ES2247120T3 - Inhibidores de la serinproteasa. - Google Patents

Inhibidores de la serinproteasa.

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ES2247120T3
ES2247120T3 ES01938403T ES01938403T ES2247120T3 ES 2247120 T3 ES2247120 T3 ES 2247120T3 ES 01938403 T ES01938403 T ES 01938403T ES 01938403 T ES01938403 T ES 01938403T ES 2247120 T3 ES2247120 T3 ES 2247120T3
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Christopher William Murray
Stephen Clinton Young
Nicholas Paul Camp
Stuart Donald Jones
William Alexander Wylie
John Joseph Masters
Michael Robert Wiley
Scott Martin Sheehan
David Birenbaum Engel
Brian Morgan Watson
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Abstract

Un compuesto inhibidor de serinproteasa de **fórmula**, en la que R2 representa (i) fenilo que está opcionalmente sustituido en las posiciones 3 y/o 4 con halo, nitro, tiol, haloalcoxi, hidrazido, alquilhidrazido, amino, ciano, haloalquilo, alquiltio, alquenilo, alquinilo, acilamino, tri- o difluorometoxi, carboxi, aciloxi, MeSO2- o R1, y opcionalmente sustituido en la posición 6 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio; (ii)naft-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 ó 7 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R1j, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio; (iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6- ilo, indazol-5-ilo, indazol-6-ilo, benzotiazol-6-ilo o benzoisoxazol-5-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 3 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R1j; (iv)bencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 2 con amino; o una sal fisiológicamente tolerable del mismo.

Description

Inhibidores de la serinproteasa.
Esta invención se refiere a compuestos que son inhibidores de serinproteasas y a composiciones farmacéuticas de los mismos, y a su uso en el tratamiento del cuerpo humano o animal.
Las serinproteasas son un grupo de enzimas proteolíticas que tienen un mecanismo catalítico común caracterizado por un residuo de Ser particularmente reactivo. Los ejemplos de serinproteasas incluyen tripsina, triptasa, quimotripsina, elastasa, trombina, plasmina, calicreína, complemento C1, proteasa acrosómica, proteasa lisosómica, coconasa, proteasa \alpha-lítica, proteasa A, proteasa B, serincarboxipeptidasa II, subtilisina, uroquinasa, factor VIIa, factor IXa y factor Xa. Las serinproteasas se han investigado extensamente durante un periodo de varias décadas, y el valor terapéutico de los inhibidores de serinproteasas es bien conocido.
Los inhibidores de serinproteasas desempeñan un papel importante en la regulación de una amplia variedad de procesos fisiológicos, incluyendo coagulación, fibrinólisis, fertilización, desarrollo, malignidad, modelización neuromuscular e inflamación. Es bien conocido que estos compuestos inhiben una variedad de proteasas en circulación, así como proteasas que son activadas o liberadas en tejido. Se está haciendo también evidente que los inhibidores de serinproteasas inhiben procesos celulares críticos, tales como adhesión, migración, producción de radicales libres y apoptosis. Además, los experimentos animales indican que los inhibidores de serinproteasas, variantes o células que expresan inhibidores de serinproteasas administrados por vía intravenosa proporcionan un efecto protector frente a la lesión de tejido.
Se ha predicho también que los inhibidores de serinproteasas tengan usos beneficiosos potenciales en el tratamiento de enfermedades en una amplia variedad de áreas clínicas, tales como oncología, neurología, hematología, medicina pulmonar, inmunología, inflamación y enfermedades infecciosas.
En particular, los inhibidores de serinproteasas pueden ser beneficiosos en el tratamiento de enfermedades trombóticas, asma, enfisema, cirrosis, artritis, carcinoma, melanoma, reestenosis, ateroma, traumatismo, shock y lesión por reperfusión.
Por tanto, por ejemplo, un inhibidor del factor Xa tiene valor como agente terapéutico como anticoagulante, por ejemplo, en el tratamiento y la prevención de trastornos trombóticos. El uso de un inhibidor del factor Xa como anticoagulante es deseable a la vista de la selectividad de su efecto. Muchos anticoagulantes aprobados clínicamente se han asociado a eventos adversos debido a la naturaleza no específica de sus efectos sobre la cascada de coagulación.
Además, existen asociaciones bien conocidas de deficiencia de inhibidor de proteasa \alpha1 con enfisema y cirrosis, y de deficiencia de inhibidor de esterasa C1 con angioedema.
Se ha encontrado ahora que ciertos compuestos aromáticos son particularmente eficaces como inhibidores de serinproteasas, especialmente proteasas con bolsas de especificidad P1 cargadas negativamente, y lo más especialmente el factor Xa. Los inhibidores del factor Xa de esta invención son potencialmente útiles para la profilaxis o el tratamiento de trastornos trombóticos tales como, entre otros, trombosis venosa, embolia pulmonar, trombosis arterial, isquemia miocárdica, infarto de miocardio y trombosis cerebral. Potencialmente tienen beneficio en el tratamiento de cierre agudo de vasos asociado a terapia trombolítica y reestenosis, por ejemplo, después de angioplastia coronaria transluminal o injerto de bypass de arterias coronarias o periféricas, y en el mantenimiento de la permeabilidad de acceso vascular en pacientes con hemodiálisis a largo plazo.
Los inhibidores del factor Xa de esta invención pueden formar parte beneficiosamente de una terapia de combinación con un anticoagulante con un modo de acción diferente o con un agente trombolítico.
Se ha reseñado en los documentos WO 99/11658 y WO 99/11657 que ciertos derivados de benzamidina y aminoisoquinolina que portan una cadena lateral lipófila voluminosa son excelentes inhibidores de serinproteasas. Desgraciadamente, se ha encontrado desde entonces que los compuestos de benzamidina del documento WO 99/11658 demuestran en general una pobre biodisponibilidad oral.
Sorprendentemente, se ha encontrado ahora que ciertos otros compuestos aromáticos muestran también actividad inhibidora frente a serinproteasas, en particular factor Xa, a pesar de la falta de la funcionalidad amidino o 1-aminoisoquinolina que se creía anteriormente crucial para la actividad como inhibidor del factor Xa. Muchos de estos compuestos poseen también otros rasgos estructurales que los distinguen adicionalmente de los compuestos de los documentos WO 99/11658 y WO 99/11657.
Cuando se han ensayado compuestos de la invención, han demostrado generalmente una biodisponibilidad oral superior en comparación con las benzamidinas dadas a conocer en el documento WO 99/11658. También se ha encontrado que los compuestos de la invención actúan excelentemente en el ensayo de tiempo de protrombina (PT) cuando se comparan con aminoisoquinolinas de actividad de factor Xa y estructura similares. El ensayo PT es un ensayo de coagulación, y es ampliamente aceptado que los inhibidores del factor Xa de acción directa que actúan bien en el ensayo de PT es más probable que sean buenos antitrombóticos. Se ha encontrado también que los compuestos de la invención exhiben una buena duración de acción después de la administración oral.
En el documento WO 99/09053, se dan a conocer ciertos compuestos de 2-aminobenzamida como potenciales antagonistas de receptor de motilina, y en el documento US 3268513 se sugieren compuestos de 2-aminobenzamida similares como potenciales agentes antibacterianos. Sin embargo, los nuevos compuestos de la presente invención no se han sugerido antes como potenciales inhibidores de serinproteasas.
Por tanto, vista desde un aspecto, la invención proporciona un compuesto inhibidor de serinproteasa de fórmula (I)
1
en la que
R_{2} representa
(i) fenilo que está opcionalmente sustituido en las posiciones 3 y/o 4 con halo, nitro, tiol, haloalcoxi, hidrazido, alquilhidrazido, amino, ciano, haloalquilo, alquiltio, alquenilo, alquinilo, acilamino, tri- o difluorometoxi, carboxi, aciloxi, MeSO_{2}^{-} o R^{1}, y opcionalmente sustituido en la posición 6 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio;
(ii) naft-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 ó 7 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j}, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio;
(iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo, indazol-5-ilo, indazol-y6-ilo, benzotiazol-6-ilo o benzoisoxazol-5-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 3 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(iv) bencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 2 con amino;
(v) tien-2-ilo o tien-3-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 4 ó 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(vi) 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-dihidroindol-6-ilo, 3,3-dicloro-2-oxoindol-6-ilo o 1-metil-3-aminoindazol-5-ilo;
(vii) benzotiazol-2-ilo, imidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo o tetrahidroimidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo;
(viii) pirazol-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(ix) pirid-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(x) pirid-3-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(xi) benzofur-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio y en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(xii) indol-2-ilo opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno del indol con alquilo y opcionalmente sustituido en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(xiii) indol-6-ilo sustituido en la posición 5 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j}; o
(xiv) benzo[b]tiofen-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio y en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{ij};
con la condición de que R_{2} no pueda ser aminoisoquinolilo;
R_{1} representa hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alquilo, alquilaminoalquilo, alcanoílo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, alquilaminocarbonilo, alquilamino, carboxilo, carboximetilo, amido o amidometilo;
R_{1j} representa hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alquilo, alcanoílo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, alquilamino, carboxilo, carboximetilo, amido o amidometilo;
X-X- es CONH;
Y es CH;
Cy es un grupo fenilo, piridilo, tienilo, tiazolilo, naftilo, piperidinilo, furanilo, pirrolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, oxazolilo, imidazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, pirimidinilo, piridazinilo, quinolilo, isoquinolilo, benzofurilo, benzotienilo o cicloalquilo opcionalmente sustituido con R_{3a}, o un grupo fenilo sustituido con R_{3i}X_{i}, en la que X_{i} es un enlace, O, NH o CH_{2} y R_{3i} es fenilo, piridilo o pirimidinilo opcionalmente sustituido con R_{3a};
cada R_{3a} es independientemente hidrógeno, hidroxilo, alcoxi, alquilo, alquilaminoalquilo, hidroxialquilo, carboxi, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, alquilaminocarbonilo, aminoalquilo, CONH_{2}, CH_{2}CONH_{2}, alcanoil (1-6C)amino, alcoxicarbonilamino, amino, halo, ciano, nitro, tiol, alquiltio, alquilsulfonilo, alquilsulfenilo, alquilsulfonamido, alquilaminosulfonilo, aminosulfonilo, haloalcoxi, haloalquilo, un grupo de fórmula -C(X^{3})N(R^{11})R^{12} (en la que X^{3} es O o S y R^{11} y R^{12} se seleccionan independientemente de hidrógeno, metilo, etilo o, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidin-1-ilo, piperidin-1-ilo o morfolino); o -OCH_{2}O-, que está unido a dos átomos de anillo adyacentes en Cy; y
-L-Lp(D)_{n} es
2
q es 1 ó 2;
Q es metileno y R_{q} es NR_{a}R_{b}, en la que cada uno de R_{a} y R_{b} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1-3}, o uno de R_{a} y R_{b} es hidrógeno o metilo y el otro de R_{a} y R_{b} es cicloalquilo (3-6C), pirid-4-ilo, -CH_{2}R_{c} o -CH_{2}R_{d}, en las que R_{c} es piridilo o fenilo (dicho fenilo puede portar un sustituyente fluoro, cloro, metilo, CONH_{2}, SO_{2}NH_{2}, metilaminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, metilsulfonilamino, metoxi o metilsulfonilo) y en las que R_{d} es isopropilo o ciclopentilo, o NR_{a}R_{b} es azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino [en los que un pirrolidino o piperidino puede ser un derivado 3,4-dideshidro y en los que un azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino puede estar opcionalmente sustituido en un átomo de carbono de anillo con hidroxi, amino, alcoxi (1-3C), hidroxialquilo (1-3C), alquilo (1-3C), carboxi, metoxicarbonilo o etoxicarbonilo (a condición de que el sustituyente amino, hidroxi o alcoxi no esté en un átomo de carbono de anillo que esté incluido en un doble enlace, o adyacente a un átomo de oxígeno, azufre o nitrógeno de anillo) y en los que el piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino pueda portar un grupo metilo en la posición 4];
o una sal fisiológicamente tolerable del mismo, por ejemplo, una sal haluro, fosfato o sulfato o una sal con amonio o una amina orgánica tal como etilamina o meglumina.
En los compuestos de la invención, el átomo alfa, carbono, tiene preferiblemente la conformación que sería el resultado de la construcción a partir de un D-\alpha-aminoácido NH_{2}-CH(Cy)-COOH, en el que el NH_{2} representa parte de X-X. Se apreciará que los compuestos de fórmula (I) pueden existir en forma racémica o quiral, y que el isómero D preferido puede administrarse en una mezcla racémica con el isómero L o solo.
En los compuestos de la invención, a menos que se indique otra cosa, los grupos alquilo, alquenilo o alquinilo o restos alquileno contienen preferiblemente hasta 6 carbonos, por ejemplo C_{1-6} o C_{1-3}; los grupos cíclicos tienen preferiblemente tamaños de anillo de 3 a 8 átomos; y los grupos multicíclicos condensados contienen preferiblemente 8 a 16 átomos de anillo.
El grupo de engarce del grupo R_{2} con el átomo alfa es -CONH-.
El átomo alfa (Y) es un grupo CH.
En el grupo -L-Lp(D)_{n}, preferiblemente el azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino en NR_{a}R_{b} está opcionalmente sustituido en un átomo de carbono de anillo con metilo, hidroxi o hidroximetilo.
Es un subgrupo preferido de compuestos de fórmula I aquel en el que -L-Lp(D)_{n} es de fórmula:
3
en la que
q es 1 ó 2;
Q es metileno y R_{q} es NR_{a}R_{b}, en la que cada uno de R_{a} y R_{b} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1-3}, o uno de R_{a} y R_{b} es hidrógeno o metilo y el otro de R_{a} y R_{b} es -CH_{2}-R_{c} o -CH_{2}R_{d}, en las que R_{c} es piridilo o fenilo (pudiendo portar dicho fenilo un sustituyente fluoro, cloro, metilo, CONH_{2}, SO_{2}NH_{2}, metilaminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, metilsulfonilamino, metoxi o metilsulfonilo) y en las que R_{d} es isopropilo o ciclopentilo, o NR_{a}R_{b} es pirrolidino, piperidino, morfolino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino, en los que un pirrolidino o piperidino puede ser un derivado 3,4-dideshidro y en los que un pirrolidino, piperidino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino puede portar un grupo metilo en la posición 4.
q es preferiblemente 2.
Preferiblemente, -L-Lp(D)_{n} es de fórmula:
4
en la que
q es 1 ó 2;
Q es metileno; y R_{q} es NR_{a}R_{b} en la que cada uno de R_{a} y R_{b} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1-3}, o uno de R_{a} y R_{b} es hidrógeno y el otro es cicloalquilo (3-6C) o pirid-4-ilo, o NR_{a}R_{b} es azetidino, pirrolidino, piperidino o piperazino [en los que un pirrolidino o piperidino puede ser un derivado 3,4-dideshidro y en los que un azetidino, pirrolidino, piperidino o piperazino puede estar opcionalmente sustituido en un átomo de carbono de anillo con metilo, hidroxi o hidroximetilo (a condición de que el sustituyente hidroxi no esté en un átomo de carbono de anillo que esté incluido en un doble enlace, o adyacente a un átomo de nitrógeno de anillo) y en los que el piperazino puede portar un grupo metilo en la posición 4).
Más preferiblemente, R_{q} se selecciona de dimetilamino, dietilamino, prop-2-ilamino, pirrolidino, 3-pirrolino, 3-hidroxipirrolidino, 3-hidroximetilpirrolidino, piperidino, 3-hidroxipiperidino, 4-hidroxipiperidino, 4-hidroximetilpiperidino, piperazino y 4-metilpiperazino.
Son ejemplos de valores particulares para R_{q}: dimetilamino, dietilamino, prop-2-ilamino, pirrolidino, 3-pirrolino, 3-hidroxipirrolidino, 3-hidroximetilpirrolidino, 3(S)-hidroxipirrolidino, 3(S)-hidroximetilpirrolidino, 3(R)-hidroximetilpirrolidino, piperidino, 4-hidroxipiperidino, 4-hidroximetilpiperidino, 3-hidroxipiperidino, piperazino y 4-metilpiperazino.
Cuando R_{a} o R_{b} representan un grupo alquilo C_{1-3}, éste puede ser, por ejemplo, un grupo metilo o etilo. Cuando R_{b} representa un grupo cicloalquilo C_{3-6}, éste puede ser, por ejemplo, un grupo ciclohexilo.
Preferiblemente, R_{q} es NR_{a}R_{b} en la que R_{a} es hidrógeno o alquilo C_{1-3} y R_{b} es alquilo C_{1-3}; o R_{a} es hidrógeno y R_{b} es cicloalquilo (3-6C) o pirid-4-ilo; o NR_{a}R_{b} es azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino o piperazino [en los que un pirrolidino, piperidino o piperazino puede estar opcionalmente sustituido en un átomo de carbono de anilo con hidroxi o hidroximetilo (a condición de que el sustituyente hidroxi no esté en un átomo de carbono de anillo que esté adyacente a un átomo de nitrógeno de anillo) y en los que el piperazino puede portar un grupo metilo en la posición 4].
Lo más preferiblemente, el grupo L-Lp(D)_{n} se selecciona de
5
en las que:
m representa 0 ó 1;
y cuando R_{3} está presente como sustituyente en un anillo saturado, se selecciona de hidrógeno, hidroxi, amino, alcoxi (1-3C), hidroxialquilo (1-3C), alquilo (1-3C), carboxi, metoxicarbonilo y etoxicarbonilo.
Por ejemplo, los grupos específicos de fórmula L-Lp(D)_{n} incluyen
6
Cy es un grupo fenilo, piridilo, tienilo, tiazolilo, naftilo, piperidinilo, furanilo, pirrolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, oxazolilo, imidazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, pirimidinilo, piridazinilo, quinoloílo, isoquinolilo, benzofurilo, benzotienilo o cicloalquilo opcionalmente sustituido con R_{3a}, o un grupo fenilo sustituido con R_{3i}X_{i}, en la que X_{i} es un enlace, O, NH o CH_{2} y R_{3i} es fenilo, piridilo o pirimidilo opcionalmente sustituido con R_{3a}.
El grupo cíclico unido al carbono alfa debe ser por tanto un grupo fenilo, piridilo (tal como pirid-2-ilo, pirid-3-ilo o pirid-4-ilo), tienilo (tal como tien-2-ilo o tien-3-ilo), tiazolilo (tal como tiazol-2-ilo, tiazol-4-ilo o tiazol-5-ilo), naftilo (tal como naft-1-ilo), piperidinilo (tal como piperidin-4-ilo) o cicloalquilo tal como ciclohexilo opcionalmente sustituido con R_{3a}.
Son ejemplos de valores para Cy cuando representa fenilo sustituido con R_{3i}X_{i}: 3-(2-piridil)fenilo, 3-(3-piridilfenilo) y 3-(4-piridilfenilo).
Son ejemplos de valores particulares para R_{3a}:
hidrógeno,
hidroxilo;
para alcoxi: metoxi o etoxi;
alquilo, tal como metilo o etilo, o alquilaminoalquilo tal como metilaminometilo o dimetilaminometilo;
para hidroxialquilo: hidroximetilo; carboxi;
para alcoxialquilo: metoximetilo;
para alcoxicarbonilo: metoxicarbonilo o etoxicarbonilo;
para alquilaminocarbonilo: metilaminocarbonilo o dimetilaminocarbonilo;
para aminoalquilo: aminometilo; CONH_{2}, CH_{2}CONH_{2};
alcanoil (1-6C)amino, tal como acetilamino;
para alcoxicarbonilamino: metoxicarbonilamino, etoxicarbonilamino o terc-butoxicarbonilamino;
amino;
para halo: fluoro, cloro o bromo;
ciano;
nitro;
tiol;
para alquiltio: metiltio;
para alquilsulfonilo: metilsulfonilo o etilsulfonilo;
para alquilsulfenilo: metilsulfenilo;
para alquilsulfonamido: metilsulfonamido o etilsulfonamido;
para alquilaminosulfonilo: metilaminosulfonilo o etilaminosulfonilo;
aminosulfonilo;
para haloalcoxi: trifluorometoxi; y
para haloalquilo: trifluorometilo;
para un grupo de fórmula -C(X^{3})N(R^{11})R^{12}: pirrolidin-1-ilcarbonilo, piperidin-1-ilcarbonilo o morfolin-1-ilcarbonilo; y
-OCH_{2}O- que está unido a dos átomos de anillo adyacentes en Cy.
Preferiblemente, R_{3a} es hidrógeno, hidroxilo, metoxi, metilo, amino, fluoro, cloro, etilsulfonilamino, amido o metilaminocarbonilo.
Son ejemplos de valores para R_{3i}: fenilo, pirid-2-ilo, pirid-3-ilo, pirid-4-ilo, pirimid-2-ilo y pirimid-6-ilo.
Son ejemplos de valores particulares para Cy: fenilo, 4-aminofenilo, 4-amidofenilo, 4-(N-metil)amidofenilo, 4-(N,N-dimetil)amidofenilo, 2-clorofenilo, 2-metilfenilo, 2-fluorofenilo, 3-fluorofenilo, 4-fluorofenilo, 4-hidroxifenilo, 2-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 4-carboxifenilo, 3-etilsulfonilaminofenilo, tien-2-ilo, tien-3-ilo, tiazol-4-ilo, tiazol-5-ilo, 2-metiltiazol-4-ilo, pirid-2-ilo, pirid-3-ilo, pirid-4-ilo, piperidin-4-ilo, 1-metilpiperidin-4-ilo, ciclohexilo y naft-1-ilo. Son otros ejemplos: 4-carbamoilfenilo, furan-2-ilo, furan-3-ilo, imidazol-2-ilo, tiazol-2-ilo, 2-aminotiazol-4-ilo, isoquinolin-5-ilo, isoquinolin-8-ilo, quinolin-5-ilo y quinolin-8-ilo. Son ejemplos adicionales: 2-trifluorometilfenilo, 2-metiltiofenilo, 2-metilsulfonilfenilo, 3-bromofenilo, 3-cianofenilo y benzo[b]tiofen-3-ilo.
