en el que R^{c} es formilo usando
un agente de oxidación y amoniaco;
(C) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es carboxi, oxidación del grupo formilo de un compuesto
correspondiente de la fórmula I en el que R^{c} es formilo;
(D) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es (alcoxi C_{1-4})carbonilo,
esterificación del grupo carboxi de un compuesto correspondiente de
la fórmula I en el que R^{c} es carboxi;
(E) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{d} es -O-(CH_{2})_{d}-R^{c},
alquilando el grupo hidroxi de un compuesto correspondiente de la
fórmula I en el que R^{d} es hidroxi usando un agente de
alquilación de la fórmula
X-(CH_{2})_{d}-R^{c} (o un derivado
protegido del mismo) en el que X es un grupo saliente
convencional;
(F) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es carbamoilo, amidación del ácido o un derivado activado
del mismo de un compuesto correspondiente de la fórmula I en el que
R^{c} es carboxi;
(G) para un compuesto de la fórmula I en el que
R^{c} es hidroximetilo, reducción del éster de un compuesto
correspondiente de la fórmula I en el que R^{c} es
(alcoxiC_{1-4})carbonilo;
después de lo cual, para cualquiera de los
procedimientos anteriores, cuando un grupo funcional se protege
usando un grupo protector, eliminación del grupo protector;
después de lo cual, para cualquiera de los
procedimientos anteriores, cuando se requiere una sal
farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula I, se
obtiene haciendo reaccionar de la forma básica de un compuesto de
ese tipo de la fórmula I con un ácido proporcionando un ión
conjugado fisiológicamente aceptable o, para un compuesto de la
fórmula I que porta un resto ácido, haciendo reaccionar de la forma
ácida de un compuesto de ese tipo de la fórmula I con una base que
proporciona un catión farmacéuticamente aceptable o mediante
cualquier otro procedimiento convencional;
y en el que, a no ser que se describa lo
contrario, A, R^{d}, R^{e}, R^{2}, R^{3} y R^{6} tienen
los valores que se describen anteriormente.
13. Un compuesto de la fórmula I, o sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, como se reivindica en una
cualquiera de las reivindicaciones 1-10 para su uso
como un agente antitrombótico.
\newpage
14. El uso de un compuesto de la fórmula I, o sal
farmacéuticamente aceptable del mismo, como se reivindica en una
cualquiera de las reivindicaciones 1-10 para la
fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno
tromboembólico.
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