Se hace mención particular a los siguientes valores para Cy:
7
8
9
10
en las que:
X' se selecciona de O, S y NMe;
X'' se selecciona de O y S;
X''' se selecciona de O, S, NH y NMe;
Y' se selecciona de hidrógeno, amino y metilo;
R_{o} se selecciona de hidrógeno, metilo, fluoro, cloro, trifluorometilo, metoxi, metiltio, metilsulfinilo y metilsulfonilo;
R_{m} se selecciona de hidrógeno, metilo, fluoro, cloro, trifluorometilo, metoxi, metiltio, metilsulfinilo, metilsulfonilo, carboxi, metoxicarbonilo y un grupo de fórmula -C(X^{3})N(R^{11})R^{12} (en la que X^{3} es O o S y R^{11} y R^{12} se seleccionan independientemente de hidrógeno, metilo o etilo o, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidin-1-ilo, piperidin-1-ilo o morfolino);
R_{p} se selecciona de hidrógeno y fluoro; o
R_{o} y R_{m} o R_{m} y R_{p} forman un grupo -OCH_{2}O-; o
R_{o} y R_{m}, junto con el anillo la que están unidos, forman un anillo arilo o heteroarilo de 5 ó 6 miembros (conteniendo el anillo heteroarilo 1 ó 2 heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre); y
uno de R_{o1} y R_{o2} es hidrógeno y el otro es R_{o}.
Preferiblemente, Cy se selecciona de fenilo (opcionalmente sustituido con etilo, prop-2-ilo, fenoxi, hidroxi, etoxi, benciloxi, prop-2-iloxi, nitro, amino, acetilamino, metilsulfonilamino, dimetilamino, cloro, metoxi, trifluorometilo, metiltio, metilsulfonilo, terc-butiltio, terc-butilsulfonilo, aminosulfonilo o carbamoílo), piridilo, tienilo, furanilo, imidazolilo, tiazolilo (opcionalmente sustituido con amino), naftilo, isoquinolinilo y quinolinilo.
Son ejemplos de valores para Cy cuando representa tiazolilo sustituido con amino o metilo: 2-aminotiazol-4-ilo y 2-metiltiazol-4-ilo.
Preferiblemente, Cy se selecciona de fenilo, 2-clorofenilo, 2-metoxifenilo, 4-carbamoilfenilo, pirid-2-ilo, pirid-4-ilo, tien-2-ilo, tien-3-ilo, furan-2-ilo, furan-3-ilo, imidazol-2-ilo, tiazol-2-ilo, tiazol-4-ilo, 2-aminotiazol-4-ilo, tiazol-5-ilo, naft-1-ilo, isoquinolin-5-ilo, isoquinolin-8-ilo, quinolin-4-ilo, quinolin-5-ilo y quinolin-8-ilo.
Más preferiblemente, Cy se selecciona de fenilo, 2-metoxifenilo, 4-carbamoilfenilo, pirid-2-ilo, tien-2-ilo, tien-3-ilo, furan-2-ilo, furan-3-ilo, imidazol-2-ilo, tiazol-2-ilo, tiazol-4-ilo, tiazol-5-ilo y quinolin-4-ilo.
Es un valor de particular interés para Cy el fenilo.
Preferiblemente, R_{2} es fenilo, tien-2-ilo, naftilo, indol-2-ilo, indol-6-ilo, benzo[b]furan-5-ilo, benzo[b]tiofen-2-ilo o bencimidazol-2-ilo, opcionalmente sustituidos como se define anteriormente.
R_{2} representa:
(i) fenilo que está opcionalmente sustituido en la posición 3 y/o 4 con halo, nitro, tiol, haloalcoxi, hidrazido, alquilhidrazido, amino, ciano, haloalquilo, alquiltio, alquenilo, alquinilo, acilamino, tri- o difluorometoxi, carboxi, aciloxi, MeSO_{2}^{-} o R_{1}, y opcionalmente sustituido en la posición 6 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio;
(ii) naft-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 ó 7 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j}, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio;
(iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo, indazol-5-ilo, indazol-6-ilo, benzotiazol-6-ilo o benzoisoxazol-5-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 3 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(iv) bencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 2 con amino;
(v) tien-2-ilo o tien-3-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 4 ó 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(vi) 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-dihidroindol-6-ilo, 3,3-dicloro-2-oxoindol-6-ilo o 1-metil-3-aminoindazol-5-ilo;
(vii) benzotiazol-2-ilo, imidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo o tetrahidroimidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo;
(viii) pirazol-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(ix) pirid-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(x) pirid-3-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(xi) benzofur-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio, y en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(xii) indol-2-ilo opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno del indol con alquilo y opcionalmente sustituido en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(xiii) indol-6-ilo sustituido en la posición 5 con amino, hidroxi, halo (tal como fluoro o cloro), alquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con halo (tal como cloro), haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j}; o
(xiv) benzo[b]tiofen-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio y en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j}.
Son ejemplos de valores particulares para sustituyentes que pueden estar presentes en R_{2}:
para halo: fluoro, cloro, bromo o yodo;
nitro;
tiol;
para haloalcoxi: difluorometoxi o trifluorometoxi;
hidrazido;
para alquilhidrazido: metilhidrazido;
amino;
para haloalquilo: trifluorometilo:
para alquiltio: metiltio;
para alquenilo: vinilo;
para alquinilo: etinilo;
para acilamino: acetilamino;
carboxi;
para aciloxi: acetoxi;
hidroxi;
para alquilo: metilo o etilo;
amido (CONH_{2});
para aminoalquilo: aminometilo y
para alcoxi: metoxi o etoxi.
Preferiblemente, R_{2} está opcionalmente sustituido con 1 ó 2 sustituyentes seleccionados de fluoro, cloro, amino, metilo, etilo y metoxi.
Son ejemplos de valores particulares para R_{1}:
hidrógeno;
hidroxi;
para alcoxi: metoxi o etoxi;
alquilo, tal como metilo o etilo;
alquilaminoalquilo, tal como dimetilaminometilo;
alcanoílo, tal como acetilo;
para hidroxialquilo: hidroximetilo;
para alcoxialquilo: metoximetilo;
para alcoxicarbonilo: metoxicarbonilo;
para alquilaminocarbonilo: metilaminocarbonilo;
para alquilamino: metilamino, etilamino o dimetilamino;
carboxilo; carboximetilo; amido (CONH_{2}) o amidometilo.
Son ejemplos de valores particulares para R_{1j}:
hidrógeno;
hidroxi;
para alcoxi: metoxi o etoxi;
alquilo, tal como metilo o etilo;
alcanoílo, tal como acetilo;
para hidroxialquilo: hidroximetilo;
para alcoxialquilo: metoximetilo:
para alcoxicarbonilo: metoxicarbonilo;
para alquilamino: metilamino, etilamino o dimetilamino;
carboxilo; carboximetilo;
amido (CONH_{2}) o amidometilo.
Más preferiblemente, R_{2} representa:
(i) fenilo que está opcionalmente sustituido en la posición 3 y/o 4 con fluoro, cloro, bromo, yodo, nitro, difluorometoxi, trifluorometoxi, amino, ciano, trifluorometilo, metiltio, vinilo, carboxi, acetoxi, MeSO_{2}^{-}, hidroxi, metoxi, etoxi, metilo, metoxicarbonilo, metilamino, etilamino o amido, y opcionalmente sustituido en la posición 6 con amino, hidroxi, fluoro, metoxicarbonilo o aminometilo (preferiblemente fenilo sustituido en la posición 4 con cloro, amino, vinilo, metilamino, metilo o metoxi, opcionalmente en la posición 3 con amino o hidroxi y opcionalmente en la posición 6 con amino o hidroxi);
(ii) naft-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 con hidroxi y opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino o hidroxi;
(iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo, indazol-5-ilo, indazol-6-ilo, benzotiazol-6-ilo o benzoisoxazol-5-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 3 con cloro, bromo, amino, metilo o metoxi (preferiblemente indol-6-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con cloro, bromo, metilo o metoxi);
(iv) bencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 2 con amino;
(v) tien-2-ilo o tien-3-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 4 ó 5 con metiltio, metilo o acetilo;
(vi) 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-dihidroindol-6-ilo, 3,3-dicloro-2-oxoindol-6-iloo 1-metil-3-aminoindazol-5-ilo;
(vii) benzotiazol-2-ilo, imidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo o tetrahidroimidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo;
(viii) pirazol-2-ilo sustituido en la posición 5 con metilo;
(ix) 5-cloropirid-2-ilo;
(x) pirid-3-ilo o 6-cloropirid-3-ilo;
(xi) benzofur-2-ilo, 5-clorobenzofur-2-ilo, 3-metilbenzofur-2-ilo, 5-metilbenzofur-2-ilo o 6-metoxibenzofur-2-ilo;
(xii) indol-2-ilo opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno del indol con metilo, y opcionalmente sustituido en la posición 5 ó 6 con fluoro, cloro, bromo, metilo o metoxi;
(xiii) indol-6-ilo sustituido en la posición 5 con cloro, fluoro o hidroxi, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con cloro o metilo; o
(xiv) benzo[b]tiofen-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con fluoro, cloro o metilo, y opcionalmente sustituido en la posición 5 ó 6 con fluoro, cloro, metilo, hidroxi o metoxi.
Son ejemplos de valores particulares para R_{2}:
(i) fenilo, 2-aminofenilo, 3-aminofenilo, 2-amino-4-fluorofenilo, 2-amino-4-clorofenilo, 2-amino-4-nitrofenilo, 2-amino-4-metilfenilo, 3,4-diaminofenilo, 3-amino-4-fluorofenilo, 3-amino-4-clorofenilo, 3-amino-4-bromofenilo, 3-amino-4-hidroxifenilo, 3-amino-4-carboximetilfenilo, 3-amino-4-metilfenilo, 3-amino-4-metoxifenilo, 2-fluorofenilo, 4-fluoro-3-cianofenilo, 3-clorofenilo, 3-cloro-4-hidroxifenilo, 4-clorofenilo, 4-cloro-2-hidroxifenilo, 4-cloro-3-hidroxifenilo, 4-cloro-3-metilfenilo, 4-cloro-3-metoxifenilo, 4-bromofenilo, 4-bromo-3-metilfenilo, 4-yodofenilo, 2-cianofenilo, 3-cianofenilo, 4-cianofenilo, 2-hidroxifenilo, 2-hidroxi-4-metoxifenilo, 3-hidroxifenilo, 3-hidroxi-4-metilfenilo, 2,4-dihidroxifenilo, 3,4-dihidroxifenilo, 3-hidroxi-4-metoxifenilo, 4-difluorometoxifenilo, 4-trifluorometoxifenilo, 4-trifluorometilfenilo, 4-metiltiofenilo, 4-metoxicarbonilfenilo, 4-acetoxifenilo, 4-metanosulfonilfenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 4-vinilfenilo, 4-metoxifenilo, 4-etoxifenilo, 4-metoxi-3-clorofenilo, 4-metoxi-3-metilfenilo, 3-metilaminofenilo, 4-metilaminofenilo, 4-etilaminofenilo o 2-aminometilfenilo;
(ii) naft-2-ilo, 3-aminonaft-2-ilo, 3-hidroxinaft-2-ilo o 6-hidroxinaft-2-ilo;
(iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo, 3-cloroindol-6-ilo, 3-bromoindol-6-ilo, 3-metilindol-6-ilo, 3-metoxiindol-6-ilo, indazol-5-ilo, 3-aminoindazol-5-ilo, indazol-6-ilo, benzotiazol-6-ilo, 3-aminobenzoisoxazol-5-ilo;
(iv) bencimidazol-5-ilo, 2-aminobencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo;
(v) tien-2-ilo, 5-metiltien-2-ilo, 5-metiltiotien-2-ilo, 5-acetiltien-2-ilo o tien-3-ilo;
(vi) 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-dihidroindol-6-ilo, 3,3-dicloro-2-oxoindol-6-ilo o 1-metil-3-aminoindazol-5-ilo;
(vii) benzotiazol-2-ilo, imidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo o tetrahidroimidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo;
(viii) 5-metilpirazol-2-ilo;
(ix) 5-cloropirid-2-ilo;
(x) pirid-3-ilo, 6-cloropirid-3-ilo;
(xi) benzofur-2-ilo, 5-clorobenzofur-2-ilo, 3-metilbenzofur-2-ilo, 5-metilbenzofur-2-ilo, 6-metoxibenzofur-2-ilo;
(xii) indol-2-ilo, 5-fluoroindol-2-ilo, 5-cloroindol-2-ilo, 5-metilindol-2-ilo, 5-metoxiindol-2-ilo, 6-metoxiindol-2-ilo y 1-metilindol-2-ilo;
(xiii) 5-fluoroindol-6-ilo; o
(xiv) benzo[b]tiofen-2-ilo, 5-clorobenzo[b]tiofen-2-ilo o 6-clorobenzo[b]tiofen-2-ilo
R_{2} puede seleccionarse, por ejemplo, de una de las fórmulas (A') a (G'):
11
12
13
en las que R_{13} se selecciona de hidrógeno, cloro o metilo y R_{14} se selecciona de hidrógeno, metilo, etilo, fluoro, cloro y metoxi, y R_{15} se selecciona de hidrógeno, metilo, fluoro, cloro y amino.
Preferiblemente, R_{2} es de fórmula (A') (en la que R_{14} se selecciona de hidrógeno, metilo, etilo, fluoro, cloro y metoxi y R_{15} se selecciona de hidrógeno, metilo, fluoro, cloro y amino) o de fórmula (B') (en la que R_{13} es cloro) o de fórmula (C') (en la que R_{13} se selecciona de hidrógeno, metilo y cloro) o de fórmula (D') (en la que R_{13} se selecciona de hidrógeno y cloro) o de fórmula (E') (en la que R_{13} es hidrógeno) o de fórmula (G') (en la que R_{13} es cloro).
Más preferiblemente, R_{2} es 4-metoxifenilo, 5-cloroindol-2-ilo, 3-cloroindol-6-ilo, indol-6-ilo o 3-metilindol-6-ilo.
R_{2} es preferiblemente de fórmula (A') y R_{14} y R_{15} son como se definen anteriormente en la presente memoria. Más preferiblemente, R_{2} es de fórmula (A'), R_{14} es metoxi y R_{15} es hidrógeno.
Los compuestos de la invención pueden preparase mediante rutas sintéticas químicas convencionales o mediante rutas como se ilustran por los siguientes ejemplos.
Los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse formando el enlace -X-X a partir de intermedios apropiados. Por ejemplo, cuando -X-X- es -CONH-, haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (10): H_{2}N-Y-(Cy)-L-Lp(D)_{n} con un compuesto de fórmula R_{2}-COOH en condiciones conocidas para la formación de un enlace amida. La reacción se lleva a cabo convenientemente en presencia de un reactivo basado en benzotriazol tal como 1-hidroxibenzotriazol o 1-hidroxi-7-azabenzotriazol, en un disolvente orgánico inerte tal como dimetilformamida y/o cloruro de metileno. La mezcla de reacción se lleva habitualmente a 0ºC y después se añade un agente deshidratante tal como diciclohexilcarbodiimida o 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida. Son conocidos en la técnica otros reactivos y disolventes adecuados. Por ejemplo, puede convertirse un ácido de fórmula R_{2}COOH en un haluro de ácido, tal como un cloruro de ácido, y hacerse reaccionar después con el compuesto de fórmula (10) en presencia de una base, tal como piridina. Es otro reactivo el cianofosfonato de dietilo.
Estas reacciones pueden utilizarse también para formar intermedios que contienen el enlace X-X anterior.
Los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse también introduciendo el grupo Lp(D)_{n} en un compuesto de fórmula (11):
R^{2}-X-X-Y(Cy)-COOH
Los grupos reactivos en Lp(D)_{n}, que podrían causar reacciones secundarias, pueden estar por supuesto protegidos. La reacción entre el compuesto (11) y H-Lp(D)_{n} se lleva a cabo convenientemente en un disolvente orgánico inerte en presencia de una base orgánica tal como una amina (por ejemplo, etildiisopropilamina), adicionalmente en presencia de un reactivo tal como cianofosfonato de dietilo.
Los intermedios que contienen ya el grupo Lp(D)_{n} pueden prepararse a partir del compuesto carboxi apropiado utilizando condiciones de reacción similares a las descritas anteriormente.
Los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse también haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (12):
14
o (13):
15
(en la que X^{5} es un grupo saliente tal como tosiloxi, mesiloxi o halo) con un compuesto de fórmula HNR_{a}Rb. La reacción entre el compuesto de fórmula (12) y HNR_{a}R_{b} puede llevarse a cabo en presencia de un agente reductor, tal como cianoborohidruro de sodio, utilizando por ejemplo condiciones similares a las descritas en los ejemplos 1 a 5. La reacción entre el compuesto de fórmula (13) y HNR_{a}R_{b} puede llevarse a cabo en un disolvente orgánico inerte tal como THF, en presencia de una base inorgánica tal como carbonato de potasio, y preferiblemente en presencia de yoduro de sodio. La reacción tiene lugar habitualmente a reflujo de THF o casi.
Los intermedios que contienen el grupo Lp(D)_{n} pueden formarse también utilizando estas reacciones a partir de intermedios apropiados, aunque normalmente la introducción del grupo HNR_{a}R_{b} es la última etapa de la síntesis.
Por tanto, la presente invención proporciona también un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I) que comprende:
a) cuando -X-X- es -CONH-, hacer reaccionar un compuesto de fórmula (10) con un compuesto de fórmula R_{2}-COOH en condiciones de formación de enlace amida;
b) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (11) con un compuesto de fórmula H-Lp(D)_{n} en condiciones de formación de enlace amida; o
c) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (12) o (13) con un compuesto de fórmula HNR_{a}R_{b};
en la que R_{2}, R_{a}, R_{b} y Lp(D)_{n} son como se definen anteriormente en la presente memoria y las fórmulas (10), (11), (12) y (13) son como se definen anteriormente en la presente memoria.
Puede formarse un compuesto de fórmula (12) o (13) a partir del correspondiente compuesto hidroximetilo de fórmula (14)
16
La oxidación del compuesto hidroximetilo con un agente oxidante suave adecuado para la formación de aldehídos, tal como óxido de N-metilmorfolina en presencia de perrutenato de tetrapropilamonio, puede utilizarse para formar un compuesto de fórmula (12).
Otros posibles agentes oxidantes incluyen dióxido de manganeso o DMSO/cloruro de oxalilo o DMSO/SO_{3} o reactivo de Dess-Martin.
Puede formarse un compuesto de fórmula (13) a partir del compuesto hidroximetilo de fórmula (14) mediante la introducción del grupo saliente X. Cuando X es mesiloxi o tosiloxi, el compuesto hidroximetilo puede hacerse reaccionar con el haluro de mesilo o tosilo en presencia de una base orgánica, tal como trietilamina, en un disolvente orgánico inerte tal como diclorometano.
Puede prepararse un compuesto hidroximetilo de fórmula (14) en la que X-X es CONH haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (15)
17
con un compuesto de fórmula R_{2}COOH en condiciones de formación de enlace amida, como se describe anteriormente.
Puede prepararse un compuesto de fórmula (15) haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (16)
PG-NH-Y(Cy)COOH
en la que PG es un grupo protector de amino, tal como terc-butoxicarbonilo, con un compuesto de fórmula (17)
18
en condiciones de formación de enlace amida, proporcionando un compuesto de fórmula (18)
19
seguido de la retirada del grupo protector PG.
Puede prepararse un compuesto de fórmula (10) haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (16) con un compuesto de fórmula H-Lp(D)_{n} en condiciones de formación de enlace amida, proporcionando un compuesto de fórmula (19), seguido de la retirada del grupo protector PG.
Puede prepararse un compuesto de fórmula (11) en la que X-X es CONH haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (20)
H_{2}N-Y(Cy)COOPG'
en la que PG' representa un grupo protector de carboxilo, con un compuesto de fórmula R_{2}COOH en condiciones de formación de enlace amida, proporcionando un compuesto de fórmula (21)
R_{2}CONHY(Cy)COOPG'
seguido de la retirada del grupo protector PG'.
Cuando -X-X es -CONH- e Y es CH, puede prepararse un compuesto de fórmula (I) mediante una serie de etapas a
partir de un derivado aminoacídico utilizando las reacciones descritas anteriormente. Por ejemplo, véase el esquema I.
Esquema 1
20
Puede prepararse un compuesto aminoacídico a partir del esquema 1 (por ejemplo) mediante uno o más de los siguientes procedimientos:
(i) a partir de aril- o heteroarilaldehídos mediante síntesis de Strecker o modificaciones de la misma, mediante síntesis de hidantoína de Bucherer-Bergs o mediante la metodología Ugi ("Isonitrile Chemistry", Ugi I., Ed.; Academic; Nueva York, 1971; pág. 145-1999; "Multicomponent Reactions with Isocyanides", Domling, A.; Ugi, I., Angew. Chem. Int. Ed., 2000, 39, 3168; "Amino Acid Derivatives by Multicomponent Reactions", Dyker, G. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1997, 36, 1700; y véase también "A new Class of Convertible Isocyanides in the Ugi Four-Component Reaction", Lindhorst, T.; Bock, H., Ugi, I. Tetrahedron, 1999, 55, 7411) con retirada y reemplazo de grupos protectores;
(ii) a partir de estirenos mediante metodología de Sharpless (J. Am. Chem. Soc., 1998, 120, 1207-1217);
(iii) a partir de ácidos arilborónicos mediante metodología de Petasis (Tetrahedron, 1997, 53, 16463-16470) con retirada y reemplazo de grupos protectores;
(iv) a partir de ácidos aril- y heteroarilacéticos mediante azidación de Evan (Synthesis, 1997, 536-540) o mediante oximación, seguida de reducción y adición de grupos protectores; o
(v) a partir de arilglicinas existentes mediante manipulación de grupos funcionales, por ejemplo, alquilación de grupos hidroxi, carbonilación asistida por paladio de triflatos derivados de grupos hidroxi, y manipulación adicional de los ésteres carboxílicos, proporcionando ácidos carboxílicos mediante hidrólisis, carboxamidas mediante activación del ácido carboxílico y acoplamiento con aminas, aminas mediante reacción de Curtius en el ácido carboxílico o compuestos de alquilsulfonilo mediante oxidación de compuestos de alquiltio;
(vi) a partir de aldehídos y cetonas alifáticos, carbocíclicos y heterocíclicos no aromáticos utilizando una reacción de Horner-Emmons con éster trimetílico de N-benciloxicarbonil-\alpha-fosfonoglicina (Synthesis, 1992, 487-490); o
(vii) a partir de oximas de fórmula
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en la que Pg es un grupo protector de carboxi, mediante reducción.
El experto será consciente de que en ciertas etapas de la síntesis de un compuesto de fórmula (I) puede ser necesario proteger un grupo funcional reactivo en la molécula para evitar reacciones secundarias indeseadas.
La protección de los grupos amino y ácido carboxílico se describe en McOmie, "Protecting Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, NY, 1973, y Greene y Wuts, "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2ª ed., John Wiley & Sons, NY, 1991. Los ejemplos de grupos protectores de carboxi incluyen grupos alquilo C_{1}-C_{6} tales como metilo, etilo, terc-butilo y terc-amilo; grupos arilalquilo C_{1}-C_{4} tales como bencilo, 4-nitrobencilo, 4-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2,4-dimetoxibencilo, 2,4,6-trimetoxibencilo, 2,4,6-trimetilbencilo, benzhidrilo y tritilo; grupos sililo tales como trimetilsililo y terc-butildimetilsililo; y grupos alilo tales como alilo y 1-(trimetilsililmetil)prop-1-en-3-ilo.
Los ejemplos de grupos protectores de amina (PG) incluyen grupos acilo, tales como grupos de fórmula RCO en la que R representa alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-10}, fenilalquilo C_{1-6}, fenilo, alcoxi C_{1-6}, fenilalcoxi C_{1-6} o un cicloalcoxi C_{3-10}, en los que un grupo fenilo puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo, con uno o dos de halógeno, alquilo C_{1}-C_{4} y alcoxi C_{1}-C_{4}.
Los grupos protectores de amino preferidos incluyen benciloxicarbonilo (CBz), terc-butoxicarbonilo (Boc) y bencilo.
En otro aspecto, la invención se refiere a un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula I que comprende desproteger un compuesto de fórmula (I'):
(I')R^{2}'-X-X-Y-(Cy')-L-Lp(D)_{n}'
en la que R^{2}' es R^{2} (como se define anteriormente en la presente memoria) o R^{2} protegido, Cy' es Cy (como se define anteriormente en la presente memoria) o Cy protegido y Lp(D)_{n}' es Lp(D)_{n} (como se define anteriormente en la presente memoria) o Lp(D)_{n} protegido, a condición de que esté presente al menos un grupo protector.
Si es necesario, pueden formarse sales fisiológicamente tolerables utilizando procedimientos conocidos en la técnica.
Se entenderá que los compuestos de fórmula (I) pueden aislarse en forma de sales o solvatos (que pueden ser fisiológicamente tolerables o no), y que todas dichas sales y solvatos están incluidos por lo tanto dentro del alcance de la invención.
Los compuestos de la invención pueden administrarse mediante cualquier vía conveniente, por ejemplo, al tracto gastrointestinal (por ejemplo, rectal u oral), la nariz, pulmones, musculatura o vasos, o por vía transdérmica. Los compuestos pueden administrarse en cualquier forma de administración conveniente, por ejemplo, comprimidos, polvos, cápsulas, soluciones, dispersiones, suspensiones, jarabes, pulverizadores, supositorios, geles, emulsiones, parches, etc. Dichas composiciones pueden contener componentes convencionales en preparaciones farmacéuticas, por ejemplo, diluyentes, vehículos, modificadores del pH, edulcorantes, agentes de relleno y agentes activos adicionales. Preferiblemente, las composiciones serán estériles y en una forma de solución o suspensión adecuada para inyección o infusión. Dichas composiciones forman un aspecto adicional de la invención.
Los siguientes son ejemplos de composiciones farmacéuticas de compuestos según la invención.
Formulación 1
Las cápsulas de gelatina dura se preparan utilizando los siguientes ingredientes:
Cantidad (mg/cápsula)
Ingrediente activo 250 \; \;
Almidón, secado 200 \; \;
Estearato de magnesio 10 \; \;
Total \overline{460 \ mg}
Se mezclan los ingredientes anteriores, y se rellenan cápsulas de gelatina dura en cantidades de 460 mg.
Formulación 2
Se preparan comprimidos que contienen cada uno 60 mg de ingrediente activo de la manera siguiente:
Ingrediente activo 60,0 mg
Almidón 45,0 mg
Celulosa microcristalina 35,0 mg
Polivinilpirrolidona 4,0 mg
Carboximetilalmidón de sodio 4,5 mg
Estearato de magnesio 0,5 mg
Talco 1,0 mg
Total \overline{150,0 \ mg}
Se pasan el ingrediente activo, el almidón y la celulosa a través de un tamiz de número de malla 45 de EE.UU. y se mezclan concienzudamente. Se mezcla la solución de polivinilpirrolidona con los polvos resultantes, que se pasan después a través de un tamiz de número de malla 14 de EE.UU. Los gránulos así producidos se secan a 50ºC y se pasan a través de un tamiz de número de malla 18 de EE.UU. Se añaden después el carboximetilalmidón de sodio, el estearato de magnesio y el talco, previamente pasados a través de un tamiz de número de malla 60 de EE.UU., a los gránulos que, después de mezclar, se comprimen en una máquina de comprimidos proporcionando comprimidos de 150 mg de peso cada uno.
Vista desde este aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de serinproteasa según la invención junto con al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéuticamente aceptable puede comprender también opcionalmente al menos un agente antitrombótico y/o trombolítico adicional.
Vista desde un aspecto adicional, la invención proporciona el uso de un inhibidor de serinproteasa según la invención para la fabricación de un medicamento para uso en un procedimiento de tratamiento del cuerpo humano o animal no humano (por ejemplo, un cuerpo de mamífero, ave o reptil) para combatir (concretamente, tratar o prevenir) una afección sensible a dicho inhibidor.
La dosificación del compuesto inhibidor de la invención dependerá de la naturaleza y la gravedad de la afección que se esté tratando, de la vía de administración y del tamaño y la especie del paciente. Sin embargo, en general, se administrarán cantidades de 0,01 a 100 \mumol/kg de peso corporal.
Todas las publicaciones designadas en la presente memoria son incorporan a la presente memoria como referencia.
La invención se describirá ahora adicionalmente con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.
Parte experimental
Las abreviaturas utilizadas siguen la nomenclatura IUPAC-IUB. Son abreviaturas adicionales: HPLC, cromatografía líquida de alta resolución; HPLC-FI, HPLC en fase inversa; SCX, resina de intercambio catiónico fuerte; THF, tetrahidrofurano; AcOH, ácido acético; DMSO, dimetilsulfóxido (perdeuterado si es para RMN); AcOEt, acetato de etilo; EtOH, etanol; DMF, dimetilformamida; DCM, diclorometano; HOAT, 1-hidroxi-7-azabenzotriazol; HOBT, 1-hidroxibenzotriazol; EDCI, clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida; DIPEA, diisopropiletilamina; Boc, terc-butiloxicarbonilo; TEA, trietilamina, TFA, ácido trifluoroacético; MALDI-TOF, espectrometría de masas con analizador de tiempo de vuelo y desorción mediante láser asistida por matriz, EM-IQ, espectro de masas por ionización química. Los EM-IPA, (espectros de masas por ionización química a presión atmosférica) se obtuvieron en un API 150EX PESciex (marca comercial) con un nebulizador por calentamiento y nitrógeno como gas reactivo en el modo de ión positivo. Tr, tiempo de retención; TLC, cromatografía de capa fina con Rf como movilidad relativa. Todas las concentraciones en solución se expresan como %vol/%vol, a menos que se indique otra cosa. Los reactivos se obtuvieron de una variedad de fuentes comerciales.
IR significa que se obtuvo un espectro infrarrojo. ^{1}RMN, ^{1}H-RMN o ^{1}H RMN significa que se obtuvo un espectro de resonancia magnética de protón.
En general, en esta memoria descriptiva, "D-" o "R-" en el nombre del producto indica que el producto se preparó partiendo de un material de partida quiral, por ejemplo D-fenilglicina; sin embargo, puede haber ocurrido racemización, y la pureza enantiomérica puede no haberse determinado.
Procedimientos experimentales generales Purificación de compuestos (cromatografía HPLC-FI)
Se purifica o se purificó el material utilizando técnicas de cromatografía preparativa en fase inversa. Se utilizó una columna de 5 micrómetros, 20 x 50 mm, O.D. C18 (YMC-ODS-A) con un caudal de 20 ml/min y un tiempo de elución estándar de 10-15 minutos. Se utiliza o se utilizó un gradiente de agua:acetonitrilo (entre 95:5 y 5:95, conteniendo cada eluyente 0,1% de TFA) durante el tiempo de elución. Se concentran o se concentraron las fracciones que contenían producto, se congelan o congelaron, y se liofilizan o liofilizaron proporcionando, cuando sea aplicable, la sal trifluoroacetato del producto. La base libre puede o podría obtenerse, si se desea, cargando una solución metanólica de la sal trifluoroacetato en una resina de intercambio iónico (SCX, Varian) y eluyendo posteriormente la resina con metanol, seguido de amoniaco 2 N en metanol. La concentración de las últimas fracciones proporciona o proporcionó el producto base libre. Se completa o se completó la preparación de una sal clorhidrato a partir de la base libre mediante el tratamiento de una solución orgánica de la base libre (AcOEt, cloruro de metileno) con HCl anhidro en dietiléter y concentración.
Preparación de materiales de partida e intermedios
Los compuestos de glicina sustituida intermedios para materiales de partida e intermedios, incluyendo aquellos en los que el grupo amino y/o el grupo carboxi está protegido, pueden prepararse convenientemente utilizando uno de los procedimientos siguientes, o mediante un procedimiento similar. Puede ser conveniente o preferible cambiar el orden de las etapas en la preparación de un compuesto de la invención y utilizar un procedimiento similar con un intermedio diferente. En particular, puede ser conveniente utilizar un grupo acilo R_{2}-CO- inicialmente en una preparación, en lugar de un grupo protector de amino.
Las abreviaturas, además de las otras enumeradas en la presente memoria, incluyen: TEMPO: 2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi, radical libre; (DHQD)_{2}PHAL: hidroquinidin-1,4-ftalazindiildiéter; f.r. fondo redondo; PPh_{3}, trifenilfosfina; Boc_{2}O o anhídrido Boc: dicarbonato de di-terc-butilo.
Preparación de los intermedios KE-1-KE5
Se prepararon los siguientes compuestos según el procedimiento indicado (procedimiento KE-A) a partir de los materiales de partida indicados, a menos que se describa otra cosa.
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Intermedio KE-1
Oxoquinolin-8-ilacetato de etilo
Procedimiento KE-A
Se añadió gota a gota una solución de sec-butil-litio 1,3 M (37,3 ml, 48,5 mmol) en ciclohexano a una solución agitada de 8-bromoquinolina (10,1 g, 48,5 mmol) en THF (500 ml) a -78ºC. Después de 5 min, se añadió oxalato de dietilo (8 ml, 58,3 mmol), y se permitió calentar lentamente la solución a temperatura ambiente durante una noche. A la mañana siguiente, se inactivó la reacción con la adición de NH_{4}Cl acuoso saturado y se retiró el disolvente a vacío. Se repartió el residuo entre acetato de etilo y NaHCO_{3} ac. sat., se separaron las fases y después se lavó la fase acuosa con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró a vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con 20% de acetato de etilo/hexanos a 25% de acetato de etilo/hexanos. Se combinaron las fracciones que contenían producto y se concentraron a vacío, proporcionando 5,88 g (53%) del compuesto del título.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 230,1 (M+1).
Intermedio KE-2
Oxoquinolin-5-ilacetato de etilo
Preparado a partir de 5-bromoquinolina y oxalato de dietilo utilizando el procedimiento KE-A.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 230,0 (M+1).
Intermedio KE-3
Oxotiazol-5-ilacetato de etilo
Se añadió éter anhidro (100 cm^{3}) con agitación en atmósfera de argón a un matraz f.r. (500 cm^{3}) equipado con termómetro de etanol, tapón de septum y embudo de adición. Se enfrió éste a -78ºC y se añadió n-butil-litio 2 M (60 cm^{3}, 120 mmol).
Se añadió después una solución de sililtiazol (60 cm^{3}, 120 mmol) en éter anhidro (100 cm^{3}) mediante el embudo de adición durante 30 minutos. Se permitió agitar durante 1 hora, proporcionando una suspensión de color melocotón. Se añadió a ésta rápidamente oxalato de dietilo (16,3 cm^{3}, 17,5 g, 120 mmol), proporcionando una solución marrón que da como resultado un aumento de temperatura a -30ºC. Se permitió enfriar de nuevo a -78ºC y se agitó durante 30 minutos. La reacción se controló por ^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
Se vertió la solución marrón en una solución de ácido clorhídrico al 5% (300 cm^{3}) con agitación vigorosa durante 30 minutos. Se separó la fase de éter y se lavó con bicarbonato saturado (aprox. 80 cm^{3}), se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío, proporcionando un aceite naranja. Se purificó éste mediante cromatografía ultrarrápida (10% de acetato de etilo/hexano), proporcionando un aceite amarillo (7,31 g, 39,47 mmol) (40% de rendimiento).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,42 (3H, t), 4,45 (2H, c), 8,89 (1H, s), 9,10 (1H, s).
Intermedio KE-4
Oxotiazol-2-ilacetato de etilo
Preparado a partir de tiazol y oxalato de dietilo utilizando el procedimiento KE-A. En este caso, se mantuvo la temperatura a -35ºC y se utilizó n-butil-litio en hexano en lugar de sec-butil-litio en ciclohexano.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 165,0 (M+1).
Intermedio KE-5
Oxoisoquinolin-8-ilacetato de etilo
Preparado a partir de 8-bromoisoquinolina y oxalato de dietilo utilizando el procedimiento KE-A, sustituyendo por n-butil-litio en hexanos el sec-butil-litio en ciclohexano.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 230,0 (M+1).
\newpage
Análisis para C_{13}H_{11}NO_{3}:
Calculado: C 68,11, H 4,84, N 6,11.
Encontrado: C 68,11, H 5,00, N 6,14.
Preparación de los intermedios OX-1 - OX-9
Se prepararon los siguientes compuestos según el procedimiento indicado (procedimiento OX-A o procedimiento OX-B) a partir de los materiales de partida indicados a menos que se describa otra cosa.
Intermedio OX-1
Hidroximinopiridin-2-ilacetato de etilo
Procedimiento OX-A
Se añadió una solución de nitrito de sodio (6,05 g, 87,7 mmol) en agua (12 ml) a una solución agitada de 2-piridilacetato de etilo (12,6 g, 76,3 mmol) en ácido acético (19 ml) a 5ºC a una velocidad suficiente para mantener la temperatura interna por debajo de 15ºC. Después de completar la adición y 30 min adicionales, se añadieron 30 ml adicionales de agua. Se filtró el precipitado blanco resultante, se lavó con agua, NaHCO_{3} ac. sat., y de nuevo con agua. Se secó después el sólido a vacío, proporcionando 14,1 g (95%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 194,9 (M+1).
Análisis para C_{9}H_{10}N_{2}O_{3}:
Calculado: C 55,67, H 5,19, N 14,43.
Encontrado: C 55,79, H 5,14, N 14,13.
Intermedio OX-2
Hidroximinopiridin-3-ilacetato de etilo
Utilizando el procedimiento de Tikk et al. [Acta Chimica Hungarica, 114 (3-4), 355], se preparó una mezcla de hidroximinopiridin-3-ilacetato de etilo e hidroximinopiridin-3-ilacetato de n-butilo a partir de 3-piridinilacetato de etilo y nitrito de n-butilo.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 195 (M+1), 223,1 (M+1).
Intermedio OX-3
Hidroximinoquinolin-8-ilacetato de etilo
Procedimiento OX-B
Se añadió acetato de sodio (2,16 g, 26,4 mmol) a una solución agitada de oxoquinolin-8-ilacetato de etilo (5,5 g, 24 mmol) en etanol (140 ml) seguido de clorhidrato de hidroxilamina (2,67 g, 38,4 mmol). Se calentó la mezcla a reflujo y, después de 7 h, se retiró la manta calefactora y se permitió agitar la solución durante una noche a temperatura ambiente. A la mañana siguiente, se retiró el disolvente a vacío y se repartió el residuo entre acetato de etilo y NaHCO_{3} ac. sat. Se separaron las fases y se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó con Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a vacío.
Se recristalizó la espuma resultante con diclorometano/hexanos, proporcionando una recogida inicial de 2,5 g del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino, seguido de 0,31 g de una segunda recogida. Se concentraron después las aguas madre a vacío y se disolvió el residuo en la cantidad mínima de diclorometano. Se purificó después mediante cromatografía la solución sobre gel de sílice, eluyendo con 30% de acetato de etilo/hexanos, después 40% de acetato de etilo/hexanos y finalmente con acetato de etilo. Se combinaron las fracciones que contenían producto y se concentraron a vacío, proporcionando 1,94 g del compuesto del título para un rendimiento combinado de 4,75 g (81%).
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 245,0 (M+1).
\newpage
Intermedio OX-4
Hidroximinoquinolin-5-ilacetato de etilo
Preparado a partir de oxoquinolin-5-ilacetato de etilo utilizando el procedimiento OX-B.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 245,0 (M+1).
Intermedio OX-5
Hidroximinotiazol-5-ilacetato de etilo
Se añadió el oxotiazol-5-ilacetato de etilo (6,30 g, 34,02 mmol) a un matraz f.r. (500 cm^{3}) con etanol (aprox. 180 cm^{3}) con agitación. Se añadieron después acetato de sodio (3,06 g, 37,30 mmol) y clorhidrato de hidroxilamina (3,78 g, 54,43 mmol), proporcionando una suspensión blanquecina. Se llevó ésta a reflujo a 85ºC durante 1 hora. La reacción se controló por TLC (60% de hexano/acetato de etilo; r.f. m.p. 0,5, r.f. prod. 0,3). Se enfrió la reacción y se concentró a vacío. Se recogió el producto en acetato de etilo (aprox. 200 cm^{3}) y se lavó con una solución de ácido clorhídrico al 5%. Se secó la fase de acetato de etilo sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad, proporcionando un sólido de color crema (6,372 g, 31,825 mmol) (94% de rendimiento).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,40 (3H, m), 4,40 (2H, m), 8,06 (1/3H, s), 8,78 (1/3H, s), 8,95 (2/3H, s), 8,98 (2/3H, s).
Intermedio OX-6
\alpha-Oximinotiazol-4-acetato de etilo
Se añadió ácido sulfúrico concentrado (25 cm^{3}) a un matraz f.r. de 2 bocas (100 cm^{3}) con termómetro de etanol, y se enfrió a 0ºC con agitación. Se añadió a esta solución el \alpha-oximino-2-aminotiazol-4-acetato de etilo (5,00 g, 23,231 mmol). Se añadió después agua (10 cm^{3}) y se enfrió a -10ºC. Se añadió después lentamente una solución de nitrito de sodio (1,683 g, 24,393 mmol) en agua (5 cm^{3}) durante una hora, manteniendo la temperatura por debajo de -5ºC. Se añadió agua (180 cm^{3}) a un matraz f.r. separado (500 cm^{3}) y se enfrió a 3ºC. Se vertió la solución de reacción en el agua fría con agitación, y después se enfrió a -5ºC. Se añadió gota a gota a esta solución ácido hipofosfórico al 50% (90 cm^{3}) durante 10 minutos, manteniendo la temperatura a -5ºC. Se permitió calentar la solución a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. Se extrajo el producto con dietiléter (aprox. 3 x 150 cm^{3}) y se lavó con agua. Se concentró la fase de éter a vacío y se trató con cromatografía ultrarrápida (50% de acetato de etilo/n-hexano), proporcionando un aceite naranja tras concentración a vacío (0,60 g, 3,00 mmol) (13% de rendimiento).
^{1}HRMN (CDCl_{3}) 1,35 (3H, m), 4,35 (2H, m), 8,4 (1H, s), 8,9 (1H, s), 14,4 (1H, s).
Intermedio OX-7
\alpha-Oximino-2-metiltiazol-4-acetato de etilo
Se preparó éste a partir de \gamma-cloro-\alpha-oximinoacetoacetato de etilo (1,44 g) utilizando el procedimiento de Hatanaka et al. (Journal of Medicinal Chemistry, 1973, 16(9), 978-984), proporcionando el compuesto del título (0,64 g).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,35 (3H, t), 2,7 (3H, s), 4,35 (2H, c), 8,2 (1H, s).
\gamma-Cloro-\alpha-oximinoacetoacetato de etilo
Se preparó éste a partir de oximinoacetoaceato de etilo (1,73 g) utilizando el procedimiento de Hatanaka et al. (Journal of Medicinal Chemistry, 1973, 16(9), 978-984), proporcionando el compuesto del título (1,44 g)
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,25 (3H, t), 4,3 (2H, c), 4,55 (2H, s), 9,45 (1H, s), contiene 20% de material de partida según RMN.
Oximinoacetoacetato de etilo
Se preparó éster a partir de acetoacetato de etilo (10,00 g) utilizando el procedimiento de Fischer (Organic Synthesis Coll. Vol. 3, 513-516), proporcionando el compuesto del título (12,45 g).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,25 (3H, t), 2,35 (3H, s), 4,3 (2H, c), 8,8 (1H, a).
\newpage
Intermedio OX-8
Hidroximinotiazol-2-ilacetato de etilo
Preparado a partir de oxotiazol-2-ilacetato de etilo utilizando el procedimiento OX-B.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 198,9 (M-1).
Intermedio OX-9
Hidroximinoisoquinolin-8-ilacetato de etilo
Preparado a partir de oxoisoquinolin-8-ilacetato de etilo utilizando el procedimiento OX-B.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 245,0 (M+1).
Análisis para C_{13}H_{12}N_{2}O_{3}:
Calculado: C 63,93, H 4,95, N 11,47.
Encontrado: C 63,68, H 4,60, N 11,34.
Preparación de intermedios AL-1 - AL-3
Se prepararon los siguientes compuestos según el procedimiento indicado (procedimiento AL-A o procedimiento AL-B) a partir de los materiales de partida indicados, a menos que se describa otra cosa.
Intermedio AL-1
R-3-Bromo-(1-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxietil)benceno
Procedimiento AL-A
Se disolvió hidróxido de sodio (3,33 g, 82,25 mmol) en agua (220 ml), se retiraron 20 ml de la solución resultante y se añadieron a osmiato de potasio (410 mg, 1,11 mmol). Se añadió la solución de hidróxido de sodio restante (200 ml) a una solución agitada de carbamato de terc-butilo (9,9 g, 84,5 mmol) en n-propanol (110 ml), seguido de hipoclorito de terc-butilo recién preparado (9,65 ml, 83,5 mmol). Después de agitar durante 5 min, se enfrió la solución a 0ºC. Se añadió una solución de (DHQD)_{2}PHAL (1,30 g, 1,67 mmol) en n-propanol (110 ml), seguido por una solución de 3-bromoestireno (5 g, 27,31 mmol) en n-propanol (220 ml), seguido de la adición gota a gota de la solución de osmiato de potasio/hidróxido de sodio. Se agitó la reacción durante una noche. Se añadió sulfito de sodio acuoso saturado (150 ml) y se agitó la reacción durante 15 min. Se separó la fase acuosa y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 ml). Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera y se secaron sobre MgSO_{4}. La retirada del disolvente a vacío proporcionó el producto bruto, que se purificó mediante cromatografía (sílice, hexano:acetato de etilo 3:2, después se volvió a purificar mediante cromatografía cargando con tolueno, elución en gradiente con hexano - hexano:acetato de etilo 4:1), proporcionando el producto del título (4,18 g, 49%).
Punto de fusión: 90-91ºC.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
Intermedio AL-2
R-3-Metoxicarbonoil-(1-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxietil)benceno
Procedimiento AL-B
Se dispusieron en una camisa de vidrio que contiene una barra de agitación Pd(OAc)_{2} (871 mg, 3,88 mmol), PPh_{3} (1,96 g, 7,47 mmol), NaOAc (1,48 g, 18,04 mmol) y DMF (82 ml). Se añadió a esta solución agitada una solución de R-3-bromo-(1-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxietil)benceno (4,27 g, 13,5 mmol) en MeOH (82 ml). Se purgó la solución resultante con nitrógeno y se dispuso en un recipiente agitado a presión. Se cargó el sistema a 414 kPa de CO y se calentó a 95ºC durante 36 horas. Se enfrió la mezcla a temperatura ambiente, se filtró a través de tierra de diatomeas y se repartió entre acetato de etilo y agua. Se lavó la fase orgánica con agua (3x) y salmuera (1x) y se secó sobre MgSO_{4}. La retirada del disolvente a vacío proporcionó el producto bruto, que se purificó mediante cromatografía (gel de sílice, elución en gradiente con 30-35% de acetato de etilo/hexano), proporcionando el producto del título (3,53 g, 89%).
Punto de fusión: 73-75ºC con descomposición.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
EM-IPA, m/e= 240 (M-C_{4}H_{9}+1).
Intermedio AL-3
R-3-Ciano-(1-terc- butoxicarbonilamino-2-hidroxietil)benceno
Preparado a partir de 3-cianoestireno utilizando el procedimiento AL-A. Se preparó el 3-cianoestireno utilizando el procedimiento descrito a continuación.
Punto de fusión: 76ºC.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
Preparación de 3-cianoestireno
Se añadió gota a gota n-BuLi (83 ml, 2,5 M en hexanos, 207,50 mmol) a una suspensión agitada de bromuro de metiltrifenilfosfonio (75 g, 209,71 mmol) en THF seco (750 ml) a 0ºC en atmósfera de nitrógeno. Se calentó la mezcla a temperatura ambiente. Se añadió 3-cianobenzaldehído (25 g, 190,65 mmol) en forma de un sólido en lotes de 5 g, y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante una noche. Se inactivó la reacción en agua, y se retiró el disolvente a vacío. Se disolvió el residuo en la cantidad mínima de THF y precipitó óxido de trifenilfosfina utilizando éter. Se filtró el sólido a través de tierra de diatomeas y se concentró el filtrado. La destilación por columna de bolas a 90ºC/33 Pa proporcionó el producto en forma de un aceite incoloro (15,5 g, 62%).
Punto de ebullición: 90ºC a 33 Pa.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
Preparación de intermedios PAE-1 - PAE-18
Se prepararon los siguientes compuestos según el procedimiento indicado (procedimiento PAE-A, procedimiento PAE-B, procedimiento PAE-C, procedimiento PAE-D o PAE-E) a partir de los materiales de partida indicados, a menos que se describa otra cosa.
Intermedio PAE-1
Éster etílico de Boc-D,L-(2-piridinil)glicina
Procedimiento PAE-A
Se añadió Pd/C al 5% a una solución de acetato de hidroximinopiridin-2-ilacetato de etilo (7,8 g, 40,15 g) en etanol (175 ml) y ácido acético glacial (20 ml), y se agitó la mezcla en un aparato de hidrogenación en atmósfera de hidrógeno a 311 kPa durante 4 h. Se filtró la mezcla a través de tierra de diatomeas y se concentró a vacío. Se disolvió el residuo en THF/H_{2}O (1/1, 240 ml) y se trató con dicarbonato de di-terc-butilo (14,23 g, 65,2 mmol) y bicarbonato de sodio (27,4 g, 326 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se concentró la solución a vacío y se repartió el residuo entre AcOEt y agua. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a vacío. Se purificó el material bruto mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente por etapas de 10-20% de acetato de etilo en diclorometano, proporcionando 8,11 g (72%) del compuesto del título en forma de un aceite amarillo.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 281,1 (M+1).
Intermedio PAE-2
Éster etílico de Boc-D,L-(3-piridinil)glicina
Preparado a partir de hidroximinopiridin-3-ilacetato de etilo utilizando el procedimiento PAE-A.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 281,1 (M+1).
\newpage
Intermedio PAE-3
Éster etílico de Boc-D,L-(8-quinolinil)glicina
Procedimiento PAE-B
Se añadió cinc en polvo (2 g, 31 mmol) a una solución agitada de hidroximinoquinolin-8-ilacetato de etilo (2,4 g, 9,8 mmol) en ácido fórmico ac. al 50% (50 ml) a 0ºC. Después de 1 min, se filtró la mezcla a través de tierra de diatomeas y se cargó el filtrado en una columna SCX. Después de lavar la columna con metanol, se eluyó el producto con una mezcla 3 a 1 de diclorometano y (NH_{3} 2N en metanol). Se combinaron las fracciones que contenían producto y se concentraron a vacío, proporcionando 2,24 g de aceite naranja claro (EM-PI, m/e 231,0 (M+1)).
Se disolvió el aceite (2,14 g, 9,3 mmol) en THF (40 ml) y se añadió a esta solución agitada trietilamina (1,4 ml, 10,2 mmol), seguido de dicarbonato de di-terc-butilo (2,1 g, 9,8 mmol). Después de 45 min, se retiró el disolvente a vacío y se repartió el residuo entre acetato de etilo y agua. Se lavó después la fase orgánica con NaHCO_{3} ac. sat., se secó con Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a vacío. Se disolvió el residuo en la cantidad mínima de diclorometano y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con 5% de acetato de etilo en hexanos. Se combinaron las fracciones que contenían producto y se concentraron, proporcionando 2,5 g (81%) del compuesto del título.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 331,0 (M+1).
Intermedio PAE-4
Éster etílico de Boc-D,L-(5-quinolinil)glicina
Preparado a partir de hidroximinoquinolin-5-ilacetato de etilo utilizando el procedimiento PAE-B.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 311,0 (M+1).
Intermedio PAE-5
Éster metílico de N-4-metoxibenzoil-N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(2-trifluorometilfenil)glicina
Procedimiento PAE-C
Se añadieron 2,4-dimetoxibencilamina (0,86 ml, 5,7 mmol) y metanol (2 ml) a 2-trifluorometilbenzaldehído (1 g, 5,7 mmol) con agitación. Después de 5 min, se diluyó la solución con tolueno (100 ml) y se concentró a vacío (dos veces). Se disolvió después el residuo en metanol anhidro (12 ml) y se añadió 1,1-dimetil-2- (metoxicarboniloxi)etilisonitrilo [Tetrahedron, 55 (1999), 7411-7420] (0,9 g, 5,7 mmol), seguido de ácido 4-metoxibenzoico (0,87 g, 5,7 mmol). Después de agitar durante 72 h, se retiró el disolvente a vacío y se purificó el residuo mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente en etapas de 30% de acetato de etilo en hexanos a 50% de acetato de etilo en hexanos. Se combinaron las fracciones que contenían producto y se concentraron a vacío, y después se disolvió el residuo en acetato de etilo, se lavó con NaHCO_{3} ac. sat., se secó con Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró, proporcionando 1,76 g (48%) de aceite espeso (RMN, EM-PI, m/e 633,0 (M+1)). Se disolvió después el aceite (0,5 g, 0,79 mmol) en tolueno (5 ml) y se concentró a vacío (dos veces) proporcionando una espuma blanca. Se disolvió después el residuo en THF (3 ml) y se añadió terc-butóxido de potasio (0,11 g, 0,95 mmol). Después de 15 min, se añadió HCl 12 N (0,079 ml, 0,95 mmol) y se permitió reposar la solución durante una noche en la nevera. A la mañana siguiente, se retiró el disolvente y se purificó el residuo mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con 30% de acetato de etilo en hexanos. Se combinaron las fracciones que contenían producto, proporcionando 0,32 g (79%) del compuesto del título.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 518,0 (M+1).
Intermedio PAE-6
Éster etílico de Boc-D,L-(5-tiazolil)glicina
Se añadió éster etílico de D,L-(5-tiazolil)glicina (4,60 g, 24,7 mmol) a un matraz f.r. (250 cm^{3}) con tetrahidrofurano (aprox. 100 cm^{3}) con agitación, proporcionando una solución amarilla. Se añadieron después anhídrido Boc (5,439 g, 29,948 mmol) y trietilamina (3,79 cm^{3}, 2,75 g, 27,17 mmol) con agitación durante 1 hora. La reacción se controló mediante TLC (60% de hexano/acetato de etilo, f.r. m.p. 0,05, r.f. prod. 0,5). Se concentró la reacción a vacío y se recogió el producto en acetato de etilo (aprox. 150 cm^{3}), se lavó con una solución de ácido clorhídrico al 5% (aprox. 30 cm^{3}) y bicarbonato saturado (aprox. 30 cm^{3}). Se secó la fase de acetato de etilo sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad, proporcionando un aceite naranja (7,42 g, \sim24,70 mmol) [\sim100% de rendimiento].
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,30 (3H, t), 1,48 (9H, s), 4,28 (2H, c), 5,68 (1H, a), 7,88 (1H, s), 8,78 (1H, s).
Éster etílico de D,L-(5-tiazolil)glicina
Se añadió éster etílico del ácido 5-tiazoliloximinoacético (6,37 g, 31,825 mmol) a un matraz f.r. (250 cm^{3}) con etanol (aprox. 80 cm^{3}) con agitación. Se añadió una solución de ácido fórmico al 50% (50 cm^{3}) con cinc en polvo (5,10 g, 81,83 mmol) y se permitió agitar durante una noche. Se controló la reacción por TLC (60% de hexano/acetato de etilo; r.f. m.p. 0,3, r.f. prod. 0,05). Se filtró la solución de reacción sobre tierra de diatomeas y se concentró el filtrado a vacío. Se alcalinizó éste a pH 9 con carbonato de potasio anhidro y se recogió el producto en una solución de cloroformo:isopropanol 3:1 (aprox. 200 cm^{3}). Se lavó ésta con bicarbonato saturado (aprox. 50 cm^{3}), se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío, proporcionando un aceite marrón (4,60 g, 24,70 mmol) (78% de rendimiento).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,25 (3H, t), 1,95 (2H, a), 4,22 (2H, c), 4,85 (1H, s), 7,80 (1H, s), 8,70 (1H, s).
Intermedio PAE-7
Éster etílico de N-Boc-D,L-(4-tiazolil)glicina
Se añadieron dicarbonato de di-terc-butilo (0,530 g, 2,470 mmol) y trietilamina (0,344 cm^{3}, 2,470 mmol) a una solución de éster etílico de D,L-(4-tiazolil)glicina (0,460 g, 2,470 mmol) en tetrahidrofurano (20 cm^{3}). Se permitió agitar ésta durante 1 hora y se concentró la solución a vacío. Se recogió el aceite en acetato de etilo (aprox. 50 cm^{3}), se lavó con una solución de ácido clorhídrico al 0,5% (aprox. 20 cm^{3}) y una solución saturada de bicarbonato de sodio (aprox. 20 cm^{3}). Se secó después ésta sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío, proporcionando un aceite naranja (0,709 g, 2,477 mmol) (\sim100% de rendimiento).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,15 (3H, t), 1,35 (9H, s), 4,1 (2H, m), 5,45 (1H, d), 5,75 (1H, d), 7,3 (1H, d), 8,7 (1H, d).
Éster etílico de D,L-(4-tiazolil)glicina
Se preparó éste a partir de \alpha-oximinotiazol-4-acetato de etilo (0,60 g) utilizando el procedimiento de Hatanaka et al. (Journal of Medicinal Chemistry, 1973, 16(9), 978-984), proporcionando el compuesto del título (0,46 g).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,25 (3H, t), 1,8-2,3 (2H, a), 4,1 (2H, m), 4,75 (1H, s), 7,25 (1H, d), 8,7 (1H, d).
Intermedio PAE-8
Éster etílico de N-Boc-D,L-(2-metiltiazol-4-il)glicina
Se añadieron dicarbonato de di-terc-butilo (0,475 g, 2,180 mmol) y trietilamina (0,304 cm^{3}, 2,180 mmol) a una solución de éster etílico de D,L-(2-metiltiazol-4-il)glicina (0,397 g, 1,982 mmol) en tetrahidrofurano (20 cm^{3}). Se permitió agitar ésta durante 1 hora y se concentró la solución a vacío. Se recogió el sólido en acetato de etilo (aprox. 50 cm^{3}), se lavó con una solución de ácido clorhídrico al 0,5% (aprox. 20 cm^{3}) y una solución saturada de bicarbonato de sodio (aprox. 20 cm^{3}). Se secó después ésta sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío, proporcionando un aceite amarillo (0,654 g, 2,177 mmol) [\sim100% de rendimiento].
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,1 (3H, s), 1,35 (9H, s), 2,6 (3H, s), 4,15 (3H, m), 5,3 (1H, d), 5,7 (1H, s), 7,0 (1H, s).
Éster etílico de D,L-(2-metiltiazol-4-il)glicina
Se preparó éste a partir de \alpha-oximino-2-metiltiazol-4-acetato de etilo (0,62 g) utilizando el procedimiento de Hatanaka et al. (Journal of Medicinal Chemistry, 1973, 16(9), 978-984), proporcionando el compuesto del título (0,40 g).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,15 (3H, t), 1,95 (2H, a), 2,6 (3H, s), 4,15 (2H, m), 4,65 (1H, s), 6,95 (1H, s).
Intermedio PAE-9
Éster metílico de Boc-R-(4-hidroxifenil)glicina
Se añadió en una porción dicarbonato de di-terc-butilo (15,9 g) a una mezcla agitada de clorhidrato de éster metílico de R-(4-hidroxifenil)glicina (14 g) y bicarbonato de sodio (11,7 g) en THF (150 ml) y agua (50 ml). Se agitó rápidamente la mezcla para permitir un mezclado concienzudo durante 4 h. Se añadió hexano (75 ml), se separó la fase orgánica y se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio, después salmuera y después se secó con sulfato de magnesio. Se separaron por filtración los agentes de secado, se lavó con un poco de THF y se evaporó hasta sequedad, acabando con una bomba de alto vacío para retirar las últimas trazas de dicarbonato de di-terc-butilo. Rendimiento: 19,7 g, 96%.
^{1}H-RMN.
Clorhidrato de éster metílico de R-(4-hidroxifenil)glicina
Se añadieron R-4-hidroxifenilglicina (12,5 g) y metanol seco (24 ml) a un matraz de fondo redondo seco de tres bocas de 250 ml equipado con un termómetro de baja temperatura, un septum para la cobertura con nitrógeno y otro para la introducción de cloruro de tionilo mediante jeringa. Se agitó la mezcla (agitador magnético) y se enfrió a una temperatura interna de -20ºC utilizando dióxido de carbono sólido/acetona. Utilizando una jeringa, se añadió gota a gota cloruro de tionilo a la mezcla enfriada durante un periodo de 10 min. (Precaución: la reacción de cloruro de tionilo con metanol es muy exotérmica, y la velocidad de adición debe ser tal que el cloruro de tionilo se agite suficientemente en la mezcla y que la temperatura no se eleve por encima de -20ºC). Una vez completada la adición, se permitió calentar la mezcla a temperatura ambiente durante una noche (16-18 h). Se añadió éter seco (150 ml) y se separó por filtración el precipitado blanco que se formó, se lavó con un poco más de éter y se secó. Rendimiento: 15,5, 95%.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAE-10
Clorhidrato de éster metílico de Boc-R-(4-trifluorometanosulfoniloxifenil)glicina
Se añadieron 2,6-lutidina (9,44 ml) y 4-dimetilaminopiridina (1,65 g) a una solución agitada de éster metílico de Boc-R-(4-hidroxifenil)glicina (19 g) en diclorometano (400 ml), y se enfrió la mezcla en un baño de hielo. Se añadió anhídrido trifluorometananosulfónico (13,74 ml) durante un periodo de 5 min, y después se dejó calentar la reacción a temperatura ambiente durante 4 h. Se lavó la solución orgánica con agua (2 x 150 ml), HCl 1 N (2 x 150 ml) y después bicarbonato de sodio saturado (150 ml). Se secaron los extractos orgánicos con sulfato de magnesio y después se evaporaron hasta un aceite. Se purificó la mezcla utilizando cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}, 250 g, eluyendo con hexano/diclorometano 1:1 y después diclorometano puro). Se combinaron las fracciones de producto puro y se evaporaron, acabando con una bomba de alto vacío para retirar todas las trazas de disolvente, proporcionando un sólido blanco, 19 g, 77%.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAE-11
Éster metílico de Boc-R-(4-metoxicarbonilfenil)glicina
Procedimiento PAE-D
Se dispusieron éster metílico de Boc-R-4-trifluorometanosufoniloxifenilglicina (15 g), metanol (32,6 ml), bis-1,3-difenilfosfinilpropano (448 mg), acetato de paladio (II) (255 mg), trietilamina (10,2 ml) y dimetilformamida (72 ml) en una camisa de vidrio de un reactor a presión (Parr) y se ensambló el reactor. Se puso el recipiente a una presión de \sim69 kPa con nitrógeno y se liberó el gas (repetido cinco veces para retirar todo el oxígeno del sistema). Se introdujo después cuidadosamente gas monóxido de carbono a \sim138 kPa (utilizar con extremo cuidado, el cilindro de gas está a bastante más presión que la presión del disco de seguridad del Parr, utilizar idealmente un regulador de presión para reducir la presión a \sim690 kPa), y se liberó tres veces (en el fondo de una campana de humos). Se añadió después monóxido de carbono a \sim690 kPa y se encendió el agitador. Se calentó lentamente el recipiente a 65ºC de temperatura interna y después se agitó a 65ºC durante una noche. (En las etapas iniciales se añadió más monóxido de carbono para mantener los \sim690 kPa). Se retiró una muestra después de 18 h y se examinó por TLC. Cuando se completó, se enfrió la reacción a -30ºC, se liberó el gas y se purgó el recipiente cinco veces con nitrógeno como anteriormente. Se repartió la mezcla de reacción entre acetato de etilo y agua, se lavó la fase orgánica con ácido clorhídrico 1 M y después bicarbonato de sodio saturado. Se secó la solución con MgSO_{4} y se evaporó. La cromatografía ultrarrápida del aceite resultante proporcionó el producto, puro según TLC, 10,6 g, 90%.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAE-12
Éster metílico de Boc-R-(4-benciloxicarbonilfenil)glicina
Preparado a partir de éster metílico de Boc-R-4-trifluorometanosulfoniloxifenilglicina y alcohol bencílico utilizando el procedimiento PAE-D.
^{1}H-RMN.
\newpage
Intermedio PAE-13
Éster metílico de Boc-R-(4-carboxifenil)glicina
Se disolvió éster metílico de Boc-R-(4-benciloxicarbonilfenil)glicina (500 mg) en THF que contenía Pd/C al 10% (100 mg) y se hidrogenó a 101,3 kPa durante 2 h. La retirada del catalizador mediante filtración y evaporación del disolvente proporcionaron éster metílico de Boc-R-(4-carboxifenil)glicina (330 mg, 87%).
^{1}H-RMN.
Intermedio PAE-14
Éster metílico de Boc-R-(4-carboxamidofenil)glicina
Procedimiento PAE-E
Se añadieron EDCI (2,60 g, 1,36 mmol) y HOBt (1,4 g, 10,4 mmol) a una solución de éster metílico de Boc-R-(4-carboxifenil)glicina (3,5 g) en DMF (30 ml), y se agitó la mezcla durante 10 min antes de enfriar en un baño de hielo y burbujear gas amoniaco durante 5 min. Se agitó la mezcla durante 2 h a temperatura ambiente, después se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. Se extrajo la solución acuosa con un poco de acetato de etilo y se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera. Se evaporó la solución orgánica hasta un aceite, que se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}-diclorometano/acetato de etilo 0-25%), proporcionando éster metílico de Boc-R-(4-carboxamidofenil)glicina (1,7 g, 48%).
^{1}H-RMN.
Intermedio PAE-15
Éster metílico de Boc-R-(4-metilcarboxamidofenil)glicina
Preparado a partir de éster metílico de Boc-R-(4-carboxifenil)glicina y metilamina utilizando el procedimiento PAE-E.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAE-16
Éster metílico de N-4-metoxibenzoil-N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(quinolin-4-il)glicina
Preparado a partir de quinolin-4-carboxaldehído utilizando el procedimiento PAE-C.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAE-17
Boc-D,L-tiazol-2-glicina de etilo
Preparado a partir de hidroximinotiazol-2-ilacetato de etilo utilizando el procedimiento PAE-B. En este caso, la reacción con Zn/ácido fórmico se realizó durante 15 min.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 287,0 (M+1).
Intermedio PAE-18
Boc-D,L-isoquinolin-8-glicina de etilo
Preparado a partir de hidroximinoisoquinolin-8-ilacetato de etilo utilizando el procedimiento PAE-B. En este caso, la reacción con Zn/ácido fórmico se realizó durante 30 min, seguido de concentración y reparto del residuo entre cloroformo/isopropanol 3/1 y NaHCO_{3} ac. sat. Se llevó a cabo la protección con Boc como se describe anteriormente. Se realizó la purificación utilizando cromatografía en gel de sílice (Biotage Quad System) eluyendo con 10% de acetato de etilo en cloruro de metileno.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 331,0 (M+1).
Análisis para C_{18}H_{22}N_{2}O_{4}:
Calculado: C 65,44, H 6,71, N 8,48.
Encontrado: C 65,05, H 6,67, N 8,49.
Preparación de intermedios PAA-1 - PAA-28
Se prepararon los siguientes compuestos según el procedimiento indicado (procedimiento PAA-A, procedimiento PAA-B, procedimiento PAA-C, procedimiento PAA-D, procedimiento PAA-E o procedimiento PAA-F) a partir de los materiales de partida indicados, a menos que se describa otra cosa.
Intermedio PAA-1
Boc-D,L-(2-clorofenil)glicina
Procedimiento PAA-A
Se añadieron conjuntamente 2-clorobenzaldehído (20 mmol, 2,252 ml) y 2,4-dimetoxibencilamina (20 mmol, 3,004 ml) y se agitaron durante 2 horas. Se añadió DCM (5 ml) y se separó y retiro el agua. Se añadió terc-butilisonitrilo (20 mmol, 2,262 ml) y se agitó durante 10 min, seguido de ácido acético (20 mmol, 1,145 mmol). Se continuó la agitación durante 3 días. Se trató después la mezcla de reacción con TFA (30 ml) y trietilsilano (5 ml). Después de 3 h, se evaporó la mezcla hasta sequedad, se añadió HCl 6 M (100 ml) y se calentó a reflujo todo durante una noche a 130ºC, agitando rápidamente. Se permitió enfriar la mezcla y se extrajo con AcOEt (50 ml x 2); se evaporó la fracción acuosa hasta sequedad y se trató con una solución de NaOH 2 M. Se extrajo la mezcla con AcOEt (50 ml x 2), se añadió anhídrido Boc en exceso (5,2 g) en dioxano (20 ml) a la fracción acuosa y se agitó durante una noche. Se extrajo la mezcla con dietiléter (100 ml x 2), se acidificó a pH 1 (HCl conc) y se extrajo con AcOEt (50 ml x 2). Se lavaron las fracciones orgánicas combinadas con agua y se evaporaron hasta sequedad a alto vacío. Producto: Boc-2-clorofenilglicina (4,252 g, 74,5%).
^{1}H-RMN (CD_{3}CN/D_{2}O) 7,3 (4H, m), 5,5 (1H, s), 1,3 (9H, s). EM 286 (M+1).
Intermedio PAA-1'
(R)-Benciloxicarbonil-(2-clorofenil)glicina
Preparado a partir de 2-cloroestireno utilizando el procedimiento de Sharpless et al., J.A.C.S. (1998), vol. 20, nº 6, 1207-1217.
Intermedio PAA-1, preparación alternativa
Boc-D,L-(2-clorofenil)glicina
Preparado a partir de 2-clorobenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-F. En este caso, la temperatura de reacción no se controló tras la adición de 2-clorobenzaldehído, y la reacción se permitió agitar durante 2 h. Se realizó la extracción del intermedio aminonitrilo con etiléter en lugar de acetato de etilo y se purificó adicionalmente mediante la adición gas HCl a los extractos de éter, seguido de decantación de las aguas madre para aislar la sal clorhidrato semisólida. Se realizó la protección con Boc del aminoácido de 0ºC a temperatura ambiente durante un periodo de 1 hora, y se realizó la extracción final con acetato de etilo en lugar de etiléter.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 284 (M-1).
Intermedio PAA-2
Boc-D,L-(3-fluorofenil)glicina
Preparado a partir de 3-fluorobenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-A.
^{1}H-RMN (CD_{3}CN/D_{2}O) 7,3 (1H, m), 7,1 (3H, m), 5,2 (1H, s), 1,3 (9H, s). EM 270 (M+1).
Intermedio PAA-3
Boc-D,L-(4-fluorofenil)glicina
Preparado a partir de 4-fluorobenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-A.
^{1}H-RMN (CD_{3}CN/D_{2}O) 7,3 (2H, m), 6,9 (2H, m), 5,0 (1H, s), 1,3 (9H, s). EM 270 (M+1).
Intermedio PAA-4
Boc-D,L-(2-metilfenil)glicina
Preparado a partir de 2-metilbenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-A.
^{1}H-RMN (CD_{3}CN/D_{2}O) 7,3 (4H, m), 5,5 (1H, s), 2,5 (3H, s), 1,3 (9H, s). EM 266 (M+1).
Intermedio PAA-5
Boc-D,L-(3-tienil)glicina
Preparado a partir de 3-tiofenocarboxaldehído utilizando el procedimiento PAA-A.
^{1}H-RMN (CD_{3}CN/D_{2}O) 7,5 (2H, m), 7,1 (1H, d), 5,3 (1H, s), 1,3 (9H, s). EM 258 (M+1).
Intermedio PAA-6
Boc-D,L-(2-fluorofenil)glicina
Se obtuvo tratando D,L-2-fluorofenilglicina (Aldrich) con Boc-anhídrido (1,1 eq) y NaOH 2 M (1 eq) en etanol. El procesamiento acuoso como se describe anteriormente proporcionó el aminoácido protegido.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAA-7
Boc-D,L-(2-metoxifenil)glicina
Preparado a partir de 2-metoxibenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-A.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAA-7, preparación alternativa
Boc-D,L-(2-metoxifenil)glicina
Preparado a partir de 2-metoxibenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-F. En este caso, se enfrió la reacción a 0ºC antes de la adición de 2- metoxibenzaldehído y se permitió agitar después a temperatura ambiente durante una noche. Se realizó la extracción del intermedio aminonitrilo con etiléter en lugar de acetato de etilo, y se purificó adicionalmente mediante la adición de HCl 1 M en etiléter seguido de filtración de la sal clorhidrato cristalina. La protección con Boc del aminoácido se realizó de 0ºC a temperatura ambiente durante un periodo de 3 horas, y la extracción final se realizó con diclorometano en lugar de etiléter.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 280,1 (M-1).
Análisis para C_{14}H_{19}NO_{5}.
Calculado: C 59,78, H 6,81, N 4,98.
Encontrado: C 59,68, H 6,78, N 4,95.
Intermedio PAA-8
Boc-D,L-(2-trifluorometil)fenilglicina
Preparado a partir de 2-trifluorometilbenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-A.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAA-8, preparación alternativa
Boc-D,L-(2-trifluorometilfenil)glicina
Preparado a partir de 2-trifluorometilbenzaldehído utilizando el procedimiento PAA-F. En este caso, la temperatura de la reacción no se controló tras la adición de 2-trifluorometilbenzaldehído y se permitió agitar la reacción durante 2 h. La extracción del intermedio aminonitrilo se realizó con etiléter en lugar de acetato de etilo, y se purificó adicionalmente mediante la adición de gas HCl a los extractos de éter seguido de decantación de las aguas madre para aislar la sal clorhidrato semisólida. La desprotección del Boc del aminoácido se realizó de 0ºC a temperatura ambiente durante un periodo de 1 hora, y la extracción final se realizó con acetato de etilo en lugar de etiléter.
^{1}H-RMN. EM-PI m/e 318 (M-1).
Intermedio PAA-9
Boc-D,L-(8-quinolinil)glicina
Procedimiento PAA-B
Se añadió una solución de LiOH hidratado (0,32 g, 7,6 mmol) en agua a una solución agitada de éster etílico de Boc-D,L-(8-quinolinil)glicina (2,29 g, 6,93 mmol) en 1,4-dioxano (11 ml). Después de 2 h, se retiraron los disolventes a vacío, se disolvió el residuo en agua y se lavó con dietiléter. Se acidificó después la fase acuosa a pH 3 con ácido cítrico sólido y se extrajo con acetato de etilo. Se lavó después la fase orgánica con salmuera, se secó con Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró, proporcionando 2,06 g (98%) del compuesto del título.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 303,0 (M+1).
Intermedio PAA-10
Boc-D,L-(5-quinolinil)glicina
Preparado a partir de éster etílico de Boc-D,L-(5-quinolinil)glicina utilizando el procedimiento PAA-B.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 303,0 (M+1).
Intermedio PAA-11
Boc-D-(3-bromofenil)glicina
Preparado a partir de R-3-bromo-(1-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxietil)benceno utilizando el procedimiento PAA-C.
Punto de fusión: 130-132ºC con descomposición.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
EM-IPA, m/e= 286 (M-CO_{2}H+1).
Intermedio PAA-12
Boc-D-(3-metoxicarbonilfenil)glicina
Procedimiento PAA-C
Se añadió NaHCO_{3} al 5% (3 ml) a una solución agitada de R-3-metoxicarbonil-(1-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxietil)benceno (338 mg, 1,14 mmol) en acetona (7,2 ml). Se enfrió la mezcla de reacción a 0ºC. Se añadieron gota a gota a la suspensión agitada KBr (14 mg, 0,12 mmol), TEMPO (181 mg, 1,16 mmol) y NaOCl (2,81 ml, 5,25%). Después de 1 h a 0ºC, se añadieron TEMPO (136 mg, 0,88 mmol) y NaOCl (1,09 ml, 5,25%). Se agitó la reacción durante 0,5 h adicionales a 0ºC y se añadió NaHCO_{3} al 5% (4,3 ml). Se permitió calentar la reacción a temperatura ambiente durante una noche. Se retiró la acetona a vacío y se repartió el producto bruto entre acetato de etilo y agua. Se lavó la fase acuosa con acetato de etilo (2x), se acidificó a pH 5 con ácido cítrico al 10% y se extrajo con acetato de etilo (4x). Se secaron los extractos orgánicos combinados sobre MgSO_{4}. La retirada del disolvente a vacío proporcionó el producto (305 mg, 86%).
^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
EM-IPA, m/e= 254 (M-C_{4}H_{9}+1).
Intermedio PAA-13
Boc-D-(3-cianofenil)glicina
Preparado a partir de R-3-ciano-(1-terc-butoxicarbonilamino-2-hidroxietil)benceno utilizando el procedimiento PAA-C.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}).
EM-IPA, m/e= 221 (M-C_{4}H_{9}+1).
Intermedio PAA-14
Boc-D-(3-etanosulfonilaminofenil)glicina
Se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (18,5 g, 85,17 mmol) a una solución agitada de 3-(etanosulfonilaminofenil)glicina (20 g, 77,43 mmol) y carbonato de sodio (8,2 g, 77,43 mmol) en THF:agua 3:1 (200 ml) a 0ºC. Después de agitar durante 30 min, se retiró el baño de refrigeración y, después de 30 min adicionales a temperatura ambiente, se retiró el disolvente y se repartió el residuo entre acetato de etilo y agua. Se acidificó la fase acuosa a pH 2 con KHSO_{4} y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Se lavaron los extractos combinados de acetato de etilo con agua, se secaron con Na_{2}SO_{4}, se filtraron y se concentraron a vacío, proporcionando 17,51 g (63%) de un sólido blanco.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 357,0 (M-1).
Intermedio PAA-15
N-Boc-D,L-(5-tiazolil)glicina
Se añadió éster etílico de Boc-D,L-(5-tiazolil)glicina (7,00 g, 24,70 mmol) a un matraz f.r. (150 cm^{3}) con etanol (aprox. 100 cm^{3}) con agitación. Se añadió una solución de hidróxido de sodio 2 M (25 cm^{3}, 50 mmol) y se permitió agitar durante 1 h. Se controló la reacción por TLC (60% de hexano/acetato de etilo; f.r. m.p. 0,5, f.r. m.p. 0). La reacción se concentró a vacío, se recogió el producto en bicarbonato saturado (aprox. 50 cm^{3}) y se lavó con acetato de etilo (aprox. 30 cm^{3}). Se acidificó la fase acuosa a pH 2 con ácido clorhídrico concentrado y se extrajo el producto con una solución de cloroformo:isopropanol 3:1 (aprox. 3 x 60 cm^{3}). Se secó la fase orgánica sobre sulfato de magnesio y se evaporó hasta sequedad, proporcionando un sólido naranja (4,47 g, 17,30 mmol) [74% de rendimiento].
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,35 (9H, s), 5,60 (1H, d), 5,83 (1H, d), 7,88 (1H, s), 8,80 (1H, s).
Intermedio PAA-16
N-Boc-D,L-(4-tiazolil)glicina
Procedimiento PAA-D
Se añadió hidróxido de sodio 2 M (2,47 cm^{3}, 4,940 mmol) a una solución de éster etílico de N-Boc-D,L-(4-tiazolil)glicina (0,700 g, 2,470 mmol) en metanol (aprox. 15 cm^{3}), y se permitió agitar durante 90 min. Se concentró la solución a vacío y se recogió en agua (aprox. 20 cm^{3}). Se lavó la solución acuosa con acetato de etilo (aprox. 20 cm^{3}) y después se acidificó a pH 2 con una solución de ácido clorhídrico al 5% (aprox. 50 cm^{3}). Se extrajo el producto con acetato de etilo (aprox. 3 x 30 cm^{3}), se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró a vacío, proporcionando un aceite amarillo pálido (0,582 g, 2,254 mmol) [91% de rendimiento].
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,35 (9H, s), 5,5 (1H, d), 5,8 (1H, d), 7,35 (1H, d), 8,75 (1H, d), 9,8-10,2 (1H, a).
Intermedio PAA-17
N-Boc-D,L-(2-metiltiazol-4-il)glicina
Preparado a partir de éster etílico de N-Boc-D,L-(2-metiltiazol-4-il)glicina utilizando el procedimiento PAA-D.
^{1}H-RMN (CDCl_{3}) 1,35 (9H, s), 2,6 (3H, s), 5,4 (1H, d), 5,9 (1H, s), 7,1 (1H, s).
Intermedio PAA-18
N-Boc-D,L-(2-benciloxicarbonilamino-4-tiazolil)glicina
Se prepara a partir de D,L-(2-benciloxicarbonilamino-4-tiazolil)glicina. Se retira el grupo protector benciloxicarbonilo del grupo tiazolilamino en el punto conveniente de la preparación de un compuesto final utilizando un procedimiento convencional, tal como por ejemplo calentar una solución de un intermedio en HBr/ácido acético a 60ºC, seguido de evaporación y aislamiento convencional, tal como utilizando cromatografía de intercambio iónico SCX.
D,L-(2-Benciloxicarbonilamino-4-tiazolil)glicina
Se preparó mediante el procedimiento de Hardy, K.; Harrington, F. y Stachulski, A. J. Chem. Soc. Perkin Trans. I (1984), 1227-1235.
\newpage
Intermedio PAA-19
Boc-R-(4-metoxicarbonilfenil)glicina
Se añadió una solución de hidróxido de litio hidratado (90 mg) en agua (7 ml) a una solución de éster metílico de Boc-R-(4-metoxicarbonilfenil)glicina (692 mg) en THF (10 ml). Se enturbió inmediatamente la mezcla y se aclaró durante 15 min. Después de 30 min, la TLC mostró la reacción terminada. Se añadieron acetato de etilo 20 ml) y agua (20 ml), y se separó la fase acuosa. Se acidificó la solución acuosa con ácido clorhídrico 2 M y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Se lavó la solución orgánica después con agua x 2 y salmuera x 2, se secó con MgSO_{4} y se evaporó, proporcionando el monoéster (650 mg, 98%), puro según TLC.
Intermedio PAA-20
Boc-R-(4-metoxifenil)glicina
Se convirtió el éster metílico de Boc-R-(4-hidroxifenil)glicina en Boc-R-4-metoxifenilglicina utilizando el procedimiento de alquilación descrito por Basak et al. (Tetrahedron Lett. 1998, 39 (27), 4883-4886), seguido de hidrólisis del éster metílico con hidróxido de litio en THF acuoso.
^{1}H-RMN.
Intermedio PAA-21
N-4-Metoxibenzoil-N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(2-trifluorometilfenil)glicina
Preparado a partir de éster metílico de N-4-metoxibenzoil-N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(2-trifluorometilfenil)glicina utilizando el procedimiento PAA-B (3 equivalentes de LiOH hidratado).
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 503,9 (M+1).
Intermedio PAA-22
N-4-Metoxibenzoil-N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(tien-2-il)glicina
Procedimiento PAA-E
Se añadió 3,4-dimetoxibencilamina (5,89 ml, 39,0 mmol, 1 eq) a una solución de ácido 2-tiofenoborónico (5,0 g, 39,0 mmol, 1 eq) en 275 ml de cloruro de metileno a ta, seguido de ácido glioxílico monohidratado (3,6 g, 39 mmol, 1 eq). Se permitió agitar la reacción durante 56 horas a ta, después de dicho tiempo se filtró el precipitado resultante y se lavó con cloruro de metileno, proporcionando 9,3 g (78%) de N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(tien-2-il)glicina en forma de un sólido blanquecino (EM-PI, m/e 308 (M+1)).
Se disolvió una parte del sólido (5,0 g, 16,3 mmol, 1 eq) en acetona (20 ml) e hidróxido de sodio 1 N (20 ml) a ta. Se añadieron simultáneamente a esta solución cloruro de anisoílo (2,78 g, 16,3 mmol, 1 eq) en 20 ml de acetona e hidróxido de sodio 2 N gota a gota. Después de agitar a ta durante 1 h, se enfrió la reacción a 0ºC y se acidificó a pH 2-3. Se añadió dietiléter y se extrajo el producto en la fase orgánica. Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a vacío, proporcionando 5,1 g (71%) del compuesto del título en forma de un sólido blanco.
EM-PI, m/e 440 (M+1).
Intermedio PAA-23
N-Boc-N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(tien-2-il)glicina
Se añadió trietilamina (0,97 ml, 7,0 mmol, 2,1 eq) a una solución de N-2,4-dimetoxibencil-D,L-(tien-2-il)glicina (1,0 g, 3,2 mmol, 1 eq) en 6 ml de acetona y 6 ml de agua a ta, seguido de la adición de 2-(terc-butoxicarboniloximino)-2-fenilacetonitrilo (BOC-ON) (0,76 g, 3,1 mmol, 0,95 eq). Después de agitar a ta durante una noche, se diluyó la reacción con agua y se lavó con éter. Se acidificó después la fase acuosa con ácido cítrico 0,5 M y se extrajo el producto con dietiléter. Se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron, proporcionando 0,38 g (29%) del compuesto del título en forma de un aceite amarillo bruto.
EM-PI, m/e 408 (M+1).
\newpage
Intermedio PAA-24
Boc-D,L-isoquinolin-8-ilglicina
Preparado a partir de Boc-D,L-isoquinolin-8-ilglicina de etilo utilizando el procedimiento PAA-B. El producto precipitó a partir de una solución acuosa básica ajustando el pH a 3 con ácido cítrico sólido.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 303,0 (M+1).
Análisis para C_{16}H_{18}N_{2}O_{4}\cdot0,5 H_{2}O:
Calculado: C 61,73, H 6,15, N 9,00.
Encontrado: C 61,62, H 5,66, N 8,84.
Intermedio PAA-25
Boc-D,L-naftalen-1-ilglicina
Procedimiento PAA-F
Parte A
Clorhidrato de D,L-nafalen-1-ilglicina
Se añadió cloruro de amonio (11,4 g, 0,22 mmol) a una solución de cianuro de sodio (10,0 g, 0,22 mmol) en 40 ml de agua, y se agitó la mezcla hasta disolución completa. Se añadió después una solución de 1-naftaldehído (31,0 g, 0,22 mmol) en 40 ml de metanol, y se permitió agitar la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 2 días. Se añadieron después 150 ml adicionales de agua y se extrajo el producto bruto con AcOEt. Se lavaron las fases orgánicas combinadas con agua, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron y se concentraron, proporcionando un aceite bruto. Se purificó mediante cromatografía el residuo bruto sobre gel de sílice, eluyendo con AcOEt:CH_{2}Cl_{2} 10:1, proporcionando 35 g de un aceite marrón claro. Se disolvió después este material en 250 ml de HCl 5 N y se calentó a reflujo durante 9 h. Se permitió enfriar la reacción a temperatura ambiente y se permitió cristalizar el producto durante una noche. La filtración de la mezcla proporcionó 13,6 g (29%) del compuesto del título en forma de cristales marrones claros.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 201,9 (M+1).
Parte B
Boc-D,L-naftalen-1-ilglicina
Se añadió (Boc)_{2}O (15 g, 69 mmol) a una solución de clorhidrato de D,L-naftalen-1-ilglicina (13,6 g, 57,2 mmol) e hidróxido de sodio 2 N (57 ml, 115 mmol) en 120 ml de 1,4-dioxano y 60 ml de agua. Se permitió agitar la reacción a temperatura ambiente durante 3 h, después de dicho tiempo se llevó la solución a pH 5 mediante la adición de ácido sulfúrico 1 N. Se extrajo después el producto con AcOEt, y se secaron los extractos orgánicos combinados sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron y se concentraron, proporcionando 14 g (81%) del compuesto del título en forma de una espuma marrón clara.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 300,1 (M-1).
Intermedio PAA-26
Boc-D,L-(2-metiltiofenil)glicina
Se añadieron carbonato de amonio (23,1 g, 296 mmol) y una solución de cianuro de potasio (12 g, 148 mmol) en 100 ml de agua a una solución de 2-(metiltio)benzaldehído (15 g, 98,7 mmol) en 100 ml de etanol. Se calentó la reacción y se agitó a 70ºC durante 3 h, después de dicho tiempo se concentró la reacción a presión reducida. Se extrajo el producto con acetato de etilo, se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron y se concentraron. Se recogió el residuo bruto resultante con 70 ml de acetato de etilo y se añadieron 70 ml de hidróxido de sodio 5 N. Se calentó la reacción a reflujo durante 3 días, después de dicho tiempo se retiró el acetato de etilo a presión reducida. Se añadieron secuencialmente a la mezcla acuosa 100 ml de dioxano, Boc_{2}O (42 g, 192 mmol) y 100 ml de hidróxido de sodio 2,5 N. Se calentó después a reflujo la reacción durante 48 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, se diluyó la reacción con agua y se lavó la fase acuosa con etiléter. Se acidificó después la fase acuosa a pH 2 y se extrajo el producto con acetato de etilo. Se lavaron los extractos orgánicos combinados con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron, proporcionando 21,7 g de un residuo bruto. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (elución en gradiente, diclorometano:metanol:ácido acético 97:2:1 a 95:4:1) proporcionó 5,0 g (17%) del compuesto del título.
^{1}H-RMN. EM-EN m/e 296 (M-1).
Intermedio PAA-27
Boc-D,L-(2-metilsulfonilfenil)glicina
Se añadió una solución de oxona (14 g, 23 mmol) en agua a una solución de Boc-D,L-(2-metiltiofenil)glicina (4,5 g, 15,2 mmol) en 75 ml de metanol. Se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 2 h, después de dicho tiempo se retiró el metanol a presión reducida. Se extrajo el producto con acetato de etilo y se lavaron las fases orgánicas combinadas con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron, proporcionando 4,35 g (87%) del compuesto del título.
^{1}H-RMN. EM-EN m/e 230 (M+1-C_{5}H_{9}O_{2}).
Intermedio PAA-28
Boc-D,L-(benzo[b]tiofen-3-il)glicina
Puede prepararse mediante el procedimiento de Kukolja, S. et al., J. Med. Chem. 1985, 28, 1886-1896.
Procedimientos experimentales generales: síntesis de inhibidores Procedimiento de acoplamiento A
Acoplamiento de una amina y un ácido carboxílico para formar una amida. Se trata o se trató una solución de amina (1 eq) y ácido carboxílico (1,1 eq) en un disolvente adecuado (DMF y/o cloruro de metileno) con cianofosfato de dietilo (1,1 eq), seguido de la adición de trietilamina o diisopropiletilamina (0 a 3 eq) a la mezcla. Después de terminada la reacción según cromatografía en capa fina, se repartió la mezcla entre un disolvente adecuado (AcOEt y/o cloruro de metileno) y se lavó con NaOH 1 N, agua, salmuera y se concentró. Se purificó después la mezcla bruta, como se indica, o se utilizó directamente en transformaciones posteriores.
Procedimiento de acoplamiento B
Acoplamiento de amina y ácido carboxílico para formar una amida. Se trata o se trató una solución de amina (1 eq) y ácido carboxílico (1,1 eq) en un disolvente adecuado (DMF y/o cloruro de metileno) con un agente deshidratante basado en carbodiimida (por ejemplo, DCC o EDCI) (1,0 eq). En general, la adición de un reactivo basado en benzotriazol (por ejemplo, HOBT o HOAT) (1 eq) mejoraba los rendimientos de reacción. Después de terminada la reacción según cromatografía en capa fina, se reparte o se repartió la mezcla entre un disolvente adecuado (AcOEt y/o cloruro de metileno) y se lava o se lavó con NaOH 1 N, agua, salmuera y se concentra o se concentró. Se purifica o se purificó después la mezcla bruta, como se indica, o se utiliza o se utilizó directamente en transformaciones posteriores.
Procedimiento de acoplamiento C
Acoplamiento de amina y ácido carboxílico para formar una amida. Se trata o se trató una solución de amina (1 eq) en un disolvente apropiado (cloroformo y/o cloruro de metileno) y piridina (1-10 eq) con un cloruro de ácido (1,1 eq). Después de terminada la reacción según cromatografía en capa fina, se reparte o se repartió la mezcla entre un disolvente adecuado (AcOEt, cloruro de metileno y/o cloroformo) y se lava o se lavó con NaOH 1 N, agua, salmuera y se concentra o se concentró. Se purifica o se purificó después la mezcla bruta, como se indica, o se utiliza o se utilizó directamente en transformaciones posteriores.
Procedimiento de desprotección A
Se dispuso una mezcla de paladio sobre carbono al 10% y el material de partida en un disolvente apropiado (AcOEt, EtOH y/o AcOH) en atmósfera de hidrógeno. Tras la terminación, se filtra o se filtró la mezcla y se concentra o se concentró el filtrado resultante. Se purifica o se purificó después la mezcla bruta, como se indica, o se utilizó directamente en transformaciones posteriores.
Procedimiento de alquilación A
Se trata o se trató una solución del material de partida (1 eq) en 5-10% de AcOH en metanol (anhidro) con el aldehído o cetona indicado (2-10 eq), seguido de cianoborohidruro de sodio (2-10 eq). Después de la terminación, se concentra o se concentró la mezcla y se repartió el residuo entre un disolvente adecuado (AcOEt, cloruro de metileno y/o cloroformo) y se lava o se lavó con NaOH 1 N, agua, salmuera y se concentra o se concentró, o se carga o se cargó directamente en una resina de intercambio iónico (SCX, Varian) y se eluye o se eluyó con metanol, seguido de amoniaco 2 N en metanol. La concentración de las últimas fracciones proporcionó el producto base libre. La mezcla bruta se purifica o se purificó después, como se indica, o se utiliza o se utilizó directamente en transformaciones posteriores.
Preparación de materiales de partida 1-(Benciloxicarbonil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (procedimiento de acoplamiento A)
Se enfrió en un baño de metanol/hielo una solución de benciloxicarbonil-D-fenilglicina (5,0 g, 17,5 mmol) y 4-piperidinmetanol (1,83 g, 15,9 mmol) en 90 ml de cloruro de metileno, y después se trató con cianofosfonato de dietilo (2,67 ml, 17,5 mmol), seguido por etildiisopropilamina (3,1 ml). Después de 5 h, se concentró la mezcla, se diluyó con AcOEt y carbonato de potasio acuoso saturado y se separaron las fases resultantes. Se lavó la fase orgánica (con carbonato de potasio acuoso, HCl 1 N, salmuera), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, se concentró y se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO_{2}, 70-80% de AcOEt-hexano), proporcionando 1,54 g (25%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 725 (M+1).
Análisis para C_{22}H_{26}N_{2}O_{4}\cdot0,15 H_{2}O:
Calculado: C 68,6, H 6,9, N 7,3.
Encontrado: C 68,5, H 6,9, N 7,1.
1-(D-Fenilglicinil)piperidin-4-metanol
Utilizando el procedimiento de desprotección A, 1-(benciloxicarbonil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (3,93 g, 29,5 mmol) y paladio sobre carbono al 10% (1,30 g) en AcOEt:EtOH 2:1 (75 ml) proporcionaron 2,31 g (88%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 249 (M+1).
Preparación de intermedios A-1 - A-3
Intermedio A-1
1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol
Utilizando el procedimiento de acoplamiento C, 1-(D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (1,23 g, 4,96 mmol) y cloruro de p-anisoílo (0,888 g, 5,21 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}, hexanos:AcOEt 1:1 a 1:9), 1,26 g (66%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 383 (M+1).
Intermedio A-2
1-(Indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (procedimiento de acoplamiento B)
Se trató una solución de 1-(D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (500 mg, 2,02 mmol), ácido indol-6-carboxílico (325 mg, 2,02 mmol) y 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (275 mg, 2,02 mmol) en 10 ml de DMF con DCC (415 mg, 2,02 mmol). Después de 15 h, se concentró la mezcla y se disolvió el residuo en AcOEt. Se lavó la fase orgánica (con NaOH 2 N, agua, salmuera), se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; AcOEt), proporcionando 780 mg (98%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 383 (M+1).
Intermedio A-3
1-(3-Cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol
Utilizando el procedimiento de acoplamiento B, 1-(D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (9,90 g, 39,9 mmol) y ácido 3-cloroindol-6-carboxílico (8,56 g, 43,9 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 95% de AcOEt en hexano), 8,95 g (53%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 426 (M+1).
\newpage
Preparación del intermedio B-1
Intermedio B-1
1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-carboxaldehído
Se trató una solución de 1-(4-metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (0,800 g, 2,08 mmol) y óxido de N-metilmorfolina (0,366 g, 3,13 mmol) en cloruro de metileno (15 ml) con perrutenato de tetrapropilamonio (TPAP, 2 mg). Después de 14 h, se trató la mezcla con TPAP adicional (5 mg). Después de 20 h, se trató la mezcla con TPAP adicional (5 mg). Después de 32 h, se cargó directamente la mezcla en una columna y se purificó mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; hexanos:AcOEt 1:1 a 1:4), proporcionando 0,286 g (36%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 381 (M+1).
Preparación de intermedios C-2 - C-4
Intermedio C-2
1-(Indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-(metilsulfoniloximetil)piperidina
Se trató una solución de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (2,82 g, 7,21 mmol) y trietilamina (2,0 ml) en 40 ml de cloruro de metileno con cloruro de metanosulfonilo (1,1 ml, 14,0 mmol). Después de 2 h, se concentró la mezcla y se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO_{2}, 90% de AcOEt en hexano), proporcionando 2,80 g (83%) del compuesto del título.
^{1}H-RMN. EM-PI, m/e 470 (M+1).
Intermedio C-3
1-(3-Cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4- (metilsulfonioximetil)piperidina
Utilizando un procedimiento similar al descrito anteriormente para el intermedio C-2, 1-(3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (8,95 g, 21,0 mmol) proporcionó, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 80 a 99% de AcOEt en hexano), 2,58 g (24%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 504 (M+1).
Intermedio C-4 (protegido)
1-(1-Metilsulfonil-3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-(metilsulfoniloxi-metil)piperidina
Utilizando un procedimiento similar al descrito anteriormente para el intermedio C-3, 1-(3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)piperidin-4-metanol (8,95 g, 21,0 mmol) proporcionó, como producto secundario minoritario después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}, 80 a 99% de AcOEt en hexano), 940 mg (8%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 582 (M+1).
Preparación del intermedio D-1 Sal bisclorhidrato de 4-(piperidin-1-ilmetil)piperidina
Se dispuso en atmósfera de hidrógeno (414 kPa) una solución de 4-(piperidin-1-ilmetil)piperidina (10,0 g, 0,056 mmol, preparada utilizando un procedimiento similar al descrito en el documento US 430491) y óxido de platino (1,5 g) en 55 ml de etanol y 18 ml de HCl 12 N. Después de 15 h, se filtró la mezcla, se concentró y se trituró el residuo con metanol, proporcionando 9,0 g del compuesto del título en forma de una sal bisclorhidrato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 183 (M+1).
1-(Benciloxicarbonil-D-feniglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Utilizando el procedimiento de acoplamiento A, benciloxicarbonil-D-fenilglicina (17,1 g, 60,1 mmol) y 4-(piperi-
din-1-ilmetil)piperidina (10,0 g, 54,6 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 2% a 3% de [amoniaco 2 N en metanol]:cloruro de metileno) 10,7 g (43%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, 451 (M+1).
Análisis para C_{27}H_{35}N_{3}O_{3}:
Calculado: C 72,1, H 7,8, N 9,3.
Encontrado: C 72,0, H 7,7, N 9,4.
Intermedio D-1
1-(D-Fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Utilizando el procedimiento de desprotección A, 1-(benciloxicarbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina (10,7 g, 23,8 mmol) y paladio sobre carbono al 10% (1,35 g) en 200 ml de EtOH:AcOEt 1:1 proporcionaron el compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 315 (M+1).
Preparación del intermedio D-2 1-[Boc-D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Utilizando el procedimiento de acoplamiento B, Boc-D,L-(2-metoxifenil)glicina (2,0 g, 7,11 mmol) y 4-(piperidin-1-ilmetil)piperidina (1,43 g, 7,82 mmol) con trietilamina (1 ml, 7,8 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 0-2% de [amoniaco 2 N en metanol]:cloruro de metileno), 1,59 g (50%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 446,1 (M+1).
Intermedio D-2
1-[D,L-(2-Metoxifenil)glicinil]-4-(piperidin-1-ilmetil)piperidina
Se añadió anisol (2,6 ml, 24 mmol) a una solución agitada de 1-(Boc-D,L-2-metoxifenil)glicinil-4-(piperidin-1-ilmetil)piperidina (1,52 g, 3,42 mmol) en cloruro de metileno (15 ml), seguido de ácido trifluoroacético (5,3 ml). Después de agitar durante 3 h, se retiró el disolvente a vacío, se disolvió el residuo en la cantidad mínima de metanol y se cargó en una columna SCX. Se eluyó la columna con metanol, seguido de amoniaco 2 N en metanol. Se combinaron las fracciones que contenían producto y se concentraron a vacío, proporcionando 1,2 g (100%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 346,1 (M+1).
Preparación del intermedio D-3 1-(Boc-D,L-tiazol-5-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Se añadió EDCI (1,11 g, 5,78 mmol) a una solución de N-Boc-D,L-(5-tiazolil)glicina (1,36 g, 5,25 mmol), HOAT (787 mg, 5,78 mmol), 4-(1-piperidinilmetil)piperidina (1,35 g, 5,25 mmol) y trietilamina (1,61 ml, 11,6 mmol) en DMF (42 ml), y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 20 h. Se retiró el disolvente a vacío, se recogieron los residuos en cloroformo:alcohol isopropílico (2:1) y se lavó con agua y bicarbonato de sodio saturado. Se volvió a extraer la fase acuosa con cloroformo:alcohol isopropílico (2:1) (x2), se secaron los extractos orgánicos combinados (MgSO_{4}) y se concentraron a vacío hasta un aceite marrón anaranjado. Se llevó el producto de reacción así obtenido a la siguiente etapa sin purificación adicional.
Intermedio D-3
1-(D,L-tiazol-5-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Se añadió TFA (10,5 ml) a una solución agitada de 1-(Boc-D,L-tiazol-5-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-ilmetil)piperidina] bruta (aprox. 5,25 mmol) y anisol (11,4 ml) en diclorometano (42 ml) a temperatura ambiente, y se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 20 ha antes de concentrar a vacío. Se aisló el producto utilizando cromatografía de intercambio iónico SCX. ^{1}RMN.
Preparación del intermedio D-4 1-[N-Boc-D,L-(2-benciloxicarbonilaminotiazol-4-il)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metilpiperidina]
Se preparó éste mediante acoplamiento de N-Boc-D,L-(2-benciloxicarbonilamino-4-tiazolil)glicina y 4-(1-piperidinilmetil)piperidina como se describe anteriormente en la correspondiente etapa de preparación del intermedio D-3.
Intermedio D-4
1-(D,L-2-Aminotiazol-4-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-ilmetil)piperidina]
Se calentó a 60ºC durante 7 h una solución agitada de 1-[N-Boc-D,L-(2-benciloxicarbonilamino-4-tiazolilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil)piperidina] (bruta, aprox., 5,25 ml) en una mezcla de HBr-ácido acético (al 50%, 35 ml) y ácido acético (70 ml), se enfrió y después se concentró a vacío. Se aisló el producto utilizando cromatografía de intercambio iónico SCX. ^{1}RMN.
Preparación del intermedio D-5 1-(Boc-D,L-2-metiltiazol-4-ilglicinil)-4-[(1-piperidinil)metil]piperidina
Se preparó éste acoplando N-Boc-D,L-(2-metiltiazol)-4-ilglicina y 4-(1-piperidinilmetil)piperidina como se describe anteriormente en la correspondiente etapa de la preparación del intermedio D-3.
Intermedio D-5
1-(D,L-2-Metiltiazol-4-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Se preparó éste mediante desprotección de 1-(Boc-D,L-2-metiltiazol-4-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina como anteriormente en la correspondiente etapa de preparación del intermedio D-3. ^{1}RMN.
Preparación del intermedio D-6 1-Boc-4-[(2,3,5,6-tetracloropirid-4-ilamino)metil]piperidina
Se calentó a 60ºC en DMF (22 ml) durante 2 h una mezcla de 1-Boc-4-(aminometil)piperidina (2,0 g, 9,33 mmol), pentacloropiridina (2,58 g, 10,3 mmol) y carbonato de potasio (2,58 g, 18,7 mmol). Se retiró el exceso de DMF a vacío y se recogió el residuo en agua/acetato de etilo. Se extrajo la solución acuosa con acetato de etilo (x3), se secó la solución orgánica combinada (MgSO_{4}) y se concentró a vacío. La cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}, 30 a 60% de hexano/dietiléter, proporcionó el producto en forma de un sólido blanco (2,5 g, 62%). ^{1}RMN.
1-Boc-4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina
Se añadieron metóxido de sodio (1,89 g, 35 mmol) y paladio sobre carbono al 5% (1,24 g) a una solución agitada de 1-Boc-4-[(2,3,5,6-tetracloropirid-4-ilamino)metil]piperidina (2,5 g, 5,83 mmol) en una mezcla de metanol (23 ml) y THF (23 ml). Se hidrogenó la mezcla durante 30 h, se separó el catalizador por filtración y se concentró la solución a vacío. Se recogió el residuo en acetato de etilo y se lavó con agua y bicarbonato de sodio saturado. Se volvieron a extraer los lavados acuosos con acetato de etilo, se secaron los lavados orgánicos combinados (MgSO_{4}) y se concentraron a vacío, proporcionando el producto (1,0 g, 59%). ^{1}RMN.
Diclorhidrato de 4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina
Se añadió HCl (1 M en éter, 34 ml) a una solución agitada de 1-Boc-4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina (1,0 g, 3,43 mmol) en metanol (100 ml), y se agitó la mezcla durante una noche. Se retiró el disolvente a vacío, se recogió el residuo en agua y se liofilizó, proporcionando el producto en forma de un sólido amarillo (800 mg, 88%).
Sal trifluoroacetato de 1-(Boc-D-fenilglicinil)-4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina
Se añadió EDCI (232 mg, 1,21 mmol) a una mezcla de Boc-D-fenilglicina (276 mg, 1,1 mmol), diclorhidrato de 4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina (290 mg, 1,1 mmol), HOAT (165 mg, 1,21 mmol) y trietilamina (367 mg, 3,63 mmol) en DMF (9 ml), y se agitó la mezcla durante 7 h a temperatura ambiente y durante 64 h a 5ºC. Se retiró el disolvente a vacío y se repartió el residuo entre bicarbonato de sodio acuoso diluido y cloroformo:isopropanol 2:1. Se volvió a extraer la solución acuosa con cloroformo:isopropanol 2:1 tres veces y se secaron los extractos combinados (MgSO_{4}). Se retiró a vacío el disolvente y se purificó el producto bruto mediante HPLC-FI, proporcionando el producto (500 mg) en forma de una sal de TFA.
Intermedio D-6
1-(D-Fenilglicinil)-4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina
Se añadió TFA (2,3 ml) a sal de TFA de 1-(Boc-D-fenilglicinil)-4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina (500 ml, 1,1 mmol) disuelta en DCM (9 ml) y anisol (1,79 ml, 16,5 mmol), y se agitó la mezcla durante 3 h. Se retiró el disolvente a vacío, y se purificó el residuo mediante cromatografía de intercambio iónico SCX, proporcionando el producto (290 mg, 81% para dos etapas).
Preparación de ejemplos 1-5
Procedimiento general: A menos que se indique otra cosa, se obtuvo el producto de los ejemplos 1-5 a partir de la amina indicada y 1-(4-metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-carboxaldehído (intermedio B-1) utilizando el procedimiento de alquilación A.
Ejemplo 1 Clorhidrato de 1-[(4-metoxibenzoil-D-fenilglicinil)]-4-[(isopropilamino)-metil]piperidina
1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-carboxaldehído (0,050 g, 0,131 mmol) e isopropilamina proporcionaron, después de tratamiento del producto aislado con ácido clorhídrico en exceso en metanol y concentración, 37 mg del compuesto del título en forma de una sal clorhidrato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 424 (M+1).
Ejemplo 2 1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)-4-[(dimetilamino)metil]piperidina
1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-carboxaldehído (0,050 g, 0,131 mmol) y dimetilamina proporcionaron 25 mg (47%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 410 (M+1).
Ejemplo 3 Clorhidrato de 1-[(4-metoxibenzoil-D-feniglicinil)]-4-[(N,N-dietilamino)-metil]piperidina
1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-carboxaldehído (0,050 g, 0,131 mmol) y dietilamina proporcionaron, después de tratamiento del producto aislado con ácido clorhídrico en exceso en metanol y concentración, 42 mg del compuesto del título en forma de una sal clorhidrato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 438 (M+1).
Ejemplo 4 1-[(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)]-4-[(1-pirrolidinil)metil]piperidina
1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-carboxaldehído (0,050 g, 0,131 mmol) y pirrolidina proporcionaron 27 mg (47%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 436 (M+1).
Ejemplo 5 Clorhidrato de 1-[(4-metoxibenzoil-D-fenilglicinil)]-4-[(3-pirrolin-1-il)metil]piperidina
1-(4-Metoxibenzoil-D-fenilglicinil)piperidin-4-carboxaldehído (0,050 g, 0,131 mmol) y 3-pirrolina proporcionaron, después de tratamiento del producto aislado con ácido clorhídrico en exceso en metanol y concentración, 43 mg del compuesto del título en forma de una sal clorhidrato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 434 (M+1).
Preparación de ejemplos 6-18
Procedimiento general: A menos que se indique otra cosa, se obtuvo el producto de los ejemplos 6-18 a partir de la amina indicada y 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-(metilsulfoniloximetil)piperidina (intermedio C-2) o 1-(3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-(metilsulfoniloximetil)piperidina (intermedio C-3) utilizando un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 6.
Cuando se indicó, se obtuvieron las bases libres utilizando cromatografía de intercambio iónico SCX; las sales clorhidrato se obtuvieron disolviendo la base libre en acetato de etilo, tratando con HCl 1 M en éter, retirando el disolvente a vacío, redisolviendo la sal HCl resultante en agua/acetonitrilo y liofilizando.
Ejemplo 6 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(isopropilamino)metil]piperidina
Se trató una solución de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-(metilsulfoniloximetil)piperidina (100 mg, 0,213 mmol) e isopropilamina (0,18 ml, 2,1 mmol) en 1 ml de THF con carbonato de potasio (60 mg) y yoduro de sodio (32 mg, 0,21 mmol), y se calentó la mezcla a reflujo. Después de 16 h, se concentró la mezcla y se purificó el residuo mediante cromatografía HPLC-FI, proporcionando 24 mg (21%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 433 (M+1).
Ejemplo 6a
Sal clorhidrato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(isopropilamino)metil]piperidina
Se convirtió la sal trifluoroacetato en la sal clorhidrato mediante la base libre como se describe anteriormente. EM-EN, m/e 433 (M+1).
Ejemplo 7 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[4-(pirrolidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-2 (200 mg, 0,426 mmol) y pirrolidina (0,85 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 38 mg (16%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato. ^{1}RMN.
Ejemplo 7a
Sal clorhidrato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[4-(pirrolidin-1-il)metil]piperidina
Se convirtió la sal trifluoroacetato en la sal clorhidrato mediante la base libre como se describe anteriormente. EM-EN, m/e 445 (M+1).
Ejemplo 8 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(dietilamino)metil]piperidina
El intermedio C-2 (100 mg, 0,213 mmol) y dietilamina (2,1 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 59 mg (49%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 447 (M+1).
Ejemplo 8a
Sal clorhidrato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(dietilamino)metil]piperidina
Se convirtió la sal trifluoroacetato en la sal clorhidrato mediante la base libre como se describe anteriormente.
EM-EN, m/e 447 (M+1).
Ejemplo 9 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-2 (100 mg, 0,213 mmol) y piperidina (2,3 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 16 mg (13%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato. ^{1}RMN.
EM-PI, m/e 459 (M+1).
Ejemplo 9a
Sal clorhidrato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
La sal trifluoroacetato se convirtió en la sal clorhidrato mediante la base libre como se describe anteriormente.
EM-EN, m/e 449 (M+1).
Ejemplo 10 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(4-hidroxipiperidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-2 (100 mg, 0,213 mmol) y 4-hidroxipiperidina (2,3 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 32 mg (25%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 475 (M+1).
Ejemplo 10a
Sal clorhidrato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(4-hidroxipiperidin-1-il)metil]piperidina
Se convirtió la sal trifluoroacetato en la sal clorhidrato mediante la base libre como se describe anteriormente. EM-EN, m/e 475 (M+1).
Ejemplo 11 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperazin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-2 (100 mg, 0,213 mmol) y piperazina (2,3 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 85 mg (70%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 460 (M+1).
Ejemplo 12 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(4-metilpiperazin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-2 (100 mg, 0,213 mmol) y 1-metilpiperazina (2,3 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 66 mg (53%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 474 (M+1).
Ejemplo 13 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(3-hidroxipirrolidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-2 (100 mg, 0,213 mmol) y 3-hidroxipirrolidina (2,3 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 36 mg (30%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroaceta-
to.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 461 (M+1).
Ejemplo 16 Sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(4-hidroximetilpiperidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-2 (100 mg, 0,213 mmol) y 4-hidroximetilpiperidina (2,3 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía HPLC-FI, 28 mg (22%) del compuesto del título en forma de una sal trifluoroacetato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 489 (M+1).
Ejemplo 17 Sal clorhidrato de 1-(3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio C-3 (1,0 g, 2,0 mmol) y piperidina (6,0 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 2 a 4% de [amoniaco 2 N en metanol]:cloruro de metileno) y la formación de sal con ácido clorhídrico, 443 mg (41%) del compuesto del título en forma de una sal clorhidrato.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 493 (M+1).
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Ejemplo 18 1-(3-Cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(3-hidroxipiperidin-1-il)metil]-piperidina
El intermedio C-3 (1,50 g, 3,0 mmol) y 3-hidroxipiperidina (9,0 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 2 a 3% de [amoniaco 2 N en metanol]:cloruro de metileno), 1,10 g del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 507 (M+1).
Preparación de ejemplos 19-21
Procedimiento general: A menos que se indique otra cosa, se obtuvo el producto de los ejemplos 19-21 a partir del ácido carboxílico indicado y 1-(D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina (intermedio D-1), utilizando un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 19.
Ejemplo 19 1-(Indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Procedimiento de acoplamiento B: Se trató una solución de 1-(D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina (4,00 g, 12,7 mmol) y ácido indol-6-carboxílico (2,25 g, 13,9 mmol) en 60 ml de DMF con HOBT (1,88 g, 13,9 mmol), se enfrió la mezcla a 0ºC y después se trató con DCC (2,87 g, 13,9 mmol). Después de 15 h, se diluyó la mezcla con AcOEt, se filtró y se concentró el filtrado. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna (SiO_{2}, 2 a 3,5% de [amoniaco 2 N en metanol]:cloruro de metileno), proporcionando 3,1 g (53%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 459 (M+1).
Ejemplo 20 Sal clorhidrato de 1-(3-metilindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio D-1 (2,00 g, 6,35 mmol) y ácido 3-metilindol-6-carboxílico (1,22 g, 6,98 mmol) proporcionaron, después de formación de la sal clorhidrato, 1,29 g (41%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 473 (M+1).
Análisis para C_{29}H_{36}N_{4}O_{2}\cdotHCl\cdot0,75H_{2}O:
Calculado: C 66,7, H 7,4, N 10,7.
Encontrado: C 66,7, H 7,2, N 10,8.
Ejemplo 21 Sal clorhidrato de 1-(5-cloroindol-2-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
El intermedio D-1 y ácido 5-cloro-1H-indol-2-carboxílico (1,36 g, 6,98 mmol) proporcionaron, después de formación de la sal clorhidrato, 1,52 g (45%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 493 (M+1).
Análisis para C_{28}H_{33}ClN_{4}O_{2}\cdotHCl\cdot0,75H_{2}O.
Calculado: C 61,9, H 6,6, N 10,3.
Encontrado: C 61,8, H 6,4, N 10,4.
Ejemplo 22 Clorhidrato de 1-[4-metoxibenzoil-D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Utilizando el procedimiento de acoplamiento B, ácido 4-metoxibenzoico (0,29 g, 1,89 mmol) y 1-[D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina (0,59 g, 1,7 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 0-4% de [amoniaco 2 N en metanol]:cloruro de metileno), 0,47 g de 1-[4-metoxibenzoil-D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-ilmetil]piperidina. Se disolvió la base libre en cloruro de metileno y se añadió HCl 1 M en dietiléter (1 ml, 1 mmol) con agitación. Se concentró parcialmente la mezcla y se filtró, proporcionando 0,34 g (39%) del compuesto del título, seguido de una segunda recogida de 0,12 g (14%).
^{1}RMN. EM-PI, m/e 480,1 (M+1).
Análisis para C_{28}H_{37}N_{3}O_{4}\cdot0,95 HCl\cdot1,0H_{2}O
Calculado: C 63,18, H 7,57, N 7,90, Cl, 6,33.
Encontrado: C 63,43, H 7,41, N 7,68, Cl 5,93.
Ejemplo 23 Clorhidrato de 1-[indol-6-carbonil-D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Utilizando el procedimiento de acoplamiento B, ácido indol-6-carboxílico (0,29 g, 1,89 mmol) y 1-[D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina (0,59 g, 1,7 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 0-4% de [amoniaco 2 N en metanol]:cloruro de metileno), 0,36 g de 1-[indol-6-carbonil-D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina. Se disolvió la base libre en cloruro de metileno, y se añadió HCl 1 M en dietiléter (1 ml, 1 mmol) con agitación. Seconcentró parcialmente la mezcla y se filtró, proporcionando 0,21 g (24%) del compuesto del título, seguido de una segunda cosecha de 0,065 g (7%).
^{1}RMN. EM-PI, m/e 489,0 (M+1).
Análisis para C_{29}H_{36}N_{4}O_{3}\cdot1,0 HCl\cdot1,5H_{2}O.
Calculado: C 63,09, H 7,30, N 10,15, Cl 6,42.
Encontrado: C 62,99, H 7,06, N 9,90, Cl 6,27.
Ejemplo 24 Sal clorhidrato de 1-(4-metoxibenzoil-D,L-tiazol-5-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Se añadió EDCI (1,11 g, 5,76 mmol) a una solución agitada de ácido 4-metoxibenzoico (797 mg, 5,24 mmol), 1-(D,L-tiazol-5-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-ilmetil]piperidina (aprox. 5,24 mmol) y HOAT (786 mg, 5,76 mmol) en DMF (40 ml). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 20 h y se retiró el disolvente a vacío. Se recogieron los residuos en cloroformo:alcohol isopropílico (2:1) y se lavaron con bicarbonato de sodio saturado. Se volvió a extraer la fase acuosa con cloroformo:alcohol isopropílico (2:1) (x3), y se secaron los extractos orgánicos combinados (MgSO_{4}) y se concentraron a vacío. Se purificó la mitad del producto bruto mediante HPLC-FI preparativa, y se concentraron las fracciones de producto, se recogieron en cloroformo:alcohol isopropílico (2:1), se lavaron con bicarbonato de sodio saturado, se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron a vacío. Se disolvió en metanol la base libre así obtenida, se trató con 2 equivalentes de HCl en éter y se evaporó hasta sequedad. Se disolvió el residuo en agua/acetonitrilo y se liofilizó. Rendimiento: 672 mg.
^{1}RMN. CLEM, m/e 457 (M+1).
Ejemplo 25 Sal clorhidrato de 1-(4-metoxibenzoil-D,L-2-aminotiazol-4-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Se preparó el compuesto del título mediante el acoplamiento de 1-(D,L-2-aminotiazol-4-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metilpiperidina y ácido 4-metoxibenzoiico utilizando un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 24.
^{1}RMN. CLEM, m/e 472 (M+1).
Ejemplo 26 Sal clorhidrato de 1-(4-metoxibenzoil-D,L-2-metiltiazol-4-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina
Se preparó el compuesto del título mediante el acoplamiento de 1-(D,L-2-metiltiazol-4-ilglicinil)-4-[(piperidin-1-ilmetil)piperidina y ácido 4-metoxibenzoico utilizando un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 24.
^{1}RMN. CLEM, m/e 471 (M+1).
Ejemplo 27 Clorhidrato de 1-(3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(ciclohexilamino)metil]piperidina A. 1-(1-Metilsulfonil-3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(ciclohexilamino)metil]piperidina
Utilizando un procedimiento similar al descrito anteriormente para el ejemplo 6, 1-(1-metilsulfonil-3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-(metilsulfoniloximetil)piperidina (940 mg, 1,6 mmol) y ciclohexilamina (1,3 ml, 11,2 mmol) proporcionaron, después de purificación mediante cromatografía en columna (SiO_{2}; 2% de amoniaco 2 N en metanol:cloruro de metileno), 600 mg (63%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 585 (M+1).
B. Clorhidrato de 1-(3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(ciclohexilamino)metil]piperidina
Se añadió hidróxido de potasio (50 mg, 0,89 mmol) a una solución de 1-(1-metilsulfonil-3-cloroindol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4- [(ciclohexilamino)metil]-piperidina (100 mg, 0,17 mmol) en 4 ml de metanol. Después de agitar durante 1 h, la filtración del precipitado blanco resultante proporcionó 35 mg (40%) del compuesto del título.
^{1}RMN. EM-PI, m/e 507 (M+1).
Se convirtió la base libre en la sal clorhidrato.
Como alternativa, utilizando el procedimiento descrito anteriormente para el ejemplo 6, la reacción del intermedio C-3 y ciclohexilamina proporciona, después de purificación y conversión en la sal clorhidrato, el compuesto del título.
Ejemplo 28 1-(Indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina
Se añadió EDCI (189 mg, 0,983 mmol) a una solución de ácido indol-6-carboxílico (144 mg, 0,894 mmol), 1-(D-fenilglicinil)-4-[(pirid-4-ilamino)metil]piperidina (290 mg, 0,894 mmol) y HOAT (134 mg, 0,983 mmol) en DMF (7 ml), y se agitó la mezcla durante 5 h a temperatura ambiente y durante 18 h a 5ºC. Se retiró la DMF a vacío y se purificó el residuo mediante HPLC-FI. Se convirtió la sal TFA obtenida en la base libre disolviéndola en cloroformo:isopropanol 2:1 y lavando con bicarbonato de sodio acuoso, secando (MgSO_{4}) y evaporando el disolvente a vacío, proporcionando el compuesto del título (325 mg, 78%). ^{1}RMN.
Los siguientes compuestos se preparan utilizando procedimientos similares a los descritos anteriormente y los materiales de partida necesarios:
1-[indol-6-carbonil-D,L-(5-tiazolil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[indol-6-carbonil-D,L-(2-aminotiazol-4-il)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[indol-6-carbonil-D,L-(2-metiltiazol-4-il)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-metilindol-6-carbonil-D,L-(4-piridil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-cloroindol-6-carbonil-D,L-(4-piridil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-metilindol-6-carbonil-D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-cloroindol-6-carbonil-D,L-(2-metoxifenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[indol-6-carbonil-D,L-(1-naftil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]-piperidina;
1-[3-metilindol-6-carbonil-D,L-(1-naftil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]-piperidina;
1-[3-cloroindol-6-carbonil-D,L-(1-naftil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]-piperidina;
1-[indol-6-carbonil-D,L-(2-clorofenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]-piperidina;
1-[3-metilindol-6-carbonil-D,L-(2-clorofenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-cloroindol-6-carbonil-D,L-(2-clorofenil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[indol-6-carbonil-D,L-(8-quinolinil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-metilindol-6-carbonil-D,L-(8-quinolinil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-cloroindol-6-carbonil-D,L-(8-quinolinil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[indol-6-carbonil-D,L-(4-quinolinil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-metilindol-6-carbonil-D,L-(4-quinolinil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
1-[3-cloroindol-6-carbonil-D,L-(4-quinolinil)glicinil]-4-[(piperidin-1-il)metil]piperidina;
sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(R)-(3-hidroximetilpirrolidin-1-il)metil]piperidina;
sal clorhidrato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(R)-(3-hidroximetilpirrolidin-1-il)metil]piperidina;
sal trifluoroacetato de 1-(indol-6-carbonil-D-fenilglicinil)-4-[(R)-(3-hidroximetilpirrolidin-1-il)metil]piperidina.
Protocolos de ensayo Ensayos de inhibición enzimática
Puede evaluarse la capacidad de un compuesto de ensayo de inhibir el factor Xa en uno o más de los siguientes ensayos de inhibición enzimática, o en otros ensayos estándar conocidos por los expertos en la técnica.
Ensayo de inhibición enzimática 1
Los ensayos enzimáticos se llevaron a cabo a temperatura ambiente en tampón fosfato 0,1 M, pH 7,4, según el procedimiento de Tapparelli et al. (J. Biol. Chem., 1993, 268, 4734-4741). Se adquirieron factor Xa humano purificado, tripsina, trombina y plasmina en Alexis Corporation, Nottingham, R.U.. Se adquirió uroquinasa en Calbiochem, Nottingham, R.U.. Se adquirieron los sustratos cromogénicos para estas enzimas: pefachrome-FXA, pefachrome-TRY, pefachrome-TH, pefachrome-PL y pefachrome-UK en Pentapharm AG, Basilea, Suiza. Se cuantificó el producto (p-nitroanilina) mediante adsorción a 405 nm en microplacas de 96 pocillos utilizando un lector Dynatech MR5000 (Dynex Ltd., Billingshurst, R.U.). Se calcularon Km y Ki utilizando SAS PROC NLIN (SAS Institute, Cary, NC, EE.UU., edición 6.11). Se determinaron los valores de Km como 100,9 \muM para factor Xa/pefachrome-FXA y 81,6 \muM para tripsina/pefachrome-TRY. Se prepararon las soluciones madre inhibidoras a 40 mM en Me_{2}SO, y se ensayaron a 500 \muM, 50 \muM y 5 \muM. Se confirmó la exactitud de las medidas de Ki mediante comparación con los valores de Ki de inhibidores conocidos de factor Xa y tripsina.
De acuerdo con los datos publicados, la benzamidina inhibía el factor Xa, la tripsina, la trombina, la plasmina y la uroquinasa, con valores de Ki de 155 \muM, 21 \muM, 330 nM, 200 nM y 100 nM, respectivamente. El NAPAP inhibía la trombina con un valor de Ki de 3 nM. Se encontró que los compuestos de la invención tienen actividad en estos ensayos.
Ensayo de inhibición enzimática 2
Se adquirieron factor Xa humano y trombina humana en Enzyme Research Laboratories (South Bend, Indiana, EE.UU.). Otras proteasas era de otras fuentes comerciales. Los sustratos de proteasa péptidos de para-nitroanilida cromogénicos se adquirieron en Midwest Biotech (Fishers, Indiana, EE.UU.).
Se midieron las afinidades de unión por el factor Xa humano como constantes de asociación aparentes (Kass) derivadas de la cinética de inhibición de proteasa como se describe anteriormente^{a, b, c, d}. Se obtuvieron los valores de Kass aparente utilizando diluciones automatizadas (BioMek 1000) de inhibidores (las determinaciones de Kass se realizan por triplicado a cada una de las 4-8 concentraciones de inhibidor) en placas de 96 pocillos, y se determinaron las velocidades de hidrólisis de sustrato cromogénico a 405 nm utilizando un lector de placas Thermomax de Molecular Devices (San Francisco). Para la inhibición del factor Xa, el protocolo de ensayo fue: 50 \mul de tampón (Tris 0,06 M, NaCl 0,3 M, pH 7,4), 25 \mul de solución de ensayo de inhibidor (en MeOH), 25 \mul de factor Xa humano (32 nM en Tris 0,03 M, NaCl 0,15 M, HSA 1 mg/ml); finalmente, se añadieron 150 \mul de BzIleGluGlyArgpNA (0,3 mM en agua) a lo largo de 2 min para empezar la hidrólisis. El factor Xa final fue de 3,2 nM. Se determinaron las [Xa] libre y [Xa] unido a partir de curvas patrón lineales en la misma placa utilizando el software SoftmaxPro para cada concentración de inhibidor, y se calcularon las Kass aparentes para cada concentración de inhibidor que producía una inhibición de la hidrólisis de entre 20% y 80% del control (factor Xa 3,2 nM): Kass aparente = [E:I]/[Ef][If] = [Eb]/[Ef][I^{0}-Ib]. Los valores de Kass aparente así obtenidos son aproximadamente la inversa de los Ki para los respectivos inhibidores [1/Kass ap = Ki ap]. La variabilidad de los valores de la Kass aparente media determinada a la concentración de sustrato única fue \pm15%. Se midió la Km del sistema de ensayo como 0,347\pm0,031 mM [n= 4], y la Vmáx fue 13,11\pm0,76 \muM/min.
Se determinaron los valores de Kass con trombina y otras proteasas utilizando el mismo protocolo con las siguientes concentraciones de enzima y sustrato: trombina 5,9 nM con BzPheValArgpNA 0,2 mM, XIa 1,2 nM con piroGluProArgpNA 0,4 mM, XIIa 10 nM con HDProPheArgpNA 0,2 mM, plasmina 3,4 nM con HDValLeuLyspNA 0,5 mM, nt-PA 1,2 nM con HDIleProARgpNA 0,8 mM y uroquinasa 0,4 nM con piroGluGlyArgpNA 0,4 mM, aPC 3 nM con piroGluProArgpNA 0,174 mM, calicreína plasmática 1,9 nM con D-ProPheArgpNA; tripsina bovina 1,4 nM con BzPheValArgpNA 0,18 mM.
Referencias
(a) Sall D.J., J.A. Bastian, S.L. Briggs, J.A. Buben, N.Y. Chirgadze, D.K. Clawson, M.L. Denny, D.D. Giera, D.S. Gifford-Moore, R.W. Harper, K.L. Hauser, V.J. Klimkowski, T.J. Kohn, H-S. Lin, J.R. McCowan, A.D. Palkowitz, G.F. Smith, M.E. Richett, K. Takeuchi, K.J. Thrasher, J.M. Tinsley, B.G. Utterback, S.-CB. Yan, M. Zhang. "Dibasic Benzo[b]tiophenes Derivatives as a Novel Class of Active Site Directed Thrombin Inhbitors. 1. Determination of the Serine Protease Selectivity, Structure-Activity Relationships and Binding Orientation". J. Med. Chem. 40, 3489-3493 (1997).
(b) Smith G.F., T.J. Craft, D.S. Gifford-Moore, W.J. Coffman, K.D. Kurz, E. Roberts, R.T. Shuman, G.E. Sandusky, N.D. Jones, N. Chirgadze y C.V. Jackson. "A Family of Arginal Thrombin Inhibitors Related to Efegatran", Sem. Thrombos. Hemost. 22, 173-183 (1996).
(c) Smith G.F., D.S. Gifford-Moore, T.J. Craft, N. Chirgadze, K.J. Ruterbories, T.D. Lindstrom, J.H. Satterwhite. "Efegatran: A New Cardiovascular Anticoagulant." En "New Anticoagulants for the Cardiovascular Patient". Ed. R. Pifarre. Hanley & Belfus, Inc., Filadelfia (1997), pág. 265-300.
(d) Sall D.J., J.A. Bastian, N.Y. Chirgadze, M.L. Denny, M.J. Fisher, D.S. Gifford-Moore, R.W. Harper, V.J. Klimkowski, T.J. Kohn, H.S. Lin, J.R. McCowan, M.E. Richett, G.F. Smith, K. Takeuchi, J.E. Toth, M. Zhang. "Diamino Benzo[b]thiofene Derivatives as a Novel Class of Active Site Directed Thrombin Inhibitors: 5. Potency, Efficacy and Pharmacokinetic Properties of Modified C-3 Side Chain Derivatives". En prensa. J. Med. Chem. (1999).
En general, se ha encontrado que los compuestos de fórmula (I) ejemplificados en la presente memoria exhiben una Ki de 10 \muM o menor en el ensayo 1 y/o una Kass de al menos 0,1 x 10^{6} l/mol en el ensayo 2.
Puede evaluarse la capacidad de un compuesto de ensayo de alargar el tiempo de tromboplastina parcial (tiempo de protrombina) en los siguientes protocolos de ensayo.
Protocolo de ensayo de tiempo de tromboplastina parcial (protrombina)
Se recogió sangre venosa en tubos Vacutainer con citrato de sodio al 3,2% (0,109 m) a 1 volumen de anticoagulante por 9 volúmenes de sangre. Se separaron las células sanguíneas mediante centrifugación a 700 g durante 10 minutos proporcionando plasma, que se congeló a -70ºC hasta que fuera necesario.
Para realizar el ensayo, se pipetearon 100 \mul de plasma en un tubo de ensayo de vidrio. Se añadió 1 \mul del compuesto de ensayo en DMSO, y se permitió calentar a 37ºC durante 2 minutos. Se añadieron 100 \mul de reactivo de Manchester (tromboplastina de tejido) (Helena Biosciences, R.U.) caliente (37ºC) y se permitió equilibrar durante 2 minutos. Se añadieron 100 \mul de solución de cloruro de calcio 25 mM caliente (37ºC) para iniciar la coagulación. Se basculó el tubo de ensayo tres veces con un ángulo de 90ºC cada 5 segundos para mezclar los reactivos, y se registró el tiempo de formación del coágulo. Se analizan los datos de una serie de observaciones y concentraciones de compuesto de ensayo mediante un programa de análisis estadístico SAS y se genera una CT2 (concentración necesaria para duplicar el tiempo de coagulación) para cada compuesto.
Se encontró que los compuestos de la invención alargaban significativamente el tiempo de tromboplastina parcial (tiempo de protrombina).
Protocolos alternativos de tiempo de protrombina y APTT
Determinaciones de coagulación. Se determinaron los tiempos de protrombina y valores de APTT en PLASMA HUMANO con un instrumento STA (Stago). El BioPT es un ensayo de coagulación no plasmática especial desencadenado por el factor de tejido humano (Innovin). Se evaluó la posible unión a albúmina o a lípido comparando los efectos de BioPT en presencia/ausencia de 30 mg/ml de albúmina humana (HSA) y 1 mg/ml de fosfatidilcolina (PC). Los inhibidores se suministran en un vehículo de MeOH al 50%.
Ensayo APTT
75 \mul de plasma Citrol Baxter-Dade citrato normal
Plasma humano
25 \mul de solución de ensayo
75 \mul de incubado de 2 min a 37ºC de cefaloplastina activada 2 Actin Baxter-Dade
75 \mul de CaCl_{2} (0,02 M)
Ensayo PT
75 \mul de plasma
25 \mul de solución de ensayo
75 \mul de solución salina, incubada 1 min a 37ºC
75 \mul de factor de tejido humano recombinante Innovin Baxter-Dade.
Se encontró que los compuestos de la invención eran potentes inhibidores del factor Xa.

Claims (16)

1. Un compuesto inhibidor de serinproteasa de fórmula (I)
22
en la que
R_{2} representa
(i) fenilo que está opcionalmente sustituido en las posiciones 3 y/o 4 con halo, nitro, tiol, haloalcoxi, hidrazido, alquilhidrazido, amino, ciano, haloalquilo, alquiltio, alquenilo, alquinilo, acilamino, tri- o difluorometoxi, carboxi, aciloxi, MeSO_{2}^{-} o R^{1}, y opcionalmente sustituido en la posición 6 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio;
(ii) naft-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 ó 7 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j}, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio;
(iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo, indazol-5-ilo, indazol-6-ilo, benzotiazol-6-ilo o benzoisoxazol-5-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 3 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(iv) bencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 2 con amino;
(v) tien-2-ilo o tien-3-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 4 ó 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(vi) 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-dihidroindol-6-ilo, 3,3-dicloro-2-oxoindol-6-ilo o 1-metil-3-aminoindazol-5-ilo;
(vii) benzotiazol-2-ilo, imidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo o tetrahidroimidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo;
(viii) pirazol-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(ix) pirid-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 5 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(x) pirid-3-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1};
(xi) benzofur-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio y en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(xii) indol-2-ilo opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno del indol con alquilo y opcionalmente sustituido en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j};
(xiii) indol-6-ilo sustituido en la posición 5 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, alcoxicarbonilo, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{1j}; o
(xiv) benzo[b]tiofen-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino, hidroxi, halo, alquilo, carboxi, ciano, amido, aminoalquilo, alcoxi o alquiltio y en la posición 5 ó 6 con halo, haloalcoxi, haloalquilo, ciano, nitro, amino, hidrazido, alquiltio, alquenilo, alquinilo o R_{ij};
con la condición de que R_{2} no pueda ser aminoisoquinolilo;
\newpage
R_{1} representa hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alquilo, alquilaminoalquilo, alcanoílo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, alquilaminocarbonilo, alquilamino, carboxilo, carboximetilo, amido o amidometilo;
R_{1j} representa hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alquilo, alcanoílo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, alquilamino, carboxilo, carboximetilo, amido o amidometilo;
X-X- es CONH;
Y es CH;
Cy es un grupo fenilo, piridilo, tienilo, tiazolilo, naftilo, piperidinilo, furanilo, pirrolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, oxazolilo, imidazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, pirimidinilo, piridazinilo, quinolilo, isoquinolilo, benzofurilo, benzotienilo o cicloalquilo opcionalmente sustituido con R_{3a}, o un grupo fenilo sustituido con R_{3i}X_{i}, en la que X_{i} es un enlace, O, NH o CH_{2} y R_{3i} es fenilo, piridilo o pirimidinilo opcionalmente sustituido con R_{3a};
cada R_{3a} es independientemente hidrógeno, hidroxilo, alcoxi, alquilo, alquilaminoalquilo, hidroxialquilo, carboxi, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, alquilaminocarbonilo, aminoalquilo, CONH_{2}, CH_{2}CONH_{2}, alcanoil (1-6C)amino, alcoxicarbonilamino, amino, halo, ciano, nitro, tiol, alquiltio, alquilsulfonilo, alquilsulfenilo, alquilsulfonamido, alquilaminosulfonilo, aminosulfonilo, haloalcoxi, haloalquilo, un grupo de fórmula -C(X^{3})N(R^{11})R^{12} (en la que X^{3} es O o S y R^{11} y R^{12} se seleccionan independientemente de hidrógeno, metilo, etilo o, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidin-1-ilo, piperidin-1-ilo o morfolino); o -OCH_{2}O-, que está unido a dos átomos de anillo adyacentes en Cy; y
-L-Lp(D)_{n} es
23
q es 1 ó 2;
Q es metileno y R_{q} es NR_{a}R_{b}, en la que cada uno de R_{a} y R_{b} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1-3}, o uno de R_{a} y R_{b} es hidrógeno o metilo y el otro de R_{a} y R_{b} es cicloalquilo (3-6C), pirid-4-ilo, -CH_{2}R_{c} o -CH_{2}R_{d}, en las que R_{c} es piridilo o fenilo (dicho fenilo puede portar un sustituyente fluoro, cloro, metilo, CONH_{2}, SO_{2}NH_{2}, metilaminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, metilsulfonilamino, metoxi o metilsulfonilo) y en las que R_{d} es isopropilo o ciclopentilo, o NR_{a}R_{b} es azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino [en los que un pirrolidino o piperidino puede ser un derivado 3,4-dideshidro y en los que un azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino puede estar opcionalmente sustituido en un átomo de carbono de anillo con hidroxi, amino, alcoxi (1-3C), hidroxialquilo (1-3C), alquilo (1-3C), carboxi, metoxicarbonilo o etoxicarbonilo (a condición de que el sustituyente amino, hidroxi o alcoxi no esté en un átomo de carbono de anillo que esté incluido en un doble enlace, o adyacente a un átomo de oxígeno, azufre o nitrógeno de anillo) y en los que el piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino pueda portar un grupo metilo en la posición 4];
o una sal fisiológicamente tolerable del mismo.
2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que
Cy es un grupo fenilo, piridilo, tienilo, tiazolilo, naftilo, piperidinilo o cicloalquilo opcionalmente sustituido con R_{3a};
R_{3a} se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, metoxi, etoxi, metilo, etilo, metilaminometilo, dimetilaminometilo, hidroximetilo, carboxi, metoximetilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, metilaminocarbonilo, dimetilaminocarbonilo, aminometilo, CONH_{2}, CH_{2}CONH_{2}, acetilamino, metoxicarbonilamino, etoxicarbonilamino, terc-butoxicarbonilamino, amino, fluoro, cloro, ciano, nitro, tiol, metiltio, metilsulfonilo, etilsulfonilo, metilsulfenilo, metilsulfonilamido, etilsulfonilamido, metilaminosulfonilo, etilaminosulfonilo, aminosulfonilo, trifluorometoxi y trifluorometilo; y
-L-L_{p}(D)_{n} es de fórmula
24
q es 1 ó 2;
Q es metileno y R_{q} es NR_{a}R_{b}, en la que cada uno de R_{a} y R_{b} es independientemente hidrógeno o alquilo C_{1-3}, o uno de R_{a} y R_{b} es hidrógeno o metilo y el otro de R_{a} y R_{b} es -CH_{2}R_{c} o -CH_{2}R_{d}, en las que R_{c} es piridilo o fenilo (dicho fenilo puede portar un sustituyente fluoro, cloro, metilo, CONH_{2}, SO_{2}NH_{2}, metilaminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, metilsulfonilamino, metoxi o metilsulfonilo) y en las que R_{d} es isopropilo o ciclopentilo, o NR_{a}R_{b} es pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino, en los que un pirrolidino o piperidino puede ser un derivado 3,4-dideshidro y en los que un pirrolidino, piperidino, piperazino o tetrahidro-1,4-diazepino puede portar un grupo metilo en la posición 4;
o una sal fisiológicamente tolerable del mismo.
3. Un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que q es 2.
4. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R_{q} es NR_{a}R_{b}, en la que R_{a} es hidrógeno o alquilo C_{1-3} y R_{b} es alquilo C_{1-3}; o R_{a} es hidrógeno y R_{b} es cicloalquilo (3-6C) o pirid-4-ilo; o NR_{a}R_{b} es azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, tiomorfolino o piperazino [en los que un pirrolidino, piperidino o piperazino puede estar opcionalmente sustituido en un átomo de carbono de anilo con hidroxi o hidroximetilo (a condición de que el sustituyente hidroxi no esté en un átomo de carbono de anillo que esté adyacente a un átomo de nitrógeno de anillo) y en los que el piperazino puede portar un grupo metilo en la posición 4].
5. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R_{q} se selecciona de dimetilamino, dietilamino, prop-2-ilamino, pirrolidino, 3-pirrolino, 3-hidroxipirrolidino, 3-hidroximetilpirrolidino, piperidino, 3-hidroxipiperidino, 4-hidroxipiperidino, 4-hidroximetilpiperidino, piperazino y 4-metilpiperazino.
6. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R_{2} es
(i) fenilo que está opcionalmente sustituido en la posición 3 y/o 4 con fluoro, cloro, bromo, yodo, nitro, difluorometoxi, trifluorometoxi, amino, ciano, trifluorometilo, metiltio, vinilo, carboxi, acetoxi, MeSO_{2}^{-}, hidroxi, metoxi, etoxi, metilo, metoxicarbonilo, metilamino, etilamino o amido, y opcionalmente sustituido en la posición 6 con amino, hidroxi, fluoro, metoxicarbonilo, ciano o aminometilo;
(ii) naft-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 6 con hidroxi y opcionalmente sustituido en la posición 3 con amino o hidroxi;
(iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo, indazol-5-ilo, indazol- 6-ilo, benzotiazol-6-ilo o benzoisoxazol-5-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 3 con cloro, bromo, amino, metilo o metoxi;
(iv) bencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 2 con amino;
(v) tien-2-ilo o tien-3-ilo opcionalmente sustituidos en la posición 4 ó 5 con metiltio, metilo o acetilo;
(vi) 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-dihidroindol-6-ilo, 3,3-dicloro-2-oxoindol-6-ilo o 1-metil-3-aminoindazol-5-ilo;
(vii) benzotiazol-2-ilo, imidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo o tetrahidroimidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo;
(viii) pirazol-2-ilo sustituido en la posición 5 con metilo;
(ix) 5-cloropirid-2-ilo;
(x) pirid-3-ilo o 6-cloropirid-3-ilo;
(xi) benzofur-2-ilo, 5-clorobenzofur-2-ilo, 3-metilbenzofur-2-ilo, 5-metilbenzofur-2-ilo o 6-metoxibenzofur-2-ilo;
(xii) indol-2-ilo opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno del indol con metilo, y opcionalmente sustituido en la posición 5 ó 6 con fluoro, cloro, bromo, metilo o metoxi;
(xiii) indol-6-ilo sustituido en la posición 5 con cloro, fluoro o hidroxi, y opcionalmente sustituido en la posición 3 con cloro o metilo; o
(xiv) benzo[b]tiofen-2-ilo opcionalmente sustituido en la posición 3 con fluoro, cloro o metilo, y opcionalmente sustituido en la posición 5 ó 6 con fluoro, cloro, metilo, hidroxi o metoxi.
7. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R_{2} es:
(i) fenilo, 2-aminofenilo, 3-aminofenilo, 2-amino-4-fluorofenilo, 2-amino-4-clorofenilo, 2-amino-4-nitrofenilo, 2-amino-4-metilfenilo, 3,4-diaminofenilo, 3-amino-4-fluorofenilo, 3-amino-4-clorofenilo, 3-amino-4-bromofenilo, 3-amino-4-hidroxifenilo, 3-amino-4-carboximetilfenilo, 3-amino-4-metilfenilo, 3-amino-4-metoxifenilo, 2-fluorofenilo, 4-fluoro-3-cianofenilo, 3-clorofenilo, 3-cloro-4-hidroxifenilo, 4-clorofenilo, 4-cloro-2-hidroxifenilo, 4-cloro-3-hidroxifenilo, 4-cloro-3-metilfenilo, 4-cloro-3-metoxifenilo, 4-bromofenilo, 4-bromo-3-metilfenilo, 4-yodofenilo, 2-cianofenilo, 3-cianofenilo, 4-cianofenilo, 2-hidroxifenilo, 2-hidroxi-4-metoxifenilo, 3-hidroxifenilo, 3-hidroxi-4-metilfenilo, 2,4-dihidroxifenilo, 3,4-dihidroxifenilo, 3-hidroxi-4-metoxifenilo, 4-difluorometoxifenilo, 4-trifluorometoxifenilo, 4-trifluorometilfenilo, 4-metiltiofenilo, 4-metoxicarbonilfenilo, 4-acetoxifenilo, 4-metanosulfonilfenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 4-vinilfenilo, 4-metoxifenilo, 4-etoxifenilo, 4-metoxi-3-clorofenilo, 4-metoxi-3-metilfenilo, 3-metilaminofenilo, 4-metilaminofenilo, 4-etilaminofenilo o 2-aminometilfenilo;
(ii) naft-2-ilo, 3-aminonaft-2-ilo, 3-hidroxinaft-2-ilo o 6-hidroxinaft-2-ilo;
(iii) isoquinolin-7-ilo, indol-5-ilo, indol-6-ilo, 3-cloroindol-6-ilo, 3-bromoindol-6-ilo, 3-metilindol-6-ilo, 3-metoxiindol-6-ilo, indazol-5-ilo, 3-aminoindazol-5-ilo, indazol-6-ilo, benzotiazol-6-ilo, 3-aminobenzoisoxazol-5-ilo;
(iv) bencimidazol-5-ilo, 2-aminobencimidazol-5-ilo o benzotiazol-6-ilo;
(v) tien-2-ilo, 5-metiltien-2-ilo, 5-metiltiotien-2-ilo, 5-acetiltien-2-ilo o tien-3-ilo; (vi) 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-dihidroindol-6-ilo, 3,3-dicloro-2-oxoindol-6-ilo o 1-metil-3-aminoindazol-5-ilo;
(vii) benzotiazol-2-ilo, imidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo o tetrahidroimidazo[1,2-a]pirimidin-2-ilo;
(viii) 5-metilpirazol-2-ilo;
(ix) 5-cloropirid-2-ilo;
(x) pirid-3-ilo, 6-cloropirid-3-ilo;
(xi) benzofur-2-ilo, 5-clorobenzofur-2-ilo, 3-metilbenzofur-2-ilo, 5-metilbenzofur-2-ilo, 6-metoxibenzofur-2-ilo;
(xii) indol-2-ilo, 5-fluoroindol-2-ilo, 5-cloroindol-2-ilo, 5-metilindol-2-ilo, 5-metoxiindol-2-ilo, 6-metoxiindol-2-ilo y 1-metilindol-2-ilo;
(xiii) 5-fluoroindol-6-ilo; o
(xiv) benzo[b]tiofen-2-ilo, 5-clorobenzo[b]tiofen-2-ilo o 6-clorobenzo[b]tiofen-2-ilo.
8. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R_{2} se selecciona de una de las fórmulas (A') a (G'):
25 
\vskip1.000000\baselineskip
26
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en las que R_{13} se selecciona de hidrógeno, cloro o metilo y R_{14} se selecciona de hidrógeno, metilo, etilo, fluoro, cloro y metoxi, y R_{15} se selecciona de hidrógeno, metilo, fluoro, cloro y amino.
9. Un compuesto según la reivindicación 8, en el que R_{2} es 4-metoxifenilo, 5-cloroindol-2-ilo, 3-cloroindol-6-ilo, indol-6-ilo o 3-metilindol-6-ilo.
10. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 a 9, en el que R_{3a} se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, metoxi, etoxi, metilo, etilo, metilaminometilo, dimetilaminometilo, hidroximetilo, carboxi, metoximetilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, metilaminocarbonilo, dimetilaminocarbonilo, aminometilo, CONH_{2}, CH_{2}CONH_{2}, acetilamino, metoxicarbonilamino, etoxicarbonilamino, terc-butoxicarbonilamino, amino, fluoro, cloro, ciano, nitro, tiol, metiltio, metilsulfonilo, etilsulfonilo, metilsulfenilo, metilsulfonilamido, etilsulfonilamido, metilaminosulfonilo, etilaminosulfonilo, aminosulfonilo, trifluorometoxi, trifluorometilo, pirrolidin-1-ilcarbonilo, piperidin-1-ilcarbonilo o morfolin-1-ilcarbonilo, y -OCH_{2}O- (que está unido a dos átomos de anillo adyacentes en Cy).
11. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que Cy se selecciona de:
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29
30
31
en las que
X' se selecciona de O, S y NMe;
X'' se selecciona de O y S;
X''' se selecciona de O, S, NH y NMe;
Y' se selecciona de hidrógeno, amino y metilo;
R_{o} se selecciona de hidrógeno, metilo, fluoro, cloro, trifluorometilo, metoxi, metiltio, metilsulfinilo y metilsulfonilo;
R_{m} se selecciona de hidrógeno, metilo, fluoro, cloro, trifluorometilo, metoxi, metiltio, metilsulfinilo, metilsulfonilo, carboxi, metoxicarbonilo y un grupo de fórmula -C(X^{3})N(R^{11})R^{12} (en la que X^{3} es O o S y R^{11} y R^{12} se seleccionan independientemente de hidrógeno, metilo o etilo o, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un grupo pirrolidin-1-ilo, piperidin-1-ilo o morfolino);
R_{p} se selecciona de hidrógeno y fluoro; o
R_{o} y R_{m}, o R_{m} y R_{p} forman un grupo -OCH_{2}O-; o
R_{o} y R_{m}, junto con el anillo la que están unidos, forman un anillo arilo o heteroarilo de 5 ó 6 miembros (conteniendo el anillo heteroarilo 1 ó 2 heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre); y
uno de R_{o1} y R_{o2} es hidrógeno y el otro es R_{o}.
12. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en el que Cy se selecciona de fenilo, 2-clorofenilo, 2-metoxifenilo, 4-carbamoilfenilo, pirid-2-ilo, pirid-4-ilo, tien-2-ilo, tien-3-ilo, furan-2-ilo, furan-3-ilo, imidazol-2-ilo, tiazol-2-ilo, tiazol-4-ilo, 2-aminotiazol-4-ilo, tiazol-5-ilo, naft-1-ilo, isoquinolin-5-ilo, isoquinolin-8-ilo, quinolin-4-ilo, quinolin-5-ilo y quinolin-8-ilo.
13. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que el átomo alfa en Y, carbono, tiene la conformación que sería el resultado de la construcción a partir de un D-\alpha-aminoácido NH_{2}-CH(Cy)-COOH, en la que NH_{2} representa parte de X-X.
14. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 junto con al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.
15. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 para uso en terapia.
16. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno trombótico.
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